７−クロロ−Ｎ，Ｎ，５−トリメチル−４−オキソ−３−フェニル−３，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピリダジノ［４，５−ｂ］インドール−１−アセトアミドの末梢ベンゾジアゼピン受容体レベルのバイオマーカーとしての使用
放射標識形態の７−クロロ−Ｎ，Ｎ，５−トリメチル−４−オキソ−３−フェニル−３，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピリダジノ［４，５−ｂ］インドール−１−アセトアミドの個人における正常及び病的状態に関連するＰＢＲレベルを検出するためのバイオマーカーとしての使用。正常及び病的状態に関連するＰＢＲレベルの検出方法。診断キット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、７−クロロ−Ｎ，Ｎ，５−トリメチル−４−オキソ−３−フェニル−３，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピリダジノ［４，５−ｂ］インドール−１−アセトアミドの個人における正常及び病的状態に関連するＰＢＲ（末梢ベンゾジアゼピン受容体）レベルを検出するためのバイオマーカーとしての使用に関する。本発明は、上記目的のためのＰＢＲレベルの検出方法にも関する。
【背景技術】
【０００２】
正常な生理的状態では、トランスロケータータンパク質１８ｋＤａ（ＴＳＰＯ）（Ｐａｐａｄｏｐｏｕｌｏｓ，Ｂ．ら，（２００６）Ｔｒｅｎｄｓ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｓｃｉ．，２７：４０２−４０９）としても公知のＰＢＲは脳、主にミクログリア細胞中では低レベルで発現し、副腎、松果体、唾液腺、生殖腺、腎臓、肺、心臓や骨格筋のような多数の末梢組織中では高度に発現する（Ｃｈｅｎ，Ｍ−Ｋ．ａｎｄ Ｇｕｉｌａｒｔｅ，Ｔ．，（２００８）Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，１１８：１−１７；Ｖｅｎｎｅｔｉ，Ｓ．ら，（２００６）Ｐｒｏｇｒｅｓｓ ｉｎ Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ．，８０：３０８−３２２）。基準ＰＢＲリガンドの［３Ｈ］ＰＫ１１１９５を用いた細胞レベル下局在化研究で、ＰＢＲがミトコンドリア外膜中に局在していることが判明した（Ａｎｈｏｌｔ，Ｒ．Ｒ．ら，（１９８６）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２６１：５７６−５８３；Ａｎｔｋｉｅｗｉｃｚ−Ｍｉｃｈａｌｕｋ，Ｌ．ら，（１９８８）Ｍｏｌ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，３４：２７２−２７８）。しかしながら、免疫組織化学的研究で、ＰＢＲは（ミトコンドリアがない）血球中で発現し（Ｏｌｓｏｎ，Ｊ．Ｍ．ら，（１９８８）Ｅｕｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，１５２：４７−５３）、細胞膜に局在化され得ること（Ｏ’Ｂｅｉｒｎｅ、Ｇ．ら，（１９９０）Ｅｕｒ．Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，１８８：１３１−１３８；Ｗｏｏｄｓ，Ｍ．Ｊ．ら，（１９９６）Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，５１：１２８３−１２９２）も判明した。ＰＢＲの核または核周囲局在化も乳癌細胞（Ｈａｒｄｗｉｃｋ，Ｍ．ら，（１９９９）Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．，５９：８３１−８４２）、ヒト神経膠腫細胞（Ｂｒｏｗｎ，Ｒ．Ｃ．ら，（２０００）Ｃａｎｃｅｒ Ｌｅｔｔ．，１５６：１２５−１３２）、肝腫瘍細胞（Ｃｏｒｓｉ，Ｌ．ら，（２００５）Ｌｉｆｅ Ｓｃｉ．，７６：２５２３−２５３３）及びグリア細胞（Ｋｕｈｌｍａｎｎ，Ａ．Ｃ．ａｎｄ Ｇｕｉｌａｒｔｅ，Ｔ．Ｒ．（２０００）Ｊ．Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ．，７４：１６９４−１７０４）で観察された。
【０００３】
ＰＢＲレベルの著しい上昇が細胞損傷、炎症または増殖後に観察され、多数の急性及び慢性病的状態に関連している（Ｃｈｅｎ，Ｍ−Ｋ．ａｎｄ Ｇｕｉｌａｒｔｅ，Ｔ．（２００８）Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，１１８：１−１７；Ｖｅｎｎｅｔｉ，Ｓ．ら，（２００６）Ｐｒｏｇｒｅｓｓ ｉｎ Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，８０：３０８−３２２）。これらには、脳損傷、例えば卒中及び虚血再灌流障害（Ｇｅｒｈａｒｄ，Ａ．ら，（２０００）Ｎｅｕｒｏｒｅｐｏｒｔ，１１：２９５７−２９６０；Ｇｅｒｈａｒｄ，Ａ．ら，（２００５）Ｎｅｕｒｏｉｍａｇｅ，２４：４０４−４１２）、外傷性脳損傷（Ｒａｇｈａｖｅｎｄｒａ，Ｒ．ら，（２０００）Ｅｘｐ．Ｎｅｕｒｏｌ．，１６１：１０２−１１４）；脳感染、例えば脳炎（Ｂａｎａｔｉ，Ｒ．Ｂ．ら，（１９９９）Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ，５３：２１９９−２２０３；Ｃａｇｉｎ，Ａ．ら，（２００１）Ｂｒａｉｎ，１２４：２０１４−２０２７）；神経疾患、例えば多発性硬化症（Ｂａｎａｔｉ，Ｒ．Ｂ．ら，（２０００）Ｂｒａｉｎ，１２３：２３２１−２３３７）、アルツハイマー病及び認知症（Ｃａｇｎｉｎ，Ａ．ら，（２００１）Ｌａｎｃｅｔ，３５８：４６１−４６７；Ｖｅｒｓｉｊｐｔ，Ｊ．Ｊ．ら，（２００３）Ｅｕｒ．Ｎｅｕｒｏｌ．，５０：３９−４７）、パーキンソン病（Ｏｕｃｈｉ，Ｙ．ら，（２００５）Ａｎｎ．Ｎｅｕｒｏｌ．，５７：１６８−１７５；Ｇｅｒｈａｒｄ，Ａ．ら，（２００６）Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ．Ｄｉｓ．，２１：４０４−４１２）、筋萎縮性側索硬化症（Ｔｕｒｎｅｒ，Ｍ．Ｒ．ら，（２００４）Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ．Ｄｉｓ．，１５：６０１−６０９）、大脳皮質基底核変性症（Ｇｅｒｈａｒｄ Ａ．ら，（２００４）Ｍｏｖ．Ｄｉｓｏｒｄ．，１９：１２２１−１２２６；Ｈｅｎｋｅｌ，Ｋ．ら，（２００４）Ｍｏｖ．Ｄｉｓｏｒｄ．，１９：８１７−８２１）、ハンチントン病（Ｍｅｓｓｍｅｒ，Ｋ．ａｎｄ Ｒｅｙｎｏｌｄｓ，Ｇ．Ｐ．，（１９９８）Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．Ｌｅｔｔ．，２４１：５３−５６；Ｐａｖｅｓｅ，Ｎ．ら，（２００６）Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ，６６：１６３８−１６４３）及びてんかん（Ｓａｕｖａｇｅａｕ，Ａ．ら，（２００２）Ｍｅｔａｂ．Ｂｒａｉｎ Ｄｉｓ．，１７：３−１１）が含まれる。ＣＮＳ病理における高いＰＢＲレベルが主にミクログリア細胞で観察されている（Ｃｈｅｎ，Ｍ−Ｋ．ａｎｄ Ｇｕｉｌａｒｔｅ、Ｔ．，（２００８）Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，１１８：１−１７；Ｖｅｎｎｅｔｉ，Ｓ．ら，（２００６）Ｐｒｏｇｒｅｓｓ ｉｎ Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，８０：３０８−３２２）。
【０００４】
ＰＢＲの高い上昇は、癌（Ｃｏｒｎｕ，Ｐ．ら，（１９９２）Ａｃｔａ．Ｎｅｕｒｉｃｈｉｒ．，１１９：１４６−１５２；Ｈａｒｄｗｉｃｋ，Ｍ．ら，（１９９９）Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．，５９：８３１−８４２；Ｍａａｓｅｒ，Ｋ．ら，（２００２）Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．，８：３２０５−３２０９）、肺の炎症（Ａｕｄｉ，Ｓ．Ｈ．ら，（２００２）Ｌｕｎｇ．，１８０：２４１−２５０；Ｈａｒｄｗｉｃｋ，Ｍ．Ｊ．ら，（２００５）Ｍｏｌ．Ｉｍａｇｉｎｇ．，４：４３２−４３８）、心虚血（Ｍａｚｚｏｎｅ，Ａ．ら，（２０００）Ｊ．Ａｍ．Ｃｏｌｌ．Ｃａｒｄｉｏｌ．，３６：７４６−７５０）、腎虚血（Ｚｈａｎｇ，Ｋ．ら，（２００６）Ｊ．Ａｍ．Ｃｏｌｌ．Ｓｕｒｇ．，２０３：３５３−３６４）、リウマチ（線維筋痛）（Ｆａｇｇｉｏｌｉ，Ｐ．ら，（２００４）Ｒｈｅｕｍａｔｏｌｏｇｙ（Ｏｘｆｏｒｄ），４３：１２２４−１２２５）、座骨神経再生（Ｍｉｌｌｓ，Ｃ．Ｄ．ら，（２００５）Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．，３０：２２８−２３７）、乾癬性関節炎（Ｇｕｉｓｔｉ，Ｌ．ら，（２００４）Ｃｌｉｎ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，３７：６１−６６）及びアテローム性動脈硬化症（Ｆｕｊｉｍｕｒａ，Ｙ．ら，（２００８）Ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ，２０１：１０８−１１１；Ｌａｉｔｉｎｅｎ，Ｉ．ら，（２００８）Ｅｕｒ．Ｊ．Ｎｕｃ．Ｍｅｄ．Ｍｏｌ．Ｉｍａｇｉｎｇ，３６：７３−８０）でも観察されている。
【０００５】
対照的に、ＰＢＲレベルの低下は、統合失調症患者の脳で（Ｋｕｒｕｍａｊｉ，Ａ．ら，（１９９７）Ｊ．Ｎｅｕｒａｌ．Ｔｒａｎｓｍ．，１０４：１３６１−１３７０；Ｗｏｄａｒｚ，Ｎ．ら，（１９９８）Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ Ｒｅｓ．，１４：３６３−３６９）、関節リウマチ（Ｂｒｉｂｅｓ，Ｅ．ら，（２００２）Ｅｕｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，４５２：１１１−１２２）及び骨関節症（Ｂａｚｚｉｃｈｉ，Ｌ．ら，（２００３）Ｃｌｉｎ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，３６：５７−６０）で観察されている。
【０００６】
従って、脳及び他の組織中のＰＢＲレベルをインビボでイメージングする能力は、病気の進行の重要なバイオマーカーとして、治療処置の有効性を調べ、評価するために、またインビボでＰＢＲ受容体占有率を評価するために役立つ。
【０００７】
基準ＰＥＴ ＰＢＲリガンドの［１１Ｃ］ＰＫ１１１９５は、多数の神経病的状態におけるＰＢＲレベルをインビボでイメージングするために広く使用されている（Ｃｈｅｎ，Ｍ−Ｋ ａｎｄ Ｇｕｉｌａｒｔｅ，Ｔ．（２００８）Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，１１８：１−１７；Ｖｅｎｎｅｔｉ，Ｓ．ら，（２００６）Ｐｒｏｇｒｅｓｓ ｉｎ Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，８０：３０８−３２２）。しかしながら、［１１Ｃ］ＰＫ１１１９５は、比較的低い脳取り込み、高い非特異的結合及び乏しい信号／雑音比を示す。これらの性質により、ＣＮＳにおけるＰＢＲレベルのＰＥＴイメージング及び占有率研究のための［１１Ｃ］ＰＫ１１１９５の感度は限られている。従って、［１１Ｃ］ＰＫ１１１９５よりもより高い特異的結合及びより高い感度を有する改良されたＰＢＲ ＰＥＴリガンドが開発されれば、脳及び他の組織中のＰＢＲレベルのイメージングがかなり進歩するであろう。
【０００８】
ＷＯ ９９／０６４０６及びＷＯ ００／４４３８４に記載されており、特許請求されている化合物の中で、ピリダジノ［４，５−ｂ］インドール誘導体の７−クロロ−Ｎ，Ｎ，５−トリメチル−４−オキソ−３−フェニル−３，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピリダジノ［４，５−ｂ］インドール−１−アセトアミドがＰＢＲに対するＰＥＴ（または、ＳＰＥＣＴ）リガンドとして使用するために特に興味深いと同定された。この化合物はインビトロ及びインビボでＰＢＲに対して高い親和性を有している（Ｆｅｒｚａｚ，Ｂ．ら，（２００２）Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒａｐ．，３０１：１０６７−１０７８）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００９】
【特許文献１】国際公開第９９／０６４０６号
【特許文献２】国際公開第００／４４３８４号
【非特許文献】
【００１０】
【非特許文献１】Ｐａｐａｄｏｐｏｕｌｏｓ，Ｂ．ら，（２００６）Ｔｒｅｎｄｓ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｓｃｉ．，２７：４０２−４０９
【非特許文献２】Ｃｈｅｎ，Ｍ−Ｋ．ａｎｄ Ｇｕｉｌａｒｔｅ，Ｔ．，（２００８）Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，１１８：１−１７
【非特許文献３】Ｖｅｎｎｅｔｉ，Ｓ．ら，（２００６）Ｐｒｏｇｒｅｓｓ ｉｎ Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ．，８０：３０８−３２２
【非特許文献４】Ａｎｈｏｌｔ，Ｒ．Ｒ．ら，（１９８６）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２６１：５７６−５８３
【非特許文献５】Ａｎｔｋｉｅｗｉｃｚ−Ｍｉｃｈａｌｕｋ，Ｌ．ら，（１９８８）Ｍｏｌ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，３４：２７２−２７８
【非特許文献６】Ｏｌｓｏｎ，Ｊ．Ｍ．ら，（１９８８）Ｅｕｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，１５２：４７−５３
【非特許文献７】Ｏ’Ｂｅｉｒｎｅ、Ｇ．ら，（１９９０）Ｅｕｒ．Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，１８８：１３１−１３８
【非特許文献８】Ｗｏｏｄｓ，Ｍ．Ｊ．ら，（１９９６）Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，５１：１２８３−１２９２
【非特許文献９】Ｈａｒｄｗｉｃｋ，Ｍ．ら，（１９９９）Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．，５９：８３１−８４２
【非特許文献１０】Ｂｒｏｗｎ，Ｒ．Ｃ．ら，（２０００）Ｃａｎｃｅｒ Ｌｅｔｔ．，１５６：１２５−１３２
【非特許文献１１】Ｃｏｒｓｉ，Ｌ．ら，（２００５）Ｌｉｆｅ Ｓｃｉ．，７６：２５２３−２５３３
【非特許文献１２】Ｋｕｈｌｍａｎｎ，Ａ．Ｃ．ａｎｄ Ｇｕｉｌａｒｔｅ，Ｔ．Ｒ．（２０００）Ｊ．Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ．，７４：１６９４−１７０４
【非特許文献１３】Ｇｅｒｈａｒｄ，Ａ．ら，（２０００）Ｎｅｕｒｏｒｅｐｏｒｔ，１１：２９５７−２９６０
【非特許文献１４】Ｇｅｒｈａｒｄ，Ａ．ら，（２００５）Ｎｅｕｒｏｉｍａｇｅ，２４：４０４−４１２
【非特許文献１５】Ｒａｇｈａｖｅｎｄｒａ，Ｒ．ら，（２０００）Ｅｘｐ．Ｎｅｕｒｏｌ．，１６１：１０２−１１４
【非特許文献１６】Ｂａｎａｔｉ，Ｒ．Ｂ．ら，（１９９９）Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ，５３：２１９９−２２０３
【非特許文献１７】Ｃａｇｉｎ，Ａ．ら，（２００１）Ｂｒａｉｎ，１２４：２０１４−２０２７
【非特許文献１８】Ｂａｎａｔｉ，Ｒ．Ｂ．ら，（２０００）Ｂｒａｉｎ，１２３：２３２１−２３３７
【非特許文献１９】Ｃａｇｎｉｎ，Ａ．ら，（２００１）Ｌａｎｃｅｔ，３５８：４６１−４６７
【非特許文献２０】Ｖｅｒｓｉｊｐｔ，Ｊ．Ｊ．ら，（２００３）Ｅｕｒ．Ｎｅｕｒｏｌ．，５０：３９−４７
【非特許文献２１】Ｏｕｃｈｉ，Ｙ．ら，（２００５）Ａｎｎ．Ｎｅｕｒｏｌ．，５７：１６８−１７５
【非特許文献２２】Ｇｅｒｈａｒｄ，Ａ．ら，（２００６）Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ．Ｄｉｓ．，２１：４０４−４１２
【非特許文献２３】Ｔｕｒｎｅｒ，Ｍ．Ｒ．ら，（２００４）Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ．Ｄｉｓ．，１５：６０１−６０９
【非特許文献２４】Ｇｅｒｈａｒｄ Ａ．ら，（２００４）Ｍｏｖ．Ｄｉｓｏｒｄ．，１９：１２２１−１２２６
【非特許文献２５】Ｈｅｎｋｅｌ，Ｋ．ら，（２００４）Ｍｏｖ．Ｄｉｓｏｒｄ．，１９：８１７−８２１
【非特許文献２６】Ｍｅｓｓｍｅｒ，Ｋ．ａｎｄ Ｒｅｙｎｏｌｄｓ，ＧＰ．，（１９９８）Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．Ｌｅｔｔ．，２４１：５３−５６
【非特許文献２７】Ｐａｖｅｓｅ，Ｎ．ら，（２００６）Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ，６６：１６３８−１６４３
【非特許文献２８】Ｓａｕｖａｇｅａｕ，Ａ．ら，（２００２）Ｍｅｔａｂ．Ｂｒａｉｎ Ｄｉｓ．，１７：３−１１
【非特許文献２９】Ｃｏｒｎｕ，Ｐ．ら，（１９９２）Ａｃｔａ．Ｎｅｕｒｉｃｈｉｒ．，１１９：１４６−１５２
【非特許文献３０】Ｍａａｓｅｒ，Ｋ．ら，（２００２）Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．，８：３２０５−３２０９
【非特許文献３１】Ａｕｄｉ，Ｓ．Ｈ．ら，（２００２）Ｌｕｎｇ．，１８０：２４１−２５０
【非特許文献３２】Ｈａｒｄｗｉｃｋ，Ｍ．Ｊ．ら，（２００５）Ｍｏｌ．Ｉｍａｇｉｎｇ．，４：４３２−４３８
【非特許文献３３】Ｍａｚｚｏｎｅ，Ａ．ら，（２０００）Ｊ．Ａｍ．Ｃｏｌｌ．Ｃａｒｄｉｏｌ．，３６：７４６−７５０
【非特許文献３４】Ｚｈａｎｇ，Ｋ．ら，（２００６）Ｊ．Ａｍ．Ｃｏｌｌ．Ｓｕｒｇ．，２０３：３５３−３６４
【非特許文献３５】Ｆａｇｇｉｏｌｉ，Ｐ．ら，（２００４）Ｒｈｅｕｍａｔｏｌｏｇｙ（Ｏｘｆｏｒｄ），４３：１２２４−１２２５
【非特許文献３６】Ｍｉｌｌｓ，Ｃ．Ｄ．ら，（２００５）Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．，３０：２２８−２３７
【非特許文献３７】Ｇｕｉｓｔｉ，Ｌ．ら，（２００４）Ｃｌｉｎ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，３７：６１−６６
【非特許文献３８】Ｆｕｊｉｍｕｒａ，Ｙ．ら，（２００８）Ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ，２０１：１０８−１１１
【非特許文献３９】Ｌａｉｔｉｎｅｎ，Ｉ．ら，（２００８）Ｅｕｒ．Ｊ．Ｎｕｃ．Ｍｅｄ．Ｍｏｌ．Ｉｍａｇｉｎｇ，３６：７３−８０
【非特許文献４０】Ｋｕｒｕｍａｊｉ，Ａ．ら，（１９９７）Ｊ．Ｎｅｕｒａｌ．Ｔｒａｎｓｍ．，１０４：１３６１−１３７０
【非特許文献４１】Ｗｏｄａｒｚ，Ｎ．ら，（１９９８）Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ Ｒｅｓ．，１４：３６３−３６９
【非特許文献４２】Ｂｒｉｂｅｓ，Ｅ．ら，（２００２）Ｅｕｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，４５２：１１１−１２２
【非特許文献４３】Ｂａｚｚｉｃｈｉ，Ｌ．ら，（２００３）Ｃｌｉｎ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，３６：５７−６０
【非特許文献４４】Ｆｅｒｚａｚ，Ｂ．ら，（２００２）Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒａｐ．，３０１：１０６７−１０７８
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
本発明は、放射標識形態の７−クロロ−Ｎ，Ｎ，５−トリメチル−４−オキソ−３−フェニル−３，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピリダジノ［４，５−ｂ］インドール−１−アセトアミドの正常状態に関連するＰＢＲレベル及び病的状態に関連するＰＢＲレベルを検出するためのバイオマーカーとしての使用に関する。
【００１２】
本発明は、放射標識形態の７−クロロ−Ｎ，Ｎ，５−トリメチル−４−オキソ−３−フェニル−３，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピリダジノ［４，５−ｂ］インドール−１−アセトアミドを用いる正常状態に関連するＰＢＲレベル及び病的状態に関連するＰＢＲレベルの検出方法にも関する。
【００１３】
本発明は、ＰＢＲレベルを検出するための診断キットにも関する。
【００１４】
定義
便宜的理由のため且つ読みやすくするために、化合物７−クロロ−Ｎ，Ｎ，５−トリメチル−４−オキソ−３−フェニル−３，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピリダジノ［４，５−ｂ］インドール−１−アセトアミドを本明細書中の幾つかの章で「Ａ」と改名した。
【００１５】
本発明のために、以下の用語は適切に理解されたい。
【００１６】
バイオマーカー：客観的に（すなわち、許容される精度及び再現性で）調べられ、また正常な生理学的または病理学的プロセスの指標として、医学的治療の作用を評価するために使用され得る特性。バイオマーカーは、組織または体液中で検出され得る生物学的、解剖学的、生理学的、生化学的または分子パラメーターであり得る。
【００１７】
炎症：組織の損傷または破壊に対する応答。末梢では、急性炎症は多形核細胞（好中球）により特徴づけられる白血球浸潤物から構成され、慢性炎症は単核細胞（マクロファージ、リンパ球、プラズマ細胞）から構成される。脳では、炎症はミクログリア及び星状グリア細胞の活性化、並びにサイトカイン及びケモカインの関与、補体タンパク質、急性期タンパク質、酸化的損傷及び関連分子プロセスを含む広いスペクトルの細胞応答を取り込む。これらの事象はニューロン機能に対して悪影響を有し得、ニューロン損傷、更にはグリア活性化、最終的には神経変性が生じ得る。脳炎症に応答して、グリア細胞（主に、ミクログリア）は活性化され、ＰＢＲを過剰発現する。従って、脳中のＰＢＲレベルは神経炎症の指標であり、本発明のために神経炎症のバイオマーカーとして見なされ得る。
【００１８】
病的状態：これらの状態は神経疾患、すなわち中枢神経系の機能に影響を及ぼす損傷、障害または疾患を含み得る。これらには急性脳損傷、例えば卒中、虚血再灌流障害及び外傷性脳損傷；脳感染、例えば脳炎；神経疾患、例えば多発性硬化症、アルツハイマー病、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症、認知症、大脳皮質基底核変性症、ハンチントン病及びてんかんが含まれ得る。病的状態には精神病、例えば統合失調症；末梢炎症プロセス、例えば肺炎症、アテローム性動脈硬化症、心虚血、腎虚血、リウマチ（線維筋痛）、乾癬性関節炎、関節リウマチ及び骨関節症；増殖性疾患、例えば癌も含まれ得る。
【００１９】
受容体占有率：生化学的標的または受容体に対する結合の量の尺度。薬物に対する受容体占有率のレベルは、放射標識されているＰＥＴリガンド単独で、または非標識薬物を投与した後にＰＥＴリガンドを与えたときに得られる時間−放射能測定値を比較することにより調べられ得る。ＰＥＴリガンドは非標識薬物と同一の受容体に結合されなければならない。放射標識されているＰＥＴリガンドの受容体に対する結合の量は非標識薬物の濃度が増加すると減少する。この減少の程度が非標識薬物の受容体占有率として定義される。
【００２０】
ＰＥＴイメージング：陽電子放射断層撮影法は体内の機能プロセスの三次元イメージまたはマップを作成するイメージング技術である。このシステムは、体内の生物学的活性分子上に導入される陽電子放射性核種（トレーサー）により間接的に放射される対のγ線を検出する。次いで、体内の三次元空間中のトレーサー濃度のイメージをコンピュータ分析により再構築する。ＰＥＴのために使用される材料は、γ線阻止能及び信号変換スピードが高いのでシンチレーター、例えばゲルマニウム酸ビスマス、オキシ−オルトケイ酸ルテチウムまたはオルトケイ酸ガドリウムである。
【００２１】
ＳＰＥＣＴイメージング：単一光子放射形コンピュータ断層撮影法は体内の機能プロセスの三次元シメージまたはマップを作成する別のイメージング技術である。このシステムは、体内の生物学的活性分子上に導入される単一光子放射性核種（トレーサー）により放射されるγ線を直接検出する。次いで、体内の三次元空間中のトレーサー濃度のイメージをコンピュータ分析により再構築する。
【００２２】
放射標識形態：１個または数個の原子が検出を可能にする同位元素で置換した分子。ＰＥＴイメージングのために最も頻繁に使用されている陽電子放射性同位元素は炭素−１１（すなわち、１１Ｃ，ｔ１／２＝２０分間）、窒素−１３（すなわち、１３Ｎ，ｔ１／２＝１０分間）、酸素−１５（すなわち、１５Ｏ，ｔ１／２＝２分間）である。ＰＥＴイメージングのために誘導体を他の陽電子放射性同位元素で標識するため追加の原子が添加されている分子、例えばフッ素−１８（すなわち、１８Ｆ，ｔ１／２＝１１０分間）、ガリウム−６８（６８Ｇａ、ｔ１／２＝６８分間）、銅−６４（６４Ｃｕ，ｔ１／２＝１２．７時間）、臭素−７６（すなわち、７６Ｂｒ，ｔ１／２＝１６．１時間）及びヨウ素−１２４（すなわち、１２４Ｉ，ｔ１／２＝４．２日）も考えられる。最後に、ＳＰＥＣＴイメージングのために誘導体を単一光子放射性同位元素で標識するために他の追加の原子が付加されている分子、例えばヨウ素−１２３（すなわち、１２３Ｉ，ｔ１／２＝１３．１時間）またはテクネチウム−９９ｍ（すなわち、９９ｍＴｃ，ｔ１／２＝６．０時間）も考えられる。
【００２３】
