糖代謝改善組成物
【課題】優れた血糖値調節作用、及び糖代謝改善作用を有し、安全性が高く、飲食品として摂取でき、安定性の高い糖代謝改善剤、及び前記糖代謝改善剤を含有する糖代謝改善組成物の提供。
【解決手段】構造式（１）で表される化合物からなる糖代謝改善剤、該糖代謝改善剤を含有する糖代謝改善組成物、食後血糖値上昇抑制剤、空腹時血糖値低下剤。
【解決手段】構造式（１）で表される化合物からなる糖代謝改善剤、該糖代謝改善剤を含有する糖代謝改善組成物、食後血糖値上昇抑制剤、空腹時血糖値低下剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、パナキサジオール（ＰＤ）からなる糖代謝改善剤、及び前記糖代謝改善剤を含有する糖代謝改善組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
我が国の糖尿病患者は、約８２０万人、糖尿病予備軍は、約１，０５０万人であると推定され、更にその数は年々増加している。日本人は糖尿病になりやすい体質、即ち、食べた物を消費しにくく、貯め込み易い体質であり、倹約遺伝子保有率は、欧米人の２倍〜５倍といわれている。そのため、糖尿病の予防乃至治療は重要な問題となっている。
【０００３】
糖尿病の病態分類としては、正常型、境界型、及び糖尿病型の３つに分類（日本糖尿病学会ガイドライン）され、前記糖尿病予備軍とは、境界型の患者をいう。
前記糖尿病型の判断基準は、（１）空腹時血糖値が１２６ｍｇ／ｄＬ以上、（２）食後血糖値が２００ｍｇ／ｄＬ以上、（３）７５ｇのグルコース負荷試験で２時間後の血糖値が２００ｍｇ／ｄＬ以上、（４）糖尿病の典型的症状（口渇、多飲、多尿、体重減少など）がある、（５）ＨｂＡ１ｃ（グリコヘモグロビン）が６．５質量％以上、（６）確実な糖尿病網膜症の存在などの基準が設けられている。
前記境界型は、（１）空腹時血糖値が１１０ｍｇ／ｄＬ以上、１２６ｍｇ／ｄＬ未満、（２）７５ｇの糖負荷試験で２時間後の血糖値が１４０ｍｇ／ｄＬ以上、２００ｍｇ／ｄＬ未満の場合に該当する。
【０００４】
現在、糖尿病治療薬としては、インスリンの分泌を促進するスルホニル尿素剤（ＳＵ剤）、フェニールアラニン誘導体や、糖の吸収を抑制するα−グリコシダーゼ阻害剤、肝臓での糖の産生を抑制するビクアナイド（ＢＧ）薬、インスリン抵抗性を改善するチアゾリジン誘導体などが知られているが、空腹時血糖、及び食後血糖の両者の調節に効果のあるものは少ない。また、これらの医薬品が処方されるのは、糖尿病と診断された場合のみであり、境界型に属する者が、糖尿病へ進行することを防ぐためには、食事療法や運動療法に頼るしかないのが現状である。
【０００５】
また、糖尿病による高血糖状態の改善は、一過性ではなく体質を含めて根本的に改善することが望まれる。体内に取り込まれた余分なグルコースは、血中から肝臓や筋肉に取込まれ、グリコーゲンとして貯蔵される。このグリコーゲン合成を促進することができれば、高血糖状態を改善できると考えられる。糖代謝の７０％以上は筋肉で行われているため、グルコースの筋肉への取込みを促進することにより、高血糖状態の改善が期待できる。
このように、筋肉で積極的に糖代謝を行う体質を維持するためには、前述した薬剤だけでなく、食品療法による糖尿病の改善が有効である。上述した薬剤以外に、食品として摂取できるもので食後血糖値を抑制するものは多数存在するが、空腹時血糖値を抑制するものとしては医薬品しか存在せず、空腹時血糖値を抑制する食品の提供が強く求められている。
【０００６】
人参に含まれる配糖体（ジンセノサイド）は、血糖値調節作用（特許文献１参照）、抗糖尿病作用（特許文献２）を有することが知られており、また、前記配糖体から糖がはずれたアグリコン体であるプロトパナキサジオール（ＰＰＤ）は、抗ガン作用（特許文献３〜４参照）、皮膚疾患に対する抗炎症作用（特許文献５参照）、脂肪代謝及び糖代謝に重要な遺伝子発現を調節するＰＰＡＲγの活性化作用（特許文献６）などの様々な作用を有することが知られている。
前記プロトパナキサジオール（ＰＰＤ）は、白色の粉末であり、水に対しては不溶であるが、有機溶媒を加えることで溶解性を向上させることができる。しかしながら、前記プロトパナキサジオール（ＰＰＤ）は構造的に不安定であり、液系、特に低ｐＨ系においては、速やかに分解してしまう。また、粉末状態でも常温以上の温度条件下では、日単位でその分解が進んでしまう点で問題である。
【０００７】
したがって、血糖値調節作用、及び糖代謝改善作用を有し、安全性が高く、飲食品として摂取でき、安定性の高い化合物の速やかな提供が求められているのが現状である。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】特表２００８−５３３１３２号公報
【特許文献２】特開昭６１−２４５９７号公報
【特許文献３】特表２００５−５０４７９９号公報
【特許文献４】特開昭５８−５７３９９号公報
【特許文献５】特開２００７−００８８９６号公報
【特許文献６】韓国公開特許１０−２００６−０１３１０１２号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
本発明は、前記従来における諸問題を解決し、以下の目的を達成することを課題とする。即ち、本発明は、優れた血糖値調節作用、及び糖代謝改善作用を有し、安全性が高く、飲食品として摂取でき、安定性の高い糖代謝改善剤、及び前記糖代謝改善剤を含有する糖代謝改善組成物を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
前記課題を解決するため、本発明者らは鋭意検討した結果、以下のような知見を得た。即ち、パナキサジオール（ＰＤ）からなる糖代謝改善剤は、筋肉細胞への糖の取込を促進すること、食後血糖値の上昇抑制作用、空腹時血糖値の低下作用、糖代謝関連指標の調節作用、及び食事由来の糖の代謝促進作用を有することを見出し、本発明の完成に至った。
【００１１】
本発明は、本発明者らによる前記知見に基づくものであり、前記課題を解決するための手段としては、以下の通りである。即ち、
＜１＞ 下記構造式（１）で表される化合物からなることを特徴とする糖代謝改善剤である。
【化１】
＜２＞ 食後血糖値の上昇抑制作用を有する前記＜１＞に記載の糖代謝改善剤である。
＜３＞ 空腹時血糖値の低下作用、及び血清中の糖代謝関連指標の調節作用の少なくともいずれかを有する前記＜１＞から＜２＞のいずれかに記載の糖代謝改善剤である。
＜４＞ 食事由来の糖の代謝促進作用を有する前記＜１＞から＜３＞のいずれかに記載の糖代謝改善剤である。
＜５＞ 筋肉細胞への糖の取込促進作用を有する前記＜１＞から＜４＞のいずれかに記載の糖代謝改善剤である。
＜６＞ 食事と同時摂取することなく糖代謝改善作用が発揮される前記＜１＞から＜５＞のいずれかに記載の糖代謝改善剤である。
＜７＞ １日あたりの摂取量が少なくとも１ｍｇである前記＜１＞から＜６＞のいずれかに記載の糖代謝改善剤である。
＜８＞ 前記＜１＞から＜７＞のいずれかに記載の糖代謝改善剤を含有することを特徴とする糖代謝改善組成物である。
＜９＞ 前記＜１＞から＜７＞のいずれかに記載の糖代謝改善剤を含有することを特徴とする食後血糖値上昇抑制剤である。
＜１０＞ 前記＜１＞から＜７＞のいずれかに記載の糖代謝改善剤を含有することを特徴とする空腹時血糖値低下剤である。
＜１１＞ 前記＜１＞から＜７＞のいずれかに記載の糖代謝改善剤を含有することを特徴とする筋肉細胞への糖取込促進剤である。
＜１２＞ 前記＜１＞から＜７＞のいずれかに記載の糖代謝改善剤を含有することを特徴とする飲食品である。
【発明の効果】
【００１２】
本発明によれば、従来における前記諸問題を解決し、前記目的を達成することができ、優れた血糖値調節作用、及び糖代謝改善作用を有し、安全性が高く、飲食品として摂取でき、安定性の高い糖代謝改善剤、及び前記糖代謝改善剤を含有する糖代謝改善組成物を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
【図１】図１は、ヒト試験における空腹時血糖値の変化を示したグラフである。縦軸は、血糖値（ｍｇ／ｄＬ）を示し、横軸は、ＰＤ摂取開始後の経過日数を示す。
【図２】図２は、ヒト試験のプラセボ摂取群における食後血糖値の変化を示したグラフである。縦軸は、血糖値（ｍｇ／ｄＬ）を示し、横軸は、食事後の経過時間（分間）を示す。
【図３】図３は、ヒト試験のパナキサジオール（ＰＤ）摂取群における食後血糖値の変化を示したグラフである。縦軸は、血糖値（ｍｇ／ｄＬ）を示し、横軸は、食事後の経過時間（分間）を示す。
【図４】図４は、実施例４の各群の呼吸商の測定結果を示したグラフである。縦軸は、呼吸商（ＲＱ）を示し、横軸は、測定時間（時間）を示す。
【図５Ａ】図５Ａは、実施例５の各群の１３ＣＯ２排出量の経時変化を示したグラフである。縦軸は、呼気中の１３ＣＯ２の排出量（体積比率％）を示し、横軸は、ｇｌｕｃｏｓｅ−Ｕ−１３Ｃ６投与後の時間（分間）を示す。
【図５Ｂ】図５Ｂは、実施例５の各群の累積１３ＣＯ２排出量を示したグラフである。縦軸は、ＡＵＣ（１３ＣＯ２排出量上昇値）を示す。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
（糖代謝改善剤）
本発明の糖代謝改善剤は、下記構造式（１）で表される化合物からなる。
【化２】
【００１５】
＜構造式（１）で表される化合物＞
前記構造式（１）で表される化合物は、ダンマラン系トリテルペン類に属する化合物である。以下、「パナキサジオール（ＰＤ）」と称することがある。
前記パナキサジオール（ＰＤ）は、植物由来のサポニン（配糖体）から糖がはずれ、側鎖が閉環し、アグリコン体になったものである。
【００１６】
−入手方法−
前記パナキサジオール（ＰＤ）の入手方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、市販品より入手する方法、合成により得る方法、前記植物より得る方法などが挙げられる。
前記植物としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、ウコギ科人参が好ましく、これらの中でも田七人参がより好ましい。
前記田七人参由来のサポニンとしては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、ジンセノサイド−Ｒｂ１、ジンセノサイド−Ｒｄ、ジンセノサイド−Ｒｃなどが挙げられる。
【００１７】
以下に、ウコギ科人参由来のパナキサジオール（ＰＤ）を得る方法の一例について説明する。前記ウコギ科人参由来のパナキサジオール（ＰＤ）を得る方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、ウコギ科人参から抽出及び／又は精製する方法などが挙げられる。
【００１８】
前記抽出により得る方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、田七人参粉末を水−エタノール溶液で抽出することにより得る方法などが挙げられる。
前記水−エタノール溶液の混合比としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、水：エタノール（Ｖ／Ｖ）が、９：１〜２：１が好ましく、３：１がより好ましい。
前記抽出では、前記水−エタノール溶液に塩酸を含有させ、酸加水分解を行う方法が、パナキサジオール（ＰＤ）を高濃度含有する抽出物を得ることができる点で好ましい。前記塩酸の濃度としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、０．０４質量％〜１６質量％が好ましく、２質量％〜１２質量％がより好ましい。
前記酸加水分解の温度としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、６０℃〜１００℃が好ましく、７０℃〜９０℃がより好ましい。
前記酸加水分解の時間としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、０．５時間〜２４時間が好ましく、２時間〜８時間がより好ましい。
前記酸加水分解により得られた田七人参加水分解液は、更に必要に応じて、苛性ソーダで中和し、エタノール濃度を下げた後に、吸引やその他の方法により濾過後、残渣を、凍結乾燥、減圧乾燥、噴霧乾燥などの乾燥させる処理を施すことができ、これにより、田七人参由来の前記パナキサジオール（ＰＤ）を得ることができる。
【００１９】
前記精製により得る方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、シリカゲルカラムを用いて精製する方法などが挙げられる。
前記シリカゲルカラムを用いて精製する方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、酸加水分解により得られた処理物を１質量％〜５質量％含むエタノール溶液を調製し、次いで、濾紙又は遠心機を用いて、不溶物を除去後、更にロータリーエバポレーターを用いて５倍〜１０倍に濃縮し、シリカゲル（例えば、関東化学株式会社製シリカゲル６０Ｎ）を充填したガラスカラムに、前記濃縮液を添加し、クロロホルム：エタノール＝１０：１（Ｖ／Ｖ）を溶離液として、カラム分取を行う方法などが挙げられる。
