インスリン分泌促進剤
【課題】安全性が高く、継続的に摂取しても副作用の懸念がない、糖尿病の予防等に有効なインスリン分泌促進剤を提供すること。
【解決手段】本発明のインスリン分泌促進剤は、ＨＬＢ４〜１５のポリグリセリン脂肪酸エステルを有効成分として含有するので、安全性が高く、継続的に摂取しても副作用の懸念がない。本発明のインスリン分泌促進剤では、上記ポリグリセリン脂肪酸エステルを油脂とともに含有することが好ましい。また、油脂と併用されてもよい。
【解決手段】本発明のインスリン分泌促進剤は、ＨＬＢ４〜１５のポリグリセリン脂肪酸エステルを有効成分として含有するので、安全性が高く、継続的に摂取しても副作用の懸念がない。本発明のインスリン分泌促進剤では、上記ポリグリセリン脂肪酸エステルを油脂とともに含有することが好ましい。また、油脂と併用されてもよい。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、インスリン分泌促進剤に関し、詳細には、特定の範囲のＨＬＢを有するポリグリセリン脂肪酸エステルを有効成分とするインスリン分泌促進剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
糖尿病は、Ｉ型糖尿病（インスリン依存型糖尿病）と、ＩＩ型糖尿病（インスリン非依存型糖尿病）とに大別される。日本人が罹患している糖尿病の大部分は、ＩＩ型糖尿病である。ＩＩ型糖尿病は、インスリンの分泌量が低下するインスリン分泌不全や、インスリンの血糖を下げる作用が弱くなるインスリン抵抗性といった症状が進行することで発症する。これらの症状には、遺伝的要因や、偏食、過食、運動不足、ストレス等の環境的要因が大きく関与している。
【０００３】
近年、ＩＩ型糖尿病の患者数が増加しており、境界型と呼ばれる糖尿病予備軍を含めるとすでに２０００万人にも及ぶと言われている。したがって、糖尿病患者のケアだけでなく、糖尿病予備軍を糖尿病に移行させない予防が重要な課題となっている。
【０００４】
一般に、ＩＩ型糖尿病の治療は、食事療法及び運動療法を基本とした上で薬物療法を行う。日本におけるＩＩ型糖尿病の薬物療法としては、インスリン分泌を促進させるスルホニルウレア剤（ＳＵ剤）が多く使用されている。これは、日本人のインスリン分泌能力は欧米人に比べて低いからである。しかしながら、ＳＵ剤には、低血糖、そう痒感、発疹、体重増加等の副作用の問題があった。糖尿病の薬物療法は、長期間継続して行う必要があるため、継続的に服用しても副作用の懸念がないインスリン分泌促進剤の開発が所望されていた。
【０００５】
このようなインスリン分泌促進剤としては、例えば、特許文献１において、白甘薯の塊根の皮部分から得られる抽出液が有効である旨の報告がなされている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】特許第３６７７００７号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明は、上記事情に鑑みてなされたものであり、その目的は、安全性が高く、継続的に摂取しても副作用の懸念がない、糖尿病の予防等に有効なインスリン分泌促進剤を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者は、上記課題を解決するための研究を重ねる過程で、ラットに対して糖負荷を与えると同時に、油脂と、ある特定のＨＬＢを有するポリグリセリン脂肪酸エステルとを投与すると、油脂のみを投与した場合と比較して、血漿のインスリン濃度の上昇が顕著であることを見出し、本発明を完成するに至った。
【０００９】
具体的には、本発明では以下のようなものを提供する。
【００１０】
（１）ＨＬＢ４〜１５のポリグリセリン脂肪酸エステルを有効成分として含有することを特徴とするインスリン分泌促進剤。
【００１１】
（２） 上記ポリグリセリン脂肪酸エステルを、油脂とともに含有する（１）に記載のインスリン分泌促進剤。
【００１２】
（３） 油脂と併用される（１）に記載のインスリン分泌促進剤。
【００１３】
（４） ＩＩ型糖尿病の予防又は治療に用いられる（１）から（３）のいずれか１項に記載のインスリン分泌促進剤。
【発明の効果】
【００１４】
本発明のインスリン分泌促進剤は、インスリン分泌促進作用に優れるので、特に、ＩＩ型糖尿病の予防又は治療に有効である。また、本発明のインスリン分泌促進剤によれば、ポリグリセリン脂肪酸エステルを有効成分として含有するので、安全性が高く、副作用の懸念がないため、安心して継続的に使用することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１５】
【図１】（Ａ）ヘキサステアリン酸ペンタグリセリン（ＨＬＢ：４）投与試行における血漿インスリン濃度の測定結果、（Ｂ）トリオレイン酸ペンタグリセリン（ＨＬＢ：７）投与試行における血漿インスリン濃度の測定結果を示す図である。
【図２】デカオレイン酸デカグリセリン（ＨＬＢ：３）投与試行における血漿インスリン濃度の測定結果を示す図である。
【図３】モノオレイン酸テトラグリセリン（ＨＬＢ：８．８）投与試行における血漿インスリン濃度の測定結果を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
以下、本発明の具体的な実施形態について詳細に説明するが、本発明は、以下の実施形態に何ら限定されるものではなく、本発明の目的の範囲内において、適宜、変更を加えて実施することができる。
【００１７】
本発明のインスリン分泌促進剤は、ポリグリセリン脂肪酸エステルを有効成分として含有することを特徴とする。該ポリグリセリン脂肪酸エステルのＨＬＢは４〜１５であり、好ましくは４〜９である。本発明のインスリン分泌促進剤では、ＨＬＢ値が４〜１５のポリグリセリン脂肪酸エステルの１種又は２種以上を含有してもよい。ここで、ＨＬＢ値は、界面活性剤における親水性と疎水性のバランスを表す数値であり、例えば、「改訂三版 油脂化学便覧」（日本油化学協会編、丸善発行）に記載された方法により測定することができる。
【００１８】
本発明のインスリン分泌促進剤では、ポリグリセリン脂肪酸エステルを構成する脂肪酸は、特に限定されるものではなく、その炭素数が通常６〜２４、好ましくは１４〜２０、より好ましくは１６〜２０の飽和及び／又は不飽和脂肪酸である。具体的には、カプロン酸（ｎ−ヘキサン酸）、カプリル酸（ｎ−オクタン酸）、カプリン酸（ｎ−デカン酸）、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、パルミトレイン酸、ステアリン酸、オレイン酸、リノール酸、リノレン酸、アラキジン酸、アラキドン酸、ベヘン酸、エルカ酸、リグノセリン酸等が挙げられる。
【００１９】
