血管一時塞栓剤用ＰＶＡ粒子、その製造方法、および血管一時塞栓剤
【課題】カテーテルの通過性と生体内における血流の一時塞栓性能に優れた塞栓材料を提供する。
【解決手段】鹸化度が９０モル％以上で、平均粒径が７０μｍ〜１０００μｍであるパール状の血管一時塞栓剤用ポリビニルアルコール粒子、および該粒子を混合または溶解した血管一時塞栓剤。
【解決手段】鹸化度が９０モル％以上で、平均粒径が７０μｍ〜１０００μｍであるパール状の血管一時塞栓剤用ポリビニルアルコール粒子、および該粒子を混合または溶解した血管一時塞栓剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、生体内において血管を一時的に塞ぎ、血流の一時的な閉塞に使用する血管塞栓材料に関する。
【背景技術】
【０００２】
外科手術に伴う切開に先だって、出血を最小限に留める目的や出血防止目的以外に、切断不能な腫瘍や子宮筋腫に対して、血管閉塞により栄養を遮断する動脈塞栓術が知られている。また、抗悪性腫瘍剤と血管塞栓材料とを組み合わせて投与することにより、腫瘍内の血流を遮断し、かつ抗悪性腫瘍剤濃度を高く維持して抗腫瘍効果の向上を期待する化学塞栓療法が知られている。血管内に注入されるこれらの塞栓材料としては、ＥＶＯＨ（約１０％濃度ＤＭＳＯ溶液）、シアノアクリレート、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）のホルマール化粒子が知られている。
【０００３】
これらの塞栓材料は、たとえば、ＥＶＯＨ（約１０％濃度ＤＭＳＯ溶液）は、溶媒であるＤＭＳＯが毒性を有する等の点で生体への悪影響があり、シアノアクリレートでは、ヨウ化脂肪酸エステル鹸化物との混合比を調整することにより血液中での塞栓時間を制御できるが、混合比のバランスが難しく、また、カテーテルを通じて血管内に投与後、カテーテルを引き抜くタイミングを誤ると、カテーテル先端が血管内に接着してしまい、最悪、カテーテルの先端を血管内に残存させたままになる危険性がある。また、ＰＶＡのホルマール化粒子は、永久塞栓材料であり、一時的な塞栓用途には使用できないという問題があった。
【０００４】
これらの問題を解決するために、種々の検討がなされている。たとえば、特許文献１では、一時塞栓用にゼラチンスポンジが使用されているが、ゼラチンスポンジには生物由来の成分が含まれるため、エイズウイルス等の感染症を媒介する危険性がある。また、一時塞栓材として使用する場合、ゼラチンスポンジをカテーテルに通過させる為には、使用前に１ｍｍ厚程度に非常に細かく裁断する必要があり、医師の非常に高い熟練度が要求され、治療効果に個人差がでるという問題がある。また、一般に、架橋デンプンも一時塞栓材として使用されているが、血液中のアミラーゼによって、分単位で分解するため、１週間〜３ケ月といった比較的長い一定期間有効である塞栓材料ではなかった。
【０００５】
特許文献２には、３０％以上の水膨潤率を有し、リン酸緩衝生理食塩水において分解性がある略粒状の粒子からなる血管塞栓材料が開示されている。しかしながら、該血管塞栓材料は、水溶性ポリマーを生分解性成分によるブロックコポリマー化、架橋、変性などの方法によって水不溶化したもので、その分解は生分解によるものであるため、血管内の塞栓時間の制御が未だ不充分であった。
【０００６】
【特許文献１】国際公開第９８／０３２０３号公報
【特許文献２】特開２００４−１６７２２９号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
生体内において血管を一時的に塞ぎ、カテーテル通過性および塞栓時間の制御性に優れた血管塞栓材料を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
すなわち、本発明は、鹸化度が９０モル％以上で、平均粒径が７０μｍ〜１０００μｍであるパール状の血管一時塞栓剤用ポリビニルアルコール粒子に関する。
【０００９】
ポリビニルアルコールの平均重合度が、８０〜６００であることが好ましく、８０〜３５０であることがより好ましい。
【００１０】
本発明におけるポリビニルアルコール粒子は、アルコールまたはアルコールと酢酸メチル（ａ）を溶媒とするポリビニルエステル溶液（ｂ）を、ポリビニルエステル、該エステルの鹸化物、および成分（ａ）のいずれとも実質的に相溶せず、かつ成分（ｂ）よりも粘度の高い媒体（ｃ）中に粒状に分散せしめ、鹸化触媒存在下で鹸化して得られることが好ましい。
【００１１】
前記ポリビニルエステル溶液（ｂ）／媒体（ｃ）の重量比が、２／８〜６／４であることが好ましく、４／６〜５／５であることがより好ましい。
【００１２】
また、本発明は、前記ポリビニルアルコール粒子を造影剤に分散した血管一時塞栓剤、および前記ポリビニルアルコール粒子を造影剤に溶解した血管一時塞栓剤に関する。
【００１３】
さらに、本発明は、前記ポリビニルアルコール粒子を造影剤に溶解した血管一時塞栓剤に、さらに、前記ポリビニルアルコール粒子を分散した血管一時塞栓剤に関する。
【発明の効果】
【００１４】
本発明によれば、スタックを起こす事が無く、カテーテル通過性が良好であり、塞栓時間の制御が可能な血管一時塞栓剤用粒子および塞栓剤を提供することができる。該塞栓剤は、生体内で吸収後、体外に自然に排斥される。また、血液由来の一時塞栓剤ではないので、エイズや狂牛病等の血液を媒介とした感染症伝播の危険性が無い。さらに、目的外の血管内において凝集詰まりを起こす危険性が少ない。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１５】
本発明の粒子は、血管一時塞栓剤用の粒子であって、鹸化度が９０モル％以上、平均粒径が７０μｍ〜１０００μｍのパール状のポリビニルアルコール（ＰＶＡ）粒子である。ここで、パール状とは、顆粒状や異形の粉状物ではなく、一定の球形度を有する粒子を表すものである。
【００１６】
本発明のＰＶＡ粒子の鹸化度は、９０モル％以上であることが好ましい。より好ましくは、９４〜９９モル％、さらに好ましくは、９５〜９８．９モル％である。鹸化度が９０モル％未満の場合は、造影剤に膨潤し易いため、カテーテル通過性が悪くスタックを引き起こしたり、カテーテルを通して本発明の塞栓剤を注入する際の圧力が非常に高くなり、作業性が著しく低下することがあり、好ましくない。
【００１７】
ＰＶＡ粒子の平均粒径は、７０〜１０００μｍであることが好ましい。より好ましくは１００〜３００ｍμであり、さらに好ましくは１００〜２２０μｍである。また、かかるＰＶＡ粒子は１２００μｍ以上のものの含有量が３重量％以下であるものが好ましい。ＰＶＡ粒子の平均粒径が７０μｍ未満の場合は、目的とする血管以外の部位を塞栓する傾向があり、好ましくない。また、平均粒径が１０００μｍより大きい場合は、使用するカテーテルの種類によっては粒子のカテーテル通過性が著しく低下したり、通過不能となる傾向がある。なお、本明細書において特に断らない限り、平均粒径はイソプロピルアルコール中にＰＶＡを所定量分散させた状態における値である。
【００１８】
ＰＶＡ粒子の平均重合度は、８０〜６００であることが好ましく、より好ましくは８０〜３５０、さらに好ましくは、１００〜２２０である。平均重合度が８０未満の場合には、工業的に安定に生産出来る重合度域ではなく、また、塞栓時間が極端に短くなる傾向があり、好ましくない。平均重合度が６００より大きい場合には、血管内における粒子の溶解時間が非常に長くなり、粒子が体内残存することとなるため、一時塞栓剤としての機能が低下する。本発明において一時塞栓剤とは、血管の塞栓時間がおよそ３０分〜３ヶ月である塞栓剤をいう。
【００１９】
本発明のＰＶＡ粒子は、たとえば、特開平５６−１２０７０７に記載された粒状ポリビニルアルコールの製造法に準じて製造することができる。具体的には、アルコールまたはアルコールと酢酸メチル（ａ）からなる溶媒のポリビニルエステル溶液（ｂ）を、ポリビニルエステル、該エステルの鹸化物、および成分（ａ）のいずれとも実質的に相溶せず、かつ成分（ｂ）よりも粘度の高い媒体（ｃ）中に粒状に分散せしめ、鹸化触媒存在下で鹸化して得られる。
