腎損傷および腎不全の診断および予後診断のための方法ならびに組成物
本発明は、腎損傷を患うまたは有する疑いのある対象における監視、診断、予後診断、および治療計画の決定のための方法および組成物に関する。具体的には、本発明は、腎損傷の診断および予後診断のバイオマーカーとしてβ２糖タンパク質１を検出するアッセイを用いることに関する。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、２００９年８月７日に出願した米国特許仮出願第６１／２３２，２９３号の優先権を主張し、これは、全ての表、図、および特許請求の範囲を含めて、その全体が本明細書に組込まれる。
【背景技術】
【０００２】
本発明の背景について以下に論じることは、読者が本発明を理解することを助けるために提供されるにすぎず、本発明の先行技術について記載または構成することを認めるものではない。
【０００３】
腎臓は、体内からの水および溶質の排出に関与する。その機能には、酸と塩基のバランスの維持、電解質濃度の調節、血液量の制御、および血圧の調節が含まれる。そのようなことから、損傷および／または疾患による腎機能の喪失は、相当な罹患率および死亡率をもたらす。Ｈａｒｒｉｓｏｎ’ｓ
Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ｏｆ Ｉｎｔｅｒｎａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ,１７ｔｈ Ｅｄ.,ＭｃＧｒａｗ Ｈｉｌｌ,Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ,ｐａｇｅｓ １７４１−１８３０（これは、参照により、その全体が本明細書に組込まれる）の中で、腎損傷について詳細に論じられている。腎臓の疾患および／または損傷は、急性的または慢性的であり得る。急性および慢性の腎臓疾患については、以下のように記載されている（Ｃｕｒｒｅｎｔ
Ｍｅｄｉｃａｌ Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ＆Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ２００８,４７ｔｈ Ｅｄ,ＭｃＧｒａｗ Ｈｉｌｌ,Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ,ｐａｇｅｓ ７８５−８１５、これらは、参照によりその全体が本明細書に組込まれる）。「急性腎不全は、数時間から数日にわたる、腎機能の悪化であり、血液中に（尿素窒素などの）窒素性廃棄物およびクレアチニンの滞留をもたらす。これらの物質の滞留は、高窒素血症と呼ばれる。慢性腎不全（慢性腎臓疾患）は、数か月から数年にわたる異常な腎機能の喪失に起因する。」
【０００４】
急性腎不全（急性腎損傷とも知られるＡＲＦ、またはＡＫＩ）は、糸球体濾過の突然の（典型的には、約４８時間から１週間以内に検出される）低下である。この濾過能力の低下は、通常、腎臓によって排出される窒素（尿素およびクレアチニン）廃棄物ならびに無窒素廃棄物の滞留、尿排出量の減少、またはその両方をもたらす。ＡＲＦは、入院の約５％、心肺バイパス手術の４〜１５％、および集中治療入院の３０％以下にあたると報告されている。ＡＲＦは、因果関係において腎前性、腎内性、または腎後性として分類され得る。内因性腎疾患を、糸球体異常、尿細管異常、間質異常、および血管異常にさらに分けることができる。ＡＲＦの主な原因を以下の表に記載するが、この出典はＭｅｒｃｋ
Ｍａｎｕａｌ,１７ｔｈ ｅｄ.,Ｃｈａｐｔｅｒ
２２２である（これは、参照によりその全体が本明細書に組込まれる）。
【０００５】
【表１】
【０００６】
虚血性ＡＲＦの場合、疾患過程は、４段階に分けられ得る。数時間から数日続く初期の段階の期間に、腎臓の灌流の低下は損傷へ進行する。糸球体限外濾過が低下し、尿細管内の残骸により濾液の流れが低下し、かつ傷ついた上皮を通過する濾液の背部漏れが起こる。腎損傷は、この段階の期間に、腎臓の再灌流によって媒介され得る。開始に続いて、拡大の段階があり、これは、虚血性損傷および炎症の継続によって特徴づけられ、内皮障害および血管の鬱血を伴う可能性がある。維持段階の期間が１〜２週間続き、腎細胞損傷が生じ、糸球体濾過および尿排出量が最小限になる。腎上皮が修復され、ＧＦＲが徐々に回復する回復段階が続き得る。これにもかかわらず、ＡＲＦを患う対象の生存率は、約６０％と同じくらい低くなり得る。
【０００７】
（造影剤（ｃｏｎｔｒａｓｔ ｍｅｄｉａ）とも呼ばれる）放射線造影剤（ｒａｄｉｏｃｏｎｔｒａｓｔ ａｇｅｎｔ）およびシクロスポリン、アミノグリコシドを含む抗生物質およびシスプラチンなどの抗癌剤などの他の腎毒素によって引き起こされる急性腎損傷は、数日から約１週間の期間にわたって現れる。造影剤腎症（放射線造影剤によって引き起こされるＡＫＩであるＣＩＮ）は、（虚血性損傷につながる）腎内の血管収縮によって、かつ尿細管上皮細胞に対して直接的な毒性を有する反応性酸素種の発生から引き起こされると考えられている。ＣＩＮは、これまでに、血中尿素窒素および血清クレアチニンの急性（２４〜４８時間以内の発症）であるが可逆（ピークは３〜５日、回復は１週間以内）の増加として、症状が見つかっている。
【０００８】
ＡＫＩを定義および検出するための一般に報告される判定基準は、血清クレアチニンの突然の（典型的には、約２〜７日以内または入院期間内の）上昇である。ＡＫＩを定義および検出するために血清クレアチニン上昇を用いることは定評があるが、血清クレアチニン上昇の規模および血清クレアチニンを測定し、ＡＫＩを定義するのにかかる時間は、刊行物間でかなり異なる。伝統的に、１００％、２００％などの血清クレアチニンの比較的大幅な増加、少なくとも１００％から２ｍｇ／ｄＬをこえる値の増加、および他の定義を用いてＡＫＩを定義する。しかし、最近の傾向は、より少ない血清クレアチニン上昇を用いてＡＫＩを定義する方向に向かっている。血清クレアチニン上昇とＡＫＩとの関係および関連する健康上のリスクは、Ｐｒａｕｇｈｔ
ａｎｄ Ｓｈｌｉｐａｋ,Ｃｕｒｒ Ｏｐｉｎ Ｎｅｐｈｒｏｌ Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓ １４：２６５−２７０,２００５およびＣｈｅｒｔｏｗ ｅｔ ａｌ,Ｊ Ａｍ Ｓｏｃ Ｎｅｐｈｒｏｌ
１６：３３６５−３３７０,２００５に概説されており、その中でまとめられている参考文献と共に、これらは、参照によりその全体が本明細書に組込まれる。これらの刊行物中に記載されているように、腎機能の急速な悪化（ＡＫＩ）およびの死亡リスクの増加ならびに他の有害な結果は、血清クレアチニンの微増と関連することが今や知られている。これらの増加は、相対（パーセント）値または名目上の値として決定され得る。損傷前の値の２０％ほどの少ない血清クレアチニンの相対的増加は、腎機能の急速な悪化（ＡＫＩ）および健康上のリスクの増加を示すことが報告されたが、ＡＫＩおよび健康上のリスクの増加を定義するための、より一般な報告値は、少なくとも２５％の相対的増加である。０．３ｍｇ／ｄＬ、０．２ｍｇ／ｄＬまたはさらに０．１ｍｇ／ｄＬほどの少ない名目上の増加は、腎機能の悪化および死亡リスクの増加を示すことが報告された。血清クレアチニンをこれらの閾値まで上昇させるために、例えば、２日、３日、７日、または患者が病院または集中治療室にいる時間として定義される可変期間におよぶ様々な期間を用いて、ＡＫＩを定義してきた。これらの研究は、腎機能の悪化またはＡＫＩに対して血清クレアチニン上昇の特定の閾値（または上昇の期間）はなく、むしろ血清クレアチニンの上昇の規模の増加と共にリスクの連続的な増加があることを示している。
【０００９】
１つの研究（Ｌａｓｓｎｉｇｇ ｅｔ ａｌｌ,Ｊ Ａｍ Ｓｏｃ Ｎｅｐｈｒｏｌ
１５：１５９７−１６０５,２００４、参照によりその全体が本明細書に組込まれる）は、血清クレアチニンの増加および減少の両方を調べた。心臓手術後、血清クレアチニンが−０．１〜−０．３ｍｇ／ｄＬに少し低下した患者は、死亡率が最も低かった。血清クレアチニンがより大きく低下した（−０．４ｍｇ／ｄＬ以上）または血清クレアチニンが増加した患者は、死亡率が高かった。これらの研究結果から、（手術後４８時間以内のわずかなクレアチニン変化によって検出されるような）腎機能の非常にわずかな変化が、患者の予後に深刻な影響をもたらすと結論づけられる。臨床試験および診療において血清クレアチニンを用いてＡＫＩを定義するための統一された分類システムのコンセンサスを得るために、Ｂｅｌｌｏｍｏ
ｅｔ ａｌ.,Ｃｒｉｔ Ｃａｒｅ.８（４）：Ｒ２０４−１２,２００４（これは、参照によりその全体が本明細書に組込まれる）は、ＡＫＩ患者を層別化するための以下の分類を提議している：
「リスク」：ベースラインから１．５倍の血清クレアチニンの増加、または６時間の間の、０．５ｍｌ／体重ｋｇ／時間より少ない尿の産生；
「損傷」：ベースラインから２．０倍の血清クレアチニンの増加、または１２時間の間の、０．５ｍｌ／体重ｋｇ／時間より少ない尿の産生；
「不全」：ベースラインから３．０倍の血清クレアチニンの増加もしくは３５５μｍｏｌ／ｌを超えるクレアチニン（４４を超える上昇）、または２４時間の間の、０．３ｍｌ／ｋｇ／ｈｒを下回る尿排出量または少なくとも１２時間の間、無尿；
かつ２つの臨床予後を含む：
「喪失」：４週間を超える腎置換療法の永続的な必要性：
「ＥＳＲＤ」：末期の腎疾患−３ヶ月を超える透析の必要性：
これらの判定基準は、ＲＩＦＬＥ判定基準と呼ばれ、腎臓の状態を分類するための有用な臨床的手段を提供する。Ｋｅｌｌｕｍ,Ｃｒｉｔ.Ｃａｒｅ Ｍｅｄ.３６：Ｓ１４１−４５,２００８およびＲｉｃｃｉ ｅｔ ａｌ.,Ｋｉｄｎｅｙ Ｉｎｔ.７３,５３８−５４６,２００８（これらの各々は、参照によりその全体が本明細書に組込まれる）において論じられるように、ＲＩＦＬＥ判定基準は、多数の研究において実証されたＡＫＩの一定の定義を提供する。
【００１０】
さらに最近、Ｍｅｈｔａ ｅｔ ａｌ.,Ｃｒｉｔ.Ｃａｒｅ １１：Ｒ３１（ｄｏｉ：１０．１１８６.ｃｃ５７１３）,２００７（これは、参照によりその全体が本明細書に組込まれる）が、ＲＩＦＬＥから変更された、ＡＫＩ患者を層別化するための以下の類似の分類を提議している。
「ステージＩ」：０．３ｍｇ／ｄＬ以上（≧２６．４μｍｏｌ／Ｌ以上）の血清クレアチニンの増加もしくはベースラインから１５０％（１．５倍）以上の増加、または６時間以上の間の、１時間あたり０．５ｍＬ／ｋｇより少ない尿排出量；
「ステージＩＩ」：ベースラインから２００％（２倍）を超える血清クレアチニンの増加、または１２時間以上の間の、１時間あたり０．５ｍＬ／ｋｇより少ない尿排出量；
「ステージＩＩＩ」：ベースラインから３００％（３倍）を超える血清クレアチニンの増加、または少なくとも４４μｍｏｌ／Ｌの急激な増加を伴う３５４μｍｏｌ／Ｌ以上の血清クレアチニン、または２４時間の間の、１時間あたり０．３ｍＬ／ｋｇより少ない尿排出量、もしくは１２時間の間、無尿。
【００１１】
ＣＩＮ Ｃｏｎｓｅｎｓｕｓ Ｗｏｒｋｉｎｇ Ｐａｎｅｌ（ＭｃＣｏｌｌｏｕｇｈ ｅｔ ａｌ,Ｒｅｖ Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ Ｍｅｄ．２００６；７（４）：１７７−１９７、これは、参照によりその全体が本明細書に組込まれる）は、血清クレアチニンの２５％の上昇を用いて、（ＡＫＩ型である）造影剤腎症を定義する。様々なグループが、血清クレアチニンを用いてＡＫＩを検出するためにわずかに異なる判定基準を定義しているが、０．３ｍｇ／ｄＬまたは２５％などの血清クレアチニンのわずかな変化は、ＡＫＩ（腎機能の悪化）を検出するのに十分であり、血清クレアチニン変化の規模は、ＡＫＩの重症度および死亡リスクの指標であるということがコンセンサスである。
【００１２】
数日の期間にわたる血清クレアチニンの連続的測定は、ＡＫＩを検出および診断する一般に認められる方法であり、かつＡＫＩ患者を評価する最も重要な手段の１つであると考えられているが、一般に、血清クレアチニンは、ＡＫＩ患者の診断、評価および監視においていくつかの制限があると考えられている。血清クレアチニンが、ＡＫＩの診断に用いられると考えられている値（例えば、０．３ｍｇ／ｄＬまたは２５％の上昇）まで上昇する期間は、用いられる定義に応じて４８時間以上になり得る。ＡＫＩにおける細胞損傷は数時間にわたって起こり得るので、４８時間以上の時点で検出される血清クレアチニン上昇は、損傷の後期の指標になり得、したがって、血清クレアチニンを信頼することはＡＫＩの診断を遅らせ得る。さらに、血清クレアチニンは、腎臓機能が急速に変化しているＡＫＩの最も急性な段階の期間には、腎臓の正確な状態および治療の必要性についての優れた指標にならない。ＡＫＩを患う一部の患者は完全に回復し、一部は透析を（短期または長期のいずれか一方で）必要とし、一部は、死、心臓の主要有害事象および慢性腎疾患を含む他の有害な結果を有するであろう。血清クレアチニンは濾過率のマーカーであるので、ＡＫＩの原因（腎前性、腎内性、腎後性の閉塞、アンテローム閉塞など）または（例えば、起源が、尿細管、糸球体または間質内である）腎内性の疾患の分類もしくは損傷部位を区別しない。尿排出量は同様に限界がある。これらのことを知ることは、ＡＫＩを患う患者を管理および治療することにおいて極めて重要なことであり得る。
【００１３】
これらの制限は、特に、初期および無症状のステージにおいて、しかしまた、腎臓の回復および修復が起きる可能性のあるより後期のステージにおいて、ＡＫＩを検出および評価するためのより良い方法の必要性を強調する。さらに、ＡＫＩを患うリスクのある患者のより優れた同定の必要性がある。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１４】
本発明の目的は、対象の腎機能を評価するための方法および組成物を提供することにある。本明細書記載のβ２糖タンパク質１（ヒト前駆体Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔ
Ｐ０２７４９、アポリポタンパク質としても知られている）の測定を、腎機能への損傷、腎機能の低下、および／または（急性腎臓損傷とも呼ばれる）急性腎不全を患う対象もしくはそれらを患うリスクのある対象において、診断、予後診断、リスク層化、病期分類、監視、分類ならびにさらなる診断および治療計画の決定のために用いることができる。
【課題を解決するための手段】
【００１５】
このバイオマーカーを、リスク層化のために（すなわち、腎機能の将来的な損傷、腎機能の低下への将来的な進行、ＡＲＦへの将来的な進行、腎機能の将来的な改善などのリスクのある対象を同定するために）；現在の疾患の診断のために（すなわち、腎機能への損傷を患っている対象、腎機能への低下へと進行している対象、ＡＲＦへと進行している対象などを同定するために）；腎機能の悪化または改善についての監視のために；かつ腎機能の改善もしくは悪化、死亡率の減少もしくは増加、対象が腎置換療法（すなわち、血液透析、腹膜透析、血液濾過、および／または腎移植）を必要とするであろうリスクの減少もしくは増加、対象が腎機能への損傷から回復するであろうリスクの減少もしくは増加、対象がＡＲＦから回復するであろうリスクの減少もしくは増加、対象が末期の腎疾患へと進行するであろうリスクの減少もしくは増加、対象が慢性腎疾患へと進行するであろうリスクの減少もしくは増加、対象が移植された腎臓の拒絶反応を患うであろうリスクの減少もしくは増加などの将来的な医学的予後を予測するために使用してもよい。
【発明の効果】
【００１６】
第一の態様において、本発明は、対象において腎臓の状態を評価する方法に関する。これらの方法は、対象から得られた体液試料において、β２糖タンパク質１を検出するように構成されたアッセイ法を実行することを含む。その後、このアッセイ結果、例えば、β２糖タンパク質１の測定濃度は、対象の腎臓の状態と相関する。この腎臓の状態との相関は、このアッセイ結果を、本明細書記載の対象のリスク層化、診断、予後診断、病期分類、分類および監視のうちの１つ以上と相関させることを含んでもよい。したがって、本発明は、腎損傷の評価のためにβ２糖タンパク質１を利用する。
【００１７】
特定の実施形態において、本明細書記載の腎臓の状態を評価する方法は、対象のリスク層化、すなわち、腎臓の状態における１つ以上の将来的な変化の可能性を対象に割り当てる方法である。これらの実施形態において、このアッセイ結果は、１つ以上の将来的なそのような変化と相関する。以下のものは、好ましいリスク層化の実施形態である。
【００１８】
リスク層化の好ましい実施形態において、これらの方法は、腎機能への将来的な損傷について対象のリスクを決定することを含み、このアッセイ結果、例えば、β２糖タンパク質１の測定濃度は、腎機能への将来的なかかる損傷の可能性と相関する。例えば、この測定濃度を閾値と比較してもよく、測定濃度が閾値より低い時に割り当てられる可能性に対して、測定濃度が閾値を超えた時に、腎機能への将来的な損傷を患う可能性の増加を対象に割り当てる。
【００１９】
リスク層化の他の好ましい実施形態において、これらの方法は、腎機能の将来的な低下について対象のリスクを決定することを含み、このアッセイの結果、例えば、β２糖タンパク質１の測定濃度は、腎機能のかかる低下の可能性と相関する。例えば、この測定濃度を閾値と比較してもよく、測定濃度が閾値より低い時に割り当てられる可能性に対して、測定濃度が閾値を超えた時に、腎機能の将来的な低下の可能性の増加をその対象に割り当てる。
【００２０】
リスク層化の他のさらに好ましい実施形態において、これらの方法は、腎機能の将来的な改善についての対象の可能性を決定することを含み、このアッセイの結果、例えば、β２糖タンパク質１の測定濃度は、腎機能のかかる将来的な改善の可能性と相関する。例えば、この測定濃度を閾値と比較してもよく、測定濃度が閾値を超える時に割り当てられる可能性に対して、測定濃度が閾値より低い時に、腎機能の将来的な改善の可能性の増加をその対象に割り当てる。
【００２１】
リスク層化の他のさらに好ましい実施形態において、これらの方法は、ＡＲＦへの進行についての対象のリスクを決定することを含み、このアッセイの結果、例えば、β２糖タンパク質１の測定濃度は、ＡＲＦへのかかる進行の可能性と相関する。例えば、この測定濃度を閾値と比較してもよく、測定濃度が閾値より低い時に割り当てられる可能性に対して、測定濃度が閾値を超える時に、ＡＲＦへの進行の可能性の増加をその対象に割り当てる。
【００２２】
リスク層化の他の好ましい実施形態において、これらの方法は、対象の予後のリスクを決定することを含み、このアッセイの結果、例えば、β２糖タンパク質１の測定濃度は、その対象が患う腎損傷に関連する臨床予後の発生の可能性と相関する。例えば、この測定濃度を閾値と比較してもよく、この測定濃度が閾値より低い時に割り当てられる可能性に対して、測定濃度が閾値を超える時に、急性腎臓損傷、ＡＫＩの悪化するステージへの進行、死亡、腎置換療法の必要性、腎毒素の退薬の必要性、末期の腎疾患、心不全、脳卒中、心筋梗塞、慢性腎臓疾患への進行などのうちの１つ以上になる可能性の増加をその対象に割り当てる。
【００２３】
かかるリスク層化の実施形態において、体液試料を対象から得る時から約１８０日以内に、多少とも、所望の事象が生じる可能性があると割り当てられる可能性またはリスクが好ましい。特に好ましい実施形態において、この割り当てられる可能性またはリスクは、１８カ月、１２０日、９０日、６０日、４５日、３０日、２１日、１４日、７日、５日、９６時間、７２時間、４８時間、３６時間、２４時間、１２時間以内などのより短い期間内で生じる所望の事象に関連する。体液試料を対象から得る時の０時間におけるリスクは、現状の診断に等しい。
【００２４】
リスク層化の好ましい実施形態において、対象において腎前性、腎内性、または腎後性のＡＲＦに対する１つ以上の既知のリスクファクターが以前から存在することに基づいて、リスク層化について、対象を選択する。例えば、大規模な血管手術、冠動脈バイパス、または他の心臓手術を経験するもしくは経験した対象；以前から存在する鬱血性心不全、子癇前症、子癇、真性糖尿病、高血圧、冠動脈疾患、タンパク尿、腎不全、正常範囲を下回る糸球体濾過、肝硬変、正常範囲を上回る血清クレアチニン、もしくは敗血症を患っている対象；またはＮＳＡＩＤ、シクロスポリン、タクロリムス、アミノグリコシド、フォスカネット、エチレングリコール、ヘモグロビン、ミオグロビン、イホスファミド、重金属、メトトレキサート、放射線造影剤、もしくはストレプトゾトシンに曝露された対象が、本明細書記載の方法に従ってリスクを監視するのに好ましい全ての対象である。このリストは、限定するようには意図しない。この文脈の「以前から存在する」とは、体液試料を対象から得る時に、リスクファクターが存在することを意味する。特に好ましい実施形態において、腎機能への損傷、腎機能の低下、またはＡＲＦの現行の診断に基づくリスク層化について、対象を選択する。
【００２５】
当業者は様々な方法を用いて、これらの方法に使用するための所望の閾値に達することができる。例えば、この域値を、かかる健常対象において測定されるβ２糖タンパク質１の７５％、８５％、９０％、９５％、または９９％を表す濃度を選択することにより、健常対象の集団から決定してもよい。あるいは、この域値を、腎機能への損傷または腎機能の低下を患っているが、ＡＲＦ（または死、透析、腎移植などのいくつかの他の臨床予後）へは進行していない対象の集団から、かかる対象において測定されるβ２糖タンパク質１の７５％、８５％、９０％、９５％、または９９％を表す濃度を選択することにより決定してもよい。別の代替手段において、この域値を、同じ対象のβ２糖タンパク質１を事前に測定することにより決定してもよい。すなわち、その対象におけるβ２糖タンパク質１のレベルの一時的変化を用いて、その対象にリスクを割り当てることができる。すなわち、時間とともにβ２糖タンパク質１の濃度が増加することを用いて、この濃度が安定であるか、または減少している時に割り当てられるリスクと比較して、腎損傷のリスクが増加しているか、または現在患っている腎損傷が進行している対象を同定することができる。
【００２６】
特定の試験の２つの集団を区別する能力を、ＲＯＣ解析を用いて確立することができる。例えば、腎臓の状態における１つ以上の将来的な変化を受けやすい「第一の」亜集団からＲＯＣ曲線を作成し、そのような変化を受けにくい「第二の」亜集団を用いて、ＲＯＣ曲線を作成することができ、この曲線下の面積は試験の質の尺度を提供する。本明細書記載の試験は、好ましくは０．５を超える、好ましくは少なくとも０．６を超える、より好ましくは０．７を超える、さらに好ましくは少なくとも０．８を超える、よりさらに好ましくは少なくとも０．９を超える、最も好ましくは少なくとも０．９５を超えるＲＯＣ曲線面積を提供する。
【００２７】
特定の態様において、β２糖タンパク質１の測定濃度を連続的変数として処理する。例えば、任意の特定の濃度を、対象の腎機能の将来的な低下の可能性に変換することができる。さらに別の代替手段において、閾値は、腎臓の状態における１つ以上の将来的な変化を受けやすい「第一の」亜集団、およびそのような影響を受けない「第二の」亜集団に対象の集団を分離することにおける許容レベルの特異度および感度を提供することができる。試験精度の以下の尺度のうちの１つ以上により、閾値を選択して、この第一および第二の集団を分離する：
１を超える、好ましくは少なくとも約２以上もしくは約０．５以下、より好ましくは少なくとも約３以上もしくは約０．３３以下、さらにより好ましくは少なくとも約４以上もしくは約０．２５以下、さらにより好ましくは少なくとも約５以上もしくは約０．２以下、最も好ましくは少なくとも約１０以上もしくは０．１以下のオッズ比；
０．５を超える、好ましくは少なくとも約０．６、より好ましくは少なくとも約０．７、さらにより好ましくは少なくとも約０．８、さらにより好ましくは少なくとも約０．９、最も好ましくは少なくとも約０．９５の特異度、および０．２を超える、好ましくは約０．３を超える、より好ましくは約０．４を超える、さらにより好ましくは少なくとも約０．５を超える、さらにより好ましくは約０．６を超える、さらにより好ましくは約０．７を超える、さらにより好ましくは約０．８を超える、より好ましくは約０．９を超える、最も好ましくは約０．９５を超える対応する感度；
０．５を超える、好ましくは少なくとも約０．６、より好ましくは少なくとも約０．７、さらにより好ましくは少なくとも約０．８、さらにより好ましくは少なくとも約０．９、最も好ましくは少なくとも約０．９５の感度、および０．２を超える、好ましくは約０．３を超える、より好ましくは約０．４を超える、さらにより好ましくは少なくとも約０．５を超える、さらにより好ましくは約０．６を超える、さらにより好ましくは約０．７を超える、さらにより好ましくは約０．８を超える、より好ましくは約０．９を超える、最も好ましくは約０．９５を超える対応する特異度；
少なくとも約７５％の感度および少なくとも約７５％の特異度；
１を超える、少なくとも約２、より好ましくは少なくとも約３、さらにより好ましくは少なくとも約５、最も好ましくは少なくとも約１０の（感度／（１−特異度）として計算される）陽性尤度比；または
１より低い、約０．５以下、より好ましくは約０．３以下、最も好ましくは約０．１以下の（（１−感度）／特異度として計算される）陰性尤度比。
上記の尺度のいずれかの文脈における「約」という用語は、既定の尺度の＋／−５％を表す。
【００２８】
複数の閾値を用いて、対象の腎臓の状態を評価することができる。例えば、腎臓の状態における１つ以上の将来的な変化を受けやすい「第一の」亜集団、およびそのような影響を受けにくい「第二の」亜集団を、単一グループに統合することができる。その後、このグループを、（細分数に応じて、三分位数、四分位数、五分位数などとして知られる）３つ以上の均等な部分に細かく分ける。対象が分類される細分に基づいて、オッズ比を対象に割り当てる。三分位数を考慮する場合、他の細分の比較のための参照として、最も低いまたは最も高い三分位数を用いることができる。この参照細分は、オッズ比を１と割り当てる。第二の三分位数を、その第一の三分位数に関連するオッズ比を割り当てる。すなわち、第二の三分位数のヒトは、第一の三分位数のヒトと比較して、腎臓の状態における１つ以上の将来的な変化に苦しむ可能性が３倍以上ある。第三の三分位数にも、その第一の三分位数に関連するオッズ比を割り当てる。
【００２９】
特定に実施形態において、このアッセイ法はイムノアッセイである。かかるアッセイで使用する抗体は、β２糖タンパク質１の全長タンパク質と特異的に結合し、かつそれと「関連する」（この用語は下記で定義される）１種類以上のポリペプチドとも結合することができる。多数のイムノアッセイ形式が当業者に知られている。好ましい体液試料は、尿、血液、血清、唾液、涙、および血漿からなる群から選択される。
【００３０】
前述の方法のステップは、β２糖タンパク質１のアッセイ結果を、単独で、対象のリスク層化に使用するという意味で解釈されるべきではない。むしろ、追加変数または他の臨床的徴候を本明細書記載の方法に含めてもよい。例えば、リスク層化の方法は、人口学的情報（例えば、体重、性別、年齢、人種）、病歴（例えば、家族の病歴、手術の種類、動脈瘤、鬱血性心不全、子癇前症、子癇、真性糖尿病、高血圧、冠動脈疾患、タンパク尿、腎不全、もしくは敗血症などの以前から存在する疾患、ＮＳＡＩＤ、シクロスポリン、タクロリムス、アミノグリコシド、フォスカネット、エチレングリコール、ヘモグロビン、ミオグロビン、イホスファミド、重金属、メトトレキサート、放射線造影剤、もしくはストレプトゾトシンなどの毒物曝露の種類）、臨床的変数（例えば、血圧、温度、呼吸速度）、リスクスコア（ＡＰＡＣＨＥスコア、ＰＲＥＤＩＣＴスコア、ＵＡ／ＮＳＴＥＭＩのＴＩＭＩリスクスコア、フラミンガムリスクスコア）、糸球体濾過量、推定糸球体濾過量、尿生産率、血清もしくは血漿のクレアチニン濃度、尿クレアチニン濃度、ナトリウムの分画排泄率、尿ナトリウム濃度、血清もしくは血漿のクレアチニンに対する尿クレアチニンの比、尿比重、尿浸透圧、血漿の尿素窒素に対する尿の尿素窒素の比、クレアチニンに対する血漿ＢＵＮの比、尿ナトリウム／（尿クレアチニン／血漿クレアチニン）として計算される腎不全の指標、血清または血漿の好中球ゼラチナーゼ（ＮＧＡＬ）濃度、尿のＮＧＡＬ濃度、血清もしくは血漿のシスタチンＣ濃度、血清もしくは血漿の心臓トロポニン濃度、血清もしくは血漿のＢＮＰ濃度、血清もしくは血漿のＮＴｐｒｏＢＮＰ濃度、および血清もしくは血漿のｐｒｏＢＮＰ濃度からなる群から選択される、対象について測定される１つ以上の変数と、このアッセイ結果とを組み合わせてもよい。β２糖タンパク質１のアッセイ結果と組み合わせてもよい腎機能の他の尺度は、本明細書の以下に、およびＨａｒｒｉｓｏｎ’ｓ
Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ｏｆ Ｉｎｔｅｒｎａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ,１７ｔｈ Ｅｄ.,ＭｃＧｒａｗ Ｈｉｌｌ,Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ,ｐａｇｅｓ １７４１−１８３０、ならびにＣｕｒｒｅｎｔ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ＆Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ２００８,４７ｔｈ Ｅｄ,ＭｃＧｒａｗ Ｈｉｌｌ,Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ,ｐａｇｅｓ ７８５−８１５（これらの各々は、参照によりその全体が本明細書に組込まれる）に記載されている。
【００３１】
かかる追加変数を、β２糖タンパク質１のアッセイ結果を決定するのに用いられる試料と同時に得られる試料において測定するか、またはそれより早い時期もしくは遅い時期に決定してもよい。これらの追加変数も、同じまたは異なる体液試料において測定することができる。例えば、β２糖タンパク質１を血清または血漿試料において測定し、別のバイオマーカーを尿試料において測定してもよい。さらに、可能性の割り当ては、β２糖タンパク質１のアッセイ結果と、１つ以上のかかる追加変数における一時的変化とを組み合わせてもよい。
【００３２】
他の実施形態において、本明細書記載の腎臓の状態を評価する方法は、対象の腎損傷を診断する方法、すなわち、対象が腎機能への損傷、腎機能の低下、またはＡＲＦを患っているか否かを評価する方法である。これらの実施形態において、このアッセイ結果は、腎臓の状態における変化の発生または不発生と相関する。下記は、好ましい診断の実施形態である。
【００３３】
好ましい診断の実施形態において、これらの方法は、腎機能への損傷の発生または不発生を診断することを含み、このアッセイの結果、例えば、β２糖タンパク質１の測定濃度は、かかる損傷の発生または不発生と相関する。例えば、この測定濃度を閾値と比較してもよく、測定濃度が閾値より低い時に割り当てられる可能性に対して、測定濃度が閾値を超える時に、腎機能へ損傷が発生する可能性の増加を対象に割り当てるか、あるいは、測定濃度が閾値を超える時に割り当てられる可能性に対して、測定濃度が閾値より低い時に、腎機能へ損傷が発生しない可能性の減少を対象に割り当てる。本明細書の以下で言及するβ２糖タンパク質１のアッセイ結果を用いる「診断」は、他の臨床的徴候を考慮にいれることができる。
【００３４】
他の好ましい診断の実施形態において、これらの方法は、腎機能の低下の発生または不発生を診断することを含み、このアッセイの結果、例えば、β２糖タンパク質１の測定濃度は、腎機能の低下を引き起こす損傷の発生または不発生と相関する。例えば、この測定濃度を閾値と比較してもよく、測定濃度が閾値より低い時に割り当てられる可能性に対して、測定濃度が閾値を超える時に、腎機能の低下を引き起こす損傷が発生する可能性の増加を対象に割り当てるか、あるいは、測定濃度が閾値を超える時に割り当てられる可能性に対して、測定濃度が閾値より低い時に、腎機能の低下を引き起こす損傷が発生しない可能性の減少を対象に割り当てる。
【００３５】
さらに他の好ましい診断の実施形態において、これらの方法は、ＡＲＦの発生または不発生を診断することを含み、このアッセイの結果、例えば、β２糖タンパク質１の測定濃度は、ＡＲＦを引き起こす損傷の発生または不発生と相関する。例えば、この測定濃度を閾値と比較してもよく、測定濃度が閾値より低い時に割り当てられる可能性に対して、測定濃度が閾値を超える時に、ＡＲＦを引き起こす損傷が発生する可能性の増加を対象に割り当てるか、あるいは、測定濃度が閾値を超える時に割り当てられる可能性に対して、測定濃度が閾値より低い時に、ＡＲＦを引き起こす損傷が発生しない可能性の減少を対象に割り当てる。
【００３６】
さらに他の好ましい診断の実施形態において、これらの方法は、腎置換療法を必要としている対象を診断することを含み、このアッセイの結果、例えば、β２糖タンパク質１の測定濃度は、腎置換療法の必要性と相関する。例えば、この測定濃度を閾値と比較してもよく、測定濃度が閾値より低い時に割り当てられる可能性に対して、測定濃度が閾値を超える時に、腎置換療法を現在必要とする可能性の増加をその対象に割り当てるか、あるいは、測定濃度が閾値を超える時に割り当てられる可能性に対して、測定濃度が閾値より低い時に、腎置換療を現在必要とする可能性の減少をその対象に割り当てる。
【００３７】
さらに他の好ましい診断の実施形態において、これらの方法は、腎移植を必要としている対象を診断することを含み、このアッセイの結果、例えば、β２糖タンパク質１の測定濃度は、腎置換療法の必要性と相関する。例えば、この測定濃度を閾値と比較してもよく、測定濃度が閾値より低い時に割り当てられる可能性に対して、測定濃度が閾値を超える時に、腎移植を現在必要とする可能性の増加をその対象に割り当てるか、あるいは、測定濃度が閾値を超える時に割り当てられる可能性に対して、測定濃度が閾値より低い時に、腎移植を現在必要とする可能性の減少をその対象に割り当てる。
【００３８】
当業者は、様々な方法を用いて所望の閾値に達することができる。例えば、この域値を、かかる健常対象において測定されるβ２糖タンパク質１の７５％、８５％、９０％、９５％、または９９％を表す濃度を選択することにより、健常対象の集団から決定してもよい。別の代替手段において、この域値を、同じ対象のβ２糖タンパク質１を事前に測定することにより決定してもよい。すなわち、その対象におけるβ２糖タンパク質１のレベルの一時的変化を用いて、その対象に診断を割り当てることができる。
【００３９】
さらに別の代替手段において、閾値は、対象となる疾患を患っている「第一の」亜集団および対象となる疾患を患っていない「第二の」亜集団に対象の複合集団を分離することにおける許容レベルの特異度および感度を提供することができる。試験精度の以下の尺度のうちの１つ以上により閾値を選択して、この第一および第二の集団を分離する：
１を超える、好ましくは少なくとも約２以上もしくは約０．５以下、より好ましくは少なくとも約３以上もしくは約０．３３以下、さらにより好ましくは少なくとも約４以上もしくは約０．２５以下、さらにより好ましくは少なくとも約５以上もしくは約０．２以下、最も好ましくは少なくとも約１０以上もしくは０．１以下のオッズ比；
０．５を超える、好ましくは少なくとも約０．６、より好ましくは少なくとも約０．７、さらにより好ましくは少なくとも約０．８、さらにより好ましくは少なくとも約０．９、最も好ましくは少なくとも約０．９５の特異度、および０．２を超える、好ましくは約０．３を超える、より好ましくは約０．４を超える、さらにより好ましくは少なくとも約０．５を超える、さらにより好ましくは約０．６を超える、さらにより好ましくは約０．７を超える、さらにより好ましくは約０．８を超える、より好ましくは約０．９を超える、最も好ましくは約０．９５を超える対応する感度；
０．５を超える、好ましくは少なくとも約０．６、より好ましくは少なくとも約０．７、さらにより好ましくは少なくとも約０．８、さらにより好ましくは少なくとも約０．９、最も好ましくは少なくとも約０．９５の感度、および０．２を超える、好ましくは約０．３を超える、より好ましくは約０．４を超える、さらにより好ましくは少なくとも約０．５を超える、さらにより好ましくは約０．６を超える、さらにより好ましくは約０．７を超える、さらにより好ましくは約０．８を超える、より好ましくは約０．９を超える、最も好ましくは約０．９５を超える対応する特異度；
少なくとも約７５％の感度および少なくとも約７５％の特異度；
１を超える、少なくとも約２、より好ましくは少なくとも約３、さらにより好ましくは少なくとも約５、最も好ましくは少なくとも約１０の（感度／（１−特異度）として計算される）陽性尤度比；または
１より低い、約０．５以下、より好ましくは約０．３以下、最も好ましくは約０．１以下の（（１−感度）／特異度として計算される）陰性尤度比。
上記の尺度のいずれかの文脈における「約」という用語は、既定の尺度の＋／−５％を表す。
【００４０】
複数の閾値を用いて、対象の腎臓の状態も評価することができる。例えば、対象の病状を有する人々の「第一の」亜集団、およびそうではない「第二の」亜集団を、単一グループに統合することができる。その後、このグループを、（細分数に応じて、三分位数、四分位数、五分位数などとして知られる）３つ以上の均等な部分に細かく分ける。対象が分類される細分に基づいて、オッズ比を対象に割り当てる。三分位数を考慮する場合、他の細分の比較のための参照として、最も低いまたは最も高い三分位数を用いることができる。この参照細分は、オッズ比を１と割り当てる。第二の三分位数を、その第一の三分位数に関連するオッズ比を割り当てる。すなわち、第二の三分位数のヒトは、第一の三分位数のヒトと比較して、この病状を有する可能性が３倍以上ある。第三の三分位数にも、その第一の三分位数に関連するオッズ比を割り当てる。
【００４１】
特定に実施形態において、このアッセイ法はイムノアッセイである。かかるアッセイで使用する抗体は、β２糖タンパク質１の全長タンパク質と特異的に結合し、かつそれと「関連する」（この用語は下記で定義される）１種類以上のポリペプチドとも結合することができる。多数のイムノアッセイ形式が当業者に知られている。好ましい体液試料は、尿、血液、血清、および血漿からなる群から選択される。
