植物内または植物の部分内でインフルエンザウイルス様粒子（ＶＬＰ）を合成するための方法が提供される。本方法は、植物内でのインフルエンザＨＡの発現、およびサイズ排除クロマトグラフィーによる精製を伴う。本発明は、インフルエンザＨＡタンパク質および植物脂質を含むＶＬＰにも関する。本発明はさらに、インフルエンザＨＡをコードする核酸ならびにベクターを対象とする。ＶＬＰは、インフルエンザワクチンを処方するために使用されてもよく、または従来型ワクチンを濃縮するために使用されてもよい。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
植物において活性のある調節領域に作動可能に連結された、インフルエンザ赤血球凝集素（ＨＡ）をコードするヌクレオチド配列を含む核酸。
【請求項２】
前記ＨＡが、天然または非天然シグナルペプチドを含む、請求項１に記載の核酸。
【請求項３】
前記非天然シグナルペプチドが、タンパク質ジスルフィドイソメラーゼシグナルペプチドである、請求項２に記載の核酸。
【請求項４】
前記ＨＡが、Ａ型インフルエンザ、Ｂ型インフルエンザであるか、またはＨ１、Ｈ２、Ｈ３、Ｈ４、Ｈ５、Ｈ６、Ｈ７、Ｈ８、Ｈ９、Ｈ１０、Ｈ１１、Ｈ１２、Ｈ１３、Ｈ１４、Ｈ１５、およびＨ１６からなる群から選択されるＡ型インフルエンザの亜型である、請求項１に記載の核酸。
【請求項５】
前記ＨＡが、Ｈ１、Ｈ２、Ｈ３、Ｈ５、Ｈ６、Ｈ７、およびＨ９からなる群から選択されるＡ型インフルエンザ由来である、請求項１に記載の核酸。
【請求項６】
インフルエンザウイルス様粒子（ＶＬＰ）を植物において生産する方法であって、
ａ）請求項１に記載の核酸を該植物または該植物の部分に導入する工程と、
ｂ）該核酸の発現を可能にする条件下で該植物または該植物の部分をインキュベートし、それにより該ＶＬＰを生産する工程と
を含む方法。
【請求項７】
前記導入工程（工程ａ）において、前記核酸が、前記植物中で一過性に発現される、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
前記導入工程（工程ａ）において、前記核酸が、前記植物中で安定的に発現される、請求項６に記載の方法。
【請求項９】
ｃ）宿主を回収し、前記ＶＬＰを精製する工程
をさらに含む、請求項６に記載の方法。
【請求項１０】
前記導入工程（工程ａ）において、１つまたは複数のシャペロンタンパク質をコードするヌクレオチド配列を含む第２の核酸が、前記植物に導入される、請求項６に記載の方法。
【請求項１１】
前記１つまたは複数のシャペロンタンパク質が、Ｈｓｐ４０およびＨｓｐ７０からなる群から選択される、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
インフルエンザウイルス様粒子（ＶＬＰ）を植物において生産する方法であって、
ａ）請求項１に記載の核酸を含む植物または植物の部分を準備する工程と、
ｂ）該核酸の発現を可能にする条件下で該植物または該植物の部分をインキュベートし、それにより該ＶＬＰを生産する工程と
を含む方法。
【請求項１３】
請求項１に記載の核酸を含む植物。
【請求項１４】
植物において活性のある調節領域に作動可能に連結された、１つまたは複数のシャペロンタンパク質をコードするヌクレオチド配列を含む核酸をさらに含む、請求項１３に記載の植物。
【請求項１５】
前記１つまたは複数のシャペロンタンパク質が、Ｈｓｐ４０およびＨｓｐ７０からなる群から選択される、請求項１４に記載の植物。
【請求項１６】
インフルエンザウイルス赤血球凝集素（ＨＡ）タンパク質および植物に由来する１つまたは複数の脂質を含むウイルス様粒子（ＶＬＰ）。
【請求項１７】
前記ＨＡが、Ａ型インフルエンザ、Ｂ型インフルエンザ、またはＨ１、Ｈ２、Ｈ３、Ｈ４、Ｈ５、Ｈ６、Ｈ７、Ｈ８、Ｈ９、Ｈ１０、Ｈ１１、Ｈ１２、Ｈ１３、Ｈ１４、Ｈ１５、およびＨ１６からなる群から選択されるＡ型インフルエンザＨＡの亜型である、請求項１６に記載のウイルス様粒子（ＶＬＰ）。
【請求項１８】
前記ＨＡが、Ｈ１、Ｈ２、Ｈ３、Ｈ５、Ｈ６、Ｈ７、およびＨ９からなる群から選択されるＡ型インフルエンザ由来である、請求項１７に記載のＶＬＰ。
【請求項１９】
有効用量の請求項１６に記載のＶＬＰおよび薬学的に許容される担体を含む組成物。
【請求項２０】
対象においてインフルエンザウイルス感染に対する免疫を誘導する方法であって、請求項１６に記載のウイルス様粒子を投与することを含む方法。
【請求項２１】
前記ウイルス様粒子が、経口、皮内、鼻腔内、筋肉内、腹腔内、静脈内、または皮下で、対象に投与される、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
植物特異的Ｎ−グリカンまたは修飾Ｎ−グリカンを保持するインフルエンザウイルスＨＡを含むウイルス様粒子（ＶＬＰ）。
【請求項２３】
前記ＨＡが、Ａ型インフルエンザ、Ｂ型インフルエンザであるか、またはＨ１、Ｈ２、Ｈ３、Ｈ４、Ｈ５、Ｈ６、Ｈ７、Ｈ８、Ｈ９、Ｈ１０、Ｈ１１、Ｈ１２、Ｈ１３、Ｈ１４、Ｈ１５、およびＨ１６からなる群から選択されるＡ型インフルエンザＨＡの亜型である、請求項２２に記載のウイルス様粒子（ＶＬＰ）。
【請求項２４】
前記ＨＡが、Ｈ１、Ｈ２、Ｈ３、Ｈ５、Ｈ６、Ｈ７、およびＨ９からなる群から選択されるＡ型インフルエンザ由来である、請求項２３に記載のＶＬＰ。
【請求項２５】
有効用量の請求項２２に記載のＶＬＰおよび薬学的に許容される担体を含む組成物。
【請求項２６】
対象においてインフルエンザウイルス感染に対する免疫を誘導する方法であって、請求項２５に記載の組成物を投与することを含む方法。
【請求項２７】
前記組成物が、経口、皮内、鼻腔内、筋肉内、腹腔内、静脈内、または皮下で、対象に投与される、請求項２６に記載の方法。