【００２０】
ポリビニルエステルとしては、酢酸ビニル、プロピオン酸ビニル、ギ酸ビニル、ステアリン酸ビニル、安息香酸ビニルなどのビニルエステルの単独重合体や共重合体があげられる。また、ビニルエステルと共重合可能なモノマー、たとえば、アクリル酸、メタクリル酸、クロトン酸、マレイン酸、無水マレイン酸、イタコン酸等の不飽和酸類あるいはその塩あるいはモノまたはジアルキルエステル等の不飽和カルボン酸；エチレン、プロピレン等の各種α-オレフィン；ノルボルネン等の脂環式炭化水素；アクリロニトリル、メタアクリロニトリル等のニトリル類；ジアセトンアクリルアミド、アクリルアミド、メタクリルアミド等のアミド類；エチレンスルホン酸、アリルスルホン酸、メタアリルスルホン酸等のオレフィンスルホン酸あるいはその塩；アルキルビニルエーテル類；ジメチルアリルビニルケトン、Ｎ−ビニルピロリドン、（メタ）アクリレート、さらに、Ｎ−アクリルアミドメチルトリメチルアンモニウムクロライド、Ｎ−アクリルアミドエチルトリメチルアンモニウムクロライド、Ｎ−アクリルアミドプロピルトリメチルアンモニウムクロライド、２−アクリロキシエチルトリメチルアンモニウムクロライド、２−メタクリロキシエチルトリメチルアンモニウムクロライド、２−ヒドロキシ−３−メタクリロイルオキシプロピルトリメチルアンモニウムクロライド、アリルトリメチルアンモニウムクロライド、メタアリルトリメチルアンモニウムクロライド、３−ブテントリメチルアンモニウムクロライド、ジメチルジアリルアンモニウムクロリド、ジエチルジアリルアンモニウムクロライド等のカチオン基含有モノマー；アセトアセチル基含有モノマー；アリルスルホン酸、２−アクリルアミド−２−メチルプロペンスルホン酸、３，４−ジアセトキシ-１−ブテン、グリセリンモノアリルエーテル、酢酸イソプロペニル、１−メトキシビニルアセテート、１，４−ジアセトキシ−２−ブテン等との共重合体も本発明におけるポリビニルエステルとしてあげられる。
【００２１】
アルコールまたはアルコールと酢酸メチル（ａ）におけるアルコールとしては、メタノール、エタノール、イソプロピルアルコール、プロピルアルコール等の低級脂肪族アルコールを用いることができる。これらのアルコールは、単独であるいは２種以上を任意の割合で混合して用いることができる。なかでも、鹸化反応時の粒径制御および実用的な鹸化度速度が得られる点から、メタノール、エタノール、イソプロピルアルコールを用いることが好ましい。アルコールと酢酸メチルを併用する場合は、ポリビニルエステルの鹸化反応効率の点から、アルコール／酢酸メチルの割合を重量比で０．５以上とすることが好ましく、１．５以上とすることがより好ましい。また、酢酸メチルより更に極性が低い各種有機溶剤を併用することも可能である。
【００２２】
ポリビニルエステル溶液（ｂ）におけるポリビニルエステルの含有量は、特に限定されるものではないが、通常、溶媒全体の１０〜８０重量％である。ポリビニルエステル溶液（ｂ）は、ポリビニルエステルに対して０．０５〜１０重量部の水を含有していてもよく、少量の水の存在により鹸化物の残存酢酸基の分布をランダムにし、また鹸化度を制御する役割を果たすことができる。
【００２３】
媒体（ｃ）は、用いるポリビニルエステル、その鹸化物およびアルコールまたはアルコールと酢酸メチル（ａ）のいずれとも実質的に相溶せず、かつポリビニルエステル溶液（ｂ）よりも粘度の高いものであって、たとえば、流動パラフィン、灯油の如き脂肪族飽和炭化水素類、芳香族炭化水素類、脂環式炭化水素類があげられる。これらは単独または２種以上を混合して用いることができる。なかでも、ポリビニルエステル溶液を均一に分散できることから、流動パラフィンが好ましい。
【００２４】
媒体（ｃ）の粘度は、ポリビニルエステル溶液（ｂ）の粘度よりも高ければ特に限定されるものではない。
【００２５】
ポリビニルエステル溶液（ｂ）と媒体（ｃ）の使用割合は、重量比で２／８〜６／４とすることが好ましく、４／６〜５／５とすることがより好ましい。ポリビニルエステル溶液（ｂ）の使用割合が２０重量％未満の場合は、生産効率が低下するため好ましくない。ポリビニルエステル溶液（ｂ）の使用割合が６０重量％をこえる場合には、分散性が悪くなり、多数粒子の集合体が形成されやすくパール状ＰＶＡ粒子の平均粒径が大きくなる傾向にある。
【００２６】
鹸化触媒としては、ポリビニルエステルを鹸化してＰＶＡを製造する時に用いられる通常のアルカリ触媒を用いることができる。鹸化触媒の使用量は、ポリビニルエステルの濃度、目的とする鹸化度により適宜決定されるが、通常、ポリビニルエステル中の酢酸ビニル単位（１モル）に対して０．１〜３０ミリモル、好ましくは２〜１７ミリモルの割合が適当である。
【００２７】
鹸化反応の反応温度は、２０℃〜６０℃とすることが好ましい。反応温度が２０℃以下の場合には、反応速度が小さくなり反応効率が低下する。６０℃をこえる場合には、溶媒の沸点以上となり安全上好ましくない。
【００２８】
本発明の高鹸化度のＰＶＡ粒子は、得られるＰＶＡ粒子の特性やＰＶＡ粒子内部に取り込まれる流動パラフィンによる人体への毒性を低減させるという安全性上の目的より、２段階の鹸化反応により製造することが好ましい。１次鹸化では、鹸化度７５〜９０モル％となるまで鹸化反応を行った後、反応スラリーより粒子を遠心分離器装置等の固液分離装置や実験室的にはアドバンテック濾紙Ｎｏ．２または、Ｎｏ．６３による濾過により分離し、必要に応じてメタノール、酢酸メチル、酢酸エチル、酢酸メチル／メタノール混合物などの適当な溶剤あるいは混合溶剤で洗浄を行い、１次鹸化粒子を得る。つづいて、得られた１次鹸化粒子を、メタノール、エタノール等のアルコール系溶媒中に分散させて、鹸化反応の追い込みを行う。所望の鹸化度が達成できたところで、反応を終了させ、１次鹸化における粒子の回収と同様の方法により、本発明のＰＶＡ粒子（２次鹸化粒子）を得る。その後、必要に応じて生理食塩水にて洗浄を行なう。
【００２９】
ＰＶＡ生成時における未架橋のＰＶＡの滅菌法としては、γ線、加圧水蒸気滅菌、ヒビテン液（グルコン酸クロルヘキシジン液）に浸漬する方法や、滅菌生理食塩水による洗浄方法が用いられる。
【００３０】
ＰＶＡの平均粒径は、前記製造方法で得られたパール状ＰＶＡ粒子を、必要に応じて標準金網により物理的に篩い分けを行うことにより任意の粒径のパール状ＰＶＡ粒子の調整を行うことができる。また、平均粒径を所望のレベルまで小さくするためには、特開平５６−１２０７０７号公報に記載された粒状ポリビニルアルコールの製造法に準じて製造する際の鹸化反応時の撹拌速度を速くしたり、流動パラフィン等の媒体（ｃ）の粘度をポリビニルエステル溶液（ｂ）の粘度より高く設定したり、媒体（ｃ）とポリビニルエステル溶液（ｂ）の比率を制御することにより粒径を制御することもできる。
【００３１】
たとえば、粒径を１０５〜１７７μｍの範囲とする場合には、１４５メッシュ（１０５μｍ）オン、８０メッシュ（１７７μｍ）パスにより篩い分けされた粒径のものを用いる。また、１７７〜２９７μｍに設定する場合、８０メッシュ（１７７μｍ）オン、４８メッシュ（２９７μｍ）パスにより篩い分けされた粒径のもの、２９７〜５００μｍに設定する場合４８メッシュ（２９７μｍ）オン、３２メッシュ（５００μｍ）パスにより篩い分けされた粒径のものを用いれば良い。
【００３２】
また、上述の鹸化反応条件によって所望の平均粒径のパール状ＰＶＡ粒子を得る具体的な方法としては、たとえば、平均粒径１５０μｍ程度のパール状ＰＶＡ粒子を得るには、平均重合度５００のポリビニルエステルの場合、メタノール溶液（ｂ）の濃度を４０％とし、平均重合度１５０〜２００のポリビニルエステルの場合はメタノール溶液（ｂ）の濃度を５０％として、該溶液（ｂ）と流動パラフィン等の媒体（ｃ）の割合を重量比で５０／５０として鹸化反応を行なえば良く、また、平均粒径を５００μｍ程度とするには、ポリビニルエステル（ｂ）溶液の粘度を媒体（ｃ）より高く設定（例えば、重合５００のポリ酢酸ビニルエステル溶液の樹脂分を５０％）とすれば良い。