前記クロロホルム：エタノール＝１０：１（Ｖ／Ｖ）を展開溶媒とする順相ＴＬＣ上で、Ｒｆ値が０．６に相当する画分を濃縮し、高純度のパナキサジオール（ＰＤ）を得ることができる。
【００２０】
＜摂取＞
前記糖代謝改善剤の摂取方法、摂取量、摂取回数、摂取時期、及び摂取対象としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
前記摂取方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、経口で摂取する方法が、容易に摂取できるため継続しやすい点で好ましい。
前記摂取量としては、特に制限はなく、摂取対象個体の年齢、体重、体質、症状、他の成分を有効成分とする医薬の投与の有無など、様々な要因を考慮して適宜選択することができるが、１日あたりの摂取量が、少なくとも１ｍｇであることが好ましく、２ｍｇ〜２０ｍｇがより好ましい。前記好ましい範囲内であると、食後血糖値、及び空腹時血糖値の両方を抑制でき、かつ服用性を向上させることができる点で有利である。
また、前記摂取回数としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、１日１回が、利便性が良い点で好ましい。
前記摂取時期としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。使用者にとって服用に関る煩わしさを軽減するためには、食事と同時、あるいは食後など、摂取時期を限定すべきではなく、食事と同時摂取することがなくとも糖代謝改善作用が発揮されることが好ましいが、摂取する形態が通常の食品として、食事の中で支障なく摂取することが可能な剤型であるならば、糖代謝改善作用としては摂取時期により異なるものではなく、食事と非同時摂取に拘るものではない。
前記摂取対象となる動物種としては、ヒトに対して好適に適用されるものであるが、その作用効果が奏される限り、ヒト以外の動物（例えば、マウス、ラット、ハムスター、トリ、イヌ、ネコ、ヒツジ、ヤギ、ウシ、ブタ、サルなど）に対して適用することも可能である。
【００２１】
＜糖代謝改善作用＞
前記糖代謝改善剤の糖代謝改善作用としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、細胞への糖の取込促進作用による食後血糖値の上昇抑制作用、空腹時血糖値の低下作用、及び食事由来の糖代謝促進作用の少なくともいずれかを有することが好ましい。
【００２２】
−細胞への糖の取込−
前記細胞としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、筋肉細胞、肝臓細胞、脂肪細胞などが挙げられるが、これらの中でも筋肉細胞であることが好ましい。前記筋肉細胞は、糖代謝の７０％以上を担う細胞であることから、糖の取込み器官としては効率良く機能することが期待できる。一方、肝臓や脂肪細胞では、脂肪肝や肥満という症状に発展するリスクがある為、高血糖状態の改善は期待できるが、可能であれば筋肉細胞が糖取込みの主体となることが望ましい。
前記糖の取込促進作用の作用機序についての詳細は不明であるが、前記糖代謝改善剤により、細胞内に局在しているＧＬＵＴ４の細胞膜上へのトランスロケーションが促進されることによるものであることが推測される。
【００２３】
−−糖取込促進作用の評価方法−−
前記糖取込促進作用を評価する方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、培養細胞の培地中に前記糖代謝改善剤を添加して一定期間感作させた後、ラベルした糖を取り込ませ、前記培養細胞を可溶化して培養細胞中のラベルを測定する方法などが挙げられる。
前記培養細胞としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、ラット骨格筋由来細胞であるＬ６細胞、マウス骨格筋由来細胞であるＣ２Ｃ１２細胞などを用いることができる。
前記Ｌ６細胞を培養する培地としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、１０質量％ＦＢＳ（ｆｅｔａｌ ｂｏｖｉｎｅ ｓｅｒｕｍ）、及び１質量％ＡＢ（ａｎｔｉ−ｂｉｏｔｉｃ ｓｏｌｕｔｉｏｎ）を含有するＤＭＥＭ（Ｄｕｌｂｅｃｃｏ’ｓ ｍｏｄｉｆｉｅｄ Ｅａｇｌｅ ｍｅｄｉｕｍ）などが挙げられる。また、前記Ｌ６細胞に分化誘導をかける方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、２質量％ＦＢＳ、及び１質量％ＡＢを含有するＭＥＭで培養する方法などが挙げられる。
前記糖のラベルとしては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、ＲＩラベルなどが挙げられる。前記ＲＩラベルした糖を取り込ませる方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、培地にＲＩラベルした糖を添加する方法などが挙げられる。前記糖としても、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、グルコースなどが挙げられる。
前記細胞を可溶化する方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、０．０５Ｎ水酸化ナトリウムを用いる方法などが挙げられる。
前記糖のラベルがＲＩラベルである場合、その放射活性を測定する方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、可溶化した細胞を回収したバイアルにシンチレーションカクテルＰｉｃｏｆｌｏｕｒ（パーキンエルマー社製）を添加し、シンチレーションカウンターを用いて測定する方法などが挙げられる。
【００２４】
−食後血糖値−
前記食後血糖値は、食後３０分間後〜１２０分間後の血糖値をいう。
前記食後血糖値としては、年齢、食後の経過時間などによって適宜選択できるが、ヒトでは、食後３０分間後の場合、１８０ｍｇ／ｄＬ未満が好ましく、食後１２０分間後の場合、１４０ｍｇ／ｄＬ未満が好ましい。
【００２５】
−−食後血糖値の評価方法−−
食後血糖値を評価する方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、高血糖モデルマウスにより評価する方法、ヒトに澱粉食を負荷して評価する方法などが挙げられる。
前記血糖値の測定方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、簡易型血糖測定機（例えば、ニプロ株式会社製フリースタイルなど）により測定する方法、サイクリックＧＢセンサー（三光純薬株式会社製）により測定する方法などが挙げられる。
【００２６】
−−−高血糖モデルマウスにより評価する方法−−−
前記高血糖モデルマウスにより評価する方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、高脂肪食に前記糖代謝改善剤を配合した餌で一定期間飼育し、飼育後の血糖値を測定する方法などが挙げられる。
前記高血糖モデルマウスとしては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、ＫＫＡｙマウス（日本クレア株式会社）、ＺＤＦラット（日本チャールスリバー株式会社）などが挙げられる。
前記高脂肪食としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、市販品（Ｑｕｉｃｋ Ｆａｔ、日本クレア株式会社製）などを用いることができる。
前記飼育する期間としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、４日間〜３５日間などが挙げられる。
【００２７】
−−−ヒトに澱粉食を負荷して評価する方法−−−
前記ヒトに澱粉食を負荷して評価する方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、空腹時血糖値が高い（１２０ｍｇ／ｄＬ〜１４０ｍｇ／ｄＬ）被験者に、一定の試験期間所定の食事を摂取させ、食事と同時に摂取することのない時間に１日１回、糖代謝改善剤を摂取させ、食後３０分間ごとに１２０分間までの血糖値の変化を測定する方法などが挙げられる。
前記試験期間としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、４週間〜１６週間などが挙げられる。
前記決められた食事としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、ご飯、パスタなど、澱粉含有量の多い食事が好ましい。
【００２８】
−空腹時血糖値−
前記空腹時血糖値は、朝起床した後、絶飲食で採血した血液の血糖値をいう。なお、厳密には、食事から１０時間以上の間隔を経て採血したもので測定した血糖値であることが望ましい。
前記空腹時血糖値としては、年齢などによって適宜選択できるが、ヒトでは１１０ｍｇ／ｄＬ未満が好ましい。
【００２９】
−−空腹時血糖値の評価方法−−
前記空腹時血糖値を評価する方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、測定時間が空腹時であることを除いて、前記ヒトに澱粉食を負荷して評価する方法と同様の方法で評価することができる。
【００３０】
−糖代謝関連指標−
前記糖代謝関連指標としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、血液指標などが挙げられる。
前記血液指標としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、ＨｂＡ１ｃ（グリコヘモグロビン）、グリコアルブミン、１・５ＡＧ（１，５アンヒドログルシトール）、インスリンなどが挙げられる。
前記血液指標を測定する方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、前記ヒトに澱粉食を負荷した評価の試験時に採取した血液を用いて、医療機関の定法に従い測定することができる。
【００３１】
−−ＨｂＡ１ｃ−−
前記ＨｂＡ１ｃ（グリコヘモグロビン）とは、赤血球中のヘモグロビン（Ｈｂ）とグルコースとが結合した状態のものをいう。即ち、血糖値が高くなると、ＨｂＡ１ｃの値が高くなる。前記ヘモグロビン（Ｈｂ）とグルコースとの結合は反応速度が遅いため、その値は、一時的な生理条件に左右されず、過去１ヶ月間〜２ヶ月間の平均血糖を反映している。
前記ＨｂＡ１ｃの正常値は、４．３質量％〜５．８質量％であり、６．５質量％以上であると、糖尿病である疑いが極めて高くなる。
【００３２】
−−グリコアルブミン−−
前記グリコアルブミンとは、血中のアルブミンとグルコースとが結合した状態のものをいう。即ち、血糖値が高くなると、グリコアルブミンの値が高くなる。
前記アルブミンは、前記ＨｂＡ１ｃと比較して半減期が短いため、前記ＨｂＡ１ｃより近い過去の平均血糖、即ち、１週間〜２週間前の平均血糖を反映している。
前記グリコアルブミンの正常値は、１１．６質量％〜１６．４質量％である。
【００３３】
−−１・５ＡＧ−−
前記１・５ＡＧは、構造がグルコースと類似したポリオールであり、体内に豊富に存在する。前記１・５ＡＧは食物より供給され、余分な前記１・５ＡＧは尿へ排泄される。正常な状態では、前記１・５ＡＧは腎尿細管により再吸収を受けるが、高血糖に伴いグルコースが排泄（尿糖）されると、前記１・５ＡＧの再吸収は競合阻害を受け、尿中へ喪失されることにより血中濃度が低下する。このように、前記１・５ＡＧは、尿糖の影響を受けて増減するため、現在乃至直近の血糖の指標となる。
ただし、前記ＨｂＡ１ｃが１０質量％以上のレベルでは、前記１・５ＡＧは体外に排出されてしまうため、この場合は、前記ＨｂＡ１ｃを指標とすることが適している。
前記１・５ＡＧの正常値は、１４μｇ／ｍＬ〜４６μｇ／ｍＬである。
【００３４】
−食事由来の糖代謝促進作用−
食事由来の糖としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、スクロース、マルトース、ラクトース、グルコース、フルクトース、ガラクトースなどが挙げられる。
【００３５】
前記糖代謝促進作用を評価する方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、呼吸商（ＲＱ）を測定する方法、二酸化炭素排出量を測定する方法などが挙げられる。動物は、通常エネルギー源として糖質又は脂質を利用しているが、呼吸商を測定することにより、糖質若しくは脂質の消費割合を算出することができる。なお、呼吸商は、その値が高いほど糖質を栄養源とし代謝していることを示す。