【図１Ａ】

【図１Ｂ】

【図２Ａ】

【図２Ｂ】

【図３Ａ】

【図３Ｂ】

【図３Ｃ】

【図３Ｄ】

【図４】

【図５】

【図６】

【図７】

【図８】

【図９】

【図１０Ａ】

【図１０Ｂ】

【図１０Ｃ】

【図１０Ｄ】

【図１０Ｅ】

【図１０Ｆ】

【図１０Ｇ】

【図１０Ｈ】

【図１０Ｉ】

【図１０Ｊ】

【図１０Ｋ】

【図１０Ｌ】

【図１０Ｍ】

【図１０Ｎ】

【図１０Ｏ】

【図１０Ｐ】

【図１０Ｑ】

【図１０Ｒ】

【図１０Ｓ】

【図１０Ｔ】

【図１１】

【図１２】

【図１３】

【図１４】

【図１５Ａ】

【図１５Ｂ】

【図１５Ｃ】

【図１５Ｄ】

【図１６】

【図１７】

【図１８】

【図１９】

【図２０】

【図２１】

【図２２】

【図２３】

【図２４】

【図２５】

【図２６】

【図２７】

【図２８】

【図２９】

【図３０】

【図３１】

【図３２】

【図３３】

【図３４】

【図３５】

【図３６】

【図３７】

【図３８】

【図３９】

【図４０】

【図４１】

【図４２】

【図４３】

【図４４】

【図４５】

【図４６】

【図４７】

【図４８ａ】

【図４８ｂ】

【図４９】

【図５０】

【図５１】

【図５２】

【図５３】

【図５４】

【図５５】

【図５６】

【図５７】

【図５８】

【図５９】

【図６０】

【図６１】

【図６２】

【図６３】

【図６４】

【図６５】

【図６６】

【図６７】

【図６８】

【図６９】

【図７０】

【図７１】

【図７２】

【図７３】

【図７４】

【図７５】

【図７６】

【図７７】

【図７８】

【図７９】

【図８０】

【図８１】

【図８２】

【図８３】

【図８４】

【図８５Ａ】

【図８５Ｂ】

【図８６】

【図８７】

【図８８】

【図８９】

【公表番号】特表２０１１−５０９６６１（Ｐ２０１１−５０９６６１Ａ）
【公表日】平成２３年３月３１日（２０１１．３．３１）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１０−５４２４８６（Ｐ２０１０−５４２４８６）
【出願日】平成２１年１月１２日（２００９．１．１２）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＣＡ２００９／００００３２
【国際公開番号】ＷＯ２００９／０７６７７８
【国際公開日】平成２１年６月２５日（２００９．６．２５）
【出願人】（５０２１２１３９５）メディカゴ　インコーポレイテッド (13)
【Ｆターム（参考）】