放射標識されているリガンドの合成及び原子の同位元素による置換は当業者に公知の幾つかの技術により実施され得る。例えば、炭素原子を炭素−１１で置換するために、我々は幾つかの誘導体、例えばヨウ化［１１Ｃ］メチルまたは［１１Ｃ］メチルトリフレート（Ｗｅｌｃｈ Ｍ．Ｊ．ら，（２００３）Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ−Ｒａｄｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ（Ｗｅｌｃｈ ＭＪ，Ｒｅｄｖａｎｌｙ ＣＳ Ｅｄｓ．），Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ−Ｃｈｉｃｈｅｓｔｅｒ−Ｂｒｉｓｂａｎｅ−Ｔｏｒｏｎｔｏ，Ｗｉｌｅｙ−ｌｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ Ｐｕｂ．，１−８４８）を使用し得る。Ａの場合、幾つかのメチル基、例えばＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミドまたはＮ−メチルインドール官能基を炭素−１１で標識し得る。
【００２４】
フッ素−１８で標識する場合、放射性同位元素をコア構造（Ａ）に対して求核性脂肪族または芳香族（ヘテロ芳香族（Ｄｏｌｌｅ Ｆ．ら，（２００５）Ｃｕｒｒ．Ｐｈａｒｍ．Ｄｅｓｉｇｎ，１１：３２２１−３２３５）を含む）置換または求電子置換により直接結合させても、スペーサー基を付加して連結させてもよく、これらの技術は両方とも当業者に公知である（Ｋｉｌｂｏｕｒｎ ＭＲ（１９９０）Ｆｌｕｏｒｉｎｅ−１８ Ｌａｂｅｌｉｎｇ ｏｆ Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｎｕｃｌｅａｒ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｓｅｒｉｅｓ（Ｋｉｌｂｏｕｒｎ ＭＲ Ｅｄ．），Ｎａｔｉｏｎａｌ Ａｃａｄｅｍｙ Ｐｒｅｓｓ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｄ．Ｃ．，１−１４９；Ｌａｓｎｅ Ｍ．−Ｃ．ら，（２００２）Ｔｏｐｉｃｓ ｉｎ Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２２２：２０１−２５８；Ｃａｉ Ｌ．ら，（２００８）Ｅｕｒ．Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，１７：２８５３−２８７３；Ｄｏｌｌｅ Ｆ．ら，（２００８）Ｆｌｕｏｒｉｎｅ ａｎｄ Ｈｅａｌｔｈ：Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｉｍａｇｉｎｇ，Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ Ｍａｔｅｒｉａｌｓ ａｎｄ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｔｒｅｓｓａｕｄ Ａ，Ｈａｕｆｅ Ｇ（Ｅｄｓ）．Ｅｌｓｅｖｉｅｒ：Ａｍｓｔｅｒｄａｍ−Ｂｏｓｔｏｎ−Ｈｅｉｄｅｌｂｅｒｇ−Ｌｏｎｄｏｎ−Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ−Ｏｘｆｏｒｄ−Ｐａｒｉｓ−Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ−Ｓａｎ Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ−Ｓｉｎｇａｐｏｒｅ−Ｓｙｄｎｅｙ−Ｔｏｋｙｏ，３−６５）。フッ素−１８原子を付加するためにアルキル、アルケニルまたはアルキニルリンカーを使用することが特に興味深い（Ｄａｍｏｎｔ Ａ．ら，（２００８）Ｊ．Ｌａｂｅｌ．Ｃｏｍｐｄｓ Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍ．，５１：２８６−２９２；Ｄｏｌｌｅ Ｆ．ら，（２００６）Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，１４：１１１５−１１２５；Ｄｏｌｌｅ Ｆ．ら，（２００７）Ｊ．Ｌａｂｅｌ．Ｃｏｍｐｄｓ Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍ．，５０：７１６−７２３）。
【００２５】
別のハロゲン（例えば、臭素−７６、ヨウ素−１２３またはヨウ素−１２４）で標識する場合、放射性同位元素をコア構造（Ａ）に対して求核または求電子置換により直接結合させても、またはスペーサー基の付加により連結させてもよく、これらの技術は両方とも当業者に公知である（Ｍａｚｉｅｒｅ Ｂ．ら，（２００１）Ｃｕｒｒ．Ｐｈａｒｍ．Ｄｅｓ．，７：１９３１−１９４３；Ｃｏｅｎｅｎ Ｈ．Ｈ．ら，（２００６）Ｒａｄｉｏｉｏｄｉｎａｔｉｏｎ ｒｅａｃｔｉｏｎｓ ｆｏｒ ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ−Ｃｏｍｐｅｎｄｉｕｍ ｆｏｒ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｓｔｒａｔｅｇｉｅｓ，Ｃｏｅｎｅｎ Ｈ．Ｈ．，Ｍｅｒｔｅｎｓ Ｊ．，Ｍａｚｉｅｒｅ Ｂ．（Ｅｄｓ），Ｓｐｒｉｎｇｅｒ Ｖｅｒｌａｇ，Ｂｅｒｌｉｎ−Ｈｅｉｄｅｌｂｅｒｇ，１−１０１）。
【００２６】
金属放射性同位元素（例えば、ガリウム−６８、銅−６４またはテクネチウム−９９ｍ）で標識する場合、当業者が考えている好ましく使用されるアプローチは、例えば開鎖ポリアミノカルボキシレートエチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）及びジエチレントリアミン五酢酸（ＤＴＰＡ）、ポリアミノカルボン酸マクロ環１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−テトラ酢酸（ＤＯＴＡ）、メルカプトアセチルジ−及びトリグリシン（ＭＡＧ２、ＭＡＧ３）、ビス（Ｓ−ベンゾイル−チオグリコロイル）ジアミノプロパノエート（（ＳＢＴ）２ＤＡＰ）及びヒドラジノニコチン酸（ＨＹＮＩＣ）の使用であり、これにより１つの官能基での放射性金属カチオンの複合体化及び別の官能基でのコア分子への共有結合が容易となる（Ｂｒｕｎｎｅｒ Ｕ．Ｋ．ら，（１９９５）Ｒａｄｉｏｔｒａｃｅｒ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ−Ｒａｄｉｏｍｅｔａｌｓ ａｎｄ ｔｈｅｉｒ ｃｈｅｌａｔｅｓ，Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅ ｏｆ Ｎｕｃｌｅａｒ Ｍｅｄｅｃｉｎｅ，Ｗａｇｎｅｒ Ｈ．Ｎ．（Ｅｄ），Ｓａｕｎｄｅｒｓ：Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，２２０−２２８；Ｗｅｉｎｅｒ Ｒ．Ｅ．ら，（２００３）Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ｏｆ ｇａｌｌｉｕｍ ａｎｄ ｉｎｄｉｕｍ ｒａｄｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ−Ｒａｄｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ（Ｗｅｌｃｈ ＭＪ，Ｒｅｄｖａｎｌｙ ＣＳ Ｅｄｓ．），Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ−Ｃｈｉｃｈｅｓｔｅｒ−Ｂｒｉｓｂａｎｅ−Ｔｏｒｏｎｔｏ，Ｗｉｌｅｙ−ｌｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ Ｐｕｂ．，３６３−４００；Ａｎｄｅｒｓｏｎ Ｃ．Ｊ．ら，（２００３）Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ｏｆ ｃｏｐｐｅｒ ｒａｄｉｏｎｕｃｌｅｉｄｅｓ ａｎｄ ｒａｄｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ ｐｒｏｄｕｃｔｓ，Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ−Ｒａｄｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ（Ｗｅｌｃｈ ＭＪ，Ｒｅｄｖａｎｌｙ ＣＳ Ｅｄｓ．），Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ−Ｃｈｉｃｈｅｓｔｅｒ−Ｂｒｉｓｂａｎｅ−Ｔｏｒｏｎｔｏ，Ｗｉｌｅｙ−ｌｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ Ｐｕｂ．，４０１−４２２；Ｍａｈｍｏｏｄ Ａ．ら，（２００３）Ｔｅｃｈｎｅｔｉｕｍ ｒａｄｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ−Ｒａｄｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ（Ｗｅｌｃｈ ＭＪ，Ｒｅｄｖａｎｌｙ ＣＳ Ｅｄｓ．），Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ−Ｃｈｉｃｈｅｓｔｅｒ−Ｂｒｉｓｂａｎｅ−Ｔｏｒｏｎｔｏ，Ｗｉｌｅｙ−ｌｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ Ｐｕｂ．，３２３−３６２）。
【００２７】
フッ素−１８原子（または、臭素−７６、ヨウ素−１２３またはヨウ素−１２４）の直接付加は、例えば３−フェニル及び／またはピリダジノ［４，５−ｂ］インドール芳香族環上で、並びに他の化学的に接近し得る位置（例えば、アセトアミド官能基）上で実施され得る。これらの放射性ハロゲンの（例えば、スペーサー基の使用を介する）間接付加、または上に挙げた金属放射活性放射性同位元素（キレート化剤の使用を介するガリウム−６８、銅−６４またはテクネチウム−９９ｍ）の付加はＮ，Ｎ，５−トリメチル−４−オキソ−３−フェニル−３，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピリダジノ［４，５−ｂ］インドール−１−アセトアミド（Ａ）コアの化学的に接近可能な位置でも実施され得る（上に挙げた参考文献を参照されたい）。
【００２８】
投与：放射標識されているバイオマーカーの投与は好ましくは静脈内投与ルートによる。
【００２９】
第１実施形態は、放射標識されている７−クロロ−Ｎ，Ｎ，５−トリメチル−４−オキソ−３−フェニル−３，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピリダジノ［４，５−ｂ］インドール−１−アセトアミドの個人における病的状態に関連するＰＢＲ（末梢ベンゾジアゼピン受容体）レベル及び炎症を検出するためのバイオマーカーとしての使用であり、前記放射標識は炭素−１１、放射性ハロゲン及び放射性金属の中から選択される。好ましくは、前記化合物は炭素−１１で放射標識されており、より好ましくはインドール核の５位に位置しているメチル基の炭素上で炭素−１１で放射標識されている。
【００３０】
別の実施形態では、７−クロロ−Ｎ，Ｎ，５−トリメチル−４−オキソ−３−フェニル−３，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピリダジノ［４，５−ｂ］インドール−１−アセトアミドは、優先的にフェニル環のパラ位で、塩素原子に代えて（場合によりスベーサーを用いて、下記参照）ピリダジノ［４，５−ｂ］インドールの７位で、またはＮ−メチル位（Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド官能基またはインドール核の５位に位置しているメチル基）で放射性金属で放射標識されている。
【００３１】
別の実施形態では、７−クロロ−Ｎ，Ｎ，５−トリメチル−４−オキソ−３−フェニル−３，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピリダジノ［４，５−ｂ］インドール−１−アセトアミドは、優先的にフェニル環のパラ位で、塩素原子に代えて（場合によりスベーサーを用いて、下記参照）ピリダジノ［４，５−ｂ］インドールの７位で、またはＮ−メチル位（Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド官能基またはインドール核の５位に位置しているメチル基）で放射性金属で放射標識されている。
【００３２】
幾つかの実施形態では、ＰＢＲレベル及び炎症の検出はＰＥＴイメージング（陽電子放射断層撮影法）またはＳＰＥＣＴイメージング（単一光子放射型コンピュータ断層撮影法）により実施される。
【００３３】
本発明の幾つかの実施形態では、放射標識形態の７−クロロ−Ｎ，Ｎ，５−トリメチル−４−オキソ−３−フェニル−３，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピリダジノ［４，５−ｂ］インドール−１−アセトアミドが病的状態に関連するＰＢＲレベルの変化及び炎症を検出するためのバイオマーカーとして使用され、前記病的状態は脳損傷、例えば卒中、虚血再灌流障害及び外傷性脳損傷；脳感染、例えば脳炎；神経疾患、例えば多発性硬化症、アルツハイマー病、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症、認知症、大脳皮質基底核変性症、ハンチントン病及びてんかん；精神病、例えば統合失調症；末梢炎症プロセス、例えば肺炎症、アテローム性動脈硬化症、心虚血、腎虚血、リウマチ（線維筋痛）、乾癬性関節炎、関節リウマチ及び骨関節症；増殖性疾患、例えば癌から選択される。
【００３４】
本発明の幾つかの実施形態では、放射標識形態の７−クロロ−Ｎ，Ｎ，５−トリメチル−４−オキソ−３−フェニル−３，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピリダジノ［４，５−ｂ］インドール−１−アセトアミドがＰＢＲレベル及び炎症のバイオマーカーとして使用され、前記炎症は神経炎症である。
【００３５】
本発明の幾つかの実施形態では、放射標識形態の７−クロロ−Ｎ，Ｎ，５−トリメチル−４−オキソ−３−フェニル−３，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピリダジノ［４，５−ｂ］インドール−１−アセトアミドが治療処置の有効性を評価するために使用される。
【００３６】
本発明は、放射標識形態の７−クロロ−Ｎ，Ｎ，５−トリメチル−４−オキソ−３−フェニル−３，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピリダジノ［４，５−ｂ］インドール−１−アセトアミドを用いる病的状態に関連するＰＢＲ及び炎症の検出方法にも関する。
【００３７】
幾つかの実施形態では、放射標識形態の７−クロロ−Ｎ，Ｎ，５−トリメチル−４−オキソ−３−フェニル−３，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピリダジノ［４，５−ｂ］インドール−１−アセトアミドは炭素−１１、放射性ハロゲン及び放射性金属の中から選択される放射標識を含有している。幾つかの実施形態では、放射標識形態の７−クロロ−Ｎ，Ｎ，５−トリメチル−４−オキソ−３−フェニル−３，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピリダジノ［４，５−ｂ］インドール−１−アセトアミドは炭素−１１で標識されている。
【００３８】
幾つかの実施形態では、放射標識形態の７−クロロ−Ｎ，Ｎ，５−トリメチル−４−オキソ−３−フェニル−３，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピリダジノ［４，５−ｂ］インドール−１−アセトアミドはインドール核の５位に位置しているメチル基の炭素上で放射標識されている。
【００３９】
幾つかの実施形態では、７−クロロ−Ｎ，Ｎ，５−トリメチル−４−オキソ−３−フェニル−３，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピリダジノ［４，５−ｂ］インドール−１−アセトアミドは優先的にはフェニル環のパラ位で、塩素原子に代えて（場合によりスベーサーを用いて、下記参照）ピリダジノ［４，５−ｂ］インドールの７位で、またはＮ−メチル位（Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド官能基またはインドール核の５位に位置しているメチル基）で放射性金属で放射標識されている。
【００４０】
幾つかの実施形態では７−クロロ−Ｎ，Ｎ，５−トリメチル−４−オキソ−３−フェニル−３，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピリダジノ［４，５−ｂ］インドール−１−アセトアミドは優先的には３−フェニル環のパラ位で、塩素原子に代えて（場合によりスベーサーを用いて、下記参照）ピリダジノ［４，５−ｂ］インドールの７位で、またはＮ−メチル位（Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド官能基またはインドール核の５位に位置しているメチル基）で放射性ハロゲン、好ましくは放射性ハロゲンフッ素−１８で放射標識されている。
【００４１】
本発明の幾つかの実施形態では、病的状態は脳損傷、例えば卒中、虚血再灌流障害、外傷性脳損傷；脳感染、例えば脳炎；神経疾患、例えば多発性硬化症、アルツハイマー病，パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症、認知症、大脳皮質基底核変性症，ハンチントン病及びてんかん；精神病、例えば統合失調症；末梢炎症プロセス、例えば肺炎症、アテローム性動脈硬化症、心虚血、腎虚血、リウマチ（線維筋痛）、乾癬性関節炎、関節リウマチ及び骨関節症；増殖性疾患、例えば癌から選択される。
【００４２】
本発明の別の実施形態は、病的状態に関連するＰＢＲ及び炎症の検出方法であり、前記炎症は神経炎症である。
【００４３】
本発明の別の実施形態は、占有率研究のために実施される病的状態に関連するＰＢＲ及び炎症の検出方法である。
【００４４】
別の実施形態は、病的状態に関連するＰＢＲ及び炎症の検出方法であり、前記方法は
ａ）放射標識形態の７−クロロ−Ｎ，Ｎ，５−トリメチル−４−オキソ−３−フェニル−３，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピリダジノ［４，５−ｂ］インドール−１−アセトアミドを投与するステップ；
ｂ）ＰＥＴ（または、ＳＰＥＣＴ）技術を用いて脳または他の末梢組織中の関心ある領域の画像を取得するステップ；
ｃ）この関心ある領域中の放射標識形態の７−クロロ−Ｎ，Ｎ，５−トリメチル−４−オキソ−３−フェニル−３，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピリダジノ［４，５−ｂ］インドール−１−アセトアミドに関連するＰＥＴシグナルを定量することによる前記関心ある領域中のＰＢＲのレベルを定量するステップ；
ｄ）ステップｃ）で得たＰＥＴ（ＳＰＥＣＴ）シグナルを関心ある対照領域で得たシグナルと比較するステップ；
ｅ）病的状態に関連する炎症の存在を調べるステップ；
を含む。
【００４５】
本発明は、放射標識形態の７−クロロ−Ｎ，Ｎ，５−トリメチル−４−オキソ−３−フェニル−３，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピリダジノ［４，５−ｂ］インドール−１−アセトアミドを含む正常状態に関連するＰＢＲレベル及び病的状態に関連するＰＢＲレベルの変化を検出するための診断キットにも関する。
【００４６】
下記実施例により本発明を更に説明するが、これらは本発明を限定すると意図されない。便宜上の理由且つ読みやすくするために、化合物７−クロロ−Ｎ，Ｎ，５−トリメチル−４−オキソ−３−フェニル−３，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピリダジノ［４，５−ｂ］インドール−１−アセトアミドを図面及び結果中では「Ａ」と改名する。
【図面の簡単な説明】
【００４７】
【図１】病変及び無傷のラット線条体における［１１Ｃ］−Ａ及び［１１Ｃ］ＰＫ１１１９５の時間−放射能曲線。データを注射後時間（分）の関数としてのｃｍ３あたりの注射用量の％として表す。
【図２】病変対無傷対側のラット線条体における［１１Ｃ］−Ａ及び［１１Ｃ］ＰＫ１１１９５取り込みの比。
【図３】病変（同側）及び無傷（対側）のラット線条体における［１１Ｃ］−Ａの時間−放射能曲線。矢印は、病変（同側＋ＰＫ）及び無傷対側（対側＋ＰＫ）のラット線条体における［１１Ｃ］−Ａ注射から２０分後の過剰の１ｍｇ／ｋｇのＰＫ１１１９５の添加を指す。データを注射後時間（分）の関数としてのｃｍ３あたりの注射用量の％として表す。
【図４】病変（同側Ａ）及び無傷（対側Ａ）のラット線条体における［１１Ｃ］−Ａの時間−放射能曲線。矢印は、病変（同側Ａ＋Ａ）及び無傷対側（対側Ａ＋Ａ）のラット線条体における［１１］−Ａの注射から２０分後の過剰の１ｍｇ／ｋｇのＡの添加を指す。データを注射後時間（分）の関数としてのｃｍ３あたりの注射用量の％として表す。
【図５】病変後７〜８日目のラット脳切片（２０μｍ）の［１１Ｃ］−Ａ（１８ｎＭ）オートラジオグラフィー。非特異的結合を過剰の非標識ＰＫ１１１９５（２３μＭ）またはＡ（２２μＭ）を用いて評価した。ＰＢＲ対中枢ベンゾジアゼピン結合部位に対する特異性は過剰の非標識フルマゼニル（２７μＭ）を用いて評価した。データを任意面積単位あたりのｄｐｍとして表す。＊は病変線条体における［１１Ｃ］−Ａ（１８ｎＭ）結合に対する有意な差を示す。
【図６】１１〜１２ヶ月齢ＡＰＰ／Ｓ１及び野生型ＰＳ１トランスジェニックマウスの全脳（小脳を除く）における［１１Ｃ］−Ａ及び［１１Ｃ］ＰＫ１１１９５の時間−放射能曲線。データは注射後時間（分）の関数としてのｃｍ３あたりの注射用量の％として表す。
【図７】２０〜２３ヶ月齢のＡＰＰ／ＰＳ１及び野生型ＰＳ１トランスジェニックマウス由来の全脳切片における［１１Ｃ］−Ａ（１８ｎＭ）オートラジオグラフィー。非特異的結合は過剰の非標識ＰＫ１１１９５（２３μＭ）またはＡ（２２μＭ）を用いて評価した。ＰＢＲ対中枢ベンゾジアゼピン結合部位に対する特異性は過剰の非標識フルマゼニル（２７μＭ）を用いて評価した。データを任意面積単位あたりのｄｐｍとして表す。
【図８】研究の異なる時点、すなわち基準時（Ａ、Ｂ）及び右線条体の病変から２４時間後（Ｃ、Ｄ）の非ヒト霊長類の４つの異なる脳領域（右及び左の線条体、前頭前野皮質、小脳）における［１１Ｃ］−Ａの時間−放射能曲線、並びに１２０分にわたる特定の冠状脳切片の対応するＰＥＴ加重画像。パネル（Ｅ、Ｆ）は左線条体の病変から４８時間後及び右線条体の病変から７ヶ月後の［１１Ｃ］−Ａ時間−放射能曲線を示す。データは注射後時間（分）の関数としての１００ｍＬあたりの注射用量の％（％ＩＤ／１００ｍＬ）として表す。
【図９】研究の４つの異なる時点、すなわち基準時（Ａ、Ｂ）、病変から４８時間後（Ｃ、Ｄ）、病変から９日後（Ｅ、Ｆ）、並びに左線条体の病変から１６日後及び右線条体の病変から４８時間後（Ｇ、Ｈ）の４つの異なる脳領域（右及び左の線条体、前頭前野皮質、小脳）における［１１Ｃ］−Ａの時間−放射能曲線、並びに１２０分にわたる特定の冠状脳切片の対応するＰＥＴ加重画像。矢印は、過剰の非標識ＰＫ１１１９５（１ｍｇ／ｋｇ）の投与時間を指す。データは注射後時間（分）の関数としての１００ｍＬあたりの注射用量の％として表す。
【図１０】血漿及び脳中の［１１Ｃ］−Ａ代謝産物の分析。
【図１１】Ａの特定の炭素−１１−標識及びフッ素−１８−標識形態。
【発明を実施するための形態】
【００４８】
方法
リガンドの放射合成
炭素−１１での標識
［１１Ｃ］ＰＫ１１１９５（（Ｒ）−Ｎ−［１１Ｃ］メチル−Ｎ−（１−メチルプロピル）−１−（２−クロロフェニル）イソキノリン−３−カルボキサミド，Ｒ−エナンチオマー）
［１１Ｃ］ＰＫ１１１９５の製造は公開方法（Ｃａｍｓｏｎｎｅ Ｃ．ら，（１９８４）Ｊ．Ｌａｂｅｌ．Ｃｏｍｐ．Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍ．，２１：９８５−９９１；Ｃｒｅｍｅｒ Ｊ．Ｅ．ら，（１９９２）Ｉｎｔ．Ｊ．Ｒａｄ．Ａｐｐｌ．Ｉｎｓｔｒｕｍ．Ｂ．１９：１５９−６６；Ｂｏｕｔｉｎ，Ｈ．ら，（２００７）Ｇｌｉａ，５５：１４５９−６８；Ｂｏｕｔｉｎ，Ｈ．ら，（２００７）Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．，４８：５７３−５８１）の僅かな修飾に基づいており、（１）−１０℃でヨウ化［１１Ｃ］メチルを１．５〜２．０ｍｇの標識用前駆体及び１５〜２０ｍｇの粉末状水酸化物（過剰）を含有するＤＭＦ／ＤＭＳＯ（２／１（ｖ：ｖ），３００μＬ）中にトラップするステップ；（２）１１０℃で３分間加熱するステップ；（３）混合物を０．５ｍＬのＨＰＬＣ移動相に取るステップ；及び（４）半分取ＨＰＬＣを用いて精製するステップ；を含む。品質コントロール、特に放射性化学的及び化学的純度の測定は最終産物バッチのアリコートに対して実施した。
【００４９】
［１１Ｃ］−Ａ（Ｎ−メチルインドール官能基での標識：７−クロロ−Ｎ，Ｎ−ジメチル−５−［１１Ｃ］メチル−４−オキソ−３−フェニル−３，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピリダジノ［４，５−ｂ］インドール−１−アセトアミド）
［１１Ｃ］−Ａの製造は、（１）−１０℃で［１１Ｃ］メチルトリフレートを０．２〜０．３ｍｇの標識用前駆体及び４ｍｇの粉末状炭酸カリウム（過剰）を含有するＤＭＦ（３００μＬ）中にトラップするステップ；（２）１２０℃で３分間加熱するステップ；（３）混合物を０．５ｍＬのＨＰＬＣ移動相に取るステップ；及び（４）半分取ＨＰＬＣを用いて精製するステップ；を含む。品質コントロール、特に放射性化学的及び化学的純度の測定は最終産物バッチのアリコートに対して実施した。
【００５０】