【００３６】
＜用途＞
前記糖代謝改善剤は、優れた食後血糖値の上昇抑制作用、空腹時血糖値の低下作用、糖代謝関連指標の調節作用、筋肉細胞への糖取込促進作用、及び食事由来の糖代謝促進作用を有することから、後述する糖代謝改善組成物、食後血糖値上昇抑制剤、空腹時血糖値低下剤、及び糖取込促進剤として好適に利用できる。
【００３７】
（糖代謝改善組成物）
本発明の糖代謝改善組成物は、前述した糖代謝改善剤を含有し、必要に応じて、更にその他の成分を含有する。
前記糖代謝改善組成物中の、前記糖代謝改善剤の含有量としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。また、前記糖代謝改善組成物は、前記糖代謝改善剤そのものであってもよい。
【００３８】
前記糖代謝改善組成物のその他の成分としては、特に制限はなく、本発明の効果を損なわない範囲で、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、エタノール、水、デンプン等の薬理学的に許容される担体や、後述する飲食品に利用される補助的原料又は添加物などが挙げられる。
前記その他の成分の含有量としても、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
【００３９】
＜使用＞
前記糖代謝改善組成物は、１種単独で使用されてもよいし、２種以上を併用してもよく、他の成分を有効成分とする医薬と併せて使用されてもよい。また、前記糖代謝改善組成物は、他の成分を有効成分とする医薬中に、配合された状態で使用されてもよい。
【００４０】
＜用途＞
前記糖代謝改善組成物の用途としては、例えば、糖尿病の予防乃至治療に好適に利用することができる。また、後述する飲食品にも好適に利用することができる。
【００４１】
（食後血糖値上昇抑制剤、空腹時血糖値低下剤、及び糖取込促進剤）
＜食後血糖値上昇抑制剤＞
本発明の食後血糖値上昇抑制剤は、前述した糖代謝改善剤を含有し、必要に応じて、更にその他の成分を含有する。
前記食後血糖値上昇抑制剤中の、前記糖代謝改善剤の含有量としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。また、前記食後血糖値上昇抑制剤は、前記糖代謝改善剤そのものであってもよい。
【００４２】
前記その他の成分としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、薬理学的に許容される担体の中から前記食後血糖値上昇抑制剤の剤型などに応じて適宜選択することができ、例えば、エタノール、水、デンプンなどが挙げられる。
前記その他の成分の含有量としても、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
【００４３】
＜空腹時血糖値低下剤＞
本発明の空腹時血糖値低下剤は、前述した糖代謝改善剤を含有し、必要に応じて、更にその他の成分を含有する。
前記空腹時血糖値低下剤中の、前記糖代謝改善剤の含有量としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。また、前記空腹時血糖値低下剤は、前記糖代謝改善剤そのものであってもよい。
【００４４】
前記その他の成分としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、薬理学的に許容される担体の中から前記空腹時血糖値低下剤の剤型などに応じて適宜選択することができ、例えば、エタノール、水、デンプンなどが挙げられる。
前記その他の成分の含有量としても、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
【００４５】
＜糖取込促進剤＞
本発明の糖取込促進剤は、前述した糖代謝改善剤を含有し、必要に応じて、更にその他の成分を含有する。
前記糖取込促進剤中の、前記糖代謝改善剤の含有量としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。また、前記糖取込促進剤は、前記糖代謝改善剤そのものであってもよい。
【００４６】
前記その他の成分としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、薬理学的に許容される担体の中から前記糖取込促進剤の剤型などに応じて適宜選択することができ、例えば、エタノール、水、デンプンなどが挙げられる。
前記その他の成分の含有量としても、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
【００４７】
＜使用＞
前記食後血糖値上昇抑制剤、前記空腹時血糖値低下剤、及び前記糖取込促進剤は、１種単独で使用されてもよいし、２種以上を併用してもよく、他の成分を有効成分とする医薬と併せて使用されてもよい。また、前記食後血糖値上昇抑制剤、前記空腹時血糖値低下剤、及び前記糖取込促進剤は、他の成分を有効成分とする医薬中に、配合された状態で使用されてもよい。
【００４８】
＜用途＞
前記食後血糖値上昇抑制剤、前記空腹時血糖値低下剤、及び前記糖取込促進剤の用途としては、例えば、糖尿病の予防乃至治療に好適に利用することができる。また、後述する飲食品にも好適に利用することができる。
【００４９】
（飲食品）
本発明の飲食品は、前記糖代謝改善剤を含有し、必要に応じて、更にその他の成分を含有する。
ここで、前記飲食品とは、人の健康に危害を加えるおそれが少なく、通常の社会生活において、経口又は消化管投与により摂取されるものをいい、行政区分上の食品、医薬品、医薬部外品などの区分に制限されるものではなく、例えば、経口的に摂取される一般食品、健康食品、保健機能食品、医薬部外品、医薬品などを幅広く含むものを意味する。
【００５０】
前記飲食品中の前記糖代謝改善剤の配合量としては、特に制限はなく、本発明の効果を損なわない範囲内で、対象となる飲食品の種類に応じて適宜配合することができる。
前記飲食品は、前記糖代謝改善剤のみを含有するものであってもよく、また、前記飲食品は、前記糖代謝改善剤そのものであってもよい。
【００５１】
＜飲食品の種類＞
前記飲食品の種類としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、清涼飲料、炭酸飲料、栄養飲料、果実飲料、乳酸飲料などの飲料；アイスクリーム、アイスシャーベット、かき氷などの冷菓；そば、うどん、はるさめ、ぎょうざの皮、しゅうまいの皮、中華麺、即席麺などの麺類；飴、キャンディー、ガム、チョコレート、錠菓、スナック菓子、ビスケット、ゼリー、ジャム、クリーム、焼き菓子、パンなどの菓子類；カニ、サケ、アサリ、マグロ、イワシ、エビ、カツオ、サバ、クジラ、カキ、サンマ、イカ、アカガイ、ホタテ、アワビ、ウニ、イクラ、トコブシなどの水産物；かまぼこ、ハム、ソーセージなどの水産・畜産加工食品；加工乳、発酵乳などの乳製品；サラダ油、てんぷら油、マーガリン、マヨネーズ、ショートニング、ホイップクリーム、ドレッシングなどの油脂及び油脂加工食品；ソース、たれなどの調味料；カレー、シチュー、親子丼、お粥、雑炊、中華丼、かつ丼、天丼、うな丼、ハヤシライス、おでん、マーボドーフ、牛丼、ミートソース、玉子スープ、オムライス、餃子、シューマイ、ハンバーグ、ミートボールなどのレトルトパウチ食品；種々の形態の健康食品、栄養補助食品、医薬品、医薬部外品などが挙げられる。
【００５２】
＜その他の成分＞
前記その他の成分としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、飲食品を製造するにあたって通常用いられる、補助的原料又は添加物などが挙げられる。
前記補助的原料又は添加物としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、ブドウ糖、果糖、ショ糖、マルトース、ソルビトール、ステビオサイド、ルブソサイド、コーンシロップ、乳糖、クエン酸、酒石酸、リンゴ酸、コハク酸、乳酸、Ｌ−アスコルビン酸、ｄｌ−α−トコフェロール、エリソルビン酸ナトリウム、グリセリン、プロピレングリコール、グリセリン脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステル、ショ糖脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、アラビアガム、カラギーナン、カゼイン、ゼラチン、ペクチン、寒天、ビタミンＢ類、ニコチン酸アミド、パントテン酸カルシウム、アミノ酸類、カルシウム塩類、色素、香料、保存剤などが挙げられる。
前記その他の成分の含有量としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
【実施例】
【００５３】
以下、実施例を挙げて本発明をより詳細に説明するが、本発明はこれらの実施例に何ら限定されるものではない。
【００５４】
（実施例１：高血糖モデルマウスの血糖値）
＜方法＞
市販高脂肪食（商品名：Ｑｕｉｃｋ Ｆａｔ、日本クレア株式会社製）に対し、下記表１に示す割合でパナキサジオール（ＰＤ）（ＬＫＴラボラトリーズ社製）を配合した餌を用い、自由摂取により、高血糖モデルマウス（ＫＫＡｙマウス（日本クレア株式会社）、８週齢、５匹／群）を５日間飼育した（以下、「ＰＤ配合群」と称することがある。）。コントロールは、パナキサジオール（ＰＤ）無配合の餌を用いた（以下、「ＰＤ無配合群」と称することがある。）。
前記パナキサジオール（ＰＤ）配合高脂肪食による飼育の開始前（初期値）と後（飼育後）とにおいて、それぞれ午前１０時の血糖値を測定した。血糖値の測定はサイクリックＧＢセンサー（三光純薬株式会社製）により行った。各個体の食後血糖値として、２回測定した平均値を下記表１に示す。なお、統計解析はダネットの多重検定により行った。
【００５５】
【表１】
【００５６】
＜結果＞
表１より、ＰＤ無配合群（コントロール）では、初期値と、飼育５日間後とを比較すると、５日間で有意な食後血糖値の上昇が認められた。これに対し、ＰＤを０．０００１質量％配合した投与群では、ＰＤ無配合群（コントロール）に対して１０％未満の危険率で有意に食後血糖値の上昇が抑制されており、ＰＤを０．００１質量％配合した投与群では、ＰＤ無配合群（コントロール）に対して５％未満の危険率で有意に食後血糖値の上昇が抑制されており、０．０１質量％配合した投与群では、ＰＤ無配合群（コントロール）に対して１％未満の危険率で、有意に食後血糖値の上昇が抑制された。
これらの結果より、ＫＫＡｙマウスに対しては、ＰＤを０．０００１質量％以上配合することで、食後血糖値の上昇抑制効果があることが認められた。
【００５７】
（実施例２：ラット骨格筋由来細胞への糖の取込）
＜方法＞
ラット骨格筋由来細胞（Ｌ６細胞、大日本製薬株式会社製）を、１０質量％ＦＢＳ（ｆｅｔａｌ ｂｏｖｉｎｅ ｓｅｒｕｍ、ＧＩＢＣＯ社製）、及び１質量％ＡＢ（ａｎｔｉ−ｂｉｏｔｉｃ ｓｏｌｕｔｉｏｎ、ＳＩＧＭＡ社製）を含むＤＭＥＭ（Ｄｕｌｂｅｃｃｏ’ｓ ｍｏｄｉｆｉｅｄ Ｅａｇｌｅ ｍｅｄｉｕｍ、ＳＩＧＭＡ社製）１５ｍＬに懸濁し、７５ｃｍ２培養フラスコに分注した後、３７℃、５％ＣＯ２環境下で静置培養した。サブコンフルエント（８０％）に達した後、２４ウエルプレート（住友ベークライト株式会社製）に５０，０００細胞／ウエルとなるように播種した。コンフルエントに達してから３日間培養した後、２質量％ＦＢＳ、及び１質量％ＡＢを含むＭＥＭ（ｍｉｎｉｍａｌ ｅｓｓｅｎｔｉａｌ ｍｅｄｉｕｍ、ナカライテスク株式会社製）に交換し、Ｌ６細胞の分化を誘導した。分化誘導８日後、パナキサジオール（ＰＤ）（エタノールに溶解）を１ｐｐｍ又は１０ｐｐｍとなるように添加した。ＰＤ無添加のウエルをコントロールとした。次いで、３０時間後にパナキサジオール（ＰＤ）を１ｐｐｍ又は１０ｐｐｍとなるように添加した２質量％ＢＳＡ（ウシ血清アルブミン、ＳＩＧＭＡ社製）を含むＭＥＭに交換することにより脱感作した。更に１８時間後、前記２質量％ＢＳＡ含有ＭＥＭを除去し、ＫＲＨバッファー（５０ｍＭ ＨＥＰＥＳ（ＳＩＧＭＡ社製）、ｐＨ７．４、１３７ｍＭ塩化ナトリウム（和光純薬工業株式会社製）、４．８ｍＭ塩化カリウム（和光純薬工業株式会社製）、１．８５ｍＭ塩化カルシウム（和光純薬工業株式会社製）、１．３ｍＭ硫酸マグネシウム（和光純薬工業株式会社製））を３０μＬ／ウエル添加した。その後、ＲＩラベルした２−デオキシグルコース（２−ＤＧ、Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｒａｄｉｏｌａｂｅｌｅｄ Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ社製）を６μＬ添加（終濃度６．５ｍＭ（０．５・Ｃｉ））して反応させた。反応開始５分間後に、細胞を氷冷したＫＲＨバッファーで４回洗浄し、Ｌ６細胞内に取り込まれなかった２−ＤＧを除去した。ＫＲＨバッファーを除去した後、０．０５Ｎ水酸化ナトリウム（和光純薬工業株式会社製）２５０μＬで細胞を可溶化し、バイアルに回収した。更にＫＲＨバッファー２００μＬで２回洗浄し、同様にバイアルに回収した。細胞を回収したバイアルに液体シンチレーションカクテルＰｉｃｏｆｌｏｕｒ（株式会社パーキンエルマー製）３ｍＬを添加し、放射活性を液体シンチレーションカウンター（ＬＳＣ−５１００、Ａｌｏｋａ社製）を用いて測定した。
