抗レトロウィルス性エナンチオマー性ヌクレオチドアナログ
【課題】非環式ヌクレオチドアナログ、それらの調製および使用方法を提供すること。
【解決手段】本発明は、非環式ヌクレオチドアナログを提供し、この化合物は、この化合物の塩を包含し、ここで、式ＩＡまたはＩＢの化合物は、実質的にこの化合物のエナンチオマーを含まず、Ｂは、置換または非置換のプリンまたはピリミジン部分、もしくはそのアザおよび／またはデアザのアナログであり、そしてＢは、グアニン以外であり、そしてＲは、独立して、Ｈ、アルキル（１〜６Ｃ）、アリールまたはアラルキルである。
【解決手段】本発明は、非環式ヌクレオチドアナログを提供し、この化合物は、この化合物の塩を包含し、ここで、式ＩＡまたはＩＢの化合物は、実質的にこの化合物のエナンチオマーを含まず、Ｂは、置換または非置換のプリンまたはピリミジン部分、もしくはそのアザおよび／またはデアザのアナログであり、そしてＢは、グアニン以外であり、そしてＲは、独立して、Ｈ、アルキル（１〜６Ｃ）、アリールまたはアラルキルである。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
発明の分野
本発明は、非環式ヌクレオチドアナログ、それらの調製および使用に関する。特に、本発明は、プリン塩基およびピリミジン塩基の２−ホスホノメトキシプロピル誘導体の個々のエナンチオマーに関する。
【背景技術】
【０００２】
発明の背景
ウィルス性疾患の治療における化学療法剤の開発が緊急に必要である。特に、レトロウィルスによって引き起こされる疾患の治療は、人間医療における最も困難な挑戦の１つである。登録済みまたは現在研究中の多数の抗ウィルス剤は、効果的に疾患を治癒し、症状を緩和し、またはある種の慢性ウィルス性感染症の再発の間隔を実質的に延ばし得るが、多くの場合、レトロウィルス性疾患の例として特にＡＩＤＳの場合、確実な成果は未だ達成されていなかった。新しい抗ウィルス剤に対して重要な要件である抗ウィルス作用の選択性は、達成されていなかった。
【０００３】
抗ウィルス性化学療法に臨床的に有用である大部分の化合物は、プリン塩基またはピリミジン塩基のいずれかおよび／または炭水化物部分において修飾されたヌクレオシドである。このような化合物は、主として、ウィルスの核酸の合成に関するプロセスにおいて作用する；それらの作用は、リン酸化、それに続くトリホスフェートへの変換を受ける能力に依存する。修飾ヌクレオシドを投与する１つの問題は、宿主細胞における適切なリン酸化活性の欠如およびウィルス特異性リン酸化活性を欠いたウィルス株の存在である。酵素的に耐性のヌクレオチドアナログは、可能性のある抗ウィルス剤として特に有用のようであるが、それらの極性の特性は、細胞膜の適切なヌクレオチドレセプターを欠いているので、これらアナログの細胞への効果的な侵入を妨げる。
【０００４】
この困難性は、ヒドロキシル基を有し、糖部分を置換している脂肪族鎖を含む一連の非環式ヌクレオチドアナログにより克服されるように思われる。例えば、抗ウィルス性ヌクレオシドアナログのガンシクロビル（Ｃｙｔｏｖｅｎｅ）から誘導されるホスフェートまたはホスホン酸誘導体が、抗ヘルペスウィルス活性を有すると報告されている（Ｒｅｉｓｔらの「抗ウィルス剤としてのヌクレオチドアナログ」， ＡＣＳシンポジウムシリーズ，第４０１号， １７ー３４頁 （１９８９）；Ｔｏｌｍａｎ， 同上， ３５−５０頁；Ｐｒｉｓｂｅら， Ｊ Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ （１９８６）， ２９：６７１）。
【０００５】
以下の式により、幾つかのクラスの先行技術の化合物が記載される。
【０００６】
【化１０】
抗ウィルス作用が複素環塩基の性質によってそれほど厳密に制限されない別の群の抗ウィルス化合物は、ホスホン酸部分がメチレン単位を介して脂肪族鎖糖置換基のヒドロキシル基に結合しているホスホン酸アナログを包含する。このような化合物の例としては、ＨＰＭＰ誘導体（１）があり、ＵＫ特許出願第２１３４９０７号およびＨｏｌｙらのＥＰ２０６，４５９として１９８６年１２月３０日付けで現在公開されたＰＶ−３０１７により開示されていた。このような化合物は、もっぱらＤＮＡウィルスに対して作用し、Ｄｅ ＣｌｅｒｃｑらのＮａｔｕｒｅ （１９８６） ３２３：４６４−４６７に報告され、そしてＨｏｌｙらのＡｎｔｉｖｉｒａｌ Ｒｅｓ （１９９０） １３：２９５に概説されている。
【０００７】