［１１Ｃ］−Ａ（Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド官能基での標識：７−クロロ−Ｎ−［１１Ｃ］メチル−Ｎ，５−ジメチル−４−オキソ−３−フェニル−３，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピリダジノ［４，５−ｂ］インドール−１−アセトアミド）
［１１Ｃ］−Ａの製造は、（１）−１０℃でヨウ化［１１Ｃ］メチルを０．５〜１．０ｍｇの標識用前駆体及び５μＬのメタノール中１Ｍ 水酸化テトラブチルアンモニウム溶液を含有するＤＭＦとＤＭＳＯの１／２（ｖ：ｖ）混合物（１００／２００μＬ）中にトラップするステップ；（２）１２０℃で３分間加熱するステップ；（３）混合物を０．５ｍＬのＨＰＬＣ移動相に取るステップ；及び（４）半分取ＨＰＬＣを用いて精製するステップ；をも含む。品質コントロール、特に放射性化学的及び化学的純度の測定は最終産物バッチのアリコートに対して実施した。
【００５１】
フッ素−１８での標識
Ａのフッ素−１８標識誘導体のすべての製造は、少なくとも（１）１〜１０ｍｇの適当な標識用前駆体を含有する特定溶媒（３００〜９００μＬ）中で中〜高温で［１８Ｆ］フッ素源を用いてフッ素化するステップ；及び（２）例えば半分取ＨＰＬＣを用いて精製するステップ；を含む。上記したように、品質コントロール、特に放射性化学的及び化学的純度の測定は最終産物バッチのアリコートに対して実施した。
【００５２】
この反応において使用される［１８Ｆ］フッ素アニオンの源の種類は特に限定されず、分子の他の部分に悪影響を持たない限り、このタイプの反応において慣用されている［１８Ｆ］フッ素アニオンの源が本発明において等しく使用され得る。［１８Ｆ］フッ素アニオンの適当な源の例には、［１８Ｆ］フッ化アルカリ金属、例えば［１８Ｆ］フッ化ナトリウム、［１８Ｆ］フッ化カリウム、［１８Ｆ］フッ化セシウム；［１８Ｆ］フッ化アンモニウム、［１８Ｆ］フッ化テトラアルキルアンモニウム、例えば［１８Ｆ］フッ化テトラブチルアンモニウムが含まれる。これらの中で、［１８Ｆ］フッ化アルカリ金属、特にフッ化カリウムが好ましい。［１８Ｆ］フッ素アニオンの源の対カチオン種と複合体形成し得るリガンドの存在下で［１８Ｆ］フッ素アニオンの源を活性化してもよい。リガンドは特に単環式または多環式多座配位リガンドであり得る。適当なリガンドの例には、特にクラウンエーテル、例えば１，４，７，１０，１３−ペンタオキサシクロオクタデカン（１８−Ｃ−６）；またはクリプタンド、例えばＫ２２２（登録商標）の商品名で販売されている４，７，１３，１６，２１，２４−ヘキサオキサ−１，１０−ジアザビシクロ−［８，８，８］ヘキサコサンが含まれる。好ましくは、［１８Ｆ］フッ素アニオンの源は［１８Ｆ］フッ化アルカリ金属−クリプテート複合体、特に［１８Ｆ］フッ化カリウム−クリプテート複合体、好ましくは［１８Ｆ］フッ化カリウム−４，７，１３，１６，２１，２４−ヘキサオキサ−１，１０−ジアザビシクロ−［８，８，８］ヘキサコサン（Ｋ［１８Ｆ］／Ｋ２２２）である。複合体Ｋ［１８Ｆ］／Ｋ２２２（登録商標）は慣用方法（Ｄｏｌｌｅ Ｆ．ら，（１９９９）Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，４２：２２５１−２２５９またはＤｏｌｃｉ Ｌ．ら，（１９９９）Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，７：４６７−４７９）により製造され得る。
【００５３】
フッ素化反応は各種溶媒中で実施され得、広範囲の温度で起こり得る。通常、反応を約５０〜約２００℃の温度で実施することが好都合であり、よりしばしば使用されている溶媒はジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）及びアセトニトリルである。反応に要する時間は、多くの要因、特に反応温度、試薬及び溶媒の種類、並びに使用する標識用前駆体の量に依存して広範囲で異なり得る（例えば、約５〜１５分）（Ｋｉｌｂｏｕｒｎ ＭＲ．（１９９０）Ｆｌｕｏｒｉｎｅ−１８ Ｌａｂｅｌｉｎｇ ｏｆ Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｎｕｃｌｅａｒ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｓｅｒｉｅｓ（Ｋｉｌｂｏｕｒｎ ＭＲ Ｅｄ．），Ｎａｔｉｏｎａｌ Ａｃａｄｅｍｙ Ｐｒｅｓｓ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｄ．Ｃ，１−１４９；Ｌａｓｎｅ Ｍ．−Ｃ．ら，（２００２）Ｔｏｐｉｃｓ ｉｎ Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２２２：２０１−２５８；Ｄｏｌｌｅ Ｆ．ら，（２００５）Ｃｕｒｒ．Ｐｈａｒｍ．Ｄｅｓｉｇｎ，１１：３２２１−３２３５；Ｃａｉ Ｌ．ら，（２００８）Ｅｕｒ．Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，１７：２８５３−２８７３；Ｄｏｌｌｅ Ｆ．ら，（２００８）Ｆｌｕｏｒｉｎｅ ａｎｄ Ｈｅａｌｔｈ：Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｉｍａｇｉｎｇ，Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ Ｍａｔｅｒｉａｌｓ ａｎｄ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｔｒｅｓｓａｕｄ Ａ，Ｈａｕｆｅ Ｇ（Ｅｄｓ）．Ｅｌｓｅｖｉｅｒ：Ａｍｓｔｅｒｄａｍ−Ｂｏｓｔｏｎ−Ｈｅｉｄｅｌｂｅｒｇ−Ｌｏｎｄｏｎ−Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ−Ｏｘｆｏｒｄ−Ｐａｒｉｓ−Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ−Ｓａｎ Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ−Ｓｉｎｇａｐｏｒｅ−Ｓｙｄｎｅｙ−Ｔｏｋｙｏ，３−６５）。こうして製造した放射性フッ素化化合物は通常炭素−１１−標識誘導体について記載したようにＨＰＬＣにより精製され得るが、反応混合物から他の公知のクロマトグラフィー技術を用いて、または単に前充填した分離カラムを用いて濾過することにより回収または精製してもよい。
【００５４】
［１８Ｆ］フルオロエトキシ−Ａ（７−クロロ−Ｎ，Ｎ，５−トリメチル−４−オキソ−３−（４−［１８Ｆ］フルオロエトキシ）−フェニル−３，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピリダジノ［４，５−ｂ］インドール−１−アセトアミド）
［１８Ｆ］フルオロエトキシ−Ａの製造は、（１）Ｋ［１８Ｆ］Ｆ−Ｋｒｙｐｔｏｆｉｘ（登録商標）２２２複合体を標識用トシルオキシ前駆体（２．０〜８．０ｍｇ）を含有するＤＭＳＯ溶液（６００μＬ）中に取るステップ；（２）１６５℃で３〜１０分間加熱するステップ；（３）Ｃ−８またはＣ−１８ ＰｒｅｐＳｅｐカートリッジを用いて予備精製するステップ；及び（４）半分取ＨＰＬＣを用いて精製するステップ；を含む。品質コントロール、特に放射性化学的及び化学的純度の測定は最終産物バッチのアリコートに対して実施した。
【００５５】
他のハロゲン（臭素−７６、ヨウ素−１２３、ヨウ素−１２４）での標識
すべての他の放射性ハロゲン化誘導体（臭素−７６、ヨウ素−１２３、ヨウ素−１２４）の製造は当業者に公知の標準技術及び手順に従った（Ｍａｚｉｅｒｅ Ｂ．ら，（２００１）Ｃｕｒｒ．Ｐｈａｒｍ．Ｄｅｓ．，７：１９３１−１９４３；Ｃｏｅｎｅｎ Ｈ．Ｈ．ら，（２００６）Ｒａｄｉｏｉｏｄｉｎａｔｉｏｎ ｒｅａｃｔｉｏｎｓ ｆｏｒ ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ−Ｃｏｍｐｅｎｄｉｕｍ ｆｏｒ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｓｔｒａｔｅｇｉｅｓ，Ｃｏｅｎｅｎ Ｈ．Ｈ．，Ｍｅｒｔｅｎｓ Ｊ．，Ｍａｚｉｅｒｅ Ｂ．（Ｅｄｓ），Ｓｐｒｉｎｇｅｒ Ｖｅｒｌａｇ，Ｂｅｒｌｉｎ−Ｈｅｉｄｅｌｂｅｒｇ，１−１０１）。
【００５６】
放射性金属（ガリウム−６８、銅−６４及びテクネチウム−９９ｍ）での標識
放射性金属（ガリウム−６８、銅−６４及びテクネチウム−９９ｍ）で標識されている誘導体の製造も当業者に公知の標準技術及び手順に従った（Ｂｒｕｎｎｅｒ Ｕ．Ｋ．ら，（１９９５）Ｒａｄｉｏｔｒａｃｅｒ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ−Ｒａｄｉｏｍｅｔａｌｓ ａｎｄ ｔｈｅｉｒ ｃｈｅｌａｔｅｓ，Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅ ｏｆ Ｎｕｃｌｅａｒ Ｍｅｄｅｃｉｎｅ，Ｗａｇｎｅｒ Ｈ．Ｎ．（Ｅｄ），Ｓａｕｎｄｅｒｓ：Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，２２０−２２８；Ｗｅｉｎｅｒ Ｒ．Ｅ．ら，（２００３）Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ｏｆ ｇａｌｌｉｕｍ ａｎｄ ｉｎｄｉｕｍ ｒａｄｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ−Ｒａｄｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ（Ｗｅｌｃｈ ＭＪ，Ｒｅｄｖａｎｌｙ ＣＳ Ｅｄｓ．），Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ−Ｃｈｉｃｈｅｓｔｅｒ−Ｂｒｉｓｂａｎｅ−Ｔｏｒｏｎｔｏ，Ｗｉｌｅｙ−ｌｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ Ｐｕｂ．，３６３−４００；Ａｎｄｅｒｓｏｎ Ｃ．Ｊ．ら，（２００３）Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ｏｆ ｃｏｐｐｅｒ ｒａｄｉｏｎｕｃｌｅｉｄｅｓ ａｎｄ ｒａｄｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ ｐｒｏｄｕｃｔｓ，Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ−Ｒａｄｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ（Ｗｅｌｃｈ ＭＪ，Ｒｅｄｖａｎｌｙ ＣＳ Ｅｄｓ．），Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ−Ｃｈｉｃｈｅｓｔｅｒ−Ｂｒｉｓｂａｎｅ−Ｔｏｒｏｎｔｏ，Ｗｉｌｅｙ−ｌｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ Ｐｕｂ．，４０１−４２２；Ｍａｈｍｏｏｄ Ａ．ら，（２００３）Ｔｅｃｈｎｅｔｉｕｍ ｒａｄｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ−Ｒａｄｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ（Ｗｅｌｃｈ ＭＪ，Ｒｅｄｖａｎｌｙ ＣＳ Ｅｄｓ．），Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ−Ｃｈｉｃｈｅｓｔｅｒ−Ｂｒｉｓｂａｎｅ−Ｔｏｒｏｎｔｏ，Ｗｉｌｅｙ−ｌｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ Ｐｕｂ．，３２３−３６２）。
【００５７】
製剤化
［１１Ｃ］ＰＫ１１１９５、［１１Ｃ］−Ａまたは他の放射標識されているＡ誘導体の注射用ｉ．ｖ．液剤としての製剤化は、しばしばＨＰＬＣ溶媒のＷａｔｅｒｓ ＳｅｐＰａｋ（登録商標）カートリッジを用いる除去及び／または１０％以下のエタノール濃度までの水性０．９％ ＮａＣｌ（生理食塩水）での単なる希釈を含む。
【００５８】
動物モデル
研究はすべてフランス法律及び欧州指令に従って実施した。
【００５９】
神経炎症のラットモデル
Ｗｉｓｔａｒラット（平均体重３００ｇ，フランスのｃｅｎｔｒｅ ｄ’Ｅｌｅｖａｇｅ Ｒｅｎｅ Ｊａｎｖｉｅｒ）を温度調節されている湿度管理施設に１２時間／１２時間の明／暗サイクル（午前７時から午後７時まで点灯）で収容し、餌及び水は自由に摂取させた。既報（Ｂｏｕｔｉｎ，Ｈ．ら，（２００７）Ｇｌｉａ ５５：１４５９−６８；Ｂｏｕｔｉｎ，Ｈ．ら，（２００７）Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．，４８：５７３−５８１）のように、ＡＭＰＡ（α−アミノ−３−ヒドロキシ−５−メチル−４−イソオキサゾールプロピオネート）（ＰＢＳ緩衝液中１５ｍＭ，Ｓｉｇｍａ（登録商標））を１μＬ マイクロシリンジ及びマイクロポンプ（注射速度：０．５μＬ／分，ＵｌｔｒａＭｉｃｒｏＰｕｍｐ ＩＩ（登録商標）及びＭｉｃｒｏ４（登録商標）コントローラー，ＷＰＩ Ｉｎｃ．，ＵＳＡ）を用いて定位的注射することにより神経炎症を誘発させた。ＡＭＰＡ（０．５μＬ）を右線条体（ブレグマ＋０．７ｍｍ，矢状縫合から：２．７ｍｍ，脳表面からの深さ：５．５ｍｍ）に注射した。動物は、加熱ブランケット（Ｈｏｍｅｏｔｈｅｒｍｉｃ Ｂｌａｎｋｅｔ Ｃｏｎｔｒｏｌ Ｕｎｉｔ，Ｈａｒｖａｒｄ Ａｐｐａｒａｔｕｓ Ｌｉｍｉｔｅｄ（登録商標），英国ケント州エデンブリッジに所在）を用いて手術中正常体温（体温：３６．７±０．５℃，平均±ＳＤ）を維持した。
【００６０】
神経炎症の霊長類モデル
体重４〜５ｋｇのカニクイザル（Ｍａｃａｃａ ｆａｓｃｉｃｕｌａｒｉｓ）を温度調節されている湿度管理施設に１２時間／１２時間の明／暗サイクル（午前７時から午後７時まで点灯）で収容し、餌及び水は自由に摂取させた。キノリン酸（キノリン酸，ミズーリ州セントルイスに所在のＳｉｇｍａ；０．１Ｍ ＰＢＳ（ｐＨ７．２）中に溶解）を霊長類の線条体に（１つの注射部位は尾状核に、２つの注射部位は被殻に）２つの異なる手術介入の間に、すなわちキノリン酸を１日目に１つの半球に注射し、２週間または７ヶ月後に第２半球に局所定位的注射することにより神経炎症を誘発させた（図８及び９）。各手術の間、動物には６０ナノモルのキノリン酸を２６ゲージ針に取り付けた１０μＬ−Ｈａｍｉｌｔｏｎ注射器を用いて３つの異なる線条体部位に（１つの尾状核部位に５μｌ及び２つの被殻部位に１０μＬ）分布させるように与えた。Ｓｗａｂｏ ａｎｄ Ｃｏｗａｎ（１９８４）の定位的アトラスに従って測定した定期的座標は次の通りであった：尾状核部位［ＡＰ：＋１９ｍｍ，ＭＬ：±６ｍｍ，ＤＶ：洞から−１４ｍｍ］；被殻部位１［ＡＰ：＋１９ｍｍ，ＭＬ：±１２ｍｍ，ＤＶ：定位固定ゼロから−１７ｍｍ］；被殻部位２［ＡＰ：＋１７ｍｍ，ＭＬ：±１３ｍｍ，ＤＶ：洞から−１６ｍｍ］。興奮性毒素を０．１μＬ／分の速度で注射し、毒素の逆流を避けるために注射器を更に５分間適所に残した。手術中、霊長類の温度を正常体温（直腸温：３６±０．６℃，平均±ＳＤ）に維持した。針を除いた後、皮膚を縫合し、動物を麻酔から回復させ、完全に目覚めたらケージに戻した。
【００６１】
トランスジェニックマウス
１匹のＰＳ１Ｍ１４６Ｌ（ＰＳ１）及び２匹のＡＰＰ７５１ＳＬ×ＰＳ１Ｍ１４６Ｌ（ＡＰＰ×ＰＳ１）トランスジェニックマウスの作成及びキャラクタリゼーションは既報（Ｂｌａｎｃｈａｒｄ，Ｖ．ら，（２００３）Ｅｘｐ．Ｎｅｕｒｏｌ．，１８４：２４７−２６３）のように行った。これらの動物では、ＡＰＰがＴｈｙ−１プロモーターの制御下ですべての皮質ニューロンで高レベルで発現される。Ｍ１４６Ｌ突然変異を有するヒトＰＳ１はＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼプロモーターの制御下で発現される。アミロイド量のレベルは所与の年齢でかなり再現性であることが判明した。Ｓａｎｏｆｉ−Ａｖｅｎｔｉｓから提供された１匹のＰＳ１及び２匹のＡＰＰ×ＰＳ１マウスを１１〜１２ヶ月齢でＰＥＴイメージングのために、２０〜２３ヶ月齢でオートラジオグラフィーのために使用した。
【００６２】
マイクロＰＥＴスキャン及びデータ取得
ラット及びトランスジェニックマウス
ラット及び１１〜１２ヶ月齢のトランスジェニックマウスにおいてマイクロＰＥＴイメージングをＡＭＰＡ注射後７日目に実施した。マウス及びラットにおいて、イソフラン５％により麻酔を施し、その後７０％／３０％ ＮＯ２／Ｏ２混合物中２〜２．５％ イソフランにより維持した。ＰＥＴスキャンのために、ラットの頭部をＰＥＴ取得に適合する手製定位フレームに固定し、ラットを正常体温（直腸温：３６．７±０．５℃，平均±ＳＤ）に維持した。マウスを空気流を加熱し得る麻酔マスクを備えたベッドに置き、直腸温を恒温ブランケットコントロールユニットを用いてモニターした。すべてのイメージングプロトコルを［１１Ｃ］ＰＫ１１１９５または［１１Ｃ］−Ａを用いてＣｏｎｃｏｒｄｅ Ｆｏｃｕｓ ２２０ ＰＥＴスキャナーで実施した。
【００６３】
ラットの場合には、放射標識化合物及び非標識リガンドを２４ゲージカテーテルを用いて尾静脈に注射した。放射標識化合物はＰＥＴ取得の開始と同時に注射し、非標識化合物はラジオトレーサーを注射してから２０分後に注射した。ＰＥＴデータは８０分間取得した。マウス場合には、放射標識化合物をＰＥＴスキャン開始の直前に２８ゲージ針を用いて尾静脈に注射した。ＰＥＴデータは６０分間取得した。
【００６４】
霊長類
イメージングはキノリン酸注射の前またはその後のいろいろな時間（病変後２４時間後、４８時間後、９日後、１６日後及び７ヶ月後）に実施した。［１１Ｃ］−Ａを注射し、脳カイネティックスをＰＥＴにより９０分間追跡した。
【００６５】
ＰＥＴイメージングの１時間前に、ケタミン／キシラジン混合物（１５ｍｇ／ｋｇ／１．５ｍｇ／ｋｇ）を筋肉内注射することにより動物に麻酔をかけ、挿管した。次いで、カテーテルをラジオトレーサー注射のために伏在静脈に入れ、血液サンプリングのために大腿動脈に入れた。プロポフォール（Ｄｉｐｒｉｖａｎ（登録商標）１％；０．０５ｍｇ／ｋｇ／分）を静脈内注射することにより動物を麻酔状態に維持した。
【００６６】
動物を装置内に正しく配置するために、動物の頭部を手製定位フレームに固定した。ＰＥＴスキャンを９５個の接触面を同時に取得する高解像ＦｏｃｕｓマイクロＰＥＴ（テネシー州ノックスビルに所在のＣＴＩ−Ｓｉｅｍｅｎｓ）を用いて実施した。減衰を補正するために、まず透過スキャンを６８Ｇｅ回転ロッド源を用いて実施した。マカクに１９２．２９±３３．６７ＭＢｑの［１１Ｃ］−Ａを静脈内注射し、取得を９０分間実施した。ＰＥＴ取得はすべてリストモード（３Ｄモード）で実施し、イメージを以下の時間フレーム：（２５秒の４イメージ）＋（３０秒の４イメージ）＋（１分の２イメージ）＋（２分の５イメージ）＋（５分の３イメージ）＋（１０分の３イメージ）及び（１５分の１イメージ）を用いて再構築し、［１１Ｃ］−Ａの場合全部で９０分間であった。
【００６７】
イメージ分析
ＰＥＴイメージ分析はＡＳＩＰｒｏ ＶＭ（商標）（ＣＴＩ Ｃｏｎｃｏｒｄｅ Ｍｉｃｒｏｓｙｓｔｅｍｓ’Ａｎａｌｙｓｉｓ Ｔｏｏｌｓ ａｎｄ Ｓｙｓｔｅｍ Ｓｅｔｕｐ／Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ Ｔｏｏｌ）及びＢｒａｉｎｖｉｓａ／Ａｎａｔｏｍｉｓｔ（ｈｔｔｐ：／／ｂｒａｉｎｖｉｓａ．ｉｎｆｏ／）を用いて実施した。
【００６８】
ラット血液及び脳中の代謝産物分析
未処置のまたは手術した成体雄Ｗｉｓｔａｒラット（体重３００〜４００ｇ）の尾静脈に［１１Ｃ］−Ａをｉ．ｖ．注射した。１０，２０または３０分後に動物を殺した。血液サンプルを集め、遠心（５分間，３０００ｒｐｍ）することにより血漿を単離した。４００μＬの血清から４００μｌのアセトニトリルを添加することにより血漿タンパク質を沈降させた。遠心（５分間，３０００ｒｐｍ）後、上清をＨＰＬＣカラムに注入した。ラットの脳を除去し、半球を分離した。音波処理による均質化を半球あたり１ｍＬのアセトニトリル中で実施した。急速遠心後、上清をペレットから分離し、減圧下で濃縮した後、ＨＰＬＣに注入した（ＨＰＬＣ条件については放射化学の欄を参照されたい）。
【００６９】
オートラジオグラフィー
［１１Ｃ］−Ａオートラジオグラフィーは、ラット（病変後７〜８日）またはマウス（２０〜２３ヶ月齢）からの２０μｍ脳切片を用いて実施した。非特異的結合を過剰の非標識ＰＫ１１１９５またはＡのいずれかを用いて評価した。ＰＢＲ対中枢ベンゾジアゼピン結合部位に対する特異性は過剰の非標識フルマゼニルを用いて評価しした。切片をトリス緩衝液（ＴＲＩＺＭＡ ｐｒｅ−ｓｅｔ Ｃｒｙｓｔａｌｓ、Ｓｉｇｍａ（登録商標），ｐＨ７，４，４℃でＮａＣｌ １２０ｍＭを用いて５０ｍＭに調節）中で２０分間インキュベートした後、冷緩衝液で２分間２回濯ぎ、次いで冷蒸留水で直ぐに洗浄した。次いで、切片をホスフォイメージャースクリーンに直接接触させて置き、一晩露呈させた。オートラジオグラフをＩｍａｇｅＱｕａｎｔ（商標）ソフトウェアを用いて分析した。
【実施例１】
【００７０】
［１１Ｃ］ＰＫ１１１９５放射合成：
［１１Ｃ］ＰＫ１１１９５の最終ＨＰＬＣ精製を半分取Ｗａｔｅｒｓ Ｓｙｍｍｅｔｒｙ（登録商標）Ｃ−１８ ＨＰＬＣカラム（溶離液：水／アセトニトリル／ＴＦＡ：４０／６０／０．１［ｖ：ｖ：ｖ］；流速７ｍＬ／分）を用いて実施し、放射化学的に純粋な［１１Ｃ］ＰＫ１１１９５に対応するピーク（Ｒｔ：６．５〜７．０分）を集めた。典型的には、５５．５ＧＢｑの［１１Ｃ］ＣＯ２サイクロトロン生成バッチから出発して、約４．５〜５．０ＧＢｑの［１１Ｃ］ＰＫ１１１９５が３０分の放射合成（ＨＰＬＣ精製及び形成を含む）の範囲内で得られた。（Ｗａｔｅｒｓ Ｓｙｍｍｅｔｒｙ−Ｍ（登録商標）Ｃ−１８カラムを用いる分析ＨＰＬＣにより測定した）放射化学純度は９５％以上であり、（放射合成終了時の）比放射能は５０〜９０ＧＢｑ／μｍｏｌの範囲であった。
【実施例２】
【００７１】
［１１Ｃ］−Ａ放射合成（Ｎ−メチルインドール官能基での標識）：
［１１Ｃ］−Ａの最終ＨＰＬＣ精製を半分取Ｚｏｒｂａｘ（登録商標）ＳＢ−Ｃ−１８ ＨＰＬＣカラム（溶離液：０．９％ 水性ＮａＣｌ／ＥｔＯＨ／１Ｍ 水性リン酸緩衝液（ｐＨ２，３）：５０／５０／０．１［ｖ：ｖ：ｖ］；流速：６ｍＬ／分）を用いて実施し、放射化学的に純粋な［１１Ｃ］−Ａに対応するピーク（Ｒｔ：８．０〜８．５分）を集めた。典型的には、５５．５ＧＢｑの［１１Ｃ］ＣＯ２サイクロトロン生成バッチから出発して、約４．５〜６．０ＧＢｑの［１１Ｃ］−Ａが２５分の放射合成（ＨＰＬＣ精製及び形成を含む）の範囲内で得られた。（Ｗａｔｅｒｓ Ｓｙｍｍｅｔｒｙ−Ｍ（登録商標）Ｃ−１８カラムを用いる分析ＨＰＬＣにより測定した）放射化学純度は９５％以上であり、（放射合成終了時の）比放射能は５０〜９０ＧＢｑ／μｍｏｌの範囲であった。
【実施例３】
【００７２】
［１１Ｃ］−Ａ放射合成（Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド官能基での標識）：
［１１Ｃ］−Ａの最終ＨＰＬＣ精製を半分取ＳｙｍｍｅｔｒｙＰｒｅｐ（登録商標）Ｃ−１８ ＨＰＬＣカラム（溶離液：水／アセトニトリル／ＴＦＡ：５０／５０／０．１［ｖ：ｖ：ｖ］；流速：５ｍＬ／分）を用いて実施し、放射化学的に純粋な［１１Ｃ］−Ａに対応するピーク（Ｒｔ：８．０〜８．５分）を集めた。典型的には、５５．５ＧＢｑの［１１Ｃ］ＣＯ２サイクロトロン生成バッチから出発して、約３．５〜５．０ＧＢｑの［１１Ｃ］−Ａが２５分の放射合成（ＨＰＬＣ精製及び形成を含む）の範囲内で得られた。（Ｗａｔｅｒｓ Ｓｙｍｍｅｔｒｙ−Ｍ（登録商標）Ｃ−１８カラムを用いる分析ＨＰＬＣにより測定した）放射化学純度は９５％以上であり、（放射合成終了時の）比放射能は５０〜９０ＧＢｑ／μｍｏｌの範囲であった。
【実施例４】
【００７３】
ｉ）４−ヒドロキシ−Ａ合成：
４−ヒドロキシ−ＡはＷＯ ００／４４３８４に従って再合成され得る。Ｒｆ：０．１５（ＳｉＯ２−ＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ：９５／５ ｖ：ｖ））。１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ９．７１（ｓ，１Ｈ），７．９４（ｓ，１Ｈ），７．８６（ｄ，１Ｈ，Ｊ：８．４Ｈｚ），７．３９（ｄ，１Ｈ，Ｊ：８．４Ｈｚ），７．３２（ｄ，２Ｈ，Ｊ：８．８Ｈｚ），６．８４（ｄ，２Ｈ，Ｊ：８．８Ｈｚ），４．２７（ｓ，３Ｈ），４．２０（ｓ，２Ｈ），３．１６（ｓ，３Ｈ），２．８４（ｓ，３Ｈ）。１３Ｃ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ １６８．６［Ｃ］，１５７．１［Ｃ］，１５４．８［Ｃ］，１４１．２［Ｃ］，１４０．９［Ｃ］，１３３．６［Ｃ］，１３２．１［Ｃ］，１３０．９［Ｃ］，１２７．８［２．ＣＨ］，１２４．０［ＣＨ］，１２２．６［ＣＨ］，１１８．９［Ｃ］，１１７．３［Ｃ］，１１５．３［２．ＣＨ］，１１１．６［ＣＨ］，４０．０［ＣＨ２］，３７．４［ＣＨ３］，３５．４［ＣＨ３］，３２．０［ＣＨ３］。
【００７４】
ｉｉ）［１１Ｃ］メトキシ−Ａ放射合成：
炭素−１１での標識及び最終ＨＰＬＣ精製は、直ぐ上（実施例４ｉ）で合成したＡの４−ヒドロキシ誘導体を用いて［１１Ｃ］−Ａの製造について記載（実施例２／実施例３）されているように実施され得る。
【実施例５】
【００７５】
（フルオロ）アルコキシ−Ａ及びトシルオキシアルコキシ−Ａの合成のための一般的手順：
Ｋ２ＣＯ３（１０１ｍｇ，０．７３ｍｍｏｌ）を乾燥ＤＭＦ（８〜１２ｍＬ）中に含む懸濁液にＡの４−ヒドロキシ誘導体（１５０ｍｇ，０．３６ｍｍｏｌ，ＷＯ ００／４４３８４を参照されたい）を乾燥ＤＭＦ（２ｍＬ）中に含む溶液を添加する。反応混合物を室温で３０分間攪拌した後、適当なアルキル化試薬（２当量）をＤＭＦ（２ｍＬ）中に含む溶液を徐々に添加する。全混合物を７０℃で２時間攪拌し、室温で更に１時間攪拌する。次いで、飽和水性ＮＨ４Ｃｌ溶液を添加することにより混合物をクエンチし、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。有機層を合わせ、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮乾固した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液としてＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ ９８：２→９５：５ ｖ／ｖ）により精製して、予想される（フルオロ）アルコキシ−Ａを白色粉末または白色綿毛状固体として得た。
