αアミラーゼ活性を有する酵素及びその使用方法
【課題】本発明により、新しいαアミラーゼを設計する方法及びその使用方法が提供される。
【解決手段】本発明のαアミラーゼは、酸性、中性及びアルカリ性のpH並びに上昇した温度において、増加した活性及び増加した安定性を有する。
【解決手段】本発明のαアミラーゼは、酸性、中性及びアルカリ性のpH並びに上昇した温度において、増加した活性及び増加した安定性を有する。
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【特許請求の範囲】
【請求項1】
(a)αアミラーゼ活性を有するポリペプチドをコードする配列であって、配列比較アルゴリズムを用いた解析又は目視検査によって決定する場合に少なくとも約100、約150、約200、約300、約400若しくは約500残基の領域にわたって又は配列の完全長にわたって配列番号1, 3, 5, 9, 11, 13, 15, 17, 19, 21, 23, 25, 27, 29, 31, 33, 35, 37, 39, 41, 43, 45 ,47, 49, 51, 53, 55, 57, 59, 61, 63, 65, 67, 69, 71, 73, 75, 77, 79, 81, 83, 85, 87, 89, 91, 93, 95, 97, 99, 101, 103, 105, 107, 109, 111, 113, 115, 117, 119, 121, 123, 125, 127, 129, 131, 133, 135, 137, 139, 141, 143, 145, 147, 149, 151, 153, 155, 157, 159, 161, 163, 165, 167, 169, 171, 173, 175, 177, 179, 181, 183, 185, 187, 189, 191, 193, 195, 197, 199, 201, 203, 205, 207, 209, 211, 213, 215, 217, 219, 221, 223, 225, 227, 229, 231, 233, 235, 237, 239, 241, 243, 245, 247, 249, 251, 253, 255, 257, 259, 261, 263, 265, 267, 269, 271, 273, 275, 277, 279, 281, 283, 285, 287, 289, 291, 293, 295, 297又は299に記載の配列を有する核酸に対して少なくとも約50%、約55%、約60%、約65%、約70%、約75%、約80%、約85%、約90%、約95%、約97%又は約100%の配列同一性を有する前記配列;
(b)αアミラーゼ活性を有するポリペプチドをコードする配列であって、配列番号1, 3, 5, 9, 11, 13, 15, 17, 19, 21, 23, 25, 27, 29, 31, 33, 35, 37, 39, 41, 43, 45 ,47, 49, 51, 53, 55, 57, 59, 61, 63, 65, 67, 69, 71, 73, 75, 77, 79, 81, 83, 85, 87, 89, 91, 93, 95, 97, 99, 101, 103, 105, 107, 109, 111, 113, 115, 117, 119, 121, 123, 125, 127, 129, 131, 133, 135, 137, 139, 141, 143, 145, 147, 149, 151, 153, 155, 157, 159, 161, 163, 165, 167, 169, 171, 173, 175, 177, 179, 181, 183, 185, 187, 189, 191, 193, 195, 197, 199, 201, 203, 205, 207, 209, 211, 213, 215, 217, 219, 221, 223, 225, 227, 229, 231, 233, 235, 237, 239, 241, 243, 245, 247, 249, 251, 253, 255, 257, 259, 261, 263, 265, 267, 269, 271, 273, 275, 277, 279, 281, 283, 285, 287, 289, 291, 293, 295, 297又は299に記載の配列を有する核酸と高ストリンジェンシー条件下又は減少したストリンジェンシー条件下においてハイブリダイズする前記配列;
(c)αアミラーゼ活性を有するポリペプチドをコードする配列であって、前記ポリペプチドが配列番号2, 4, 6, 10, 12, 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34, 36, 38, 40, 42, 44, 46, 48, 50, 52, 54, 56, 58, 60, 62, 64, 66, 68, 70, 72, 74, 76, 78, 80, 82, 84, 86, 88, 90, 92, 94, 96, 98, 100, 102, 104, 106, 108, 110, 112, 114, 116, 118, 120, 122, 124, 126, 128, 130, 132, 134, 136, 138, 140, 142, 144, 146, 148, 150, 