牛の乳質改善剤及び牛の乳質改善方法
【課題】安全で副作用がなく、乳質改善の効果に優れた牛の乳質改善剤並びに牛の乳質改善方法を提供する。
【解決手段】牛の乳質改善剤の有効成分として、アウレオバシジウム属（Aureobasidium sp.）に属する微生物の培養物から得られる培養組成物を含有せしめる。また、牛の乳質改善方法として、アウレオバシジウム属（Aureobasidium sp.）に属する微生物の培養物から得られる培養組成物を摂取させる。
【解決手段】牛の乳質改善剤の有効成分として、アウレオバシジウム属（Aureobasidium sp.）に属する微生物の培養物から得られる培養組成物を含有せしめる。また、牛の乳質改善方法として、アウレオバシジウム属（Aureobasidium sp.）に属する微生物の培養物から得られる培養組成物を摂取させる。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、牛の乳質改善剤及び牛の乳質改善方法に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
乳牛より搾乳される牛乳の品質については、乳脂率、無脂固形分率、細胞数、乳蛋白率などについて規格が設定され、その規格を外れた牛乳を出荷した生産者にペナルティを与えるなどして、業界全体として厳格な品質管理が行われている。したがって、それらの基準を満たすように牛乳を生産することは、酪農家にとって、極めて重要なことである。
【０００３】
このような問題について、特許文献１には、ツバキ科植物の粉末及び／又はツバキ科植物抽出物を有効成分とする乳質改善剤が開示されている。また、特許文献２には、茶抽出物を含有することを特徴とする乳質改善，乳量増加用組成物が開示されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特開平０７―０７５５０６号公報
【特許文献２】特開平０７−１０７９１９号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
しかしながら、従来の方法では、必ずしもその乳質を改善する効果が十分とはいえなかった。
【０００６】
本発明の目的は、安全で副作用がなく、乳質改善の効果に優れた牛の乳質改善剤並びに牛の乳質改善方法を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者らは、上記目的を達成するため鋭意研究し、本発明を完成するに至った。すなわち、本発明は以下のとおりである。
［１］アウレオバシジウム属（Aureobasidium sp.）に属する微生物の培養物から得られる培養組成物を有効成分として含有することを特徴とする牛の乳質改善剤。
［２］前記培養物は、前記微生物を培養する培地に乳酸菌もしくは死菌化された微生物を添加して前記微生物の栄養成分として資化されるように培養して得られた培養物である、上記［１］記載の牛の乳質改善剤。
［３］牛の飼料に添加して使用される、上記［１］又は［２］記載の牛の乳質改善剤。
［４］アウレオバシジウム属（Aureobasidium sp.）に属する微生物の培養物から得られる培養組成物を摂取させることを特徴とする牛の乳質改善方法。
［５］前記培養物は、前記微生物を培養する培地に乳酸菌もしくは死菌化された微生物を添加して前記微生物の栄養成分として資化されるように培養して得られた培養物である、上記［４］記載の牛の乳質改善方法。
［６］アウレオバシジウム属（Aureobasidium sp.）に属する微生物の培養物から得られる培養組成物を添加した飼料を摂取させる、上記［４］又は［５］記載の牛の乳質改善方法。
【発明の効果】
【０００８】
本発明の牛の乳質改善剤並びに牛の乳質改善方法によれば、乳牛より搾乳される牛乳の乳質を、効果的に改善することができる。また、アウレオバシジウム属（Aureobasidium sp.）に属する微生物の培養物から得られる培養組成物を用いるので、副作用のリスクがなく、牛の健康管理の観点からも安心である。
【図面の簡単な説明】
【０００９】
【図１】飼養されている牛にアウレオバシジウム プルランス M-2の培養液を投与したときの乳量の推移を示す図表であり、吉野牧場(千葉県)で飼育されているホルスタイン種を供試牛にしたときの結果である。
【図２】飼養されている牛にアウレオバシジウム プルランス M-2の培養液を投与したときの乳量の推移を示す図表であり、大和田牧場(北海道)で飼育されているホルスタイン種を供試牛にしたときの結果である。
【図３】飼養されている牛にアウレオバシジウム プルランス M-2の培養液を投与したときの乳脂率の推移を示す図表であり、吉野牧場(千葉県)で飼育されているホルスタイン種を供試牛にしたときの結果である。
【図４】飼養されている牛にアウレオバシジウム プルランス M-2の培養液を投与したときの乳脂率の推移を示す図表であり、大和田牧場(北海道)で飼育されているホルスタイン種を供試牛にしたときの結果である。
【図５】飼養されている牛にアウレオバシジウム プルランス M-2の培養液を投与したときの無脂固形分率の推移を示す図表であり、吉野牧場(千葉県)で飼育されているホルスタイン種を供試牛にしたときの結果である。