【実施例６】
【００７６】
メトキシ−Ａ合成：
ヨウ化メチルを使用し、上の一般的手順（実施例５）を用いて、標的化合物を４０％の収率で得た。Ｒｆ：０．３５（ＳｉＯ２−ＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ：９５／５ ｖ：ｖ））。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ ７．９４（ｄ，１Ｈ，Ｊ：８．４Ｈｚ），７．５３（ｍ，３Ｈ），７．３３（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ：８．４，１．６Ｈｚ），７．００（ｄ，２Ｈ，Ｊ：８．８Ｈｚ），４．３２（ｓ，３Ｈ），４．１８（ｓ，２Ｈ），３．８６（ｓ，３Ｈ），３．２２（ｓ，３Ｈ），３．００（ｓ，３Ｈ）。１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ １６８．４［Ｃ］，１５８．９［Ｃ］，１５５．３［Ｃ］，１４１．６［Ｃ］，１４０．１［Ｃ］，１３４．６［Ｃ］，１３３．２［Ｃ］，１３１．３［Ｃ］，１２７．３［２．ＣＨ］，１２３．３［ＣＨ］，１２３．０［ＣＨ］，１１９．０［Ｃ］，１１７．４［Ｃ］，１１３．９［２．ＣＨ］，１１０．６［ＣＨ］，５５．５［ＣＨ３］，３９．６［ＣＨ２］，３７．６［ＣＨ３］，３５．７［ＣＨ３］，３１．６［ＣＨ３］。
【実施例７】
【００７７】
フルオロエトキシ−Ａ合成：
（Ｄａｍｏｎｔ Ａ．ら，（２００８）Ｊ．Ｌａｂｅｌ．Ｃｏｍｐｄｓ Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍ．，５１：２８６−２９２に従って合成した）２−フルオロエチル−４−メチルベンゼンスルホネートを使用し、上の一般的手順（実施例５）を用いて、標的化合物を６３％の収率で得た。Ｒｆ：０．３８（ＳｉＯ２−ＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ：９５／５ ｖ：ｖ））。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ２Ｃｌ２）δ ７．８９（ｄ，１Ｈ，Ｊ：８．８Ｈｚ），７．５８（ｄ，１Ｈ，Ｊ：１．６Ｈｚ），７．５４（ｄ，２Ｈ，Ｊ：９．２Ｈｚ），７．３４（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ：８．８，１．６Ｈｚ），７．０３（ｄ，２Ｈ，Ｊ：９．２Ｈｚ），４．７８（ｄｔ，２Ｈ，Ｊ２Ｈ−Ｆ：４７．６，Ｊ３Ｈ−Ｈ：４．０Ｈｚ），４．３２（ｓ，３Ｈ），４．２７（ｄｔ，２Ｈ，Ｊ３Ｈ−Ｆ：２８．４Ｈｚ，Ｊ３Ｈ−Ｈ：４．０Ｈｚ），４．１６（ｓ，２Ｈ），３．１９（ｓ，３Ｈ），２．９６（ｓ，３Ｈ）。１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤ２Ｃｌ２）δ １６８．２［Ｃ］，１５７．６［Ｃ］，１５５．１［Ｃ］，１４１．３［Ｃ］，１４０．７［Ｃ］，１４０．３［Ｃ］，１３５．４［Ｃ］，１３２．８［Ｃ］，１２７．４［２．ＣＨ］，１２３．２［ＣＨ］，１２２．６［ＣＨ］，１１８．９［Ｃ］，１１７．２［Ｃ］，１１４．３［２．ＣＨ］，１１０．７［ＣＨ］，８２．０［ｄ，Ｊ１Ｃ−Ｆ：１６９Ｈｚ，ＣＨ２］，６７．５［ｄ，Ｊ２Ｃ−Ｆ：２０Ｈｚ，ＣＨ２］，３９．５［ＣＨ２］，３７．４［ＣＨ３］，３５．２［ＣＨ３］，３１．６［ＣＨ３］。分析 計算値（Ｃ２３Ｈ２２ＣｌＦＮ４Ｏ３・０．１５Ｈ２Ｏ）：Ｃ，６０．１１，Ｈ，４．８９，Ｎ，１２．１９；実測値：Ｃ，６０．００，Ｈ，４．９６，Ｎ，１２．１８。
【実施例８】
【００７８】
フルオロプロポキシ−Ａ合成：
３−フルオロプロピル−４−メチルベンゼンスルホネートを使用し、上の一般的手順（実施例５）を用いて、標的化合物を５８％の収率で得た。Ｒｆ：０．３９（ＳｉＯ２−ＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ：９５／５ ｖ：ｖ））。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ２Ｃｌ２）δ ７．８９（ｄ，１Ｈ，Ｊ：８．４Ｈｚ），７．５８（ｄ，１Ｈ，Ｊ：１．６Ｈｚ），７．５２（ｄ，２Ｈ，Ｊ：９．２Ｈｚ），７．３４（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ：８．４，１．６Ｈｚ），７．０１（ｄ，２Ｈ，Ｊ：９．２Ｈｚ），４．６７（ｄｔ，２Ｈ，Ｊ２Ｈ−Ｆ：４６．８Ｈｚ，Ｊ３Ｈ−Ｈ：６．０Ｈｚ），４．３１（ｓ，３Ｈ），４．１６（ｍ，４Ｈ），３．１９（ｓ，３Ｈ），２．９６（ｓ，３Ｈ），２．２０（ｄｑ５，２Ｈ，Ｊ３Ｈ−Ｆ：２６．０Ｈｚ，Ｊ３Ｈ−Ｈ：６．０）。１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤ２Ｃｌ２）δ １６８．２［Ｃ］，１５８．０［Ｃ］，１５５．１［Ｃ］，１４１．３［Ｃ］，１４０．３［Ｃ］，１３５．０［Ｃ］，１３２．８［Ｃ］，１３１．３［Ｃ］，１２７．３［２．ＣＨ］，１２３．２［ＣＨ］，１２２．５［ＣＨ］，１１９．０［Ｃ］，１１７．２［Ｃ］，１１４．２［２．ＣＨ］，１１０．７［ＣＨ］，８０．８［ｄ，Ｊ１Ｇ−Ｆ：１６３Ｈｚ，ＣＨ２］，６３．９［ｄ，Ｊ３Ｃ−Ｆ：６．０Ｈｚ，ＣＨ２］，３９．５［ＣＨ２］，３７．４［ＣＨ３］，３５．２［ＣＨ３］，３１．５［ＣＨ３］，３０．３［ＣＨ２，Ｊ２Ｃ−Ｆ：２０．０Ｈｚ］。
【実施例９】
【００７９】
フルオロブトキシ−Ａ合成：
４−フルオロブチルブロミドを使用し、上の一般的手順（実施例５）を用いて、標的化合物を７０％の収率で得た。Ｒｆ：０．４０（ＳｉＯ２−ＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ：９５／５ ｖ：ｖ））。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ２Ｃｌ２）δ ７．９０（ｄ，１Ｈ，Ｊ：８．８Ｈｚ），７．５８（ｄ，１Ｈ，Ｊ：１．６Ｈｚ），７．５１（ｄ，２Ｈ，Ｊ：９．２Ｈｚ），７．３４（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ：８．８，１．６Ｈｚ），６．９９（ｄ，２Ｈ，Ｊ：９．２Ｈｚ），４．５４（ｄｔ，２Ｈ，Ｊ２Ｈ−Ｆ：４７．２Ｈｚ，Ｊ３Ｈ−Ｈ：５．６Ｈｚ），４．３３（ｓ，３Ｈ），４．１６（ｓ，２Ｈ），４．０８（ｔ，２Ｈ，Ｊ：５．６Ｈｚ），３．１９（ｓ，３Ｈ），２．９６（ｓ，３Ｈ），１．９７−１．８５（ｍ，４Ｈ）。１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤ２Ｃｌ２）δ １６８．２［Ｃ］，１５８．２［Ｃ］，１５５．１［Ｃ］，１４１．３［Ｃ］，１４０．２［Ｃ］，１３４．９［Ｃ］，１３２．８［Ｃ］，１３１．４［Ｃ］，１２７．３［２．ＣＨ］，１２３．２［ＣＨ］，１２２．５［ＣＨ］，１１９．０［Ｃ］，１１７．２［Ｃ］，１１４．２［２．ＣＨ］，１１０．７［ＣＨ］，８３．８［ｄ，Ｊ１Ｃ−Ｆ：１６３Ｈｚ，ＣＨ２］，６７．６［ＣＨ２］，３９．５［ＣＨ２］，３７．４［ＣＨ３］，３５．２［ＣＨ３］，３１．５［ＣＨ３］，２７．１［ＣＨ２，Ｊ２Ｃ−Ｆ：２０．０Ｈｚ］，２５．１［ＣＨ２，Ｊ３Ｃ−Ｆ：５．０Ｈｚ］。
【実施例１０】
【００８０】
２−（フルオロエトキシ）エトキシ−Ａ合成：
２−（２−フルオロエトキシ）エチル−４−メチルベンゼンスルホネートを使用し、上の一般的手順（実施例５）を用いて、標的化合物を６９％の収率で得た。Ｒｆ：０．４５（ＳｉＯ２−ＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２／アセトン：８０／２０ ｖ：ｖ））。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ２Ｃｌ２）δ ７．９１（ｄ，１Ｈ，Ｊ：８．４Ｈｚ），７．６０（ｄ，１Ｈ，Ｊ：１．６Ｈｚ），７．５４（ｄ，２Ｈ，Ｊ：８．８Ｈｚ），７．３６（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ：８．４，１．６Ｈｚ），７．０４（ｄ，２Ｈ，Ｊ：８．８Ｈｚ），４．６１（ｄｔ，２Ｈ，Ｊ２Ｈ−Ｆ：４８．０Ｈｚ，Ｊ３Ｈ−Ｈ：４．０Ｈｚ），４．３４（ｓ，３Ｈ），４．２２（ｔ，２Ｈ，Ｊ：４．８Ｈｚ），４．１７（ｓ，２Ｈ），３．９１（ｔ，２Ｈ，Ｊ：４．８Ｈｚ），３．８３（ｄｔ，２Ｈ，Ｊ３Ｈ−Ｆ：３０．０，Ｊ３Ｈ−Ｈ：４．０Ｈｚ），３．２１（ｓ，３Ｈ），２．９８（ｓ，３Ｈ）。１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤ２Ｃｌ２）δ １６８．２［Ｃ］，１５７．９［Ｃ］，１５５．１［Ｃ］，１４１．３［Ｃ］，１４０．３［Ｃ］，１３５．１［Ｃ］，１３２．８［Ｃ］，１３１．４［Ｃ］，１２７．３［２．ＣＨ］，１２３．２［ＣＨ］，１２２．５［ＣＨ］，１１９．０［Ｃ］，１１７．２［Ｃ］，１１４．３［２．ＣＨ］，１１０．７［ＣＨ］，８３．２［ｄ，Ｊ１Ｃ−Ｆ：１６７Ｈｚ，ＣＨ２］，７０．４［ｄ，Ｊ２Ｃ−Ｆ：１９Ｈｚ，ＣＨ２］，６９．７［ＣＨ２］，６７．８［ＣＨ２］，３９．５［ＣＨ２］，３７．４［ＣＨ３］，３５．２［ＣＨ３］，３１．６［ＣＨ３］。
【実施例１１】
【００８１】
２−（２−（フルオロエトキシ）エトキシ）エトキシ−Ａ合成：
２−（２−（２−フルオロエトキシ）エトキシ）エチル−４−メチルベンゼンスルホネートを使用し、上の一般的手順（実施例５）を用いて、標的化合物を６３％の収率で得た。Ｒｆ：０．３２（ＳｉＯ２−ＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２／アセトン：８０／２０ ｖ：ｖ））。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ２Ｃｌ２）δ ７．９１（ｄ，１Ｈ，Ｊ：８．８Ｈｚ），７．６０（ｄ，１Ｈ，Ｊ：１．６Ｈｚ），７．５４（ｄ，２Ｈ，Ｊ：８．８Ｈｚ），７．３６（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ：８．８，１．６Ｈｚ），７．０４（ｄ，２Ｈ，Ｊ：８．８Ｈｚ），４．５７（ｄｔ，２Ｈ，Ｊ２Ｈ−Ｆ：４７．６Ｈｚ，Ｊ３Ｈ−Ｈ：４．４Ｈｚ），４．３３（ｓ，３Ｈ），４．２１（ｔ，２Ｈ，Ｊ：４．４Ｈｚ），４．１７（ｓ，２Ｈ），３．８８（ｔ，２Ｈ，Ｊ：４．８Ｈｚ），３．８０−３．６５（ｍ，６Ｈ），３．２１（ｓ，３Ｈ），２．９８（ｓ，３Ｈ）。１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤ２Ｃｌ２）δ １６８．２［Ｃ］，１５８．０［Ｃ］，１５５．１［Ｃ］，１４１．３［Ｃ］，１４０．３［Ｃ］，１３５．１［Ｃ］，１３２．８［Ｃ］，１３１．４［Ｃ］，１２７．３［２．ＣＨ］，１２３．２［ＣＨ］，１２２．５［ＣＨ］，１１９．０［Ｃ］，１１７．２［Ｃ］，１１４．３［２．ＣＨ］，１１０．７［ＣＨ］，８３．２［ｄ，Ｊ１Ｃ−Ｆ：１６７Ｈｚ，ＣＨ２］，７０．７［ＣＨ２］，７０．６［ＣＨ２］，７０．３［ｄ，Ｊ２Ｃ−Ｆ：１９Ｈｚ，ＣＨ２］，６９．６［ＣＨ２］，６７．８［ＣＨ２］，３９．５［ＣＨ２］，３７．４［ＣＨ３］，３５．２［ＣＨ３］，３１．６［ＣＨ３］。
【実施例１２】
【００８２】
トシルオキシエトキシ−Ａ合成：
（Ｄａｍｏｎｔ Ａ．ら，（２００８）Ｊ．Ｌａｂｅｌ．Ｃｏｍｐｄｓ．Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍ．，５１：２８６−２９２に従って合成した）エタン−１，２−ジイルビス（４−メチルベンゼンスルホネート）を使用し、上の一般的手順（実施例５）を用いて、標的化合物を４５％の収率で得た。Ｒｆ：０．７２（ＳｉＯ２−ＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ：９５／５ ｖ：ｖ））。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ２Ｃｌ２）δ ７．８９（ｄ，１Ｈ，Ｊ：８．８Ｈｚ），７．８４（ｄ，２Ｈ，Ｊ：８．４Ｈｚ），７．６０（ｄ，１Ｈ，Ｊ：１．６Ｈｚ），７．５３（ｄ，２Ｈ，Ｊ：８．８Ｈｚ），７．４１（ｄ，２Ｈ，Ｊ：８．４Ｈｚ），７．３６（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ：８．８，１．６Ｈｚ），６．９１（ｄ，２Ｈ，Ｊ：８．８Ｈｚ），４．４０（ｔ，２Ｈ，Ｊ：４．４Ｈｚ），４．３２（ｓ，３Ｈ），４．２２（ｔ，２Ｈ，Ｊ：４．４Ｈｚ），４．１７（ｓ，２Ｈ），３．２１（ｓ，３Ｈ），２．９８（ｓ，３Ｈ），２．４８（ｓ，３Ｈ）。１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤ２Ｃｌ２）δ １６８．１［Ｃ］，１５７．２［Ｃ］，１５５．０［Ｃ］，１４５．２［Ｃ］，１４１．２［Ｃ］，１４０．３［Ｃ］，１３５．５［Ｃ］，１３２．８［Ｃ］，１３２．７［Ｃ］，１３１．３［Ｃ］，１２９．９［２．ＣＨ］，１２７．９［２．ＣＨ］，１２７．４［２．ＣＨ］，１２３．２［ＣＨ］，１２２．６［ＣＨ］，１１８．９［Ｃ］，１１７．２［Ｃ］，１１４．４［２．ＣＨ］，１１０．７［ＣＨ］，６８．３［ＣＨ２］，６５．８［ＣＨ２］，３９．５［ＣＨ２］，３７．４［ＣＨ３］，３５．２［ＣＨ３］，３１．６［ＣＨ３］，２１．３［ＣＨ３］。
【００８３】
上記したフルオロアルコキシ−Ａ誘導体のフッ素−１８での標識用前駆体としてのトシルオキシプロポキシ−Ａ、トシルオキシブトキシ−Ａ、２−（トシルオキシエトキシ）エトキシ−Ａ及び２−（２−（トシルオキシエトキシ）エトキシ）エトキシ−Ａは、適切なアルキル化試薬を用いて直ぐ上に記載されているように製造され得る。
【実施例１３】
【００８４】
［１８Ｆ］フルオロエトキシ−Ａ放射合成：
［１８Ｆ］フルオロエトキシ−Ａの最終ＨＰＬＣ精製は半分取Ｓｙｍｍｅｔｒｙ（登録商標）Ｃ−１８ ＨＰＬＣカラム（溶離液：水／アセトニトリル／ＴＦＡ：６０／４０／０．１［ｖ：ｖ：ｖ］；流速：５ｍＬ／分）を用いて実施し、放射化学的に純粋な［１８Ｆ］フルオロエトキシ−Ａに対応するピーク（Ｒｔ：１１．０〜１３．０分）を集めた。３７ＧＢｑの［１８Ｆ］フルオリドサイクロトン生産バッチから出発して、約３．７ＧＢｑの［１８Ｆ］フルオロエトキシ−Ａが９０分の放射合成（ＨＰＬＣ精製及び形成を含む）の範囲内で得られた。（Ｗａｔｅｒｓ Ｓｙｍｍｅｔｒｙ−Ｍ（登録商標）Ｃ−１８カラムを用いる分析ＨＰＬＣにより測定した）放射化学純度は９５％以上であり、（放射合成の最終時の）比放射能は５０ＧＢｑ／μｍｏｌ以上であった。
【００８５】
［１８Ｆ］フルオロプロポキシ−Ａ、［１８Ｆ］フルオロブトキシ−Ａ、２−（［１８Ｆ］フルオロエトキシ）エトキシ−Ａ及び２−（２−（［１８Ｆ］フルオロエトキシ）エトキシ）エトキシ−Ａは、フッ素−１８標識用前駆体として対応するトシルオキシアルコキシ−Ａ誘導体（実施例１２）から直ぐ上に記載されているように製造され得る。
【実施例１４】
【００８６】
ＡＭＰＡ注射ラットの病変線条体（ＰＢＲ発現が誘発されている領域）における［１１Ｃ］−Ａの取り込みは、ＰＢＲが全くまたは少ししか発現していないと予想される無傷対側の線条体と比較して有意により高い（図１）。病変線条体における［１１Ｃ］−Ａの取り込みも基準ＰＢＲ ＰＥＴリガンドの［１１Ｃ］ＰＫ１１１９５で観察された取り込みよりも有意により高い（図１）。無傷線条体に対する病変線条体における取り込み比も［１１Ｃ］ＰＫ１１１９５の場合よりも［１１Ｃ］−Ａの場合で有意により高い（図２）。結合ポテンシャル及びＲ１も［１１Ｃ］ＰＫ１１１９５の場合よりも［１１Ｃ］−Ａの場合で有意により高い（ＢＰ＝１．６５±０．３６対０．６６±０．１５；Ｒ１＝１．２６±０．０８対１．１０±０．０５）。
【００８７】
非標識ＰＫ１１１９５（図３）もＡ（図４）（１ｍｇ／ｋｇ ｉ．ｖ．；［１１Ｃ］−Ａ注射から２０分後）も病変線条体における［１１Ｃ］−Ａの脳取り込みを大きく低減させた。いずれの非標識化合物も、多分［１１Ｃ］−Ａが脳外結合部位から遊離されるために［１１Ｃ］−Ａの血液濃度が高くなるので対側における［１１Ｃ］−Ａ結合を少ししか増加させなかった。
【００８８】
［１１Ｃ］−Ａ注射から１０及び２０分後にラットの血液及び血漿中に存在する代謝産物及び［１１Ｃ］−Ａ注射から１０、２０及び３０分後にラットの脳中に存在する代謝産物の分析は本質的に親化合物のみを検出した（図１０）。
【００８９】
加えて、脳切片に対する［１１Ｃ］−Ａ結合のオートラジオグラフィーは同側対対側比が高い（３．８）というイメージング結果を反映し、これは過剰の非標識ＰＫ１１１９５またはＡにより無効にされる（図５）。［１１Ｃ］−Ａ結合の小さいが有意な低下もベンゾジアゼピンアンタゴニストの非標識フルマゼニルで観察された（図５）。
【実施例１５】
【００９０】
ＡＰＰ×ＰＳ１及び野生型ＰＳ１トランスジェニックマウスにおいて、全脳（小脳を除く）における［１１Ｃ］−Ａ取り込みは［１１Ｃ］ＰＫ１１１９５の取り込みよりも高い（図６）。しかしながら、［１１Ｃ］−Ａ及び［１１Ｃ］ＰＫ１１１９５の取り込みは野生型ＰＳ１に比してＡＰＰ×ＰＳ１において有意に高くない。対照的に、［３Ｈ］−Ａ結合の特異性は、野生型ＰＳ１マウスと比較してＡＰＰ×ＰＳ１マウス由来の全脳切片よりも約２倍高い（図７）。
【００９１】
これらのデータから、［１１Ｃ］−Ａはラット神経炎症の急性モデル及びアルツハイマー病のマウスモデルにおいて高いＰＢＲ結合及び炎症を特異的に検出し得ることが立証される。インビボＰＥＴイメージングから、［１１Ｃ］−Ａが齧歯類においてＰＢＲ受容体過剰発現及び神経炎症をイメージングするために使用され得ることが確認される。更に、［１１Ｃ］−ＡでのＰＥＴイメージングにより観察されたＰＢＲ受容体結合は、基準ＰＢＲ受容体ＰＥＴリガンドの［１１Ｃ］ＰＫ１１１９５で観察されたＰＢＲ受容体結合よりも大きい。
【実施例１６】
【００９２】
キノリン酸を注射された霊長類の病変右線条体における［１１Ｃ］−Ａの取り込みは、興奮性毒素注射から２４時間後の対側非注射線条体及び２つの非注射照脳領域（小脳、前頭前野皮質）における［１１Ｃ］−Ａ取り込みと比較して有意により高い（図８）。対側非注射線条体における［１１Ｃ］−Ａ取り込みは安定であり、非注射霊長類の脳領域における［１１Ｃ］−Ａ取り込みと同レベルのままであった（図８）。［１１Ｃ］−Ａ取り込みの増加は（左半球で）興奮性毒素注射から４８時間目でもなお可視化され得、興奮性毒素注射から７ヶ月目の［１１Ｃ］−Ａ取り込み（７ヶ月前に病変させた右線条体のカイネティック）は基準レベルに戻った。神経炎症の初期相のより詳細なキャラクタリゼーションから、高い［１１Ｃ］−Ａ取り込みが２４時間から１６日まで可視化され得ることが立証された（図９）。ラジオトレーサーを注射してから３０分後に大過剰の非標識ＰＫ１１１９５を全身投与すると、病変線条体において［１１Ｃ］−Ａ結合の特異的置換が生じ、非病変対照脳領域では顕著な変化は観察されなかった（図９）。
【００９３】
適用
本発明は、診断ツールとして、及びＰＢＲレベルが変化し、炎症が存在している病理の発生及び進行を追跡するためのツールとして適用され得る。本発明は、病的状態での受容体占有率を研究したり、治療処置の有効性を評価するために、並びに動物モデルからヒトまでの研究のための翻訳バイオマーカーとしても適用され得る。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、７−クロロ−Ｎ，Ｎ，５−トリメチル−４−オキソ−３−フェニル−３，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピリダジノ［４，５−ｂ］インドール−１−アセトアミドの個人における正常及び病的状態に関連するＰＢＲ（末梢ベンゾジアゼピン受容体）レベルを検出するためのバイオマーカーとしての使用に関する。本発明は、上記目的のためのＰＢＲレベルの検出方法にも関する。
【背景技術】
【０００２】
正常な生理的状態では、トランスロケータータンパク質１８ｋＤａ（ＴＳＰＯ）（Ｐａｐａｄｏｐｏｕｌｏｓ，Ｂ．ら，（２００６）Ｔｒｅｎｄｓ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｓｃｉ．，２７：４０２−４０９）としても公知のＰＢＲは脳、主にミクログリア細胞中では低レベルで発現し、副腎、松果体、唾液腺、生殖腺、腎臓、肺、心臓や骨格筋のような多数の末梢組織中では高度に発現する（Ｃｈｅｎ，Ｍ−Ｋ．ａｎｄ Ｇｕｉｌａｒｔｅ，Ｔ．，（２００８）Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，１１８：１−１７；Ｖｅｎｎｅｔｉ，Ｓ．ら，（２００６）Ｐｒｏｇｒｅｓｓ ｉｎ Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ．，８０：３０８−３２２）。基準ＰＢＲリガンドの［３Ｈ］ＰＫ１１１９５を用いた細胞レベル下局在化研究で、ＰＢＲがミトコンドリア外膜中に局在していることが判明した（Ａｎｈｏｌｔ，Ｒ．Ｒ．ら，（１９８６）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２６１：５７６−５８３；Ａｎｔｋｉｅｗｉｃｚ−Ｍｉｃｈａｌｕｋ，Ｌ．ら，（１９８８）Ｍｏｌ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，３４：２７２−２７８）。しかしながら、免疫組織化学的研究で、ＰＢＲは（ミトコンドリアがない）血球中で発現し（Ｏｌｓｏｎ，Ｊ．Ｍ．ら，（１９８８）Ｅｕｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，１５２：４７−５３）、細胞膜に局在化され得ること（Ｏ’Ｂｅｉｒｎｅ、Ｇ．ら，（１９９０）Ｅｕｒ．Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，１８８：１３１−１３８；Ｗｏｏｄｓ，Ｍ．Ｊ．ら，（１９９６）Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，５１：１２８３−１２９２）も判明した。ＰＢＲの核または核周囲局在化も乳癌細胞（Ｈａｒｄｗｉｃｋ，Ｍ．ら，（１９９９）Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．，５９：８３１−８４２）、ヒト神経膠腫細胞（Ｂｒｏｗｎ，Ｒ．Ｃ．ら，（２０００）Ｃａｎｃｅｒ Ｌｅｔｔ．，１５６：１２５−１３２）、肝腫瘍細胞（Ｃｏｒｓｉ，Ｌ．ら，（２００５）Ｌｉｆｅ Ｓｃｉ．，７６：２５２３−２５３３）及びグリア細胞（Ｋｕｈｌｍａｎｎ，Ａ．Ｃ．ａｎｄ Ｇｕｉｌａｒｔｅ，Ｔ．Ｒ．（２０００）Ｊ．Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ．，７４：１６９４−１７０４）で観察された。
【０００３】
ＰＢＲレベルの著しい上昇が細胞損傷、炎症または増殖後に観察され、多数の急性及び慢性病的状態に関連している（Ｃｈｅｎ，Ｍ−Ｋ．ａｎｄ Ｇｕｉｌａｒｔｅ，Ｔ．（２００８）Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，１１８：１−１７；Ｖｅｎｎｅｔｉ，Ｓ．ら，（２００６）Ｐｒｏｇｒｅｓｓ ｉｎ Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，８０：３０８−３２２）。これらには、脳損傷、例えば卒中及び虚血再灌流障害（Ｇｅｒｈａｒｄ，Ａ．ら，（２０００）Ｎｅｕｒｏｒｅｐｏｒｔ，１１：２９５７−２９６０；Ｇｅｒｈａｒｄ，Ａ．ら，（２００５）Ｎｅｕｒｏｉｍａｇｅ，２４：４０４−４１２）、外傷性脳損傷（Ｒａｇｈａｖｅｎｄｒａ，Ｒ．ら，（２０００）Ｅｘｐ．Ｎｅｕｒｏｌ．，１６１：１０２−１１４）；脳感染、例えば脳炎（Ｂａｎａｔｉ，Ｒ．Ｂ．ら，（１９９９）Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ，５３：２１９９−２２０３；Ｃａｇｉｎ，Ａ．ら，（２００１）Ｂｒａｉｎ，１２４：２０１４−２０２７）；神経疾患、例えば多発性硬化症（Ｂａｎａｔｉ，Ｒ．Ｂ．ら，（２０００）Ｂｒａｉｎ，１２３：２３２１−２３３７）、アルツハイマー病及び認知症（Ｃａｇｎｉｎ，Ａ．ら，（２００１）Ｌａｎｃｅｔ，３５８：４６１−４６７；Ｖｅｒｓｉｊｐｔ，Ｊ．Ｊ．ら，（２００３）Ｅｕｒ．Ｎｅｕｒｏｌ．，５０：３９−４７）、パーキンソン病（Ｏｕｃｈｉ，Ｙ．ら，（２００５）Ａｎｎ．Ｎｅｕｒｏｌ．，５７：１６８−１７５；Ｇｅｒｈａｒｄ，Ａ．ら，（２００６）Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ．Ｄｉｓ．，２１：４０４−４１２）、筋萎縮性側索硬化症（Ｔｕｒｎｅｒ，Ｍ．Ｒ．ら，（２００４）Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ．Ｄｉｓ．，１５：６０１−６０９）、大脳皮質基底核変性症（Ｇｅｒｈａｒｄ Ａ．ら，（２００４）Ｍｏｖ．Ｄｉｓｏｒｄ．，１９：１２２１−１２２６；Ｈｅｎｋｅｌ，Ｋ．ら，（２００４）Ｍｏｖ．Ｄｉｓｏｒｄ．，１９：８１７−８２１）、ハンチントン病（Ｍｅｓｓｍｅｒ，Ｋ．ａｎｄ Ｒｅｙｎｏｌｄｓ，Ｇ．Ｐ．，（１９９８）Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．Ｌｅｔｔ．，２４１：５３−５６；Ｐａｖｅｓｅ，Ｎ．ら，（２００６）Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ，６６：１６３８−１６４３）及びてんかん（Ｓａｕｖａｇｅａｕ，Ａ．ら，（２００２）Ｍｅｔａｂ．Ｂｒａｉｎ Ｄｉｓ．，１７：３−１１）が含まれる。ＣＮＳ病理における高いＰＢＲレベルが主にミクログリア細胞で観察されている（Ｃｈｅｎ，Ｍ−Ｋ．ａｎｄ Ｇｕｉｌａｒｔｅ、Ｔ．，（２００８）Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，１１８：１−１７；Ｖｅｎｎｅｔｉ，Ｓ．ら，（２００６）Ｐｒｏｇｒｅｓｓ ｉｎ Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，８０：３０８−３２２）。
