小分子を用いるリン酸管理
本発明は、リン酸輸送を抑制するのに、および正常な血清中リン酸レベルの維持に関わる異常に関連した疾患を治療または予防するのに使用することのできる方法、およびリン酸基を有する小分子に関する。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
２００９年１月２６日に出願の米国特許仮出願第６１／１４７３４８号の米国特許法第１１９条（ｅ）項による利益を請求する。
本開示は、一般に、リン酸輸送を抑制するのに使用できる方法および小分子に関する。とりわけ、本開示は、正常な血清中リン酸レベルの維持についての異常に関連する疾患を治療または予防するのに使用できる方法および小分子を対象とする。より詳細には、本開示は、高リン血症を治療または予防するのに使用できる方法および小分子を対象とする。
【背景技術】
【０００２】
リンおよび無機リン酸（Ｐｉ）は、細胞シグナル伝達、核酸合成、エネルギー代謝、膜機能、および骨ミネラル化を含む数多くの不可欠な生物学的過程に関与する。したがって、血清中Ｐｉレベルまたは相殺Ｐｉバランスの有意な変化は、かなりの生理学的意義を有し得る。血清中Ｐｉ濃度の急速な低下は、筋疾患、心機能不全、好中球機能異常、血小板機能不全、および赤血球膜脆弱を含むいくつかの病理の中で明らかにされることがある。慢性の血清中Ｐｉ欠乏は、骨軟化症およびくる病に繋がることのある骨ミネラル化についての障害を引き起こすことがある。対照的に、高められた血清中Ｐｉ濃度は、慢性腎不全患者における二次性副甲状腺機能亢進症の病因となる。高リン血症および結果としてのカルシウム−リン酸積（Ｃａ×Ｐ）の増加は、軟部組織および血管壁の石灰化をもたらし、より高い死亡リスクに関連する。
【０００３】
Ｐｉの血漿中レベルは、主として、（１）小腸内での、ビタミンＤによって直接的に刺激されるＰｉ吸収のコントロール、（２）骨再吸収の速度をコントロールする因子、および（３）副甲状腺ホルモン（ＰＴＨ）、および線維芽細胞増殖因子−２３（ＦＧＦ−２３）などのリン酸塩尿因子の影響下にある、腎臓中でのＰｉ排泄を介して安定化される。不適切な腎機能または副甲状腺機能低下症などの、リン酸の恒常性をコントロールするシグナル経路の障害は、高リン血症を引き起こすことが多い。慢性高リン血症は、副甲状腺機能亢進症、骨疾患、ならびに関節、肺、眼および脈管系における異所性石灰化によって現れることの多い、カルシウムおよびリン代謝の深刻な異常に繋がることがある。腎機能不全を示す患者の場合、血清中リンの正常範囲内での上昇は、腎不全の進行および心血管事象のリスク増大と関連している。逆に、リン酸滞留を低減すると、腎疾患の進行を減速することができる。したがって、高リン血症である腎不全患者、およびその血清中リン酸が正常範囲内であるか、ほんのわずかに上昇している慢性腎臓病（ＣＫＤ）患者の場合、リン酸の取込みおよび停留を低下させる治療的取組みが有益である。
慢性腎臓病が進行するにつれ、血清中リン酸レベルをコントロールすることがより困難になる。血液透析中の患者の６０％超が、５．５ｍｇ／ｄＬを超える血清中リン酸レベルを有すると報告された。正常な生理学的血清中リン濃度は、一般に、約２．５ｍｇ／ｄＬ〜約４．５ｍｇ／ｄＬであると考えられる（Ｂｌｏｃｋ ＧおよびＰｏｒｔ Ｆ，Ａｍ．Ｊ．Ｋｉｄｈｅｙ Ｄｉｓ．２０００年、３５巻、１２２６〜１２３７頁）。さらに、血清中リンレベルが６．５ｍｇ／ｄＬを超える血液透析患者は、血清中リンが２．４〜６．５ｍｇ／ｄＬの患者に比べて、２７％高い死亡リスクを有することが報告された。これらの知見に基づき、米国腎臓財団（Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｋｉｄｎｅｙ Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ）−腎臓病予後改善対策（Ｋｉｄｎｅｙ Ｄｉｓｅａｓｅ Ｏｕｔｃｏｍｅ Ｑｕａｌｉｔｙ Ｉｎｉｔｉａｔｉｖｅ）（Ｋ／ＤＯＱＩ）の慢性腎臓病における骨代謝および疾患に関する診療ガイドライン（Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｐｒａｃｔｉｃｅ Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ ｆｏｒ Ｂｏｎｅ Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ ａｎｄ Ｄｉｓｅａｓｅ ｉｎ Ｃｈｒｏｎｉｃ Ｋｉｄｎｅｙ Ｄｉｓｅａｓｅ）は、患者の生活の質および寿命を改善するために、血清中リンおよびＣａ×Ｐ積をコントロールするための厳しい方策を最近推奨している。
【０００４】
高リン血症を管理するための最近の治療的取組みは、食事性リン摂取を制限すること、およびリン酸捕捉性マトリックスを採用することを含み、その双方とも、大部分は不十分であり、耐容性が不足していることが多い。初期には、臨床的強調は、食事性リン摂取を制限することに向けられていた。食事性リンは、３つの主要供給源、食材中の本来的なリン含有量、保存のためのリン酸塩含有添加物、およびリン酸塩を含有する栄養補助食品に由来する。食事性リンは、主としてタンパク質に由来するので、リンの意味のある制限は、タンパク質の摂取を不可避的に制限する。結果として、透析患者は、栄養不良および死亡リスクの増大を経験する。
初期に使用されたリン酸捕捉性マトリックスは、アルミニウムおよびカルシウムの化合物である。リン酸捕捉のために利用されて来たカルシウム塩としては、炭酸カルシウム、酢酸カルシウム（ＰｈｏｓＬｏ（登録商標）酢酸カルシウム錠剤など）、クエン酸、アルギン酸、およびケト酸の塩が挙げられる。主たるリン酸錯体化物質としてカルシウムを使用することの利点は、副甲状腺ホルモンの分泌に対する抑制効果、低コスト、および良好な耐容性である。しかし、この部類の治療薬は、このような結合剤はＣａ×Ｐ指数を上昇させることがあるので、一般に高カルシウム血症をもたらし、高められたリンの出現に繋がる。アルミニウムおよびマグネシウム塩は、カルシウムに基づかないリン酸結合剤として利用できるが、これらの化合物は、いくつかの潜在的に深刻な副作用を有する。アルミニウムゲル剤を長期に使用すると、アルミニウムの蓄積、ならびに、脳障害、骨軟化症および筋疾患のような症状を伴うアルミニウム毒性に繋がることが多い。
初めは胆汁酸捕捉剤として開発されたポリマー樹脂も、Ｐｉ結合剤として研究され、あるいは使用されている。これらのポリマーをベースにしたリン酸結合剤を用いて、血管石灰化の進行低減またはさらには改善が立証された。しかし、コレステロールを拘束するそれらの能力から本質的に、これらの結合剤は、数ある有用なビタミンおよび栄養素の中でもビタミンＤを錯化し、したがってそれを枯渇させる。カルシウムをベースにしないリン酸結合剤である塩化ランタンも、臨床的に研究された。リン酸レベルに対する効果は、ポリマーをベースにしたリン酸結合剤の効果に類似していると思われる。酸化鉄も、リン酸を錯化するその能力ゆえに、クリニックで使用されている。最近の治療剤のすべては、管腔を横断する血清中への輸送に関して食事性リン酸を接近し難くするための、食事性リン酸の錯体化に基づく。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
前記の理由のため、ＧＩ管中でのリン酸吸収を低減するための、および高リン血症を予防または減弱するための新たな方法および医薬組成物が、相変わらず求められている。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本開示の一態様は、本明細書に開示の、リン酸基を有する小分子、またはリン酸基を有する小分子を含む任意の製剤を投与することによって、ヒト上皮細胞の膜を横断するリン酸輸送、およびそれゆえリン酸の胃腸内吸収を抑制する方法を提供する。
本開示の別の態様は、本明細書に開示の、リン酸基を有する小分子、またはリン酸基を有する小分子を含む任意の製剤を投与することによって、リン酸代謝異常またはリン酸輸送障害と関連した疾患の進行を予防する、安定化する、または逆転する方法を提供する。
本開示の別の態様は、本明細書に開示の、リン酸基を有する小分子、またはリン酸基を有する小分子を含む任意の製剤を投与することによって、血清中へのリン酸蓄積が起こり得る疾患を治療または予防する方法を提供する。
本開示の別の態様は、本明細書に開示の、リン酸基を有する小分子、またはリン酸基を有する小分子を含む任意の製剤を投与することによって、このような療法を必要とする疾患を治療するための薬学的介入の結果として発生する高リン血症を治療する、遅延する、または予防する方法を提供する。
【０００７】
本開示の別の態様は、化合物００１〜０２９および構造式Ｉ〜ＸＸＸＩＩによって表される、リン酸基を有する小分子に関する。これらの化合物は、ヒト上皮細胞の膜を横断するリン酸輸送を抑制することができ、それゆえリン酸の胃腸内吸収を抑制することができる。これらの化合物は、それらの根本的原因または効果が、正常な血清中リン酸レベルの維持についての異常に関連する疾患を治療または予防するのに使用することができる。
本開示の別の態様は、リン酸基を有する本明細書に記載の小分子の投与に関する。これらの小分子は、単独で、または許容される医薬製剤と組み合わせて、経口または注射によって投与することができる。
本明細書に記載の組成物および方法に関して、成分、その組成範囲、置換基、条件、およびステップなどの好ましい特徴は、本明細書中で提供される種々の実施例から選択することができる。
さらなる態様および利点は、当業者にとって、以下の詳細な説明を図面と結び付けて概観することから明らかであろう。方法、化合物、および組成物は、種々の形態の実施形態に影響され易いが、以後の説明は、特定の実施形態を含むが、その開示は、例示であって、本発明を本明細書に記載の特定の実施形態に限定することを意図しないことを理解されたい。
本明細書中で使用される語法および術語は、説明の目的のため存在すると理解すべきであり、限定するものと見なすべきでない。本明細書中で用語「包含する」、「有する」および「含む」、ならびにその変形体の使用は、後に挙げる条項、およびその等価物、ならびに任意選択のさらなる条項およびその等価物を包含することを意味する。
【図面の簡単な説明】
【０００８】
【図１】Ｃａｃｏ−２ヒト腸上皮細胞における、リン酸取込み抑制に対する化合物００１〜０２９の効果を示す図である。
【図２】Ｃａｃｏ−２ヒト腸上皮細胞における、リン酸取込み抑制に対する化合物００２、００４、０１２および０２８の量的効果を示す図である。
【図３】化合物００２、００４、０１２および０２８の存在下でのＣａｃｏ−２ヒト腸上皮細胞の生存能を、ＡＬＡＭＡＲ ＢＬＵＥ染色液の還元を利用して示す図である。
【図４】化合物００２、００４、０１２および０２８の存在下でのＣａｃｏ−２ヒト腸上皮細胞の生存能を、トリパンブルー色素排除法を利用して示す図である。
【図５】雄性Ｓｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙラットに対する化合物００２、００４、０１２、０２１、０２２、０２３および０２８の量的効果を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【０００９】
いずれか特定の理論によって束縛されることを意図しないが、リン酸吸収を制限するより有効な取組み（食事性リン酸摂取を制限すること、またはリン酸捕捉性マトリックスを使用することに代わる）は、腸管内リン酸産生の原因である腸管内アルカリホスファターゼ活性を直接的に遮断することに、および血清中へのリン酸送達の原因である管腔横断輸送系（ＮａＰｉ−２ｂ）を抑制することによる。小腸内でのリン酸吸収は、リン酸の輸送をナトリウムの輸送にエネルギー依存性機構で連結する担体介在性でよい。一例が、ＮａＰｉ−２ｂＮａ／リン酸共輸送体の場合である。しかし、他の機構も、輸送にとって重要である可能性がある。リン酸輸送を抑制する小分子の発見は、栄養供給源からの腸管内リン酸吸収を制限するのに治療的に利用できる。この取組みは、例えば、腎疾患患者における高リン血症を治療または予防するのに有用である可能性がある。
本発明の実施形態および特許請求を説明する上で、そうではないことを明確に述べない限り、以下の術語が、以下に示す定義により使用される。
本明細書中で使用する場合、用語「抑制する」は、全部または部分的に低減することまたは予防することを意味する。
【００１０】
本明細書中で使用する場合、用語「予防する」は、予防的利益を達成することを意味する。例えば、リン酸基を有する小分子化合物は、高リン血症を発症する危険にさらされた患者に、またはたとえ高リン血症の診断がなされていなくとも高リン血症の病態生理学的症状の１種または複数を訴える患者に投与される。特に、リン酸基を有する小分子化合物は、高リン血症と診断されていない慢性腎臓病患者に投与することができる。
本明細書中で使用する場合、「薬学的に許容される製剤」は、米国食品医薬品庁、またはヒトへの投与に関して外国の対応する規制当局によって承認された、または承認され得る分子本体または組成物を指す。
本明細書中で使用する場合、「有効量」は、治療されている状態の有益な治療成績をもたらす量である。例えば、リン酸基を有する有効量の小分子は、高リン血症を有する対象の血清中リンレベルを低下すること、高リン血症を有するまたは有する危険にさらされている対象の血清中リンレベルが上昇するのを予防すること、あるいは、例えば糞便性リンの増加によって、または低下したもしくは安定した血清中リンレベルによって測定できる、食物からのリン吸収を低減することなどの１種または複数の効果を示す。
本明細書中で使用する場合、「有益な治療成績」には、対象が基礎をなす障害でなお苦しんでいる可能性があることに拘泥せず、治療されている基礎をなす障害の改善または根治が含まれる。高リン血症を有する対象において、有益な治療成績には、基礎をなす高リン血症の改善または根治が含まれる。例えば、高リン血症を有する対象は、血漿中リン酸レベルの低下、または高められた血清中リン酸レベルの原因または効果と関連する症状の開始の遅延を含む症状の重症度の低下を経験する。このような症状には、軟部組織の異所性石灰化、心血管の石灰化、心血管事象、腎劣化、カルシフィラキシス、副甲状腺機能亢進症、尿毒症性骨疾患、腎性骨疾患、骨粗鬆症、および高リン血症が包含される。
【００１１】
本明細書中で使用する場合、「治療を必要とする対象」には、リン酸輸送抑制剤を用いて治療して有益な治療成績を達成できる疾患および／または状態を現に有する、またはそれらを発症する可能性のある対象が含まれる。このような対象の考えられる下位集合は、リン酸輸送抑制剤で治療して有益な治療成績を達成できる疾患または状態と診断された対象である。
本明細書中で使用する場合、「薬学的に許容される担体」には、溶媒、分散媒体、被覆剤、抗細菌および抗真菌剤、等張剤、ならびに吸収遅延剤などのいずれかおよびすべてが含まれる。このような媒体および薬剤の薬学的に活性な物質のための使用は、当技術分野で周知である。任意の通常の媒体または薬剤が治療用組成物と不適合である場合を除き、治療用組成物中でのその使用が考えられる。補足的な活性成分も、組成物中に組み込むことができる。
本明細書中で使用する場合、「賦形剤」は、本明細書に記載の化合物などの医薬を投与するための個々の投与方式および剤形に応じて、担体、溶媒、安定剤、補助剤、希釈剤などを指す。
本明細書中で使用する場合、「高リン血症」は、その血清中リンが医学的に容認される正常範囲を超える濃度で存在する対象における状態を記述するのに広く使用される。
【００１２】
本明細書中で使用する場合、用語「アルキル」は、直鎖および分枝の飽和炭化水素基を指し、その非限定的例には、メチル、エチル、ならびに直鎖および分枝のプロピルおよびブチル基が含まれる。アルキル基は、例えば、１〜２０個の炭素原子、１〜１０個の炭素原子、および／または１〜６個の炭素原子を有することができる。
本明細書中で使用する場合、用語「ジアルキル」は、同一原子に結合されたアルキル基を指す、例えば、Ｎ−ジアルキルは、同一の窒素原子にそれぞれ結合された２つのアルキル基を指す。
本明細書中で使用する場合、用語「アリール」は、単環式または多環式芳香族基、好ましくは単環式または二環式芳香族基を指す。そうでないことを指摘しない限り、アリール基は、置換されていないか、あるいは、例えば、ハロ、アルキル、アルケニル、−ＯＣＦ3、−ＮＯ2、−ＣＮ、−ＮＣ、−ＯＨ、アルコキシ、アミノ、−ＣＯ2Ｈ、−ＣＯ2−アルキル、アリール、およびヘテロアリール基から独立に選択される１つまたは複数の、とりわけ１〜４つの基で置換されていてもよい。典型的なアリール基には、限定はされないが、フェニル、ナフチル、テトラヒドロナフチル、クロロフェニル、メチルフェニル、メトキシフェニル、トリフルオロメチルフェニル、ニトロフェニル、２，４−メトキシクロロフェニルなどが含まれる。
【００１３】
本明細書中で使用する場合、用語「ヘテロアリール」は、１つまたは２つの芳香族環を含み、芳香族環中に少なくとも１つの窒素、酸素、または硫黄原子を含む、単環式または二環式環系を指す。そうでないことを指摘しない限り、ヘテロアリール基は、置換されていないか、あるいは、例えば、ハロ、アルキル、アルケニル、−ＯＣＦ3、−ＮＯ2、−ＣＮ、−ＮＣ、−ＯＨ、アルコキシ、アミノ、−ＣＯ2Ｈ、−ＣＯ2−アルキル、アリール、およびヘテロアリールから選択される１つまたは複数の、とりわけ１〜４つの置換基で置換されていてもよい。ヘテロアリール基の例には、限定はされないが、チエニル、フリル、ピリジル、オキサゾリル、キノリル、チオフェニル、イソキノリル、インドリル、トリアジニル、トリアゾリル、イソチアゾリル、イソキサゾリル、イミダゾリル、ベンゾチアゾリル、ピラジニル、ピリミジニル、チアゾリル、およびチアジアゾリルが含まれる。
本明細書中で使用する場合、用語「ベンジル」は、メチレンに結合された芳香族基を指す。そうでないことを指摘しない限り、ベンジル基は、置換されていないか、あるいは、例えば、ハロ、アルキル、アルケニル、−ＯＣＦ3、−ＮＯ2、−ＣＮ、−ＮＣ、−ＯＨ、アルコキシ、アミノ、−ＣＯ2Ｈ、−ＣＯ2−アルキル、アリール、芳香族基、およびヘテロアリール基から選択される１つまたは複数の置換基で置換されていてもよい。ベンジル基の一例が−ＣＨ2−Ｃ6Ｈ5である。
本明細書中で使用する場合、用語「メチレン」は、２つの水素原子に結合されている炭素を指す。
本明細書中で使用する場合、用語「ハロゲン」は、周期表のＶＩＩＡ族のハロゲン、例えば、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒおよびＩを指す。
本明細書中で使用する場合、下表１に示す省略形は、文脈中でそうでないことが明白に示されない限り、対応する表１に示す化学名を意味する。
【００１４】
【表１】
（方法）
考えられる最初の方法は、ヒト上皮細胞の膜を横断するリン酸輸送、したがってリン酸の胃腸内吸収を抑制する方法である。該方法は、リン酸輸送の抑制を必要とするヒト対象に、リン酸基を有する小分子を有益な治療成績を達成するのに有効な量で投与するステップを含む。好ましくは、リン酸基を有する小分子は、薬学的に許容される製剤中に存在する。
【００１５】
考えられる別の方法は、ヒト上皮細胞の膜を横断するリン酸輸送、したがってリン酸の胃腸内吸収を抑制する方法である。該方法は、リン酸輸送の抑制を必要とするヒト対象に、リン酸基を有する小分子を有益な治療成績を達成するのに有効な量で含む薬学的に許容される製剤を投与するステップを含む。
【００１６】
考えられる別の方法は、限定はされないが、副甲状腺機能亢進症、代謝性骨疾患、尿毒症性骨疾患、腎性骨疾患、軟部組織の石灰化、心血管の石灰化、心血管事象、カルシフィラキシス、および骨粗鬆症などの、リン酸代謝異常またはリン酸輸送障害と関連する疾患の進行を予防する、安定化する、または逆転する方法である。該方法は、リン酸代謝異常またはリン酸輸送障害と関連する疾患を有するヒト対象に、本明細書に開示の、リン酸基を有する小分子、またはリン酸基を有する小分子を含む任意の製剤を、リン酸代謝またはリン酸輸送障害と関連する疾患の進行を予防、安定化または逆転するのに有効な量で投与するステップを含む。