【００４２】
前述の方法のステップは、β２糖タンパク質１のアッセイ結果を、単独で、対象の診断に使用するという意味で解釈されるべきではない。むしろ、追加変数を本明細書記載の方法に含めてもよい。例えば、診断は、人口学的情報（例えば、体重、性別、年齢、人種）、病歴（例えば、家族の病歴、手術の種類、動脈瘤、鬱血性心不全、子癇前症、子癇、真性糖尿病、高血圧、冠動脈疾患、タンパク尿、腎不全、もしくは敗血症などの以前から存在する疾患、ＮＳＡＩＤ、シクロスポリン、タクロリムス、アミノグリコシド、フォスカネット、エチレングリコール、ヘモグロビン、ミオグロビン、イホスファミド、重金属、メトトレキサート、放射線造影剤、もしくはストレプトゾトシンなどの毒物曝露の種類）、臨床的変数（例えば、血圧、温度、呼吸速度）、リスクスコア（ＡＰＡＣＨＥスコア、ＰＲＥＤＩＣＴスコア、ＵＡ／ＮＳＴＥＭＩのＴＩＭＩリスクスコア、フラミンガムリスクスコア）、糸球体濾過量、推定糸球体濾過量、尿生産率、血清もしくは血漿のクレアチニン濃度、尿クレアチニン濃度、ナトリウムの分画排泄率、尿ナトリウム濃度、血清もしくは血漿のクレアチニンに対する尿クレアチニンの比、尿比重、尿浸透圧、血漿の尿素窒素に対する尿の尿素窒素の比、クレアチニンに対する血漿ＢＵＮの比、尿ナトリウム／（尿クレアチニン／血漿クレアチニン）として計算される腎不全の指標、血清または血漿の好中球ゼラチナーゼ（ＮＧＡＬ）濃度、尿のＮＧＡＬ濃度、血清もしくは血漿のシスタチンＣ濃度、血清もしくは血漿の心臓トロポニン濃度、血清もしくは血漿のＢＮＰ濃度、血清もしくは血漿のＮＴｐｒｏＢＮＰ濃度、および血清もしくは血漿のｐｒｏＢＮＰ濃度からなる群から選択される、対象について測定される１つ以上の変数と、このアッセイ結果とを組み合わせてもよい。β２糖タンパク質１のアッセイ結果と組み合わせてもよい腎機能の他の尺度は、本明細書の以下に、およびＨａｒｒｉｓｏｎ’ｓ
Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ｏｆ Ｉｎｔｅｒｎａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ,１７ｔｈ Ｅｄ.,ＭｃＧｒａｗ Ｈｉｌｌ,Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ,ｐａｇｅｓ １７４１−１８３０、ならびにＣｕｒｒｅｎｔ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ＆Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ２００８,４７ｔｈ Ｅｄ,ＭｃＧｒａｗ Ｈｉｌｌ,Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ,ｐａｇｅｓ ７８５−８１５（これらの各々は、参照によりその全体が本明細書に組込まれる）に記載されている。
【００４３】
かかる追加変数を、β２糖タンパク質１のアッセイ結果を決定するのに用いられる試料と同時に得られる試料において測定するか、またはそれより早い時期もしくは遅い時期に決定してもよい。これらの追加変数も、同じまたは異なる体液試料において測定することができる。例えば、β２糖タンパク質１を血清または血漿試料において測定し、別のバイオマーカーを尿試料において測定してもよい。さらに、診断法は、β２糖タンパク質１のアッセイ結果と、１つ以上のかかる追加変数における一時的変化とを組み合わせてもよい。
【００４４】
さらに他の実施形態において、本明細書記載の腎臓の状態を評価する方法は、対象の腎損傷を監視する方法であり、すなわち、腎機能への損傷、腎機能の低下、またはＡＲＦを患っている対象において、腎機能が改善しているかまたは悪化しているか否かを評価する方法である。これらの実施形態において、このアッセイ結果は、腎臓の状態における変化の発生または不発生と相関する。以下のものは、好ましい監視の実施形態である。
【００４５】
好ましい監視の実施形態において、これらの方法は、腎機能への損傷を患っている対象において、腎臓の状態を監視することを含み、このアッセイの結果、例えば、β２糖タンパク質１の測定濃度は、その対象の腎臓の状態における変化の発生または不発生と相関する。例えば、この測定濃度を閾値と比較してもよく、測定濃度が閾値を超える時に、腎機能の悪化をその対象に割り当てるか、あるいは、測定濃度が閾値より低い時に、腎機能の改善をその対象に割り当ててもよい。
【００４６】
他の好ましい監視の実施形態において、これらの方法は、腎機能の低下を患っている対象において、腎臓の状態を監視することを含み、このアッセイの結果、例えば、β２糖タンパク質１の測定濃度は、その対象の腎臓の状態における変化の発生または不発生と相関する。例えば、この測定濃度を閾値と比較してもよく、測定濃度が閾値を超える時に、腎機能の悪化をその対象に割り当てるか、あるいは、測定濃度が閾値より低い時に、腎機能の改善をその対象に割り当ててもよい。
【００４７】
さらに他の好ましい監視の実施形態において、これらの方法は、急性腎不全を患っている対象において、腎臓の状態を監視することを含み、このアッセイの結果、例えば、β２糖タンパク質１の測定濃度は、その対象の腎臓の状態における変化の発生または不発生と相関する。例えば、この測定濃度を閾値と比較してもよく、測定濃度が閾値を超える時に、腎機能の悪化をその対象に割り当てるか、あるいは、測定濃度が閾値より低い時に、腎機能の改善をその対象に割り当ててもよい。
【００４８】
さらに他の好ましい監視の実施形態において、これらの方法は、腎前性、腎内性、または腎後性のＡＲＦに対する１つ以上の既知のリスクファクターが以前から存在することにより、腎機能への損傷のリスクのある対象において、腎臓の状態を監視することを含み、このアッセイの結果、例えば、β２糖タンパク質１の測定濃度は、その対象の腎臓の状態における変化の発生または不発生と相関する。例えば、この測定濃度を閾値と比較してもよく、測定濃度が閾値を超える時に、腎機能の悪化をその対象に割り当てるか、あるいは、測定濃度が閾値より低い時に、腎機能の改善をその対象に割り当ててもよい。
【００４９】
当業者は様々な方法を用いて所望の閾値に達することができる。例えば、この域値を、かかる健常対象において測定されるβ２糖タンパク質１の７５％、８５％、９０％、９５％、または９９％を表す濃度を選択することにより、健常対象の集団から決定してもよい。別の代替手段において、この域値を、同じ対象のβ２糖タンパク質１を事前に測定することにより決定してもよい。すなわち、その対象におけるβ２糖タンパク質１のレベルの一時的変化を用いて、その対象に診断を割り当ててもよい。
【００５０】
さらに別の代替手段において、閾値は、対象となる疾患を患っていて、かつその腎機能が悪化する「第一の」亜集団、および対象となる疾患を患っていて、かつその腎機能が改善する「第二の」亜集団に対象の複合集団を分離することにおける許容レベルの特異度および感度を提供することができる。試験精度の以下の尺度のうちの１つ以上により、閾値を選択して、この第一および第二の集団を分離する：
１を超える、好ましくは少なくとも約２以上もしくは約０．５以下、より好ましくは少なくとも約３以上もしくは約０．３３以下、さらにより好ましくは少なくとも約４以上もしくは約０．２５以下、さらにより好ましくは少なくとも約５以上もしくは約０．２以下、最も好ましくは少なくとも約１０以上もしくは０．１以下のオッズ比；
０．５を超える、好ましくは少なくとも約０．６、より好ましくは少なくとも約０．７、さらにより好ましくは少なくとも約０．８、さらにより好ましくは少なくとも約０．９、最も好ましくは少なくとも約０．９５の特異度、および０．２を超える、好ましくは約０．３を超える、より好ましくは約０．４を超える、さらにより好ましくは少なくとも約０．５を超える、さらにより好ましくは約０．６を超える、さらにより好ましくは約０．７を超える、さらにより好ましくは約０．８を超える、より好ましくは約０．９を超える、最も好ましくは約０．９５を超える対応する感度；
０．５を超える、好ましくは少なくとも約０．６、より好ましくは少なくとも約０．７、さらにより好ましくは少なくとも約０．８、さらにより好ましくは少なくとも約０．９、最も好ましくは少なくとも約０．９５の感度、および０．２を超える、好ましくは約０．３を超える、より好ましくは約０．４を超える、さらにより好ましくは少なくとも約０．５を超える、さらにより好ましくは約０．６を超える、さらにより好ましくは約０．７を超える、さらにより好ましくは約０．８を超える、より好ましくは約０．９を超える、最も好ましくは約０．９５を超える対応する特異度；
少なくとも約７５％の感度および少なくとも約７５％の特異度；
１を超える、少なくとも約２、より好ましくは少なくとも約３、さらにより好ましくは少なくとも約５、最も好ましくは少なくとも約１０の（感度／（１−特異度）として計算される）陽性尤度比；または
１より低い、約０．５以下、より好ましくは約０．３以下、最も好ましくは約０．１以下の（（１−感度）／特異度として計算される）陰性尤度比。
上記の尺度のいずれかの文脈における「約」という用語は、既定の尺度の＋／−５％を表す。
【００５１】
複数の閾値を用いて、対象の腎臓の状態を監視することができる。例えば、腎機能が改善（または悪化）している人々の「第一の」亜集団、およびそうではない人々の「第二の」亜集団を、単一グループに統合することができる。その後、このグループを、（細分数に応じて、三分位数、四分位数、五分位数などとして知られる）３つ以上の均等な部分に細かく分ける。対象が分類される細分に基づいて、オッズ比を対象に割り当てる。三分位数を考慮する場合、他の細分の比較のための参照として、最も低いまたは最も高い三分位数を用いることができる。この参照細分は、オッズ比を１と割り当てる。第二の三分位数を、その第一の三分位数に関連するオッズ比を割り当てる。すなわち、第二の三分位数のヒトは、第一の三分位数のヒトと比較して、改善（または悪化）する可能性が３倍以上ある。第三の三分位数にも、その第一の三分位数に関連するオッズ比を割り当てる。
【００５２】
特定に実施形態において、このアッセイ法はイムノアッセイである。かかるアッセイで使用する抗体は、β２糖タンパク質１の全長タンパク質と特異的に結合し、かつそれと「関連する」（この用語は下記で定義される）１種類以上のポリペプチドとも結合することができる。多数のイムノアッセイ形式が当業者に知られている。好ましい体液試料は、尿、血液、血清、唾液、涙、および血漿からなる群から選択される。
【００５３】
前述の方法のステップは、β２糖タンパク質１のアッセイ結果を、単独で、対象を監視するのに使用するという意味で解釈されるべきではない。むしろ、追加変数を本明細書記載の方法に含めてもよい。例えば、監視は、人口学的情報（例えば、体重、性別、年齢、人種）、病歴（例えば、家族の病歴、手術の種類、動脈瘤、鬱血性心不全、子癇前症、子癇、真性糖尿病、高血圧、冠動脈疾患、タンパク尿、腎不全、もしくは敗血症などの以前から存在する疾患、ＮＳＡＩＤ、シクロスポリン、タクロリムス、アミノグリコシド、フォスカネット、エチレングリコール、ヘモグロビン、ミオグロビン、イホスファミド、重金属、メトトレキサート、放射線造影剤、もしくはストレプトゾトシンなどの毒物曝露の種類）、臨床的変数（例えば、血圧、温度、呼吸速度）、リスクスコア（ＡＰＡＣＨＥスコア、ＰＲＥＤＩＣＴスコア、ＵＡ／ＮＳＴＥＭＩのＴＩＭＩリスクスコア、フラミンガムリスクスコア）、糸球体濾過量、推定糸球体濾過量、尿生産率、血清もしくは血漿のクレアチニン濃度、尿クレアチニン濃度、ナトリウムの分画排泄率、尿ナトリウム濃度、血清もしくは血漿のクレアチニンに対する尿クレアチニンの比、尿比重、尿浸透圧、血漿の尿素窒素に対する尿の尿素窒素の比、クレアチニンに対する血漿ＢＵＮの比、尿ナトリウム／（尿クレアチニン／血漿クレアチニン）として計算される腎不全の指標、血清または血漿の好中球ゼラチナーゼ（ＮＧＡＬ）濃度、尿のＮＧＡＬ濃度、血清もしくは血漿のシスタチンＣ濃度、血清もしくは血漿の心臓トロポニン濃度、血清もしくは血漿のＢＮＰ濃度、血清もしくは血漿のＮＴｐｒｏＢＮＰ濃度、および血清もしくは血漿のｐｒｏＢＮＰ濃度からなる群から選択される、対象について測定される１つ以上の変数と、このアッセイ結果とを組み合わせてもよい。β２糖タンパク質１のアッセイ結果と組み合わせてもよい腎機能の他の尺度は、本明細書の以下に、およびＨａｒｒｉｓｏｎ’ｓ
Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ｏｆ Ｉｎｔｅｒｎａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ,１７ｔｈ Ｅｄ.,ＭｃＧｒａｗ Ｈｉｌｌ,Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ,ｐａｇｅｓ １７４１−１８３０、ならびにＣｕｒｒｅｎｔ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ＆Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ２００８,４７ｔｈ Ｅｄ,ＭｃＧｒａｗ Ｈｉｌｌ,Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ,ｐａｇｅｓ ７８５−８１５（これらの各々は、参照によりその全体が本明細書に組込まれる）に記載されている。
【００５４】
かかる追加変数を、β２糖タンパク質１のアッセイ結果を決定するのに用いられる試料と同時に得られる試料において測定するか、またはそれより早い時期もしくは遅い時期に決定してもよい。これらの追加変数も、同じまたは異なる体液試料において測定することができる。例えば、β２糖タンパク質１を血清または血漿試料において測定し、別のバイオマーカーを尿試料において測定してもよい。さらに、監視の方法は、β２糖タンパク質１のアッセイ結果と、１つ以上のかかる追加変数における一時的変化とを組み合わせてもよい。
【００５５】
さらに他の実施形態において、本明細書記載の腎臓の状態を評価する方法は、対象の腎損傷を分類する方法であり、すなわち、対象の腎損傷が腎前性、腎内性、または腎後性であるのかを決定する方法、および／またはこれらのクラスを、急性尿細管損傷、急性糸球体腎炎、急性尿細管間質性腎炎、急性血管腎症、または浸潤性疾患などのサブクラスに細かく分ける方法である。これらの実施形態において、このアッセイの結果は、特定のクラスおよび／またはサブクラスと相関する。下記は、好ましい分類の実施形態である。
【００５６】
好ましい分類の実施形態において、これらの方法は、対象の腎損傷が腎前性、腎内性、または腎後性であるのかを決定すること、および／またはこれらのクラスを、急性尿細管損傷、急性糸球体腎炎、急性尿細管間質性腎炎、急性血管腎症、または浸潤性疾患などのサブクラスにさらに細かく分けることであり、このアッセイの結果、例えば、β２糖タンパク質１の測定濃度は、その対象についての損傷分類と相関する。例えば、測定濃度を閾値と比較してもよく、測定濃度が閾値を超える時に、特定の分類を割り当てるか、あるいは、測定濃度が閾値より低い時に、異なる分類をその対象に割り当ててもよい。
【００５７】
当業者は、様々な方法を用いて所望の閾値に達してもよい。例えば、この域値を、特定分類（例えば、「対照」グループ）に属さない対象の集団から、かかる対照の対象において測定されるβ２糖タンパク質１の７５％、８５％、９０％、９５％、または９９％を表す濃度を選択することにより決定してもよい。別の代替手段において、この域値を、同じ対象のβ２糖タンパク質１を事前に測定することにより決定してもよい。すなわち、その対象におけるβ２糖タンパク質１のレベルの一時的変化を用いて、その対象に分類を割り当ててもよい。
【００５８】
さらに別の代替手段において、閾値は、特定分類を有する「第一の」亜集団および異なる分類を有する「第二の」亜集団に対象の複合集団を分離することにおける許容レベルの特異度および感度を提供することができる。試験精度の以下の尺度のうちの１つ以上により、閾値を選択して、この第一および第二の集団を分離する：
１を超える、好ましくは少なくとも約２以上もしくは約０．５以下、より好ましくは少なくとも約３以上もしくは約０．３３以下、さらにより好ましくは少なくとも約４以上もしくは約０．２５以下、さらにより好ましくは少なくとも約５以上もしくは約０．２以下、最も好ましくは少なくとも約１０以上もしくは０．１以下のオッズ比；
０．５を超える、好ましくは少なくとも約０．６、より好ましくは少なくとも約０．７、さらにより好ましくは少なくとも約０．８、さらにより好ましくは少なくとも０．９、最も好ましくは少なくとも０．９５の特異度、および０．２を超える、好ましくは約０．３を超える、より好ましくは約０．４を超える、さらにより好ましくは少なくとも約０．５を超える、さらにより好ましくは約０．６を超える、さらにより好ましくは約０．７を超える、さらにより好ましくは約０．８を超える、より好ましくは約０．９を超える、最も好ましくは約０．９５を超える対応する感度；
０．５を超える、好ましくは少なくとも約０．６、より好ましくは少なくとも約０．７、さらにより好ましくは少なくとも約０．８、さらにより好ましくは少なくとも０．９、最も好ましくは少なくとも０．９５の感度、および０．２を超える、好ましくは約０．３を超える、より好ましくは約０．４を超える、さらにより好ましくは少なくとも約０．５を超える、さらにより好ましくは約０．６を超える、さらにより好ましくは約０．７を超える、さらにより好ましくは約０．８を超える、より好ましくは約０．９を超える、最も好ましくは約０．９５を超える対応する特異度；
少なくとも約７５％の感度および少なくとも約７５％の特異度；
１を超える、少なくとも約２、より好ましくは少なくとも約３、さらにより好ましくは少なくとも約５、最も好ましくは少なくとも約１０の（感度／（１−特異度）として計算される）陽性尤度比；または
１より低い、約０．５以下、より好ましくは約０．３以下、最も好ましくは約０．１以下の（（１−感度）／特異度として計算される）陰性尤度比。
この文脈における「約」という用語は、既定の尺度の＋／−５％を表す。
【００５９】
複数の閾値を用いて、対象の腎損傷を分類することができる。例えば、特定分類を有する人々の「第一の」亜集団、および異なる分類を有する「第二の」亜集団を、単一グループに統合することができる。その後、このグループを、（細分数に応じて、三分位数、四分位数、五分位数などとして知られる）３つ以上の均等な部分に細かく分ける。対象が分類される細分に基づいて、オッズ比を対象に割り当てる。三分位数を考慮する場合、他の細分の比較のための参照として、最も低いまたは最も高い三分位数を用いることができる。この参照細分は、オッズ比を１と割り当てる。第二の三分位数を、その第一の三分位数に関連するオッズ比を割り当てる。すなわち、第二の三分位数のあるヒトは、第一の三分位数のヒトと比較して、特定分類を有する可能性が３倍以上ある。第三の三分位数にも、その第一の三分位数に関連するオッズ比を割り当てる。
【００６０】
特定に実施形態において、このアッセイ法はイムノアッセイである。かかるアッセイで使用する抗体は、β２糖タンパク質１の全長タンパク質と特異的に結合し、かつそれと「関連する」（この用語は下記で定義される）１種類以上のポリペプチドとも結合してもよい。多数のイムノアッセイ形式が当業者に知られている。好ましい体液試料は、尿、血液、血清、および血漿からなる群から選択される。
【００６１】
前述の方法のステップは、β２糖タンパク質１のアッセイ結果を、単独で、対象における損傷の分類に使用するという意味で解釈されるべきではない。むしろ、追加変数を本明細書記載の方法に含めてもよい。例えば、分類は、人口学的情報（例えば、体重、性別、年齢、人種）、病歴（例えば、家族の病歴、手術の種類、動脈瘤、鬱血性心不全、子癇前症、子癇、真性糖尿病、高血圧、冠動脈疾患、タンパク尿、腎不全、もしくは敗血症などの以前から存在する疾患、ＮＳＡＩＤ、シクロスポリン、タクロリムス、アミノグリコシド、フォスカネット、エチレングリコール、ヘモグロビン、ミオグロビン、イホスファミド、重金属、メトトレキサート、放射線造影剤、もしくはストレプトゾトシンなどの毒物曝露の種類）、臨床的変数（例えば、血圧、温度、呼吸速度）、リスクスコア（ＡＰＡＣＨＥスコア、ＰＲＥＤＩＣＴスコア、ＵＡ／ＮＳＴＥＭＩのＴＩＭＩリスクスコア、フラミンガムリスクスコア、心臓手術後の急性腎不全を予測するＴｈａｋｅｒスコアなど）、糸球体濾過量、推定糸球体濾過量、尿生産率、血清もしくは血漿のクレアチニン濃度、尿クレアチニン濃度、ナトリウムの分画排泄率、尿ナトリウム濃度、血清もしくは血漿のクレアチニンに対する尿クレアチニンの比、尿比重、尿浸透圧、血漿の尿素窒素に対する尿の尿素窒素の比、クレアチニンに対する血漿ＢＵＮの比、尿ナトリウム／（尿クレアチニン／血漿クレアチニン）として計算される腎不全の指標、血清または血漿の好中球ゼラチナーゼ（ＮＧＡＬ）濃度、尿のＮＧＡＬ濃度、血清もしくは血漿のシスタチンＣ濃度、血清もしくは血漿のＢＮＰ濃度、血清もしくは血漿のＮＴｐｒｏＢＮＰ濃度、および血清もしくは血漿のｐｒｏＢＮＰ濃度からなる群から選択される、対象について測定される１つ以上の変数と、このアッセイ結果とを組み合わせてもよい。β２糖タンパク質１のアッセイ結果と組み合わせてもよい腎機能の他の尺度は、本明細書の以下に、およびＨａｒｒｉｓｏｎ’ｓ
Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ｏｆ Ｉｎｔｅｒｎａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ,１７ｔｈ Ｅｄ.,ＭｃＧｒａｗ Ｈｉｌｌ,Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ,ｐａｇｅｓ １７４１−１８３０、ならびにＣｕｒｒｅｎｔ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ＆Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ２００８,４７ｔｈ Ｅｄ,ＭｃＧｒａｗ Ｈｉｌｌ,Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ,ｐａｇｅｓ ７８５−８１５（これらの各々は、参照によりその全体が本明細書に組込まれる）に記載されている。
【００６２】
かかる追加変数を、β２糖タンパク質１のアッセイ結果を決定するのに用いられる試料と同時に得られる試料において測定するか、またはそれより早い時期もしくは遅い時期に決定してもよい。これらの追加変数も、同じまたは異なる体液試料において測定することができる。例えば、β２糖タンパク質１を血清または血漿試料において測定し、別のバイオマーカーを尿試料において測定してもよい。さらに、監視の方法は、β２糖タンパク質１のアッセイ結果と、１つ以上のかかる追加変数における一時的変化とを組み合わせてもよい。
【００６３】
関連する様々な態様において、本発明は、本明細書記載の方法を実行するための装置およびキットにも関連する。適切なキットは、記載の閾値比較を実行するための説明書と共に、記載のβ２糖タンパク質１アッセイのうちの少なくとも１つを実行するのに十分である試薬を含む。
【００６４】
特定の実施形態において、かかるアッセイを実行するための試薬はアッセイ装置に供給され、かかるアッセイ装置はかかるキットに含まれてもよい。好ましい試薬は、１種類以上の固相抗体を含み、この固相抗体は、固形支持体に結合した目的のバイオマーカーの（１つまたは複数の）標的を検出する抗体を含み得る。サンドイッチイムノアッセイの場合、かかる試薬は、１種類以上の検出可能な程度に標識された抗体も含み、この検出可能な程度に標識された抗体は、検出可能な標識に結合した目的のバイオマーカーの（１つまたは複数の）標的を検出する抗体を含み得る。アッセイ装置の一部として提供され得る追加の随意的要素を、本明細書の以下に記載する。
【００６５】
検出可能な標識は、それら自体検出可能（例えば、蛍光性の部分、電気化学的標識、ｅｃｌ（電気化学発光）標識、金属キレート、コロイド金属粒子など）である分子、および検出可能な反応産物（例えば、西洋ワサビペルオキシダーゼなどの酵素、アルカリホスファターゼなど）の産生によって、または、それ自体検出可能であり得る特異的結合分子（例えば、二次抗体、ビオチン、ジゴキシゲニン、マルトース、オリゴヒスチジン、２，４−ジニトロベンゼン、フェニルヒ酸（ｐｈｅｎｙｌａｒｓｅｎａｔｅ）、ｓｓＤＮＡ、ｄｓＤＮＡなど）の使用を経て間接的に検出され得る分子を含み得る。
【００６６】
シグナル発生要素からのシグナルの産生を、当業で周知の様々な光学的な、聴覚の、電気化学的方法を用いて行うことができる。検出モードの例として、蛍光発光、放射化学検出、反射率、吸光度、電流測定、伝導性、インピーダンス、インターフェロメトリー、偏光解析法などが挙げられる。これらの方法のうちの特定の方法において、固相抗体は、シグナル産生のトランスデューサー（例えば、回折格子、電気化学センサーなど）に結合するが、他の方法において、固相抗体から空間的に離れたトランスデューサー（例えば、励起光源および光学検出器を使用する蛍光光度計）によりシグナルを産生する。このリストは、限定するようには意図しない。抗体ベースのバイオセンサーも使用して、任意選択で標識分子を必要としない検体の存在または量を決定してもよい。
【発明を実施するための形態】
【００６７】
本発明は、β２糖タンパク質１の測定を経て、腎機能への損傷、腎機能の低下、および／または急性腎不全を患う対象もしくはそれらを患うリスクのある対象における診断、鑑別診断、リスク層化、監視、分類ならびに治療計画の決定のための方法および組成物に関連する。
【００６８】
本明細書の目的のために、以下の定義を適用する。本明細書で使用する「腎機能への損傷」は、腎機能の尺度における突然（１４日以内、好ましくは７日以内、より好ましくは７２時間以内、さらにより好ましくは４８時間以内）の測定可能な低下である。かかる損傷を、例えば、糸球体濾過量または推定ＧＦＲの減少、尿排出量の低下、血清クレアチニンの増加、血清シスタチンＣの増加、腎置換療法の必要性などによって明らかにしてもよい。「腎機能の改善」は、腎機能の尺度における突然（１４日以内、好ましくは７日以内、より好ましくは７２時間以内、さらにより好ましくは４８時間以内）の測定可能な増加である。ＧＦＲを測定および／または評価する好ましい方法を、本明細書の以下に記載する。
【００６９】
本明細書で使用する「腎機能の低下」は、０．１ｍｇ／ｄＬ以上（≧８．８μｍｏｌ／Ｌ）の血清クレアチニンの絶対的増加、２０％（ベースラインから１．２倍）以上の血清クレアチニンの増加の割合、または尿排出量の低下（１時間あたり０．５ｍｌ／ｋｇより低い実証された乏尿）によって明らかにされる腎臓機能における突然（１４日以内、好ましくは７日以内、より好ましくは７２時間以内、さらにより好ましくは４８時間以内）の低下である。
【００７０】
本明細書で使用する「急性腎不全」または「ＡＲＦ」は、０．３ｍｇ／ｄＬ以上（≧２６．４μｍｏｌ／ｌ）の血清クレアチニンの絶対的増加、５０％（ベースラインから１．５倍）以上の血清クレアチニンの増加の割合、または尿排出量の低下（少なくとも６時間の間、１時間あたり０．５ｍｌ／ｋｇより低い実証された乏尿）によって明らかにされる腎臓機能における突然（１４日以内、好ましくは７日以内、より好ましくは７２時間以内、さらにより好ましくは４８時間以内）の低下である。この用語は、「急性腎臓損傷」または
「ＡＫＩ」と同義である。
【００７１】
本明細書で使用する「β２糖タンパク質１」という用語は、生体試料中に存在し、β２糖タンパク質１前駆体に由来する１種類以上のポリペプチド（Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔ
Ｐ０２７４９（配列番号１））である。
【表２】
【００７２】
以下のドメインが、β２糖タンパク質１において同定された。
残基 → 長さ → → ドメインＩＤ
１−１９ → １９ → → シグナル配列
２０−３４５ → ３２６ → → β２糖タンパク質１
【００７３】
さらに、いくつかの天然に存在するバリアントが同定された。
残基 変化
５→ → → →ＶからＡ
１０７→ → →ＳからＮ
１５４→ → →ＲからＨ
２６６→ → →ＶからＬ
３２５→ → →ＣからＧ
３３５→ → →ＷからＳ
【００７４】
この点において、イムノアッセイから得られるシグナルは、１種類以上の抗体および標的生体分子（すなわち、検体）ならびにこれらの抗体が結合する必須の（１つまたは複数の）エピトープを含むポリペプチドとの間で形成される複合体の直接的な結果であることを、当業者は理解するであろう。かかるアッセイは全長のβ２糖タンパク質１分子を検出し、このアッセイ結果はβ２糖タンパク質１の濃度として表され得るが、実際は、このアッセイのシグナルは、試料中に存在する全てのかかる「免疫反応性」ポリペプチドの結果である。β２糖タンパク質１の発現を、タンパク質測定（ドットブロット、ウエスタンブロット、クロマトグラフ法、質量分析法など）および核酸測定（ｍＲＮＡ定量化）を含むイムノアッセイ以外の手段によって決定してもよい。このリストは、限定することを意図しない。
【００７５】
本明細書で使用する、検体の「存在または量とシグナルを関連づける」という用語は、この理解を反映する。典型的には、所望の検体の既知濃度を用いて計算される標準曲線の使用を経て、アッセイシグナルを検体の存在または量と関連づける。この用語は、本明細書で使用されるように、アッセイが、生理的に適切な濃度の検体の存在または量を示す検出可能なシグナルを発生することができる場合、アッセイは、検体を「検出するように構成」される。ポリペプチドがこのアッセイにおいて使用される抗体または複数の抗体に結合するのに必要な（１つまたは複数の）エピトープを含む限り、抗体エピトープは約８アミノ酸であるので、β２糖タンパク質１を検出するように構成されるイムノアッセイは、β２糖タンパク質１配列と関連するポリペプチドも検出するであろう。β２糖タンパク質１などのバイオマーカーに関して、本明細書で使用する「関連マーカー」という用語は、マーカーそれ自体の代替としてもしくは独立したバイオマーカー類として検出され得る特定のマーカーまたはその生合成の親マーカーのうちの１つ以上の断片を表す。この用語は、生体試料中に存在し、結合タンパク質類、受容体類、ヘパリン、脂質類、糖類などの追加種と複合体を形成するβ２糖タンパク質１前駆体に由来する１種類以上のポリペプチドも表す。
【００７６】
本明細書で使用する「対象」という用語は、ヒトまたはヒトではない生物を表す。したがって、本明細書記載の方法および組成物は、ヒトおよび動物の両方の疾患に適用できる。さらに、対象は生物であることが好ましいが、本明細書記載の発明は、死後の検体において同様に使用してもよい。好ましい対象はヒトであり、最も好ましくは「患者」であり、本明細書で使用する患者は、疾患または病気の医療を受けている、生きているヒトを表す。これには、病気が分からない、病状の兆候について調べられているヒトが含まれる。
【００７７】
検体は試料において測定されることが好ましい。かかる試料を、対象から取得するか、または対象に提供されることが意図される生体物質から取得してもよい。例えば、試料は、対象への移植の可能性について評価されている腎臓から取得してもよく、検体測定を用いて、以前から存在する損傷についてこの腎臓を評価してもよい。試料は、体液試料であることが好ましい。
【００７８】
本明細書で使用する「体液試料」という用語は、患者または移植提供者などの所望の対象の診断、予後診断、分類または評価の目的のために取得される体液の試料を表す。特定の実施形態において、かかる試料を、進行している病気の予後または病気における治療計画の効果を決定する目的のために取得してもよい。好ましい体液試料には、血液、血清、血漿、脳脊髄液、尿、唾液、痰、および胸水が含まれる。さらに、特定の体液試料は、分画または精製の手順後に、例えば、全血を血清または血漿の成分へ分離した後に、より容易に解析されるということを当業者は理解するであろう。
【００７９】
本明細書で使用する「診断」という用語は、患者がある疾患または病気を患っているか否かの可能性（ｐｒｏｂａｂｉｌｉｔｙ）（「可能性（ｌｉｋｅｌｉｈｏｏｄ）」）を当業者が評価および／または決定することができる方法を表す。本発明の場合、「診断」は、任意選択で、他の臨床的特徴と共に本発明のβ２糖タンパク質１アッセイの結果を用いて、試料を取得し、アッセイする対象の急性腎損傷またはＡＲＦの診断（すなわち、発生もしくは不発生）に達することを含む。かかる診断が「決定される」ということは、この診断が１００％正確であることを意味することは意図しない。多くのバイオマーカーが複数の病気を示す。熟練した臨床医は、情報の真空状態においてバイオマーカーの結果を用いないが、むしろ、他の臨床的徴候と共に試験結果を用いて、診断に達する。したがって、一方の所定の診断の閾値における測定バイオマーカーのレベルは、他方の所定の診断の閾値の測定レベルに対して、対象における疾患の発生の可能性が高いことを示す。
【００８０】
同様に、予後診断のリスクは、所定の経過または結果が起こる可能性（ｐｒｏｂａｂｉｌｉｔｙ）（「可能性（ｌｉｋｅｌｉｈｏｏｄ）」）を示唆する。病的状態の可能性の増加（例えば、腎機能の悪化、将来的なＡＲＦ、または死）と同じく関係がある予後指標のレベルまたはレベルの変化を、患者における有害事象の「可能性の増加を示している」と見なす。
【００８１】
β２糖タンパク質１アッセイ
一般に、イムノアッセイは、所望のバイオマーカーを含むまたは含むと思われる試料と、このバイオマーカーと特異的に結合する少なくとも１種類の抗体とを接触させることを含む。その後、この試料中のポリペプチドとこの抗体が結合することにより形成される複合体の存在または量を示すシグナルが発生する。その後、このシグナルは、この試料中のバイオマーカーの存在または量と関連する。バイオマーカーの検出および解析のための多数の方法および装置が当業者に周知である。例えば、米国特許第６，１４３，５７６号、同第６，１１３，８５５号、同第６，０１９，９４４号、同第５，９８５，５７９号、同第５，９４７，１２４号、同第５，９３９，２７２号、同第５，９２２，６１５号、同第５，８８５，５２７号、同第５，８５１，７７６号、同第５，８２４，７９９号、同第５，６７９，５２６号、同第５，５２５，５２４号、および同第５，４８０，７９２号、ならびにＴｈｅ
Ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ Ｈａｎｄｂｏｏｋ,Ｄａｖｉｄ Ｗｉｌｄ,ｅｄ.Ｓｔｏｃｋｔｏｎ Ｐｒｅｓｓ,Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ,１９９４を参照されたい。これらの各々は、全ての表、図および特許請求の範囲を含めて、参照によりその全体が本明細書に組込まれる。
【００８２】
当業で知られるこれらのアッセイ装置および方法は、様々なサンドイッチアッセイ、競合アッセイ、または非競合アッセイの形式で標識分子を利用し、所望のバイオマーカーの存在または量と関連するシグナルを発生することができる。適切なアッセイ形式には、クロマトグラフ法、質量分析法、およびタンパク質「ブロッティング」法も含まれる。さらに、標識分子を必要とせず、かかるバイオセンサーおよび光学イムノアッセイなどの特定の方法および装置を用いて、検体の存在または量を決定してもよい。例えば、米国特許第５，６３１，１７１号、および同第５，９５５，３７７号明細書を参照されたい。これらの各々は、全ての表、図および特許請求の範囲を含めて、参照によりその全体が本明細書に組込まれる。ベックマン社のＡＣＣＥＳＳ（登録商標）、アボット社のＡＸＳＹＭ（登録商標）、ロッシュ社のＥＬＥＣＳＹＳ（登録商標）、デイドベーリング社のＳＴＲＡＴＵＳ（登録商標）のシステムを含むがそれらに限定されないロボット計測手段は、イムノアッセイを実行することができるイムノアッセイ分析器に含まれることも当業者は理解する。しかし、任意の適切なイムノアッセイは、例えば、酵素結合イムノアッセイ（ＥＬＩＳＡ）、ラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）、競合結合アッセイなどを利用してもよい。
【００８３】
抗体または他のポリペプチドを、アッセイにおいて使用するための様々な固形支持体上に固定化してもよい。特異的結合メンバーを固定化するために使用され得る固相は、固相結合アッセイの固相として開発および／または使用される固相を含む。適切な固相の例として、メンブランフィルター、セルロースベースのペーパー紙、（重合体、ラテックス、常磁性の粒子を含む）ビーズ、グラス、シリコンウエハー、微小粒子、ナノ粒子、ＴｅｎｔａＧｅｌ、ＡｇｒｏＧｅｌ、ＰＥＧＡゲル、ＳＰＯＣＣゲルならびにマルチウェルプレートが挙げられる。アッセイの条片（ｓｔｒｉｐ）を、固形支持体上のアレイに抗体または複数の抗体をコーティングすることにより調製することができる。その後、この条片を試験試料に浸し、洗浄および検出ステップを経て迅速に処理し、有色点などの測定可能なシグナルを発生させることができる。抗体または他のポリペプチドを、アッセイ装置表面に直接結合させるか、または間接的に結合させるかのいずれかにより、アッセイ装置の特異的ゾーンに結合させてもよい。後者の例において、抗体または他のポリペプチドを、粒子または他の固形支持体上に固定化してもよく、その固形支持体をこの装置表面に固定化してもよい。
【００８４】
生物アッセイは検出法を必要とし、結果の定量化の最も一般的な方法の１つは、試験している生物システム中の成分の１つに親和性を有するタンパク質または核酸に、検出可能な標識を結合させることである。検出可能な標識には、それ自体検出可能な（例えば、蛍光部分、電気化学標識、金属キレートなどの）分子、および検出可能な反応生成物（例えば、西洋ワサビペルオキシダーゼ、アルカリホスファターゼなどの酵素）の産生によって、またはそれ自体検出可能である特異的結合分子（例えば、ビオチン、ジゴキシゲニン、マルトース、オリゴヒスチジン、２，４−ジニトロベンゼン、フェニルヒ酸、ｓｓＤＮＡ、ｄｓＤＮＡなど）によって間接的に検出され得る分子が含まれ得る。