【０００４】
ＰＢＲの高い上昇は、癌（Ｃｏｒｎｕ，Ｐ．ら，（１９９２）Ａｃｔａ．Ｎｅｕｒｉｃｈｉｒ．，１１９：１４６−１５２；Ｈａｒｄｗｉｃｋ，Ｍ．ら，（１９９９）Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．，５９：８３１−８４２；Ｍａａｓｅｒ，Ｋ．ら，（２００２）Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．，８：３２０５−３２０９）、肺の炎症（Ａｕｄｉ，Ｓ．Ｈ．ら，（２００２）Ｌｕｎｇ．，１８０：２４１−２５０；Ｈａｒｄｗｉｃｋ，Ｍ．Ｊ．ら，（２００５）Ｍｏｌ．Ｉｍａｇｉｎｇ．，４：４３２−４３８）、心虚血（Ｍａｚｚｏｎｅ，Ａ．ら，（２０００）Ｊ．Ａｍ．Ｃｏｌｌ．Ｃａｒｄｉｏｌ．，３６：７４６−７５０）、腎虚血（Ｚｈａｎｇ，Ｋ．ら，（２００６）Ｊ．Ａｍ．Ｃｏｌｌ．Ｓｕｒｇ．，２０３：３５３−３６４）、リウマチ（線維筋痛）（Ｆａｇｇｉｏｌｉ，Ｐ．ら，（２００４）Ｒｈｅｕｍａｔｏｌｏｇｙ（Ｏｘｆｏｒｄ），４３：１２２４−１２２５）、座骨神経再生（Ｍｉｌｌｓ，Ｃ．Ｄ．ら，（２００５）Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．，３０：２２８−２３７）、乾癬性関節炎（Ｇｕｉｓｔｉ，Ｌ．ら，（２００４）Ｃｌｉｎ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，３７：６１−６６）及びアテローム性動脈硬化症（Ｆｕｊｉｍｕｒａ，Ｙ．ら，（２００８）Ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ，２０１：１０８−１１１；Ｌａｉｔｉｎｅｎ，Ｉ．ら，（２００８）Ｅｕｒ．Ｊ．Ｎｕｃ．Ｍｅｄ．Ｍｏｌ．Ｉｍａｇｉｎｇ，３６：７３−８０）でも観察されている。
【０００５】
対照的に、ＰＢＲレベルの低下は、統合失調症患者の脳で（Ｋｕｒｕｍａｊｉ，Ａ．ら，（１９９７）Ｊ．Ｎｅｕｒａｌ．Ｔｒａｎｓｍ．，１０４：１３６１−１３７０；Ｗｏｄａｒｚ，Ｎ．ら，（１９９８）Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ Ｒｅｓ．，１４：３６３−３６９）、関節リウマチ（Ｂｒｉｂｅｓ，Ｅ．ら，（２００２）Ｅｕｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，４５２：１１１−１２２）及び骨関節症（Ｂａｚｚｉｃｈｉ，Ｌ．ら，（２００３）Ｃｌｉｎ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，３６：５７−６０）で観察されている。
【０００６】
従って、脳及び他の組織中のＰＢＲレベルをインビボでイメージングする能力は、病気の進行の重要なバイオマーカーとして、治療処置の有効性を調べ、評価するために、またインビボでＰＢＲ受容体占有率を評価するために役立つ。
【０００７】
基準ＰＥＴ ＰＢＲリガンドの［１１Ｃ］ＰＫ１１１９５は、多数の神経病的状態におけるＰＢＲレベルをインビボでイメージングするために広く使用されている（Ｃｈｅｎ，Ｍ−Ｋ ａｎｄ Ｇｕｉｌａｒｔｅ，Ｔ．（２００８）Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，１１８：１−１７；Ｖｅｎｎｅｔｉ，Ｓ．ら，（２００６）Ｐｒｏｇｒｅｓｓ ｉｎ Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，８０：３０８−３２２）。しかしながら、［１１Ｃ］ＰＫ１１１９５は、比較的低い脳取り込み、高い非特異的結合及び乏しい信号／雑音比を示す。これらの性質により、ＣＮＳにおけるＰＢＲレベルのＰＥＴイメージング及び占有率研究のための［１１Ｃ］ＰＫ１１１９５の感度は限られている。従って、［１１Ｃ］ＰＫ１１１９５よりもより高い特異的結合及びより高い感度を有する改良されたＰＢＲ ＰＥＴリガンドが開発されれば、脳及び他の組織中のＰＢＲレベルのイメージングがかなり進歩するであろう。
【０００８】
ＷＯ ９９／０６４０６及びＷＯ ００／４４３８４に記載されており、特許請求されている化合物の中で、ピリダジノ［４，５−ｂ］インドール誘導体の７−クロロ−Ｎ，Ｎ，５−トリメチル−４−オキソ−３−フェニル−３，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピリダジノ［４，５−ｂ］インドール−１−アセトアミドがＰＢＲに対するＰＥＴ（または、ＳＰＥＣＴ）リガンドとして使用するために特に興味深いと同定された。この化合物はインビトロ及びインビボでＰＢＲに対して高い親和性を有している（Ｆｅｒｚａｚ，Ｂ．ら，（２００２）Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒａｐ．，３０１：１０６７−１０７８）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００９】
【特許文献１】国際公開第９９／０６４０６号
【特許文献２】国際公開第００／４４３８４号
【非特許文献】
【００１０】
【非特許文献１】Ｐａｐａｄｏｐｏｕｌｏｓ，Ｂ．ら，（２００６）Ｔｒｅｎｄｓ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｓｃｉ．，２７：４０２−４０９
【非特許文献２】Ｃｈｅｎ，Ｍ−Ｋ．ａｎｄ Ｇｕｉｌａｒｔｅ，Ｔ．，（２００８）Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，１１８：１−１７
【非特許文献３】Ｖｅｎｎｅｔｉ，Ｓ．ら，（２００６）Ｐｒｏｇｒｅｓｓ ｉｎ Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ．，８０：３０８−３２２
【非特許文献４】Ａｎｈｏｌｔ，Ｒ．Ｒ．ら，（１９８６）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２６１：５７６−５８３
【非特許文献５】Ａｎｔｋｉｅｗｉｃｚ−Ｍｉｃｈａｌｕｋ，Ｌ．ら，（１９８８）Ｍｏｌ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，３４：２７２−２７８
【非特許文献６】Ｏｌｓｏｎ，Ｊ．Ｍ．ら，（１９８８）Ｅｕｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，１５２：４７−５３
【非特許文献７】Ｏ’Ｂｅｉｒｎｅ、Ｇ．ら，（１９９０）Ｅｕｒ．Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，１８８：１３１−１３８
【非特許文献８】Ｗｏｏｄｓ，Ｍ．Ｊ．ら，（１９９６）Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，５１：１２８３−１２９２
【非特許文献９】Ｈａｒｄｗｉｃｋ，Ｍ．ら，（１９９９）Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．，５９：８３１−８４２
【非特許文献１０】Ｂｒｏｗｎ，Ｒ．Ｃ．ら，（２０００）Ｃａｎｃｅｒ Ｌｅｔｔ．，１５６：１２５−１３２
【非特許文献１１】Ｃｏｒｓｉ，Ｌ．ら，（２００５）Ｌｉｆｅ Ｓｃｉ．，７６：２５２３−２５３３
【非特許文献１２】Ｋｕｈｌｍａｎｎ，Ａ．Ｃ．ａｎｄ Ｇｕｉｌａｒｔｅ，Ｔ．Ｒ．（２０００）Ｊ．Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ．，７４：１６９４−１７０４
【非特許文献１３】Ｇｅｒｈａｒｄ，Ａ．ら，（２０００）Ｎｅｕｒｏｒｅｐｏｒｔ，１１：２９５７−２９６０
【非特許文献１４】Ｇｅｒｈａｒｄ，Ａ．ら，（２００５）Ｎｅｕｒｏｉｍａｇｅ，２４：４０４−４１２
【非特許文献１５】Ｒａｇｈａｖｅｎｄｒａ，Ｒ．ら，（２０００）Ｅｘｐ．Ｎｅｕｒｏｌ．，１６１：１０２−１１４
【非特許文献１６】Ｂａｎａｔｉ，Ｒ．Ｂ．ら，（１９９９）Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ，５３：２１９９−２２０３
【非特許文献１７】Ｃａｇｉｎ，Ａ．ら，（２００１）Ｂｒａｉｎ，１２４：２０１４−２０２７
【非特許文献１８】Ｂａｎａｔｉ，Ｒ．Ｂ．ら，（２０００）Ｂｒａｉｎ，１２３：２３２１−２３３７
【非特許文献１９】Ｃａｇｎｉｎ，Ａ．ら，（２００１）Ｌａｎｃｅｔ，３５８：４６１−４６７
【非特許文献２０】Ｖｅｒｓｉｊｐｔ，Ｊ．Ｊ．ら，（２００３）Ｅｕｒ．Ｎｅｕｒｏｌ．，５０：３９−４７
【非特許文献２１】Ｏｕｃｈｉ，Ｙ．ら，（２００５）Ａｎｎ．Ｎｅｕｒｏｌ．，５７：１６８−１７５
【非特許文献２２】Ｇｅｒｈａｒｄ，Ａ．ら，（２００６）Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ．Ｄｉｓ．，２１：４０４−４１２
【非特許文献２３】Ｔｕｒｎｅｒ，Ｍ．Ｒ．ら，（２００４）Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ．Ｄｉｓ．，１５：６０１−６０９
【非特許文献２４】Ｇｅｒｈａｒｄ Ａ．ら，（２００４）Ｍｏｖ．Ｄｉｓｏｒｄ．，１９：１２２１−１２２６
【非特許文献２５】Ｈｅｎｋｅｌ，Ｋ．ら，（２００４）Ｍｏｖ．Ｄｉｓｏｒｄ．，１９：８１７−８２１
【非特許文献２６】Ｍｅｓｓｍｅｒ，Ｋ．ａｎｄ Ｒｅｙｎｏｌｄｓ，ＧＰ．，（１９９８）Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．Ｌｅｔｔ．，２４１：５３−５６
【非特許文献２７】Ｐａｖｅｓｅ，Ｎ．ら，（２００６）Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ，６６：１６３８−１６４３
【非特許文献２８】Ｓａｕｖａｇｅａｕ，Ａ．ら，（２００２）Ｍｅｔａｂ．Ｂｒａｉｎ Ｄｉｓ．，１７：３−１１
【非特許文献２９】Ｃｏｒｎｕ，Ｐ．ら，（１９９２）Ａｃｔａ．Ｎｅｕｒｉｃｈｉｒ．，１１９：１４６−１５２
【非特許文献３０】Ｍａａｓｅｒ，Ｋ．ら，（２００２）Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．，８：３２０５−３２０９
【非特許文献３１】Ａｕｄｉ，Ｓ．Ｈ．ら，（２００２）Ｌｕｎｇ．，１８０：２４１−２５０
【非特許文献３２】Ｈａｒｄｗｉｃｋ，Ｍ．Ｊ．ら，（２００５）Ｍｏｌ．Ｉｍａｇｉｎｇ．，４：４３２−４３８
【非特許文献３３】Ｍａｚｚｏｎｅ，Ａ．ら，（２０００）Ｊ．Ａｍ．Ｃｏｌｌ．Ｃａｒｄｉｏｌ．，３６：７４６−７５０
【非特許文献３４】Ｚｈａｎｇ，Ｋ．ら，（２００６）Ｊ．Ａｍ．Ｃｏｌｌ．Ｓｕｒｇ．，２０３：３５３−３６４
【非特許文献３５】Ｆａｇｇｉｏｌｉ，Ｐ．ら，（２００４）Ｒｈｅｕｍａｔｏｌｏｇｙ（Ｏｘｆｏｒｄ），４３：１２２４−１２２５
【非特許文献３６】Ｍｉｌｌｓ，Ｃ．Ｄ．ら，（２００５）Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．，３０：２２８−２３７
【非特許文献３７】Ｇｕｉｓｔｉ，Ｌ．ら，（２００４）Ｃｌｉｎ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，３７：６１−６６
【非特許文献３８】Ｆｕｊｉｍｕｒａ，Ｙ．ら，（２００８）Ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ，２０１：１０８−１１１
【非特許文献３９】Ｌａｉｔｉｎｅｎ，Ｉ．ら，（２００８）Ｅｕｒ．Ｊ．Ｎｕｃ．Ｍｅｄ．Ｍｏｌ．Ｉｍａｇｉｎｇ，３６：７３−８０
【非特許文献４０】Ｋｕｒｕｍａｊｉ，Ａ．ら，（１９９７）Ｊ．Ｎｅｕｒａｌ．Ｔｒａｎｓｍ．，１０４：１３６１−１３７０
【非特許文献４１】Ｗｏｄａｒｚ，Ｎ．ら，（１９９８）Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ Ｒｅｓ．，１４：３６３−３６９
【非特許文献４２】Ｂｒｉｂｅｓ，Ｅ．ら，（２００２）Ｅｕｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，４５２：１１１−１２２
【非特許文献４３】Ｂａｚｚｉｃｈｉ，Ｌ．ら，（２００３）Ｃｌｉｎ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，３６：５７−６０
【非特許文献４４】Ｆｅｒｚａｚ，Ｂ．ら，（２００２）Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒａｐ．，３０１：１０６７−１０７８
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
本発明は、放射標識形態の７−クロロ−Ｎ，Ｎ，５−トリメチル−４−オキソ−３−フェニル−３，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピリダジノ［４，５−ｂ］インドール−１−アセトアミドの正常状態に関連するＰＢＲレベル及び病的状態に関連するＰＢＲレベルを検出するためのバイオマーカーとしての使用に関する。
【００１２】
本発明は、放射標識形態の７−クロロ−Ｎ，Ｎ，５−トリメチル−４−オキソ−３−フェニル−３，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピリダジノ［４，５−ｂ］インドール−１−アセトアミドを用いる正常状態に関連するＰＢＲレベル及び病的状態に関連するＰＢＲレベルの検出方法にも関する。
【００１３】
本発明は、ＰＢＲレベルを検出するための診断キットにも関する。
【００１４】
定義
便宜的理由のため且つ読みやすくするために、化合物７−クロロ−Ｎ，Ｎ，５−トリメチル−４−オキソ−３−フェニル−３，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピリダジノ［４，５−ｂ］インドール−１−アセトアミドを本明細書中の幾つかの章で「Ａ」と改名した。
【００１５】
本発明のために、以下の用語は適切に理解されたい。
【００１６】
バイオマーカー：客観的に（すなわち、許容される精度及び再現性で）調べられ、また正常な生理学的または病理学的プロセスの指標として、医学的治療の作用を評価するために使用され得る特性。バイオマーカーは、組織または体液中で検出され得る生物学的、解剖学的、生理学的、生化学的または分子パラメーターであり得る。
【００１７】
炎症：組織の損傷または破壊に対する応答。末梢では、急性炎症は多形核細胞（好中球）により特徴づけられる白血球浸潤物から構成され、慢性炎症は単核細胞（マクロファージ、リンパ球、プラズマ細胞）から構成される。脳では、炎症はミクログリア及び星状グリア細胞の活性化、並びにサイトカイン及びケモカインの関与、補体タンパク質、急性期タンパク質、酸化的損傷及び関連分子プロセスを含む広いスペクトルの細胞応答を取り込む。これらの事象はニューロン機能に対して悪影響を有し得、ニューロン損傷、更にはグリア活性化、最終的には神経変性が生じ得る。脳炎症に応答して、グリア細胞（主に、ミクログリア）は活性化され、ＰＢＲを過剰発現する。従って、脳中のＰＢＲレベルは神経炎症の指標であり、本発明のために神経炎症のバイオマーカーとして見なされ得る。
【００１８】
病的状態：これらの状態は神経疾患、すなわち中枢神経系の機能に影響を及ぼす損傷、障害または疾患を含み得る。これらには急性脳損傷、例えば卒中、虚血再灌流障害及び外傷性脳損傷；脳感染、例えば脳炎；神経疾患、例えば多発性硬化症、アルツハイマー病、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症、認知症、大脳皮質基底核変性症、ハンチントン病及びてんかんが含まれ得る。病的状態には精神病、例えば統合失調症；末梢炎症プロセス、例えば肺炎症、アテローム性動脈硬化症、心虚血、腎虚血、リウマチ（線維筋痛）、乾癬性関節炎、関節リウマチ及び骨関節症；増殖性疾患、例えば癌も含まれ得る。
【００１９】
受容体占有率：生化学的標的または受容体に対する結合の量の尺度。薬物に対する受容体占有率のレベルは、放射標識されているＰＥＴリガンド単独で、または非標識薬物を投与した後にＰＥＴリガンドを与えたときに得られる時間−放射能測定値を比較することにより調べられ得る。ＰＥＴリガンドは非標識薬物と同一の受容体に結合されなければならない。放射標識されているＰＥＴリガンドの受容体に対する結合の量は非標識薬物の濃度が増加すると減少する。この減少の程度が非標識薬物の受容体占有率として定義される。
【００２０】
ＰＥＴイメージング：陽電子放射断層撮影法は体内の機能プロセスの三次元イメージまたはマップを作成するイメージング技術である。このシステムは、体内の生物学的活性分子上に導入される陽電子放射性核種（トレーサー）により間接的に放射される対のγ線を検出する。次いで、体内の三次元空間中のトレーサー濃度のイメージをコンピュータ分析により再構築する。ＰＥＴのために使用される材料は、γ線阻止能及び信号変換スピードが高いのでシンチレーター、例えばゲルマニウム酸ビスマス、オキシ−オルトケイ酸ルテチウムまたはオルトケイ酸ガドリウムである。
【００２１】
ＳＰＥＣＴイメージング：単一光子放射形コンピュータ断層撮影法は体内の機能プロセスの三次元シメージまたはマップを作成する別のイメージング技術である。このシステムは、体内の生物学的活性分子上に導入される単一光子放射性核種（トレーサー）により放射されるγ線を直接検出する。次いで、体内の三次元空間中のトレーサー濃度のイメージをコンピュータ分析により再構築する。
【００２２】
放射標識形態：１個または数個の原子が検出を可能にする同位元素で置換した分子。ＰＥＴイメージングのために最も頻繁に使用されている陽電子放射性同位元素は炭素−１１（すなわち、１１Ｃ，ｔ１／２＝２０分間）、窒素−１３（すなわち、１３Ｎ，ｔ１／２＝１０分間）、酸素−１５（すなわち、１５Ｏ，ｔ１／２＝２分間）である。ＰＥＴイメージングのために誘導体を他の陽電子放射性同位元素で標識するため追加の原子が添加されている分子、例えばフッ素−１８（すなわち、１８Ｆ，ｔ１／２＝１１０分間）、ガリウム−６８（６８Ｇａ、ｔ１／２＝６８分間）、銅−６４（６４Ｃｕ，ｔ１／２＝１２．７時間）、臭素−７６（すなわち、７６Ｂｒ，ｔ１／２＝１６．１時間）及びヨウ素−１２４（すなわち、１２４Ｉ，ｔ１／２＝４．２日）も考えられる。最後に、ＳＰＥＣＴイメージングのために誘導体を単一光子放射性同位元素で標識するために他の追加の原子が付加されている分子、例えばヨウ素−１２３（すなわち、１２３Ｉ，ｔ１／２＝１３．１時間）またはテクネチウム−９９ｍ（すなわち、９９ｍＴｃ，ｔ１／２＝６．０時間）も考えられる。
【００２３】
放射標識されているリガンドの合成及び原子の同位元素による置換は当業者に公知の幾つかの技術により実施され得る。例えば、炭素原子を炭素−１１で置換するために、我々は幾つかの誘導体、例えばヨウ化［１１Ｃ］メチルまたは［１１Ｃ］メチルトリフレート（Ｗｅｌｃｈ Ｍ．Ｊ．ら，（２００３）Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ−Ｒａｄｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ（Ｗｅｌｃｈ ＭＪ，Ｒｅｄｖａｎｌｙ ＣＳ Ｅｄｓ．），Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ−Ｃｈｉｃｈｅｓｔｅｒ−Ｂｒｉｓｂａｎｅ−Ｔｏｒｏｎｔｏ，Ｗｉｌｅｙ−ｌｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ Ｐｕｂ．，１−８４８）を使用し得る。Ａの場合、幾つかのメチル基、例えばＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミドまたはＮ−メチルインドール官能基を炭素−１１で標識し得る。
【００２４】
フッ素−１８で標識する場合、放射性同位元素をコア構造（Ａ）に対して求核性脂肪族または芳香族（ヘテロ芳香族（Ｄｏｌｌｅ Ｆ．ら，（２００５）Ｃｕｒｒ．Ｐｈａｒｍ．Ｄｅｓｉｇｎ，１１：３２２１−３２３５）を含む）置換または求電子置換により直接結合させても、スペーサー基を付加して連結させてもよく、これらの技術は両方とも当業者に公知である（Ｋｉｌｂｏｕｒｎ ＭＲ（１９９０）Ｆｌｕｏｒｉｎｅ−１８ Ｌａｂｅｌｉｎｇ ｏｆ Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｎｕｃｌｅａｒ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｓｅｒｉｅｓ（Ｋｉｌｂｏｕｒｎ ＭＲ Ｅｄ．），Ｎａｔｉｏｎａｌ Ａｃａｄｅｍｙ Ｐｒｅｓｓ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｄ．Ｃ．，１−１４９；Ｌａｓｎｅ Ｍ．−Ｃ．ら，（２００２）Ｔｏｐｉｃｓ ｉｎ Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２２２：２０１−２５８；Ｃａｉ Ｌ．ら，（２００８）Ｅｕｒ．Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，１７：２８５３−２８７３；Ｄｏｌｌｅ Ｆ．ら，（２００８）Ｆｌｕｏｒｉｎｅ ａｎｄ Ｈｅａｌｔｈ：Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｉｍａｇｉｎｇ，Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ Ｍａｔｅｒｉａｌｓ ａｎｄ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｔｒｅｓｓａｕｄ Ａ，Ｈａｕｆｅ Ｇ（Ｅｄｓ）．Ｅｌｓｅｖｉｅｒ：Ａｍｓｔｅｒｄａｍ−Ｂｏｓｔｏｎ−Ｈｅｉｄｅｌｂｅｒｇ−Ｌｏｎｄｏｎ−Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ−Ｏｘｆｏｒｄ−Ｐａｒｉｓ−Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ−Ｓａｎ Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ−Ｓｉｎｇａｐｏｒｅ−Ｓｙｄｎｅｙ−Ｔｏｋｙｏ，３−６５）。フッ素−１８原子を付加するためにアルキル、アルケニルまたはアルキニルリンカーを使用することが特に興味深い（Ｄａｍｏｎｔ Ａ．ら，（２００８）Ｊ．Ｌａｂｅｌ．Ｃｏｍｐｄｓ Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍ．，５１：２８６−２９２；Ｄｏｌｌｅ Ｆ．ら，（２００６）Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，１４：１１１５−１１２５；Ｄｏｌｌｅ Ｆ．ら，（２００７）Ｊ．Ｌａｂｅｌ．Ｃｏｍｐｄｓ Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍ．，５０：７１６−７２３）。
【００２５】
別のハロゲン（例えば、臭素−７６、ヨウ素−１２３またはヨウ素−１２４）で標識する場合、放射性同位元素をコア構造（Ａ）に対して求核または求電子置換により直接結合させても、またはスペーサー基の付加により連結させてもよく、これらの技術は両方とも当業者に公知である（Ｍａｚｉｅｒｅ Ｂ．ら，（２００１）Ｃｕｒｒ．Ｐｈａｒｍ．Ｄｅｓ．，７：１９３１−１９４３；Ｃｏｅｎｅｎ Ｈ．Ｈ．ら，（２００６）Ｒａｄｉｏｉｏｄｉｎａｔｉｏｎ ｒｅａｃｔｉｏｎｓ ｆｏｒ ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ−Ｃｏｍｐｅｎｄｉｕｍ ｆｏｒ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｓｔｒａｔｅｇｉｅｓ，Ｃｏｅｎｅｎ Ｈ．Ｈ．，Ｍｅｒｔｅｎｓ Ｊ．，Ｍａｚｉｅｒｅ Ｂ．（Ｅｄｓ），Ｓｐｒｉｎｇｅｒ Ｖｅｒｌａｇ，Ｂｅｒｌｉｎ−Ｈｅｉｄｅｌｂｅｒｇ，１−１０１）。
【００２６】
金属放射性同位元素（例えば、ガリウム−６８、銅−６４またはテクネチウム−９９ｍ）で標識する場合、当業者が考えている好ましく使用されるアプローチは、例えば開鎖ポリアミノカルボキシレートエチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）及びジエチレントリアミン五酢酸（ＤＴＰＡ）、ポリアミノカルボン酸マクロ環１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−テトラ酢酸（ＤＯＴＡ）、メルカプトアセチルジ−及びトリグリシン（ＭＡＧ２、ＭＡＧ３）、ビス（Ｓ−ベンゾイル−チオグリコロイル）ジアミノプロパノエート（（ＳＢＴ）２ＤＡＰ）及びヒドラジノニコチン酸（ＨＹＮＩＣ）の使用であり、これにより１つの官能基での放射性金属カチオンの複合体化及び別の官能基でのコア分子への共有結合が容易となる（Ｂｒｕｎｎｅｒ Ｕ．Ｋ．ら，（１９９５）Ｒａｄｉｏｔｒａｃｅｒ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ−Ｒａｄｉｏｍｅｔａｌｓ ａｎｄ ｔｈｅｉｒ ｃｈｅｌａｔｅｓ，Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅ ｏｆ Ｎｕｃｌｅａｒ Ｍｅｄｅｃｉｎｅ，Ｗａｇｎｅｒ Ｈ．Ｎ．（Ｅｄ），Ｓａｕｎｄｅｒｓ：Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，２２０−２２８；Ｗｅｉｎｅｒ Ｒ．Ｅ．ら，（２００３）Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ｏｆ ｇａｌｌｉｕｍ ａｎｄ ｉｎｄｉｕｍ ｒａｄｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ−Ｒａｄｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ（Ｗｅｌｃｈ ＭＪ，Ｒｅｄｖａｎｌｙ ＣＳ Ｅｄｓ．），Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ−Ｃｈｉｃｈｅｓｔｅｒ−Ｂｒｉｓｂａｎｅ−Ｔｏｒｏｎｔｏ，Ｗｉｌｅｙ−ｌｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ Ｐｕｂ．，３６３−４００；Ａｎｄｅｒｓｏｎ Ｃ．Ｊ．ら，（２００３）Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ｏｆ ｃｏｐｐｅｒ ｒａｄｉｏｎｕｃｌｅｉｄｅｓ ａｎｄ ｒａｄｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ ｐｒｏｄｕｃｔｓ，Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ−Ｒａｄｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ（Ｗｅｌｃｈ ＭＪ，Ｒｅｄｖａｎｌｙ ＣＳ Ｅｄｓ．），Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ−Ｃｈｉｃｈｅｓｔｅｒ−Ｂｒｉｓｂａｎｅ−Ｔｏｒｏｎｔｏ，Ｗｉｌｅｙ−ｌｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ Ｐｕｂ．，４０１−４２２；Ｍａｈｍｏｏｄ Ａ．ら，（２００３）Ｔｅｃｈｎｅｔｉｕｍ ｒａｄｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ−Ｒａｄｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ（Ｗｅｌｃｈ ＭＪ，Ｒｅｄｖａｎｌｙ ＣＳ Ｅｄｓ．），Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ−Ｃｈｉｃｈｅｓｔｅｒ−Ｂｒｉｓｂａｎｅ−Ｔｏｒｏｎｔｏ，Ｗｉｌｅｙ−ｌｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ Ｐｕｂ．，３２３−３６２）。