ｎ＝４で評価し、その平均値を求めた。統計解析は全てスチューデントｔ検定で実施し、Ｐ＜０．０５で有意な差とした。無添加の場合の放射活性を１００としたときの比活性を下記表２に示す。
【００５８】
【表２】
【００５９】
＜結果＞
表２より、Ｌ６細胞にＰＤを添加することにより、細胞内部へのグルコースの取込量の増加が認められた。
これらの結果は、本発明のパナキサジオール（ＰＤ）含有糖代謝改善剤が、生体の糖取込の中心臓器である筋肉において、糖取込の促進作用を有することを示唆するものである。
【００６０】
（実施例３：ヒト試験）
＜糖代謝関連指標の測定＞
−方法−
田七人参粉末１０ｇを３０質量％エタノール水溶液１００ｍＬに懸濁後、ジンセノサイド−Ｒｂ１、ジンセノサイド−Ｒｄ、ジンセノサイド−Ｒｃなどのサポニン類を２時間加熱抽出し、得られた抽出物に対し、塩酸共存下で加水分解を行い、アグリコン含有処理物を調製した。このアグリコン含有処理物をシリカゲルカラム（関東化学株式会社製シリカゲル６０Ｎ）を用いて単離を行い、純度９９質量％以上のパナキサジオール（ＰＤ）を調製した。
このように調製したパナキサジオール（ＰＤ）を８ｍｇ含有するカプセルを調製し、８週間継続摂取した場合（以下、「ＰＤ摂取群」と称することがある。）の空腹時血糖値、並びに、所定のメニュー（米飯２００ｇを使用したおにぎり（３５０ｋｃａｌ）などの澱粉食を負荷したメニュー）の食事を摂取した後の食後血糖値の変化を測定した。また血液指標として、血中のＨｂＡ１ｃ値、グリコアルブミン値、１・５ＡＧ、及び空腹時インスリン値を測定した。
血糖値の測定は、簡易型血糖測定機（フリースタイル、ニプロ株式会社製）を用い、空腹時血糖値、及び空腹時インスリン値の測定を午前９時に、食後血糖値の測定を午前９時から午前１１時３０分にかけて所定の澱粉食を摂取した後、３０分間おきに１２０分間後まで測定した。ＨｂＡ１ｃ値、グリコアルブミン値、及び１・５ＡＧは、医療機関の定法に従い午前９時に採取した血液を用いて測定した。
なお、被験者（２４名）は、空腹時血糖値が１２０ｍｇ／ｄＬ〜１４０ｍｇ／ｄＬの者とし、対照としてプラセボ摂取群を置き、２４名を無作為に２群に分け、プラセボ摂取群とＰＤ摂取群とに割付を行った。また、結果についての統計解析は、プラセボ摂取群と、ＰＤ摂取群とを比較したスチューデントｔ検定を行った。また、カプセルを摂取する時間帯は毎日午前１０時とし、食事と同時摂取することのない時間帯で設定した。
図１に空腹時血糖値の測定結果を示す。
図２にプラセボ摂取群の食後血糖値の変化を、図３にＰＤ摂取群の食後血糖値の変化を示す。
プラセボ摂取群の血液指標の測定結果を下記表３に、ＰＤ摂取群の血液指標の測定結果を下記表４に示す。
【００６１】
【表３】
【００６２】
【表４】
【００６３】
−結果−
ヒト試験（実施例３）の結果、ＰＤ摂取群の空腹時血糖値は、プラセボ摂取群と比較して有意に低下していた（図１）。ＰＤ摂取群の食後血糖値は、プラセボ摂取群と比較して摂取３０分間後、６０分間後、１２０分間後で有意に低下し、明らかな糖代謝の改善効果が認められた（図２〜３）。
これらの結果より、パナキサジオール（ＰＤ）を含有する本発明の糖尿病改善用剤は、空腹時血糖値、及び食後血糖値の両方を低下させることが明らかとなった。
また、表３〜４より、血液中の糖代謝に関する指標を確認した結果、ＰＤ摂取群のＨｂＡ１ｃは、プラセボ摂取群と比較して摂取８週間後に有意に低下した。ＰＤ摂取群のグリコアルブミンはプラセボ摂取群と比較して有意に低下していた。また、グリコアルブミンは、ＰＤ摂取群０週目と、８週目との間にも、有意な低下が認められた。ＰＤ摂取群の１・５ＡＧは４週目以降に増加が認められた。ＰＤ摂取群において、空腹時インスリン値には統計的に有意な変化がなかったとこから、パナキサジオール（ＰＤ）の血糖値の上昇抑制作用は、インスリン分泌能の亢進ではなく、インスリン感受性が向上したものと考えられる。
これらの結果より、パナキサジオール（ＰＤ）を含有する本発明の糖尿病改善用剤は、食事と同時摂取する必要がなく、１日１回の摂取で効果があったことから、継続摂取を促す上で意義が高いものと考えられる。
【００６４】
（実施例４：呼吸商の回復効果）
高血糖モデルマウス（ＫＫＡｙマウス（日本クレア株式会社）、オス、４週齢）１２匹を室温２２±１℃、湿度５０±５％、１２時間の明暗サイクルの条件下にて個別ケージで１週間予備飼育した。予備飼育期間中の飼料は、１日当たり、ＣＥ−２（日本クレア社製）をマウス１匹につき８ｇ与え、給水は自由摂取とした。
予備飼育期終了後、体重及び血糖値を測定し、平均的になるように６匹／群の２群に分け、以下の方法により本飼育を行なった。
なお、血糖値の測定は、マウス尾静脈より採血を行い、全血を、サイクリックＧＢセンサー（三光純薬株式会社製）を用いて２回測定した。
【００６５】
−対照群−
市販高脂肪食（商品名：Ｑｕｉｃｋ Ｆａｔ、日本クレア株式会社製）を１日当たりマウス１匹につき８ｇ与え、給水は自由摂取とし、１週間本飼育を行なった。以下、「対照群」と称することがある。
【００６６】
−田七人参処理物投与群−
田七人参粉末１０ｇを３０質量％エタノール水溶液１００ｍＬに懸濁後、サポニン類を２時間加熱抽出し、得られた抽出物に対し、塩酸共存下で加水分解を行い、アグリコン含有処理物を調製した。
得られたアグリコン含有処理物を約０．１ｇ精密に量り、エタノール（純度９９．５質量％）約８ｍＬを加え、超音波槽を用いて１５分間懸濁した。約７００×ｇで１０分間遠心した後、上清にエタノール（純度９９．５質量％）を加えて正確に１０ｍＬとした。この液を、下記の条件でガスクロマトグラフィーにより測定したところ、パナキサジオール（ＰＤ）の含有量は３．５質量％であった。なお、下記条件におけるパナキサジオール（ＰＤ）の保持時間は約１８分間であった。
［分析条件］
ガスクロマトグラフ： ＧＬサイエンス社製 ＧＣ３５３Ｂ
検出器： 水素炎イオン化検出器（ＦＩＤ）
注入法： スプリット注入法（スプリット比 １：５０）
カラム： Ｊ＆Ｗ社製 ＤＢ−１７ＭＳ（長さ３０ｍ、内径０．２５ｍｍ、膜厚０．２５μｍ）
カラム温度： 初期温度：３１０℃
初期温度保持時間：２０分間
昇温速度：１０℃／分間
到達温度：３２０℃
到達温度保持時間：１４分間
キャリヤーガス： ヘリウム
流量： １．５ｍＬ／分間
注入口温度： ３２０℃
検出器温度： ３２０℃
注入量： １μＬ
【００６７】
市販高脂肪食（商品名：Ｑｕｉｃｋ Ｆａｔ、日本クレア株式会社製）に１質量％の前記アグリコン含有処理物を配合した飼料（アグリコン含有量０．１質量％）を１日当たりマウス１匹につき８ｇ（ＰＤ：約２．８ｍｇ／日）与え、給水は自由摂取とし、１週間本飼育を行なった。以下、「田七人参処理物投与群」と称することがある。
【００６８】
本飼育を１週間行なった後、２４時間呼気ガス測定を行なった。即ち、マウスを呼気ガス分析チャンバー（１５０ｍｍ×１５０ｍｍ×１５０ｍｍ、室町機械株式会社製）内で飼育し、酸素消費量、二酸化炭素排出量、及び呼吸商（ＲＱ）を小動物用代謝計測システム ＭＫ−５０００ＲＱ（室町機械株式会社製）にて連続的に測定した。測定中は、飼育期間中と同様に、対照群には市販高脂肪食を１日当たりマウス１匹につき８ｇ与え、田七人参処理物投与群には市販高脂肪食に１質量％の前記アグリコン含有処理物を配合した飼料を１日当たりマウス１匹につき８ｇ与えた。給水は共に自由摂取とした。
なお、呼吸商（ＲＱ）は、次式により算出される。
呼吸商（ＲＱ）＝単位時間当たりの二酸化炭素排出量／単位時間当たりの酸素排出量
ここで、糖質はＲＱ＝１．０であり、脂質はＲＱ＝０．７である。したがって、呼吸商の値により、糖及び脂質のどちらがどれだけ利用されているのかを求めることができる。
【００６９】
図４に呼吸商の測定結果を示す。この結果より、田七人参処理物投与群ではＲＱ値の上昇が認められた。即ち、パナキサジオール（ＰＤ）を含む田七人参処理物を摂取することにより、糖質消費能の改善効果が確認できた。
糖質の消費割合を次式で算出したところ、対照群では５０．７％であったが、田七人参処理物投与群では６０．８％まで上昇し、糖質の消費割合が亢進していた。
呼吸商（ＲＱ）＝１．０×（ｘ／１００）＋０．７×（１−ｘ／１００）
上記式において、「ｘ」は、糖質消費割合（％）を表す。
【００７０】
（実施例５：食事由来の糖に対する糖代謝促進効果）
高血糖モデルマウス（ＫＫＡｙマウス（日本クレア株式会社）、オス、４週齢）１６匹を実施例４と同様の方法で１週間予備飼育した。
予備飼育期終了後、体重及び血糖値を測定し、平均的になるように８匹／群の２群に分け、以下の方法により本飼育を行なった。なお、血糖値の測定は、マウス尾静脈より採血を行い、全血を、サイクリックＧＢセンサー（三光純薬株式会社製）を用いて測定した。
【００７１】
−対照群−
市販高脂肪食（商品名：Ｑｕｉｃｋ Ｆａｔ、日本クレア株式会社製）を１日当たりマウス１匹につき８ｇ与え、給水は自由摂取とし、１週間本飼育を行なった。以下、「対照群」と称することがある。
【００７２】
−ＰＤ投与群−
市販高脂肪食（商品名：Ｑｕｉｃｋ Ｆａｔ、日本クレア株式会社製）に０．１質量％のパナキサジオール（ＰＤ）（ＬＫＴラボラトリーズ社製）を配合した飼料を１日当たりマウス１匹につき８ｇ与え、給水は自由摂取とし、１週間本飼育を行なった。以下、「ＰＤ投与群」と称することがある。
【００７３】
本飼育を１週間行なった後、血糖値及び体重測定を行い、１３ＣＯ２排出量測定に供した。対照群の血糖値は３３５．４ｍｇ／ｄＬ、ＰＤ投与群の血糖値は２３１．６ｍｇ／ｄＬであった。
【００７４】
＜１３ＣＯ２排出量の測定＞
マウスを呼気ガス分析チャンバー（ＡＲＣＯ−２０００−ＩＳＯ Ｓｙｓｔｅｍ、ＡＲＣＯ ＳＹＳＴＥＭ社製）に移し、２時間の馴化を行った。その後、［２．０ｇ Ｄ−ｇｌｕｃｏｓｅ（ナカライテクス株式会社製）＋７２ｍｇ Ｄ−ｇｌｕｃｏｓｅ−Ｕ−１３Ｃ６（９９％）（Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ Ｉｓｏｔｏｐｅ Ｌａｂ．社製）／ｋｇ−体重］から算出される濃度で、ｇｌｕｃｏｓｅ及びｇｌｕｃｏｓｅ−Ｕ−１３Ｃ６の水溶液をマウスに経口投与し、４時間に渡って累積１３ＣＯ２排出量を測定した。累積１３ＣＯ２排出量は、ＡＵＣ（１３ＣＯ２排出量上昇値）で示した。ＡＵＣ（１３ＣＯ２排出量上昇値）とは、ｇｌｕｃｏｓｅ−Ｕ−１３Ｃ６投与後の排出量変化を時間に対してプロットしたグラフにおいて、ｇｌｕｃｏｓｅ−Ｕ−１３Ｃ６投与前の排出量をベースラインとしてｇｌｕｃｏｓｅ−Ｕ−１３Ｃ６投与４時間後までの増加部分の面積を表わす。
【００７５】
図５Ａに１３ＣＯ２排出量の経時変化を、図５Ｂに累積１３ＣＯ２排出量の結果を示す。これらの結果より、ＰＤ投与群において、１３ＣＯ２排出量の有意な上昇が確認された（統計解析はスチューデントｔ検定で実施し、Ｐ＜０．０５で有意な差とした。）。即ち、食事より摂取した糖の代謝を促進することがわかった。
【産業上の利用可能性】
【００７６】
本発明のパナキサジオール（ＰＤ）からなる糖代謝改善剤及び前記糖代謝改善剤を含有する糖代謝改善組成物は、優れた筋肉細胞への糖の取込促進作用、食後血糖値の上昇抑制作用、空腹時血糖値の低下作用、糖代謝関連指標の調節作用、及び食事由来の糖代謝促進作用を有することから、食後血糖値上昇抑制剤、空腹時血糖値低下剤、及び糖取込促進剤として好適に利用でき、糖尿病の予防乃至治療に有効である。
更に、前記糖代謝改善剤は、安全性が高いため、飲食品に好適に利用可能である。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、パナキサジオール（ＰＤ）からなる糖代謝改善剤、及び前記糖代謝改善剤を含有する糖代謝改善組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
我が国の糖尿病患者は、約８２０万人、糖尿病予備軍は、約１，０５０万人であると推定され、更にその数は年々増加している。日本人は糖尿病になりやすい体質、即ち、食べた物を消費しにくく、貯め込み易い体質であり、倹約遺伝子保有率は、欧米人の２倍〜５倍といわれている。そのため、糖尿病の予防乃至治療は重要な問題となっている。
【０００３】
糖尿病の病態分類としては、正常型、境界型、及び糖尿病型の３つに分類（日本糖尿病学会ガイドライン）され、前記糖尿病予備軍とは、境界型の患者をいう。
前記糖尿病型の判断基準は、（１）空腹時血糖値が１２６ｍｇ／ｄＬ以上、（２）食後血糖値が２００ｍｇ／ｄＬ以上、（３）７５ｇのグルコース負荷試験で２時間後の血糖値が２００ｍｇ／ｄＬ以上、（４）糖尿病の典型的症状（口渇、多飲、多尿、体重減少など）がある、（５）ＨｂＡ１ｃ（グリコヘモグロビン）が６．５質量％以上、（６）確実な糖尿病網膜症の存在などの基準が設けられている。
