強力なリポ多糖金属イオン封鎖剤としての疎水性ポリアミンアミド類
【課題】強力なリポ多糖金属イオン封鎖剤としての疎水性ポリアミンアミド類の提供。
【解決手段】Ｒ１位に長鎖脂肪族（Ｃ１２−Ｃ２０）置換基を有するリジン−スペルミン複合体は細菌のリポ多糖を結合及び中和する。これらの化合物は、マウスのリポ多糖誘導性ショックモデルにおいて致死率を低減し、かつ、グラム陰性敗血症治療用の新規抗リポ多糖剤を開発するためのリード物質としてはたらく可能性がある。これらの化合物は、式（Ｉ）で表される化合物、その医薬品に許容される塩及びそのプロドラッグである。
（式中、ＸはＯ又はＨ、Ｈであり、Ｒは疎水性Ｃ１２−Ｃ２０鎖であり、Ｙは−ＮＨ２又は−Ｈである）
【解決手段】Ｒ１位に長鎖脂肪族（Ｃ１２−Ｃ２０）置換基を有するリジン−スペルミン複合体は細菌のリポ多糖を結合及び中和する。これらの化合物は、マウスのリポ多糖誘導性ショックモデルにおいて致死率を低減し、かつ、グラム陰性敗血症治療用の新規抗リポ多糖剤を開発するためのリード物質としてはたらく可能性がある。これらの化合物は、式（Ｉ）で表される化合物、その医薬品に許容される塩及びそのプロドラッグである。
（式中、ＸはＯ又はＨ、Ｈであり、Ｒは疎水性Ｃ１２−Ｃ２０鎖であり、Ｙは−ＮＨ２又は−Ｈである）
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願を参照
本出願は、発明の名称を「強力なリポ多糖金属イオン封鎖剤としての疎水性ポリアミンアミド類」とする米国仮出願シリアル番号６０／６２７，０８２号（２００４年１１月１２日出願）の利益を主張し、その開示全体が本明細書中で参考として組み込まれる。
【０００２】
連邦委託研究又は振興に関する報告
本研究は、ＮＩＨ ＩＵ０１ ＡＩ０５４７８５（ＳＤ）により支持されており、米国政府は、本発明に一定の権利を有し得る。
【背景技術】
【０００３】
「エンドトキシン類」とも呼ばれるリポ多糖（ＬＰＳ）は、グラム陰性菌の外部膜の構成成分である。リポ多糖は、重病患者の主な死因である「敗血症ショック」の発病に重要な役割を担っている。リポ多糖を標的とし、下流における全身性炎症過程を抑えるための治療は、現在のところは存在しない。本発明者らは、小分子によるＬＰＳの特異的な結合及び中和に必要な活性基を定義し、かつ、敗血症の動物モデルを用いて、小分子による循環系のＬＰＳの捕捉が治療上有用な戦略であることを示した。リジン−スペルミン複合体の特定のライブラリとリポ多糖（ＬＰＳ）との相互作用が特徴付けられた。アシル又はアルキル結合中の長鎖脂肪族疎水性置換基で誘導体化されたリジニル部位のε−アミノ末端を有するリジン−スペルミン複合体などの特定のポリアミンアミドは、細菌のリポ多糖を結合及び中和し、試験結果によれば、これらは内毒素性ショック状態又は敗血症の予防又は治療に適していることが示唆される。
【０００４】
エンドトキシン類、すなわちリポ多糖類（ＬＰＳ）は、グラム陰性菌の外部膜の主要な構成要素であり（非特許文献１及び２）、身体の防御機構が弱まっていたり損傷していたりする場合、又は、重篤な全身性感染（グラム陰性敗血症）の抗生物質による化学療法の結果として起こる全身毒性の症候群である敗血症ショックにおいて、中心的な役割を担う（非特許文献３〜５）。非専門用語で「血液毒」と呼ばれるグラム陰性敗血症は、死因全体の１３番目にあたり（非特許文献６）、集中治療室での死因では１番目であり（非特許文献７）、死亡者は米国で年間２００，０００人を超える（非特許文献８）。抗微生物化学療法の著しい飛躍にもかかわらず、敗血症の発症率は１９７９〜２０００年でほぼ３倍に増加しており（非特許文献９）、敗血症関連致死率は、約４５％から実質的に変動していない。これらのいずれからも、重病患者の死亡を防ぐには、積極的な抗微生物療法のみでは不十分であり、敗血症の病理学を特に標的とした治療上の選択肢を開発する必要性が満たされておらず、また、これが急務であるということが明らかである。
【０００５】
ＬＰＳの存在は、先天的な免疫応答の広範な活性化を引き起こし（非特許文献１０及び１１）、主に単細胞／マクロファージ系の細胞により、腫瘍壊死因子α（ＴＮＦ−α）、インターロイキン−１β（ＩＬ−１β）及びインターロイキン−６（ＩＬ−６）を含む多くの炎症メディエーターの産生が制御されなくなる（非特許文献１２及び１３）。これらのメディエーターや、これ以外に、上皮細胞により産生される酸化窒素など（非特許文献１４及び１５）が過剰に産生されて、これが制御されない場合、発熱、低血圧、凝固障害、血行動態異常、組織の血流低下及び多臓器不全により特徴付けられる全身性の炎症応答が生じ（非特許文献１６及び１７）、死に至ることが多い。
【０００６】
敗血症ショックの治療は依然として主に支持的療法であり、根本的な病理を抑えるための特定の療法は、残念なことにまだ利用できない。グラム陰性敗血症の問題の治療に使用できる可能性のあるアプローチの一つは、ＬＰＳに結合してこれを捕捉する薬剤を用いてＬＰＳ自体を標的とするものである。ＬＰＳの毒性は、高度に保存された構造を有する脂質Ａと呼ばれる糖脂質成分に起因する（非特許文献２２及び２３）ということが、全体的な合成により示された（非特許文献１８〜２１）。脂質Ａは、親水性のビスホスホリル化ジグルコースアミン骨格、並びに、アミド結合及びエステル結合中の６つ（大腸菌）又は７つ（サルモネラ菌）のアシル鎖の疎水性ドメインから構成される（非特許文献２４〜２６）（図１）。脂質Ａは、アニオン性及び両親媒性であるため（図１）、正電荷を帯びていて両親媒性の性質も有する多くの物質に結合することができる。タンパク質（非特許文献２７及び２８）、ペプチド（非特許文献２９〜３３）、医薬化合物（非特許文献３４及び３５）及び他の合成ポリカチオン性両親媒性分子（非特許文献３６〜３８）を含む多くの分類のカチオン性両親媒性分子と脂質Ａとの相互作用を特徴づけに関して、過去１０年にわたって研究がなされてきた。重要なことに、これらの研究及び現在進行中の研究によって、小分子が脂質Ａを最適に認識及び中和するのに必要な活性基（非特許文献３５）は、脂質Ａ（〜約１４Å）上の２つのアニオン性リン酸基同士の間の距離と距離が等しく配置された２つのプロトン化可能な正電荷を必要とし、これにより、脂質Ａ骨格上のリン酸基と化合物上の正電荷との間にイオン性の水素結合ができるということが決定された。さらに、結合親和性の増強、及び、脂質Ａとポリアシルドメインとの疎水性相互作用により得られた複合体の安定化には、ペンダント疎水性官能基が適切に配置されていることが必要である（最近の総説による、参考文献３９を参照）。こうした構造的な要件は、新しく見出され、現在はＤＮＡトランスフェクション（リポフェクション）剤として用いられている新規分類の化合物リポポリアミンのうちの特定種において初めて同定された（非特許文献４０〜４３）。複合体化スペルミンクラスの化合物は特に関心を集めている、というのは、これらはｉｎ ｖｉｖｏにおいて活性を有していて、グラム陰性敗血症の動物モデルにおいて保護作用があり、合成によって容易に入手でき、かつ、重要なことには、生理学的置換基（スペルミン及び脂肪酸）に分解するために非毒性である（非特許文献３７及び４４）からである。
【非特許文献１】Ｒｉｅｔｓｃｈｅｌ， Ｅ． Ｔ．； Ｋｉｒｉｋａｅ， Ｔ．； Ｓｃｈａｄｅ， Ｆ． Ｕ．； Ｍａｍａｔ， Ｕ．； Ｓｃｈｍｉｄｔ， Ｇ．； Ｌｏｐｐｎｏｗ， Ｈ．； Ｕｌｍｅｒ， Ａ． Ｊ．； Ｚａｈｒｉｎｇｅｒ， Ｕ．； Ｓｅｙｄｅｌ， Ｕ．； Ｄｉ Ｐａｄｏｖａ， Ｆ．ら． Ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ： ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｓ ｏｆ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｔｏ ａｃｔｉｖｉｔｙ ａｎｄ ｆｕｎｃｔｉｏｎ． ＦＡＳＥＢ Ｊ． １９９４， ８， ２１７−２２５．
【非特許文献２】Ｒｉｅｔｓｃｈｅｌ，Ｅ．Ｔ．； Ｂｒａｄｅ，Ｌ．； Ｌｉｎｄｎｅｒ，Ｂ．； ａｎｄ Ｚａｈｒｉｎｇｅｒ，Ｕ． Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ｏｆ ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ． Ｉｎ Ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｅｎｄｏｔｏｘｉｃ ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ， ｖｏｌ．Ｉ． Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ ｃｅｌｌｕｌａｒ ｂｉｏｌｏｇｙ． Ｍｏｒｒｉｓｏｎ， Ｄ． Ｃ． ａｎｄ Ｒｙａｎ， Ｊ． Ｌ． Ｅｄｓ．； ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ： Ｂｏｃａ Ｒａｔｏｎ， １９９２； ｐｐ １−４１．
【非特許文献３】Ｈｕｒｌｅｙ， Ｊ． Ｃ． Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ−ｉｎｄｕｃｅｄ ｒｅｌｅａｓｅ ｏｆ ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ： Ａ ｒｅａｐｐｒａｉｓａｌ． Ｃｌｉｎ． Ｉｎｆｅｃｔ． Ｄｉｓ． １９９２， １５， ８４０−８５４．
【非特許文献４】Ｈｕｒｌｅｙ， Ｊ． Ｃ． Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ−ｉｎｄｕｃｅｄ ｒｅｌｅａｓｅ ｏｆ ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ． Ａ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｐａｒａｄｏｘ． Ｄｒｕｇ Ｓａｆ． １９９５， １２， １８３−１９５．
【非特許文献５】Ｐｒｉｎｓ， Ｊ． Ｍ．； ｖａｎ Ａｇｔｍａｅｌ， Ｍ． Ａ．； Ｋｕｉｊｐｅｒ， Ｅ． Ｊ．； ｖａｎ Ｄｅｖｅｎｔｅｒ， Ｓ． Ｊ．； ａｎｄ Ｓｐｅｅｌｍａｎ， Ｐ． Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ−ｉｎｄｕｃｅｄ ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ ｒｅｌｅａｓｅ ｉｎ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｇｒａｍ−ｎｅｇａｔｉｖｅ ｕｒｏｓｅｐｓｉｓ： ａ ｄｏｕｂｌｅ−ｂｌｉｎｄ ｓｔｕｄｙ ｃｏｍｐａｒｉｎｇ ｉｍｉｐｅｎｅｍ ａｎｄ ｃｅｆｔａｚｉｄｉｍｅ． Ｊ． Ｉｎｆｅｃｔ． Ｄｉｓ． １９９５， １７２， ８８６−８９１．
【非特許文献６】Ｇｅｌｆａｎｄ， Ｊ． Ａ． ａｎｄ Ｓｈａｐｉｒｏ， Ｌ． Ｃｙｔｏｋｉｎｅｓ ａｎｄ ｓｅｐｓｉｓ： ｐａｔｈｏｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ ａｎｄ ｔｈｅｒａｐｙ． Ｎｅｗ Ｈｏｒｉｚｏｎｓ １９９３， １， １３−２２．
【非特許文献７】Ｇａｓｃｈｅ，Ｙ．； Ｐｉｔｔｅｔ，Ｄ．； ａｎｄ Ｓｕｔｔｅｒ，Ｐ． Ｏｕｔｃｏｍｅ ａｎｄ ｐｒｏｇｎｏｓｔｉｃ ｆａｃｔｏｒｓ ｉｎ ｂａｃｔｅｒｅｍｉｃ ｓｅｐｓｉｓ． Ｉｎ Ｃｌｉｎｉｃａｌ ｔｒｉａｌｓ ｆｏｒ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ｓｅｐｓｉｓ． Ｓｉｂｂａｌｄ， Ｗ． Ｊ． ａｎｄ Ｖｉｎｃｅｎｔ， Ｊ． Ｌ． Ｅｄｓ．； Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ： Ｂｅｒｌｉｎ， １９９５； ｐｐ ３５−５１．
【非特許文献８】Ｃｅｎｔｅｒｓ ｆｏｒ Ｄｉｓｅａｓｅｓ Ｃｏｎｔｒｏｌ． Ｉｎｃｒｅａｓｅｓ ｉｎ ｎａｔｉｏｎａｌ ｈｏｓｐｉｔａｌ ｄｉｓｃｈａｒｇｅ ｓｕｒｖｅｙ ｒａｔｅｓ ｆｏｒ ｓｅｐｔｉｃｅｍｉａ − Ｕｎｉｔｅｄ Ｓｔａｔｅｓ， １９７９−１９８７． ＭＭＷＲ １９９０， ３９， ３１−３４．
【非特許文献９】Ｍａｒｔｉｎ， Ｇ． Ｓ．； Ｍａｎｎｉｎｏ， Ｄ． Ｍ．； Ｅａｔｏｎ， Ｓ．； ａｎｄ Ｍｏｓｓ， Ｍ． Ｔｈｅ ｅｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｙ ｏｆ ｓｅｐｓｉｓ ｉｎ ｔｈｅ Ｕｎｉｔｅｄ Ｓｔａｔｅｓ ｆｒｏｍ １９７９ ｔｈｒｏｕｇｈ ２０００． Ｎ． Ｅｎｇｌ． Ｊ． Ｍｅｄ． ２００３， ３４８， １５４６−１５５４．
【非特許文献１０】Ｕｌｅｖｉｔｃｈ， Ｒ． Ｊ． Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ ｏｆ ｉｎｎａｔｅ ｉｍｍｕｎｉｔｙ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． Ｒｅｓ． ２０００， ２１， ４９−５４．
【非特許文献１１】Ｕｌｅｖｉｔｃｈ， Ｒ． Ｊ． ａｎｄ Ｔｏｂｉａｓ， Ｐ． Ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ ｏｆ ｇｒａｍ−ｎｅｇａｔｉｖｅ ｂａｃｔｅｒｉａ ａｎｄ ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ ｂｙ ｔｈｅ ｉｎｎａｔｅ ｉｍｍｕｎｅ ｓｙｓｔｅｍ． Ｃｕｒｒ． Ｏｐｉｎ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． １９９９， １１， １９−２３．
【非特許文献１２】Ｄｉｎａｒｅｌｌｏ， Ｃ． Ａ． Ｃｙｔｏｋｉｎｅｓ ａｓ ｍｅｄｉａｔｏｒｓ ｉｎ ｔｈｅ ｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ ｏｆ ｓｅｐｔｉｃ ｓｈｏｃｋ． Ｃｕｒｒ． Ｔｏｐ． Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． １９９６， ２１６， １３３−１６５．
【非特許文献１３】Ｄｉｎａｒｅｌｌｏ， Ｃ． Ａ． Ｔｈｅ ｐｒｏｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｃｙｔｏｋｉｎｅｓ ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ−１ ａｎｄ ｔｕｍｏｒ ｎｅｃｒｏｓｉｓ ｆａｃｔｏｒ ａｎｄ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ｔｈｅ ｓｅｐｔｉｃ ｓｈｏｃｋ ｓｙｎｄｒｏｍｅ． Ｊ． Ｉｎｆｅｃｔ． Ｄｉｓ． １９９１， １６３， １１７７−１１８４．
【非特許文献１４】Ｍｅｙｅｒ， Ｊ． ａｎｄ Ｔｒａｂｅｒ， Ｄ． Ｌ． Ｎｉｔｒｉｃ ｏｘｉｄｅ ａｎｄ ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ ｓｈｏｃｋ． Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ． Ｒｅｓ． １９９２， ２６， ５５８．
【非特許文献１５】Ｗｒｉｇｈｔ， Ｃ． Ｅ．； Ｒｅｅｓ， Ｄ． Ｄ．； ａｎｄ Ｍｏｎｃａｄａ， Ｓ． Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ ａｎｄ ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ ｒｏｌｅｓ ｏｆ ｎｉｔｒｉｃ ｏｘｉｄｅ ｉｎ ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ ｓｈｏｃｋ． Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ． Ｒｅｓ． １９９２， ２６， ４８−５７．
【非特許文献１６】Ｂｏｎｅ， Ｒ． Ｃ．； Ｂａｌｋ， Ｒ． Ａ．； Ｃｅｒｒａ， Ｆ． Ｂ．； Ｄｅｌｌｉｎｇｅｒ， Ｒ． Ｐ．； Ｆｅｉｎ， Ａ． Ｍ．； Ｋｎａｕｓ， Ｗ． Ａ．； Ｓｃｈｅｉｎ， Ｒ． Ｍ．； ａｎｄ Ｓｉｂｂａｌｄ， Ｗ． Ｊ． Ｄｅｆｉｎｉｔｉｏｎｓ ｆｏｒ ｓｅｐｓｉｓ ａｎｄ ｏｒｇａｎ ｆａｉｌｕｒｅ ａｎｄ ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ｕｓｅ ｏｆ ｉｎｎｏｖａｔｉｖｅ ｔｈｅｒａｐｉｅｓ ｉｎ ｓｅｐｓｉｓ． Ｔｈｅ ＡＣＣＰ／ＳＣＣＭ Ｃｏｎｓｅｎｓｕｓ Ｃｏｎｆｅｒｅｎｃｅ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ． Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｃｈｅｓｔ Ｐｈｙｓｉｃｉａｎｓ／Ｓｏｃｉｅｔｙ ｏｆ Ｃｒｉｔｉｃａｌ Ｃａｒｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ． Ｃｈｅｓｔ １９９２， １０１， １６４４−１６５５．
【非特許文献１７】Ｂｏｎｅ， Ｒ． Ｃ． Ｔｈｅ ｓｅｐｓｉｓ ｓｙｎｄｒｏｍｅ． Ｄｅｆｉｎｉｔｉｏｎ ａｎｄ ｇｅｎｅｒａｌ ａｐｐｒｏａｃｈ ｔｏ ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ． Ｃｌｉｎ． Ｃｈｅｓｔ Ｍｅｄ． １９９６， １７， １７５−１８１．
【非特許文献１８】Ｇａｌａｎｏｓ， Ｃ．； Ｌｕｄｅｒｉｔｚ， Ｏ．； Ｒｉｅｔｓｃｈｅｌ， Ｅ． Ｔ．； Ｗｅｓｔｐｈａｌ， Ｏ．； Ｂｒａｄｅ， Ｈ．； Ｂｒａｄｅ， Ｌ．； Ｆｒｅｕｄｅｎｂｅｒｇ， Ｍ． Ａ．； Ｓｃｈａｄｅ， Ｕ． Ｆ．； Ｉｍｏｔｏ， Ｍ．； Ｙｏｓｈｉｍｕｒａ， Ｓ．； Ｋｕｓｕｍｏｔｏ， Ｓ．； ａｎｄ Ｓｈｉｂａ， Ｔ． Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ ａｎｄ ｎａｔｕｒａｌ Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ ｆｒｅｅ ｌｉｐｉｄ Ａ ｅｘｐｒｅｓｓ ｉｄｅｎｔｉｃａｌ ｅｎｄｏｔｏｘｉｃ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ． Ｅｕｒ． Ｊ． Ｂｉｏｃｈｅｍ． １９８５， １４８， １−５．
【非特許文献１９】Ｉｍｏｔｏ， Ｍ．； Ｙｏｓｈｉｍｕｒａ， Ｈ．； Ｋｕｓｕｍｏｔｏ， Ｓ．； ａｎｄ Ｓｈｉｂａ， Ｔ． Ｔｏｔａｌ ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｏｆ ｌｉｐｉｄ Ａ， ａｃｔｉｖｅ ｐｒｉｎｃｉｐｌｅ ｏｆ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ． Ｐｒｏｃ． Ｊａｐａｎ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ． １９８４， ６０， ２８５−２８８．
【非特許文献２０】Ｋｏｔａｎｉ， Ｓ．； Ｔａｋａｄａ， Ｈ．； Ｔｓｕｊｉｍｏｔｏ， Ｍ．； Ｏｇａｗａ， Ｔ．； Ｔａｋａｈａｓｈｉ， Ｉ．； Ｉｋｅｄａ， Ｔ．； Ｏｔｓｕｋａ， Ｋ．； Ｓｈｉｍａｕｃｈｉ， Ｈ．； Ｋａｓａｉ， Ｎ．； Ｍａｓｈｉｍｏ， Ｊ．； Ｎａｇａｏ， Ｓ．； Ｔａｎａｋａ， Ａ．； Ｔａｎａｋａ， Ｓ．； Ｈａｒａｄａ， Ｋ．； Ｎａｇａｋｉ， Ｋ．； Ｋｉｔａｍｕｒａ， Ｈ．； Ｓｈｉｂａ， Ｔ．； Ｋｕｓｕｍｏｔｏ， Ｓ．； Ｉｍｏｔｏ， Ｍ．； ａｎｄ Ｙｏｓｈｉｍｕｒａ， Ｈ． Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ ｌｉｐｉｄ Ａ ｗｉｔｈ ｅｎｄｏｔｏｘｉｃ ａｎｄ ｒｅｌａｔｅｄ ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｃｏｍｐａｒａｂｌｅ ｔｏ ｔｈｏｓｅ ｏｆ ａ ｎａｔｕｒａｌ ｌｉｐｉｄ Ａ ｆｒｏｍ ａｎ Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ Ｒｅ−ｍｕｔａｎｔ． Ｉｎｆｅｃｔ． Ｉｍｍｕｎ． １９８５， ４９， ２２５−２３７．
【非特許文献２１】Ｋｕｓｕｍｏｔｏ，Ｓ．； Ｋａｍｉｋａｗａ，Ｔ．； Ｋｕｒｏｓａｗａ，Ｍ．； Ｆｕｋａｓｅ，Ｋ．； Ｓｈｉｂａ，Ｔ．； Ｋｕｓａｍａ，Ｔ．； Ｓｏｇａ，Ｔ．； Ｓｈｉｏｙａ，Ｅ．； Ｎａｋａｙａｍａ，Ｋ．； Ｎａｋａｙｉｍａ，Ｈ．； Ｏｓａｄａ，Ｙ．； ａｎｄ Ｏｎｏ，Ｙ． Ｎｅｗ ｒｅｓｕｌｔｓ ｉｎ ｔｈｅ ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｏｆ ｌｉｐｉｄ Ａ ａｎｄ ｅｎｄｏｔｏｘｉｎｓ． Ｉｎ Ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｓｅｒｉｅｓ， Ｎｏｗｏｔｎｙ， Ａ．， Ｅｄ．， Ｖｏｌ． １， Ｃｅｌｌｕｌａｒ ａｎｄ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ａｓｐｅｃｔｓ ｏｆ ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ ｒｅａｃｔｉｏｎｓ． Ｎｏｗｏｔｎｙ， Ａ．， Ｓｐｉｔｚｅｒ， Ｊ． Ｊ．， ａｎｄ Ｚｉｅｇｌｅｒ， Ｅ． Ｊ． Ｅｄｓ．； Ｅｌｓｅｖｉｅｒ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ： Ａｍｓｔｅｒｄａｍ， １９９０； ｐｐ ４１−５１．
【非特許文献２２】Ｈｏｌｓｔ，Ｏ．； Ｕｌｍｅｒ，Ａ．Ｊ．； Ｂｒａｄｅ，Ｈ．； ａｎｄ Ｒｉｅｔｓｃｈｅｌ，Ｅ．Ｔ． Ｏｎ ｔｈｅ ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ ｂｉｏｌｏｇｙ ｏｆ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｅｎｄｏｔｏｘｉｃ ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ． Ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ ｏｆ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ． Ｍａｓｉｈｉ， Ｎ． Ｅｄ．； Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ， Ｉｎｃ．： Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ， Ｂａｓｅｌ， Ｈｏｎｇ Ｋｏｎｇ， １９９４； ｐｐ ２８１−３０８．
【非特許文献２３】Ｒｉｅｔｓｃｈｅｌ，Ｅ．Ｔ．； Ｗｏｌｌｅｎｗｅｂｅｒ，Ｈ．Ｗ．； Ｓｉｄｏｒｃｚｙｋ，Ｚ．； Ｚａｈｒｉｎｇｅｒ，Ｕ．； ａｎｄ Ｌｕｄｅｒｉｔｚ，Ｏ． Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｔｈｅ ｐｒｉｍａｒｙ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｏｆ ｌｉｐｉｄ Ａ． Ｉｎ Ｂａｃｔｅｒｉａｌ Ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ： Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ， Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ａｎｄ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ． Ａｎｄｅｒｓｏｎ， Ｌ． ａｎｄ Ｕｎｇｅｒ， Ｆ． Ｍ． Ｅｄｓ．； Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｓｙｍｐ．Ｓｅｒ．： Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｄ．Ｃ．， １９８３； ｐｐ １９５−２１２．
【非特許文献２４】Ｆｅｒｇｕｓｏｎ， Ａ． Ｄ．； Ｈｏｆｍａｎｎ， Ｅ．； Ｃｏｕｌｔｏｎ， Ｊ．； Ｄｉｅｄｒｉｃｈｓ， Ｋ．； ａｎｄ Ｗｅｌｔｅ， Ｗ． Ｓｉｄｅｒｏｐｈｏｒｅ−ｍｅｄｉａｔｅｄ ｉｒｏｎ ｔｒａｎｓｐｏｒｔ： Ｃｒｙｓｔａｌ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｏｆ ＦｈｕＡ ｗｉｔｈ ｂｏｕｎｄ ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ． Ｓｃｉｅｎｃｅ １９９８， ２２１５−２２２０．
【非特許文献２５】Ｋｉｒｉｋａｅ， Ｔ．； Ｓｃｈａｄｅ， Ｆ． Ｕ．； Ｚａｈｒｉｎｇｅｒ， Ｕ．； Ｋｉｒｉｋａｅ， Ｆ．； Ｂｒａｄｅ， Ｈ．； Ｋｕｓｕｍｏｔｏ， Ｓ．； Ｋｕｓａｍａ， Ｔ．； ａｎｄ Ｒｉｅｔｓｃｈｅｌ， Ｅ． Ｔ． Ｔｈｅ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ ｏｆ ｔｈｅ ｈｙｄｒｏｐｈｉｌｉｃ ｂａｃｋｂｏｎｅ ａｎｄ ｔｈｅ ｈｙｄｒｏｐｈｏｂｉｃ ｆａｔｔｙ ａｃｉｄ ｒｅｇｉｏｎｓ ｏｆ Ｌｉｐｉｄ Ａ ｏｎ ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ ｂｉｎｄｉｎｇ ａｎｄ ｃｙｔｏｋｉｎｅ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ． ＦＥＭＳ Ｉｍｍｕｎｏｌ． Ｍｅｄ． Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ． １９９４， ８， １３−２６．
【非特許文献２６】Ｋｕｓｕｍｏｔｏ，Ｓ．； Ｉｎａｇｅ，Ｍ．； Ｃｈａｋｉ，Ｈ．； Ｉｍｏｔｏ，Ｍ．； Ｓｈｉｍａｍｏｔｏ，Ｔ．； ａｎｄ Ｓｈｉｂａ，Ｔ． Ｃｈｅｍｉｃａｌ ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｏｆ ｌｉｐｉｄ Ａ ｆｏｒ ｔｈｅ ｅｌｕｃｉｄａｔｉｏｎ ｏｆ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ−ａｃｔｉｖｉｔｙ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｓ． Ｉｎ Ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ： ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ， ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ， ａｎｄ ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ． Ａｎｄｅｒｓｏｎ， Ｌ． ａｎｄ Ｕｎｇｅｒ， Ｆ． Ｍ． Ｅｄｓ．； Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｓｏｃｉｅｔｙ： １９８３； ｐｐ ２３７−２５４．
【非特許文献２７】Ｄａｖｉｄ， Ｓ． Ａ．； Ｂａｌａｒａｍ， Ｐ．； ａｎｄ Ｍａｔｈａｎ， Ｖ． Ｉ． Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ ｏｆ ｌｉｐｉｄ Ａ ａｎｄ ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ｗｉｔｈ ｈｕｍａｎ ｓｅｒｕｍ ａｌｂｕｍｉｎ： ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｆｏｒ ａｎ ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ−ｃａｒｒｉｅｒ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｆｏｒ ａｌｂｕｍｉｎ． Ｊ． Ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ． Ｒｅｓ． １９９５， ２， ９９−１０６．
【非特許文献２８】Ｄａｖｉｄ，Ｓ．Ａ． Ｔｈｅ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ ｏｆ ｌｉｐｉｄ Ａ ａｎｄ ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ｗｉｔｈ ｈｕｍａｎ ｓｅｒｕｍ ａｌｂｕｍｉｎ． Ｉｎ Ｅｎｄｏｔｏｘｉｎｓ ｉｎ ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ ｄｉｓｅａｓｅ． Ｂｒａｄｅ， Ｈ．， Ｏｐａｌ， Ｓ． Ｍ．， Ｖｏｇｅｌ， Ｓ． Ｎ．， ａｎｄ Ｍｏｒｒｉｓｏｎ， Ｄ． Ｃ． Ｅｄｓ．； Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ： Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ， １９９９； ｐｐ ４１３−４２２．
【非特許文献２９】Ｂｈａｔｔａｃｈａｒｊｙａ， Ｓ．； Ｄａｖｉｄ， Ｓ． Ａ．； Ｍａｔｈａｎ， Ｖ． Ｉ．； ａｎｄ Ｂａｌａｒａｍ， Ｐ． Ｐｏｌｙｍｙｘｉｎ Ｂ ｎｏｎａｐｅｐｔｉｄｅ： Ｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ ｉｎ ｗａｔｅｒ ａｎｄ ｉｎ ｔｈｅ ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ−ｂｏｕｎｄ ｓｔａｔｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ｂｙ ｔｗｏ−ｄｉｍｅｎｓｉｏｎａｌ ＮＭＲ ａｎｄ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｄｙｎａｍｉｃｓ． Ｂｉｏｐｏｌｙｍｅｒｓ １９９７， ４１， ２５１−２６５．
【非特許文献３０】Ｄａｖｉｄ， Ｓ． Ａ．； Ｂｈａｔｔａｃｈａｒｊｙａ， Ｓ．； Ｍａｔｈａｎ， Ｖ． Ｉ．； ａｎｄ Ｂａｌａｒａｍ， Ｐ． Ｅｌｕｃｉｄａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｏｆ ｆｒｅｅ ａｎｄ ＬＰＳ−ｂｏｕｎｄ ｐｏｌｙｍｙｘｉｎ Ｂ ｎｏｎａｐｅｐｔｉｄｅ ｉｎ ｗａｔｅｒ ｂｙ ２Ｄ−ＮＭＲ ａｎｄ ｒｅｓｔｒａｉｎｅｄ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｄｙｎａｍｉｃｓ ｍｅｔｈｏｄｓ ａｎｄ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｍｏｄｅｌｉｎｇ ｏｆ ｐｏｌｙｍｙｘｉｎ−ｌｉｐｉｄ Ａ ｃｏｍｐｌｅｘ． Ｊ． Ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ． Ｒｅｓ． １９９４， １（ｓｕｐｐｌ）， Ａ６０．
【非特許文献３１】Ｄａｖｉｄ， Ｓ． Ａ．； Ｂａｌａｒａｍ， Ｐ．； ａｎｄ Ｍａｔｈａｎ， Ｖ． Ｉ． Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ ｏｆ ｂａｓｉｃ ａｍｐｈｉｐｈｉｌｉｃ ｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅ ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌｓ， ｇｒａｍｉｃｉｄｉｎ Ｓ， ｔｙｒｏｃｉｄｉｎ ａｎｄ ｅｆｒａｐｅｐｔｉｎ， ｗｉｔｈ ｅｎｄｏｔｏｘｉｃ ｌｉｐｉｄ Ａ． Ｍｅｄ． Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ． Ｌｅｔｔ． １９９３， ２， ４２−４７．
【非特許文献３２】Ｄａｖｉｄ， Ｓ． Ａ．； Ｍａｔｈａｎ， Ｖ． Ｉ．； ａｎｄ Ｂａｌａｒａｍ， Ｐ． Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ ｏｆ ｍｅｌｉｔｔｉｎ ｗｉｔｈ ｅｎｄｏｔｏｘｉｃ ｌｉｐｉｄ Ａ． Ｂｉｏｃｈｉｍ． Ｂｉｏｐｈｙｓ． Ａｃｔａ １９９２， １１２３， ２６９−２７４．
【非特許文献３３】Ｄａｖｉｄ， Ｓ． Ａ．； Ａｗａｓｔｈｉ， Ｓ． Ｋ．； ａｎｄ Ｂａｌａｒａｍ， Ｐ． Ｔｈｅ ｒｏｌｅ ｏｆ ｐｏｌａｒ ａｎｄ ｆａｃｉａｌ ａｍｐｈｉｐａｔｈｉｃ ｃｈａｒａｃｔｅｒ ｉｎ ｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇ ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ−ｂｉｎｄｉｎｇ ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ ｉｎ ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ ｃａｔｉｏｎｉｃ ｐｅｐｔｉｄｅｓ． Ｊ． Ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ Ｒｅｓ． ２０００， ６， ２４９−２５６．
【非特許文献３４】Ｄａｖｉｄ， Ｓ． Ａ．； Ｂｅｃｈｔｅｌ， Ｂ．； Ａｎｎａｉａｈ， Ｃ．； Ｍａｔｈａｎ， Ｖ． Ｉ．； ａｎｄ Ｂａｌａｒａｍ， Ｐ． Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ ｏｆ ｃａｔｉｏｎｉｃ ａｍｐｈｉｐｈｉｌｉｃ ｄｒｕｇｓ ｗｉｔｈ ｌｉｐｉｄ Ａ： Ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｆｏｒ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｓ． Ｂｉｏｃｈｉｍ． Ｂｉｏｐｈｙｓ． Ａｃｔａ １９９４， １２１２， １６７−１７５．
【非特許文献３５】Ｄａｖｉｄ， Ｓ． Ａ．； Ｍａｔｈａｎ， Ｖ． Ｉ．； ａｎｄ Ｂａｌａｒａｍ， Ｐ． Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ ｏｆ ｌｉｎｅａｒ ｄｉｃａｔｉｏｎｉｃ ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ ｗｉｔｈ ｌｉｐｉｄ Ａ： Ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ ｒｅｑｕｉｓｉｔｅｓ ｆｏｒ ｏｐｔｉｍａｌ ｂｉｎｄｉｎｇ ａｆｆｉｎｉｔｙ． Ｊ． Ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ． Ｒｅｓ． １９９５， ２， ３２５−３３６．
【非特許文献３６】Ｄａｖｉｄ， Ｓ． Ａ．； Ａｗａｓｔｈｉ， Ｓ． Ｋ．； Ｗｉｅｓｅ， Ａ．； Ｕｌｍｅｒ， Ａ． Ｊ．； Ｌｉｎｄｎｅｒ， Ｂ．； Ｂｒａｎｄｅｎｂｕｒｇ， Ｋ．； Ｓｅｙｄｅｌ， Ｕ．； Ｒｉｅｔｓｃｈｅｌ， Ｅ． Ｔ．； Ｓｏｎｅｓｓｏｎ， Ａ．； ａｎｄ Ｂａｌａｒａｍ， Ｐ． Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ ｏｆ ａ ｐｏｌｙｃａｔｉｏｎｉｃ， ａｍｐｈｉｐｈｉｌｉｃ， ｔｅｒｍｉｎａｌｌｙ ｂｒａｎｃｈｅｄ ｏｌｉｇｏｐｅｐｔｉｄｅ ｗｉｔｈ ｌｉｐｉｄ Ａ ａｎｄ ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｄｅｅｐ ｒｏｕｇｈ ｍｕｔａｎｔ ｏｆ Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｍｉｎｎｅｓｏｔａ． Ｊ． Ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ Ｒｅｓ． １９９６， ３， ３６９−３７９．
【非特許文献３７】Ｄａｖｉｄ， Ｓ． Ａ．； Ｓｉｌｖｅｒｓｔｅｉｎ， Ｒ．； Ａｍｕｒａ， Ｃ． Ｒ．； Ｋｉｅｌｉａｎ， Ｔ．； ａｎｄ Ｍｏｒｒｉｓｏｎ， Ｄ． Ｃ． Ｌｉｐｏｐｏｌｙａｍｉｎｅｓ： ｎｏｖｅｌ ａｎｔｉｅｎｄｏｔｏｘｉｎ ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ ｔｈａｔ ｒｅｄｕｃｅ ｍｏｒｔａｌｉｔｙ ｉｎ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｓｅｐｓｉｓ ｃａｕｓｅｄ ｂｙ ｇｒａｍ−ｎｅｇａｔｉｖｅ ｂａｃｔｅｒｉａ． Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ． １９９９， ４３， ９１２−９１９．
【非特許文献３８】Ｄａｖｉｄ， Ｓ． Ａ．； Ｐｅｒｅｚ， Ｌ．； ａｎｄ Ｉｎｆａｎｔｅ， Ｍ． Ｒ． Ｓｅｑｕｅｓｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ｂｙ ｂｉｓ（ａｒｇｓ） ｇｅｍｉｎｉ ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ． Ｂｉｏｏｒｇ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ． Ｌｅｔｔ． ２００２， １２， ３５７−３６０．
【非特許文献３９】Ｄａｖｉｄ， Ｓ． Ａ． Ｔｏｗａｒｄｓ ａ ｒａｔｉｏｎａｌ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ａｎｔｉ−ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ ａｇｅｎｔｓ： ｎｏｖｅｌ ａｐｐｒｏａｃｈｅｓ ｔｏ ｓｅｑｕｅｓｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｅｎｄｏｔｏｘｉｎｓ ｗｉｔｈ ｓｍａｌｌ ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ （Ｉｎｖｉｔｅｄ Ｒｅｖｉｅｗ）． Ｊ． Ｍｏｌｅｃ． Ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ ２００１， １４， ３７０−３８７．
【非特許文献４０】Ｂｅｈｒ， Ｊ． Ｐ．； Ｄｅｍｅｎｅｉｘ， Ｂ．； Ｌｏｅｆｆｌｅｒ， Ｊ． Ｐ．； ａｎｄ Ｐｅｒｅｚ−Ｍｕｔｕｌ， Ｊ． Ｅｆｆｉｃｉｅｎｔ ｇｅｎｅ ｔｒａｎｓｆｅｒ ｉｎｔｏ ｍａｍｍａｌｉａｎ ｐｒｉｍａｒｙ ｅｎｄｏｃｒｉｎｅ ｃｅｌｌｓ ｗｉｔｈ ｌｉｐｏｐｏｌｙａｍｉｎｅ−ｃｏａｔｅｄ ＤＮＡ． Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ． ＵＳＡ １９８９， ８６， ６９８２−６９８６．