【００８５】
固相および検出可能な標識複合体の調製には、多くの場合、化学的架橋剤の使用が含まれる。クロスリンク試薬には少なくとも２つの反応基が含まれ、一般的に、（同一の反応基を含む）同種官能性クロスリンカーおよび（同一ではない反応基を含む）異種官能性クロスリンカーに分けられる。アミン、スルフヒドリル基を介して結合するか、または非特異的に反応する同種二機能性クロスリンカーは、多くの商業的供給源から入手可能である。マレイミド、アルキルおよびアリールハロゲン化物、α−ハロアシル、ピリジルジスルフィドは、チオール反応基である。マレイミド、アルキルおよびアリールハロゲン化物、およびα−ハロアシルはスルフヒドリル基と反応し、チオールエーテル結合を形成するが、ピリジルジスルフィドはスルフヒドリル基と反応し、混合ジスルフィドを産生する。このピリジルジスルフィド産物は切断可能である。イミドエステルは、タンパク質−タンパク質クロスリンクにも非常に有用である。成功する結合に対して異なる性質を各々組み合わせている、様々な異種二機能性クロスリンカーが市販されている。
【００８６】
特定の態様において、本発明は、β２糖タンパク質１マーカー、および任意に１つ以上の他のマーカーの解析のためのキットを提供する。このキットは、β２糖タンパク質１マーカーと結合する少なくとも１種類の抗体を含む少なくとも１種類の試験試料の解析のための試薬類を含む。このキットは、本明細書記載の診断および／または予後の相関のうちの１つ以上を行う装置および使用説明書も含み得る。好ましいキットには、検体について、サンドイッチアッセイを実行するための抗体ペア、または競合アッセイを実行するための標識種が含まれるであろう。抗体ペアは、固相に結合する一次抗体および検出可能な標識に結合する二次抗体を含むことが好ましく、この一次および二次抗体の各々は、β２糖タンパク質１と結合する。これらの抗体の各々は、モノクローナル抗体であることが最も好ましい。このキットを使用するための、および相関を行うための使用説明書はラベルの形式で存在することができ、このラベルは、その製造、輸送、販売または使用の期間のいかなる時にも、キットに付着しているか、またはそうでなければ、キットに伴う任意の記入または記録された資料を表す。例えば、ラベルという用語は、広告ビラおよびパンフレット、包装材料、使用説明書、オーディオまたはビデオカセット、コンピューターディスク、および直接キットにインプリントされた文書を包含する。
【００８７】
β２糖タンパク質１抗体
本明細書で使用する「抗体」という用語は、抗原またはエピトープと特異的に結合することができる免疫グロブリン遺伝子もしくは複数の免疫グロブリン遺伝子、もしくはその断片に由来する、それらを手本にするまたはそれらによって実質的にコードされるペプチドもしくはポリペプチドを表す。例えば、Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ
Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ,３ｒｄ Ｅｄｉｔｉｏｎ,Ｗ.Ｅ.Ｐａｕｌ,ｅｄ.,Ｒａｖｅｎ Ｐｒｅｓｓ,Ｎ.Ｙ.（１９９３）；Ｗｉｌｓｏｎ（１９９４；Ｊ.Ｉｍｍｕｎｏｌ.Ｍｅｔｈｏｄｓ １７５：２６７−２７３；Ｙａｒｍｕｓｈ（１９９２）Ｊ.Ｂｉｏｃｈｅｍ.Ｂｉｏｐｈｙｓ.Ｍｅｔｈｏｄｓ
２５：８５−９７を参照されたい。抗体という用語は，抗原に結合する能力を保有する抗原結合部分、すなわち「抗原結合部位」（例えば、断片、サブシーケンス、相補性決定領域（ＣＤＲ））を含み、（ｉ）ＶＬ、ＶＨ、ＣＬおよびＣＨ１ドメインからなる一価の断片であるＦａｂ断片；（ｉｉ）ヒンジ領域においてジスルフィド架橋によって結合される２つのＦａｂ断片からなる二価の断片であるＦ（ａｂ’）２断片；（ｉｉｉ）ＶＨおよびＣＨ１ドメインからなるＦｄ断片；（ｉｖ）抗体の単一アームのＶＬおよびＶＨドメインからなるＦｖ断片；（ｖ）ＶＨドメインからなるｄＡｂ断片（Ｗａｒｄ
ｅｔ ａｌ.,（１９８９） Ｎａｔｕｒｅ ３４１：５４４−５４６）ならびに（ｖｉ）単離された相補性決定領域（ＣＤＲ）を含む。一本鎖抗体も、参照により「抗体」という用語に含まれる。
【００８８】
本明細書記載のイムノアッセイにおいて使用する抗体は、β２糖タンパク質１に特異的に結合することが好ましい。「特異的に結合する」という用語は、抗体は、上記のように、その抗体が結合する（１つまたは複数の）エピトープを提示する任意のポリペプチドと結合するので、抗体は、その指定された標的と独占的に結合するということを示すようには意図しない。むしろ、適切な（１つまたは複数の）エピトープを提示しない非標的分子に対する親和性と比較した時、抗体の指定された標的に対する親和性が約５倍を超える場合、抗体は「特異的に結合する」。非標的分子に対する親和性よりも標的分子に対する抗体の親和性は、好ましくは少なくとも約５倍を超える、好ましくは１０倍を超える、より好ましくは２５倍を超える、さらにより好ましくは５０倍を超える、最も好ましくは１００倍以上であろう。好ましい実施形態において、好ましい抗体は少なくとも約１０７Ｍ−１の親和性、好ましくは約１０８Ｍ−１〜約１０９Ｍ−１の間の親和性、約１０９Ｍ−１〜約１０１０Ｍ−１の間の親和性、または約１０１０Ｍ−１〜約１０１２Ｍ−１の間の親和性で結合する。
【００８９】
親和性は、Ｋｄ＝ｋｏｆｆ／ｋｏｎ（ｋｏｆｆは解離速度定数であり、ｋｏｎは会合速度定数であり、ｋｄは平衡定数である）として計算される。親和性を、様々な濃度（ｃ）における標識リガンドの結合の割合（ｆｒａｃｔｉｏｎ
ｂｏｕｎｄ）（ｒ）を測定することによって、平衡状態で決定することができる。スキャッチャード方程式：ｒ／ｃ＝Ｋ（ｎ−ｒ）（式中、ｒ＝平衡状態における結合リガンドのモル／受容体のモル；ｃ＝平衡状態における遊離リガンド濃度；Ｋ＝平衡結合定数；およびｎ＝１つの受容体分子あたりのリガンド結合部位の数）を用いて、これらのデータをグラフにする。グラフ解析により、ｒ／ｃをＹ軸上にプロットするのに対して、ｒをＸ軸上にプロットし、このようにして、スキャッチャードプロットを作成する。スキャッチャード解析による抗体親和性測定法は当業で周知である。例えば、ｖａｎ
Ｅｒｐ ｅｔ ａｌ.,Ｊ.Ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ １２：４２５−４３,１９９１；Ｎｅｌｓｏｎ ａｎｄ Ｇｒｉｓｗｏｌｄ,Ｃｏｍｐｕｔ.Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｐｒｏｇｒａｍｓ Ｂｉｏｍｅｄ.２７：６５−８,１９８８を参照されたい。
【００９０】
「エピトープ」という用語は、抗体に特異的に結合することができる抗原決定基を表す。エピトープは、大抵、アミノ酸または糖の側鎖などの分子の化学的な活性表面集団からなり、大抵、特定の３次元構造の特性および、特定の電荷特性を有する。立体構造エピトープおよび非立体構造エピトープを、変性溶媒の存在下で、前者との結合を失うが後者との結合は失わないという点において区別する。
【００９１】
多数の刊行物が、選択される検体に結合するポリペプチドのライブラリーを作製し、スクリーニングを行うファージディスプレイ法の使用について論じている。例えば、Ｃｗｉｒｌａ
ｅｔ ａｌ.,Ｐｒｏｃ.Ｎａｔｌ.Ａｃａｄ.Ｓｃｉ.ＵＳＡ
８７,６３７８−８２,１９９０；Ｄｅｖｌｉｎ ｅｔ ａｌ.,Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４９,４０４−６,１９９０,Ｓｃｏｔｔ ａｎｄ Ｓｍｉｔｈ,Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４９,３８６−８８,１９９０；およびＬａｄｎｅｒらの米国特許第５，５７１，６９８号明細書を参照されたい。ファージディスプレイ法の基本概念は、スクリーニングされるポリペプチドをコードするＤＮＡとこのポリペプチドとの間の物理的結合の確立である。この物理的結合は、このポリペプチドをコードするファージゲノムを封入するカプシドの一部としてポリペプチドを提示するファージ粒子によってもたらされる。ポリペプチドとそれらの遺伝物質との間の物理的結合の確立は、異なるポリペプチドを有する非常に多数のファージの同時マススクリーニングを可能にする。標的に対する親和性を有するポリペプチドを提示するファージはこの標的に結合し、これらのファージを、この標的に対する親和性スクリーニングによって濃縮する。これらのファージから提示されるポリペプチドの同一性を、それらのそれぞれのゲノムから決定することができる。その後、これらの方法を用いて、所望の標的に対する結合親和性を有するとして同定されるポリペプチドを、常法により、大量に合成することができる。例えば、米国特許第６，０５７，０９８号明細書を参照されたい。これは、全ての表、図および特許請求の範囲を含めて、その全体が本明細書に組込まれる。
【００９２】
その後、これらの方法によって産生される抗体を、所望の精製ポリペプチドとの親和性および特異度について最初にスクリーニングし、必要であれば、これらの結果を、結合から排除されることが望まれるポリペプチドとの抗体の親和性および特異度を比較することによって選択してもよい。このスクリーニング手順は、マイクロタイタープレートの別々のウェルに、精製ポリペプチドを固定化することを含み得る。その後、有望な抗体または抗体群を含む溶液を、それぞれのマイクロタイターウェルに入れ、約３０分〜２時間の間インキュベートする。その後、このマイクロタイターウェルを洗浄し、標識二次抗体（例えば、産生される抗体がマウス抗体である場合、アルカリホスファターゼに結合した抗マウス抗体）をこれらのウェルに添加し、約３０分間インキュベートし、その後洗浄する。基質をこれらのウェルに添加し、（１つまたは複数の）固定化ポリペプチドに対する抗体が存在する場合、呈色反応が現れる。
【００９３】
その後、そのように同定される抗体を、選択されるアッセイデザインにおいて親和性および特異度についてさらに解析をしてもよい。標的タンパク質のイムノアッセイの開発において、選択された抗体を用いて、イムノアッセイの感度および特異度を判断するために、精製標的タンパク質は標準物質として作用する。様々な抗体の結合親和性は異なり、（例えば、サンドイッチアッセイにおいて）特定の抗体ペアは立体的にお互い干渉し得るなどの理由により、抗体アッセイの性能は、抗体の絶対的な親和性および特異度よりも重要な尺度であり得る。
【００９４】
アッセイの相関
β２糖タンパク質１などのバイオマーカーの使用に関して本明細書で使用する「相関する」という用語は、患者における（１つまたは複数の）バイオマーカーの存在または量を、ある病気を患っていると知られている、もしくはある病気を患うリスクのあることが知られているヒト、またはある病気にかかっていないことが知られているヒトにおけるその存在または量とを比較することを表す。多くの場合、これは、バイオマーカー濃度の形式のアッセイ結果と、疾患の発生もしくは不発生またはある将来的な予後の可能性を示すと選択される所定の閾値とを比較する形式をとる。
【００９５】
診断の閾値を選択することには、とりわけ、疾患の可能性の考慮、異なる試験の閾値における正確な診断と正確ではない診断の分配、診断に基づく治療（もしくは治療ができないこと）の結果の予測が含まれる。例えば、非常に有効であり、リスクのレベルが低い特異的治療を施すことを考慮する時、臨床医は実質的な診断の不確実性を容認することができるので、試験を必要としない。一方、治療選択は効果がなく、リスクが高い状況において、多くの場合、臨床医は、程度の高い診断の確実性を必要とする。したがって、費用／有益な解析には、診断の閾値を選択することが含まれる。
【００９６】
適切な閾値を、様々な方法で決定することができる。例えば、心臓トロポニンを用いる急性心筋梗塞の診断のための１つの推奨される診断の閾値は、健常集団において見られる濃度の９７．５％である。別の方法では、同じ患者の一連の試料を調べて、事前のベースラインの結果を用いて、バイオマーカーレベルの一時的な変化を監視してもよい。
【００９７】
集団研究も用いて、判定閾値を選択してもよい。受信者動作特性（「ＲＯＣ」）は、第二次世界大戦中に、レーダー画像解析のために開発されたシグナル検出理論の分野から生じ、多くの場合、ＲＯＣ解析を用いて、「病気の」亜集団と「無病の」亜集団とを一番有効に区別することができる閾値を選択する。この場合の偽陽性は、ヒトの試験結果は陽性であるが、実際には病気ではない時に起こる。一方、偽陰性は、ヒトの試験結果は陰性であり、健常であると示唆されるが、実際には疾患を有する時に起こる。判定閾値が絶えず変化するので、ＲＯＣ曲線を描くために、真陽性率（ＴＰＲ）および偽陽性率（ＦＰＲ）を決定する。ＴＰＲは感度と同等のものであり、ＦＰＲは１−特異度と同等であるので、ＲＯＣグラフは、時々、感度対（１−特異度）のプロットと呼ばれる。完璧な試験では、ＲＯＣ曲線下の面積は１．０であり、ランダムな試験では、面積は０．５であろう。閾値を、特異度および感度の許容レベルをもたらすように選択する。
【００９８】
この文脈において、「病気の」（亜集団）とは、１つの特徴（疾患もしくは病気の存在またはある予後の発生）を有する集団を表すことを意味し、「無病の」（亜集団）とは、その特徴を欠く集団を表すことを意味する。単一の判定閾値は、かかる方法の最も単純な適用であるが、複数の判定閾値を使用してもよい。例えば、第一の閾値を下回る場合、比較的高い信頼度で疾患が存在しないと割り当てることができ、また、第二の閾値を超える場合、比較的高い信頼度で疾患の存在を割り当てることができる。２つの閾値の間は、確定できないと考えることができる。これは、実際、単なる例であることを意味する。
【００９９】
閾値の比較に加えて、アッセイ結果を患者の分類（疾患の発生もしくは不発生、予後の可能性など）と相関させる他の方法には、決定木、ルールのセット、ベイズ法、およびニューラル・ネットワーク法が含まれる。これらの方法は、対象が多数の分類から外れて１つの分類に属する程度を表す確立値を生み出すことができる。
【０１００】
試験精度の尺度を、Ｆｉｓｃｈｅｒ ｅｔ ａｌ.,Ｉｎｔｅｎｓｉｖｅ
Ｃａｒｅ Ｍｅｄ.２９：１０４３−５１,２００３に記載のように取得してもよく、これらを用いて、所定のバイオマーカーの有効性を決定してもよい。これらの尺度には、感度および特異度、予測値、尤度比、診断オッズ比、およびＲＯＣ曲線面積が含まれる。ＲＯＣプロットの曲線下の面積（「ＡＵＣ」）は、分類指標が、ランダムに選択される陰性の場合よりも、ランダムに選択される陽性の場合を高く位置づける可能性に等しい。ＲＯＣ曲線下の面積は、２つのグループが連続データである場合を考慮する、２つのグループ間において得られるスコア間の中央値の違いについて検定をするマン・ホイットニーＵ検定、またはランクのウィルコクソン検定と同等であると考えられ得る。
【０１０１】
上記で論じたように、適切な検定は、これらの様々な尺度に関する以下の結果のうちの１つ以上を示し得る：０．５を超える、好ましくは少なくとも０．６、より好ましくは少なくとも０．７、さらにより好ましくは少なくとも０．８、さらにより好ましくは少なくとも０．９、最も好ましくは少なくとも０．９５の特異度、および０．２を超える、好ましくは０．３を超える、より好ましくは０．４を超える、さらにより好ましくは少なくとも０．５、さらにより好ましくは０．６、さらにより好ましくは０．７を超える、さらにより好ましくは０．８を超える、より好ましくは０．９を超える、最も好ましくは０．９５を超える対応する感度；０．５を超える、好ましくは少なくとも０．６、より好ましくは少なくとも０．７、さらにより好ましくは少なくとも０．８、さらにより好ましくは少なくとも０．９、最も好ましくは少なくとも０．９５の感度、および、０．２を超える、好ましくは０．３を超える、より好ましくは０．４を超える、さらにより好ましくは少なくとも０．５、さらにより好ましくは０．６、さらにより好ましくは０．７を超える、さらにより好ましくは０．８を超える、より好ましくは０．９を超える、最も好ましくは０．９５を超える対応する特異度；少なくとも７５％特異度と組み合わせて少なくとも７５％の感度；０．５を超える、好ましくは少なくとも０．６、より好ましくは０．７、さらにより好ましくは少なくとも０．８、さらにより好ましくは少なくとも０．９、最も好ましくは少なくとも０．９５のＲＯＣ曲線面積；１とは異なり、好ましくは少なくとも約２以上もしくは約０．５以下、より好ましくは少なくとも約３以上もしくは約０．３３以下、さらにより好ましくは少なくとも約４以上もしくは約０．２５以下、さらにより好ましくは少なくとも約５以上もしくは約０．２以下、最も好ましくは少なくとも約１０以上もしくは約０．１以下のオッズ比；１を超える、少なくとも約２、より好ましくは少なくとも約３、さらにより好ましくは少なくとも約５、最も好ましくは少なくとも約１０の（感度／（１−特異度）として計算される）陽性尤度比；または１より低い、約０．５以下、より好ましくは約０．３以下、最も好ましくは約０．１以下の（１−感度／特異度として計算される）陰性尤度比。
【０１０２】
追加の臨床的徴候を、本発明のβ２糖タンパク質１アッセイの結果と組み合わせてもよい。これらには、腎臓の状態と関連する他のバイオマーカーが含まれる。一般的なバイオマーカー名、続いてそのバイオマーカーまたはその親のＳｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔ登録番号を記載する以下のものが、例として含まれる：アクチン（Ｐ６８１３３）、アデノシンデアミナーゼ結合タンパク質（ＤＰＰ４、Ｐ２７４８７）、α１−酸性糖タンパク質１（Ｐ０２７６３）、α１ミクログロブリン（Ｐ０２７６０）、アルブミン（Ｐ０２７６８）、アンジオテンシノゲナーゼ（Ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎｏｇｅｎａｓｅ）（レニン、Ｐ００７９７）、アネキシンＡ２（Ｐ０７３５５）、β−グルクロニダーゼ（Ｐ０８２３６）、β２ミクログロブリン（Ｐ６１６７９）、β−ガラクトシダーゼ（Ｐ１６２７８）、ＢＭＰ−７（Ｐ１８０７５）、脳性ナトリウム利尿ペプチド（ｐｒｏＢＮＰ、ＢＮＰ−３２、ＮＴｐｒｏＢＮＰ；Ｐ１６８６０）、カルシウム結合タンパク質β（Ｓ１００−β、Ｐ０４２７１）、炭酸脱水酵素（Ｑ１６７９０）、カゼインキナーゼ２（Ｐ６８４００）、カテプシンＢ（Ｐ０７８５８）、セルロプラスミン（Ｐ００４５０）、クラスタリン（Ｐ１０９０９）、補体Ｃ３（Ｐ０１０２４）、システインリッチタンパク質（ＣＹＲ６１、Ｏ００６２２）、シトクロムＣ（Ｐ９９９９９）、上皮細胞増殖因子（ＥＧＦ、Ｐ０１１３３）、エンドセリン−１（Ｐ０５３０５）、エキソソームフェチュイン−Ａ（Ｅｘｏｓｏｍａｌ
Ｆｅｔｕｉｎ−Ａ）（Ｐ０２７６５）、脂肪酸結合タンパク質、心臓（ＦＡＢＰ３、Ｐ０５４１３）、脂肪酸結合タンパク質、肝臓（Ｐ０７１４８）、フェリチン（軽鎖、Ｐ０２７９３；重鎖、Ｐ０２７９４）、フルクトース−１，６−ビスホスファターゼ（Ｐ０９４６７）、ＧＲＯ−α（ＣＸＣＬ１、（Ｐ０９３４１）、成長ホルモン（Ｐ０１２４１）、肝細胞増殖因子（Ｐ１４２１０）、インスリン様成長ホルモンＩ（Ｐ０１３４３）、免疫グロブリンＧ、免疫グルブリン軽鎖（κおよびλ）、インターフェロンγ（Ｐ０１３０８）、リゾチーム（Ｐ６１６２６）、インターロイキン−１α（Ｐ０１５８３）、インターロイキン−２（Ｐ６０５６８）、インターロイキン−４（Ｐ６０５６８）、インターロイキン−９（Ｐ１５２４８）、インターロイキン−１２ｐ４０（Ｐ２９４６０）、インターロイキン−１３（Ｐ３５２２５）、インターロイキン−１６（Ｑ１４００５）、Ｌ１細胞接着分子（Ｐ３２００４）、乳酸脱水素酵素（Ｐ００３３８）、ロイシンアミノペプチダーゼ（Ｐ２８８３８）、メプリンＡ−αサブユニット（Ｑ１６８１９）、メプリンＡ−βサブユニット（Ｑ１６８２０）、ミッドカイン（Ｐ２１７４１）、ＭＩＰ２−α（ＣＸＣＬ２、Ｐ１９８７５）、ＭＭＰ−２（Ｐ０８２５３）、ＭＭＰ−９（Ｐ１４７８０）、ネトリン−１（Ｏ９５６３１）、中性エンドペプチダーゼ（Ｐ０８４７３）、オステオポンチン（Ｐ１０４５１）、腎乳頭抗原１（ＲＰＡ１）、腎乳頭抗原２（ＲＰＡ２）、レチノール結合タンパク質（Ｐ０９４５５）、リボヌクレアーゼ、Ｓ１００カルシウム結合タンパク質Ａ６（Ｐ０６７０３）、血清アミロイドＰ成分（Ｐ０２７４３）、ナトリウム／水素交換アイソフォーム（ＮＨＥ３、Ｐ４８７６４）、スペルミジン／スペルミンＮ１−アセチルトランスフェラーゼ（Ｐ２１６７３）、ＴＧＦ−β１（Ｐ０１１３７）、トラスフェリン（Ｐ０２７８７）、トレフォイル因子３（ＴＦＦ３、Ｑ０７６５４）、Ｔｏｌｌ様タンパク質４（Ｏ００２０６）、総タンパク質、尿細管間質性腎炎抗原（Ｑ９ＵＪＷ２）、ウロモジュリン（タム−ホースフォールタンパク質、Ｐ０７９１１）。
【０１０３】
リスク層化を目的として、アディポネクチン（Ｑ１５８４８）、アルカリホスファターゼ（Ｐ０５１８６）、アミノペプチダーゼＮ（Ｐ１５１４４）、カルビンジンＤ２８ｋ（Ｐ０５９３７）、シスタチンＣ（Ｐ０１０３４）、Ｆ１ＦＯ
ＡＴＰ分解酵素の８サブユニット（Ｐ０３９２８）、γ−グルタミルトランスフェラーゼ（Ｐ１９４４０）、ＧＳＴａ（α−グルタチオン−Ｓ−トランスフェラーゼ、Ｐ０８２６３）、ＧＳＴｐｉ(グルタチオン−Ｓ−トランスフェラーゼＰ、ＧＳＴクラス−ｐｉ、Ｐ０９２１１)、ＩＧＦＢＰ−１（Ｐ０８８３３）、ＩＧＦＢＰ−２（Ｐ１８０６５）、ＩＧＦＢＰ−６（Ｐ２４５９２）、内在性膜タンパク質１（Ｉｔｍ１、Ｐ４６９７７）、インターロイキン−６（Ｐ０５２３１）、インターロイキン−８（Ｐ１０１４５）、インターロイキン−１８（Ｑ１４１１６）、ＩＰ−１０（１０ｋＤａのインターフェロン−γ−誘導タンパク質、Ｐ０２７７８）、ＩＲＰＲ（ＩＦＲＤ１、Ｏ００４５８）、イソバレリル−ＣｏＡ脱水素酵素（ＩＶＤ、Ｐ２６４４０）、Ｉ−ＴＡＣ／ＣＸＣＬ１１（Ｏ１４６２５）、ケラチン１９（Ｐ０８７２７）、Ｋｉｍ−１(Ａ型肝炎ウイルス細胞受容体１、Ｏ４３６５６)、Ｌ−アルギニン：グリシンアミジノトランスフェラーゼ（Ｐ５０４４０）、レプチン（Ｐ４１１５９）、リポカリン２（ＮＧＡＬ、Ｐ８０１８８）、ＭＣＰ−１（Ｐ１３５００）、ＭＩＧ（γ−インターフェロン誘導モノカインＱ０７３２５)、ＭＩＰ−１ａ（Ｐ１０１４７）、ＭＩＰ−３ａ（Ｐ７８５５６）、ＭＩＰ−１β（Ｐ１３２３６）、ＭＩＰ−１ｄ（Ｑ１６６６３）、ＮＡＧ（Ｎ−アセチル−β−Ｄ−グルコサミニダーゼ、Ｐ５４８０２）、有機イオン輸送体（ＯＣＴ２、Ｏ１５２４４）、オステオプロテジェリン（Ｏ１４７８８）、Ｐ８タンパク質（Ｏ６０３５６）、プラスミノーゲン活性化因子阻害剤１（ＰＡＩ−１、Ｐ０５１２１）、ＰｒｏＡＮＰ（１−９８）（Ｐ０１１６０）、タンパク質ホスファターゼ１−β（ＰＰＩ−β、Ｐ６２１４０）、Ｒａｂ
ＧＤＩ−β（Ｐ５０３９５）、腎カリクレイン（Ｑ８６Ｕ６１）、内在性膜タンパク質のＲＴ１.Ｂ−１（α）鎖（Ｑ５Ｙ７Ａ８）、可溶性腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリーメンバー１Ａ（ｓＴＮＦＲ−Ｉ、Ｐ１９４３８）、可溶性腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリーメンバー１Ｂ（ｓＴＮＦＲ−ＩＩ、Ｐ２０３３３）、メタロプロテイナーゼ３の組織阻害剤（ＴＩＭＰ−３、Ｐ３５６２５）、ｕＰＡＲ（Ｑ０３４０５）を、本発明のβ２糖タンパク質１のアッセイ結果と組み合わせてもよい。
【０１０４】
本発明のβ２糖タンパク質１のアッセイ結果と組み合わせてもよい他の臨床的徴候には、人口学的情報（例えば、体重、性別、年齢、人種）、病歴（例えば、家族の病歴、手術の種類、動脈瘤、鬱血性心不全、子癇前症、子癇、真性糖尿病、高血圧、冠動脈疾患、タンパク尿、腎不全、もしくは敗血症など以前から存在する疾患、ＮＳＡＩＤ、シクロスポリン、タクロリムス、アミノグリコシド、フォスカネット、エチレングリコール、ヘモグロビン、ミオグロビン、イホスファミド、重金属、メトトレキサート、放射線造影剤、もしくはストレプトゾトシンなどの毒物曝露の種類）、臨床的変数（例えば、血圧、温度、呼吸速度）、リスクスコア（ＡＰＡＣＨＥスコア、ＰＲＥＤＩＣＴスコア、ＵＡ／ＮＳＴＥＭＩのＴＩＭＩリスクスコア、フラミンガムリスクスコア）、糸球体濾過量、推定糸球体濾過量、尿生産率、血清もしくは血漿のクレアチニン濃度、腎乳頭抗原１（ＲＰＡ１）測定、腎乳頭抗原２（ＲＰＡ２）測定、尿クレアチニン濃度、ナトリウムの分画排泄率、尿ナトリウム濃度、血清もしくは血漿のクレアチニンに対する尿クレアチニンの比、尿比重、尿浸透圧、血漿の尿素窒素に対する尿の尿素窒素の比、クレアチニンに対する血漿ＢＵＮの比、および／または尿ナトリウム／（尿クレアチニン／血漿クレアチニン）として計算される腎不全の指標が含まれる。β２糖タンパク質１のアッセイ結果と組み合わせてもよい腎機能の他の尺度は、本明細書の以下に、およびＨａｒｒｉｓｏｎ’ｓ
Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ｏｆ Ｉｎｔｅｒｎａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ,１７ｔｈ Ｅｄ.,ＭｃＧｒａｗ Ｈｉｌｌ,Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ,ｐａｇｅｓ １７４１−１８３０,ならびにＣｕｒｒｅｎｔ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ＆Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ
２００８,４７ｔｈ Ｅｄ,ＭｃＧｒａｗ Ｈｉｌｌ,Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ,ｐａｇｅｓ ７８５−８１５に記載されている。これらの各々は、参照によりその全体が本明細書に組込まれる。
【０１０５】
このようなアッセイ結果／臨床的徴候の組み合わせは、多変数ロジスティック回帰、対数線形モデル、ニューラル・ネットワーク解析、ｎ／ｍ解析、ディシジョンツリー解析などの使用を含み得る。このリストは、限定するようには意図しない。
【０１０６】
急性腎不全の診断
上記のように、本明細書で使用する「急性腎（または腎臓）損傷」および「急性腎（または腎臓）不全」という用語を、ベースライン値からの血清クレアチニンの変化に関して、ある程度定義する。ＡＲＦのほとんどの定義は、血清クレアチニンおよび、多くの場合、尿排出量の使用を含む共通事項を有する。この比較において使用する腎機能の利用できるベースラインを測定することなく、腎機能障害を有する患者が存在し得る。かかる事象において、最初に、患者が正常なＧＦＲを有すると想定することにより、ベースラインの血清クレアチニンの値を推定することができる。糸球体濾過量（ＧＦＲ）は、単位時間あたりの腎（腎臓）糸球体毛細血管からボーマン嚢に濾過される液体の体積である。血液中に安定したレベルで存在し、腎臓によって自由に濾過されるが、再吸収または分泌のいずれも起こらない任意の化学物質を測定することにより、糸球体濾過量（ＧＦＲ）を計算することができる。典型的には、ＧＦＲをｍｌ／分の単位で表す。
【０１０７】
【数１】
【０１０８】
体表面積に対するＧＦＲの正規化によって、約１．７３ｍ２あたり約７５−１００ｍｌ／分のＧＦＲが想定され得る。したがって、測定される割合は、計算される血液量に由来する尿中の物質の量である。
【０１０９】
糸球体濾過量（ＧＦＲまたはｅＧＦＲ）を計算または推定するために用いられるいくつかの異なる技術がある。しかし、診療においては、クレアチニン・クリアランスを用いてＧＦＲを測定する。クレアチニンは体内で自然に作られる（クレアチニンは、筋肉内で見出されるクレアチンの代謝物である）。クレアチニンは糸球体で自由に濾過され、非常に少量が尿細管によって能動的に分泌され、それにより、クレアチニン・クリアランスが実際のＧＦＲを１０〜２０％過剰評価する。この誤差の範囲は、クレアチニン・クリアランスが測定される容易さを考慮すると許容できる。
【０１１０】
クレアチニンの尿中濃度の値（ＵＣｒ）、尿流量（Ｖ）、およびクレアチニンの血漿濃度（ＰＣｒ）の値が分かっている場合、クレアチニン・クリアランス（ＣＣｒ）を計算することができる。尿中濃度と尿流量の積はクレアチニンの排出量をもたらすので、クレアチニン・クリアランスは、クレアチニン排出量（ＵＣｒ×Ｖ）をクレアチニン血漿濃度で割ったものとも言われる。これらは、一般に、以下のように、数学的に表される。
【０１１１】
【数２】
【０１１２】
一般的に、１日目の朝の空の膀胱から、次の日の朝の膀胱の容量までの２４時間の採尿が行われ、その後、血液の比較試験が行われる。
【０１１３】
【数３】
【０１１４】
異なるサイズを有するヒト間での結果の比較を可能にするために、多くの場合、ＣＣｒは体表面積（ＢＳＡ）について補正され、平均サイズを有するヒトと比較して、ｍｌ／分／１．７３ｍ２として表される。ほとんどの成人は、１．７（１．６〜１．９）に近いＢＳＡを有するが、極度の肥満または極度に細い患者は、かれらの実際のＢＳＡについて補正されたＣＣｒを有するべきである。
【０１１５】
【数４】
【０１１６】
（収集が完全である時でさえ、）糸球体濾過量（ＧＦＲ）が低下するにつれて、クレアチニン分泌が増加し、それ故に、血清クレアチニンの上昇はより少なくなるので、クレアチニン・クリアランス測定の精度は制限される。したがって、クレアチニン排出は、濾過した量よりもはるかに多くなり、ＧＦＲの潜在的に大きい過剰評価（２倍と同じくらいの違い）をもたらす。しかし、臨床目的には、腎機能が安定か、または徐々に悪くなるか、もしくは良くなるかどうかを決定することが重要である。多くの場合、これを、血清クレアチニンのみを監視することにより決定する。クレアチニン・クリアランスのように、血清クレアチニンは、ＡＲＦの非定常状態の条件において、ＧＦＲを正確に反映するものではないだろう。それにもかかわらず、血清クレアチニンがベースラインから変化する割合は、ＧＦＲの変化を反映するであろう。血清クレアチニンは、容易に、簡単に測定され、腎機能に特異的である。
【０１１７】
ｍＬ／ｋｇ／ｈｒに基づく尿排出量を決定する目的のために、１時間あたりの採尿および測定が適切である。例えば、累積する２４時間の排出量のみが利用でき、患者の体重が分からない場合において、ＲＩＦＬＥ尿排出量判定基準を少し変更することが記載された。例えば、Ｂａｇｓｈａｗ
ｅｔ ａｌ.,Ｎｅｐｈｒｏｌ.Ｄｉａｌ.Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ.２３：１２０３−１２１０,２００８は、患者の平均体重を７０ｋｇと想定し、以下に基づくＲＩＦＬＥ分類を患者に割り当てる：＜３５ｍＬ／ｈ（リスク）、＜２１ｍＬ／ｈ（損傷）または＜４ｍＬ／ｈ（不全)。
【０１１８】
治療計画の選択
一度診断が確立すると、腎置換療法の開始、腎臓に損傷をあたえると知られる化合物送達の取りやめ、腎臓移植、腎臓に損傷をあたえることが知られる処置の遅延または回避、改良された利尿薬の投与、目標指向の治療の開始などのその診断に適合する治療計画を、臨床医は容易に選択することができる。当業者は、本明細書記載の診断法に関して論じられる多数の疾患の適切な治療を知っている。例えば、Ｍｅｒｃｋ
Ｍａｎｕａｌ ｏｆ Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ａｎｄ Ｔｈｅｒａｐｙ,１７ｔｈ Ｅｄ.Ｍｅｒｃｋ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ,Ｗｈｉｔｅｈｏｕｓｅ
Ｓｔａｔｉｏｎ,ＮＪ,１９９９を参照されたい。さらに、本明細書記載の方法および組成物は予後の情報を提供するので、本発明のマーカーを用いて、治療経過を監視することが可能である。例えば、予後の状態の改善または悪化は、特定の治療が有効であるかまたは有効ではないかを示し得る。
【０１１９】
本発明は目的を実行し、言及した結果および利点、ならびにその中で固有の結果および利点を得るのに十分適することを、当業者は容易に理解する。本明細書に提供される例は、好ましい実施形態を代表するものであり、例示的であり、本発明の範囲に限定されるようには意図しない。
【０１２０】
実施例
実施例１
造影剤腎症試料の収集
この資料収集研究の目的は、血管内への造影剤の投入前後の、患者の血漿および尿の試料ならびに臨床データを収集することである。ヨウ素造影剤の血管内投与を含むＸ線検査／血管造影検査を行う約２５０人の成人を登録する。この研究に登録するためには、各患者は以下の試験対象患者基準の全てを満たさなければならず、かつ以下の試験対象除外基準のいずれも満たしてはいけない：
試験対象患者基準
１８歳以上の男性および女性であること；
造影剤の血管内投与を含む（ＣＴスキャンまたは冠状動脈インターベンションなどの）Ｘ線検査／血管造影検査を行うこと；
造影剤投与後少なくとも４８時間の間は入院することが期待されること；
研究の参加について書面によるインフォームド・コンセントを提出すること、かつ全ての研究手順に従うことができ、かつその意思があること。
試験対象除外基準
腎移植者であること；
造影の手順に先立って、急に腎機能が悪化すること；
（緊急のまたは習慣的に）透析をすでに受けているか、または登録時に透析の切迫した必要性があること；
造影剤投与後４８時間以内に、（例えば、心肺バイパスを含む）大手術、またはさらなる腎損傷のかなりのリスクを有する造影剤による追加の画像診断手順を行うことが期待されること；
試験前３０日以内に実験的治療を伴う介入的臨床研究に参加すること；
ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）または肝炎ウイルスによる感染が判明していること。
【０１２１】
第一の造影剤の投与の直前に（および任意の事前の水和手順の後に）、ＥＤＴＡ抗凝固処理血液試料（１０ｍＬ）および尿試料（１０ｍＬ）を各患者から収集する。その後、血液および尿の試料を、インデックス造影手順の間、最後の造影剤投与後４（±０．５）、８（±１）、２４（±２）、４８（±２）、および７２（±２）時間の時点で収集する。血液を、直接的な静脈穿刺により、または既存の大腿鞘、中心静脈ライン、末梢の静脈ラインもしくはヘップロック（ｈｅｐ−ｌｏｃｋ）などの他に利用可能な静脈アクセスにより収集する。これらの研究の血液試料を、臨床現場で血漿まで処理し、凍結させ、Ａｓｔｕｔｅ
Ｍｅｄｉｃａｌ,Ｉｎｃ.,Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ,ＣＡに輸送する。この研究の尿試料を凍結させ、Ａｓｔｕｔｅ Ｍｅｄｉｃａｌ,Ｉｎｃに輸送する。
【０１２２】
第一の造影剤投与の直前（任意の事前の水和手順の後に）、最後の造影剤投与後４（±０．５）、８（±１）、２４（±２）、４８（±２）、および７２（±２）時間の時点において（理想的には、研究試料を得るのと同時に）、血清クレアチニンをその場で調べる。さらに、各患者の状態を、さらなる血清および尿のクレアチニン測定、透析の必要性、入院状態、および（死亡を含む）有害な臨床予後に関して、３０日間診断する。
【０１２３】
造影剤投与に先立って、各患者に、以下の評価に基づくリスクを割り当てる：収縮期血圧８０ｍｍＨｇ未満＝５ポイント；動脈内バルーンポンプ＝５ポイント；鬱血性心不全（クラスＩＩＩ−ＩＶまたは肺水腫の病歴）＝５ポイント；７５歳を超える年齢＝４ポイント；男性の場合３９％未満のヘマトクリット値、女性の場合３５％未満のヘマトクリット値＝３ポイント；糖尿病＝３ポイント；造影剤の体積＝１００ｍＬごとに１ポイント；１．５ｇ／ｄＬを超える血清クレアチニンレベル＝４ポイントまたは推定ＧＦＲ４０−６０ｍＬ／分／１．７３ｍ２＝２ポイント、２０−４０ｍＬ／分／１．７３ｍ２＝４ポイント、２０ｍＬ／分／１．７３ｍ２未満＝６ポイント。割り当てられるリスクは以下のものである：ＣＩＮまたは透析のリスク：５以下の合計ポイント＝ＣＩＮのリスク−７．５％、透析のリスク−０．０４％；６〜１０の合計ポイント＝ＣＩＮのリスク−１４％、透析のリスク−０．１２％；１１〜１６の合計ポイント＝ＣＩＮのリスク−２６．１％、透析のリスク−１．０９％；１６を超える合計ポイント＝ＣＩＮのリスク−５７．３％、透析のリスク−１２．８％。
【０１２４】
実施例２
心臓外科試料の収集
この資料収集研究の目的は、心臓血管手術（腎臓機能に潜在的に損傷を与えると知られる手術）を受ける前後の、患者の血漿および尿の試料ならびに臨床データを収集することである。かかる手術を受ける約９００人の成人を登録する。この研究に登録するためには、各患者は以下の試験対象患者基準の全てを満たさなければならず、かつ以下の試験対象除外基準のいずれも満たしてはいけない：
試験対象患者基準
１８歳以上の男性および女性であること；
心臓血管手術を行うこと；
腎置換リスクスコアのＴｏｒｏｎｔｏ／Ｏｔｔａｗａ Ｐｒｅｄｉｃｔｉｖｅ Ｒｉｓｋ Ｉｎｄｅｘ（Ｗｉｊｅｙｓｕｎｄｅｒａ
ｅｔ ａｌ.,ＪＡＭＡ ２９７：１８０１−９,２００７）が少なくとも２であること；および
研究の参加について書面によるインフォームド・コンセントを提出すること、かつ全ての研究手順に従うことができ、かつその意思があること。
試験対象除外基準
妊娠が判明していること；
腎移植の前歴があること；
登録に先立って、急に腎機能が悪化すること（例えば、ＲＩＦＬＥ分類のいずれかのカテゴリー）；
（緊急のまたは習慣的に）透析をすでに受けているか、または登録時に透析の切迫した必要性があること：
ＡＫＩのための薬剤注入もしくは治療的介入を伴う心臓手術後７日以内に、別の臨床研究にすぐに登録するか、または別の臨床研究に登録することが期待されること；
ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）または肝炎ウイルスによる感染が判明していること。
【０１２５】
第一の切開前３時間以内に（および任意の事前の水和手順の後に）、ＥＤＴＡ抗凝固処理血液試料（１０ｍＬ）、全血（３ｍＬ）、および尿試料（３５ｍＬ）を各患者から収集する。その後、血液および尿の試料を、この手順後３（±０．５）、６（±０．５）、１２（±１）、２４（±２）および４８（±２）時間の時点で収集し、その後、患者が病院に留まる場合、３日目から７日目まで毎日収集する。血液を、直接的な静脈穿刺により、または既存の大腿鞘、中心静脈ライン、末梢の静脈ラインもしくはヘップロック（ｈｅｐ−ｌｏｃｋ）などの他に利用可能な静脈アクセスにより収集する。これらの研究の血液試料を凍結させ、Ａｓｔｕｔｅ