考えられる別の方法は、血清中へのリン酸蓄積が起こり得る疾患を治療または予防する方法である。このような疾患には、限定はされないが、高リン血症、慢性腎臓病、二次性副甲状腺機能亢進症、副甲状腺機能亢進症、および副甲状腺機能低下症が含まれる。該方法は、血清中リン酸の低減または血清中リン酸の維持を必要とするヒト対象に、本明細書に開示の、リン酸基を有する小分子、またはリン酸基を有する小分子を含む任意の製剤を、血清中リン酸レベルを低減または維持するのに有効な量で投与するステップを含む。
【００１７】
考えられる別の方法は、そのような療法を必要とする二次性副甲状腺機能亢進症などの疾患を治療するためのビタミンＤをベースにした療法などの薬学的介入の結果として発生する高リン血症を治療する、遅延する、または予防する方法である。該方法は、そのような介入を必要とする疾患を治療するための薬学的介入を受け入れているヒト対象に、本明細書に開示の、リン酸基を有する小分子、またはリン酸基を有する小分子を含む任意の製剤を、高リン血症を治療、遅延、または予防するのに有効な量で投与するステップを含む。
本明細書に開示のいずれかの方法に関して、リン酸基を有する小分子は、単独で投与することができ、あるいは別法として、リン酸基を有する１種または複数のさらなる小分子と組み合わせて投与することができる。
【００１８】
（リン酸基を有する小分子化合物）
本発明のさらに別の態様は、リン酸基を有する小分子に関する。リン酸基を有する小分子の例には、限定はされないが、表２に記載の化合物００１〜０２９が含まれる。
【００１９】
【表２】
【００２０】
一実施形態において、リン酸基を有する小分子は、構造式Ｉ〜ＶＩＩ：
【００２１】
【化１】
［式中、Ｘは、Ｏ、Ｓ、ＮＨまたはＮ−アルキルであり；Ｒ1は、１つまたは複数の位置で、ハロゲン、ＯＨ、Ｏ−アルキル、Ｎ−ジアルキルまたはＮＨＣＯ−アルキルであり；Ｒ2は、Ｈ、アルキルまたは置換ベンジルである］から選択される。
別の実施形態において、リン酸基を有する小分子は、構造式ＶＩＩＩ〜ＸＩ：
【００２２】
【化２】
［式中、Ｒ3は、１つまたは複数の位置で、ハロゲン、アルキル、置換ベンジル、ＯＨ、Ｏ−アルキル、Ｎ−ジアルキル、またはＮＨＣＯ−アルキルである。Ｎ−原子の位置は変更できる。例えば、Ｎ−原子は、化合物ＩＸではリン酸置換基をもっている芳香族環の一部であるが、化合物ＸＩではリン酸置換基をもっている芳香族環の一部ではない］から選択される。
別の実施形態において、リン酸基を有する小分子は、構造式ＸＩＩ〜ＸＩＩＩ：
【００２３】
【化３】
［式中、Ｒ4は、Ｈ、ハロゲン、Ｏ−アルキル、Ｓ−アルキル、Ｎ−ジアルキル、またはＮＨＣＯ−アルキルであり；ｎは０、１または２である］から選択される。
別の実施形態において、リン酸基を有する小分子は、構造式ＸＩＶ：
【００２４】
【化４】
［式中、Ｒ1は、ハロゲン、ＯＨ、Ｏ−アルキル、Ｎ−ジアルキル、またはＮＨＣＯ−アルキルであり；Ｒ5は、アルキル、アリール、または置換アリールであり；ｍは１〜６個の炭素原子である］から選択される。
別の実施形態において、リン酸基を有する小分子は、構造式ＸＶ：
【００２５】
【化５】
［式中、Ｒ6は、アルキル、ベンジル、または芳香族置換ベンジルである］から選択される。
別の実施形態において、リン酸基を有する小分子は、構造式ＸＶＩ：
【００２６】
【化６】
［式中、Ｒ7は、Ｈ、アルキル、ベンジル、または芳香族置換ベンジルである］から選択される。
別の実施形態において、リン酸基を有する小分子は、構造式ＸＶＩＩ〜ＸＶＩＩＩ：
【００２７】
【化７】
［式中、Ｒ8は、Ｈ、アルキル、アリール、ベンジル、または芳香族置換ベンジルであり；ｍは１個またはそれ以上の、好ましくは１〜６個の炭素原子である］から選択される。
別の実施形態において、リン酸基を有する小分子は、構造式ＸＩＸ〜ＸＸＩ：
【００２８】
【化８】
［式中、Ｙは、ＯまたはＳであり；Ｒ1は、ＯＨ、Ｏ−アルキル、ハロゲン、Ｎ−ジアルキル、またはＮＨＣＯ−アルキルであり；Ｒ9は、Ｈまたはアルキルであり；ｎは０、１または２である］から選択される。
別の実施形態において、リン酸基を有する小分子は、構造式ＸＸＩＩ：
【００２９】
【化９】
［式中、Ｒ10は、アルキル、Ｏ−アルキル、Ｓ−アルキル、アリール、ＮＲ112、またはＮＣＯＲ11であり；Ｒ11は、アルキルまたはアリールであり；Ｒ12はハロゲンである］から選択される。
別の実施形態において、リン酸基を有する小分子は、構造式ＸＸＩＩＩ：
【００３０】
【化１０】
［式中、各Ｚは、独立に、Ｏ、Ｓ、Ｎ、またはＣＨ2であり；ｎは０、１または２である］から選択される。
別の実施形態において、リン酸基を有する小分子は、構造式ＸＸＩＶ：
【００３１】
【化１１】
［式中、Ｒ13は、ハロゲン、ＯＲ14、ＮＲ152、ＰＯ3Ｈ2、ＳＯ3Ｈ、ＣＯＯＨ、またはＮＨ2であり；Ｒ14は、メチル、エチル、イソプロピル、ｔｅｒｔ−ブチル、アリル、または置換ベンジルもしくは非置換ベンジルであり；Ｒ15は、メチル、エチル、イソプロピル、アリル、ベンジル、置換ベンジル、または非置換ベンジルであり；ｍは１〜６個の炭素原子である］から選択される。
別の実施形態において、リン酸基を有する小分子は、構造式ＸＸＶ：
【００３２】
【化１２】
［式中、Ａは
【００３３】
【化１３】
【００３４】
であり；Ｘは、Ｏ、Ｓ、ＮＨ、またはＮ−アルキルであり；Ｒ16は、ＳＯ3Ｈ、ＣＯＯＨ、またはＮＨ2である］から選択される。
別の実施形態において、リン酸基を有する小分子は、構造式ＸＸＶＩ〜ＸＸＶＩＩ：
【００３５】
【化１４】
［式中、Ｒ17は、メチル、エチル、イソプロピル、ｔｅｒｔ−ブチル、シクロヘキシル、アリール、またはヘテロアリール、好ましくはベンゼン、ピリジル、またはベンジルであり；Ｒ18は、１つまたは複数の位置で、メチル、エチル、イソプロピル、ｔｅｒｔ−ブチル、ハロゲン、ＯＨ、Ｏ−アルキル、Ｎ−ジアルキル、またはＮＨＣＯ−アルキルである］から選択される。
別の実施形態において、リン酸基を有する小分子は、構造式ＸＸＶＩＩＩ：
【００３６】
【化１５】
［式中、Ｒ19は、ハロゲン、ＮＲ112、ＮＨＣＯＲ11、ＳＲ11、またはヘテロアリールであり；Ｒ20は、ハロゲン、メチル、エチル、イソプロピル、ｔｅｒｔ−ブチル、Ｎ（ＣＨ3）2、Ｎ（Ｅｔ）2、Ｎ（ｉＰｒ）2、ＮＨＣＯＣＨ3、ＮＨＣＯＣＦ3、またはＮＨＣＯＰｈであり；Ｒ11は、アルキルまたはアリールであり；ｎは０、１または２である］から選択される。
別の実施形態において、リン酸基を有する小分子は、構造式ＸＸＩＸ〜ＸＸＸＩ：
【００３７】
【化１６】
［式中、Ｒ10は、アルキル、Ｏ−アルキル、Ｓ−アルキル、アリール、ＮＲ112、またはＮＣＯＲ11であり；Ｒ11は、アルキルまたはアリールである］から選択される。
別の実施形態において、リン酸基を有する小分子は、構造式ＸＸＸＩＩ：
【００３８】
【化１７】
［式中、Ｒ21は、アルキル、ハロゲン化アルキル、Ｏ−アルキル、置換アリール、またはヘテロアリールであり；Ｒ5は、アルキル、アリール、または置換アリールであり；ｎは０、１または２である］から選択される。
化合物００１〜０２９および構造式Ｉ〜ＸＸＸＩＩで表される化合物を含む、リン酸基を有する小分子は、ヒト上皮細胞の膜を横断するリン酸輸送、したがってリン酸の胃腸内吸収を抑制するのに使用することができる。リン酸基を有するこれらの小分子は、また、それらの根本的原因または効果が、本明細書に記載のような正常な血清中リン酸レベルの維持についての異常に関連する疾患を治療または予防するのに使用することができる。
【００３９】
（リン酸基を有する小分子の製剤および投与）
リン酸基を有する小分子は、単独または組み合わせて、限定はされないが、エレキシル剤、液剤、ゲル剤、シロップ剤、スラリー剤などの食事性製剤としての、あるいはカプセル剤、錠剤または丸剤の形態での経口投与に向けて調製することができる。化合物は、単独または組み合わせて、皮下、静脈内または腹膜内のいずれかでの注射に適した製剤の状態で注射することができる。
リン酸基を有する小分子は、リン酸基を有する１種または複数の小分子、および薬学的に許容される担体、希釈剤、または賦形剤を含む医薬製剤の状態で投与することができる。
リン酸基を有する小分子は、単独または組み合わせて、そのような治療的または予防的介入を必要とする対象における消化管からのリン酸の取込みを低減することおよび／または尿中へのリン酸排泄の速度を増大させることによって、ヒト対象におけるリン酸蓄積を低減または制限するための許容される医薬製剤の状態で投与することができる。
本発明の目的の場合、投与されるリン酸基を有する小分子、またはその医薬製剤の量または投与量は、ヒト対象において妥当な時間枠にわたって例えば治療的または予防的反応をもたらすのに十分でなければならない、投与量は、リン酸基を有する個々の小分子の有効性、およびヒト対象の状態、ならびに治療予定のヒト対象の体重によって決定される。
リン酸基を有する小分子、またはその医薬製剤の投与量は、また、リン酸基を有する個々の小分子またはその医薬製剤の投与に付随する可能性のある任意の有害副作用の存在、本質、および程度によって決定される。典型的には、応対医師は、年齢、体重、一般的健康状態、食事、性別、投与予定のリン酸基を有する小分子、投与経路、および治療されている状態の重症度などの、種々の因子を考慮して、それぞれ個々の患者を治療するために、リン酸基を有する小分子の投与量を決定する。本発明を限定することを意図しない例を挙げれば、リン酸基を有する小分子またはその医薬製剤の投与量は、約０．０００１〜約１ｇ／ｋｇ治療対象の体重／日、約０．０００１〜約０．００１ｇ／ｋｇ体重／日、または約０．０１ｍｇ〜約１ｇ／ｋｇ体重／日でよい。
【実施例】
【００４０】
以下の実施例は、例示のために提供され、本発明の範囲を限定することを意図しない。
（例１）Ｃａｃｏ−２ヒト腸上皮細胞におけるリン酸取込み抑制に対する化合物００１〜０２９の効果
Ｃａｃｏ−２細胞を、２０％ウシ胎児血清を含むＤＭＥＭ培地中で培養した。Ｃａｃｏ−２細胞のサブコンフルエントな単層から培地を除去した。生じた細胞を、ナトリウム不含緩衝液（１３７ｍＭ塩化コリン、５．４ｍＭ ＫＣｌ、２．８ｍＭ ＣａＣｌ2、１．２ｍＭ ＭｇＳＯ4、および１４ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、ｐＨ７．４）またはナトリウム含有緩衝液（１３７ｍＭ塩化ナトリウム、５．４ｍＭ ＫＣｌ ２．８ｍＭ ＣａＣｌ2、１．２ｍＭ ＭｇＳＯ4、および１４ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、ｐＨ７．４）のどちらかで洗浄した。洗浄した後、細胞に、１μＭの放射能標識化リン酸塩（Ｋ2Ｈ32ＰＯ4、１μＣｉ／ｍＬ）を含むナトリウム含有緩衝液またはナトリウム不含緩衝液、および１００μＭの化合物００１〜０２９を含む群から選択されたリン酸基を有する小分子を添加し、それらを３７℃で２０分間インキュベートした。取込み培地を除去すること、および細胞を１３７ｍＭの塩化コリンまたは塩化ナトリウムのどちらかを含む１４ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ７．４）の氷冷溶液で洗浄することによって、リン酸取込みを終結した。放射能標識化リン酸を抽出するために、細胞の単層を、Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１００の１％溶液を添加して可溶化した。放射能標識化リン酸のアリコートを、シンチレーション流体に添加し、液体シンチレーション計数で放射能を測定した、ナトリウムを含むまたは含まない２種の溶液を使用するアッセイ間の差異は、リン酸のナトリウム依存性輸送を表す。図１は、Ｃ−００３、０１４、０１６および０１８を除いて、リン酸基を有する小分子は、Ｃａｃｏ−２ヒト上皮細胞におけるリン酸の取込みを低減するか、あるいは完全に抑制したことを示す。
【００４１】
（例２）リン酸取込み抑制に対するリン酸基を有する小分子化合物の投与量の効果
Ｃ−００２、Ｃ−００４、Ｃ−０１２およびＣ−０２８を１〜１００μＭの濃度で使用して、例１の手順を繰り返した。結果は、リン酸基を有する小分子の濃度に対するリン酸取込み抑制のパーセントとして記録した。図２は、Ｃａｃｏ−２細胞におけるリン酸取込みのパーセント抑制が、限界濃度に到達するまで、リン酸基を有する小分子化合物の濃度と共に増大することを示す。
【００４２】
（例３）リン輸送アッセイにおけるリン酸基を有する小分化合物の毒性測定
リン輸送アッセイにおける化合物の毒性を排除するために、１００μＭのＣ−００２、Ｃ−００４、Ｃ−０１２、Ｃ−０２８、および細胞の存在下で、ＡＬＡＭＡＲ ＢＬＵＥ染色液を用いて染色を実施した。Ｃａｃｏ−２細胞を９６−ウェルのプレートに、試験当日に約１６，０００細胞／ウェル（例えば、１日間の増殖には８，０００細胞／ウェル、２日間の増殖には４，０００細胞／ウェル、３日間の増殖には２，０００細胞／ウェル）を与える濃度で播種した。試験当日に、古い培地を、最終濃度が１００μＭのリン酸基を有する小分子／ＤＭＳＯを含む、または対照ウェルでは１％のＤＭＳＯを含むウェル当たり８０μＬの新鮮な培地と交換した。試験は、二つ組みで実施した。ＡＬＡＭＡＲ ＢＬＵＥ染色液（ＢｉｏＳｏｕｒｃｅ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，Ｉｎｃ．社、カタログ番号ＤＡＬ １１００）を製造業者の説明書に従って１０％の最終濃度で各ウェルに添加した。次いで、細胞を３７℃でさらに１８または２４時間インキュベートし、生細胞によるＡＬＡＭＡＲ ＢＬＵＥ染色液の還元を分光光度法により５７０ｎｍおよび６００ｎｍで測定した。結果は、製造業者のマニュアル（ＴＲＥＫ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ Ｓｙｓｔｅｍｓ社、ＰＩ−ＤＩＡＬ １０２５／１１００Ｒｅｖ１．０）中の式を使用して還元のパーセントとして計算した。図３は、１８および２４時間後のＡＬＡＭＡＲ ＢＬＵＥ染色液の還元におけるパーセント差は実質的に変化せず、リン酸基を有する小分子はＣａｃｏ−２ヒト上皮細胞に対して非毒性であったことを示す。
【００４３】
トリパンブルー色素排除法を利用して、細胞生存能に対するＣ−００２、００４、０１２および０２８の効果を測定した。細胞を、ＡＬＡＭＡＲ ＢＬＵＥ染色液試験と同様の方式で播種した（上記参照）。試験当日に、培地を除去し、細胞をＰＢＳで洗浄し、ナトリウム不含緩衝液（１３７ｍＭ塩化コリン、５．４ｍＭ ＫＣｌ、２．８ｍＭ ＣａＣｌ2、１．２ｍＭ ＭｇＳＯ4、および１４ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、ｐＨ７．４）、またはナトリウム含有緩衝液（１３７ｍＭ塩化ナトリウム、５．４ｍＭ ＫＣｌ ２．８ｍＭ ＣａＣｌ2、１．２ｍＭ ＭｇＳＯ4、および１４ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、ｐＨ７．４）中、１００μＭ（最終濃度）のＣ−００２、Ｃ−００４、Ｃ−０１２およびＣ−０２８と共にインキュベートした。試験は二つ組みで実施した。１時間インキュベートした後、細胞をトリプリン／ＥＤＴＡで引き離し、エッペンドルフチューブに移送し、それらの生存能を、０．４％トリパンブルー染色液（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社、カタログ番号１５２５０−０６１）を１：４希釈で使用し、共焦点顕微鏡法を用いて計数した。図４は、リン酸基を揺する小分子が、１時間インキュベートした後に、Ｃａｃｏ−２ヒト上皮細胞の生存能に対して有意な効果を有さなかったことを示す。
【００４４】
（例４）雄性Ｓｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙラットに対するリン酸基を有する小分子の最大耐容投与量（ＭＴＤ）の決定
雄性Ｓｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙラットに、Ｃ−００２、Ｃ−００４、Ｃ−０１２、Ｃ−０２１、Ｃ−０２２、Ｃ−０２３およびＣ−０２８を経口でｋｇ当たり０．５、５および１０ｍｇの投与量で１２日間毎日与えた。死亡数および動物の体重データを記録した。死亡は報告されず、体重増加に対する有意な効果は観察されなかった（図５参照）。これらの結果は、最大で１０ｍｇ／ｋｇまで投与された場合に、これらの化合物の毒性がないことまたは低いことを示唆する。
【００４５】
（例５）血清中リン酸の低減に対する構造式１〜ＸＸＸＩＩで表される化合物の有効性
血清中リン酸レベルの低減に対する構造式Ｉ〜ＸＸＸＩＩで表される化合物の有効性を、尿毒症性ラットで試験する。腎不全および血清中リン酸レベルの上昇を誘導するために、雄性Ｓｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙラットに、アデニン（５００ｍｇ／ｋｇ／日）を１２日間経口で毎日投与する。同一の胃管栄養液で、構造式Ｉ〜ＸＸＸＩＩで表される化合物を０．５〜１０ｍｇ／ｋｇの範囲の投与量で毎日経口で投与する。研究中、経口胃管栄養の直後に限られた時間で（例えば、３時間）２５ｇの高リン酸食を毎日提供する。１、６および１２日目に血液を採取する。１２日目に腸を採取する。血清中リン酸およびＦＧＦ−２３レベルを測定し、ＮａＰｉ−２ｂ転写物を腸から定量する。血清中リン酸レベルは、研究の過程中に低下すると予想される。低下した血清中リン酸は、血清中ＦＧＦ−２３の上昇および腸管内ＮａＰｉ−２ｂ転写の上昇をもたらすはずである。
【００４６】
（例６）化合物００２の調製（スキーム１）
スキーム１．
【００４７】
【化１８】
１００ｍＬの４口丸底フラスコに、２，３，４，５，６−ペンタクロロピリジン（１０ｇ、０．０３９７モル）および亜リン酸トリエチル（６．８ｇ、０．０４０９モル）を窒素下で仕込んだ。反応混合物を還流するまで加熱して２４時間維持し、次いで２５〜３０℃まで放冷した。反応混合物に水（５０ｍＬ）を添加し、ＥｔＯＡｃ（２×５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物を、ＭｇＳＯ4上で乾燥し、真空下で濃縮して粗材料を得た。粗材料を、溶離液としてＤＣＭ（９００ｍＬ）を用いるカラムクロマトグラフィー（シリカゲル１００〜２００）で精製した。純粋なカラム画分を合わせ、真空下で蒸発させてクリーム色の固体（３．８ｇ、収率２７％）を得た。クリーム色の固体について1Ｈ ＮＭＲ分析を実施すると、スペクトルは化合物Ａと矛盾しなかった。
１００ｍＬの４口丸底フラスコに、化合物Ａ（１．５ｇ、０．００４２モル）および６Ｍ塩酸（５０ｍＬ）を仕込んだ。反応混合物を還流するまで加熱して４時間維持し、２５〜３０℃まで放冷し、真空下で濃縮した。反応混合物に水（３０ｍＬ）を添加し、溶液を真空下で濃縮した。次いで、反応混合物にアセトン（５０ｍＬ）を添加し、溶液を真空下で濃縮した。反応混合物にジクロロメタン（３０ｍＬ）を添加し、溶液を２５〜３０℃で１５分間撹拌した。化合物を析出させ、濾過し、スラリーをｎ−ヘキサン（３０ｍＬ）で洗浄して灰白色固体としてＣ−００２（１．２ｇ、収率９５％）を得た。Ｃ−００２を1Ｈ ＮＭＲ、13Ｃ ＮＭＲおよび31Ｐ ＮＭＲで特徴付けた。
1H NMR (DMSO-d6): δ 5.00-7.00 ppm (bs,2H). 13C NMR (DMSO-d6): δ 146.87, 146.76, 146.17, 144.85, 131.28, 131.26. 31P NMR (DMSO-d6): δ 0.65(s).