類似のタイプの抗ウィルス剤は、ＰＭＥ誘導体（２）により表され、これは、Ｈｏｌｙらの欧州特許出願第０２０６４５９号により開示され、そしてＤｅ ＣｌｅｒｃｑらのＡｎｔｉｖｉｒａｌ Ｒｅｓ （１９８７） ８：２６１およびＨｏｌｙらのＣｏｌｌｅｃｔｉｏｎ Ｃｚｅｃｈ Ｃｈｅｍ Ｃｏｍｍｕｎ （１９８７） ５２：２８０１；同上 （１９８９）， ５４：２１９０に詳細に記載されている。これらの化合物は、ＤＮＡウィルスおよびレトロウィルス（ＨＩＶ−１およびＨＩＶ−２を包含する）の両方に対して作用する。アデニン誘導体、すなわちＰＭＥＡは、マウスにおけるモロニィ（Ｍｏｌｏｎｅｙ）肉腫ウィルス、アカゲザルにおけるサル免疫不全ウィルス、および、ネコにおけるネコ免疫不全ウィルスに対して顕著な活性を示すことが実証された（Ｂａｌｚａｒｉｎｉら， ＡＩＤＳ （１９９１） ５：２１； Ｅｇｂｅｒｉｎｋら， Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ Ｕ．Ｓ．Ａ． （１９９０） ８７：３０８７）。
【０００８】
側鎖の修飾に集中した広範な構造−活性の調査（Ｈｏｌｙらの「抗ウィルス剤としてのヌクレオチドアナログ」， ＡＣＳシンポジウムシリーズ， 第４０１号 （１９８９）， ５１頁に記載されている）は、さらなる実質的に活性な抗ウィルス剤を示さなかった。フッ素原子によりこのヒドロキシルを置換すると、ＦＰＭＰ化合物（３）が得られ、これは、幾らかの抗ＤＮＡ−ウィルス活性を有するのに加えて、ＨＩＶ−１、ＨＩＶ−２、およびネズミ肉腫ウィルスの両方に対して実質的な効果を示す（ＥＰ ４５４，１２７として１９９１年１０月３０日付けで現在公開されたＨｏｌｙらのチェコスロバキア特許出願ＰＶ２０４７−９０、および、Ｂａｌｚａｒｉｎｉら， Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ Ｕ．Ｓ．Ａ．（１９９１） ８８：４９６１に開示されている）。
【０００９】
９−（２−ホスホノメトキシプロピル）アデニンおよび９−（２−ホスホノメトキシプロピル）グアニン（ＰＭＰＡおよびＰＭＰＧ）のラセミ混合物もまた、Ｈｏｌｙらの欧州特許出願第０２０６４５９号（ＰＭＰＡ）およびＨｏｌｙら，Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ Ｃｚｅｃｈ Ｃｈｅｍ Ｃｏｍｍｕｎ （１９８８） ５３：２７５３ （ＰＭＰＡ）、ならびに米国特許出願第９３２，１１２ （ＰＭＰＧ）に記載されていた。ＰＭＰＡは、評価可能な抗ヘルペス効果を全く欠いているが、ＰＭＰＧの抗ヘルペス効果は、その実質的な細胞毒性によるようであった。ＰＭＰＧの臨床的な形、およびその関連化合物、すなわち９−（３−ヒドロキシ−２−（ホスホノメトキシ）プロピル）グアニン（ＨＰＭＰＧ）の臨床的な形が、ＥＰ出願第４５２９３５号に開示されている。これらのグアニン形に関して、Ｒ−エナンチオマーは、特にレトロウィルスのＨＩＶに関して、より大きい抗ウィルス活性を一貫して与えた。ある種のＤＮＡウィルスに関して、抗ウィルス活性において、ＲおよびＳのエナンチオマーの間の差はほとんどなかった。この活性のパターンが、グアニン以外のＰＭＰ化合物にまで広げられるかどうかは予測できない。
【００１０】
上記の文献またはそれらの組み合わせによって、本発明の分割されたエナンチオマーが抗レトロウィルス活性を示すということ、あるいは、好適なエナンチオマーは何かということを予測することはできない。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
本発明の目的は、非環式ヌクレオチドアナログ、それらの調製および使用方法を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明は、以下の式：
【００１３】
【化１１】
で示される化合物を提供し、この化合物は、この化合物の塩を包含し、ここで、式ＩＡまたはＩＢの化合物は、実質的にこの化合物のエナンチオマーを含まず、Ｂは、置換または非置換のプリンまたはピリミジン部分、もしくはそのアザおよび／またはデアザのアナログであり、そしてＢは、グアニン以外であり、そしてＲは、独立して、Ｈ、アルキル（１〜６Ｃ）、アリールまたはアラルキルである。
【００１４】
１つの実施形態において、ＲがＨであり、そしてＢが、アデニン、２，６−ジアミノプリン、２−アミノプリン、ヒポキサンチン、およびキサンチン、およびそれらの１−デアザアナログ、３−デアザアナログおよび８−アザアナログからなる群より選択されるプリン部分であり、このプリン部分は、非置換の、プリンまたはアナログの誘導体、あるいは、２位および／または６位および／または８位をアミノ、ハロゲン、ヒドロキシ、アルコキシ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アラルキルアミノ、ヘテロアラルキルアミノ、複素環式アミノ、ヒドロキシアミノ、アルコキシアミノ、ヒドラジノ、アジド、メルカプトまたはアルキルチオで置換された、プリンまたはアナログの誘導体のいずれかであり、そしてこの誘導体はグアニン以外である。