前記境界型は、（１）空腹時血糖値が１１０ｍｇ／ｄＬ以上、１２６ｍｇ／ｄＬ未満、（２）７５ｇの糖負荷試験で２時間後の血糖値が１４０ｍｇ／ｄＬ以上、２００ｍｇ／ｄＬ未満の場合に該当する。
【０００４】
現在、糖尿病治療薬としては、インスリンの分泌を促進するスルホニル尿素剤（ＳＵ剤）、フェニールアラニン誘導体や、糖の吸収を抑制するα−グリコシダーゼ阻害剤、肝臓での糖の産生を抑制するビクアナイド（ＢＧ）薬、インスリン抵抗性を改善するチアゾリジン誘導体などが知られているが、空腹時血糖、及び食後血糖の両者の調節に効果のあるものは少ない。また、これらの医薬品が処方されるのは、糖尿病と診断された場合のみであり、境界型に属する者が、糖尿病へ進行することを防ぐためには、食事療法や運動療法に頼るしかないのが現状である。
【０００５】
また、糖尿病による高血糖状態の改善は、一過性ではなく体質を含めて根本的に改善することが望まれる。体内に取り込まれた余分なグルコースは、血中から肝臓や筋肉に取込まれ、グリコーゲンとして貯蔵される。このグリコーゲン合成を促進することができれば、高血糖状態を改善できると考えられる。糖代謝の７０％以上は筋肉で行われているため、グルコースの筋肉への取込みを促進することにより、高血糖状態の改善が期待できる。
このように、筋肉で積極的に糖代謝を行う体質を維持するためには、前述した薬剤だけでなく、食品療法による糖尿病の改善が有効である。上述した薬剤以外に、食品として摂取できるもので食後血糖値を抑制するものは多数存在するが、空腹時血糖値を抑制するものとしては医薬品しか存在せず、空腹時血糖値を抑制する食品の提供が強く求められている。
【０００６】
人参に含まれる配糖体（ジンセノサイド）は、血糖値調節作用（特許文献１参照）、抗糖尿病作用（特許文献２）を有することが知られており、また、前記配糖体から糖がはずれたアグリコン体であるプロトパナキサジオール（ＰＰＤ）は、抗ガン作用（特許文献３〜４参照）、皮膚疾患に対する抗炎症作用（特許文献５参照）、脂肪代謝及び糖代謝に重要な遺伝子発現を調節するＰＰＡＲγの活性化作用（特許文献６）などの様々な作用を有することが知られている。
前記プロトパナキサジオール（ＰＰＤ）は、白色の粉末であり、水に対しては不溶であるが、有機溶媒を加えることで溶解性を向上させることができる。しかしながら、前記プロトパナキサジオール（ＰＰＤ）は構造的に不安定であり、液系、特に低ｐＨ系においては、速やかに分解してしまう。また、粉末状態でも常温以上の温度条件下では、日単位でその分解が進んでしまう点で問題である。
【０００７】
したがって、血糖値調節作用、及び糖代謝改善作用を有し、安全性が高く、飲食品として摂取でき、安定性の高い化合物の速やかな提供が求められているのが現状である。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】特表２００８−５３３１３２号公報
【特許文献２】特開昭６１−２４５９７号公報
【特許文献３】特表２００５−５０４７９９号公報
【特許文献４】特開昭５８−５７３９９号公報
【特許文献５】特開２００７−００８８９６号公報
【特許文献６】韓国公開特許１０−２００６−０１３１０１２号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
本発明は、前記従来における諸問題を解決し、以下の目的を達成することを課題とする。即ち、本発明は、優れた血糖値調節作用、及び糖代謝改善作用を有し、安全性が高く、飲食品として摂取でき、安定性の高い糖代謝改善剤、及び前記糖代謝改善剤を含有する糖代謝改善組成物を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
前記課題を解決するため、本発明者らは鋭意検討した結果、以下のような知見を得た。即ち、パナキサジオール（ＰＤ）からなる糖代謝改善剤は、筋肉細胞への糖の取込を促進すること、食後血糖値の上昇抑制作用、空腹時血糖値の低下作用、糖代謝関連指標の調節作用、及び食事由来の糖の代謝促進作用を有することを見出し、本発明の完成に至った。
【００１１】
本発明は、本発明者らによる前記知見に基づくものであり、前記課題を解決するための手段としては、以下の通りである。即ち、
＜１＞ 下記構造式（１）で表される化合物からなることを特徴とする糖代謝改善剤である。
【化１】
＜２＞ 食後血糖値の上昇抑制作用を有する前記＜１＞に記載の糖代謝改善剤である。
＜３＞ 空腹時血糖値の低下作用、及び血清中の糖代謝関連指標の調節作用の少なくともいずれかを有する前記＜１＞から＜２＞のいずれかに記載の糖代謝改善剤である。
＜４＞ 食事由来の糖の代謝促進作用を有する前記＜１＞から＜３＞のいずれかに記載の糖代謝改善剤である。
＜５＞ 筋肉細胞への糖の取込促進作用を有する前記＜１＞から＜４＞のいずれかに記載の糖代謝改善剤である。
＜６＞ 食事と同時摂取することなく糖代謝改善作用が発揮される前記＜１＞から＜５＞のいずれかに記載の糖代謝改善剤である。
＜７＞ １日あたりの摂取量が少なくとも１ｍｇである前記＜１＞から＜６＞のいずれかに記載の糖代謝改善剤である。
＜８＞ 前記＜１＞から＜７＞のいずれかに記載の糖代謝改善剤を含有することを特徴とする糖代謝改善組成物である。
＜９＞ 前記＜１＞から＜７＞のいずれかに記載の糖代謝改善剤を含有することを特徴とする食後血糖値上昇抑制剤である。
＜１０＞ 前記＜１＞から＜７＞のいずれかに記載の糖代謝改善剤を含有することを特徴とする空腹時血糖値低下剤である。
＜１１＞ 前記＜１＞から＜７＞のいずれかに記載の糖代謝改善剤を含有することを特徴とする筋肉細胞への糖取込促進剤である。
＜１２＞ 前記＜１＞から＜７＞のいずれかに記載の糖代謝改善剤を含有することを特徴とする飲食品である。
【発明の効果】
【００１２】
本発明によれば、従来における前記諸問題を解決し、前記目的を達成することができ、優れた血糖値調節作用、及び糖代謝改善作用を有し、安全性が高く、飲食品として摂取でき、安定性の高い糖代謝改善剤、及び前記糖代謝改善剤を含有する糖代謝改善組成物を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
【図１】図１は、ヒト試験における空腹時血糖値の変化を示したグラフである。縦軸は、血糖値（ｍｇ／ｄＬ）を示し、横軸は、ＰＤ摂取開始後の経過日数を示す。
【図２】図２は、ヒト試験のプラセボ摂取群における食後血糖値の変化を示したグラフである。縦軸は、血糖値（ｍｇ／ｄＬ）を示し、横軸は、食事後の経過時間（分間）を示す。
【図３】図３は、ヒト試験のパナキサジオール（ＰＤ）摂取群における食後血糖値の変化を示したグラフである。縦軸は、血糖値（ｍｇ／ｄＬ）を示し、横軸は、食事後の経過時間（分間）を示す。
【図４】図４は、実施例４の各群の呼吸商の測定結果を示したグラフである。縦軸は、呼吸商（ＲＱ）を示し、横軸は、測定時間（時間）を示す。
【図５Ａ】図５Ａは、実施例５の各群の１３ＣＯ２排出量の経時変化を示したグラフである。縦軸は、呼気中の１３ＣＯ２の排出量（体積比率％）を示し、横軸は、ｇｌｕｃｏｓｅ−Ｕ−１３Ｃ６投与後の時間（分間）を示す。
【図５Ｂ】図５Ｂは、実施例５の各群の累積１３ＣＯ２排出量を示したグラフである。縦軸は、ＡＵＣ（１３ＣＯ２排出量上昇値）を示す。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
（糖代謝改善剤）
本発明の糖代謝改善剤は、下記構造式（１）で表される化合物からなる。
【化２】
【００１５】
＜構造式（１）で表される化合物＞
前記構造式（１）で表される化合物は、ダンマラン系トリテルペン類に属する化合物である。以下、「パナキサジオール（ＰＤ）」と称することがある。
前記パナキサジオール（ＰＤ）は、植物由来のサポニン（配糖体）から糖がはずれ、側鎖が閉環し、アグリコン体になったものである。
【００１６】
−入手方法−
前記パナキサジオール（ＰＤ）の入手方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、市販品より入手する方法、合成により得る方法、前記植物より得る方法などが挙げられる。
前記植物としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、ウコギ科人参が好ましく、これらの中でも田七人参がより好ましい。
前記田七人参由来のサポニンとしては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、ジンセノサイド−Ｒｂ１、ジンセノサイド−Ｒｄ、ジンセノサイド−Ｒｃなどが挙げられる。
【００１７】
以下に、ウコギ科人参由来のパナキサジオール（ＰＤ）を得る方法の一例について説明する。前記ウコギ科人参由来のパナキサジオール（ＰＤ）を得る方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、ウコギ科人参から抽出及び／又は精製する方法などが挙げられる。
【００１８】
前記抽出により得る方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、田七人参粉末を水−エタノール溶液で抽出することにより得る方法などが挙げられる。
前記水−エタノール溶液の混合比としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、水：エタノール（Ｖ／Ｖ）が、９：１〜２：１が好ましく、３：１がより好ましい。
前記抽出では、前記水−エタノール溶液に塩酸を含有させ、酸加水分解を行う方法が、パナキサジオール（ＰＤ）を高濃度含有する抽出物を得ることができる点で好ましい。前記塩酸の濃度としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、０．０４質量％〜１６質量％が好ましく、２質量％〜１２質量％がより好ましい。
前記酸加水分解の温度としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、６０℃〜１００℃が好ましく、７０℃〜９０℃がより好ましい。
前記酸加水分解の時間としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、０．５時間〜２４時間が好ましく、２時間〜８時間がより好ましい。
前記酸加水分解により得られた田七人参加水分解液は、更に必要に応じて、苛性ソーダで中和し、エタノール濃度を下げた後に、吸引やその他の方法により濾過後、残渣を、凍結乾燥、減圧乾燥、噴霧乾燥などの乾燥させる処理を施すことができ、これにより、田七人参由来の前記パナキサジオール（ＰＤ）を得ることができる。
【００１９】
前記精製により得る方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、シリカゲルカラムを用いて精製する方法などが挙げられる。
前記シリカゲルカラムを用いて精製する方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、酸加水分解により得られた処理物を１質量％〜５質量％含むエタノール溶液を調製し、次いで、濾紙又は遠心機を用いて、不溶物を除去後、更にロータリーエバポレーターを用いて５倍〜１０倍に濃縮し、シリカゲル（例えば、関東化学株式会社製シリカゲル６０Ｎ）を充填したガラスカラムに、前記濃縮液を添加し、クロロホルム：エタノール＝１０：１（Ｖ／Ｖ）を溶離液として、カラム分取を行う方法などが挙げられる。
前記クロロホルム：エタノール＝１０：１（Ｖ／Ｖ）を展開溶媒とする順相ＴＬＣ上で、Ｒｆ値が０．６に相当する画分を濃縮し、高純度のパナキサジオール（ＰＤ）を得ることができる。
【００２０】
＜摂取＞
前記糖代謝改善剤の摂取方法、摂取量、摂取回数、摂取時期、及び摂取対象としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
前記摂取方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、経口で摂取する方法が、容易に摂取できるため継続しやすい点で好ましい。
前記摂取量としては、特に制限はなく、摂取対象個体の年齢、体重、体質、症状、他の成分を有効成分とする医薬の投与の有無など、様々な要因を考慮して適宜選択することができるが、１日あたりの摂取量が、少なくとも１ｍｇであることが好ましく、２ｍｇ〜２０ｍｇがより好ましい。前記好ましい範囲内であると、食後血糖値、及び空腹時血糖値の両方を抑制でき、かつ服用性を向上させることができる点で有利である。
また、前記摂取回数としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、１日１回が、利便性が良い点で好ましい。