本発明のインスリン分泌促進剤では、ＨＬＢ値が４〜１５であれば、市販のポリグリセリン脂肪酸エステルを用いてもよいし、従来公知の方法により製造したポリグリセリン脂肪酸エステルを用いてもよい。ポリグリセリン脂肪酸エステルの製造方法は、特に限定されるものではなく、例えば、グリセリンと脂肪酸とのエステル化やグリセリンと油脂とのエステル交換といった従来公知の方法が挙げられる。以下に、ポリグリセリン脂肪酸エステルの製造方法の一例を示すが、これに限定されるものではない。まず、グリセリンと、水酸化ナトリウム（触媒）とを混合し、９０℃以上で減圧しながら乾燥させた後、２００〜２７０℃にて重合反応させて、ポリグリセリンを得る。得られたポリグリセリンと、脂肪酸とを、適当な比率で反応容器に仕込み、触媒として水酸化ナトリウム溶液を添加する。次いで、窒素気流下で、２００℃以上の温度に加熱し、１〜３時間程度反応させた後、更に内温を２５０℃以上とし、３〜５時間反応させる。その後、常温まで冷却し、常法により精製し、ポリグリセリン脂肪酸エステルを得ることができる。なお、ポリグリセリン脂肪酸エステルのＨＬＢ値は、常法により調整することができる。
【００２０】
上記ポリグリセリン脂肪酸エステルの市販品としては、例えば、太陽化学社製の「サンソフトＡ−１８６Ｅ」、「サンソフトＱ−１７５Ｓ」、「サンソフトＱ−１８５Ｓ」、「サンソフトＱ−１７Ｂ」、「サンソフトＱ−１８Ｂ」、「サンソフトＱ−１８Ｄ」、「サンソフトＡ−１７３Ｅ」、「サンソフトＱ−１８２Ｓ」、「サンソフトＱ−１７Ｓ」、「サンソフトＡ−１７１Ｅ」、「サンソフトＡ−１２１Ｅ」、「サンソフトＱ−１４Ｓ」等が挙げられる。
【００２１】
本発明のインスリン分泌促進剤では、上記ポリグリセリン脂肪酸エステルの性状は、特に限定されるものではなく、例えば、油状、ペースト状、粉末状、顆粒状等が挙げられる。
【００２２】
上記ポリグリセリン脂肪酸エステルは、ポリグリセリンと、天然植物油脂由来の脂肪酸とから得られるエステルであり、従来から食品用乳化剤として使用されている。食品添加物として古くから認められており、安全性が高く、問題となるような副作用は知られていない。本発明のインスリン分泌促進剤は、このようなポリグリセリン脂肪酸エステルを有効成分として含有するので、継続的に摂取しても副作用の懸念がない。
【００２３】
本発明のインスリン分泌促進剤は、上記ポリグリセリン脂肪酸エステルを、油脂とともに含有することが好ましい。上記ポリグリセリン脂肪酸エステルは、糖（グルコース）を摂取する際に、油脂と併用されることで、インスリンの分泌促進効果を発揮する。したがって、上記ポリグリセリン脂肪酸エステルを油脂とともに含有する、本発明のインスリン分泌促進剤によれば、インスリンの分泌促進効果をより確実に発揮させることができる。油脂の種類は、特に限定されるものではないが、植物油脂であることが好ましく、例えば、大豆油、菜種油、コーン油、ヤシ油、パーム油、米油、ゴマ油、綿実油、ひまわり油、紅花油、亜麻仁油、シソ油、オリーブ油、落花生油、ブドウ種子油、マカデミアナッツ油、ヘーゼルナッツ油、カボチャ種子油、クルミ油、椿油、茶実油、エゴマ油、ボラージ油、米糠油、小麦胚芽油等の１種又は２種以上の混合油脂が挙げられる。また、これらの分別油、硬化油、エステル交換油等を用いることもできる。これらの中でも２０℃で液状である油脂がハンドリング性という観点において好ましい。
【００２４】
本発明のインスリン分泌促進剤が、上記ポリグリセリン脂肪酸エステルを油脂とともに含有する場合、該油脂と、上記ポリグリセリン脂肪酸エステルとの割合（質量比）は、９９．５：０．５〜９８：２であることが好ましい。上記範囲であれば、糖尿病の予防等に有効なインスリン分泌促進作用を得ることができる。
【００２５】
本発明のインスリン分泌促進剤は、本発明の効果を損なわない範囲において、上記ポリグリセリン脂肪酸エステル以外の公知の乳化剤を含有してもよい。該乳化剤としては、例えば、ソルビタン脂肪酸エステル、ポリソルベート、縮合リシノレイン脂肪酸エステル、モノグリセリン脂肪酸エステル、レシチン、リゾレシチン、サポニン、植物ステロール類等が挙げられる。
【００２６】
上記ポリグリセリン脂肪酸エステルは、油脂と併用されることで、糖摂取時の血漿のインスリン濃度を顕著に上昇させる作用を発揮する。このようなポリグリセリン脂肪酸エステルを有効成分として含有する本発明のインスリン分泌促進剤は、インスリン分泌量を高める必要がある糖尿病又はその予備軍に該当するヒトを含む動物に対して有効に作用するが、特にインスリンの分泌量が低下するインスリン分泌不全を伴うＩＩ型糖尿病の予防又は治療に対して効果を発揮すると考えられる。ここで、予防とは、例えば、発症の抑制、遅延等を意味し、治療とは、例えば、進行の遅延、症状の緩和、軽減、改善等を意味する。
【００２７】
糖尿病の薬物療法は、長期間継続して行う必要があるため、薬剤には、継続的に服用しても副作用の懸念がないことが求められる。本発明のインスリン分泌促進剤は、安全性が高く、副作用の懸念のない、ポリグリセリン脂肪酸エステルを有効成分として含有するので、安心して継続的に服用することができる。また、服用のコントロールが容易であるので、ＩＩ型糖尿病の治療における食事療法と運動療法とを組み合わせた薬物療法に好適である。
【００２８】
本発明のインスリン分泌促進剤の投与経路としては、経口投与が好ましい。ポリグリセリン脂肪酸エステルは分解された後、その大部分が腸管（小腸）の粘膜を通して体内に吸収されるからである。経口投与に適する製剤としては、例えば、カプセル剤、錠剤、丸剤、散剤、細粒剤、顆粒剤、液剤、シロップ剤等が挙げられる。有効成分である上記ポリグリセリン脂肪酸エステルと、薬理上及び製剤上許容しうる添加物と、を含む医薬品組成物の形態の製剤とすることが好ましい。更に、上記油脂を含む医薬品組成物の形態の製剤としてもよい。薬理上及び製剤上許容しうる添加物としては、例えば、ブドウ糖、乳糖、結晶セルロース、デンプン等の賦形剤、崩壊剤、結合剤、コーティング剤、色素、希釈剤等が挙げられ、通常、製剤分野において常用され、且つ上記ポリグリセリン脂肪酸エステルと反応しない物質が用いられる。
【００２９】
上記したように、本発明のインスリン分泌促進剤は、安全性が高く、既存のインスリン分泌促進剤のような副作用もないので、既存薬と組み合わせて用いることにより、該既存薬の用量を下げて、これらが有する副作用を低減することができる。他の薬との組み合わせは、配合剤のように同一の医薬組成物中に含むものであってもよいし、別々の医薬組成物中に含むものであってもよい。
【００３０】
本発明のインスリン分泌促進剤の投与量は、患者の症状、予防又は治療、年齢、体重、投与方法、投与期間等の諸条件に応じて、適宜選択可能である。例えば、ヒト（成人６０ｋｇ）の治療を目的とする場合には、有効量は、通常、ポリグリセリン脂肪酸エステルとして、５〜２０ｍｇ／ｋｇ体重／日であり、この量を１回又は数回に分けて投与すればよい。なお、本発明のインスリン分泌促進剤は、食前又は食事中に投与すると効果的である。
【００３１】
上記ポリグリセリン脂肪酸エステルは、糖尿病患者又はその予備軍を対象とするインスリン分泌促進用食品の製造のために使用することができる。例えば、上記ポリグリセリン脂肪酸エステルは、単独又は上記油脂とともに、ソフトカプセルに充填・加工することにより、健康食品として摂取することができる。また、例えば、上記ポリグリセリン脂肪酸エステルと上記油脂とを液状乳化油脂に加工したり、該液状乳化油脂を更に粉末状に加工することにより、直接摂取したり、これらを更に一般食品に利用し、加工することにより、間接的に摂取したりすることもできる。
【００３２】