【００１５】
１つの実施形態において、ＲがＨであり、そしてＢが、シトシン、ウラシル、チミンおよび５−メチルシトシンおよびそれらの６−アザアナログからなる群より選択されるピリミジンであり、このピリミジンが、非置換か、あるいは、４位の任意の環外アミノ基がアルキル、アラルキル、ヒドロキシまたはアミノで置換されているかのいずれかである。
【００１６】
１つの実施形態において、Ｂが、アデニン、２，６−ジアミノプリン、２−アミノプリン、８−ブロモアデニン、６−メルカプトプリン、６−チオグアニン、２−メチルチオアデニン、３−デアザアデニン、８−アザアデニン、８−アザグアニン、１−デアザアデニンまたは８−アザ−２，６−ジアミノプリンであり、上記化合物は、式ＩＡで示される。
【００１７】
１つの実施形態において、Ｂが、アデニン、２，６−ジアミノプリン、２−アミノプリン、８−ブロモアデニン、６−メルカプトプリン、６−チオグアニン、２−メチルチオアデニン、３−デアザアデニン、８−アザアデニン、８−アザグアニン、１−デアザアデニンまたは８−アザ−２，６−ジアミノプリンであり、上記化合物は、式ＩＢで表される。
【００１８】
１つの実施形態において、Ｂが、アデニン、８−アザグアニンまたは２，６−ジアミノプリンである。
【００１９】
１つの実施形態において、Ｂが、２，６−ジアミノプリンである。
【００２０】
１つの実施形態において、Ｂが、８−アザグアニンである。
【００２１】
１つの実施形態において、Ｂが、シトシン、チミン、ウラシル、５−メチルシトシン、６−アザウラシルまたは６−アザシトシンである。
【００２２】
別の局面において、本発明は、以下の式：
【００２３】
【化１２】
（ここで、Ｂは上記で定義されたのと同様である）
で示される化合物を調製する方法を提供し、この方法は、以下の式：
【００２４】
【化１３】
（ここで、Ｒは、独立して、アルキル（１〜６Ｃ）、アリールまたはアラルキルである）
で示される化合物を、極性非プロトン性溶媒媒質中でハロトリアルキルシランで処理することによって加水分解する工程を包含する。
【００２５】
１つの実施形態において、両Ｒが、２−プロピルである。
【００２６】
１つの実施形態において、上記式ＶＩＩＡまたはＶＩＩＢで示される化合物が、以下の式：
【００２７】
【化１４】
（ここで、Ｂ’は、明細書中で定義されるようなＢの保護された形である）
で示される化合物を、式ＶＩＡまたはＶＩＢで示される化合物を少なくとも１種の脱保護試薬で処理することによって脱保護する工程を包含するプロセスにより調製される。
【００２８】
１つの実施形態において、上記式ＶＩＡまたはＶＩＢで示される化合物が、以下の式：
【００２９】
【化１５】
（ここで、Ｂ’は、明細書中で定義されるようなＢの保護された形である）
で示される化合物を、以下の式：
【００３０】
【化１６】
（ここで、ＬｖＯは、脱離基であり、そして各Ｒは、独立して、アルキル（１〜６Ｃ）である）
で示される化合物と、式ＶおよびＩＶで示される化合物が反応して式ＶＩＡまたはＶＩＢで示される化合物を形成する条件下で、反応させる工程を包含するプロセスにより調製される。
【００３１】
１つの実施形態において、ＬｖＯが、ｐ−トルエンスルホニルオキシ（ＴｓＯ）基である。
【００３２】
１つの実施形態において、上記ＶＩＩＡまたはＶＩＩＢの化合物が、水素化アルカリ金属または炭酸アルカリ金属の存在下、上記で定義されるようなプリンまたはピリミジン部分Ｂを、以下の式：
【００３３】
【化１７】
（ここで、ＬｖＯは、脱離基であり、そしてＲは、独立して、アルキル（１〜６Ｃ）、アリールまたはアラルキルである）
で示される（Ｒ）−または（Ｓ）−２−Ｏ−ジアルキルホスホニルメチル化合物でアルキル化することにより調製される。
【００３４】
１つの実施形態において、上記炭酸アルカリが、炭酸セシウムである。
【００３５】
１つの実施形態において、ＬｖＯが、ｐ−トルエンスルホニルオキシ（ＴｓＯ）基である。
【００３６】
別の局面において、本発明は、本発明の化合物を合成する方法を提供し、この方法は、 以下の式ＩＩ：
【００３７】
【化１８】
（ここで、Ｂは、上記に定義されるのと同様である）