Ｃ−００２の純度は、ＨＰＬＣにより９８．３％と測定された。ＭＳ（ｍ／ｚ）：Ｃ5Ｈ2Ｃｌ4ＮＯ3Ｐに対して計算値２９６．９；実測値（Ｍ−１）２９５．９。
【００４８】
（例７）化合物―００４の調製（スキーム２）
スキーム２．
【００４９】
【化１９】
２５０ｍＬの４口丸底フラスコに、窒素下でアセトフェノン（２５ｇ、０．２０８モル）を仕込んだ。フラスコに、三塩化リン（２２．４ｍＬ、０．２５６モル）および酢酸（６０ｇ、０．９９９モル）を２５〜３０℃で逐次的に添加し、２時間撹拌した。反応混合物を０〜５℃まで冷却し、乾燥塩酸ガスを反応混合物に０〜５℃で１．５時間吹き込んだ。反応混合物を室温まで放冷し、さらに１４時間撹拌した、析出した化合物を濾取し、スラリーをエーテル（１００ｍＬ）で洗浄した。化合物を、１００ｍＬ丸底フラスコに入れ、１９０℃まで加熱してその温度で１５分間維持した。次いで、化合物を６０℃まで冷却し、フラスコにクロロホルム（２０ｍＬ）を添加し、溶液を２５〜３０℃で１５分間撹拌した。析出した固体を濾過し、５０℃で乾燥して、灰白色固体としてＣ−００４（３ｇ、収率８％）を得た。Ｃ−００４を1Ｈ ＮＭＲ、13Ｃ ＮＭＲ、31Ｐ ＮＭＲ、およびＦＴ−ＩＲで特徴付けた。
1H NMR (CD3OD): δ 7.6 (m,2H), 7.35 (m,3H), 6.20 (s, 1H), 6.16 (s, 1H), 6.04 (s, 1H), 5.96 (s, 1H). 13C NMR (CD3OD): δ 145.16, 143.77, 139.00, 138.90, 129.29, 129.12, 129.06, 129.04, 128.70, 128.65. 31P NMR (CD3OD): δ 13.30, 13.10.
Ｃ−００４の純度は、ＨＰＬＣにより９８．４％と測定された。ＭＳ（ｍ／ｚ）：Ｃ8Ｈ9Ｏ3Ｐに対して計算値１８４．１３；実測値（Ｍ−１）１８３．１。
【００５０】
（例８）化合物−０１２の調製（スキーム３）
スキーム３．
【００５１】
【化２０】
【００５２】
パミドロン酸（ｐａｌｍｉｄｒｏｎｉｃ ａｃｉｄ）（４．７ｇ、０．０２１モル）を、水（１０ｍＬ）とトリエチルアミン（１２ｍＬ）とエタノール（４０ｍＬ）との混合物に溶解した。反応混合物に、試薬４−ニトロフェニルイソチオシアネート（３．９６ｇ、０．０２１９モル）を２５〜３０℃で添加した。反応混合物を１６時間撹拌し、還流するまで加熱して１時間維持した。混合物を５〜１０℃まで冷却した後、２０％塩酸（２０ｍＬ）を添加し、反応物を２５〜３０℃で１４時間撹拌した。生じた固体析出物を濾過し、水、エタノール、そしてアセトンで洗浄した。析出物を、熱風オーブン中、６０〜６５℃で４時間乾燥して化合物Ｂ（４．５ｇ、収率５０％）を得た。化合物Ｂを1Ｈ ＮＭＲで特徴付けた。
１００ｍＬの４口丸底フラスコに、化合物Ｂ（２．２５ｇ、０．００５４モル）、エタノール（３５ｍＬ）、および水（６ｍＬ）を窒素下で仕込んだ。反応混合物にトリエチルアミン（１．２ｍＬ）を添加し、２５〜３０℃で１０分間撹拌した。反応物にクロロアセトン（９０％溶液、０．７４ｇ、０．４５７ｍＬ、０．００５６モル）を２５〜３０℃で添加した。反応混合物を、還流するまで加熱して１時間維持し、次いで２５〜３０℃まで放冷した。反応混合物に塩酸（２０％、１．２ｍＬ）を２５〜３０℃で添加し、１時間撹拌した。反応混合物を１０〜１５℃まで冷却し、さらに１時間撹拌した。析出物を濾過し、スラリーをエタノール（１５ｍＬ）およびアセトン（２０ｍＬ）で洗浄し、湿り化合物を５０〜６０℃で２時間乾燥して、淡黄色固体としてＣ−０１２（１．１５ｇ、収率４７％）を得た。Ｃ−０１２を1Ｈ ＮＭＲで特徴付けた。
1H NMR (CD3OD): δ 8.4 (d,2H), 7.85 (d,2H), 6.8 (s, 1H), 4.65 (s, 2H), 2.6 (m, 2H), 2.45 (s, 3H).
Ｃ−０１２の純度は、ＨＰＬＣにより９７．７％と測定された。ＭＳ（ｍ／ｚ）：Ｃ13Ｈ18Ｎ3Ｏ9Ｐ2Ｓ+に対して計算値４５４．３１；実測値（Ｍ＋）４５４．２。
【００５３】
（例９）化合物―０２１の調製（スキーム４）
スキーム４．
【００５４】
【化２１】
フェノール（１５ｇ、１５９．５ミリモル）の撹拌された無水ＣＣｌ4（５０ｍＬ）溶液に、新たに蒸留したトリエチルアミン（１６．９４ｇ、２４ｍＬ、１６７．４８ミリモル）、続いて亜リン酸ジエチル（２３．１２９ｇ、１６７．４８ミリモル）をアルゴン雰囲気下で添加した。反応混合物を室温で２時間撹拌し、出発原料の消失をＴＬＣで追跡した。次いで、反応混合物に水を添加し、続いてＤＣＭで希釈した。ＤＣＭ層を、分離し、ブラインで乾燥し、無水Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥し、濾過し、真空で濃縮して無色のオイルを得た。このオイルをＤＣＭ（２０ｍＬ）に溶解し、シリカゲルカラム（２３０メッシュ、２７５ｇ）に負荷し、０〜５０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを用い、グラジエントで溶離した。画分をＴＬＣ／ＵＶで分析し、純粋な画分を合わせ、真空で濃縮乾固し、無色オイルとして純粋な化合物Ｃ（３０．４０ｇ、収率８９％）を得た。ＴＬＣを３０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンで実施し、化合物Ｃは、ＵＶおよびＰＭＡを用いてＲf０．４０の位置で可視化された。
【００５５】
ＤＩＰＡ（９．６７ｇ、９５．５３ミリモル）の撹拌された無水ＴＨＦ（２００ｍＬ）溶液に、ｎＢｕＬｉ（６．１２ｇ、９５．５３ミリモル）を−２０℃で添加し、反応物を−２０℃でさらに３０分間撹拌した。次いで、反応混合物に、化合物Ｃ（２０ｇ、８６．８８ミリモル）のＴＨＦ（５０ｍＬ）溶液を添加し、室温で２時間撹拌した。出発原料が消失したら（ＴＬＣで監視して）反応混合物に水、次いでＥｔＯＡｃを添加した。ＥｔＯＡｃ層を、分離し、ブラインで乾燥し、無水Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥し、濾過し、真空中で濃縮して、無色のオイルを得た。このオイルを、ＤＣＭ（２０ｍＬ）に溶解し、シリカゲルカラム（２３０メッシュ、２７５ｇ）に負荷し、０〜１００％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを用い、グラジエントで溶離した。カラム画分をＴＬＣ／ＵＶで分析した。純粋な画分を合わせ、真空で濃縮乾固し、無色オイルとして純粋な化合物Ｄ（１６．１２ｇ、収率７５％）を得た。ＴＬＣを３０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンで実施し、化合物Ｄは、ＵＶおよびＰＭＡを用いてＲf０．３０の位置で可視化された。
【００５６】
化合物Ｄ（５ｇ、９５．５３ミリモル）の撹拌された無水ＤＭＦ（２００ｍＬ）溶液に、Ｋ2ＣＯ3（６．０ｇ、４３．４４ミリモル）および１−ブロモ−１−クロロエタン（３．１１ｇ、２１．７２ミリモル）をアルゴン雰囲気下に室温で添加した。反応混合物を２４時間撹拌し、出発原料の消失をＴＬＣで監視した。次いで、反応混合物に水、続いてＥｔＯＡｃを添加した。ＥｔＯＡｃ層を、分離し、ブラインで乾燥し、無水Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥し、濾過し、真空で濃縮して無色のオイルを得た。このオイルをＤＣＭ（２０ｍＬ）に溶解し、シリカゲルカラム（２３０メッシュ、２７５ｇ）に負荷し、０〜１００％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを用い、グラジエントで溶離した。カラム画分をＴＬＣ／ＵＶで分析した。純粋な画分を合わせ、真空で濃縮乾固し、無色オイルとして純粋な化合物Ｅ（１６．１２ｇ、収率７５％）を得た。ＴＬＣを５０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンで実施し、化合物Ｅは、ＵＶおよびＰＭＡを用いてＲf０．２５の位置で可視化された。
化合物Ｅ（５ｇ、１６．１９ミリモル）の撹拌された無水ＤＣＭ（５０ｍＬ）溶液に、ＴＢＳ−Ｂｒ（１５．６９ｇ、９７．１８ミリモル）をアルゴン雰囲気下に室温で添加した。反応混合物を２時間撹拌し、出発原料の消失をＴＬＣで監視した。次いで、反応混合物に水、次いでアセトンを添加した。有機溶媒をロータリー蒸発で除去し、非水溶性の白色析出物を得た。固体の結晶性生成物を、濾過し、水で徹底的に洗浄し、高真空下で乾燥して、灰白色結晶性固体としてＣ−０２１（３．０ｇ、収率７５％）を得た。ＴＬＣを１００％ＥｔＯＡｃで実施し、Ｃ−０２１は、ＵＶおよびＰＭＡを用いてＲf０．１５の位置で可視化された。Ｃ−０２１を、1Ｈ ＮＭＲおよび31Ｐ ＮＭＲで特徴付けた。
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): 3.9 (dd, J=6.0, 5.7 Hz, 2H), 4.28 (dd, 5.4, 5.7 Hz, 2H), 7.0 (m, 1H), 7.10 (m, 1H), 7.45 (m, 1H), 7.65 (m, 1H). 31P NMR (300, DMSO-d6): 11.669 (s). MS (m/z): C8H10ClO5Pの計算値, 252.59; 実測値(M+ - OH), 235.1.
【００５７】
（例１０）化合物―０２２の調製（スキーム５）
スキーム５．
【００５８】
【化２２】
【００５９】
２−ブロモフェノール（２５ｇ、０．１４４モル）と炭酸カリウム（６０ｇ、０．４３３モル）とのＤＭＦ（１７５ｍＬ）懸濁液に、１，３−ジブロモプロパン（７．０ｍＬ、０．０６９モル）を窒素雰囲気下に室温で滴加した。反応混合物を室温で５時間撹拌した。反応を完結した後（ＴＬＣで監視して）、反応混合物を水（８２０ｍＬ）で希釈し、１５分間撹拌した。析出した白色固体を、濾過し、水で洗浄し、気流乾燥して化合物Ｆ（２５ｇ、収率８９％）を得た。
1H NMR (200 MHz, DMSO-d6): δ 2.21 (p, J = 6.4 Hz, 2H), 4.24 (t, J = 6.4 Hz, 4H), 6.87 (dt, J = 7.4, 1.4 Hz, 2H), 7.14 (dd, J = 8.0, 1.4 Hz, 2H), 7.32 (dt, J = 8.0, 1.4 Hz, 2H), 7.55 (dt, J = 7.8, 1.4 Hz, 2H).
【００６０】
化合物Ｆ（２３ｇ、５９．０ミリモル）のＤＭＳＯ（１６０ｍＬ）溶液に、ＤＩＰＥＡ（８３ｍＬ）、ｄｐｐｂ（４．０５ｇ、９．４ミリモル）、酢酸パラジウム（ＩＩ）（２．１ｇ、９．４ミリモル）および亜リン酸ジエチル（３８．２ｍＬ、２９５ミリモル）を窒素雰囲気下に室温で添加した。反応混合物を１００℃で一夜加熱した。次いで、反応混合物を、室温まで冷却し、２Ｎ ＨＣｌ（３００ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２×３００ｍＬ）で抽出した。有機層を、水（２５０ｍＬ）で洗浄し、ブライン（２００ｍＬ）で乾燥し、硫酸ナトリウム上で乾燥し、減圧下で蒸発させた。得られる粗体を、溶離液としてＭｅＯＨ／ＤＣＭを使用するカラムクロマトグラフィーで精製して化合物Ｇ（１１．９ｇ、収率４０％）を得た。
1H NMR (200 MHz, CDCl3): δ 1.24 (t, J = 7.4 Hz, 12H), 2.33 (p, J = 6.0 Hz, 2H), 3.96-4.17 (m, 8H), 4.34 (t, J = 6.0 Hz, 4H), 6.94-7.04 (m, 4H), 7.48 (t, J = 8.6 Hz, 2H), 7.80 (dd, J = 15.0, 7.6 Hz, 2H); 質量: 500.9 (M++1).
【００６１】
化合物Ｇ（１０ｇ、０．０２モル）のＤＣＭ（４０ｍＬ）溶液に、ＴＭＳ−Ｂｒ（１５．８ｍＬ、０．１２モル）を窒素雰囲気下で徐々に添加した。反応混合物を室温で４時間撹拌した。化合物Ｇが完全に消失した後（質量分析法で）、揮発物を減圧下で除去した、アセトン−水（５０ｍＬ、１：１）を添加し、反応混合物を室温で３０分間撹拌した。析出した固体を、濾過し、アセトンで洗浄し、ＤＭＦ−ＥｔＯＨ−ＥｔＯＡｃ（１：３：４）から再析出させて、Ｃ−０２２（６．０ｇ、収率７７％）を得た。痕跡量のＤＭＦおよびＥｔＯＨを除去するため、最後の析出は、ＤＭＳＯ−水（１：３）を使用して行った。
1H NMR (200 MHz, DMSO-d6): δ 2.16 (p, J = 6.0 Hz, 2H), 4.24 (t, J = 6.0 Hz, 4H), 6.94 (dt, J = 7.6, 3.2 Hz, 2H), 7.05 (t, J = 8.2 Hz, 2H), 7.43 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 7.63 (dd, J = 14.2, 7.4 Hz, 2H); 13C NMR (75 MHz, DMSO-d6): 28.3, 64.7, 112.3, 112.4, 119.6, 119.7, 120.5, 122.0, 133.1, 133.2, 133.3, 160.0; 質量: 388.9 (M++1).
Ｃ−０２２の純度は、ＨＰＬＣにより９９．５％と測定された。
【００６２】
（例１１）化合物―０２３の調製（スキーム６）
スキーム６．
【００６３】
【化２３】
ベンズアルデヒド（３．３４ｇ、３１．５０ミリモル）とビス−ジエチルホスホネート（９．０８ｇ、３１．５０ミリモル）の撹拌された無水ＤＣＭ（５０ｍＬ）溶液に、５０％ＮａＯＨ水をアルゴン雰囲気下に室温にて２時間で添加した。出発原料が消失した後（ＴＬＣで監視して）、反応混合物に水、続いてさらなるＤＣＭを添加した。ＤＣＭ層を、分離し、希ＨＣｌで洗浄し、水で洗浄し、ブラインで乾燥し、無水Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥し、濾過し、真空で濃縮して粗生成物を得た。粗生成物をＤＣＭ（１０ｍＬ）に溶解し、シリカゲルカラム（２３０メッシュ、２００ｇ）に負荷し、０〜７５％酢酸エチル／ヘキサンを用い、グラジエントで溶離した。カラム画分をＴＬＣ／ＵＶで分析し、純粋な画分を合わせ、真空で濃縮乾固して、無色オイルとして純粋な化合物Ｈ（６．４ｇ、収率８５％）を得た。ＴＬＣを４０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンで実施し、化合物Ｈは、ＵＶおよびＰＭＡを用いてＲf０．４５の位置で可視化された。
化合物Ｈ（３ｇ、１２．４８ミリモル）の撹拌された無水ＤＣＭ（５０ｍＬ）溶液に、ＴＭＳ−Ｂｒ（１１．４７ｇ、９４．９２ミリモル）をアルゴン雰囲気下に室温で添加した。反応混合物を２時間撹拌し、反応の進行をＴＬＣで監視した。次いで、反応混合物に水、続いてアセトンを添加した。有機溶媒を減圧下に除去すると、非水溶性の白色析出物が生じた。析出物を、濾過し、水で徹底的に洗浄し、高真空下で乾燥して、結晶性固体としてＣ−０２３（１．８３ｇ、収率８０％）を得た。ＴＬＣを１００％ＥｔＯＡｃで実施し、Ｃ−０２３は、ＵＶおよびＰＭＡを用いてＲf０．１５の位置で可視化された。Ｃ−０２３を1Ｈ ＮＭＲおよび31Ｐ ＮＭＲで特徴付けた。
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 6.5 (dd, J = 18.0, 16.2 Hz, 1H), 7.2 (dd, J = 17.7, 17.4 Hz, 1H), 7.4 (m, 3H), 7.6 (m, 2H), 9.6 (bs, 2H). 31P NMR (300 MHz, DMSO-d6): 14.707 (s). MS (m/z): C8H9O3Pの計算値, 184.13; 実測値(M+), 184.1.