【図６】図５に示す無脂固形分率の推移における投与群の開始月(８月)／投与開始４ヶ月(１２月)の比較において、対応のあるＴ検定を行った結果を示す図表である。
【図７】飼養されている牛にアウレオバシジウム プルランス M-2の培養液を投与したときの無脂固形分率の推移を示す図表であり、大和田牧場(北海道)で飼育されているホルスタイン種を供試牛にしたときの結果である。
【図８】図７に示す無脂固形分率の推移における投与群の開始月(１１月)／投与開始１ヶ月(１２月)の比較において、対応のあるＴ検定を行った結果を示す図表である。
【図９】飼養されている牛にアウレオバシジウム プルランス M-2の培養液を投与したときの蛋白質率の推移を示す図表であり、吉野牧場(千葉県)で飼育されているホルスタイン種を供試牛にしたときの結果である。
【図１０】図９に示す蛋白質率の推移における投与群の開始月(８月)／投与開始４ヶ月(１２月)の比較において、対応のあるＴ検定を行った結果を示す図表である。
【図１１】飼養されている牛にアウレオバシジウム プルランス M-2の培養液を投与したときの蛋白質率の推移を示す図表であり、大和田牧場(北海道)で飼育されているホルスタイン種を供試牛にしたときの結果である。
【図１２】図１１に示す蛋白質率の推移における投与群の開始月(１１月)／投与開始３ヶ月(２月)の比較において、対応のあるＴ検定を行った結果を示す図表である。
【図１３】飼養されている牛にアウレオバシジウム プルランス M-2の培養液を投与したときの乳糖含有率の推移を示す図表であり、大和田牧場(北海道)で飼育されているホルスタイン種を供試牛にしたときの結果である。
【発明を実施するための形態】
【００１０】
本発明の牛の乳質改善剤には、アウレオバシジウム属（Aureobasidium sp.）に属する微生物の培養物から得られる培養組成物（以下、「アウレオバシジウム由来培養組成物」という。）を有効成分として含有せしめる。また、本発明の牛の乳質改善方法においては、乳質を改善しようとする牛又は乳質を維持しようとする牛に、アウレオバシジウム由来培養組成物を摂取させる。
【００１１】
上記アウレオバシジウム微生物の培養は、公知の方法（特開昭５７−１４９３０１号公報等参照）などで行うことができる。例えば、炭素源（ショ糖）０．５〜５．０質量％、Ｎ源０．１〜５．０質量％、その他微量物質（例えば、ビタミン類、無機質）を加えた培地（ｐＨ５．２〜６．０）に菌を接種し、温度２０〜３０℃で２〜１４日間通気培養、好ましくは通気撹拌培養すればよい。
【００１２】
上記アウレオバシジウム微生物の培養は、また、それを培養する生菌の又は死菌化された微生物を加えて、栄養成分として資化させるようにして培養してもよい。この場合、その微生物の培養液中への配合量は、用いる菌体の種類によっても異なるが、通常、１00個/ｍＬ（培養液）〜100兆個/ｍＬ（培養液）程度であることが好ましい。微生物の死菌化は加熱殺菌等によって行うことができる。
【００１３】
上記微生物としては、窒素源等のアウレオバシジウム微生物の栄養源を含むものであれば特に制限はないが、例えば乳酸菌や酵母などが挙げられる。乳酸菌としては、エンテロコッカス・フェカリス（Enterococcus faecalis）、エンテロコッカス・フェシューム（E.fecium）ラクトバチルス・アシドフィルス（Lactobacillus acidphilus）、ラクトバチルス・ガセリ（L.gasseri）、ラクトバチルス・マリ（L.mali）、ラクトバチルス・プランタラム（L.plantarum）、ラクトバチルス・ブヒネリ（L.buchneri）、ラクトバチルス・カゼイ（L.casei）、ラクトバチルス・ジョンソニー（L.johnsonii）、ラクトバチルス・ガリナラム（L.gallinarum）、ラクトバチルス・アミロボラス（L.amylovorus）、ラクトバチルス・ブレビス（L.brevis）、ラクトバチルス・ラムノーザス（L.rhamnosus）、ラクトバチルス・ケフィア（L.kefir）、ラクトバチルス・パラカゼイ（L.paracasei）、ラクトバチルス・クリスパタス（L.crispatus）等のラクトバチルス属細菌、ストレプトコッカス・サーモフィルス（Streptcoccus thermophilus）等のストレプトコッカス属細菌、ラクトコッカス・ラクチス（Lactococcus lactis）等のラクトコッカス属細菌、ビフィドバクテリウム・ビフィダム（Bifidobacterium bifidum）、ビフィドバクテリウム・ロンガム（B.longum）、ビフィドバクテリウム・アドレスセンティス（B.adolescentis）、ビフィドバクテリウム・インファンティス（B.infantis）、ビフィドバクテリウム・ブレーベ（B.breve）、ビフィドバクテリウム・カテヌラータム（B.catenulatum）等のビフィドバクテリウム属細菌、バチルス・ズブチリス（Bacillus subtilis）、バチルス・コアグランス（B.coagulans）等のバチルス属細菌、クロストリジウム・ブチリカム（Clostoridium butilicum）等のクロストリジウム属細菌、などを用いることができる。