で示されるプリンまたはピリミジン塩基の（Ｒ）−または（Ｓ）−Ｎ−（２−ヒドロキシプロピル）誘導体を保護して、以下の式ＩＩＩ：
【００３８】
【化１９】
（ここで、Ｂ’残基は、少なくとも１つのＮ−アセチル、Ｎ−ベンゾイル、Ｎ−ピバロイル、Ｎ−ジメチルアミノメチレン、Ｎ−トリチルまたはＮ−テトラヒドロピラニル基で置換された塩基Ｂの残基を表す）
で示される塩基が保護された誘導体を得る工程；
次いで不活性非プロトン性溶媒中−２０℃〜１００℃で、式ＩＩＩの化合物をジアルキル ｐ−トルエンスルホニルオキシメチルホスホネートおよび水素化ナトリウムで処理して、以下の式ＩＶ：
【００３９】
【化２０】
（ここで、各Ｒは、独立して、アルキル（１〜６Ｃ）、アリールまたはアラルキルである）
で示される中間体を得、次いで不活性非プロトン性溶媒中で、式ＩＶの中間体をハロトリメチルシランと反応させる工程を包含する。
【００４０】
１つの実施形態において、上記ハロトリメチルシランが、ブロモトリメチルシランである。
【００４１】
１つの実施形態において、上記不活性非プロトン性溶媒が、アセトニトリル、ジメチルホルムアミド、または塩素化炭化水素である。
【００４２】
別の局面において、本発明は、本発明の化合物を調製する方法を提供し、この方法は、水素化アルカリ金属または炭酸アルカリの存在下、不活性有機溶媒中で複素環式プリンまたはピリミジン塩基Ｂを、以下の式ＸＶＩ：
【００４３】
【化２１】
（ここで、各Ｒは、独立して、アルキル（１〜６Ｃ）、アリールまたはアラルキルである）
で示される（Ｒ）−または（Ｓ）−２−Ｏ−ジアルキルホスホニルメチル−１−Ｏ−ｐ−トルエンスルホニル−１，２−プロパンジオールで処理して、以下の式ＶＩ：
【００４４】
【化２２】
で示される（Ｒ）−または（Ｓ）−Ｎ−（２−ジアルキルホスホニルメトキシプロピル）誘導体を得、次いで不活性非プロトン性溶媒の存在下、式ＶＩの誘導体をハロトリメチルシランで処理する工程を包含する。
【００４５】
１つの実施形態において、上記炭酸アルカリが、炭酸セシウムである。
【００４６】
１つの実施形態において、上記不活性非プロトン性溶媒が、アセトニトリル、ジメチルホルムアミドまたはハロゲン化炭化水素である。
【００４７】
１つの実施形態において、上記ハロトリメチルシランが、ブロモトリメチルシランである。
【００４８】
別の局面において、本発明は、ラセミ体としての、あるいはエンリッチされたまたは分割されたエナンチオマーとしての、以下の式：
【００４９】
【化２３】
（ＬｖＯは脱離基である）
で示される化合物を提供する。
【００５０】
別の局面において、本発明は、ラセミ体としての、あるいはエンリッチされたまたは分割されたエナンチオマーとしての、以下の式：
【００５１】
【化２４】
（Ｂは、上記に定義されるのと同様であるか、またはその保護形である）
で示される化合物を提供する。
【００５２】
別の局面において、本発明は、ラセミ体としての、あるいはエンリッチされたまたは分割されたエナンチオマーとしての、以下の式：
【００５３】
【化２５】
（Ｂは、置換または非置換のプリンまたはピリミジン部分、グアニン以外のそのアザおよび／またはデアザのアナログ、または明細書中で定義されたのと同様の保護形である）
で示される化合物の、エンリッチされたまたは分割されたエナンチオマーを提供する。
【００５４】
別の局面において、本発明は、エンリッチされたまたは分割されたＲエナンチオマーとしての、以下の式：
【００５５】
【化２６】
で示される化合物を提供する。
【００５６】
別の局面において、本発明は、エンリッチされたまたは分割されたＲエナンチオマーとしての、以下の式：
【００５７】
【化２７】
で示される化合物を提供する。
【００５８】
別の局面において、本発明は、ラセミ体としての、あるいはエンリッチされたまたは分割されたエナンチオマーとしての、以下の式：
【００５９】
【化２８】
（ここで、Ｒは、独立して、アルキル（１〜６Ｃ）、アリールまたはアラルキルである）
で示される化合物を提供する。
【００６０】
別の局面において、本発明は、ラセミ体としての、あるいはエンリッチされたまたは分割されたエナンチオマーとしての、以下の式：
【００６１】
【化２９】
（ここで、Ｒは、アルキル（１〜６Ｃ）、アリールまたはアラルキルである）
で示される化合物を提供する。
【００６２】
別の局面において、本発明は、ラセミ体としての、あるいはエンリッチされたまたは分割されたエナンチオマーとしての、以下の式：
【００６３】
【化３０】
（ここで、ＬｖＯは、脱離基であり、そしてＲは、独立して、アルキル（１〜６Ｃ）、アリールまたはアラルキルである）