【００６４】
（例１２）化合物―２８の調製（スキーム７）
スキーム７．
【００６５】
【化２４】
【００６６】
ヘプタフルオロ酪酸（１７ｇ、７９．４２ミリモル）の撹拌された無水ＴＨＦ（２００ｍＬ）溶液に、ＰｈＭｇＢｒ（１７．２８ｇ、９５．３０ミリモル）をアルゴン雰囲気下に−２０℃で添加した。反応物を−２０℃で１時間撹拌し、出発原料の消失をＴＬＣで監視した。反応混合物に飽和ＮＨ4Ｃｌ溶液を徐々に添加し、混合物を続いてＥｔ2Ｏで希釈した。Ｅｔ2Ｏ層を、分離し、希ＨＣｌで洗浄し、水で洗浄し、ブラインで乾燥し、無水Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥し、濾過し、真空で濃縮して、無色のオイルを得た。オイルをＤＣＭ（２０ｍＬ）に溶解し、シリカゲルカラム（２３０メッシュ、５００ｇ）に負荷し、０〜２０％酢酸エチル／ヘキサンを用い、グラジエントで溶離した。カラム画分をＴＬＣ／ＵＶで分析した。純粋な画分を合わせ、真空で濃縮乾固し、無色のオイルとして純粋な化合物Ｉ（５．４４ｇ、収率２５％）を得た。ＴＬＣを１５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンで実施し、化合物Ｉは、ＵＶおよびＰＭＡを用いてＲf０．７０の位置で可視化された。
【００６７】
化合物Ｉ（５．４４ｇ、１９．８４ミリモル）の撹拌された無水ＭｅＯＨ（５０ｍＬ）溶液に、ＮａＢＨ4（０．９ｇ、２３．８１ミリモル）をアルゴン雰囲気下に室温で添加した、反応混合物を１５分間撹拌し、出発原料の消失をＴＬＣで監視した。出発原料が消失した後、反応混合物に飽和ＨＮ4Ｃｌ溶液を添加し、続いてＥｔＯＡｃで希釈した。ＥｔＯＡｃ層を、分離し、ブラインで乾燥し、無水Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥し、濾過し、真空で濃縮して、無色のオイルを得た。このオイルをＤＣＭ（１０ｍＬ）に溶解し、シリカゲルカラム（２３０メッシュ、１００ｇ）に負荷し、０〜３０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを用い、グラジエントで溶離した。カラム画分をＴＬＣ／ＵＶで分析した。純粋な画分を合わせ、真空で濃縮乾固し、無色のオイルとして純粋な化合物Ｊ（４．６５ｇ、収率８５％）を得た。ＴＬＣを１５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンで実施し、化合物Ｊは、ＵＶおよびＰＭＡを用いてＲf０．４５の位置で可視化された。
【００６８】
化合物Ｊ（３ｇ、１０．８６ミリモル）の撹拌された無水ＴＨＦ（５０ｍＬ）溶液に、Ｅｔ3Ｎ（１．６４ｇ、１６．２９ミリモル）およびテトラゾール（０．９１ｇ、１０．０３ミリモル）、続いてジクロロフェニルホスホネートをアルゴン雰囲気下に室温で添加した。反応混合物を２時間撹拌し、出発原料の消失をＴＬＣで監視した。出発原料が消失した後、反応フラスコに水を添加し、３０分間撹拌し、反応混合物をＥｔＯＡｃで希釈した。ＥｔＯＡｃ層を、分離し、水で洗浄し、ブラインで乾燥し、無水Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥し、濾過し、真空で濃縮して、粗生成物を得た。粗生成物を、逆相カラムクロマトグラフィー（Ｃ１８メッシュ、５０ｇ）および０〜１００％アセトニトリル／水を用いて溶離されるグラジエントによって精製した。カラム画分を、７５％酢酸エチル／ヘキサンを使用するＴＬＣで分析し、生成物はＵＶおよびＰＭＡを用いてＲf０．１５の位置で可視された。純粋な画分を合わせ、真空で濃縮すると、非水溶性の結晶性固体が生じた。固体を濾過し、高真空で乾燥して、純粋な結晶性白色固体としてＣ−０２８（３．７ｇ、収率８２％）を得た。Ｃ−０２８を1Ｈ ＮＭＲおよび31Ｐ ＮＭＲで特徴付けた。
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): 7.2-7.6 (m, 10H), 6.0 (m, 1H), 5.4 (bs, 1H). 31P NMR (300 MHz, DMSO-d6): 15.99 (s). MS (m/z): C16H12F7O3Pの計算値, 416.23; 実測値415.1.
【００６９】
前記の説明は、単に理解を明瞭にするために提供され、本発明の範囲内の修正形態は当業者にとって明らかである可能性があるので、それらの説明から不必要な限定を推測すべきでない。
明細書を通して、組成物が成分または材料を含むと説明される場合、該組成物は、そうでないことを記載しない限り、列挙された成分または材料の任意の組合せから本質的になる、あるいは任意の組合せからなることもできることを企図する。
【００７０】
本明細書中で開示される方法、およびその個々のステップの実施は、手動で、および／または電子装置の助けを借りて実施することができる。方法を、特定の実施形態に関して説明してきたが、当業者は、該方法に付随する行為を実施する他の手段を使用できることを容易に認識するであろう。例えば、種々のステップの順序は、そうでないことを記載しない限り、該方法の範囲または精神から逸脱することなしに変更できる。加えて、個々のステップの一部を、組み合わせること、割愛すること、またはさらなるステップにさらに再分割することができる。
【００７１】
本明細書中で引用されるすべての特許、刊行物および参考文献は、参照により全体で本明細書に組み込まれる。本開示と組み込まれる特許、刊行物および参考文献との間に矛盾がある場合には、本開示が優先するものとする。
【図１Ａ】
【図１Ｂ】
【図２Ａ】
【図２Ｂ】
【図２Ｃ】
【図２Ｄ】
【技術分野】
【０００１】
２００９年１月２６日に出願の米国特許仮出願第６１／１４７３４８号の米国特許法第１１９条（ｅ）項による利益を請求する。
本開示は、一般に、リン酸輸送を抑制するのに使用できる方法および小分子に関する。とりわけ、本開示は、正常な血清中リン酸レベルの維持についての異常に関連する疾患を治療または予防するのに使用できる方法および小分子を対象とする。より詳細には、本開示は、高リン血症を治療または予防するのに使用できる方法および小分子を対象とする。
【背景技術】
【０００２】
リンおよび無機リン酸（Ｐｉ）は、細胞シグナル伝達、核酸合成、エネルギー代謝、膜機能、および骨ミネラル化を含む数多くの不可欠な生物学的過程に関与する。したがって、血清中Ｐｉレベルまたは相殺Ｐｉバランスの有意な変化は、かなりの生理学的意義を有し得る。血清中Ｐｉ濃度の急速な低下は、筋疾患、心機能不全、好中球機能異常、血小板機能不全、および赤血球膜脆弱を含むいくつかの病理の中で明らかにされることがある。慢性の血清中Ｐｉ欠乏は、骨軟化症およびくる病に繋がることのある骨ミネラル化についての障害を引き起こすことがある。対照的に、高められた血清中Ｐｉ濃度は、慢性腎不全患者における二次性副甲状腺機能亢進症の病因となる。高リン血症および結果としてのカルシウム−リン酸積（Ｃａ×Ｐ）の増加は、軟部組織および血管壁の石灰化をもたらし、より高い死亡リスクに関連する。
【０００３】
Ｐｉの血漿中レベルは、主として、（１）小腸内での、ビタミンＤによって直接的に刺激されるＰｉ吸収のコントロール、（２）骨再吸収の速度をコントロールする因子、および（３）副甲状腺ホルモン（ＰＴＨ）、および線維芽細胞増殖因子−２３（ＦＧＦ−２３）などのリン酸塩尿因子の影響下にある、腎臓中でのＰｉ排泄を介して安定化される。不適切な腎機能または副甲状腺機能低下症などの、リン酸の恒常性をコントロールするシグナル経路の障害は、高リン血症を引き起こすことが多い。慢性高リン血症は、副甲状腺機能亢進症、骨疾患、ならびに関節、肺、眼および脈管系における異所性石灰化によって現れることの多い、カルシウムおよびリン代謝の深刻な異常に繋がることがある。腎機能不全を示す患者の場合、血清中リンの正常範囲内での上昇は、腎不全の進行および心血管事象のリスク増大と関連している。逆に、リン酸滞留を低減すると、腎疾患の進行を減速することができる。したがって、高リン血症である腎不全患者、およびその血清中リン酸が正常範囲内であるか、ほんのわずかに上昇している慢性腎臓病（ＣＫＤ）患者の場合、リン酸の取込みおよび停留を低下させる治療的取組みが有益である。
慢性腎臓病が進行するにつれ、血清中リン酸レベルをコントロールすることがより困難になる。血液透析中の患者の６０％超が、５．５ｍｇ／ｄＬを超える血清中リン酸レベルを有すると報告された。正常な生理学的血清中リン濃度は、一般に、約２．５ｍｇ／ｄＬ〜約４．５ｍｇ／ｄＬであると考えられる（Ｂｌｏｃｋ ＧおよびＰｏｒｔ Ｆ，Ａｍ．Ｊ．Ｋｉｄｈｅｙ Ｄｉｓ．２０００年、３５巻、１２２６〜１２３７頁）。さらに、血清中リンレベルが６．５ｍｇ／ｄＬを超える血液透析患者は、血清中リンが２．４〜６．５ｍｇ／ｄＬの患者に比べて、２７％高い死亡リスクを有することが報告された。これらの知見に基づき、米国腎臓財団（Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｋｉｄｎｅｙ Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ）−腎臓病予後改善対策（Ｋｉｄｎｅｙ Ｄｉｓｅａｓｅ Ｏｕｔｃｏｍｅ Ｑｕａｌｉｔｙ Ｉｎｉｔｉａｔｉｖｅ）（Ｋ／ＤＯＱＩ）の慢性腎臓病における骨代謝および疾患に関する診療ガイドライン（Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｐｒａｃｔｉｃｅ Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ ｆｏｒ Ｂｏｎｅ Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ ａｎｄ Ｄｉｓｅａｓｅ ｉｎ Ｃｈｒｏｎｉｃ Ｋｉｄｎｅｙ Ｄｉｓｅａｓｅ）は、患者の生活の質および寿命を改善するために、血清中リンおよびＣａ×Ｐ積をコントロールするための厳しい方策を最近推奨している。
【０００４】
高リン血症を管理するための最近の治療的取組みは、食事性リン摂取を制限すること、およびリン酸捕捉性マトリックスを採用することを含み、その双方とも、大部分は不十分であり、耐容性が不足していることが多い。初期には、臨床的強調は、食事性リン摂取を制限することに向けられていた。食事性リンは、３つの主要供給源、食材中の本来的なリン含有量、保存のためのリン酸塩含有添加物、およびリン酸塩を含有する栄養補助食品に由来する。食事性リンは、主としてタンパク質に由来するので、リンの意味のある制限は、タンパク質の摂取を不可避的に制限する。結果として、透析患者は、栄養不良および死亡リスクの増大を経験する。
初期に使用されたリン酸捕捉性マトリックスは、アルミニウムおよびカルシウムの化合物である。リン酸捕捉のために利用されて来たカルシウム塩としては、炭酸カルシウム、酢酸カルシウム（ＰｈｏｓＬｏ（登録商標）酢酸カルシウム錠剤など）、クエン酸、アルギン酸、およびケト酸の塩が挙げられる。主たるリン酸錯体化物質としてカルシウムを使用することの利点は、副甲状腺ホルモンの分泌に対する抑制効果、低コスト、および良好な耐容性である。しかし、この部類の治療薬は、このような結合剤はＣａ×Ｐ指数を上昇させることがあるので、一般に高カルシウム血症をもたらし、高められたリンの出現に繋がる。アルミニウムおよびマグネシウム塩は、カルシウムに基づかないリン酸結合剤として利用できるが、これらの化合物は、いくつかの潜在的に深刻な副作用を有する。アルミニウムゲル剤を長期に使用すると、アルミニウムの蓄積、ならびに、脳障害、骨軟化症および筋疾患のような症状を伴うアルミニウム毒性に繋がることが多い。
初めは胆汁酸捕捉剤として開発されたポリマー樹脂も、Ｐｉ結合剤として研究され、あるいは使用されている。これらのポリマーをベースにしたリン酸結合剤を用いて、血管石灰化の進行低減またはさらには改善が立証された。しかし、コレステロールを拘束するそれらの能力から本質的に、これらの結合剤は、数ある有用なビタミンおよび栄養素の中でもビタミンＤを錯化し、したがってそれを枯渇させる。カルシウムをベースにしないリン酸結合剤である塩化ランタンも、臨床的に研究された。リン酸レベルに対する効果は、ポリマーをベースにしたリン酸結合剤の効果に類似していると思われる。酸化鉄も、リン酸を錯化するその能力ゆえに、クリニックで使用されている。最近の治療剤のすべては、管腔を横断する血清中への輸送に関して食事性リン酸を接近し難くするための、食事性リン酸の錯体化に基づく。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
前記の理由のため、ＧＩ管中でのリン酸吸収を低減するための、および高リン血症を予防または減弱するための新たな方法および医薬組成物が、相変わらず求められている。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本開示の一態様は、本明細書に開示の、リン酸基を有する小分子、またはリン酸基を有する小分子を含む任意の製剤を投与することによって、ヒト上皮細胞の膜を横断するリン酸輸送、およびそれゆえリン酸の胃腸内吸収を抑制する方法を提供する。
本開示の別の態様は、本明細書に開示の、リン酸基を有する小分子、またはリン酸基を有する小分子を含む任意の製剤を投与することによって、リン酸代謝異常またはリン酸輸送障害と関連した疾患の進行を予防する、安定化する、または逆転する方法を提供する。
本開示の別の態様は、本明細書に開示の、リン酸基を有する小分子、またはリン酸基を有する小分子を含む任意の製剤を投与することによって、血清中へのリン酸蓄積が起こり得る疾患を治療または予防する方法を提供する。
本開示の別の態様は、本明細書に開示の、リン酸基を有する小分子、またはリン酸基を有する小分子を含む任意の製剤を投与することによって、このような療法を必要とする疾患を治療するための薬学的介入の結果として発生する高リン血症を治療する、遅延する、または予防する方法を提供する。
【０００７】
本開示の別の態様は、化合物００１〜０２９および構造式Ｉ〜ＸＸＸＩＩによって表される、リン酸基を有する小分子に関する。これらの化合物は、ヒト上皮細胞の膜を横断するリン酸輸送を抑制することができ、それゆえリン酸の胃腸内吸収を抑制することができる。これらの化合物は、それらの根本的原因または効果が、正常な血清中リン酸レベルの維持についての異常に関連する疾患を治療または予防するのに使用することができる。
本開示の別の態様は、リン酸基を有する本明細書に記載の小分子の投与に関する。これらの小分子は、単独で、または許容される医薬製剤と組み合わせて、経口または注射によって投与することができる。
本明細書に記載の組成物および方法に関して、成分、その組成範囲、置換基、条件、およびステップなどの好ましい特徴は、本明細書中で提供される種々の実施例から選択することができる。
さらなる態様および利点は、当業者にとって、以下の詳細な説明を図面と結び付けて概観することから明らかであろう。方法、化合物、および組成物は、種々の形態の実施形態に影響され易いが、以後の説明は、特定の実施形態を含むが、その開示は、例示であって、本発明を本明細書に記載の特定の実施形態に限定することを意図しないことを理解されたい。
本明細書中で使用される語法および術語は、説明の目的のため存在すると理解すべきであり、限定するものと見なすべきでない。本明細書中で用語「包含する」、「有する」および「含む」、ならびにその変形体の使用は、後に挙げる条項、およびその等価物、ならびに任意選択のさらなる条項およびその等価物を包含することを意味する。
【図面の簡単な説明】
【０００８】
【図１】Ｃａｃｏ−２ヒト腸上皮細胞における、リン酸取込み抑制に対する化合物００１〜０２９の効果を示す図である。
【図２】Ｃａｃｏ−２ヒト腸上皮細胞における、リン酸取込み抑制に対する化合物００２、００４、０１２および０２８の量的効果を示す図である。
【図３】化合物００２、００４、０１２および０２８の存在下でのＣａｃｏ−２ヒト腸上皮細胞の生存能を、ＡＬＡＭＡＲ ＢＬＵＥ染色液の還元を利用して示す図である。
【図４】化合物００２、００４、０１２および０２８の存在下でのＣａｃｏ−２ヒト腸上皮細胞の生存能を、トリパンブルー色素排除法を利用して示す図である。
【図５】雄性Ｓｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙラットに対する化合物００２、００４、０１２、０２１、０２２、０２３および０２８の量的効果を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【０００９】
いずれか特定の理論によって束縛されることを意図しないが、リン酸吸収を制限するより有効な取組み（食事性リン酸摂取を制限すること、またはリン酸捕捉性マトリックスを使用することに代わる）は、腸管内リン酸産生の原因である腸管内アルカリホスファターゼ活性を直接的に遮断することに、および血清中へのリン酸送達の原因である管腔横断輸送系（ＮａＰｉ−２ｂ）を抑制することによる。小腸内でのリン酸吸収は、リン酸の輸送をナトリウムの輸送にエネルギー依存性機構で連結する担体介在性でよい。一例が、ＮａＰｉ−２ｂＮａ／リン酸共輸送体の場合である。しかし、他の機構も、輸送にとって重要である可能性がある。リン酸輸送を抑制する小分子の発見は、栄養供給源からの腸管内リン酸吸収を制限するのに治療的に利用できる。この取組みは、例えば、腎疾患患者における高リン血症を治療または予防するのに有用である可能性がある。
本発明の実施形態および特許請求を説明する上で、そうではないことを明確に述べない限り、以下の術語が、以下に示す定義により使用される。
本明細書中で使用する場合、用語「抑制する」は、全部または部分的に低減することまたは予防することを意味する。
【００１０】
本明細書中で使用する場合、用語「予防する」は、予防的利益を達成することを意味する。例えば、リン酸基を有する小分子化合物は、高リン血症を発症する危険にさらされた患者に、またはたとえ高リン血症の診断がなされていなくとも高リン血症の病態生理学的症状の１種または複数を訴える患者に投与される。特に、リン酸基を有する小分子化合物は、高リン血症と診断されていない慢性腎臓病患者に投与することができる。