【００１４】
酵母としては、不完全菌類も含み、アウレオバシジウム・プルランス（Aureobasidium pullans）、サッカロマイセス・セレビシエ（Saccharomyces cerevisiae）、サッカロマイセス・インタメディウス（Saccharomyces intemedius）、サッカロマイセス・ヴァリドウスSaccharomyces validus）、サッカロマイセス・エリプソイデウス（Saccharomyces ellipsoideus）、サッカロマイセス・マリリスラー（マリーリスラー）（Saccharomyces mali risler）、サッカロマイセス・マンシュリカス（Saccharomyces mandschuricus）サッカロマイセス・フォルデルマニ（Saccharomyces Vordermannii ）、サッカロマイセス・ペーカー（Saccharomyces Peka）、サッカロマイセス・シアシング（Saccharomyces shasshing）、サッカロマイセス・ピリフォルミス（Saccharomyces piriformis）、サッカロマイセス・アナメンシス（Saccharomyces anamensis）、サッカロマイセス・カルティラギノースス（Saccharomyces cartilaginosus）、サッカロマイセス・アワモリ（Saccharomyces Awamori）、サッカロマイセス・バタタエ（Saccharomyces Batatae）、サッカロマイセス・コレアヌス（Saccharomyces Coreanus）、サッカロマイセス・ロブストウス（Saccharomyces robustus）、サッカロマイセス・カールスベルゲンシス（Saccharomyces Carlsbergensis）、サッカロマイセス・モナセンシス（Saccharomyces Monacensis）、サッカロマイセス・マルキシアヌス（Saccharomyces Marxianus）、ザイゴサッカロマイセス（チゴサッカロマイセス）・マヨール（Zygosaccharomyces major）、サッカロマイセス・ラクティス（Saccharomyces lactis）、サッカロマイセス・ルクシー（Saccharomyces Rouxii）、ハンゼヌーラ・アノマーラ（Hansenula anomala）などを用いることができる。
【００１５】
本発明においては、上記の培養によって得られる培養物をそのまま加熱又は加圧加熱殺菌して用いてもよく、遠心分離等により菌体を分離除去した後、この培養液を殺菌して用いてもよい。また、必要に応じて濃縮したもの、更には乾燥したものを用いることもできる。更に、効果物質のみを抽出して用いることもできる。また、分画していった各々の分画物を用いることもできる。なお、アウレオバシジウム属（Aureobasidium sp.）に属する微生物の培養物は、増粘安定剤等の食品添加物として使用されているものであり安全性が高い。
【００１６】
本発明においては、乳質を改善しようとする牛がその適用の対象であるが、乳質が良好な牛に対しても、その乳質が落ちるのを避けるために予防的に用いてもよい。特に、後述の実施例で示すように、牛の乳の無脂固形分率や蛋白質率の値を増加する効果が高い。投与すべき量は、牛の体調、年齢、投与方法・投与回数・投与時期などによって適宜決定することができる。一般的な投与量を例示すれば、例えば、アウレオバシジウム由来培養組成物の固形分換算にして０．０２５〜４０００ｍｇｍｇ/ｋｇ（体重）の量で摂取する。また長期間摂取させるようにし、効果を持続的に発揮させることが好ましい。
【００１７】
本発明においては、その一形態として、上記アウレオバシジウム由来培養組成物を牛の飼料に添加して使用し、摂取させることもできる。これによれば、牛に給餌するための特別な作業時間を割くことなく、長期間継続的に使用し、摂取させる場合にも、作業性よく行うことができる。
【実施例】
【００１８】
以下実施例を挙げて本発明を具体的に説明するが、これらの実施例は本発明の範囲を限定するものではない。
【００１９】
＜製造例１＞
下記のようにしてアウレオバシジウム プルランス M-2（Aureobasidium pullulans M-2）（FERM BP-10014）の培養液を調製した。
【００２０】
前培養液を、ショ糖１％、アスコルビン酸０．１％、米糠０．１％を含む液体培地（ｐＨ５．３）に適量接種して、２５℃、７２〜９６時間（製造バッチによって異なる）、通気撹拌培養を行った。培養終了後、この培養液を１２１℃、１５分間殺菌した。なお、得られた殺菌後の培養液は、固形分およそ１．２質量％を含む。
【００２１】
＜試験例１＞(吉野)