【非特許文献４１】Ｂｅｈｒ， Ｊ． Ｐ． Ｇｅｎｅ ｔｒａｎｓｆｅｒ ｗｉｔｈ ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ ｃａｔｉｏｎｉｃ ａｍｐｈｉｐｈｉｌｅｓ： Ｐｒｏｓｐｅｃｔｓ ｆｏｒ ｇｅｎｅ ｔｈｅｒａｐｙ． Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇ． Ｃｈｅｍ． １９９４， ５， ３８２−３８９．
【非特許文献４２】Ｆｅｌｇｎｅｒ， Ｐ． Ｌ．； Ｇａｄｅｋ， Ｔ． Ｒ．； Ｈｏｌｍ， Ｍ．； Ｒｏｍａｎ， Ｒ．； Ｃｈａｎ， Ｈ． Ｗ．； Ｗｅｎｚ， Ｍ．； Ｎｏｒｔｈｒｏｐ， Ｊ． Ｐ．； Ｒｉｎｇｏｌｄ， Ｇ． Ｍ．； ａｎｄ Ｄａｎｉｅｌｓｅｎ， Ｍ． Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｏｎ： ａ ｈｉｇｈｌｙ ｅｆｆｉｃｉｅｎｔ， ｌｉｐｉｄ−ｍｅｄｉａｔｅｄ ＤＮＡ ｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ ｐｒｏｃｅｄｕｒｅ． Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ． ＵＳＡ １９８７， ８４， ７４１３−７４１７．
【非特許文献４３】Ｓａｎ， Ｈ．； Ｙａｎｇ， Ｚ． Ｙ．； Ｐｏｍｐｉｌｉ， Ｖ． Ｊ．； Ｊａｆｆｅ， Ｍ． Ｌ．； Ｐｌａｕｔｚ， Ｇ． Ｅ．； Ｘｕ， Ｌ．； Ｆｅｌｇｎｅｒ， Ｊ．； Ｗｈｅｅｌｅｒ， Ｃ． Ｊ．； Ｆｅｌｇｎｅｒ， Ｐ． Ｌ．； ａｎｄ Ｇａｏ， Ｘ． Ｓａｆｅｔｙ ａｎｄ ｓｈｏｒｔ−ｔｅｒｍ ｔｏｘｉｃｉｔｙ ｏｆ ａ ｎｏｖｅｌ ｃａｔｉｏｎｉｃ ｌｉｐｉｄ ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ ｆｏｒ ｈｕｍａｎ ｇｅｎｅ ｔｈｅｒａｐｙ． Ｈｕｍ． Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒ． １９９３， ４， ７８１−７８８．
【非特許文献４４】Ｂｌａｇｂｒｏｕｇｈ， Ｉ． Ｓ．； Ｇｅａｌｌ， Ａ． Ｊ．； ａｎｄ Ｄａｖｉｄ， Ｓ． Ａ． Ｌｉｐｏｐｏｌｙａｍｉｎｅｓ ｉｎｃｏｒｐｏｒｔａｉｎｇ ｔｈｅ ｔｅｒａａｍｉｎｅ ｓｐｅｒｍｉｎｅ ｂｏｕｎｄ ｔｏ ａｎ ａｌｋｙｌ ｃｈａｉｎ ， ｓｅｑｕｅｓｔｅｒ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ． Ｂｉｏｏｒｇ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ． Ｌｅｔｔ． ２０００， １０， １９５９−１９６２．
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明者らは、エンタルピー性の水素結合／ファンデルワールス相互作用をさらに付与するであろうポリアミン骨格の構造的多様性を系統的に同定することを目的として、研究を継続している。本明細書に記載のリジン−スペルミン誘導体などのポリアミンアミドは、ポリアミン骨格の１つの末端に立体的な水素結合供与体／受容体官能基が組み込まれた化合物の群の例である。このことから、最適なエンドトキシン捕捉のためには、長鎖疎水性基が末端に配置されていることが必須であるということが確認される。また、本発明者らは、Ｌ−リジン複合体とＤ−リジン複合体とでは結合親和性及び中和効力の両方において顕著な差があることを見出した。このことは、適切な立体化学を有する水素結合供与体／受容体官能基でポリアミン骨格が繰り返し置換されることによって、非常に強力であるが毒性のないエンドトキシンの中和剤が得られるということを示唆する。本開示による、強力であるが非毒性であるエンドトキシン中和剤であるとして意図される化合物の例は、米国特許出願公開第２００３０１８７２７６ Ａ１号（米国特許出願１０／２９６，２５９号）及びＰＣＴ公開ＷＯ０２／０５３５１９ Ａ２号に開示され、これらの開示は本明細書中で参照として組み込まれる。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本開示は、下記式：
【０００９】
【化１】
【００１０】
（式中、ＸはＯ又はＨ、Ｈであり、Ｒは疎水性Ｃ１２−Ｃ２０鎖であり、Ｙは−ＮＨ２又は−Ｈである）：で表される少なくとも１つの化合物、その医薬品に許容される塩及びそのプロドラッグの有効量を、これを必要とする宿主に投与することによって、内毒素性ショック症状を治療する、又は、ＮＯ活性、ＴＮＦ−α産生、ＩＬ−６産生及びサイトカイン活性のうち少なくとも１つを阻害する方法に関する。
【００１１】
また、本開示は、Ｙが−Ｈである上記式の新規化合物、その医薬品に許容される塩及びそのプロドラッグにも関する。
【００１２】
本開示の他の目的、特徴及び利点は、以下の詳細な説明から明らかになるであろう。しかし、以下の詳細な説明及び特定の実施例は、本発明の好ましい実施形態を示しているが、これらを例証するのみであって、本開示から逸脱しない範囲で種々の改変を当然実施可能であるということが理解されるであろう。
【００１３】
（図面の簡潔な説明）
図１は、細菌のリポ多糖の毒性部位である脂質Ａの構造を示す。
【００１４】
図２は、ＢＯＤＩＰＹ−カダベリン置換法により決定される化合物のＬＰＳへの結合親和性を例示するグラフである。
【００１５】
図３は、マウスＪ７７４．Ａ１細胞における酸化窒素（ＮＯ）阻害を例示するグラフである。
【００１６】
図４は、ＮＯ阻害効力と直鎖アシル／アルキル類似体の炭素長との相関を例示するグラフである。
【００１７】
図５は、マウスＪ７７４細胞における、ＢＣ蛍光プローブ置換により決定されるＬｙｓ−スペルミン類似体の結合親和性（ＥＤ５０）と、ＮＯ阻害（ＩＣ５０）との相関を例示するグラフである。
【００１８】
図６は、グラム陰性菌から単離されたＬＰＳに対するリジン−スペルミン化合物の結合を例示する表である。
【００１９】
図７は、１０ｎｇ／ｍｌの大腸菌０１１１：Ｂ４ ＬＰＳで刺激されたヒト血液中における、選択されたＬｙｓ−スペルミン化合物の炎症性サイトカインＴＮＦ−α及びＩＬ−６の阻害を例示するグラフである。
【００２０】
図８は、本開示に関して用いられる化合物の合成のためのスキームを例示する。
【００２１】
本開示は、下記式：
【００２２】
【化２】
【００２３】
（式中、ＸはＯ又はＨ、Ｈであり、Ｒは疎水性Ｃ１２−Ｃ２０鎖であり、Ｙは−ＮＨ２又はＨである）：で表される少なくとも１つの化合物、その医薬品に許容される塩及びそのプロドラッグの有効量を、これを必要とする宿主に投与することによって、内毒素性ショック症状を治療する、又は、ＮＯ活性、ＴＮＦ−α産生、ＩＬ−６産生及びサイトカイン活性のうち少なくとも１つを阻害する方法に関する。
【００２４】
また、本開示は、Ｙが−Ｈである上記式の新規化合物、その医薬品に許容される塩及びそのプロドラッグにも関する。
【００２５】
疎水性Ｃ１２−Ｃ２０鎖の例としては、脂肪族基、アシル基、フェニルベンジル、及び、ＯＳＯ基をα位に有する基が挙げられる。脂肪族基は、飽和又はエチレン性不飽和の、直鎖、環状又は分岐鎖であってよい。本開示の方法は、敗血症、炎症及び感染を治療するのに用いることができる。
【００２６】
種々の窒素系官能基（アミノ基、ヒドロキシアミノ基、ヒドラジノ基、グアジニノ基、アミジノ基、アミド基等）を有する化合物のプロドラッグの形態としては下記のタイプの誘導体が含まれていてもよい。ここでＲ基は、それぞれ独立に、上述したような、水素、置換又は無置換のアルキル基、アリール基、アルケニル基、アルキニル基、複素環基、アルキルアリール基、アラルキル基、アラルケニル基、アラルキニル基、シクロアルキル基又はシクロアルケニル基であってもよい。
カルボキサミド、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ
カルバミン酸エステル、−ＮＨＣ（Ｏ）ＯＲ
カルバミン酸（アシルオキシ）アルキルエステル、ＮＨＣ（Ｏ）ＯＲＯＣ（Ｏ）Ｒ
エナミン、−ＮＨＣＲ（＝ＣＨＣＲＯ２Ｒ）又は−ＮＨＣＲ（＝ＣＨＣＲＯＮＲ２）
シッフ（Ｓｃｈｉｆｆ）塩基、−Ｎ＝ＣＲ２
マンニッヒ（Ｍａｎｎｉｃｈ）塩基（カルボキシイミド化合物由来）、ＲＣＯＮＨＣＨ２ＮＲ２
【００２７】
上記プロドラッグ誘導体の調製法は、種々の文献において議論されている（例えば、 Ａｌｅｘａｎｄｅｒら， Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１９８８，３１，３１８； Ａｌｉｇａｓ−Ｍａｒｔｉｎら， ＰＣＴ ＷＯ ｐｐ／４１５３１， ｐ．３０）。これらの誘導体を調製する際に変換される窒素系官能基は、本発明の化合物の窒素原子のうちの１つ（又は２つ以上）である。
【００２８】
本開示の、カルボキシル基を有する化合物のプロドラッグ型の形態にはエステル（−ＣＯ２Ｒ）が含まれ、Ｒ基は、酵素的又は加水分解的プロセスにより体内に放出される量が薬学的に許容されるレベルである任意のアルコールに相当する。
【００２９】
本開示のカルボン酸形態から誘導される他のプロドラッグは、Ｂｏｄｏｒら Ｊ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ． １９８０， ２３， ４６９に記載される第四級塩型：
【００３０】
【化３】
【００３１】
：の構造であってよい。
【００３２】
当然ながら、本発明の化合物は、上記分子に存在する可能性のある種々の原子におけるすべての光学異性体及び立体異性体に関連するということが理解される。
【００３３】
本開示の化合物は、広範囲にわたる種々の有機酸・無機酸及び有機塩基・無機塩基と共に酸付加塩及び塩基付加塩を形成し、これらの中には、薬化学において使用されることの多い生理学的に許容される塩が含まれる。このような塩もまた、本発明の一部である。上記塩を形成するために使用される典型的な無機酸には、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硝酸、硫酸、リン酸、次リン酸等が含まれる。脂肪族モノカルボン酸及びジカルボン酸、フェニル基置換アルカン酸、ヒドロキシアルカン酸及びヒドロキシアルカンジオン酸、芳香族酸、脂肪族及び芳香族スルホン酸等の有機酸由来の塩を使用することもできる。従って、上記医薬品に許容される塩には、酢酸塩、フェニル酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、アクリル酸塩、アスコルビン酸塩、安息香酸塩、クロロ安息香酸塩、ジニトロ安息香酸塩、ヒドロキシ安息香酸塩、メトキシ安息香酸塩、メチル安息香酸塩、ｏ−アセトキシ安息香酸塩、ナフタレン−２−ベンゾエート、臭化物、イソ酪酸塩、フェニル酪酸塩、β−ヒドロキシ酪酸塩、ブチン−１，４−ジオエート、ヘキシン−１，４−ジオエート、カプロン酸塩、カプリル酸塩、塩化物、珪皮酸塩、クエン酸塩、ギ酸塩、フマル酸塩、グリコール酸塩、ヘプタン酸塩、馬尿酸塩、乳酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、ヒドロキシマレイン酸塩、マロン酸塩、マンデル酸塩、メシラート、ニコチン酸塩、イソニコチン酸塩、硝酸塩、シュウ酸塩、フタル酸塩、テレフタル酸塩、リン酸塩、リン酸一水素塩、リン酸二水素塩、メタリン酸塩、ピロリン酸塩、プロピオール酸塩、プロピオン酸塩、フェニルプロピオン酸塩、サリチル酸塩、セバシン酸塩、コハク酸塩、スベリン酸塩、硫酸塩、重硫酸塩、ピロ硫酸塩、亜硫酸塩、重亜硫酸塩、スルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ−ブロモベンゼンスルホン酸塩、クロロベンゼンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、２−ヒドロキシエタンスルホン酸塩、メタンスルホン酸塩、ナフタレン−１−スルホン酸塩、ナフタレン−２−スルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、キシレンスルホン酸塩、酒石酸塩等が含まれる。
【００３４】
塩を形成するために一般に使用される塩基には、水酸化アンモニウム、並びに、アルカリ金属及びアルカリ土類金属の水酸化物、炭酸塩、さらに１級、２級及び３級の脂肪族アミン、脂肪族ジアミンが含まれる。付加塩の調製に特に有用な塩基には、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化アンモニウム、炭酸カリウム、メチルアミン、ジエチルアミン及びエチレンジアミンが含まれる。
【００３５】
リジン−スペルミン複合体の合成に用いられる方法を使用することによって、リジンのε−窒素原子の選択的官能基化及びクロマトグラフィーによる精製を過剰量の極性アミン基への暴露前に実施することができる。特に、ポリアミン複合体上において極性アミノ基をブロックする際にはＢｏｃ−カルバメートを用い、こうすることによって、以前に報告された、時間のかかるイオン交換法４５の代わりに順相ＳｉＯ２クロマトグラフィーを用いることができる。これらの類似体の合成は、図８に示すように、スペルミン１の遊離塩基を垂直状に保護された活性エステルＢｏｃ−Ｌｙｓ（Ｃｂｚ）−ＯＮｐ ２のＬ−又はＤ−立体異性体のいずれかとカップリングさせることから始まる。活性エステルをスペルミン溶液に滴下することによって、モノ−、ジ−及び未置換生成物の統計学的分布が得られる。スペルミンの残存未置換アミノ基と過剰量のＢｏｃ２Ｏとを反応させることによって、過Ｂｏｃ混合物が得られる。そして、得られた混合物を標準的なシリカゲルクロマトグラフィーにより分離することができる。次いで、精製されたモノアシル化誘導体３を接触水素化に供し、これによって、Ｃｂｚ−保護基を除去し、遊離のアミノ中間体４を得る。高Ｒｆを有するアルキル化副生成物が形成されるのを防ぐため、この水素化の間にはケトンを含有しないエタノールを使用することが望ましい。次いで、アミン４を標準的なアシル化又は還元的アルキル化により官能基化して、Ｌｙｓ−スペルミン類似体の保護形態を得る。モノアルキル誘導体については、イミンを予め形成し、次いで、ＮａＢＨ４を用いて還元する。ジアルキル化類似体３０及び３８については、過剰量のアルデヒドを、ＮａＢＨ３ＣＮでの還元的アミノ化反応で用いる。特有の官能基は、一般的な反応条件を用いて、又は、市販の供給源から合成する場合もある。誘導体化された中間体をＳｉＯ２クロマトグラフィーを用いて精製し、ＭｅＯＨ中の３Ｎ ＨＣｌを用いてＢｏｃ基を除去して、Ｌｙｓ−スペルミン類似体をそのＨＣｌ塩の形態で得る。化合物をＴＬＣ、１Ｈ及び１３Ｃ ＮＭＲ、元素分析及びＬＣ／ＭＳを用いて特徴付けした結果、全てのスペクトルは指定された構造と一致する。
【００３６】
「構造−活性の関係：結合親和性及びｉｎ ｖｉｔｒｏ中和効力」
Ｌｙｓ−スペルミン類似体の相対的結合親和性を、最近報告された４６ＢＯＤＩＰＹ−ＴＲカダベリン（ＢＣ）を用いた高処理量蛍光性置換アッセイによって検査し、プローブの５０％有効置換量（ｈａｌｆ−ｍａｘｉｍａｌ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ ｄｉｓｐｌａｃｅｍｅｎｔ）（ＥＤ５０）として図２及び表１−３に示す。マウス単細胞（Ｊ７７４．Ａ１細胞）は、ＬＰＳに暴露されるとＮＯをいくらか生成し、化合物によるＬＰＳ活性の中和を迅速に評価するためのモデルとなる。ＬＰＳを中和する化合物はＮＯ産生を用量依存的に阻害し、これより、図３及び表１−３に示すように、５０％阻害濃度（ＩＣ５０）を決定することができる。全実験において、ＬＰＳを結合及び中和することが知られているデカペプチド抗生物質であるポリミキシンＢ（ＰＭＢ）２９；４７；４８を、対照化合物として用いる。
【００３７】
＜炭化水素鎖長＞未置換ε−アミノリジンを有するリジン−スペルミン類似体５（Ｌ−Ｌｙｓ、ＥＤ５０：４０μＭ）及び６（Ｄ−Ｌｙｓ、ＥＤ５０：５８μＭ）は、置換アッセイにおいてほとんど結合を示さず、また、ＬＰＳ誘導性ＮＯ産生の阻害は無視できる程度のものである。リジンのε−アミノ基の置換から親和性が増加していることが明らかになるが（表１）、炭化水素鎖長と親和性の間に顕著な相関性はない（図４、挿入図）。対照的に、炭素鎖長の増大はＬＰＳ活性の阻害の効力に相関することが明らかである（図４）。こうした明らかな不整合は、ＬＰＳ結合ＢＣの置換が疎水性置換基に対して相対的に鈍感であることに起因しており、また、静電的相互作用に支配されている４６。このように制約される結果、ＬＰＳを単に結合するのみのリガンドと、実際にＬＰＳ活性を中和するリガンドが区別できない。見込みのある全てのリード物質もＮＯ阻害アッセイによってスクリーニングする。アルキルホモログＣ６ ３１（＞１０００μＭ）、Ｃ７ ２９（４６μＭ）、Δ１１−Ｃ１６ ２７（０．６６μＭ）及びＣ８ １７（１６０μＭ）〜Ｃ２０ ７（１．２μＭ）の一連のアシル群により示されるように、鎖長はＮＯ阻害活性において重要な決定因子であった。
【００３８】
＜鎖不飽和＞アシル鎖のトランス不飽和は、Δ９−Ｌ−Ｌｙｓ−Ｃ１６ １５（３．８μＭ）とＬ−Ｌｙｓ−Ｃ１６ １４（１１μＭ）との比較、及び、Δ１１−Ｌ−Ｌｙｓ−Ｃ１８ １０（４．２μＭ）とＬ−Ｌｙｓ−Ｃ１６ ９（１６μＭ）との比較によって示されるように、結合を増大させることが見出される。アルキルについても同様で、ｃｉｓ−不飽和Ｌ−Ｌｙｓ−Δ１１−Ｃ１６ ２７は、対応する飽和体Ｃ１６ ２６（５．６μＭ）よりもＩＣ５０が２．６μＭと高い。しかし、これはＬＰＳ中和活性の改善と比例していない；例えば、Ｌ−Ｌｙｓ−Ｃ１６ １４（ＩＣ５０：６．４μＭ）及び完全飽和体１５（ＩＣ５０：８．８μＭ）は効力が等しい。本発明者らは、不飽和類似体で観察された親和性の増大も、プローブ置換方法により人為的にもたらされたものであろうと推測するが、このことに束縛されるわけではない。一般的に不飽和化合物はその飽和ホモログよりも水溶性がわずかに大きいため、ＬＰＳ−バルク溶媒界面における局所的有効濃度が高くなり得る３４。留意すべきことに、ｉｎ ｖｉｔｒｏバイオアッセイと動物モデルとで溶解度が異なるという問題は、生理学的濃度のアルブミンが存在し、これによりＬＰＳ及びリガンドの両方が可溶化されることにより緩和される２８。従って、疎水性置換基の不飽和化は、効力の高い化合物をもたらすということは予測されていなかったが、溶解性が低い他の類似体についての溶解性増大の評価用に有用である可能性があるストラテジーとして、関心がもたれるであろう。
【００３９】
＜立体的相互作用＞短くてかさ高い置換基を有する類似体は結合が多くて鎖炭素数が多いが（例えば、（Ｓ）−（−）−シトロネラールから誘導される３２（９．６μＭ）を有するイソブチル３５（１０１μＭ）、及び、モノアルキル化メチルシクロヘキシル３７（９．８μＭ）を有するビス−アルキル化メチルシクロヘキシル ３８（４．０μＭ）（表２））、しかし、これらの化合物はいずれも、ジ−及びトリ−エーテルホモログ２４及び２５（ＩＣ５０：＞１０００ｍＭ）並びにポリエチレングリコールポリマー２３（３２０μＭ）ほど強力なＬＰＳ中和剤ではない。ビフェニル３９及び２１並びにアントラセン２２はいずれも、ＬＰＳ親和性が相当高いが（ＥＤ５０：それぞれ３．７μＭ、７．９μＭ及び７．１μＭ）、これらはＬＰＳ生物活性阻害剤としては弱い（ＩＣ５０：＞１００μＭ）。こうした結果から、最適な生物学的効力には長鎖脂肪族炭化水素置換基が必須要件であることが強調される。
【００４０】
＜Ｌｙｓ残基の立体化学＞リジンのα−炭素の立体化学が転化された場合、Ｄ−Ｌｙｓ−Ｃ１６ １３（１０μＭ）及びＬ−Ｌｙｓ−Ｃ１６ １４（１１μＭ）の立体異性対の結合親和性には影響は全く及ばないが、長鎖Ｄ−Ｌｙｓ−Ｃ１８ ８（８．８μＭ）においてはＬ−Ｌｙｓ−Ｃ１８ ９（１６μＭ）と比較して顕著な増強がみられる。このことは、ＮＯ産生の阻害においてＤ−類似体の効力がより高いということに一致する。脂質Ａ部位はキラルであり、結合様式は不斉中心の立体配置に影響され得る。
【００４１】
＜アルキル化とアシル化＞アルキル化合物は、これに対応するアシル化合物よりも結合が強い；例えば、アルキルＣ１６ ２６（５．６μＭ）とアシルＣ１６ １４（１１μＭ）とを比較されたい。このことは、上述するように、ε−アミノ基のアシル化の際にプロトン化可能な正電荷が失われ、これによって溶解性が弱まることに起因する可能性がある。
【００４２】
「ＩＣ５０とＥＤ５０との比較」
ＩＣ５０値対ＥＤ５０値のグラフは、直線傾向を示し、相関係数はＲ＝０．６４である（図５）。疎水性相互作用の強いＬＰＳ結合剤は勅製から逸れているが、これは、ＢＣ−ＬＰＳ置換アッセイでは、ＬＰＳ中和に必須であることが示された疎水性相互作用は正確に予測されないということに起因する。このことは、結合親和性が高いにも関わらず生物学的活性が顕著に低い芳香族及びかさ高い置換基についても観察され、ＩＣ５０対ＥＤ５０のグラフの左上側で塊のように見える（図５）。
【００４３】
「異なるグラム陰性菌由来のＬＰＳの比較」
脂質Ａの構造はグラム陰性菌の間でよく保存されているが、多糖ドメインはグラム陰性菌の間で非常に多様である４９；５０。Ｌｙｓ−スペルミンライブラリは、保存された脂質Ａ部分に結合するよう設計されているため、本発明者らは、異なる細菌に由来する広範囲のＬＰＳに対する結合は多様ではないと予測していた。図６に示すように、親和性が最も高いＬｙｓ−スペルミン類似体は１〜１０μＭにおいて異なる細菌由来のＬＰＳに常に結合し、相対的に弱い結合剤は、１０〜１００μＭにおいて全てのＬＰＳに結合することが示された。このことから、Ｌｙｓ−スペルミン化合物は種々のＬＰＳ構造に結合するために臨床的に有用である可能性があるということが明らかになる。
【００４４】
「多重サイトメトリックビーズアッセイにより測定される、ヒト全血中の炎症性サイトカインの用量依存的阻害」
Ｌｙｓ−スペルミン化合物がマウスマクロファージにおけるＮＯ産生の阻害に対して活性を有するということが確認されたため、これらがヒト細胞においてＬＰＳ誘導性炎症応答をも阻害するであろうということをそれぞれ確認する。Ｌｙｓ−スペルミン化合物の小集団の活性について、ＬＰＳでｅｘ ｖｉｖｏ刺激されたヒト全血中でＴＮＦ−α及びＩＬ−６の産生を阻害する能力について検査する。図７に示すように、本アッセイにおける阻害効力の順位は概してＮＯ阻害活性に並行であり、８は、対照化合物であるポリミキシンＢとほぼ同等の効力を有する。
【００４５】
「内毒素性ショックのマウスモデルにおける保護効果」
置換アッセイ、ＮＯ及びサイトカインの阻害データの結果に基づいて、動物実験において詳細に評価するために８を選択する。ＬＤ１００（致死用量−１００％）の用量を、マウス（雌、異系交配、ＣＦ−１マウス、Ｄ−ガラクトサミン８００ｍｇ／ｋｇにより感作）１匹当たり１００ｎｇであると決定する。本明細書中で報告する全ての実験において、最終容積０．２ｍＬの生理食塩水中、マウス１匹当たりの致死量を超える２００ｎｇを使用して入る。８により得られる保護の用量応答を、表４に図示する。以前の研究ではＤＯＳＰＥＲ３７などの不安定なスペルミン複合体を用いていたが、これによれば、保護の時間枠（ｗｉｎｄｏｗ）は１５分と非常に短いことが分かった。加水分解安定性が大きいのではないかと期待される化合物８について、保護の時間枠が長くなるかどうかを試験する。全てのマウスに２００ｎｇ／匹のＬＰＳを注射した時点を時間０として−６、−４、−２、０、＋１及び＋２時間で、最終容積０．２ｍＬの注射剤中の２００μｇの８を腹腔内投与する。化合物８は、ＬＰＳを投与する６時間前まで保護が顕著である（表５）。これらの結果に基づき、腹腔内投与ではなく皮下投与での経時実験を、より長い時間枠で実施する（ＬＰＳ投与の時間に対して−２４、−１６、−１２、−８、−４、０及び＋２時間）。注射部位から徐々にゆっくりと全身に吸収されるという特徴を有するこの治療計画において、長時間の保護が観察されるかどうかを確認するために試験を実施する。最後に注射して２４時間後に、致死率を再度評価する。−２４の群において５匹中２匹のマウスが生存していて、−１６、−１２及び−８の群では５匹中３匹のマウスが生存しているが（表６）、このことから、ＬＰＳ投与の１６時間前に化合物が投与される場合であっても保護は顕著であるということが示される。これらの結果から、一時的保護の時間枠がＤＯＳＰＥＲ３７よりも顕著に長いということが示される。
【００４６】
アルキル又はアシルε−置換リジン−スペルミン複合体の特定のライブラリを、炭素数が偶数で長さＣ１４〜Ｃ２０の鎖を用いて合成する。これらの類似体及びそれらの関連するＬＰＳ結合、ＮＯ阻害及びＮＦκＢ阻害活性を、表７に示す。これらのデータは、効力の高い化合物の鎖長は約Ｃ１８であるということを明らかに示す。さらに、上記データは、活性の高い化合物の鎖長はＣ１６〜Ｃ２０であるということを示す。上記データは、活性の高い化合物はアシル（Ｘ＝Ｏ）置換されていてよいということを示す。上記データは、活性の高い化合物はアルキル（Ｘ＝Ｈ、Ｈ）置換されていてよいということを示す。例示された化合物Ｌ−Ｌｙｓ−ε−（ステアロイル）−Ｎ１−スペルミン、Ｄ−Ｌｙｓ−ε−（ステアロイル）−Ｎ１−スペルミン、Ｌ−Ｌｙｓ−ε−（オクタデカニル）−Ｎ１−スペルミン及びＤ−Ｌｙｓ−ε−（オクタデカニル）−Ｎ１−スペルミンは全て、刺激されたリンパ球からのＬＰＳ誘導性ＮＦκβサイトカイン放出の予防に高い活性を示す。さらに、例示された化合物Ｌ−Ｌｙｓ−ε−（ステアロイル）−Ｎ１−スペルミン、Ｄ−Ｌｙｓ−ε−（ステアロイル）−Ｎ１−スペルミン、Ｌ−Ｌｙｓ−ε−（オクタデカニル）−Ｎ１−スペルミン及びＤ−Ｌｙｓ−ε−（オクタデカニル）−Ｎ１−スペルミンは全て、刺激されたリンパ球からのＬＰＳ誘導性ＮＯ放出の予防に高い活性を示す。
【００４７】
結果として、リジン−スペルミン複合体の特定のライブラリとグラム陰性菌リポ多糖との相互作用が特徴付けられた。アシル又はアルキル結合においてリジニル部位のε−アミノ末端が長鎖脂肪族疎水性置換基（例、Ｃ１２−Ｃ２０）で誘導体化されたリジン−スペルミン複合体は、ＬＰＳの脂質Ａ部位に結合し、その毒性を中和する。長鎖脂肪族疎水性官能基の存在は、生物学的活性にとって重要であるようである。これらの化合物の合成において、偏在する非毒性部分構造（スペルミン、リジン及び長鎖脂肪酸）を使用すれば全身毒性が低いことが予測されるため、内毒素性ショック状態の予防又は治療を意図した新規治療剤を提供する際に望ましい。
【発明を実施するための最良の形態】
【００４８】
以下の実施例は本開示をさらに例示するためのものであるが、これらに限定されない。
【００４９】
（実施例１）＜一般的な合成方法＞化学試薬及び出発原料の供給源はすべて入手可能な最上級グレードのものであり、それ以上さらに精製することなく使用する。薄層クロマトグラフィー分析及びカラムクロマトグラフィーは、メルク Ｆ２５４シリカゲルプレート及びベーカー（Ｂａｋｅｒ）４０μｍフラッシュクロマトグラフィー・パッキングをそれぞれ使用して実施する。ＴＬＣ分析は、以下の溶媒系を用いて、ニンヒドリン染色による検出で実施する：ａ）ヘキサン／酢酸エチル／メタノール ４８：４８：４； ｂ）２−プロパノール／ピリジン／氷酢酸／Ｈ２Ｏ、４：１：１：２；ｃ）ＣＨＣｌ３／ＭｅＯＨ／ＮＨ４ＯＨ ８５：１５：１。ＬＣ／ＭＳ分析は、２１５リキッドハンドラーに連結させたＧｉｌｓｏｎ ３２２ ＨＰＬＣシステムを用いて実施する。これらの極性分子は、０．０５％ヘプタフルオロ酪酸を移動相中でイオン対試薬として用いることによって、Ｃ−１８逆相ＨＰＬＣ媒体上で容易に保持できる。こうすることによって、化合物を誘導体化していない状態で分析できる。
【００５０】
ＥＳＩ＋モード（ｍ／ｚ範囲が１４０〜１６００ａｍｕ）で作動するＦｉｎｎｉｇａｎ ＡＱＡ及びＡｇｉｌｅｎｔ １１００シリーズＤＡＤ検出器（ＵＶ範囲が２２０〜３２０ｎｍ）によって、検出を実施する。２％〜１００％ ＣＨ３ＣＮ水溶液（いずれも、０．０５％ヘプタフルオロ酪酸を揮発性イオン対試薬として添加済み）を用いて、２〜７分での勾配溶出を実施する。１Ｈ及び１３Ｃ ＮＭＲスペクトルを、それぞれ５００ＭＨｚ及び１２５．８ＭＨｚで、ワシントン大学（シアトル）のＢｒｕｃｋｅｒ ＷＭ５００分光器にて記録する。１Ｈ ＮＭＲシグナルは、ｓはシングレット、ｄはダブレットであり、ｔはトリプレットであり、特に示さない場合は概してマルチプレットである。化学シフトは、外部３−（トリメチルシリル）−１−プロパンスルホン酸ナトリウム塩に対してのものである。
【００５１】
リジン−スペルミン複合体の合成方法においては、リジンのε−窒素原子の選択的官能基化及びクロマトグラフィーによる精製を過剰な極性を有するアミン基への暴露前に実施することができる。特に、ポリアミン複合体上において極性アミノ基をブロックする際にはＢｏｃ−カルバメートを用い、こうすることによって、以前に報告された、時間のかかるイオン交換法５１の代わりに順相ＳｉＯ２クロマトグラフィーを用いることができる。これらの類似体の合成は、スペルミン１の遊離塩基を垂直状に保護されたＢｏｃ−Ｌｙｓ（Ｃｂｚ）−ＯＮｐ活性エステル２のＬ−又はＤ−立体異性体のいずれかとカップリングさせることから始まる。活性エステルをスペルミン溶液に滴下することによって、モノ−、ジ−及び未置換生成物の統計学的分布が得られる。スペルミンの残存未置換アミノ基と過剰量のＢｏｃ２Ｏとを反応させることによって、過Ｂｏｃ混合物が得られる。そして、得られた混合物を標準的なシリカゲルクロマトグラフィーにより分離することができる。
【００５２】
次いで、精製されたモノアシル化誘導体３を接触水素化に供し、これによって、Ｃｂｚ−保護基を除去し、遊離のアミノ中間体４を得る。高Ｒｆを有するアルキル化副生成物が形成されるのを防ぐため、この水素化の間にはケトンを含有しないエタノールを使用することが望ましい。次いで、アミン４を標準的なアシル化又は還元的アルキル化により官能基化して、類似体５の保護形態を得る。モノアルキル誘導体については、イミンを予め形成し、次いで、ＮａＢＨ４を用いて還元する。ジアルキル化類似体３０及び３８については、過剰量のアルデヒドを、ＮａＢＨ３ＣＮでの還元的アミノ化反応で用いる。特有の官能基は、一般的な反応条件を用いて、又は、市販の供給源から合成する場合もある。誘導体化された中間体５をＳｉＯ２クロマトグラフィーを用いて精製する。ＭｅＯＨ中の３Ｎ ＨＣｌを用いてＢｏｃ基を除去して、所望の物質をそのＨＣｌ塩の形態で得る。化合物をＴＬＣ、１Ｈ及び１３Ｃ ＮＭＲ、元素分析及びＬＣ／ＭＳを用いて特徴付けした結果、全てのスペクトルは指定された構造と一致する。
【００５３】
（実施例２）
＜前駆体化合物の合成方法＞
ＢｏＣ−Ｌ−Ｌｙｓ（ＣｂＺ）−Ｎ１−スペルミン−Ｂｏｃ３（３）
ＭｅＯＨ（２００ｍＬ）中のスペルミン１（１１．３０ｇ、１．４当量、遊離塩基形態）を撹拌している中に、ＭｅＯＨ（２００ｍＬ）中の活性エステル２（２０．０ｇ、４０ｍｍｏｌｅ）を、室温にて１．５時間にわたって滴下する。滴下後、ＴＬＣ分析（ｂ）によって、予測された生成物の混合物が形成されたことが示される（二置換の副生成物 Ｒｆ＝０．７６；モノ置換の所望の生成物 Ｒｆ＝０．５０、及び、未置換のスペルミン Ｒｆ＝０．０８）。最適な比が得られない場合には、ＭｅＯＨ中の活性エステルをさらに滴下する。２時間撹拌した後、溶媒を蒸発させて、黄色の固体を得、これをＴＨＦ（３００ｍＬ）及びＨ２Ｏ（１００ｍＬ）中に懸濁させる。ジ−ｔｅｒｔ−ブチルカーボネート（４３．５ｇ， ５．０当量）をテトラヒドロフラン（５０ｍＬ）に溶解した溶液を、室温にて添加する。１０％Ｎａ２ＣＯ３溶液を用いて、ｐＨを周期的に約１０に調整する。１０分後、沈殿物が観察される。１８時間撹拌した後、ＴＬＣ分析（ａ）によって、予測された生成物の混合物が形成されたことが示される（溶出の順は上記したものと逆にした）。大部分のＴＨＦを真空下で除去する。得られた混合物を、ＥｔＯＡｃ（４００ｍＬ）及びＨ２Ｏ（４００ｍＬ）に溶解する。有機層を除去し、水層をＥｔＯＡｃ（３×４００ｍＬ）で再抽出する。有機層を合わせて、０．１Ｎ氷冷ＨＣｌ（２×２５０ｍＬ）で洗浄し、続いて食塩水で洗浄する。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、ろ過して濃縮し、粗製の油を得、これを、０％、２％、３％、４％及び５％ ＭｅＯＨ（それぞれ１Ｌ）を含むヘキサン／ＥｔＯＡｃ（１：１）で段階的に溶出するシリカゲルクロマトグラフィー（カラム面積８×１７ｃｍ）によって精製する。溶出の順番は、Ｂｏｃ４−スペルミン（収率２５％（スペルミンは、酸脱保護及び遊離塩基への転化後に回収することができる））、所望のモノ置換Ｂｏｃ−Ｌｙｓ（Ｃｂｚ）−スペルミン−Ｂｏｃ３ ３（１９．４ｇ、収率５６％）、及び、最後に溶出するのは二置換副生成物である。所望の生成物の１Ｈ ＮＭＲから、これがシス−及びトランスカルバメートロートマー（ｒｏｔｏｍｅｒ）の混合物であることが示される。これをさらに特徴付けることなく次の反応に用いる。
【００５４】
（実施例３）
Ｂｏｃ−Ｌ−Ｌｙｓ−Ｎ１−スペルミン−Ｂｏｃ３（４）
ＥｔＯＨ（２００ｍＬ、ケトン及びアルデヒド非含有ＥｔＯＨ）中の垂直状に保護されたリジン−スペルミン複合体３（１９．４ｇ、２２．５ｍｍｏｌｅ）を丸底フラスコ内で撹拌している中に、活性炭素−１０重量％パラジウム（１０．０ｇ）を添加する。反応用フラスコにＨ２を３回通気し、次いで、５ｐｓｉのＨ２圧力下に置く。室温で４．０時間撹拌した後、ＴＬＣ分析（ｃ）によって反応の完了が示される。過剰量の活性炭を混合物に添加し、Ｃｅｌｉｔｅのパッドでろ過することによって触媒を除去する。このパッドをＥｔＯＨ（２×５０ｍＬ）で洗浄し、ろ液を合わせて蒸発させ、４を白色泡状物として量的収率で得る。上記ＴＬＣシステムで評価した後、この生成物を次の実施例に直接用いる。
【００５５】
（実施例４）
＜代表的なアシル化反応＞
Ｌ−Ｌｙｓ（パルミトイル）−Ｎ１−スペルミン（１４）
アミン前駆体４（９．６６ｇ，１３．２２ｍｍｏｌ）に、Ｅｔ３Ｎ（５．５ｍＬ、３．０当量）及び無水ＣＨ２Ｃｌ２（１００ｍＬ）を、アルゴン雰囲気下、シリンジで添加する。得られる溶液を氷浴中で０℃に冷却し、塩化パルミトイル（６．０ｍＬ、１．５当量）をシリンジで添加する。アルゴン雰囲気で一晩撹拌した後、ＴＬＣ分析（ｃ）によって、予測された生成物が形成されたことが示される。この溶液を、ＣＨ２Ｃｌ２（１００ｍＬ）及びＨ２Ｏ（１００ｍＬ）中で希釈する。有機層を除去し、水層を２回、ＣＨ２Ｃｌ２（２×１００ｍＬ）で抽出する。有機層を合わせて０．１Ｎ氷冷ＨＣｌ（１００ｍＬ）で洗浄し、次いで食塩水で洗浄して、ＭｇＳＯ４で乾燥させてろ過し、濃縮して粗製油を得る。これを、０％、２％、３％、４％、５％及び６％ ＭｅＯＨ（それぞれ５００ｍＬ）を含むヘキサン／ＥｔＯＡｃ（１：１）で段階的に溶出するシリカゲルクロマトグラフィー（カラム面積８×１７ｃｍ）によって精製し、Ｂｏｃ保護された生成物１３を透明な油（６．４８ｇ、５１％）として得る。ＭｅＯＨ（５０ｍＬ）中で上記生成物（６．４８ｇ、６．６８ｍｍｏｌ）を撹拌し、これを６Ｎ ＨＣｌ（５０ｍＬ）を用いて室温で処理することにより、保護基を除去する。ＴＬＣ分析を３時間実施することによって（ｂ）、反応の完了が示される。溶媒を蒸発させて、所望の生成物１４をその４ＨＣｌ塩の形態で、白色固体（４．７８ｇ、１００％）として得る。ＴＬＣ分析（ｂ）；Ｒｆ＝０．１９．１Ｈ ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，δ）：３．９３（１Ｈ），３．４５（１Ｈ），３．０３（１３Ｈ），２．１２（２Ｈ），２．０２（２Ｈ），１．８５（４Ｈ），１．７５（ｓ，４Ｈ），１．４３（４Ｈ），１．３２（２Ｈ），１．１１（２４Ｈ），０．７２（ｔ，３Ｈ）．１３Ｃ ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，ｐｐｍ）：１７５．７， １６９．８， ５３．４， ４６．７（ｍ）， ４５．２， ４４．６， ３８．８， ３６．５， ３６．１， ３１．９， ３０．４， ３０．０（ｍ）， ２９．９（ｍ）， ２９．６（ｍ）， ２９．４， ２８．２， ２５．７， ２５．５， ２３．６， ２２．８， ２２．７， ２２．３， ２１．７， １３．８． ＬＣ／ＭＳ（保持時間、７．２分）、計算値Ｃ３２Ｈ６８Ｎ６Ｏ２ ｍ／ｚ ５６８、実測値５６９（ＭＨ＋）。分析（Ｃ３２Ｈ７２Ｃｌ４Ｎ６Ｏ２）Ｃ、Ｈ、Ｎ。
【００５６】
（実施例５）
＜代表的なモノアルキル化反応＞
Ｌ−Ｌｙｓ（３，３−ジメチル−ｌ−ブタン）−Ｎ１−スペルミン（１８）
無水ＣＨ２Ｃｌ２ ５ｍＬ中のアミン４ ０．５８ｇ（０．８２ｍｍｏｌ）に、アルゴン下、トリメチルオルトギ酸０．２７ｍＬ（３当量）、Ｅｔ３Ｎ ０．１７ｍＬ（１．５当量）及び３，３−ジメチルブチルアルデヒド０．３１ｍＬ（３当量）を添加する。得られた溶液を室温で２時間撹拌すると、溶媒が蒸発する。油状の残渣を、ＣＨ３ＯＨ ５ｍＬ中に溶解し、ＮａＢＨ４ ７０ｍｇ（２当量）を添加する。２時間後、溶媒が蒸発し、０．０１Ｎ ＨＣｌとＣＨ２Ｃｌ２（それぞれ５０ｍＬ）との間で残渣を分ける。ＣＨ２Ｃｌ２部分を追加して水部分を洗浄し、有機層を合わせて食塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させて蒸発させ、粗製油０．６４ｇを得る。ＣＨＣｌ３／ＭｅＯＨ／濃ＮＨ４ＯＨ（９６：４：０．２）を用いるカラムクロマトグラフィーにより、保護された純粋な生成物０．３１ｇ（収率６４％）を得る。これをＣＨ３ＯＨ ３ｍＬに溶解し、６Ｎ ＨＣｌ ３ｍＬを用いて、室温で３時間処理する。蒸発により、０．２４ｇ（収率９６％）の１８を白色固体として得る。ＴＬＣ分析（ｂ）；Ｒｆ＝０．２１．１Ｈ ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，δ）：３．９５（１Ｈ），３．３１（２Ｈ），３．０５（１４Ｈ），２．０４（２Ｈ），１．８８（４Ｈ），１．７１（６Ｈ），１．５３（２Ｈ），１．４１（２Ｈ），０．８８（９Ｈ）．ＬＣ／ＭＳ（保持時間、６．１分）、計算値Ｃ２２Ｈ５０Ｎ６Ｏ ｍ／ｚ ４１４、実測値４１５（ＭＨ＋）。分析（Ｃ２２Ｈ５５Ｃｌ５Ｎ６Ｏ ０．５Ｈ２Ｏ）Ｃ、Ｈ、Ｎ。
【００５７】
（実施例６）
＜代表的なジアルキル化反応＞
Ｌ−Ｌｙｓ−ε−（ビス−（ｎ−へプチル））−Ｎ１−スペルミン（３０）
アミン４ ０．２２ｇ（０．３０ｍｍｏｌ）、ｎ−ヘプタナール０．４２ｍＬ（３ｍｍｏｌ、１０当量）及びＣＨ３ＯＨ １０ｍＬ中のＮａＢＨ３ＣＮ ０．１９ｇ（３ｍｍｏｌ、１０当量）を含む溶液を、氷酢酸（５滴）で処理する。試験紙で測定したところ、ｐＨは４である。一晩撹拌した後、溶媒を蒸発させ、１Ｎ ＮａＯＨとＣＨ２Ｃｌ２（それぞれ５０ｍＬ）との間で残渣を分ける。ＣＨ２Ｃｌ２を追加して水層を洗浄し、有機層を合わせて食塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させて蒸発させ、粗製生成物０．３３ｇを得る。ＣＨＣｌ３／ＭｅＯＨ／濃ＮＨ４ＯＨ（９６：４：０．２）を用いるカラムクロマトグラフィーにより、保護された純粋な生成物０．２０ｇ（収率７１％）を得る。これをＣＨ３ＯＨ １ｍＬに溶解し、６Ｎ ＨＣｌ １ｍＬを用いて室温で３時間処理する。蒸発により、０．１１ｇ（収率７３％）の３０を白色固体として得る。ＴＬＣ分析（ｂ）、Ｒｆ＝０．２１．１Ｈ ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，δ）：３．９３（ｔ，１Ｈ），３．２８（２Ｈ），３．０４（１６Ｈ），２．０２（２Ｈ），１．８５（４Ｈ），１．７１（ｓ，４Ｈ），１．６２（６Ｈ），１．４０（４Ｈ），１．２５（１４Ｈ），０．８１（ｔ，６Ｈ）．１３Ｃ ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，ｐｐｍ）：１７５．７， １６９．８， ５３．４， ４６．７（ｍ）， ４５．２， ４４．６， ３８．８， ３６．５， ３６．１， ３１．９， ３０．４， ３０．０（ｍ）， ２９．９（ｍ）， ２９．６（ｍ）， ２９．４， ２８．２， ２５．７， ２５．５， ２３．６， ２２．８， ２２．７， ２２．３， ２１．７， １３．８． ＬＣ／ＭＳ（保持時間、７．３分）、計算値Ｃ３２Ｈ６８Ｎ６Ｏ２ ｍ／ｚ ５６８、実測値５６９（ＭＨ＋）。