で示される化合物を提供する。
【００６４】
別の局面において、本発明は、薬学的に受容可能な担体と混合して、抗ウィルス的に有効な量の、本発明の化合物を含有する、抗レトロウィルス的に使用するための薬学的組成物を提供する。
【００６５】
１つの実施形態において、上記抗ウィルス化合物が、９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）アデニンである。
【００６６】
１つの実施形態において、上記抗ウィルス化合物が、９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２，６−ジアミノプリンである。
【００６７】
別の局面において、本発明は、治療を必要とする哺乳動物に抗ウィルス効果を達成する薬学的組成物であって、抗ウィルス的に有効な量の、本発明の化合物を含む、薬学的組成物を提供する。
【００６８】
１つの実施形態において、上記抗ウィルス化合物が、９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）アデニンである。
【００６９】
１つの実施形態において、上記抗ウィルス化合物が、９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２，６−ジアミノプリンである。
【００７０】
１つの実施形態において、上記複素環式アミノ基が、酸素ヘテロ原子を含有する。
【００７１】
１つの実施形態において、上記複素環式アミノ基が、飽和である。
【００７２】
別の局面において、本発明の化合物は、以下から選択される：
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−ジメチルアミノプリン；
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−ジエチルアミノプリン；
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−ブチルアミノプリン；
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−（２−ブチル）アミノプリン；
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−シクロプロピルアミノプリン；
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−シクロペンチルアミノプリン；
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−シクロヘキシルアミノプリン；
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−ピロリジノプリン；
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−ピペリジノプリン；
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−モルホリノプリン；
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−ベンジルアミノプリン；
９−（Ｓ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−８−アザグアニン；
８−（Ｓ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−８−アザグアニン；
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−８−アザグアニン；
８−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−８−アザグアニン；
７−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−８−アザグアニン；
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−８−アザ−２，６−ジアミノプリン；
８−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−８−アザ−２，６−ジアミノプリン；
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−６−メルカプトプリン；