飼養されている吉野牧場(千葉県)で飼育されているホルスタイン種６頭を供試牛とし（投与群）、アウレオバシジウム培養液の投与試験を行った。試験は２０１０年６月から１２月にかけて実施した。投与は８月から開始し、製造例１で調製したアウレオバシジウム培養液３００ｍＬを、直接経口投与にて１日１回与え続けた。各月毎に乳汁を採取し、その乳量、乳脂率、無脂固形分率、蛋白質率を調べた。また、アウレオバシジウム培養液を与えない供試牛１３頭を対照群とし、同様に、その乳量、乳脂率、無脂固形分率、蛋白質率を調べた。なお、測定は、フローサイトメトリー自動分析装置（「フォソマチックＦＣ（Fossomatic TM FC）」FOSS社製）を用いてそのシステムに備えられた自動計測により行った。
【００２２】
表１，図１には乳量について、表２，図３には乳脂率について、表３，図５には無脂固形分率について、表４，図９には蛋白質率について、それぞれの各月平均値の結果をその標準偏差とともに示す。なお、該当する場合には図中にＴ検定による有意差を示す。
【００２３】
【表１】
【００２４】
【表２】
【００２５】
【表３】
【００２６】
【表４】
【００２７】
＜試験例２＞(大和田)
飼養されている大和田牧場(北海道)で飼育されているホルスタイン種３頭を供試牛とし（投与群）、試験例１と同様にして、製造例１で調製したアウレオバシジウム培養液の投与試験を行った。試験は２０１０年１０月から２０１１年２月にかけて実施した。投与は１１月から開始し、製造例１で調製したアウレオバシジウム培養液３００ｍＬを、直接経口投与にて１日１回与え続けた。各月毎に乳汁を採取し、その乳量、乳脂率、無脂固形分率、蛋白質率、及び乳糖含有率を調べた。また、アウレオバシジウム培養液を与えない供試牛３頭を対照群とし、同様に、その乳量、乳脂率、無脂固形分率、蛋白質率、及び乳糖含有率を調べた。
【００２８】
表５，図２には乳量について、表６，図４には乳脂率について、表７，図７には無脂固形分率について、表８，図１１には蛋白質率について、表９，図１３には乳糖含有率について、それぞれの各月平均値の結果をその標準偏差とともに示す。また、該当する場合には図中にＴ検定による有意差を示す。
【００２９】
【表５】
【００３０】
【表６】
【００３１】
【表７】
【００３２】
【表８】
【００３３】
【表９】
【００３４】
［評価１］
無脂固形分率について、吉野の投与群の開始月(８月)／投与開始４ヶ月(１２月)を比較すると、その変化量は0.78、増加率が8.4％であり、統計的に有意な無脂固形分率の増加が認められた(対応のあるＴ検定による P＝0.025)(図６)。また、大和田の投与群の開始月(１１月)／投与開始３ヶ月(２月)を比較すると、その変化量は0.37、増加率が4.1％であり、大和田の投与群の開始月(１１月)／投与開始１ヶ月(１２月)の比較において、統計的に有意な無脂固形分率の増加が認められた(対応のあるＴ検定による P＝0.09)(図８)。各月の変化量においても、平均0.12の無脂固形分率の安定した増加が認められた。
【００３５】
［評価２］
蛋白質率について、吉野の投与群の開始月(８月)／投与開始４ヶ月(１２月)を比較すると、その変化量は0.69、増加率が17.8％であり、統計的に有意な蛋白質率の増加が認められた(対応のあるＴ検定による P＝0.007)(図１０)。また、大和田の投与群の開始月(１１月)／開始３ヶ月(２月)を比較すると、その変化量は0.33、増加率が9.6％であり、統計的に有意な蛋白質率の増加が認められた(対応のあるＴ検定による P＝0.027)(図１２)。また、対照群の標準偏差の平均がSD(±0.49)であったのに対し、投与群の標準偏差の平均がSD(±0.07)であり、顕著に低く、蛋白質率が安定して増加傾向を示した(表８)(図１１Ｂ)。
【００３６】
以上の結果より、アウレオバシジウム培養液の投与により牛の乳質が改善され、無脂固形分率及び蛋白質率の値が増加することが明らかとなった。また、北海道の牧場で飼育されている牛と千葉県で飼育されている牛に上記のような改善効果の再現性があり、環境的因子に影響されないことがわかった。このようにアウレオバシジウム培養液の乳質改善の効果が明らかになった。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、牛の乳質改善剤及び牛の乳質改善方法に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
乳牛より搾乳される牛乳の品質については、乳脂率、無脂固形分率、細胞数、乳蛋白率などについて規格が設定され、その規格を外れた牛乳を出荷した生産者にペナルティを与えるなどして、業界全体として厳格な品質管理が行われている。したがって、それらの基準を満たすように牛乳を生産することは、酪農家にとって、極めて重要なことである。
【０００３】
このような問題について、特許文献１には、ツバキ科植物の粉末及び／又はツバキ科植物抽出物を有効成分とする乳質改善剤が開示されている。また、特許文献２には、茶抽出物を含有することを特徴とする乳質改善，乳量増加用組成物が開示されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特開平０７―０７５５０６号公報
【特許文献２】特開平０７−１０７９１９号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
しかしながら、従来の方法では、必ずしもその乳質を改善する効果が十分とはいえなかった。