【００３３】
なお、各パール状ＰＶＡ粒子の平均粒径は、各ＰＶＡ粒子をイソプロピルアルコール（ＩＰＡ）中に分散させ、レーゼンテックＭ１００（インライン式粒体モニタリングシステム、レーゼンテック製）で平均コード長（μｍ）を測定することで求めることが出来る。具体的には、０．８〜１０００μｍの範囲を３８チャンネルのコード長に分割、各チャンネルの粒子数をカウントし、下式によって求めた。
平均コード長＝Σ（Ｙｉ×Ｍｉ2）／ΣＹｉ
Ｙｉ：レーゼンテックＭ１００によりモニタリングしたときの粒子のカウント数
Ｍｉ：各チャンネルのコード長
【００３４】
本発明は、前記得られたＰＶＡ粒子を、造影剤に分散した血管一時塞栓剤（ｉ）に関する。
【００３５】
造影剤としては、イオン性造影剤、非イオン性造影剤のいずれも使用することができる。具体的には、イオパミロン（シエーリングＡＧ製）、オイパロミン（富士製薬工業（株）製）、ヘキサブリックス（テルモ（株）製）、オムニパーク（第一製薬（株）製）、ウログラフィン（シエーリングＡＧ製）、イオメロン（エーザイ（株）製）などがあげられる。
【００３６】
ＰＶＡ粒子は、カテーテル通過性を確保する必要があるという観点から、造影剤に対して、２０重量％以下の割合で用いることが好ましい。この場合、ＰＶＡ粒子を造影剤に分散させてから、５〜１５分間放置したのちに、血管一時塞栓剤として用いることが好ましい。塞栓後の再開通までの時間は、ＰＶＡの重合度、鹸化度、造影剤中での放置時間によって制御される。ＰＶＡの重合度や鹸化度を高くすることにより、塞栓時間を長くすることが可能となる。また、造影剤中における事前の放置時間が長くなると、塞栓時間は短くなる。塞栓時間の制御には事前の造影剤中における放置時間の影響がもっとも大きく、放置時間が５分未満の場合は、造影剤によるＰＶＡ粒子の膨潤が不充分となり、血管内塞栓後のＰＶＡ粒子の再溶解が開始するまでの時間が長くなる傾向があり、１５分をこえると逆に造影剤によりＰＶＡ粒子が膨潤し過ぎる為か、ＰＶＡ粒子が継子状態になりやすく、カテーテル通過性が低下し、塞栓治療の作業性が著しく低下する傾向がある。
【００３７】
また、本発明は、前記ＰＶＡ粒子を、造影剤に溶解した血管一時塞栓剤（ii）に関する。具体的には、造影剤１００重量部に対して、ＰＶＡ粒子を２０重量％以内で添加し、５０℃〜７０℃程度で加温し、３０分〜１時間程度で溶解することで得られたペースト状の血管一時塞栓剤である。
【００３８】
さらに、本発明は、前記ペースト状血管一時塞栓剤に前記ＰＶＡ粒子を分散した血管一時塞栓剤（iii）に関する。該塞栓剤（iii）は、ペースト状血管一時塞栓剤中に溶解したＰＶＡ（Ａ）と分散状態であるＰＶＡ粒子（Ｂ）の混合重量比を変えることにより、塞栓時間を制御できる。混合において、溶解したＰＶＡ（Ａ）の割合が小さすぎる場合は、血管内塞栓の際、血管径によっては、血管内塞栓時間が長くなりすぎる場合があり、大きすぎる場合は、塞栓時間が極めて短く（たとえば、１５分程度）なりやすく、目的とする塞栓治療を施すことができない場合がある。
【００３９】
血管一時塞栓剤（ｉ）〜（iii）は、目的とする塞栓時間に合わせて選択し用いることができる。鹸化度により多少変動するものの、各塞栓剤は、それぞれ以下のように制御された塞栓時間を有する。
血管一時塞栓剤（ｉ） ：約３ヶ月
血管一時塞栓剤（ii） ：約２時間
血管一時塞栓剤（iii）（Ａ）／（Ｂ）＝９／１（重量比）：約５時間
（Ａ）／（Ｂ）＝５／５（重量比）：約２４時間
（Ａ）／（Ｂ）＝３／７（重量比）：約１ヶ月
【００４０】
本発明の血管一時塞栓剤には、薬効成分を混合してもよい。薬効成分は、造影剤とＰＶＡ粒子の混合時や薬効成分を溶解させた溶媒中でパール状ＰＶＡ粒子に吸蔵して担持させる方法等により血管一時塞栓剤に配合することができる。薬効成分としては、スマンクス、シクロホスファミドなどの抗悪性腫瘍剤、ステロイド系ホルモン剤、肝臓疾患薬、糖尿病薬、抗酸化剤、ペプチド系薬物、悪性腫瘍に対する分子標的治療薬、抗生物質等の化学療法剤などがあげられる。また、細胞増殖因子である塩基性繊維芽細胞増殖因子（ｂＦＧＦ）、血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ）、トランスフォーミング増殖因子β１（ＴＧＦ−β１）、血管内皮細胞増殖因子（ＶＦＧＦ）などがあげられる。
【００４１】
本発明の一時塞栓剤を血液中に塞栓する場合に用いるカテーテルは、特に限定されるものではなく、ＣＯＲＤＩＳ（コーディス）社製のカテーテル、ＭＡＳＳ ＴＲＡＮＳＩＴやテルモ社製のカテーテル、プログレートなど適宜選択することができる。
【実施例】
【００４２】
以下、本発明の本発明のＰＶＡ粒子および該粒子の製造方法、血液一時塞栓剤を実施例に基づいてさらに詳細に説明するが、本発明はかかる実施例のみに制限されるものではない。なお、特に断らない限り、以下「部」は「重量部」をいう。
【００４３】
実施例１（ＰＶＡ粒子１：平均粒径１５０μｍ、鹸化度９８．２モル％、パール鹸化品 平均重合度１５０の製造）
平均重合度１５５のポリ酢酸ビニルエステルの５５％メタノール溶液（含水量０．０５％）にメタノールを加えて樹脂分５０％に希釈した。この溶液１００部を攪拌機つき反応缶に仕込み、温度を２５℃に保って攪拌しながら、鹸化反応触媒としてＮａＯＨのＮａ含量換算で２％メタノール溶液をポリ酢酸ビニルの酢酸ビニル単位に対して３ｍｍｏｌの割合で添加した。続いて流動パラフィン１００部を加えて、攪拌速度を２５０回転に調節したところ、ポリ酢酸ビニルエステルは球形状で流動パラフィン中に分散した。温度を２５℃に保って反応させ、６０分経過後に反応を停止し、遠心分離装置により固液分離を行うことによりＰＶＡ粒子を分離した。この粒子を温度５０℃の酢酸エチル溶液を用いて抽出法により洗浄し、次いで温度８０℃で２時間熱風乾燥した。得られたＰＶＡ粒子（１次鹸化粒子）１００部を、再度メタノール溶液６００部に分散して、鹸化触媒（Ｎａ重量換算で２％ＮａＯＨメタノール溶液）を２０部添加して、温度５０℃で、１時間かけて２次鹸化を行ない、再度遠心分離装置によりＰＶＡ粒子を分離し、温度５０℃の酢酸エチル溶液を用いて抽出法により洗浄し、次いで温度８０℃で２時間熱風乾燥して平均重合度が１５０であるＰＶＡ粒子１を得た。
【００４４】
（鹸化度）
ＰＶＡ粒子の鹸化度は、ＪＩＳ Ｋ-６７２６に準じて測定し９８．２モル％と求められた。
【００４５】
（平均粒径）
ＰＶＡ粒子の平均粒径は、レーゼンテックＭ１００を用いて、高鹸化ＰＶＡにとって貧溶媒であるイソプロピルアルコール１００部中にＰＶＡ粒子１０部を添加して、撹拌下にて粒径をコード長として測定を行った。ＰＶＡ粒子の平均粒径は、１５０μｍであった。
【００４６】
実施例２（ＰＶＡ粒子２：平均粒径１５２μｍ、鹸化度９７．５モル％、パール鹸化 平均重合度２００の製造）
平均重合度２０５のポリ酢酸ビニルエステルの５５％メタノール溶液を用いたことと、２次鹸化における反応時間を４０分間とした以外は、実施例１と同様にしてＰＶＡ粒子を得た。得られたＰＶＡ粒子２は、平均粒径１５２μｍ、鹸化度９７．５モル％、平均重合度２００であった。
【００４７】
実施例３（ＰＶＡ粒子３：粒径１５４μｍ、鹸化度９５モル％、パール鹸化品 平均重合度１５０の製造）
２次鹸化における反応時間を３５分間とした以外は、実施例１と同様にしてＰＶＡ粒子を得た。得られたＰＶＡ粒子３は、粒径１５４μｍ、鹸化度９５モル％、平均重合度１５０であった。
【００４８】
実施例４（ＰＶＡ粒子４：平均粒径１５６μｍ、鹸化度９９．２モル％、パール鹸化品 平均重合度３００の製造）
平均重合度３００のポリ酢酸ビニルエステルを用いた以外は、実施例１と同様にしてＰＶＡ粒子を得た。得られたＰＶＡ粒子４は、粒径１５６μｍ、鹸化度９９．２モル％、平均重合度３００であった。