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−Ｎ１，Ｎ６−エテノアデニン；ならびに
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２，６−ジアミノプリンおよびその１，３−ジデアザ、１−デアザ、３−デアザまたは８−アザのアナログからなる群より選択される化合物。
【００７３】
別の局面において、本発明は、Ｂが、６位をアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アラルキルアミノ、ヘテロアルキルアミノまたは複素環式アミノで置換された２−アミノプリンである、本発明の化合物を合成する方法を提供し、この方法は、対応するアミンまたは複素環式アミンを、９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−クロロプリンのアルキル（１〜６Ｃ）、アリールまたはアラルキルジエステルと反応させる工程を包含する。
【００７４】
別の局面において、本発明は、ラセミ体としての、あるいはエンリッチされたまたは分割されたエナンチオマーとしての、以下の式：
【００７５】
【化３１】
（ここで、Ｂは、置換または非置換のプリンまたはピリミジン部分、そのアザおよび／またはデアザアナログ、またはその保護形である）
で示される化合物を提供し、ただしＢは、アデニン、８−アザアデニン、２−アミノプリン、または６位をハロゲン、ヒドロキシ、アルコキシ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、メルカプト、−ＮＨＮＨ２または−ＮＨＯＨで置換されたアデニン、ではない。
【００７６】
１つの実施形態において、Ｂが、置換または非置換のプリン部分、そのアザおよび／またはデアザのアナログ、またはその保護形である。
【００７７】
１つの実施形態において、Ｂが、置換または非置換のプリン部分、そのアザおよび／またはデアザのアナログ、またはその保護形である。
【００７８】
発明の要旨
プリン塩基およびピリミジン塩基のＮ−（２−ホスホノメトキシプロピル）誘導体の分割されたエナンチオマー形が合成されて、特にレトロウィルスに対しての有用かつ予期せぬ抗ウィルス活性を有することが見い出された。これらの化合物は、式ＩＡおよびＩＢからなり、ＩＡはＲエナンチオマーを表し、そしてＩＢはＳエナンチオマーを表す。
【００７９】
【化３２】
式ＩＡおよびＩＢにおいて、Ｂはプリン塩基またはピリミジン塩基、もしくはグアニン以外のそれらのアザおよび／またはデアザアナログであり、そしてＲは、独立して、Ｈ、アルキル（１−６Ｃ）、アリールまたはアラルキルである。
【００８０】
従って、１つの局面では、本発明は、対応する式ＩＢの化合物の実質的な量を伴わない式ＩＡを含む組成物に関し、そして対応する式ＩＡの化合物の実質的な量を伴わない式ＩＢを含む組成物に関する。
【００８１】
「実質的な量」とは、約５モル％より少ないこと、好ましくは約２モル％より少ないこと、より好ましくは約１モル％より少ないこと、最も好ましくは検出不可能な量のことを意味する。「対応する化合物」とは、示された化合物のエナンチオマーを意味する。
【００８２】
本発明の他の局面は、これら組成物の調製、抗ウィルス性薬学的組成物へのそれらの処方物およびレトロウィルス感染症を治療するためのこれら処方物の使用を包含する。
【発明の効果】
【００８３】
本発明により、非環式ヌクレオチドアナログ、それらの調製および使用方法が提供される。
【発明を実施するための最良の形態】
【００８４】
発明の詳細な説明
本発明の化合物は、構造式Ｉを有する、プリン塩基およびピリミジン塩基のＮ−（２−ホスホノメトキシプロピル）誘導体の分割された（Ｒ）−エナンチオマーおよび（Ｓ）−エナンチオマーである。
【００８５】
【化３３】
Ｂは、プリン塩基またはピリミジン塩基、もしくはグアニン以外のそれらのアザおよび／またはデアザアナログである。Ｒエナンチオマーが好ましい。本明細書中で用いられるように、「プリン」は、置換または非置換の以下の式（以下の式において、遊離原子価および水素は示されていない）で表される部分を示す：
【００８６】
【化３４】
そして「ピリミジン」は、置換または非置換の以下の式で表される部分を示す：
【００８７】
【化３５】
アザアナログにおいては、上記式において少なくとも１つのＣは、Ｎで置き換えられる；デアザアナログにおいては、少なくとも１つのＮは、Ｃで置き換えられる。このような置換の組み合わせはまた、本発明の範囲内に含まれる。
【００８８】
従って、１−デアザプリンアナログは以下の式：