【０００６】
本発明の目的は、安全で副作用がなく、乳質改善の効果に優れた牛の乳質改善剤並びに牛の乳質改善方法を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者らは、上記目的を達成するため鋭意研究し、本発明を完成するに至った。すなわち、本発明は以下のとおりである。
［１］アウレオバシジウム属（Aureobasidium sp.）に属する微生物の培養物から得られる培養組成物を有効成分として含有することを特徴とする牛の乳質改善剤。
［２］前記培養物は、前記微生物を培養する培地に乳酸菌もしくは死菌化された微生物を添加して前記微生物の栄養成分として資化されるように培養して得られた培養物である、上記［１］記載の牛の乳質改善剤。
［３］牛の飼料に添加して使用される、上記［１］又は［２］記載の牛の乳質改善剤。
［４］アウレオバシジウム属（Aureobasidium sp.）に属する微生物の培養物から得られる培養組成物を摂取させることを特徴とする牛の乳質改善方法。
［５］前記培養物は、前記微生物を培養する培地に乳酸菌もしくは死菌化された微生物を添加して前記微生物の栄養成分として資化されるように培養して得られた培養物である、上記［４］記載の牛の乳質改善方法。
［６］アウレオバシジウム属（Aureobasidium sp.）に属する微生物の培養物から得られる培養組成物を添加した飼料を摂取させる、上記［４］又は［５］記載の牛の乳質改善方法。
【発明の効果】
【０００８】
本発明の牛の乳質改善剤並びに牛の乳質改善方法によれば、乳牛より搾乳される牛乳の乳質を、効果的に改善することができる。また、アウレオバシジウム属（Aureobasidium sp.）に属する微生物の培養物から得られる培養組成物を用いるので、副作用のリスクがなく、牛の健康管理の観点からも安心である。
【図面の簡単な説明】
【０００９】
【図１】飼養されている牛にアウレオバシジウム プルランス M-2の培養液を投与したときの乳量の推移を示す図表であり、吉野牧場(千葉県)で飼育されているホルスタイン種を供試牛にしたときの結果である。
【図２】飼養されている牛にアウレオバシジウム プルランス M-2の培養液を投与したときの乳量の推移を示す図表であり、大和田牧場(北海道)で飼育されているホルスタイン種を供試牛にしたときの結果である。
【図３】飼養されている牛にアウレオバシジウム プルランス M-2の培養液を投与したときの乳脂率の推移を示す図表であり、吉野牧場(千葉県)で飼育されているホルスタイン種を供試牛にしたときの結果である。
【図４】飼養されている牛にアウレオバシジウム プルランス M-2の培養液を投与したときの乳脂率の推移を示す図表であり、大和田牧場(北海道)で飼育されているホルスタイン種を供試牛にしたときの結果である。
【図５】飼養されている牛にアウレオバシジウム プルランス M-2の培養液を投与したときの無脂固形分率の推移を示す図表であり、吉野牧場(千葉県)で飼育されているホルスタイン種を供試牛にしたときの結果である。
【図６】図５に示す無脂固形分率の推移における投与群の開始月(８月)／投与開始４ヶ月(１２月)の比較において、対応のあるＴ検定を行った結果を示す図表である。
【図７】飼養されている牛にアウレオバシジウム プルランス M-2の培養液を投与したときの無脂固形分率の推移を示す図表であり、大和田牧場(北海道)で飼育されているホルスタイン種を供試牛にしたときの結果である。
【図８】図７に示す無脂固形分率の推移における投与群の開始月(１１月)／投与開始１ヶ月(１２月)の比較において、対応のあるＴ検定を行った結果を示す図表である。
【図９】飼養されている牛にアウレオバシジウム プルランス M-2の培養液を投与したときの蛋白質率の推移を示す図表であり、吉野牧場(千葉県)で飼育されているホルスタイン種を供試牛にしたときの結果である。
【図１０】図９に示す蛋白質率の推移における投与群の開始月(８月)／投与開始４ヶ月(１２月)の比較において、対応のあるＴ検定を行った結果を示す図表である。
【図１１】飼養されている牛にアウレオバシジウム プルランス M-2の培養液を投与したときの蛋白質率の推移を示す図表であり、大和田牧場(北海道)で飼育されているホルスタイン種を供試牛にしたときの結果である。
【図１２】図１１に示す蛋白質率の推移における投与群の開始月(１１月)／投与開始３ヶ月(２月)の比較において、対応のあるＴ検定を行った結果を示す図表である。
【図１３】飼養されている牛にアウレオバシジウム プルランス M-2の培養液を投与したときの乳糖含有率の推移を示す図表であり、大和田牧場(北海道)で飼育されているホルスタイン種を供試牛にしたときの結果である。
【発明を実施するための形態】
【００１０】
本発明の牛の乳質改善剤には、アウレオバシジウム属（Aureobasidium sp.）に属する微生物の培養物から得られる培養組成物（以下、「アウレオバシジウム由来培養組成物」という。）を有効成分として含有せしめる。また、本発明の牛の乳質改善方法においては、乳質を改善しようとする牛又は乳質を維持しようとする牛に、アウレオバシジウム由来培養組成物を摂取させる。