【００４９】
実施例５（ＰＶＡ粒子５：平均粒径１５２μｍ、鹸化度９７．０モル％、パール鹸化品 平均重合度３００の製造）
平均重合度３００のポリ酢酸ビニルエステルを用い、２次鹸化の時間を３０分間とした以外は実施例１と同様にしてＰＶＡ粒子を得た。得られたＰＶＡ粒子５は、粒径１５２μｍ、鹸化度９７．０モル％、平均重合度３００であった。
【００５０】
実施例６（血管一時塞栓剤１）
造影剤（オイパロミン３００、富士製薬工業（株）製）１００部に対して、実施例１で得られたＰＶＡ粒子２０部を分散させて、５〜１５分間放置後して、血管塞栓剤１とした。
【００５１】
実施例７（血管一時塞栓剤２）
造影剤（オイパロミン３００）１００部に対して、実施例２で得られたＰＶＡ粒子２０部を温度６０℃で４５分間かけて溶解させて、ペースト状の血管塞栓剤２とした。
【００５２】
実施例８（血管一時塞栓剤３）
実施例１で得られたＰＶＡ粒子２０部を、造影剤（オイパロミン３００）１００部に６０℃で６０分間かけて溶解させて、ペースト状塞栓剤とした。その後、該ペースト状塞栓剤９０部に、実施例３で得られたＰＶＡ粒子２０部を造影剤（オイパロミン３００）１００部に分散させた造影剤分散液を１０部混合し、溶解状態であるＰＶＡ（Ａ）と分散状態であるＰＶＡ粒子（Ｂ）の重量比（Ａ）／（Ｂ）が９／１になるようにして、血管一時塞栓剤３を得た。
【００５３】
実施例９（血管一時塞栓剤４）
実施例８において、ペースト状塞栓剤を５０部、ＰＶＡ粒子３の造影剤分散液を５０部に変えて、（Ａ）／（Ｂ）の重量比を５／５とした以外は、実施例８と同様の方法で、血管一時塞栓剤４を得た。
【００５４】
実施例１０（血管一時塞栓剤５）
実施例８において、ペースト状塞栓剤を３０部、ＰＶＡ粒子３の造影剤分散液を７０部に変えて、（Ａ）／（Ｂ）の重量比を３／７とした以外は、実施例８と同様の方法で、血管一時塞栓剤５を得た。
【００５５】
実施例１１（血管一時塞栓剤６）
造影剤（オイパロミン３００）１００部に対して、実施例４で得られたＰＶＡ粒子２０部を分散させて、１５分間放置後、血管一時塞栓剤６として使用した。
【００５６】
実施例１２（血管一時塞栓剤７）
造影剤（オイパロミン３００）１００部に対して、実施例５で得られたＰＶＡ粒子２０部を分散させて、１５分間放置後、血管一時塞栓剤７として使用した。
【００５７】
得られた血管一時塞栓剤１〜７を以下の評価方法により評価した。
【００５８】
（カテーテル通過試験）
１ｇの血管一時塞栓剤１〜５を、造影剤（オイパロミン３００）５ｍｌに分散して球形粒子分散液とした。この球形粒子分散液および血管一時塞栓剤６、７のそれぞれを２．５ｃｃ注射シリンジから肝動脈塞栓用２．７Ｆｒマイクロカテーテル（プログレートＭＣ−ＰＣ２７１０、テルモ社製）に注入し、吸入抵抗、スタッキング現象の有無の確認を行った。さらに、少量の生理食塩水を注入した後、カテーテルを長手方向に切開し、カテーテル内を目視観察して、残存する球形粒子の有無を観察した。
【００５９】
血管一時塞栓剤１〜７（球形粒子分散液）の流量に変化はなく、カテーテルの通過性は良好であった。また、カテーテル内を目視観察したところ、残存する球形粒子は全く観察されなかった。
【００６０】
（動物実験での腎動脈塞栓開通時間評価）
実施例６〜１１で得られた血管一時塞栓剤１〜６を、マイクロカテーテル（テルモ社製カテーテル、プログレートＭＣ−ＰＣ２７１０）を用いて、麻酔した豚の腎動脈に注入した。塞栓時間がおよそ２５時間以内と予想されるケースにおいては逐次、腎臓のＸ線撮影による血管閉塞状況の観察を行い、Ｘ線写真上で閉塞した動脈の再開通が認められ始めた時点で豚の腎臓を摘出し、血管閉塞部位の組織切片を作製して血管塞栓の状況や周囲組織への影響を観察した。１ケ月〜数ケ月単位のものついては、一定期間毎のＸ線撮影による外観観察を経て、再開通時間の確認を行った。
【００６１】
再開通を開始した時間は次のようになった。
血管一時塞栓剤１ 約３ヶ月
血管一時塞栓剤２ 約２時間
血管一時塞栓剤３ 約５時間
血管一時塞栓剤４ 約２４時間
血管一時塞栓剤５ 約１ヶ月
血管一時塞栓剤６ 約３週間
【００６２】
なお、再開通後の所見では、末梢血管への再分布による塞栓を起こすことなく、塞栓部位の再開通を確認した。
【００６３】
塞栓部位の血管では、血管径の縮小化や血管網の退縮が確認され、これを腫瘍栄養血管の塞栓の目的に用いた場合には癌治療での有効性が期待される結果となった。
【００６４】
（動物実験での肺動脈塞栓開通時間評価）
全身麻酔下のブタ肺動脈区域枝にバルーン付カテーテルを挿入し、実施例１２で得られた血管一時塞栓剤７を透視画像で確認しながら手圧で注入したところ、５ｍｌを注入した時点で該当区域枝の血流が停止した。その後、塞栓から１５分で血流の再開が確認され、３０分後には血管造影写真上の血流はほぼ回復した。
【００６５】
（人新鮮凍結血漿中での溶解特性）
溶解試験測定装置レーゼンテックＭ１００にてＰＶＡ粒子または血管一時塞栓剤の造影剤、およびＢ型人新鮮凍結血漿（ＦＦＰ）中での平均粒径変化を測定した。測定手順は以下のとおりである。
１．４００ｍｌのジャケット付きセパラブルフラスコ（以下フラスコ）のジャケット部へ予め３７℃の恒温水を通水しておく。
２．１５０ｍｌのＦＦＰを予め３７℃の恒温水にて解凍しておく。
３．フラスコ内へＰＶＡ粒子または血管一時塞栓剤１ｇ／５ｍｌ造影剤（イオメロン３００、エーザイ（株）製）を１０部投入し、引き続きフラスコ内へ３００部のＦＦＰを投入し、攪拌翼（パドル）にて１５０ｒｐｍで攪拌しながらレーゼンテックでの測定を開始する。
【００６６】
撹拌および測定は、３７℃でおこない、粒子がレーゼンテックにてカウントされなくなった時間をもって溶解とした。結果を以下に示す。
ＰＶＡ粒子１ ３時間で溶解
ＰＶＡ粒子２ ５分で溶解
血管一時塞栓剤１ ２５分で溶解
血管一時塞栓剤２ ４５分で溶解
血管一時塞栓剤３ １時間で溶解
【産業上の利用可能性】
【００６７】
本発明は、生体内において血管を塞ぎ、血流の一時塞栓に使用する一時血管塞栓材料に関する。詳しくは、特定のＰＶＡ粒子により血管内部を塞ぎ、血流の閉塞に使用する塞栓形成材料であって、最終的に生体内に吸収され、体外に排出可能な、生体内に残存しない血管塞栓材料に関する。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、生体内において血管を一時的に塞ぎ、血流の一時的な閉塞に使用する血管塞栓材料に関する。
【背景技術】
【０００２】
外科手術に伴う切開に先だって、出血を最小限に留める目的や出血防止目的以外に、切断不能な腫瘍や子宮筋腫に対して、血管閉塞により栄養を遮断する動脈塞栓術が知られている。また、抗悪性腫瘍剤と血管塞栓材料とを組み合わせて投与することにより、腫瘍内の血流を遮断し、かつ抗悪性腫瘍剤濃度を高く維持して抗腫瘍効果の向上を期待する化学塞栓療法が知られている。血管内に注入されるこれらの塞栓材料としては、ＥＶＯＨ（約１０％濃度ＤＭＳＯ溶液）、シアノアクリレート、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）のホルマール化粒子が知られている。
【０００３】
これらの塞栓材料は、たとえば、ＥＶＯＨ（約１０％濃度ＤＭＳＯ溶液）は、溶媒であるＤＭＳＯが毒性を有する等の点で生体への悪影響があり、シアノアクリレートでは、ヨウ化脂肪酸エステル鹸化物との混合比を調整することにより血液中での塞栓時間を制御できるが、混合比のバランスが難しく、また、カテーテルを通じて血管内に投与後、カテーテルを引き抜くタイミングを誤ると、カテーテル先端が血管内に接着してしまい、最悪、カテーテルの先端を血管内に残存させたままになる危険性がある。また、ＰＶＡのホルマール化粒子は、永久塞栓材料であり、一時的な塞栓用途には使用できないという問題があった。
【０００４】