本明細書中で使用する場合、「薬学的に許容される製剤」は、米国食品医薬品庁、またはヒトへの投与に関して外国の対応する規制当局によって承認された、または承認され得る分子本体または組成物を指す。
本明細書中で使用する場合、「有効量」は、治療されている状態の有益な治療成績をもたらす量である。例えば、リン酸基を有する有効量の小分子は、高リン血症を有する対象の血清中リンレベルを低下すること、高リン血症を有するまたは有する危険にさらされている対象の血清中リンレベルが上昇するのを予防すること、あるいは、例えば糞便性リンの増加によって、または低下したもしくは安定した血清中リンレベルによって測定できる、食物からのリン吸収を低減することなどの１種または複数の効果を示す。
本明細書中で使用する場合、「有益な治療成績」には、対象が基礎をなす障害でなお苦しんでいる可能性があることに拘泥せず、治療されている基礎をなす障害の改善または根治が含まれる。高リン血症を有する対象において、有益な治療成績には、基礎をなす高リン血症の改善または根治が含まれる。例えば、高リン血症を有する対象は、血漿中リン酸レベルの低下、または高められた血清中リン酸レベルの原因または効果と関連する症状の開始の遅延を含む症状の重症度の低下を経験する。このような症状には、軟部組織の異所性石灰化、心血管の石灰化、心血管事象、腎劣化、カルシフィラキシス、副甲状腺機能亢進症、尿毒症性骨疾患、腎性骨疾患、骨粗鬆症、および高リン血症が包含される。
【００１１】
本明細書中で使用する場合、「治療を必要とする対象」には、リン酸輸送抑制剤を用いて治療して有益な治療成績を達成できる疾患および／または状態を現に有する、またはそれらを発症する可能性のある対象が含まれる。このような対象の考えられる下位集合は、リン酸輸送抑制剤で治療して有益な治療成績を達成できる疾患または状態と診断された対象である。
本明細書中で使用する場合、「薬学的に許容される担体」には、溶媒、分散媒体、被覆剤、抗細菌および抗真菌剤、等張剤、ならびに吸収遅延剤などのいずれかおよびすべてが含まれる。このような媒体および薬剤の薬学的に活性な物質のための使用は、当技術分野で周知である。任意の通常の媒体または薬剤が治療用組成物と不適合である場合を除き、治療用組成物中でのその使用が考えられる。補足的な活性成分も、組成物中に組み込むことができる。
本明細書中で使用する場合、「賦形剤」は、本明細書に記載の化合物などの医薬を投与するための個々の投与方式および剤形に応じて、担体、溶媒、安定剤、補助剤、希釈剤などを指す。
本明細書中で使用する場合、「高リン血症」は、その血清中リンが医学的に容認される正常範囲を超える濃度で存在する対象における状態を記述するのに広く使用される。
【００１２】
本明細書中で使用する場合、用語「アルキル」は、直鎖および分枝の飽和炭化水素基を指し、その非限定的例には、メチル、エチル、ならびに直鎖および分枝のプロピルおよびブチル基が含まれる。アルキル基は、例えば、１〜２０個の炭素原子、１〜１０個の炭素原子、および／または１〜６個の炭素原子を有することができる。
本明細書中で使用する場合、用語「ジアルキル」は、同一原子に結合されたアルキル基を指す、例えば、Ｎ−ジアルキルは、同一の窒素原子にそれぞれ結合された２つのアルキル基を指す。
本明細書中で使用する場合、用語「アリール」は、単環式または多環式芳香族基、好ましくは単環式または二環式芳香族基を指す。そうでないことを指摘しない限り、アリール基は、置換されていないか、あるいは、例えば、ハロ、アルキル、アルケニル、−ＯＣＦ3、−ＮＯ2、−ＣＮ、−ＮＣ、−ＯＨ、アルコキシ、アミノ、−ＣＯ2Ｈ、−ＣＯ2−アルキル、アリール、およびヘテロアリール基から独立に選択される１つまたは複数の、とりわけ１〜４つの基で置換されていてもよい。典型的なアリール基には、限定はされないが、フェニル、ナフチル、テトラヒドロナフチル、クロロフェニル、メチルフェニル、メトキシフェニル、トリフルオロメチルフェニル、ニトロフェニル、２，４−メトキシクロロフェニルなどが含まれる。
【００１３】
本明細書中で使用する場合、用語「ヘテロアリール」は、１つまたは２つの芳香族環を含み、芳香族環中に少なくとも１つの窒素、酸素、または硫黄原子を含む、単環式または二環式環系を指す。そうでないことを指摘しない限り、ヘテロアリール基は、置換されていないか、あるいは、例えば、ハロ、アルキル、アルケニル、−ＯＣＦ3、−ＮＯ2、−ＣＮ、−ＮＣ、−ＯＨ、アルコキシ、アミノ、−ＣＯ2Ｈ、−ＣＯ2−アルキル、アリール、およびヘテロアリールから選択される１つまたは複数の、とりわけ１〜４つの置換基で置換されていてもよい。ヘテロアリール基の例には、限定はされないが、チエニル、フリル、ピリジル、オキサゾリル、キノリル、チオフェニル、イソキノリル、インドリル、トリアジニル、トリアゾリル、イソチアゾリル、イソキサゾリル、イミダゾリル、ベンゾチアゾリル、ピラジニル、ピリミジニル、チアゾリル、およびチアジアゾリルが含まれる。
本明細書中で使用する場合、用語「ベンジル」は、メチレンに結合された芳香族基を指す。そうでないことを指摘しない限り、ベンジル基は、置換されていないか、あるいは、例えば、ハロ、アルキル、アルケニル、−ＯＣＦ3、−ＮＯ2、−ＣＮ、−ＮＣ、−ＯＨ、アルコキシ、アミノ、−ＣＯ2Ｈ、−ＣＯ2−アルキル、アリール、芳香族基、およびヘテロアリール基から選択される１つまたは複数の置換基で置換されていてもよい。ベンジル基の一例が−ＣＨ2−Ｃ6Ｈ5である。
本明細書中で使用する場合、用語「メチレン」は、２つの水素原子に結合されている炭素を指す。
本明細書中で使用する場合、用語「ハロゲン」は、周期表のＶＩＩＡ族のハロゲン、例えば、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒおよびＩを指す。
本明細書中で使用する場合、下表１に示す省略形は、文脈中でそうでないことが明白に示されない限り、対応する表１に示す化学名を意味する。
【００１４】
【表１】
（方法）
考えられる最初の方法は、ヒト上皮細胞の膜を横断するリン酸輸送、したがってリン酸の胃腸内吸収を抑制する方法である。該方法は、リン酸輸送の抑制を必要とするヒト対象に、リン酸基を有する小分子を有益な治療成績を達成するのに有効な量で投与するステップを含む。好ましくは、リン酸基を有する小分子は、薬学的に許容される製剤中に存在する。
【００１５】
考えられる別の方法は、ヒト上皮細胞の膜を横断するリン酸輸送、したがってリン酸の胃腸内吸収を抑制する方法である。該方法は、リン酸輸送の抑制を必要とするヒト対象に、リン酸基を有する小分子を有益な治療成績を達成するのに有効な量で含む薬学的に許容される製剤を投与するステップを含む。
【００１６】
考えられる別の方法は、限定はされないが、副甲状腺機能亢進症、代謝性骨疾患、尿毒症性骨疾患、腎性骨疾患、軟部組織の石灰化、心血管の石灰化、心血管事象、カルシフィラキシス、および骨粗鬆症などの、リン酸代謝異常またはリン酸輸送障害と関連する疾患の進行を予防する、安定化する、または逆転する方法である。該方法は、リン酸代謝異常またはリン酸輸送障害と関連する疾患を有するヒト対象に、本明細書に開示の、リン酸基を有する小分子、またはリン酸基を有する小分子を含む任意の製剤を、リン酸代謝またはリン酸輸送障害と関連する疾患の進行を予防、安定化または逆転するのに有効な量で投与するステップを含む。
考えられる別の方法は、血清中へのリン酸蓄積が起こり得る疾患を治療または予防する方法である。このような疾患には、限定はされないが、高リン血症、慢性腎臓病、二次性副甲状腺機能亢進症、副甲状腺機能亢進症、および副甲状腺機能低下症が含まれる。該方法は、血清中リン酸の低減または血清中リン酸の維持を必要とするヒト対象に、本明細書に開示の、リン酸基を有する小分子、またはリン酸基を有する小分子を含む任意の製剤を、血清中リン酸レベルを低減または維持するのに有効な量で投与するステップを含む。
【００１７】
考えられる別の方法は、そのような療法を必要とする二次性副甲状腺機能亢進症などの疾患を治療するためのビタミンＤをベースにした療法などの薬学的介入の結果として発生する高リン血症を治療する、遅延する、または予防する方法である。該方法は、そのような介入を必要とする疾患を治療するための薬学的介入を受け入れているヒト対象に、本明細書に開示の、リン酸基を有する小分子、またはリン酸基を有する小分子を含む任意の製剤を、高リン血症を治療、遅延、または予防するのに有効な量で投与するステップを含む。
本明細書に開示のいずれかの方法に関して、リン酸基を有する小分子は、単独で投与することができ、あるいは別法として、リン酸基を有する１種または複数のさらなる小分子と組み合わせて投与することができる。
【００１８】
（リン酸基を有する小分子化合物）
本発明のさらに別の態様は、リン酸基を有する小分子に関する。リン酸基を有する小分子の例には、限定はされないが、表２に記載の化合物００１〜０２９が含まれる。
【００１９】
【表２】
【００２０】
一実施形態において、リン酸基を有する小分子は、構造式Ｉ〜ＶＩＩ：
【００２１】
【化１】
［式中、Ｘは、Ｏ、Ｓ、ＮＨまたはＮ−アルキルであり；Ｒ1は、１つまたは複数の位置で、ハロゲン、ＯＨ、Ｏ−アルキル、Ｎ−ジアルキルまたはＮＨＣＯ−アルキルであり；Ｒ2は、Ｈ、アルキルまたは置換ベンジルである］から選択される。
別の実施形態において、リン酸基を有する小分子は、構造式ＶＩＩＩ〜ＸＩ：
【００２２】
【化２】
［式中、Ｒ3は、１つまたは複数の位置で、ハロゲン、アルキル、置換ベンジル、ＯＨ、Ｏ−アルキル、Ｎ−ジアルキル、またはＮＨＣＯ−アルキルである。Ｎ−原子の位置は変更できる。例えば、Ｎ−原子は、化合物ＩＸではリン酸置換基をもっている芳香族環の一部であるが、化合物ＸＩではリン酸置換基をもっている芳香族環の一部ではない］から選択される。
別の実施形態において、リン酸基を有する小分子は、構造式ＸＩＩ〜ＸＩＩＩ：
【００２３】
【化３】
［式中、Ｒ4は、Ｈ、ハロゲン、Ｏ−アルキル、Ｓ−アルキル、Ｎ−ジアルキル、またはＮＨＣＯ−アルキルであり；ｎは０、１または２である］から選択される。
別の実施形態において、リン酸基を有する小分子は、構造式ＸＩＶ：
【００２４】
【化４】
［式中、Ｒ1は、ハロゲン、ＯＨ、Ｏ−アルキル、Ｎ−ジアルキル、またはＮＨＣＯ−アルキルであり；Ｒ5は、アルキル、アリール、または置換アリールであり；ｍは１〜６個の炭素原子である］から選択される。
別の実施形態において、リン酸基を有する小分子は、構造式ＸＶ：
【００２５】
【化５】
［式中、Ｒ6は、アルキル、ベンジル、または芳香族置換ベンジルである］から選択される。
別の実施形態において、リン酸基を有する小分子は、構造式ＸＶＩ：
【００２６】
【化６】
［式中、Ｒ7は、Ｈ、アルキル、ベンジル、または芳香族置換ベンジルである］から選択される。
別の実施形態において、リン酸基を有する小分子は、構造式ＸＶＩＩ〜ＸＶＩＩＩ：
【００２７】
【化７】
［式中、Ｒ8は、Ｈ、アルキル、アリール、ベンジル、または芳香族置換ベンジルであり；ｍは１個またはそれ以上の、好ましくは１〜６個の炭素原子である］から選択される。
別の実施形態において、リン酸基を有する小分子は、構造式ＸＩＸ〜ＸＸＩ：
【００２８】
【化８】
［式中、Ｙは、ＯまたはＳであり；Ｒ1は、ＯＨ、Ｏ−アルキル、ハロゲン、Ｎ−ジアルキル、またはＮＨＣＯ−アルキルであり；Ｒ9は、Ｈまたはアルキルであり；ｎは０、１または２である］から選択される。
別の実施形態において、リン酸基を有する小分子は、構造式ＸＸＩＩ：
【００２９】
【化９】
［式中、Ｒ10は、アルキル、Ｏ−アルキル、Ｓ−アルキル、アリール、ＮＲ112、またはＮＣＯＲ11であり；Ｒ11は、アルキルまたはアリールであり；Ｒ12はハロゲンである］から選択される。
別の実施形態において、リン酸基を有する小分子は、構造式ＸＸＩＩＩ：
【００３０】
【化１０】
［式中、各Ｚは、独立に、Ｏ、Ｓ、Ｎ、またはＣＨ2であり；ｎは０、１または２である］から選択される。
別の実施形態において、リン酸基を有する小分子は、構造式ＸＸＩＶ：
【００３１】
【化１１】
［式中、Ｒ13は、ハロゲン、ＯＲ14、ＮＲ152、ＰＯ3Ｈ2、ＳＯ3Ｈ、ＣＯＯＨ、またはＮＨ2であり；Ｒ14は、メチル、エチル、イソプロピル、ｔｅｒｔ−ブチル、アリル、または置換ベンジルもしくは非置換ベンジルであり；Ｒ15は、メチル、エチル、イソプロピル、アリル、ベンジル、置換ベンジル、または非置換ベンジルであり；ｍは１〜６個の炭素原子である］から選択される。
別の実施形態において、リン酸基を有する小分子は、構造式ＸＸＶ：
【００３２】
【化１２】
［式中、Ａは
【００３３】
【化１３】
【００３４】
であり；Ｘは、Ｏ、Ｓ、ＮＨ、またはＮ−アルキルであり；Ｒ16は、ＳＯ3Ｈ、ＣＯＯＨ、またはＮＨ2である］から選択される。
別の実施形態において、リン酸基を有する小分子は、構造式ＸＸＶＩ〜ＸＸＶＩＩ：
【００３５】
【化１４】
［式中、Ｒ17は、メチル、エチル、イソプロピル、ｔｅｒｔ−ブチル、シクロヘキシル、アリール、またはヘテロアリール、好ましくはベンゼン、ピリジル、またはベンジルであり；Ｒ18は、１つまたは複数の位置で、メチル、エチル、イソプロピル、ｔｅｒｔ−ブチル、ハロゲン、ＯＨ、Ｏ−アルキル、Ｎ−ジアルキル、またはＮＨＣＯ−アルキルである］から選択される。
別の実施形態において、リン酸基を有する小分子は、構造式ＸＸＶＩＩＩ：
【００３６】
【化１５】
［式中、Ｒ19は、ハロゲン、ＮＲ112、ＮＨＣＯＲ11、ＳＲ11、またはヘテロアリールであり；Ｒ20は、ハロゲン、メチル、エチル、イソプロピル、ｔｅｒｔ−ブチル、Ｎ（ＣＨ3）2、Ｎ（Ｅｔ）2、Ｎ（ｉＰｒ）2、ＮＨＣＯＣＨ3、ＮＨＣＯＣＦ3、またはＮＨＣＯＰｈであり；Ｒ11は、アルキルまたはアリールであり；ｎは０、１または２である］から選択される。
別の実施形態において、リン酸基を有する小分子は、構造式ＸＸＩＸ〜ＸＸＸＩ：
【００３７】
【化１６】
［式中、Ｒ10は、アルキル、Ｏ−アルキル、Ｓ−アルキル、アリール、ＮＲ112、またはＮＣＯＲ11であり；Ｒ11は、アルキルまたはアリールである］から選択される。
別の実施形態において、リン酸基を有する小分子は、構造式ＸＸＸＩＩ：
【００３８】
【化１７】
［式中、Ｒ21は、アルキル、ハロゲン化アルキル、Ｏ−アルキル、置換アリール、またはヘテロアリールであり；Ｒ5は、アルキル、アリール、または置換アリールであり；ｎは０、１または２である］から選択される。
化合物００１〜０２９および構造式Ｉ〜ＸＸＸＩＩで表される化合物を含む、リン酸基を有する小分子は、ヒト上皮細胞の膜を横断するリン酸輸送、したがってリン酸の胃腸内吸収を抑制するのに使用することができる。リン酸基を有するこれらの小分子は、また、それらの根本的原因または効果が、本明細書に記載のような正常な血清中リン酸レベルの維持についての異常に関連する疾患を治療または予防するのに使用することができる。
【００３９】
（リン酸基を有する小分子の製剤および投与）
リン酸基を有する小分子は、単独または組み合わせて、限定はされないが、エレキシル剤、液剤、ゲル剤、シロップ剤、スラリー剤などの食事性製剤としての、あるいはカプセル剤、錠剤または丸剤の形態での経口投与に向けて調製することができる。化合物は、単独または組み合わせて、皮下、静脈内または腹膜内のいずれかでの注射に適した製剤の状態で注射することができる。
リン酸基を有する小分子は、リン酸基を有する１種または複数の小分子、および薬学的に許容される担体、希釈剤、または賦形剤を含む医薬製剤の状態で投与することができる。
リン酸基を有する小分子は、単独または組み合わせて、そのような治療的または予防的介入を必要とする対象における消化管からのリン酸の取込みを低減することおよび／または尿中へのリン酸排泄の速度を増大させることによって、ヒト対象におけるリン酸蓄積を低減または制限するための許容される医薬製剤の状態で投与することができる。
本発明の目的の場合、投与されるリン酸基を有する小分子、またはその医薬製剤の量または投与量は、ヒト対象において妥当な時間枠にわたって例えば治療的または予防的反応をもたらすのに十分でなければならない、投与量は、リン酸基を有する個々の小分子の有効性、およびヒト対象の状態、ならびに治療予定のヒト対象の体重によって決定される。
リン酸基を有する小分子、またはその医薬製剤の投与量は、また、リン酸基を有する個々の小分子またはその医薬製剤の投与に付随する可能性のある任意の有害副作用の存在、本質、および程度によって決定される。典型的には、応対医師は、年齢、体重、一般的健康状態、食事、性別、投与予定のリン酸基を有する小分子、投与経路、および治療されている状態の重症度などの、種々の因子を考慮して、それぞれ個々の患者を治療するために、リン酸基を有する小分子の投与量を決定する。本発明を限定することを意図しない例を挙げれば、リン酸基を有する小分子またはその医薬製剤の投与量は、約０．０００１〜約１ｇ／ｋｇ治療対象の体重／日、約０．０００１〜約０．００１ｇ／ｋｇ体重／日、または約０．０１ｍｇ〜約１ｇ／ｋｇ体重／日でよい。
【実施例】
【００４０】
以下の実施例は、例示のために提供され、本発明の範囲を限定することを意図しない。
（例１）Ｃａｃｏ−２ヒト腸上皮細胞におけるリン酸取込み抑制に対する化合物００１〜０２９の効果