【００１１】
上記アウレオバシジウム微生物の培養は、公知の方法（特開昭５７−１４９３０１号公報等参照）などで行うことができる。例えば、炭素源（ショ糖）０．５〜５．０質量％、Ｎ源０．１〜５．０質量％、その他微量物質（例えば、ビタミン類、無機質）を加えた培地（ｐＨ５．２〜６．０）に菌を接種し、温度２０〜３０℃で２〜１４日間通気培養、好ましくは通気撹拌培養すればよい。
【００１２】
上記アウレオバシジウム微生物の培養は、また、それを培養する生菌の又は死菌化された微生物を加えて、栄養成分として資化させるようにして培養してもよい。この場合、その微生物の培養液中への配合量は、用いる菌体の種類によっても異なるが、通常、１00個/ｍＬ（培養液）〜100兆個/ｍＬ（培養液）程度であることが好ましい。微生物の死菌化は加熱殺菌等によって行うことができる。
【００１３】
上記微生物としては、窒素源等のアウレオバシジウム微生物の栄養源を含むものであれば特に制限はないが、例えば乳酸菌や酵母などが挙げられる。乳酸菌としては、エンテロコッカス・フェカリス（Enterococcus faecalis）、エンテロコッカス・フェシューム（E.fecium）ラクトバチルス・アシドフィルス（Lactobacillus acidphilus）、ラクトバチルス・ガセリ（L.gasseri）、ラクトバチルス・マリ（L.mali）、ラクトバチルス・プランタラム（L.plantarum）、ラクトバチルス・ブヒネリ（L.buchneri）、ラクトバチルス・カゼイ（L.casei）、ラクトバチルス・ジョンソニー（L.johnsonii）、ラクトバチルス・ガリナラム（L.gallinarum）、ラクトバチルス・アミロボラス（L.amylovorus）、ラクトバチルス・ブレビス（L.brevis）、ラクトバチルス・ラムノーザス（L.rhamnosus）、ラクトバチルス・ケフィア（L.kefir）、ラクトバチルス・パラカゼイ（L.paracasei）、ラクトバチルス・クリスパタス（L.crispatus）等のラクトバチルス属細菌、ストレプトコッカス・サーモフィルス（Streptcoccus thermophilus）等のストレプトコッカス属細菌、ラクトコッカス・ラクチス（Lactococcus lactis）等のラクトコッカス属細菌、ビフィドバクテリウム・ビフィダム（Bifidobacterium bifidum）、ビフィドバクテリウム・ロンガム（B.longum）、ビフィドバクテリウム・アドレスセンティス（B.adolescentis）、ビフィドバクテリウム・インファンティス（B.infantis）、ビフィドバクテリウム・ブレーベ（B.breve）、ビフィドバクテリウム・カテヌラータム（B.catenulatum）等のビフィドバクテリウム属細菌、バチルス・ズブチリス（Bacillus subtilis）、バチルス・コアグランス（B.coagulans）等のバチルス属細菌、クロストリジウム・ブチリカム（Clostoridium butilicum）等のクロストリジウム属細菌、などを用いることができる。
【００１４】
酵母としては、不完全菌類も含み、アウレオバシジウム・プルランス（Aureobasidium pullans）、サッカロマイセス・セレビシエ（Saccharomyces cerevisiae）、サッカロマイセス・インタメディウス（Saccharomyces intemedius）、サッカロマイセス・ヴァリドウスSaccharomyces validus）、サッカロマイセス・エリプソイデウス（Saccharomyces ellipsoideus）、サッカロマイセス・マリリスラー（マリーリスラー）（Saccharomyces mali risler）、サッカロマイセス・マンシュリカス（Saccharomyces mandschuricus）サッカロマイセス・フォルデルマニ（Saccharomyces Vordermannii ）、サッカロマイセス・ペーカー（Saccharomyces Peka）、サッカロマイセス・シアシング（Saccharomyces shasshing）、サッカロマイセス・ピリフォルミス（Saccharomyces piriformis）、サッカロマイセス・アナメンシス（Saccharomyces anamensis）、サッカロマイセス・カルティラギノースス（Saccharomyces cartilaginosus）、サッカロマイセス・アワモリ（Saccharomyces Awamori）、サッカロマイセス・バタタエ（Saccharomyces Batatae）、サッカロマイセス・コレアヌス（Saccharomyces Coreanus）、サッカロマイセス・ロブストウス（Saccharomyces robustus）、サッカロマイセス・カールスベルゲンシス（Saccharomyces Carlsbergensis）、サッカロマイセス・モナセンシス（Saccharomyces Monacensis）、サッカロマイセス・マルキシアヌス（Saccharomyces Marxianus）、ザイゴサッカロマイセス（チゴサッカロマイセス）・マヨール（Zygosaccharomyces major）、サッカロマイセス・ラクティス（Saccharomyces lactis）、サッカロマイセス・ルクシー（Saccharomyces Rouxii）、ハンゼヌーラ・アノマーラ（Hansenula anomala）などを用いることができる。