これらの問題を解決するために、種々の検討がなされている。たとえば、特許文献１では、一時塞栓用にゼラチンスポンジが使用されているが、ゼラチンスポンジには生物由来の成分が含まれるため、エイズウイルス等の感染症を媒介する危険性がある。また、一時塞栓材として使用する場合、ゼラチンスポンジをカテーテルに通過させる為には、使用前に１ｍｍ厚程度に非常に細かく裁断する必要があり、医師の非常に高い熟練度が要求され、治療効果に個人差がでるという問題がある。また、一般に、架橋デンプンも一時塞栓材として使用されているが、血液中のアミラーゼによって、分単位で分解するため、１週間〜３ケ月といった比較的長い一定期間有効である塞栓材料ではなかった。
【０００５】
特許文献２には、３０％以上の水膨潤率を有し、リン酸緩衝生理食塩水において分解性がある略粒状の粒子からなる血管塞栓材料が開示されている。しかしながら、該血管塞栓材料は、水溶性ポリマーを生分解性成分によるブロックコポリマー化、架橋、変性などの方法によって水不溶化したもので、その分解は生分解によるものであるため、血管内の塞栓時間の制御が未だ不充分であった。
【０００６】
【特許文献１】国際公開第９８／０３２０３号公報
【特許文献２】特開２００４−１６７２２９号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
生体内において血管を一時的に塞ぎ、カテーテル通過性および塞栓時間の制御性に優れた血管塞栓材料を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
すなわち、本発明は、鹸化度が９０モル％以上で、平均粒径が７０μｍ〜１０００μｍであるパール状の血管一時塞栓剤用ポリビニルアルコール粒子に関する。
【０００９】
ポリビニルアルコールの平均重合度が、８０〜６００であることが好ましく、８０〜３５０であることがより好ましい。
【００１０】
本発明におけるポリビニルアルコール粒子は、アルコールまたはアルコールと酢酸メチル（ａ）を溶媒とするポリビニルエステル溶液（ｂ）を、ポリビニルエステル、該エステルの鹸化物、および成分（ａ）のいずれとも実質的に相溶せず、かつ成分（ｂ）よりも粘度の高い媒体（ｃ）中に粒状に分散せしめ、鹸化触媒存在下で鹸化して得られることが好ましい。
【００１１】
前記ポリビニルエステル溶液（ｂ）／媒体（ｃ）の重量比が、２／８〜６／４であることが好ましく、４／６〜５／５であることがより好ましい。
【００１２】
また、本発明は、前記ポリビニルアルコール粒子を造影剤に分散した血管一時塞栓剤、および前記ポリビニルアルコール粒子を造影剤に溶解した血管一時塞栓剤に関する。
【００１３】
さらに、本発明は、前記ポリビニルアルコール粒子を造影剤に溶解した血管一時塞栓剤に、さらに、前記ポリビニルアルコール粒子を分散した血管一時塞栓剤に関する。
【発明の効果】
【００１４】
本発明によれば、スタックを起こす事が無く、カテーテル通過性が良好であり、塞栓時間の制御が可能な血管一時塞栓剤用粒子および塞栓剤を提供することができる。該塞栓剤は、生体内で吸収後、体外に自然に排斥される。また、血液由来の一時塞栓剤ではないので、エイズや狂牛病等の血液を媒介とした感染症伝播の危険性が無い。さらに、目的外の血管内において凝集詰まりを起こす危険性が少ない。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１５】
本発明の粒子は、血管一時塞栓剤用の粒子であって、鹸化度が９０モル％以上、平均粒径が７０μｍ〜１０００μｍのパール状のポリビニルアルコール（ＰＶＡ）粒子である。ここで、パール状とは、顆粒状や異形の粉状物ではなく、一定の球形度を有する粒子を表すものである。
【００１６】
本発明のＰＶＡ粒子の鹸化度は、９０モル％以上であることが好ましい。より好ましくは、９４〜９９モル％、さらに好ましくは、９５〜９８．９モル％である。鹸化度が９０モル％未満の場合は、造影剤に膨潤し易いため、カテーテル通過性が悪くスタックを引き起こしたり、カテーテルを通して本発明の塞栓剤を注入する際の圧力が非常に高くなり、作業性が著しく低下することがあり、好ましくない。
【００１７】
ＰＶＡ粒子の平均粒径は、７０〜１０００μｍであることが好ましい。より好ましくは１００〜３００ｍμであり、さらに好ましくは１００〜２２０μｍである。また、かかるＰＶＡ粒子は１２００μｍ以上のものの含有量が３重量％以下であるものが好ましい。ＰＶＡ粒子の平均粒径が７０μｍ未満の場合は、目的とする血管以外の部位を塞栓する傾向があり、好ましくない。また、平均粒径が１０００μｍより大きい場合は、使用するカテーテルの種類によっては粒子のカテーテル通過性が著しく低下したり、通過不能となる傾向がある。なお、本明細書において特に断らない限り、平均粒径はイソプロピルアルコール中にＰＶＡを所定量分散させた状態における値である。
【００１８】
ＰＶＡ粒子の平均重合度は、８０〜６００であることが好ましく、より好ましくは８０〜３５０、さらに好ましくは、１００〜２２０である。平均重合度が８０未満の場合には、工業的に安定に生産出来る重合度域ではなく、また、塞栓時間が極端に短くなる傾向があり、好ましくない。平均重合度が６００より大きい場合には、血管内における粒子の溶解時間が非常に長くなり、粒子が体内残存することとなるため、一時塞栓剤としての機能が低下する。本発明において一時塞栓剤とは、血管の塞栓時間がおよそ３０分〜３ヶ月である塞栓剤をいう。
【００１９】
本発明のＰＶＡ粒子は、たとえば、特開平５６−１２０７０７に記載された粒状ポリビニルアルコールの製造法に準じて製造することができる。具体的には、アルコールまたはアルコールと酢酸メチル（ａ）からなる溶媒のポリビニルエステル溶液（ｂ）を、ポリビニルエステル、該エステルの鹸化物、および成分（ａ）のいずれとも実質的に相溶せず、かつ成分（ｂ）よりも粘度の高い媒体（ｃ）中に粒状に分散せしめ、鹸化触媒存在下で鹸化して得られる。
【００２０】
ポリビニルエステルとしては、酢酸ビニル、プロピオン酸ビニル、ギ酸ビニル、ステアリン酸ビニル、安息香酸ビニルなどのビニルエステルの単独重合体や共重合体があげられる。また、ビニルエステルと共重合可能なモノマー、たとえば、アクリル酸、メタクリル酸、クロトン酸、マレイン酸、無水マレイン酸、イタコン酸等の不飽和酸類あるいはその塩あるいはモノまたはジアルキルエステル等の不飽和カルボン酸；エチレン、プロピレン等の各種α-オレフィン；ノルボルネン等の脂環式炭化水素；アクリロニトリル、メタアクリロニトリル等のニトリル類；ジアセトンアクリルアミド、アクリルアミド、メタクリルアミド等のアミド類；エチレンスルホン酸、アリルスルホン酸、メタアリルスルホン酸等のオレフィンスルホン酸あるいはその塩；アルキルビニルエーテル類；ジメチルアリルビニルケトン、Ｎ−ビニルピロリドン、（メタ）アクリレート、さらに、Ｎ−アクリルアミドメチルトリメチルアンモニウムクロライド、Ｎ−アクリルアミドエチルトリメチルアンモニウムクロライド、Ｎ−アクリルアミドプロピルトリメチルアンモニウムクロライド、２−アクリロキシエチルトリメチルアンモニウムクロライド、２−メタクリロキシエチルトリメチルアンモニウムクロライド、２−ヒドロキシ−３−メタクリロイルオキシプロピルトリメチルアンモニウムクロライド、アリルトリメチルアンモニウムクロライド、メタアリルトリメチルアンモニウムクロライド、３−ブテントリメチルアンモニウムクロライド、ジメチルジアリルアンモニウムクロリド、ジエチルジアリルアンモニウムクロライド等のカチオン基含有モノマー；アセトアセチル基含有モノマー；アリルスルホン酸、２−アクリルアミド−２−メチルプロペンスルホン酸、３，４−ジアセトキシ-１−ブテン、グリセリンモノアリルエーテル、酢酸イソプロペニル、１−メトキシビニルアセテート、１，４−ジアセトキシ−２−ブテン等との共重合体も本発明におけるポリビニルエステルとしてあげられる。
【００２１】