【００２７】
フッ素−１８原子（または、臭素−７６、ヨウ素−１２３またはヨウ素−１２４）の直接付加は、例えば３−フェニル及び／またはピリダジノ［４，５−ｂ］インドール芳香族環上で、並びに他の化学的に接近し得る位置（例えば、アセトアミド官能基）上で実施され得る。これらの放射性ハロゲンの（例えば、スペーサー基の使用を介する）間接付加、または上に挙げた金属放射活性放射性同位元素（キレート化剤の使用を介するガリウム−６８、銅−６４またはテクネチウム−９９ｍ）の付加はＮ，Ｎ，５−トリメチル−４−オキソ−３−フェニル−３，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピリダジノ［４，５−ｂ］インドール−１−アセトアミド（Ａ）コアの化学的に接近可能な位置でも実施され得る（上に挙げた参考文献を参照されたい）。
【００２８】
投与：放射標識されているバイオマーカーの投与は好ましくは静脈内投与ルートによる。
【００２９】
第１実施形態は、放射標識されている７−クロロ−Ｎ，Ｎ，５−トリメチル−４−オキソ−３−フェニル−３，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピリダジノ［４，５−ｂ］インドール−１−アセトアミドの個人における病的状態に関連するＰＢＲ（末梢ベンゾジアゼピン受容体）レベル及び炎症を検出するためのバイオマーカーとしての使用であり、前記放射標識は炭素−１１、放射性ハロゲン及び放射性金属の中から選択される。好ましくは、前記化合物は炭素−１１で放射標識されており、より好ましくはインドール核の５位に位置しているメチル基の炭素上で炭素−１１で放射標識されている。
【００３０】
別の実施形態では、７−クロロ−Ｎ，Ｎ，５−トリメチル−４−オキソ−３−フェニル−３，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピリダジノ［４，５−ｂ］インドール−１−アセトアミドは、優先的にフェニル環のパラ位で、塩素原子に代えて（場合によりスベーサーを用いて、下記参照）ピリダジノ［４，５−ｂ］インドールの７位で、またはＮ−メチル位（Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド官能基またはインドール核の５位に位置しているメチル基）で放射性金属で放射標識されている。
【００３１】
別の実施形態では、７−クロロ−Ｎ，Ｎ，５−トリメチル−４−オキソ−３−フェニル−３，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピリダジノ［４，５−ｂ］インドール−１−アセトアミドは、優先的にフェニル環のパラ位で、塩素原子に代えて（場合によりスベーサーを用いて、下記参照）ピリダジノ［４，５−ｂ］インドールの７位で、またはＮ−メチル位（Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド官能基またはインドール核の５位に位置しているメチル基）で放射性金属で放射標識されている。
【００３２】
幾つかの実施形態では、ＰＢＲレベル及び炎症の検出はＰＥＴイメージング（陽電子放射断層撮影法）またはＳＰＥＣＴイメージング（単一光子放射型コンピュータ断層撮影法）により実施される。
【００３３】
本発明の幾つかの実施形態では、放射標識形態の７−クロロ−Ｎ，Ｎ，５−トリメチル−４−オキソ−３−フェニル−３，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピリダジノ［４，５−ｂ］インドール−１−アセトアミドが病的状態に関連するＰＢＲレベルの変化及び炎症を検出するためのバイオマーカーとして使用され、前記病的状態は脳損傷、例えば卒中、虚血再灌流障害及び外傷性脳損傷；脳感染、例えば脳炎；神経疾患、例えば多発性硬化症、アルツハイマー病、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症、認知症、大脳皮質基底核変性症、ハンチントン病及びてんかん；精神病、例えば統合失調症；末梢炎症プロセス、例えば肺炎症、アテローム性動脈硬化症、心虚血、腎虚血、リウマチ（線維筋痛）、乾癬性関節炎、関節リウマチ及び骨関節症；増殖性疾患、例えば癌から選択される。
【００３４】
本発明の幾つかの実施形態では、放射標識形態の７−クロロ−Ｎ，Ｎ，５−トリメチル−４−オキソ−３−フェニル−３，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピリダジノ［４，５−ｂ］インドール−１−アセトアミドがＰＢＲレベル及び炎症のバイオマーカーとして使用され、前記炎症は神経炎症である。
【００３５】
本発明の幾つかの実施形態では、放射標識形態の７−クロロ−Ｎ，Ｎ，５−トリメチル−４−オキソ−３−フェニル−３，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピリダジノ［４，５−ｂ］インドール−１−アセトアミドが治療処置の有効性を評価するために使用される。
【００３６】
本発明は、放射標識形態の７−クロロ−Ｎ，Ｎ，５−トリメチル−４−オキソ−３−フェニル−３，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピリダジノ［４，５−ｂ］インドール−１−アセトアミドを用いる病的状態に関連するＰＢＲ及び炎症の検出方法にも関する。
【００３７】
幾つかの実施形態では、放射標識形態の７−クロロ−Ｎ，Ｎ，５−トリメチル−４−オキソ−３−フェニル−３，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピリダジノ［４，５−ｂ］インドール−１−アセトアミドは炭素−１１、放射性ハロゲン及び放射性金属の中から選択される放射標識を含有している。幾つかの実施形態では、放射標識形態の７−クロロ−Ｎ，Ｎ，５−トリメチル−４−オキソ−３−フェニル−３，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピリダジノ［４，５−ｂ］インドール−１−アセトアミドは炭素−１１で標識されている。
【００３８】
幾つかの実施形態では、放射標識形態の７−クロロ−Ｎ，Ｎ，５−トリメチル−４−オキソ−３−フェニル−３，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピリダジノ［４，５−ｂ］インドール−１−アセトアミドはインドール核の５位に位置しているメチル基の炭素上で放射標識されている。
【００３９】
幾つかの実施形態では、７−クロロ−Ｎ，Ｎ，５−トリメチル−４−オキソ−３−フェニル−３，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピリダジノ［４，５−ｂ］インドール−１−アセトアミドは優先的にはフェニル環のパラ位で、塩素原子に代えて（場合によりスベーサーを用いて、下記参照）ピリダジノ［４，５−ｂ］インドールの７位で、またはＮ−メチル位（Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド官能基またはインドール核の５位に位置しているメチル基）で放射性金属で放射標識されている。
【００４０】
幾つかの実施形態では７−クロロ−Ｎ，Ｎ，５−トリメチル−４−オキソ−３−フェニル−３，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピリダジノ［４，５−ｂ］インドール−１−アセトアミドは優先的には３−フェニル環のパラ位で、塩素原子に代えて（場合によりスベーサーを用いて、下記参照）ピリダジノ［４，５−ｂ］インドールの７位で、またはＮ−メチル位（Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド官能基またはインドール核の５位に位置しているメチル基）で放射性ハロゲン、好ましくは放射性ハロゲンフッ素−１８で放射標識されている。
【００４１】
本発明の幾つかの実施形態では、病的状態は脳損傷、例えば卒中、虚血再灌流障害、外傷性脳損傷；脳感染、例えば脳炎；神経疾患、例えば多発性硬化症、アルツハイマー病，パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症、認知症、大脳皮質基底核変性症，ハンチントン病及びてんかん；精神病、例えば統合失調症；末梢炎症プロセス、例えば肺炎症、アテローム性動脈硬化症、心虚血、腎虚血、リウマチ（線維筋痛）、乾癬性関節炎、関節リウマチ及び骨関節症；増殖性疾患、例えば癌から選択される。
【００４２】
本発明の別の実施形態は、病的状態に関連するＰＢＲ及び炎症の検出方法であり、前記炎症は神経炎症である。
【００４３】
本発明の別の実施形態は、占有率研究のために実施される病的状態に関連するＰＢＲ及び炎症の検出方法である。
【００４４】
別の実施形態は、病的状態に関連するＰＢＲ及び炎症の検出方法であり、前記方法は
ａ）放射標識形態の７−クロロ−Ｎ，Ｎ，５−トリメチル−４−オキソ−３−フェニル−３，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピリダジノ［４，５−ｂ］インドール−１−アセトアミドを投与するステップ；
ｂ）ＰＥＴ（または、ＳＰＥＣＴ）技術を用いて脳または他の末梢組織中の関心ある領域の画像を取得するステップ；
ｃ）この関心ある領域中の放射標識形態の７−クロロ−Ｎ，Ｎ，５−トリメチル−４−オキソ−３−フェニル−３，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピリダジノ［４，５−ｂ］インドール−１−アセトアミドに関連するＰＥＴシグナルを定量することによる前記関心ある領域中のＰＢＲのレベルを定量するステップ；
ｄ）ステップｃ）で得たＰＥＴ（ＳＰＥＣＴ）シグナルを関心ある対照領域で得たシグナルと比較するステップ；
ｅ）病的状態に関連する炎症の存在を調べるステップ；
を含む。
【００４５】
本発明は、放射標識形態の７−クロロ−Ｎ，Ｎ，５−トリメチル−４−オキソ−３−フェニル−３，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピリダジノ［４，５−ｂ］インドール−１−アセトアミドを含む正常状態に関連するＰＢＲレベル及び病的状態に関連するＰＢＲレベルの変化を検出するための診断キットにも関する。
【００４６】
下記実施例により本発明を更に説明するが、これらは本発明を限定すると意図されない。便宜上の理由且つ読みやすくするために、化合物７−クロロ−Ｎ，Ｎ，５−トリメチル−４−オキソ−３−フェニル−３，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピリダジノ［４，５−ｂ］インドール−１−アセトアミドを図面及び結果中では「Ａ」と改名する。
【図面の簡単な説明】
【００４７】
【図１】病変及び無傷のラット線条体における［１１Ｃ］−Ａ及び［１１Ｃ］ＰＫ１１１９５の時間−放射能曲線。データを注射後時間（分）の関数としてのｃｍ３あたりの注射用量の％として表す。
【図２】病変対無傷対側のラット線条体における［１１Ｃ］−Ａ及び［１１Ｃ］ＰＫ１１１９５取り込みの比。
【図３】病変（同側）及び無傷（対側）のラット線条体における［１１Ｃ］−Ａの時間−放射能曲線。矢印は、病変（同側＋ＰＫ）及び無傷対側（対側＋ＰＫ）のラット線条体における［１１Ｃ］−Ａ注射から２０分後の過剰の１ｍｇ／ｋｇのＰＫ１１１９５の添加を指す。データを注射後時間（分）の関数としてのｃｍ３あたりの注射用量の％として表す。
【図４】病変（同側Ａ）及び無傷（対側Ａ）のラット線条体における［１１Ｃ］−Ａの時間−放射能曲線。矢印は、病変（同側Ａ＋Ａ）及び無傷対側（対側Ａ＋Ａ）のラット線条体における［１１］−Ａの注射から２０分後の過剰の１ｍｇ／ｋｇのＡの添加を指す。データを注射後時間（分）の関数としてのｃｍ３あたりの注射用量の％として表す。
【図５】病変後７〜８日目のラット脳切片（２０μｍ）の［１１Ｃ］−Ａ（１８ｎＭ）オートラジオグラフィー。非特異的結合を過剰の非標識ＰＫ１１１９５（２３μＭ）またはＡ（２２μＭ）を用いて評価した。ＰＢＲ対中枢ベンゾジアゼピン結合部位に対する特異性は過剰の非標識フルマゼニル（２７μＭ）を用いて評価した。データを任意面積単位あたりのｄｐｍとして表す。＊は病変線条体における［１１Ｃ］−Ａ（１８ｎＭ）結合に対する有意な差を示す。
【図６】１１〜１２ヶ月齢ＡＰＰ／Ｓ１及び野生型ＰＳ１トランスジェニックマウスの全脳（小脳を除く）における［１１Ｃ］−Ａ及び［１１Ｃ］ＰＫ１１１９５の時間−放射能曲線。データは注射後時間（分）の関数としてのｃｍ３あたりの注射用量の％として表す。
【図７】２０〜２３ヶ月齢のＡＰＰ／ＰＳ１及び野生型ＰＳ１トランスジェニックマウス由来の全脳切片における［１１Ｃ］−Ａ（１８ｎＭ）オートラジオグラフィー。非特異的結合は過剰の非標識ＰＫ１１１９５（２３μＭ）またはＡ（２２μＭ）を用いて評価した。ＰＢＲ対中枢ベンゾジアゼピン結合部位に対する特異性は過剰の非標識フルマゼニル（２７μＭ）を用いて評価した。データを任意面積単位あたりのｄｐｍとして表す。
【図８】研究の異なる時点、すなわち基準時（Ａ、Ｂ）及び右線条体の病変から２４時間後（Ｃ、Ｄ）の非ヒト霊長類の４つの異なる脳領域（右及び左の線条体、前頭前野皮質、小脳）における［１１Ｃ］−Ａの時間−放射能曲線、並びに１２０分にわたる特定の冠状脳切片の対応するＰＥＴ加重画像。パネル（Ｅ、Ｆ）は左線条体の病変から４８時間後及び右線条体の病変から７ヶ月後の［１１Ｃ］−Ａ時間−放射能曲線を示す。データは注射後時間（分）の関数としての１００ｍＬあたりの注射用量の％（％ＩＤ／１００ｍＬ）として表す。
【図９】研究の４つの異なる時点、すなわち基準時（Ａ、Ｂ）、病変から４８時間後（Ｃ、Ｄ）、病変から９日後（Ｅ、Ｆ）、並びに左線条体の病変から１６日後及び右線条体の病変から４８時間後（Ｇ、Ｈ）の４つの異なる脳領域（右及び左の線条体、前頭前野皮質、小脳）における［１１Ｃ］−Ａの時間−放射能曲線、並びに１２０分にわたる特定の冠状脳切片の対応するＰＥＴ加重画像。矢印は、過剰の非標識ＰＫ１１１９５（１ｍｇ／ｋｇ）の投与時間を指す。データは注射後時間（分）の関数としての１００ｍＬあたりの注射用量の％として表す。
【図１０】血漿及び脳中の［１１Ｃ］−Ａ代謝産物の分析。
【図１１】Ａの特定の炭素−１１−標識及びフッ素−１８−標識形態。
【発明を実施するための形態】
【００４８】
方法
リガンドの放射合成
炭素−１１での標識
［１１Ｃ］ＰＫ１１１９５（（Ｒ）−Ｎ−［１１Ｃ］メチル−Ｎ−（１−メチルプロピル）−１−（２−クロロフェニル）イソキノリン−３−カルボキサミド，Ｒ−エナンチオマー）
［１１Ｃ］ＰＫ１１１９５の製造は公開方法（Ｃａｍｓｏｎｎｅ Ｃ．ら，（１９８４）Ｊ．Ｌａｂｅｌ．Ｃｏｍｐ．Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍ．，２１：９８５−９９１；Ｃｒｅｍｅｒ Ｊ．Ｅ．ら，（１９９２）Ｉｎｔ．Ｊ．Ｒａｄ．Ａｐｐｌ．Ｉｎｓｔｒｕｍ．Ｂ．１９：１５９−６６；Ｂｏｕｔｉｎ，Ｈ．ら，（２００７）Ｇｌｉａ，５５：１４５９−６８；Ｂｏｕｔｉｎ，Ｈ．ら，（２００７）Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．，４８：５７３−５８１）の僅かな修飾に基づいており、（１）−１０℃でヨウ化［１１Ｃ］メチルを１．５〜２．０ｍｇの標識用前駆体及び１５〜２０ｍｇの粉末状水酸化物（過剰）を含有するＤＭＦ／ＤＭＳＯ（２／１（ｖ：ｖ），３００μＬ）中にトラップするステップ；（２）１１０℃で３分間加熱するステップ；（３）混合物を０．５ｍＬのＨＰＬＣ移動相に取るステップ；及び（４）半分取ＨＰＬＣを用いて精製するステップ；を含む。品質コントロール、特に放射性化学的及び化学的純度の測定は最終産物バッチのアリコートに対して実施した。
【００４９】
［１１Ｃ］−Ａ（Ｎ−メチルインドール官能基での標識：７−クロロ−Ｎ，Ｎ−ジメチル−５−［１１Ｃ］メチル−４−オキソ−３−フェニル−３，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピリダジノ［４，５−ｂ］インドール−１−アセトアミド）
［１１Ｃ］−Ａの製造は、（１）−１０℃で［１１Ｃ］メチルトリフレートを０．２〜０．３ｍｇの標識用前駆体及び４ｍｇの粉末状炭酸カリウム（過剰）を含有するＤＭＦ（３００μＬ）中にトラップするステップ；（２）１２０℃で３分間加熱するステップ；（３）混合物を０．５ｍＬのＨＰＬＣ移動相に取るステップ；及び（４）半分取ＨＰＬＣを用いて精製するステップ；を含む。品質コントロール、特に放射性化学的及び化学的純度の測定は最終産物バッチのアリコートに対して実施した。
【００５０】
［１１Ｃ］−Ａ（Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド官能基での標識：７−クロロ−Ｎ−［１１Ｃ］メチル−Ｎ，５−ジメチル−４−オキソ−３−フェニル−３，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピリダジノ［４，５−ｂ］インドール−１−アセトアミド）
［１１Ｃ］−Ａの製造は、（１）−１０℃でヨウ化［１１Ｃ］メチルを０．５〜１．０ｍｇの標識用前駆体及び５μＬのメタノール中１Ｍ 水酸化テトラブチルアンモニウム溶液を含有するＤＭＦとＤＭＳＯの１／２（ｖ：ｖ）混合物（１００／２００μＬ）中にトラップするステップ；（２）１２０℃で３分間加熱するステップ；（３）混合物を０．５ｍＬのＨＰＬＣ移動相に取るステップ；及び（４）半分取ＨＰＬＣを用いて精製するステップ；をも含む。品質コントロール、特に放射性化学的及び化学的純度の測定は最終産物バッチのアリコートに対して実施した。
【００５１】
フッ素−１８での標識
Ａのフッ素−１８標識誘導体のすべての製造は、少なくとも（１）１〜１０ｍｇの適当な標識用前駆体を含有する特定溶媒（３００〜９００μＬ）中で中〜高温で［１８Ｆ］フッ素源を用いてフッ素化するステップ；及び（２）例えば半分取ＨＰＬＣを用いて精製するステップ；を含む。上記したように、品質コントロール、特に放射性化学的及び化学的純度の測定は最終産物バッチのアリコートに対して実施した。
【００５２】
この反応において使用される［１８Ｆ］フッ素アニオンの源の種類は特に限定されず、分子の他の部分に悪影響を持たない限り、このタイプの反応において慣用されている［１８Ｆ］フッ素アニオンの源が本発明において等しく使用され得る。［１８Ｆ］フッ素アニオンの適当な源の例には、［１８Ｆ］フッ化アルカリ金属、例えば［１８Ｆ］フッ化ナトリウム、［１８Ｆ］フッ化カリウム、［１８Ｆ］フッ化セシウム；［１８Ｆ］フッ化アンモニウム、［１８Ｆ］フッ化テトラアルキルアンモニウム、例えば［１８Ｆ］フッ化テトラブチルアンモニウムが含まれる。これらの中で、［１８Ｆ］フッ化アルカリ金属、特にフッ化カリウムが好ましい。［１８Ｆ］フッ素アニオンの源の対カチオン種と複合体形成し得るリガンドの存在下で［１８Ｆ］フッ素アニオンの源を活性化してもよい。リガンドは特に単環式または多環式多座配位リガンドであり得る。適当なリガンドの例には、特にクラウンエーテル、例えば１，４，７，１０，１３−ペンタオキサシクロオクタデカン（１８−Ｃ−６）；またはクリプタンド、例えばＫ２２２（登録商標）の商品名で販売されている４，７，１３，１６，２１，２４−ヘキサオキサ−１，１０−ジアザビシクロ−［８，８，８］ヘキサコサンが含まれる。好ましくは、［１８Ｆ］フッ素アニオンの源は［１８Ｆ］フッ化アルカリ金属−クリプテート複合体、特に［１８Ｆ］フッ化カリウム−クリプテート複合体、好ましくは［１８Ｆ］フッ化カリウム−４，７，１３，１６，２１，２４−ヘキサオキサ−１，１０−ジアザビシクロ−［８，８，８］ヘキサコサン（Ｋ［１８Ｆ］／Ｋ２２２）である。複合体Ｋ［１８Ｆ］／Ｋ２２２（登録商標）は慣用方法（Ｄｏｌｌｅ Ｆ．ら，（１９９９）Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，４２：２２５１−２２５９またはＤｏｌｃｉ Ｌ．ら，（１９９９）Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，７：４６７−４７９）により製造され得る。
【００５３】
フッ素化反応は各種溶媒中で実施され得、広範囲の温度で起こり得る。通常、反応を約５０〜約２００℃の温度で実施することが好都合であり、よりしばしば使用されている溶媒はジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）及びアセトニトリルである。反応に要する時間は、多くの要因、特に反応温度、試薬及び溶媒の種類、並びに使用する標識用前駆体の量に依存して広範囲で異なり得る（例えば、約５〜１５分）（Ｋｉｌｂｏｕｒｎ ＭＲ．（１９９０）Ｆｌｕｏｒｉｎｅ−１８ Ｌａｂｅｌｉｎｇ ｏｆ Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｎｕｃｌｅａｒ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｓｅｒｉｅｓ（Ｋｉｌｂｏｕｒｎ ＭＲ Ｅｄ．），Ｎａｔｉｏｎａｌ Ａｃａｄｅｍｙ Ｐｒｅｓｓ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｄ．Ｃ，１−１４９；Ｌａｓｎｅ Ｍ．−Ｃ．ら，（２００２）Ｔｏｐｉｃｓ ｉｎ Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２２２：２０１−２５８；Ｄｏｌｌｅ Ｆ．ら，（２００５）Ｃｕｒｒ．Ｐｈａｒｍ．Ｄｅｓｉｇｎ，１１：３２２１−３２３５；Ｃａｉ Ｌ．ら，（２００８）Ｅｕｒ．Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，１７：２８５３−２８７３；Ｄｏｌｌｅ Ｆ．ら，（２００８）Ｆｌｕｏｒｉｎｅ ａｎｄ Ｈｅａｌｔｈ：Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｉｍａｇｉｎｇ，Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ Ｍａｔｅｒｉａｌｓ ａｎｄ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｔｒｅｓｓａｕｄ Ａ，Ｈａｕｆｅ Ｇ（Ｅｄｓ）．Ｅｌｓｅｖｉｅｒ：Ａｍｓｔｅｒｄａｍ−Ｂｏｓｔｏｎ−Ｈｅｉｄｅｌｂｅｒｇ−Ｌｏｎｄｏｎ−Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ−Ｏｘｆｏｒｄ−Ｐａｒｉｓ−Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ−Ｓａｎ Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ−Ｓｉｎｇａｐｏｒｅ−Ｓｙｄｎｅｙ−Ｔｏｋｙｏ，３−６５）。こうして製造した放射性フッ素化化合物は通常炭素−１１−標識誘導体について記載したようにＨＰＬＣにより精製され得るが、反応混合物から他の公知のクロマトグラフィー技術を用いて、または単に前充填した分離カラムを用いて濾過することにより回収または精製してもよい。
【００５４】
［１８Ｆ］フルオロエトキシ−Ａ（７−クロロ−Ｎ，Ｎ，５−トリメチル−４−オキソ−３−（４−［１８Ｆ］フルオロエトキシ）−フェニル−３，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピリダジノ［４，５−ｂ］インドール−１−アセトアミド）
［１８Ｆ］フルオロエトキシ−Ａの製造は、（１）Ｋ［１８Ｆ］Ｆ−Ｋｒｙｐｔｏｆｉｘ（登録商標）２２２複合体を標識用トシルオキシ前駆体（２．０〜８．０ｍｇ）を含有するＤＭＳＯ溶液（６００μＬ）中に取るステップ；（２）１６５℃で３〜１０分間加熱するステップ；（３）Ｃ−８またはＣ−１８ ＰｒｅｐＳｅｐカートリッジを用いて予備精製するステップ；及び（４）半分取ＨＰＬＣを用いて精製するステップ；を含む。品質コントロール、特に放射性化学的及び化学的純度の測定は最終産物バッチのアリコートに対して実施した。
【００５５】
他のハロゲン（臭素−７６、ヨウ素−１２３、ヨウ素−１２４）での標識