【００５８】
（実施例７）
＜代表的な個々の類似体＞
Ｌ−Ｌｙｓ−Ｎ１−スペルミン（５）１
ＴＬＣ分析（ｂ）；Ｒｆ＝０．０４。ＬＣ／ＭＳ（保持時間、５．５分），計算値 Ｃ１６Ｈ３８Ｎ６Ｏ ｍ／ｚ ３３０、実測値 ３３１（ＭＨ＋）。
【００５９】
Ｄ−Ｌｙｓ−Ｎ１−スペルミン（６）
類似体６の合成は、１４の合成に用いられる垂直状に保護されたリジン誘導体の代わりに、Ｂｏｃ−Ｄ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＮｐを用いる。スペルミンとのカップリング、次いで残存するアミノ基のそれらのＢｏｃ−カルバメートとしての保護により、保護された中間体を得、次いでカラムクロマトグラフィーにより精製する。ＣＨ３ＯＨ中の６Ｎ ＨＣｌ を使用して脱保護することによって、所望の生成物６を得る。ＴＬＣ分析（ｂ）；Ｒｆ＝０．０４．１Ｈ ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，δ）：３．９２（ｔ，１Ｈ），３．２９（２Ｈ），３．０７（１０Ｈ），２．９３（ｔ，２Ｈ），２．０４（２Ｈ），１．８４（４Ｈ），１．７２（４Ｈ），１．５４（２Ｈ），１．３４（２Ｈ）．１３Ｃ ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，ｐｐｍ）：１６８．７， ５２．２， ４５．８（ｍ）， ４４．２， ４３．６， ４０．０， ３７．８， ３５．４（ｍ）， ２９．０， ２５．４， ２４．６， ２２．６， ２１．８（ｍ）， ２０．２． ＬＣ／ＭＳ（保持時間、５．５分）、計算値 Ｃ１６Ｈ３８Ｎ６Ｏ ｍ／ｚ ３３０， 実測値 ３３１（ＭＨ＋）。ＨＲＭＳ ｍ／ｚ 計算値Ｃ１６Ｈ３８Ｎ６Ｏ（Ｍ＋Ｈ）３３１．３１８５、実測値３３１．３１７３。
Ｌ−Ｌｙｓ−ε−（エイコサノイル）−Ｎ１−スペルミン（７）
ＴＬＣ分析（ｂ）；Ｒｆ＝０．０８．１Ｈ ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，δ）：３．９４（１Ｈ），３．４８（１Ｈ），３．０６（１３Ｈ），２．１５（２Ｈ），２．０６（２Ｈ），１．８８（４Ｈ），１．７５（４Ｈ），１．４７（４Ｈ），１．３６（２Ｈ），１．１６（３２Ｈ），０．７７（３Ｈ）．１３Ｃ ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，ｐｐｍ）：１７５．５， １６９．８， ５３．４， ４６．９（ｍ）， ４５．６， ４４．８， ３８．８， ３６．８（ｍ）， ３６．０， ３１．９， ３０．４， ２９．７（ｍ）， ２９．５， ２９．３， ２８．５， ２５．９， ２５．７， ２３．８， ２３．２， ２３．１， ２２．８， ２１．７， １３．８． ＬＣ／ＭＳ（保持時間、７．６分）、計算値Ｃ３６Ｈ７６Ｎ６Ｏ２ ｍ／ｚ ６２５ 、実測値６２６（ＭＨ＋）。
【００６０】
Ｄ−Ｌｙｓ−ε−（ステアロイル）−Ｎ１−スペルミン（８）
ＴＬＣ分析（ｂ）；Ｒｆ＝０．１３．１Ｈ ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，δ）：３．９４（１Ｈ），３．４７（１Ｈ），３．０６（１３Ｈ），２．１３（２Ｈ），２．０４（２Ｈ），１．８７（４Ｈ），１．７５（４Ｈ），１．４７（４Ｈ），１．３６（２Ｈ），１．１６（２８Ｈ），０．７９（３Ｈ）．１３Ｃ ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，ｐｐｍ）： １７５．９， １７０．１， ５３．４， ４７．１（ｍ）， ４５．５， ４４．７， ３９．０， ３６．８（ｍ）， ３６．０， ３１．９， ３０．６， ２９．８（ｍ）， ２９．６， ２９．３， ２８．４， ２５．９， ２５．７， ２３．８， ２３．２， ２３．１， ２２．８， １３．８． ＬＣ／ＭＳ（保持時間、７．４分）、計算値Ｃ３２Ｈ６８Ｎ６Ｏ２ ｍ／ｚ ５９７、実測値５９８（ＭＨ＋）。
【００６１】
Ｌ−Ｌｙｓ−ε−（ステアロイル）−Ｎ１−スペルミン（９）
ＬＣ／ＭＳ（保持時間、７．４分）、計算値Ｃ３４Ｈ７２Ｎ６Ｏ２ ｍ／ｚ ５９７、実測値５９８（ＭＨ＋）。
【００６２】
Ｌ−Ｌｙｓ−ε−（ヘプタデカノイル）−Ｎ１−スペルミン（１１）
ＴＬＣ分析（ｂ）； Ｒｆ＝０．１９．１Ｈ ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，δ）：３．９６（１Ｈ），３．４７（１Ｈ），３．０８（１３Ｈ），２．１４（２Ｈ），２．０４（２Ｈ），１．８７（４Ｈ），１．７８（４Ｈ）， １．５０（４Ｈ），１．３６（２Ｈ），１．２２（２６Ｈ），０．７８（３Ｈ）．１３Ｃ ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，ｐｐｍ）：１７５．７， １６９．９， ５３．２， ４７．２（ｍ）， ４５．４， ４４．８， ３９．０， ３６．６（ｍ）， ３６．１， ３１．９， ２９．９（ｍ）， ２９．５， ２９．３， ２８．４， ２５．８， ２５．７， ２３．８， ２２．６， ２２．５， ２２．２， ２２．０， １４．８． ＬＣ／ＭＳ（保持時間、７．２分）、計算値Ｃ３３Ｈ７０Ｎ６Ｏ２ ｍ／ｚ ５８３、実測値５８４（ＭＨ＋）。
【００６３】
Ｌ−Ｌｙｓ−ε−（ヘキサデカンスルホンアミド）−Ｎ１−スペルミン（１２）
１Ｈ ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，δ）：４．０４（１Ｈ），３．５３（１Ｈ），３．３０（１Ｈ），３．２２（２Ｈ），３．１７（１４Ｈ），２．１８（２Ｈ），２．００（４Ｈ），１．８２（６Ｈ），１．６７（２Ｈ），１．５２（４Ｈ），１．３４（２２Ｈ），０．９５（ｔ，３Ｈ）． ＬＣ／ＭＳ（保持時間、７．３分）、計算値Ｃ３２Ｈ７０Ｎ６Ｏ３Ｓ ｍ／ｚ ６１９、実測値６２０（ＭＨ＋）。
【００６４】
Ｄ−Ｌｙｓ−ε−（パルミトイル）−Ｎ１−スペルミン（１３）
ＴＬＣ分析（ｂ）；Ｒｆ＝０．２１．１Ｈ ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，δ）：３．９４（１Ｈ），３．４７（１Ｈ），３．０６（１３Ｈ），２．１３（２Ｈ），２．０４（２Ｈ），１．８７（４Ｈ）， １．７５（４Ｈ），１．４７（４Ｈ），１．３６（２Ｈ），１．１６（２４Ｈ），０．７８（３Ｈ）．１３Ｃ ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，ｐｐｍ）：１７５．７， １６９．８， ５３．４， ４７．２（ｍ）， ４５．６， ４４．８， ３９．０， ３６．６（ｍ）， ３６．１， ３１．９， ２９．８（ｍ）， ２９．６， ２９．３， ２８．４， ２５．９， ２５．７， ２３．８， ２２．８， ２３．１， ２２．８， ２２．１， １４．０． ＬＣ／ＭＳ（保持時間、７．２分）、計算値Ｃ３２Ｈ６８Ｎ６Ｏ２ ｍ／ｚ ５６９、実測値５７０（ＭＨ＋）。
【００６５】
Ｌ−Ｌｙｓ−ε−（ミリストイル）−Ｎ１−スペルミン（１６）
ＴＬＣ分析（ｂ）；Ｒｆ＝０．２２．１Ｈ ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，δ）：３．９２（１Ｈ），３．２７（２Ｈ），３．０３（１４Ｈ），２．１２（２Ｈ），２．０７（４Ｈ），１．８３（４Ｈ），１．６６（６Ｈ），１．４８（４Ｈ），１．２０（２０Ｈ），０．７８（３Ｈ）． ＬＣ／ＭＳ（保持時間、７．０分）、計算値Ｃ３０Ｈ６４Ｎ６Ｏ２ ｍ／ｚ ５４１、実測値５４２（ＭＨ＋）。
【００６６】
Ｌ−Ｌｙｓ−ε−（オクタノイル）−Ｎ１−スペルミン（１７）
ＴＬＣ分析（ｂ）；Ｒｆ＝０．２０。ＬＣ／ＭＳ（保持時間、５．７分）、計算値Ｃ２１Ｈ４６Ｎ６Ｏ２ ｍ／ｚ ４１４、実測値４１５（ＭＨ＋）。
【００６７】
Ｄ−Ｌｙｓ−ε−（イソプロピル）−Ｎ１−スペルミン（１８）
ＴＬＣ分析（ｂ）；Ｒｆ＝０．２４．１Ｈ ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，δ）：３．９０（１Ｈ），３．２８（３Ｈ），３．０５（１３Ｈ），２．４０（１Ｈ），２．０２（２Ｈ），１．８２（４Ｈ）， １．７１（ｓ，２Ｈ），１．４７（２Ｈ），１．２８（２Ｈ），０．９９（６Ｈ）．１３Ｃ ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，ｐｐｍ）：１８０．８， １７５．８， ５３．２， ４７．０（ｍ）， ４５．２， ４４．６， ３８．６， ３６．４（ｍ）， ３５．１， ３０．４， ２８．１， ２５．７， ２３．８， ２９．４， ２２．８（ｍ）， ２１．６， １８．９． ＬＣ／ＭＳ（保持時間、５．５分）、計算値Ｃ２０Ｈ４４Ｎ６Ｏ２ ｍ／ｚ ４００、実測値４０１（ＭＨ＋）。
【００６８】
Ｄ−Ｌｙｓ−ε−（２−ノルボルネンアセトイル）−Ｎ１−スペルミン（２０）
ＴＬＣ分析（ｂ）；Ｒｆ＝０．２２．１Ｈ ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，δ）：３．８８（１Ｈ），３．２４（２Ｈ），３．０５（１３Ｈ），２．０２（４Ｈ），１．８０（４Ｈ），１．６８（４Ｈ），１．３３（８Ｈ），０．９８（５Ｈ）． ＬＣ／ＭＳ（保持時間、６．０分）、計算値Ｃ２５Ｈ５０Ｎ６Ｏ２ ｍ／ｚ ４６６、実測値４６７（ＭＨ＋）。
【００６９】
Ｄ−Ｌｙｓ−ε−（４−ビフェニルカルボキサミド）−Ｎ１−スペルミン（２１）
ＴＬＣ分析（ｂ）；Ｒｆ＝０．１３．１Ｈ ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，δ）：７．７７（６Ｈ），７．４３（３Ｈ），３．８７（１Ｈ），３．４８（２Ｈ），３．１６（２Ｈ），２．９５（１０Ｈ）， １．９４（２Ｈ），１．８３（２Ｈ），１．７２（２Ｈ），１．６２（６Ｈ），１．３４（２Ｈ）． ＬＣ／ＭＳ（保持時間、６．３分）、計算値Ｃ２９Ｈ４６Ｎ６Ｏ２ ｍ／ｚ ５１１、実測値 ５１２（ＭＨ＋）。
【００７０】
（実施例７）
Ｌ−Ｌｙｓ−ε−（４−（１−ピレン）−ブタノイル）−Ｎ１−スペルミン（２２）
類似体２２の合成は、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ社（オレゴン州ユージーン）から入手した１−ピレンブタン酸スクシンイミジルエステル（カタログ番号Ｐ−１３０）でのアシル化による。ＴＬＣ分析（ｂ）；Ｒｆ＝０．１５．１Ｈ ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，δ）：７．３４（ｄ，１Ｈ），７．２２（３Ｈ），７．０８（２Ｈ），６．９８（２Ｈ），６．８８（ｄ， １Ｈ），３．７４（ｔ，１Ｈ），３．１８（１Ｈ），３．０１（４Ｈ），２．９３（２Ｈ），２．８６（１Ｈ），２．７７（１Ｈ），２．７２（２Ｈ），２．６５（２Ｈ），２．５６（１Ｈ），２．４０（２Ｈ），１．９７（２Ｈ），１．７３（２Ｈ），１．６８（２Ｈ），１．５４（６Ｈ），１．４０（２Ｈ），０．９８（４Ｈ）． ＬＣ／ＭＳ（保持時間、６．６分）、計算値Ｃ３６Ｈ５２Ｎ６Ｏ２ ｍ／ｚ ６０１、実測値６０２（ＭＨ＋）。
【００７１】
（実施例８）
Ｌ−Ｌｙｓ−ε−（メチルポリエチレングリコールプロピオニル）−Ｎ１−スペルミン（２３）
ε−窒素原子をアシル化するのに用いる活性エステルは、Ｎｅｋｔａｒ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓから入手したｍＰＥＧ−ＳＰＡ（分子量２０００）（カタログ番号２Ｍ４ＭＯＤＯ１）である。ＴＬＣ分析（ｂ）；Ｒｆ＝０．２４．１Ｈ ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，δ）：３．８０（１Ｈ），３．５０（ｌａｒｇｅ ＯＣＨ２ ｅｎｖｅｌｏｐｅ），３．４２（６Ｈ），２．９２（１５Ｈ），２．３４（１Ｈ），１．９６（１Ｈ），１．７５（４Ｈ），１．６２（４Ｈ），１．４１（１Ｈ），１．２３（１Ｈ）． ＬＣ／ＭＳ（保持時間、６．１分）、６５０に集中したｍ／ｚのエンベロープを観察した。
【００７２】
Ｌ−Ｌｙｓ−ε−（２−［２−（２−メトキシエトキシ）エトキシ］アセトイル）−Ｎ１−スペルミン（２４）
ＴＬＣ分析（ｂ）；Ｒｆ＝０．１１．１Ｈ ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，δ）：４．０１（３Ｈ），３．９１（１Ｈ），３．６２（６Ｈ），３．３１（８Ｈ），３．０３（１２Ｈ），２．０６（２Ｈ）， １．８２（６Ｈ），１．５３（１Ｈ），１．３２（１Ｈ）． ＬＣ／ＭＳ（保持時間、５．４分）、計算値 Ｃ２３Ｈ５０Ｎ６Ｏ５ ｍ／ｚ ４９０、実測値 ４９１（ＭＨ＋）。
【００７３】
Ｌ−Ｌｙｓ−ε−（２−（２−メトキシエトキシ）アセトイル）−Ｎ１−スペルミン（２５）
ＴＬＣ分析（ｂ）；Ｒｆ＝０．０９．１Ｈ ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，δ）：３．９８（３Ｈ），３．９２（１Ｈ），３．６２（６Ｈ），３．３１（６Ｈ），３．２４（６Ｈ），３．０３（６Ｈ），２．０６（２Ｈ），１．８７（２Ｈ），１．８０（４Ｈ），１．５３（１Ｈ），１．３２（１Ｈ）． ＬＣ／ＭＳ（保持時間、５．７分）、計算値 Ｃ２１Ｈ４６Ｎ６Ｏ４ ｍ／ｚ ４４６、実測値 ４４７（ＭＨ＋）。
【００７４】
Ｌ−Ｌｙｓ−ε−（ｎヘキサデシル）−Ｎ１−スペルミン（２６）
ＴＬＣ分析（ｂ）；Ｒｆ＝０．１１．１Ｈ ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，δ）：３．９７（１Ｈ），３．４８（１Ｈ），３．０４（１５Ｈ），２．０４（２Ｈ），１．９１（４Ｈ），１．７５（８Ｈ）， １．４８（２Ｈ），１．２２（２６Ｈ），０．９１（３Ｈ）．１３Ｃ ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，ｐｐｍ）：１６８．８， ５３．４， ４８．０， ４７．３， ４７．１（ｍ）， ４５．４， ４４．７， ３６．７， ３２．０， ３０．６， ２９．９（ｍ）， ２９．８， ２９．５， ２９．４， ２９．１， ２６．５， ２５．９， ２５．６， ２５．５， ２３．８， ２２．９， ２２．８， ２１．７， １３．９． ＬＣ／ＭＳ（保持時間、７．２分）、計算値 Ｃ３２Ｈ７０Ｎ６Ｏ ｍ／ｚ ５５５、実測値 ５５６（ＭＨ＋）。
【００７５】
Ｄ−Ｌｙｓ−ε−（３，３−ジメチル−ｌ−ブチル）−Ｎ１−スペルミン（３４）
ＴＬＣ分析（ｂ）；Ｒｆ＝０．０６．１Ｈ ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，δ）：３．９１（１Ｈ），３．３３（１Ｈ），３．２３（１Ｈ），３．０５（１４Ｈ），２．０１（２Ｈ），１．８６（４Ｈ）， １．７１（４Ｈ），１．６７（２Ｈ），１．５０（２Ｈ），１．３８（２Ｈ），０．８５（９Ｈ）． ＬＣ／ＭＳ（保持時間、６．１分）、計算値 Ｃ２２Ｈ５０Ｎ６Ｏ ｍ／ｚ ４１５、実測値 ４１６（ＭＨ＋）。
【００７６】
Ｄ−Ｌｙｓ−ε−（３−メチルプロピル）−Ｎ１−スペルミン（３５）
ＴＬＣ分析（ｂ）；Ｒｆ＝０．０６．１Ｈ ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，δ）：３．９０（１Ｈ），３．３２（１Ｈ），３．２４（１Ｈ），３．０５（１０Ｈ），２．８２（２Ｈ），２．０２（２Ｈ），１．８２（６Ｈ），１．７１（６Ｈ），１．３７（１Ｈ），０．９０（６Ｈ）． ＬＣ／ＭＳ（保持時間、５．８分）、計算値 Ｃ２０Ｈ４６Ｎ６Ｏ ｍ／ｚ ３８７、実測値 ３８８（ＭＨ＋）。
【００７７】
Ｌ−Ｌｙｓ−ε−（ビス−（シクロヘキシル））−Ｎ１−スペルミン（３８）
ＴＬＣ分析（ｂ）；Ｒｆ＝０．２２．１Ｈ ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，δ）：３．９６（１Ｈ），３．３０（２Ｈ），３．０４（１８Ｈ），２．０６（２Ｈ），１．８６（４Ｈ），１．７２（１６Ｈ），１．４０（２Ｈ），１．１８（６Ｈ），０．９７（４Ｈ）．１３Ｃ ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，ｐｐｍ）： １６９．８， ６０．２， ５４．１， ５３．２， ４７．０（ｍ）， ４５．３， ４４．６， ３６．６（ｍ）， ３２．９， ３０．３（ｍ）， ２５．４， ２５．０， ２３．８， ２２．８， ２２．３， ２１．７． ＬＣ／ＭＳ（保持時間、６．４分）、計算値 Ｃ３０Ｈ６２Ｎ６Ｏ ｍ／ｚ ５２３、実測値 ５２４（ＭＨ＋）。
【００７８】
Ｄ−Ｌｙｓ−ε−（４−フェニルベンジル）−Ｎ１−スペルミン（３９）
ＴＬＣ分析（ｂ）；Ｒｆ＝０．１１．１Ｈ ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，δ）：７．５５（９Ｈ），４．２１（ｓ，２Ｈ），３．９３（１Ｈ），３．３２（１Ｈ），３．２４（１Ｈ），３．０４（１２Ｈ），２．０４（２Ｈ），１．８０（４Ｈ），１．７２（６Ｈ），１．４０（２Ｈ）．１３Ｃ ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，ｐｐｍ）：１６９．８， １４１．６， １３９．６， １３０．５， １３９．９， １２９．３， １２８．２， １２７．６， １２７．０， ５３．１， ５０．６， ４７．１， ４７．０， ４６．５， ４５．３， ４４．６， ３６．６（ｍ）， ３０．３， ２５．５， ２５．１， ２３．８， ２２．９（ｍ）， ２１．６． ＬＣ／ＭＳ（保持時間、６．３分）、計算値 Ｃ２９Ｈ４８Ｎ６Ｏ ｍ／ｚ ４９７、実測値 ４９８（ＭＨ＋）。
【００７９】
（実施例９）
＜ＬＰＳへの結合親和性を定量するための高速処理蛍光置換アッセイ＞
ＢＯＤＩＰＹ−ＴＲ−カダベリン（ＢＣ；（５−（（４−（４，４−ジフルオロ−５−（２−チエニル）−４−ボラ−３ａ，４ａ−ジアザ−ｓ−インダセン−３−イル）フェノキシ）アセチル）アミノ）ペンチルアミン，塩酸塩）；Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ社（オレゴン州ユージーン）から入手）置換アッセイで化合物のＬＰＳへの結合親和性を定量するため方法は、最近、詳細に報告されている４６。このアッセイを、高速処理方式により以下のように実施する。Ｃｏｒｎｉｎｇ Ｎｏｎｂｉｎｄｉｎｇ Ｓｕｒｆａｃｅ ３８４ウェル平底黒色蛍光マイクロプレートの最初の列（１６ウェル）には試験化合物１５個及びポリミキシンＢが全て５ｍＭで入っていて、これらを残りの２３列を使用して次々に２倍希釈してゆき、最終希釈濃度を容積４０μｌにおいて０．５９６ｎｍとする。ＬＰＳを結合及び中和することが知られているペプチド抗生物質であるポリミキシンＢ（ＰＭＢ）４７を各プレートについてポジティブコントロール及び対照化合物として使用し、これによって、アッセイの反復性及び再現性を定量的に評価することができる（ＣＶ及びＺ’因子）。自動装置による液体の取り扱いは、Ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ Ｐｏｗｅｒ Ｓｏｆｔｗａｒｅ（Ｂｉｏ−Ｔｅｋ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ社（米国バーモント州））を用いてプログラムしたＰｒｅｃｉｓｉｏｎ ２０００自動マイクロプレートピペッティングシステムを用いて実施する。ＬＰＳ保存溶液（５ｍｇ／ｍＬ；大腸菌０１１１：Ｂ４； Ｓｉｇｍａから入手）及びＢＣ（５００μＭ）を、Ｔｒｉｓバッファー（ｐＨ７．４、５０ｍＭ）中で調製する。ＬＰＳ及びＢＣ保存液それぞれ１ｍＬずつを混合し、Ｔｒｉｓバッファー中で最終容積１００ｍＬに希釈し、最終濃度をＬＰＳについて５０μｇ／ｍＬ、ＢＣについて５μＭとする。このＢＣ：ＬＰＳ混合物４０μｌを、Ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ ２０００を用いてプレートの各ウェルに添加する。蛍光測定を、２５℃において、Ｍｉｃｒｏｍａｘ Ｍｉｃｒｏｗｅｌｌ ３８４ウェルプレートリーダーを備えたＦｌｕｏｒｏｍａｘ−３を使用し、ＤａｔａＭａｘ Ｓｏｆｔｗａｒｅ（Ｊｏｂｉｎ Ｙｖｏｎ社（ニュージャージー州））を用いて実施する。ＢＣ励起波長は５８０ｎｍであり、６２０ｎｍにおいて、５ｎｍに設定した発光及び励起モノクロメーター帯域の両方で発光スペクトルを得る。ＢＣの蛍光はＬＰＳへの結合の際に停止し、化合物によるＢＣ置換によって、ＢＣ蛍光が脱消光（強度増強）する。先行文献に記載されるように、有効置換量（ＥＤ５０）を、蛍光シグナル対化合物濃度置換曲線の中間点で計算し、Ｏｒｉｇｉｎ ｐｌｏｔｔｉｎｇ Ｓｏｆｔｗａｒｅ（Ｏｒｉｇｉｎ Ｌａｂ社（マサチューセッツ州））の自動式四パラメータＳ字適合ユーティリティを用いて決定する。等式：１−［３（ＳＤ＋ＳＤ’）／（Ａ−Ａ’）］（式中、ＳＤ及びＳＤ’、Ａ及びＡ’は、それぞれ、シグナル及びノイズの標準偏差であり、かつ、シグナル及びノイズの平均である）を使用して得られるＺ’因子５２により、Ｚ’因子は０．８２１、及び、プレート内ＣＶは５．２％であるとの結果がそれぞれ得られる。
【００８０】
（実施例１０）
＜酸化窒素アッセイ＞
酸化窒素産生を、Ｇｒｉｅｓｓ試薬系５３；５４を用いて、マウスマクロファージＪ７７４．Ａ１細胞において総亜硝酸塩として測定する。Ｌ−グルタミン及び重炭酸ナトリウムを含み、１０％仔ウシ血清、１％ Ｌ−グルタミン−ペニシリン−ストレプトマイシン溶液及びＬ−アルギニン２００μｇ／ｍＬを添加したＲＰＭＩ−１６４０細胞培養培地で、マウスマクロファージＪ７７４．Ａ１細胞を、３７℃において５％ＣＯ２雰囲気中で生育させる。約２×１０６／ｍＬ、容積４０μｌ／ウェルで、３８４ウェル細胞培養処理平底マイクロタイタープレートで細胞を平板培養してコンフルエントとし、続いて、リポ多糖（ＬＰＳ）１００ｎｇ／ｍＬで刺激する。ＬＰＳ刺激と同時に、濃度を連続的に希釈した試験化合物を細胞培地に添加し、一晩１６時間にわたってインキュベートする。各プレートにおいて、ポリミキシンＢを対照化合物として用いる。ポジティブコントロール（ＬＰＳ刺激のみ）及びネガティブコントロール（Ｊ７７４．Ａ１培地のみ）を各実験で使用する。上清３０μｌを等容積のＧｒｉｅｓｓ試薬（５０μｌ／ウェル；ｄｄＨ２Ｏ中の０．１％ ＮＥＤ溶液、及び、ｄｄＨ２Ｏ中の１％スルファニルアミド、５％リン酸溶液）に添加し、室温において暗所で１５分間インキュベートすることによって、亜硝酸塩濃度を測定する。５３５ｍｍでの吸光度を、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ Ｓｐｅｃｔｒａｍａｘ Ｍ２多機能プレートリーダー（Ｓｕｎｎｙｖａｌｅ社（カリフォルニア州））を用いて測定する。連続的に希釈した標準の亜硝酸ナトリウムから得られた標準曲線から、亜硝酸塩濃度を補間する。
【００８１】
（実施例１１）
＜ｅｘ ｖｉｖｏでのヒト血液における多重サイトカインアッセイ＞
インフォームドコンセントを実施し、かつ、Ｈｕｍａｎ Ｓｕｂｊｅｃｔｓ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｔｉｏｎ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ承認のガイドラインに従って健常人ボランティアから静脈穿刺により採取し、ＥＤＴＡで抗凝集化した新鮮な全血１００μｌ分を、生理食塩水で濃度を段階的に希釈した試験化合物を含む等容積の５０ｎｇ／ｍＬの大腸菌 ０１１１：Ｂ４ ＬＰＳに、９６−ウェルマイクロタイタープレート中で４時間暴露する。サイトカイン産生の調節における化合物の影響を、ＦＡＣＳ Ａｒｒａｙ多重フローサイトメトリービーズアレイ（ＣＢＡ）システム（Ｂｅｃｔｏｎ−Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ−Ｐｈａｒｍｉｎｇｅｎ社（カリフォルニア州サンノゼ））を用いて試験する。システムは、ビーズ式サンドウィッチＥＬＩＳＡ原理を用いるものであり５５；５６、また、その固有の蛍光発光強度（標準的なフローサイトメーターのＦＬ３チャネルにおいて検出される）の点からスペクトルの異なる６群のマイクロビーズから構成される。各ビーズ群は、同一の生物サンプルに由来する６つの異なるサイトカイン（ヒト炎症ＣＢＡキットには、ＴＮＦ−α、ＩＬ−ｌβ、ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＩＬ−１０及びＩＬ−１２ｐ７０が入っている）を検出するための別々の捕捉抗体で被覆されている。ビーズをサンプル３０μｌと共にインキュベートすると、目的のサイトカインがまずビーズ上に捕捉される。ビーズを洗浄した後、最適な対を形成しているフィコエリトリン結合二次抗体の混合物を添加し、固定されたサイトカインと共に蛍光三元複合体を形成させると、その強度（ＦＬ２チャネル中で測定）はビーズ上のサイトカイン濃度に比例する。アッセイは、販売者より提供のプロトコルに従って実施する。標準曲線は、キット中の組み換えサイトカインを使用して得る。ＦＡＣＳアレイシステムに一体化しているＣＢＡソフトウェア一式を使用してデータを分析する。
【００８２】
（実施例１２）
＜マウス致死率実験＞
異系交配の９〜１１週齢雌ＣＦ−１マウス（Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ社（マサチューセッツ州ウィルミントン））（体重２２〜２８ｇ）を、別に記載されるように使用する３７。マウスが到着したら、実験する前に１週間順応させ、ＡＡＬＡＣ公認のカンザス大学動物管理施設内の制御環境下で、ケージ１つにつき５匹ずつ収納し、マウスに餌及び水を自由に摂取させる。マウスを、Ｄ−ガラクトサミンによるＬＰＳの致死効果に感作させる５５；５７；５８。まず、新たに調製した生理食塩水中のＤ−ガラクトサミン（８００ｍｇ／ｋｇ）及びＬＰＳ（０、１０、２０、５０、１００、２００ｎｇ／匹）をマウス５匹の群に容積０．２ｍＬで腹腔内に単回注射投与することによって、用いたＬＰＳ群について１００％致死をもたらす致死用量（ＬＤ１００）を決定する。５匹全てのマウス（１００ｎｇ投与によって２４時間以内に死亡）を用いた２つの独立した実験で、用量応答特性が予測されたように観察され、ＬＤ１００用量は１００ｎｇ／匹であると確立される。ＬＰＳ誘導性死を保護するアシルスペルミンの用量応答効果を試験するために設計された実験において、マウスに、致死量を超える（２００ｎｇの）ＬＰＳ投与の直前に、生理食塩水で希釈された連続的な用量の化合物を片脇腹に腹腔内注射し、これとは別に、当該量を腹腔内注射によりもう片方の脇腹に投与する。一時的保護の時間枠を試験する実験においては、致死量を超える（２００ｎｇ／匹）ＬＰＳを投与する前又はその後に、化合物の固定用量２００μｇ／匹を様々な時間で投与する。致死率をＬＰＳを投与して２４時間後に決定する。
【００８３】
本開示の化合物は、医薬品に許容される担体と組み合わせることができる。医薬品に許容される担体は、例えばビヒクル、佐剤、賦形剤又は希釈剤を含み、当業者に周知のものである。典型的には、医薬品に許容される担体は、活性化合物に化学的に不活性で、使用条件下で有害な副作用や毒性がないものである。医薬品に許容される担体にはポリマー及びポリマーマトリクスが含まれる。
【００８４】
本開示の化合物は、個々の治療薬として、あるいは治療薬を組み合わせて、医薬品と共に使用するために利用可能ないかなる従来の方法によっても投与することができる。
【００８５】
言うまでもなく、投与量は、個々の薬剤の薬力学的特性、その投与方法及び投与経路；被投与者の年齢、健康状態及び体重；症状の性質及び程度；同時治療の種類；処置頻度；並びに、所望される効果等の既知の要因に応じて変わるであろう。有効成分の１日当たりの投与量は、体重１キログラム（ｋｇ）当たり約０．００１〜１０００ミリグラム（ｍｇ）であると予測することができ、また好ましい投与量は０．１〜約３０ｍｇ／ｋｇであると予想することができる。
【００８６】
（投与に適した組成物の）剤形には、１単位当たり約１ｍｇ〜約５００ｍｇの有効成分が含まれている。これらの医薬組成物では、有効成分は通常、組成物の全重量のうち約０．５〜９５重量％の量で存在するであろう。
【００８７】
上記有効成分は、カプセル剤、錠剤及び粉末等の固体の剤形、又はエリキシル剤、シロップ剤及び懸濁液等の液体の剤形により経口投与することができる。さらに、上記有効成分は滅菌した液体の剤形によって非経口的に投与することもできる。さらに上記有効成分は、鼻腔内で（点鼻剤）、あるいは薬粉末のミストの吸入によって投与することもできる。他の剤形としては、パッチ構造あるいは軟膏によって経皮的に投与すること等も潜在的に可能である。上記有効成分は、持続性若しくは徐放性デリバリーシステム、又は、即放性デリバリーシステムを用いて投与することができる。
【００８８】
経口投与に好適な調合物は、（ａ）有効量の化合物を、水、食塩水又はオレンジジュースなどの希釈剤に溶解させた液体溶液；（ｂ）所定量の有効成分をそれぞれ含む、カプセル剤、サッシェ、錠剤、甘味つき錠剤及びトローチ等の固体又は顆粒；（ｃ）粉末；（ｄ）適当な液体中の懸濁液；並びに（ｅ）好適な乳剤；を含んでいてよい。液体の調合物としては、水及びアルコール（例えばエタノール、ベンジルアルコール、プロピレングリコール、グリセリン、ポリエチレンアルコール）等の希釈剤を含んでいよく、医薬品に許容される界面活性剤、懸濁剤又は乳化剤が添加されていてもされていなくてもよい。カプセル剤としては、界面活性剤、滑剤、並びに、例えばラクトース、スクロース、リン酸カルシウム及びコーンスターチなどの不活性充填剤を含む、通常のハード又はソフトシェル型ゼラチンタイプのものが考えられる。錠剤には、ラクトース、スクロース、マンニトール、コーンスターチ、バレイショデンプン、アルギン酸、微結晶セルロース、アラビアゴム、ゼラチン、グアーガム、膠質二酸化ケイ素、クロスカルメロースナトリウム、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸亜鉛、ステアリン酸、並びに、他の賦形剤、着色剤、希釈剤、バッファー、崩壊剤、湿潤剤、防腐剤、香料及び薬学的に適合性のある担体のうち、１種以上のものを含有することができる。更に、甘味つき錠剤は、香料中に、通常はスクロース及びアラビアゴム又はトラガカント中に有効成分を含んでいてよく、また菱形錠剤は、ゼラチン及びグリセリン、又は、スクロース及びアラビアゴム等の不活性基剤中に有効成分を含んでいてよく、更に乳剤及びゲル剤は、有効成分に加えて、従来公知の担体を含んでいてよい。
【００８９】
本開示の化合物は単独で、又は、他の好適な成分と組み合わせて、吸入によって投与されるエアロゾル製剤とすることができる。これらのエアロゾル製剤は、ジクロロジフルオロメタン、プロパン及び窒素などの許容可能な加圧不活性ガス中に入れることができる。さらに、上記エアロゾル製剤は、ネブライザー又はアトマイザーなどの非加圧式薬剤として調剤してもよい。
【００９０】
非経口投与に好適な調製物には、抗酸化剤、バッファー、静菌剤、及び、目的の投薬対象者の血液と調製物を等張にする溶質を含んでいてもよい、水性又は非水性の等張無菌注射溶液、並びに、懸濁剤、可溶化剤、増粘剤、安定剤及び防腐剤を含んでいてよい水性又は非水性の無菌懸濁液が含まれる。上記化合物は、医薬品用担体中の生理的に許容される希釈剤中に添加した状態で投与することができ、上記希釈剤としては、例えば、水、生理食塩水、デキストロース水溶液及び関連の糖水溶液；エタノール、イソプロパノール又はヘキサデシルアルコール等のアルコール類；プロピレングリコール、又は、ポリ（エチレングリコール）４００等のポリエチレングリコール等のグリコール類；２，２−ジメチル−１、３−ジオキソラン−４−メタノール等のグリセリンケタール類；エーテル類、油類、脂肪酸、脂肪酸エステル若しくはグリセリド又はアセチル化脂肪酸グリセリド等を含む滅菌液体又は液体混合物が挙げられ、これには、石鹸若しくは洗浄剤等の医薬品に許容される界面活性剤、ペクチン、カルボマー、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース若しくはカルボキシメチルセルロース等の懸濁剤、又は、乳化剤及び他の医薬品用補助剤が含まれていても含まれていなくてもよい。
【００９１】
非経口投与用調製物において使用することができる油類には、石油性油、動物性油、植物性油あるいは合成油が含まれる。油類の具体例には、ピーナッツ油、大豆油、ごま油、綿実油、トウモロコシ油、オリーブ油、ペトロラタム及び鉱油が含まれる。非経口投与用調製物で使用される好適な脂肪酸には、オレイン酸、ステアリン酸及びイソステアリン酸が含まれる。オレイン酸エチルとミリスチン酸イソプロピルは好適な脂肪酸エステルの例である。非経口投与用調製物において使用される好適な石鹸には、脂肪酸アルカリ金属塩類、脂肪酸アンモニウム塩類及び脂肪酸トリエタノールアミン塩類が含まれ、好適な洗浄剤には、（ａ）陽イオン洗浄剤、例えばジメチルジアルキルアンモニウムハライド及びアルキルピリジニウムハライド等、（ｂ）陰イオン洗浄剤、例えばスルホン酸アルキル、スルホン酸アリール及びオレフィンスルホナート、硫酸アルキル、オレフィンサルフェート、硫酸エーテル及び硫酸モノグリセリド、並びに、スルホコハク酸塩等、（ｃ）非イオン性洗浄剤、例えば脂肪族アミン酸化物、脂肪酸アルカノールアミド及びポリオキシエチレン−ポリプロピレン共重合体、（ｄ）両性洗浄剤、例えばアルキル−β−アミノプロピオネート及び２−アルキルイミダゾリン四級アンモニウム塩等、並びに、ｅ）それらの混合物等が含まれる。
【００９２】
非経口投与用調製物は、典型的には、溶液中に約０．５重量％〜約２５重量％の有効成分を含んでいる。好適な防腐剤及びバッファーを、このような調製物中で使用することができる。注射する部位での刺激を最小限にするかあるいは刺激を取り除くために、上記組成物は、親水性・親油性バランス（ＨＬＢ）が約１２〜約１７である１種以上の非イオン性界面活性剤を含んでいてもよい。上記調製物中における界面活性剤の量は、約５重量％〜約１５重量％の範囲である。好適な界面活性剤には、ソルビタンモノオレエート等のポリエチレン・ソルビタン脂肪酸エステル、及び、プロピレンオキシドとプロピレングリコールの縮合によって形成される、エチレンオキシドと疎水性塩基との高分子量付加体などが含まれる。
【００９３】
さらに、医薬品に許容される賦形剤もまた当業者に周知である。賦形剤の選択は、いくらかは個々の化合物に応じて決定され、また、個々の組成物投与方法に応じても決定されるであろう。従って本発明の医薬組成物には、種々の好適な製剤態様がある。下記方法及び賦形剤は単に例として示されるものであり、これらに限定されることは全く意図されない。医薬品に許容される賦形剤は、有効成分の作用を妨害せず、有害な副作用を引き起こさないものが好ましい。好適な担体及び賦形剤には、水、アルコール及びプロピレングリコール等の溶剤、固体吸着剤及び希釈剤、界面活性剤、懸濁剤、錠剤形成用結合剤、滑剤、香料及び着色剤が含まれる。
【００９４】
上記調製物は、アンプルやバイアルなどの１回服用分分包密封容器又は複数回服用分含有密封容器とすることができ、フリーズドライ（凍結乾燥）状態で保存できて、滅菌液体賦形剤（例えば水）を加えるだけで注射剤としてすぐに使用することができる。注射溶液及び懸濁液は、滅菌した粉末、顆粒及び錠剤からその場で調製することもできる。注射用組成物のための有効な医薬品担体に対する必要条件は、当業者に周知である。Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ ａｎｄ Ｐｈａｒｍａｃｙ Ｐｒａｃｔｉｃｅ，Ｊ．Ｂ． Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ Ｃｏ．，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，ＰＡ， Ｂａｎｋｅｒ ａｎｄ Ｃｈａｌｍｅｒｓ，Ｅｄｓ．，２３８−２５０（１９８２） ａｎｄ ＡＳＨＰ Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｎ Ｉｎｊｅｃｔａｂｌｅ Ｄｒｕｇｓ， Ｔｏｉｓｓｅｌ，４ｔｈ ｅｄ．，６２２−６３０（１９８６）を参照のこと。
【００９５】
局所投与に好適な調製物には、香料、通常はスクロース及びアラビアゴム又はトラガント中に有効成分を含む甘味つき錠剤；ゼラチン及びグリセリン又はスクロース及びアラビアゴムなどの不活性基剤中に有効成分を含む菱形錠剤；適当な液体担体中に有効成分を含む口内洗浄剤；並びに、有効成分に加えて当業者に公知の担体を含むクリーム剤、乳剤及びゲル剤が含まれる。
【００９６】
さらに、直腸投与に好適な調製物としては、乳化基剤又は水溶性基剤等の種々の基剤と混合することにより得られる坐剤があげられる。膣投与に好適な調製物としては、有効成分に加えて、好適な担体であると当業者に公知の担体を含む、膣坐剤、タンポン、クリーム剤、ゲル剤、ペースト剤、泡剤又はスプレー剤等が挙げられる。
【００９７】
好適な医薬品担体は、本分野で標準的な参考書である、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ）で説明されている。
【００９８】
本発明の範囲内における動物（特にヒト）に投与される用量は、合理的な時間をかけて動物体内に治療的な応答をもたらすのに十分な量でなければならない。当業者は、動物の症状、動物の体重及び治療される症状などの種々の要因に応じて用量が異なるということを認識できるであろう。
【００９９】
適当な用量は、所望の応答を発揮することが知られている、患者体内における有効成分の濃度であろう。
【０１００】
また、用量の程度は、投与の経路、タイミング及び頻度、並びに、化合物の投与に伴って生じる可能性のある副作用の有無、性質及び程度、並びに、望まれる生理学的作用に応じて決定されるであろう。
【０１０１】
本発明の化合物の投与に有用な医薬品投与剤形を、以下に例証する。
【０１０２】
ハードシェルカプセル剤
粉末状有効成分１００ｍｇ、ラクトース１５０ｍｇ、セルロース５０ｍｇ及びステアリン酸マグネシウム６ｍｇを、標準ツーピースハードゼラチンカプセルに充填することにより、多数のカプセル剤が製造される。
【０１０３】
ソフトゼラチンカプセル剤
大豆油、綿実油又はオリーブ油等の消化されやすい油中に有効成分を混合させた混合物を調製し、溶融させたゼラチン中へ容積移送式ポンプによって注入することにより、有効成分１００ｍｇを含むソフトゼラチンカプセル剤を形成する。カプセル剤を洗浄し乾燥させる。有効成分は、ポリエチレングリコール、グリセリン及びソルビトールの混合物中に溶解させて、水混和性医薬調合物を作ることができる。
【０１０４】
錠剤
一錠あたりの処方量が、有効成分１００ｍｇ、謬質二酸化ケイ素０．２ｍｇ、ステアリン酸マグネシウム５ｍｇ、結晶セルロース２７５ｍｇ、デンプン１１ｍｇ及びラクトース９８．８ｍｇとなるように、従来の方法によって多数の錠剤を製造する。適当な水性・非水性のコーティングを施すことにより、飲みやすさを向上せたり、上品さや安定性を改善したり、あるいは吸収を遅らせることもできる
【０１０５】
即放性錠剤／カプセル剤