アルコールまたはアルコールと酢酸メチル（ａ）におけるアルコールとしては、メタノール、エタノール、イソプロピルアルコール、プロピルアルコール等の低級脂肪族アルコールを用いることができる。これらのアルコールは、単独であるいは２種以上を任意の割合で混合して用いることができる。なかでも、鹸化反応時の粒径制御および実用的な鹸化度速度が得られる点から、メタノール、エタノール、イソプロピルアルコールを用いることが好ましい。アルコールと酢酸メチルを併用する場合は、ポリビニルエステルの鹸化反応効率の点から、アルコール／酢酸メチルの割合を重量比で０．５以上とすることが好ましく、１．５以上とすることがより好ましい。また、酢酸メチルより更に極性が低い各種有機溶剤を併用することも可能である。
【００２２】
ポリビニルエステル溶液（ｂ）におけるポリビニルエステルの含有量は、特に限定されるものではないが、通常、溶媒全体の１０〜８０重量％である。ポリビニルエステル溶液（ｂ）は、ポリビニルエステルに対して０．０５〜１０重量部の水を含有していてもよく、少量の水の存在により鹸化物の残存酢酸基の分布をランダムにし、また鹸化度を制御する役割を果たすことができる。
【００２３】
媒体（ｃ）は、用いるポリビニルエステル、その鹸化物およびアルコールまたはアルコールと酢酸メチル（ａ）のいずれとも実質的に相溶せず、かつポリビニルエステル溶液（ｂ）よりも粘度の高いものであって、たとえば、流動パラフィン、灯油の如き脂肪族飽和炭化水素類、芳香族炭化水素類、脂環式炭化水素類があげられる。これらは単独または２種以上を混合して用いることができる。なかでも、ポリビニルエステル溶液を均一に分散できることから、流動パラフィンが好ましい。
【００２４】
媒体（ｃ）の粘度は、ポリビニルエステル溶液（ｂ）の粘度よりも高ければ特に限定されるものではない。
【００２５】
ポリビニルエステル溶液（ｂ）と媒体（ｃ）の使用割合は、重量比で２／８〜６／４とすることが好ましく、４／６〜５／５とすることがより好ましい。ポリビニルエステル溶液（ｂ）の使用割合が２０重量％未満の場合は、生産効率が低下するため好ましくない。ポリビニルエステル溶液（ｂ）の使用割合が６０重量％をこえる場合には、分散性が悪くなり、多数粒子の集合体が形成されやすくパール状ＰＶＡ粒子の平均粒径が大きくなる傾向にある。
【００２６】
鹸化触媒としては、ポリビニルエステルを鹸化してＰＶＡを製造する時に用いられる通常のアルカリ触媒を用いることができる。鹸化触媒の使用量は、ポリビニルエステルの濃度、目的とする鹸化度により適宜決定されるが、通常、ポリビニルエステル中の酢酸ビニル単位（１モル）に対して０．１〜３０ミリモル、好ましくは２〜１７ミリモルの割合が適当である。
【００２７】
鹸化反応の反応温度は、２０℃〜６０℃とすることが好ましい。反応温度が２０℃以下の場合には、反応速度が小さくなり反応効率が低下する。６０℃をこえる場合には、溶媒の沸点以上となり安全上好ましくない。
【００２８】
本発明の高鹸化度のＰＶＡ粒子は、得られるＰＶＡ粒子の特性やＰＶＡ粒子内部に取り込まれる流動パラフィンによる人体への毒性を低減させるという安全性上の目的より、２段階の鹸化反応により製造することが好ましい。１次鹸化では、鹸化度７５〜９０モル％となるまで鹸化反応を行った後、反応スラリーより粒子を遠心分離器装置等の固液分離装置や実験室的にはアドバンテック濾紙Ｎｏ．２または、Ｎｏ．６３による濾過により分離し、必要に応じてメタノール、酢酸メチル、酢酸エチル、酢酸メチル／メタノール混合物などの適当な溶剤あるいは混合溶剤で洗浄を行い、１次鹸化粒子を得る。つづいて、得られた１次鹸化粒子を、メタノール、エタノール等のアルコール系溶媒中に分散させて、鹸化反応の追い込みを行う。所望の鹸化度が達成できたところで、反応を終了させ、１次鹸化における粒子の回収と同様の方法により、本発明のＰＶＡ粒子（２次鹸化粒子）を得る。その後、必要に応じて生理食塩水にて洗浄を行なう。
【００２９】
ＰＶＡ生成時における未架橋のＰＶＡの滅菌法としては、γ線、加圧水蒸気滅菌、ヒビテン液（グルコン酸クロルヘキシジン液）に浸漬する方法や、滅菌生理食塩水による洗浄方法が用いられる。
【００３０】
ＰＶＡの平均粒径は、前記製造方法で得られたパール状ＰＶＡ粒子を、必要に応じて標準金網により物理的に篩い分けを行うことにより任意の粒径のパール状ＰＶＡ粒子の調整を行うことができる。また、平均粒径を所望のレベルまで小さくするためには、特開平５６−１２０７０７号公報に記載された粒状ポリビニルアルコールの製造法に準じて製造する際の鹸化反応時の撹拌速度を速くしたり、流動パラフィン等の媒体（ｃ）の粘度をポリビニルエステル溶液（ｂ）の粘度より高く設定したり、媒体（ｃ）とポリビニルエステル溶液（ｂ）の比率を制御することにより粒径を制御することもできる。
【００３１】
たとえば、粒径を１０５〜１７７μｍの範囲とする場合には、１４５メッシュ（１０５μｍ）オン、８０メッシュ（１７７μｍ）パスにより篩い分けされた粒径のものを用いる。また、１７７〜２９７μｍに設定する場合、８０メッシュ（１７７μｍ）オン、４８メッシュ（２９７μｍ）パスにより篩い分けされた粒径のもの、２９７〜５００μｍに設定する場合４８メッシュ（２９７μｍ）オン、３２メッシュ（５００μｍ）パスにより篩い分けされた粒径のものを用いれば良い。
【００３２】
また、上述の鹸化反応条件によって所望の平均粒径のパール状ＰＶＡ粒子を得る具体的な方法としては、たとえば、平均粒径１５０μｍ程度のパール状ＰＶＡ粒子を得るには、平均重合度５００のポリビニルエステルの場合、メタノール溶液（ｂ）の濃度を４０％とし、平均重合度１５０〜２００のポリビニルエステルの場合はメタノール溶液（ｂ）の濃度を５０％として、該溶液（ｂ）と流動パラフィン等の媒体（ｃ）の割合を重量比で５０／５０として鹸化反応を行なえば良く、また、平均粒径を５００μｍ程度とするには、ポリビニルエステル（ｂ）溶液の粘度を媒体（ｃ）より高く設定（例えば、重合５００のポリ酢酸ビニルエステル溶液の樹脂分を５０％）とすれば良い。
【００３３】
なお、各パール状ＰＶＡ粒子の平均粒径は、各ＰＶＡ粒子をイソプロピルアルコール（ＩＰＡ）中に分散させ、レーゼンテックＭ１００（インライン式粒体モニタリングシステム、レーゼンテック製）で平均コード長（μｍ）を測定することで求めることが出来る。具体的には、０．８〜１０００μｍの範囲を３８チャンネルのコード長に分割、各チャンネルの粒子数をカウントし、下式によって求めた。
平均コード長＝Σ（Ｙｉ×Ｍｉ2）／ΣＹｉ
Ｙｉ：レーゼンテックＭ１００によりモニタリングしたときの粒子のカウント数
Ｍｉ：各チャンネルのコード長
【００３４】
本発明は、前記得られたＰＶＡ粒子を、造影剤に分散した血管一時塞栓剤（ｉ）に関する。
【００３５】
造影剤としては、イオン性造影剤、非イオン性造影剤のいずれも使用することができる。具体的には、イオパミロン（シエーリングＡＧ製）、オイパロミン（富士製薬工業（株）製）、ヘキサブリックス（テルモ（株）製）、オムニパーク（第一製薬（株）製）、ウログラフィン（シエーリングＡＧ製）、イオメロン（エーザイ（株）製）などがあげられる。
【００３６】
ＰＶＡ粒子は、カテーテル通過性を確保する必要があるという観点から、造影剤に対して、２０重量％以下の割合で用いることが好ましい。この場合、ＰＶＡ粒子を造影剤に分散させてから、５〜１５分間放置したのちに、血管一時塞栓剤として用いることが好ましい。塞栓後の再開通までの時間は、ＰＶＡの重合度、鹸化度、造影剤中での放置時間によって制御される。ＰＶＡの重合度や鹸化度を高くすることにより、塞栓時間を長くすることが可能となる。また、造影剤中における事前の放置時間が長くなると、塞栓時間は短くなる。塞栓時間の制御には事前の造影剤中における放置時間の影響がもっとも大きく、放置時間が５分未満の場合は、造影剤によるＰＶＡ粒子の膨潤が不充分となり、血管内塞栓後のＰＶＡ粒子の再溶解が開始するまでの時間が長くなる傾向があり、１５分をこえると逆に造影剤によりＰＶＡ粒子が膨潤し過ぎる為か、ＰＶＡ粒子が継子状態になりやすく、カテーテル通過性が低下し、塞栓治療の作業性が著しく低下する傾向がある。