Ｍｅｄｉｃａｌ,Ｉｎｃ.,Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ,ＣＡに輸送する。この研究の尿試料を凍結させ、Ａｓｔｕｔｅ Ｍｅｄｉｃａｌ,Ｉｎｃに輸送する。
【０１２６】
実施例３
急性疾患の対象の試料の収集
この研究の目的は、急性疾患の患者の試料を収集することである。少なくとも４８時間の間、ＩＣＵにいることが期待される約９００人の成人を登録する。この研究に登録するためには、各患者は以下の試験対象患者基準の全てを満たさなければならず、かつ以下の試験対象除外基準のいずれも満たしてはいけない：
試験対象患者基準
１８歳以上の男性および女性であること；
研究集団１：以下の少なくとも１つを有する約３００人の患者：
ショック状態（９０ｍｍＨｇ未満のＳＢＰおよび ／または６０ｍｍＨｇを超えるＭＡＰを維持するために昇圧剤のサポートの必要性および／または少なくとも４０ｍｍＨｇのＳＢＰの文書化された急降下）；ならびに
敗血症；
研究集団２：以下の少なくとも１つを有する約３００人の患者：
登録の２４時間以内に医師向けコンピューター受注システム（ＣＰＯＥ）で注文したＩＶ構成物質；
登録の２４時間以内の造影剤の曝露；
急性非代償性心不全を伴う腹圧の増加；ならびに
登録後４８時間の間のＩＣＵ入院およびＩＣＵに入院する可能性の主な理由として重症外傷；
研究集団３：約３００人の患者
急性腎損傷（例えば、敗血症、低血圧症／ショック状態（ショック＝９０ｍｍＨｇ未満の収縮期のＢＰおよび／もしくは６０ｍｍＨｇを超えるＭＡＰを維持するために昇圧剤のサポートの必要性および／もしくは４０ｍｍＨｇを超えるＳＢＰの文書化された急降下）、大外傷、大出血、または大手術）のリスクファクターが判明することで救急処置の環境（ＩＣＵまたはＥＤ）を経て入院することが期待されること；
試験対象除外基準
妊娠が判明していること；
施設居住者；
腎移植の前歴があること；
登録に先立って、腎機能の急激な悪化が判明していること（例えば、ＲＩＦＬＥ判定基準のいずれかのカテゴリー）；
登録前５日以内に（緊急のまたは習慣的に）透析を受けたか、または登録時に透析の切迫した必要性があること：
ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）または肝炎ウイルスによる感染が判明していること；
上記の試験対象患者基準の９０ｍｍＨｇ未満のＳＢＰのみを満たし、主治医または研究責任者の意見にショックを受けないこと。
【０１２７】
インフォームド・コンセントを提出した後、ＥＤＴＡ抗凝固処理血液試料（１０ｍＬ）および尿試料（２５〜３０ｍＬ）を各患者から収集する。その後、血液および尿の試料を、（適用できる場合）造影剤投与後４（±０．５）および８（±１）時間の時点で、登録後１２（±１）、２４（±２）、および４８（±２）時間の時点で、ならびにその後、患者が入院中７〜１４日目まで毎日収集する。血液を、直接的な静脈穿刺により、または既存の大腿鞘、中心静脈ライン、末梢の静脈ラインもしくはヘップロック（ｈｅｐ−ｌｏｃｋ）などの他に利用可能な静脈アクセスにより収集する。これらの研究の血液試料を臨床現場で血漿まで処理し、凍結させ、Ａｓｔｕｔｅ
Ｍｅｄｉｃａｌ,Ｉｎｃ.,Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ,ＣＡに輸送する。この研究の尿試料を凍結させ、Ａｓｔｕｔｅ Ｍｅｄｉｃａｌ,Ｉｎｃに輸送する。
【０１２８】
実施例４
β２糖タンパク質１のイムノアッセイ
標準的なサンドイッチ酵素イムノアッセイ技術を用いて、β２糖タンパク質１検体を測定する。検体と結合する一次抗体を９６ウェルポリスチレンマイクロプレートのウェルの中に固定化する。検体標準物質および試験試料を適切なウェルの中にピペッターで入れ、存在する全検体を固定化抗体と結合させる。結合しなかった全物質を洗い流した後、この検体が結合する西洋ワサビペルオキシダーゼに結合させた二次抗体をこれらのウェルに添加し、それによって、この検体（存在する場合）および一次抗体とでサンドイッチ複合体を形成させる。結合しなかった全ての抗体−酵素試薬を除去するための洗浄後、テトラメチルベンジジンおよび過酸化水素を含む基質溶液をこれらのウェルに添加する。この試料中に存在する検体量に比例して呈色する。呈色反応を止め、色の強度を５４０ｎｍまたは５７０ｎｍで測定する。検体標準物質から作成した標準曲線と比較することにより、検体濃度をこの試験試料に割り当てる。
【０１２９】
実施例５
外見上健康そうである提供者および慢性疾患患者の試料
慢性または急性疾患が判明していない提供者（「外見上健康そうである提供者」）のヒトの尿試料を２社（Ｇｏｌｄｅｎ Ｗｅｓｔ
Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｓ,Ｉｎｃ.,２７６２５ Ｃｏｍｍｅｒｃｅ
Ｃｅｎｔｅｒ Ｄｒ.,Ｔｅｍｅｃｕｌａ,ＣＡ ９２５９０およびＶｉｒｇｉｎｉａ
Ｍｅｄｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ,Ｉｎｃ.,９１５ Ｆｉｒｓｔ
Ｃｏｌｏｎｉａｌ Ｒｄ.,Ｖｉｒｇｉｎｉａ Ｂｅａｃｈ,ＶＡ ２３４５４）から購入した。これらの尿試料を輸送し、−２０℃より低い温度で凍結保存した。これらの会社が、性別、人種（白人／黒人）、喫煙状態および年齢を含む個々の提供者の人口学的情報を提供した。
【０１３０】
鬱血性心不全、冠動脈疾患、慢性腎臓疾患、慢性閉塞性肺疾患、真性糖尿病および高血圧を含む様々な慢性疾患を患う提供者（「慢性疾患患者」）のヒトの尿試料を、Ｖｉｒｇｉｎｉａ
Ｍｅｄｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ,Ｉｎｃ.,９１５ Ｆｉｒｓｔ
Ｃｏｌｏｎｉａｌ Ｒｄ.,Ｖｉｒｇｉｎｉａ Ｂｅａｃｈ,ＶＡ ２３４５４から購入した。これらの尿試料を輸送し、−２０℃より低い温度で凍結保存した。この会社が、年齢、性別、人種（白人／黒人）、喫煙状態およびアルコールの使用、身長、体重、（１つまたは複数の）慢性疾患診断、現在の投薬ならびに既往手術を有する個々の提供者についての症例報告を提供した。
【０１３１】
実施例６
ＲＩＦＬＥステージ０における患者の腎臓の状態を評価するためのマーカーとしてのβ２糖タンパク質１の使用
集中治療室（ＩＣＵ）の患者を、ＲＩＦＬＥ判定基準によって決定するように、登録後７日以内に達した最高ステージに従って、損傷なし（０）、損傷のリスク（Ｒ）、損傷（Ｉ）、および不全（Ｆ）のように腎臓状態によって分類した。
【０１３２】
２つのコホートを、ステージ０を越えて進行しなかった（コホート１）患者、および１０日以内にステージＲ、Ｉ、またはＦに到達した（コホート２）患者として定義した。ＩＣＵの患者内に生じる正常なマーカー変動を調べ、それによってＡＫＩ状態を監視する有用性を評価するために、コホート１から収集した尿試料においてマーカーレベルを測定した。コホート２のステージＲ、Ｉ、またはＦに達する前の０時間、２４時間、および４８時間の時点で患者から収集した尿試料において、β２糖タンパク質１濃度を測定した。以下の表において、＋／−１２時間である３つのグループに分けられるコホートについて定義したように、最も低い疾患ステージに特定の患者が達する時点に対して、「最高ステージの前」という時点は、試料を収集する時点を表す。例えば、この実施例（０対Ｒ、Ｉ、Ｆ）について２４時間前とは、ステージＲ（またはＲにおける試料がない場合はＩ、またはＲもしくはＩにおける試料がない場合はＦ）に達する２４時間（＋／−１２時間）前を意味する。
【０１３３】
市販のアッセイ試薬を用いて、標準的なイムノアッセイ法により、β２糖タンパク質１を測定した。以下の実施例において、濃度をμｇ／ｍｌと表す。受信者動作特性（ＲＯＣ）曲線を、β２糖タンパク質１について作成し、各ＲＯＣ曲線下の面積（ＡＵＣ）を決定した。血清クレアチニン測定値に基づくように、尿排出量に基づくように、または血清クレアチニン測定値もしくは尿排出量のいずれか一方に基づくように、コホート２の患者も、ステージＲ、Ｉ、またはＦに定まる理由に従って分類した。すなわち、血清クレアチニン測定値のみに基づいてステージＲ、Ｉ、またはＦに定まる患者に対しては、ステージ０のコホートは、尿排出量に基づいてステージＲ、Ｉ、またはＦに定まる患者を含むことができ、尿排出量のみに基づいてステージＲ、Ｉ、またはＦに定まる患者に対しては、ステージ０のコホートは、血清クレアチニン測定値に基づいてステージＲ、Ｉ、またはＦに定まる患者を含むことができ、かつ、血清クレアチニン測定値もしくは尿排出量に基づいてステージＲ、Ｉ、またはＦに定まる患者に対しては、ステージ０のコホートは、血清クレアチニン測定値および尿排出量の両方についてステージ０の患者のみを含む。また、血清クレアチニン測定値もしくは尿排出量に基づいてステージＲ、Ｉ、またはＦに定まる患者に対しては、最も重篤なＲＩＦＬＥステージを生み出す判定法を用いた。
【０１３４】
以下の記述統計学を得た。
【０１３５】
【表３】
【０１３６】
【表４】
【０１３７】
【表５】
【０１３８】
以下の表において、コホート１（ＲＩＦＬＥ ０に留まる対象）とコホート２（ＲＩＦＬＥ Ｒ、ＩまたはＦに進行する対象）とを区別する能力を、ＲＯＣ解析を用いて調べた。ＳＥは、ＡＵＣの標準誤差であり、ｎは試料または個々の患者の数である（「ｐｔｃ」として示される）。標準誤差を、Ｈａｎｌｅｙ,Ｊ.Ａ.,ａｎｄ ＭｃＮｅｉｌ,Ｂ.ＪＴｈｅ ｍｅａｎｉｎｇ ａｎｄ ｕｓｅ ｏｆ ｔｈｅ ａｒｅａ ｕｎｄｅｒ
ａ ｒｅｃｅｉｖｅｒ ｏｐｅｒａｔｉｎｇ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃ （ＲＯＣ） ｃｕｒｖｅ.Ｒａｄｉｏｌｏｇｙ（１９８２）１４３：２９−３６に記載されているように計算した。ｐ値を、両側Ｚ検定を用いて計算した。
【０１３９】
血清クレアチニン測定値もしくは尿排出量を判定するコホート１対コホート２
【表６】
【０１４０】
血清クレアチニンを判定するコホート１対コホート２
【表７】
【０１４１】
尿排出量を判定するコホート１対コホート２
【表８】
【０１４２】
様々な閾値（または「カットオフ」）β２糖タンパク質１濃度を選択し、以下の表に、コホート１とコホート２とを区別する関連する感度および特異度を示す。ＯＲは、特定のカットオフ濃度について計算されたオッズ比であり、９５％ＣＩはオッズ比の信頼区間である。
【０１４３】
【表９】
【０１４４】
【表１０】
【０１４５】
【表１１】
【０１４６】
実施例７
ＲＩＦＬＥステージ０およびＲにおける患者の腎臓の状態を評価するためのマーカーとしてのβ２糖タンパク質１の使用
実施例６に記載したように、患者を分類し、解析した。しかし、ステージＲには達したが、ステージＩまたはＦに進行しなかった患者を、コホート１の非損傷ステージ０の患者と共にグループ化した。この実施例のコホート２は、ステージＩまたはＦに進行した患者のみを含んだ。尿試料中のβ２糖タンパク質１濃度を、コホート１（についての解析）に含めた。ステージＩまたはＦに達する０、２４、および４８時間以内に収集した尿試料中のβ２糖タンパク質１濃度を、コホート２（についての解析）に含めた。
【０１４７】
以下の記述統計学を得た。
【０１４８】
【表１２】
【０１４９】
【表１３】
【０１５０】
【表１４】
【０１５１】
以下の表において、コホート１（ＲＩＦＬＥ ０またはＲに留まる対象）とコホート２（ＲＩＦＬＥ ＩまたはＦに進行する対象）とを区別する能力を、ＲＯＣ解析を用いて調べた。
【０１５２】
血清クレアチニン測定値もしくは尿排出量を判定するコホート１対コホート２
【表１５】
【０１５３】
血清クレアチニンを判定するコホート１対コホート２
【表１６】
【０１５４】
尿排出量を判定するコホート１対コホート２
【表１７】
【０１５５】
様々な閾値（または「カットオフ」）β２糖タンパク質１濃度を選択し、以下の表に、コホート１とコホート２とを区別する関連する感度および特異度を示す。ＯＲは、特定のカットオフ濃度について計算されたオッズ比であり、９５％ＣＩはオッズ比の信頼区間である。
【０１５６】
【表１８】
【０１５７】
【表１９】
【０１５８】
【表２０】
【０１５９】
実施例８
ステージＲからステージＩおよびＦに進行する患者において腎臓の状態を評価するためのマーカーとしてのβ２糖タンパク質１の使用
実施例６に記載したように、患者を分類し、解析したが、ステージＲには達した患者のみをこの実施例に含めた。コホート１は、１０日以内にステージＲに達したが、ステージＩまたはＦに進行しなかった患者を含み、コホート２は、ステージＩまたはＦに進行した患者のみを含んだ。ステージＲに達する１２時間以内に収集した尿試料中のβ２糖タンパク質１濃度を、コホート１およびコホート２の両方についての解析に含めた。
【０１６０】
以下の記述統計学を得た。
【０１６１】
【表２１】
【０１６２】
以下の表において、コホート１（ＲＩＦＬＥ Ｒに留まる対象）とコホート２（ＲＩＦＬＥ ＩまたはＦに進行する対象）とを区別する能力を、ＲＯＣ解析を用いて調べた。
【０１６３】
血清クレアチニン測定値もしくは尿排出量を判定するコホート１対コホート２
【表２２】
【０１６４】
血清クレアチニンを判定するコホート１対コホート２
【表２３】
【０１６５】
尿排出量を判定するコホート１対コホート２
【表２４】
【０１６６】
様々な閾値（または「カットオフ」）β２糖タンパク質１濃度を選択し、以下の表に、コホート１とコホート２とを区別する関連する感度および特異度を示す。ＯＲは、特定のカットオフ濃度について計算されたオッズ比であり、９５％ＣＩはオッズ比の信頼区間である。
【０１６７】
【表２５】
【０１６８】
実施例９
ＩＣＵ患者集団におけるマーカーとしてのβ２糖タンパク質１の評価
集中治療室（ＩＣＵ）の患者を以下の研究に登録した。各患者を、ＲＩＦＬＥ判定基準が決定するとおり、登録後７日以内に達した最高ステージに従って、損傷なし（０）、損傷のリスク（Ｒ）、損傷（Ｉ）、および不全（Ｆ）のように腎臓状態によって分類した。ＥＤＴＡ抗凝固処理血液試料（１０ｍＬ）および尿試料（２５〜３０ｍＬ）を、登録時、造影剤投与後４（±０．５）、８（±１）時間（適用できる場合）、登録後１２（±１）、２４（±２）、および４８（±２）、ならびにその後、対象が入院している間の毎日から最高で７日〜１４日の時点の各患者から収集した。β２糖タンパク質１を、収集した尿試料および収集した血液試料の血漿成分において、市販のアッセイ試薬を用いて、標準的なイムノアッセイ法により測定した。
【０１６９】
２つのコホートを、以下の表のそれぞれの概説で記載したとおりに定義した。以下の表において、＋／−１２時間である３つのグループに分けられるコホートについて定義したように、特定の患者が最も低い疾患ステージに達する時点に対して、「最高ステージの前」という時点は、試料を収集する時点を表す。例えば、２つのコホートとして０対Ｒ、Ｉ、Ｆを使用する「２４時間前」とは、ステージＲ（またはＲにおける試料がない場合はＩ、またはＲもしくはＩにおける試料がない場合はＦ）に達する２４時間（＋／−１２時間）前を意味する。
【０１７０】
受信者動作特性（ＲＯＣ）曲線を、β２糖タンパク質１について作成し、各ＲＯＣ曲線下の面積（ＡＵＣ）を決定した。血清クレアチニン測定値（ｓＣｒ）に基づくように、尿排出量（ＵＯ）に基づくように、または血清クレアチニン測定値もしくは尿排出量のいずれか一方に基づくように、コホート２の患者も、コホート２に定まる理由に従って分類した。上記で論じた同じ例（０対Ｒ、Ｉ、Ｆ）を用いて、血清クレアチニン測定値のみに基づいてステージＲ、Ｉ、またはＦに定まる患者については、ステージ０のコホートは、尿排出量に基づいてステージＲ、Ｉ、またはＦに定まる患者を含むことができ、尿排出量のみに基づいてステージＲ、Ｉ、またはＦに定まる患者については、ステージ０のコホートは、血清クレアチニン測定値に基づいてステージＲ、Ｉ、またはＦに定まる患者を含むことができ、かつ、血清クレアチニン測定値もしくは尿排出量に基づいてステージＲ、Ｉ、またはＦに定まる患者については、ステージ０のコホートは、血清クレアチニン測定値および尿排出量の両方についてステージ０にいる患者のみを含む。また、血清クレアチニン測定値もしくは尿排出量に基づいて定まる患者のデータにおいて、最も重篤なＲＩＦＬＥステージを生み出す判定法を用いた。
【０１７１】
コホート１とコホート２とを区別する能力を、ＲＯＣ解析を用いて調べた。ＳＥは、ＡＵＣの標準誤差であり、ｎは試料または個々の患者の数である（「ｐｔｃ」として示される）。標準誤差を、Ｈａｎｌｅｙ,Ｊ.Ａ.,ａｎｄ ＭｃＮｅｉｌ,Ｂ.ＪＴｈｅ ｍｅａｎｉｎｇ ａｎｄ ｕｓｅ ｏｆ ｔｈｅ ａｒｅａ ｕｎｄｅｒ
ａ ｒｅｃｅｉｖｅｒ ｏｐｅｒａｔｉｎｇ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃ （ＲＯＣ） ｃｕｒｖｅ.Ｒａｄｉｏｌｏｇｙ（１９８２）１４３：２９−３６に記載されているように計算した。ｐ値を、両側Ｚ検定を用いて計算し、表１〜４ではｐ＜０．０５、表５〜６ではｐ＜０．１０と報告する。０．５未満のＡＵＣは、比較の際に陰性進行を表すマーカーを示し、０．５を超えるＡＵＣは、比較の際に陽性進行を表すマーカーを示す。
【０１７２】
様々なβ２糖タンパク質１閾値（または「カットオフ」）濃度を選択し、コホート１とコホート２とを区別する関連する感度および特異度を決定した。ＯＲは、特定のカットオフ濃度について計算されたオッズ比であり、９５％ＣＩはオッズ比の信頼区間である。
【０１７３】
表１：コホート１（ＲＩＦＬＥステージ０を超えて進行しなかった患者）について収集した尿試料ならびにステージＲ、ＩまたはＦに達する０時間、２４時間、および４８時間前の時点のコホート２の対象から収集した尿試料におけるマーカーレベルの比較
【表２６】
【０１７４】
【表２７】
【０１７５】
【表２８】
【０１７６】
【表２９】
【０１７７】
表２：コホート１（ＲＩＦＬＥステージ０またはＲを超えて進行しなかった患者）について収集した尿試料ならびにステージＩまたはＦに達する０時間、２４時間、および４８時間前の時点のコホート２の対象から収集した尿試料におけるマーカーレベルの比較
【表３０】
【０１７８】
【表３１】
【０１７９】
【表３２】
【０１８０】
【表３３】
【０１８１】
表３：コホート１（ＲＩＦＬＥステージＲに達したが、それを超えて進行しなかった患者）およびコホート２（ＲＩＦＬＥステージＩまたはＦに達した患者）のステージＲに達する１２時間以内に収集した尿試料におけるマーカーレベルの比較
【表３４】
【０１８２】
【表３５】
【０１８３】
表４：コホート１（ＲＩＦＬＥステージ０を超えて進行しなかった患者）について収集した尿試料における最高マーカーレベルならびにコホート２の登録時からステージＦに達する０時間、２４時間、および４８時間前の間に収集した尿試料における最大値の比較
【表３６】
【０１８４】
【表３７】
【０１８５】
【表３８】
【０１８６】
【表３９】
【０１８７】
表５：コホート１（ＲＩＦＬＥステージ０を超えて進行しなかった患者）について収集したＥＤＴＡ試料ならびにステージＲ、ＩまたはＦに達する０時間、２４時間、および４８時間前の時点でコホート２の対象から収集したＥＤＴＡ試料におけるマーカーレベルの比較
【表４０】
【０１８８】
【表４１】
【０１８９】
【表４２】
【０１９０】
【表４３】
【０１９１】
表６：コホート１（ＲＩＦＬＥステージ０またはＲを超えて進行しなかった患者）について収集したＥＤＴＡ試料ならびにステージＩまたはＦに達する０時間、２４時間、および４８時間前の時点でコホート２の対象から収集したＥＤＴＡ試料におけるマーカーレベルの比較
【表４４】
【０１９２】
【表４５】
【０１９３】
【表４６】
【０１９４】
表７：コホート１（ＲＩＦＬＥステージＲに達したが、それを超えて進行しなかった患者）およびコホート２（ＲＩＦＬＥステージＩまたはＦに達した患者）についてステージＲに達する１２時間以内に収集したＥＤＴＡ試料におけるマーカーレベルの比較
【表４７】
【０１９５】
【表４８】
【０１９６】
表８：コホート１（ＲＩＦＬＥステージ０を超えて進行しなかった患者）について収集したＥＤＴＡ試料における最高マーカーレベルならびにコホート２の登録時からステージＦに達する０時間、２４時間、および４８時間前の間に収集したＥＤＴＡ試料における最大値の比較
【表４９】
【０１９７】
【表５０】
【０１９８】
【表５１】
【０１９９】
表９：コホート１（ＲＩＦＬＥステージ０、Ｒ、またはＩを超えて進行しなかった患者）から収集した尿試料ならびに対象がＲＩＦＬＥステージＩに達する０時間、２４時間、および４８時間前にコホート２（ＲＩＦＬＥステージＦに進行する対象）から収集した尿試料におけるマーカーレベルの比較
【表５２】
【０２００】
【表５３】
【０２０１】
【表５４】
【０２０２】
【表５５】
【０２０３】
表１０：コホート１（ＲＩＦＬＥステージ０、Ｒ、またはＩを超えて進行しなかった患者）から収集したＥＤＴＡ試料ならびに対象がＲＩＦＬＥステージＩに達する０時間、２４時間、および４８時間前にコホート２（ＲＩＦＬＥステージＦに進行する対象）から収集したＥＤＴＡ試料におけるマーカーレベルの比較
【表５６】
【０２０４】
【表５７】
【０２０５】
【表５８】
【０２０６】
表１１：コホート１（４８時間以内にＲＩＦＬＥステージ０またはＲを超えて進行しなかった患者）について収集した登録（ｅｎｒｏｌｌ）尿試料およびコホート２（４８時間以内にＲＩＦＬＥステージＩまたはＦに達した患者）から収集した登録尿試料におけるマーカーレベルの比較（すでにＲＩＦＬＥステージＩまたはＦにいる患者の登録試料は、コホートに含めた）
【表５９】
【０２０７】
【表６０】
【０２０８】
表１２：コホート１（４８時間以内にＲＩＦＬＥステージ０またはＲを超えて進行しなかった患者）から収集した登録ＥＤＴＡ試料およびコホート２（４８時間以内にＲＩＦＬＥステージＩまたはＦに達した対象）から収集した登録ＥＤＴＡ試料におけるマーカーレベルの比較（すでにＲＩＦＬＥステージＩまたはＦにいる患者の登録試料は、コホートに含めた）
【表６１】
【０２０９】
【表６２】
【０２１０】
当業者が本発明を行い、かつ使用するために、本発明を十分に詳細に記載および実証したが、本発明の趣旨および範囲から逸脱することなく、様々な代替方法、変更、および改良が行われることは明らかである。本明細書に提供した実施例は、好ましい実施形態を代表するものであり、例示的であり、本発明の範囲に限定されるようには意図しない。当業者は、その中での変更および他の使用を行うであろう。これらの変更は、本発明の趣旨に包含され、特許請求の範囲で定義される。
【０２１１】
本発明の範囲および趣旨から逸脱することなく、本明細書で開示される本発明に対して、様々な代替および変更を行うことができることを当業者は容易に理解するであろう。
【０２１２】
本明細書に記述した全ての特許文献および刊行物は、本発明が関係する分野の技術者のレベルを示す。個々の刊行物が、参照により、明確に、単独に組込まれることを示したのと同じ程度に、全ての特許文献および刊行物は、参照により本明細書に組込まれる。
【０２１３】
本明細書に適切に、説明として記載した本発明は、本明細書に明確に開示されない任意の要素または複数の要素、制限または複数の制限がない状態で実行され得る。したがって、例えば、本明細書の各場合において、「含む」、「基本的に〜からなる」および「〜からなる」という用語のいずれも、他の２つの用語のいずれかと置き換えられ得る。使用された用語および表現は、説明の用語として、制限なく使用される。示され、記載される特徴の全ての同等物またはその一部を排除するそのような用語および表現の使用は意図しないが、本発明の特許請求の範囲の中で、様々な変更が可能であることは理解される。したがって、本発明は、好ましい実施形態および任意の特徴によって明確に開示されるが、当業者は、本明細書に開示される概念の変更および変化を行うことが可能であり、かかる変更および変化は、添付の特許請求の範囲によって定義されるように、本発明の範囲に入ると考えられることは理解されるべきである。
【０２１４】
他の実施形態を、以下の特許請求の範囲に記載する。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、２００９年８月７日に出願した米国特許仮出願第６１／２３２，２９３号の優先権を主張し、これは、全ての表、図、および特許請求の範囲を含めて、その全体が本明細書に組込まれる。
【背景技術】
【０００２】
本発明の背景について以下に論じることは、読者が本発明を理解することを助けるために提供されるにすぎず、本発明の先行技術について記載または構成することを認めるものではない。
【０００３】
腎臓は、体内からの水および溶質の排出に関与する。その機能には、酸と塩基のバランスの維持、電解質濃度の調節、血液量の制御、および血圧の調節が含まれる。そのようなことから、損傷および／または疾患による腎機能の喪失は、相当な罹患率および死亡率をもたらす。Ｈａｒｒｉｓｏｎ’ｓ
Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ｏｆ Ｉｎｔｅｒｎａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ,１７ｔｈ Ｅｄ.,ＭｃＧｒａｗ Ｈｉｌｌ,Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ,ｐａｇｅｓ １７４１−１８３０（これは、参照により、その全体が本明細書に組込まれる）の中で、腎損傷について詳細に論じられている。腎臓の疾患および／または損傷は、急性的または慢性的であり得る。急性および慢性の腎臓疾患については、以下のように記載されている（Ｃｕｒｒｅｎｔ
Ｍｅｄｉｃａｌ Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ＆Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ２００８,４７ｔｈ Ｅｄ,ＭｃＧｒａｗ Ｈｉｌｌ,Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ,ｐａｇｅｓ ７８５−８１５、これらは、参照によりその全体が本明細書に組込まれる）。「急性腎不全は、数時間から数日にわたる、腎機能の悪化であり、血液中に（尿素窒素などの）窒素性廃棄物およびクレアチニンの滞留をもたらす。これらの物質の滞留は、高窒素血症と呼ばれる。慢性腎不全（慢性腎臓疾患）は、数か月から数年にわたる異常な腎機能の喪失に起因する。」
【０００４】
急性腎不全（急性腎損傷とも知られるＡＲＦ、またはＡＫＩ）は、糸球体濾過の突然の（典型的には、約４８時間から１週間以内に検出される）低下である。この濾過能力の低下は、通常、腎臓によって排出される窒素（尿素およびクレアチニン）廃棄物ならびに無窒素廃棄物の滞留、尿排出量の減少、またはその両方をもたらす。ＡＲＦは、入院の約５％、心肺バイパス手術の４〜１５％、および集中治療入院の３０％以下にあたると報告されている。ＡＲＦは、因果関係において腎前性、腎内性、または腎後性として分類され得る。内因性腎疾患を、糸球体異常、尿細管異常、間質異常、および血管異常にさらに分けることができる。ＡＲＦの主な原因を以下の表に記載するが、この出典はＭｅｒｃｋ
Ｍａｎｕａｌ,１７ｔｈ ｅｄ.,Ｃｈａｐｔｅｒ
２２２である（これは、参照によりその全体が本明細書に組込まれる）。
【０００５】
【表１】
【０００６】
虚血性ＡＲＦの場合、疾患過程は、４段階に分けられ得る。数時間から数日続く初期の段階の期間に、腎臓の灌流の低下は損傷へ進行する。糸球体限外濾過が低下し、尿細管内の残骸により濾液の流れが低下し、かつ傷ついた上皮を通過する濾液の背部漏れが起こる。腎損傷は、この段階の期間に、腎臓の再灌流によって媒介され得る。開始に続いて、拡大の段階があり、これは、虚血性損傷および炎症の継続によって特徴づけられ、内皮障害および血管の鬱血を伴う可能性がある。維持段階の期間が１〜２週間続き、腎細胞損傷が生じ、糸球体濾過および尿排出量が最小限になる。腎上皮が修復され、ＧＦＲが徐々に回復する回復段階が続き得る。これにもかかわらず、ＡＲＦを患う対象の生存率は、約６０％と同じくらい低くなり得る。
【０００７】
（造影剤（ｃｏｎｔｒａｓｔ ｍｅｄｉａ）とも呼ばれる）放射線造影剤（ｒａｄｉｏｃｏｎｔｒａｓｔ ａｇｅｎｔ）およびシクロスポリン、アミノグリコシドを含む抗生物質およびシスプラチンなどの抗癌剤などの他の腎毒素によって引き起こされる急性腎損傷は、数日から約１週間の期間にわたって現れる。造影剤腎症（放射線造影剤によって引き起こされるＡＫＩであるＣＩＮ）は、（虚血性損傷につながる）腎内の血管収縮によって、かつ尿細管上皮細胞に対して直接的な毒性を有する反応性酸素種の発生から引き起こされると考えられている。ＣＩＮは、これまでに、血中尿素窒素および血清クレアチニンの急性（２４〜４８時間以内の発症）であるが可逆（ピークは３〜５日、回復は１週間以内）の増加として、症状が見つかっている。
【０００８】
ＡＫＩを定義および検出するための一般に報告される判定基準は、血清クレアチニンの突然の（典型的には、約２〜７日以内または入院期間内の）上昇である。ＡＫＩを定義および検出するために血清クレアチニン上昇を用いることは定評があるが、血清クレアチニン上昇の規模および血清クレアチニンを測定し、ＡＫＩを定義するのにかかる時間は、刊行物間でかなり異なる。伝統的に、１００％、２００％などの血清クレアチニンの比較的大幅な増加、少なくとも１００％から２ｍｇ／ｄＬをこえる値の増加、および他の定義を用いてＡＫＩを定義する。しかし、最近の傾向は、より少ない血清クレアチニン上昇を用いてＡＫＩを定義する方向に向かっている。血清クレアチニン上昇とＡＫＩとの関係および関連する健康上のリスクは、Ｐｒａｕｇｈｔ
ａｎｄ Ｓｈｌｉｐａｋ,Ｃｕｒｒ Ｏｐｉｎ Ｎｅｐｈｒｏｌ Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓ １４：２６５−２７０,２００５およびＣｈｅｒｔｏｗ ｅｔ ａｌ,Ｊ Ａｍ Ｓｏｃ Ｎｅｐｈｒｏｌ
１６：３３６５−３３７０,２００５に概説されており、その中でまとめられている参考文献と共に、これらは、参照によりその全体が本明細書に組込まれる。これらの刊行物中に記載されているように、腎機能の急速な悪化（ＡＫＩ）およびの死亡リスクの増加ならびに他の有害な結果は、血清クレアチニンの微増と関連することが今や知られている。これらの増加は、相対（パーセント）値または名目上の値として決定され得る。損傷前の値の２０％ほどの少ない血清クレアチニンの相対的増加は、腎機能の急速な悪化（ＡＫＩ）および健康上のリスクの増加を示すことが報告されたが、ＡＫＩおよび健康上のリスクの増加を定義するための、より一般な報告値は、少なくとも２５％の相対的増加である。０．３ｍｇ／ｄＬ、０．２ｍｇ／ｄＬまたはさらに０．１ｍｇ／ｄＬほどの少ない名目上の増加は、腎機能の悪化および死亡リスクの増加を示すことが報告された。血清クレアチニンをこれらの閾値まで上昇させるために、例えば、２日、３日、７日、または患者が病院または集中治療室にいる時間として定義される可変期間におよぶ様々な期間を用いて、ＡＫＩを定義してきた。これらの研究は、腎機能の悪化またはＡＫＩに対して血清クレアチニン上昇の特定の閾値（または上昇の期間）はなく、むしろ血清クレアチニンの上昇の規模の増加と共にリスクの連続的な増加があることを示している。
【０００９】
１つの研究（Ｌａｓｓｎｉｇｇ ｅｔ ａｌｌ,Ｊ Ａｍ Ｓｏｃ Ｎｅｐｈｒｏｌ
１５：１５９７−１６０５,２００４、参照によりその全体が本明細書に組込まれる）は、血清クレアチニンの増加および減少の両方を調べた。心臓手術後、血清クレアチニンが−０．１〜−０．３ｍｇ／ｄＬに少し低下した患者は、死亡率が最も低かった。血清クレアチニンがより大きく低下した（−０．４ｍｇ／ｄＬ以上）または血清クレアチニンが増加した患者は、死亡率が高かった。これらの研究結果から、（手術後４８時間以内のわずかなクレアチニン変化によって検出されるような）腎機能の非常にわずかな変化が、患者の予後に深刻な影響をもたらすと結論づけられる。臨床試験および診療において血清クレアチニンを用いてＡＫＩを定義するための統一された分類システムのコンセンサスを得るために、Ｂｅｌｌｏｍｏ
ｅｔ ａｌ.,Ｃｒｉｔ Ｃａｒｅ.８（４）：Ｒ２０４−１２,２００４（これは、参照によりその全体が本明細書に組込まれる）は、ＡＫＩ患者を層別化するための以下の分類を提議している：
「リスク」：ベースラインから１．５倍の血清クレアチニンの増加、または６時間の間の、０．５ｍｌ／体重ｋｇ／時間より少ない尿の産生；
「損傷」：ベースラインから２．０倍の血清クレアチニンの増加、または１２時間の間の、０．５ｍｌ／体重ｋｇ／時間より少ない尿の産生；
「不全」：ベースラインから３．０倍の血清クレアチニンの増加もしくは３５５μｍｏｌ／ｌを超えるクレアチニン（４４を超える上昇）、または２４時間の間の、０．３ｍｌ／ｋｇ／ｈｒを下回る尿排出量または少なくとも１２時間の間、無尿；
かつ２つの臨床予後を含む：
「喪失」：４週間を超える腎置換療法の永続的な必要性：
「ＥＳＲＤ」：末期の腎疾患−３ヶ月を超える透析の必要性：
これらの判定基準は、ＲＩＦＬＥ判定基準と呼ばれ、腎臓の状態を分類するための有用な臨床的手段を提供する。Ｋｅｌｌｕｍ,Ｃｒｉｔ.Ｃａｒｅ Ｍｅｄ.３６：Ｓ１４１−４５,２００８およびＲｉｃｃｉ ｅｔ ａｌ.,Ｋｉｄｎｅｙ Ｉｎｔ.７３,５３８−５４６,２００８（これらの各々は、参照によりその全体が本明細書に組込まれる）において論じられるように、ＲＩＦＬＥ判定基準は、多数の研究において実証されたＡＫＩの一定の定義を提供する。
【００１０】
さらに最近、Ｍｅｈｔａ ｅｔ ａｌ.,Ｃｒｉｔ.Ｃａｒｅ １１：Ｒ３１（ｄｏｉ：１０．１１８６.ｃｃ５７１３）,２００７（これは、参照によりその全体が本明細書に組込まれる）が、ＲＩＦＬＥから変更された、ＡＫＩ患者を層別化するための以下の類似の分類を提議している。
「ステージＩ」：０．３ｍｇ／ｄＬ以上（≧２６．４μｍｏｌ／Ｌ以上）の血清クレアチニンの増加もしくはベースラインから１５０％（１．５倍）以上の増加、または６時間以上の間の、１時間あたり０．５ｍＬ／ｋｇより少ない尿排出量；
「ステージＩＩ」：ベースラインから２００％（２倍）を超える血清クレアチニンの増加、または１２時間以上の間の、１時間あたり０．５ｍＬ／ｋｇより少ない尿排出量；
「ステージＩＩＩ」：ベースラインから３００％（３倍）を超える血清クレアチニンの増加、または少なくとも４４μｍｏｌ／Ｌの急激な増加を伴う３５４μｍｏｌ／Ｌ以上の血清クレアチニン、または２４時間の間の、１時間あたり０．３ｍＬ／ｋｇより少ない尿排出量、もしくは１２時間の間、無尿。
【００１１】
ＣＩＮ Ｃｏｎｓｅｎｓｕｓ Ｗｏｒｋｉｎｇ Ｐａｎｅｌ（ＭｃＣｏｌｌｏｕｇｈ ｅｔ ａｌ,Ｒｅｖ Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ Ｍｅｄ．２００６；７（４）：１７７−１９７、これは、参照によりその全体が本明細書に組込まれる）は、血清クレアチニンの２５％の上昇を用いて、（ＡＫＩ型である）造影剤腎症を定義する。様々なグループが、血清クレアチニンを用いてＡＫＩを検出するためにわずかに異なる判定基準を定義しているが、０．３ｍｇ／ｄＬまたは２５％などの血清クレアチニンのわずかな変化は、ＡＫＩ（腎機能の悪化）を検出するのに十分であり、血清クレアチニン変化の規模は、ＡＫＩの重症度および死亡リスクの指標であるということがコンセンサスである。
【００１２】
数日の期間にわたる血清クレアチニンの連続的測定は、ＡＫＩを検出および診断する一般に認められる方法であり、かつＡＫＩ患者を評価する最も重要な手段の１つであると考えられているが、一般に、血清クレアチニンは、ＡＫＩ患者の診断、評価および監視においていくつかの制限があると考えられている。血清クレアチニンが、ＡＫＩの診断に用いられると考えられている値（例えば、０．３ｍｇ／ｄＬまたは２５％の上昇）まで上昇する期間は、用いられる定義に応じて４８時間以上になり得る。ＡＫＩにおける細胞損傷は数時間にわたって起こり得るので、４８時間以上の時点で検出される血清クレアチニン上昇は、損傷の後期の指標になり得、したがって、血清クレアチニンを信頼することはＡＫＩの診断を遅らせ得る。さらに、血清クレアチニンは、腎臓機能が急速に変化しているＡＫＩの最も急性な段階の期間には、腎臓の正確な状態および治療の必要性についての優れた指標にならない。ＡＫＩを患う一部の患者は完全に回復し、一部は透析を（短期または長期のいずれか一方で）必要とし、一部は、死、心臓の主要有害事象および慢性腎疾患を含む他の有害な結果を有するであろう。血清クレアチニンは濾過率のマーカーであるので、ＡＫＩの原因（腎前性、腎内性、腎後性の閉塞、アンテローム閉塞など）または（例えば、起源が、尿細管、糸球体または間質内である）腎内性の疾患の分類もしくは損傷部位を区別しない。尿排出量は同様に限界がある。これらのことを知ることは、ＡＫＩを患う患者を管理および治療することにおいて極めて重要なことであり得る。
【００１３】
これらの制限は、特に、初期および無症状のステージにおいて、しかしまた、腎臓の回復および修復が起きる可能性のあるより後期のステージにおいて、ＡＫＩを検出および評価するためのより良い方法の必要性を強調する。さらに、ＡＫＩを患うリスクのある患者のより優れた同定の必要性がある。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１４】
本発明の目的は、対象の腎機能を評価するための方法および組成物を提供することにある。本明細書記載のβ２糖タンパク質１（ヒト前駆体Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔ
Ｐ０２７４９、アポリポタンパク質としても知られている）の測定を、腎機能への損傷、腎機能の低下、および／または（急性腎臓損傷とも呼ばれる）急性腎不全を患う対象もしくはそれらを患うリスクのある対象において、診断、予後診断、リスク層化、病期分類、監視、分類ならびにさらなる診断および治療計画の決定のために用いることができる。