【００８９】
【化３６】
である；
３−デアザプリンアナログは以下の式：
【００９０】
【化３７】
である；
８−アザプリンアナログは以下の式：
【００９１】
【化３８】
である；そして
１−デアザ−８−アザプリンアナログは以下の式：
【００９２】
【化３９】
である。
【００９３】
Ｂの好ましい実施態様として、Ｂは、アデニン、２，６−ジアミノプリン、２−アミノプリン、ヒポキサンチン、キサンチン；およびそれらの１−デアザアナログ、３−デアザアナログまたは８−アザアナログ；および
プリンまたは上記アナログの誘導体からなる群から選択されるプリン塩基であり、この誘導体は、グアニン以外であり、アミノ、ハロゲン、ヒドロキシ、アルコキシ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アラルキルアミノ、ヘテロアラルキルアミノ、ヒドロキシアミノ、アルコキシアミノ、ヒドラジノ、複素環式アミノ、アジド、メルカプトまたはアルキルチオにより２位および／または６位および／または８位が置換されている。
【００９４】
本明細書中の記載の目的では、互変異性体は、特定の基の記載に含まれ、例えば、チオ／メルカプト、またはオキソ／ヒドロキシルである。
【００９５】
本発明に包含される実施態様として、Ｂは、シトシン、ウラシル、チミン、５−メチルシトシン、およびそれらの６−アザアナログ；および
アルキル、アラルキル、ヒドロキシまたはアミノにより４位の環外アミノ基が置換されたピリミジン誘導体からなる群から選択されるピリミジン塩基である。
【００９６】
本明細書中に示されるように、ハロゲンは、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩを示す；アルキルは、１−６Ｃを含む直鎖または分岐鎖の飽和炭化水素基を示し、例えば、メチル、エチル、２−プロピル、ｎ−ペンチル、ネオペンチルなどである；アルコキシは、式−ＯＲの基であり、ここで、Ｒは上記で定義されるようなアルキルである；アルキルチオは、式−ＳＲの基であり、ここで、Ｒは上記で定義されるようなアルキルである；アラルキルまたはヘテロアラルキルは、式−Ｒ−Ａｒの基であり、ここで、−Ｒ−は上記で定義されるようなアルキル（−Ｒ）に対応するアルキレンであり、Ａｒは置換（ヒドロキシル、ハロ、アミノ、スルホニル、カルボニル、あるいはヒドロキシル、ハロ、アミノ、スルホニルまたはカルボニルで置換されたＣ１−Ｃ３アルキルによる）または非置換で、６−１０Ｃを有し、そして必要に応じて酸素または窒素から選ばれるヘテロ原子を有する芳香族基（例えば、フェニル、ナフチル（ｎａｐｔｈｙｌ）、キノリル、およびベンジル）である；アラルキルアミノまたはヘテロアラルキルアミノは、式−Ｎ（Ｚ）２の基であり、ここで、Ｚは、独立して、Ｈまたは−Ｒ−Ａｒである（しかし、少なくとも１個のＺは−Ｒ−Ａｒである）；複素環式アミノは、少なくとも１個のＮ原子（通常１個）および必要に応じてさらに少なくとも１個の他のヘテロ原子を含む置換または非置換の複素環（例えば、ピロリジン、モルホリノ、ピペリジンなどの基）である。典型的には、環状構造は、３〜６員環原子を含み、単環式である。ある実施態様では、プリンの６−アミノ基の置換基は、プリンのＮ１と結合し合って、例えば、Ｎ１，Ｎ６−エテノ−アデニンにおけるように、プリニル部分に融合したＮ−複素環を形成する。
【００９７】
本発明の化合物は、遊離酸、塩の形で、あるいは少なくとも１個のアミノ官能基の付いた複素環塩基を有する化合物の場合には、両性イオンの形で単離され得る。酸または両性イオンの形は、陰イオン交換クロマトグラフィーにより、溶出液として揮発性有機酸（酢酸またはギ酸）を用いて、脱イオン化された粗物質を精製して得られ得る。遊離酸は、当該分野で公知の方法により、生理学的に受容可能な塩に容易に変換され得る。このような塩は、アンモニウムイオン、Ｌｉ＋、Ｎａ＋、Ｋ＋、Ｍｇ＋＋、およびＣａ＋＋、あるいは薬学的に受容可能な有機陽イオンの塩を包含する；それらの塩は一塩基性または二塩基性であり得る。Ｂに含まれる少なくとも１個のアミノ官能基もまた、ＨＢｒ、ＨＣｌ、Ｈ２ＳＯ４またはＨＯＡｃなどの無機酸または有機酸との酸付加塩として調製され得る。
【００９８】
ある場合には、式ＩＡおよびＩＢの化合物の酸または両性イオンの形は、水に難溶性である。このような環境下では、炭酸水素トリエチルアンモニウムなどの弱アルカリ揮発性緩衝液中で、中程度の塩基性陰イオン交換体（例えば、ＤＥＡＥ−セルロース、ＤＥＡＥ−セファデックス）上で精製が行われる。得られた水溶性トリエチルアンモニウム塩は、対応する形の陽イオン交換体を用いて、例えば陽イオン交換により他の陽イオンの塩に変換され得る。