【００３７】
また、本発明は、前記ＰＶＡ粒子を、造影剤に溶解した血管一時塞栓剤（ii）に関する。具体的には、造影剤１００重量部に対して、ＰＶＡ粒子を２０重量％以内で添加し、５０℃〜７０℃程度で加温し、３０分〜１時間程度で溶解することで得られたペースト状の血管一時塞栓剤である。
【００３８】
さらに、本発明は、前記ペースト状血管一時塞栓剤に前記ＰＶＡ粒子を分散した血管一時塞栓剤（iii）に関する。該塞栓剤（iii）は、ペースト状血管一時塞栓剤中に溶解したＰＶＡ（Ａ）と分散状態であるＰＶＡ粒子（Ｂ）の混合重量比を変えることにより、塞栓時間を制御できる。混合において、溶解したＰＶＡ（Ａ）の割合が小さすぎる場合は、血管内塞栓の際、血管径によっては、血管内塞栓時間が長くなりすぎる場合があり、大きすぎる場合は、塞栓時間が極めて短く（たとえば、１５分程度）なりやすく、目的とする塞栓治療を施すことができない場合がある。
【００３９】
血管一時塞栓剤（ｉ）〜（iii）は、目的とする塞栓時間に合わせて選択し用いることができる。鹸化度により多少変動するものの、各塞栓剤は、それぞれ以下のように制御された塞栓時間を有する。
血管一時塞栓剤（ｉ） ：約３ヶ月
血管一時塞栓剤（ii） ：約２時間
血管一時塞栓剤（iii）（Ａ）／（Ｂ）＝９／１（重量比）：約５時間
（Ａ）／（Ｂ）＝５／５（重量比）：約２４時間
（Ａ）／（Ｂ）＝３／７（重量比）：約１ヶ月
【００４０】
本発明の血管一時塞栓剤には、薬効成分を混合してもよい。薬効成分は、造影剤とＰＶＡ粒子の混合時や薬効成分を溶解させた溶媒中でパール状ＰＶＡ粒子に吸蔵して担持させる方法等により血管一時塞栓剤に配合することができる。薬効成分としては、スマンクス、シクロホスファミドなどの抗悪性腫瘍剤、ステロイド系ホルモン剤、肝臓疾患薬、糖尿病薬、抗酸化剤、ペプチド系薬物、悪性腫瘍に対する分子標的治療薬、抗生物質等の化学療法剤などがあげられる。また、細胞増殖因子である塩基性繊維芽細胞増殖因子（ｂＦＧＦ）、血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ）、トランスフォーミング増殖因子β１（ＴＧＦ−β１）、血管内皮細胞増殖因子（ＶＦＧＦ）などがあげられる。
【００４１】
本発明の一時塞栓剤を血液中に塞栓する場合に用いるカテーテルは、特に限定されるものではなく、ＣＯＲＤＩＳ（コーディス）社製のカテーテル、ＭＡＳＳ ＴＲＡＮＳＩＴやテルモ社製のカテーテル、プログレートなど適宜選択することができる。
【実施例】
【００４２】
以下、本発明の本発明のＰＶＡ粒子および該粒子の製造方法、血液一時塞栓剤を実施例に基づいてさらに詳細に説明するが、本発明はかかる実施例のみに制限されるものではない。なお、特に断らない限り、以下「部」は「重量部」をいう。
【００４３】
実施例１（ＰＶＡ粒子１：平均粒径１５０μｍ、鹸化度９８．２モル％、パール鹸化品 平均重合度１５０の製造）
平均重合度１５５のポリ酢酸ビニルエステルの５５％メタノール溶液（含水量０．０５％）にメタノールを加えて樹脂分５０％に希釈した。この溶液１００部を攪拌機つき反応缶に仕込み、温度を２５℃に保って攪拌しながら、鹸化反応触媒としてＮａＯＨのＮａ含量換算で２％メタノール溶液をポリ酢酸ビニルの酢酸ビニル単位に対して３ｍｍｏｌの割合で添加した。続いて流動パラフィン１００部を加えて、攪拌速度を２５０回転に調節したところ、ポリ酢酸ビニルエステルは球形状で流動パラフィン中に分散した。温度を２５℃に保って反応させ、６０分経過後に反応を停止し、遠心分離装置により固液分離を行うことによりＰＶＡ粒子を分離した。この粒子を温度５０℃の酢酸エチル溶液を用いて抽出法により洗浄し、次いで温度８０℃で２時間熱風乾燥した。得られたＰＶＡ粒子（１次鹸化粒子）１００部を、再度メタノール溶液６００部に分散して、鹸化触媒（Ｎａ重量換算で２％ＮａＯＨメタノール溶液）を２０部添加して、温度５０℃で、１時間かけて２次鹸化を行ない、再度遠心分離装置によりＰＶＡ粒子を分離し、温度５０℃の酢酸エチル溶液を用いて抽出法により洗浄し、次いで温度８０℃で２時間熱風乾燥して平均重合度が１５０であるＰＶＡ粒子１を得た。
【００４４】
（鹸化度）
ＰＶＡ粒子の鹸化度は、ＪＩＳ Ｋ-６７２６に準じて測定し９８．２モル％と求められた。
【００４５】
（平均粒径）
ＰＶＡ粒子の平均粒径は、レーゼンテックＭ１００を用いて、高鹸化ＰＶＡにとって貧溶媒であるイソプロピルアルコール１００部中にＰＶＡ粒子１０部を添加して、撹拌下にて粒径をコード長として測定を行った。ＰＶＡ粒子の平均粒径は、１５０μｍであった。
【００４６】
実施例２（ＰＶＡ粒子２：平均粒径１５２μｍ、鹸化度９７．５モル％、パール鹸化 平均重合度２００の製造）
平均重合度２０５のポリ酢酸ビニルエステルの５５％メタノール溶液を用いたことと、２次鹸化における反応時間を４０分間とした以外は、実施例１と同様にしてＰＶＡ粒子を得た。得られたＰＶＡ粒子２は、平均粒径１５２μｍ、鹸化度９７．５モル％、平均重合度２００であった。
【００４７】
実施例３（ＰＶＡ粒子３：粒径１５４μｍ、鹸化度９５モル％、パール鹸化品 平均重合度１５０の製造）
２次鹸化における反応時間を３５分間とした以外は、実施例１と同様にしてＰＶＡ粒子を得た。得られたＰＶＡ粒子３は、粒径１５４μｍ、鹸化度９５モル％、平均重合度１５０であった。
【００４８】
実施例４（ＰＶＡ粒子４：平均粒径１５６μｍ、鹸化度９９．２モル％、パール鹸化品 平均重合度３００の製造）
平均重合度３００のポリ酢酸ビニルエステルを用いた以外は、実施例１と同様にしてＰＶＡ粒子を得た。得られたＰＶＡ粒子４は、粒径１５６μｍ、鹸化度９９．２モル％、平均重合度３００であった。
【００４９】
実施例５（ＰＶＡ粒子５：平均粒径１５２μｍ、鹸化度９７．０モル％、パール鹸化品 平均重合度３００の製造）
平均重合度３００のポリ酢酸ビニルエステルを用い、２次鹸化の時間を３０分間とした以外は実施例１と同様にしてＰＶＡ粒子を得た。得られたＰＶＡ粒子５は、粒径１５２μｍ、鹸化度９７．０モル％、平均重合度３００であった。
【００５０】
実施例６（血管一時塞栓剤１）
造影剤（オイパロミン３００、富士製薬工業（株）製）１００部に対して、実施例１で得られたＰＶＡ粒子２０部を分散させて、５〜１５分間放置後して、血管塞栓剤１とした。
【００５１】
実施例７（血管一時塞栓剤２）
造影剤（オイパロミン３００）１００部に対して、実施例２で得られたＰＶＡ粒子２０部を温度６０℃で４５分間かけて溶解させて、ペースト状の血管塞栓剤２とした。
【００５２】
実施例８（血管一時塞栓剤３）
実施例１で得られたＰＶＡ粒子２０部を、造影剤（オイパロミン３００）１００部に６０℃で６０分間かけて溶解させて、ペースト状塞栓剤とした。その後、該ペースト状塞栓剤９０部に、実施例３で得られたＰＶＡ粒子２０部を造影剤（オイパロミン３００）１００部に分散させた造影剤分散液を１０部混合し、溶解状態であるＰＶＡ（Ａ）と分散状態であるＰＶＡ粒子（Ｂ）の重量比（Ａ）／（Ｂ）が９／１になるようにして、血管一時塞栓剤３を得た。
【００５３】
実施例９（血管一時塞栓剤４）
実施例８において、ペースト状塞栓剤を５０部、ＰＶＡ粒子３の造影剤分散液を５０部に変えて、（Ａ）／（Ｂ）の重量比を５／５とした以外は、実施例８と同様の方法で、血管一時塞栓剤４を得た。
【００５４】
実施例１０（血管一時塞栓剤５）
実施例８において、ペースト状塞栓剤を３０部、ＰＶＡ粒子３の造影剤分散液を７０部に変えて、（Ａ）／（Ｂ）の重量比を３／７とした以外は、実施例８と同様の方法で、血管一時塞栓剤５を得た。
【００５５】
実施例１１（血管一時塞栓剤６）
造影剤（オイパロミン３００）１００部に対して、実施例４で得られたＰＶＡ粒子２０部を分散させて、１５分間放置後、血管一時塞栓剤６として使用した。
【００５６】
実施例１２（血管一時塞栓剤７）