【課題を解決するための手段】
【００１５】
このバイオマーカーを、リスク層化のために（すなわち、腎機能の将来的な損傷、腎機能の低下への将来的な進行、ＡＲＦへの将来的な進行、腎機能の将来的な改善などのリスクのある対象を同定するために）；現在の疾患の診断のために（すなわち、腎機能への損傷を患っている対象、腎機能への低下へと進行している対象、ＡＲＦへと進行している対象などを同定するために）；腎機能の悪化または改善についての監視のために；かつ腎機能の改善もしくは悪化、死亡率の減少もしくは増加、対象が腎置換療法（すなわち、血液透析、腹膜透析、血液濾過、および／または腎移植）を必要とするであろうリスクの減少もしくは増加、対象が腎機能への損傷から回復するであろうリスクの減少もしくは増加、対象がＡＲＦから回復するであろうリスクの減少もしくは増加、対象が末期の腎疾患へと進行するであろうリスクの減少もしくは増加、対象が慢性腎疾患へと進行するであろうリスクの減少もしくは増加、対象が移植された腎臓の拒絶反応を患うであろうリスクの減少もしくは増加などの将来的な医学的予後を予測するために使用してもよい。
【発明の効果】
【００１６】
第一の態様において、本発明は、対象において腎臓の状態を評価する方法に関する。これらの方法は、対象から得られた体液試料において、β２糖タンパク質１を検出するように構成されたアッセイ法を実行することを含む。その後、このアッセイ結果、例えば、β２糖タンパク質１の測定濃度は、対象の腎臓の状態と相関する。この腎臓の状態との相関は、このアッセイ結果を、本明細書記載の対象のリスク層化、診断、予後診断、病期分類、分類および監視のうちの１つ以上と相関させることを含んでもよい。したがって、本発明は、腎損傷の評価のためにβ２糖タンパク質１を利用する。
【００１７】
特定の実施形態において、本明細書記載の腎臓の状態を評価する方法は、対象のリスク層化、すなわち、腎臓の状態における１つ以上の将来的な変化の可能性を対象に割り当てる方法である。これらの実施形態において、このアッセイ結果は、１つ以上の将来的なそのような変化と相関する。以下のものは、好ましいリスク層化の実施形態である。
【００１８】
リスク層化の好ましい実施形態において、これらの方法は、腎機能への将来的な損傷について対象のリスクを決定することを含み、このアッセイ結果、例えば、β２糖タンパク質１の測定濃度は、腎機能への将来的なかかる損傷の可能性と相関する。例えば、この測定濃度を閾値と比較してもよく、測定濃度が閾値より低い時に割り当てられる可能性に対して、測定濃度が閾値を超えた時に、腎機能への将来的な損傷を患う可能性の増加を対象に割り当てる。
【００１９】
リスク層化の他の好ましい実施形態において、これらの方法は、腎機能の将来的な低下について対象のリスクを決定することを含み、このアッセイの結果、例えば、β２糖タンパク質１の測定濃度は、腎機能のかかる低下の可能性と相関する。例えば、この測定濃度を閾値と比較してもよく、測定濃度が閾値より低い時に割り当てられる可能性に対して、測定濃度が閾値を超えた時に、腎機能の将来的な低下の可能性の増加をその対象に割り当てる。
【００２０】
リスク層化の他のさらに好ましい実施形態において、これらの方法は、腎機能の将来的な改善についての対象の可能性を決定することを含み、このアッセイの結果、例えば、β２糖タンパク質１の測定濃度は、腎機能のかかる将来的な改善の可能性と相関する。例えば、この測定濃度を閾値と比較してもよく、測定濃度が閾値を超える時に割り当てられる可能性に対して、測定濃度が閾値より低い時に、腎機能の将来的な改善の可能性の増加をその対象に割り当てる。
【００２１】
リスク層化の他のさらに好ましい実施形態において、これらの方法は、ＡＲＦへの進行についての対象のリスクを決定することを含み、このアッセイの結果、例えば、β２糖タンパク質１の測定濃度は、ＡＲＦへのかかる進行の可能性と相関する。例えば、この測定濃度を閾値と比較してもよく、測定濃度が閾値より低い時に割り当てられる可能性に対して、測定濃度が閾値を超える時に、ＡＲＦへの進行の可能性の増加をその対象に割り当てる。
【００２２】
リスク層化の他の好ましい実施形態において、これらの方法は、対象の予後のリスクを決定することを含み、このアッセイの結果、例えば、β２糖タンパク質１の測定濃度は、その対象が患う腎損傷に関連する臨床予後の発生の可能性と相関する。例えば、この測定濃度を閾値と比較してもよく、この測定濃度が閾値より低い時に割り当てられる可能性に対して、測定濃度が閾値を超える時に、急性腎臓損傷、ＡＫＩの悪化するステージへの進行、死亡、腎置換療法の必要性、腎毒素の退薬の必要性、末期の腎疾患、心不全、脳卒中、心筋梗塞、慢性腎臓疾患への進行などのうちの１つ以上になる可能性の増加をその対象に割り当てる。
【００２３】
かかるリスク層化の実施形態において、体液試料を対象から得る時から約１８０日以内に、多少とも、所望の事象が生じる可能性があると割り当てられる可能性またはリスクが好ましい。特に好ましい実施形態において、この割り当てられる可能性またはリスクは、１８カ月、１２０日、９０日、６０日、４５日、３０日、２１日、１４日、７日、５日、９６時間、７２時間、４８時間、３６時間、２４時間、１２時間以内などのより短い期間内で生じる所望の事象に関連する。体液試料を対象から得る時の０時間におけるリスクは、現状の診断に等しい。
【００２４】
リスク層化の好ましい実施形態において、対象において腎前性、腎内性、または腎後性のＡＲＦに対する１つ以上の既知のリスクファクターが以前から存在することに基づいて、リスク層化について、対象を選択する。例えば、大規模な血管手術、冠動脈バイパス、または他の心臓手術を経験するもしくは経験した対象；以前から存在する鬱血性心不全、子癇前症、子癇、真性糖尿病、高血圧、冠動脈疾患、タンパク尿、腎不全、正常範囲を下回る糸球体濾過、肝硬変、正常範囲を上回る血清クレアチニン、もしくは敗血症を患っている対象；またはＮＳＡＩＤ、シクロスポリン、タクロリムス、アミノグリコシド、フォスカネット、エチレングリコール、ヘモグロビン、ミオグロビン、イホスファミド、重金属、メトトレキサート、放射線造影剤、もしくはストレプトゾトシンに曝露された対象が、本明細書記載の方法に従ってリスクを監視するのに好ましい全ての対象である。このリストは、限定するようには意図しない。この文脈の「以前から存在する」とは、体液試料を対象から得る時に、リスクファクターが存在することを意味する。特に好ましい実施形態において、腎機能への損傷、腎機能の低下、またはＡＲＦの現行の診断に基づくリスク層化について、対象を選択する。
【００２５】
当業者は様々な方法を用いて、これらの方法に使用するための所望の閾値に達することができる。例えば、この域値を、かかる健常対象において測定されるβ２糖タンパク質１の７５％、８５％、９０％、９５％、または９９％を表す濃度を選択することにより、健常対象の集団から決定してもよい。あるいは、この域値を、腎機能への損傷または腎機能の低下を患っているが、ＡＲＦ（または死、透析、腎移植などのいくつかの他の臨床予後）へは進行していない対象の集団から、かかる対象において測定されるβ２糖タンパク質１の７５％、８５％、９０％、９５％、または９９％を表す濃度を選択することにより決定してもよい。別の代替手段において、この域値を、同じ対象のβ２糖タンパク質１を事前に測定することにより決定してもよい。すなわち、その対象におけるβ２糖タンパク質１のレベルの一時的変化を用いて、その対象にリスクを割り当てることができる。すなわち、時間とともにβ２糖タンパク質１の濃度が増加することを用いて、この濃度が安定であるか、または減少している時に割り当てられるリスクと比較して、腎損傷のリスクが増加しているか、または現在患っている腎損傷が進行している対象を同定することができる。
【００２６】
特定の試験の２つの集団を区別する能力を、ＲＯＣ解析を用いて確立することができる。例えば、腎臓の状態における１つ以上の将来的な変化を受けやすい「第一の」亜集団からＲＯＣ曲線を作成し、そのような変化を受けにくい「第二の」亜集団を用いて、ＲＯＣ曲線を作成することができ、この曲線下の面積は試験の質の尺度を提供する。本明細書記載の試験は、好ましくは０．５を超える、好ましくは少なくとも０．６を超える、より好ましくは０．７を超える、さらに好ましくは少なくとも０．８を超える、よりさらに好ましくは少なくとも０．９を超える、最も好ましくは少なくとも０．９５を超えるＲＯＣ曲線面積を提供する。
【００２７】
特定の態様において、β２糖タンパク質１の測定濃度を連続的変数として処理する。例えば、任意の特定の濃度を、対象の腎機能の将来的な低下の可能性に変換することができる。さらに別の代替手段において、閾値は、腎臓の状態における１つ以上の将来的な変化を受けやすい「第一の」亜集団、およびそのような影響を受けない「第二の」亜集団に対象の集団を分離することにおける許容レベルの特異度および感度を提供することができる。試験精度の以下の尺度のうちの１つ以上により、閾値を選択して、この第一および第二の集団を分離する：
１を超える、好ましくは少なくとも約２以上もしくは約０．５以下、より好ましくは少なくとも約３以上もしくは約０．３３以下、さらにより好ましくは少なくとも約４以上もしくは約０．２５以下、さらにより好ましくは少なくとも約５以上もしくは約０．２以下、最も好ましくは少なくとも約１０以上もしくは０．１以下のオッズ比；
０．５を超える、好ましくは少なくとも約０．６、より好ましくは少なくとも約０．７、さらにより好ましくは少なくとも約０．８、さらにより好ましくは少なくとも約０．９、最も好ましくは少なくとも約０．９５の特異度、および０．２を超える、好ましくは約０．３を超える、より好ましくは約０．４を超える、さらにより好ましくは少なくとも約０．５を超える、さらにより好ましくは約０．６を超える、さらにより好ましくは約０．７を超える、さらにより好ましくは約０．８を超える、より好ましくは約０．９を超える、最も好ましくは約０．９５を超える対応する感度；
０．５を超える、好ましくは少なくとも約０．６、より好ましくは少なくとも約０．７、さらにより好ましくは少なくとも約０．８、さらにより好ましくは少なくとも約０．９、最も好ましくは少なくとも約０．９５の感度、および０．２を超える、好ましくは約０．３を超える、より好ましくは約０．４を超える、さらにより好ましくは少なくとも約０．５を超える、さらにより好ましくは約０．６を超える、さらにより好ましくは約０．７を超える、さらにより好ましくは約０．８を超える、より好ましくは約０．９を超える、最も好ましくは約０．９５を超える対応する特異度；
少なくとも約７５％の感度および少なくとも約７５％の特異度；
１を超える、少なくとも約２、より好ましくは少なくとも約３、さらにより好ましくは少なくとも約５、最も好ましくは少なくとも約１０の（感度／（１−特異度）として計算される）陽性尤度比；または
１より低い、約０．５以下、より好ましくは約０．３以下、最も好ましくは約０．１以下の（（１−感度）／特異度として計算される）陰性尤度比。
上記の尺度のいずれかの文脈における「約」という用語は、既定の尺度の＋／−５％を表す。
【００２８】
複数の閾値を用いて、対象の腎臓の状態を評価することができる。例えば、腎臓の状態における１つ以上の将来的な変化を受けやすい「第一の」亜集団、およびそのような影響を受けにくい「第二の」亜集団を、単一グループに統合することができる。その後、このグループを、（細分数に応じて、三分位数、四分位数、五分位数などとして知られる）３つ以上の均等な部分に細かく分ける。対象が分類される細分に基づいて、オッズ比を対象に割り当てる。三分位数を考慮する場合、他の細分の比較のための参照として、最も低いまたは最も高い三分位数を用いることができる。この参照細分は、オッズ比を１と割り当てる。第二の三分位数を、その第一の三分位数に関連するオッズ比を割り当てる。すなわち、第二の三分位数のヒトは、第一の三分位数のヒトと比較して、腎臓の状態における１つ以上の将来的な変化に苦しむ可能性が３倍以上ある。第三の三分位数にも、その第一の三分位数に関連するオッズ比を割り当てる。
【００２９】
特定に実施形態において、このアッセイ法はイムノアッセイである。かかるアッセイで使用する抗体は、β２糖タンパク質１の全長タンパク質と特異的に結合し、かつそれと「関連する」（この用語は下記で定義される）１種類以上のポリペプチドとも結合することができる。多数のイムノアッセイ形式が当業者に知られている。好ましい体液試料は、尿、血液、血清、唾液、涙、および血漿からなる群から選択される。
【００３０】
前述の方法のステップは、β２糖タンパク質１のアッセイ結果を、単独で、対象のリスク層化に使用するという意味で解釈されるべきではない。むしろ、追加変数または他の臨床的徴候を本明細書記載の方法に含めてもよい。例えば、リスク層化の方法は、人口学的情報（例えば、体重、性別、年齢、人種）、病歴（例えば、家族の病歴、手術の種類、動脈瘤、鬱血性心不全、子癇前症、子癇、真性糖尿病、高血圧、冠動脈疾患、タンパク尿、腎不全、もしくは敗血症などの以前から存在する疾患、ＮＳＡＩＤ、シクロスポリン、タクロリムス、アミノグリコシド、フォスカネット、エチレングリコール、ヘモグロビン、ミオグロビン、イホスファミド、重金属、メトトレキサート、放射線造影剤、もしくはストレプトゾトシンなどの毒物曝露の種類）、臨床的変数（例えば、血圧、温度、呼吸速度）、リスクスコア（ＡＰＡＣＨＥスコア、ＰＲＥＤＩＣＴスコア、ＵＡ／ＮＳＴＥＭＩのＴＩＭＩリスクスコア、フラミンガムリスクスコア）、糸球体濾過量、推定糸球体濾過量、尿生産率、血清もしくは血漿のクレアチニン濃度、尿クレアチニン濃度、ナトリウムの分画排泄率、尿ナトリウム濃度、血清もしくは血漿のクレアチニンに対する尿クレアチニンの比、尿比重、尿浸透圧、血漿の尿素窒素に対する尿の尿素窒素の比、クレアチニンに対する血漿ＢＵＮの比、尿ナトリウム／（尿クレアチニン／血漿クレアチニン）として計算される腎不全の指標、血清または血漿の好中球ゼラチナーゼ（ＮＧＡＬ）濃度、尿のＮＧＡＬ濃度、血清もしくは血漿のシスタチンＣ濃度、血清もしくは血漿の心臓トロポニン濃度、血清もしくは血漿のＢＮＰ濃度、血清もしくは血漿のＮＴｐｒｏＢＮＰ濃度、および血清もしくは血漿のｐｒｏＢＮＰ濃度からなる群から選択される、対象について測定される１つ以上の変数と、このアッセイ結果とを組み合わせてもよい。β２糖タンパク質１のアッセイ結果と組み合わせてもよい腎機能の他の尺度は、本明細書の以下に、およびＨａｒｒｉｓｏｎ’ｓ
Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ｏｆ Ｉｎｔｅｒｎａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ,１７ｔｈ Ｅｄ.,ＭｃＧｒａｗ Ｈｉｌｌ,Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ,ｐａｇｅｓ １７４１−１８３０、ならびにＣｕｒｒｅｎｔ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ＆Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ２００８,４７ｔｈ Ｅｄ,ＭｃＧｒａｗ Ｈｉｌｌ,Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ,ｐａｇｅｓ ７８５−８１５（これらの各々は、参照によりその全体が本明細書に組込まれる）に記載されている。
【００３１】
かかる追加変数を、β２糖タンパク質１のアッセイ結果を決定するのに用いられる試料と同時に得られる試料において測定するか、またはそれより早い時期もしくは遅い時期に決定してもよい。これらの追加変数も、同じまたは異なる体液試料において測定することができる。例えば、β２糖タンパク質１を血清または血漿試料において測定し、別のバイオマーカーを尿試料において測定してもよい。さらに、可能性の割り当ては、β２糖タンパク質１のアッセイ結果と、１つ以上のかかる追加変数における一時的変化とを組み合わせてもよい。
【００３２】
他の実施形態において、本明細書記載の腎臓の状態を評価する方法は、対象の腎損傷を診断する方法、すなわち、対象が腎機能への損傷、腎機能の低下、またはＡＲＦを患っているか否かを評価する方法である。これらの実施形態において、このアッセイ結果は、腎臓の状態における変化の発生または不発生と相関する。下記は、好ましい診断の実施形態である。
【００３３】
好ましい診断の実施形態において、これらの方法は、腎機能への損傷の発生または不発生を診断することを含み、このアッセイの結果、例えば、β２糖タンパク質１の測定濃度は、かかる損傷の発生または不発生と相関する。例えば、この測定濃度を閾値と比較してもよく、測定濃度が閾値より低い時に割り当てられる可能性に対して、測定濃度が閾値を超える時に、腎機能へ損傷が発生する可能性の増加を対象に割り当てるか、あるいは、測定濃度が閾値を超える時に割り当てられる可能性に対して、測定濃度が閾値より低い時に、腎機能へ損傷が発生しない可能性の減少を対象に割り当てる。本明細書の以下で言及するβ２糖タンパク質１のアッセイ結果を用いる「診断」は、他の臨床的徴候を考慮にいれることができる。
【００３４】
他の好ましい診断の実施形態において、これらの方法は、腎機能の低下の発生または不発生を診断することを含み、このアッセイの結果、例えば、β２糖タンパク質１の測定濃度は、腎機能の低下を引き起こす損傷の発生または不発生と相関する。例えば、この測定濃度を閾値と比較してもよく、測定濃度が閾値より低い時に割り当てられる可能性に対して、測定濃度が閾値を超える時に、腎機能の低下を引き起こす損傷が発生する可能性の増加を対象に割り当てるか、あるいは、測定濃度が閾値を超える時に割り当てられる可能性に対して、測定濃度が閾値より低い時に、腎機能の低下を引き起こす損傷が発生しない可能性の減少を対象に割り当てる。
【００３５】
さらに他の好ましい診断の実施形態において、これらの方法は、ＡＲＦの発生または不発生を診断することを含み、このアッセイの結果、例えば、β２糖タンパク質１の測定濃度は、ＡＲＦを引き起こす損傷の発生または不発生と相関する。例えば、この測定濃度を閾値と比較してもよく、測定濃度が閾値より低い時に割り当てられる可能性に対して、測定濃度が閾値を超える時に、ＡＲＦを引き起こす損傷が発生する可能性の増加を対象に割り当てるか、あるいは、測定濃度が閾値を超える時に割り当てられる可能性に対して、測定濃度が閾値より低い時に、ＡＲＦを引き起こす損傷が発生しない可能性の減少を対象に割り当てる。
【００３６】
さらに他の好ましい診断の実施形態において、これらの方法は、腎置換療法を必要としている対象を診断することを含み、このアッセイの結果、例えば、β２糖タンパク質１の測定濃度は、腎置換療法の必要性と相関する。例えば、この測定濃度を閾値と比較してもよく、測定濃度が閾値より低い時に割り当てられる可能性に対して、測定濃度が閾値を超える時に、腎置換療法を現在必要とする可能性の増加をその対象に割り当てるか、あるいは、測定濃度が閾値を超える時に割り当てられる可能性に対して、測定濃度が閾値より低い時に、腎置換療を現在必要とする可能性の減少をその対象に割り当てる。
【００３７】
さらに他の好ましい診断の実施形態において、これらの方法は、腎移植を必要としている対象を診断することを含み、このアッセイの結果、例えば、β２糖タンパク質１の測定濃度は、腎置換療法の必要性と相関する。例えば、この測定濃度を閾値と比較してもよく、測定濃度が閾値より低い時に割り当てられる可能性に対して、測定濃度が閾値を超える時に、腎移植を現在必要とする可能性の増加をその対象に割り当てるか、あるいは、測定濃度が閾値を超える時に割り当てられる可能性に対して、測定濃度が閾値より低い時に、腎移植を現在必要とする可能性の減少をその対象に割り当てる。
【００３８】
当業者は、様々な方法を用いて所望の閾値に達することができる。例えば、この域値を、かかる健常対象において測定されるβ２糖タンパク質１の７５％、８５％、９０％、９５％、または９９％を表す濃度を選択することにより、健常対象の集団から決定してもよい。別の代替手段において、この域値を、同じ対象のβ２糖タンパク質１を事前に測定することにより決定してもよい。すなわち、その対象におけるβ２糖タンパク質１のレベルの一時的変化を用いて、その対象に診断を割り当てることができる。
【００３９】
さらに別の代替手段において、閾値は、対象となる疾患を患っている「第一の」亜集団および対象となる疾患を患っていない「第二の」亜集団に対象の複合集団を分離することにおける許容レベルの特異度および感度を提供することができる。試験精度の以下の尺度のうちの１つ以上により閾値を選択して、この第一および第二の集団を分離する：
１を超える、好ましくは少なくとも約２以上もしくは約０．５以下、より好ましくは少なくとも約３以上もしくは約０．３３以下、さらにより好ましくは少なくとも約４以上もしくは約０．２５以下、さらにより好ましくは少なくとも約５以上もしくは約０．２以下、最も好ましくは少なくとも約１０以上もしくは０．１以下のオッズ比；
０．５を超える、好ましくは少なくとも約０．６、より好ましくは少なくとも約０．７、さらにより好ましくは少なくとも約０．８、さらにより好ましくは少なくとも約０．９、最も好ましくは少なくとも約０．９５の特異度、および０．２を超える、好ましくは約０．３を超える、より好ましくは約０．４を超える、さらにより好ましくは少なくとも約０．５を超える、さらにより好ましくは約０．６を超える、さらにより好ましくは約０．７を超える、さらにより好ましくは約０．８を超える、より好ましくは約０．９を超える、最も好ましくは約０．９５を超える対応する感度；
０．５を超える、好ましくは少なくとも約０．６、より好ましくは少なくとも約０．７、さらにより好ましくは少なくとも約０．８、さらにより好ましくは少なくとも約０．９、最も好ましくは少なくとも約０．９５の感度、および０．２を超える、好ましくは約０．３を超える、より好ましくは約０．４を超える、さらにより好ましくは少なくとも約０．５を超える、さらにより好ましくは約０．６を超える、さらにより好ましくは約０．７を超える、さらにより好ましくは約０．８を超える、より好ましくは約０．９を超える、最も好ましくは約０．９５を超える対応する特異度；
少なくとも約７５％の感度および少なくとも約７５％の特異度；
１を超える、少なくとも約２、より好ましくは少なくとも約３、さらにより好ましくは少なくとも約５、最も好ましくは少なくとも約１０の（感度／（１−特異度）として計算される）陽性尤度比；または
１より低い、約０．５以下、より好ましくは約０．３以下、最も好ましくは約０．１以下の（（１−感度）／特異度として計算される）陰性尤度比。
上記の尺度のいずれかの文脈における「約」という用語は、既定の尺度の＋／−５％を表す。
【００４０】
複数の閾値を用いて、対象の腎臓の状態も評価することができる。例えば、対象の病状を有する人々の「第一の」亜集団、およびそうではない「第二の」亜集団を、単一グループに統合することができる。その後、このグループを、（細分数に応じて、三分位数、四分位数、五分位数などとして知られる）３つ以上の均等な部分に細かく分ける。対象が分類される細分に基づいて、オッズ比を対象に割り当てる。三分位数を考慮する場合、他の細分の比較のための参照として、最も低いまたは最も高い三分位数を用いることができる。この参照細分は、オッズ比を１と割り当てる。第二の三分位数を、その第一の三分位数に関連するオッズ比を割り当てる。すなわち、第二の三分位数のヒトは、第一の三分位数のヒトと比較して、この病状を有する可能性が３倍以上ある。第三の三分位数にも、その第一の三分位数に関連するオッズ比を割り当てる。
【００４１】
特定に実施形態において、このアッセイ法はイムノアッセイである。かかるアッセイで使用する抗体は、β２糖タンパク質１の全長タンパク質と特異的に結合し、かつそれと「関連する」（この用語は下記で定義される）１種類以上のポリペプチドとも結合することができる。多数のイムノアッセイ形式が当業者に知られている。好ましい体液試料は、尿、血液、血清、および血漿からなる群から選択される。
【００４２】
前述の方法のステップは、β２糖タンパク質１のアッセイ結果を、単独で、対象の診断に使用するという意味で解釈されるべきではない。むしろ、追加変数を本明細書記載の方法に含めてもよい。例えば、診断は、人口学的情報（例えば、体重、性別、年齢、人種）、病歴（例えば、家族の病歴、手術の種類、動脈瘤、鬱血性心不全、子癇前症、子癇、真性糖尿病、高血圧、冠動脈疾患、タンパク尿、腎不全、もしくは敗血症などの以前から存在する疾患、ＮＳＡＩＤ、シクロスポリン、タクロリムス、アミノグリコシド、フォスカネット、エチレングリコール、ヘモグロビン、ミオグロビン、イホスファミド、重金属、メトトレキサート、放射線造影剤、もしくはストレプトゾトシンなどの毒物曝露の種類）、臨床的変数（例えば、血圧、温度、呼吸速度）、リスクスコア（ＡＰＡＣＨＥスコア、ＰＲＥＤＩＣＴスコア、ＵＡ／ＮＳＴＥＭＩのＴＩＭＩリスクスコア、フラミンガムリスクスコア）、糸球体濾過量、推定糸球体濾過量、尿生産率、血清もしくは血漿のクレアチニン濃度、尿クレアチニン濃度、ナトリウムの分画排泄率、尿ナトリウム濃度、血清もしくは血漿のクレアチニンに対する尿クレアチニンの比、尿比重、尿浸透圧、血漿の尿素窒素に対する尿の尿素窒素の比、クレアチニンに対する血漿ＢＵＮの比、尿ナトリウム／（尿クレアチニン／血漿クレアチニン）として計算される腎不全の指標、血清または血漿の好中球ゼラチナーゼ（ＮＧＡＬ）濃度、尿のＮＧＡＬ濃度、血清もしくは血漿のシスタチンＣ濃度、血清もしくは血漿の心臓トロポニン濃度、血清もしくは血漿のＢＮＰ濃度、血清もしくは血漿のＮＴｐｒｏＢＮＰ濃度、および血清もしくは血漿のｐｒｏＢＮＰ濃度からなる群から選択される、対象について測定される１つ以上の変数と、このアッセイ結果とを組み合わせてもよい。β２糖タンパク質１のアッセイ結果と組み合わせてもよい腎機能の他の尺度は、本明細書の以下に、およびＨａｒｒｉｓｏｎ’ｓ
Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ｏｆ Ｉｎｔｅｒｎａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ,１７ｔｈ Ｅｄ.,ＭｃＧｒａｗ Ｈｉｌｌ,Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ,ｐａｇｅｓ １７４１−１８３０、ならびにＣｕｒｒｅｎｔ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ＆Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ２００８,４７ｔｈ Ｅｄ,ＭｃＧｒａｗ Ｈｉｌｌ,Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ,ｐａｇｅｓ ７８５−８１５（これらの各々は、参照によりその全体が本明細書に組込まれる）に記載されている。
【００４３】
かかる追加変数を、β２糖タンパク質１のアッセイ結果を決定するのに用いられる試料と同時に得られる試料において測定するか、またはそれより早い時期もしくは遅い時期に決定してもよい。これらの追加変数も、同じまたは異なる体液試料において測定することができる。例えば、β２糖タンパク質１を血清または血漿試料において測定し、別のバイオマーカーを尿試料において測定してもよい。さらに、診断法は、β２糖タンパク質１のアッセイ結果と、１つ以上のかかる追加変数における一時的変化とを組み合わせてもよい。
【００４４】
さらに他の実施形態において、本明細書記載の腎臓の状態を評価する方法は、対象の腎損傷を監視する方法であり、すなわち、腎機能への損傷、腎機能の低下、またはＡＲＦを患っている対象において、腎機能が改善しているかまたは悪化しているか否かを評価する方法である。これらの実施形態において、このアッセイ結果は、腎臓の状態における変化の発生または不発生と相関する。以下のものは、好ましい監視の実施形態である。
【００４５】
好ましい監視の実施形態において、これらの方法は、腎機能への損傷を患っている対象において、腎臓の状態を監視することを含み、このアッセイの結果、例えば、β２糖タンパク質１の測定濃度は、その対象の腎臓の状態における変化の発生または不発生と相関する。例えば、この測定濃度を閾値と比較してもよく、測定濃度が閾値を超える時に、腎機能の悪化をその対象に割り当てるか、あるいは、測定濃度が閾値より低い時に、腎機能の改善をその対象に割り当ててもよい。
【００４６】
他の好ましい監視の実施形態において、これらの方法は、腎機能の低下を患っている対象において、腎臓の状態を監視することを含み、このアッセイの結果、例えば、β２糖タンパク質１の測定濃度は、その対象の腎臓の状態における変化の発生または不発生と相関する。例えば、この測定濃度を閾値と比較してもよく、測定濃度が閾値を超える時に、腎機能の悪化をその対象に割り当てるか、あるいは、測定濃度が閾値より低い時に、腎機能の改善をその対象に割り当ててもよい。
【００４７】
さらに他の好ましい監視の実施形態において、これらの方法は、急性腎不全を患っている対象において、腎臓の状態を監視することを含み、このアッセイの結果、例えば、β２糖タンパク質１の測定濃度は、その対象の腎臓の状態における変化の発生または不発生と相関する。例えば、この測定濃度を閾値と比較してもよく、測定濃度が閾値を超える時に、腎機能の悪化をその対象に割り当てるか、あるいは、測定濃度が閾値より低い時に、腎機能の改善をその対象に割り当ててもよい。
【００４８】
さらに他の好ましい監視の実施形態において、これらの方法は、腎前性、腎内性、または腎後性のＡＲＦに対する１つ以上の既知のリスクファクターが以前から存在することにより、腎機能への損傷のリスクのある対象において、腎臓の状態を監視することを含み、このアッセイの結果、例えば、β２糖タンパク質１の測定濃度は、その対象の腎臓の状態における変化の発生または不発生と相関する。例えば、この測定濃度を閾値と比較してもよく、測定濃度が閾値を超える時に、腎機能の悪化をその対象に割り当てるか、あるいは、測定濃度が閾値より低い時に、腎機能の改善をその対象に割り当ててもよい。
【００４９】
当業者は様々な方法を用いて所望の閾値に達することができる。例えば、この域値を、かかる健常対象において測定されるβ２糖タンパク質１の７５％、８５％、９０％、９５％、または９９％を表す濃度を選択することにより、健常対象の集団から決定してもよい。別の代替手段において、この域値を、同じ対象のβ２糖タンパク質１を事前に測定することにより決定してもよい。すなわち、その対象におけるβ２糖タンパク質１のレベルの一時的変化を用いて、その対象に診断を割り当ててもよい。
【００５０】
さらに別の代替手段において、閾値は、対象となる疾患を患っていて、かつその腎機能が悪化する「第一の」亜集団、および対象となる疾患を患っていて、かつその腎機能が改善する「第二の」亜集団に対象の複合集団を分離することにおける許容レベルの特異度および感度を提供することができる。試験精度の以下の尺度のうちの１つ以上により、閾値を選択して、この第一および第二の集団を分離する：
１を超える、好ましくは少なくとも約２以上もしくは約０．５以下、より好ましくは少なくとも約３以上もしくは約０．３３以下、さらにより好ましくは少なくとも約４以上もしくは約０．２５以下、さらにより好ましくは少なくとも約５以上もしくは約０．２以下、最も好ましくは少なくとも約１０以上もしくは０．１以下のオッズ比；
０．５を超える、好ましくは少なくとも約０．６、より好ましくは少なくとも約０．７、さらにより好ましくは少なくとも約０．８、さらにより好ましくは少なくとも約０．９、最も好ましくは少なくとも約０．９５の特異度、および０．２を超える、好ましくは約０．３を超える、より好ましくは約０．４を超える、さらにより好ましくは少なくとも約０．５を超える、さらにより好ましくは約０．６を超える、さらにより好ましくは約０．７を超える、さらにより好ましくは約０．８を超える、より好ましくは約０．９を超える、最も好ましくは約０．９５を超える対応する感度；
０．５を超える、好ましくは少なくとも約０．６、より好ましくは少なくとも約０．７、さらにより好ましくは少なくとも約０．８、さらにより好ましくは少なくとも約０．９、最も好ましくは少なくとも約０．９５の感度、および０．２を超える、好ましくは約０．３を超える、より好ましくは約０．４を超える、さらにより好ましくは少なくとも約０．５を超える、さらにより好ましくは約０．６を超える、さらにより好ましくは約０．７を超える、さらにより好ましくは約０．８を超える、より好ましくは約０．９を超える、最も好ましくは約０．９５を超える対応する特異度；
少なくとも約７５％の感度および少なくとも約７５％の特異度；
１を超える、少なくとも約２、より好ましくは少なくとも約３、さらにより好ましくは少なくとも約５、最も好ましくは少なくとも約１０の（感度／（１−特異度）として計算される）陽性尤度比；または
１より低い、約０．５以下、より好ましくは約０．３以下、最も好ましくは約０．１以下の（（１−感度）／特異度として計算される）陰性尤度比。
上記の尺度のいずれかの文脈における「約」という用語は、既定の尺度の＋／−５％を表す。
【００５１】
複数の閾値を用いて、対象の腎臓の状態を監視することができる。例えば、腎機能が改善（または悪化）している人々の「第一の」亜集団、およびそうではない人々の「第二の」亜集団を、単一グループに統合することができる。その後、このグループを、（細分数に応じて、三分位数、四分位数、五分位数などとして知られる）３つ以上の均等な部分に細かく分ける。対象が分類される細分に基づいて、オッズ比を対象に割り当てる。三分位数を考慮する場合、他の細分の比較のための参照として、最も低いまたは最も高い三分位数を用いることができる。この参照細分は、オッズ比を１と割り当てる。第二の三分位数を、その第一の三分位数に関連するオッズ比を割り当てる。すなわち、第二の三分位数のヒトは、第一の三分位数のヒトと比較して、改善（または悪化）する可能性が３倍以上ある。第三の三分位数にも、その第一の三分位数に関連するオッズ比を割り当てる。
【００５２】
特定に実施形態において、このアッセイ法はイムノアッセイである。かかるアッセイで使用する抗体は、β２糖タンパク質１の全長タンパク質と特異的に結合し、かつそれと「関連する」（この用語は下記で定義される）１種類以上のポリペプチドとも結合することができる。多数のイムノアッセイ形式が当業者に知られている。好ましい体液試料は、尿、血液、血清、唾液、涙、および血漿からなる群から選択される。
【００５３】
前述の方法のステップは、β２糖タンパク質１のアッセイ結果を、単独で、対象を監視するのに使用するという意味で解釈されるべきではない。むしろ、追加変数を本明細書記載の方法に含めてもよい。例えば、監視は、人口学的情報（例えば、体重、性別、年齢、人種）、病歴（例えば、家族の病歴、手術の種類、動脈瘤、鬱血性心不全、子癇前症、子癇、真性糖尿病、高血圧、冠動脈疾患、タンパク尿、腎不全、もしくは敗血症などの以前から存在する疾患、ＮＳＡＩＤ、シクロスポリン、タクロリムス、アミノグリコシド、フォスカネット、エチレングリコール、ヘモグロビン、ミオグロビン、イホスファミド、重金属、メトトレキサート、放射線造影剤、もしくはストレプトゾトシンなどの毒物曝露の種類）、臨床的変数（例えば、血圧、温度、呼吸速度）、リスクスコア（ＡＰＡＣＨＥスコア、ＰＲＥＤＩＣＴスコア、ＵＡ／ＮＳＴＥＭＩのＴＩＭＩリスクスコア、フラミンガムリスクスコア）、糸球体濾過量、推定糸球体濾過量、尿生産率、血清もしくは血漿のクレアチニン濃度、尿クレアチニン濃度、ナトリウムの分画排泄率、尿ナトリウム濃度、血清もしくは血漿のクレアチニンに対する尿クレアチニンの比、尿比重、尿浸透圧、血漿の尿素窒素に対する尿の尿素窒素の比、クレアチニンに対する血漿ＢＵＮの比、尿ナトリウム／（尿クレアチニン／血漿クレアチニン）として計算される腎不全の指標、血清または血漿の好中球ゼラチナーゼ（ＮＧＡＬ）濃度、尿のＮＧＡＬ濃度、血清もしくは血漿のシスタチンＣ濃度、血清もしくは血漿の心臓トロポニン濃度、血清もしくは血漿のＢＮＰ濃度、血清もしくは血漿のＮＴｐｒｏＢＮＰ濃度、および血清もしくは血漿のｐｒｏＢＮＰ濃度からなる群から選択される、対象について測定される１つ以上の変数と、このアッセイ結果とを組み合わせてもよい。β２糖タンパク質１のアッセイ結果と組み合わせてもよい腎機能の他の尺度は、本明細書の以下に、およびＨａｒｒｉｓｏｎ’ｓ
Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ｏｆ Ｉｎｔｅｒｎａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ,１７ｔｈ Ｅｄ.,ＭｃＧｒａｗ Ｈｉｌｌ,Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ,ｐａｇｅｓ １７４１−１８３０、ならびにＣｕｒｒｅｎｔ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ＆Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ２００８,４７ｔｈ Ｅｄ,ＭｃＧｒａｗ Ｈｉｌｌ,Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ,ｐａｇｅｓ ７８５−８１５（これらの各々は、参照によりその全体が本明細書に組込まれる）に記載されている。
【００５４】
かかる追加変数を、β２糖タンパク質１のアッセイ結果を決定するのに用いられる試料と同時に得られる試料において測定するか、またはそれより早い時期もしくは遅い時期に決定してもよい。これらの追加変数も、同じまたは異なる体液試料において測定することができる。例えば、β２糖タンパク質１を血清または血漿試料において測定し、別のバイオマーカーを尿試料において測定してもよい。さらに、監視の方法は、β２糖タンパク質１のアッセイ結果と、１つ以上のかかる追加変数における一時的変化とを組み合わせてもよい。
【００５５】