152, 154, 156, 158, 160, 162, 164, 166, 168, 170, 172, 174, 176, 178, 180, 182, 184, 186, 188, 190, 192, 194, 196, 198, 202, 204, 206, 208, 210, 212, 214, 216, 218, 220, 222, 224, 226, 228, 230, 232, 234, 236, 238, 240, 242, 244, 246, 248, 250, 252, 254, 256, 258, 260, 262, 264, 266, 268, 270, 272, 274, 276, 278, 280, 282, 284, 286, 288, 290, 292, 294, 296若しくは298に記載の配列又はそれらの酵素的に活性な断片を有する前記配列;又は
(d)(a)、(b)、(c)又は(d)の配列に対して相補的な配列;
を含む単離、合成又は組換え核酸。
【請求項2】
(a)配列比較アルゴリズムを用いた解析又は目視検査によって決定する場合に少なくとも約10、約15、約20、約25、約30、約35、約40、約50、約75、約100、約150若しくは約200残基の領域にわたって又は配列の完全長にわたって配列番号2, 4, 6, 10, 12, 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34, 36, 38, 40, 42, 44, 46, 48, 50, 52, 54, 56, 58, 60, 62, 64, 66, 68, 70, 72, 74, 76, 78, 80, 82, 84, 86, 88, 90, 92, 94, 96, 98, 100, 102, 104, 106, 108, 110, 112, 114, 116, 118, 120, 122, 124, 126, 128, 130, 132, 134, 136, 138, 140, 142, 144, 146, 148, 150, 152, 154, 156, 158, 160, 162, 164, 166, 168, 170, 172, 174, 176, 178, 180, 182, 184, 186, 188, 190, 192, 194, 196, 198, 202, 204, 206, 208, 210, 212, 214, 216, 218, 220, 222, 224, 226, 228, 230, 232, 234, 236, 238, 240, 242, 244, 246, 248, 250, 252, 254, 256, 258, 260, 262, 264, 266, 268, 270, 272, 274, 276, 278, 280, 282, 284, 286, 288, 290, 292, 294, 296若しくは298に記載の配列又はこれらの酵素的に活性な断片をコードする配列に対して少なくとも約50%、約55%、約60%、約65%、約70%、約75%、約80%、約85%、約90%、約95%又は約100%の配列同一性を有するアミノ酸配列であって、
そのポリペプチドがαアミラーゼ活性を有するか又はαアミラーゼポリペプチド若しくはその断片に特異的に結合する抗体を生じる前記アミノ酸配列;又は
(b)請求項1に記載の核酸によってコードされるアミノ酸配列;
を含む配列を有する単離、合成又は組換えポリペプチド。
【請求項1】
(a)αアミラーゼ活性を有するポリペプチドをコードする配列であって、配列比較アルゴリズムを用いた解析又は目視検査によって決定する場合に少なくとも約100、約150、約200、約300、約400若しくは約500残基の領域にわたって又は配列の完全長にわたって配列番号1, 3, 5, 9, 11, 13, 15, 17, 19, 21, 23, 25, 27, 29, 31, 33, 35, 37, 39, 41, 43, 45 ,47, 49, 51, 53, 55, 57, 59, 61, 63, 65, 67, 69, 71, 73, 75, 77, 79, 81, 83, 85, 87, 89, 91, 93, 95, 97, 99, 101, 103, 105, 107, 109, 111, 113, 115, 117, 119, 121, 123, 125, 127, 129, 131, 133, 135, 137, 139, 141, 143, 145, 147, 149, 151, 153, 155, 157, 159, 161, 163, 165, 167, 169, 171, 173, 175, 177, 179, 181, 183, 185, 187, 189, 191, 193, 195, 197, 199, 201, 203, 205, 207, 209, 211, 213, 215, 217, 219, 221, 223, 225, 227, 229, 231, 233, 235, 237, 239, 241, 243, 245, 247, 249, 251, 253, 255, 257, 259, 261, 263, 265, 267, 269, 271, 273, 275, 277, 279, 281, 283, 285, 287, 289, 291, 293, 295, 297又は299に記載の配列を有する核酸に対して少なくとも約50%、約55%、約60%、約65%、約70%、約75%、約80%、約85%、約90%、約95%、約97%又は約100%の配列同一性を有する前記配列;