上記ポリグリセリン脂肪酸エステルを使用して製造することができる一般食品としては、特に限定されるものではなく、例えば、パン、ケーキ、クッキー、ビスケット、ドーナツ、マフィン、スコーン、チョコレート、スナック菓子、ホイップクリーム、アイスクリーム等のパン・菓子類、果汁飲料、栄養ドリンク、スポーツドリンク等の飲料類、スープ類、ドレッシング、ソース、マヨネーズ、バター、マーガリン、調製マーガリン等の調味加工食品、ファットスプレッド、ショートニング、ベーカリーミックス、炒め油、フライ油、フライ食品、加工肉製品、冷凍食品、フライ食品、麺、レトルト食品、流動食、嚥下食等が挙げられる。
【００３３】
上記ポリグリセリン脂肪酸エステルを、糖尿病患者又はその予備軍を対象とするインスリン分泌促進用食品の製造のために使用する場合、成人（体重６０ｋｇ）１人当たりの１日の摂取量は、例えば、ポリグリセリン脂肪酸エステルとして、５〜２０ｍｇ／ｋｇ体重であることが好ましい。
【００３４】
上記ポリグリセリン脂肪酸エステルを有効成分として含有する本発明のインスリン分泌促進剤は、油脂と併用されることが好ましい。上記ポリグリセリン脂肪酸エステルは、油脂と併用されることで、糖摂取時の血漿のインスリン濃度を顕著に上昇させる作用を発揮する。上記ポリグリセリン脂肪酸エステルが油脂と併用されるためには、例えば、上述したように、剤中に上記ポリグリセリン脂肪酸エステルを油脂とともに含有させるか、あるいは、剤中に油脂を含まない場合、含まれる場合であっても適量含まない場合等には、油脂を食品等として、別途、摂取するとよい。
【実施例】
【００３５】
以下、実施例により、本発明を更に詳細に説明するが、本発明はこれらの記載に何ら制限を受けるものではない。
【００３６】
［試験例１］血漿インスリン分泌促進効果の検討（１）
ラットに対して、糖負荷と同時に、油脂又は油脂とポリグリセリン脂肪酸エステルであるヘキサステアリン酸ペンタグリセリン（ＨＬＢ：４）を投与することにより、ポリグリセリン脂肪酸エステルの血漿インスリン分泌に対する効果の検討を行った。
【００３７】
＜製造例１＞試料１の製造方法
４０％グルコース（Ｄ（＋）−Ｇｌｕｃｏｓｅ，和光純薬社製）溶液１０ｍｌに、油脂（商品名：日清キャノーラ油，長鎖脂肪酸トリグリセライド（ＬＣＴ），日清オイリオグループ社製）２ｇと、牛血清アルブミン（ＳＩＧＭＡ社製）２００ｍｇとを添加し、得られた溶液を氷上で冷却しながら超音波処理（５分間を２セット、合計１０分間）し、試料１を得た。
【００３８】
＜製造例２＞試料２の製造方法
４０％グルコース（Ｄ（＋）−Ｇｌｕｃｏｓｅ，和光純薬社製）溶液１０ｍｌに、ポリグリセリン脂肪酸エステルとしてヘキサステアリン酸ペンタグリセリン（商品名：サンソフトＡ−１８６Ｅ，ＨＬＢ：４，太陽化学社製）２０ｍｇと、油脂（商品名：日清キャノーラ油，長鎖脂肪酸トリグリセライド（ＬＣＴ），日清オイリオグループ社製）２ｇと、牛血清アルブミン（ＳＩＧＭＡ社製）２００ｍｇとを添加し、得られた溶液を氷上で冷却しながら超音波処理（５分間を２セット、合計１０分間）し、試料２を得た。
【００３９】
試験には、７週齢のＳＤ系雄性ラット（日本ＳＬＣ社より購入）を用いた。該ラット（１１匹）を１週間馴化飼育した後、８週齢及び９週齢に、試料１及び試料２の投与を行う糖負荷試験をクロスオーバー法にて行った。すなわち、ポリグリセリン脂肪酸エステルの効果を同一個体で比較できるように、最初の糖負荷試験後、１週間のＷａｓｈ−Ｏｕｔ期間を設けて２回目の糖負荷試験を行う、クロスオーバー法を採用した。飼育期間中は、温度２３±１℃、湿度５０±１０％、１２時間明暗サイクル（８：００〜２０：００照明）の環境下でステンレス製メッシュケージにて個別飼育した。水及び固形飼料（商品名：ＰｉｃｏＬａｂ Ｒｏｄｅｎｔ Ｄｉｅｔ ２０ ５０５３，日本ＳＬＣ社製）は自由摂取とした。試験前日は１７：００から絶食を行い、試験当日は１０：００から投与を開始した。
【００４０】
試験は、糖負荷と同時に油脂の投与を行う「対照試行（試料１投与試行）」と、糖負荷と同時に油脂及びポリグリセリン脂肪酸エステルであるヘキサステアリン酸ペンタグリセリン（ＨＬＢ：４）の投与を行う「ヘキサステアリン酸ペンタグリセリン（ＨＬＢ：４）投与試行（試料２投与試行）」との２試行にて行った。試料１及び２は、ゾンデを用いてラットに経口投与した。投与量は、ラットの体重１ｇ当たり６μｌとした。なお、最終的投与量は、ラットの体重１ｋｇ当たり、糖質が２ｇ、脂質が１ｇ、及びヘキサステアリン酸ペンタグリセリンが０．０１ｇであった。
【００４１】
そして、投与前及び投与２０分後に尾静脈から採血を行い、血漿インスリン濃度（ｎｇ／ｍｌ）を測定した。なお、血漿インスリン濃度の測定は、市販のキット（商品名：Ｒａｔ Ｉｎｓｕｌｉｎ ＥＬＩＳＡ ｋｉｔ，Ｍｅｒｃｏｄｉａ社製）を用いてＥＬＩＳＡ法により行った。試験結果を図１（Ａ）に示す。なお、ヘキサステアリン酸ペンタグリセリン（ＨＬＢ：４）投与試行における血漿インスリン濃度増加量は、対照試行における血漿インスリン濃度増加量の平均値を１００とした相対値（％）とし、相対値の平均値±標準誤差で表した。試行間の有意差検定には、Ｓｔｕｄｅｎｔ ｔ−ｔｅｓｔ検定を用い、危険率５％未満を持って有意差ありと判断した。
【００４２】
図１（Ａ）に示すように、ヘキサステアリン酸ペンタグリセリン（ＨＬＢ：４）投与試行における血漿インスリン濃度増加量は、対照試行と比較して有意に（Ｐ＜０．０１）高値を示した。このことから、ＨＬＢ値が４のポリグリセリン脂肪酸エステルであるヘキサステアリン酸ペンタグリセリンによれば、血漿へのインスリン分泌が促進されることが明らかとなった。なお、対照試行の血漿インスリン濃度増加量の平均値（絶対値）は１．３３±０．１３ｎｇ／ｍｌであり、ヘキサステアリン酸ペンタグリセリン（ＨＬＢ：４）投与試行の血漿インスリン濃度増加量の平均値（絶対値）は１．６５±０．１１ｎｇ／ｍｌであった。
【００４３】
［試験例２］血漿インスリン分泌促進効果の検討（２）
ラットに対して、糖負荷と同時に、油脂又は油脂とポリグリセリン脂肪酸エステルであるトリオレイン酸ペンタグリセリン（ＨＬＢ：７）を投与することにより、ポリグリセリン脂肪酸エステルの血漿インスリン分泌に対する効果の検討を行った。
【００４４】
＜製造例３＞試料３の製造方法
４０％グルコース（Ｄ（＋）−Ｇｌｕｃｏｓｅ，和光純薬社製）溶液１０ｍｌに、ポリグリセリン脂肪酸エステルとしてトリオレイン酸ペンタグリセリン（商品名：サンソフトＡ−１７３Ｅ，ＨＬＢ：７，太陽化学社製）２０ｍｇと、油脂（商品名：日清キャノーラ油，長鎖脂肪酸トリグリセライド（ＬＣＴ），日清オイリオグループ社製）２ｇと、牛血清アルブミン（ＳＩＧＭＡ社製）２００ｍｇとを添加し、得られた溶液を氷上で冷却しながら超音波処理（５分間を２セット、合計１０分間）し、試料３を得た。
【００４５】
試験には、７週齢のＳＤ系雄性ラット（日本ＳＬＣ社より購入）を用いた。該ラット（１７匹）を１週間馴化飼育した後、８週齢及び９週齢に、試料１及び試料３の投与を行う糖負荷試験をクロスオーバー法にて行った。飼育条件は、試験例１と同様とした。
【００４６】
試験は、糖負荷と同時に油脂の投与を行う「対照試行（試料１投与試行）」と、糖負荷と同時に油脂及びポリグリセリン脂肪酸エステルであるトリオレイン酸ペンタグリセリン（ＨＬＢ：７）の投与を行う「トリオレイン酸ペンタグリセリン（ＨＬＢ：７）投与試行（試料３投与試行）」の２試行にて行った。試料の投与方法及び投与量は、試験例１と同様とした。