さらに他の実施形態において、本明細書記載の腎臓の状態を評価する方法は、対象の腎損傷を分類する方法であり、すなわち、対象の腎損傷が腎前性、腎内性、または腎後性であるのかを決定する方法、および／またはこれらのクラスを、急性尿細管損傷、急性糸球体腎炎、急性尿細管間質性腎炎、急性血管腎症、または浸潤性疾患などのサブクラスに細かく分ける方法である。これらの実施形態において、このアッセイの結果は、特定のクラスおよび／またはサブクラスと相関する。下記は、好ましい分類の実施形態である。
【００５６】
好ましい分類の実施形態において、これらの方法は、対象の腎損傷が腎前性、腎内性、または腎後性であるのかを決定すること、および／またはこれらのクラスを、急性尿細管損傷、急性糸球体腎炎、急性尿細管間質性腎炎、急性血管腎症、または浸潤性疾患などのサブクラスにさらに細かく分けることであり、このアッセイの結果、例えば、β２糖タンパク質１の測定濃度は、その対象についての損傷分類と相関する。例えば、測定濃度を閾値と比較してもよく、測定濃度が閾値を超える時に、特定の分類を割り当てるか、あるいは、測定濃度が閾値より低い時に、異なる分類をその対象に割り当ててもよい。
【００５７】
当業者は、様々な方法を用いて所望の閾値に達してもよい。例えば、この域値を、特定分類（例えば、「対照」グループ）に属さない対象の集団から、かかる対照の対象において測定されるβ２糖タンパク質１の７５％、８５％、９０％、９５％、または９９％を表す濃度を選択することにより決定してもよい。別の代替手段において、この域値を、同じ対象のβ２糖タンパク質１を事前に測定することにより決定してもよい。すなわち、その対象におけるβ２糖タンパク質１のレベルの一時的変化を用いて、その対象に分類を割り当ててもよい。
【００５８】
さらに別の代替手段において、閾値は、特定分類を有する「第一の」亜集団および異なる分類を有する「第二の」亜集団に対象の複合集団を分離することにおける許容レベルの特異度および感度を提供することができる。試験精度の以下の尺度のうちの１つ以上により、閾値を選択して、この第一および第二の集団を分離する：
１を超える、好ましくは少なくとも約２以上もしくは約０．５以下、より好ましくは少なくとも約３以上もしくは約０．３３以下、さらにより好ましくは少なくとも約４以上もしくは約０．２５以下、さらにより好ましくは少なくとも約５以上もしくは約０．２以下、最も好ましくは少なくとも約１０以上もしくは０．１以下のオッズ比；
０．５を超える、好ましくは少なくとも約０．６、より好ましくは少なくとも約０．７、さらにより好ましくは少なくとも約０．８、さらにより好ましくは少なくとも０．９、最も好ましくは少なくとも０．９５の特異度、および０．２を超える、好ましくは約０．３を超える、より好ましくは約０．４を超える、さらにより好ましくは少なくとも約０．５を超える、さらにより好ましくは約０．６を超える、さらにより好ましくは約０．７を超える、さらにより好ましくは約０．８を超える、より好ましくは約０．９を超える、最も好ましくは約０．９５を超える対応する感度；
０．５を超える、好ましくは少なくとも約０．６、より好ましくは少なくとも約０．７、さらにより好ましくは少なくとも約０．８、さらにより好ましくは少なくとも０．９、最も好ましくは少なくとも０．９５の感度、および０．２を超える、好ましくは約０．３を超える、より好ましくは約０．４を超える、さらにより好ましくは少なくとも約０．５を超える、さらにより好ましくは約０．６を超える、さらにより好ましくは約０．７を超える、さらにより好ましくは約０．８を超える、より好ましくは約０．９を超える、最も好ましくは約０．９５を超える対応する特異度；
少なくとも約７５％の感度および少なくとも約７５％の特異度；
１を超える、少なくとも約２、より好ましくは少なくとも約３、さらにより好ましくは少なくとも約５、最も好ましくは少なくとも約１０の（感度／（１−特異度）として計算される）陽性尤度比；または
１より低い、約０．５以下、より好ましくは約０．３以下、最も好ましくは約０．１以下の（（１−感度）／特異度として計算される）陰性尤度比。
この文脈における「約」という用語は、既定の尺度の＋／−５％を表す。
【００５９】
複数の閾値を用いて、対象の腎損傷を分類することができる。例えば、特定分類を有する人々の「第一の」亜集団、および異なる分類を有する「第二の」亜集団を、単一グループに統合することができる。その後、このグループを、（細分数に応じて、三分位数、四分位数、五分位数などとして知られる）３つ以上の均等な部分に細かく分ける。対象が分類される細分に基づいて、オッズ比を対象に割り当てる。三分位数を考慮する場合、他の細分の比較のための参照として、最も低いまたは最も高い三分位数を用いることができる。この参照細分は、オッズ比を１と割り当てる。第二の三分位数を、その第一の三分位数に関連するオッズ比を割り当てる。すなわち、第二の三分位数のあるヒトは、第一の三分位数のヒトと比較して、特定分類を有する可能性が３倍以上ある。第三の三分位数にも、その第一の三分位数に関連するオッズ比を割り当てる。
【００６０】
特定に実施形態において、このアッセイ法はイムノアッセイである。かかるアッセイで使用する抗体は、β２糖タンパク質１の全長タンパク質と特異的に結合し、かつそれと「関連する」（この用語は下記で定義される）１種類以上のポリペプチドとも結合してもよい。多数のイムノアッセイ形式が当業者に知られている。好ましい体液試料は、尿、血液、血清、および血漿からなる群から選択される。
【００６１】
前述の方法のステップは、β２糖タンパク質１のアッセイ結果を、単独で、対象における損傷の分類に使用するという意味で解釈されるべきではない。むしろ、追加変数を本明細書記載の方法に含めてもよい。例えば、分類は、人口学的情報（例えば、体重、性別、年齢、人種）、病歴（例えば、家族の病歴、手術の種類、動脈瘤、鬱血性心不全、子癇前症、子癇、真性糖尿病、高血圧、冠動脈疾患、タンパク尿、腎不全、もしくは敗血症などの以前から存在する疾患、ＮＳＡＩＤ、シクロスポリン、タクロリムス、アミノグリコシド、フォスカネット、エチレングリコール、ヘモグロビン、ミオグロビン、イホスファミド、重金属、メトトレキサート、放射線造影剤、もしくはストレプトゾトシンなどの毒物曝露の種類）、臨床的変数（例えば、血圧、温度、呼吸速度）、リスクスコア（ＡＰＡＣＨＥスコア、ＰＲＥＤＩＣＴスコア、ＵＡ／ＮＳＴＥＭＩのＴＩＭＩリスクスコア、フラミンガムリスクスコア、心臓手術後の急性腎不全を予測するＴｈａｋｅｒスコアなど）、糸球体濾過量、推定糸球体濾過量、尿生産率、血清もしくは血漿のクレアチニン濃度、尿クレアチニン濃度、ナトリウムの分画排泄率、尿ナトリウム濃度、血清もしくは血漿のクレアチニンに対する尿クレアチニンの比、尿比重、尿浸透圧、血漿の尿素窒素に対する尿の尿素窒素の比、クレアチニンに対する血漿ＢＵＮの比、尿ナトリウム／（尿クレアチニン／血漿クレアチニン）として計算される腎不全の指標、血清または血漿の好中球ゼラチナーゼ（ＮＧＡＬ）濃度、尿のＮＧＡＬ濃度、血清もしくは血漿のシスタチンＣ濃度、血清もしくは血漿のＢＮＰ濃度、血清もしくは血漿のＮＴｐｒｏＢＮＰ濃度、および血清もしくは血漿のｐｒｏＢＮＰ濃度からなる群から選択される、対象について測定される１つ以上の変数と、このアッセイ結果とを組み合わせてもよい。β２糖タンパク質１のアッセイ結果と組み合わせてもよい腎機能の他の尺度は、本明細書の以下に、およびＨａｒｒｉｓｏｎ’ｓ
Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ｏｆ Ｉｎｔｅｒｎａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ,１７ｔｈ Ｅｄ.,ＭｃＧｒａｗ Ｈｉｌｌ,Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ,ｐａｇｅｓ １７４１−１８３０、ならびにＣｕｒｒｅｎｔ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ＆Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ２００８,４７ｔｈ Ｅｄ,ＭｃＧｒａｗ Ｈｉｌｌ,Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ,ｐａｇｅｓ ７８５−８１５（これらの各々は、参照によりその全体が本明細書に組込まれる）に記載されている。
【００６２】
かかる追加変数を、β２糖タンパク質１のアッセイ結果を決定するのに用いられる試料と同時に得られる試料において測定するか、またはそれより早い時期もしくは遅い時期に決定してもよい。これらの追加変数も、同じまたは異なる体液試料において測定することができる。例えば、β２糖タンパク質１を血清または血漿試料において測定し、別のバイオマーカーを尿試料において測定してもよい。さらに、監視の方法は、β２糖タンパク質１のアッセイ結果と、１つ以上のかかる追加変数における一時的変化とを組み合わせてもよい。
【００６３】
関連する様々な態様において、本発明は、本明細書記載の方法を実行するための装置およびキットにも関連する。適切なキットは、記載の閾値比較を実行するための説明書と共に、記載のβ２糖タンパク質１アッセイのうちの少なくとも１つを実行するのに十分である試薬を含む。
【００６４】
特定の実施形態において、かかるアッセイを実行するための試薬はアッセイ装置に供給され、かかるアッセイ装置はかかるキットに含まれてもよい。好ましい試薬は、１種類以上の固相抗体を含み、この固相抗体は、固形支持体に結合した目的のバイオマーカーの（１つまたは複数の）標的を検出する抗体を含み得る。サンドイッチイムノアッセイの場合、かかる試薬は、１種類以上の検出可能な程度に標識された抗体も含み、この検出可能な程度に標識された抗体は、検出可能な標識に結合した目的のバイオマーカーの（１つまたは複数の）標的を検出する抗体を含み得る。アッセイ装置の一部として提供され得る追加の随意的要素を、本明細書の以下に記載する。
【００６５】
検出可能な標識は、それら自体検出可能（例えば、蛍光性の部分、電気化学的標識、ｅｃｌ（電気化学発光）標識、金属キレート、コロイド金属粒子など）である分子、および検出可能な反応産物（例えば、西洋ワサビペルオキシダーゼなどの酵素、アルカリホスファターゼなど）の産生によって、または、それ自体検出可能であり得る特異的結合分子（例えば、二次抗体、ビオチン、ジゴキシゲニン、マルトース、オリゴヒスチジン、２，４−ジニトロベンゼン、フェニルヒ酸（ｐｈｅｎｙｌａｒｓｅｎａｔｅ）、ｓｓＤＮＡ、ｄｓＤＮＡなど）の使用を経て間接的に検出され得る分子を含み得る。
【００６６】
シグナル発生要素からのシグナルの産生を、当業で周知の様々な光学的な、聴覚の、電気化学的方法を用いて行うことができる。検出モードの例として、蛍光発光、放射化学検出、反射率、吸光度、電流測定、伝導性、インピーダンス、インターフェロメトリー、偏光解析法などが挙げられる。これらの方法のうちの特定の方法において、固相抗体は、シグナル産生のトランスデューサー（例えば、回折格子、電気化学センサーなど）に結合するが、他の方法において、固相抗体から空間的に離れたトランスデューサー（例えば、励起光源および光学検出器を使用する蛍光光度計）によりシグナルを産生する。このリストは、限定するようには意図しない。抗体ベースのバイオセンサーも使用して、任意選択で標識分子を必要としない検体の存在または量を決定してもよい。
【発明を実施するための形態】
【００６７】
本発明は、β２糖タンパク質１の測定を経て、腎機能への損傷、腎機能の低下、および／または急性腎不全を患う対象もしくはそれらを患うリスクのある対象における診断、鑑別診断、リスク層化、監視、分類ならびに治療計画の決定のための方法および組成物に関連する。
【００６８】
本明細書の目的のために、以下の定義を適用する。本明細書で使用する「腎機能への損傷」は、腎機能の尺度における突然（１４日以内、好ましくは７日以内、より好ましくは７２時間以内、さらにより好ましくは４８時間以内）の測定可能な低下である。かかる損傷を、例えば、糸球体濾過量または推定ＧＦＲの減少、尿排出量の低下、血清クレアチニンの増加、血清シスタチンＣの増加、腎置換療法の必要性などによって明らかにしてもよい。「腎機能の改善」は、腎機能の尺度における突然（１４日以内、好ましくは７日以内、より好ましくは７２時間以内、さらにより好ましくは４８時間以内）の測定可能な増加である。ＧＦＲを測定および／または評価する好ましい方法を、本明細書の以下に記載する。
【００６９】
本明細書で使用する「腎機能の低下」は、０．１ｍｇ／ｄＬ以上（≧８．８μｍｏｌ／Ｌ）の血清クレアチニンの絶対的増加、２０％（ベースラインから１．２倍）以上の血清クレアチニンの増加の割合、または尿排出量の低下（１時間あたり０．５ｍｌ／ｋｇより低い実証された乏尿）によって明らかにされる腎臓機能における突然（１４日以内、好ましくは７日以内、より好ましくは７２時間以内、さらにより好ましくは４８時間以内）の低下である。
【００７０】
本明細書で使用する「急性腎不全」または「ＡＲＦ」は、０．３ｍｇ／ｄＬ以上（≧２６．４μｍｏｌ／ｌ）の血清クレアチニンの絶対的増加、５０％（ベースラインから１．５倍）以上の血清クレアチニンの増加の割合、または尿排出量の低下（少なくとも６時間の間、１時間あたり０．５ｍｌ／ｋｇより低い実証された乏尿）によって明らかにされる腎臓機能における突然（１４日以内、好ましくは７日以内、より好ましくは７２時間以内、さらにより好ましくは４８時間以内）の低下である。この用語は、「急性腎臓損傷」または
「ＡＫＩ」と同義である。
【００７１】
本明細書で使用する「β２糖タンパク質１」という用語は、生体試料中に存在し、β２糖タンパク質１前駆体に由来する１種類以上のポリペプチド（Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔ
Ｐ０２７４９（配列番号１））である。
【表２】
【００７２】
以下のドメインが、β２糖タンパク質１において同定された。
残基 → 長さ → → ドメインＩＤ
１−１９ → １９ → → シグナル配列
２０−３４５ → ３２６ → → β２糖タンパク質１
【００７３】
さらに、いくつかの天然に存在するバリアントが同定された。
残基 変化
５→ → → →ＶからＡ
１０７→ → →ＳからＮ
１５４→ → →ＲからＨ
２６６→ → →ＶからＬ
３２５→ → →ＣからＧ
３３５→ → →ＷからＳ
【００７４】
この点において、イムノアッセイから得られるシグナルは、１種類以上の抗体および標的生体分子（すなわち、検体）ならびにこれらの抗体が結合する必須の（１つまたは複数の）エピトープを含むポリペプチドとの間で形成される複合体の直接的な結果であることを、当業者は理解するであろう。かかるアッセイは全長のβ２糖タンパク質１分子を検出し、このアッセイ結果はβ２糖タンパク質１の濃度として表され得るが、実際は、このアッセイのシグナルは、試料中に存在する全てのかかる「免疫反応性」ポリペプチドの結果である。β２糖タンパク質１の発現を、タンパク質測定（ドットブロット、ウエスタンブロット、クロマトグラフ法、質量分析法など）および核酸測定（ｍＲＮＡ定量化）を含むイムノアッセイ以外の手段によって決定してもよい。このリストは、限定することを意図しない。
【００７５】
本明細書で使用する、検体の「存在または量とシグナルを関連づける」という用語は、この理解を反映する。典型的には、所望の検体の既知濃度を用いて計算される標準曲線の使用を経て、アッセイシグナルを検体の存在または量と関連づける。この用語は、本明細書で使用されるように、アッセイが、生理的に適切な濃度の検体の存在または量を示す検出可能なシグナルを発生することができる場合、アッセイは、検体を「検出するように構成」される。ポリペプチドがこのアッセイにおいて使用される抗体または複数の抗体に結合するのに必要な（１つまたは複数の）エピトープを含む限り、抗体エピトープは約８アミノ酸であるので、β２糖タンパク質１を検出するように構成されるイムノアッセイは、β２糖タンパク質１配列と関連するポリペプチドも検出するであろう。β２糖タンパク質１などのバイオマーカーに関して、本明細書で使用する「関連マーカー」という用語は、マーカーそれ自体の代替としてもしくは独立したバイオマーカー類として検出され得る特定のマーカーまたはその生合成の親マーカーのうちの１つ以上の断片を表す。この用語は、生体試料中に存在し、結合タンパク質類、受容体類、ヘパリン、脂質類、糖類などの追加種と複合体を形成するβ２糖タンパク質１前駆体に由来する１種類以上のポリペプチドも表す。
【００７６】
本明細書で使用する「対象」という用語は、ヒトまたはヒトではない生物を表す。したがって、本明細書記載の方法および組成物は、ヒトおよび動物の両方の疾患に適用できる。さらに、対象は生物であることが好ましいが、本明細書記載の発明は、死後の検体において同様に使用してもよい。好ましい対象はヒトであり、最も好ましくは「患者」であり、本明細書で使用する患者は、疾患または病気の医療を受けている、生きているヒトを表す。これには、病気が分からない、病状の兆候について調べられているヒトが含まれる。
【００７７】
検体は試料において測定されることが好ましい。かかる試料を、対象から取得するか、または対象に提供されることが意図される生体物質から取得してもよい。例えば、試料は、対象への移植の可能性について評価されている腎臓から取得してもよく、検体測定を用いて、以前から存在する損傷についてこの腎臓を評価してもよい。試料は、体液試料であることが好ましい。
【００７８】
本明細書で使用する「体液試料」という用語は、患者または移植提供者などの所望の対象の診断、予後診断、分類または評価の目的のために取得される体液の試料を表す。特定の実施形態において、かかる試料を、進行している病気の予後または病気における治療計画の効果を決定する目的のために取得してもよい。好ましい体液試料には、血液、血清、血漿、脳脊髄液、尿、唾液、痰、および胸水が含まれる。さらに、特定の体液試料は、分画または精製の手順後に、例えば、全血を血清または血漿の成分へ分離した後に、より容易に解析されるということを当業者は理解するであろう。
【００７９】
本明細書で使用する「診断」という用語は、患者がある疾患または病気を患っているか否かの可能性（ｐｒｏｂａｂｉｌｉｔｙ）（「可能性（ｌｉｋｅｌｉｈｏｏｄ）」）を当業者が評価および／または決定することができる方法を表す。本発明の場合、「診断」は、任意選択で、他の臨床的特徴と共に本発明のβ２糖タンパク質１アッセイの結果を用いて、試料を取得し、アッセイする対象の急性腎損傷またはＡＲＦの診断（すなわち、発生もしくは不発生）に達することを含む。かかる診断が「決定される」ということは、この診断が１００％正確であることを意味することは意図しない。多くのバイオマーカーが複数の病気を示す。熟練した臨床医は、情報の真空状態においてバイオマーカーの結果を用いないが、むしろ、他の臨床的徴候と共に試験結果を用いて、診断に達する。したがって、一方の所定の診断の閾値における測定バイオマーカーのレベルは、他方の所定の診断の閾値の測定レベルに対して、対象における疾患の発生の可能性が高いことを示す。
【００８０】
同様に、予後診断のリスクは、所定の経過または結果が起こる可能性（ｐｒｏｂａｂｉｌｉｔｙ）（「可能性（ｌｉｋｅｌｉｈｏｏｄ）」）を示唆する。病的状態の可能性の増加（例えば、腎機能の悪化、将来的なＡＲＦ、または死）と同じく関係がある予後指標のレベルまたはレベルの変化を、患者における有害事象の「可能性の増加を示している」と見なす。
【００８１】
β２糖タンパク質１アッセイ
一般に、イムノアッセイは、所望のバイオマーカーを含むまたは含むと思われる試料と、このバイオマーカーと特異的に結合する少なくとも１種類の抗体とを接触させることを含む。その後、この試料中のポリペプチドとこの抗体が結合することにより形成される複合体の存在または量を示すシグナルが発生する。その後、このシグナルは、この試料中のバイオマーカーの存在または量と関連する。バイオマーカーの検出および解析のための多数の方法および装置が当業者に周知である。例えば、米国特許第６，１４３，５７６号、同第６，１１３，８５５号、同第６，０１９，９４４号、同第５，９８５，５７９号、同第５，９４７，１２４号、同第５，９３９，２７２号、同第５，９２２，６１５号、同第５，８８５，５２７号、同第５，８５１，７７６号、同第５，８２４，７９９号、同第５，６７９，５２６号、同第５，５２５，５２４号、および同第５，４８０，７９２号、ならびにＴｈｅ
Ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ Ｈａｎｄｂｏｏｋ,Ｄａｖｉｄ Ｗｉｌｄ,ｅｄ.Ｓｔｏｃｋｔｏｎ Ｐｒｅｓｓ,Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ,１９９４を参照されたい。これらの各々は、全ての表、図および特許請求の範囲を含めて、参照によりその全体が本明細書に組込まれる。
【００８２】
当業で知られるこれらのアッセイ装置および方法は、様々なサンドイッチアッセイ、競合アッセイ、または非競合アッセイの形式で標識分子を利用し、所望のバイオマーカーの存在または量と関連するシグナルを発生することができる。適切なアッセイ形式には、クロマトグラフ法、質量分析法、およびタンパク質「ブロッティング」法も含まれる。さらに、標識分子を必要とせず、かかるバイオセンサーおよび光学イムノアッセイなどの特定の方法および装置を用いて、検体の存在または量を決定してもよい。例えば、米国特許第５，６３１，１７１号、および同第５，９５５，３７７号明細書を参照されたい。これらの各々は、全ての表、図および特許請求の範囲を含めて、参照によりその全体が本明細書に組込まれる。ベックマン社のＡＣＣＥＳＳ（登録商標）、アボット社のＡＸＳＹＭ（登録商標）、ロッシュ社のＥＬＥＣＳＹＳ（登録商標）、デイドベーリング社のＳＴＲＡＴＵＳ（登録商標）のシステムを含むがそれらに限定されないロボット計測手段は、イムノアッセイを実行することができるイムノアッセイ分析器に含まれることも当業者は理解する。しかし、任意の適切なイムノアッセイは、例えば、酵素結合イムノアッセイ（ＥＬＩＳＡ）、ラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）、競合結合アッセイなどを利用してもよい。
【００８３】
抗体または他のポリペプチドを、アッセイにおいて使用するための様々な固形支持体上に固定化してもよい。特異的結合メンバーを固定化するために使用され得る固相は、固相結合アッセイの固相として開発および／または使用される固相を含む。適切な固相の例として、メンブランフィルター、セルロースベースのペーパー紙、（重合体、ラテックス、常磁性の粒子を含む）ビーズ、グラス、シリコンウエハー、微小粒子、ナノ粒子、ＴｅｎｔａＧｅｌ、ＡｇｒｏＧｅｌ、ＰＥＧＡゲル、ＳＰＯＣＣゲルならびにマルチウェルプレートが挙げられる。アッセイの条片（ｓｔｒｉｐ）を、固形支持体上のアレイに抗体または複数の抗体をコーティングすることにより調製することができる。その後、この条片を試験試料に浸し、洗浄および検出ステップを経て迅速に処理し、有色点などの測定可能なシグナルを発生させることができる。抗体または他のポリペプチドを、アッセイ装置表面に直接結合させるか、または間接的に結合させるかのいずれかにより、アッセイ装置の特異的ゾーンに結合させてもよい。後者の例において、抗体または他のポリペプチドを、粒子または他の固形支持体上に固定化してもよく、その固形支持体をこの装置表面に固定化してもよい。
【００８４】
生物アッセイは検出法を必要とし、結果の定量化の最も一般的な方法の１つは、試験している生物システム中の成分の１つに親和性を有するタンパク質または核酸に、検出可能な標識を結合させることである。検出可能な標識には、それ自体検出可能な（例えば、蛍光部分、電気化学標識、金属キレートなどの）分子、および検出可能な反応生成物（例えば、西洋ワサビペルオキシダーゼ、アルカリホスファターゼなどの酵素）の産生によって、またはそれ自体検出可能である特異的結合分子（例えば、ビオチン、ジゴキシゲニン、マルトース、オリゴヒスチジン、２，４−ジニトロベンゼン、フェニルヒ酸、ｓｓＤＮＡ、ｄｓＤＮＡなど）によって間接的に検出され得る分子が含まれ得る。
【００８５】
固相および検出可能な標識複合体の調製には、多くの場合、化学的架橋剤の使用が含まれる。クロスリンク試薬には少なくとも２つの反応基が含まれ、一般的に、（同一の反応基を含む）同種官能性クロスリンカーおよび（同一ではない反応基を含む）異種官能性クロスリンカーに分けられる。アミン、スルフヒドリル基を介して結合するか、または非特異的に反応する同種二機能性クロスリンカーは、多くの商業的供給源から入手可能である。マレイミド、アルキルおよびアリールハロゲン化物、α−ハロアシル、ピリジルジスルフィドは、チオール反応基である。マレイミド、アルキルおよびアリールハロゲン化物、およびα−ハロアシルはスルフヒドリル基と反応し、チオールエーテル結合を形成するが、ピリジルジスルフィドはスルフヒドリル基と反応し、混合ジスルフィドを産生する。このピリジルジスルフィド産物は切断可能である。イミドエステルは、タンパク質−タンパク質クロスリンクにも非常に有用である。成功する結合に対して異なる性質を各々組み合わせている、様々な異種二機能性クロスリンカーが市販されている。
【００８６】
特定の態様において、本発明は、β２糖タンパク質１マーカー、および任意に１つ以上の他のマーカーの解析のためのキットを提供する。このキットは、β２糖タンパク質１マーカーと結合する少なくとも１種類の抗体を含む少なくとも１種類の試験試料の解析のための試薬類を含む。このキットは、本明細書記載の診断および／または予後の相関のうちの１つ以上を行う装置および使用説明書も含み得る。好ましいキットには、検体について、サンドイッチアッセイを実行するための抗体ペア、または競合アッセイを実行するための標識種が含まれるであろう。抗体ペアは、固相に結合する一次抗体および検出可能な標識に結合する二次抗体を含むことが好ましく、この一次および二次抗体の各々は、β２糖タンパク質１と結合する。これらの抗体の各々は、モノクローナル抗体であることが最も好ましい。このキットを使用するための、および相関を行うための使用説明書はラベルの形式で存在することができ、このラベルは、その製造、輸送、販売または使用の期間のいかなる時にも、キットに付着しているか、またはそうでなければ、キットに伴う任意の記入または記録された資料を表す。例えば、ラベルという用語は、広告ビラおよびパンフレット、包装材料、使用説明書、オーディオまたはビデオカセット、コンピューターディスク、および直接キットにインプリントされた文書を包含する。
【００８７】
β２糖タンパク質１抗体
本明細書で使用する「抗体」という用語は、抗原またはエピトープと特異的に結合することができる免疫グロブリン遺伝子もしくは複数の免疫グロブリン遺伝子、もしくはその断片に由来する、それらを手本にするまたはそれらによって実質的にコードされるペプチドもしくはポリペプチドを表す。例えば、Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ
Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ,３ｒｄ Ｅｄｉｔｉｏｎ,Ｗ.Ｅ.Ｐａｕｌ,ｅｄ.,Ｒａｖｅｎ Ｐｒｅｓｓ,Ｎ.Ｙ.（１９９３）；Ｗｉｌｓｏｎ（１９９４；Ｊ.Ｉｍｍｕｎｏｌ.Ｍｅｔｈｏｄｓ １７５：２６７−２７３；Ｙａｒｍｕｓｈ（１９９２）Ｊ.Ｂｉｏｃｈｅｍ.Ｂｉｏｐｈｙｓ.Ｍｅｔｈｏｄｓ
２５：８５−９７を参照されたい。抗体という用語は，抗原に結合する能力を保有する抗原結合部分、すなわち「抗原結合部位」（例えば、断片、サブシーケンス、相補性決定領域（ＣＤＲ））を含み、（ｉ）ＶＬ、ＶＨ、ＣＬおよびＣＨ１ドメインからなる一価の断片であるＦａｂ断片；（ｉｉ）ヒンジ領域においてジスルフィド架橋によって結合される２つのＦａｂ断片からなる二価の断片であるＦ（ａｂ’）２断片；（ｉｉｉ）ＶＨおよびＣＨ１ドメインからなるＦｄ断片；（ｉｖ）抗体の単一アームのＶＬおよびＶＨドメインからなるＦｖ断片；（ｖ）ＶＨドメインからなるｄＡｂ断片（Ｗａｒｄ
ｅｔ ａｌ.,（１９８９） Ｎａｔｕｒｅ ３４１：５４４−５４６）ならびに（ｖｉ）単離された相補性決定領域（ＣＤＲ）を含む。一本鎖抗体も、参照により「抗体」という用語に含まれる。
【００８８】
本明細書記載のイムノアッセイにおいて使用する抗体は、β２糖タンパク質１に特異的に結合することが好ましい。「特異的に結合する」という用語は、抗体は、上記のように、その抗体が結合する（１つまたは複数の）エピトープを提示する任意のポリペプチドと結合するので、抗体は、その指定された標的と独占的に結合するということを示すようには意図しない。むしろ、適切な（１つまたは複数の）エピトープを提示しない非標的分子に対する親和性と比較した時、抗体の指定された標的に対する親和性が約５倍を超える場合、抗体は「特異的に結合する」。非標的分子に対する親和性よりも標的分子に対する抗体の親和性は、好ましくは少なくとも約５倍を超える、好ましくは１０倍を超える、より好ましくは２５倍を超える、さらにより好ましくは５０倍を超える、最も好ましくは１００倍以上であろう。好ましい実施形態において、好ましい抗体は少なくとも約１０７Ｍ−１の親和性、好ましくは約１０８Ｍ−１〜約１０９Ｍ−１の間の親和性、約１０９Ｍ−１〜約１０１０Ｍ−１の間の親和性、または約１０１０Ｍ−１〜約１０１２Ｍ−１の間の親和性で結合する。
【００８９】
親和性は、Ｋｄ＝ｋｏｆｆ／ｋｏｎ（ｋｏｆｆは解離速度定数であり、ｋｏｎは会合速度定数であり、ｋｄは平衡定数である）として計算される。親和性を、様々な濃度（ｃ）における標識リガンドの結合の割合（ｆｒａｃｔｉｏｎ
ｂｏｕｎｄ）（ｒ）を測定することによって、平衡状態で決定することができる。スキャッチャード方程式：ｒ／ｃ＝Ｋ（ｎ−ｒ）（式中、ｒ＝平衡状態における結合リガンドのモル／受容体のモル；ｃ＝平衡状態における遊離リガンド濃度；Ｋ＝平衡結合定数；およびｎ＝１つの受容体分子あたりのリガンド結合部位の数）を用いて、これらのデータをグラフにする。グラフ解析により、ｒ／ｃをＹ軸上にプロットするのに対して、ｒをＸ軸上にプロットし、このようにして、スキャッチャードプロットを作成する。スキャッチャード解析による抗体親和性測定法は当業で周知である。例えば、ｖａｎ
Ｅｒｐ ｅｔ ａｌ.,Ｊ.Ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ １２：４２５−４３,１９９１；Ｎｅｌｓｏｎ ａｎｄ Ｇｒｉｓｗｏｌｄ,Ｃｏｍｐｕｔ.Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｐｒｏｇｒａｍｓ Ｂｉｏｍｅｄ.２７：６５−８,１９８８を参照されたい。
【００９０】
「エピトープ」という用語は、抗体に特異的に結合することができる抗原決定基を表す。エピトープは、大抵、アミノ酸または糖の側鎖などの分子の化学的な活性表面集団からなり、大抵、特定の３次元構造の特性および、特定の電荷特性を有する。立体構造エピトープおよび非立体構造エピトープを、変性溶媒の存在下で、前者との結合を失うが後者との結合は失わないという点において区別する。
【００９１】
多数の刊行物が、選択される検体に結合するポリペプチドのライブラリーを作製し、スクリーニングを行うファージディスプレイ法の使用について論じている。例えば、Ｃｗｉｒｌａ
ｅｔ ａｌ.,Ｐｒｏｃ.Ｎａｔｌ.Ａｃａｄ.Ｓｃｉ.ＵＳＡ
８７,６３７８−８２,１９９０；Ｄｅｖｌｉｎ ｅｔ ａｌ.,Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４９,４０４−６,１９９０,Ｓｃｏｔｔ ａｎｄ Ｓｍｉｔｈ,Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４９,３８６−８８,１９９０；およびＬａｄｎｅｒらの米国特許第５，５７１，６９８号明細書を参照されたい。ファージディスプレイ法の基本概念は、スクリーニングされるポリペプチドをコードするＤＮＡとこのポリペプチドとの間の物理的結合の確立である。この物理的結合は、このポリペプチドをコードするファージゲノムを封入するカプシドの一部としてポリペプチドを提示するファージ粒子によってもたらされる。ポリペプチドとそれらの遺伝物質との間の物理的結合の確立は、異なるポリペプチドを有する非常に多数のファージの同時マススクリーニングを可能にする。標的に対する親和性を有するポリペプチドを提示するファージはこの標的に結合し、これらのファージを、この標的に対する親和性スクリーニングによって濃縮する。これらのファージから提示されるポリペプチドの同一性を、それらのそれぞれのゲノムから決定することができる。その後、これらの方法を用いて、所望の標的に対する結合親和性を有するとして同定されるポリペプチドを、常法により、大量に合成することができる。例えば、米国特許第６，０５７，０９８号明細書を参照されたい。これは、全ての表、図および特許請求の範囲を含めて、その全体が本明細書に組込まれる。
【００９２】
その後、これらの方法によって産生される抗体を、所望の精製ポリペプチドとの親和性および特異度について最初にスクリーニングし、必要であれば、これらの結果を、結合から排除されることが望まれるポリペプチドとの抗体の親和性および特異度を比較することによって選択してもよい。このスクリーニング手順は、マイクロタイタープレートの別々のウェルに、精製ポリペプチドを固定化することを含み得る。その後、有望な抗体または抗体群を含む溶液を、それぞれのマイクロタイターウェルに入れ、約３０分〜２時間の間インキュベートする。その後、このマイクロタイターウェルを洗浄し、標識二次抗体（例えば、産生される抗体がマウス抗体である場合、アルカリホスファターゼに結合した抗マウス抗体）をこれらのウェルに添加し、約３０分間インキュベートし、その後洗浄する。基質をこれらのウェルに添加し、（１つまたは複数の）固定化ポリペプチドに対する抗体が存在する場合、呈色反応が現れる。
【００９３】
その後、そのように同定される抗体を、選択されるアッセイデザインにおいて親和性および特異度についてさらに解析をしてもよい。標的タンパク質のイムノアッセイの開発において、選択された抗体を用いて、イムノアッセイの感度および特異度を判断するために、精製標的タンパク質は標準物質として作用する。様々な抗体の結合親和性は異なり、（例えば、サンドイッチアッセイにおいて）特定の抗体ペアは立体的にお互い干渉し得るなどの理由により、抗体アッセイの性能は、抗体の絶対的な親和性および特異度よりも重要な尺度であり得る。
【００９４】
アッセイの相関
β２糖タンパク質１などのバイオマーカーの使用に関して本明細書で使用する「相関する」という用語は、患者における（１つまたは複数の）バイオマーカーの存在または量を、ある病気を患っていると知られている、もしくはある病気を患うリスクのあることが知られているヒト、またはある病気にかかっていないことが知られているヒトにおけるその存在または量とを比較することを表す。多くの場合、これは、バイオマーカー濃度の形式のアッセイ結果と、疾患の発生もしくは不発生またはある将来的な予後の可能性を示すと選択される所定の閾値とを比較する形式をとる。
【００９５】
診断の閾値を選択することには、とりわけ、疾患の可能性の考慮、異なる試験の閾値における正確な診断と正確ではない診断の分配、診断に基づく治療（もしくは治療ができないこと）の結果の予測が含まれる。例えば、非常に有効であり、リスクのレベルが低い特異的治療を施すことを考慮する時、臨床医は実質的な診断の不確実性を容認することができるので、試験を必要としない。一方、治療選択は効果がなく、リスクが高い状況において、多くの場合、臨床医は、程度の高い診断の確実性を必要とする。したがって、費用／有益な解析には、診断の閾値を選択することが含まれる。
【００９６】
適切な閾値を、様々な方法で決定することができる。例えば、心臓トロポニンを用いる急性心筋梗塞の診断のための１つの推奨される診断の閾値は、健常集団において見られる濃度の９７．５％である。別の方法では、同じ患者の一連の試料を調べて、事前のベースラインの結果を用いて、バイオマーカーレベルの一時的な変化を監視してもよい。
【００９７】
集団研究も用いて、判定閾値を選択してもよい。受信者動作特性（「ＲＯＣ」）は、第二次世界大戦中に、レーダー画像解析のために開発されたシグナル検出理論の分野から生じ、多くの場合、ＲＯＣ解析を用いて、「病気の」亜集団と「無病の」亜集団とを一番有効に区別することができる閾値を選択する。この場合の偽陽性は、ヒトの試験結果は陽性であるが、実際には病気ではない時に起こる。一方、偽陰性は、ヒトの試験結果は陰性であり、健常であると示唆されるが、実際には疾患を有する時に起こる。判定閾値が絶えず変化するので、ＲＯＣ曲線を描くために、真陽性率（ＴＰＲ）および偽陽性率（ＦＰＲ）を決定する。ＴＰＲは感度と同等のものであり、ＦＰＲは１−特異度と同等であるので、ＲＯＣグラフは、時々、感度対（１−特異度）のプロットと呼ばれる。完璧な試験では、ＲＯＣ曲線下の面積は１．０であり、ランダムな試験では、面積は０．５であろう。閾値を、特異度および感度の許容レベルをもたらすように選択する。
【００９８】
この文脈において、「病気の」（亜集団）とは、１つの特徴（疾患もしくは病気の存在またはある予後の発生）を有する集団を表すことを意味し、「無病の」（亜集団）とは、その特徴を欠く集団を表すことを意味する。単一の判定閾値は、かかる方法の最も単純な適用であるが、複数の判定閾値を使用してもよい。例えば、第一の閾値を下回る場合、比較的高い信頼度で疾患が存在しないと割り当てることができ、また、第二の閾値を超える場合、比較的高い信頼度で疾患の存在を割り当てることができる。２つの閾値の間は、確定できないと考えることができる。これは、実際、単なる例であることを意味する。
【００９９】
閾値の比較に加えて、アッセイ結果を患者の分類（疾患の発生もしくは不発生、予後の可能性など）と相関させる他の方法には、決定木、ルールのセット、ベイズ法、およびニューラル・ネットワーク法が含まれる。これらの方法は、対象が多数の分類から外れて１つの分類に属する程度を表す確立値を生み出すことができる。
【０１００】
試験精度の尺度を、Ｆｉｓｃｈｅｒ ｅｔ ａｌ.,Ｉｎｔｅｎｓｉｖｅ