Ｃａｃｏ−２細胞を、２０％ウシ胎児血清を含むＤＭＥＭ培地中で培養した。Ｃａｃｏ−２細胞のサブコンフルエントな単層から培地を除去した。生じた細胞を、ナトリウム不含緩衝液（１３７ｍＭ塩化コリン、５．４ｍＭ ＫＣｌ、２．８ｍＭ ＣａＣｌ2、１．２ｍＭ ＭｇＳＯ4、および１４ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、ｐＨ７．４）またはナトリウム含有緩衝液（１３７ｍＭ塩化ナトリウム、５．４ｍＭ ＫＣｌ ２．８ｍＭ ＣａＣｌ2、１．２ｍＭ ＭｇＳＯ4、および１４ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、ｐＨ７．４）のどちらかで洗浄した。洗浄した後、細胞に、１μＭの放射能標識化リン酸塩（Ｋ2Ｈ32ＰＯ4、１μＣｉ／ｍＬ）を含むナトリウム含有緩衝液またはナトリウム不含緩衝液、および１００μＭの化合物００１〜０２９を含む群から選択されたリン酸基を有する小分子を添加し、それらを３７℃で２０分間インキュベートした。取込み培地を除去すること、および細胞を１３７ｍＭの塩化コリンまたは塩化ナトリウムのどちらかを含む１４ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ７．４）の氷冷溶液で洗浄することによって、リン酸取込みを終結した。放射能標識化リン酸を抽出するために、細胞の単層を、Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１００の１％溶液を添加して可溶化した。放射能標識化リン酸のアリコートを、シンチレーション流体に添加し、液体シンチレーション計数で放射能を測定した、ナトリウムを含むまたは含まない２種の溶液を使用するアッセイ間の差異は、リン酸のナトリウム依存性輸送を表す。図１は、Ｃ−００３、０１４、０１６および０１８を除いて、リン酸基を有する小分子は、Ｃａｃｏ−２ヒト上皮細胞におけるリン酸の取込みを低減するか、あるいは完全に抑制したことを示す。
【００４１】
（例２）リン酸取込み抑制に対するリン酸基を有する小分子化合物の投与量の効果
Ｃ−００２、Ｃ−００４、Ｃ−０１２およびＣ−０２８を１〜１００μＭの濃度で使用して、例１の手順を繰り返した。結果は、リン酸基を有する小分子の濃度に対するリン酸取込み抑制のパーセントとして記録した。図２は、Ｃａｃｏ−２細胞におけるリン酸取込みのパーセント抑制が、限界濃度に到達するまで、リン酸基を有する小分子化合物の濃度と共に増大することを示す。
【００４２】
（例３）リン輸送アッセイにおけるリン酸基を有する小分化合物の毒性測定
リン輸送アッセイにおける化合物の毒性を排除するために、１００μＭのＣ−００２、Ｃ−００４、Ｃ−０１２、Ｃ−０２８、および細胞の存在下で、ＡＬＡＭＡＲ ＢＬＵＥ染色液を用いて染色を実施した。Ｃａｃｏ−２細胞を９６−ウェルのプレートに、試験当日に約１６，０００細胞／ウェル（例えば、１日間の増殖には８，０００細胞／ウェル、２日間の増殖には４，０００細胞／ウェル、３日間の増殖には２，０００細胞／ウェル）を与える濃度で播種した。試験当日に、古い培地を、最終濃度が１００μＭのリン酸基を有する小分子／ＤＭＳＯを含む、または対照ウェルでは１％のＤＭＳＯを含むウェル当たり８０μＬの新鮮な培地と交換した。試験は、二つ組みで実施した。ＡＬＡＭＡＲ ＢＬＵＥ染色液（ＢｉｏＳｏｕｒｃｅ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，Ｉｎｃ．社、カタログ番号ＤＡＬ １１００）を製造業者の説明書に従って１０％の最終濃度で各ウェルに添加した。次いで、細胞を３７℃でさらに１８または２４時間インキュベートし、生細胞によるＡＬＡＭＡＲ ＢＬＵＥ染色液の還元を分光光度法により５７０ｎｍおよび６００ｎｍで測定した。結果は、製造業者のマニュアル（ＴＲＥＫ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ Ｓｙｓｔｅｍｓ社、ＰＩ−ＤＩＡＬ １０２５／１１００Ｒｅｖ１．０）中の式を使用して還元のパーセントとして計算した。図３は、１８および２４時間後のＡＬＡＭＡＲ ＢＬＵＥ染色液の還元におけるパーセント差は実質的に変化せず、リン酸基を有する小分子はＣａｃｏ−２ヒト上皮細胞に対して非毒性であったことを示す。
【００４３】
トリパンブルー色素排除法を利用して、細胞生存能に対するＣ−００２、００４、０１２および０２８の効果を測定した。細胞を、ＡＬＡＭＡＲ ＢＬＵＥ染色液試験と同様の方式で播種した（上記参照）。試験当日に、培地を除去し、細胞をＰＢＳで洗浄し、ナトリウム不含緩衝液（１３７ｍＭ塩化コリン、５．４ｍＭ ＫＣｌ、２．８ｍＭ ＣａＣｌ2、１．２ｍＭ ＭｇＳＯ4、および１４ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、ｐＨ７．４）、またはナトリウム含有緩衝液（１３７ｍＭ塩化ナトリウム、５．４ｍＭ ＫＣｌ ２．８ｍＭ ＣａＣｌ2、１．２ｍＭ ＭｇＳＯ4、および１４ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、ｐＨ７．４）中、１００μＭ（最終濃度）のＣ−００２、Ｃ−００４、Ｃ−０１２およびＣ−０２８と共にインキュベートした。試験は二つ組みで実施した。１時間インキュベートした後、細胞をトリプリン／ＥＤＴＡで引き離し、エッペンドルフチューブに移送し、それらの生存能を、０．４％トリパンブルー染色液（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社、カタログ番号１５２５０−０６１）を１：４希釈で使用し、共焦点顕微鏡法を用いて計数した。図４は、リン酸基を揺する小分子が、１時間インキュベートした後に、Ｃａｃｏ−２ヒト上皮細胞の生存能に対して有意な効果を有さなかったことを示す。
【００４４】
（例４）雄性Ｓｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙラットに対するリン酸基を有する小分子の最大耐容投与量（ＭＴＤ）の決定
雄性Ｓｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙラットに、Ｃ−００２、Ｃ−００４、Ｃ−０１２、Ｃ−０２１、Ｃ−０２２、Ｃ−０２３およびＣ−０２８を経口でｋｇ当たり０．５、５および１０ｍｇの投与量で１２日間毎日与えた。死亡数および動物の体重データを記録した。死亡は報告されず、体重増加に対する有意な効果は観察されなかった（図５参照）。これらの結果は、最大で１０ｍｇ／ｋｇまで投与された場合に、これらの化合物の毒性がないことまたは低いことを示唆する。
【００４５】
（例５）血清中リン酸の低減に対する構造式１〜ＸＸＸＩＩで表される化合物の有効性
血清中リン酸レベルの低減に対する構造式Ｉ〜ＸＸＸＩＩで表される化合物の有効性を、尿毒症性ラットで試験する。腎不全および血清中リン酸レベルの上昇を誘導するために、雄性Ｓｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙラットに、アデニン（５００ｍｇ／ｋｇ／日）を１２日間経口で毎日投与する。同一の胃管栄養液で、構造式Ｉ〜ＸＸＸＩＩで表される化合物を０．５〜１０ｍｇ／ｋｇの範囲の投与量で毎日経口で投与する。研究中、経口胃管栄養の直後に限られた時間で（例えば、３時間）２５ｇの高リン酸食を毎日提供する。１、６および１２日目に血液を採取する。１２日目に腸を採取する。血清中リン酸およびＦＧＦ−２３レベルを測定し、ＮａＰｉ−２ｂ転写物を腸から定量する。血清中リン酸レベルは、研究の過程中に低下すると予想される。低下した血清中リン酸は、血清中ＦＧＦ−２３の上昇および腸管内ＮａＰｉ−２ｂ転写の上昇をもたらすはずである。
【００４６】
（例６）化合物００２の調製（スキーム１）
スキーム１．
【００４７】
【化１８】
１００ｍＬの４口丸底フラスコに、２，３，４，５，６−ペンタクロロピリジン（１０ｇ、０．０３９７モル）および亜リン酸トリエチル（６．８ｇ、０．０４０９モル）を窒素下で仕込んだ。反応混合物を還流するまで加熱して２４時間維持し、次いで２５〜３０℃まで放冷した。反応混合物に水（５０ｍＬ）を添加し、ＥｔＯＡｃ（２×５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物を、ＭｇＳＯ4上で乾燥し、真空下で濃縮して粗材料を得た。粗材料を、溶離液としてＤＣＭ（９００ｍＬ）を用いるカラムクロマトグラフィー（シリカゲル１００〜２００）で精製した。純粋なカラム画分を合わせ、真空下で蒸発させてクリーム色の固体（３．８ｇ、収率２７％）を得た。クリーム色の固体について1Ｈ ＮＭＲ分析を実施すると、スペクトルは化合物Ａと矛盾しなかった。
１００ｍＬの４口丸底フラスコに、化合物Ａ（１．５ｇ、０．００４２モル）および６Ｍ塩酸（５０ｍＬ）を仕込んだ。反応混合物を還流するまで加熱して４時間維持し、２５〜３０℃まで放冷し、真空下で濃縮した。反応混合物に水（３０ｍＬ）を添加し、溶液を真空下で濃縮した。次いで、反応混合物にアセトン（５０ｍＬ）を添加し、溶液を真空下で濃縮した。反応混合物にジクロロメタン（３０ｍＬ）を添加し、溶液を２５〜３０℃で１５分間撹拌した。化合物を析出させ、濾過し、スラリーをｎ−ヘキサン（３０ｍＬ）で洗浄して灰白色固体としてＣ−００２（１．２ｇ、収率９５％）を得た。Ｃ−００２を1Ｈ ＮＭＲ、13Ｃ ＮＭＲおよび31Ｐ ＮＭＲで特徴付けた。
1H NMR (DMSO-d6): δ 5.00-7.00 ppm (bs,2H). 13C NMR (DMSO-d6): δ 146.87, 146.76, 146.17, 144.85, 131.28, 131.26. 31P NMR (DMSO-d6): δ 0.65(s).
Ｃ−００２の純度は、ＨＰＬＣにより９８．３％と測定された。ＭＳ（ｍ／ｚ）：Ｃ5Ｈ2Ｃｌ4ＮＯ3Ｐに対して計算値２９６．９；実測値（Ｍ−１）２９５．９。
【００４８】
（例７）化合物―００４の調製（スキーム２）
スキーム２．
【００４９】
【化１９】
２５０ｍＬの４口丸底フラスコに、窒素下でアセトフェノン（２５ｇ、０．２０８モル）を仕込んだ。フラスコに、三塩化リン（２２．４ｍＬ、０．２５６モル）および酢酸（６０ｇ、０．９９９モル）を２５〜３０℃で逐次的に添加し、２時間撹拌した。反応混合物を０〜５℃まで冷却し、乾燥塩酸ガスを反応混合物に０〜５℃で１．５時間吹き込んだ。反応混合物を室温まで放冷し、さらに１４時間撹拌した、析出した化合物を濾取し、スラリーをエーテル（１００ｍＬ）で洗浄した。化合物を、１００ｍＬ丸底フラスコに入れ、１９０℃まで加熱してその温度で１５分間維持した。次いで、化合物を６０℃まで冷却し、フラスコにクロロホルム（２０ｍＬ）を添加し、溶液を２５〜３０℃で１５分間撹拌した。析出した固体を濾過し、５０℃で乾燥して、灰白色固体としてＣ−００４（３ｇ、収率８％）を得た。Ｃ−００４を1Ｈ ＮＭＲ、13Ｃ ＮＭＲ、31Ｐ ＮＭＲ、およびＦＴ−ＩＲで特徴付けた。
1H NMR (CD3OD): δ 7.6 (m,2H), 7.35 (m,3H), 6.20 (s, 1H), 6.16 (s, 1H), 6.04 (s, 1H), 5.96 (s, 1H). 13C NMR (CD3OD): δ 145.16, 143.77, 139.00, 138.90, 129.29, 129.12, 129.06, 129.04, 128.70, 128.65. 31P NMR (CD3OD): δ 13.30, 13.10.
Ｃ−００４の純度は、ＨＰＬＣにより９８．４％と測定された。ＭＳ（ｍ／ｚ）：Ｃ8Ｈ9Ｏ3Ｐに対して計算値１８４．１３；実測値（Ｍ−１）１８３．１。
【００５０】
（例８）化合物−０１２の調製（スキーム３）
スキーム３．
【００５１】
【化２０】
【００５２】
パミドロン酸（ｐａｌｍｉｄｒｏｎｉｃ ａｃｉｄ）（４．７ｇ、０．０２１モル）を、水（１０ｍＬ）とトリエチルアミン（１２ｍＬ）とエタノール（４０ｍＬ）との混合物に溶解した。反応混合物に、試薬４−ニトロフェニルイソチオシアネート（３．９６ｇ、０．０２１９モル）を２５〜３０℃で添加した。反応混合物を１６時間撹拌し、還流するまで加熱して１時間維持した。混合物を５〜１０℃まで冷却した後、２０％塩酸（２０ｍＬ）を添加し、反応物を２５〜３０℃で１４時間撹拌した。生じた固体析出物を濾過し、水、エタノール、そしてアセトンで洗浄した。析出物を、熱風オーブン中、６０〜６５℃で４時間乾燥して化合物Ｂ（４．５ｇ、収率５０％）を得た。化合物Ｂを1Ｈ ＮＭＲで特徴付けた。
１００ｍＬの４口丸底フラスコに、化合物Ｂ（２．２５ｇ、０．００５４モル）、エタノール（３５ｍＬ）、および水（６ｍＬ）を窒素下で仕込んだ。反応混合物にトリエチルアミン（１．２ｍＬ）を添加し、２５〜３０℃で１０分間撹拌した。反応物にクロロアセトン（９０％溶液、０．７４ｇ、０．４５７ｍＬ、０．００５６モル）を２５〜３０℃で添加した。反応混合物を、還流するまで加熱して１時間維持し、次いで２５〜３０℃まで放冷した。反応混合物に塩酸（２０％、１．２ｍＬ）を２５〜３０℃で添加し、１時間撹拌した。反応混合物を１０〜１５℃まで冷却し、さらに１時間撹拌した。析出物を濾過し、スラリーをエタノール（１５ｍＬ）およびアセトン（２０ｍＬ）で洗浄し、湿り化合物を５０〜６０℃で２時間乾燥して、淡黄色固体としてＣ−０１２（１．１５ｇ、収率４７％）を得た。Ｃ−０１２を1Ｈ ＮＭＲで特徴付けた。
1H NMR (CD3OD): δ 8.4 (d,2H), 7.85 (d,2H), 6.8 (s, 1H), 4.65 (s, 2H), 2.6 (m, 2H), 2.45 (s, 3H).
Ｃ−０１２の純度は、ＨＰＬＣにより９７．７％と測定された。ＭＳ（ｍ／ｚ）：Ｃ13Ｈ18Ｎ3Ｏ9Ｐ2Ｓ+に対して計算値４５４．３１；実測値（Ｍ＋）４５４．２。
【００５３】
（例９）化合物―０２１の調製（スキーム４）
スキーム４．
【００５４】
【化２１】
フェノール（１５ｇ、１５９．５ミリモル）の撹拌された無水ＣＣｌ4（５０ｍＬ）溶液に、新たに蒸留したトリエチルアミン（１６．９４ｇ、２４ｍＬ、１６７．４８ミリモル）、続いて亜リン酸ジエチル（２３．１２９ｇ、１６７．４８ミリモル）をアルゴン雰囲気下で添加した。反応混合物を室温で２時間撹拌し、出発原料の消失をＴＬＣで追跡した。次いで、反応混合物に水を添加し、続いてＤＣＭで希釈した。ＤＣＭ層を、分離し、ブラインで乾燥し、無水Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥し、濾過し、真空で濃縮して無色のオイルを得た。このオイルをＤＣＭ（２０ｍＬ）に溶解し、シリカゲルカラム（２３０メッシュ、２７５ｇ）に負荷し、０〜５０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを用い、グラジエントで溶離した。画分をＴＬＣ／ＵＶで分析し、純粋な画分を合わせ、真空で濃縮乾固し、無色オイルとして純粋な化合物Ｃ（３０．４０ｇ、収率８９％）を得た。ＴＬＣを３０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンで実施し、化合物Ｃは、ＵＶおよびＰＭＡを用いてＲf０．４０の位置で可視化された。
【００５５】
ＤＩＰＡ（９．６７ｇ、９５．５３ミリモル）の撹拌された無水ＴＨＦ（２００ｍＬ）溶液に、ｎＢｕＬｉ（６．１２ｇ、９５．５３ミリモル）を−２０℃で添加し、反応物を−２０℃でさらに３０分間撹拌した。次いで、反応混合物に、化合物Ｃ（２０ｇ、８６．８８ミリモル）のＴＨＦ（５０ｍＬ）溶液を添加し、室温で２時間撹拌した。出発原料が消失したら（ＴＬＣで監視して）反応混合物に水、次いでＥｔＯＡｃを添加した。ＥｔＯＡｃ層を、分離し、ブラインで乾燥し、無水Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥し、濾過し、真空中で濃縮して、無色のオイルを得た。このオイルを、ＤＣＭ（２０ｍＬ）に溶解し、シリカゲルカラム（２３０メッシュ、２７５ｇ）に負荷し、０〜１００％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを用い、グラジエントで溶離した。カラム画分をＴＬＣ／ＵＶで分析した。純粋な画分を合わせ、真空で濃縮乾固し、無色オイルとして純粋な化合物Ｄ（１６．１２ｇ、収率７５％）を得た。ＴＬＣを３０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンで実施し、化合物Ｄは、ＵＶおよびＰＭＡを用いてＲf０．３０の位置で可視化された。
【００５６】
化合物Ｄ（５ｇ、９５．５３ミリモル）の撹拌された無水ＤＭＦ（２００ｍＬ）溶液に、Ｋ2ＣＯ3（６．０ｇ、４３．４４ミリモル）および１−ブロモ−１−クロロエタン（３．１１ｇ、２１．７２ミリモル）をアルゴン雰囲気下に室温で添加した。反応混合物を２４時間撹拌し、出発原料の消失をＴＬＣで監視した。次いで、反応混合物に水、続いてＥｔＯＡｃを添加した。ＥｔＯＡｃ層を、分離し、ブラインで乾燥し、無水Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥し、濾過し、真空で濃縮して無色のオイルを得た。このオイルをＤＣＭ（２０ｍＬ）に溶解し、シリカゲルカラム（２３０メッシュ、２７５ｇ）に負荷し、０〜１００％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを用い、グラジエントで溶離した。カラム画分をＴＬＣ／ＵＶで分析した。純粋な画分を合わせ、真空で濃縮乾固し、無色オイルとして純粋な化合物Ｅ（１６．１２ｇ、収率７５％）を得た。ＴＬＣを５０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンで実施し、化合物Ｅは、ＵＶおよびＰＭＡを用いてＲf０．２５の位置で可視化された。
化合物Ｅ（５ｇ、１６．１９ミリモル）の撹拌された無水ＤＣＭ（５０ｍＬ）溶液に、ＴＢＳ−Ｂｒ（１５．６９ｇ、９７．１８ミリモル）をアルゴン雰囲気下に室温で添加した。反応混合物を２時間撹拌し、出発原料の消失をＴＬＣで監視した。次いで、反応混合物に水、次いでアセトンを添加した。有機溶媒をロータリー蒸発で除去し、非水溶性の白色析出物を得た。固体の結晶性生成物を、濾過し、水で徹底的に洗浄し、高真空下で乾燥して、灰白色結晶性固体としてＣ−０２１（３．０ｇ、収率７５％）を得た。ＴＬＣを１００％ＥｔＯＡｃで実施し、Ｃ−０２１は、ＵＶおよびＰＭＡを用いてＲf０．１５の位置で可視化された。Ｃ−０２１を、1Ｈ ＮＭＲおよび31Ｐ ＮＭＲで特徴付けた。
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): 3.9 (dd, J=6.0, 5.7 Hz, 2H), 4.28 (dd, 5.4, 5.7 Hz, 2H), 7.0 (m, 1H), 7.10 (m, 1H), 7.45 (m, 1H), 7.65 (m, 1H). 31P NMR (300, DMSO-d6): 11.669 (s). MS (m/z): C8H10ClO5Pの計算値, 252.59; 実測値(M+ - OH), 235.1.