これらは、従来法及び新規な方法によって作製される固体経口投与用の剤形である。これらの剤型単位は、薬剤が即時に溶解して送達されるように、水なしで経口摂取される。有効成分は、糖、ゼラチン、ペクチン及び甘味料などの成分を含んでいる液体中で混合される。これらの液体は、凍結乾燥及び固体抽出技術によって固体化されて固体の錠剤又はカプレットとされる。医薬化合物は、水を使わずに、粘弾性かつ熱可塑性の糖及びポリマー又は発泡性成分と共に打錠することによって、即放性を意図した多孔性マトリクスに製造してもよい。
【０１０６】
さらに、本開示の化合物は、点鼻剤の形で投与することができる、又は、計量及び経鼻若しくは経口内吸入によって投与することができる。薬剤は、微細ミストとして点鼻液から送達される、又は、粉末からエアロゾルとして送達される。
【０１０７】
上記の開示の説明は、本開示を例証して説明するものである。さらに、開示内容は、発明の好ましい実施形態を記載して説明するのみであるが、上述の通り、本発明は種々の他の組み合わせ、変更及び環境において使用できるものであって、本明細書に表された発明の概念を逸脱しない範囲で変更・改変できるということが、上述の教示及び／又は関連する技術分野のスキル若しくは知識に従えば理解されるであろう。さらに、上述の実施形態は、本出願人の知る最良の態様の説明を意図したものであり、かつ、当業者が本開示を上記実施形態の通りに又は他の実施形態において、本発明の個々の用途又はその使用方法に必要とされる種々の改変を伴って利用できるよう意図したものである。従って、本記載は、本発明が本明細書に開示された態様に限定されることを意図したものではない。さらに添付の請求の範囲は、代替可能な別の実施形態をも含むものとして解釈されるよう意図したものである。
【０１０８】
本明細書中で引用された全ての刊行物及び特許出願は、本明細書中において参考として組み込まれ、個々の刊行物又は特許出願はそれぞれ個々に参考として援用されると考える。本明細書中で用いる用語“ａ”、“ａｎ”及び“ａｎｙ”はそれぞれ、単数形及び複数形の両方を含むことが意図される。
【０１０９】
表１：リジン−スペルミン アシル長鎖ホモログ
【０１１０】
【表１】
【０１１１】
表２：リジン−スペルミン混合アシル類似体
【０１１２】
【表２】
【０１１３】
表３：リジン−スペルミン混合アルキル類似体
【０１１４】
【表３】
【０１１５】
表４：化合物８を致死量を超える用量２００ｎｇ／匹で投与した、ＣＦ−１マウス（動物５匹の群）についての用量依存的な保護。ＬＰＳ注射２４時間後に致死率を記録。比は生存数／動物総数を示す。アスタリスクは統計的有意性を示す（Ｐ＜０．０５；フィッシャー片側正確確率検定）
【０１１６】
【表４】
【０１１７】
表５：Ｄ−ガラクトサミンで感作したＣＦ−１マウス致死モデルにおける、８による経時的な保護。ＬＰＳ投与（２００ｎｇ／匹）について示す時間において、動物に８を２００μｇ腹腔内注射。ＬＰＳ注射２４時間後に致死率を記録。アスタリスクは統計的有意性を示す（Ｐ＜０．０５；フィッシャー片側正確確率検定）
【０１１８】
【表５】
【０１１９】
表６：Ｄ−ガラクトサミンで感作したＣＦ−１マウス致死モデルにおける、化合物８による経時的な保護。ＬＰＳ投与（２００ｎｇ／匹）について示す時間において、動物に８を２００μｇ皮下注射。ＬＰＳ注射２４時間後に致死率を記録。アスタリスクは統計的有意性を示す（Ｐ＜０．０５；フィッシャー片側正確確率検定）
【０１２０】
【表６】
【０１２１】
表７−１：アシル化及びアルキル化リジン−スペルミン複合体の特定のライブラリ
【０１２２】
【表７−１】
【０１２３】
表７−２：アシル化及びアルキル化リジン−スペルミン複合体の特定のライブラリ
【０１２４】
【表７−２】
【０１２５】
参考文献
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【０１３９】
１５． Ｗｒｉｇｈｔ， Ｃ． Ｅ．； Ｒｅｅｓ， Ｄ． Ｄ．； ａｎｄ Ｍｏｎｃａｄａ， Ｓ． Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ ａｎｄ ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ ｒｏｌｅｓ ｏｆ ｎｉｔｒｉｃ ｏｘｉｄｅ ｉｎ ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ ｓｈｏｃｋ． Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ． Ｒｅｓ． １９９２， ２６， ４８−５７．
【０１４０】
１６． Ｂｏｎｅ， Ｒ． Ｃ．； Ｂａｌｋ， Ｒ． Ａ．； Ｃｅｒｒａ， Ｆ． Ｂ．； Ｄｅｌｌｉｎｇｅｒ， Ｒ． Ｐ．； Ｆｅｉｎ， Ａ． Ｍ．； Ｋｎａｕｓ， Ｗ． Ａ．； Ｓｃｈｅｉｎ， Ｒ． Ｍ．； ａｎｄ Ｓｉｂｂａｌｄ， Ｗ． Ｊ． Ｄｅｆｉｎｉｔｉｏｎｓ ｆｏｒ ｓｅｐｓｉｓ ａｎｄ ｏｒｇａｎ ｆａｉｌｕｒｅ ａｎｄ ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ｕｓｅ ｏｆ ｉｎｎｏｖａｔｉｖｅ ｔｈｅｒａｐｉｅｓ ｉｎ ｓｅｐｓｉｓ． Ｔｈｅ ＡＣＣＰ／ＳＣＣＭ Ｃｏｎｓｅｎｓｕｓ Ｃｏｎｆｅｒｅｎｃｅ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ． Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｃｈｅｓｔ Ｐｈｙｓｉｃｉａｎｓ／Ｓｏｃｉｅｔｙ ｏｆ Ｃｒｉｔｉｃａｌ Ｃａｒｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ． Ｃｈｅｓｔ １９９２， １０１， １６４４−１６５５．
【０１４１】
１７． Ｂｏｎｅ， Ｒ． Ｃ． Ｔｈｅ ｓｅｐｓｉｓ ｓｙｎｄｒｏｍｅ． Ｄｅｆｉｎｉｔｉｏｎ ａｎｄ ｇｅｎｅｒａｌ ａｐｐｒｏａｃｈ ｔｏ ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ． Ｃｌｉｎ． Ｃｈｅｓｔ Ｍｅｄ． １９９６， １７， １７５−１８１．
【０１４２】
１８． Ｇａｌａｎｏｓ， Ｃ．； Ｌｕｄｅｒｉｔｚ， Ｏ．； Ｒｉｅｔｓｃｈｅｌ， Ｅ． Ｔ．； Ｗｅｓｔｐｈａｌ， Ｏ．； Ｂｒａｄｅ， Ｈ．； Ｂｒａｄｅ， Ｌ．； Ｆｒｅｕｄｅｎｂｅｒｇ， Ｍ． Ａ．； Ｓｃｈａｄｅ， Ｕ． Ｆ．； Ｉｍｏｔｏ， Ｍ．； Ｙｏｓｈｉｍｕｒａ， Ｓ．； Ｋｕｓｕｍｏｔｏ， Ｓ．； ａｎｄ Ｓｈｉｂａ， Ｔ． Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ ａｎｄ ｎａｔｕｒａｌ Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ ｆｒｅｅ ｌｉｐｉｄ Ａ ｅｘｐｒｅｓｓ ｉｄｅｎｔｉｃａｌ ｅｎｄｏｔｏｘｉｃ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ． Ｅｕｒ． Ｊ． Ｂｉｏｃｈｅｍ． １９８５， １４８， １−５．
【０１４３】
１９． Ｉｍｏｔｏ， Ｍ．； Ｙｏｓｈｉｍｕｒａ， Ｈ．； Ｋｕｓｕｍｏｔｏ， Ｓ．； ａｎｄ Ｓｈｉｂａ， Ｔ． Ｔｏｔａｌ ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｏｆ ｌｉｐｉｄ Ａ， ａｃｔｉｖｅ ｐｒｉｎｃｉｐｌｅ ｏｆ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ． Ｐｒｏｃ． Ｊａｐａｎ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ． １９８４， ６０， ２８５−２８８．
【０１４４】
２０． Ｋｏｔａｎｉ， Ｓ．； Ｔａｋａｄａ， Ｈ．； Ｔｓｕｊｉｍｏｔｏ， Ｍ．； Ｏｇａｗａ， Ｔ．； Ｔａｋａｈａｓｈｉ， Ｉ．； Ｉｋｅｄａ， Ｔ．； Ｏｔｓｕｋａ， Ｋ．； Ｓｈｉｍａｕｃｈｉ， Ｈ．； Ｋａｓａｉ， Ｎ．； Ｍａｓｈｉｍｏ， Ｊ．； Ｎａｇａｏ， Ｓ．； Ｔａｎａｋａ， Ａ．； Ｔａｎａｋａ， Ｓ．； Ｈａｒａｄａ， Ｋ．； Ｎａｇａｋｉ， Ｋ．； Ｋｉｔａｍｕｒａ， Ｈ．； Ｓｈｉｂａ， Ｔ．； Ｋｕｓｕｍｏｔｏ， Ｓ．； Ｉｍｏｔｏ， Ｍ．； ａｎｄ Ｙｏｓｈｉｍｕｒａ， Ｈ． Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ ｌｉｐｉｄ Ａ ｗｉｔｈ ｅｎｄｏｔｏｘｉｃ ａｎｄ ｒｅｌａｔｅｄ ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｃｏｍｐａｒａｂｌｅ ｔｏ ｔｈｏｓｅ ｏｆ ａ ｎａｔｕｒａｌ ｌｉｐｉｄ Ａ ｆｒｏｍ ａｎ Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ Ｒｅ−ｍｕｔａｎｔ． Ｉｎｆｅｃｔ． Ｉｍｍｕｎ． １９８５， ４９， ２２５−２３７．
【０１４５】
２１． Ｋｕｓｕｍｏｔｏ，Ｓ．； Ｋａｍｉｋａｗａ，Ｔ．； Ｋｕｒｏｓａｗａ，Ｍ．； Ｆｕｋａｓｅ，Ｋ．； Ｓｈｉｂａ，Ｔ．； Ｋｕｓａｍａ，Ｔ．； Ｓｏｇａ，Ｔ．； Ｓｈｉｏｙａ，Ｅ．； Ｎａｋａｙａｍａ，Ｋ．； Ｎａｋａｙｉｍａ，Ｈ．； Ｏｓａｄａ，Ｙ．； ａｎｄ Ｏｎｏ，Ｙ． Ｎｅｗ ｒｅｓｕｌｔｓ ｉｎ ｔｈｅ ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｏｆ ｌｉｐｉｄ Ａ ａｎｄ ｅｎｄｏｔｏｘｉｎｓ． Ｉｎ Ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｓｅｒｉｅｓ， Ｎｏｗｏｔｎｙ， Ａ．， Ｅｄ．， Ｖｏｌ． １， Ｃｅｌｌｕｌａｒ ａｎｄ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ａｓｐｅｃｔｓ ｏｆ ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ ｒｅａｃｔｉｏｎｓ． Ｎｏｗｏｔｎｙ， Ａ．， Ｓｐｉｔｚｅｒ， Ｊ． Ｊ．， ａｎｄ Ｚｉｅｇｌｅｒ， Ｅ． Ｊ． Ｅｄｓ．； Ｅｌｓｅｖｉｅｒ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ： Ａｍｓｔｅｒｄａｍ， １９９０； ｐｐ ４１−５１．
【０１４６】
２２． Ｈｏｌｓｔ，Ｏ．； Ｕｌｍｅｒ，Ａ．Ｊ．； Ｂｒａｄｅ，Ｈ．； ａｎｄ Ｒｉｅｔｓｃｈｅｌ，Ｅ．Ｔ． Ｏｎ ｔｈｅ ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ ｂｉｏｌｏｇｙ ｏｆ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｅｎｄｏｔｏｘｉｃ ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ． Ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ ｏｆ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ． Ｍａｓｉｈｉ， Ｎ． Ｅｄ．； Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ， Ｉｎｃ．： Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ， Ｂａｓｅｌ， Ｈｏｎｇ Ｋｏｎｇ， １９９４； ｐｐ ２８１−３０８．
【０１４７】
２３． Ｒｉｅｔｓｃｈｅｌ，Ｅ．Ｔ．； Ｗｏｌｌｅｎｗｅｂｅｒ，Ｈ．Ｗ．； Ｓｉｄｏｒｃｚｙｋ，Ｚ．； Ｚａｈｒｉｎｇｅｒ，Ｕ．； ａｎｄ Ｌｕｄｅｒｉｔｚ，Ｏ． Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｔｈｅ ｐｒｉｍａｒｙ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｏｆ ｌｉｐｉｄ Ａ． Ｉｎ Ｂａｃｔｅｒｉａｌ Ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ： Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ， Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ａｎｄ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ． Ａｎｄｅｒｓｏｎ， Ｌ． ａｎｄ Ｕｎｇｅｒ， Ｆ． Ｍ． Ｅｄｓ．； Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｓｙｍｐ．Ｓｅｒ．： Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｄ．Ｃ．， １９８３； ｐｐ １９５−２１２．
【０１４８】
２４． Ｆｅｒｇｕｓｏｎ， Ａ． Ｄ．； Ｈｏｆｍａｎｎ， Ｅ．； Ｃｏｕｌｔｏｎ， Ｊ．； Ｄｉｅｄｒｉｃｈｓ， Ｋ．； ａｎｄ Ｗｅｌｔｅ， Ｗ． Ｓｉｄｅｒｏｐｈｏｒｅ−ｍｅｄｉａｔｅｄ ｉｒｏｎ ｔｒａｎｓｐｏｒｔ： Ｃｒｙｓｔａｌ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｏｆ ＦｈｕＡ ｗｉｔｈ ｂｏｕｎｄ ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ． Ｓｃｉｅｎｃｅ １９９８， ２２１５−２２２０．
【０１４９】
２５． Ｋｉｒｉｋａｅ， Ｔ．； Ｓｃｈａｄｅ， Ｆ． Ｕ．； Ｚａｈｒｉｎｇｅｒ， Ｕ．； Ｋｉｒｉｋａｅ， Ｆ．； Ｂｒａｄｅ， Ｈ．； Ｋｕｓｕｍｏｔｏ， Ｓ．； Ｋｕｓａｍａ， Ｔ．； ａｎｄ Ｒｉｅｔｓｃｈｅｌ， Ｅ． Ｔ． Ｔｈｅ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ ｏｆ ｔｈｅ ｈｙｄｒｏｐｈｉｌｉｃ ｂａｃｋｂｏｎｅ ａｎｄ ｔｈｅ ｈｙｄｒｏｐｈｏｂｉｃ ｆａｔｔｙ ａｃｉｄ ｒｅｇｉｏｎｓ ｏｆ Ｌｉｐｉｄ Ａ ｏｎ ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ ｂｉｎｄｉｎｇ ａｎｄ ｃｙｔｏｋｉｎｅ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ． ＦＥＭＳ Ｉｍｍｕｎｏｌ． Ｍｅｄ． Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ． １９９４， ８， １３−２６．
【０１５０】
２６． Ｋｕｓｕｍｏｔｏ，Ｓ．； Ｉｎａｇｅ，Ｍ．； Ｃｈａｋｉ，Ｈ．； Ｉｍｏｔｏ，Ｍ．； Ｓｈｉｍａｍｏｔｏ，Ｔ．； ａｎｄ Ｓｈｉｂａ，Ｔ． Ｃｈｅｍｉｃａｌ ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｏｆ ｌｉｐｉｄ Ａ ｆｏｒ ｔｈｅ ｅｌｕｃｉｄａｔｉｏｎ ｏｆ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ−ａｃｔｉｖｉｔｙ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｓ． Ｉｎ Ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ： ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ， ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ， ａｎｄ ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ． Ａｎｄｅｒｓｏｎ， Ｌ． ａｎｄ Ｕｎｇｅｒ， Ｆ． Ｍ． Ｅｄｓ．； Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｓｏｃｉｅｔｙ： １９８３； ｐｐ ２３７−２５４．
【０１５１】
２７． Ｄａｖｉｄ， Ｓ． Ａ．； Ｂａｌａｒａｍ， Ｐ．； ａｎｄ Ｍａｔｈａｎ， Ｖ． Ｉ． Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ ｏｆ ｌｉｐｉｄ Ａ ａｎｄ ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ｗｉｔｈ ｈｕｍａｎ ｓｅｒｕｍ ａｌｂｕｍｉｎ： ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｆｏｒ ａｎ ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ−ｃａｒｒｉｅｒ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｆｏｒ ａｌｂｕｍｉｎ． Ｊ． Ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ． Ｒｅｓ． １９９５， ２， ９９−１０６．
【０１５２】
２８． Ｄａｖｉｄ，Ｓ．Ａ． Ｔｈｅ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ ｏｆ ｌｉｐｉｄ Ａ ａｎｄ ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ｗｉｔｈ ｈｕｍａｎ ｓｅｒｕｍ ａｌｂｕｍｉｎ． Ｉｎ Ｅｎｄｏｔｏｘｉｎｓ ｉｎ ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ ｄｉｓｅａｓｅ． Ｂｒａｄｅ， Ｈ．， Ｏｐａｌ， Ｓ． Ｍ．， Ｖｏｇｅｌ， Ｓ． Ｎ．， ａｎｄ Ｍｏｒｒｉｓｏｎ， Ｄ． Ｃ． Ｅｄｓ．； Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ： Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ， １９９９； ｐｐ ４１３−４２２．
【０１５３】
２９． Ｂｈａｔｔａｃｈａｒｊｙａ， Ｓ．； Ｄａｖｉｄ， Ｓ． Ａ．； Ｍａｔｈａｎ， Ｖ． Ｉ．； ａｎｄ Ｂａｌａｒａｍ， Ｐ． Ｐｏｌｙｍｙｘｉｎ Ｂ ｎｏｎａｐｅｐｔｉｄｅ： Ｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ ｉｎ ｗａｔｅｒ ａｎｄ ｉｎ ｔｈｅ ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ−ｂｏｕｎｄ ｓｔａｔｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ｂｙ ｔｗｏ−ｄｉｍｅｎｓｉｏｎａｌ ＮＭＲ ａｎｄ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｄｙｎａｍｉｃｓ． Ｂｉｏｐｏｌｙｍｅｒｓ １９９７， ４１， ２５１−２６５．
【０１５４】
３０． Ｄａｖｉｄ， Ｓ． Ａ．； Ｂｈａｔｔａｃｈａｒｊｙａ， Ｓ．； Ｍａｔｈａｎ， Ｖ． Ｉ．； ａｎｄ Ｂａｌａｒａｍ， Ｐ． Ｅｌｕｃｉｄａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｏｆ ｆｒｅｅ ａｎｄ ＬＰＳ−ｂｏｕｎｄ ｐｏｌｙｍｙｘｉｎ Ｂ ｎｏｎａｐｅｐｔｉｄｅ ｉｎ ｗａｔｅｒ ｂｙ ２Ｄ−ＮＭＲ ａｎｄ ｒｅｓｔｒａｉｎｅｄ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｄｙｎａｍｉｃｓ ｍｅｔｈｏｄｓ ａｎｄ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｍｏｄｅｌｉｎｇ ｏｆ ｐｏｌｙｍｙｘｉｎ−ｌｉｐｉｄ Ａ ｃｏｍｐｌｅｘ． Ｊ． Ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ． Ｒｅｓ． １９９４， １（ｓｕｐｐｌ）， Ａ６０．
【０１５５】
３１． Ｄａｖｉｄ， Ｓ． Ａ．； Ｂａｌａｒａｍ， Ｐ．； ａｎｄ Ｍａｔｈａｎ， Ｖ． Ｉ． Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ ｏｆ ｂａｓｉｃ ａｍｐｈｉｐｈｉｌｉｃ ｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅ ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌｓ， ｇｒａｍｉｃｉｄｉｎ Ｓ， ｔｙｒｏｃｉｄｉｎ ａｎｄ ｅｆｒａｐｅｐｔｉｎ， ｗｉｔｈ ｅｎｄｏｔｏｘｉｃ ｌｉｐｉｄ Ａ． Ｍｅｄ． Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ． Ｌｅｔｔ． １９９３， ２， ４２−４７．
【０１５６】
３２． Ｄａｖｉｄ， Ｓ． Ａ．； Ｍａｔｈａｎ， Ｖ． Ｉ．； ａｎｄ Ｂａｌａｒａｍ， Ｐ． Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ ｏｆ ｍｅｌｉｔｔｉｎ ｗｉｔｈ ｅｎｄｏｔｏｘｉｃ ｌｉｐｉｄ Ａ． Ｂｉｏｃｈｉｍ． Ｂｉｏｐｈｙｓ． Ａｃｔａ １９９２， １１２３， ２６９−２７４．
【０１５７】
３３． Ｄａｖｉｄ， Ｓ． Ａ．； Ａｗａｓｔｈｉ， Ｓ． Ｋ．； ａｎｄ Ｂａｌａｒａｍ， Ｐ． Ｔｈｅ ｒｏｌｅ ｏｆ ｐｏｌａｒ ａｎｄ ｆａｃｉａｌ ａｍｐｈｉｐａｔｈｉｃ ｃｈａｒａｃｔｅｒ ｉｎ ｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇ ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ−ｂｉｎｄｉｎｇ ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ ｉｎ ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ ｃａｔｉｏｎｉｃ ｐｅｐｔｉｄｅｓ． Ｊ． Ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ Ｒｅｓ． ２０００， ６， ２４９−２５６．
【０１５８】
３４． Ｄａｖｉｄ， Ｓ． Ａ．； Ｂｅｃｈｔｅｌ， Ｂ．； Ａｎｎａｉａｈ， Ｃ．； Ｍａｔｈａｎ， Ｖ． Ｉ．； ａｎｄ Ｂａｌａｒａｍ， Ｐ． Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ ｏｆ ｃａｔｉｏｎｉｃ ａｍｐｈｉｐｈｉｌｉｃ ｄｒｕｇｓ ｗｉｔｈ ｌｉｐｉｄ Ａ： Ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｆｏｒ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｓ． Ｂｉｏｃｈｉｍ． Ｂｉｏｐｈｙｓ． Ａｃｔａ １９９４， １２１２， １６７−１７５．
【０１５９】
３５． Ｄａｖｉｄ， Ｓ． Ａ．； Ｍａｔｈａｎ， Ｖ． Ｉ．； ａｎｄ Ｂａｌａｒａｍ， Ｐ． Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ ｏｆ ｌｉｎｅａｒ ｄｉｃａｔｉｏｎｉｃ ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ ｗｉｔｈ ｌｉｐｉｄ Ａ： Ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ ｒｅｑｕｉｓｉｔｅｓ ｆｏｒ ｏｐｔｉｍａｌ ｂｉｎｄｉｎｇ ａｆｆｉｎｉｔｙ． Ｊ． Ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ． Ｒｅｓ． １９９５， ２， ３２５−３３６．
【０１６０】
３６． Ｄａｖｉｄ， Ｓ． Ａ．； Ａｗａｓｔｈｉ， Ｓ． Ｋ．； Ｗｉｅｓｅ， Ａ．； Ｕｌｍｅｒ， Ａ． Ｊ．； Ｌｉｎｄｎｅｒ， Ｂ．； Ｂｒａｎｄｅｎｂｕｒｇ， Ｋ．； Ｓｅｙｄｅｌ， Ｕ．； Ｒｉｅｔｓｃｈｅｌ， Ｅ． Ｔ．； Ｓｏｎｅｓｓｏｎ， Ａ．； ａｎｄ Ｂａｌａｒａｍ， Ｐ． Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ ｏｆ ａ ｐｏｌｙｃａｔｉｏｎｉｃ， ａｍｐｈｉｐｈｉｌｉｃ， ｔｅｒｍｉｎａｌｌｙ ｂｒａｎｃｈｅｄ ｏｌｉｇｏｐｅｐｔｉｄｅ ｗｉｔｈ ｌｉｐｉｄ Ａ ａｎｄ ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｄｅｅｐ ｒｏｕｇｈ ｍｕｔａｎｔ ｏｆ Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｍｉｎｎｅｓｏｔａ． Ｊ． Ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ Ｒｅｓ． １９９６， ３， ３６９−３７９．
【０１６１】
３７． Ｄａｖｉｄ， Ｓ． Ａ．； Ｓｉｌｖｅｒｓｔｅｉｎ， Ｒ．； Ａｍｕｒａ， Ｃ． Ｒ．； Ｋｉｅｌｉａｎ， Ｔ．； ａｎｄ Ｍｏｒｒｉｓｏｎ， Ｄ． Ｃ． Ｌｉｐｏｐｏｌｙａｍｉｎｅｓ： ｎｏｖｅｌ ａｎｔｉｅｎｄｏｔｏｘｉｎ ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ ｔｈａｔ ｒｅｄｕｃｅ ｍｏｒｔａｌｉｔｙ ｉｎ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｓｅｐｓｉｓ ｃａｕｓｅｄ ｂｙ ｇｒａｍ−ｎｅｇａｔｉｖｅ ｂａｃｔｅｒｉａ． Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ． １９９９， ４３， ９１２−９１９．
【０１６２】
３８． Ｄａｖｉｄ， Ｓ． Ａ．； Ｐｅｒｅｚ， Ｌ．； ａｎｄ Ｉｎｆａｎｔｅ， Ｍ． Ｒ． Ｓｅｑｕｅｓｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ｂｙ ｂｉｓ（ａｒｇｓ） ｇｅｍｉｎｉ ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ． Ｂｉｏｏｒｇ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ． Ｌｅｔｔ． ２００２， １２， ３５７−３６０．
【０１６３】
３９． Ｄａｖｉｄ， Ｓ． Ａ． Ｔｏｗａｒｄｓ ａ ｒａｔｉｏｎａｌ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ａｎｔｉ−ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ ａｇｅｎｔｓ： ｎｏｖｅｌ ａｐｐｒｏａｃｈｅｓ ｔｏ ｓｅｑｕｅｓｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｅｎｄｏｔｏｘｉｎｓ ｗｉｔｈ ｓｍａｌｌ ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ （Ｉｎｖｉｔｅｄ Ｒｅｖｉｅｗ）． Ｊ． Ｍｏｌｅｃ． Ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ ２００１， １４， ３７０−３８７．
【０１６４】
４０． Ｂｅｈｒ， Ｊ． Ｐ．； Ｄｅｍｅｎｅｉｘ， Ｂ．； Ｌｏｅｆｆｌｅｒ， Ｊ． Ｐ．； ａｎｄ Ｐｅｒｅｚ−Ｍｕｔｕｌ， Ｊ． Ｅｆｆｉｃｉｅｎｔ ｇｅｎｅ ｔｒａｎｓｆｅｒ ｉｎｔｏ ｍａｍｍａｌｉａｎ ｐｒｉｍａｒｙ ｅｎｄｏｃｒｉｎｅ ｃｅｌｌｓ ｗｉｔｈ ｌｉｐｏｐｏｌｙａｍｉｎｅ−ｃｏａｔｅｄ ＤＮＡ． Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ． ＵＳＡ １９８９， ８６， ６９８２−６９８６．
【０１６５】
４１． Ｂｅｈｒ， Ｊ． Ｐ． Ｇｅｎｅ ｔｒａｎｓｆｅｒ ｗｉｔｈ ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ ｃａｔｉｏｎｉｃ ａｍｐｈｉｐｈｉｌｅｓ： Ｐｒｏｓｐｅｃｔｓ ｆｏｒ ｇｅｎｅ ｔｈｅｒａｐｙ． Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇ． Ｃｈｅｍ． １９９４， ５， ３８２−３８９．
【０１６６】
４２． Ｆｅｌｇｎｅｒ， Ｐ． Ｌ．； Ｇａｄｅｋ， Ｔ． Ｒ．； Ｈｏｌｍ， Ｍ．； Ｒｏｍａｎ， Ｒ．； Ｃｈａｎ， Ｈ． Ｗ．； Ｗｅｎｚ， Ｍ．； Ｎｏｒｔｈｒｏｐ， Ｊ． Ｐ．； Ｒｉｎｇｏｌｄ， Ｇ． Ｍ．； ａｎｄ Ｄａｎｉｅｌｓｅｎ， Ｍ． Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｏｎ： ａ ｈｉｇｈｌｙ ｅｆｆｉｃｉｅｎｔ， ｌｉｐｉｄ−ｍｅｄｉａｔｅｄ ＤＮＡ ｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ ｐｒｏｃｅｄｕｒｅ． Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ． ＵＳＡ １９８７， ８４， ７４１３−７４１７．
【０１６７】
４３． Ｓａｎ， Ｈ．； Ｙａｎｇ， Ｚ． Ｙ．； Ｐｏｍｐｉｌｉ， Ｖ． Ｊ．； Ｊａｆｆｅ， Ｍ． Ｌ．； Ｐｌａｕｔｚ， Ｇ． Ｅ．； Ｘｕ， Ｌ．； Ｆｅｌｇｎｅｒ， Ｊ．； Ｗｈｅｅｌｅｒ， Ｃ． Ｊ．； Ｆｅｌｇｎｅｒ， Ｐ． Ｌ．； ａｎｄ Ｇａｏ， Ｘ． Ｓａｆｅｔｙ ａｎｄ ｓｈｏｒｔ−ｔｅｒｍ ｔｏｘｉｃｉｔｙ ｏｆ ａ ｎｏｖｅｌ ｃａｔｉｏｎｉｃ ｌｉｐｉｄ ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ ｆｏｒ ｈｕｍａｎ ｇｅｎｅ ｔｈｅｒａｐｙ． Ｈｕｍ． Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒ． １９９３， ４， ７８１−７８８．
【０１６８】
４４． Ｂｌａｇｂｒｏｕｇｈ， Ｉ． Ｓ．； Ｇｅａｌｌ， Ａ． Ｊ．； ａｎｄ Ｄａｖｉｄ， Ｓ． Ａ． Ｌｉｐｏｐｏｌｙａｍｉｎｅｓ ｉｎｃｏｒｐｏｒｔａｉｎｇ ｔｈｅ ｔｅｒａａｍｉｎｅ ｓｐｅｒｍｉｎｅ ｂｏｕｎｄ ｔｏ ａｎ ａｌｋｙｌ ｃｈａｉｎ ， ｓｅｑｕｅｓｔｅｒ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ． Ｂｉｏｏｒｇ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ． Ｌｅｔｔ． ２０００， １０， １９５９−１９６２．
【０１６９】
４５． Ｂｕｒｎｓ， Ｍ． Ｒ．； Ｃａｒｌｓｏｎ， Ｃ． Ｌ．； Ｖａｎｄｅｒｗｅｒｆ， Ｓ． Ｍ．； Ｚｉｅｍｅｒ， Ｊ． Ｒ．； Ｗｅｅｋｓ， Ｒ． Ｓ．； Ｃａｉ， Ｆ．； Ｗｅｂｂ， Ｈ． Ｋ．； ａｎｄ Ｇｒａｍｉｎｓｋｉ， Ｇ． Ｆ． Ａｍｉｎｏ ａｃｉｄ／ｓｐｅｒｍｉｎｅ ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ： ｐｏｌｙａｍｉｎｅ ａｍｉｄｅｓ ａｓ ｐｏｔｅｎｔ ｓｐｅｒｍｉｄｉｎｅ ｕｐｔａｋｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ． Ｊ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ． ２００１， ４４， ３６３２−３６４４．
【０１７０】
４６． Ｗｏｏｄ， Ｓ． Ｊ．； Ｍｉｌｌｅｒ， Ｋ． Ａ．； ａｎｄ Ｄａｖｉｄ， Ｓ． Ａ． Ａｎｔｉ−ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ ａｇｅｎｔｓ． １． Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ａ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ ｐｒｏｂｅ ｄｉｓｐｌａｃｅｍｅｎｔ ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｔｈｅ ｒａｐｉｄ ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ−ｂｉｎｄｉｎｇ ａｇｅｎｔｓ． Ｃｏｍｂ． Ｃｈｅｍ． Ｈｉｇｈ． Ｔｈｒｏｕｇｈｐｕｔ． Ｓｃｒｅｅｎ． ２００４， ７， ２３９−２４９．
【０１７１】
４７． Ｍｏｒｒｉｓｏｎ， Ｄ． Ｃ． ａｎｄ Ｊａｃｏｂｓ， Ｄ． Ｍ． Ｂｉｎｄｉｎｇ ｏｆ ｐｏｌｙｍｙｘｉｎ Ｂ ｔｏ ｔｈｅ ｌｉｐｉｄ Ａ ｐｏｒｔｉｏｎ ｏｆ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ． Ｉｍｍｕｎｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ １９７６， １３， ８１３−８１８．
【０１７２】
４８． Ｄａｖｉｄ， Ｓ． Ａ．； Ｂａｌａｓｕｂｒａｍａｎｉａｎ， Ｋ． Ａ．； Ｍａｔｈａｎ， Ｖ． Ｉ．； ａｎｄ Ｂａｌａｒａｍ， Ｐ． Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｔｈｅ ｂｉｎｄｉｎｇ ｏｆ ｐｏｌｙｍｙｘｉｎ Ｂ ｔｏ ｅｎｄｏｔｏｘｉｃ ｌｉｐｉｄ Ａ ａｎｄ ｃｏｒｅ ｇｌｙｃｏｌｉｐｉｄ ｕｓｉｎｇ ａ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ ｄｉｓｐｌａｃｅｍｅｎｔ ｐｒｏｂｅ． Ｂｉｏｃｈｉｍ． Ｂｉｏｐｈｙｓ． Ａｃｔａ １９９２， １１６５， １４７−１５２．
【０１７３】
４９． Ｂｒａｄｅ， Ｈ．； Ｍｏｌｌ， Ｈ．； ａｎｄ Ｒｉｅｔｓｃｈｅｌ， Ｅ． Ｔ． Ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ ｏｎ ｔｈｅ ｉｎｎｅｒ ｃｏｒｅ ｒｅｇｉｏｎ ｏｆ ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ ｆｒｏｍ Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｍｉｎｎｅｓｏｔａ ｒｏｕｇｈ ｍｕｔａｎｔｓ． Ｂｉｏｍｅｄ． Ｅｎｖｉｒｏｎ． Ｍａｓｓ Ｓｐｅｃｔｒｏｍ． １９８５， １２， ６０２−６０９．
【０１７４】
５０． Ｂｒａｄｅ， Ｈ．； Ｂｒａｄｅ， Ｌ．； ａｎｄ Ｒｉｅｔｓｃｈｅｌ， Ｅ． Ｔ． Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ−ａｃｔｉｖｉｔｙ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｓ ｏｆ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ （Ｅｎｄｏｔｏｘｉｎｓ）． Ｃｕｒｒｅｎｔ ａｎｄ Ｆｕｔｕｒｅ Ａｓｐｅｃｔｓ． Ｚｂｌ． Ｂａｋｔ． Ｈｙｇ． ，Ｉ Ａｂｔ． Ｏｒｉｇ． １９８８， Ａ ２６８／２， １５１−１７９．
【０１７５】
５１． Ｂｕｒｎｓ， Ｍ． Ｒ．； Ｃａｒｌｓｏｎ， Ｃ． Ｌ．； Ｖａｎｄｅｒｗｅｒｆ， Ｓ． Ｍ．； Ｚｉｅｍｅｒ， Ｊ． Ｒ．； Ｗｅｅｋｓ， Ｒ． Ｓ．； Ｃａｉ， Ｆ．； Ｗｅｂｂ， Ｈ． Ｋ．； ａｎｄ Ｇｒａｍｉｎｓｋｉ， Ｇ． Ｆ． Ａｍｉｎｏ ａｃｉｄ／ｓｐｅｒｍｉｎｅ ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ： ｐｏｌｙａｍｉｎｅ ａｍｉｄｅｓ ａｓ ｐｏｔｅｎｔ ｓｐｅｒｍｉｄｉｎｅ ｕｐｔａｋｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ． Ｊ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ． ２００１， ４４， ３６３２−３６４４．
【０１７６】
５２． Ｚｈａｎｇ， Ｊ． Ｈ．； Ｃｈｕｎｇ， Ｔ． Ｄ．； ａｎｄ Ｏｌｄｅｎｂｕｒｇ， Ｋ． Ｒ． Ａ Ｓｉｍｐｌｅ Ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌ Ｐａｒａｍｅｔｅｒ ｆｏｒ Ｕｓｅ ｉｎ Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｖａｌｉｄａｔｉｏｎ ｏｆ Ｈｉｇｈ Ｔｈｒｏｕｇｈｐｕｔ Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ Ａｓｓａｙｓ． Ｊ Ｂｉｏｍｏｌ． Ｓｃｒｅｅｎ． １９９９， ４， ６７−７３．
【０１７７】
５３． Ｇｒｅｅｎ， Ｌ． Ｃ．； Ｗａｇｎｅｒ， Ｄ． Ａ．； Ｇｌｏｇｏｗｓｋｉ， Ｊ．； Ｓｋｉｐｐｅｒ， Ｐ． Ｌ．； Ｗｉｓｈｎｏｋ， Ｊ． Ｓ．； ａｎｄ Ｔａｎｎｅｎｂａｕｍ， Ｓ． Ｒ． Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｎｉｔｒａｔｅ， ｎｉｔｒｉｔｅ ａｎｄ ［１５−Ｎ］ ｎｉｔｒａｔｅ ｉｎ ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｆｌｕｉｄｓ． Ａｎａｌ． Ｂｉｏｃｈｅｍ． １９８２， １２６， １３１．
【０１７８】
５４． Ｇｒｅｉｓｓ， Ｐ． Ｂｅｍｅｒｋｕｎｇｅｎ ｚｕ ｄｅｒ ａｂｈａｎｄｌｕｎｇ ｄｅｒ Ｈ．Ｈ． Ｗｅｓｅｌｓｋｙ ｕｎｄ Ｂｅｎｅｄｉｋｔ “Ｕｅｂｅｒ ｅｉｎｉｇｅ ａｚｏｖｅｒｂｉｎｄｕｎｇｅｎ”． Ｃｈｅｍ． Ｂｅｒ． １８７９， １２， ４２６−４２７．
【０１７９】
５５． Ｃｏｏｋ， Ｅ． Ｂ．； Ｓｔａｈｌ， Ｊ． Ｌ．； Ｌｏｗｅ， Ｌ．； Ｃｈｅｎ， Ｒ．； Ｍｏｒｇａｎ， Ｅ．； Ｗｉｌｓｏｎ， Ｊ．； Ｖａｒｒｏ， Ｒ．； Ｃｈａｎ， Ａ．； Ｇｒａｚｉａｎｏ， Ｆ． Ｍ．； ａｎｄ Ｂａｒｎｅｙ， Ｎ． Ｐ． Ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓ ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ ｏｆ ｓｉｘ ｃｙｔｏｋｉｎｅｓ ｉｎ ａ ｓｉｎｇｌｅ ｓａｍｐｌｅ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｔｅａｒｓ ｕｓｉｎｇ ｍｉｃｒｏｐａｒｔｉｃｌｅ−ｂａｓｅｄ ｆｌｏｗ ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ： ａｌｌｅｒｇｉｃｓ ｖｓ． ｎｏｎ−ａｌｌｅｒｇｉｃｓ． Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． Ｍｅｔｈｏｄｓ ２００１， ２５４， １０９−１１６．
【０１８０】