【００４７】
そして、投与前及び投与２０分後に尾静脈から採血を行い、試験例１と同様の方法にて血漿インスリン濃度（ｎｇ／ｍｌ）を測定した。試験結果を図１（Ｂ）に示す。なお、トリオレイン酸ペンタグリセリン（ＨＬＢ：７）投与試行における血漿インスリン濃度増加量は、対照試行における血漿インスリン濃度増加量の平均値を１００とした相対値（％）とし、相対値の平均値±標準誤差で表した。試行間の有意差検定には、Ｓｔｕｄｅｎｔ ｔ−ｔｅｓｔ検定を用い、危険率５％未満を持って有意差ありと判断した。
【００４８】
図１（Ｂ）に示すように、トリオレイン酸ペンタグリセリン（ＨＬＢ：７）投与試行における血漿インスリン濃度増加量は、対照試行と比較して有意に（Ｐ＜０．０１）高値を示した。このことから、ＨＬＢ値が７のポリグリセリン脂肪酸エステルであるトリオレイン酸ペンタグリセリンによれば、血漿へのインスリン分泌が促進されることが明らかとなった。なお、対照試行の血漿インスリン濃度増加量の平均値（絶対値）は１．３２±０．１４ｎｇ／ｍｌであり、トリオレイン酸ペンタグリセリン（ＨＬＢ：７）投与試行の血漿インスリン濃度増加量の平均値（絶対値）は２．０２±０．２０ｎｇ／ｍｌであった。
【００４９】
［試験例３］血漿インスリン分泌促進効果の検討（３）
ラットに対して、糖負荷と同時に、油脂又は油脂とポリグリセリン脂肪酸エステルであるデカオレイン酸デカグリセリン（ＨＬＢ：３）とを投与することにより、ポリグリセリン脂肪酸エステルの血漿インスリン分泌に対する効果の検討を行った。
【００５０】
＜製造例４＞試料４の製造方法
４０％グルコース（Ｄ（＋）−Ｇｌｕｃｏｓｅ，和光純薬社製）溶液１０ｍｌに、デカオレイン酸デカグリセリン（商品名：サンソフトＱ−１７１０Ｓ，ＨＬＢ：３，太陽化学社製）２０ｍｇと、油脂（商品名：日清キャノーラ油，長鎖脂肪酸トリグリセライド（ＬＣＴ），日清オイリオグループ社製）２ｇと、牛血清アルブミン（ＳＩＧＭＡ社製）２００ｍｇとを添加し、得られた溶液を氷上で冷却しながら超音波処理（５分間を２セット、合計１０分間）し、試料４を得た。
【００５１】
試験には、７週齢のＳＤ系雄性ラット（日本ＳＬＣ社より購入）を用いた。該ラット（１０匹）を１週間馴化飼育した後、８週齢及び９週齢に、試料１及び試料４の投与を行う糖負荷試験をクロスオーバー法にて行った。飼育条件は、試験例１と同様とした。
【００５２】
試験は、糖負荷と同時に油脂の投与を行う「対照試行（試料１投与試行）」と、糖負荷と同時に油脂及びポリグリセリン脂肪酸エステルであるデカオレイン酸デカグリセリン（ＨＬＢ：３）の投与を行う「デカオレイン酸デカグリセリン（ＨＬＢ：３）投与試行（試料４投与試行）」との２試行にて行った。試料の投与方法及び投与量は、試験例１と同様とした。
【００５３】
そして、投与前及び投与２０分後に尾静脈から採血を行い、試験例１と同様の方法にて血漿インスリン濃度（ｎｇ／ｍｌ）を測定した。試験結果を図２に示す。なお、デカオレイン酸デカグリセリン（ＨＬＢ：３）投与試行における血漿インスリン濃度増加量は、対照試行における血漿インスリン濃度増加量の平均値を１００とした相対値（％）とし、相対値の平均値±標準誤差で表した。試行間の有意差検定には、Ｓｔｕｄｅｎｔ ｔ−ｔｅｓｔ検定を用い、危険率５％未満を持って有意差ありと判断した。
【００５４】
図２に示すように、デカオレイン酸デカグリセリン（ＨＬＢ：３）投与試行における血漿インスリン濃度は、有意な差は認められないものの、対照試行と比較して低値を示した。このことから、デカオレイン酸デカグリセリン（ＨＬＢ：３）には、インスリン分泌を促進する作用がないことが明らかとなった。なお、対照試行の血漿インスリン濃度増加量の平均値（絶対値）は１．３８±０．１６ｎｇ／ｍｌであり、デカオレイン酸デカグリセリン（ＨＬＢ：３）投与試行の血漿インスリン濃度増加量の平均値（絶対値）は１．２６±０．１３ｎｇ／ｍｌであった。
【００５５】
［試験例４］血漿インスリン分泌促進効果の検討（４）
ラットに対して、糖負荷と同時に、油脂又は油脂とポリグリセリン脂肪酸エステルであるモノオレイン酸テトラグリセリン（ＨＬＢ：８．８）を投与することにより、ポリグリセリン脂肪酸エステルの血漿インスリン分泌に対する効果の検討を行った。
【００５６】
＜製造例５＞試料５の製造方法
４０％グルコース（Ｄ（＋）−Ｇｌｕｃｏｓｅ，和光純薬社製）溶液１０ｍｌに、ポリグリセリン脂肪酸エステルとしてモノオレイン酸テトラグリセリン（商品名：ＳＹグリスターＭＯ−３Ｓ，ＨＬＢ：８．８，阪本薬品工業社製）２０ｍｇと、油脂（商品名：日清キャノーラ油，長鎖脂肪酸トリグリセライド（ＬＣＴ），日清オイリオグループ社製）２ｇと、牛血清アルブミン（ＳＩＧＭＡ社製）２００ｍｇとを添加し、得られた溶液を氷上で冷却しながら超音波処理（５分間を２セット、合計１０分間）し、試料５を得た。
【００５７】
試験には、７週齢のＳＤ系雄性ラット（日本ＳＬＣ社より購入）を用いた。該ラット（１７匹）を１週間馴化飼育した後、８週齢及び９週齢に、試料１及び試料５の投与を行う糖負荷試験をクロスオーバー法にて行った。飼育条件は、試験例１と同様とした。
【００５８】
試験は、糖負荷と同時に油脂の投与を行う「対照試行（試料１投与試行）」と、糖負荷と同時に油脂及びポリグリセリン脂肪酸エステルであるモノオレイン酸テトラグリセリン（ＨＬＢ：８．８）の投与を行う「モノオレイン酸テトラグリセリン（ＨＬＢ：８．８）投与試行（試料５投与試行）」の２試行にて行った。試料の投与方法及び投与量は、試験例１と同様とした。
【００５９】
そして、投与前及び投与２０分後に尾静脈から採血を行い、試験例１と同様の方法にて血漿インスリン濃度（ｎｇ／ｍｌ）を測定した。試験結果を図３に示す。なお、モノオレイン酸テトラグリセリン（ＨＬＢ：８．８）投与試行における血漿インスリン濃度増加量は、対照試行における血漿インスリン濃度増加量の平均値を１００とした相対値（％）とし、相対値の平均値±標準誤差で表した。試行間の有意差検定には、Ｓｔｕｄｅｎｔ ｔ−ｔｅｓｔ検定を用い、危険率５％未満を持って有意差ありと判断した。
【００６０】
図３に示すように、モノオレイン酸テトラグリセリン（ＨＬＢ：８．８）投与試行における血漿インスリン濃度増加量は、対照試行と比較して有意に（Ｐ＜０．０１）高値を示した。このことから、ＨＬＢ値が８．８のポリグリセリン脂肪酸エステルであるモノオレイン酸テトラグリセリンによれば、血漿へのインスリン分泌が促進されることが明らかとなった。なお、対照試行の血漿インスリン濃度増加量の平均値（絶対値）は０．７１±０．０６ｎｇ／ｍｌであり、モノオレイン酸テトラグリセリン（ＨＬＢ：８．８）投与試行の血漿インスリン濃度増加量の平均値（絶対値）は１．３５±０．２０ｎｇ／ｍｌであった。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、インスリン分泌促進剤に関し、詳細には、特定の範囲のＨＬＢを有するポリグリセリン脂肪酸エステルを有効成分とするインスリン分泌促進剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