前記摂取時期としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。使用者にとって服用に関る煩わしさを軽減するためには、食事と同時、あるいは食後など、摂取時期を限定すべきではなく、食事と同時摂取することがなくとも糖代謝改善作用が発揮されることが好ましいが、摂取する形態が通常の食品として、食事の中で支障なく摂取することが可能な剤型であるならば、糖代謝改善作用としては摂取時期により異なるものではなく、食事と非同時摂取に拘るものではない。
前記摂取対象となる動物種としては、ヒトに対して好適に適用されるものであるが、その作用効果が奏される限り、ヒト以外の動物（例えば、マウス、ラット、ハムスター、トリ、イヌ、ネコ、ヒツジ、ヤギ、ウシ、ブタ、サルなど）に対して適用することも可能である。
【００２１】
＜糖代謝改善作用＞
前記糖代謝改善剤の糖代謝改善作用としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、細胞への糖の取込促進作用による食後血糖値の上昇抑制作用、空腹時血糖値の低下作用、及び食事由来の糖代謝促進作用の少なくともいずれかを有することが好ましい。
【００２２】
−細胞への糖の取込−
前記細胞としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、筋肉細胞、肝臓細胞、脂肪細胞などが挙げられるが、これらの中でも筋肉細胞であることが好ましい。前記筋肉細胞は、糖代謝の７０％以上を担う細胞であることから、糖の取込み器官としては効率良く機能することが期待できる。一方、肝臓や脂肪細胞では、脂肪肝や肥満という症状に発展するリスクがある為、高血糖状態の改善は期待できるが、可能であれば筋肉細胞が糖取込みの主体となることが望ましい。
前記糖の取込促進作用の作用機序についての詳細は不明であるが、前記糖代謝改善剤により、細胞内に局在しているＧＬＵＴ４の細胞膜上へのトランスロケーションが促進されることによるものであることが推測される。
【００２３】
−−糖取込促進作用の評価方法−−
前記糖取込促進作用を評価する方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、培養細胞の培地中に前記糖代謝改善剤を添加して一定期間感作させた後、ラベルした糖を取り込ませ、前記培養細胞を可溶化して培養細胞中のラベルを測定する方法などが挙げられる。
前記培養細胞としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、ラット骨格筋由来細胞であるＬ６細胞、マウス骨格筋由来細胞であるＣ２Ｃ１２細胞などを用いることができる。
前記Ｌ６細胞を培養する培地としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、１０質量％ＦＢＳ（ｆｅｔａｌ ｂｏｖｉｎｅ ｓｅｒｕｍ）、及び１質量％ＡＢ（ａｎｔｉ−ｂｉｏｔｉｃ ｓｏｌｕｔｉｏｎ）を含有するＤＭＥＭ（Ｄｕｌｂｅｃｃｏ’ｓ ｍｏｄｉｆｉｅｄ Ｅａｇｌｅ ｍｅｄｉｕｍ）などが挙げられる。また、前記Ｌ６細胞に分化誘導をかける方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、２質量％ＦＢＳ、及び１質量％ＡＢを含有するＭＥＭで培養する方法などが挙げられる。
前記糖のラベルとしては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、ＲＩラベルなどが挙げられる。前記ＲＩラベルした糖を取り込ませる方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、培地にＲＩラベルした糖を添加する方法などが挙げられる。前記糖としても、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、グルコースなどが挙げられる。
前記細胞を可溶化する方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、０．０５Ｎ水酸化ナトリウムを用いる方法などが挙げられる。
前記糖のラベルがＲＩラベルである場合、その放射活性を測定する方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、可溶化した細胞を回収したバイアルにシンチレーションカクテルＰｉｃｏｆｌｏｕｒ（パーキンエルマー社製）を添加し、シンチレーションカウンターを用いて測定する方法などが挙げられる。
【００２４】
−食後血糖値−
前記食後血糖値は、食後３０分間後〜１２０分間後の血糖値をいう。
前記食後血糖値としては、年齢、食後の経過時間などによって適宜選択できるが、ヒトでは、食後３０分間後の場合、１８０ｍｇ／ｄＬ未満が好ましく、食後１２０分間後の場合、１４０ｍｇ／ｄＬ未満が好ましい。
【００２５】
−−食後血糖値の評価方法−−
食後血糖値を評価する方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、高血糖モデルマウスにより評価する方法、ヒトに澱粉食を負荷して評価する方法などが挙げられる。
前記血糖値の測定方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、簡易型血糖測定機（例えば、ニプロ株式会社製フリースタイルなど）により測定する方法、サイクリックＧＢセンサー（三光純薬株式会社製）により測定する方法などが挙げられる。
【００２６】
−−−高血糖モデルマウスにより評価する方法−−−
前記高血糖モデルマウスにより評価する方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、高脂肪食に前記糖代謝改善剤を配合した餌で一定期間飼育し、飼育後の血糖値を測定する方法などが挙げられる。
前記高血糖モデルマウスとしては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、ＫＫＡｙマウス（日本クレア株式会社）、ＺＤＦラット（日本チャールスリバー株式会社）などが挙げられる。
前記高脂肪食としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、市販品（Ｑｕｉｃｋ Ｆａｔ、日本クレア株式会社製）などを用いることができる。
前記飼育する期間としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、４日間〜３５日間などが挙げられる。
【００２７】
−−−ヒトに澱粉食を負荷して評価する方法−−−
前記ヒトに澱粉食を負荷して評価する方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、空腹時血糖値が高い（１２０ｍｇ／ｄＬ〜１４０ｍｇ／ｄＬ）被験者に、一定の試験期間所定の食事を摂取させ、食事と同時に摂取することのない時間に１日１回、糖代謝改善剤を摂取させ、食後３０分間ごとに１２０分間までの血糖値の変化を測定する方法などが挙げられる。
前記試験期間としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、４週間〜１６週間などが挙げられる。
前記決められた食事としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、ご飯、パスタなど、澱粉含有量の多い食事が好ましい。
【００２８】
−空腹時血糖値−
前記空腹時血糖値は、朝起床した後、絶飲食で採血した血液の血糖値をいう。なお、厳密には、食事から１０時間以上の間隔を経て採血したもので測定した血糖値であることが望ましい。
前記空腹時血糖値としては、年齢などによって適宜選択できるが、ヒトでは１１０ｍｇ／ｄＬ未満が好ましい。
【００２９】
−−空腹時血糖値の評価方法−−
前記空腹時血糖値を評価する方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、測定時間が空腹時であることを除いて、前記ヒトに澱粉食を負荷して評価する方法と同様の方法で評価することができる。
【００３０】
−糖代謝関連指標−
前記糖代謝関連指標としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、血液指標などが挙げられる。
前記血液指標としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、ＨｂＡ１ｃ（グリコヘモグロビン）、グリコアルブミン、１・５ＡＧ（１，５アンヒドログルシトール）、インスリンなどが挙げられる。
前記血液指標を測定する方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、前記ヒトに澱粉食を負荷した評価の試験時に採取した血液を用いて、医療機関の定法に従い測定することができる。
【００３１】
−−ＨｂＡ１ｃ−−
前記ＨｂＡ１ｃ（グリコヘモグロビン）とは、赤血球中のヘモグロビン（Ｈｂ）とグルコースとが結合した状態のものをいう。即ち、血糖値が高くなると、ＨｂＡ１ｃの値が高くなる。前記ヘモグロビン（Ｈｂ）とグルコースとの結合は反応速度が遅いため、その値は、一時的な生理条件に左右されず、過去１ヶ月間〜２ヶ月間の平均血糖を反映している。
前記ＨｂＡ１ｃの正常値は、４．３質量％〜５．８質量％であり、６．５質量％以上であると、糖尿病である疑いが極めて高くなる。
【００３２】
−−グリコアルブミン−−
前記グリコアルブミンとは、血中のアルブミンとグルコースとが結合した状態のものをいう。即ち、血糖値が高くなると、グリコアルブミンの値が高くなる。
前記アルブミンは、前記ＨｂＡ１ｃと比較して半減期が短いため、前記ＨｂＡ１ｃより近い過去の平均血糖、即ち、１週間〜２週間前の平均血糖を反映している。
前記グリコアルブミンの正常値は、１１．６質量％〜１６．４質量％である。
【００３３】
−−１・５ＡＧ−−
前記１・５ＡＧは、構造がグルコースと類似したポリオールであり、体内に豊富に存在する。前記１・５ＡＧは食物より供給され、余分な前記１・５ＡＧは尿へ排泄される。正常な状態では、前記１・５ＡＧは腎尿細管により再吸収を受けるが、高血糖に伴いグルコースが排泄（尿糖）されると、前記１・５ＡＧの再吸収は競合阻害を受け、尿中へ喪失されることにより血中濃度が低下する。このように、前記１・５ＡＧは、尿糖の影響を受けて増減するため、現在乃至直近の血糖の指標となる。
ただし、前記ＨｂＡ１ｃが１０質量％以上のレベルでは、前記１・５ＡＧは体外に排出されてしまうため、この場合は、前記ＨｂＡ１ｃを指標とすることが適している。
前記１・５ＡＧの正常値は、１４μｇ／ｍＬ〜４６μｇ／ｍＬである。
【００３４】
−食事由来の糖代謝促進作用−
食事由来の糖としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、スクロース、マルトース、ラクトース、グルコース、フルクトース、ガラクトースなどが挙げられる。
【００３５】
前記糖代謝促進作用を評価する方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、呼吸商（ＲＱ）を測定する方法、二酸化炭素排出量を測定する方法などが挙げられる。動物は、通常エネルギー源として糖質又は脂質を利用しているが、呼吸商を測定することにより、糖質若しくは脂質の消費割合を算出することができる。なお、呼吸商は、その値が高いほど糖質を栄養源とし代謝していることを示す。
【００３６】
＜用途＞
前記糖代謝改善剤は、優れた食後血糖値の上昇抑制作用、空腹時血糖値の低下作用、糖代謝関連指標の調節作用、筋肉細胞への糖取込促進作用、及び食事由来の糖代謝促進作用を有することから、後述する糖代謝改善組成物、食後血糖値上昇抑制剤、空腹時血糖値低下剤、及び糖取込促進剤として好適に利用できる。
【００３７】
（糖代謝改善組成物）
本発明の糖代謝改善組成物は、前述した糖代謝改善剤を含有し、必要に応じて、更にその他の成分を含有する。
前記糖代謝改善組成物中の、前記糖代謝改善剤の含有量としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。また、前記糖代謝改善組成物は、前記糖代謝改善剤そのものであってもよい。
【００３８】
前記糖代謝改善組成物のその他の成分としては、特に制限はなく、本発明の効果を損なわない範囲で、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、エタノール、水、デンプン等の薬理学的に許容される担体や、後述する飲食品に利用される補助的原料又は添加物などが挙げられる。
前記その他の成分の含有量としても、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
【００３９】
＜使用＞
前記糖代謝改善組成物は、１種単独で使用されてもよいし、２種以上を併用してもよく、他の成分を有効成分とする医薬と併せて使用されてもよい。また、前記糖代謝改善組成物は、他の成分を有効成分とする医薬中に、配合された状態で使用されてもよい。
【００４０】
＜用途＞
前記糖代謝改善組成物の用途としては、例えば、糖尿病の予防乃至治療に好適に利用することができる。また、後述する飲食品にも好適に利用することができる。