５６． Ｆｕｎａｔｏ， Ｙ．； Ｂａｕｍｈｏｖｅｒ， Ｈ．； Ｇｒａｎｔｈａｍ−Ｗｒｉｇｈｔ， Ｄ．； Ｗｉｌｓｏｎ， Ｊ．； Ｅｒｎｓｔ， Ｄ．； ａｎｄ Ｓｅｐｕｌｖｅｄａ， Ｈ． Ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓ ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ ｏｆ ｓｉｘ ｈｕｍａｎ ｃｙｔｏｋｉｎｅｓ ｕｓｉｎｇ ｔｈｅ Ｃｙｔｏｍｅｔｒｉｃ Ｂｅａｄ Ａｒｒａｙ Ｓｙｓｔｅｍ， ａ ｍｕｌｔｉｐａｒａｍｅｔｅｒ ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ ｓｙｓｔｅｍ ｆｏｒ ｆｌｏｗ ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ． Ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ Ｒｅｓ． ２００２， １２， ９３−１０３．
【０１８１】
５７． Ｆｒｅｕｄｅｎｂｅｒｇ， Ｍ． Ａ． ａｎｄ Ｇａｌａｎｏｓ， Ｃ． Ｔｕｍｏｒ ｎｅｃｒｏｓｉｓ ｆａｃｔｏｒ ａｌｐｈａ ｍｅｄｉａｔｅｓ ｌｅｔｈａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｋｉｌｌｅｄ Ｇｒａｍ−ｎｅｇａｔｉｖｅ ａｂｄ Ｇｒａｍ−ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｂａｃｔｅｒｉａ ｉｎ Ｄ−ｇａｌａｃｔｏｓａｍｉｎｅ−ｔｒｅａｔｅｄ ｍｉｃｅ． Ｉｎｆｅｃｔ． Ｉｍｍｕｎ． １９９１， ５９， ２１１０−２１１５．
【０１８２】
５８． Ｔｒａｃｅｙ， Ｋ． Ｊ． ａｎｄ Ｃｅｒａｍｉ， Ａ． Ｔｕｍｏｒ ｎｅｃｒｏｓｉｓ ｆａｃｔｏｒ， ｏｔｈｅｒ ｃｙｔｏｋｉｎｅｓ ａｎｄ ｄｉｓｅａｓｅ． ． Ａｎｎｕ． Ｒｅｖ． Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ． １９９３， ９， ３１７−３４３．
【図面の簡単な説明】
【０１８３】
【図１】細菌のリポ多糖の毒性部位である脂質Ａの構造。数値はアシル鎖長を示す。
【図２】ＢＯＤＩＰＹ−カダベリン置換法により決定される化合物のＬＰＳ結合親和性。ポリミキシンＢ（ＰＭＳ）を対照化合物として用いた。アルキル化合物を白抜き記号及び点線で表示し、アシル化合物を黒塗り記号及び実線で表示する。
【図３】１０ｎｇ／ｍｌの大腸菌０１１１：Ｂ４ ＬＰＳで１４時間刺激したマウスＪ７７４．Ａ１細胞の、ポリミキシンＢ（対照化合物）、アシル（黒塗り記号）及びアルキル（白抜き記号）Ｌｙｓ−スペルミン類似体による酸化窒素（ＮＯ）阻害。４つのパラメータロジティックフィットにより決定された阻害定数（ＩＣ５０）値を、表１〜３に示す。
【図４】ＮＯ阻害効力と、直鎖アシル／アルキル類似体の炭素長との相関。挿入図：結合親和性（ＢＣ置換）と炭素鎖長との間の相関。相関があまりない場合には、結合剤と真の中和剤とを識別するためのプローブ置換法の感受性がやや低い。
【図５】マウスＪ７７４細胞における、ＢＣ蛍光プローブ置換により決定されるＬｙｓ−スペルミン類似体の結合親和性（ＥＤ５０）と、ＮＯ阻害（ＩＣ５０）との相関。
【図６】多様なグラム陰性菌から単離されたＬＰＳへのリジン−スペルミン化合物の結合。結合効力のランク順は一定である。
【図７】選択されたＬｙｓ−スペルミン化合物による、１０ｎｇ／ｍｌの大腸菌０１１１：Ｂ４ ＬＰＳで刺激されたヒト血液中における炎症性サイトカインＴＮＦ−α及びＩＬ−６の阻害。
【図８】親油性リジン−スペルミン複合体の合成ａ ａ条件及び試薬：（ａ）ＣＨ３ＯＨ；（ｂ）Ｂｏｃ２Ｏ，ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ，Ｎａ２ＣＯ３；（ｃ）Ｈ２，Ｐｄ／Ｃ，ＥｔＯＨ；（ｄ）ＲＣＯＣｌ，Ｅｔ３Ｎ，ＣＨ２Ｃｌ２；（ｅ）１．ＲＣＨＯ，ＣＨ（ＯＣＨ３）３，Ｅｔ３Ｎ，ＣＨ２Ｃｌ２，２．ＮａＢＨ４，ＣＨ３ＯＨ；（ｆ）３Ｎ ＨＣｌ／ＣＨ３ＯＨ．
【技術分野】
【０００１】
関連出願を参照
本出願は、発明の名称を「強力なリポ多糖金属イオン封鎖剤としての疎水性ポリアミンアミド類」とする米国仮出願シリアル番号６０／６２７，０８２号（２００４年１１月１２日出願）の利益を主張し、その開示全体が本明細書中で参考として組み込まれる。
【０００２】
連邦委託研究又は振興に関する報告
本研究は、ＮＩＨ ＩＵ０１ ＡＩ０５４７８５（ＳＤ）により支持されており、米国政府は、本発明に一定の権利を有し得る。
【背景技術】
【０００３】
「エンドトキシン類」とも呼ばれるリポ多糖（ＬＰＳ）は、グラム陰性菌の外部膜の構成成分である。リポ多糖は、重病患者の主な死因である「敗血症ショック」の発病に重要な役割を担っている。リポ多糖を標的とし、下流における全身性炎症過程を抑えるための治療は、現在のところは存在しない。本発明者らは、小分子によるＬＰＳの特異的な結合及び中和に必要な活性基を定義し、かつ、敗血症の動物モデルを用いて、小分子による循環系のＬＰＳの捕捉が治療上有用な戦略であることを示した。リジン−スペルミン複合体の特定のライブラリとリポ多糖（ＬＰＳ）との相互作用が特徴付けられた。アシル又はアルキル結合中の長鎖脂肪族疎水性置換基で誘導体化されたリジニル部位のε−アミノ末端を有するリジン−スペルミン複合体などの特定のポリアミンアミドは、細菌のリポ多糖を結合及び中和し、試験結果によれば、これらは内毒素性ショック状態又は敗血症の予防又は治療に適していることが示唆される。
【０００４】
エンドトキシン類、すなわちリポ多糖類（ＬＰＳ）は、グラム陰性菌の外部膜の主要な構成要素であり（非特許文献１及び２）、身体の防御機構が弱まっていたり損傷していたりする場合、又は、重篤な全身性感染（グラム陰性敗血症）の抗生物質による化学療法の結果として起こる全身毒性の症候群である敗血症ショックにおいて、中心的な役割を担う（非特許文献３〜５）。非専門用語で「血液毒」と呼ばれるグラム陰性敗血症は、死因全体の１３番目にあたり（非特許文献６）、集中治療室での死因では１番目であり（非特許文献７）、死亡者は米国で年間２００，０００人を超える（非特許文献８）。抗微生物化学療法の著しい飛躍にもかかわらず、敗血症の発症率は１９７９〜２０００年でほぼ３倍に増加しており（非特許文献９）、敗血症関連致死率は、約４５％から実質的に変動していない。これらのいずれからも、重病患者の死亡を防ぐには、積極的な抗微生物療法のみでは不十分であり、敗血症の病理学を特に標的とした治療上の選択肢を開発する必要性が満たされておらず、また、これが急務であるということが明らかである。
【０００５】
ＬＰＳの存在は、先天的な免疫応答の広範な活性化を引き起こし（非特許文献１０及び１１）、主に単細胞／マクロファージ系の細胞により、腫瘍壊死因子α（ＴＮＦ−α）、インターロイキン−１β（ＩＬ−１β）及びインターロイキン−６（ＩＬ−６）を含む多くの炎症メディエーターの産生が制御されなくなる（非特許文献１２及び１３）。これらのメディエーターや、これ以外に、上皮細胞により産生される酸化窒素など（非特許文献１４及び１５）が過剰に産生されて、これが制御されない場合、発熱、低血圧、凝固障害、血行動態異常、組織の血流低下及び多臓器不全により特徴付けられる全身性の炎症応答が生じ（非特許文献１６及び１７）、死に至ることが多い。
【０００６】
敗血症ショックの治療は依然として主に支持的療法であり、根本的な病理を抑えるための特定の療法は、残念なことにまだ利用できない。グラム陰性敗血症の問題の治療に使用できる可能性のあるアプローチの一つは、ＬＰＳに結合してこれを捕捉する薬剤を用いてＬＰＳ自体を標的とするものである。ＬＰＳの毒性は、高度に保存された構造を有する脂質Ａと呼ばれる糖脂質成分に起因する（非特許文献２２及び２３）ということが、全体的な合成により示された（非特許文献１８〜２１）。脂質Ａは、親水性のビスホスホリル化ジグルコースアミン骨格、並びに、アミド結合及びエステル結合中の６つ（大腸菌）又は７つ（サルモネラ菌）のアシル鎖の疎水性ドメインから構成される（非特許文献２４〜２６）（図１）。脂質Ａは、アニオン性及び両親媒性であるため（図１）、正電荷を帯びていて両親媒性の性質も有する多くの物質に結合することができる。タンパク質（非特許文献２７及び２８）、ペプチド（非特許文献２９〜３３）、医薬化合物（非特許文献３４及び３５）及び他の合成ポリカチオン性両親媒性分子（非特許文献３６〜３８）を含む多くの分類のカチオン性両親媒性分子と脂質Ａとの相互作用を特徴づけに関して、過去１０年にわたって研究がなされてきた。重要なことに、これらの研究及び現在進行中の研究によって、小分子が脂質Ａを最適に認識及び中和するのに必要な活性基（非特許文献３５）は、脂質Ａ（〜約１４Å）上の２つのアニオン性リン酸基同士の間の距離と距離が等しく配置された２つのプロトン化可能な正電荷を必要とし、これにより、脂質Ａ骨格上のリン酸基と化合物上の正電荷との間にイオン性の水素結合ができるということが決定された。さらに、結合親和性の増強、及び、脂質Ａとポリアシルドメインとの疎水性相互作用により得られた複合体の安定化には、ペンダント疎水性官能基が適切に配置されていることが必要である（最近の総説による、参考文献３９を参照）。こうした構造的な要件は、新しく見出され、現在はＤＮＡトランスフェクション（リポフェクション）剤として用いられている新規分類の化合物リポポリアミンのうちの特定種において初めて同定された（非特許文献４０〜４３）。複合体化スペルミンクラスの化合物は特に関心を集めている、というのは、これらはｉｎ ｖｉｖｏにおいて活性を有していて、グラム陰性敗血症の動物モデルにおいて保護作用があり、合成によって容易に入手でき、かつ、重要なことには、生理学的置換基（スペルミン及び脂肪酸）に分解するために非毒性である（非特許文献３７及び４４）からである。
【非特許文献１】Ｒｉｅｔｓｃｈｅｌ， Ｅ． Ｔ．； Ｋｉｒｉｋａｅ， Ｔ．； Ｓｃｈａｄｅ， Ｆ． Ｕ．； Ｍａｍａｔ， Ｕ．； Ｓｃｈｍｉｄｔ， Ｇ．； Ｌｏｐｐｎｏｗ， Ｈ．； Ｕｌｍｅｒ， Ａ． Ｊ．； Ｚａｈｒｉｎｇｅｒ， Ｕ．； Ｓｅｙｄｅｌ， Ｕ．； Ｄｉ Ｐａｄｏｖａ， Ｆ．ら． Ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ： ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｓ ｏｆ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｔｏ ａｃｔｉｖｉｔｙ ａｎｄ ｆｕｎｃｔｉｏｎ． ＦＡＳＥＢ Ｊ． １９９４， ８， ２１７−２２５．
【非特許文献２】Ｒｉｅｔｓｃｈｅｌ，Ｅ．Ｔ．； Ｂｒａｄｅ，Ｌ．； Ｌｉｎｄｎｅｒ，Ｂ．； ａｎｄ Ｚａｈｒｉｎｇｅｒ，Ｕ． Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ｏｆ ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ． Ｉｎ Ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｅｎｄｏｔｏｘｉｃ ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ， ｖｏｌ．Ｉ． Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ ｃｅｌｌｕｌａｒ ｂｉｏｌｏｇｙ． Ｍｏｒｒｉｓｏｎ， Ｄ． Ｃ． ａｎｄ Ｒｙａｎ， Ｊ． Ｌ． Ｅｄｓ．； ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ： Ｂｏｃａ Ｒａｔｏｎ， １９９２； ｐｐ １−４１．
【非特許文献３】Ｈｕｒｌｅｙ， Ｊ． Ｃ． Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ−ｉｎｄｕｃｅｄ ｒｅｌｅａｓｅ ｏｆ ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ： Ａ ｒｅａｐｐｒａｉｓａｌ． Ｃｌｉｎ． Ｉｎｆｅｃｔ． Ｄｉｓ． １９９２， １５， ８４０−８５４．
【非特許文献４】Ｈｕｒｌｅｙ， Ｊ． Ｃ． Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ−ｉｎｄｕｃｅｄ ｒｅｌｅａｓｅ ｏｆ ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ． Ａ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｐａｒａｄｏｘ． Ｄｒｕｇ Ｓａｆ． １９９５， １２， １８３−１９５．
【非特許文献５】Ｐｒｉｎｓ， Ｊ． Ｍ．； ｖａｎ Ａｇｔｍａｅｌ， Ｍ． Ａ．； Ｋｕｉｊｐｅｒ， Ｅ． Ｊ．； ｖａｎ Ｄｅｖｅｎｔｅｒ， Ｓ． Ｊ．； ａｎｄ Ｓｐｅｅｌｍａｎ， Ｐ． Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ−ｉｎｄｕｃｅｄ ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ ｒｅｌｅａｓｅ ｉｎ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｇｒａｍ−ｎｅｇａｔｉｖｅ ｕｒｏｓｅｐｓｉｓ： ａ ｄｏｕｂｌｅ−ｂｌｉｎｄ ｓｔｕｄｙ ｃｏｍｐａｒｉｎｇ ｉｍｉｐｅｎｅｍ ａｎｄ ｃｅｆｔａｚｉｄｉｍｅ． Ｊ． Ｉｎｆｅｃｔ． Ｄｉｓ． １９９５， １７２， ８８６−８９１．
【非特許文献６】Ｇｅｌｆａｎｄ， Ｊ． Ａ． ａｎｄ Ｓｈａｐｉｒｏ， Ｌ． Ｃｙｔｏｋｉｎｅｓ ａｎｄ ｓｅｐｓｉｓ： ｐａｔｈｏｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ ａｎｄ ｔｈｅｒａｐｙ． Ｎｅｗ Ｈｏｒｉｚｏｎｓ １９９３， １， １３−２２．
【非特許文献７】Ｇａｓｃｈｅ，Ｙ．； Ｐｉｔｔｅｔ，Ｄ．； ａｎｄ Ｓｕｔｔｅｒ，Ｐ． Ｏｕｔｃｏｍｅ ａｎｄ ｐｒｏｇｎｏｓｔｉｃ ｆａｃｔｏｒｓ ｉｎ ｂａｃｔｅｒｅｍｉｃ ｓｅｐｓｉｓ． Ｉｎ Ｃｌｉｎｉｃａｌ ｔｒｉａｌｓ ｆｏｒ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ｓｅｐｓｉｓ． Ｓｉｂｂａｌｄ， Ｗ． Ｊ． ａｎｄ Ｖｉｎｃｅｎｔ， Ｊ． Ｌ． Ｅｄｓ．； Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ： Ｂｅｒｌｉｎ， １９９５； ｐｐ ３５−５１．
【非特許文献８】Ｃｅｎｔｅｒｓ ｆｏｒ Ｄｉｓｅａｓｅｓ Ｃｏｎｔｒｏｌ． Ｉｎｃｒｅａｓｅｓ ｉｎ ｎａｔｉｏｎａｌ ｈｏｓｐｉｔａｌ ｄｉｓｃｈａｒｇｅ ｓｕｒｖｅｙ ｒａｔｅｓ ｆｏｒ ｓｅｐｔｉｃｅｍｉａ − Ｕｎｉｔｅｄ Ｓｔａｔｅｓ， １９７９−１９８７． ＭＭＷＲ １９９０， ３９， ３１−３４．
【非特許文献９】Ｍａｒｔｉｎ， Ｇ． Ｓ．； Ｍａｎｎｉｎｏ， Ｄ． Ｍ．； Ｅａｔｏｎ， Ｓ．； ａｎｄ Ｍｏｓｓ， Ｍ． Ｔｈｅ ｅｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｙ ｏｆ ｓｅｐｓｉｓ ｉｎ ｔｈｅ Ｕｎｉｔｅｄ Ｓｔａｔｅｓ ｆｒｏｍ １９７９ ｔｈｒｏｕｇｈ ２０００． Ｎ． Ｅｎｇｌ． Ｊ． Ｍｅｄ． ２００３， ３４８， １５４６−１５５４．
【非特許文献１０】Ｕｌｅｖｉｔｃｈ， Ｒ． Ｊ． Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ ｏｆ ｉｎｎａｔｅ ｉｍｍｕｎｉｔｙ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． Ｒｅｓ． ２０００， ２１， ４９−５４．
【非特許文献１１】Ｕｌｅｖｉｔｃｈ， Ｒ． Ｊ． ａｎｄ Ｔｏｂｉａｓ， Ｐ． Ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ ｏｆ ｇｒａｍ−ｎｅｇａｔｉｖｅ ｂａｃｔｅｒｉａ ａｎｄ ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ ｂｙ ｔｈｅ ｉｎｎａｔｅ ｉｍｍｕｎｅ ｓｙｓｔｅｍ． Ｃｕｒｒ． Ｏｐｉｎ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． １９９９， １１， １９−２３．
【非特許文献１２】Ｄｉｎａｒｅｌｌｏ， Ｃ． Ａ． Ｃｙｔｏｋｉｎｅｓ ａｓ ｍｅｄｉａｔｏｒｓ ｉｎ ｔｈｅ ｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ ｏｆ ｓｅｐｔｉｃ ｓｈｏｃｋ． Ｃｕｒｒ． Ｔｏｐ． Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． １９９６， ２１６， １３３−１６５．
【非特許文献１３】Ｄｉｎａｒｅｌｌｏ， Ｃ． Ａ． Ｔｈｅ ｐｒｏｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｃｙｔｏｋｉｎｅｓ ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ−１ ａｎｄ ｔｕｍｏｒ ｎｅｃｒｏｓｉｓ ｆａｃｔｏｒ ａｎｄ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ｔｈｅ ｓｅｐｔｉｃ ｓｈｏｃｋ ｓｙｎｄｒｏｍｅ． Ｊ． Ｉｎｆｅｃｔ． Ｄｉｓ． １９９１， １６３， １１７７−１１８４．
【非特許文献１４】Ｍｅｙｅｒ， Ｊ． ａｎｄ Ｔｒａｂｅｒ， Ｄ． Ｌ． Ｎｉｔｒｉｃ ｏｘｉｄｅ ａｎｄ ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ ｓｈｏｃｋ． Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ． Ｒｅｓ． １９９２， ２６， ５５８．
【非特許文献１５】Ｗｒｉｇｈｔ， Ｃ． Ｅ．； Ｒｅｅｓ， Ｄ． Ｄ．； ａｎｄ Ｍｏｎｃａｄａ， Ｓ． Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ ａｎｄ ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ ｒｏｌｅｓ ｏｆ ｎｉｔｒｉｃ ｏｘｉｄｅ ｉｎ ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ ｓｈｏｃｋ． Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ． Ｒｅｓ． １９９２， ２６， ４８−５７．
【非特許文献１６】Ｂｏｎｅ， Ｒ． Ｃ．； Ｂａｌｋ， Ｒ． Ａ．； Ｃｅｒｒａ， Ｆ． Ｂ．； Ｄｅｌｌｉｎｇｅｒ， Ｒ． Ｐ．； Ｆｅｉｎ， Ａ． Ｍ．； Ｋｎａｕｓ， Ｗ． Ａ．； Ｓｃｈｅｉｎ， Ｒ． Ｍ．； ａｎｄ Ｓｉｂｂａｌｄ， Ｗ． Ｊ． Ｄｅｆｉｎｉｔｉｏｎｓ ｆｏｒ ｓｅｐｓｉｓ ａｎｄ ｏｒｇａｎ ｆａｉｌｕｒｅ ａｎｄ ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ｕｓｅ ｏｆ ｉｎｎｏｖａｔｉｖｅ ｔｈｅｒａｐｉｅｓ ｉｎ ｓｅｐｓｉｓ． Ｔｈｅ ＡＣＣＰ／ＳＣＣＭ Ｃｏｎｓｅｎｓｕｓ Ｃｏｎｆｅｒｅｎｃｅ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ． Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｃｈｅｓｔ Ｐｈｙｓｉｃｉａｎｓ／Ｓｏｃｉｅｔｙ ｏｆ Ｃｒｉｔｉｃａｌ Ｃａｒｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ． Ｃｈｅｓｔ １９９２， １０１， １６４４−１６５５．
【非特許文献１７】Ｂｏｎｅ， Ｒ． Ｃ． Ｔｈｅ ｓｅｐｓｉｓ ｓｙｎｄｒｏｍｅ． Ｄｅｆｉｎｉｔｉｏｎ ａｎｄ ｇｅｎｅｒａｌ ａｐｐｒｏａｃｈ ｔｏ ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ． Ｃｌｉｎ． Ｃｈｅｓｔ Ｍｅｄ． １９９６， １７， １７５−１８１．
【非特許文献１８】Ｇａｌａｎｏｓ， Ｃ．； Ｌｕｄｅｒｉｔｚ， Ｏ．； Ｒｉｅｔｓｃｈｅｌ， Ｅ． Ｔ．； Ｗｅｓｔｐｈａｌ， Ｏ．； Ｂｒａｄｅ， Ｈ．； Ｂｒａｄｅ， Ｌ．； Ｆｒｅｕｄｅｎｂｅｒｇ， Ｍ． Ａ．； Ｓｃｈａｄｅ， Ｕ． Ｆ．； Ｉｍｏｔｏ， Ｍ．； Ｙｏｓｈｉｍｕｒａ， Ｓ．； Ｋｕｓｕｍｏｔｏ， Ｓ．； ａｎｄ Ｓｈｉｂａ， Ｔ． Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ ａｎｄ ｎａｔｕｒａｌ Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ ｆｒｅｅ ｌｉｐｉｄ Ａ ｅｘｐｒｅｓｓ ｉｄｅｎｔｉｃａｌ ｅｎｄｏｔｏｘｉｃ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ． Ｅｕｒ． Ｊ． Ｂｉｏｃｈｅｍ． １９８５， １４８， １−５．
【非特許文献１９】Ｉｍｏｔｏ， Ｍ．； Ｙｏｓｈｉｍｕｒａ， Ｈ．； Ｋｕｓｕｍｏｔｏ， Ｓ．； ａｎｄ Ｓｈｉｂａ， Ｔ． Ｔｏｔａｌ ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｏｆ ｌｉｐｉｄ Ａ， ａｃｔｉｖｅ ｐｒｉｎｃｉｐｌｅ ｏｆ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ． Ｐｒｏｃ． Ｊａｐａｎ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ． １９８４， ６０， ２８５−２８８．
【非特許文献２０】Ｋｏｔａｎｉ， Ｓ．； Ｔａｋａｄａ， Ｈ．； Ｔｓｕｊｉｍｏｔｏ， Ｍ．； Ｏｇａｗａ， Ｔ．； Ｔａｋａｈａｓｈｉ， Ｉ．； Ｉｋｅｄａ， Ｔ．； Ｏｔｓｕｋａ， Ｋ．； Ｓｈｉｍａｕｃｈｉ， Ｈ．； Ｋａｓａｉ， Ｎ．； Ｍａｓｈｉｍｏ， Ｊ．； Ｎａｇａｏ， Ｓ．； Ｔａｎａｋａ， Ａ．； Ｔａｎａｋａ， Ｓ．； Ｈａｒａｄａ， Ｋ．； Ｎａｇａｋｉ， Ｋ．； Ｋｉｔａｍｕｒａ， Ｈ．； Ｓｈｉｂａ， Ｔ．； Ｋｕｓｕｍｏｔｏ， Ｓ．； Ｉｍｏｔｏ， Ｍ．； ａｎｄ Ｙｏｓｈｉｍｕｒａ， Ｈ． Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ ｌｉｐｉｄ Ａ ｗｉｔｈ ｅｎｄｏｔｏｘｉｃ ａｎｄ ｒｅｌａｔｅｄ ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｃｏｍｐａｒａｂｌｅ ｔｏ ｔｈｏｓｅ ｏｆ ａ ｎａｔｕｒａｌ ｌｉｐｉｄ Ａ ｆｒｏｍ ａｎ Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ Ｒｅ−ｍｕｔａｎｔ． Ｉｎｆｅｃｔ． Ｉｍｍｕｎ． １９８５， ４９， ２２５−２３７．
【非特許文献２１】Ｋｕｓｕｍｏｔｏ，Ｓ．； Ｋａｍｉｋａｗａ，Ｔ．； Ｋｕｒｏｓａｗａ，Ｍ．； Ｆｕｋａｓｅ，Ｋ．； Ｓｈｉｂａ，Ｔ．； Ｋｕｓａｍａ，Ｔ．； Ｓｏｇａ，Ｔ．； Ｓｈｉｏｙａ，Ｅ．； Ｎａｋａｙａｍａ，Ｋ．； Ｎａｋａｙｉｍａ，Ｈ．； Ｏｓａｄａ，Ｙ．； ａｎｄ Ｏｎｏ，Ｙ． Ｎｅｗ ｒｅｓｕｌｔｓ ｉｎ ｔｈｅ ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｏｆ ｌｉｐｉｄ Ａ ａｎｄ ｅｎｄｏｔｏｘｉｎｓ． Ｉｎ Ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｓｅｒｉｅｓ， Ｎｏｗｏｔｎｙ， Ａ．， Ｅｄ．， Ｖｏｌ． １， Ｃｅｌｌｕｌａｒ ａｎｄ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ａｓｐｅｃｔｓ ｏｆ ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ ｒｅａｃｔｉｏｎｓ． Ｎｏｗｏｔｎｙ， Ａ．， Ｓｐｉｔｚｅｒ， Ｊ． Ｊ．， ａｎｄ Ｚｉｅｇｌｅｒ， Ｅ． Ｊ． Ｅｄｓ．； Ｅｌｓｅｖｉｅｒ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ： Ａｍｓｔｅｒｄａｍ， １９９０； ｐｐ ４１−５１．
【非特許文献２２】Ｈｏｌｓｔ，Ｏ．； Ｕｌｍｅｒ，Ａ．Ｊ．； Ｂｒａｄｅ，Ｈ．； ａｎｄ Ｒｉｅｔｓｃｈｅｌ，Ｅ．Ｔ． Ｏｎ ｔｈｅ ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ ｂｉｏｌｏｇｙ ｏｆ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｅｎｄｏｔｏｘｉｃ ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ． Ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ ｏｆ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ． Ｍａｓｉｈｉ， Ｎ． Ｅｄ．； Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ， Ｉｎｃ．： Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ， Ｂａｓｅｌ， Ｈｏｎｇ Ｋｏｎｇ， １９９４； ｐｐ ２８１−３０８．
【非特許文献２３】Ｒｉｅｔｓｃｈｅｌ，Ｅ．Ｔ．； Ｗｏｌｌｅｎｗｅｂｅｒ，Ｈ．Ｗ．； Ｓｉｄｏｒｃｚｙｋ，Ｚ．； Ｚａｈｒｉｎｇｅｒ，Ｕ．； ａｎｄ Ｌｕｄｅｒｉｔｚ，Ｏ． Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｔｈｅ ｐｒｉｍａｒｙ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｏｆ ｌｉｐｉｄ Ａ． Ｉｎ Ｂａｃｔｅｒｉａｌ Ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ： Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ， Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ａｎｄ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ． Ａｎｄｅｒｓｏｎ， Ｌ． ａｎｄ Ｕｎｇｅｒ， Ｆ． Ｍ． Ｅｄｓ．； Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｓｙｍｐ．Ｓｅｒ．： Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｄ．Ｃ．， １９８３； ｐｐ １９５−２１２．
【非特許文献２４】Ｆｅｒｇｕｓｏｎ， Ａ． Ｄ．； Ｈｏｆｍａｎｎ， Ｅ．； Ｃｏｕｌｔｏｎ， Ｊ．； Ｄｉｅｄｒｉｃｈｓ， Ｋ．； ａｎｄ Ｗｅｌｔｅ， Ｗ． Ｓｉｄｅｒｏｐｈｏｒｅ−ｍｅｄｉａｔｅｄ ｉｒｏｎ ｔｒａｎｓｐｏｒｔ： Ｃｒｙｓｔａｌ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｏｆ ＦｈｕＡ ｗｉｔｈ ｂｏｕｎｄ ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ． Ｓｃｉｅｎｃｅ １９９８， ２２１５−２２２０．
【非特許文献２５】Ｋｉｒｉｋａｅ， Ｔ．； Ｓｃｈａｄｅ， Ｆ． Ｕ．； Ｚａｈｒｉｎｇｅｒ， Ｕ．； Ｋｉｒｉｋａｅ， Ｆ．； Ｂｒａｄｅ， Ｈ．； Ｋｕｓｕｍｏｔｏ， Ｓ．； Ｋｕｓａｍａ， Ｔ．； ａｎｄ Ｒｉｅｔｓｃｈｅｌ， Ｅ． Ｔ． Ｔｈｅ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ ｏｆ ｔｈｅ ｈｙｄｒｏｐｈｉｌｉｃ ｂａｃｋｂｏｎｅ ａｎｄ ｔｈｅ ｈｙｄｒｏｐｈｏｂｉｃ ｆａｔｔｙ ａｃｉｄ ｒｅｇｉｏｎｓ ｏｆ Ｌｉｐｉｄ Ａ ｏｎ ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ ｂｉｎｄｉｎｇ ａｎｄ ｃｙｔｏｋｉｎｅ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ． ＦＥＭＳ Ｉｍｍｕｎｏｌ． Ｍｅｄ． Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ． １９９４， ８， １３−２６．
【非特許文献２６】Ｋｕｓｕｍｏｔｏ，Ｓ．； Ｉｎａｇｅ，Ｍ．； Ｃｈａｋｉ，Ｈ．； Ｉｍｏｔｏ，Ｍ．； Ｓｈｉｍａｍｏｔｏ，Ｔ．； ａｎｄ Ｓｈｉｂａ，Ｔ． Ｃｈｅｍｉｃａｌ ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｏｆ ｌｉｐｉｄ Ａ ｆｏｒ ｔｈｅ ｅｌｕｃｉｄａｔｉｏｎ ｏｆ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ−ａｃｔｉｖｉｔｙ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｓ． Ｉｎ Ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ： ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ， ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ， ａｎｄ ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ． Ａｎｄｅｒｓｏｎ， Ｌ． ａｎｄ Ｕｎｇｅｒ， Ｆ． Ｍ． Ｅｄｓ．； Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｓｏｃｉｅｔｙ： １９８３； ｐｐ ２３７−２５４．
【非特許文献２７】Ｄａｖｉｄ， Ｓ． Ａ．； Ｂａｌａｒａｍ， Ｐ．； ａｎｄ Ｍａｔｈａｎ， Ｖ． Ｉ． Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ ｏｆ ｌｉｐｉｄ Ａ ａｎｄ ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ｗｉｔｈ ｈｕｍａｎ ｓｅｒｕｍ ａｌｂｕｍｉｎ： ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｆｏｒ ａｎ ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ−ｃａｒｒｉｅｒ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｆｏｒ ａｌｂｕｍｉｎ． Ｊ． Ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ． Ｒｅｓ． １９９５， ２， ９９−１０６．
【非特許文献２８】Ｄａｖｉｄ，Ｓ．Ａ． Ｔｈｅ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ ｏｆ ｌｉｐｉｄ Ａ ａｎｄ ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ｗｉｔｈ ｈｕｍａｎ ｓｅｒｕｍ ａｌｂｕｍｉｎ． Ｉｎ Ｅｎｄｏｔｏｘｉｎｓ ｉｎ ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ ｄｉｓｅａｓｅ． Ｂｒａｄｅ， Ｈ．， Ｏｐａｌ， Ｓ． Ｍ．， Ｖｏｇｅｌ， Ｓ． Ｎ．， ａｎｄ Ｍｏｒｒｉｓｏｎ， Ｄ． Ｃ． Ｅｄｓ．； Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ： Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ， １９９９； ｐｐ ４１３−４２２．
【非特許文献２９】Ｂｈａｔｔａｃｈａｒｊｙａ， Ｓ．； Ｄａｖｉｄ， Ｓ． Ａ．； Ｍａｔｈａｎ， Ｖ． Ｉ．； ａｎｄ Ｂａｌａｒａｍ， Ｐ． Ｐｏｌｙｍｙｘｉｎ Ｂ ｎｏｎａｐｅｐｔｉｄｅ： Ｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ ｉｎ ｗａｔｅｒ ａｎｄ ｉｎ ｔｈｅ ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ−ｂｏｕｎｄ ｓｔａｔｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ｂｙ ｔｗｏ−ｄｉｍｅｎｓｉｏｎａｌ ＮＭＲ ａｎｄ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｄｙｎａｍｉｃｓ． Ｂｉｏｐｏｌｙｍｅｒｓ １９９７， ４１， ２５１−２６５．
【非特許文献３０】Ｄａｖｉｄ， Ｓ． Ａ．； Ｂｈａｔｔａｃｈａｒｊｙａ， Ｓ．； Ｍａｔｈａｎ， Ｖ． Ｉ．； ａｎｄ Ｂａｌａｒａｍ， Ｐ． Ｅｌｕｃｉｄａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｏｆ ｆｒｅｅ ａｎｄ ＬＰＳ−ｂｏｕｎｄ ｐｏｌｙｍｙｘｉｎ Ｂ ｎｏｎａｐｅｐｔｉｄｅ ｉｎ ｗａｔｅｒ ｂｙ ２Ｄ−ＮＭＲ ａｎｄ ｒｅｓｔｒａｉｎｅｄ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｄｙｎａｍｉｃｓ ｍｅｔｈｏｄｓ ａｎｄ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｍｏｄｅｌｉｎｇ ｏｆ ｐｏｌｙｍｙｘｉｎ−ｌｉｐｉｄ Ａ ｃｏｍｐｌｅｘ． Ｊ． Ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ． Ｒｅｓ． １９９４， １（ｓｕｐｐｌ）， Ａ６０．
【非特許文献３１】Ｄａｖｉｄ， Ｓ． Ａ．； Ｂａｌａｒａｍ， Ｐ．； ａｎｄ Ｍａｔｈａｎ， Ｖ． Ｉ． Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ ｏｆ ｂａｓｉｃ ａｍｐｈｉｐｈｉｌｉｃ ｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅ ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌｓ， ｇｒａｍｉｃｉｄｉｎ Ｓ， ｔｙｒｏｃｉｄｉｎ ａｎｄ ｅｆｒａｐｅｐｔｉｎ， ｗｉｔｈ ｅｎｄｏｔｏｘｉｃ ｌｉｐｉｄ Ａ． Ｍｅｄ． Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ． Ｌｅｔｔ． １９９３， ２， ４２−４７．
【非特許文献３２】Ｄａｖｉｄ， Ｓ． Ａ．； Ｍａｔｈａｎ， Ｖ． Ｉ．； ａｎｄ Ｂａｌａｒａｍ， Ｐ． Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ ｏｆ ｍｅｌｉｔｔｉｎ ｗｉｔｈ ｅｎｄｏｔｏｘｉｃ ｌｉｐｉｄ Ａ． Ｂｉｏｃｈｉｍ． Ｂｉｏｐｈｙｓ． Ａｃｔａ １９９２， １１２３， ２６９−２７４．
【非特許文献３３】Ｄａｖｉｄ， Ｓ． Ａ．； Ａｗａｓｔｈｉ， Ｓ． Ｋ．； ａｎｄ Ｂａｌａｒａｍ， Ｐ． Ｔｈｅ ｒｏｌｅ ｏｆ ｐｏｌａｒ ａｎｄ ｆａｃｉａｌ ａｍｐｈｉｐａｔｈｉｃ ｃｈａｒａｃｔｅｒ ｉｎ ｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇ ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ−ｂｉｎｄｉｎｇ ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ ｉｎ ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ ｃａｔｉｏｎｉｃ ｐｅｐｔｉｄｅｓ． Ｊ． Ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ Ｒｅｓ． ２０００， ６， ２４９−２５６．
【非特許文献３４】Ｄａｖｉｄ， Ｓ． Ａ．； Ｂｅｃｈｔｅｌ， Ｂ．； Ａｎｎａｉａｈ， Ｃ．； Ｍａｔｈａｎ， Ｖ． Ｉ．； ａｎｄ Ｂａｌａｒａｍ， Ｐ． Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ ｏｆ ｃａｔｉｏｎｉｃ ａｍｐｈｉｐｈｉｌｉｃ ｄｒｕｇｓ ｗｉｔｈ ｌｉｐｉｄ Ａ： Ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｆｏｒ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｓ． Ｂｉｏｃｈｉｍ． Ｂｉｏｐｈｙｓ． Ａｃｔａ １９９４， １２１２， １６７−１７５．
【非特許文献３５】Ｄａｖｉｄ， Ｓ． Ａ．； Ｍａｔｈａｎ， Ｖ． Ｉ．； ａｎｄ Ｂａｌａｒａｍ， Ｐ． Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ ｏｆ ｌｉｎｅａｒ ｄｉｃａｔｉｏｎｉｃ ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ ｗｉｔｈ ｌｉｐｉｄ Ａ： Ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ ｒｅｑｕｉｓｉｔｅｓ ｆｏｒ ｏｐｔｉｍａｌ ｂｉｎｄｉｎｇ ａｆｆｉｎｉｔｙ． Ｊ． Ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ． Ｒｅｓ． １９９５， ２， ３２５−３３６．
【非特許文献３６】Ｄａｖｉｄ， Ｓ． Ａ．； Ａｗａｓｔｈｉ， Ｓ． Ｋ．； Ｗｉｅｓｅ， Ａ．； Ｕｌｍｅｒ， Ａ． Ｊ．； Ｌｉｎｄｎｅｒ， Ｂ．； Ｂｒａｎｄｅｎｂｕｒｇ， Ｋ．； Ｓｅｙｄｅｌ， Ｕ．； Ｒｉｅｔｓｃｈｅｌ， Ｅ． Ｔ．； Ｓｏｎｅｓｓｏｎ， Ａ．； ａｎｄ Ｂａｌａｒａｍ， Ｐ． Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ ｏｆ ａ ｐｏｌｙｃａｔｉｏｎｉｃ， ａｍｐｈｉｐｈｉｌｉｃ， ｔｅｒｍｉｎａｌｌｙ ｂｒａｎｃｈｅｄ ｏｌｉｇｏｐｅｐｔｉｄｅ ｗｉｔｈ ｌｉｐｉｄ Ａ ａｎｄ ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｄｅｅｐ ｒｏｕｇｈ ｍｕｔａｎｔ ｏｆ Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｍｉｎｎｅｓｏｔａ． Ｊ． Ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ Ｒｅｓ． １９９６， ３， ３６９−３７９．
【非特許文献３７】Ｄａｖｉｄ， Ｓ． Ａ．； Ｓｉｌｖｅｒｓｔｅｉｎ， Ｒ．； Ａｍｕｒａ， Ｃ． Ｒ．； Ｋｉｅｌｉａｎ， Ｔ．； ａｎｄ Ｍｏｒｒｉｓｏｎ， Ｄ． Ｃ． Ｌｉｐｏｐｏｌｙａｍｉｎｅｓ： ｎｏｖｅｌ ａｎｔｉｅｎｄｏｔｏｘｉｎ ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ ｔｈａｔ ｒｅｄｕｃｅ ｍｏｒｔａｌｉｔｙ ｉｎ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｓｅｐｓｉｓ ｃａｕｓｅｄ ｂｙ ｇｒａｍ−ｎｅｇａｔｉｖｅ ｂａｃｔｅｒｉａ． Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ． １９９９， ４３， ９１２−９１９．