糖尿病は、Ｉ型糖尿病（インスリン依存型糖尿病）と、ＩＩ型糖尿病（インスリン非依存型糖尿病）とに大別される。日本人が罹患している糖尿病の大部分は、ＩＩ型糖尿病である。ＩＩ型糖尿病は、インスリンの分泌量が低下するインスリン分泌不全や、インスリンの血糖を下げる作用が弱くなるインスリン抵抗性といった症状が進行することで発症する。これらの症状には、遺伝的要因や、偏食、過食、運動不足、ストレス等の環境的要因が大きく関与している。
【０００３】
近年、ＩＩ型糖尿病の患者数が増加しており、境界型と呼ばれる糖尿病予備軍を含めるとすでに２０００万人にも及ぶと言われている。したがって、糖尿病患者のケアだけでなく、糖尿病予備軍を糖尿病に移行させない予防が重要な課題となっている。
【０００４】
一般に、ＩＩ型糖尿病の治療は、食事療法及び運動療法を基本とした上で薬物療法を行う。日本におけるＩＩ型糖尿病の薬物療法としては、インスリン分泌を促進させるスルホニルウレア剤（ＳＵ剤）が多く使用されている。これは、日本人のインスリン分泌能力は欧米人に比べて低いからである。しかしながら、ＳＵ剤には、低血糖、そう痒感、発疹、体重増加等の副作用の問題があった。糖尿病の薬物療法は、長期間継続して行う必要があるため、継続的に服用しても副作用の懸念がないインスリン分泌促進剤の開発が所望されていた。
【０００５】
このようなインスリン分泌促進剤としては、例えば、特許文献１において、白甘薯の塊根の皮部分から得られる抽出液が有効である旨の報告がなされている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】特許第３６７７００７号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明は、上記事情に鑑みてなされたものであり、その目的は、安全性が高く、継続的に摂取しても副作用の懸念がない、糖尿病の予防等に有効なインスリン分泌促進剤を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者は、上記課題を解決するための研究を重ねる過程で、ラットに対して糖負荷を与えると同時に、油脂と、ある特定のＨＬＢを有するポリグリセリン脂肪酸エステルとを投与すると、油脂のみを投与した場合と比較して、血漿のインスリン濃度の上昇が顕著であることを見出し、本発明を完成するに至った。
【０００９】
具体的には、本発明では以下のようなものを提供する。
【００１０】
（１）ＨＬＢ４〜１５のポリグリセリン脂肪酸エステルを有効成分として含有することを特徴とするインスリン分泌促進剤。
【００１１】
（２） 上記ポリグリセリン脂肪酸エステルを、油脂とともに含有する（１）に記載のインスリン分泌促進剤。
【００１２】
（３） 油脂と併用される（１）に記載のインスリン分泌促進剤。
【００１３】
（４） ＩＩ型糖尿病の予防又は治療に用いられる（１）から（３）のいずれか１項に記載のインスリン分泌促進剤。
【発明の効果】
【００１４】
本発明のインスリン分泌促進剤は、インスリン分泌促進作用に優れるので、特に、ＩＩ型糖尿病の予防又は治療に有効である。また、本発明のインスリン分泌促進剤によれば、ポリグリセリン脂肪酸エステルを有効成分として含有するので、安全性が高く、副作用の懸念がないため、安心して継続的に使用することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１５】
【図１】（Ａ）ヘキサステアリン酸ペンタグリセリン（ＨＬＢ：４）投与試行における血漿インスリン濃度の測定結果、（Ｂ）トリオレイン酸ペンタグリセリン（ＨＬＢ：７）投与試行における血漿インスリン濃度の測定結果を示す図である。
【図２】デカオレイン酸デカグリセリン（ＨＬＢ：３）投与試行における血漿インスリン濃度の測定結果を示す図である。
【図３】モノオレイン酸テトラグリセリン（ＨＬＢ：８．８）投与試行における血漿インスリン濃度の測定結果を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
以下、本発明の具体的な実施形態について詳細に説明するが、本発明は、以下の実施形態に何ら限定されるものではなく、本発明の目的の範囲内において、適宜、変更を加えて実施することができる。
【００１７】
本発明のインスリン分泌促進剤は、ポリグリセリン脂肪酸エステルを有効成分として含有することを特徴とする。該ポリグリセリン脂肪酸エステルのＨＬＢは４〜１５であり、好ましくは４〜９である。本発明のインスリン分泌促進剤では、ＨＬＢ値が４〜１５のポリグリセリン脂肪酸エステルの１種又は２種以上を含有してもよい。ここで、ＨＬＢ値は、界面活性剤における親水性と疎水性のバランスを表す数値であり、例えば、「改訂三版 油脂化学便覧」（日本油化学協会編、丸善発行）に記載された方法により測定することができる。
【００１８】
本発明のインスリン分泌促進剤では、ポリグリセリン脂肪酸エステルを構成する脂肪酸は、特に限定されるものではなく、その炭素数が通常６〜２４、好ましくは１４〜２０、より好ましくは１６〜２０の飽和及び／又は不飽和脂肪酸である。具体的には、カプロン酸（ｎ−ヘキサン酸）、カプリル酸（ｎ−オクタン酸）、カプリン酸（ｎ−デカン酸）、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、パルミトレイン酸、ステアリン酸、オレイン酸、リノール酸、リノレン酸、アラキジン酸、アラキドン酸、ベヘン酸、エルカ酸、リグノセリン酸等が挙げられる。
【００１９】
本発明のインスリン分泌促進剤では、ＨＬＢ値が４〜１５であれば、市販のポリグリセリン脂肪酸エステルを用いてもよいし、従来公知の方法により製造したポリグリセリン脂肪酸エステルを用いてもよい。ポリグリセリン脂肪酸エステルの製造方法は、特に限定されるものではなく、例えば、グリセリンと脂肪酸とのエステル化やグリセリンと油脂とのエステル交換といった従来公知の方法が挙げられる。以下に、ポリグリセリン脂肪酸エステルの製造方法の一例を示すが、これに限定されるものではない。まず、グリセリンと、水酸化ナトリウム（触媒）とを混合し、９０℃以上で減圧しながら乾燥させた後、２００〜２７０℃にて重合反応させて、ポリグリセリンを得る。得られたポリグリセリンと、脂肪酸とを、適当な比率で反応容器に仕込み、触媒として水酸化ナトリウム溶液を添加する。次いで、窒素気流下で、２００℃以上の温度に加熱し、１〜３時間程度反応させた後、更に内温を２５０℃以上とし、３〜５時間反応させる。その後、常温まで冷却し、常法により精製し、ポリグリセリン脂肪酸エステルを得ることができる。なお、ポリグリセリン脂肪酸エステルのＨＬＢ値は、常法により調整することができる。
【００２０】
上記ポリグリセリン脂肪酸エステルの市販品としては、例えば、太陽化学社製の「サンソフトＡ−１８６Ｅ」、「サンソフトＱ−１７５Ｓ」、「サンソフトＱ−１８５Ｓ」、「サンソフトＱ−１７Ｂ」、「サンソフトＱ−１８Ｂ」、「サンソフトＱ−１８Ｄ」、「サンソフトＡ−１７３Ｅ」、「サンソフトＱ−１８２Ｓ」、「サンソフトＱ−１７Ｓ」、「サンソフトＡ−１７１Ｅ」、「サンソフトＡ−１２１Ｅ」、「サンソフトＱ−１４Ｓ」等が挙げられる。
【００２１】
本発明のインスリン分泌促進剤では、上記ポリグリセリン脂肪酸エステルの性状は、特に限定されるものではなく、例えば、油状、ペースト状、粉末状、顆粒状等が挙げられる。
【００２２】