【００４１】
（食後血糖値上昇抑制剤、空腹時血糖値低下剤、及び糖取込促進剤）
＜食後血糖値上昇抑制剤＞
本発明の食後血糖値上昇抑制剤は、前述した糖代謝改善剤を含有し、必要に応じて、更にその他の成分を含有する。
前記食後血糖値上昇抑制剤中の、前記糖代謝改善剤の含有量としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。また、前記食後血糖値上昇抑制剤は、前記糖代謝改善剤そのものであってもよい。
【００４２】
前記その他の成分としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、薬理学的に許容される担体の中から前記食後血糖値上昇抑制剤の剤型などに応じて適宜選択することができ、例えば、エタノール、水、デンプンなどが挙げられる。
前記その他の成分の含有量としても、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
【００４３】
＜空腹時血糖値低下剤＞
本発明の空腹時血糖値低下剤は、前述した糖代謝改善剤を含有し、必要に応じて、更にその他の成分を含有する。
前記空腹時血糖値低下剤中の、前記糖代謝改善剤の含有量としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。また、前記空腹時血糖値低下剤は、前記糖代謝改善剤そのものであってもよい。
【００４４】
前記その他の成分としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、薬理学的に許容される担体の中から前記空腹時血糖値低下剤の剤型などに応じて適宜選択することができ、例えば、エタノール、水、デンプンなどが挙げられる。
前記その他の成分の含有量としても、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
【００４５】
＜糖取込促進剤＞
本発明の糖取込促進剤は、前述した糖代謝改善剤を含有し、必要に応じて、更にその他の成分を含有する。
前記糖取込促進剤中の、前記糖代謝改善剤の含有量としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。また、前記糖取込促進剤は、前記糖代謝改善剤そのものであってもよい。
【００４６】
前記その他の成分としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、薬理学的に許容される担体の中から前記糖取込促進剤の剤型などに応じて適宜選択することができ、例えば、エタノール、水、デンプンなどが挙げられる。
前記その他の成分の含有量としても、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
【００４７】
＜使用＞
前記食後血糖値上昇抑制剤、前記空腹時血糖値低下剤、及び前記糖取込促進剤は、１種単独で使用されてもよいし、２種以上を併用してもよく、他の成分を有効成分とする医薬と併せて使用されてもよい。また、前記食後血糖値上昇抑制剤、前記空腹時血糖値低下剤、及び前記糖取込促進剤は、他の成分を有効成分とする医薬中に、配合された状態で使用されてもよい。
【００４８】
＜用途＞
前記食後血糖値上昇抑制剤、前記空腹時血糖値低下剤、及び前記糖取込促進剤の用途としては、例えば、糖尿病の予防乃至治療に好適に利用することができる。また、後述する飲食品にも好適に利用することができる。
【００４９】
（飲食品）
本発明の飲食品は、前記糖代謝改善剤を含有し、必要に応じて、更にその他の成分を含有する。
ここで、前記飲食品とは、人の健康に危害を加えるおそれが少なく、通常の社会生活において、経口又は消化管投与により摂取されるものをいい、行政区分上の食品、医薬品、医薬部外品などの区分に制限されるものではなく、例えば、経口的に摂取される一般食品、健康食品、保健機能食品、医薬部外品、医薬品などを幅広く含むものを意味する。
【００５０】
前記飲食品中の前記糖代謝改善剤の配合量としては、特に制限はなく、本発明の効果を損なわない範囲内で、対象となる飲食品の種類に応じて適宜配合することができる。
前記飲食品は、前記糖代謝改善剤のみを含有するものであってもよく、また、前記飲食品は、前記糖代謝改善剤そのものであってもよい。
【００５１】
＜飲食品の種類＞
前記飲食品の種類としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、清涼飲料、炭酸飲料、栄養飲料、果実飲料、乳酸飲料などの飲料；アイスクリーム、アイスシャーベット、かき氷などの冷菓；そば、うどん、はるさめ、ぎょうざの皮、しゅうまいの皮、中華麺、即席麺などの麺類；飴、キャンディー、ガム、チョコレート、錠菓、スナック菓子、ビスケット、ゼリー、ジャム、クリーム、焼き菓子、パンなどの菓子類；カニ、サケ、アサリ、マグロ、イワシ、エビ、カツオ、サバ、クジラ、カキ、サンマ、イカ、アカガイ、ホタテ、アワビ、ウニ、イクラ、トコブシなどの水産物；かまぼこ、ハム、ソーセージなどの水産・畜産加工食品；加工乳、発酵乳などの乳製品；サラダ油、てんぷら油、マーガリン、マヨネーズ、ショートニング、ホイップクリーム、ドレッシングなどの油脂及び油脂加工食品；ソース、たれなどの調味料；カレー、シチュー、親子丼、お粥、雑炊、中華丼、かつ丼、天丼、うな丼、ハヤシライス、おでん、マーボドーフ、牛丼、ミートソース、玉子スープ、オムライス、餃子、シューマイ、ハンバーグ、ミートボールなどのレトルトパウチ食品；種々の形態の健康食品、栄養補助食品、医薬品、医薬部外品などが挙げられる。
【００５２】
＜その他の成分＞
前記その他の成分としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、飲食品を製造するにあたって通常用いられる、補助的原料又は添加物などが挙げられる。
前記補助的原料又は添加物としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、ブドウ糖、果糖、ショ糖、マルトース、ソルビトール、ステビオサイド、ルブソサイド、コーンシロップ、乳糖、クエン酸、酒石酸、リンゴ酸、コハク酸、乳酸、Ｌ−アスコルビン酸、ｄｌ−α−トコフェロール、エリソルビン酸ナトリウム、グリセリン、プロピレングリコール、グリセリン脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステル、ショ糖脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、アラビアガム、カラギーナン、カゼイン、ゼラチン、ペクチン、寒天、ビタミンＢ類、ニコチン酸アミド、パントテン酸カルシウム、アミノ酸類、カルシウム塩類、色素、香料、保存剤などが挙げられる。
前記その他の成分の含有量としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
【実施例】
【００５３】
以下、実施例を挙げて本発明をより詳細に説明するが、本発明はこれらの実施例に何ら限定されるものではない。
【００５４】
（実施例１：高血糖モデルマウスの血糖値）
＜方法＞
市販高脂肪食（商品名：Ｑｕｉｃｋ Ｆａｔ、日本クレア株式会社製）に対し、下記表１に示す割合でパナキサジオール（ＰＤ）（ＬＫＴラボラトリーズ社製）を配合した餌を用い、自由摂取により、高血糖モデルマウス（ＫＫＡｙマウス（日本クレア株式会社）、８週齢、５匹／群）を５日間飼育した（以下、「ＰＤ配合群」と称することがある。）。コントロールは、パナキサジオール（ＰＤ）無配合の餌を用いた（以下、「ＰＤ無配合群」と称することがある。）。
前記パナキサジオール（ＰＤ）配合高脂肪食による飼育の開始前（初期値）と後（飼育後）とにおいて、それぞれ午前１０時の血糖値を測定した。血糖値の測定はサイクリックＧＢセンサー（三光純薬株式会社製）により行った。各個体の食後血糖値として、２回測定した平均値を下記表１に示す。なお、統計解析はダネットの多重検定により行った。
【００５５】
【表１】
【００５６】
＜結果＞
表１より、ＰＤ無配合群（コントロール）では、初期値と、飼育５日間後とを比較すると、５日間で有意な食後血糖値の上昇が認められた。これに対し、ＰＤを０．０００１質量％配合した投与群では、ＰＤ無配合群（コントロール）に対して１０％未満の危険率で有意に食後血糖値の上昇が抑制されており、ＰＤを０．００１質量％配合した投与群では、ＰＤ無配合群（コントロール）に対して５％未満の危険率で有意に食後血糖値の上昇が抑制されており、０．０１質量％配合した投与群では、ＰＤ無配合群（コントロール）に対して１％未満の危険率で、有意に食後血糖値の上昇が抑制された。
これらの結果より、ＫＫＡｙマウスに対しては、ＰＤを０．０００１質量％以上配合することで、食後血糖値の上昇抑制効果があることが認められた。
【００５７】
（実施例２：ラット骨格筋由来細胞への糖の取込）
＜方法＞
ラット骨格筋由来細胞（Ｌ６細胞、大日本製薬株式会社製）を、１０質量％ＦＢＳ（ｆｅｔａｌ ｂｏｖｉｎｅ ｓｅｒｕｍ、ＧＩＢＣＯ社製）、及び１質量％ＡＢ（ａｎｔｉ−ｂｉｏｔｉｃ ｓｏｌｕｔｉｏｎ、ＳＩＧＭＡ社製）を含むＤＭＥＭ（Ｄｕｌｂｅｃｃｏ’ｓ ｍｏｄｉｆｉｅｄ Ｅａｇｌｅ ｍｅｄｉｕｍ、ＳＩＧＭＡ社製）１５ｍＬに懸濁し、７５ｃｍ２培養フラスコに分注した後、３７℃、５％ＣＯ２環境下で静置培養した。サブコンフルエント（８０％）に達した後、２４ウエルプレート（住友ベークライト株式会社製）に５０，０００細胞／ウエルとなるように播種した。コンフルエントに達してから３日間培養した後、２質量％ＦＢＳ、及び１質量％ＡＢを含むＭＥＭ（ｍｉｎｉｍａｌ ｅｓｓｅｎｔｉａｌ ｍｅｄｉｕｍ、ナカライテスク株式会社製）に交換し、Ｌ６細胞の分化を誘導した。分化誘導８日後、パナキサジオール（ＰＤ）（エタノールに溶解）を１ｐｐｍ又は１０ｐｐｍとなるように添加した。ＰＤ無添加のウエルをコントロールとした。次いで、３０時間後にパナキサジオール（ＰＤ）を１ｐｐｍ又は１０ｐｐｍとなるように添加した２質量％ＢＳＡ（ウシ血清アルブミン、ＳＩＧＭＡ社製）を含むＭＥＭに交換することにより脱感作した。更に１８時間後、前記２質量％ＢＳＡ含有ＭＥＭを除去し、ＫＲＨバッファー（５０ｍＭ ＨＥＰＥＳ（ＳＩＧＭＡ社製）、ｐＨ７．４、１３７ｍＭ塩化ナトリウム（和光純薬工業株式会社製）、４．８ｍＭ塩化カリウム（和光純薬工業株式会社製）、１．８５ｍＭ塩化カルシウム（和光純薬工業株式会社製）、１．３ｍＭ硫酸マグネシウム（和光純薬工業株式会社製））を３０μＬ／ウエル添加した。その後、ＲＩラベルした２−デオキシグルコース（２−ＤＧ、Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｒａｄｉｏｌａｂｅｌｅｄ Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ社製）を６μＬ添加（終濃度６．５ｍＭ（０．５・Ｃｉ））して反応させた。反応開始５分間後に、細胞を氷冷したＫＲＨバッファーで４回洗浄し、Ｌ６細胞内に取り込まれなかった２−ＤＧを除去した。ＫＲＨバッファーを除去した後、０．０５Ｎ水酸化ナトリウム（和光純薬工業株式会社製）２５０μＬで細胞を可溶化し、バイアルに回収した。更にＫＲＨバッファー２００μＬで２回洗浄し、同様にバイアルに回収した。細胞を回収したバイアルに液体シンチレーションカクテルＰｉｃｏｆｌｏｕｒ（株式会社パーキンエルマー製）３ｍＬを添加し、放射活性を液体シンチレーションカウンター（ＬＳＣ−５１００、Ａｌｏｋａ社製）を用いて測定した。
ｎ＝４で評価し、その平均値を求めた。統計解析は全てスチューデントｔ検定で実施し、Ｐ＜０．０５で有意な差とした。無添加の場合の放射活性を１００としたときの比活性を下記表２に示す。
【００５８】
【表２】
【００５９】
＜結果＞
表２より、Ｌ６細胞にＰＤを添加することにより、細胞内部へのグルコースの取込量の増加が認められた。
これらの結果は、本発明のパナキサジオール（ＰＤ）含有糖代謝改善剤が、生体の糖取込の中心臓器である筋肉において、糖取込の促進作用を有することを示唆するものである。
【００６０】
（実施例３：ヒト試験）
＜糖代謝関連指標の測定＞
−方法−
田七人参粉末１０ｇを３０質量％エタノール水溶液１００ｍＬに懸濁後、ジンセノサイド−Ｒｂ１、ジンセノサイド−Ｒｄ、ジンセノサイド−Ｒｃなどのサポニン類を２時間加熱抽出し、得られた抽出物に対し、塩酸共存下で加水分解を行い、アグリコン含有処理物を調製した。このアグリコン含有処理物をシリカゲルカラム（関東化学株式会社製シリカゲル６０Ｎ）を用いて単離を行い、純度９９質量％以上のパナキサジオール（ＰＤ）を調製した。
このように調製したパナキサジオール（ＰＤ）を８ｍｇ含有するカプセルを調製し、８週間継続摂取した場合（以下、「ＰＤ摂取群」と称することがある。）の空腹時血糖値、並びに、所定のメニュー（米飯２００ｇを使用したおにぎり（３５０ｋｃａｌ）などの澱粉食を負荷したメニュー）の食事を摂取した後の食後血糖値の変化を測定した。また血液指標として、血中のＨｂＡ１ｃ値、グリコアルブミン値、１・５ＡＧ、及び空腹時インスリン値を測定した。