(b)αアミラーゼ活性を有するポリペプチドをコードする配列であって、配列番号1, 3, 5, 9, 11, 13, 15, 17, 19, 21, 23, 25, 27, 29, 31, 33, 35, 37, 39, 41, 43, 45 ,47, 49, 51, 53, 55, 57, 59, 61, 63, 65, 67, 69, 71, 73, 75, 77, 79, 81, 83, 85, 87, 89, 91, 93, 95, 97, 99, 101, 103, 105, 107, 109, 111, 113, 115, 117, 119, 121, 123, 125, 127, 129, 131, 133, 135, 137, 139, 141, 143, 145, 147, 149, 151, 153, 155, 157, 159, 161, 163, 165, 167, 169, 171, 173, 175, 177, 179, 181, 183, 185, 187, 189, 191, 193, 195, 197, 199, 201, 203, 205, 207, 209, 211, 213, 215, 217, 219, 221, 223, 225, 227, 229, 231, 233, 235, 237, 239, 241, 243, 245, 247, 249, 251, 253, 255, 257, 259, 261, 263, 265, 267, 269, 271, 273, 275, 277, 279, 281, 283, 285, 287, 289, 291, 293, 295, 297又は299に記載の配列を有する核酸と高ストリンジェンシー条件下又は減少したストリンジェンシー条件下においてハイブリダイズする前記配列;
(c)αアミラーゼ活性を有するポリペプチドをコードする配列であって、前記ポリペプチドが配列番号2, 4, 6, 10, 12, 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34, 36, 38, 40, 42, 44, 46, 48, 50, 52, 54, 56, 58, 60, 62, 64, 66, 68, 70, 72, 74, 76, 78, 80, 82, 84, 86, 88, 90, 92, 94, 96, 98, 100, 102, 104, 106, 108, 110, 112, 114, 116, 118, 120, 122, 124, 126, 128, 130, 132, 134, 136, 138, 140, 142, 144, 146, 148, 150, 152, 154, 156, 158, 160, 162, 164, 166, 168, 170, 172, 174, 176, 178, 180, 182, 184, 186, 188, 190, 192, 194, 196, 198, 202, 204, 206, 208, 210, 212, 214, 216, 218, 220, 222, 224, 226, 228, 230, 232, 234, 236, 238, 240, 242, 244, 246, 248, 250, 252, 254, 256, 258, 260, 262, 264, 266, 268, 270, 272, 274, 276, 278, 280, 282, 284, 286, 288, 290, 292, 294, 296若しくは298に記載の配列又はそれらの酵素的に活性な断片を有する前記配列;又は
(d)(a)、(b)、(c)又は(d)の配列に対して相補的な配列;
を含む単離、合成又は組換え核酸。
【請求項2】
(a)配列比較アルゴリズムを用いた解析又は目視検査によって決定する場合に少なくとも約10、約15、約20、約25、約30、約35、約40、約50、約75、約100、約150若しくは約200残基の領域にわたって又は配列の完全長にわたって配列番号2, 4, 6, 10, 12, 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34, 36, 38, 40, 42, 44, 46, 48, 50, 52, 54, 56, 58, 60, 62, 64, 66, 68, 70, 72, 74, 76, 78, 80, 82, 84, 86, 88, 90, 92, 94, 96, 98, 100, 102, 104, 106, 108, 110, 112, 114, 116, 118, 120, 122, 124, 126, 128, 130, 132, 134, 136, 138, 140, 142, 144, 146, 148, 150, 152, 154, 156, 158, 160, 162, 164, 166, 168, 170, 172, 174, 176, 178, 180, 182, 184, 186, 188, 190, 192, 194, 196, 198, 202, 204, 206, 208, 210, 212, 214, 216, 218, 220, 222, 224, 226, 228, 230, 232, 234, 236, 238, 240, 242, 244, 246, 248, 250, 252, 254, 256, 258, 260, 262, 264, 266, 268, 270, 272, 274, 276, 278, 280, 282, 284, 286, 288, 290, 292, 294, 296若しくは298に記載の配列又はこれらの酵素的に活性な断片をコードする配列に対して少なくとも約50%、約55%、約60%、約65%、約70%、約75%、約80%、約85%、約90%、約95%又は約100%の配列同一性を有するアミノ酸配列であって、