上記ポリグリセリン脂肪酸エステルは、ポリグリセリンと、天然植物油脂由来の脂肪酸とから得られるエステルであり、従来から食品用乳化剤として使用されている。食品添加物として古くから認められており、安全性が高く、問題となるような副作用は知られていない。本発明のインスリン分泌促進剤は、このようなポリグリセリン脂肪酸エステルを有効成分として含有するので、継続的に摂取しても副作用の懸念がない。
【００２３】
本発明のインスリン分泌促進剤は、上記ポリグリセリン脂肪酸エステルを、油脂とともに含有することが好ましい。上記ポリグリセリン脂肪酸エステルは、糖（グルコース）を摂取する際に、油脂と併用されることで、インスリンの分泌促進効果を発揮する。したがって、上記ポリグリセリン脂肪酸エステルを油脂とともに含有する、本発明のインスリン分泌促進剤によれば、インスリンの分泌促進効果をより確実に発揮させることができる。油脂の種類は、特に限定されるものではないが、植物油脂であることが好ましく、例えば、大豆油、菜種油、コーン油、ヤシ油、パーム油、米油、ゴマ油、綿実油、ひまわり油、紅花油、亜麻仁油、シソ油、オリーブ油、落花生油、ブドウ種子油、マカデミアナッツ油、ヘーゼルナッツ油、カボチャ種子油、クルミ油、椿油、茶実油、エゴマ油、ボラージ油、米糠油、小麦胚芽油等の１種又は２種以上の混合油脂が挙げられる。また、これらの分別油、硬化油、エステル交換油等を用いることもできる。これらの中でも２０℃で液状である油脂がハンドリング性という観点において好ましい。
【００２４】
本発明のインスリン分泌促進剤が、上記ポリグリセリン脂肪酸エステルを油脂とともに含有する場合、該油脂と、上記ポリグリセリン脂肪酸エステルとの割合（質量比）は、９９．５：０．５〜９８：２であることが好ましい。上記範囲であれば、糖尿病の予防等に有効なインスリン分泌促進作用を得ることができる。
【００２５】
本発明のインスリン分泌促進剤は、本発明の効果を損なわない範囲において、上記ポリグリセリン脂肪酸エステル以外の公知の乳化剤を含有してもよい。該乳化剤としては、例えば、ソルビタン脂肪酸エステル、ポリソルベート、縮合リシノレイン脂肪酸エステル、モノグリセリン脂肪酸エステル、レシチン、リゾレシチン、サポニン、植物ステロール類等が挙げられる。
【００２６】
上記ポリグリセリン脂肪酸エステルは、油脂と併用されることで、糖摂取時の血漿のインスリン濃度を顕著に上昇させる作用を発揮する。このようなポリグリセリン脂肪酸エステルを有効成分として含有する本発明のインスリン分泌促進剤は、インスリン分泌量を高める必要がある糖尿病又はその予備軍に該当するヒトを含む動物に対して有効に作用するが、特にインスリンの分泌量が低下するインスリン分泌不全を伴うＩＩ型糖尿病の予防又は治療に対して効果を発揮すると考えられる。ここで、予防とは、例えば、発症の抑制、遅延等を意味し、治療とは、例えば、進行の遅延、症状の緩和、軽減、改善等を意味する。
【００２７】
糖尿病の薬物療法は、長期間継続して行う必要があるため、薬剤には、継続的に服用しても副作用の懸念がないことが求められる。本発明のインスリン分泌促進剤は、安全性が高く、副作用の懸念のない、ポリグリセリン脂肪酸エステルを有効成分として含有するので、安心して継続的に服用することができる。また、服用のコントロールが容易であるので、ＩＩ型糖尿病の治療における食事療法と運動療法とを組み合わせた薬物療法に好適である。
【００２８】
本発明のインスリン分泌促進剤の投与経路としては、経口投与が好ましい。ポリグリセリン脂肪酸エステルは分解された後、その大部分が腸管（小腸）の粘膜を通して体内に吸収されるからである。経口投与に適する製剤としては、例えば、カプセル剤、錠剤、丸剤、散剤、細粒剤、顆粒剤、液剤、シロップ剤等が挙げられる。有効成分である上記ポリグリセリン脂肪酸エステルと、薬理上及び製剤上許容しうる添加物と、を含む医薬品組成物の形態の製剤とすることが好ましい。更に、上記油脂を含む医薬品組成物の形態の製剤としてもよい。薬理上及び製剤上許容しうる添加物としては、例えば、ブドウ糖、乳糖、結晶セルロース、デンプン等の賦形剤、崩壊剤、結合剤、コーティング剤、色素、希釈剤等が挙げられ、通常、製剤分野において常用され、且つ上記ポリグリセリン脂肪酸エステルと反応しない物質が用いられる。
【００２９】
上記したように、本発明のインスリン分泌促進剤は、安全性が高く、既存のインスリン分泌促進剤のような副作用もないので、既存薬と組み合わせて用いることにより、該既存薬の用量を下げて、これらが有する副作用を低減することができる。他の薬との組み合わせは、配合剤のように同一の医薬組成物中に含むものであってもよいし、別々の医薬組成物中に含むものであってもよい。
【００３０】
本発明のインスリン分泌促進剤の投与量は、患者の症状、予防又は治療、年齢、体重、投与方法、投与期間等の諸条件に応じて、適宜選択可能である。例えば、ヒト（成人６０ｋｇ）の治療を目的とする場合には、有効量は、通常、ポリグリセリン脂肪酸エステルとして、５〜２０ｍｇ／ｋｇ体重／日であり、この量を１回又は数回に分けて投与すればよい。なお、本発明のインスリン分泌促進剤は、食前又は食事中に投与すると効果的である。
【００３１】
上記ポリグリセリン脂肪酸エステルは、糖尿病患者又はその予備軍を対象とするインスリン分泌促進用食品の製造のために使用することができる。例えば、上記ポリグリセリン脂肪酸エステルは、単独又は上記油脂とともに、ソフトカプセルに充填・加工することにより、健康食品として摂取することができる。また、例えば、上記ポリグリセリン脂肪酸エステルと上記油脂とを液状乳化油脂に加工したり、該液状乳化油脂を更に粉末状に加工することにより、直接摂取したり、これらを更に一般食品に利用し、加工することにより、間接的に摂取したりすることもできる。
【００３２】
上記ポリグリセリン脂肪酸エステルを使用して製造することができる一般食品としては、特に限定されるものではなく、例えば、パン、ケーキ、クッキー、ビスケット、ドーナツ、マフィン、スコーン、チョコレート、スナック菓子、ホイップクリーム、アイスクリーム等のパン・菓子類、果汁飲料、栄養ドリンク、スポーツドリンク等の飲料類、スープ類、ドレッシング、ソース、マヨネーズ、バター、マーガリン、調製マーガリン等の調味加工食品、ファットスプレッド、ショートニング、ベーカリーミックス、炒め油、フライ油、フライ食品、加工肉製品、冷凍食品、フライ食品、麺、レトルト食品、流動食、嚥下食等が挙げられる。
【００３３】
上記ポリグリセリン脂肪酸エステルを、糖尿病患者又はその予備軍を対象とするインスリン分泌促進用食品の製造のために使用する場合、成人（体重６０ｋｇ）１人当たりの１日の摂取量は、例えば、ポリグリセリン脂肪酸エステルとして、５〜２０ｍｇ／ｋｇ体重であることが好ましい。
【００３４】
上記ポリグリセリン脂肪酸エステルを有効成分として含有する本発明のインスリン分泌促進剤は、油脂と併用されることが好ましい。上記ポリグリセリン脂肪酸エステルは、油脂と併用されることで、糖摂取時の血漿のインスリン濃度を顕著に上昇させる作用を発揮する。上記ポリグリセリン脂肪酸エステルが油脂と併用されるためには、例えば、上述したように、剤中に上記ポリグリセリン脂肪酸エステルを油脂とともに含有させるか、あるいは、剤中に油脂を含まない場合、含まれる場合であっても適量含まない場合等には、油脂を食品等として、別途、摂取するとよい。
【実施例】
【００３５】