【非特許文献３８】Ｄａｖｉｄ， Ｓ． Ａ．； Ｐｅｒｅｚ， Ｌ．； ａｎｄ Ｉｎｆａｎｔｅ， Ｍ． Ｒ． Ｓｅｑｕｅｓｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ｂｙ ｂｉｓ（ａｒｇｓ） ｇｅｍｉｎｉ ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ． Ｂｉｏｏｒｇ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ． Ｌｅｔｔ． ２００２， １２， ３５７−３６０．
【非特許文献３９】Ｄａｖｉｄ， Ｓ． Ａ． Ｔｏｗａｒｄｓ ａ ｒａｔｉｏｎａｌ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ａｎｔｉ−ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ ａｇｅｎｔｓ： ｎｏｖｅｌ ａｐｐｒｏａｃｈｅｓ ｔｏ ｓｅｑｕｅｓｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｅｎｄｏｔｏｘｉｎｓ ｗｉｔｈ ｓｍａｌｌ ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ （Ｉｎｖｉｔｅｄ Ｒｅｖｉｅｗ）． Ｊ． Ｍｏｌｅｃ． Ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ ２００１， １４， ３７０−３８７．
【非特許文献４０】Ｂｅｈｒ， Ｊ． Ｐ．； Ｄｅｍｅｎｅｉｘ， Ｂ．； Ｌｏｅｆｆｌｅｒ， Ｊ． Ｐ．； ａｎｄ Ｐｅｒｅｚ−Ｍｕｔｕｌ， Ｊ． Ｅｆｆｉｃｉｅｎｔ ｇｅｎｅ ｔｒａｎｓｆｅｒ ｉｎｔｏ ｍａｍｍａｌｉａｎ ｐｒｉｍａｒｙ ｅｎｄｏｃｒｉｎｅ ｃｅｌｌｓ ｗｉｔｈ ｌｉｐｏｐｏｌｙａｍｉｎｅ−ｃｏａｔｅｄ ＤＮＡ． Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ． ＵＳＡ １９８９， ８６， ６９８２−６９８６．
【非特許文献４１】Ｂｅｈｒ， Ｊ． Ｐ． Ｇｅｎｅ ｔｒａｎｓｆｅｒ ｗｉｔｈ ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ ｃａｔｉｏｎｉｃ ａｍｐｈｉｐｈｉｌｅｓ： Ｐｒｏｓｐｅｃｔｓ ｆｏｒ ｇｅｎｅ ｔｈｅｒａｐｙ． Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇ． Ｃｈｅｍ． １９９４， ５， ３８２−３８９．
【非特許文献４２】Ｆｅｌｇｎｅｒ， Ｐ． Ｌ．； Ｇａｄｅｋ， Ｔ． Ｒ．； Ｈｏｌｍ， Ｍ．； Ｒｏｍａｎ， Ｒ．； Ｃｈａｎ， Ｈ． Ｗ．； Ｗｅｎｚ， Ｍ．； Ｎｏｒｔｈｒｏｐ， Ｊ． Ｐ．； Ｒｉｎｇｏｌｄ， Ｇ． Ｍ．； ａｎｄ Ｄａｎｉｅｌｓｅｎ， Ｍ． Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｏｎ： ａ ｈｉｇｈｌｙ ｅｆｆｉｃｉｅｎｔ， ｌｉｐｉｄ−ｍｅｄｉａｔｅｄ ＤＮＡ ｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ ｐｒｏｃｅｄｕｒｅ． Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ． ＵＳＡ １９８７， ８４， ７４１３−７４１７．
【非特許文献４３】Ｓａｎ， Ｈ．； Ｙａｎｇ， Ｚ． Ｙ．； Ｐｏｍｐｉｌｉ， Ｖ． Ｊ．； Ｊａｆｆｅ， Ｍ． Ｌ．； Ｐｌａｕｔｚ， Ｇ． Ｅ．； Ｘｕ， Ｌ．； Ｆｅｌｇｎｅｒ， Ｊ．； Ｗｈｅｅｌｅｒ， Ｃ． Ｊ．； Ｆｅｌｇｎｅｒ， Ｐ． Ｌ．； ａｎｄ Ｇａｏ， Ｘ． Ｓａｆｅｔｙ ａｎｄ ｓｈｏｒｔ−ｔｅｒｍ ｔｏｘｉｃｉｔｙ ｏｆ ａ ｎｏｖｅｌ ｃａｔｉｏｎｉｃ ｌｉｐｉｄ ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ ｆｏｒ ｈｕｍａｎ ｇｅｎｅ ｔｈｅｒａｐｙ． Ｈｕｍ． Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒ． １９９３， ４， ７８１−７８８．
【非特許文献４４】Ｂｌａｇｂｒｏｕｇｈ， Ｉ． Ｓ．； Ｇｅａｌｌ， Ａ． Ｊ．； ａｎｄ Ｄａｖｉｄ， Ｓ． Ａ． Ｌｉｐｏｐｏｌｙａｍｉｎｅｓ ｉｎｃｏｒｐｏｒｔａｉｎｇ ｔｈｅ ｔｅｒａａｍｉｎｅ ｓｐｅｒｍｉｎｅ ｂｏｕｎｄ ｔｏ ａｎ ａｌｋｙｌ ｃｈａｉｎ ， ｓｅｑｕｅｓｔｅｒ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ． Ｂｉｏｏｒｇ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ． Ｌｅｔｔ． ２０００， １０， １９５９−１９６２．
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明者らは、エンタルピー性の水素結合／ファンデルワールス相互作用をさらに付与するであろうポリアミン骨格の構造的多様性を系統的に同定することを目的として、研究を継続している。本明細書に記載のリジン−スペルミン誘導体などのポリアミンアミドは、ポリアミン骨格の１つの末端に立体的な水素結合供与体／受容体官能基が組み込まれた化合物の群の例である。このことから、最適なエンドトキシン捕捉のためには、長鎖疎水性基が末端に配置されていることが必須であるということが確認される。また、本発明者らは、Ｌ−リジン複合体とＤ−リジン複合体とでは結合親和性及び中和効力の両方において顕著な差があることを見出した。このことは、適切な立体化学を有する水素結合供与体／受容体官能基でポリアミン骨格が繰り返し置換されることによって、非常に強力であるが毒性のないエンドトキシンの中和剤が得られるということを示唆する。本開示による、強力であるが非毒性であるエンドトキシン中和剤であるとして意図される化合物の例は、米国特許出願公開第２００３０１８７２７６ Ａ１号（米国特許出願１０／２９６，２５９号）及びＰＣＴ公開ＷＯ０２／０５３５１９ Ａ２号に開示され、これらの開示は本明細書中で参照として組み込まれる。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本開示は、下記式：
【０００９】
【化１】
【００１０】
（式中、ＸはＯ又はＨ、Ｈであり、Ｒは疎水性Ｃ１２−Ｃ２０鎖であり、Ｙは−ＮＨ２又は−Ｈである）：で表される少なくとも１つの化合物、その医薬品に許容される塩及びそのプロドラッグの有効量を、これを必要とする宿主に投与することによって、内毒素性ショック症状を治療する、又は、ＮＯ活性、ＴＮＦ−α産生、ＩＬ−６産生及びサイトカイン活性のうち少なくとも１つを阻害する方法に関する。
【００１１】
また、本開示は、Ｙが−Ｈである上記式の新規化合物、その医薬品に許容される塩及びそのプロドラッグにも関する。
【００１２】
本開示の他の目的、特徴及び利点は、以下の詳細な説明から明らかになるであろう。しかし、以下の詳細な説明及び特定の実施例は、本発明の好ましい実施形態を示しているが、これらを例証するのみであって、本開示から逸脱しない範囲で種々の改変を当然実施可能であるということが理解されるであろう。
【００１３】
（図面の簡潔な説明）
図１は、細菌のリポ多糖の毒性部位である脂質Ａの構造を示す。
【００１４】
図２は、ＢＯＤＩＰＹ−カダベリン置換法により決定される化合物のＬＰＳへの結合親和性を例示するグラフである。
【００１５】
図３は、マウスＪ７７４．Ａ１細胞における酸化窒素（ＮＯ）阻害を例示するグラフである。
【００１６】
図４は、ＮＯ阻害効力と直鎖アシル／アルキル類似体の炭素長との相関を例示するグラフである。
【００１７】
図５は、マウスＪ７７４細胞における、ＢＣ蛍光プローブ置換により決定されるＬｙｓ−スペルミン類似体の結合親和性（ＥＤ５０）と、ＮＯ阻害（ＩＣ５０）との相関を例示するグラフである。
【００１８】
図６は、グラム陰性菌から単離されたＬＰＳに対するリジン−スペルミン化合物の結合を例示する表である。
【００１９】
図７は、１０ｎｇ／ｍｌの大腸菌０１１１：Ｂ４ ＬＰＳで刺激されたヒト血液中における、選択されたＬｙｓ−スペルミン化合物の炎症性サイトカインＴＮＦ−α及びＩＬ−６の阻害を例示するグラフである。
【００２０】
図８は、本開示に関して用いられる化合物の合成のためのスキームを例示する。
【００２１】
本開示は、下記式：
【００２２】
【化２】
【００２３】
（式中、ＸはＯ又はＨ、Ｈであり、Ｒは疎水性Ｃ１２−Ｃ２０鎖であり、Ｙは−ＮＨ２又はＨである）：で表される少なくとも１つの化合物、その医薬品に許容される塩及びそのプロドラッグの有効量を、これを必要とする宿主に投与することによって、内毒素性ショック症状を治療する、又は、ＮＯ活性、ＴＮＦ−α産生、ＩＬ−６産生及びサイトカイン活性のうち少なくとも１つを阻害する方法に関する。
【００２４】
また、本開示は、Ｙが−Ｈである上記式の新規化合物、その医薬品に許容される塩及びそのプロドラッグにも関する。
【００２５】
疎水性Ｃ１２−Ｃ２０鎖の例としては、脂肪族基、アシル基、フェニルベンジル、及び、ＯＳＯ基をα位に有する基が挙げられる。脂肪族基は、飽和又はエチレン性不飽和の、直鎖、環状又は分岐鎖であってよい。本開示の方法は、敗血症、炎症及び感染を治療するのに用いることができる。
【００２６】
種々の窒素系官能基（アミノ基、ヒドロキシアミノ基、ヒドラジノ基、グアジニノ基、アミジノ基、アミド基等）を有する化合物のプロドラッグの形態としては下記のタイプの誘導体が含まれていてもよい。ここでＲ基は、それぞれ独立に、上述したような、水素、置換又は無置換のアルキル基、アリール基、アルケニル基、アルキニル基、複素環基、アルキルアリール基、アラルキル基、アラルケニル基、アラルキニル基、シクロアルキル基又はシクロアルケニル基であってもよい。
カルボキサミド、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ
カルバミン酸エステル、−ＮＨＣ（Ｏ）ＯＲ
カルバミン酸（アシルオキシ）アルキルエステル、ＮＨＣ（Ｏ）ＯＲＯＣ（Ｏ）Ｒ
エナミン、−ＮＨＣＲ（＝ＣＨＣＲＯ２Ｒ）又は−ＮＨＣＲ（＝ＣＨＣＲＯＮＲ２）
シッフ（Ｓｃｈｉｆｆ）塩基、−Ｎ＝ＣＲ２
マンニッヒ（Ｍａｎｎｉｃｈ）塩基（カルボキシイミド化合物由来）、ＲＣＯＮＨＣＨ２ＮＲ２
【００２７】
上記プロドラッグ誘導体の調製法は、種々の文献において議論されている（例えば、 Ａｌｅｘａｎｄｅｒら， Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１９８８，３１，３１８； Ａｌｉｇａｓ−Ｍａｒｔｉｎら， ＰＣＴ ＷＯ ｐｐ／４１５３１， ｐ．３０）。これらの誘導体を調製する際に変換される窒素系官能基は、本発明の化合物の窒素原子のうちの１つ（又は２つ以上）である。
【００２８】
本開示の、カルボキシル基を有する化合物のプロドラッグ型の形態にはエステル（−ＣＯ２Ｒ）が含まれ、Ｒ基は、酵素的又は加水分解的プロセスにより体内に放出される量が薬学的に許容されるレベルである任意のアルコールに相当する。
【００２９】
本開示のカルボン酸形態から誘導される他のプロドラッグは、Ｂｏｄｏｒら Ｊ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ． １９８０， ２３， ４６９に記載される第四級塩型：
【００３０】
【化３】
【００３１】
：の構造であってよい。
【００３２】
当然ながら、本発明の化合物は、上記分子に存在する可能性のある種々の原子におけるすべての光学異性体及び立体異性体に関連するということが理解される。
【００３３】
本開示の化合物は、広範囲にわたる種々の有機酸・無機酸及び有機塩基・無機塩基と共に酸付加塩及び塩基付加塩を形成し、これらの中には、薬化学において使用されることの多い生理学的に許容される塩が含まれる。このような塩もまた、本発明の一部である。上記塩を形成するために使用される典型的な無機酸には、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硝酸、硫酸、リン酸、次リン酸等が含まれる。脂肪族モノカルボン酸及びジカルボン酸、フェニル基置換アルカン酸、ヒドロキシアルカン酸及びヒドロキシアルカンジオン酸、芳香族酸、脂肪族及び芳香族スルホン酸等の有機酸由来の塩を使用することもできる。従って、上記医薬品に許容される塩には、酢酸塩、フェニル酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、アクリル酸塩、アスコルビン酸塩、安息香酸塩、クロロ安息香酸塩、ジニトロ安息香酸塩、ヒドロキシ安息香酸塩、メトキシ安息香酸塩、メチル安息香酸塩、ｏ−アセトキシ安息香酸塩、ナフタレン−２−ベンゾエート、臭化物、イソ酪酸塩、フェニル酪酸塩、β−ヒドロキシ酪酸塩、ブチン−１，４−ジオエート、ヘキシン−１，４−ジオエート、カプロン酸塩、カプリル酸塩、塩化物、珪皮酸塩、クエン酸塩、ギ酸塩、フマル酸塩、グリコール酸塩、ヘプタン酸塩、馬尿酸塩、乳酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、ヒドロキシマレイン酸塩、マロン酸塩、マンデル酸塩、メシラート、ニコチン酸塩、イソニコチン酸塩、硝酸塩、シュウ酸塩、フタル酸塩、テレフタル酸塩、リン酸塩、リン酸一水素塩、リン酸二水素塩、メタリン酸塩、ピロリン酸塩、プロピオール酸塩、プロピオン酸塩、フェニルプロピオン酸塩、サリチル酸塩、セバシン酸塩、コハク酸塩、スベリン酸塩、硫酸塩、重硫酸塩、ピロ硫酸塩、亜硫酸塩、重亜硫酸塩、スルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ−ブロモベンゼンスルホン酸塩、クロロベンゼンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、２−ヒドロキシエタンスルホン酸塩、メタンスルホン酸塩、ナフタレン−１−スルホン酸塩、ナフタレン−２−スルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、キシレンスルホン酸塩、酒石酸塩等が含まれる。
【００３４】
塩を形成するために一般に使用される塩基には、水酸化アンモニウム、並びに、アルカリ金属及びアルカリ土類金属の水酸化物、炭酸塩、さらに１級、２級及び３級の脂肪族アミン、脂肪族ジアミンが含まれる。付加塩の調製に特に有用な塩基には、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化アンモニウム、炭酸カリウム、メチルアミン、ジエチルアミン及びエチレンジアミンが含まれる。
【００３５】
リジン−スペルミン複合体の合成に用いられる方法を使用することによって、リジンのε−窒素原子の選択的官能基化及びクロマトグラフィーによる精製を過剰量の極性アミン基への暴露前に実施することができる。特に、ポリアミン複合体上において極性アミノ基をブロックする際にはＢｏｃ−カルバメートを用い、こうすることによって、以前に報告された、時間のかかるイオン交換法４５の代わりに順相ＳｉＯ２クロマトグラフィーを用いることができる。これらの類似体の合成は、図８に示すように、スペルミン１の遊離塩基を垂直状に保護された活性エステルＢｏｃ−Ｌｙｓ（Ｃｂｚ）−ＯＮｐ ２のＬ−又はＤ−立体異性体のいずれかとカップリングさせることから始まる。活性エステルをスペルミン溶液に滴下することによって、モノ−、ジ−及び未置換生成物の統計学的分布が得られる。スペルミンの残存未置換アミノ基と過剰量のＢｏｃ２Ｏとを反応させることによって、過Ｂｏｃ混合物が得られる。そして、得られた混合物を標準的なシリカゲルクロマトグラフィーにより分離することができる。次いで、精製されたモノアシル化誘導体３を接触水素化に供し、これによって、Ｃｂｚ−保護基を除去し、遊離のアミノ中間体４を得る。高Ｒｆを有するアルキル化副生成物が形成されるのを防ぐため、この水素化の間にはケトンを含有しないエタノールを使用することが望ましい。次いで、アミン４を標準的なアシル化又は還元的アルキル化により官能基化して、Ｌｙｓ−スペルミン類似体の保護形態を得る。モノアルキル誘導体については、イミンを予め形成し、次いで、ＮａＢＨ４を用いて還元する。ジアルキル化類似体３０及び３８については、過剰量のアルデヒドを、ＮａＢＨ３ＣＮでの還元的アミノ化反応で用いる。特有の官能基は、一般的な反応条件を用いて、又は、市販の供給源から合成する場合もある。誘導体化された中間体をＳｉＯ２クロマトグラフィーを用いて精製し、ＭｅＯＨ中の３Ｎ ＨＣｌを用いてＢｏｃ基を除去して、Ｌｙｓ−スペルミン類似体をそのＨＣｌ塩の形態で得る。化合物をＴＬＣ、１Ｈ及び１３Ｃ ＮＭＲ、元素分析及びＬＣ／ＭＳを用いて特徴付けした結果、全てのスペクトルは指定された構造と一致する。
【００３６】
「構造−活性の関係：結合親和性及びｉｎ ｖｉｔｒｏ中和効力」
Ｌｙｓ−スペルミン類似体の相対的結合親和性を、最近報告された４６ＢＯＤＩＰＹ−ＴＲカダベリン（ＢＣ）を用いた高処理量蛍光性置換アッセイによって検査し、プローブの５０％有効置換量（ｈａｌｆ−ｍａｘｉｍａｌ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ ｄｉｓｐｌａｃｅｍｅｎｔ）（ＥＤ５０）として図２及び表１−３に示す。マウス単細胞（Ｊ７７４．Ａ１細胞）は、ＬＰＳに暴露されるとＮＯをいくらか生成し、化合物によるＬＰＳ活性の中和を迅速に評価するためのモデルとなる。ＬＰＳを中和する化合物はＮＯ産生を用量依存的に阻害し、これより、図３及び表１−３に示すように、５０％阻害濃度（ＩＣ５０）を決定することができる。全実験において、ＬＰＳを結合及び中和することが知られているデカペプチド抗生物質であるポリミキシンＢ（ＰＭＢ）２９；４７；４８を、対照化合物として用いる。
【００３７】
＜炭化水素鎖長＞未置換ε−アミノリジンを有するリジン−スペルミン類似体５（Ｌ−Ｌｙｓ、ＥＤ５０：４０μＭ）及び６（Ｄ−Ｌｙｓ、ＥＤ５０：５８μＭ）は、置換アッセイにおいてほとんど結合を示さず、また、ＬＰＳ誘導性ＮＯ産生の阻害は無視できる程度のものである。リジンのε−アミノ基の置換から親和性が増加していることが明らかになるが（表１）、炭化水素鎖長と親和性の間に顕著な相関性はない（図４、挿入図）。対照的に、炭素鎖長の増大はＬＰＳ活性の阻害の効力に相関することが明らかである（図４）。こうした明らかな不整合は、ＬＰＳ結合ＢＣの置換が疎水性置換基に対して相対的に鈍感であることに起因しており、また、静電的相互作用に支配されている４６。このように制約される結果、ＬＰＳを単に結合するのみのリガンドと、実際にＬＰＳ活性を中和するリガンドが区別できない。見込みのある全てのリード物質もＮＯ阻害アッセイによってスクリーニングする。アルキルホモログＣ６ ３１（＞１０００μＭ）、Ｃ７ ２９（４６μＭ）、Δ１１−Ｃ１６ ２７（０．６６μＭ）及びＣ８ １７（１６０μＭ）〜Ｃ２０ ７（１．２μＭ）の一連のアシル群により示されるように、鎖長はＮＯ阻害活性において重要な決定因子であった。
【００３８】
＜鎖不飽和＞アシル鎖のトランス不飽和は、Δ９−Ｌ−Ｌｙｓ−Ｃ１６ １５（３．８μＭ）とＬ−Ｌｙｓ−Ｃ１６ １４（１１μＭ）との比較、及び、Δ１１−Ｌ−Ｌｙｓ−Ｃ１８ １０（４．２μＭ）とＬ−Ｌｙｓ−Ｃ１６ ９（１６μＭ）との比較によって示されるように、結合を増大させることが見出される。アルキルについても同様で、ｃｉｓ−不飽和Ｌ−Ｌｙｓ−Δ１１−Ｃ１６ ２７は、対応する飽和体Ｃ１６ ２６（５．６μＭ）よりもＩＣ５０が２．６μＭと高い。しかし、これはＬＰＳ中和活性の改善と比例していない；例えば、Ｌ−Ｌｙｓ−Ｃ１６ １４（ＩＣ５０：６．４μＭ）及び完全飽和体１５（ＩＣ５０：８．８μＭ）は効力が等しい。本発明者らは、不飽和類似体で観察された親和性の増大も、プローブ置換方法により人為的にもたらされたものであろうと推測するが、このことに束縛されるわけではない。一般的に不飽和化合物はその飽和ホモログよりも水溶性がわずかに大きいため、ＬＰＳ−バルク溶媒界面における局所的有効濃度が高くなり得る３４。留意すべきことに、ｉｎ ｖｉｔｒｏバイオアッセイと動物モデルとで溶解度が異なるという問題は、生理学的濃度のアルブミンが存在し、これによりＬＰＳ及びリガンドの両方が可溶化されることにより緩和される２８。従って、疎水性置換基の不飽和化は、効力の高い化合物をもたらすということは予測されていなかったが、溶解性が低い他の類似体についての溶解性増大の評価用に有用である可能性があるストラテジーとして、関心がもたれるであろう。
【００３９】
＜立体的相互作用＞短くてかさ高い置換基を有する類似体は結合が多くて鎖炭素数が多いが（例えば、（Ｓ）−（−）−シトロネラールから誘導される３２（９．６μＭ）を有するイソブチル３５（１０１μＭ）、及び、モノアルキル化メチルシクロヘキシル３７（９．８μＭ）を有するビス−アルキル化メチルシクロヘキシル ３８（４．０μＭ）（表２））、しかし、これらの化合物はいずれも、ジ−及びトリ−エーテルホモログ２４及び２５（ＩＣ５０：＞１０００ｍＭ）並びにポリエチレングリコールポリマー２３（３２０μＭ）ほど強力なＬＰＳ中和剤ではない。ビフェニル３９及び２１並びにアントラセン２２はいずれも、ＬＰＳ親和性が相当高いが（ＥＤ５０：それぞれ３．７μＭ、７．９μＭ及び７．１μＭ）、これらはＬＰＳ生物活性阻害剤としては弱い（ＩＣ５０：＞１００μＭ）。こうした結果から、最適な生物学的効力には長鎖脂肪族炭化水素置換基が必須要件であることが強調される。
【００４０】
＜Ｌｙｓ残基の立体化学＞リジンのα−炭素の立体化学が転化された場合、Ｄ−Ｌｙｓ−Ｃ１６ １３（１０μＭ）及びＬ−Ｌｙｓ−Ｃ１６ １４（１１μＭ）の立体異性対の結合親和性には影響は全く及ばないが、長鎖Ｄ−Ｌｙｓ−Ｃ１８ ８（８．８μＭ）においてはＬ−Ｌｙｓ−Ｃ１８ ９（１６μＭ）と比較して顕著な増強がみられる。このことは、ＮＯ産生の阻害においてＤ−類似体の効力がより高いということに一致する。脂質Ａ部位はキラルであり、結合様式は不斉中心の立体配置に影響され得る。
【００４１】
＜アルキル化とアシル化＞アルキル化合物は、これに対応するアシル化合物よりも結合が強い；例えば、アルキルＣ１６ ２６（５．６μＭ）とアシルＣ１６ １４（１１μＭ）とを比較されたい。このことは、上述するように、ε−アミノ基のアシル化の際にプロトン化可能な正電荷が失われ、これによって溶解性が弱まることに起因する可能性がある。
【００４２】
「ＩＣ５０とＥＤ５０との比較」
ＩＣ５０値対ＥＤ５０値のグラフは、直線傾向を示し、相関係数はＲ＝０．６４である（図５）。疎水性相互作用の強いＬＰＳ結合剤は勅製から逸れているが、これは、ＢＣ−ＬＰＳ置換アッセイでは、ＬＰＳ中和に必須であることが示された疎水性相互作用は正確に予測されないということに起因する。このことは、結合親和性が高いにも関わらず生物学的活性が顕著に低い芳香族及びかさ高い置換基についても観察され、ＩＣ５０対ＥＤ５０のグラフの左上側で塊のように見える（図５）。
【００４３】
「異なるグラム陰性菌由来のＬＰＳの比較」
脂質Ａの構造はグラム陰性菌の間でよく保存されているが、多糖ドメインはグラム陰性菌の間で非常に多様である４９；５０。Ｌｙｓ−スペルミンライブラリは、保存された脂質Ａ部分に結合するよう設計されているため、本発明者らは、異なる細菌に由来する広範囲のＬＰＳに対する結合は多様ではないと予測していた。図６に示すように、親和性が最も高いＬｙｓ−スペルミン類似体は１〜１０μＭにおいて異なる細菌由来のＬＰＳに常に結合し、相対的に弱い結合剤は、１０〜１００μＭにおいて全てのＬＰＳに結合することが示された。このことから、Ｌｙｓ−スペルミン化合物は種々のＬＰＳ構造に結合するために臨床的に有用である可能性があるということが明らかになる。
【００４４】
「多重サイトメトリックビーズアッセイにより測定される、ヒト全血中の炎症性サイトカインの用量依存的阻害」
Ｌｙｓ−スペルミン化合物がマウスマクロファージにおけるＮＯ産生の阻害に対して活性を有するということが確認されたため、これらがヒト細胞においてＬＰＳ誘導性炎症応答をも阻害するであろうということをそれぞれ確認する。Ｌｙｓ−スペルミン化合物の小集団の活性について、ＬＰＳでｅｘ ｖｉｖｏ刺激されたヒト全血中でＴＮＦ−α及びＩＬ−６の産生を阻害する能力について検査する。図７に示すように、本アッセイにおける阻害効力の順位は概してＮＯ阻害活性に並行であり、８は、対照化合物であるポリミキシンＢとほぼ同等の効力を有する。
【００４５】
「内毒素性ショックのマウスモデルにおける保護効果」
置換アッセイ、ＮＯ及びサイトカインの阻害データの結果に基づいて、動物実験において詳細に評価するために８を選択する。ＬＤ１００（致死用量−１００％）の用量を、マウス（雌、異系交配、ＣＦ−１マウス、Ｄ−ガラクトサミン８００ｍｇ／ｋｇにより感作）１匹当たり１００ｎｇであると決定する。本明細書中で報告する全ての実験において、最終容積０．２ｍＬの生理食塩水中、マウス１匹当たりの致死量を超える２００ｎｇを使用して入る。８により得られる保護の用量応答を、表４に図示する。以前の研究ではＤＯＳＰＥＲ３７などの不安定なスペルミン複合体を用いていたが、これによれば、保護の時間枠（ｗｉｎｄｏｗ）は１５分と非常に短いことが分かった。加水分解安定性が大きいのではないかと期待される化合物８について、保護の時間枠が長くなるかどうかを試験する。全てのマウスに２００ｎｇ／匹のＬＰＳを注射した時点を時間０として−６、−４、−２、０、＋１及び＋２時間で、最終容積０．２ｍＬの注射剤中の２００μｇの８を腹腔内投与する。化合物８は、ＬＰＳを投与する６時間前まで保護が顕著である（表５）。これらの結果に基づき、腹腔内投与ではなく皮下投与での経時実験を、より長い時間枠で実施する（ＬＰＳ投与の時間に対して−２４、−１６、−１２、−８、−４、０及び＋２時間）。注射部位から徐々にゆっくりと全身に吸収されるという特徴を有するこの治療計画において、長時間の保護が観察されるかどうかを確認するために試験を実施する。最後に注射して２４時間後に、致死率を再度評価する。−２４の群において５匹中２匹のマウスが生存していて、−１６、−１２及び−８の群では５匹中３匹のマウスが生存しているが（表６）、このことから、ＬＰＳ投与の１６時間前に化合物が投与される場合であっても保護は顕著であるということが示される。これらの結果から、一時的保護の時間枠がＤＯＳＰＥＲ３７よりも顕著に長いということが示される。
【００４６】
アルキル又はアシルε−置換リジン−スペルミン複合体の特定のライブラリを、炭素数が偶数で長さＣ１４〜Ｃ２０の鎖を用いて合成する。これらの類似体及びそれらの関連するＬＰＳ結合、ＮＯ阻害及びＮＦκＢ阻害活性を、表７に示す。これらのデータは、効力の高い化合物の鎖長は約Ｃ１８であるということを明らかに示す。さらに、上記データは、活性の高い化合物の鎖長はＣ１６〜Ｃ２０であるということを示す。上記データは、活性の高い化合物はアシル（Ｘ＝Ｏ）置換されていてよいということを示す。上記データは、活性の高い化合物はアルキル（Ｘ＝Ｈ、Ｈ）置換されていてよいということを示す。例示された化合物Ｌ−Ｌｙｓ−ε−（ステアロイル）−Ｎ１−スペルミン、Ｄ−Ｌｙｓ−ε−（ステアロイル）−Ｎ１−スペルミン、Ｌ−Ｌｙｓ−ε−（オクタデカニル）−Ｎ１−スペルミン及びＤ−Ｌｙｓ−ε−（オクタデカニル）−Ｎ１−スペルミンは全て、刺激されたリンパ球からのＬＰＳ誘導性ＮＦκβサイトカイン放出の予防に高い活性を示す。さらに、例示された化合物Ｌ−Ｌｙｓ−ε−（ステアロイル）−Ｎ１−スペルミン、Ｄ−Ｌｙｓ−ε−（ステアロイル）−Ｎ１−スペルミン、Ｌ−Ｌｙｓ−ε−（オクタデカニル）−Ｎ１−スペルミン及びＤ−Ｌｙｓ−ε−（オクタデカニル）−Ｎ１−スペルミンは全て、刺激されたリンパ球からのＬＰＳ誘導性ＮＯ放出の予防に高い活性を示す。
【００４７】
結果として、リジン−スペルミン複合体の特定のライブラリとグラム陰性菌リポ多糖との相互作用が特徴付けられた。アシル又はアルキル結合においてリジニル部位のε−アミノ末端が長鎖脂肪族疎水性置換基（例、Ｃ１２−Ｃ２０）で誘導体化されたリジン−スペルミン複合体は、ＬＰＳの脂質Ａ部位に結合し、その毒性を中和する。長鎖脂肪族疎水性官能基の存在は、生物学的活性にとって重要であるようである。これらの化合物の合成において、偏在する非毒性部分構造（スペルミン、リジン及び長鎖脂肪酸）を使用すれば全身毒性が低いことが予測されるため、内毒素性ショック状態の予防又は治療を意図した新規治療剤を提供する際に望ましい。
【発明を実施するための最良の形態】
【００４８】
以下の実施例は本開示をさらに例示するためのものであるが、これらに限定されない。
【００４９】
（実施例１）＜一般的な合成方法＞化学試薬及び出発原料の供給源はすべて入手可能な最上級グレードのものであり、それ以上さらに精製することなく使用する。薄層クロマトグラフィー分析及びカラムクロマトグラフィーは、メルク Ｆ２５４シリカゲルプレート及びベーカー（Ｂａｋｅｒ）４０μｍフラッシュクロマトグラフィー・パッキングをそれぞれ使用して実施する。ＴＬＣ分析は、以下の溶媒系を用いて、ニンヒドリン染色による検出で実施する：ａ）ヘキサン／酢酸エチル／メタノール ４８：４８：４； ｂ）２−プロパノール／ピリジン／氷酢酸／Ｈ２Ｏ、４：１：１：２；ｃ）ＣＨＣｌ３／ＭｅＯＨ／ＮＨ４ＯＨ ８５：１５：１。ＬＣ／ＭＳ分析は、２１５リキッドハンドラーに連結させたＧｉｌｓｏｎ ３２２ ＨＰＬＣシステムを用いて実施する。これらの極性分子は、０．０５％ヘプタフルオロ酪酸を移動相中でイオン対試薬として用いることによって、Ｃ−１８逆相ＨＰＬＣ媒体上で容易に保持できる。こうすることによって、化合物を誘導体化していない状態で分析できる。
【００５０】
ＥＳＩ＋モード（ｍ／ｚ範囲が１４０〜１６００ａｍｕ）で作動するＦｉｎｎｉｇａｎ ＡＱＡ及びＡｇｉｌｅｎｔ １１００シリーズＤＡＤ検出器（ＵＶ範囲が２２０〜３２０ｎｍ）によって、検出を実施する。２％〜１００％ ＣＨ３ＣＮ水溶液（いずれも、０．０５％ヘプタフルオロ酪酸を揮発性イオン対試薬として添加済み）を用いて、２〜７分での勾配溶出を実施する。１Ｈ及び１３Ｃ ＮＭＲスペクトルを、それぞれ５００ＭＨｚ及び１２５．８ＭＨｚで、ワシントン大学（シアトル）のＢｒｕｃｋｅｒ ＷＭ５００分光器にて記録する。１Ｈ ＮＭＲシグナルは、ｓはシングレット、ｄはダブレットであり、ｔはトリプレットであり、特に示さない場合は概してマルチプレットである。化学シフトは、外部３−（トリメチルシリル）−１−プロパンスルホン酸ナトリウム塩に対してのものである。
【００５１】
リジン−スペルミン複合体の合成方法においては、リジンのε−窒素原子の選択的官能基化及びクロマトグラフィーによる精製を過剰な極性を有するアミン基への暴露前に実施することができる。特に、ポリアミン複合体上において極性アミノ基をブロックする際にはＢｏｃ−カルバメートを用い、こうすることによって、以前に報告された、時間のかかるイオン交換法５１の代わりに順相ＳｉＯ２クロマトグラフィーを用いることができる。これらの類似体の合成は、スペルミン１の遊離塩基を垂直状に保護されたＢｏｃ−Ｌｙｓ（Ｃｂｚ）−ＯＮｐ活性エステル２のＬ−又はＤ−立体異性体のいずれかとカップリングさせることから始まる。活性エステルをスペルミン溶液に滴下することによって、モノ−、ジ−及び未置換生成物の統計学的分布が得られる。スペルミンの残存未置換アミノ基と過剰量のＢｏｃ２Ｏとを反応させることによって、過Ｂｏｃ混合物が得られる。そして、得られた混合物を標準的なシリカゲルクロマトグラフィーにより分離することができる。
【００５２】
次いで、精製されたモノアシル化誘導体３を接触水素化に供し、これによって、Ｃｂｚ−保護基を除去し、遊離のアミノ中間体４を得る。高Ｒｆを有するアルキル化副生成物が形成されるのを防ぐため、この水素化の間にはケトンを含有しないエタノールを使用することが望ましい。次いで、アミン４を標準的なアシル化又は還元的アルキル化により官能基化して、類似体５の保護形態を得る。モノアルキル誘導体については、イミンを予め形成し、次いで、ＮａＢＨ４を用いて還元する。ジアルキル化類似体３０及び３８については、過剰量のアルデヒドを、ＮａＢＨ３ＣＮでの還元的アミノ化反応で用いる。特有の官能基は、一般的な反応条件を用いて、又は、市販の供給源から合成する場合もある。誘導体化された中間体５をＳｉＯ２クロマトグラフィーを用いて精製する。ＭｅＯＨ中の３Ｎ ＨＣｌを用いてＢｏｃ基を除去して、所望の物質をそのＨＣｌ塩の形態で得る。化合物をＴＬＣ、１Ｈ及び１３Ｃ ＮＭＲ、元素分析及びＬＣ／ＭＳを用いて特徴付けした結果、全てのスペクトルは指定された構造と一致する。
【００５３】
（実施例２）
＜前駆体化合物の合成方法＞
ＢｏＣ−Ｌ−Ｌｙｓ（ＣｂＺ）−Ｎ１−スペルミン−Ｂｏｃ３（３）
ＭｅＯＨ（２００ｍＬ）中のスペルミン１（１１．３０ｇ、１．４当量、遊離塩基形態）を撹拌している中に、ＭｅＯＨ（２００ｍＬ）中の活性エステル２（２０．０ｇ、４０ｍｍｏｌｅ）を、室温にて１．５時間にわたって滴下する。滴下後、ＴＬＣ分析（ｂ）によって、予測された生成物の混合物が形成されたことが示される（二置換の副生成物 Ｒｆ＝０．７６；モノ置換の所望の生成物 Ｒｆ＝０．５０、及び、未置換のスペルミン Ｒｆ＝０．０８）。最適な比が得られない場合には、ＭｅＯＨ中の活性エステルをさらに滴下する。２時間撹拌した後、溶媒を蒸発させて、黄色の固体を得、これをＴＨＦ（３００ｍＬ）及びＨ２Ｏ（１００ｍＬ）中に懸濁させる。ジ−ｔｅｒｔ−ブチルカーボネート（４３．５ｇ， ５．０当量）をテトラヒドロフラン（５０ｍＬ）に溶解した溶液を、室温にて添加する。１０％Ｎａ２ＣＯ３溶液を用いて、ｐＨを周期的に約１０に調整する。１０分後、沈殿物が観察される。１８時間撹拌した後、ＴＬＣ分析（ａ）によって、予測された生成物の混合物が形成されたことが示される（溶出の順は上記したものと逆にした）。大部分のＴＨＦを真空下で除去する。得られた混合物を、ＥｔＯＡｃ（４００ｍＬ）及びＨ２Ｏ（４００ｍＬ）に溶解する。有機層を除去し、水層をＥｔＯＡｃ（３×４００ｍＬ）で再抽出する。有機層を合わせて、０．１Ｎ氷冷ＨＣｌ（２×２５０ｍＬ）で洗浄し、続いて食塩水で洗浄する。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、ろ過して濃縮し、粗製の油を得、これを、０％、２％、３％、４％及び５％ ＭｅＯＨ（それぞれ１Ｌ）を含むヘキサン／ＥｔＯＡｃ（１：１）で段階的に溶出するシリカゲルクロマトグラフィー（カラム面積８×１７ｃｍ）によって精製する。溶出の順番は、Ｂｏｃ４−スペルミン（収率２５％（スペルミンは、酸脱保護及び遊離塩基への転化後に回収することができる））、所望のモノ置換Ｂｏｃ−Ｌｙｓ（Ｃｂｚ）−スペルミン−Ｂｏｃ３ ３（１９．４ｇ、収率５６％）、及び、最後に溶出するのは二置換副生成物である。所望の生成物の１Ｈ ＮＭＲから、これがシス−及びトランスカルバメートロートマー（ｒｏｔｏｍｅｒ）の混合物であることが示される。これをさらに特徴付けることなく次の反応に用いる。
【００５４】
（実施例３）
Ｂｏｃ−Ｌ−Ｌｙｓ−Ｎ１−スペルミン−Ｂｏｃ３（４）
ＥｔＯＨ（２００ｍＬ、ケトン及びアルデヒド非含有ＥｔＯＨ）中の垂直状に保護されたリジン−スペルミン複合体３（１９．４ｇ、２２．５ｍｍｏｌｅ）を丸底フラスコ内で撹拌している中に、活性炭素−１０重量％パラジウム（１０．０ｇ）を添加する。反応用フラスコにＨ２を３回通気し、次いで、５ｐｓｉのＨ２圧力下に置く。室温で４．０時間撹拌した後、ＴＬＣ分析（ｃ）によって反応の完了が示される。過剰量の活性炭を混合物に添加し、Ｃｅｌｉｔｅのパッドでろ過することによって触媒を除去する。このパッドをＥｔＯＨ（２×５０ｍＬ）で洗浄し、ろ液を合わせて蒸発させ、４を白色泡状物として量的収率で得る。上記ＴＬＣシステムで評価した後、この生成物を次の実施例に直接用いる。
【００５５】
（実施例４）
＜代表的なアシル化反応＞
Ｌ−Ｌｙｓ（パルミトイル）−Ｎ１−スペルミン（１４）
アミン前駆体４（９．６６ｇ，１３．２２ｍｍｏｌ）に、Ｅｔ３Ｎ（５．５ｍＬ、３．０当量）及び無水ＣＨ２Ｃｌ２（１００ｍＬ）を、アルゴン雰囲気下、シリンジで添加する。得られる溶液を氷浴中で０℃に冷却し、塩化パルミトイル（６．０ｍＬ、１．５当量）をシリンジで添加する。アルゴン雰囲気で一晩撹拌した後、ＴＬＣ分析（ｃ）によって、予測された生成物が形成されたことが示される。この溶液を、ＣＨ２Ｃｌ２（１００ｍＬ）及びＨ２Ｏ（１００ｍＬ）中で希釈する。有機層を除去し、水層を２回、ＣＨ２Ｃｌ２（２×１００ｍＬ）で抽出する。有機層を合わせて０．１Ｎ氷冷ＨＣｌ（１００ｍＬ）で洗浄し、次いで食塩水で洗浄して、ＭｇＳＯ４で乾燥させてろ過し、濃縮して粗製油を得る。これを、０％、２％、３％、４％、５％及び６％ ＭｅＯＨ（それぞれ５００ｍＬ）を含むヘキサン／ＥｔＯＡｃ（１：１）で段階的に溶出するシリカゲルクロマトグラフィー（カラム面積８×１７ｃｍ）によって精製し、Ｂｏｃ保護された生成物１３を透明な油（６．４８ｇ、５１％）として得る。ＭｅＯＨ（５０ｍＬ）中で上記生成物（６．４８ｇ、６．６８ｍｍｏｌ）を撹拌し、これを６Ｎ ＨＣｌ（５０ｍＬ）を用いて室温で処理することにより、保護基を除去する。ＴＬＣ分析を３時間実施することによって（ｂ）、反応の完了が示される。溶媒を蒸発させて、所望の生成物１４をその４ＨＣｌ塩の形態で、白色固体（４．７８ｇ、１００％）として得る。ＴＬＣ分析（ｂ）；Ｒｆ＝０．１９．１Ｈ ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，δ）：３．９３（１Ｈ），３．４５（１Ｈ），３．０３（１３Ｈ），２．１２（２Ｈ），２．０２（２Ｈ），１．８５（４Ｈ），１．７５（ｓ，４Ｈ），１．４３（４Ｈ），１．３２（２Ｈ），１．１１（２４Ｈ），０．７２（ｔ，３Ｈ）．１３Ｃ ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，ｐｐｍ）：１７５．７， １６９．８， ５３．４， ４６．７（ｍ）， ４５．２， ４４．６， ３８．８， ３６．５， ３６．１， ３１．９， ３０．４， ３０．０（ｍ）， ２９．９（ｍ）， ２９．６（ｍ）， ２９．４， ２８．２， ２５．７， ２５．５， ２３．６， ２２．８， ２２．７， ２２．３， ２１．７， １３．８． ＬＣ／ＭＳ（保持時間、７．２分）、計算値Ｃ３２Ｈ６８Ｎ６Ｏ２ ｍ／ｚ ５６８、実測値５６９（ＭＨ＋）。分析（Ｃ３２Ｈ７２Ｃｌ４Ｎ６Ｏ２）Ｃ、Ｈ、Ｎ。
【００５６】
（実施例５）
＜代表的なモノアルキル化反応＞
Ｌ−Ｌｙｓ（３，３−ジメチル−ｌ−ブタン）−Ｎ１−スペルミン（１８）
無水ＣＨ２Ｃｌ２ ５ｍＬ中のアミン４ ０．５８ｇ（０．８２ｍｍｏｌ）に、アルゴン下、トリメチルオルトギ酸０．２７ｍＬ（３当量）、Ｅｔ３Ｎ ０．１７ｍＬ（１．５当量）及び３，３−ジメチルブチルアルデヒド０．３１ｍＬ（３当量）を添加する。得られた溶液を室温で２時間撹拌すると、溶媒が蒸発する。油状の残渣を、ＣＨ３ＯＨ ５ｍＬ中に溶解し、ＮａＢＨ４ ７０ｍｇ（２当量）を添加する。２時間後、溶媒が蒸発し、０．０１Ｎ ＨＣｌとＣＨ２Ｃｌ２（それぞれ５０ｍＬ）との間で残渣を分ける。ＣＨ２Ｃｌ２部分を追加して水部分を洗浄し、有機層を合わせて食塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させて蒸発させ、粗製油０．６４ｇを得る。ＣＨＣｌ３／ＭｅＯＨ／濃ＮＨ４ＯＨ（９６：４：０．２）を用いるカラムクロマトグラフィーにより、保護された純粋な生成物０．３１ｇ（収率６４％）を得る。これをＣＨ３ＯＨ ３ｍＬに溶解し、６Ｎ ＨＣｌ ３ｍＬを用いて、室温で３時間処理する。蒸発により、０．２４ｇ（収率９６％）の１８を白色固体として得る。ＴＬＣ分析（ｂ）；Ｒｆ＝０．２１．１Ｈ ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，δ）：３．９５（１Ｈ），３．３１（２Ｈ），３．０５（１４Ｈ），２．０４（２Ｈ），１．８８（４Ｈ），１．７１（６Ｈ），１．５３（２Ｈ），１．４１（２Ｈ），０．８８（９Ｈ）．ＬＣ／ＭＳ（保持時間、６．１分）、計算値Ｃ２２Ｈ５０Ｎ６Ｏ ｍ／ｚ ４１４、実測値４１５（ＭＨ＋）。分析（Ｃ２２Ｈ５５Ｃｌ５Ｎ６Ｏ ０．５Ｈ２Ｏ）Ｃ、Ｈ、Ｎ。