造影剤（オイパロミン３００）１００部に対して、実施例５で得られたＰＶＡ粒子２０部を分散させて、１５分間放置後、血管一時塞栓剤７として使用した。
【００５７】
得られた血管一時塞栓剤１〜７を以下の評価方法により評価した。
【００５８】
（カテーテル通過試験）
１ｇの血管一時塞栓剤１〜５を、造影剤（オイパロミン３００）５ｍｌに分散して球形粒子分散液とした。この球形粒子分散液および血管一時塞栓剤６、７のそれぞれを２．５ｃｃ注射シリンジから肝動脈塞栓用２．７Ｆｒマイクロカテーテル（プログレートＭＣ−ＰＣ２７１０、テルモ社製）に注入し、吸入抵抗、スタッキング現象の有無の確認を行った。さらに、少量の生理食塩水を注入した後、カテーテルを長手方向に切開し、カテーテル内を目視観察して、残存する球形粒子の有無を観察した。
【００５９】
血管一時塞栓剤１〜７（球形粒子分散液）の流量に変化はなく、カテーテルの通過性は良好であった。また、カテーテル内を目視観察したところ、残存する球形粒子は全く観察されなかった。
【００６０】
（動物実験での腎動脈塞栓開通時間評価）
実施例６〜１１で得られた血管一時塞栓剤１〜６を、マイクロカテーテル（テルモ社製カテーテル、プログレートＭＣ−ＰＣ２７１０）を用いて、麻酔した豚の腎動脈に注入した。塞栓時間がおよそ２５時間以内と予想されるケースにおいては逐次、腎臓のＸ線撮影による血管閉塞状況の観察を行い、Ｘ線写真上で閉塞した動脈の再開通が認められ始めた時点で豚の腎臓を摘出し、血管閉塞部位の組織切片を作製して血管塞栓の状況や周囲組織への影響を観察した。１ケ月〜数ケ月単位のものついては、一定期間毎のＸ線撮影による外観観察を経て、再開通時間の確認を行った。
【００６１】
再開通を開始した時間は次のようになった。
血管一時塞栓剤１ 約３ヶ月
血管一時塞栓剤２ 約２時間
血管一時塞栓剤３ 約５時間
血管一時塞栓剤４ 約２４時間
血管一時塞栓剤５ 約１ヶ月
血管一時塞栓剤６ 約３週間
【００６２】
なお、再開通後の所見では、末梢血管への再分布による塞栓を起こすことなく、塞栓部位の再開通を確認した。
【００６３】
塞栓部位の血管では、血管径の縮小化や血管網の退縮が確認され、これを腫瘍栄養血管の塞栓の目的に用いた場合には癌治療での有効性が期待される結果となった。
【００６４】
（動物実験での肺動脈塞栓開通時間評価）
全身麻酔下のブタ肺動脈区域枝にバルーン付カテーテルを挿入し、実施例１２で得られた血管一時塞栓剤７を透視画像で確認しながら手圧で注入したところ、５ｍｌを注入した時点で該当区域枝の血流が停止した。その後、塞栓から１５分で血流の再開が確認され、３０分後には血管造影写真上の血流はほぼ回復した。
【００６５】
（人新鮮凍結血漿中での溶解特性）
溶解試験測定装置レーゼンテックＭ１００にてＰＶＡ粒子または血管一時塞栓剤の造影剤、およびＢ型人新鮮凍結血漿（ＦＦＰ）中での平均粒径変化を測定した。測定手順は以下のとおりである。
１．４００ｍｌのジャケット付きセパラブルフラスコ（以下フラスコ）のジャケット部へ予め３７℃の恒温水を通水しておく。
２．１５０ｍｌのＦＦＰを予め３７℃の恒温水にて解凍しておく。
３．フラスコ内へＰＶＡ粒子または血管一時塞栓剤１ｇ／５ｍｌ造影剤（イオメロン３００、エーザイ（株）製）を１０部投入し、引き続きフラスコ内へ３００部のＦＦＰを投入し、攪拌翼（パドル）にて１５０ｒｐｍで攪拌しながらレーゼンテックでの測定を開始する。
【００６６】
撹拌および測定は、３７℃でおこない、粒子がレーゼンテックにてカウントされなくなった時間をもって溶解とした。結果を以下に示す。
ＰＶＡ粒子１ ３時間で溶解
ＰＶＡ粒子２ ５分で溶解
血管一時塞栓剤１ ２５分で溶解
血管一時塞栓剤２ ４５分で溶解
血管一時塞栓剤３ １時間で溶解
【産業上の利用可能性】
【００６７】
本発明は、生体内において血管を塞ぎ、血流の一時塞栓に使用する一時血管塞栓材料に関する。詳しくは、特定のＰＶＡ粒子により血管内部を塞ぎ、血流の閉塞に使用する塞栓形成材料であって、最終的に生体内に吸収され、体外に排出可能な、生体内に残存しない血管塞栓材料に関する。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
鹸化度が９０モル％以上で、平均粒径が７０μｍ〜１０００μｍであるパール状の血管一時塞栓剤用ポリビニルアルコール粒子。
【請求項２】
ポリビニルアルコールの平均重合度が、８０〜６００である請求項１記載の粒子。
【請求項３】
ポリビニルアルコールの平均重合度が、８０〜３５０である請求項１記載の粒子。
【請求項４】
アルコールまたはアルコールと酢酸メチル（ａ）を溶媒とするポリビニルエステル溶液（ｂ）を、ポリビニルエステル、該エステルの鹸化物、および成分（ａ）のいずれとも実質的に相溶せず、かつ成分（ｂ）よりも粘度の高い媒体（ｃ）中に粒状に分散せしめ、鹸化触媒存在下で鹸化する請求項１〜３のいずれかに記載の粒子の製造方法。
【請求項５】
ポリビニルエステル溶液（ｂ）／媒体（ｃ）の重量比が、２／８〜６／４である請求項４記載の製造方法。
【請求項６】
ポリビニルエステル溶液（ｂ）／媒体（ｃ）の重量比が、４／６〜５／５である請求項４記載の製造方法。
【請求項７】
請求項１〜３のいずれかに記載の粒子を、造影剤に分散した血管一時塞栓剤。
【請求項８】
請求項１〜３のいずれかに記載の粒子を、造影剤に溶解した血管一時塞栓剤。
【請求項９】
請求項１〜３のいずれかに記載の粒子を、請求項８記載の血管一時塞栓剤に分散した血管一時塞栓剤。
【請求項１】
鹸化度が９０モル％以上で、平均粒径が７０μｍ〜１０００μｍであるパール状の血管一時塞栓剤用ポリビニルアルコール粒子。
【請求項２】
ポリビニルアルコールの平均重合度が、８０〜６００である請求項１記載の粒子。
【請求項３】
ポリビニルアルコールの平均重合度が、８０〜３５０である請求項１記載の粒子。
【請求項４】
アルコールまたはアルコールと酢酸メチル（ａ）を溶媒とするポリビニルエステル溶液（ｂ）を、ポリビニルエステル、該エステルの鹸化物、および成分（ａ）のいずれとも実質的に相溶せず、かつ成分（ｂ）よりも粘度の高い媒体（ｃ）中に粒状に分散せしめ、鹸化触媒存在下で鹸化する請求項１〜３のいずれかに記載の粒子の製造方法。
【請求項５】
ポリビニルエステル溶液（ｂ）／媒体（ｃ）の重量比が、２／８〜６／４である請求項４記載の製造方法。
【請求項６】
ポリビニルエステル溶液（ｂ）／媒体（ｃ）の重量比が、４／６〜５／５である請求項４記載の製造方法。
【請求項７】
請求項１〜３のいずれかに記載の粒子を、造影剤に分散した血管一時塞栓剤。
【請求項８】
請求項１〜３のいずれかに記載の粒子を、造影剤に溶解した血管一時塞栓剤。
【請求項９】
請求項１〜３のいずれかに記載の粒子を、請求項８記載の血管一時塞栓剤に分散した血管一時塞栓剤。
【公開番号】特開２００７−３７９８９（Ｐ２００７−３７９８９Ａ）
【公開日】平成１９年２月１５日（２００７．２．１５）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００６−１７７８１５（Ｐ２００６−１７７８１５）
【出願日】平成１８年６月２８日（２００６．６．２８）
【新規性喪失の例外の表示】特許法第３０条第１項適用申請有り
【出願人】（０００００４１０１）日本合成化学工業株式会社 (572)
【出願人】（５００４０９２１９）学校法人関西医科大学 (36)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成１９年２月１５日（２００７．２．１５）
【国際特許分類】
【出願日】平成１８年６月２８日（２００６．６．２８）
【新規性喪失の例外の表示】特許法第３０条第１項適用申請有り
【出願人】（０００００４１０１）日本合成化学工業株式会社 (572)
【出願人】（５００４０９２１９）学校法人関西医科大学 (36)
【Ｆターム（参考）】
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