以下、実施例により、本発明を更に詳細に説明するが、本発明はこれらの記載に何ら制限を受けるものではない。
【００３６】
［試験例１］血漿インスリン分泌促進効果の検討（１）
ラットに対して、糖負荷と同時に、油脂又は油脂とポリグリセリン脂肪酸エステルであるヘキサステアリン酸ペンタグリセリン（ＨＬＢ：４）を投与することにより、ポリグリセリン脂肪酸エステルの血漿インスリン分泌に対する効果の検討を行った。
【００３７】
＜製造例１＞試料１の製造方法
４０％グルコース（Ｄ（＋）−Ｇｌｕｃｏｓｅ，和光純薬社製）溶液１０ｍｌに、油脂（商品名：日清キャノーラ油，長鎖脂肪酸トリグリセライド（ＬＣＴ），日清オイリオグループ社製）２ｇと、牛血清アルブミン（ＳＩＧＭＡ社製）２００ｍｇとを添加し、得られた溶液を氷上で冷却しながら超音波処理（５分間を２セット、合計１０分間）し、試料１を得た。
【００３８】
＜製造例２＞試料２の製造方法
４０％グルコース（Ｄ（＋）−Ｇｌｕｃｏｓｅ，和光純薬社製）溶液１０ｍｌに、ポリグリセリン脂肪酸エステルとしてヘキサステアリン酸ペンタグリセリン（商品名：サンソフトＡ−１８６Ｅ，ＨＬＢ：４，太陽化学社製）２０ｍｇと、油脂（商品名：日清キャノーラ油，長鎖脂肪酸トリグリセライド（ＬＣＴ），日清オイリオグループ社製）２ｇと、牛血清アルブミン（ＳＩＧＭＡ社製）２００ｍｇとを添加し、得られた溶液を氷上で冷却しながら超音波処理（５分間を２セット、合計１０分間）し、試料２を得た。
【００３９】
試験には、７週齢のＳＤ系雄性ラット（日本ＳＬＣ社より購入）を用いた。該ラット（１１匹）を１週間馴化飼育した後、８週齢及び９週齢に、試料１及び試料２の投与を行う糖負荷試験をクロスオーバー法にて行った。すなわち、ポリグリセリン脂肪酸エステルの効果を同一個体で比較できるように、最初の糖負荷試験後、１週間のＷａｓｈ−Ｏｕｔ期間を設けて２回目の糖負荷試験を行う、クロスオーバー法を採用した。飼育期間中は、温度２３±１℃、湿度５０±１０％、１２時間明暗サイクル（８：００〜２０：００照明）の環境下でステンレス製メッシュケージにて個別飼育した。水及び固形飼料（商品名：ＰｉｃｏＬａｂ Ｒｏｄｅｎｔ Ｄｉｅｔ ２０ ５０５３，日本ＳＬＣ社製）は自由摂取とした。試験前日は１７：００から絶食を行い、試験当日は１０：００から投与を開始した。
【００４０】
試験は、糖負荷と同時に油脂の投与を行う「対照試行（試料１投与試行）」と、糖負荷と同時に油脂及びポリグリセリン脂肪酸エステルであるヘキサステアリン酸ペンタグリセリン（ＨＬＢ：４）の投与を行う「ヘキサステアリン酸ペンタグリセリン（ＨＬＢ：４）投与試行（試料２投与試行）」との２試行にて行った。試料１及び２は、ゾンデを用いてラットに経口投与した。投与量は、ラットの体重１ｇ当たり６μｌとした。なお、最終的投与量は、ラットの体重１ｋｇ当たり、糖質が２ｇ、脂質が１ｇ、及びヘキサステアリン酸ペンタグリセリンが０．０１ｇであった。
【００４１】
そして、投与前及び投与２０分後に尾静脈から採血を行い、血漿インスリン濃度（ｎｇ／ｍｌ）を測定した。なお、血漿インスリン濃度の測定は、市販のキット（商品名：Ｒａｔ Ｉｎｓｕｌｉｎ ＥＬＩＳＡ ｋｉｔ，Ｍｅｒｃｏｄｉａ社製）を用いてＥＬＩＳＡ法により行った。試験結果を図１（Ａ）に示す。なお、ヘキサステアリン酸ペンタグリセリン（ＨＬＢ：４）投与試行における血漿インスリン濃度増加量は、対照試行における血漿インスリン濃度増加量の平均値を１００とした相対値（％）とし、相対値の平均値±標準誤差で表した。試行間の有意差検定には、Ｓｔｕｄｅｎｔ ｔ−ｔｅｓｔ検定を用い、危険率５％未満を持って有意差ありと判断した。
【００４２】
図１（Ａ）に示すように、ヘキサステアリン酸ペンタグリセリン（ＨＬＢ：４）投与試行における血漿インスリン濃度増加量は、対照試行と比較して有意に（Ｐ＜０．０１）高値を示した。このことから、ＨＬＢ値が４のポリグリセリン脂肪酸エステルであるヘキサステアリン酸ペンタグリセリンによれば、血漿へのインスリン分泌が促進されることが明らかとなった。なお、対照試行の血漿インスリン濃度増加量の平均値（絶対値）は１．３３±０．１３ｎｇ／ｍｌであり、ヘキサステアリン酸ペンタグリセリン（ＨＬＢ：４）投与試行の血漿インスリン濃度増加量の平均値（絶対値）は１．６５±０．１１ｎｇ／ｍｌであった。
【００４３】
［試験例２］血漿インスリン分泌促進効果の検討（２）
ラットに対して、糖負荷と同時に、油脂又は油脂とポリグリセリン脂肪酸エステルであるトリオレイン酸ペンタグリセリン（ＨＬＢ：７）を投与することにより、ポリグリセリン脂肪酸エステルの血漿インスリン分泌に対する効果の検討を行った。
【００４４】
＜製造例３＞試料３の製造方法
４０％グルコース（Ｄ（＋）−Ｇｌｕｃｏｓｅ，和光純薬社製）溶液１０ｍｌに、ポリグリセリン脂肪酸エステルとしてトリオレイン酸ペンタグリセリン（商品名：サンソフトＡ−１７３Ｅ，ＨＬＢ：７，太陽化学社製）２０ｍｇと、油脂（商品名：日清キャノーラ油，長鎖脂肪酸トリグリセライド（ＬＣＴ），日清オイリオグループ社製）２ｇと、牛血清アルブミン（ＳＩＧＭＡ社製）２００ｍｇとを添加し、得られた溶液を氷上で冷却しながら超音波処理（５分間を２セット、合計１０分間）し、試料３を得た。
【００４５】
試験には、７週齢のＳＤ系雄性ラット（日本ＳＬＣ社より購入）を用いた。該ラット（１７匹）を１週間馴化飼育した後、８週齢及び９週齢に、試料１及び試料３の投与を行う糖負荷試験をクロスオーバー法にて行った。飼育条件は、試験例１と同様とした。
【００４６】
試験は、糖負荷と同時に油脂の投与を行う「対照試行（試料１投与試行）」と、糖負荷と同時に油脂及びポリグリセリン脂肪酸エステルであるトリオレイン酸ペンタグリセリン（ＨＬＢ：７）の投与を行う「トリオレイン酸ペンタグリセリン（ＨＬＢ：７）投与試行（試料３投与試行）」の２試行にて行った。試料の投与方法及び投与量は、試験例１と同様とした。
【００４７】
そして、投与前及び投与２０分後に尾静脈から採血を行い、試験例１と同様の方法にて血漿インスリン濃度（ｎｇ／ｍｌ）を測定した。試験結果を図１（Ｂ）に示す。なお、トリオレイン酸ペンタグリセリン（ＨＬＢ：７）投与試行における血漿インスリン濃度増加量は、対照試行における血漿インスリン濃度増加量の平均値を１００とした相対値（％）とし、相対値の平均値±標準誤差で表した。試行間の有意差検定には、Ｓｔｕｄｅｎｔ ｔ−ｔｅｓｔ検定を用い、危険率５％未満を持って有意差ありと判断した。
【００４８】
図１（Ｂ）に示すように、トリオレイン酸ペンタグリセリン（ＨＬＢ：７）投与試行における血漿インスリン濃度増加量は、対照試行と比較して有意に（Ｐ＜０．０１）高値を示した。このことから、ＨＬＢ値が７のポリグリセリン脂肪酸エステルであるトリオレイン酸ペンタグリセリンによれば、血漿へのインスリン分泌が促進されることが明らかとなった。なお、対照試行の血漿インスリン濃度増加量の平均値（絶対値）は１．３２±０．１４ｎｇ／ｍｌであり、トリオレイン酸ペンタグリセリン（ＨＬＢ：７）投与試行の血漿インスリン濃度増加量の平均値（絶対値）は２．０２±０．２０ｎｇ／ｍｌであった。
【００４９】
［試験例３］血漿インスリン分泌促進効果の検討（３）
ラットに対して、糖負荷と同時に、油脂又は油脂とポリグリセリン脂肪酸エステルであるデカオレイン酸デカグリセリン（ＨＬＢ：３）とを投与することにより、ポリグリセリン脂肪酸エステルの血漿インスリン分泌に対する効果の検討を行った。