【００５７】
（実施例６）
＜代表的なジアルキル化反応＞
Ｌ−Ｌｙｓ−ε−（ビス−（ｎ−へプチル））−Ｎ１−スペルミン（３０）
アミン４ ０．２２ｇ（０．３０ｍｍｏｌ）、ｎ−ヘプタナール０．４２ｍＬ（３ｍｍｏｌ、１０当量）及びＣＨ３ＯＨ １０ｍＬ中のＮａＢＨ３ＣＮ ０．１９ｇ（３ｍｍｏｌ、１０当量）を含む溶液を、氷酢酸（５滴）で処理する。試験紙で測定したところ、ｐＨは４である。一晩撹拌した後、溶媒を蒸発させ、１Ｎ ＮａＯＨとＣＨ２Ｃｌ２（それぞれ５０ｍＬ）との間で残渣を分ける。ＣＨ２Ｃｌ２を追加して水層を洗浄し、有機層を合わせて食塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させて蒸発させ、粗製生成物０．３３ｇを得る。ＣＨＣｌ３／ＭｅＯＨ／濃ＮＨ４ＯＨ（９６：４：０．２）を用いるカラムクロマトグラフィーにより、保護された純粋な生成物０．２０ｇ（収率７１％）を得る。これをＣＨ３ＯＨ １ｍＬに溶解し、６Ｎ ＨＣｌ １ｍＬを用いて室温で３時間処理する。蒸発により、０．１１ｇ（収率７３％）の３０を白色固体として得る。ＴＬＣ分析（ｂ）、Ｒｆ＝０．２１．１Ｈ ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，δ）：３．９３（ｔ，１Ｈ），３．２８（２Ｈ），３．０４（１６Ｈ），２．０２（２Ｈ），１．８５（４Ｈ），１．７１（ｓ，４Ｈ），１．６２（６Ｈ），１．４０（４Ｈ），１．２５（１４Ｈ），０．８１（ｔ，６Ｈ）．１３Ｃ ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，ｐｐｍ）：１７５．７， １６９．８， ５３．４， ４６．７（ｍ）， ４５．２， ４４．６， ３８．８， ３６．５， ３６．１， ３１．９， ３０．４， ３０．０（ｍ）， ２９．９（ｍ）， ２９．６（ｍ）， ２９．４， ２８．２， ２５．７， ２５．５， ２３．６， ２２．８， ２２．７， ２２．３， ２１．７， １３．８． ＬＣ／ＭＳ（保持時間、７．３分）、計算値Ｃ３２Ｈ６８Ｎ６Ｏ２ ｍ／ｚ ５６８、実測値５６９（ＭＨ＋）。
【００５８】
（実施例７）
＜代表的な個々の類似体＞
Ｌ−Ｌｙｓ−Ｎ１−スペルミン（５）１
ＴＬＣ分析（ｂ）；Ｒｆ＝０．０４。ＬＣ／ＭＳ（保持時間、５．５分），計算値 Ｃ１６Ｈ３８Ｎ６Ｏ ｍ／ｚ ３３０、実測値 ３３１（ＭＨ＋）。
【００５９】
Ｄ−Ｌｙｓ−Ｎ１−スペルミン（６）
類似体６の合成は、１４の合成に用いられる垂直状に保護されたリジン誘導体の代わりに、Ｂｏｃ−Ｄ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＮｐを用いる。スペルミンとのカップリング、次いで残存するアミノ基のそれらのＢｏｃ−カルバメートとしての保護により、保護された中間体を得、次いでカラムクロマトグラフィーにより精製する。ＣＨ３ＯＨ中の６Ｎ ＨＣｌ を使用して脱保護することによって、所望の生成物６を得る。ＴＬＣ分析（ｂ）；Ｒｆ＝０．０４．１Ｈ ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，δ）：３．９２（ｔ，１Ｈ），３．２９（２Ｈ），３．０７（１０Ｈ），２．９３（ｔ，２Ｈ），２．０４（２Ｈ），１．８４（４Ｈ），１．７２（４Ｈ），１．５４（２Ｈ），１．３４（２Ｈ）．１３Ｃ ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，ｐｐｍ）：１６８．７， ５２．２， ４５．８（ｍ）， ４４．２， ４３．６， ４０．０， ３７．８， ３５．４（ｍ）， ２９．０， ２５．４， ２４．６， ２２．６， ２１．８（ｍ）， ２０．２． ＬＣ／ＭＳ（保持時間、５．５分）、計算値 Ｃ１６Ｈ３８Ｎ６Ｏ ｍ／ｚ ３３０， 実測値 ３３１（ＭＨ＋）。ＨＲＭＳ ｍ／ｚ 計算値Ｃ１６Ｈ３８Ｎ６Ｏ（Ｍ＋Ｈ）３３１．３１８５、実測値３３１．３１７３。
Ｌ−Ｌｙｓ−ε−（エイコサノイル）−Ｎ１−スペルミン（７）
ＴＬＣ分析（ｂ）；Ｒｆ＝０．０８．１Ｈ ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，δ）：３．９４（１Ｈ），３．４８（１Ｈ），３．０６（１３Ｈ），２．１５（２Ｈ），２．０６（２Ｈ），１．８８（４Ｈ），１．７５（４Ｈ），１．４７（４Ｈ），１．３６（２Ｈ），１．１６（３２Ｈ），０．７７（３Ｈ）．１３Ｃ ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，ｐｐｍ）：１７５．５， １６９．８， ５３．４， ４６．９（ｍ）， ４５．６， ４４．８， ３８．８， ３６．８（ｍ）， ３６．０， ３１．９， ３０．４， ２９．７（ｍ）， ２９．５， ２９．３， ２８．５， ２５．９， ２５．７， ２３．８， ２３．２， ２３．１， ２２．８， ２１．７， １３．８． ＬＣ／ＭＳ（保持時間、７．６分）、計算値Ｃ３６Ｈ７６Ｎ６Ｏ２ ｍ／ｚ ６２５ 、実測値６２６（ＭＨ＋）。
【００６０】
Ｄ−Ｌｙｓ−ε−（ステアロイル）−Ｎ１−スペルミン（８）
ＴＬＣ分析（ｂ）；Ｒｆ＝０．１３．１Ｈ ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，δ）：３．９４（１Ｈ），３．４７（１Ｈ），３．０６（１３Ｈ），２．１３（２Ｈ），２．０４（２Ｈ），１．８７（４Ｈ），１．７５（４Ｈ），１．４７（４Ｈ），１．３６（２Ｈ），１．１６（２８Ｈ），０．７９（３Ｈ）．１３Ｃ ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，ｐｐｍ）： １７５．９， １７０．１， ５３．４， ４７．１（ｍ）， ４５．５， ４４．７， ３９．０， ３６．８（ｍ）， ３６．０， ３１．９， ３０．６， ２９．８（ｍ）， ２９．６， ２９．３， ２８．４， ２５．９， ２５．７， ２３．８， ２３．２， ２３．１， ２２．８， １３．８． ＬＣ／ＭＳ（保持時間、７．４分）、計算値Ｃ３２Ｈ６８Ｎ６Ｏ２ ｍ／ｚ ５９７、実測値５９８（ＭＨ＋）。
【００６１】
Ｌ−Ｌｙｓ−ε−（ステアロイル）−Ｎ１−スペルミン（９）
ＬＣ／ＭＳ（保持時間、７．４分）、計算値Ｃ３４Ｈ７２Ｎ６Ｏ２ ｍ／ｚ ５９７、実測値５９８（ＭＨ＋）。
【００６２】
Ｌ−Ｌｙｓ−ε−（ヘプタデカノイル）−Ｎ１−スペルミン（１１）
ＴＬＣ分析（ｂ）； Ｒｆ＝０．１９．１Ｈ ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，δ）：３．９６（１Ｈ），３．４７（１Ｈ），３．０８（１３Ｈ），２．１４（２Ｈ），２．０４（２Ｈ），１．８７（４Ｈ），１．７８（４Ｈ）， １．５０（４Ｈ），１．３６（２Ｈ），１．２２（２６Ｈ），０．７８（３Ｈ）．１３Ｃ ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，ｐｐｍ）：１７５．７， １６９．９， ５３．２， ４７．２（ｍ）， ４５．４， ４４．８， ３９．０， ３６．６（ｍ）， ３６．１， ３１．９， ２９．９（ｍ）， ２９．５， ２９．３， ２８．４， ２５．８， ２５．７， ２３．８， ２２．６， ２２．５， ２２．２， ２２．０， １４．８． ＬＣ／ＭＳ（保持時間、７．２分）、計算値Ｃ３３Ｈ７０Ｎ６Ｏ２ ｍ／ｚ ５８３、実測値５８４（ＭＨ＋）。
【００６３】
Ｌ−Ｌｙｓ−ε−（ヘキサデカンスルホンアミド）−Ｎ１−スペルミン（１２）
１Ｈ ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，δ）：４．０４（１Ｈ），３．５３（１Ｈ），３．３０（１Ｈ），３．２２（２Ｈ），３．１７（１４Ｈ），２．１８（２Ｈ），２．００（４Ｈ），１．８２（６Ｈ），１．６７（２Ｈ），１．５２（４Ｈ），１．３４（２２Ｈ），０．９５（ｔ，３Ｈ）． ＬＣ／ＭＳ（保持時間、７．３分）、計算値Ｃ３２Ｈ７０Ｎ６Ｏ３Ｓ ｍ／ｚ ６１９、実測値６２０（ＭＨ＋）。
【００６４】
Ｄ−Ｌｙｓ−ε−（パルミトイル）−Ｎ１−スペルミン（１３）
ＴＬＣ分析（ｂ）；Ｒｆ＝０．２１．１Ｈ ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，δ）：３．９４（１Ｈ），３．４７（１Ｈ），３．０６（１３Ｈ），２．１３（２Ｈ），２．０４（２Ｈ），１．８７（４Ｈ）， １．７５（４Ｈ），１．４７（４Ｈ），１．３６（２Ｈ），１．１６（２４Ｈ），０．７８（３Ｈ）．１３Ｃ ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，ｐｐｍ）：１７５．７， １６９．８， ５３．４， ４７．２（ｍ）， ４５．６， ４４．８， ３９．０， ３６．６（ｍ）， ３６．１， ３１．９， ２９．８（ｍ）， ２９．６， ２９．３， ２８．４， ２５．９， ２５．７， ２３．８， ２２．８， ２３．１， ２２．８， ２２．１， １４．０． ＬＣ／ＭＳ（保持時間、７．２分）、計算値Ｃ３２Ｈ６８Ｎ６Ｏ２ ｍ／ｚ ５６９、実測値５７０（ＭＨ＋）。
【００６５】
Ｌ−Ｌｙｓ−ε−（ミリストイル）−Ｎ１−スペルミン（１６）
ＴＬＣ分析（ｂ）；Ｒｆ＝０．２２．１Ｈ ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，δ）：３．９２（１Ｈ），３．２７（２Ｈ），３．０３（１４Ｈ），２．１２（２Ｈ），２．０７（４Ｈ），１．８３（４Ｈ），１．６６（６Ｈ），１．４８（４Ｈ），１．２０（２０Ｈ），０．７８（３Ｈ）． ＬＣ／ＭＳ（保持時間、７．０分）、計算値Ｃ３０Ｈ６４Ｎ６Ｏ２ ｍ／ｚ ５４１、実測値５４２（ＭＨ＋）。
【００６６】
Ｌ−Ｌｙｓ−ε−（オクタノイル）−Ｎ１−スペルミン（１７）
ＴＬＣ分析（ｂ）；Ｒｆ＝０．２０。ＬＣ／ＭＳ（保持時間、５．７分）、計算値Ｃ２１Ｈ４６Ｎ６Ｏ２ ｍ／ｚ ４１４、実測値４１５（ＭＨ＋）。
【００６７】
Ｄ−Ｌｙｓ−ε−（イソプロピル）−Ｎ１−スペルミン（１８）
ＴＬＣ分析（ｂ）；Ｒｆ＝０．２４．１Ｈ ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，δ）：３．９０（１Ｈ），３．２８（３Ｈ），３．０５（１３Ｈ），２．４０（１Ｈ），２．０２（２Ｈ），１．８２（４Ｈ）， １．７１（ｓ，２Ｈ），１．４７（２Ｈ），１．２８（２Ｈ），０．９９（６Ｈ）．１３Ｃ ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，ｐｐｍ）：１８０．８， １７５．８， ５３．２， ４７．０（ｍ）， ４５．２， ４４．６， ３８．６， ３６．４（ｍ）， ３５．１， ３０．４， ２８．１， ２５．７， ２３．８， ２９．４， ２２．８（ｍ）， ２１．６， １８．９． ＬＣ／ＭＳ（保持時間、５．５分）、計算値Ｃ２０Ｈ４４Ｎ６Ｏ２ ｍ／ｚ ４００、実測値４０１（ＭＨ＋）。
【００６８】
Ｄ−Ｌｙｓ−ε−（２−ノルボルネンアセトイル）−Ｎ１−スペルミン（２０）
ＴＬＣ分析（ｂ）；Ｒｆ＝０．２２．１Ｈ ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，δ）：３．８８（１Ｈ），３．２４（２Ｈ），３．０５（１３Ｈ），２．０２（４Ｈ），１．８０（４Ｈ），１．６８（４Ｈ），１．３３（８Ｈ），０．９８（５Ｈ）． ＬＣ／ＭＳ（保持時間、６．０分）、計算値Ｃ２５Ｈ５０Ｎ６Ｏ２ ｍ／ｚ ４６６、実測値４６７（ＭＨ＋）。
【００６９】
Ｄ−Ｌｙｓ−ε−（４−ビフェニルカルボキサミド）−Ｎ１−スペルミン（２１）
ＴＬＣ分析（ｂ）；Ｒｆ＝０．１３．１Ｈ ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，δ）：７．７７（６Ｈ），７．４３（３Ｈ），３．８７（１Ｈ），３．４８（２Ｈ），３．１６（２Ｈ），２．９５（１０Ｈ）， １．９４（２Ｈ），１．８３（２Ｈ），１．７２（２Ｈ），１．６２（６Ｈ），１．３４（２Ｈ）． ＬＣ／ＭＳ（保持時間、６．３分）、計算値Ｃ２９Ｈ４６Ｎ６Ｏ２ ｍ／ｚ ５１１、実測値 ５１２（ＭＨ＋）。
【００７０】
（実施例７）
Ｌ−Ｌｙｓ−ε−（４−（１−ピレン）−ブタノイル）−Ｎ１−スペルミン（２２）
類似体２２の合成は、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ社（オレゴン州ユージーン）から入手した１−ピレンブタン酸スクシンイミジルエステル（カタログ番号Ｐ−１３０）でのアシル化による。ＴＬＣ分析（ｂ）；Ｒｆ＝０．１５．１Ｈ ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，δ）：７．３４（ｄ，１Ｈ），７．２２（３Ｈ），７．０８（２Ｈ），６．９８（２Ｈ），６．８８（ｄ， １Ｈ），３．７４（ｔ，１Ｈ），３．１８（１Ｈ），３．０１（４Ｈ），２．９３（２Ｈ），２．８６（１Ｈ），２．７７（１Ｈ），２．７２（２Ｈ），２．６５（２Ｈ），２．５６（１Ｈ），２．４０（２Ｈ），１．９７（２Ｈ），１．７３（２Ｈ），１．６８（２Ｈ），１．５４（６Ｈ），１．４０（２Ｈ），０．９８（４Ｈ）． ＬＣ／ＭＳ（保持時間、６．６分）、計算値Ｃ３６Ｈ５２Ｎ６Ｏ２ ｍ／ｚ ６０１、実測値６０２（ＭＨ＋）。
【００７１】
（実施例８）
Ｌ−Ｌｙｓ−ε−（メチルポリエチレングリコールプロピオニル）−Ｎ１−スペルミン（２３）
ε−窒素原子をアシル化するのに用いる活性エステルは、Ｎｅｋｔａｒ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓから入手したｍＰＥＧ−ＳＰＡ（分子量２０００）（カタログ番号２Ｍ４ＭＯＤＯ１）である。ＴＬＣ分析（ｂ）；Ｒｆ＝０．２４．１Ｈ ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，δ）：３．８０（１Ｈ），３．５０（ｌａｒｇｅ ＯＣＨ２ ｅｎｖｅｌｏｐｅ），３．４２（６Ｈ），２．９２（１５Ｈ），２．３４（１Ｈ），１．９６（１Ｈ），１．７５（４Ｈ），１．６２（４Ｈ），１．４１（１Ｈ），１．２３（１Ｈ）． ＬＣ／ＭＳ（保持時間、６．１分）、６５０に集中したｍ／ｚのエンベロープを観察した。
【００７２】
Ｌ−Ｌｙｓ−ε−（２−［２−（２−メトキシエトキシ）エトキシ］アセトイル）−Ｎ１−スペルミン（２４）
ＴＬＣ分析（ｂ）；Ｒｆ＝０．１１．１Ｈ ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，δ）：４．０１（３Ｈ），３．９１（１Ｈ），３．６２（６Ｈ），３．３１（８Ｈ），３．０３（１２Ｈ），２．０６（２Ｈ）， １．８２（６Ｈ），１．５３（１Ｈ），１．３２（１Ｈ）． ＬＣ／ＭＳ（保持時間、５．４分）、計算値 Ｃ２３Ｈ５０Ｎ６Ｏ５ ｍ／ｚ ４９０、実測値 ４９１（ＭＨ＋）。
【００７３】
Ｌ−Ｌｙｓ−ε−（２−（２−メトキシエトキシ）アセトイル）−Ｎ１−スペルミン（２５）
ＴＬＣ分析（ｂ）；Ｒｆ＝０．０９．１Ｈ ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，δ）：３．９８（３Ｈ），３．９２（１Ｈ），３．６２（６Ｈ），３．３１（６Ｈ），３．２４（６Ｈ），３．０３（６Ｈ），２．０６（２Ｈ），１．８７（２Ｈ），１．８０（４Ｈ），１．５３（１Ｈ），１．３２（１Ｈ）． ＬＣ／ＭＳ（保持時間、５．７分）、計算値 Ｃ２１Ｈ４６Ｎ６Ｏ４ ｍ／ｚ ４４６、実測値 ４４７（ＭＨ＋）。
【００７４】
Ｌ−Ｌｙｓ−ε−（ｎヘキサデシル）−Ｎ１−スペルミン（２６）
ＴＬＣ分析（ｂ）；Ｒｆ＝０．１１．１Ｈ ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，δ）：３．９７（１Ｈ），３．４８（１Ｈ），３．０４（１５Ｈ），２．０４（２Ｈ），１．９１（４Ｈ），１．７５（８Ｈ）， １．４８（２Ｈ），１．２２（２６Ｈ），０．９１（３Ｈ）．１３Ｃ ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，ｐｐｍ）：１６８．８， ５３．４， ４８．０， ４７．３， ４７．１（ｍ）， ４５．４， ４４．７， ３６．７， ３２．０， ３０．６， ２９．９（ｍ）， ２９．８， ２９．５， ２９．４， ２９．１， ２６．５， ２５．９， ２５．６， ２５．５， ２３．８， ２２．９， ２２．８， ２１．７， １３．９． ＬＣ／ＭＳ（保持時間、７．２分）、計算値 Ｃ３２Ｈ７０Ｎ６Ｏ ｍ／ｚ ５５５、実測値 ５５６（ＭＨ＋）。
【００７５】
Ｄ−Ｌｙｓ−ε−（３，３−ジメチル−ｌ−ブチル）−Ｎ１−スペルミン（３４）
ＴＬＣ分析（ｂ）；Ｒｆ＝０．０６．１Ｈ ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，δ）：３．９１（１Ｈ），３．３３（１Ｈ），３．２３（１Ｈ），３．０５（１４Ｈ），２．０１（２Ｈ），１．８６（４Ｈ）， １．７１（４Ｈ），１．６７（２Ｈ），１．５０（２Ｈ），１．３８（２Ｈ），０．８５（９Ｈ）． ＬＣ／ＭＳ（保持時間、６．１分）、計算値 Ｃ２２Ｈ５０Ｎ６Ｏ ｍ／ｚ ４１５、実測値 ４１６（ＭＨ＋）。
【００７６】
Ｄ−Ｌｙｓ−ε−（３−メチルプロピル）−Ｎ１−スペルミン（３５）
ＴＬＣ分析（ｂ）；Ｒｆ＝０．０６．１Ｈ ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，δ）：３．９０（１Ｈ），３．３２（１Ｈ），３．２４（１Ｈ），３．０５（１０Ｈ），２．８２（２Ｈ），２．０２（２Ｈ），１．８２（６Ｈ），１．７１（６Ｈ），１．３７（１Ｈ），０．９０（６Ｈ）． ＬＣ／ＭＳ（保持時間、５．８分）、計算値 Ｃ２０Ｈ４６Ｎ６Ｏ ｍ／ｚ ３８７、実測値 ３８８（ＭＨ＋）。
【００７７】
Ｌ−Ｌｙｓ−ε−（ビス−（シクロヘキシル））−Ｎ１−スペルミン（３８）
ＴＬＣ分析（ｂ）；Ｒｆ＝０．２２．１Ｈ ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，δ）：３．９６（１Ｈ），３．３０（２Ｈ），３．０４（１８Ｈ），２．０６（２Ｈ），１．８６（４Ｈ），１．７２（１６Ｈ），１．４０（２Ｈ），１．１８（６Ｈ），０．９７（４Ｈ）．１３Ｃ ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，ｐｐｍ）： １６９．８， ６０．２， ５４．１， ５３．２， ４７．０（ｍ）， ４５．３， ４４．６， ３６．６（ｍ）， ３２．９， ３０．３（ｍ）， ２５．４， ２５．０， ２３．８， ２２．８， ２２．３， ２１．７． ＬＣ／ＭＳ（保持時間、６．４分）、計算値 Ｃ３０Ｈ６２Ｎ６Ｏ ｍ／ｚ ５２３、実測値 ５２４（ＭＨ＋）。
【００７８】
Ｄ−Ｌｙｓ−ε−（４−フェニルベンジル）−Ｎ１−スペルミン（３９）
ＴＬＣ分析（ｂ）；Ｒｆ＝０．１１．１Ｈ ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，δ）：７．５５（９Ｈ），４．２１（ｓ，２Ｈ），３．９３（１Ｈ），３．３２（１Ｈ），３．２４（１Ｈ），３．０４（１２Ｈ），２．０４（２Ｈ），１．８０（４Ｈ），１．７２（６Ｈ），１．４０（２Ｈ）．１３Ｃ ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ，ｐｐｍ）：１６９．８， １４１．６， １３９．６， １３０．５， １３９．９， １２９．３， １２８．２， １２７．６， １２７．０， ５３．１， ５０．６， ４７．１， ４７．０， ４６．５， ４５．３， ４４．６， ３６．６（ｍ）， ３０．３， ２５．５， ２５．１， ２３．８， ２２．９（ｍ）， ２１．６． ＬＣ／ＭＳ（保持時間、６．３分）、計算値 Ｃ２９Ｈ４８Ｎ６Ｏ ｍ／ｚ ４９７、実測値 ４９８（ＭＨ＋）。
【００７９】
（実施例９）
＜ＬＰＳへの結合親和性を定量するための高速処理蛍光置換アッセイ＞
ＢＯＤＩＰＹ−ＴＲ−カダベリン（ＢＣ；（５−（（４−（４，４−ジフルオロ−５−（２−チエニル）−４−ボラ−３ａ，４ａ−ジアザ−ｓ−インダセン−３−イル）フェノキシ）アセチル）アミノ）ペンチルアミン，塩酸塩）；Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ社（オレゴン州ユージーン）から入手）置換アッセイで化合物のＬＰＳへの結合親和性を定量するため方法は、最近、詳細に報告されている４６。このアッセイを、高速処理方式により以下のように実施する。Ｃｏｒｎｉｎｇ Ｎｏｎｂｉｎｄｉｎｇ Ｓｕｒｆａｃｅ ３８４ウェル平底黒色蛍光マイクロプレートの最初の列（１６ウェル）には試験化合物１５個及びポリミキシンＢが全て５ｍＭで入っていて、これらを残りの２３列を使用して次々に２倍希釈してゆき、最終希釈濃度を容積４０μｌにおいて０．５９６ｎｍとする。ＬＰＳを結合及び中和することが知られているペプチド抗生物質であるポリミキシンＢ（ＰＭＢ）４７を各プレートについてポジティブコントロール及び対照化合物として使用し、これによって、アッセイの反復性及び再現性を定量的に評価することができる（ＣＶ及びＺ’因子）。自動装置による液体の取り扱いは、Ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ Ｐｏｗｅｒ Ｓｏｆｔｗａｒｅ（Ｂｉｏ−Ｔｅｋ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ社（米国バーモント州））を用いてプログラムしたＰｒｅｃｉｓｉｏｎ ２０００自動マイクロプレートピペッティングシステムを用いて実施する。ＬＰＳ保存溶液（５ｍｇ／ｍＬ；大腸菌０１１１：Ｂ４； Ｓｉｇｍａから入手）及びＢＣ（５００μＭ）を、Ｔｒｉｓバッファー（ｐＨ７．４、５０ｍＭ）中で調製する。ＬＰＳ及びＢＣ保存液それぞれ１ｍＬずつを混合し、Ｔｒｉｓバッファー中で最終容積１００ｍＬに希釈し、最終濃度をＬＰＳについて５０μｇ／ｍＬ、ＢＣについて５μＭとする。このＢＣ：ＬＰＳ混合物４０μｌを、Ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ ２０００を用いてプレートの各ウェルに添加する。蛍光測定を、２５℃において、Ｍｉｃｒｏｍａｘ Ｍｉｃｒｏｗｅｌｌ ３８４ウェルプレートリーダーを備えたＦｌｕｏｒｏｍａｘ−３を使用し、ＤａｔａＭａｘ Ｓｏｆｔｗａｒｅ（Ｊｏｂｉｎ Ｙｖｏｎ社（ニュージャージー州））を用いて実施する。ＢＣ励起波長は５８０ｎｍであり、６２０ｎｍにおいて、５ｎｍに設定した発光及び励起モノクロメーター帯域の両方で発光スペクトルを得る。ＢＣの蛍光はＬＰＳへの結合の際に停止し、化合物によるＢＣ置換によって、ＢＣ蛍光が脱消光（強度増強）する。先行文献に記載されるように、有効置換量（ＥＤ５０）を、蛍光シグナル対化合物濃度置換曲線の中間点で計算し、Ｏｒｉｇｉｎ ｐｌｏｔｔｉｎｇ Ｓｏｆｔｗａｒｅ（Ｏｒｉｇｉｎ Ｌａｂ社（マサチューセッツ州））の自動式四パラメータＳ字適合ユーティリティを用いて決定する。等式：１−［３（ＳＤ＋ＳＤ’）／（Ａ−Ａ’）］（式中、ＳＤ及びＳＤ’、Ａ及びＡ’は、それぞれ、シグナル及びノイズの標準偏差であり、かつ、シグナル及びノイズの平均である）を使用して得られるＺ’因子５２により、Ｚ’因子は０．８２１、及び、プレート内ＣＶは５．２％であるとの結果がそれぞれ得られる。
【００８０】
（実施例１０）
＜酸化窒素アッセイ＞
酸化窒素産生を、Ｇｒｉｅｓｓ試薬系５３；５４を用いて、マウスマクロファージＪ７７４．Ａ１細胞において総亜硝酸塩として測定する。Ｌ−グルタミン及び重炭酸ナトリウムを含み、１０％仔ウシ血清、１％ Ｌ−グルタミン−ペニシリン−ストレプトマイシン溶液及びＬ−アルギニン２００μｇ／ｍＬを添加したＲＰＭＩ−１６４０細胞培養培地で、マウスマクロファージＪ７７４．Ａ１細胞を、３７℃において５％ＣＯ２雰囲気中で生育させる。約２×１０６／ｍＬ、容積４０μｌ／ウェルで、３８４ウェル細胞培養処理平底マイクロタイタープレートで細胞を平板培養してコンフルエントとし、続いて、リポ多糖（ＬＰＳ）１００ｎｇ／ｍＬで刺激する。ＬＰＳ刺激と同時に、濃度を連続的に希釈した試験化合物を細胞培地に添加し、一晩１６時間にわたってインキュベートする。各プレートにおいて、ポリミキシンＢを対照化合物として用いる。ポジティブコントロール（ＬＰＳ刺激のみ）及びネガティブコントロール（Ｊ７７４．Ａ１培地のみ）を各実験で使用する。上清３０μｌを等容積のＧｒｉｅｓｓ試薬（５０μｌ／ウェル；ｄｄＨ２Ｏ中の０．１％ ＮＥＤ溶液、及び、ｄｄＨ２Ｏ中の１％スルファニルアミド、５％リン酸溶液）に添加し、室温において暗所で１５分間インキュベートすることによって、亜硝酸塩濃度を測定する。５３５ｍｍでの吸光度を、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ Ｓｐｅｃｔｒａｍａｘ Ｍ２多機能プレートリーダー（Ｓｕｎｎｙｖａｌｅ社（カリフォルニア州））を用いて測定する。連続的に希釈した標準の亜硝酸ナトリウムから得られた標準曲線から、亜硝酸塩濃度を補間する。
【００８１】
（実施例１１）
＜ｅｘ ｖｉｖｏでのヒト血液における多重サイトカインアッセイ＞
インフォームドコンセントを実施し、かつ、Ｈｕｍａｎ Ｓｕｂｊｅｃｔｓ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｔｉｏｎ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ承認のガイドラインに従って健常人ボランティアから静脈穿刺により採取し、ＥＤＴＡで抗凝集化した新鮮な全血１００μｌ分を、生理食塩水で濃度を段階的に希釈した試験化合物を含む等容積の５０ｎｇ／ｍＬの大腸菌 ０１１１：Ｂ４ ＬＰＳに、９６−ウェルマイクロタイタープレート中で４時間暴露する。サイトカイン産生の調節における化合物の影響を、ＦＡＣＳ Ａｒｒａｙ多重フローサイトメトリービーズアレイ（ＣＢＡ）システム（Ｂｅｃｔｏｎ−Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ−Ｐｈａｒｍｉｎｇｅｎ社（カリフォルニア州サンノゼ））を用いて試験する。システムは、ビーズ式サンドウィッチＥＬＩＳＡ原理を用いるものであり５５；５６、また、その固有の蛍光発光強度（標準的なフローサイトメーターのＦＬ３チャネルにおいて検出される）の点からスペクトルの異なる６群のマイクロビーズから構成される。各ビーズ群は、同一の生物サンプルに由来する６つの異なるサイトカイン（ヒト炎症ＣＢＡキットには、ＴＮＦ−α、ＩＬ−ｌβ、ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＩＬ−１０及びＩＬ−１２ｐ７０が入っている）を検出するための別々の捕捉抗体で被覆されている。ビーズをサンプル３０μｌと共にインキュベートすると、目的のサイトカインがまずビーズ上に捕捉される。ビーズを洗浄した後、最適な対を形成しているフィコエリトリン結合二次抗体の混合物を添加し、固定されたサイトカインと共に蛍光三元複合体を形成させると、その強度（ＦＬ２チャネル中で測定）はビーズ上のサイトカイン濃度に比例する。アッセイは、販売者より提供のプロトコルに従って実施する。標準曲線は、キット中の組み換えサイトカインを使用して得る。ＦＡＣＳアレイシステムに一体化しているＣＢＡソフトウェア一式を使用してデータを分析する。
【００８２】
（実施例１２）
＜マウス致死率実験＞
異系交配の９〜１１週齢雌ＣＦ−１マウス（Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ社（マサチューセッツ州ウィルミントン））（体重２２〜２８ｇ）を、別に記載されるように使用する３７。マウスが到着したら、実験する前に１週間順応させ、ＡＡＬＡＣ公認のカンザス大学動物管理施設内の制御環境下で、ケージ１つにつき５匹ずつ収納し、マウスに餌及び水を自由に摂取させる。マウスを、Ｄ−ガラクトサミンによるＬＰＳの致死効果に感作させる５５；５７；５８。まず、新たに調製した生理食塩水中のＤ−ガラクトサミン（８００ｍｇ／ｋｇ）及びＬＰＳ（０、１０、２０、５０、１００、２００ｎｇ／匹）をマウス５匹の群に容積０．２ｍＬで腹腔内に単回注射投与することによって、用いたＬＰＳ群について１００％致死をもたらす致死用量（ＬＤ１００）を決定する。５匹全てのマウス（１００ｎｇ投与によって２４時間以内に死亡）を用いた２つの独立した実験で、用量応答特性が予測されたように観察され、ＬＤ１００用量は１００ｎｇ／匹であると確立される。ＬＰＳ誘導性死を保護するアシルスペルミンの用量応答効果を試験するために設計された実験において、マウスに、致死量を超える（２００ｎｇの）ＬＰＳ投与の直前に、生理食塩水で希釈された連続的な用量の化合物を片脇腹に腹腔内注射し、これとは別に、当該量を腹腔内注射によりもう片方の脇腹に投与する。一時的保護の時間枠を試験する実験においては、致死量を超える（２００ｎｇ／匹）ＬＰＳを投与する前又はその後に、化合物の固定用量２００μｇ／匹を様々な時間で投与する。致死率をＬＰＳを投与して２４時間後に決定する。
【００８３】
本開示の化合物は、医薬品に許容される担体と組み合わせることができる。医薬品に許容される担体は、例えばビヒクル、佐剤、賦形剤又は希釈剤を含み、当業者に周知のものである。典型的には、医薬品に許容される担体は、活性化合物に化学的に不活性で、使用条件下で有害な副作用や毒性がないものである。医薬品に許容される担体にはポリマー及びポリマーマトリクスが含まれる。
【００８４】
本開示の化合物は、個々の治療薬として、あるいは治療薬を組み合わせて、医薬品と共に使用するために利用可能ないかなる従来の方法によっても投与することができる。
【００８５】
言うまでもなく、投与量は、個々の薬剤の薬力学的特性、その投与方法及び投与経路；被投与者の年齢、健康状態及び体重；症状の性質及び程度；同時治療の種類；処置頻度；並びに、所望される効果等の既知の要因に応じて変わるであろう。有効成分の１日当たりの投与量は、体重１キログラム（ｋｇ）当たり約０．００１〜１０００ミリグラム（ｍｇ）であると予測することができ、また好ましい投与量は０．１〜約３０ｍｇ／ｋｇであると予想することができる。
【００８６】
（投与に適した組成物の）剤形には、１単位当たり約１ｍｇ〜約５００ｍｇの有効成分が含まれている。これらの医薬組成物では、有効成分は通常、組成物の全重量のうち約０．５〜９５重量％の量で存在するであろう。
【００８７】
上記有効成分は、カプセル剤、錠剤及び粉末等の固体の剤形、又はエリキシル剤、シロップ剤及び懸濁液等の液体の剤形により経口投与することができる。さらに、上記有効成分は滅菌した液体の剤形によって非経口的に投与することもできる。さらに上記有効成分は、鼻腔内で（点鼻剤）、あるいは薬粉末のミストの吸入によって投与することもできる。他の剤形としては、パッチ構造あるいは軟膏によって経皮的に投与すること等も潜在的に可能である。上記有効成分は、持続性若しくは徐放性デリバリーシステム、又は、即放性デリバリーシステムを用いて投与することができる。
【００８８】
経口投与に好適な調合物は、（ａ）有効量の化合物を、水、食塩水又はオレンジジュースなどの希釈剤に溶解させた液体溶液；（ｂ）所定量の有効成分をそれぞれ含む、カプセル剤、サッシェ、錠剤、甘味つき錠剤及びトローチ等の固体又は顆粒；（ｃ）粉末；（ｄ）適当な液体中の懸濁液；並びに（ｅ）好適な乳剤；を含んでいてよい。液体の調合物としては、水及びアルコール（例えばエタノール、ベンジルアルコール、プロピレングリコール、グリセリン、ポリエチレンアルコール）等の希釈剤を含んでいよく、医薬品に許容される界面活性剤、懸濁剤又は乳化剤が添加されていてもされていなくてもよい。カプセル剤としては、界面活性剤、滑剤、並びに、例えばラクトース、スクロース、リン酸カルシウム及びコーンスターチなどの不活性充填剤を含む、通常のハード又はソフトシェル型ゼラチンタイプのものが考えられる。錠剤には、ラクトース、スクロース、マンニトール、コーンスターチ、バレイショデンプン、アルギン酸、微結晶セルロース、アラビアゴム、ゼラチン、グアーガム、膠質二酸化ケイ素、クロスカルメロースナトリウム、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸亜鉛、ステアリン酸、並びに、他の賦形剤、着色剤、希釈剤、バッファー、崩壊剤、湿潤剤、防腐剤、香料及び薬学的に適合性のある担体のうち、１種以上のものを含有することができる。更に、甘味つき錠剤は、香料中に、通常はスクロース及びアラビアゴム又はトラガカント中に有効成分を含んでいてよく、また菱形錠剤は、ゼラチン及びグリセリン、又は、スクロース及びアラビアゴム等の不活性基剤中に有効成分を含んでいてよく、更に乳剤及びゲル剤は、有効成分に加えて、従来公知の担体を含んでいてよい。
【００８９】
本開示の化合物は単独で、又は、他の好適な成分と組み合わせて、吸入によって投与されるエアロゾル製剤とすることができる。これらのエアロゾル製剤は、ジクロロジフルオロメタン、プロパン及び窒素などの許容可能な加圧不活性ガス中に入れることができる。さらに、上記エアロゾル製剤は、ネブライザー又はアトマイザーなどの非加圧式薬剤として調剤してもよい。
【００９０】
非経口投与に好適な調製物には、抗酸化剤、バッファー、静菌剤、及び、目的の投薬対象者の血液と調製物を等張にする溶質を含んでいてもよい、水性又は非水性の等張無菌注射溶液、並びに、懸濁剤、可溶化剤、増粘剤、安定剤及び防腐剤を含んでいてよい水性又は非水性の無菌懸濁液が含まれる。上記化合物は、医薬品用担体中の生理的に許容される希釈剤中に添加した状態で投与することができ、上記希釈剤としては、例えば、水、生理食塩水、デキストロース水溶液及び関連の糖水溶液；エタノール、イソプロパノール又はヘキサデシルアルコール等のアルコール類；プロピレングリコール、又は、ポリ（エチレングリコール）４００等のポリエチレングリコール等のグリコール類；２，２−ジメチル−１、３−ジオキソラン−４−メタノール等のグリセリンケタール類；エーテル類、油類、脂肪酸、脂肪酸エステル若しくはグリセリド又はアセチル化脂肪酸グリセリド等を含む滅菌液体又は液体混合物が挙げられ、これには、石鹸若しくは洗浄剤等の医薬品に許容される界面活性剤、ペクチン、カルボマー、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース若しくはカルボキシメチルセルロース等の懸濁剤、又は、乳化剤及び他の医薬品用補助剤が含まれていても含まれていなくてもよい。
【００９１】
非経口投与用調製物において使用することができる油類には、石油性油、動物性油、植物性油あるいは合成油が含まれる。油類の具体例には、ピーナッツ油、大豆油、ごま油、綿実油、トウモロコシ油、オリーブ油、ペトロラタム及び鉱油が含まれる。非経口投与用調製物で使用される好適な脂肪酸には、オレイン酸、ステアリン酸及びイソステアリン酸が含まれる。オレイン酸エチルとミリスチン酸イソプロピルは好適な脂肪酸エステルの例である。非経口投与用調製物において使用される好適な石鹸には、脂肪酸アルカリ金属塩類、脂肪酸アンモニウム塩類及び脂肪酸トリエタノールアミン塩類が含まれ、好適な洗浄剤には、（ａ）陽イオン洗浄剤、例えばジメチルジアルキルアンモニウムハライド及びアルキルピリジニウムハライド等、（ｂ）陰イオン洗浄剤、例えばスルホン酸アルキル、スルホン酸アリール及びオレフィンスルホナート、硫酸アルキル、オレフィンサルフェート、硫酸エーテル及び硫酸モノグリセリド、並びに、スルホコハク酸塩等、（ｃ）非イオン性洗浄剤、例えば脂肪族アミン酸化物、脂肪酸アルカノールアミド及びポリオキシエチレン−ポリプロピレン共重合体、（ｄ）両性洗浄剤、例えばアルキル−β−アミノプロピオネート及び２−アルキルイミダゾリン四級アンモニウム塩等、並びに、ｅ）それらの混合物等が含まれる。
【００９２】
非経口投与用調製物は、典型的には、溶液中に約０．５重量％〜約２５重量％の有効成分を含んでいる。好適な防腐剤及びバッファーを、このような調製物中で使用することができる。注射する部位での刺激を最小限にするかあるいは刺激を取り除くために、上記組成物は、親水性・親油性バランス（ＨＬＢ）が約１２〜約１７である１種以上の非イオン性界面活性剤を含んでいてもよい。上記調製物中における界面活性剤の量は、約５重量％〜約１５重量％の範囲である。好適な界面活性剤には、ソルビタンモノオレエート等のポリエチレン・ソルビタン脂肪酸エステル、及び、プロピレンオキシドとプロピレングリコールの縮合によって形成される、エチレンオキシドと疎水性塩基との高分子量付加体などが含まれる。
【００９３】
さらに、医薬品に許容される賦形剤もまた当業者に周知である。賦形剤の選択は、いくらかは個々の化合物に応じて決定され、また、個々の組成物投与方法に応じても決定されるであろう。従って本発明の医薬組成物には、種々の好適な製剤態様がある。下記方法及び賦形剤は単に例として示されるものであり、これらに限定されることは全く意図されない。医薬品に許容される賦形剤は、有効成分の作用を妨害せず、有害な副作用を引き起こさないものが好ましい。好適な担体及び賦形剤には、水、アルコール及びプロピレングリコール等の溶剤、固体吸着剤及び希釈剤、界面活性剤、懸濁剤、錠剤形成用結合剤、滑剤、香料及び着色剤が含まれる。
【００９４】
上記調製物は、アンプルやバイアルなどの１回服用分分包密封容器又は複数回服用分含有密封容器とすることができ、フリーズドライ（凍結乾燥）状態で保存できて、滅菌液体賦形剤（例えば水）を加えるだけで注射剤としてすぐに使用することができる。注射溶液及び懸濁液は、滅菌した粉末、顆粒及び錠剤からその場で調製することもできる。注射用組成物のための有効な医薬品担体に対する必要条件は、当業者に周知である。Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ ａｎｄ Ｐｈａｒｍａｃｙ Ｐｒａｃｔｉｃｅ，Ｊ．Ｂ． Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ Ｃｏ．，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，ＰＡ， Ｂａｎｋｅｒ ａｎｄ Ｃｈａｌｍｅｒｓ，Ｅｄｓ．，２３８−２５０（１９８２） ａｎｄ ＡＳＨＰ Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｎ Ｉｎｊｅｃｔａｂｌｅ Ｄｒｕｇｓ， Ｔｏｉｓｓｅｌ，４ｔｈ ｅｄ．，６２２−６３０（１９８６）を参照のこと。
【００９５】
局所投与に好適な調製物には、香料、通常はスクロース及びアラビアゴム又はトラガント中に有効成分を含む甘味つき錠剤；ゼラチン及びグリセリン又はスクロース及びアラビアゴムなどの不活性基剤中に有効成分を含む菱形錠剤；適当な液体担体中に有効成分を含む口内洗浄剤；並びに、有効成分に加えて当業者に公知の担体を含むクリーム剤、乳剤及びゲル剤が含まれる。
【００９６】
さらに、直腸投与に好適な調製物としては、乳化基剤又は水溶性基剤等の種々の基剤と混合することにより得られる坐剤があげられる。膣投与に好適な調製物としては、有効成分に加えて、好適な担体であると当業者に公知の担体を含む、膣坐剤、タンポン、クリーム剤、ゲル剤、ペースト剤、泡剤又はスプレー剤等が挙げられる。