【００１５】
本発明においては、上記の培養によって得られる培養物をそのまま加熱又は加圧加熱殺菌して用いてもよく、遠心分離等により菌体を分離除去した後、この培養液を殺菌して用いてもよい。また、必要に応じて濃縮したもの、更には乾燥したものを用いることもできる。更に、効果物質のみを抽出して用いることもできる。また、分画していった各々の分画物を用いることもできる。なお、アウレオバシジウム属（Aureobasidium sp.）に属する微生物の培養物は、増粘安定剤等の食品添加物として使用されているものであり安全性が高い。
【００１６】
本発明においては、乳質を改善しようとする牛がその適用の対象であるが、乳質が良好な牛に対しても、その乳質が落ちるのを避けるために予防的に用いてもよい。特に、後述の実施例で示すように、牛の乳の無脂固形分率や蛋白質率の値を増加する効果が高い。投与すべき量は、牛の体調、年齢、投与方法・投与回数・投与時期などによって適宜決定することができる。一般的な投与量を例示すれば、例えば、アウレオバシジウム由来培養組成物の固形分換算にして０．０２５〜４０００ｍｇｍｇ/ｋｇ（体重）の量で摂取する。また長期間摂取させるようにし、効果を持続的に発揮させることが好ましい。
【００１７】
本発明においては、その一形態として、上記アウレオバシジウム由来培養組成物を牛の飼料に添加して使用し、摂取させることもできる。これによれば、牛に給餌するための特別な作業時間を割くことなく、長期間継続的に使用し、摂取させる場合にも、作業性よく行うことができる。
【実施例】
【００１８】
以下実施例を挙げて本発明を具体的に説明するが、これらの実施例は本発明の範囲を限定するものではない。
【００１９】
＜製造例１＞
下記のようにしてアウレオバシジウム プルランス M-2（Aureobasidium pullulans M-2）（FERM BP-10014）の培養液を調製した。
【００２０】
前培養液を、ショ糖１％、アスコルビン酸０．１％、米糠０．１％を含む液体培地（ｐＨ５．３）に適量接種して、２５℃、７２〜９６時間（製造バッチによって異なる）、通気撹拌培養を行った。培養終了後、この培養液を１２１℃、１５分間殺菌した。なお、得られた殺菌後の培養液は、固形分およそ１．２質量％を含む。
【００２１】
＜試験例１＞(吉野)
飼養されている吉野牧場(千葉県)で飼育されているホルスタイン種６頭を供試牛とし（投与群）、アウレオバシジウム培養液の投与試験を行った。試験は２０１０年６月から１２月にかけて実施した。投与は８月から開始し、製造例１で調製したアウレオバシジウム培養液３００ｍＬを、直接経口投与にて１日１回与え続けた。各月毎に乳汁を採取し、その乳量、乳脂率、無脂固形分率、蛋白質率を調べた。また、アウレオバシジウム培養液を与えない供試牛１３頭を対照群とし、同様に、その乳量、乳脂率、無脂固形分率、蛋白質率を調べた。なお、測定は、フローサイトメトリー自動分析装置（「フォソマチックＦＣ（Fossomatic TM FC）」FOSS社製）を用いてそのシステムに備えられた自動計測により行った。
【００２２】
表１，図１には乳量について、表２，図３には乳脂率について、表３，図５には無脂固形分率について、表４，図９には蛋白質率について、それぞれの各月平均値の結果をその標準偏差とともに示す。なお、該当する場合には図中にＴ検定による有意差を示す。
【００２３】
【表１】
【００２４】
【表２】
【００２５】
【表３】
【００２６】
【表４】
【００２７】
＜試験例２＞(大和田)
飼養されている大和田牧場(北海道)で飼育されているホルスタイン種３頭を供試牛とし（投与群）、試験例１と同様にして、製造例１で調製したアウレオバシジウム培養液の投与試験を行った。試験は２０１０年１０月から２０１１年２月にかけて実施した。投与は１１月から開始し、製造例１で調製したアウレオバシジウム培養液３００ｍＬを、直接経口投与にて１日１回与え続けた。各月毎に乳汁を採取し、その乳量、乳脂率、無脂固形分率、蛋白質率、及び乳糖含有率を調べた。また、アウレオバシジウム培養液を与えない供試牛３頭を対照群とし、同様に、その乳量、乳脂率、無脂固形分率、蛋白質率、及び乳糖含有率を調べた。
【００２８】
表５，図２には乳量について、表６，図４には乳脂率について、表７，図７には無脂固形分率について、表８，図１１には蛋白質率について、表９，図１３には乳糖含有率について、それぞれの各月平均値の結果をその標準偏差とともに示す。また、該当する場合には図中にＴ検定による有意差を示す。
【００２９】
【表５】
【００３０】
【表６】
【００３１】
【表７】
【００３２】
【表８】
【００３３】
【表９】
【００３４】
［評価１］