【００５０】
＜製造例４＞試料４の製造方法
４０％グルコース（Ｄ（＋）−Ｇｌｕｃｏｓｅ，和光純薬社製）溶液１０ｍｌに、デカオレイン酸デカグリセリン（商品名：サンソフトＱ−１７１０Ｓ，ＨＬＢ：３，太陽化学社製）２０ｍｇと、油脂（商品名：日清キャノーラ油，長鎖脂肪酸トリグリセライド（ＬＣＴ），日清オイリオグループ社製）２ｇと、牛血清アルブミン（ＳＩＧＭＡ社製）２００ｍｇとを添加し、得られた溶液を氷上で冷却しながら超音波処理（５分間を２セット、合計１０分間）し、試料４を得た。
【００５１】
試験には、７週齢のＳＤ系雄性ラット（日本ＳＬＣ社より購入）を用いた。該ラット（１０匹）を１週間馴化飼育した後、８週齢及び９週齢に、試料１及び試料４の投与を行う糖負荷試験をクロスオーバー法にて行った。飼育条件は、試験例１と同様とした。
【００５２】
試験は、糖負荷と同時に油脂の投与を行う「対照試行（試料１投与試行）」と、糖負荷と同時に油脂及びポリグリセリン脂肪酸エステルであるデカオレイン酸デカグリセリン（ＨＬＢ：３）の投与を行う「デカオレイン酸デカグリセリン（ＨＬＢ：３）投与試行（試料４投与試行）」との２試行にて行った。試料の投与方法及び投与量は、試験例１と同様とした。
【００５３】
そして、投与前及び投与２０分後に尾静脈から採血を行い、試験例１と同様の方法にて血漿インスリン濃度（ｎｇ／ｍｌ）を測定した。試験結果を図２に示す。なお、デカオレイン酸デカグリセリン（ＨＬＢ：３）投与試行における血漿インスリン濃度増加量は、対照試行における血漿インスリン濃度増加量の平均値を１００とした相対値（％）とし、相対値の平均値±標準誤差で表した。試行間の有意差検定には、Ｓｔｕｄｅｎｔ ｔ−ｔｅｓｔ検定を用い、危険率５％未満を持って有意差ありと判断した。
【００５４】
図２に示すように、デカオレイン酸デカグリセリン（ＨＬＢ：３）投与試行における血漿インスリン濃度は、有意な差は認められないものの、対照試行と比較して低値を示した。このことから、デカオレイン酸デカグリセリン（ＨＬＢ：３）には、インスリン分泌を促進する作用がないことが明らかとなった。なお、対照試行の血漿インスリン濃度増加量の平均値（絶対値）は１．３８±０．１６ｎｇ／ｍｌであり、デカオレイン酸デカグリセリン（ＨＬＢ：３）投与試行の血漿インスリン濃度増加量の平均値（絶対値）は１．２６±０．１３ｎｇ／ｍｌであった。
【００５５】
［試験例４］血漿インスリン分泌促進効果の検討（４）
ラットに対して、糖負荷と同時に、油脂又は油脂とポリグリセリン脂肪酸エステルであるモノオレイン酸テトラグリセリン（ＨＬＢ：８．８）を投与することにより、ポリグリセリン脂肪酸エステルの血漿インスリン分泌に対する効果の検討を行った。
【００５６】
＜製造例５＞試料５の製造方法
４０％グルコース（Ｄ（＋）−Ｇｌｕｃｏｓｅ，和光純薬社製）溶液１０ｍｌに、ポリグリセリン脂肪酸エステルとしてモノオレイン酸テトラグリセリン（商品名：ＳＹグリスターＭＯ−３Ｓ，ＨＬＢ：８．８，阪本薬品工業社製）２０ｍｇと、油脂（商品名：日清キャノーラ油，長鎖脂肪酸トリグリセライド（ＬＣＴ），日清オイリオグループ社製）２ｇと、牛血清アルブミン（ＳＩＧＭＡ社製）２００ｍｇとを添加し、得られた溶液を氷上で冷却しながら超音波処理（５分間を２セット、合計１０分間）し、試料５を得た。
【００５７】
試験には、７週齢のＳＤ系雄性ラット（日本ＳＬＣ社より購入）を用いた。該ラット（１７匹）を１週間馴化飼育した後、８週齢及び９週齢に、試料１及び試料５の投与を行う糖負荷試験をクロスオーバー法にて行った。飼育条件は、試験例１と同様とした。
【００５８】
試験は、糖負荷と同時に油脂の投与を行う「対照試行（試料１投与試行）」と、糖負荷と同時に油脂及びポリグリセリン脂肪酸エステルであるモノオレイン酸テトラグリセリン（ＨＬＢ：８．８）の投与を行う「モノオレイン酸テトラグリセリン（ＨＬＢ：８．８）投与試行（試料５投与試行）」の２試行にて行った。試料の投与方法及び投与量は、試験例１と同様とした。
【００５９】
そして、投与前及び投与２０分後に尾静脈から採血を行い、試験例１と同様の方法にて血漿インスリン濃度（ｎｇ／ｍｌ）を測定した。試験結果を図３に示す。なお、モノオレイン酸テトラグリセリン（ＨＬＢ：８．８）投与試行における血漿インスリン濃度増加量は、対照試行における血漿インスリン濃度増加量の平均値を１００とした相対値（％）とし、相対値の平均値±標準誤差で表した。試行間の有意差検定には、Ｓｔｕｄｅｎｔ ｔ−ｔｅｓｔ検定を用い、危険率５％未満を持って有意差ありと判断した。
【００６０】
図３に示すように、モノオレイン酸テトラグリセリン（ＨＬＢ：８．８）投与試行における血漿インスリン濃度増加量は、対照試行と比較して有意に（Ｐ＜０．０１）高値を示した。このことから、ＨＬＢ値が８．８のポリグリセリン脂肪酸エステルであるモノオレイン酸テトラグリセリンによれば、血漿へのインスリン分泌が促進されることが明らかとなった。なお、対照試行の血漿インスリン濃度増加量の平均値（絶対値）は０．７１±０．０６ｎｇ／ｍｌであり、モノオレイン酸テトラグリセリン（ＨＬＢ：８．８）投与試行の血漿インスリン濃度増加量の平均値（絶対値）は１．３５±０．２０ｎｇ／ｍｌであった。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＨＬＢ４〜１５のポリグリセリン脂肪酸エステルを有効成分として含有することを特徴とするインスリン分泌促進剤。
【請求項２】
前記ポリグリセリン脂肪酸エステルを、油脂とともに含有する請求項１に記載のインスリン分泌促進剤。
【請求項３】
油脂と併用される請求項１に記載のインスリン分泌促進剤。
【請求項４】
ＩＩ型糖尿病の予防又は治療に用いられる請求項１から３のいずれか１項に記載のインスリン分泌促進剤。
【請求項１】
ＨＬＢ４〜１５のポリグリセリン脂肪酸エステルを有効成分として含有することを特徴とするインスリン分泌促進剤。
【請求項２】
前記ポリグリセリン脂肪酸エステルを、油脂とともに含有する請求項１に記載のインスリン分泌促進剤。
【請求項３】
油脂と併用される請求項１に記載のインスリン分泌促進剤。
【請求項４】
ＩＩ型糖尿病の予防又は治療に用いられる請求項１から３のいずれか１項に記載のインスリン分泌促進剤。
【図１】
【図２】
【図３】
【図２】
【図３】
【公開番号】特開２０１２−１４０４０６（Ｐ２０１２−１４０４０６Ａ）
【公開日】平成２４年７月２６日（２０１２．７．２６）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１１−２５７３７７（Ｐ２０１１−２５７３７７）
【出願日】平成２３年１１月２５日（２０１１．１１．２５）
【出願人】（０００２２７００９）日清オイリオグループ株式会社 (251)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２４年７月２６日（２０１２．７．２６）
【国際特許分類】
【出願日】平成２３年１１月２５日（２０１１．１１．２５）
【出願人】（０００２２７００９）日清オイリオグループ株式会社 (251)
【Ｆターム（参考）】
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