【００９７】
好適な医薬品担体は、本分野で標準的な参考書である、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ）で説明されている。
【００９８】
本発明の範囲内における動物（特にヒト）に投与される用量は、合理的な時間をかけて動物体内に治療的な応答をもたらすのに十分な量でなければならない。当業者は、動物の症状、動物の体重及び治療される症状などの種々の要因に応じて用量が異なるということを認識できるであろう。
【００９９】
適当な用量は、所望の応答を発揮することが知られている、患者体内における有効成分の濃度であろう。
【０１００】
また、用量の程度は、投与の経路、タイミング及び頻度、並びに、化合物の投与に伴って生じる可能性のある副作用の有無、性質及び程度、並びに、望まれる生理学的作用に応じて決定されるであろう。
【０１０１】
本発明の化合物の投与に有用な医薬品投与剤形を、以下に例証する。
【０１０２】
ハードシェルカプセル剤
粉末状有効成分１００ｍｇ、ラクトース１５０ｍｇ、セルロース５０ｍｇ及びステアリン酸マグネシウム６ｍｇを、標準ツーピースハードゼラチンカプセルに充填することにより、多数のカプセル剤が製造される。
【０１０３】
ソフトゼラチンカプセル剤
大豆油、綿実油又はオリーブ油等の消化されやすい油中に有効成分を混合させた混合物を調製し、溶融させたゼラチン中へ容積移送式ポンプによって注入することにより、有効成分１００ｍｇを含むソフトゼラチンカプセル剤を形成する。カプセル剤を洗浄し乾燥させる。有効成分は、ポリエチレングリコール、グリセリン及びソルビトールの混合物中に溶解させて、水混和性医薬調合物を作ることができる。
【０１０４】
錠剤
一錠あたりの処方量が、有効成分１００ｍｇ、謬質二酸化ケイ素０．２ｍｇ、ステアリン酸マグネシウム５ｍｇ、結晶セルロース２７５ｍｇ、デンプン１１ｍｇ及びラクトース９８．８ｍｇとなるように、従来の方法によって多数の錠剤を製造する。適当な水性・非水性のコーティングを施すことにより、飲みやすさを向上せたり、上品さや安定性を改善したり、あるいは吸収を遅らせることもできる
【０１０５】
即放性錠剤／カプセル剤
これらは、従来法及び新規な方法によって作製される固体経口投与用の剤形である。これらの剤型単位は、薬剤が即時に溶解して送達されるように、水なしで経口摂取される。有効成分は、糖、ゼラチン、ペクチン及び甘味料などの成分を含んでいる液体中で混合される。これらの液体は、凍結乾燥及び固体抽出技術によって固体化されて固体の錠剤又はカプレットとされる。医薬化合物は、水を使わずに、粘弾性かつ熱可塑性の糖及びポリマー又は発泡性成分と共に打錠することによって、即放性を意図した多孔性マトリクスに製造してもよい。
【０１０６】
さらに、本開示の化合物は、点鼻剤の形で投与することができる、又は、計量及び経鼻若しくは経口内吸入によって投与することができる。薬剤は、微細ミストとして点鼻液から送達される、又は、粉末からエアロゾルとして送達される。
【０１０７】
上記の開示の説明は、本開示を例証して説明するものである。さらに、開示内容は、発明の好ましい実施形態を記載して説明するのみであるが、上述の通り、本発明は種々の他の組み合わせ、変更及び環境において使用できるものであって、本明細書に表された発明の概念を逸脱しない範囲で変更・改変できるということが、上述の教示及び／又は関連する技術分野のスキル若しくは知識に従えば理解されるであろう。さらに、上述の実施形態は、本出願人の知る最良の態様の説明を意図したものであり、かつ、当業者が本開示を上記実施形態の通りに又は他の実施形態において、本発明の個々の用途又はその使用方法に必要とされる種々の改変を伴って利用できるよう意図したものである。従って、本記載は、本発明が本明細書に開示された態様に限定されることを意図したものではない。さらに添付の請求の範囲は、代替可能な別の実施形態をも含むものとして解釈されるよう意図したものである。
【０１０８】
本明細書中で引用された全ての刊行物及び特許出願は、本明細書中において参考として組み込まれ、個々の刊行物又は特許出願はそれぞれ個々に参考として援用されると考える。本明細書中で用いる用語“ａ”、“ａｎ”及び“ａｎｙ”はそれぞれ、単数形及び複数形の両方を含むことが意図される。
【０１０９】
表１：リジン−スペルミン アシル長鎖ホモログ
【０１１０】
【表１】
【０１１１】
表２：リジン−スペルミン混合アシル類似体
【０１１２】
【表２】
【０１１３】
表３：リジン−スペルミン混合アルキル類似体
【０１１４】
【表３】
【０１１５】
表４：化合物８を致死量を超える用量２００ｎｇ／匹で投与した、ＣＦ−１マウス（動物５匹の群）についての用量依存的な保護。ＬＰＳ注射２４時間後に致死率を記録。比は生存数／動物総数を示す。アスタリスクは統計的有意性を示す（Ｐ＜０．０５；フィッシャー片側正確確率検定）
【０１１６】
【表４】
【０１１７】
表５：Ｄ−ガラクトサミンで感作したＣＦ−１マウス致死モデルにおける、８による経時的な保護。ＬＰＳ投与（２００ｎｇ／匹）について示す時間において、動物に８を２００μｇ腹腔内注射。ＬＰＳ注射２４時間後に致死率を記録。アスタリスクは統計的有意性を示す（Ｐ＜０．０５；フィッシャー片側正確確率検定）
【０１１８】
【表５】
【０１１９】
表６：Ｄ−ガラクトサミンで感作したＣＦ−１マウス致死モデルにおける、化合物８による経時的な保護。ＬＰＳ投与（２００ｎｇ／匹）について示す時間において、動物に８を２００μｇ皮下注射。ＬＰＳ注射２４時間後に致死率を記録。アスタリスクは統計的有意性を示す（Ｐ＜０．０５；フィッシャー片側正確確率検定）
【０１２０】
【表６】
【０１２１】
表７−１：アシル化及びアルキル化リジン−スペルミン複合体の特定のライブラリ
【０１２２】
【表７−１】
【０１２３】
表７−２：アシル化及びアルキル化リジン−スペルミン複合体の特定のライブラリ
【０１２４】
【表７−２】
【０１２５】
参考文献
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【０１４３】
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２０． Ｋｏｔａｎｉ， Ｓ．； Ｔａｋａｄａ， Ｈ．； Ｔｓｕｊｉｍｏｔｏ， Ｍ．； Ｏｇａｗａ， Ｔ．； Ｔａｋａｈａｓｈｉ， Ｉ．； Ｉｋｅｄａ， Ｔ．； Ｏｔｓｕｋａ， Ｋ．； Ｓｈｉｍａｕｃｈｉ， Ｈ．； Ｋａｓａｉ， Ｎ．； Ｍａｓｈｉｍｏ， Ｊ．； Ｎａｇａｏ， Ｓ．； Ｔａｎａｋａ， Ａ．； Ｔａｎａｋａ， Ｓ．； Ｈａｒａｄａ， Ｋ．； Ｎａｇａｋｉ， Ｋ．； Ｋｉｔａｍｕｒａ， Ｈ．； Ｓｈｉｂａ， Ｔ．； Ｋｕｓｕｍｏｔｏ， Ｓ．； Ｉｍｏｔｏ， Ｍ．； ａｎｄ Ｙｏｓｈｉｍｕｒａ， Ｈ． Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ ｌｉｐｉｄ Ａ ｗｉｔｈ ｅｎｄｏｔｏｘｉｃ ａｎｄ ｒｅｌａｔｅｄ ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｃｏｍｐａｒａｂｌｅ ｔｏ ｔｈｏｓｅ ｏｆ ａ ｎａｔｕｒａｌ ｌｉｐｉｄ Ａ ｆｒｏｍ ａｎ Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ Ｒｅ−ｍｕｔａｎｔ． Ｉｎｆｅｃｔ． Ｉｍｍｕｎ． １９８５， ４９， ２２５−２３７．
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【０１５８】
３４． Ｄａｖｉｄ， Ｓ． Ａ．； Ｂｅｃｈｔｅｌ， Ｂ．； Ａｎｎａｉａｈ， Ｃ．； Ｍａｔｈａｎ， Ｖ． Ｉ．； ａｎｄ Ｂａｌａｒａｍ， Ｐ． Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ ｏｆ ｃａｔｉｏｎｉｃ ａｍｐｈｉｐｈｉｌｉｃ ｄｒｕｇｓ ｗｉｔｈ ｌｉｐｉｄ Ａ： Ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｆｏｒ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｓ． Ｂｉｏｃｈｉｍ． Ｂｉｏｐｈｙｓ． Ａｃｔａ １９９４， １２１２， １６７−１７５．
【０１５９】
３５． Ｄａｖｉｄ， Ｓ． Ａ．； Ｍａｔｈａｎ， Ｖ． Ｉ．； ａｎｄ Ｂａｌａｒａｍ， Ｐ． Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ ｏｆ ｌｉｎｅａｒ ｄｉｃａｔｉｏｎｉｃ ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ ｗｉｔｈ ｌｉｐｉｄ Ａ： Ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ ｒｅｑｕｉｓｉｔｅｓ ｆｏｒ ｏｐｔｉｍａｌ ｂｉｎｄｉｎｇ ａｆｆｉｎｉｔｙ． Ｊ． Ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ． Ｒｅｓ． １９９５， ２， ３２５−３３６．
【０１６０】
３６． Ｄａｖｉｄ， Ｓ． Ａ．； Ａｗａｓｔｈｉ， Ｓ． Ｋ．； Ｗｉｅｓｅ， Ａ．； Ｕｌｍｅｒ， Ａ． Ｊ．； Ｌｉｎｄｎｅｒ， Ｂ．； Ｂｒａｎｄｅｎｂｕｒｇ， Ｋ．； Ｓｅｙｄｅｌ， Ｕ．； Ｒｉｅｔｓｃｈｅｌ， Ｅ． Ｔ．； Ｓｏｎｅｓｓｏｎ， Ａ．； ａｎｄ Ｂａｌａｒａｍ， Ｐ． Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ ｏｆ ａ ｐｏｌｙｃａｔｉｏｎｉｃ， ａｍｐｈｉｐｈｉｌｉｃ， ｔｅｒｍｉｎａｌｌｙ ｂｒａｎｃｈｅｄ ｏｌｉｇｏｐｅｐｔｉｄｅ ｗｉｔｈ ｌｉｐｉｄ Ａ ａｎｄ ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｄｅｅｐ ｒｏｕｇｈ ｍｕｔａｎｔ ｏｆ Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｍｉｎｎｅｓｏｔａ． Ｊ． Ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ Ｒｅｓ． １９９６， ３， ３６９−３７９．
【０１６１】
３７． Ｄａｖｉｄ， Ｓ． Ａ．； Ｓｉｌｖｅｒｓｔｅｉｎ， Ｒ．； Ａｍｕｒａ， Ｃ． Ｒ．； Ｋｉｅｌｉａｎ， Ｔ．； ａｎｄ Ｍｏｒｒｉｓｏｎ， Ｄ． Ｃ． Ｌｉｐｏｐｏｌｙａｍｉｎｅｓ： ｎｏｖｅｌ ａｎｔｉｅｎｄｏｔｏｘｉｎ ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ ｔｈａｔ ｒｅｄｕｃｅ ｍｏｒｔａｌｉｔｙ ｉｎ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｓｅｐｓｉｓ ｃａｕｓｅｄ ｂｙ ｇｒａｍ−ｎｅｇａｔｉｖｅ ｂａｃｔｅｒｉａ． Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ． １９９９， ４３， ９１２−９１９．
【０１６２】
３８． Ｄａｖｉｄ， Ｓ． Ａ．； Ｐｅｒｅｚ， Ｌ．； ａｎｄ Ｉｎｆａｎｔｅ， Ｍ． Ｒ． Ｓｅｑｕｅｓｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ｂｙ ｂｉｓ（ａｒｇｓ） ｇｅｍｉｎｉ ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ． Ｂｉｏｏｒｇ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ． Ｌｅｔｔ． ２００２， １２， ３５７−３６０．
【０１６３】
３９． Ｄａｖｉｄ， Ｓ． Ａ． Ｔｏｗａｒｄｓ ａ ｒａｔｉｏｎａｌ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ａｎｔｉ−ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ ａｇｅｎｔｓ： ｎｏｖｅｌ ａｐｐｒｏａｃｈｅｓ ｔｏ ｓｅｑｕｅｓｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｅｎｄｏｔｏｘｉｎｓ ｗｉｔｈ ｓｍａｌｌ ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ （Ｉｎｖｉｔｅｄ Ｒｅｖｉｅｗ）． Ｊ． Ｍｏｌｅｃ． Ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ ２００１， １４， ３７０−３８７．
【０１６４】
４０． Ｂｅｈｒ， Ｊ． Ｐ．； Ｄｅｍｅｎｅｉｘ， Ｂ．； Ｌｏｅｆｆｌｅｒ， Ｊ． Ｐ．； ａｎｄ Ｐｅｒｅｚ−Ｍｕｔｕｌ， Ｊ． Ｅｆｆｉｃｉｅｎｔ ｇｅｎｅ ｔｒａｎｓｆｅｒ ｉｎｔｏ ｍａｍｍａｌｉａｎ ｐｒｉｍａｒｙ ｅｎｄｏｃｒｉｎｅ ｃｅｌｌｓ ｗｉｔｈ ｌｉｐｏｐｏｌｙａｍｉｎｅ−ｃｏａｔｅｄ ＤＮＡ． Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ． ＵＳＡ １９８９， ８６， ６９８２−６９８６．
【０１６５】
４１． Ｂｅｈｒ， Ｊ． Ｐ． Ｇｅｎｅ ｔｒａｎｓｆｅｒ ｗｉｔｈ ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ ｃａｔｉｏｎｉｃ ａｍｐｈｉｐｈｉｌｅｓ： Ｐｒｏｓｐｅｃｔｓ ｆｏｒ ｇｅｎｅ ｔｈｅｒａｐｙ． Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇ． Ｃｈｅｍ． １９９４， ５， ３８２−３８９．
【０１６６】
４２． Ｆｅｌｇｎｅｒ， Ｐ． Ｌ．； Ｇａｄｅｋ， Ｔ． Ｒ．； Ｈｏｌｍ， Ｍ．； Ｒｏｍａｎ， Ｒ．； Ｃｈａｎ， Ｈ． Ｗ．； Ｗｅｎｚ， Ｍ．； Ｎｏｒｔｈｒｏｐ， Ｊ． Ｐ．； Ｒｉｎｇｏｌｄ， Ｇ． Ｍ．； ａｎｄ Ｄａｎｉｅｌｓｅｎ， Ｍ． Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｏｎ： ａ ｈｉｇｈｌｙ ｅｆｆｉｃｉｅｎｔ， ｌｉｐｉｄ−ｍｅｄｉａｔｅｄ ＤＮＡ ｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ ｐｒｏｃｅｄｕｒｅ． Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ． ＵＳＡ １９８７， ８４， ７４１３−７４１７．
【０１６７】
４３． Ｓａｎ， Ｈ．； Ｙａｎｇ， Ｚ． Ｙ．； Ｐｏｍｐｉｌｉ， Ｖ． Ｊ．； Ｊａｆｆｅ， Ｍ． Ｌ．； Ｐｌａｕｔｚ， Ｇ． Ｅ．； Ｘｕ， Ｌ．； Ｆｅｌｇｎｅｒ， Ｊ．； Ｗｈｅｅｌｅｒ， Ｃ． Ｊ．； Ｆｅｌｇｎｅｒ， Ｐ． Ｌ．； ａｎｄ Ｇａｏ， Ｘ． Ｓａｆｅｔｙ ａｎｄ ｓｈｏｒｔ−ｔｅｒｍ ｔｏｘｉｃｉｔｙ ｏｆ ａ ｎｏｖｅｌ ｃａｔｉｏｎｉｃ ｌｉｐｉｄ ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ ｆｏｒ ｈｕｍａｎ ｇｅｎｅ ｔｈｅｒａｐｙ． Ｈｕｍ． Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒ． １９９３， ４， ７８１−７８８．
【０１６８】
４４． Ｂｌａｇｂｒｏｕｇｈ， Ｉ． Ｓ．； Ｇｅａｌｌ， Ａ． Ｊ．； ａｎｄ Ｄａｖｉｄ， Ｓ． Ａ． Ｌｉｐｏｐｏｌｙａｍｉｎｅｓ ｉｎｃｏｒｐｏｒｔａｉｎｇ ｔｈｅ ｔｅｒａａｍｉｎｅ ｓｐｅｒｍｉｎｅ ｂｏｕｎｄ ｔｏ ａｎ ａｌｋｙｌ ｃｈａｉｎ ， ｓｅｑｕｅｓｔｅｒ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ． Ｂｉｏｏｒｇ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ． Ｌｅｔｔ． ２０００， １０， １９５９−１９６２．
【０１６９】
４５． Ｂｕｒｎｓ， Ｍ． Ｒ．； Ｃａｒｌｓｏｎ， Ｃ． Ｌ．； Ｖａｎｄｅｒｗｅｒｆ， Ｓ． Ｍ．； Ｚｉｅｍｅｒ， Ｊ． Ｒ．； Ｗｅｅｋｓ， Ｒ． Ｓ．； Ｃａｉ， Ｆ．； Ｗｅｂｂ， Ｈ． Ｋ．； ａｎｄ Ｇｒａｍｉｎｓｋｉ， Ｇ． Ｆ． Ａｍｉｎｏ ａｃｉｄ／ｓｐｅｒｍｉｎｅ ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ： ｐｏｌｙａｍｉｎｅ ａｍｉｄｅｓ ａｓ ｐｏｔｅｎｔ ｓｐｅｒｍｉｄｉｎｅ ｕｐｔａｋｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ． Ｊ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ． ２００１， ４４， ３６３２−３６４４．
【０１７０】
４６． Ｗｏｏｄ， Ｓ． Ｊ．； Ｍｉｌｌｅｒ， Ｋ． Ａ．； ａｎｄ Ｄａｖｉｄ， Ｓ． Ａ． Ａｎｔｉ−ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ ａｇｅｎｔｓ． １． Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ａ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ ｐｒｏｂｅ ｄｉｓｐｌａｃｅｍｅｎｔ ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｔｈｅ ｒａｐｉｄ ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ−ｂｉｎｄｉｎｇ ａｇｅｎｔｓ． Ｃｏｍｂ． Ｃｈｅｍ． Ｈｉｇｈ． Ｔｈｒｏｕｇｈｐｕｔ． Ｓｃｒｅｅｎ． ２００４， ７， ２３９−２４９．
【０１７１】
４７． Ｍｏｒｒｉｓｏｎ， Ｄ． Ｃ． ａｎｄ Ｊａｃｏｂｓ， Ｄ． Ｍ． Ｂｉｎｄｉｎｇ ｏｆ ｐｏｌｙｍｙｘｉｎ Ｂ ｔｏ ｔｈｅ ｌｉｐｉｄ Ａ ｐｏｒｔｉｏｎ ｏｆ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ． Ｉｍｍｕｎｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ １９７６， １３， ８１３−８１８．
【０１７２】
４８． Ｄａｖｉｄ， Ｓ． Ａ．； Ｂａｌａｓｕｂｒａｍａｎｉａｎ， Ｋ． Ａ．； Ｍａｔｈａｎ， Ｖ． Ｉ．； ａｎｄ Ｂａｌａｒａｍ， Ｐ． Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｔｈｅ ｂｉｎｄｉｎｇ ｏｆ ｐｏｌｙｍｙｘｉｎ Ｂ ｔｏ ｅｎｄｏｔｏｘｉｃ ｌｉｐｉｄ Ａ ａｎｄ ｃｏｒｅ ｇｌｙｃｏｌｉｐｉｄ ｕｓｉｎｇ ａ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ ｄｉｓｐｌａｃｅｍｅｎｔ ｐｒｏｂｅ． Ｂｉｏｃｈｉｍ． Ｂｉｏｐｈｙｓ． Ａｃｔａ １９９２， １１６５， １４７−１５２．
【０１７３】
４９． Ｂｒａｄｅ， Ｈ．； Ｍｏｌｌ， Ｈ．； ａｎｄ Ｒｉｅｔｓｃｈｅｌ， Ｅ． Ｔ． Ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ ｏｎ ｔｈｅ ｉｎｎｅｒ ｃｏｒｅ ｒｅｇｉｏｎ ｏｆ ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ ｆｒｏｍ Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｍｉｎｎｅｓｏｔａ ｒｏｕｇｈ ｍｕｔａｎｔｓ． Ｂｉｏｍｅｄ． Ｅｎｖｉｒｏｎ． Ｍａｓｓ Ｓｐｅｃｔｒｏｍ． １９８５， １２， ６０２−６０９．
【０１７４】
５０． Ｂｒａｄｅ， Ｈ．； Ｂｒａｄｅ， Ｌ．； ａｎｄ Ｒｉｅｔｓｃｈｅｌ， Ｅ． Ｔ． Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ−ａｃｔｉｖｉｔｙ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｓ ｏｆ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ （Ｅｎｄｏｔｏｘｉｎｓ）． Ｃｕｒｒｅｎｔ ａｎｄ Ｆｕｔｕｒｅ Ａｓｐｅｃｔｓ． Ｚｂｌ． Ｂａｋｔ． Ｈｙｇ． ，Ｉ Ａｂｔ． Ｏｒｉｇ． １９８８， Ａ ２６８／２， １５１−１７９．
【０１７５】
５１． Ｂｕｒｎｓ， Ｍ． Ｒ．； Ｃａｒｌｓｏｎ， Ｃ． Ｌ．； Ｖａｎｄｅｒｗｅｒｆ， Ｓ． Ｍ．； Ｚｉｅｍｅｒ， Ｊ． Ｒ．； Ｗｅｅｋｓ， Ｒ． Ｓ．； Ｃａｉ， Ｆ．； Ｗｅｂｂ， Ｈ． Ｋ．； ａｎｄ Ｇｒａｍｉｎｓｋｉ， Ｇ． Ｆ． Ａｍｉｎｏ ａｃｉｄ／ｓｐｅｒｍｉｎｅ ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ： ｐｏｌｙａｍｉｎｅ ａｍｉｄｅｓ ａｓ ｐｏｔｅｎｔ ｓｐｅｒｍｉｄｉｎｅ ｕｐｔａｋｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ． Ｊ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ． ２００１， ４４， ３６３２−３６４４．
【０１７６】
５２． Ｚｈａｎｇ， Ｊ． Ｈ．； Ｃｈｕｎｇ， Ｔ． Ｄ．； ａｎｄ Ｏｌｄｅｎｂｕｒｇ， Ｋ． Ｒ． Ａ Ｓｉｍｐｌｅ Ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌ Ｐａｒａｍｅｔｅｒ ｆｏｒ Ｕｓｅ ｉｎ Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｖａｌｉｄａｔｉｏｎ ｏｆ Ｈｉｇｈ Ｔｈｒｏｕｇｈｐｕｔ Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ Ａｓｓａｙｓ． Ｊ Ｂｉｏｍｏｌ． Ｓｃｒｅｅｎ． １９９９， ４， ６７−７３．
【０１７７】
５３． Ｇｒｅｅｎ， Ｌ． Ｃ．； Ｗａｇｎｅｒ， Ｄ． Ａ．； Ｇｌｏｇｏｗｓｋｉ， Ｊ．； Ｓｋｉｐｐｅｒ， Ｐ． Ｌ．； Ｗｉｓｈｎｏｋ， Ｊ． Ｓ．； ａｎｄ Ｔａｎｎｅｎｂａｕｍ， Ｓ． Ｒ． Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｎｉｔｒａｔｅ， ｎｉｔｒｉｔｅ ａｎｄ ［１５−Ｎ］ ｎｉｔｒａｔｅ ｉｎ ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｆｌｕｉｄｓ． Ａｎａｌ． Ｂｉｏｃｈｅｍ． １９８２， １２６， １３１．
【０１７８】
５４． Ｇｒｅｉｓｓ， Ｐ． Ｂｅｍｅｒｋｕｎｇｅｎ ｚｕ ｄｅｒ ａｂｈａｎｄｌｕｎｇ ｄｅｒ Ｈ．Ｈ． Ｗｅｓｅｌｓｋｙ ｕｎｄ Ｂｅｎｅｄｉｋｔ “Ｕｅｂｅｒ ｅｉｎｉｇｅ ａｚｏｖｅｒｂｉｎｄｕｎｇｅｎ”． Ｃｈｅｍ． Ｂｅｒ． １８７９， １２， ４２６−４２７．
【０１７９】
５５． Ｃｏｏｋ， Ｅ． Ｂ．； Ｓｔａｈｌ， Ｊ． Ｌ．； Ｌｏｗｅ， Ｌ．； Ｃｈｅｎ， Ｒ．； Ｍｏｒｇａｎ， Ｅ．； Ｗｉｌｓｏｎ， Ｊ．； Ｖａｒｒｏ， Ｒ．； Ｃｈａｎ， Ａ．； Ｇｒａｚｉａｎｏ， Ｆ． Ｍ．； ａｎｄ Ｂａｒｎｅｙ， Ｎ． Ｐ． Ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓ ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ ｏｆ ｓｉｘ ｃｙｔｏｋｉｎｅｓ ｉｎ ａ ｓｉｎｇｌｅ ｓａｍｐｌｅ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｔｅａｒｓ ｕｓｉｎｇ ｍｉｃｒｏｐａｒｔｉｃｌｅ−ｂａｓｅｄ ｆｌｏｗ ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ： ａｌｌｅｒｇｉｃｓ ｖｓ． ｎｏｎ−ａｌｌｅｒｇｉｃｓ． Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． Ｍｅｔｈｏｄｓ ２００１， ２５４， １０９−１１６．
【０１８０】
５６． Ｆｕｎａｔｏ， Ｙ．； Ｂａｕｍｈｏｖｅｒ， Ｈ．； Ｇｒａｎｔｈａｍ−Ｗｒｉｇｈｔ， Ｄ．； Ｗｉｌｓｏｎ， Ｊ．； Ｅｒｎｓｔ， Ｄ．； ａｎｄ Ｓｅｐｕｌｖｅｄａ， Ｈ． Ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓ ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ ｏｆ ｓｉｘ ｈｕｍａｎ ｃｙｔｏｋｉｎｅｓ ｕｓｉｎｇ ｔｈｅ Ｃｙｔｏｍｅｔｒｉｃ Ｂｅａｄ Ａｒｒａｙ Ｓｙｓｔｅｍ， ａ ｍｕｌｔｉｐａｒａｍｅｔｅｒ ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ ｓｙｓｔｅｍ ｆｏｒ ｆｌｏｗ ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ． Ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ Ｒｅｓ． ２００２， １２， ９３−１０３．
【０１８１】
５７． Ｆｒｅｕｄｅｎｂｅｒｇ， Ｍ． Ａ． ａｎｄ Ｇａｌａｎｏｓ， Ｃ． Ｔｕｍｏｒ ｎｅｃｒｏｓｉｓ ｆａｃｔｏｒ ａｌｐｈａ ｍｅｄｉａｔｅｓ ｌｅｔｈａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｋｉｌｌｅｄ Ｇｒａｍ−ｎｅｇａｔｉｖｅ ａｂｄ Ｇｒａｍ−ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｂａｃｔｅｒｉａ ｉｎ Ｄ−ｇａｌａｃｔｏｓａｍｉｎｅ−ｔｒｅａｔｅｄ ｍｉｃｅ． Ｉｎｆｅｃｔ． Ｉｍｍｕｎ． １９９１， ５９， ２１１０−２１１５．
【０１８２】
５８． Ｔｒａｃｅｙ， Ｋ． Ｊ． ａｎｄ Ｃｅｒａｍｉ， Ａ． Ｔｕｍｏｒ ｎｅｃｒｏｓｉｓ ｆａｃｔｏｒ， ｏｔｈｅｒ ｃｙｔｏｋｉｎｅｓ ａｎｄ ｄｉｓｅａｓｅ． ． Ａｎｎｕ． Ｒｅｖ． Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ． １９９３， ９， ３１７−３４３．
【図面の簡単な説明】
【０１８３】
【図１】細菌のリポ多糖の毒性部位である脂質Ａの構造。数値はアシル鎖長を示す。
【図２】ＢＯＤＩＰＹ−カダベリン置換法により決定される化合物のＬＰＳ結合親和性。ポリミキシンＢ（ＰＭＳ）を対照化合物として用いた。アルキル化合物を白抜き記号及び点線で表示し、アシル化合物を黒塗り記号及び実線で表示する。
【図３】１０ｎｇ／ｍｌの大腸菌０１１１：Ｂ４ ＬＰＳで１４時間刺激したマウスＪ７７４．Ａ１細胞の、ポリミキシンＢ（対照化合物）、アシル（黒塗り記号）及びアルキル（白抜き記号）Ｌｙｓ−スペルミン類似体による酸化窒素（ＮＯ）阻害。４つのパラメータロジティックフィットにより決定された阻害定数（ＩＣ５０）値を、表１〜３に示す。
【図４】ＮＯ阻害効力と、直鎖アシル／アルキル類似体の炭素長との相関。挿入図：結合親和性（ＢＣ置換）と炭素鎖長との間の相関。相関があまりない場合には、結合剤と真の中和剤とを識別するためのプローブ置換法の感受性がやや低い。
【図５】マウスＪ７７４細胞における、ＢＣ蛍光プローブ置換により決定されるＬｙｓ−スペルミン類似体の結合親和性（ＥＤ５０）と、ＮＯ阻害（ＩＣ５０）との相関。
【図６】多様なグラム陰性菌から単離されたＬＰＳへのリジン−スペルミン化合物の結合。結合効力のランク順は一定である。
【図７】選択されたＬｙｓ−スペルミン化合物による、１０ｎｇ／ｍｌの大腸菌０１１１：Ｂ４ ＬＰＳで刺激されたヒト血液中における炎症性サイトカインＴＮＦ−α及びＩＬ−６の阻害。
【図８】親油性リジン−スペルミン複合体の合成ａ ａ条件及び試薬：（ａ）ＣＨ３ＯＨ；（ｂ）Ｂｏｃ２Ｏ，ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ，Ｎａ２ＣＯ３；（ｃ）Ｈ２，Ｐｄ／Ｃ，ＥｔＯＨ；（ｄ）ＲＣＯＣｌ，Ｅｔ３Ｎ，ＣＨ２Ｃｌ２；（ｅ）１．ＲＣＨＯ，ＣＨ（ＯＣＨ３）３，Ｅｔ３Ｎ，ＣＨ２Ｃｌ２，２．ＮａＢＨ４，ＣＨ３ＯＨ；（ｆ）３Ｎ ＨＣｌ／ＣＨ３ＯＨ．
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式：
【化１】
（式中、ＸはＯ又はＨ、Ｈであり、Ｒは疎水性Ｃ１２−Ｃ２０鎖であり、Ｙは−ＮＨ２又は−Ｈである）：で表される少なくとも１つの化合物、その医薬品に許容される塩及びそのプロドラッグの有効量を、これを必要とする宿主に投与することによって、内毒素性ショック症状を治療する、又は、ＮＯ活性、ＴＮＦ−α産生、ＩＬ−６産生及びサイトカイン活性のうち少なくとも１つを阻害する方法。
【請求項２】
内毒素性ショック症状治療用である
ことを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項３】
ＮＯ活性阻害用である
ことを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項４】
ＴＮＦ−α産生阻害用である
ことを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項５】
ＩＬ−６産生阻害用である
ことを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項６】
サイトカイン活性阻害用である
ことを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項７】
前記疎水性Ｃ１２−Ｃ２０鎖は脂肪鎖である
ことを特徴とする請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８】
前記疎水性Ｃ１２−Ｃ２０鎖はアシル鎖である
ことを特徴とする請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項９】
前記疎水性Ｃ１２−Ｃ２０鎖はＳＯ２基をα位に有する
ことを特徴とする請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０】
前記疎水性Ｃ１２−Ｃ２０鎖はフェニルベンジル鎖である
ことを特徴とする請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１１】
前記疎水性Ｃ１２−Ｃ２０鎖はエチレン性不飽和脂肪鎖である
ことを特徴とする請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１２】
前記疎水性Ｃ１２−Ｃ２０鎖は飽和脂肪鎖である
ことを特徴とする請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１３】
ＸはＯである
ことを特徴とする請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１４】
前記化合物はＬ−Ｌｙｓ−ε−（ステアロイル）−Ｎ１−スペルミンである
ことを特徴とする請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１５】
前記化合物はＤ−Ｌｙｓ−ε−（ステアロイル）−Ｎ１−スペルミンである
ことを特徴とする請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１６】
前記化合物はＬ−Ｌｙｓ−ε−（オクタデカニル）−Ｎ１−スペルミンである
ことを特徴とする請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１７】
前記化合物はＤ−Ｌｙｓ−ε−（オクタデカニル）−Ｎ１−スペルミンである
ことを特徴とする請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１８】
敗血症の治療を含む
ことを特徴とする請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１９】
炎症の治療を含む
ことを特徴とする請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２０】
感染の治療を含む
ことを特徴とする請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２１】
前記化合物は下記式：
【化２】
：で表される
ことを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項２２】
下記式：
【化３】
（式中、ＸはＯ又はＨ、Ｈであり、Ｒは疎水性Ｃ１２−Ｃ２０鎖である）：で表される化合物、その医薬品に許容される塩及びそのプロドラッグ。
【請求項２３】
請求項２２に記載の少なくとも１つの化合物と医薬品に許容される担体とを含む医薬組成物。
【請求項１】
下記式：
【化１】
（式中、ＸはＯ又はＨ、Ｈであり、Ｒは疎水性Ｃ１２−Ｃ２０鎖であり、Ｙは−ＮＨ２又は−Ｈである）：で表される少なくとも１つの化合物、その医薬品に許容される塩及びそのプロドラッグの有効量を、これを必要とする宿主に投与することによって、内毒素性ショック症状を治療する、又は、ＮＯ活性、ＴＮＦ−α産生、ＩＬ−６産生及びサイトカイン活性のうち少なくとも１つを阻害する方法。
【請求項２】
内毒素性ショック症状治療用である
ことを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項３】
ＮＯ活性阻害用である
ことを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項４】
ＴＮＦ−α産生阻害用である
ことを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項５】
ＩＬ−６産生阻害用である
ことを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項６】
サイトカイン活性阻害用である
ことを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項７】
前記疎水性Ｃ１２−Ｃ２０鎖は脂肪鎖である
ことを特徴とする請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８】
前記疎水性Ｃ１２−Ｃ２０鎖はアシル鎖である
ことを特徴とする請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項９】
前記疎水性Ｃ１２−Ｃ２０鎖はＳＯ２基をα位に有する
ことを特徴とする請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０】
前記疎水性Ｃ１２−Ｃ２０鎖はフェニルベンジル鎖である
ことを特徴とする請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１１】
前記疎水性Ｃ１２−Ｃ２０鎖はエチレン性不飽和脂肪鎖である
ことを特徴とする請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１２】
前記疎水性Ｃ１２−Ｃ２０鎖は飽和脂肪鎖である
ことを特徴とする請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１３】
ＸはＯである
ことを特徴とする請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１４】
前記化合物はＬ−Ｌｙｓ−ε−（ステアロイル）−Ｎ１−スペルミンである
ことを特徴とする請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１５】
前記化合物はＤ−Ｌｙｓ−ε−（ステアロイル）−Ｎ１−スペルミンである
ことを特徴とする請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１６】
前記化合物はＬ−Ｌｙｓ−ε−（オクタデカニル）−Ｎ１−スペルミンである
ことを特徴とする請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１７】
前記化合物はＤ−Ｌｙｓ−ε−（オクタデカニル）−Ｎ１−スペルミンである
ことを特徴とする請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１８】
敗血症の治療を含む
ことを特徴とする請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１９】
炎症の治療を含む
ことを特徴とする請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２０】
感染の治療を含む
ことを特徴とする請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２１】
前記化合物は下記式：
【化２】
：で表される
ことを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項２２】
下記式：
【化３】
（式中、ＸはＯ又はＨ、Ｈであり、Ｒは疎水性Ｃ１２−Ｃ２０鎖である）：で表される化合物、その医薬品に許容される塩及びそのプロドラッグ。
【請求項２３】
請求項２２に記載の少なくとも１つの化合物と医薬品に許容される担体とを含む医薬組成物。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【公表番号】特表２００８−５１９８５６（Ｐ２００８−５１９８５６Ａ）
【公表日】平成２０年６月１２日（２００８．６．１２）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００７−５４１３７８（Ｐ２００７−５４１３７８）
【出願日】平成１７年１１月１４日（２００５．１１．１４）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００５／０４１０４２
【国際公開番号】ＷＯ２００７／００１４５５
【国際公開日】平成１９年１月４日（２００７．１．４）
【出願人】（５０００２３９９０）メディクエスト セラピューティックス インク (9)
【出願人】（５０７１５４０００）ザ・ユニバーシティ・オブ・カンザス (2)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２０年６月１２日（２００８．６．１２）
【国際特許分類】
【出願日】平成１７年１１月１４日（２００５．１１．１４）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００５／０４１０４２
【国際公開番号】ＷＯ２００７／００１４５５
【国際公開日】平成１９年１月４日（２００７．１．４）
【出願人】（５０００２３９９０）メディクエスト セラピューティックス インク (9)
【出願人】（５０７１５４０００）ザ・ユニバーシティ・オブ・カンザス (2)
【Ｆターム（参考）】
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