すべての他の放射性ハロゲン化誘導体（臭素−７６、ヨウ素−１２３、ヨウ素−１２４）の製造は当業者に公知の標準技術及び手順に従った（Ｍａｚｉｅｒｅ Ｂ．ら，（２００１）Ｃｕｒｒ．Ｐｈａｒｍ．Ｄｅｓ．，７：１９３１−１９４３；Ｃｏｅｎｅｎ Ｈ．Ｈ．ら，（２００６）Ｒａｄｉｏｉｏｄｉｎａｔｉｏｎ ｒｅａｃｔｉｏｎｓ ｆｏｒ ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ−Ｃｏｍｐｅｎｄｉｕｍ ｆｏｒ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｓｔｒａｔｅｇｉｅｓ，Ｃｏｅｎｅｎ Ｈ．Ｈ．，Ｍｅｒｔｅｎｓ Ｊ．，Ｍａｚｉｅｒｅ Ｂ．（Ｅｄｓ），Ｓｐｒｉｎｇｅｒ Ｖｅｒｌａｇ，Ｂｅｒｌｉｎ−Ｈｅｉｄｅｌｂｅｒｇ，１−１０１）。
【００５６】
放射性金属（ガリウム−６８、銅−６４及びテクネチウム−９９ｍ）での標識
放射性金属（ガリウム−６８、銅−６４及びテクネチウム−９９ｍ）で標識されている誘導体の製造も当業者に公知の標準技術及び手順に従った（Ｂｒｕｎｎｅｒ Ｕ．Ｋ．ら，（１９９５）Ｒａｄｉｏｔｒａｃｅｒ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ−Ｒａｄｉｏｍｅｔａｌｓ ａｎｄ ｔｈｅｉｒ ｃｈｅｌａｔｅｓ，Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅ ｏｆ Ｎｕｃｌｅａｒ Ｍｅｄｅｃｉｎｅ，Ｗａｇｎｅｒ Ｈ．Ｎ．（Ｅｄ），Ｓａｕｎｄｅｒｓ：Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，２２０−２２８；Ｗｅｉｎｅｒ Ｒ．Ｅ．ら，（２００３）Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ｏｆ ｇａｌｌｉｕｍ ａｎｄ ｉｎｄｉｕｍ ｒａｄｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ−Ｒａｄｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ（Ｗｅｌｃｈ ＭＪ，Ｒｅｄｖａｎｌｙ ＣＳ Ｅｄｓ．），Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ−Ｃｈｉｃｈｅｓｔｅｒ−Ｂｒｉｓｂａｎｅ−Ｔｏｒｏｎｔｏ，Ｗｉｌｅｙ−ｌｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ Ｐｕｂ．，３６３−４００；Ａｎｄｅｒｓｏｎ Ｃ．Ｊ．ら，（２００３）Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ｏｆ ｃｏｐｐｅｒ ｒａｄｉｏｎｕｃｌｅｉｄｅｓ ａｎｄ ｒａｄｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ ｐｒｏｄｕｃｔｓ，Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ−Ｒａｄｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ（Ｗｅｌｃｈ ＭＪ，Ｒｅｄｖａｎｌｙ ＣＳ Ｅｄｓ．），Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ−Ｃｈｉｃｈｅｓｔｅｒ−Ｂｒｉｓｂａｎｅ−Ｔｏｒｏｎｔｏ，Ｗｉｌｅｙ−ｌｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ Ｐｕｂ．，４０１−４２２；Ｍａｈｍｏｏｄ Ａ．ら，（２００３）Ｔｅｃｈｎｅｔｉｕｍ ｒａｄｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ−Ｒａｄｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ（Ｗｅｌｃｈ ＭＪ，Ｒｅｄｖａｎｌｙ ＣＳ Ｅｄｓ．），Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ−Ｃｈｉｃｈｅｓｔｅｒ−Ｂｒｉｓｂａｎｅ−Ｔｏｒｏｎｔｏ，Ｗｉｌｅｙ−ｌｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ Ｐｕｂ．，３２３−３６２）。
【００５７】
製剤化
［１１Ｃ］ＰＫ１１１９５、［１１Ｃ］−Ａまたは他の放射標識されているＡ誘導体の注射用ｉ．ｖ．液剤としての製剤化は、しばしばＨＰＬＣ溶媒のＷａｔｅｒｓ ＳｅｐＰａｋ（登録商標）カートリッジを用いる除去及び／または１０％以下のエタノール濃度までの水性０．９％ ＮａＣｌ（生理食塩水）での単なる希釈を含む。
【００５８】
動物モデル
研究はすべてフランス法律及び欧州指令に従って実施した。
【００５９】
神経炎症のラットモデル
Ｗｉｓｔａｒラット（平均体重３００ｇ，フランスのｃｅｎｔｒｅ ｄ’Ｅｌｅｖａｇｅ Ｒｅｎｅ Ｊａｎｖｉｅｒ）を温度調節されている湿度管理施設に１２時間／１２時間の明／暗サイクル（午前７時から午後７時まで点灯）で収容し、餌及び水は自由に摂取させた。既報（Ｂｏｕｔｉｎ，Ｈ．ら，（２００７）Ｇｌｉａ ５５：１４５９−６８；Ｂｏｕｔｉｎ，Ｈ．ら，（２００７）Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．，４８：５７３−５８１）のように、ＡＭＰＡ（α−アミノ−３−ヒドロキシ−５−メチル−４−イソオキサゾールプロピオネート）（ＰＢＳ緩衝液中１５ｍＭ，Ｓｉｇｍａ（登録商標））を１μＬ マイクロシリンジ及びマイクロポンプ（注射速度：０．５μＬ／分，ＵｌｔｒａＭｉｃｒｏＰｕｍｐ ＩＩ（登録商標）及びＭｉｃｒｏ４（登録商標）コントローラー，ＷＰＩ Ｉｎｃ．，ＵＳＡ）を用いて定位的注射することにより神経炎症を誘発させた。ＡＭＰＡ（０．５μＬ）を右線条体（ブレグマ＋０．７ｍｍ，矢状縫合から：２．７ｍｍ，脳表面からの深さ：５．５ｍｍ）に注射した。動物は、加熱ブランケット（Ｈｏｍｅｏｔｈｅｒｍｉｃ Ｂｌａｎｋｅｔ Ｃｏｎｔｒｏｌ Ｕｎｉｔ，Ｈａｒｖａｒｄ Ａｐｐａｒａｔｕｓ Ｌｉｍｉｔｅｄ（登録商標），英国ケント州エデンブリッジに所在）を用いて手術中正常体温（体温：３６．７±０．５℃，平均±ＳＤ）を維持した。
【００６０】
神経炎症の霊長類モデル
体重４〜５ｋｇのカニクイザル（Ｍａｃａｃａ ｆａｓｃｉｃｕｌａｒｉｓ）を温度調節されている湿度管理施設に１２時間／１２時間の明／暗サイクル（午前７時から午後７時まで点灯）で収容し、餌及び水は自由に摂取させた。キノリン酸（キノリン酸，ミズーリ州セントルイスに所在のＳｉｇｍａ；０．１Ｍ ＰＢＳ（ｐＨ７．２）中に溶解）を霊長類の線条体に（１つの注射部位は尾状核に、２つの注射部位は被殻に）２つの異なる手術介入の間に、すなわちキノリン酸を１日目に１つの半球に注射し、２週間または７ヶ月後に第２半球に局所定位的注射することにより神経炎症を誘発させた（図８及び９）。各手術の間、動物には６０ナノモルのキノリン酸を２６ゲージ針に取り付けた１０μＬ−Ｈａｍｉｌｔｏｎ注射器を用いて３つの異なる線条体部位に（１つの尾状核部位に５μｌ及び２つの被殻部位に１０μＬ）分布させるように与えた。Ｓｗａｂｏ ａｎｄ Ｃｏｗａｎ（１９８４）の定位的アトラスに従って測定した定期的座標は次の通りであった：尾状核部位［ＡＰ：＋１９ｍｍ，ＭＬ：±６ｍｍ，ＤＶ：洞から−１４ｍｍ］；被殻部位１［ＡＰ：＋１９ｍｍ，ＭＬ：±１２ｍｍ，ＤＶ：定位固定ゼロから−１７ｍｍ］；被殻部位２［ＡＰ：＋１７ｍｍ，ＭＬ：±１３ｍｍ，ＤＶ：洞から−１６ｍｍ］。興奮性毒素を０．１μＬ／分の速度で注射し、毒素の逆流を避けるために注射器を更に５分間適所に残した。手術中、霊長類の温度を正常体温（直腸温：３６±０．６℃，平均±ＳＤ）に維持した。針を除いた後、皮膚を縫合し、動物を麻酔から回復させ、完全に目覚めたらケージに戻した。
【００６１】
トランスジェニックマウス
１匹のＰＳ１Ｍ１４６Ｌ（ＰＳ１）及び２匹のＡＰＰ７５１ＳＬ×ＰＳ１Ｍ１４６Ｌ（ＡＰＰ×ＰＳ１）トランスジェニックマウスの作成及びキャラクタリゼーションは既報（Ｂｌａｎｃｈａｒｄ，Ｖ．ら，（２００３）Ｅｘｐ．Ｎｅｕｒｏｌ．，１８４：２４７−２６３）のように行った。これらの動物では、ＡＰＰがＴｈｙ−１プロモーターの制御下ですべての皮質ニューロンで高レベルで発現される。Ｍ１４６Ｌ突然変異を有するヒトＰＳ１はＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼプロモーターの制御下で発現される。アミロイド量のレベルは所与の年齢でかなり再現性であることが判明した。Ｓａｎｏｆｉ−Ａｖｅｎｔｉｓから提供された１匹のＰＳ１及び２匹のＡＰＰ×ＰＳ１マウスを１１〜１２ヶ月齢でＰＥＴイメージングのために、２０〜２３ヶ月齢でオートラジオグラフィーのために使用した。
【００６２】
マイクロＰＥＴスキャン及びデータ取得
ラット及びトランスジェニックマウス
ラット及び１１〜１２ヶ月齢のトランスジェニックマウスにおいてマイクロＰＥＴイメージングをＡＭＰＡ注射後７日目に実施した。マウス及びラットにおいて、イソフラン５％により麻酔を施し、その後７０％／３０％ ＮＯ２／Ｏ２混合物中２〜２．５％ イソフランにより維持した。ＰＥＴスキャンのために、ラットの頭部をＰＥＴ取得に適合する手製定位フレームに固定し、ラットを正常体温（直腸温：３６．７±０．５℃，平均±ＳＤ）に維持した。マウスを空気流を加熱し得る麻酔マスクを備えたベッドに置き、直腸温を恒温ブランケットコントロールユニットを用いてモニターした。すべてのイメージングプロトコルを［１１Ｃ］ＰＫ１１１９５または［１１Ｃ］−Ａを用いてＣｏｎｃｏｒｄｅ Ｆｏｃｕｓ ２２０ ＰＥＴスキャナーで実施した。
【００６３】
ラットの場合には、放射標識化合物及び非標識リガンドを２４ゲージカテーテルを用いて尾静脈に注射した。放射標識化合物はＰＥＴ取得の開始と同時に注射し、非標識化合物はラジオトレーサーを注射してから２０分後に注射した。ＰＥＴデータは８０分間取得した。マウス場合には、放射標識化合物をＰＥＴスキャン開始の直前に２８ゲージ針を用いて尾静脈に注射した。ＰＥＴデータは６０分間取得した。
【００６４】
霊長類
イメージングはキノリン酸注射の前またはその後のいろいろな時間（病変後２４時間後、４８時間後、９日後、１６日後及び７ヶ月後）に実施した。［１１Ｃ］−Ａを注射し、脳カイネティックスをＰＥＴにより９０分間追跡した。
【００６５】
ＰＥＴイメージングの１時間前に、ケタミン／キシラジン混合物（１５ｍｇ／ｋｇ／１．５ｍｇ／ｋｇ）を筋肉内注射することにより動物に麻酔をかけ、挿管した。次いで、カテーテルをラジオトレーサー注射のために伏在静脈に入れ、血液サンプリングのために大腿動脈に入れた。プロポフォール（Ｄｉｐｒｉｖａｎ（登録商標）１％；０．０５ｍｇ／ｋｇ／分）を静脈内注射することにより動物を麻酔状態に維持した。
【００６６】
動物を装置内に正しく配置するために、動物の頭部を手製定位フレームに固定した。ＰＥＴスキャンを９５個の接触面を同時に取得する高解像ＦｏｃｕｓマイクロＰＥＴ（テネシー州ノックスビルに所在のＣＴＩ−Ｓｉｅｍｅｎｓ）を用いて実施した。減衰を補正するために、まず透過スキャンを６８Ｇｅ回転ロッド源を用いて実施した。マカクに１９２．２９±３３．６７ＭＢｑの［１１Ｃ］−Ａを静脈内注射し、取得を９０分間実施した。ＰＥＴ取得はすべてリストモード（３Ｄモード）で実施し、イメージを以下の時間フレーム：（２５秒の４イメージ）＋（３０秒の４イメージ）＋（１分の２イメージ）＋（２分の５イメージ）＋（５分の３イメージ）＋（１０分の３イメージ）及び（１５分の１イメージ）を用いて再構築し、［１１Ｃ］−Ａの場合全部で９０分間であった。
【００６７】
イメージ分析
ＰＥＴイメージ分析はＡＳＩＰｒｏ ＶＭ（商標）（ＣＴＩ Ｃｏｎｃｏｒｄｅ Ｍｉｃｒｏｓｙｓｔｅｍｓ’Ａｎａｌｙｓｉｓ Ｔｏｏｌｓ ａｎｄ Ｓｙｓｔｅｍ Ｓｅｔｕｐ／Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ Ｔｏｏｌ）及びＢｒａｉｎｖｉｓａ／Ａｎａｔｏｍｉｓｔ（ｈｔｔｐ：／／ｂｒａｉｎｖｉｓａ．ｉｎｆｏ／）を用いて実施した。
【００６８】
ラット血液及び脳中の代謝産物分析
未処置のまたは手術した成体雄Ｗｉｓｔａｒラット（体重３００〜４００ｇ）の尾静脈に［１１Ｃ］−Ａをｉ．ｖ．注射した。１０，２０または３０分後に動物を殺した。血液サンプルを集め、遠心（５分間，３０００ｒｐｍ）することにより血漿を単離した。４００μＬの血清から４００μｌのアセトニトリルを添加することにより血漿タンパク質を沈降させた。遠心（５分間，３０００ｒｐｍ）後、上清をＨＰＬＣカラムに注入した。ラットの脳を除去し、半球を分離した。音波処理による均質化を半球あたり１ｍＬのアセトニトリル中で実施した。急速遠心後、上清をペレットから分離し、減圧下で濃縮した後、ＨＰＬＣに注入した（ＨＰＬＣ条件については放射化学の欄を参照されたい）。
【００６９】
オートラジオグラフィー
［１１Ｃ］−Ａオートラジオグラフィーは、ラット（病変後７〜８日）またはマウス（２０〜２３ヶ月齢）からの２０μｍ脳切片を用いて実施した。非特異的結合を過剰の非標識ＰＫ１１１９５またはＡのいずれかを用いて評価した。ＰＢＲ対中枢ベンゾジアゼピン結合部位に対する特異性は過剰の非標識フルマゼニルを用いて評価しした。切片をトリス緩衝液（ＴＲＩＺＭＡ ｐｒｅ−ｓｅｔ Ｃｒｙｓｔａｌｓ、Ｓｉｇｍａ（登録商標），ｐＨ７，４，４℃でＮａＣｌ １２０ｍＭを用いて５０ｍＭに調節）中で２０分間インキュベートした後、冷緩衝液で２分間２回濯ぎ、次いで冷蒸留水で直ぐに洗浄した。次いで、切片をホスフォイメージャースクリーンに直接接触させて置き、一晩露呈させた。オートラジオグラフをＩｍａｇｅＱｕａｎｔ（商標）ソフトウェアを用いて分析した。
【実施例１】
【００７０】
［１１Ｃ］ＰＫ１１１９５放射合成：
［１１Ｃ］ＰＫ１１１９５の最終ＨＰＬＣ精製を半分取Ｗａｔｅｒｓ Ｓｙｍｍｅｔｒｙ（登録商標）Ｃ−１８ ＨＰＬＣカラム（溶離液：水／アセトニトリル／ＴＦＡ：４０／６０／０．１［ｖ：ｖ：ｖ］；流速７ｍＬ／分）を用いて実施し、放射化学的に純粋な［１１Ｃ］ＰＫ１１１９５に対応するピーク（Ｒｔ：６．５〜７．０分）を集めた。典型的には、５５．５ＧＢｑの［１１Ｃ］ＣＯ２サイクロトロン生成バッチから出発して、約４．５〜５．０ＧＢｑの［１１Ｃ］ＰＫ１１１９５が３０分の放射合成（ＨＰＬＣ精製及び形成を含む）の範囲内で得られた。（Ｗａｔｅｒｓ Ｓｙｍｍｅｔｒｙ−Ｍ（登録商標）Ｃ−１８カラムを用いる分析ＨＰＬＣにより測定した）放射化学純度は９５％以上であり、（放射合成終了時の）比放射能は５０〜９０ＧＢｑ／μｍｏｌの範囲であった。
【実施例２】
【００７１】
［１１Ｃ］−Ａ放射合成（Ｎ−メチルインドール官能基での標識）：
［１１Ｃ］−Ａの最終ＨＰＬＣ精製を半分取Ｚｏｒｂａｘ（登録商標）ＳＢ−Ｃ−１８ ＨＰＬＣカラム（溶離液：０．９％ 水性ＮａＣｌ／ＥｔＯＨ／１Ｍ 水性リン酸緩衝液（ｐＨ２，３）：５０／５０／０．１［ｖ：ｖ：ｖ］；流速：６ｍＬ／分）を用いて実施し、放射化学的に純粋な［１１Ｃ］−Ａに対応するピーク（Ｒｔ：８．０〜８．５分）を集めた。典型的には、５５．５ＧＢｑの［１１Ｃ］ＣＯ２サイクロトロン生成バッチから出発して、約４．５〜６．０ＧＢｑの［１１Ｃ］−Ａが２５分の放射合成（ＨＰＬＣ精製及び形成を含む）の範囲内で得られた。（Ｗａｔｅｒｓ Ｓｙｍｍｅｔｒｙ−Ｍ（登録商標）Ｃ−１８カラムを用いる分析ＨＰＬＣにより測定した）放射化学純度は９５％以上であり、（放射合成終了時の）比放射能は５０〜９０ＧＢｑ／μｍｏｌの範囲であった。
【実施例３】
【００７２】
［１１Ｃ］−Ａ放射合成（Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド官能基での標識）：
［１１Ｃ］−Ａの最終ＨＰＬＣ精製を半分取ＳｙｍｍｅｔｒｙＰｒｅｐ（登録商標）Ｃ−１８ ＨＰＬＣカラム（溶離液：水／アセトニトリル／ＴＦＡ：５０／５０／０．１［ｖ：ｖ：ｖ］；流速：５ｍＬ／分）を用いて実施し、放射化学的に純粋な［１１Ｃ］−Ａに対応するピーク（Ｒｔ：８．０〜８．５分）を集めた。典型的には、５５．５ＧＢｑの［１１Ｃ］ＣＯ２サイクロトロン生成バッチから出発して、約３．５〜５．０ＧＢｑの［１１Ｃ］−Ａが２５分の放射合成（ＨＰＬＣ精製及び形成を含む）の範囲内で得られた。（Ｗａｔｅｒｓ Ｓｙｍｍｅｔｒｙ−Ｍ（登録商標）Ｃ−１８カラムを用いる分析ＨＰＬＣにより測定した）放射化学純度は９５％以上であり、（放射合成終了時の）比放射能は５０〜９０ＧＢｑ／μｍｏｌの範囲であった。
【実施例４】
【００７３】
ｉ）４−ヒドロキシ−Ａ合成：
４−ヒドロキシ−ＡはＷＯ ００／４４３８４に従って再合成され得る。Ｒｆ：０．１５（ＳｉＯ２−ＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ：９５／５ ｖ：ｖ））。１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ ９．７１（ｓ，１Ｈ），７．９４（ｓ，１Ｈ），７．８６（ｄ，１Ｈ，Ｊ：８．４Ｈｚ），７．３９（ｄ，１Ｈ，Ｊ：８．４Ｈｚ），７．３２（ｄ，２Ｈ，Ｊ：８．８Ｈｚ），６．８４（ｄ，２Ｈ，Ｊ：８．８Ｈｚ），４．２７（ｓ，３Ｈ），４．２０（ｓ，２Ｈ），３．１６（ｓ，３Ｈ），２．８４（ｓ，３Ｈ）。１３Ｃ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ １６８．６［Ｃ］，１５７．１［Ｃ］，１５４．８［Ｃ］，１４１．２［Ｃ］，１４０．９［Ｃ］，１３３．６［Ｃ］，１３２．１［Ｃ］，１３０．９［Ｃ］，１２７．８［２．ＣＨ］，１２４．０［ＣＨ］，１２２．６［ＣＨ］，１１８．９［Ｃ］，１１７．３［Ｃ］，１１５．３［２．ＣＨ］，１１１．６［ＣＨ］，４０．０［ＣＨ２］，３７．４［ＣＨ３］，３５．４［ＣＨ３］，３２．０［ＣＨ３］。
【００７４】
ｉｉ）［１１Ｃ］メトキシ−Ａ放射合成：
炭素−１１での標識及び最終ＨＰＬＣ精製は、直ぐ上（実施例４ｉ）で合成したＡの４−ヒドロキシ誘導体を用いて［１１Ｃ］−Ａの製造について記載（実施例２／実施例３）されているように実施され得る。
【実施例５】
【００７５】
（フルオロ）アルコキシ−Ａ及びトシルオキシアルコキシ−Ａの合成のための一般的手順：
Ｋ２ＣＯ３（１０１ｍｇ，０．７３ｍｍｏｌ）を乾燥ＤＭＦ（８〜１２ｍＬ）中に含む懸濁液にＡの４−ヒドロキシ誘導体（１５０ｍｇ，０．３６ｍｍｏｌ，ＷＯ ００／４４３８４を参照されたい）を乾燥ＤＭＦ（２ｍＬ）中に含む溶液を添加する。反応混合物を室温で３０分間攪拌した後、適当なアルキル化試薬（２当量）をＤＭＦ（２ｍＬ）中に含む溶液を徐々に添加する。全混合物を７０℃で２時間攪拌し、室温で更に１時間攪拌する。次いで、飽和水性ＮＨ４Ｃｌ溶液を添加することにより混合物をクエンチし、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。有機層を合わせ、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮乾固した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液としてＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ ９８：２→９５：５ ｖ／ｖ）により精製して、予想される（フルオロ）アルコキシ−Ａを白色粉末または白色綿毛状固体として得た。
【実施例６】
【００７６】
メトキシ−Ａ合成：
ヨウ化メチルを使用し、上の一般的手順（実施例５）を用いて、標的化合物を４０％の収率で得た。Ｒｆ：０．３５（ＳｉＯ２−ＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ：９５／５ ｖ：ｖ））。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ ７．９４（ｄ，１Ｈ，Ｊ：８．４Ｈｚ），７．５３（ｍ，３Ｈ），７．３３（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ：８．４，１．６Ｈｚ），７．００（ｄ，２Ｈ，Ｊ：８．８Ｈｚ），４．３２（ｓ，３Ｈ），４．１８（ｓ，２Ｈ），３．８６（ｓ，３Ｈ），３．２２（ｓ，３Ｈ），３．００（ｓ，３Ｈ）。１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ １６８．４［Ｃ］，１５８．９［Ｃ］，１５５．３［Ｃ］，１４１．６［Ｃ］，１４０．１［Ｃ］，１３４．６［Ｃ］，１３３．２［Ｃ］，１３１．３［Ｃ］，１２７．３［２．ＣＨ］，１２３．３［ＣＨ］，１２３．０［ＣＨ］，１１９．０［Ｃ］，１１７．４［Ｃ］，１１３．９［２．ＣＨ］，１１０．６［ＣＨ］，５５．５［ＣＨ３］，３９．６［ＣＨ２］，３７．６［ＣＨ３］，３５．７［ＣＨ３］，３１．６［ＣＨ３］。
【実施例７】
【００７７】
フルオロエトキシ−Ａ合成：
（Ｄａｍｏｎｔ Ａ．ら，（２００８）Ｊ．Ｌａｂｅｌ．Ｃｏｍｐｄｓ Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍ．，５１：２８６−２９２に従って合成した）２−フルオロエチル−４−メチルベンゼンスルホネートを使用し、上の一般的手順（実施例５）を用いて、標的化合物を６３％の収率で得た。Ｒｆ：０．３８（ＳｉＯ２−ＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ：９５／５ ｖ：ｖ））。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ２Ｃｌ２）δ ７．８９（ｄ，１Ｈ，Ｊ：８．８Ｈｚ），７．５８（ｄ，１Ｈ，Ｊ：１．６Ｈｚ），７．５４（ｄ，２Ｈ，Ｊ：９．２Ｈｚ），７．３４（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ：８．８，１．６Ｈｚ），７．０３（ｄ，２Ｈ，Ｊ：９．２Ｈｚ），４．７８（ｄｔ，２Ｈ，Ｊ２Ｈ−Ｆ：４７．６，Ｊ３Ｈ−Ｈ：４．０Ｈｚ），４．３２（ｓ，３Ｈ），４．２７（ｄｔ，２Ｈ，Ｊ３Ｈ−Ｆ：２８．４Ｈｚ，Ｊ３Ｈ−Ｈ：４．０Ｈｚ），４．１６（ｓ，２Ｈ），３．１９（ｓ，３Ｈ），２．９６（ｓ，３Ｈ）。１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤ２Ｃｌ２）δ １６８．２［Ｃ］，１５７．６［Ｃ］，１５５．１［Ｃ］，１４１．３［Ｃ］，１４０．７［Ｃ］，１４０．３［Ｃ］，１３５．４［Ｃ］，１３２．８［Ｃ］，１２７．４［２．ＣＨ］，１２３．２［ＣＨ］，１２２．６［ＣＨ］，１１８．９［Ｃ］，１１７．２［Ｃ］，１１４．３［２．ＣＨ］，１１０．７［ＣＨ］，８２．０［ｄ，Ｊ１Ｃ−Ｆ：１６９Ｈｚ，ＣＨ２］，６７．５［ｄ，Ｊ２Ｃ−Ｆ：２０Ｈｚ，ＣＨ２］，３９．５［ＣＨ２］，３７．４［ＣＨ３］，３５．２［ＣＨ３］，３１．６［ＣＨ３］。分析 計算値（Ｃ２３Ｈ２２ＣｌＦＮ４Ｏ３・０．１５Ｈ２Ｏ）：Ｃ，６０．１１，Ｈ，４．８９，Ｎ，１２．１９；実測値：Ｃ，６０．００，Ｈ，４．９６，Ｎ，１２．１８。
【実施例８】
【００７８】
フルオロプロポキシ−Ａ合成：
３−フルオロプロピル−４−メチルベンゼンスルホネートを使用し、上の一般的手順（実施例５）を用いて、標的化合物を５８％の収率で得た。Ｒｆ：０．３９（ＳｉＯ２−ＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ：９５／５ ｖ：ｖ））。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ２Ｃｌ２）δ ７．８９（ｄ，１Ｈ，Ｊ：８．４Ｈｚ），７．５８（ｄ，１Ｈ，Ｊ：１．６Ｈｚ），７．５２（ｄ，２Ｈ，Ｊ：９．２Ｈｚ），７．３４（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ：８．４，１．６Ｈｚ），７．０１（ｄ，２Ｈ，Ｊ：９．２Ｈｚ），４．６７（ｄｔ，２Ｈ，Ｊ２Ｈ−Ｆ：４６．８Ｈｚ，Ｊ３Ｈ−Ｈ：６．０Ｈｚ），４．３１（ｓ，３Ｈ），４．１６（ｍ，４Ｈ），３．１９（ｓ，３Ｈ），２．９６（ｓ，３Ｈ），２．２０（ｄｑ５，２Ｈ，Ｊ３Ｈ−Ｆ：２６．０Ｈｚ，Ｊ３Ｈ−Ｈ：６．０）。１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤ２Ｃｌ２）δ １６８．２［Ｃ］，１５８．０［Ｃ］，１５５．１［Ｃ］，１４１．３［Ｃ］，１４０．３［Ｃ］，１３５．０［Ｃ］，１３２．８［Ｃ］，１３１．３［Ｃ］，１２７．３［２．ＣＨ］，１２３．２［ＣＨ］，１２２．５［ＣＨ］，１１９．０［Ｃ］，１１７．２［Ｃ］，１１４．２［２．ＣＨ］，１１０．７［ＣＨ］，８０．８［ｄ，Ｊ１Ｇ−Ｆ：１６３Ｈｚ，ＣＨ２］，６３．９［ｄ，Ｊ３Ｃ−Ｆ：６．０Ｈｚ，ＣＨ２］，３９．５［ＣＨ２］，３７．４［ＣＨ３］，３５．２［ＣＨ３］，３１．５［ＣＨ３］，３０．３［ＣＨ２，Ｊ２Ｃ−Ｆ：２０．０Ｈｚ］。
【実施例９】
【００７９】
フルオロブトキシ−Ａ合成：
４−フルオロブチルブロミドを使用し、上の一般的手順（実施例５）を用いて、標的化合物を７０％の収率で得た。Ｒｆ：０．４０（ＳｉＯ２−ＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ：９５／５ ｖ：ｖ））。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ２Ｃｌ２）δ ７．９０（ｄ，１Ｈ，Ｊ：８．８Ｈｚ），７．５８（ｄ，１Ｈ，Ｊ：１．６Ｈｚ），７．５１（ｄ，２Ｈ，Ｊ：９．２Ｈｚ），７．３４（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ：８．８，１．６Ｈｚ），６．９９（ｄ，２Ｈ，Ｊ：９．２Ｈｚ），４．５４（ｄｔ，２Ｈ，Ｊ２Ｈ−Ｆ：４７．２Ｈｚ，Ｊ３Ｈ−Ｈ：５．６Ｈｚ），４．３３（ｓ，３Ｈ），４．１６（ｓ，２Ｈ），４．０８（ｔ，２Ｈ，Ｊ：５．６Ｈｚ），３．１９（ｓ，３Ｈ），２．９６（ｓ，３Ｈ），１．９７−１．８５（ｍ，４Ｈ）。１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤ２Ｃｌ２）δ １６８．２［Ｃ］，１５８．２［Ｃ］，１５５．１［Ｃ］，１４１．３［Ｃ］，１４０．２［Ｃ］，１３４．９［Ｃ］，１３２．８［Ｃ］，１３１．４［Ｃ］，１２７．３［２．ＣＨ］，１２３．２［ＣＨ］，１２２．５［ＣＨ］，１１９．０［Ｃ］，１１７．２［Ｃ］，１１４．２［２．ＣＨ］，１１０．７［ＣＨ］，８３．８［ｄ，Ｊ１Ｃ−Ｆ：１６３Ｈｚ，ＣＨ２］，６７．６［ＣＨ２］，３９．５［ＣＨ２］，３７．４［ＣＨ３］，３５．２［ＣＨ３］，３１．５［ＣＨ３］，２７．１［ＣＨ２，Ｊ２Ｃ−Ｆ：２０．０Ｈｚ］，２５．１［ＣＨ２，Ｊ３Ｃ−Ｆ：５．０Ｈｚ］。
【実施例１０】
【００８０】
２−（フルオロエトキシ）エトキシ−Ａ合成：