【００５７】
（例１０）化合物―０２２の調製（スキーム５）
スキーム５．
【００５８】
【化２２】
【００５９】
２−ブロモフェノール（２５ｇ、０．１４４モル）と炭酸カリウム（６０ｇ、０．４３３モル）とのＤＭＦ（１７５ｍＬ）懸濁液に、１，３−ジブロモプロパン（７．０ｍＬ、０．０６９モル）を窒素雰囲気下に室温で滴加した。反応混合物を室温で５時間撹拌した。反応を完結した後（ＴＬＣで監視して）、反応混合物を水（８２０ｍＬ）で希釈し、１５分間撹拌した。析出した白色固体を、濾過し、水で洗浄し、気流乾燥して化合物Ｆ（２５ｇ、収率８９％）を得た。
1H NMR (200 MHz, DMSO-d6): δ 2.21 (p, J = 6.4 Hz, 2H), 4.24 (t, J = 6.4 Hz, 4H), 6.87 (dt, J = 7.4, 1.4 Hz, 2H), 7.14 (dd, J = 8.0, 1.4 Hz, 2H), 7.32 (dt, J = 8.0, 1.4 Hz, 2H), 7.55 (dt, J = 7.8, 1.4 Hz, 2H).
【００６０】
化合物Ｆ（２３ｇ、５９．０ミリモル）のＤＭＳＯ（１６０ｍＬ）溶液に、ＤＩＰＥＡ（８３ｍＬ）、ｄｐｐｂ（４．０５ｇ、９．４ミリモル）、酢酸パラジウム（ＩＩ）（２．１ｇ、９．４ミリモル）および亜リン酸ジエチル（３８．２ｍＬ、２９５ミリモル）を窒素雰囲気下に室温で添加した。反応混合物を１００℃で一夜加熱した。次いで、反応混合物を、室温まで冷却し、２Ｎ ＨＣｌ（３００ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２×３００ｍＬ）で抽出した。有機層を、水（２５０ｍＬ）で洗浄し、ブライン（２００ｍＬ）で乾燥し、硫酸ナトリウム上で乾燥し、減圧下で蒸発させた。得られる粗体を、溶離液としてＭｅＯＨ／ＤＣＭを使用するカラムクロマトグラフィーで精製して化合物Ｇ（１１．９ｇ、収率４０％）を得た。
1H NMR (200 MHz, CDCl3): δ 1.24 (t, J = 7.4 Hz, 12H), 2.33 (p, J = 6.0 Hz, 2H), 3.96-4.17 (m, 8H), 4.34 (t, J = 6.0 Hz, 4H), 6.94-7.04 (m, 4H), 7.48 (t, J = 8.6 Hz, 2H), 7.80 (dd, J = 15.0, 7.6 Hz, 2H); 質量: 500.9 (M++1).
【００６１】
化合物Ｇ（１０ｇ、０．０２モル）のＤＣＭ（４０ｍＬ）溶液に、ＴＭＳ−Ｂｒ（１５．８ｍＬ、０．１２モル）を窒素雰囲気下で徐々に添加した。反応混合物を室温で４時間撹拌した。化合物Ｇが完全に消失した後（質量分析法で）、揮発物を減圧下で除去した、アセトン−水（５０ｍＬ、１：１）を添加し、反応混合物を室温で３０分間撹拌した。析出した固体を、濾過し、アセトンで洗浄し、ＤＭＦ−ＥｔＯＨ−ＥｔＯＡｃ（１：３：４）から再析出させて、Ｃ−０２２（６．０ｇ、収率７７％）を得た。痕跡量のＤＭＦおよびＥｔＯＨを除去するため、最後の析出は、ＤＭＳＯ−水（１：３）を使用して行った。
1H NMR (200 MHz, DMSO-d6): δ 2.16 (p, J = 6.0 Hz, 2H), 4.24 (t, J = 6.0 Hz, 4H), 6.94 (dt, J = 7.6, 3.2 Hz, 2H), 7.05 (t, J = 8.2 Hz, 2H), 7.43 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 7.63 (dd, J = 14.2, 7.4 Hz, 2H); 13C NMR (75 MHz, DMSO-d6): 28.3, 64.7, 112.3, 112.4, 119.6, 119.7, 120.5, 122.0, 133.1, 133.2, 133.3, 160.0; 質量: 388.9 (M++1).
Ｃ−０２２の純度は、ＨＰＬＣにより９９．５％と測定された。
【００６２】
（例１１）化合物―０２３の調製（スキーム６）
スキーム６．
【００６３】
【化２３】
ベンズアルデヒド（３．３４ｇ、３１．５０ミリモル）とビス−ジエチルホスホネート（９．０８ｇ、３１．５０ミリモル）の撹拌された無水ＤＣＭ（５０ｍＬ）溶液に、５０％ＮａＯＨ水をアルゴン雰囲気下に室温にて２時間で添加した。出発原料が消失した後（ＴＬＣで監視して）、反応混合物に水、続いてさらなるＤＣＭを添加した。ＤＣＭ層を、分離し、希ＨＣｌで洗浄し、水で洗浄し、ブラインで乾燥し、無水Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥し、濾過し、真空で濃縮して粗生成物を得た。粗生成物をＤＣＭ（１０ｍＬ）に溶解し、シリカゲルカラム（２３０メッシュ、２００ｇ）に負荷し、０〜７５％酢酸エチル／ヘキサンを用い、グラジエントで溶離した。カラム画分をＴＬＣ／ＵＶで分析し、純粋な画分を合わせ、真空で濃縮乾固して、無色オイルとして純粋な化合物Ｈ（６．４ｇ、収率８５％）を得た。ＴＬＣを４０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンで実施し、化合物Ｈは、ＵＶおよびＰＭＡを用いてＲf０．４５の位置で可視化された。
化合物Ｈ（３ｇ、１２．４８ミリモル）の撹拌された無水ＤＣＭ（５０ｍＬ）溶液に、ＴＭＳ−Ｂｒ（１１．４７ｇ、９４．９２ミリモル）をアルゴン雰囲気下に室温で添加した。反応混合物を２時間撹拌し、反応の進行をＴＬＣで監視した。次いで、反応混合物に水、続いてアセトンを添加した。有機溶媒を減圧下に除去すると、非水溶性の白色析出物が生じた。析出物を、濾過し、水で徹底的に洗浄し、高真空下で乾燥して、結晶性固体としてＣ−０２３（１．８３ｇ、収率８０％）を得た。ＴＬＣを１００％ＥｔＯＡｃで実施し、Ｃ−０２３は、ＵＶおよびＰＭＡを用いてＲf０．１５の位置で可視化された。Ｃ−０２３を1Ｈ ＮＭＲおよび31Ｐ ＮＭＲで特徴付けた。
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 6.5 (dd, J = 18.0, 16.2 Hz, 1H), 7.2 (dd, J = 17.7, 17.4 Hz, 1H), 7.4 (m, 3H), 7.6 (m, 2H), 9.6 (bs, 2H). 31P NMR (300 MHz, DMSO-d6): 14.707 (s). MS (m/z): C8H9O3Pの計算値, 184.13; 実測値(M+), 184.1.
【００６４】
（例１２）化合物―２８の調製（スキーム７）
スキーム７．
【００６５】
【化２４】
【００６６】
ヘプタフルオロ酪酸（１７ｇ、７９．４２ミリモル）の撹拌された無水ＴＨＦ（２００ｍＬ）溶液に、ＰｈＭｇＢｒ（１７．２８ｇ、９５．３０ミリモル）をアルゴン雰囲気下に−２０℃で添加した。反応物を−２０℃で１時間撹拌し、出発原料の消失をＴＬＣで監視した。反応混合物に飽和ＮＨ4Ｃｌ溶液を徐々に添加し、混合物を続いてＥｔ2Ｏで希釈した。Ｅｔ2Ｏ層を、分離し、希ＨＣｌで洗浄し、水で洗浄し、ブラインで乾燥し、無水Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥し、濾過し、真空で濃縮して、無色のオイルを得た。オイルをＤＣＭ（２０ｍＬ）に溶解し、シリカゲルカラム（２３０メッシュ、５００ｇ）に負荷し、０〜２０％酢酸エチル／ヘキサンを用い、グラジエントで溶離した。カラム画分をＴＬＣ／ＵＶで分析した。純粋な画分を合わせ、真空で濃縮乾固し、無色のオイルとして純粋な化合物Ｉ（５．４４ｇ、収率２５％）を得た。ＴＬＣを１５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンで実施し、化合物Ｉは、ＵＶおよびＰＭＡを用いてＲf０．７０の位置で可視化された。
【００６７】
化合物Ｉ（５．４４ｇ、１９．８４ミリモル）の撹拌された無水ＭｅＯＨ（５０ｍＬ）溶液に、ＮａＢＨ4（０．９ｇ、２３．８１ミリモル）をアルゴン雰囲気下に室温で添加した、反応混合物を１５分間撹拌し、出発原料の消失をＴＬＣで監視した。出発原料が消失した後、反応混合物に飽和ＨＮ4Ｃｌ溶液を添加し、続いてＥｔＯＡｃで希釈した。ＥｔＯＡｃ層を、分離し、ブラインで乾燥し、無水Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥し、濾過し、真空で濃縮して、無色のオイルを得た。このオイルをＤＣＭ（１０ｍＬ）に溶解し、シリカゲルカラム（２３０メッシュ、１００ｇ）に負荷し、０〜３０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを用い、グラジエントで溶離した。カラム画分をＴＬＣ／ＵＶで分析した。純粋な画分を合わせ、真空で濃縮乾固し、無色のオイルとして純粋な化合物Ｊ（４．６５ｇ、収率８５％）を得た。ＴＬＣを１５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンで実施し、化合物Ｊは、ＵＶおよびＰＭＡを用いてＲf０．４５の位置で可視化された。
【００６８】
化合物Ｊ（３ｇ、１０．８６ミリモル）の撹拌された無水ＴＨＦ（５０ｍＬ）溶液に、Ｅｔ3Ｎ（１．６４ｇ、１６．２９ミリモル）およびテトラゾール（０．９１ｇ、１０．０３ミリモル）、続いてジクロロフェニルホスホネートをアルゴン雰囲気下に室温で添加した。反応混合物を２時間撹拌し、出発原料の消失をＴＬＣで監視した。出発原料が消失した後、反応フラスコに水を添加し、３０分間撹拌し、反応混合物をＥｔＯＡｃで希釈した。ＥｔＯＡｃ層を、分離し、水で洗浄し、ブラインで乾燥し、無水Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥し、濾過し、真空で濃縮して、粗生成物を得た。粗生成物を、逆相カラムクロマトグラフィー（Ｃ１８メッシュ、５０ｇ）および０〜１００％アセトニトリル／水を用いて溶離されるグラジエントによって精製した。カラム画分を、７５％酢酸エチル／ヘキサンを使用するＴＬＣで分析し、生成物はＵＶおよびＰＭＡを用いてＲf０．１５の位置で可視された。純粋な画分を合わせ、真空で濃縮すると、非水溶性の結晶性固体が生じた。固体を濾過し、高真空で乾燥して、純粋な結晶性白色固体としてＣ−０２８（３．７ｇ、収率８２％）を得た。Ｃ−０２８を1Ｈ ＮＭＲおよび31Ｐ ＮＭＲで特徴付けた。
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): 7.2-7.6 (m, 10H), 6.0 (m, 1H), 5.4 (bs, 1H). 31P NMR (300 MHz, DMSO-d6): 15.99 (s). MS (m/z): C16H12F7O3Pの計算値, 416.23; 実測値415.1.
【００６９】
前記の説明は、単に理解を明瞭にするために提供され、本発明の範囲内の修正形態は当業者にとって明らかである可能性があるので、それらの説明から不必要な限定を推測すべきでない。
明細書を通して、組成物が成分または材料を含むと説明される場合、該組成物は、そうでないことを記載しない限り、列挙された成分または材料の任意の組合せから本質的になる、あるいは任意の組合せからなることもできることを企図する。
【００７０】
本明細書中で開示される方法、およびその個々のステップの実施は、手動で、および／または電子装置の助けを借りて実施することができる。方法を、特定の実施形態に関して説明してきたが、当業者は、該方法に付随する行為を実施する他の手段を使用できることを容易に認識するであろう。例えば、種々のステップの順序は、そうでないことを記載しない限り、該方法の範囲または精神から逸脱することなしに変更できる。加えて、個々のステップの一部を、組み合わせること、割愛すること、またはさらなるステップにさらに再分割することができる。
【００７１】
本明細書中で引用されるすべての特許、刊行物および参考文献は、参照により全体で本明細書に組み込まれる。本開示と組み込まれる特許、刊行物および参考文献との間に矛盾がある場合には、本開示が優先するものとする。
【図１Ａ】
【図１Ｂ】
【図２Ａ】
【図２Ｂ】
【図２Ｃ】
【図２Ｄ】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
リン酸輸送の抑制を必要とするヒト対象に、リン酸基を有する小分子を有益な治療成績を達成するのに有効な量で投与することを含む、ヒト上皮細胞の膜を横断するリン酸輸送を抑制する方法。
【請求項２】
リン酸代謝異常またはリン酸輸送障害と関連した疾患を有するヒト対象に、リン酸基を有する小分子をリン酸代謝またはリン酸輸送障害と関連した疾患の進行を予防、安定化、または逆転するのに有効な量で投与することを含む、リン酸代謝異常またはリン酸輸送障害と関連した疾患の進行を予防する、安定化する、または逆転する方法。
【請求項３】
疾患が、副甲状腺機能亢進症、代謝性骨疾患、尿毒症性骨疾患、腎性骨疾患、軟部組織石灰化、心血管石灰化、心血管事象、カルシフィラキシス、および骨粗鬆症からなる群から選択される、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
血清中リン酸の低下または血清中リン酸の維持を必要とするヒト対象に、リン酸基を有する小分子を、血清中リン酸レベルを低下させるまたは維持するのに有効な量で投与することを含む、血清中へのリン酸蓄積が起こり得る疾患の治療または予防方法。
【請求項５】
疾患が、高リン血症、慢性腎臓病、二次性副甲状腺機能亢進症、副甲状腺機能亢進症、および副甲状腺機能低下症からなる群から選択される、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
そのような介入を必要とするヒト対象の疾患を治療するための薬学的介入に起因するまたは起因するであろう高リン血症を治療する、遅延する、または予防する方法であって、前記ヒト対象に、リン酸基を有する小分子を、高リン血症を治療、遅延、または予防するのに有効な量で投与することを含む方法。
【請求項７】
薬学的介入が、ビタミンＤをベースにした療法である、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
疾患が、二次性副甲状腺機能亢進症である、請求項６に記載の方法。
【請求項９】
リン酸基を有する小分子を、リン酸基を有する１種または複数のさらなる別の小分子と組み合わせて投与することをさらに含む、請求項１から８までのいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０】
リン酸基を有する小分子が、薬学的に許容される製剤の状態で投与される、請求項１から９までのいずれか１項に記載の方法。
【請求項１１】
薬学的に許容される製剤が、薬学的に許容される担体、希釈剤、賦形剤、またはこれらのいずれかの混合物を含む、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
製剤が、経口または注射によって投与される、請求項１０に記載の方法。
【請求項１３】
製剤が、エレキシル剤、液剤、ゲル剤、シロップ剤、スラリー剤、カプセル剤、錠剤、または丸剤として経口で投与される、請求項１１に記載の方法。
【請求項１４】
製剤が、皮下、静脈内、または腹膜内での注射によって投与される、請求項１１に記載の方法。
【請求項１５】
リン酸基を有する小分子が、１日につき体重１ｋｇ当たり約０．００１〜約１ｇの投与量で投与される、請求項１から１４までのいずれか１項に記載の方法。
【請求項１６】
リン酸基を有する小分子が、式
【化１】
【化２】
［式中、
Ａは、
【化３】
であり、
Ｘは、Ｏ、Ｓ、ＮＨ、またはＮ−アルキルであり、
Ｙは、ＯまたはＳであり、
各Ｚは、独立に、Ｏ、Ｓ、Ｎ、またはＣＨ2であり、
ｎは、０、１または２であり、
ｍは、１〜６であり、
Ｒ1は、１つまたは複数の位置で、ハロゲン、ＯＨ、Ｏ−アルキル、Ｎ−ジアルキル、またはＮＨＣＯ−アルキルであり、
Ｒ2は、Ｈ、アルキル、または置換ベンジルであり、
Ｒ3は、１つまたは複数の位置で、ハロゲン、アルキル、置換ベンジル、ＯＨ、Ｏ−アルキル、Ｎ−ジアルキル、またはＮＨＣＯ−アルキルであり、
Ｒ4は、Ｈ、ハロゲン、Ｏ−アルキル、Ｓ−アルキル、Ｎ−ジアルキル、またはＮＨＣＯ−アルキルであり、
Ｒ5は、アルキル、アリール、または置換アリールであり、
Ｒ6は、アルキル、ベンジル、または芳香族置換ベンジルであり、
Ｒ7は、Ｈ、アルキル、ベンジル、または芳香族置換ベンジルであり、
Ｒ8は、Ｈ、アルキル、アリール、ベンジル、または芳香族置換ベンジルであり、
Ｒ9は、Ｈまたはアルキルであり、
Ｒ10は、アルキル、Ｏ−アルキル、Ｓ−アルキル、アリール、ＮＲ112、またはＮＣＯＲ11であり、
Ｒ11は、アルキルまたはアリールであり、
Ｒ12はハロゲンであり、
Ｒ13は、ハロゲン、ＯＲ14、ＮＲ152、ＰＯ3Ｈ2、ＳＯ3Ｈ、ＣＯＯＨ、またはＮＨ2であり、
Ｒ14は、メチル、エチル、イソプロピル、ｔｅｒｔ−ブチル、アリル、置換ベンジル、または非置換ベンジルであり、
Ｒ15は、メチル、エチル、イソプロピル、アリル、置換ベンジル、または非置換ベンジルであり、
Ｒ16は、ＳＯ3Ｈ、ＣＯＯＨ、またはＮＨ2であり、
Ｒ17は、メチル、エチル、イソプロピル、ｔｅｒｔ−ブチル、シクロヘキシル、アリール、またはヘテロアリールであり、
Ｒ18は、１つまたは複数の位置で、メチル、エチル、イソプロピル、ｔｅｒｔ−ブチル、ハロゲン、ＯＨ、Ｏ−アルキル、Ｎ−ジアルキル、またはＮＨＣＯ−アルキルであり、
Ｒ19は、ハロゲン、ＮＲ112、ＮＨＣＯＲ11、ＳＲ11またはヘテロアリールであり、
Ｒ20は、ハロゲン、メチル、エチル、イソプロピル、ｔｅｒｔ−ブチル、Ｎ（ＣＨ3）2、Ｎ（Ｅｔ）2、Ｎ（ｉＰｒ）2、ＮＨＣＯＣＨ3、ＮＨＣＯＣＦ3、またはＮＨＣＯＰｈであり、
Ｒ21は、アルキル、ハロゲン化アルキル、Ｏ−アルキル、置換アリール、またはヘテロアリールである］、およびそれらのいずれかの組合せからなる群から選択される、請求項１から１５までのいずれか１項に記載の方法。
【請求項１７】
リン酸基を有する小分子が、
【化４】
【化５】
【化６】
およびこれらのいずれかの組合せからなる群から選択される、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
リン酸基を有する小分子が、