そのポリペプチドがαアミラーゼ活性を有するか又はαアミラーゼポリペプチド若しくはその断片に特異的に結合する抗体を生じる前記アミノ酸配列;又は
(b)請求項1に記載の核酸によってコードされるアミノ酸配列;
を含む配列を有する単離、合成又は組換えポリペプチド。
【図1】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5】
【図6】
【図7】
【図8】
【図9a】
【図9b】
【図10】
【図11】
【図12】
【図13】
【図14a−1】
【図14a−2】
【図14b−1】
【図14b−2】
【図14b−3】
【図14c−1】
【図14c−2】
【図14c−3】
【図14c−4】
【図14c−5】
【図14c−6】
【図15】
【図16−1】
【図16−2】
【図16−3】
【図16−4】
【図16−5】
【図16−6】
【図16−7】
【図16−8】
【図16−9】
【図16−10】
【図16−11】
【図16−12】
【図16−13】
【図16−14】
【図16−15】
【図16−16】
【図16−17】
【図16−18】
【図16−19】
【図16−20】
【図16−21】
【図16−22】
【図16−23】
【図16−24】
【図16−25】
【図16−26】
【図16−27】
【図16−28】
【図16−29】
【図16−30】
【図16−31】
【図16−32】
【図16−33】
【図16−34】
【図16−35】
【図16−36】
【図16−37】
【図16−38】
【図16−39】
【図16−40】
【図16−41】
【図16−42】
【図16−43】
【図16−44】
【図16−45】
【図16−46】
【図16−47】
【図16−48】
【図16−49】
【図16−50】
【図16−51】
【図16−52】
【図16−53】
【図16−54】
【図16−55】
【図16−56】
【図16−57】
【図16−58】
【図16−59】
【図16−60】
【図16−61】
【図16−62】
【図16−63】
【図16−64】
【図16−65】
【図16−66】
【図16−67】
【図16−68】
【図16−69】
【図16−70】
【図16−71】
【図16−72】
【図16−73】
【図16−74】
【図16−75】
【図16−76】
【図16−77】
【図16−78】
【図16−79】
【図16−80】
【図16−81】
【図16−82】
【図16−83】
【図16−84】
【図16−85】
【図16−86】
【図16−87】
【図16−88】
【図16−89】
【図16−90】
【図16−91】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5】
【図6】
【図7】
【図8】
【図9a】
【図9b】
【図10】
【図11】
【図12】
【図13】
【図14a−1】
【図14a−2】
【図14b−1】
【図14b−2】
【図14b−3】
【図14c−1】
【図14c−2】
【図14c−3】
【図14c−4】
【図14c−5】
【図14c−6】
【図15】
【図16−1】
【図16−2】
【図16−3】
【図16−4】
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【図16−6】
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【図16−83】
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【図16−88】
【図16−89】
【図16−90】
【図16−91】
【公開番号】特開2008−206525(P2008−206525A)
【公開日】平成20年9月11日(2008.9.11)
【国際特許分類】
【出願番号】特願2008−136876(P2008−136876)
【出願日】平成20年5月26日(2008.5.26)
【分割の表示】特願2002−568685(P2002−568685)の分割
【原出願日】平成14年2月21日(2002.2.21)
【出願人】(503089489)ヴェレニウム コーポレイション (31)
【Fターム(参考)】
【公開日】平成20年9月11日(2008.9.11)
【国際特許分類】
【出願日】平成20年5月26日(2008.5.26)
【分割の表示】特願2002−568685(P2002−568685)の分割
【原出願日】平成14年2月21日(2002.2.21)
【出願人】(503089489)ヴェレニウム コーポレイション (31)
【Fターム(参考)】
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