２−（２−フルオロエトキシ）エチル−４−メチルベンゼンスルホネートを使用し、上の一般的手順（実施例５）を用いて、標的化合物を６９％の収率で得た。Ｒｆ：０．４５（ＳｉＯ２−ＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２／アセトン：８０／２０ ｖ：ｖ））。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ２Ｃｌ２）δ ７．９１（ｄ，１Ｈ，Ｊ：８．４Ｈｚ），７．６０（ｄ，１Ｈ，Ｊ：１．６Ｈｚ），７．５４（ｄ，２Ｈ，Ｊ：８．８Ｈｚ），７．３６（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ：８．４，１．６Ｈｚ），７．０４（ｄ，２Ｈ，Ｊ：８．８Ｈｚ），４．６１（ｄｔ，２Ｈ，Ｊ２Ｈ−Ｆ：４８．０Ｈｚ，Ｊ３Ｈ−Ｈ：４．０Ｈｚ），４．３４（ｓ，３Ｈ），４．２２（ｔ，２Ｈ，Ｊ：４．８Ｈｚ），４．１７（ｓ，２Ｈ），３．９１（ｔ，２Ｈ，Ｊ：４．８Ｈｚ），３．８３（ｄｔ，２Ｈ，Ｊ３Ｈ−Ｆ：３０．０，Ｊ３Ｈ−Ｈ：４．０Ｈｚ），３．２１（ｓ，３Ｈ），２．９８（ｓ，３Ｈ）。１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤ２Ｃｌ２）δ １６８．２［Ｃ］，１５７．９［Ｃ］，１５５．１［Ｃ］，１４１．３［Ｃ］，１４０．３［Ｃ］，１３５．１［Ｃ］，１３２．８［Ｃ］，１３１．４［Ｃ］，１２７．３［２．ＣＨ］，１２３．２［ＣＨ］，１２２．５［ＣＨ］，１１９．０［Ｃ］，１１７．２［Ｃ］，１１４．３［２．ＣＨ］，１１０．７［ＣＨ］，８３．２［ｄ，Ｊ１Ｃ−Ｆ：１６７Ｈｚ，ＣＨ２］，７０．４［ｄ，Ｊ２Ｃ−Ｆ：１９Ｈｚ，ＣＨ２］，６９．７［ＣＨ２］，６７．８［ＣＨ２］，３９．５［ＣＨ２］，３７．４［ＣＨ３］，３５．２［ＣＨ３］，３１．６［ＣＨ３］。
【実施例１１】
【００８１】
２−（２−（フルオロエトキシ）エトキシ）エトキシ−Ａ合成：
２−（２−（２−フルオロエトキシ）エトキシ）エチル−４−メチルベンゼンスルホネートを使用し、上の一般的手順（実施例５）を用いて、標的化合物を６３％の収率で得た。Ｒｆ：０．３２（ＳｉＯ２−ＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２／アセトン：８０／２０ ｖ：ｖ））。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ２Ｃｌ２）δ ７．９１（ｄ，１Ｈ，Ｊ：８．８Ｈｚ），７．６０（ｄ，１Ｈ，Ｊ：１．６Ｈｚ），７．５４（ｄ，２Ｈ，Ｊ：８．８Ｈｚ），７．３６（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ：８．８，１．６Ｈｚ），７．０４（ｄ，２Ｈ，Ｊ：８．８Ｈｚ），４．５７（ｄｔ，２Ｈ，Ｊ２Ｈ−Ｆ：４７．６Ｈｚ，Ｊ３Ｈ−Ｈ：４．４Ｈｚ），４．３３（ｓ，３Ｈ），４．２１（ｔ，２Ｈ，Ｊ：４．４Ｈｚ），４．１７（ｓ，２Ｈ），３．８８（ｔ，２Ｈ，Ｊ：４．８Ｈｚ），３．８０−３．６５（ｍ，６Ｈ），３．２１（ｓ，３Ｈ），２．９８（ｓ，３Ｈ）。１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤ２Ｃｌ２）δ １６８．２［Ｃ］，１５８．０［Ｃ］，１５５．１［Ｃ］，１４１．３［Ｃ］，１４０．３［Ｃ］，１３５．１［Ｃ］，１３２．８［Ｃ］，１３１．４［Ｃ］，１２７．３［２．ＣＨ］，１２３．２［ＣＨ］，１２２．５［ＣＨ］，１１９．０［Ｃ］，１１７．２［Ｃ］，１１４．３［２．ＣＨ］，１１０．７［ＣＨ］，８３．２［ｄ，Ｊ１Ｃ−Ｆ：１６７Ｈｚ，ＣＨ２］，７０．７［ＣＨ２］，７０．６［ＣＨ２］，７０．３［ｄ，Ｊ２Ｃ−Ｆ：１９Ｈｚ，ＣＨ２］，６９．６［ＣＨ２］，６７．８［ＣＨ２］，３９．５［ＣＨ２］，３７．４［ＣＨ３］，３５．２［ＣＨ３］，３１．６［ＣＨ３］。
【実施例１２】
【００８２】
トシルオキシエトキシ−Ａ合成：
（Ｄａｍｏｎｔ Ａ．ら，（２００８）Ｊ．Ｌａｂｅｌ．Ｃｏｍｐｄｓ．Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍ．，５１：２８６−２９２に従って合成した）エタン−１，２−ジイルビス（４−メチルベンゼンスルホネート）を使用し、上の一般的手順（実施例５）を用いて、標的化合物を４５％の収率で得た。Ｒｆ：０．７２（ＳｉＯ２−ＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ：９５／５ ｖ：ｖ））。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ２Ｃｌ２）δ ７．８９（ｄ，１Ｈ，Ｊ：８．８Ｈｚ），７．８４（ｄ，２Ｈ，Ｊ：８．４Ｈｚ），７．６０（ｄ，１Ｈ，Ｊ：１．６Ｈｚ），７．５３（ｄ，２Ｈ，Ｊ：８．８Ｈｚ），７．４１（ｄ，２Ｈ，Ｊ：８．４Ｈｚ），７．３６（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ：８．８，１．６Ｈｚ），６．９１（ｄ，２Ｈ，Ｊ：８．８Ｈｚ），４．４０（ｔ，２Ｈ，Ｊ：４．４Ｈｚ），４．３２（ｓ，３Ｈ），４．２２（ｔ，２Ｈ，Ｊ：４．４Ｈｚ），４．１７（ｓ，２Ｈ），３．２１（ｓ，３Ｈ），２．９８（ｓ，３Ｈ），２．４８（ｓ，３Ｈ）。１３Ｃ ＮＭＲ（ＣＤ２Ｃｌ２）δ １６８．１［Ｃ］，１５７．２［Ｃ］，１５５．０［Ｃ］，１４５．２［Ｃ］，１４１．２［Ｃ］，１４０．３［Ｃ］，１３５．５［Ｃ］，１３２．８［Ｃ］，１３２．７［Ｃ］，１３１．３［Ｃ］，１２９．９［２．ＣＨ］，１２７．９［２．ＣＨ］，１２７．４［２．ＣＨ］，１２３．２［ＣＨ］，１２２．６［ＣＨ］，１１８．９［Ｃ］，１１７．２［Ｃ］，１１４．４［２．ＣＨ］，１１０．７［ＣＨ］，６８．３［ＣＨ２］，６５．８［ＣＨ２］，３９．５［ＣＨ２］，３７．４［ＣＨ３］，３５．２［ＣＨ３］，３１．６［ＣＨ３］，２１．３［ＣＨ３］。
【００８３】
上記したフルオロアルコキシ−Ａ誘導体のフッ素−１８での標識用前駆体としてのトシルオキシプロポキシ−Ａ、トシルオキシブトキシ−Ａ、２−（トシルオキシエトキシ）エトキシ−Ａ及び２−（２−（トシルオキシエトキシ）エトキシ）エトキシ−Ａは、適切なアルキル化試薬を用いて直ぐ上に記載されているように製造され得る。
【実施例１３】
【００８４】
［１８Ｆ］フルオロエトキシ−Ａ放射合成：
［１８Ｆ］フルオロエトキシ−Ａの最終ＨＰＬＣ精製は半分取Ｓｙｍｍｅｔｒｙ（登録商標）Ｃ−１８ ＨＰＬＣカラム（溶離液：水／アセトニトリル／ＴＦＡ：６０／４０／０．１［ｖ：ｖ：ｖ］；流速：５ｍＬ／分）を用いて実施し、放射化学的に純粋な［１８Ｆ］フルオロエトキシ−Ａに対応するピーク（Ｒｔ：１１．０〜１３．０分）を集めた。３７ＧＢｑの［１８Ｆ］フルオリドサイクロトン生産バッチから出発して、約３．７ＧＢｑの［１８Ｆ］フルオロエトキシ−Ａが９０分の放射合成（ＨＰＬＣ精製及び形成を含む）の範囲内で得られた。（Ｗａｔｅｒｓ Ｓｙｍｍｅｔｒｙ−Ｍ（登録商標）Ｃ−１８カラムを用いる分析ＨＰＬＣにより測定した）放射化学純度は９５％以上であり、（放射合成の最終時の）比放射能は５０ＧＢｑ／μｍｏｌ以上であった。
【００８５】
［１８Ｆ］フルオロプロポキシ−Ａ、［１８Ｆ］フルオロブトキシ−Ａ、２−（［１８Ｆ］フルオロエトキシ）エトキシ−Ａ及び２−（２−（［１８Ｆ］フルオロエトキシ）エトキシ）エトキシ−Ａは、フッ素−１８標識用前駆体として対応するトシルオキシアルコキシ−Ａ誘導体（実施例１２）から直ぐ上に記載されているように製造され得る。
【実施例１４】
【００８６】
ＡＭＰＡ注射ラットの病変線条体（ＰＢＲ発現が誘発されている領域）における［１１Ｃ］−Ａの取り込みは、ＰＢＲが全くまたは少ししか発現していないと予想される無傷対側の線条体と比較して有意により高い（図１）。病変線条体における［１１Ｃ］−Ａの取り込みも基準ＰＢＲ ＰＥＴリガンドの［１１Ｃ］ＰＫ１１１９５で観察された取り込みよりも有意により高い（図１）。無傷線条体に対する病変線条体における取り込み比も［１１Ｃ］ＰＫ１１１９５の場合よりも［１１Ｃ］−Ａの場合で有意により高い（図２）。結合ポテンシャル及びＲ１も［１１Ｃ］ＰＫ１１１９５の場合よりも［１１Ｃ］−Ａの場合で有意により高い（ＢＰ＝１．６５±０．３６対０．６６±０．１５；Ｒ１＝１．２６±０．０８対１．１０±０．０５）。
【００８７】
非標識ＰＫ１１１９５（図３）もＡ（図４）（１ｍｇ／ｋｇ ｉ．ｖ．；［１１Ｃ］−Ａ注射から２０分後）も病変線条体における［１１Ｃ］−Ａの脳取り込みを大きく低減させた。いずれの非標識化合物も、多分［１１Ｃ］−Ａが脳外結合部位から遊離されるために［１１Ｃ］−Ａの血液濃度が高くなるので対側における［１１Ｃ］−Ａ結合を少ししか増加させなかった。
【００８８】
［１１Ｃ］−Ａ注射から１０及び２０分後にラットの血液及び血漿中に存在する代謝産物及び［１１Ｃ］−Ａ注射から１０、２０及び３０分後にラットの脳中に存在する代謝産物の分析は本質的に親化合物のみを検出した（図１０）。
【００８９】
加えて、脳切片に対する［１１Ｃ］−Ａ結合のオートラジオグラフィーは同側対対側比が高い（３．８）というイメージング結果を反映し、これは過剰の非標識ＰＫ１１１９５またはＡにより無効にされる（図５）。［１１Ｃ］−Ａ結合の小さいが有意な低下もベンゾジアゼピンアンタゴニストの非標識フルマゼニルで観察された（図５）。
【実施例１５】
【００９０】
ＡＰＰ×ＰＳ１及び野生型ＰＳ１トランスジェニックマウスにおいて、全脳（小脳を除く）における［１１Ｃ］−Ａ取り込みは［１１Ｃ］ＰＫ１１１９５の取り込みよりも高い（図６）。しかしながら、［１１Ｃ］−Ａ及び［１１Ｃ］ＰＫ１１１９５の取り込みは野生型ＰＳ１に比してＡＰＰ×ＰＳ１において有意に高くない。対照的に、［３Ｈ］−Ａ結合の特異性は、野生型ＰＳ１マウスと比較してＡＰＰ×ＰＳ１マウス由来の全脳切片よりも約２倍高い（図７）。
【００９１】
これらのデータから、［１１Ｃ］−Ａはラット神経炎症の急性モデル及びアルツハイマー病のマウスモデルにおいて高いＰＢＲ結合及び炎症を特異的に検出し得ることが立証される。インビボＰＥＴイメージングから、［１１Ｃ］−Ａが齧歯類においてＰＢＲ受容体過剰発現及び神経炎症をイメージングするために使用され得ることが確認される。更に、［１１Ｃ］−ＡでのＰＥＴイメージングにより観察されたＰＢＲ受容体結合は、基準ＰＢＲ受容体ＰＥＴリガンドの［１１Ｃ］ＰＫ１１１９５で観察されたＰＢＲ受容体結合よりも大きい。
【実施例１６】
【００９２】
キノリン酸を注射された霊長類の病変右線条体における［１１Ｃ］−Ａの取り込みは、興奮性毒素注射から２４時間後の対側非注射線条体及び２つの非注射照脳領域（小脳、前頭前野皮質）における［１１Ｃ］−Ａ取り込みと比較して有意により高い（図８）。対側非注射線条体における［１１Ｃ］−Ａ取り込みは安定であり、非注射霊長類の脳領域における［１１Ｃ］−Ａ取り込みと同レベルのままであった（図８）。［１１Ｃ］−Ａ取り込みの増加は（左半球で）興奮性毒素注射から４８時間目でもなお可視化され得、興奮性毒素注射から７ヶ月目の［１１Ｃ］−Ａ取り込み（７ヶ月前に病変させた右線条体のカイネティック）は基準レベルに戻った。神経炎症の初期相のより詳細なキャラクタリゼーションから、高い［１１Ｃ］−Ａ取り込みが２４時間から１６日まで可視化され得ることが立証された（図９）。ラジオトレーサーを注射してから３０分後に大過剰の非標識ＰＫ１１１９５を全身投与すると、病変線条体において［１１Ｃ］−Ａ結合の特異的置換が生じ、非病変対照脳領域では顕著な変化は観察されなかった（図９）。
【００９３】
適用
本発明は、診断ツールとして、及びＰＢＲレベルが変化し、炎症が存在している病理の発生及び進行を追跡するためのツールとして適用され得る。本発明は、病的状態での受容体占有率を研究したり、治療処置の有効性を評価するために、並びに動物モデルからヒトまでの研究のための翻訳バイオマーカーとしても適用され得る。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
放射標識されている７−クロロ−Ｎ，Ｎ，５−トリメチル−４−オキソ−３−フェニル−３，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピリダジノ［４，５−ｂ］インドール−１−アセトアミドの個人における正常及び病的状態に関連するＰＢＲレベルを検出するためのバイオマーカーとしての使用であって、放射標識は炭素−１１、放射性ハロゲン及び放射性金属の中から選択される前記使用。
【請求項２】
７−クロロ−Ｎ，Ｎ，５−トリメチル−４−オキソ−３−フェニル−３，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピリダジノ［４，５−ｂ］インドール−１−アセトアミドは炭素−１１で放射標識されている請求項１に記載の使用。
【請求項３】
７−クロロ−Ｎ，Ｎ，５−トリメチル−４−オキソ−３−フェニル−３，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピリダジノ［４，５−ｂ］インドール−１−アセトアミドはインドール核の５位に位置しているメチル基の炭素上で炭素−１１で放射標識されている請求項１または２に記載の使用。
【請求項４】
７−クロロ−Ｎ，Ｎ，５−トリメチル−４−オキソ−３−フェニル−３，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピリダジノ［４，５−ｂ］インドール−１−アセトアミドは放射性ハロゲンで放射標識されている請求項１に記載の使用。
【請求項５】
７−クロロ−Ｎ，Ｎ，５−トリメチル−４−オキソ−３−フェニル−３，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピリダジノ［４，５−ｂ］インドール−１−アセトアミドは放射性ハロゲンフッ素−１８で放射標識されている請求項１または４に記載の使用。
【請求項６】
７−クロロ−Ｎ，Ｎ，５−トリメチル−４−オキソ−３−フェニル−３，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピリダジノ［４，５−ｂ］インドール−１−アセトアミドは３−フェニル環のパラ位でフッ素−１８で放射標識されている請求項１または５に記載の使用。
【請求項７】
ＰＢＲレベル及び炎症の検出をＰＥＴイメージング（陽電子放射断層撮影法）またはＳＰＥＣＴイメージング（単一光子放射型コンピュータ断層撮影法）により実施する請求項１〜６に記載の使用。
【請求項８】
ＰＢＲレベル及び炎症の検出をＰＥＴイメージング（陽電子放射断層撮影法）により実施する請求項１〜７に記載の使用。
【請求項９】
ＰＢＲレベルの変化に関係する病的状態は脳損傷、脳感染及び神経疾患から選択される請求項１〜８に記載の使用。
【請求項１０】
ＰＢＲレベルの変化に関係する病的状態は精神病から選択される請求項１〜８に記載の使用。
【請求項１１】
ＰＢＲレベルの変化に関係する病的状態は増殖性疾患から選択される請求項１〜８に記載の使用。
【請求項１２】
ＰＢＲレベルの変化に関係する病的状態は末梢炎症プロセスから選択される請求項１〜８に記載の使用。
【請求項１３】
ＰＢＲレベルの検出を占有率研究のために実施する請求項１〜８に記載の使用。
【請求項１４】
ＰＢＲレベルの検出を治療処置の有効性を評価するために実施する請求項１〜８に記載の使用。
【請求項１５】
放射標識形態の７−クロロ−Ｎ，Ｎ，５−トリメチル−４−オキソ−３−フェニル−３，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピリダジノ［４，５−ｂ］インドール−１−アセトアミドを用いて実施する正常状態に関連するＰＢＲレベル及び病的状態に関連するＰＢＲレベルの変化の検出方法であって、放射標識を炭素−１１、放射性ハロゲン及び放射性金属の中から選択する前記方法。
【請求項１６】
放射標識形態の７−クロロ−Ｎ，Ｎ，５−トリメチル−４−オキソ−３−フェニル−３，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピリダジノ［４，５−ｂ］インドール−１−アセトアミドは炭素−１１を含有している請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
７−クロロ−Ｎ，Ｎ，５−トリメチル−４−オキソ−３−フェニル−３，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピリダジノ［４，５−ｂ］インドール−１−アセトアミドはインドール核の５位に位置しているメチル基の炭素上で炭素−１１で放射標識されている請求項１５〜１６に記載の方法。
【請求項１８】
７−クロロ−Ｎ，Ｎ，５−トリメチル−４−オキソ−３−フェニル−３，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピリダジノ［４，５−ｂ］インドール−１−アセトアミドはフッ素−１８で放射標識されている請求項１５に記載の方法。
【請求項１９】
７−クロロ−Ｎ，Ｎ，５−トリメチル−４−オキソ−３−フェニル−３，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピリダジノ［４，５−ｂ］インドール−１−アセトアミドは３−フェニル環のパラ位でフッ素−１８で放射標識されている請求項１５に記載の方法。
【請求項２０】
ＰＢＲレベルの変化に関係する病的状態は脳損傷、脳感染及び神経疾患から選択される請求項１５〜１９に記載の方法。
【請求項２１】
ＰＢＲレベルの変化に関係する病的状態は精神病から選択される請求項１５〜１９に記載の方法。
【請求項２２】
ＰＢＲレベルの変化に関係する病的状態は増殖性疾患から選択される請求項１５〜１９に記載の方法。
【請求項２３】
ＰＢＲレベルの変化に関係する病的状態は末梢炎症プロセスから選択される請求項１５〜１９に記載の方法。
【請求項２４】
ＰＢＲレベルの検出を占有率研究のために実施する請求項１５〜１９に記載の方法。
【請求項２５】
ＰＢＲレベルの検出を治療処置の有効性を評価するために実施する請求項１５〜１９に記載の方法。
【請求項２６】
放射標識形態の７−クロロ−Ｎ，Ｎ，５−トリメチル−４−オキソ−３−フェニル−３，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピリダジノ［４，５−ｂ］インドール−１−アセトアミドを含む正常状態に関連するＰＢＲレベル及び病的状態に関連するＰＢＲレベルの変化を検出するための診断キット。
【請求項１】
放射標識されている７−クロロ−Ｎ，Ｎ，５−トリメチル−４−オキソ−３−フェニル−３，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピリダジノ［４，５−ｂ］インドール−１−アセトアミドの個人における正常及び病的状態に関連するＰＢＲレベルを検出するためのバイオマーカーとしての使用であって、放射標識は炭素−１１、放射性ハロゲン及び放射性金属の中から選択される前記使用。
【請求項２】
７−クロロ−Ｎ，Ｎ，５−トリメチル−４−オキソ−３−フェニル−３，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピリダジノ［４，５−ｂ］インドール−１−アセトアミドは炭素−１１で放射標識されている請求項１に記載の使用。
【請求項３】
７−クロロ−Ｎ，Ｎ，５−トリメチル−４−オキソ−３−フェニル−３，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピリダジノ［４，５−ｂ］インドール−１−アセトアミドはインドール核の５位に位置しているメチル基の炭素上で炭素−１１で放射標識されている請求項１または２に記載の使用。
【請求項４】
７−クロロ−Ｎ，Ｎ，５−トリメチル−４−オキソ−３−フェニル−３，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピリダジノ［４，５−ｂ］インドール−１−アセトアミドは放射性ハロゲンで放射標識されている請求項１に記載の使用。
【請求項５】
７−クロロ−Ｎ，Ｎ，５−トリメチル−４−オキソ−３−フェニル−３，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピリダジノ［４，５−ｂ］インドール−１−アセトアミドは放射性ハロゲンフッ素−１８で放射標識されている請求項１または４に記載の使用。
【請求項６】
７−クロロ−Ｎ，Ｎ，５−トリメチル−４−オキソ−３−フェニル−３，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピリダジノ［４，５−ｂ］インドール−１−アセトアミドは３−フェニル環のパラ位でフッ素−１８で放射標識されている請求項１または５に記載の使用。
【請求項７】
ＰＢＲレベル及び炎症の検出をＰＥＴイメージング（陽電子放射断層撮影法）またはＳＰＥＣＴイメージング（単一光子放射型コンピュータ断層撮影法）により実施する請求項１〜６に記載の使用。
【請求項８】
ＰＢＲレベル及び炎症の検出をＰＥＴイメージング（陽電子放射断層撮影法）により実施する請求項１〜７に記載の使用。
【請求項９】
ＰＢＲレベルの変化に関係する病的状態は脳損傷、脳感染及び神経疾患から選択される請求項１〜８に記載の使用。
【請求項１０】
ＰＢＲレベルの変化に関係する病的状態は精神病から選択される請求項１〜８に記載の使用。
【請求項１１】
ＰＢＲレベルの変化に関係する病的状態は増殖性疾患から選択される請求項１〜８に記載の使用。
【請求項１２】
ＰＢＲレベルの変化に関係する病的状態は末梢炎症プロセスから選択される請求項１〜８に記載の使用。
【請求項１３】
ＰＢＲレベルの検出を占有率研究のために実施する請求項１〜８に記載の使用。
【請求項１４】
ＰＢＲレベルの検出を治療処置の有効性を評価するために実施する請求項１〜８に記載の使用。
【請求項１５】
放射標識形態の７−クロロ−Ｎ，Ｎ，５−トリメチル−４−オキソ−３−フェニル−３，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピリダジノ［４，５−ｂ］インドール−１−アセトアミドを用いて実施する正常状態に関連するＰＢＲレベル及び病的状態に関連するＰＢＲレベルの変化の検出方法であって、放射標識を炭素−１１、放射性ハロゲン及び放射性金属の中から選択する前記方法。
【請求項１６】
放射標識形態の７−クロロ−Ｎ，Ｎ，５−トリメチル−４−オキソ−３−フェニル−３，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピリダジノ［４，５−ｂ］インドール−１−アセトアミドは炭素−１１を含有している請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
７−クロロ−Ｎ，Ｎ，５−トリメチル−４−オキソ−３−フェニル−３，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピリダジノ［４，５−ｂ］インドール−１−アセトアミドはインドール核の５位に位置しているメチル基の炭素上で炭素−１１で放射標識されている請求項１５〜１６に記載の方法。
【請求項１８】
７−クロロ−Ｎ，Ｎ，５−トリメチル−４−オキソ−３−フェニル−３，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピリダジノ［４，５−ｂ］インドール−１−アセトアミドはフッ素−１８で放射標識されている請求項１５に記載の方法。
【請求項１９】
７−クロロ−Ｎ，Ｎ，５−トリメチル−４−オキソ−３−フェニル−３，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピリダジノ［４，５−ｂ］インドール−１−アセトアミドは３−フェニル環のパラ位でフッ素−１８で放射標識されている請求項１５に記載の方法。
【請求項２０】
ＰＢＲレベルの変化に関係する病的状態は脳損傷、脳感染及び神経疾患から選択される請求項１５〜１９に記載の方法。
【請求項２１】
ＰＢＲレベルの変化に関係する病的状態は精神病から選択される請求項１５〜１９に記載の方法。
【請求項２２】
ＰＢＲレベルの変化に関係する病的状態は増殖性疾患から選択される請求項１５〜１９に記載の方法。
【請求項２３】
ＰＢＲレベルの変化に関係する病的状態は末梢炎症プロセスから選択される請求項１５〜１９に記載の方法。
【請求項２４】
ＰＢＲレベルの検出を占有率研究のために実施する請求項１５〜１９に記載の方法。
【請求項２５】
ＰＢＲレベルの検出を治療処置の有効性を評価するために実施する請求項１５〜１９に記載の方法。
【請求項２６】
放射標識形態の７−クロロ−Ｎ，Ｎ，５−トリメチル−４−オキソ−３−フェニル−３，５−ジヒドロ−４Ｈ−ピリダジノ［４，５−ｂ］インドール−１−アセトアミドを含む正常状態に関連するＰＢＲレベル及び病的状態に関連するＰＢＲレベルの変化を検出するための診断キット。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【公表番号】特表２０１２−５０７０３１（Ｐ２０１２−５０７０３１Ａ）
【公表日】平成２４年３月２２日（２０１２．３．２２）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１１−５３３８５５（Ｐ２０１１−５３３８５５）
【出願日】平成２１年１０月２７日（２００９．１０．２７）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＩＢ２００９／００７５６２
【国際公開番号】ＷＯ２０１０／０４９８１９
【国際公開日】平成２２年５月６日（２０１０．５．６）
【出願人】（５０４４５６７９８）サノフイ (433)
【出願人】（５９６０４８５６９）コミサリヤ・ア・レネルジ・アトミク (53)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２４年３月２２日（２０１２．３．２２）
【国際特許分類】
【出願日】平成２１年１０月２７日（２００９．１０．２７）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＩＢ２００９／００７５６２
【国際公開番号】ＷＯ２０１０／０４９８１９
【国際公開日】平成２２年５月６日（２０１０．５．６）
【出願人】（５０４４５６７９８）サノフイ (433)
【出願人】（５９６０４８５６９）コミサリヤ・ア・レネルジ・アトミク (53)
【Ｆターム（参考）】
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