【課題】多量体を形成する蛍光蛋白質を単量体化することにより、分子のラベルを行った際に現われうる不具合を解消することができるアミノ酸配列を有する蛍光蛋白質を提供する。
【解決手段】Ａｃｒｏｐｏｒａ ｓｐ．より単離された青緑蛍光蛋白質に変異を導入することにより、蛍光を有し、かつ単量体で存在する蛋白質を作製した。そのアミノ酸配列又はその１から数個のアミノ酸の欠失、置換及び／又は付加を有するアミノ酸配列を有する蛋白質、それらのアミノ酸配列をコードする塩基配列を有するＤＮＡ、ＤＮＡ又は組換えベクターを有する形質転換体を提供する。また上記蛍光蛋白質と他の蛋白質との融合蛋白質も提供される。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の何れかのアミノ酸配列を有する蛍光蛋白質。
（ａ）配列番号２に記載のアミノ酸配列；又は、
（ｂ）配列番号２に記載のアミノ酸配列において１から数個のアミノ酸の欠失、置換及び／又は付加を有するアミノ酸配列を有し、蛍光を有し、かつ単量体で存在するアミノ酸配列：
【請求項２】
以下の何れかのＤＮＡ。
（ａ）配列番号２に記載のアミノ酸配列をコードするＤＮＡ；又は、
（ｂ）配列番号２に記載のアミノ酸配列において１から数個のアミノ酸の欠失、置換及び／又は付加を有するアミノ酸配列を有し、単量体で存在する蛍光蛋白質をコードするＤＮＡ：
【請求項３】
以下の何れかの塩基配列を有するＤＮＡ。
（ａ）配列番号１に記載の塩基配列；又は、
（ｂ）配列番号１に記載の塩基配列において１から数個の塩基の欠失、置換及び／又は付加を有する塩基配列を有し、単量体で存在する蛍光蛋白質をコードする塩基配列：
【請求項４】
請求項２又は３に記載のＤＮＡを有する組み換えベクター。
【請求項５】
請求項２又は３に記載のＤＮＡ又は請求項４に記載の組み換えベクターを有する形質転換体。
【請求項６】
請求項１に記載の蛍光蛋白質と他の蛋白質とを融合させて得られる融合蛋白質。
【請求項７】
請求項１に記載の蛍光蛋白質の蛍光スペクトルとＦＲＥＴ（蛍光共鳴エネルギー移動）を引き起こすのに十分な重なりをもつ吸収スペクトルを示す色素蛋白質と、請求項１に記載の蛍光蛋白質とをリンカー配列を介して連結することにより得られるＦＲＥＴ測定用融合蛋白質。
【請求項８】
色素蛋白質が、以下の何れかのアミノ酸配列を有する色素蛋白質である、請求項７に記載のＦＲＥＴ測定用融合蛋白質。
（ａ）配列番号４に記載のアミノ酸配列；又は、
（ｂ）配列番号４に記載のアミノ酸配列において１から数個のアミノ酸の欠失、置換及び／又は付加を有するアミノ酸配列を有し、配列番号４に記載のアミノ酸配列と同等の吸光特性を有するアミノ酸配列：
【請求項９】
請求項１に記載の蛍光蛋白質、請求項２又は３に記載のＤＮＡ、請求項４に記載の組み換えベクター、請求項５に記載の形質転換体、請求項６に記載の融合蛋白質、又は請求項７若しくは８に記載のＦＲＥＴ測定用融合蛋白質の何れかを含む、蛍光試薬キット。

【図１】

【図２】

【図３】

【図４】

【図５】

【図６】

【図７】

【図８】

【図９】

【図１０】

【公開番号】特開２００６−２８０２３２（Ｐ２００６−２８０２３２Ａ）
【公開日】平成１８年１０月１９日（２００６．１０．１９）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００５−１０２３２３（Ｐ２００５−１０２３２３）
【出願日】平成１７年３月３１日（２００５．３．３１）
【出願人】（５０３３５９８２１）独立行政法人理化学研究所 (1,056)
【出願人】（３９０００４０９７）株式会社医学生物学研究所 (41)
【出願人】（００００００３７６）オリンパス株式会社 (11,466)
【Ｆターム（参考）】