無脂固形分率について、吉野の投与群の開始月(８月)／投与開始４ヶ月(１２月)を比較すると、その変化量は0.78、増加率が8.4％であり、統計的に有意な無脂固形分率の増加が認められた(対応のあるＴ検定による P＝0.025)(図６)。また、大和田の投与群の開始月(１１月)／投与開始３ヶ月(２月)を比較すると、その変化量は0.37、増加率が4.1％であり、大和田の投与群の開始月(１１月)／投与開始１ヶ月(１２月)の比較において、統計的に有意な無脂固形分率の増加が認められた(対応のあるＴ検定による P＝0.09)(図８)。各月の変化量においても、平均0.12の無脂固形分率の安定した増加が認められた。
【００３５】
［評価２］
蛋白質率について、吉野の投与群の開始月(８月)／投与開始４ヶ月(１２月)を比較すると、その変化量は0.69、増加率が17.8％であり、統計的に有意な蛋白質率の増加が認められた(対応のあるＴ検定による P＝0.007)(図１０)。また、大和田の投与群の開始月(１１月)／開始３ヶ月(２月)を比較すると、その変化量は0.33、増加率が9.6％であり、統計的に有意な蛋白質率の増加が認められた(対応のあるＴ検定による P＝0.027)(図１２)。また、対照群の標準偏差の平均がSD(±0.49)であったのに対し、投与群の標準偏差の平均がSD(±0.07)であり、顕著に低く、蛋白質率が安定して増加傾向を示した(表８)(図１１Ｂ)。
【００３６】
以上の結果より、アウレオバシジウム培養液の投与により牛の乳質が改善され、無脂固形分率及び蛋白質率の値が増加することが明らかとなった。また、北海道の牧場で飼育されている牛と千葉県で飼育されている牛に上記のような改善効果の再現性があり、環境的因子に影響されないことがわかった。このようにアウレオバシジウム培養液の乳質改善の効果が明らかになった。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
アウレオバシジウム属（Aureobasidium sp.）に属する微生物の培養物から得られる培養組成物を有効成分として含有することを特徴とする牛の乳質改善剤。
【請求項２】
前記培養物は、前記微生物を培養する培地に生菌の又は死菌化された微生物を添加して前記微生物の栄養成分として資化されるように培養して得られた培養物である、請求項１記載の牛の乳質改善剤。
【請求項３】
牛の飼料に添加して使用される、請求項１又は２記載の牛の乳質改善剤。
【請求項４】
アウレオバシジウム属（Aureobasidium sp.）に属する微生物の培養物から得られる培養組成物を摂取させることを特徴とする牛の乳質改善方法。
【請求項５】
前記培養物は、前記微生物を培養する培地に生菌の又は死菌化された微生物を添加して前記微生物の栄養成分として資化されるように培養して得られた培養物である、請求項４記載の牛の乳質改善方法。
【請求項６】
アウレオバシジウム属（Aureobasidium sp.）に属する微生物の培養物から得られる培養組成物を添加した飼料を摂取させる、請求項４又は５記載の牛の乳質改善方法。
【請求項１】
アウレオバシジウム属（Aureobasidium sp.）に属する微生物の培養物から得られる培養組成物を有効成分として含有することを特徴とする牛の乳質改善剤。
【請求項２】
前記培養物は、前記微生物を培養する培地に生菌の又は死菌化された微生物を添加して前記微生物の栄養成分として資化されるように培養して得られた培養物である、請求項１記載の牛の乳質改善剤。
【請求項３】
牛の飼料に添加して使用される、請求項１又は２記載の牛の乳質改善剤。
【請求項４】
アウレオバシジウム属（Aureobasidium sp.）に属する微生物の培養物から得られる培養組成物を摂取させることを特徴とする牛の乳質改善方法。
【請求項５】
前記培養物は、前記微生物を培養する培地に生菌の又は死菌化された微生物を添加して前記微生物の栄養成分として資化されるように培養して得られた培養物である、請求項４記載の牛の乳質改善方法。
【請求項６】
アウレオバシジウム属（Aureobasidium sp.）に属する微生物の培養物から得られる培養組成物を添加した飼料を摂取させる、請求項４又は５記載の牛の乳質改善方法。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図１３】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図１３】
【公開番号】特開２０１２−１７９０１３（Ｐ２０１２−１７９０１３Ａ）
【公開日】平成２４年９月２０日（２０１２．９．２０）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１１−４４４０９（Ｐ２０１１−４４４０９）
【出願日】平成２３年３月１日（２０１１．３．１）
【出願人】（５１０２０７６４５）株式会社アウレオサイエンス (1)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２４年９月２０日（２０１２．９．２０）
【国際特許分類】
【出願日】平成２３年３月１日（２０１１．３．１）
【出願人】（５１０２０７６４５）株式会社アウレオサイエンス (1)
【Ｆターム（参考）】
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