Ｃａｒｅ Ｍｅｄ.２９：１０４３−５１,２００３に記載のように取得してもよく、これらを用いて、所定のバイオマーカーの有効性を決定してもよい。これらの尺度には、感度および特異度、予測値、尤度比、診断オッズ比、およびＲＯＣ曲線面積が含まれる。ＲＯＣプロットの曲線下の面積（「ＡＵＣ」）は、分類指標が、ランダムに選択される陰性の場合よりも、ランダムに選択される陽性の場合を高く位置づける可能性に等しい。ＲＯＣ曲線下の面積は、２つのグループが連続データである場合を考慮する、２つのグループ間において得られるスコア間の中央値の違いについて検定をするマン・ホイットニーＵ検定、またはランクのウィルコクソン検定と同等であると考えられ得る。
【０１０１】
上記で論じたように、適切な検定は、これらの様々な尺度に関する以下の結果のうちの１つ以上を示し得る：０．５を超える、好ましくは少なくとも０．６、より好ましくは少なくとも０．７、さらにより好ましくは少なくとも０．８、さらにより好ましくは少なくとも０．９、最も好ましくは少なくとも０．９５の特異度、および０．２を超える、好ましくは０．３を超える、より好ましくは０．４を超える、さらにより好ましくは少なくとも０．５、さらにより好ましくは０．６、さらにより好ましくは０．７を超える、さらにより好ましくは０．８を超える、より好ましくは０．９を超える、最も好ましくは０．９５を超える対応する感度；０．５を超える、好ましくは少なくとも０．６、より好ましくは少なくとも０．７、さらにより好ましくは少なくとも０．８、さらにより好ましくは少なくとも０．９、最も好ましくは少なくとも０．９５の感度、および、０．２を超える、好ましくは０．３を超える、より好ましくは０．４を超える、さらにより好ましくは少なくとも０．５、さらにより好ましくは０．６、さらにより好ましくは０．７を超える、さらにより好ましくは０．８を超える、より好ましくは０．９を超える、最も好ましくは０．９５を超える対応する特異度；少なくとも７５％特異度と組み合わせて少なくとも７５％の感度；０．５を超える、好ましくは少なくとも０．６、より好ましくは０．７、さらにより好ましくは少なくとも０．８、さらにより好ましくは少なくとも０．９、最も好ましくは少なくとも０．９５のＲＯＣ曲線面積；１とは異なり、好ましくは少なくとも約２以上もしくは約０．５以下、より好ましくは少なくとも約３以上もしくは約０．３３以下、さらにより好ましくは少なくとも約４以上もしくは約０．２５以下、さらにより好ましくは少なくとも約５以上もしくは約０．２以下、最も好ましくは少なくとも約１０以上もしくは約０．１以下のオッズ比；１を超える、少なくとも約２、より好ましくは少なくとも約３、さらにより好ましくは少なくとも約５、最も好ましくは少なくとも約１０の（感度／（１−特異度）として計算される）陽性尤度比；または１より低い、約０．５以下、より好ましくは約０．３以下、最も好ましくは約０．１以下の（１−感度／特異度として計算される）陰性尤度比。
【０１０２】
追加の臨床的徴候を、本発明のβ２糖タンパク質１アッセイの結果と組み合わせてもよい。これらには、腎臓の状態と関連する他のバイオマーカーが含まれる。一般的なバイオマーカー名、続いてそのバイオマーカーまたはその親のＳｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔ登録番号を記載する以下のものが、例として含まれる：アクチン（Ｐ６８１３３）、アデノシンデアミナーゼ結合タンパク質（ＤＰＰ４、Ｐ２７４８７）、α１−酸性糖タンパク質１（Ｐ０２７６３）、α１ミクログロブリン（Ｐ０２７６０）、アルブミン（Ｐ０２７６８）、アンジオテンシノゲナーゼ（Ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎｏｇｅｎａｓｅ）（レニン、Ｐ００７９７）、アネキシンＡ２（Ｐ０７３５５）、β−グルクロニダーゼ（Ｐ０８２３６）、β２ミクログロブリン（Ｐ６１６７９）、β−ガラクトシダーゼ（Ｐ１６２７８）、ＢＭＰ−７（Ｐ１８０７５）、脳性ナトリウム利尿ペプチド（ｐｒｏＢＮＰ、ＢＮＰ−３２、ＮＴｐｒｏＢＮＰ；Ｐ１６８６０）、カルシウム結合タンパク質β（Ｓ１００−β、Ｐ０４２７１）、炭酸脱水酵素（Ｑ１６７９０）、カゼインキナーゼ２（Ｐ６８４００）、カテプシンＢ（Ｐ０７８５８）、セルロプラスミン（Ｐ００４５０）、クラスタリン（Ｐ１０９０９）、補体Ｃ３（Ｐ０１０２４）、システインリッチタンパク質（ＣＹＲ６１、Ｏ００６２２）、シトクロムＣ（Ｐ９９９９９）、上皮細胞増殖因子（ＥＧＦ、Ｐ０１１３３）、エンドセリン−１（Ｐ０５３０５）、エキソソームフェチュイン−Ａ（Ｅｘｏｓｏｍａｌ
Ｆｅｔｕｉｎ−Ａ）（Ｐ０２７６５）、脂肪酸結合タンパク質、心臓（ＦＡＢＰ３、Ｐ０５４１３）、脂肪酸結合タンパク質、肝臓（Ｐ０７１４８）、フェリチン（軽鎖、Ｐ０２７９３；重鎖、Ｐ０２７９４）、フルクトース−１，６−ビスホスファターゼ（Ｐ０９４６７）、ＧＲＯ−α（ＣＸＣＬ１、（Ｐ０９３４１）、成長ホルモン（Ｐ０１２４１）、肝細胞増殖因子（Ｐ１４２１０）、インスリン様成長ホルモンＩ（Ｐ０１３４３）、免疫グロブリンＧ、免疫グルブリン軽鎖（κおよびλ）、インターフェロンγ（Ｐ０１３０８）、リゾチーム（Ｐ６１６２６）、インターロイキン−１α（Ｐ０１５８３）、インターロイキン−２（Ｐ６０５６８）、インターロイキン−４（Ｐ６０５６８）、インターロイキン−９（Ｐ１５２４８）、インターロイキン−１２ｐ４０（Ｐ２９４６０）、インターロイキン−１３（Ｐ３５２２５）、インターロイキン−１６（Ｑ１４００５）、Ｌ１細胞接着分子（Ｐ３２００４）、乳酸脱水素酵素（Ｐ００３３８）、ロイシンアミノペプチダーゼ（Ｐ２８８３８）、メプリンＡ−αサブユニット（Ｑ１６８１９）、メプリンＡ−βサブユニット（Ｑ１６８２０）、ミッドカイン（Ｐ２１７４１）、ＭＩＰ２−α（ＣＸＣＬ２、Ｐ１９８７５）、ＭＭＰ−２（Ｐ０８２５３）、ＭＭＰ−９（Ｐ１４７８０）、ネトリン−１（Ｏ９５６３１）、中性エンドペプチダーゼ（Ｐ０８４７３）、オステオポンチン（Ｐ１０４５１）、腎乳頭抗原１（ＲＰＡ１）、腎乳頭抗原２（ＲＰＡ２）、レチノール結合タンパク質（Ｐ０９４５５）、リボヌクレアーゼ、Ｓ１００カルシウム結合タンパク質Ａ６（Ｐ０６７０３）、血清アミロイドＰ成分（Ｐ０２７４３）、ナトリウム／水素交換アイソフォーム（ＮＨＥ３、Ｐ４８７６４）、スペルミジン／スペルミンＮ１−アセチルトランスフェラーゼ（Ｐ２１６７３）、ＴＧＦ−β１（Ｐ０１１３７）、トラスフェリン（Ｐ０２７８７）、トレフォイル因子３（ＴＦＦ３、Ｑ０７６５４）、Ｔｏｌｌ様タンパク質４（Ｏ００２０６）、総タンパク質、尿細管間質性腎炎抗原（Ｑ９ＵＪＷ２）、ウロモジュリン（タム−ホースフォールタンパク質、Ｐ０７９１１）。
【０１０３】
リスク層化を目的として、アディポネクチン（Ｑ１５８４８）、アルカリホスファターゼ（Ｐ０５１８６）、アミノペプチダーゼＮ（Ｐ１５１４４）、カルビンジンＤ２８ｋ（Ｐ０５９３７）、シスタチンＣ（Ｐ０１０３４）、Ｆ１ＦＯ
ＡＴＰ分解酵素の８サブユニット（Ｐ０３９２８）、γ−グルタミルトランスフェラーゼ（Ｐ１９４４０）、ＧＳＴａ（α−グルタチオン−Ｓ−トランスフェラーゼ、Ｐ０８２６３）、ＧＳＴｐｉ(グルタチオン−Ｓ−トランスフェラーゼＰ、ＧＳＴクラス−ｐｉ、Ｐ０９２１１)、ＩＧＦＢＰ−１（Ｐ０８８３３）、ＩＧＦＢＰ−２（Ｐ１８０６５）、ＩＧＦＢＰ−６（Ｐ２４５９２）、内在性膜タンパク質１（Ｉｔｍ１、Ｐ４６９７７）、インターロイキン−６（Ｐ０５２３１）、インターロイキン−８（Ｐ１０１４５）、インターロイキン−１８（Ｑ１４１１６）、ＩＰ−１０（１０ｋＤａのインターフェロン−γ−誘導タンパク質、Ｐ０２７７８）、ＩＲＰＲ（ＩＦＲＤ１、Ｏ００４５８）、イソバレリル−ＣｏＡ脱水素酵素（ＩＶＤ、Ｐ２６４４０）、Ｉ−ＴＡＣ／ＣＸＣＬ１１（Ｏ１４６２５）、ケラチン１９（Ｐ０８７２７）、Ｋｉｍ−１(Ａ型肝炎ウイルス細胞受容体１、Ｏ４３６５６)、Ｌ−アルギニン：グリシンアミジノトランスフェラーゼ（Ｐ５０４４０）、レプチン（Ｐ４１１５９）、リポカリン２（ＮＧＡＬ、Ｐ８０１８８）、ＭＣＰ−１（Ｐ１３５００）、ＭＩＧ（γ−インターフェロン誘導モノカインＱ０７３２５)、ＭＩＰ−１ａ（Ｐ１０１４７）、ＭＩＰ−３ａ（Ｐ７８５５６）、ＭＩＰ−１β（Ｐ１３２３６）、ＭＩＰ−１ｄ（Ｑ１６６６３）、ＮＡＧ（Ｎ−アセチル−β−Ｄ−グルコサミニダーゼ、Ｐ５４８０２）、有機イオン輸送体（ＯＣＴ２、Ｏ１５２４４）、オステオプロテジェリン（Ｏ１４７８８）、Ｐ８タンパク質（Ｏ６０３５６）、プラスミノーゲン活性化因子阻害剤１（ＰＡＩ−１、Ｐ０５１２１）、ＰｒｏＡＮＰ（１−９８）（Ｐ０１１６０）、タンパク質ホスファターゼ１−β（ＰＰＩ−β、Ｐ６２１４０）、Ｒａｂ
ＧＤＩ−β（Ｐ５０３９５）、腎カリクレイン（Ｑ８６Ｕ６１）、内在性膜タンパク質のＲＴ１.Ｂ−１（α）鎖（Ｑ５Ｙ７Ａ８）、可溶性腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリーメンバー１Ａ（ｓＴＮＦＲ−Ｉ、Ｐ１９４３８）、可溶性腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリーメンバー１Ｂ（ｓＴＮＦＲ−ＩＩ、Ｐ２０３３３）、メタロプロテイナーゼ３の組織阻害剤（ＴＩＭＰ−３、Ｐ３５６２５）、ｕＰＡＲ（Ｑ０３４０５）を、本発明のβ２糖タンパク質１のアッセイ結果と組み合わせてもよい。
【０１０４】
本発明のβ２糖タンパク質１のアッセイ結果と組み合わせてもよい他の臨床的徴候には、人口学的情報（例えば、体重、性別、年齢、人種）、病歴（例えば、家族の病歴、手術の種類、動脈瘤、鬱血性心不全、子癇前症、子癇、真性糖尿病、高血圧、冠動脈疾患、タンパク尿、腎不全、もしくは敗血症など以前から存在する疾患、ＮＳＡＩＤ、シクロスポリン、タクロリムス、アミノグリコシド、フォスカネット、エチレングリコール、ヘモグロビン、ミオグロビン、イホスファミド、重金属、メトトレキサート、放射線造影剤、もしくはストレプトゾトシンなどの毒物曝露の種類）、臨床的変数（例えば、血圧、温度、呼吸速度）、リスクスコア（ＡＰＡＣＨＥスコア、ＰＲＥＤＩＣＴスコア、ＵＡ／ＮＳＴＥＭＩのＴＩＭＩリスクスコア、フラミンガムリスクスコア）、糸球体濾過量、推定糸球体濾過量、尿生産率、血清もしくは血漿のクレアチニン濃度、腎乳頭抗原１（ＲＰＡ１）測定、腎乳頭抗原２（ＲＰＡ２）測定、尿クレアチニン濃度、ナトリウムの分画排泄率、尿ナトリウム濃度、血清もしくは血漿のクレアチニンに対する尿クレアチニンの比、尿比重、尿浸透圧、血漿の尿素窒素に対する尿の尿素窒素の比、クレアチニンに対する血漿ＢＵＮの比、および／または尿ナトリウム／（尿クレアチニン／血漿クレアチニン）として計算される腎不全の指標が含まれる。β２糖タンパク質１のアッセイ結果と組み合わせてもよい腎機能の他の尺度は、本明細書の以下に、およびＨａｒｒｉｓｏｎ’ｓ
Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ｏｆ Ｉｎｔｅｒｎａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ,１７ｔｈ Ｅｄ.,ＭｃＧｒａｗ Ｈｉｌｌ,Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ,ｐａｇｅｓ １７４１−１８３０,ならびにＣｕｒｒｅｎｔ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ＆Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ
２００８,４７ｔｈ Ｅｄ,ＭｃＧｒａｗ Ｈｉｌｌ,Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ,ｐａｇｅｓ ７８５−８１５に記載されている。これらの各々は、参照によりその全体が本明細書に組込まれる。
【０１０５】
このようなアッセイ結果／臨床的徴候の組み合わせは、多変数ロジスティック回帰、対数線形モデル、ニューラル・ネットワーク解析、ｎ／ｍ解析、ディシジョンツリー解析などの使用を含み得る。このリストは、限定するようには意図しない。
【０１０６】
急性腎不全の診断
上記のように、本明細書で使用する「急性腎（または腎臓）損傷」および「急性腎（または腎臓）不全」という用語を、ベースライン値からの血清クレアチニンの変化に関して、ある程度定義する。ＡＲＦのほとんどの定義は、血清クレアチニンおよび、多くの場合、尿排出量の使用を含む共通事項を有する。この比較において使用する腎機能の利用できるベースラインを測定することなく、腎機能障害を有する患者が存在し得る。かかる事象において、最初に、患者が正常なＧＦＲを有すると想定することにより、ベースラインの血清クレアチニンの値を推定することができる。糸球体濾過量（ＧＦＲ）は、単位時間あたりの腎（腎臓）糸球体毛細血管からボーマン嚢に濾過される液体の体積である。血液中に安定したレベルで存在し、腎臓によって自由に濾過されるが、再吸収または分泌のいずれも起こらない任意の化学物質を測定することにより、糸球体濾過量（ＧＦＲ）を計算することができる。典型的には、ＧＦＲをｍｌ／分の単位で表す。
【０１０７】
【数１】
【０１０８】
体表面積に対するＧＦＲの正規化によって、約１．７３ｍ２あたり約７５−１００ｍｌ／分のＧＦＲが想定され得る。したがって、測定される割合は、計算される血液量に由来する尿中の物質の量である。
【０１０９】
糸球体濾過量（ＧＦＲまたはｅＧＦＲ）を計算または推定するために用いられるいくつかの異なる技術がある。しかし、診療においては、クレアチニン・クリアランスを用いてＧＦＲを測定する。クレアチニンは体内で自然に作られる（クレアチニンは、筋肉内で見出されるクレアチンの代謝物である）。クレアチニンは糸球体で自由に濾過され、非常に少量が尿細管によって能動的に分泌され、それにより、クレアチニン・クリアランスが実際のＧＦＲを１０〜２０％過剰評価する。この誤差の範囲は、クレアチニン・クリアランスが測定される容易さを考慮すると許容できる。
【０１１０】
クレアチニンの尿中濃度の値（ＵＣｒ）、尿流量（Ｖ）、およびクレアチニンの血漿濃度（ＰＣｒ）の値が分かっている場合、クレアチニン・クリアランス（ＣＣｒ）を計算することができる。尿中濃度と尿流量の積はクレアチニンの排出量をもたらすので、クレアチニン・クリアランスは、クレアチニン排出量（ＵＣｒ×Ｖ）をクレアチニン血漿濃度で割ったものとも言われる。これらは、一般に、以下のように、数学的に表される。
【０１１１】
【数２】
【０１１２】
一般的に、１日目の朝の空の膀胱から、次の日の朝の膀胱の容量までの２４時間の採尿が行われ、その後、血液の比較試験が行われる。
【０１１３】
【数３】
【０１１４】
異なるサイズを有するヒト間での結果の比較を可能にするために、多くの場合、ＣＣｒは体表面積（ＢＳＡ）について補正され、平均サイズを有するヒトと比較して、ｍｌ／分／１．７３ｍ２として表される。ほとんどの成人は、１．７（１．６〜１．９）に近いＢＳＡを有するが、極度の肥満または極度に細い患者は、かれらの実際のＢＳＡについて補正されたＣＣｒを有するべきである。
【０１１５】
【数４】
【０１１６】
（収集が完全である時でさえ、）糸球体濾過量（ＧＦＲ）が低下するにつれて、クレアチニン分泌が増加し、それ故に、血清クレアチニンの上昇はより少なくなるので、クレアチニン・クリアランス測定の精度は制限される。したがって、クレアチニン排出は、濾過した量よりもはるかに多くなり、ＧＦＲの潜在的に大きい過剰評価（２倍と同じくらいの違い）をもたらす。しかし、臨床目的には、腎機能が安定か、または徐々に悪くなるか、もしくは良くなるかどうかを決定することが重要である。多くの場合、これを、血清クレアチニンのみを監視することにより決定する。クレアチニン・クリアランスのように、血清クレアチニンは、ＡＲＦの非定常状態の条件において、ＧＦＲを正確に反映するものではないだろう。それにもかかわらず、血清クレアチニンがベースラインから変化する割合は、ＧＦＲの変化を反映するであろう。血清クレアチニンは、容易に、簡単に測定され、腎機能に特異的である。
【０１１７】
ｍＬ／ｋｇ／ｈｒに基づく尿排出量を決定する目的のために、１時間あたりの採尿および測定が適切である。例えば、累積する２４時間の排出量のみが利用でき、患者の体重が分からない場合において、ＲＩＦＬＥ尿排出量判定基準を少し変更することが記載された。例えば、Ｂａｇｓｈａｗ
ｅｔ ａｌ.,Ｎｅｐｈｒｏｌ.Ｄｉａｌ.Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ.２３：１２０３−１２１０,２００８は、患者の平均体重を７０ｋｇと想定し、以下に基づくＲＩＦＬＥ分類を患者に割り当てる：＜３５ｍＬ／ｈ（リスク）、＜２１ｍＬ／ｈ（損傷）または＜４ｍＬ／ｈ（不全)。
【０１１８】
治療計画の選択
一度診断が確立すると、腎置換療法の開始、腎臓に損傷をあたえると知られる化合物送達の取りやめ、腎臓移植、腎臓に損傷をあたえることが知られる処置の遅延または回避、改良された利尿薬の投与、目標指向の治療の開始などのその診断に適合する治療計画を、臨床医は容易に選択することができる。当業者は、本明細書記載の診断法に関して論じられる多数の疾患の適切な治療を知っている。例えば、Ｍｅｒｃｋ
Ｍａｎｕａｌ ｏｆ Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ａｎｄ Ｔｈｅｒａｐｙ,１７ｔｈ Ｅｄ.Ｍｅｒｃｋ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ,Ｗｈｉｔｅｈｏｕｓｅ
Ｓｔａｔｉｏｎ,ＮＪ,１９９９を参照されたい。さらに、本明細書記載の方法および組成物は予後の情報を提供するので、本発明のマーカーを用いて、治療経過を監視することが可能である。例えば、予後の状態の改善または悪化は、特定の治療が有効であるかまたは有効ではないかを示し得る。
【０１１９】
本発明は目的を実行し、言及した結果および利点、ならびにその中で固有の結果および利点を得るのに十分適することを、当業者は容易に理解する。本明細書に提供される例は、好ましい実施形態を代表するものであり、例示的であり、本発明の範囲に限定されるようには意図しない。
【０１２０】
実施例
実施例１
造影剤腎症試料の収集
この資料収集研究の目的は、血管内への造影剤の投入前後の、患者の血漿および尿の試料ならびに臨床データを収集することである。ヨウ素造影剤の血管内投与を含むＸ線検査／血管造影検査を行う約２５０人の成人を登録する。この研究に登録するためには、各患者は以下の試験対象患者基準の全てを満たさなければならず、かつ以下の試験対象除外基準のいずれも満たしてはいけない：
試験対象患者基準
１８歳以上の男性および女性であること；
造影剤の血管内投与を含む（ＣＴスキャンまたは冠状動脈インターベンションなどの）Ｘ線検査／血管造影検査を行うこと；
造影剤投与後少なくとも４８時間の間は入院することが期待されること；
研究の参加について書面によるインフォームド・コンセントを提出すること、かつ全ての研究手順に従うことができ、かつその意思があること。
試験対象除外基準
腎移植者であること；
造影の手順に先立って、急に腎機能が悪化すること；
（緊急のまたは習慣的に）透析をすでに受けているか、または登録時に透析の切迫した必要性があること；
造影剤投与後４８時間以内に、（例えば、心肺バイパスを含む）大手術、またはさらなる腎損傷のかなりのリスクを有する造影剤による追加の画像診断手順を行うことが期待されること；
試験前３０日以内に実験的治療を伴う介入的臨床研究に参加すること；
ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）または肝炎ウイルスによる感染が判明していること。
【０１２１】
第一の造影剤の投与の直前に（および任意の事前の水和手順の後に）、ＥＤＴＡ抗凝固処理血液試料（１０ｍＬ）および尿試料（１０ｍＬ）を各患者から収集する。その後、血液および尿の試料を、インデックス造影手順の間、最後の造影剤投与後４（±０．５）、８（±１）、２４（±２）、４８（±２）、および７２（±２）時間の時点で収集する。血液を、直接的な静脈穿刺により、または既存の大腿鞘、中心静脈ライン、末梢の静脈ラインもしくはヘップロック（ｈｅｐ−ｌｏｃｋ）などの他に利用可能な静脈アクセスにより収集する。これらの研究の血液試料を、臨床現場で血漿まで処理し、凍結させ、Ａｓｔｕｔｅ
Ｍｅｄｉｃａｌ,Ｉｎｃ.,Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ,ＣＡに輸送する。この研究の尿試料を凍結させ、Ａｓｔｕｔｅ Ｍｅｄｉｃａｌ,Ｉｎｃに輸送する。
【０１２２】
第一の造影剤投与の直前（任意の事前の水和手順の後に）、最後の造影剤投与後４（±０．５）、８（±１）、２４（±２）、４８（±２）、および７２（±２）時間の時点において（理想的には、研究試料を得るのと同時に）、血清クレアチニンをその場で調べる。さらに、各患者の状態を、さらなる血清および尿のクレアチニン測定、透析の必要性、入院状態、および（死亡を含む）有害な臨床予後に関して、３０日間診断する。
【０１２３】
造影剤投与に先立って、各患者に、以下の評価に基づくリスクを割り当てる：収縮期血圧８０ｍｍＨｇ未満＝５ポイント；動脈内バルーンポンプ＝５ポイント；鬱血性心不全（クラスＩＩＩ−ＩＶまたは肺水腫の病歴）＝５ポイント；７５歳を超える年齢＝４ポイント；男性の場合３９％未満のヘマトクリット値、女性の場合３５％未満のヘマトクリット値＝３ポイント；糖尿病＝３ポイント；造影剤の体積＝１００ｍＬごとに１ポイント；１．５ｇ／ｄＬを超える血清クレアチニンレベル＝４ポイントまたは推定ＧＦＲ４０−６０ｍＬ／分／１．７３ｍ２＝２ポイント、２０−４０ｍＬ／分／１．７３ｍ２＝４ポイント、２０ｍＬ／分／１．７３ｍ２未満＝６ポイント。割り当てられるリスクは以下のものである：ＣＩＮまたは透析のリスク：５以下の合計ポイント＝ＣＩＮのリスク−７．５％、透析のリスク−０．０４％；６〜１０の合計ポイント＝ＣＩＮのリスク−１４％、透析のリスク−０．１２％；１１〜１６の合計ポイント＝ＣＩＮのリスク−２６．１％、透析のリスク−１．０９％；１６を超える合計ポイント＝ＣＩＮのリスク−５７．３％、透析のリスク−１２．８％。
【０１２４】
実施例２
心臓外科試料の収集
この資料収集研究の目的は、心臓血管手術（腎臓機能に潜在的に損傷を与えると知られる手術）を受ける前後の、患者の血漿および尿の試料ならびに臨床データを収集することである。かかる手術を受ける約９００人の成人を登録する。この研究に登録するためには、各患者は以下の試験対象患者基準の全てを満たさなければならず、かつ以下の試験対象除外基準のいずれも満たしてはいけない：
試験対象患者基準
１８歳以上の男性および女性であること；
心臓血管手術を行うこと；
腎置換リスクスコアのＴｏｒｏｎｔｏ／Ｏｔｔａｗａ Ｐｒｅｄｉｃｔｉｖｅ Ｒｉｓｋ Ｉｎｄｅｘ（Ｗｉｊｅｙｓｕｎｄｅｒａ
ｅｔ ａｌ.,ＪＡＭＡ ２９７：１８０１−９,２００７）が少なくとも２であること；および
研究の参加について書面によるインフォームド・コンセントを提出すること、かつ全ての研究手順に従うことができ、かつその意思があること。
試験対象除外基準
妊娠が判明していること；
腎移植の前歴があること；
登録に先立って、急に腎機能が悪化すること（例えば、ＲＩＦＬＥ分類のいずれかのカテゴリー）；
（緊急のまたは習慣的に）透析をすでに受けているか、または登録時に透析の切迫した必要性があること：
ＡＫＩのための薬剤注入もしくは治療的介入を伴う心臓手術後７日以内に、別の臨床研究にすぐに登録するか、または別の臨床研究に登録することが期待されること；
ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）または肝炎ウイルスによる感染が判明していること。
【０１２５】
第一の切開前３時間以内に（および任意の事前の水和手順の後に）、ＥＤＴＡ抗凝固処理血液試料（１０ｍＬ）、全血（３ｍＬ）、および尿試料（３５ｍＬ）を各患者から収集する。その後、血液および尿の試料を、この手順後３（±０．５）、６（±０．５）、１２（±１）、２４（±２）および４８（±２）時間の時点で収集し、その後、患者が病院に留まる場合、３日目から７日目まで毎日収集する。血液を、直接的な静脈穿刺により、または既存の大腿鞘、中心静脈ライン、末梢の静脈ラインもしくはヘップロック（ｈｅｐ−ｌｏｃｋ）などの他に利用可能な静脈アクセスにより収集する。これらの研究の血液試料を凍結させ、Ａｓｔｕｔｅ
Ｍｅｄｉｃａｌ,Ｉｎｃ.,Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ,ＣＡに輸送する。この研究の尿試料を凍結させ、Ａｓｔｕｔｅ Ｍｅｄｉｃａｌ,Ｉｎｃに輸送する。
【０１２６】
実施例３
急性疾患の対象の試料の収集
この研究の目的は、急性疾患の患者の試料を収集することである。少なくとも４８時間の間、ＩＣＵにいることが期待される約９００人の成人を登録する。この研究に登録するためには、各患者は以下の試験対象患者基準の全てを満たさなければならず、かつ以下の試験対象除外基準のいずれも満たしてはいけない：
試験対象患者基準
１８歳以上の男性および女性であること；
研究集団１：以下の少なくとも１つを有する約３００人の患者：
ショック状態（９０ｍｍＨｇ未満のＳＢＰおよび ／または６０ｍｍＨｇを超えるＭＡＰを維持するために昇圧剤のサポートの必要性および／または少なくとも４０ｍｍＨｇのＳＢＰの文書化された急降下）；ならびに
敗血症；
研究集団２：以下の少なくとも１つを有する約３００人の患者：
登録の２４時間以内に医師向けコンピューター受注システム（ＣＰＯＥ）で注文したＩＶ構成物質；
登録の２４時間以内の造影剤の曝露；
急性非代償性心不全を伴う腹圧の増加；ならびに
登録後４８時間の間のＩＣＵ入院およびＩＣＵに入院する可能性の主な理由として重症外傷；
研究集団３：約３００人の患者
急性腎損傷（例えば、敗血症、低血圧症／ショック状態（ショック＝９０ｍｍＨｇ未満の収縮期のＢＰおよび／もしくは６０ｍｍＨｇを超えるＭＡＰを維持するために昇圧剤のサポートの必要性および／もしくは４０ｍｍＨｇを超えるＳＢＰの文書化された急降下）、大外傷、大出血、または大手術）のリスクファクターが判明することで救急処置の環境（ＩＣＵまたはＥＤ）を経て入院することが期待されること；
試験対象除外基準
妊娠が判明していること；
施設居住者；
腎移植の前歴があること；
登録に先立って、腎機能の急激な悪化が判明していること（例えば、ＲＩＦＬＥ判定基準のいずれかのカテゴリー）；
登録前５日以内に（緊急のまたは習慣的に）透析を受けたか、または登録時に透析の切迫した必要性があること：
ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）または肝炎ウイルスによる感染が判明していること；
上記の試験対象患者基準の９０ｍｍＨｇ未満のＳＢＰのみを満たし、主治医または研究責任者の意見にショックを受けないこと。
【０１２７】
インフォームド・コンセントを提出した後、ＥＤＴＡ抗凝固処理血液試料（１０ｍＬ）および尿試料（２５〜３０ｍＬ）を各患者から収集する。その後、血液および尿の試料を、（適用できる場合）造影剤投与後４（±０．５）および８（±１）時間の時点で、登録後１２（±１）、２４（±２）、および４８（±２）時間の時点で、ならびにその後、患者が入院中７〜１４日目まで毎日収集する。血液を、直接的な静脈穿刺により、または既存の大腿鞘、中心静脈ライン、末梢の静脈ラインもしくはヘップロック（ｈｅｐ−ｌｏｃｋ）などの他に利用可能な静脈アクセスにより収集する。これらの研究の血液試料を臨床現場で血漿まで処理し、凍結させ、Ａｓｔｕｔｅ
Ｍｅｄｉｃａｌ,Ｉｎｃ.,Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ,ＣＡに輸送する。この研究の尿試料を凍結させ、Ａｓｔｕｔｅ Ｍｅｄｉｃａｌ,Ｉｎｃに輸送する。
【０１２８】
実施例４
β２糖タンパク質１のイムノアッセイ
標準的なサンドイッチ酵素イムノアッセイ技術を用いて、β２糖タンパク質１検体を測定する。検体と結合する一次抗体を９６ウェルポリスチレンマイクロプレートのウェルの中に固定化する。検体標準物質および試験試料を適切なウェルの中にピペッターで入れ、存在する全検体を固定化抗体と結合させる。結合しなかった全物質を洗い流した後、この検体が結合する西洋ワサビペルオキシダーゼに結合させた二次抗体をこれらのウェルに添加し、それによって、この検体（存在する場合）および一次抗体とでサンドイッチ複合体を形成させる。結合しなかった全ての抗体−酵素試薬を除去するための洗浄後、テトラメチルベンジジンおよび過酸化水素を含む基質溶液をこれらのウェルに添加する。この試料中に存在する検体量に比例して呈色する。呈色反応を止め、色の強度を５４０ｎｍまたは５７０ｎｍで測定する。検体標準物質から作成した標準曲線と比較することにより、検体濃度をこの試験試料に割り当てる。
【０１２９】
実施例５
外見上健康そうである提供者および慢性疾患患者の試料
慢性または急性疾患が判明していない提供者（「外見上健康そうである提供者」）のヒトの尿試料を２社（Ｇｏｌｄｅｎ Ｗｅｓｔ
Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｓ,Ｉｎｃ.,２７６２５ Ｃｏｍｍｅｒｃｅ
Ｃｅｎｔｅｒ Ｄｒ.,Ｔｅｍｅｃｕｌａ,ＣＡ ９２５９０およびＶｉｒｇｉｎｉａ
Ｍｅｄｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ,Ｉｎｃ.,９１５ Ｆｉｒｓｔ
Ｃｏｌｏｎｉａｌ Ｒｄ.,Ｖｉｒｇｉｎｉａ Ｂｅａｃｈ,ＶＡ ２３４５４）から購入した。これらの尿試料を輸送し、−２０℃より低い温度で凍結保存した。これらの会社が、性別、人種（白人／黒人）、喫煙状態および年齢を含む個々の提供者の人口学的情報を提供した。
【０１３０】
鬱血性心不全、冠動脈疾患、慢性腎臓疾患、慢性閉塞性肺疾患、真性糖尿病および高血圧を含む様々な慢性疾患を患う提供者（「慢性疾患患者」）のヒトの尿試料を、Ｖｉｒｇｉｎｉａ
Ｍｅｄｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ,Ｉｎｃ.,９１５ Ｆｉｒｓｔ
Ｃｏｌｏｎｉａｌ Ｒｄ.,Ｖｉｒｇｉｎｉａ Ｂｅａｃｈ,ＶＡ ２３４５４から購入した。これらの尿試料を輸送し、−２０℃より低い温度で凍結保存した。この会社が、年齢、性別、人種（白人／黒人）、喫煙状態およびアルコールの使用、身長、体重、（１つまたは複数の）慢性疾患診断、現在の投薬ならびに既往手術を有する個々の提供者についての症例報告を提供した。
【０１３１】
実施例６
ＲＩＦＬＥステージ０における患者の腎臓の状態を評価するためのマーカーとしてのβ２糖タンパク質１の使用
集中治療室（ＩＣＵ）の患者を、ＲＩＦＬＥ判定基準によって決定するように、登録後７日以内に達した最高ステージに従って、損傷なし（０）、損傷のリスク（Ｒ）、損傷（Ｉ）、および不全（Ｆ）のように腎臓状態によって分類した。
【０１３２】
２つのコホートを、ステージ０を越えて進行しなかった（コホート１）患者、および１０日以内にステージＲ、Ｉ、またはＦに到達した（コホート２）患者として定義した。ＩＣＵの患者内に生じる正常なマーカー変動を調べ、それによってＡＫＩ状態を監視する有用性を評価するために、コホート１から収集した尿試料においてマーカーレベルを測定した。コホート２のステージＲ、Ｉ、またはＦに達する前の０時間、２４時間、および４８時間の時点で患者から収集した尿試料において、β２糖タンパク質１濃度を測定した。以下の表において、＋／−１２時間である３つのグループに分けられるコホートについて定義したように、最も低い疾患ステージに特定の患者が達する時点に対して、「最高ステージの前」という時点は、試料を収集する時点を表す。例えば、この実施例（０対Ｒ、Ｉ、Ｆ）について２４時間前とは、ステージＲ（またはＲにおける試料がない場合はＩ、またはＲもしくはＩにおける試料がない場合はＦ）に達する２４時間（＋／−１２時間）前を意味する。
【０１３３】
市販のアッセイ試薬を用いて、標準的なイムノアッセイ法により、β２糖タンパク質１を測定した。以下の実施例において、濃度をμｇ／ｍｌと表す。受信者動作特性（ＲＯＣ）曲線を、β２糖タンパク質１について作成し、各ＲＯＣ曲線下の面積（ＡＵＣ）を決定した。血清クレアチニン測定値に基づくように、尿排出量に基づくように、または血清クレアチニン測定値もしくは尿排出量のいずれか一方に基づくように、コホート２の患者も、ステージＲ、Ｉ、またはＦに定まる理由に従って分類した。すなわち、血清クレアチニン測定値のみに基づいてステージＲ、Ｉ、またはＦに定まる患者に対しては、ステージ０のコホートは、尿排出量に基づいてステージＲ、Ｉ、またはＦに定まる患者を含むことができ、尿排出量のみに基づいてステージＲ、Ｉ、またはＦに定まる患者に対しては、ステージ０のコホートは、血清クレアチニン測定値に基づいてステージＲ、Ｉ、またはＦに定まる患者を含むことができ、かつ、血清クレアチニン測定値もしくは尿排出量に基づいてステージＲ、Ｉ、またはＦに定まる患者に対しては、ステージ０のコホートは、血清クレアチニン測定値および尿排出量の両方についてステージ０の患者のみを含む。また、血清クレアチニン測定値もしくは尿排出量に基づいてステージＲ、Ｉ、またはＦに定まる患者に対しては、最も重篤なＲＩＦＬＥステージを生み出す判定法を用いた。
【０１３４】
以下の記述統計学を得た。
【０１３５】
【表３】
【０１３６】
【表４】
【０１３７】
【表５】
【０１３８】
以下の表において、コホート１（ＲＩＦＬＥ ０に留まる対象）とコホート２（ＲＩＦＬＥ Ｒ、ＩまたはＦに進行する対象）とを区別する能力を、ＲＯＣ解析を用いて調べた。ＳＥは、ＡＵＣの標準誤差であり、ｎは試料または個々の患者の数である（「ｐｔｃ」として示される）。標準誤差を、Ｈａｎｌｅｙ,Ｊ.Ａ.,ａｎｄ ＭｃＮｅｉｌ,Ｂ.ＪＴｈｅ ｍｅａｎｉｎｇ ａｎｄ ｕｓｅ ｏｆ ｔｈｅ ａｒｅａ ｕｎｄｅｒ
ａ ｒｅｃｅｉｖｅｒ ｏｐｅｒａｔｉｎｇ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃ （ＲＯＣ） ｃｕｒｖｅ.Ｒａｄｉｏｌｏｇｙ（１９８２）１４３：２９−３６に記載されているように計算した。ｐ値を、両側Ｚ検定を用いて計算した。
【０１３９】
血清クレアチニン測定値もしくは尿排出量を判定するコホート１対コホート２
【表６】
【０１４０】
血清クレアチニンを判定するコホート１対コホート２
【表７】
【０１４１】
尿排出量を判定するコホート１対コホート２
【表８】
【０１４２】
様々な閾値（または「カットオフ」）β２糖タンパク質１濃度を選択し、以下の表に、コホート１とコホート２とを区別する関連する感度および特異度を示す。ＯＲは、特定のカットオフ濃度について計算されたオッズ比であり、９５％ＣＩはオッズ比の信頼区間である。
【０１４３】
【表９】
【０１４４】
【表１０】
【０１４５】
【表１１】
【０１４６】
実施例７
ＲＩＦＬＥステージ０およびＲにおける患者の腎臓の状態を評価するためのマーカーとしてのβ２糖タンパク質１の使用
実施例６に記載したように、患者を分類し、解析した。しかし、ステージＲには達したが、ステージＩまたはＦに進行しなかった患者を、コホート１の非損傷ステージ０の患者と共にグループ化した。この実施例のコホート２は、ステージＩまたはＦに進行した患者のみを含んだ。尿試料中のβ２糖タンパク質１濃度を、コホート１（についての解析）に含めた。ステージＩまたはＦに達する０、２４、および４８時間以内に収集した尿試料中のβ２糖タンパク質１濃度を、コホート２（についての解析）に含めた。
【０１４７】
以下の記述統計学を得た。
【０１４８】
【表１２】
【０１４９】
【表１３】
【０１５０】
【表１４】
【０１５１】
以下の表において、コホート１（ＲＩＦＬＥ ０またはＲに留まる対象）とコホート２（ＲＩＦＬＥ ＩまたはＦに進行する対象）とを区別する能力を、ＲＯＣ解析を用いて調べた。
【０１５２】
血清クレアチニン測定値もしくは尿排出量を判定するコホート１対コホート２
【表１５】
【０１５３】
血清クレアチニンを判定するコホート１対コホート２
【表１６】
【０１５４】
尿排出量を判定するコホート１対コホート２
【表１７】
【０１５５】
様々な閾値（または「カットオフ」）β２糖タンパク質１濃度を選択し、以下の表に、コホート１とコホート２とを区別する関連する感度および特異度を示す。ＯＲは、特定のカットオフ濃度について計算されたオッズ比であり、９５％ＣＩはオッズ比の信頼区間である。
【０１５６】
【表１８】
【０１５７】
【表１９】
【０１５８】
【表２０】
【０１５９】
実施例８
ステージＲからステージＩおよびＦに進行する患者において腎臓の状態を評価するためのマーカーとしてのβ２糖タンパク質１の使用
実施例６に記載したように、患者を分類し、解析したが、ステージＲには達した患者のみをこの実施例に含めた。コホート１は、１０日以内にステージＲに達したが、ステージＩまたはＦに進行しなかった患者を含み、コホート２は、ステージＩまたはＦに進行した患者のみを含んだ。ステージＲに達する１２時間以内に収集した尿試料中のβ２糖タンパク質１濃度を、コホート１およびコホート２の両方についての解析に含めた。
【０１６０】
以下の記述統計学を得た。
【０１６１】
【表２１】
【０１６２】
以下の表において、コホート１（ＲＩＦＬＥ Ｒに留まる対象）とコホート２（ＲＩＦＬＥ ＩまたはＦに進行する対象）とを区別する能力を、ＲＯＣ解析を用いて調べた。
【０１６３】
血清クレアチニン測定値もしくは尿排出量を判定するコホート１対コホート２
【表２２】
【０１６４】
血清クレアチニンを判定するコホート１対コホート２
【表２３】
【０１６５】
尿排出量を判定するコホート１対コホート２
【表２４】
【０１６６】
様々な閾値（または「カットオフ」）β２糖タンパク質１濃度を選択し、以下の表に、コホート１とコホート２とを区別する関連する感度および特異度を示す。ＯＲは、特定のカットオフ濃度について計算されたオッズ比であり、９５％ＣＩはオッズ比の信頼区間である。
【０１６７】
【表２５】
【０１６８】
実施例９
ＩＣＵ患者集団におけるマーカーとしてのβ２糖タンパク質１の評価
集中治療室（ＩＣＵ）の患者を以下の研究に登録した。各患者を、ＲＩＦＬＥ判定基準が決定するとおり、登録後７日以内に達した最高ステージに従って、損傷なし（０）、損傷のリスク（Ｒ）、損傷（Ｉ）、および不全（Ｆ）のように腎臓状態によって分類した。ＥＤＴＡ抗凝固処理血液試料（１０ｍＬ）および尿試料（２５〜３０ｍＬ）を、登録時、造影剤投与後４（±０．５）、８（±１）時間（適用できる場合）、登録後１２（±１）、２４（±２）、および４８（±２）、ならびにその後、対象が入院している間の毎日から最高で７日〜１４日の時点の各患者から収集した。β２糖タンパク質１を、収集した尿試料および収集した血液試料の血漿成分において、市販のアッセイ試薬を用いて、標準的なイムノアッセイ法により測定した。