【化７】
およびこれらのいずれかの組合せからなる群から選択される、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
ヒト上皮細胞の膜を横断するリン酸輸送を抑制するのに使用するための、リン酸基を有する小分子。
【請求項２０】
ヒト上皮細胞の膜を横断するリン酸輸送を抑制するための薬剤を製造するための、リン酸基を有する小分子の使用。
【請求項２１】
リン酸代謝異常またはリン酸輸送障害と関連した疾患の進行を予防する、安定化する、または逆転するのに使用するための、リン酸基を有する小分子。
【請求項２２】
リン酸代謝異常またはリン酸輸送障害と関連した疾患の進行を予防する、安定化する、または逆転するための薬剤を製造するための、リン酸基を有する小分子の使用。
【請求項２３】
疾患が、副甲状腺機能亢進症、代謝性骨疾患、尿毒症性骨疾患、腎性骨疾患、軟部組織石灰化、心血管石灰化、心血管事象、カルシフィラキシス、および骨粗鬆症からなる群から選択される、請求項２１または２２に記載の使用。
【請求項２４】
血清中へのリン酸蓄積が起こり得る疾患を治療または予防するのに使用するための、リン酸基を有する小分子。
【請求項２５】
血清中へのリン酸蓄積が起こり得る疾患を治療または予防するための薬剤を製造するための、リン酸基を有する小分子の使用。
【請求項２６】
疾患が、高リン血症、慢性腎臓病、二次性副甲状腺機能亢進症、副甲状腺機能亢進症、および副甲状腺機能低下症からなる群から選択される、請求項２４または２５に記載の使用。
【請求項２７】
そのような療法を必要とする疾患を治療するための薬学的介入の結果である、高リン血症を治療する、遅延する、または予防するのに使用するための、リン酸基を有する小分子。
【請求項２８】
そのような療法を必要とする疾患を治療するための薬学的介入の結果である、高リン血症を治療する、遅延する、または予防するための薬剤を製造するための、リン酸基を有する小分子の使用。
【請求項２９】
薬学的介入が、ビタミンＤをベースにした療法である、請求項２７または２８に記載の使用。
【請求項３０】
疾患が、二次性副甲状腺機能亢進症である、請求項２７または２８に記載の使用。
【請求項３１】
リン酸基を有する小分子が、薬学的に許容される製剤中に含まれる、請求項１７から３０までのいずれか１項に記載の使用。
【請求項３２】
薬学的に許容される製剤が、薬学的に許容される担体、希釈剤、賦形剤、またはこれらのいずれかの混合物を含む、請求項３１に記載の使用。
【請求項３３】
リン酸基を有する小分子が、式
【化８】
【化９】
［式中、
Ａは、
【化１０】
であり、
Ｘは、Ｏ、Ｓ、ＮＨ、またはＮ−アルキルであり、
Ｙは、ＯまたはＳであり、
各Ｚは、独立に、Ｏ、Ｓ、Ｎ、またはＣＨ2であり、
ｎは、０、１または２であり、
ｍは、１〜６であり、
Ｒ1は、１つまたは複数の位置で、ハロゲン、ＯＨ、Ｏ−アルキル、Ｎ−ジアルキル、またはＮＨＣＯ−アルキルであり、
Ｒ2は、Ｈ、アルキル、または置換ベンジルであり、
Ｒ3は、１つまたは複数の位置で、ハロゲン、アルキル、置換ベンジル、ＯＨ、Ｏ−アルキル、Ｎ−ジアルキル、またはＮＨＣＯ−アルキルであり、
Ｒ4は、Ｈ、ハロゲン、Ｏ−アルキル、Ｓ−アルキル、Ｎ−ジアルキル、またはＮＨＣＯ−アルキルであり、
Ｒ5は、アルキル、アリール、または置換アリールであり、
Ｒ6は、アルキル、ベンジル、または芳香族置換ベンジルであり、
Ｒ7は、Ｈ、アルキル、ベンジル、または芳香族置換ベンジルであり、
Ｒ8は、Ｈ、アルキル、アリール、ベンジル、または芳香族置換ベンジルであり、
Ｒ9は、Ｈまたはアルキルであり、
Ｒ10は、アルキル、Ｏ−アルキル、Ｓ−アルキル、アリール、ＮＲ112、またはＮＣＯＲ11であり、
Ｒ11は、アルキルまたはアリールであり、
Ｒ12はハロゲンであり、
Ｒ13は、ハロゲン、ＯＲ14、ＮＲ152、ＰＯ3Ｈ2、ＳＯ3Ｈ、ＣＯＯＨ、またはＮＨ2であり、
Ｒ14は、メチル、エチル、イソプロピル、ｔｅｒｔ−ブチル、アリル、置換ベンジル、または非置換ベンジルであり、
Ｒ15は、メチル、エチル、イソプロピル、アリル、置換ベンジル、または非置換ベンジルであり、
Ｒ16は、ＳＯ3Ｈ、ＣＯＯＨ、またはＮＨ2であり、
Ｒ17は、メチル、エチル、イソプロピル、ｔｅｒｔ−ブチル、シクロヘキシル、アリール、またはヘテロアリールであり、
Ｒ18は、１つまたは複数の位置で、メチル、エチル、イソプロピル、ｔｅｒｔ−ブチル、ハロゲン、ＯＨ、Ｏ−アルキル、Ｎ−ジアルキル、またはＮＨＣＯ−アルキルであり、
Ｒ19は、ハロゲン、ＮＲ112、ＮＨＣＯＲ11、ＳＲ11またはヘテロアリールであり、
Ｒ20は、ハロゲン、メチル、エチル、イソプロピル、ｔｅｒｔ−ブチル、Ｎ（ＣＨ3）2、Ｎ（Ｅｔ）2、Ｎ（ｉＰｒ）2、ＮＨＣＯＣＨ3、ＮＨＣＯＣＦ3、またはＮＨＣＯＰｈであり、
Ｒ21は、アルキル、ハロゲン化アルキル、Ｏ−アルキル、置換アリール、またはヘテロアリールである］、およびそれらのいずれかの組合せからなる群から選択される、請求項１から３２までのいずれか１項に記載の使用。
【請求項３４】
リン酸基を有する小分子が、
【化１１】
【化１２】
【化１３】
およびこれらのいずれかの組合せからなる群から選択される、請求項３３に記載の使用。
【請求項３５】
リン酸基を有する小分子が、
【化１４】
およびこれらのいずれかの組合せからなる群から選択される、請求項３４に記載の使用。
【請求項１】
リン酸輸送の抑制を必要とするヒト対象に、リン酸基を有する小分子を有益な治療成績を達成するのに有効な量で投与することを含む、ヒト上皮細胞の膜を横断するリン酸輸送を抑制する方法。
【請求項２】
リン酸代謝異常またはリン酸輸送障害と関連した疾患を有するヒト対象に、リン酸基を有する小分子をリン酸代謝またはリン酸輸送障害と関連した疾患の進行を予防、安定化、または逆転するのに有効な量で投与することを含む、リン酸代謝異常またはリン酸輸送障害と関連した疾患の進行を予防する、安定化する、または逆転する方法。
【請求項３】
疾患が、副甲状腺機能亢進症、代謝性骨疾患、尿毒症性骨疾患、腎性骨疾患、軟部組織石灰化、心血管石灰化、心血管事象、カルシフィラキシス、および骨粗鬆症からなる群から選択される、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
血清中リン酸の低下または血清中リン酸の維持を必要とするヒト対象に、リン酸基を有する小分子を、血清中リン酸レベルを低下させるまたは維持するのに有効な量で投与することを含む、血清中へのリン酸蓄積が起こり得る疾患の治療または予防方法。
【請求項５】
疾患が、高リン血症、慢性腎臓病、二次性副甲状腺機能亢進症、副甲状腺機能亢進症、および副甲状腺機能低下症からなる群から選択される、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
そのような介入を必要とするヒト対象の疾患を治療するための薬学的介入に起因するまたは起因するであろう高リン血症を治療する、遅延する、または予防する方法であって、前記ヒト対象に、リン酸基を有する小分子を、高リン血症を治療、遅延、または予防するのに有効な量で投与することを含む方法。
【請求項７】
薬学的介入が、ビタミンＤをベースにした療法である、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
疾患が、二次性副甲状腺機能亢進症である、請求項６に記載の方法。
【請求項９】
リン酸基を有する小分子を、リン酸基を有する１種または複数のさらなる別の小分子と組み合わせて投与することをさらに含む、請求項１から８までのいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０】
リン酸基を有する小分子が、薬学的に許容される製剤の状態で投与される、請求項１から９までのいずれか１項に記載の方法。
【請求項１１】
薬学的に許容される製剤が、薬学的に許容される担体、希釈剤、賦形剤、またはこれらのいずれかの混合物を含む、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
製剤が、経口または注射によって投与される、請求項１０に記載の方法。
【請求項１３】
製剤が、エレキシル剤、液剤、ゲル剤、シロップ剤、スラリー剤、カプセル剤、錠剤、または丸剤として経口で投与される、請求項１１に記載の方法。
【請求項１４】
製剤が、皮下、静脈内、または腹膜内での注射によって投与される、請求項１１に記載の方法。
【請求項１５】
リン酸基を有する小分子が、１日につき体重１ｋｇ当たり約０．００１〜約１ｇの投与量で投与される、請求項１から１４までのいずれか１項に記載の方法。
【請求項１６】
リン酸基を有する小分子が、式
【化１】
【化２】
［式中、
Ａは、
【化３】
であり、
Ｘは、Ｏ、Ｓ、ＮＨ、またはＮ−アルキルであり、
Ｙは、ＯまたはＳであり、
各Ｚは、独立に、Ｏ、Ｓ、Ｎ、またはＣＨ2であり、
ｎは、０、１または２であり、
ｍは、１〜６であり、
Ｒ1は、１つまたは複数の位置で、ハロゲン、ＯＨ、Ｏ−アルキル、Ｎ−ジアルキル、またはＮＨＣＯ−アルキルであり、
Ｒ2は、Ｈ、アルキル、または置換ベンジルであり、
Ｒ3は、１つまたは複数の位置で、ハロゲン、アルキル、置換ベンジル、ＯＨ、Ｏ−アルキル、Ｎ−ジアルキル、またはＮＨＣＯ−アルキルであり、
Ｒ4は、Ｈ、ハロゲン、Ｏ−アルキル、Ｓ−アルキル、Ｎ−ジアルキル、またはＮＨＣＯ−アルキルであり、
Ｒ5は、アルキル、アリール、または置換アリールであり、
Ｒ6は、アルキル、ベンジル、または芳香族置換ベンジルであり、
Ｒ7は、Ｈ、アルキル、ベンジル、または芳香族置換ベンジルであり、
Ｒ8は、Ｈ、アルキル、アリール、ベンジル、または芳香族置換ベンジルであり、
Ｒ9は、Ｈまたはアルキルであり、
Ｒ10は、アルキル、Ｏ−アルキル、Ｓ−アルキル、アリール、ＮＲ112、またはＮＣＯＲ11であり、
Ｒ11は、アルキルまたはアリールであり、
Ｒ12はハロゲンであり、
Ｒ13は、ハロゲン、ＯＲ14、ＮＲ152、ＰＯ3Ｈ2、ＳＯ3Ｈ、ＣＯＯＨ、またはＮＨ2であり、
Ｒ14は、メチル、エチル、イソプロピル、ｔｅｒｔ−ブチル、アリル、置換ベンジル、または非置換ベンジルであり、
Ｒ15は、メチル、エチル、イソプロピル、アリル、置換ベンジル、または非置換ベンジルであり、
Ｒ16は、ＳＯ3Ｈ、ＣＯＯＨ、またはＮＨ2であり、
Ｒ17は、メチル、エチル、イソプロピル、ｔｅｒｔ−ブチル、シクロヘキシル、アリール、またはヘテロアリールであり、
Ｒ18は、１つまたは複数の位置で、メチル、エチル、イソプロピル、ｔｅｒｔ−ブチル、ハロゲン、ＯＨ、Ｏ−アルキル、Ｎ−ジアルキル、またはＮＨＣＯ−アルキルであり、
Ｒ19は、ハロゲン、ＮＲ112、ＮＨＣＯＲ11、ＳＲ11またはヘテロアリールであり、
Ｒ20は、ハロゲン、メチル、エチル、イソプロピル、ｔｅｒｔ−ブチル、Ｎ（ＣＨ3）2、Ｎ（Ｅｔ）2、Ｎ（ｉＰｒ）2、ＮＨＣＯＣＨ3、ＮＨＣＯＣＦ3、またはＮＨＣＯＰｈであり、
Ｒ21は、アルキル、ハロゲン化アルキル、Ｏ−アルキル、置換アリール、またはヘテロアリールである］、およびそれらのいずれかの組合せからなる群から選択される、請求項１から１５までのいずれか１項に記載の方法。
【請求項１７】
リン酸基を有する小分子が、
【化４】
【化５】
【化６】
およびこれらのいずれかの組合せからなる群から選択される、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
リン酸基を有する小分子が、
【化７】
およびこれらのいずれかの組合せからなる群から選択される、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
ヒト上皮細胞の膜を横断するリン酸輸送を抑制するのに使用するための、リン酸基を有する小分子。
【請求項２０】
ヒト上皮細胞の膜を横断するリン酸輸送を抑制するための薬剤を製造するための、リン酸基を有する小分子の使用。
【請求項２１】
リン酸代謝異常またはリン酸輸送障害と関連した疾患の進行を予防する、安定化する、または逆転するのに使用するための、リン酸基を有する小分子。
【請求項２２】
リン酸代謝異常またはリン酸輸送障害と関連した疾患の進行を予防する、安定化する、または逆転するための薬剤を製造するための、リン酸基を有する小分子の使用。
【請求項２３】
疾患が、副甲状腺機能亢進症、代謝性骨疾患、尿毒症性骨疾患、腎性骨疾患、軟部組織石灰化、心血管石灰化、心血管事象、カルシフィラキシス、および骨粗鬆症からなる群から選択される、請求項２１または２２に記載の使用。
【請求項２４】
血清中へのリン酸蓄積が起こり得る疾患を治療または予防するのに使用するための、リン酸基を有する小分子。
【請求項２５】
血清中へのリン酸蓄積が起こり得る疾患を治療または予防するための薬剤を製造するための、リン酸基を有する小分子の使用。
【請求項２６】
疾患が、高リン血症、慢性腎臓病、二次性副甲状腺機能亢進症、副甲状腺機能亢進症、および副甲状腺機能低下症からなる群から選択される、請求項２４または２５に記載の使用。
【請求項２７】
そのような療法を必要とする疾患を治療するための薬学的介入の結果である、高リン血症を治療する、遅延する、または予防するのに使用するための、リン酸基を有する小分子。
【請求項２８】
そのような療法を必要とする疾患を治療するための薬学的介入の結果である、高リン血症を治療する、遅延する、または予防するための薬剤を製造するための、リン酸基を有する小分子の使用。
【請求項２９】
薬学的介入が、ビタミンＤをベースにした療法である、請求項２７または２８に記載の使用。
【請求項３０】
疾患が、二次性副甲状腺機能亢進症である、請求項２７または２８に記載の使用。
【請求項３１】
リン酸基を有する小分子が、薬学的に許容される製剤中に含まれる、請求項１７から３０までのいずれか１項に記載の使用。
【請求項３２】
薬学的に許容される製剤が、薬学的に許容される担体、希釈剤、賦形剤、またはこれらのいずれかの混合物を含む、請求項３１に記載の使用。
【請求項３３】
リン酸基を有する小分子が、式
【化８】
【化９】
［式中、
Ａは、
【化１０】
であり、
Ｘは、Ｏ、Ｓ、ＮＨ、またはＮ−アルキルであり、
Ｙは、ＯまたはＳであり、
各Ｚは、独立に、Ｏ、Ｓ、Ｎ、またはＣＨ2であり、
ｎは、０、１または２であり、
ｍは、１〜６であり、
Ｒ1は、１つまたは複数の位置で、ハロゲン、ＯＨ、Ｏ−アルキル、Ｎ−ジアルキル、またはＮＨＣＯ−アルキルであり、
Ｒ2は、Ｈ、アルキル、または置換ベンジルであり、
Ｒ3は、１つまたは複数の位置で、ハロゲン、アルキル、置換ベンジル、ＯＨ、Ｏ−アルキル、Ｎ−ジアルキル、またはＮＨＣＯ−アルキルであり、
Ｒ4は、Ｈ、ハロゲン、Ｏ−アルキル、Ｓ−アルキル、Ｎ−ジアルキル、またはＮＨＣＯ−アルキルであり、
Ｒ5は、アルキル、アリール、または置換アリールであり、
Ｒ6は、アルキル、ベンジル、または芳香族置換ベンジルであり、
Ｒ7は、Ｈ、アルキル、ベンジル、または芳香族置換ベンジルであり、
Ｒ8は、Ｈ、アルキル、アリール、ベンジル、または芳香族置換ベンジルであり、
Ｒ9は、Ｈまたはアルキルであり、
Ｒ10は、アルキル、Ｏ−アルキル、Ｓ−アルキル、アリール、ＮＲ112、またはＮＣＯＲ11であり、
Ｒ11は、アルキルまたはアリールであり、
Ｒ12はハロゲンであり、
Ｒ13は、ハロゲン、ＯＲ14、ＮＲ152、ＰＯ3Ｈ2、ＳＯ3Ｈ、ＣＯＯＨ、またはＮＨ2であり、
Ｒ14は、メチル、エチル、イソプロピル、ｔｅｒｔ−ブチル、アリル、置換ベンジル、または非置換ベンジルであり、
Ｒ15は、メチル、エチル、イソプロピル、アリル、置換ベンジル、または非置換ベンジルであり、
Ｒ16は、ＳＯ3Ｈ、ＣＯＯＨ、またはＮＨ2であり、
Ｒ17は、メチル、エチル、イソプロピル、ｔｅｒｔ−ブチル、シクロヘキシル、アリール、またはヘテロアリールであり、
Ｒ18は、１つまたは複数の位置で、メチル、エチル、イソプロピル、ｔｅｒｔ−ブチル、ハロゲン、ＯＨ、Ｏ−アルキル、Ｎ−ジアルキル、またはＮＨＣＯ−アルキルであり、
Ｒ19は、ハロゲン、ＮＲ112、ＮＨＣＯＲ11、ＳＲ11またはヘテロアリールであり、
Ｒ20は、ハロゲン、メチル、エチル、イソプロピル、ｔｅｒｔ−ブチル、Ｎ（ＣＨ3）2、Ｎ（Ｅｔ）2、Ｎ（ｉＰｒ）2、ＮＨＣＯＣＨ3、ＮＨＣＯＣＦ3、またはＮＨＣＯＰｈであり、
Ｒ21は、アルキル、ハロゲン化アルキル、Ｏ−アルキル、置換アリール、またはヘテロアリールである］、およびそれらのいずれかの組合せからなる群から選択される、請求項１から３２までのいずれか１項に記載の使用。
【請求項３４】
リン酸基を有する小分子が、
【化１１】
【化１２】
【化１３】
およびこれらのいずれかの組合せからなる群から選択される、請求項３３に記載の使用。
【請求項３５】
リン酸基を有する小分子が、
【化１４】
およびこれらのいずれかの組合せからなる群から選択される、請求項３４に記載の使用。
【図３】
【図４】
【図５】
【図４】
【図５】
【公表番号】特表２０１２−５１５７２７（Ｐ２０１２−５１５７２７Ａ）
【公表日】平成２４年７月１２日（２０１２．７．１２）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１１−５４６５５８（Ｐ２０１１−５４６５５８）
【出願日】平成２２年１月２６日（２０１０．１．２６）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＣＡ２０１０／０００１１１
【国際公開番号】ＷＯ２０１０／０８３６１３
【国際公開日】平成２２年７月２９日（２０１０．７．２９）
【出願人】（５０８３７２４４５）シトクロマ インコーポレイテッド (8)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２４年７月１２日（２０１２．７．１２）
【国際特許分類】
【出願日】平成２２年１月２６日（２０１０．１．２６）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＣＡ２０１０／０００１１１
【国際公開番号】ＷＯ２０１０／０８３６１３
【国際公開日】平成２２年７月２９日（２０１０．７．２９）
【出願人】（５０８３７２４４５）シトクロマ インコーポレイテッド (8)
【Ｆターム（参考）】
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