血糖値の測定は、簡易型血糖測定機（フリースタイル、ニプロ株式会社製）を用い、空腹時血糖値、及び空腹時インスリン値の測定を午前９時に、食後血糖値の測定を午前９時から午前１１時３０分にかけて所定の澱粉食を摂取した後、３０分間おきに１２０分間後まで測定した。ＨｂＡ１ｃ値、グリコアルブミン値、及び１・５ＡＧは、医療機関の定法に従い午前９時に採取した血液を用いて測定した。
なお、被験者（２４名）は、空腹時血糖値が１２０ｍｇ／ｄＬ〜１４０ｍｇ／ｄＬの者とし、対照としてプラセボ摂取群を置き、２４名を無作為に２群に分け、プラセボ摂取群とＰＤ摂取群とに割付を行った。また、結果についての統計解析は、プラセボ摂取群と、ＰＤ摂取群とを比較したスチューデントｔ検定を行った。また、カプセルを摂取する時間帯は毎日午前１０時とし、食事と同時摂取することのない時間帯で設定した。
図１に空腹時血糖値の測定結果を示す。
図２にプラセボ摂取群の食後血糖値の変化を、図３にＰＤ摂取群の食後血糖値の変化を示す。
プラセボ摂取群の血液指標の測定結果を下記表３に、ＰＤ摂取群の血液指標の測定結果を下記表４に示す。
【００６１】
【表３】
【００６２】
【表４】
【００６３】
−結果−
ヒト試験（実施例３）の結果、ＰＤ摂取群の空腹時血糖値は、プラセボ摂取群と比較して有意に低下していた（図１）。ＰＤ摂取群の食後血糖値は、プラセボ摂取群と比較して摂取３０分間後、６０分間後、１２０分間後で有意に低下し、明らかな糖代謝の改善効果が認められた（図２〜３）。
これらの結果より、パナキサジオール（ＰＤ）を含有する本発明の糖尿病改善用剤は、空腹時血糖値、及び食後血糖値の両方を低下させることが明らかとなった。
また、表３〜４より、血液中の糖代謝に関する指標を確認した結果、ＰＤ摂取群のＨｂＡ１ｃは、プラセボ摂取群と比較して摂取８週間後に有意に低下した。ＰＤ摂取群のグリコアルブミンはプラセボ摂取群と比較して有意に低下していた。また、グリコアルブミンは、ＰＤ摂取群０週目と、８週目との間にも、有意な低下が認められた。ＰＤ摂取群の１・５ＡＧは４週目以降に増加が認められた。ＰＤ摂取群において、空腹時インスリン値には統計的に有意な変化がなかったとこから、パナキサジオール（ＰＤ）の血糖値の上昇抑制作用は、インスリン分泌能の亢進ではなく、インスリン感受性が向上したものと考えられる。
これらの結果より、パナキサジオール（ＰＤ）を含有する本発明の糖尿病改善用剤は、食事と同時摂取する必要がなく、１日１回の摂取で効果があったことから、継続摂取を促す上で意義が高いものと考えられる。
【００６４】
（実施例４：呼吸商の回復効果）
高血糖モデルマウス（ＫＫＡｙマウス（日本クレア株式会社）、オス、４週齢）１２匹を室温２２±１℃、湿度５０±５％、１２時間の明暗サイクルの条件下にて個別ケージで１週間予備飼育した。予備飼育期間中の飼料は、１日当たり、ＣＥ−２（日本クレア社製）をマウス１匹につき８ｇ与え、給水は自由摂取とした。
予備飼育期終了後、体重及び血糖値を測定し、平均的になるように６匹／群の２群に分け、以下の方法により本飼育を行なった。
なお、血糖値の測定は、マウス尾静脈より採血を行い、全血を、サイクリックＧＢセンサー（三光純薬株式会社製）を用いて２回測定した。
【００６５】
−対照群−
市販高脂肪食（商品名：Ｑｕｉｃｋ Ｆａｔ、日本クレア株式会社製）を１日当たりマウス１匹につき８ｇ与え、給水は自由摂取とし、１週間本飼育を行なった。以下、「対照群」と称することがある。
【００６６】
−田七人参処理物投与群−
田七人参粉末１０ｇを３０質量％エタノール水溶液１００ｍＬに懸濁後、サポニン類を２時間加熱抽出し、得られた抽出物に対し、塩酸共存下で加水分解を行い、アグリコン含有処理物を調製した。
得られたアグリコン含有処理物を約０．１ｇ精密に量り、エタノール（純度９９．５質量％）約８ｍＬを加え、超音波槽を用いて１５分間懸濁した。約７００×ｇで１０分間遠心した後、上清にエタノール（純度９９．５質量％）を加えて正確に１０ｍＬとした。この液を、下記の条件でガスクロマトグラフィーにより測定したところ、パナキサジオール（ＰＤ）の含有量は３．５質量％であった。なお、下記条件におけるパナキサジオール（ＰＤ）の保持時間は約１８分間であった。
［分析条件］
ガスクロマトグラフ： ＧＬサイエンス社製 ＧＣ３５３Ｂ
検出器： 水素炎イオン化検出器（ＦＩＤ）
注入法： スプリット注入法（スプリット比 １：５０）
カラム： Ｊ＆Ｗ社製 ＤＢ−１７ＭＳ（長さ３０ｍ、内径０．２５ｍｍ、膜厚０．２５μｍ）
カラム温度： 初期温度：３１０℃
初期温度保持時間：２０分間
昇温速度：１０℃／分間
到達温度：３２０℃
到達温度保持時間：１４分間
キャリヤーガス： ヘリウム
流量： １．５ｍＬ／分間
注入口温度： ３２０℃
検出器温度： ３２０℃
注入量： １μＬ
【００６７】
市販高脂肪食（商品名：Ｑｕｉｃｋ Ｆａｔ、日本クレア株式会社製）に１質量％の前記アグリコン含有処理物を配合した飼料（アグリコン含有量０．１質量％）を１日当たりマウス１匹につき８ｇ（ＰＤ：約２．８ｍｇ／日）与え、給水は自由摂取とし、１週間本飼育を行なった。以下、「田七人参処理物投与群」と称することがある。
【００６８】
本飼育を１週間行なった後、２４時間呼気ガス測定を行なった。即ち、マウスを呼気ガス分析チャンバー（１５０ｍｍ×１５０ｍｍ×１５０ｍｍ、室町機械株式会社製）内で飼育し、酸素消費量、二酸化炭素排出量、及び呼吸商（ＲＱ）を小動物用代謝計測システム ＭＫ−５０００ＲＱ（室町機械株式会社製）にて連続的に測定した。測定中は、飼育期間中と同様に、対照群には市販高脂肪食を１日当たりマウス１匹につき８ｇ与え、田七人参処理物投与群には市販高脂肪食に１質量％の前記アグリコン含有処理物を配合した飼料を１日当たりマウス１匹につき８ｇ与えた。給水は共に自由摂取とした。
なお、呼吸商（ＲＱ）は、次式により算出される。
呼吸商（ＲＱ）＝単位時間当たりの二酸化炭素排出量／単位時間当たりの酸素排出量
ここで、糖質はＲＱ＝１．０であり、脂質はＲＱ＝０．７である。したがって、呼吸商の値により、糖及び脂質のどちらがどれだけ利用されているのかを求めることができる。
【００６９】
図４に呼吸商の測定結果を示す。この結果より、田七人参処理物投与群ではＲＱ値の上昇が認められた。即ち、パナキサジオール（ＰＤ）を含む田七人参処理物を摂取することにより、糖質消費能の改善効果が確認できた。
糖質の消費割合を次式で算出したところ、対照群では５０．７％であったが、田七人参処理物投与群では６０．８％まで上昇し、糖質の消費割合が亢進していた。
呼吸商（ＲＱ）＝１．０×（ｘ／１００）＋０．７×（１−ｘ／１００）
上記式において、「ｘ」は、糖質消費割合（％）を表す。
【００７０】
（実施例５：食事由来の糖に対する糖代謝促進効果）
高血糖モデルマウス（ＫＫＡｙマウス（日本クレア株式会社）、オス、４週齢）１６匹を実施例４と同様の方法で１週間予備飼育した。
予備飼育期終了後、体重及び血糖値を測定し、平均的になるように８匹／群の２群に分け、以下の方法により本飼育を行なった。なお、血糖値の測定は、マウス尾静脈より採血を行い、全血を、サイクリックＧＢセンサー（三光純薬株式会社製）を用いて測定した。
【００７１】
−対照群−
市販高脂肪食（商品名：Ｑｕｉｃｋ Ｆａｔ、日本クレア株式会社製）を１日当たりマウス１匹につき８ｇ与え、給水は自由摂取とし、１週間本飼育を行なった。以下、「対照群」と称することがある。
【００７２】
−ＰＤ投与群−
市販高脂肪食（商品名：Ｑｕｉｃｋ Ｆａｔ、日本クレア株式会社製）に０．１質量％のパナキサジオール（ＰＤ）（ＬＫＴラボラトリーズ社製）を配合した飼料を１日当たりマウス１匹につき８ｇ与え、給水は自由摂取とし、１週間本飼育を行なった。以下、「ＰＤ投与群」と称することがある。
【００７３】
本飼育を１週間行なった後、血糖値及び体重測定を行い、１３ＣＯ２排出量測定に供した。対照群の血糖値は３３５．４ｍｇ／ｄＬ、ＰＤ投与群の血糖値は２３１．６ｍｇ／ｄＬであった。
【００７４】
＜１３ＣＯ２排出量の測定＞
マウスを呼気ガス分析チャンバー（ＡＲＣＯ−２０００−ＩＳＯ Ｓｙｓｔｅｍ、ＡＲＣＯ ＳＹＳＴＥＭ社製）に移し、２時間の馴化を行った。その後、［２．０ｇ Ｄ−ｇｌｕｃｏｓｅ（ナカライテクス株式会社製）＋７２ｍｇ Ｄ−ｇｌｕｃｏｓｅ−Ｕ−１３Ｃ６（９９％）（Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ Ｉｓｏｔｏｐｅ Ｌａｂ．社製）／ｋｇ−体重］から算出される濃度で、ｇｌｕｃｏｓｅ及びｇｌｕｃｏｓｅ−Ｕ−１３Ｃ６の水溶液をマウスに経口投与し、４時間に渡って累積１３ＣＯ２排出量を測定した。累積１３ＣＯ２排出量は、ＡＵＣ（１３ＣＯ２排出量上昇値）で示した。ＡＵＣ（１３ＣＯ２排出量上昇値）とは、ｇｌｕｃｏｓｅ−Ｕ−１３Ｃ６投与後の排出量変化を時間に対してプロットしたグラフにおいて、ｇｌｕｃｏｓｅ−Ｕ−１３Ｃ６投与前の排出量をベースラインとしてｇｌｕｃｏｓｅ−Ｕ−１３Ｃ６投与４時間後までの増加部分の面積を表わす。
【００７５】
図５Ａに１３ＣＯ２排出量の経時変化を、図５Ｂに累積１３ＣＯ２排出量の結果を示す。これらの結果より、ＰＤ投与群において、１３ＣＯ２排出量の有意な上昇が確認された（統計解析はスチューデントｔ検定で実施し、Ｐ＜０．０５で有意な差とした。）。即ち、食事より摂取した糖の代謝を促進することがわかった。
【産業上の利用可能性】
【００７６】
本発明のパナキサジオール（ＰＤ）からなる糖代謝改善剤及び前記糖代謝改善剤を含有する糖代謝改善組成物は、優れた筋肉細胞への糖の取込促進作用、食後血糖値の上昇抑制作用、空腹時血糖値の低下作用、糖代謝関連指標の調節作用、及び食事由来の糖代謝促進作用を有することから、食後血糖値上昇抑制剤、空腹時血糖値低下剤、及び糖取込促進剤として好適に利用でき、糖尿病の予防乃至治療に有効である。
更に、前記糖代謝改善剤は、安全性が高いため、飲食品に好適に利用可能である。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記構造式（１）で表される化合物からなる糖代謝改善剤を含有することを特徴とする糖代謝改善組成物。
【化１】
【請求項２】
食後血糖値の上昇抑制作用を有する請求項１に記載の糖代謝改善組成物。
【請求項３】
空腹時血糖値の低下作用、及び血清中の糖代謝関連指標の調節作用の少なくともいずれかを有する請求項１から２のいずれかに記載の糖代謝改善組成物。
【請求項４】
食事由来の糖の代謝促進作用を有する請求項１から３のいずれかに記載の糖代謝改善組成物。
【請求項５】
食事と同時摂取することなく糖代謝改善作用が発揮される請求項１から４のいずれかに記載の糖代謝改善組成物。
【請求項６】
１日あたりの摂取量が少なくとも１ｍｇである請求項１から５のいずれかに記載の糖代謝改善組成物。
【請求項１】
下記構造式（１）で表される化合物からなる糖代謝改善剤を含有することを特徴とする糖代謝改善組成物。
【化１】
【請求項２】
食後血糖値の上昇抑制作用を有する請求項１に記載の糖代謝改善組成物。
【請求項３】
空腹時血糖値の低下作用、及び血清中の糖代謝関連指標の調節作用の少なくともいずれかを有する請求項１から２のいずれかに記載の糖代謝改善組成物。
【請求項４】
食事由来の糖の代謝促進作用を有する請求項１から３のいずれかに記載の糖代謝改善組成物。
【請求項５】
食事と同時摂取することなく糖代謝改善作用が発揮される請求項１から４のいずれかに記載の糖代謝改善組成物。
【請求項６】
１日あたりの摂取量が少なくとも１ｍｇである請求項１から５のいずれかに記載の糖代謝改善組成物。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５Ａ】
【図５Ｂ】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５Ａ】
【図５Ｂ】
【公開番号】特開２０１１−２５６１８８（Ｐ２０１１−２５６１８８Ａ）
【公開日】平成２３年１２月２２日（２０１１．１２．２２）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１１−１６８２２７（Ｐ２０１１−１６８２２７）
【出願日】平成２３年８月１日（２０１１．８．１）
【分割の表示】特願２０１０−１４９５３１（Ｐ２０１０−１４９５３１）の分割
【原出願日】平成２２年６月３０日（２０１０．６．３０）
【出願人】（０００００６７６９）ライオン株式会社 (1,816)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２３年１２月２２日（２０１１．１２．２２）
【国際特許分類】
【出願日】平成２３年８月１日（２０１１．８．１）
【分割の表示】特願２０１０−１４９５３１（Ｐ２０１０−１４９５３１）の分割
【原出願日】平成２２年６月３０日（２０１０．６．３０）
【出願人】（０００００６７６９）ライオン株式会社 (1,816)
【Ｆターム（参考）】
[ Back to top ]