【０１６９】
２つのコホートを、以下の表のそれぞれの概説で記載したとおりに定義した。以下の表において、＋／−１２時間である３つのグループに分けられるコホートについて定義したように、特定の患者が最も低い疾患ステージに達する時点に対して、「最高ステージの前」という時点は、試料を収集する時点を表す。例えば、２つのコホートとして０対Ｒ、Ｉ、Ｆを使用する「２４時間前」とは、ステージＲ（またはＲにおける試料がない場合はＩ、またはＲもしくはＩにおける試料がない場合はＦ）に達する２４時間（＋／−１２時間）前を意味する。
【０１７０】
受信者動作特性（ＲＯＣ）曲線を、β２糖タンパク質１について作成し、各ＲＯＣ曲線下の面積（ＡＵＣ）を決定した。血清クレアチニン測定値（ｓＣｒ）に基づくように、尿排出量（ＵＯ）に基づくように、または血清クレアチニン測定値もしくは尿排出量のいずれか一方に基づくように、コホート２の患者も、コホート２に定まる理由に従って分類した。上記で論じた同じ例（０対Ｒ、Ｉ、Ｆ）を用いて、血清クレアチニン測定値のみに基づいてステージＲ、Ｉ、またはＦに定まる患者については、ステージ０のコホートは、尿排出量に基づいてステージＲ、Ｉ、またはＦに定まる患者を含むことができ、尿排出量のみに基づいてステージＲ、Ｉ、またはＦに定まる患者については、ステージ０のコホートは、血清クレアチニン測定値に基づいてステージＲ、Ｉ、またはＦに定まる患者を含むことができ、かつ、血清クレアチニン測定値もしくは尿排出量に基づいてステージＲ、Ｉ、またはＦに定まる患者については、ステージ０のコホートは、血清クレアチニン測定値および尿排出量の両方についてステージ０にいる患者のみを含む。また、血清クレアチニン測定値もしくは尿排出量に基づいて定まる患者のデータにおいて、最も重篤なＲＩＦＬＥステージを生み出す判定法を用いた。
【０１７１】
コホート１とコホート２とを区別する能力を、ＲＯＣ解析を用いて調べた。ＳＥは、ＡＵＣの標準誤差であり、ｎは試料または個々の患者の数である（「ｐｔｃ」として示される）。標準誤差を、Ｈａｎｌｅｙ,Ｊ.Ａ.,ａｎｄ ＭｃＮｅｉｌ,Ｂ.ＪＴｈｅ ｍｅａｎｉｎｇ ａｎｄ ｕｓｅ ｏｆ ｔｈｅ ａｒｅａ ｕｎｄｅｒ
ａ ｒｅｃｅｉｖｅｒ ｏｐｅｒａｔｉｎｇ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃ （ＲＯＣ） ｃｕｒｖｅ.Ｒａｄｉｏｌｏｇｙ（１９８２）１４３：２９−３６に記載されているように計算した。ｐ値を、両側Ｚ検定を用いて計算し、表１〜４ではｐ＜０．０５、表５〜６ではｐ＜０．１０と報告する。０．５未満のＡＵＣは、比較の際に陰性進行を表すマーカーを示し、０．５を超えるＡＵＣは、比較の際に陽性進行を表すマーカーを示す。
【０１７２】
様々なβ２糖タンパク質１閾値（または「カットオフ」）濃度を選択し、コホート１とコホート２とを区別する関連する感度および特異度を決定した。ＯＲは、特定のカットオフ濃度について計算されたオッズ比であり、９５％ＣＩはオッズ比の信頼区間である。
【０１７３】
表１：コホート１（ＲＩＦＬＥステージ０を超えて進行しなかった患者）について収集した尿試料ならびにステージＲ、ＩまたはＦに達する０時間、２４時間、および４８時間前の時点のコホート２の対象から収集した尿試料におけるマーカーレベルの比較
【表２６】
【０１７４】
【表２７】
【０１７５】
【表２８】
【０１７６】
【表２９】
【０１７７】
表２：コホート１（ＲＩＦＬＥステージ０またはＲを超えて進行しなかった患者）について収集した尿試料ならびにステージＩまたはＦに達する０時間、２４時間、および４８時間前の時点のコホート２の対象から収集した尿試料におけるマーカーレベルの比較
【表３０】
【０１７８】
【表３１】
【０１７９】
【表３２】
【０１８０】
【表３３】
【０１８１】
表３：コホート１（ＲＩＦＬＥステージＲに達したが、それを超えて進行しなかった患者）およびコホート２（ＲＩＦＬＥステージＩまたはＦに達した患者）のステージＲに達する１２時間以内に収集した尿試料におけるマーカーレベルの比較
【表３４】
【０１８２】
【表３５】
【０１８３】
表４：コホート１（ＲＩＦＬＥステージ０を超えて進行しなかった患者）について収集した尿試料における最高マーカーレベルならびにコホート２の登録時からステージＦに達する０時間、２４時間、および４８時間前の間に収集した尿試料における最大値の比較
【表３６】
【０１８４】
【表３７】
【０１８５】
【表３８】
【０１８６】
【表３９】
【０１８７】
表５：コホート１（ＲＩＦＬＥステージ０を超えて進行しなかった患者）について収集したＥＤＴＡ試料ならびにステージＲ、ＩまたはＦに達する０時間、２４時間、および４８時間前の時点でコホート２の対象から収集したＥＤＴＡ試料におけるマーカーレベルの比較
【表４０】
【０１８８】
【表４１】
【０１８９】
【表４２】
【０１９０】
【表４３】
【０１９１】
表６：コホート１（ＲＩＦＬＥステージ０またはＲを超えて進行しなかった患者）について収集したＥＤＴＡ試料ならびにステージＩまたはＦに達する０時間、２４時間、および４８時間前の時点でコホート２の対象から収集したＥＤＴＡ試料におけるマーカーレベルの比較
【表４４】
【０１９２】
【表４５】
【０１９３】
【表４６】
【０１９４】
表７：コホート１（ＲＩＦＬＥステージＲに達したが、それを超えて進行しなかった患者）およびコホート２（ＲＩＦＬＥステージＩまたはＦに達した患者）についてステージＲに達する１２時間以内に収集したＥＤＴＡ試料におけるマーカーレベルの比較
【表４７】
【０１９５】
【表４８】
【０１９６】
表８：コホート１（ＲＩＦＬＥステージ０を超えて進行しなかった患者）について収集したＥＤＴＡ試料における最高マーカーレベルならびにコホート２の登録時からステージＦに達する０時間、２４時間、および４８時間前の間に収集したＥＤＴＡ試料における最大値の比較
【表４９】
【０１９７】
【表５０】
【０１９８】
【表５１】
【０１９９】
表９：コホート１（ＲＩＦＬＥステージ０、Ｒ、またはＩを超えて進行しなかった患者）から収集した尿試料ならびに対象がＲＩＦＬＥステージＩに達する０時間、２４時間、および４８時間前にコホート２（ＲＩＦＬＥステージＦに進行する対象）から収集した尿試料におけるマーカーレベルの比較
【表５２】
【０２００】
【表５３】
【０２０１】
【表５４】
【０２０２】
【表５５】
【０２０３】
表１０：コホート１（ＲＩＦＬＥステージ０、Ｒ、またはＩを超えて進行しなかった患者）から収集したＥＤＴＡ試料ならびに対象がＲＩＦＬＥステージＩに達する０時間、２４時間、および４８時間前にコホート２（ＲＩＦＬＥステージＦに進行する対象）から収集したＥＤＴＡ試料におけるマーカーレベルの比較
【表５６】
【０２０４】
【表５７】
【０２０５】
【表５８】
【０２０６】
表１１：コホート１（４８時間以内にＲＩＦＬＥステージ０またはＲを超えて進行しなかった患者）について収集した登録（ｅｎｒｏｌｌ）尿試料およびコホート２（４８時間以内にＲＩＦＬＥステージＩまたはＦに達した患者）から収集した登録尿試料におけるマーカーレベルの比較（すでにＲＩＦＬＥステージＩまたはＦにいる患者の登録試料は、コホートに含めた）
【表５９】
【０２０７】
【表６０】
【０２０８】
表１２：コホート１（４８時間以内にＲＩＦＬＥステージ０またはＲを超えて進行しなかった患者）から収集した登録ＥＤＴＡ試料およびコホート２（４８時間以内にＲＩＦＬＥステージＩまたはＦに達した対象）から収集した登録ＥＤＴＡ試料におけるマーカーレベルの比較（すでにＲＩＦＬＥステージＩまたはＦにいる患者の登録試料は、コホートに含めた）
【表６１】
【０２０９】
【表６２】
【０２１０】
当業者が本発明を行い、かつ使用するために、本発明を十分に詳細に記載および実証したが、本発明の趣旨および範囲から逸脱することなく、様々な代替方法、変更、および改良が行われることは明らかである。本明細書に提供した実施例は、好ましい実施形態を代表するものであり、例示的であり、本発明の範囲に限定されるようには意図しない。当業者は、その中での変更および他の使用を行うであろう。これらの変更は、本発明の趣旨に包含され、特許請求の範囲で定義される。
【０２１１】
本発明の範囲および趣旨から逸脱することなく、本明細書で開示される本発明に対して、様々な代替および変更を行うことができることを当業者は容易に理解するであろう。
【０２１２】
本明細書に記述した全ての特許文献および刊行物は、本発明が関係する分野の技術者のレベルを示す。個々の刊行物が、参照により、明確に、単独に組込まれることを示したのと同じ程度に、全ての特許文献および刊行物は、参照により本明細書に組込まれる。
【０２１３】
本明細書に適切に、説明として記載した本発明は、本明細書に明確に開示されない任意の要素または複数の要素、制限または複数の制限がない状態で実行され得る。したがって、例えば、本明細書の各場合において、「含む」、「基本的に〜からなる」および「〜からなる」という用語のいずれも、他の２つの用語のいずれかと置き換えられ得る。使用された用語および表現は、説明の用語として、制限なく使用される。示され、記載される特徴の全ての同等物またはその一部を排除するそのような用語および表現の使用は意図しないが、本発明の特許請求の範囲の中で、様々な変更が可能であることは理解される。したがって、本発明は、好ましい実施形態および任意の特徴によって明確に開示されるが、当業者は、本明細書に開示される概念の変更および変化を行うことが可能であり、かかる変更および変化は、添付の特許請求の範囲によって定義されるように、本発明の範囲に入ると考えられることは理解されるべきである。
【０２１４】
他の実施形態を、以下の特許請求の範囲に記載する。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
アッセイ結果を提供するために、対象から取得した体液試料において、β２糖タンパク質１を検出するように構成されたアッセイ法を行うこと、かつ前記アッセイ結果と前記対象の腎臓の状態とを相関させることを含む、前記対象の腎臓の状態を評価する方法。
【請求項２】
前記相関ステップが、前記アッセイ結果と、前記対象の腎臓の状態のリスク層化、診断、病期分類、分類および監視のうちの１つ以上とを相関させることを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記相関ステップが、前記アッセイ結果に基づいて、腎臓の状態の１つ以上の将来的な変化の可能性を前記対象に割り当てることを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
腎臓の状態における前記１つ以上の将来的な変化が、腎機能への将来的な損傷、腎機能の将来的な低下、腎機能の将来的な改善、および将来的な急性腎不全（ＡＲＦ）のうちの１つ以上を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記対象が急性腎不全ではない、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記対象が、前記体液試料が取得される時点の前に決定されるベースライン値から１．５倍以上の血清クレアチニンの増加を経験したことがない、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
前記対象の尿排出量が、前記体液試料が取得される時点に先立つ１２時間にわたって、少なくとも０．５ｍｌ／ｋｇ／時である、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
前記対象が、前記体液試料が取得される時点の前に決定されるベースライン値から０．３ｍｇ／ｄＬ以上の血清クレアチニンの増加を経験したことがない、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
前記対象が、（ｉ）前記体液試料が取得される時点の前に決定されるベースライン値から１．５倍以上の血清クレアチニンの増加を経験したことがなく、（ｉｉ）尿排出量が、前記体液試料が取得される時点に先立つ１２時間にわたって、少なくとも０．５ｍｌ／ｋｇ／時であり、かつ（ｉｉｉ）前記体液試料が取得される時点の前に決定されるベースライン値から０．３ｍｇ／ｄＬ以上の血清クレアチニンの増加を経験したことがない、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
前記対象がＲＩＦＬＥステージ０またはＲにいる、請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
前記対象がＲＩＦＬＥステージ０におり、かつ前記相関ステップが、７２時間以内に前記対象はＲＩＦＬＥステージＲ、ＩまたはＦに達するであろうという可能性を割り当てることを含む、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記対象がＲＩＦＬＥステージ０またはＲにおり、かつ前記相関ステップが、７２時間以内に前記対象はＲＩＦＬＥステージＩまたはＦに達するであろうという可能性を割り当てることを含む、請求項１０に記載の方法。
【請求項１３】
前記対象がＲＩＦＬＥステージ０におり、かつ前記相関ステップが、７２時間以内に前記対象はＲＩＦＬＥステージＦに達するであろうという可能性を割り当てることを含む、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記対象がＲＩＦＬＥステージＲにおり、かつ前記相関ステップが、７２時間以内に前記対象はＲＩＦＬＥステージＩまたはＦに達するであろうという可能性を割り当てることを含む、請求項１２に記載の方法。
【請求項１５】
前記対象がＲＩＦＬＥステージ０、Ｒ、またはＩにおり、かつ前記相関ステップが、７２時間以内に前記対象はＲＩＦＬＥステージＦに達するであろうという可能性を割り当てることを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１６】
前記対象がＲＩＦＬＥステージＩにおり、かつ前記相関ステップが、７２時間以内に前記対象はＲＩＦＬＥステージＦに達するであろうという可能性を割り当てることを含む、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
前記相関ステップが、４８時間以内に前記対象はＲＩＦＬＥステージＲ、ＩまたはＦに達するであろうという可能性を割り当てることを含む、請求項１１に記載の方法。
【請求項１８】
前記相関ステップが、４８時間以内に前記対象はＲＩＦＬＥステージＩまたはＦに達するであろうという可能性を割り当てることを含む、請求項１２に記載の方法。
【請求項１９】
前記相関ステップが、４８時間以内に前記対象はＲＩＦＬＥステージＩまたはＦに達するであろうという可能性を割り当てることを含む、請求項１３に記載の方法。
【請求項２０】
前記相関ステップが、４８時間以内に前記対象はＲＩＦＬＥステージＦに達するであろうという可能性を割り当てることを含む、請求項１７に記載の方法。
【請求項２１】
前記相関ステップが、４８時間以内に前記対象はＲＩＦＬＥステージＦに達するであろうという可能性を割り当てることを含む、請求項１８に記載の方法。
【請求項２２】
前記相関ステップが、４８時間以内に前記対象はＲＩＦＬＥステージＦに達するであろうという可能性を割り当てることを含む、請求項１９に記載の方法。
【請求項２３】
前記相関ステップが、２４時間以内に前記対象はＲＩＦＬＥステージＲ、ＩまたはＦに達するであろうという可能性を割り当てることを含む、請求項１７に記載の方法。
【請求項２４】
前記相関ステップが、２４時間以内に前記対象はＲＩＦＬＥステージＩまたはＦに達するであろうという可能性を割り当てることを含む、請求項１８に記載の方法。
【請求項２５】
前記相関ステップが、２４時間以内に前記対象はＲＩＦＬＥステージＩまたはＦに達するであろうという可能性を割り当てることを含む、請求項１９に記載の方法。
【請求項２６】
前記相関ステップが、２４時間以内に前記対象はＲＩＦＬＥステージＦに達するであろうという可能性を割り当てることを含む、請求項２０に記載の方法。
【請求項２７】
前記相関ステップが、２４時間以内に前記対象はＲＩＦＬＥステージＦに達するであろうという可能性を割り当てることを含む、請求項２１に記載の方法。
【請求項２８】
前記相関ステップが、２４時間以内に前記対象はＲＩＦＬＥステージＦに達するであろうという可能性を割り当てることを含む、請求項２２に記載の方法。
【請求項２９】
前記アッセイ結果（複数可）が、測定されたβ２糖タンパク質１の尿濃度または血漿濃度を含み、前期相関ステップが前記測定濃度と閾値濃度を比較することを含み、前記対象の現在のＲＩＦＬＥステージに対して、前記測定濃度が閾値を超える時に、悪化するＲＩＦＬＥステージへ進行する可能性の増加を前記対象に割り当てるか、または前記対象の現在のＲＩＦＬＥステージに対して、前記測定濃度が閾値より低い時に、悪化するＲＩＦＬＥステージへ進行する可能性の減少を前記対象に割り当てることを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３０】
前記アッセイ結果（複数可）が、測定されたβ２糖タンパク質１の尿濃度または血漿濃度を含み、前期相関ステップが前記測定濃度と閾値濃度を比較することを含み、前記測定濃度が閾値を超える時に、腎置換療法の必要性へ進行する可能性の増加を前記対象に割り当てるか、または前記測定濃度が閾値より低い時に、腎置換療法の必要性へ進行する可能性の減少を割り当てることを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３１】
前記アッセイ結果（複数可）が、測定されたβ２糖タンパク質１の尿濃度または血漿濃度を含み、前期相関ステップが前記測定濃度と閾値濃度を比較することを含み、前記対象の現在のＲＩＦＬＥステージに対して、前記測定濃度が閾値を超える時に、悪化するＲＩＦＬＥステージへ進行する可能性の増加を前記対象に割り当てるか、または前記対象の現在のＲＩＦＬＥステージに対して、前記測定濃度が閾値より低い時に、悪化するＲＩＦＬＥステージへ進行する可能性の減少を前記対象に割り当てることを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３２】
前記アッセイ結果（複数可）が、測定されたβ２糖タンパク質１の尿濃度または血漿濃度を含み、前期相関ステップが前記測定濃度と閾値濃度を比較することを含み、前記測定濃度が閾値を超える時に、急性腎不全へ進行する可能性の増加を前記対象に割り当てるか、または前記測定濃度が閾値より低い時に、急性腎不全へ進行する可能性の減少を前記対象に割り当てることを含む、請求項５に記載の方法。
【請求項３３】
前記アッセイ結果（複数可）が、測定されたβ２糖タンパク質１の尿濃度または血漿濃度を含み、前期相関ステップが前記測定濃度と閾値濃度を比較することを含み、前記測定濃度が閾値を超える時に、ＲＩＦＬＥステージＲ、ＩまたはＦへ進行する可能性の増加を前記対象に割り当てるか、または前記測定濃度が閾値より低い時に、ＲＩＦＬＥステージＲ、ＩまたはＦへ進行する可能性の減少を前記対象に割り当てることを含む、請求項１１に記載の方法。
【請求項３４】
前記アッセイ結果（複数可）が、測定されたβ２糖タンパク質１の尿濃度または血漿濃度を含み、前期相関ステップが前記測定濃度と閾値濃度を比較することを含み、前記測定濃度が閾値を超える時に、ＲＩＦＬＥステージＩまたはＦへ進行する可能性の増加を前記対象に割り当てるか、または前記測定濃度が閾値より低い時に、ＲＩＦＬＥステージＩまたはＦへ進行する可能性の減少を前記対象に割り当てることを含む、請求項１２に記載の方法。
【請求項３５】
前記アッセイ結果（複数可）が、測定されたβ２糖タンパク質１の尿濃度または血漿濃度を含み、前期相関ステップが前記測定濃度と閾値濃度を比較することを含み、前記測定濃度が閾値を超える時に、ＲＩＦＬＥステージＦへ進行する可能性の増加を前記対象に割り当てるか、または前記測定濃度が閾値より低い時に、ＲＩＦＬＥステージＦへ進行する可能性の減少を前記対象に割り当てることを含む、請求項１３に記載の方法。
【請求項３６】
前記アッセイ結果（複数可）が、測定されたβ２糖タンパク質１の尿濃度または血漿濃度を含み、前期相関ステップが前記測定濃度と閾値濃度を比較することを含み、前記測定濃度が閾値を超える時に、ＲＩＦＬＥステージＦへ進行する可能性の増加を前記対象に割り当てるか、または前記測定濃度が閾値より低い時に、ＲＩＦＬＥステージＩまたはＦへ進行する可能性の減少を前記対象に割り当てることを含む、請求項１４に記載の方法。
【請求項３７】
前記アッセイ結果（複数可）が、測定されたβ２糖タンパク質１の尿濃度または血漿濃度を含み、前期相関ステップが前記測定濃度と閾値濃度を比較することを含み、前記測定濃度が閾値を超える時に、ＲＩＦＬＥステージＦへ進行する可能性の増加を前記対象に割り当てるか、または前記測定濃度が閾値より低い時に、ＲＩＦＬＥステージＦへ進行する可能性の減少を前記対象に割り当てることを含む、請求項１５に記載の方法。
【請求項３８】
前記アッセイ結果（複数可）が、測定されたβ２糖タンパク質１の尿濃度または血漿濃度を含み、前期相関ステップが前記測定濃度と閾値濃度を比較することを含み、前記測定濃度が閾値を超える時に、ＲＩＦＬＥステージＦへ進行する可能性の増加を前記対象に割り当てるか、または前記測定濃度が閾値より低い時に、ＲＩＦＬＥステージＦへ進行する可能性の減少を前記対象に割り当てることを含む、請求項１６に記載の方法。
【請求項３９】
前記対象における腎前性、腎内性、または腎後性のＡＲＦに対する１つ以上の既知のリスクファクターが以前から存在することに基づいて腎臓の状態を評価するために前記対象が選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項４０】
鬱血性心不全、子癇前症、子癇、真性糖尿病、高血圧、冠動脈疾患、タンパク尿、腎不全、正常範囲を下回る糸球体濾過、肝硬変、正常範囲を上回る血清クレアチニン、敗血症、腎機能への損傷、腎機能の低下、もしくはＡＲＦのうちの１つ以上の現在の診断に基づいて、または大規模な血管手術、冠動脈バイパス、もしくは他の心臓手術を経験するもしくは経験したことに基づいて、またはＮＳＡＩＤ、シクロスポリン、タクロリムス、アミノグリコシド、フォスカネット、エチレングリコール、ヘモグロビン、ミオグロビン、イホスファミド、重金属、メトトレキサート、放射線造影剤、もしくはストレプトゾトシンへの曝露に基づいて腎臓の状態を評価するために、前記対象が選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項４１】
腎置換療法を受けていない対象の腎臓の状態を診断、リスク層化、予後診断、分類および監視をするためのβ２糖タンパク質１の測定。
【請求項４２】
急性腎不全ではない対象の腎臓の状態を診断、リスク層化、予後診断、分類および監視をするためのβ２糖タンパク質１の測定。
【請求項４３】
前記対象の現在のＲＩＦＬＥステージに対して、悪化するＲＩＦＬＥステージへ進行する可能性の増加を対象に割り当てるためのβ２糖タンパク質１の測定。
【請求項１】
アッセイ結果を提供するために、対象から取得した体液試料において、β２糖タンパク質１を検出するように構成されたアッセイ法を行うこと、かつ前記アッセイ結果と前記対象の腎臓の状態とを相関させることを含む、前記対象の腎臓の状態を評価する方法。
【請求項２】
前記相関ステップが、前記アッセイ結果と、前記対象の腎臓の状態のリスク層化、診断、病期分類、分類および監視のうちの１つ以上とを相関させることを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記相関ステップが、前記アッセイ結果に基づいて、腎臓の状態の１つ以上の将来的な変化の可能性を前記対象に割り当てることを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
腎臓の状態における前記１つ以上の将来的な変化が、腎機能への将来的な損傷、腎機能の将来的な低下、腎機能の将来的な改善、および将来的な急性腎不全（ＡＲＦ）のうちの１つ以上を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記対象が急性腎不全ではない、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記対象が、前記体液試料が取得される時点の前に決定されるベースライン値から１．５倍以上の血清クレアチニンの増加を経験したことがない、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
前記対象の尿排出量が、前記体液試料が取得される時点に先立つ１２時間にわたって、少なくとも０．５ｍｌ／ｋｇ／時である、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
前記対象が、前記体液試料が取得される時点の前に決定されるベースライン値から０．３ｍｇ／ｄＬ以上の血清クレアチニンの増加を経験したことがない、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
前記対象が、（ｉ）前記体液試料が取得される時点の前に決定されるベースライン値から１．５倍以上の血清クレアチニンの増加を経験したことがなく、（ｉｉ）尿排出量が、前記体液試料が取得される時点に先立つ１２時間にわたって、少なくとも０．５ｍｌ／ｋｇ／時であり、かつ（ｉｉｉ）前記体液試料が取得される時点の前に決定されるベースライン値から０．３ｍｇ／ｄＬ以上の血清クレアチニンの増加を経験したことがない、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
前記対象がＲＩＦＬＥステージ０またはＲにいる、請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
前記対象がＲＩＦＬＥステージ０におり、かつ前記相関ステップが、７２時間以内に前記対象はＲＩＦＬＥステージＲ、ＩまたはＦに達するであろうという可能性を割り当てることを含む、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記対象がＲＩＦＬＥステージ０またはＲにおり、かつ前記相関ステップが、７２時間以内に前記対象はＲＩＦＬＥステージＩまたはＦに達するであろうという可能性を割り当てることを含む、請求項１０に記載の方法。
【請求項１３】
前記対象がＲＩＦＬＥステージ０におり、かつ前記相関ステップが、７２時間以内に前記対象はＲＩＦＬＥステージＦに達するであろうという可能性を割り当てることを含む、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記対象がＲＩＦＬＥステージＲにおり、かつ前記相関ステップが、７２時間以内に前記対象はＲＩＦＬＥステージＩまたはＦに達するであろうという可能性を割り当てることを含む、請求項１２に記載の方法。
【請求項１５】
前記対象がＲＩＦＬＥステージ０、Ｒ、またはＩにおり、かつ前記相関ステップが、７２時間以内に前記対象はＲＩＦＬＥステージＦに達するであろうという可能性を割り当てることを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１６】
前記対象がＲＩＦＬＥステージＩにおり、かつ前記相関ステップが、７２時間以内に前記対象はＲＩＦＬＥステージＦに達するであろうという可能性を割り当てることを含む、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
前記相関ステップが、４８時間以内に前記対象はＲＩＦＬＥステージＲ、ＩまたはＦに達するであろうという可能性を割り当てることを含む、請求項１１に記載の方法。
【請求項１８】
前記相関ステップが、４８時間以内に前記対象はＲＩＦＬＥステージＩまたはＦに達するであろうという可能性を割り当てることを含む、請求項１２に記載の方法。
【請求項１９】
前記相関ステップが、４８時間以内に前記対象はＲＩＦＬＥステージＩまたはＦに達するであろうという可能性を割り当てることを含む、請求項１３に記載の方法。
【請求項２０】
前記相関ステップが、４８時間以内に前記対象はＲＩＦＬＥステージＦに達するであろうという可能性を割り当てることを含む、請求項１７に記載の方法。
【請求項２１】
前記相関ステップが、４８時間以内に前記対象はＲＩＦＬＥステージＦに達するであろうという可能性を割り当てることを含む、請求項１８に記載の方法。
【請求項２２】
前記相関ステップが、４８時間以内に前記対象はＲＩＦＬＥステージＦに達するであろうという可能性を割り当てることを含む、請求項１９に記載の方法。
【請求項２３】
前記相関ステップが、２４時間以内に前記対象はＲＩＦＬＥステージＲ、ＩまたはＦに達するであろうという可能性を割り当てることを含む、請求項１７に記載の方法。
【請求項２４】
前記相関ステップが、２４時間以内に前記対象はＲＩＦＬＥステージＩまたはＦに達するであろうという可能性を割り当てることを含む、請求項１８に記載の方法。
【請求項２５】
前記相関ステップが、２４時間以内に前記対象はＲＩＦＬＥステージＩまたはＦに達するであろうという可能性を割り当てることを含む、請求項１９に記載の方法。
【請求項２６】
前記相関ステップが、２４時間以内に前記対象はＲＩＦＬＥステージＦに達するであろうという可能性を割り当てることを含む、請求項２０に記載の方法。
【請求項２７】
前記相関ステップが、２４時間以内に前記対象はＲＩＦＬＥステージＦに達するであろうという可能性を割り当てることを含む、請求項２１に記載の方法。
【請求項２８】
前記相関ステップが、２４時間以内に前記対象はＲＩＦＬＥステージＦに達するであろうという可能性を割り当てることを含む、請求項２２に記載の方法。
【請求項２９】
前記アッセイ結果（複数可）が、測定されたβ２糖タンパク質１の尿濃度または血漿濃度を含み、前期相関ステップが前記測定濃度と閾値濃度を比較することを含み、前記対象の現在のＲＩＦＬＥステージに対して、前記測定濃度が閾値を超える時に、悪化するＲＩＦＬＥステージへ進行する可能性の増加を前記対象に割り当てるか、または前記対象の現在のＲＩＦＬＥステージに対して、前記測定濃度が閾値より低い時に、悪化するＲＩＦＬＥステージへ進行する可能性の減少を前記対象に割り当てることを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３０】
前記アッセイ結果（複数可）が、測定されたβ２糖タンパク質１の尿濃度または血漿濃度を含み、前期相関ステップが前記測定濃度と閾値濃度を比較することを含み、前記測定濃度が閾値を超える時に、腎置換療法の必要性へ進行する可能性の増加を前記対象に割り当てるか、または前記測定濃度が閾値より低い時に、腎置換療法の必要性へ進行する可能性の減少を割り当てることを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３１】
前記アッセイ結果（複数可）が、測定されたβ２糖タンパク質１の尿濃度または血漿濃度を含み、前期相関ステップが前記測定濃度と閾値濃度を比較することを含み、前記対象の現在のＲＩＦＬＥステージに対して、前記測定濃度が閾値を超える時に、悪化するＲＩＦＬＥステージへ進行する可能性の増加を前記対象に割り当てるか、または前記対象の現在のＲＩＦＬＥステージに対して、前記測定濃度が閾値より低い時に、悪化するＲＩＦＬＥステージへ進行する可能性の減少を前記対象に割り当てることを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３２】
前記アッセイ結果（複数可）が、測定されたβ２糖タンパク質１の尿濃度または血漿濃度を含み、前期相関ステップが前記測定濃度と閾値濃度を比較することを含み、前記測定濃度が閾値を超える時に、急性腎不全へ進行する可能性の増加を前記対象に割り当てるか、または前記測定濃度が閾値より低い時に、急性腎不全へ進行する可能性の減少を前記対象に割り当てることを含む、請求項５に記載の方法。
【請求項３３】
前記アッセイ結果（複数可）が、測定されたβ２糖タンパク質１の尿濃度または血漿濃度を含み、前期相関ステップが前記測定濃度と閾値濃度を比較することを含み、前記測定濃度が閾値を超える時に、ＲＩＦＬＥステージＲ、ＩまたはＦへ進行する可能性の増加を前記対象に割り当てるか、または前記測定濃度が閾値より低い時に、ＲＩＦＬＥステージＲ、ＩまたはＦへ進行する可能性の減少を前記対象に割り当てることを含む、請求項１１に記載の方法。
【請求項３４】
前記アッセイ結果（複数可）が、測定されたβ２糖タンパク質１の尿濃度または血漿濃度を含み、前期相関ステップが前記測定濃度と閾値濃度を比較することを含み、前記測定濃度が閾値を超える時に、ＲＩＦＬＥステージＩまたはＦへ進行する可能性の増加を前記対象に割り当てるか、または前記測定濃度が閾値より低い時に、ＲＩＦＬＥステージＩまたはＦへ進行する可能性の減少を前記対象に割り当てることを含む、請求項１２に記載の方法。
【請求項３５】
前記アッセイ結果（複数可）が、測定されたβ２糖タンパク質１の尿濃度または血漿濃度を含み、前期相関ステップが前記測定濃度と閾値濃度を比較することを含み、前記測定濃度が閾値を超える時に、ＲＩＦＬＥステージＦへ進行する可能性の増加を前記対象に割り当てるか、または前記測定濃度が閾値より低い時に、ＲＩＦＬＥステージＦへ進行する可能性の減少を前記対象に割り当てることを含む、請求項１３に記載の方法。
【請求項３６】
前記アッセイ結果（複数可）が、測定されたβ２糖タンパク質１の尿濃度または血漿濃度を含み、前期相関ステップが前記測定濃度と閾値濃度を比較することを含み、前記測定濃度が閾値を超える時に、ＲＩＦＬＥステージＦへ進行する可能性の増加を前記対象に割り当てるか、または前記測定濃度が閾値より低い時に、ＲＩＦＬＥステージＩまたはＦへ進行する可能性の減少を前記対象に割り当てることを含む、請求項１４に記載の方法。
【請求項３７】
前記アッセイ結果（複数可）が、測定されたβ２糖タンパク質１の尿濃度または血漿濃度を含み、前期相関ステップが前記測定濃度と閾値濃度を比較することを含み、前記測定濃度が閾値を超える時に、ＲＩＦＬＥステージＦへ進行する可能性の増加を前記対象に割り当てるか、または前記測定濃度が閾値より低い時に、ＲＩＦＬＥステージＦへ進行する可能性の減少を前記対象に割り当てることを含む、請求項１５に記載の方法。
【請求項３８】
前記アッセイ結果（複数可）が、測定されたβ２糖タンパク質１の尿濃度または血漿濃度を含み、前期相関ステップが前記測定濃度と閾値濃度を比較することを含み、前記測定濃度が閾値を超える時に、ＲＩＦＬＥステージＦへ進行する可能性の増加を前記対象に割り当てるか、または前記測定濃度が閾値より低い時に、ＲＩＦＬＥステージＦへ進行する可能性の減少を前記対象に割り当てることを含む、請求項１６に記載の方法。
【請求項３９】
前記対象における腎前性、腎内性、または腎後性のＡＲＦに対する１つ以上の既知のリスクファクターが以前から存在することに基づいて腎臓の状態を評価するために前記対象が選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項４０】
鬱血性心不全、子癇前症、子癇、真性糖尿病、高血圧、冠動脈疾患、タンパク尿、腎不全、正常範囲を下回る糸球体濾過、肝硬変、正常範囲を上回る血清クレアチニン、敗血症、腎機能への損傷、腎機能の低下、もしくはＡＲＦのうちの１つ以上の現在の診断に基づいて、または大規模な血管手術、冠動脈バイパス、もしくは他の心臓手術を経験するもしくは経験したことに基づいて、またはＮＳＡＩＤ、シクロスポリン、タクロリムス、アミノグリコシド、フォスカネット、エチレングリコール、ヘモグロビン、ミオグロビン、イホスファミド、重金属、メトトレキサート、放射線造影剤、もしくはストレプトゾトシンへの曝露に基づいて腎臓の状態を評価するために、前記対象が選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項４１】
腎置換療法を受けていない対象の腎臓の状態を診断、リスク層化、予後診断、分類および監視をするためのβ２糖タンパク質１の測定。
【請求項４２】
急性腎不全ではない対象の腎臓の状態を診断、リスク層化、予後診断、分類および監視をするためのβ２糖タンパク質１の測定。
【請求項４３】
前記対象の現在のＲＩＦＬＥステージに対して、悪化するＲＩＦＬＥステージへ進行する可能性の増加を対象に割り当てるためのβ２糖タンパク質１の測定。
【公表番号】特表２０１３−５０１９２０（Ｐ２０１３−５０１９２０Ａ）
【公表日】平成２５年１月１７日（２０１３．１．１７）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１２−５２３９８７（Ｐ２０１２−５２３９８７）
【出願日】平成２２年８月６日（２０１０．８．６）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２０１０／０４４７７２
【国際公開番号】ＷＯ２０１１／０１７６５４
【国際公開日】平成２３年２月１０日（２０１１．２．１０）
【出願人】（５１１０５３０２３）アスチュート メディカル，インコーポレイテッド (17)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２５年１月１７日（２０１３．１．１７）
【国際特許分類】
【出願日】平成２２年８月６日（２０１０．８．６）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２０１０／０４４７７２
【国際公開番号】ＷＯ２０１１／０１７６５４
【国際公開日】平成２３年２月１０日（２０１１．２．１０）
【出願人】（５１１０５３０２３）アスチュート メディカル，インコーポレイテッド (17)
【Ｆターム（参考）】
[ Back to top ]