【００９９】
式ＩＡまたはＩＢの化合物の遊離酸、両性イオンまたは塩は、固体状態において、あるいは、無菌の水溶液または水−アルコール溶液において安定である。
調製方法
本発明の化合物は、スキーム１または２を用いて、分割された乳酸エステルエナンチオマーから誘導されて容易に調製されるキラルな中間体Ｘから調製され得る。
【０１００】
反応スキーム１は以下の通りである：
スキーム１
【０１０１】
【化４０】
ここで、Ｂは、上記で定義される通りであり、そしてＢ’はその適切に保護された形である；キラルな中心の上の ＊は、分割されたエナンチオマーが用いられることを示す。Ｂの保護は、ヒドロキシ、アミノまたはカルバミド基などの、Ｂに含まれる活性水素原子のブロッキングを包含する。アセチル、ベンゾイル、ピバロイルまたはアミジン（ジメチルアミノメチレン基など）などの、アルカリに不安定な基の導入により、あるいは、トリチル、置換トリチル、テトラヒドロピラニル基などの、酸に不安定な基により、保護は達成され得る。
【０１０２】
式Ｘの２−Ｏ−テトラヒドロ−ピラニルプロパン−１，２−ジオールの所望のエナンチオマーは、通常の条件下で、すなわち、ｐ−トルエンスルホニルクロライドとピリジン中で反応させて、工程１において対応する１−Ｏ−ｐ−トルエンスルホニルエステルに変換される。示されるトシル基が好ましいが、メシレート、トリフレートまたはハライドなどの標準的な有機脱離基もまた用いられ得る。
【０１０３】
式ＸＩの保護された中間体は、直接の結晶化またはシリカゲルクロマトグラフィーのいずれかにより単離され、複雑なＮＭＲスペクトルを与えるジアステレオマーの混合物として得られる。
【０１０４】
工程２における式ＸＩのシントンによる複素環塩基のアルキル化は、不活性溶媒（ジメチルホルムアミドなど）中で塩基を水素化アルカリで前処理すること、あるいは炭酸アルカリによりインサイチュで生じる陰イオン形成のいずれかにより生じ得る陰イオンの形成により媒介される。後者の場合には、触媒として炭酸セシウムの重要性が認識されなければならない。この触媒は、塩基のアルキル化を実質的に促進するだけでなく、プリン環系におけるシントンＸＩによるアルキル化の位置特異性（ｒｅｇｉｏｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ）に有利に影響し、これにより、プリンの好ましいＮ９の位置あるいはアザまたはデアザ塩基内の対応する位置のところでアルキル化を行う。
【０１０５】
テトラヒドロピラン−２−イル基は、工程３において、酸性媒質中で開裂されて、中間体ＩＩＩを与える。この開裂は、無機酸（例えば、硫酸）陰イオン交換樹脂、または、有機酸（例えば、酢酸、ギ酸）の作用、それに続く脱イオン化により達成され得る。
【０１０６】
式ＩＩＩのＮ−（２−ヒドロキシプロピル） 誘導体は、工程４において、選択的Ｎ−アセチル化、Ｎ−ベンゾイル化、ジメチルホルムアミドジアルキルアセタールとの反応、Ｎ−トリチル化、３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピランとの反応などのような、この目的に一般に利用可能な種々の方法のうち任意の方法を用いて、式Ｖの塩基の保護された誘導体に変換される。
【０１０７】
スキーム１の工程５において、式Ｖの保護された中間体は、非反応性溶媒（ジメチルホルムアミドなど）中で、適切な塩基（水素化アルカリ金属など）で処理することによって、アルコキシド陰イオンに転換し、そしてそのアルコキシドは、ジアルキル ｐ−トルエンスルホニルオキシメチルホスホネート（式ＩＶ）で処理される。好ましくは、ホスホネートエステルは、２−プロピルアルコールのエステルである。反応は、式Ｖの中間体と式ＩＶのトシル誘導体との混合物を、３当量（中間体Ｖに対して）の水素化アルカリ（例えば、ＮａＨ、ＫＨ）または他の適切な試薬の存在下、−１０℃から８０℃まで、大抵は０℃から２０ ℃までの範囲の温度で撹拌することによって行われる。反応は、反応成分の性質および濃度に依存して、数時間から数日間続ける。ガス状水素が反応中放出されるので、反応は、湿気に対して適切に保護された開放系において行われることが必須である。
【０１０８】
次いで、保護基はＢ’から除去され、そしてホスホネートエステル結合は加水分解される。工程６において、Ｂ’からの保護基の除去は、加メタノール分解、酸加水分解などのような一般に受容可能な方法によって達成され得る。アルカリに不安定な基は、混合物をメタノールで希釈することによって簡単に除去され得る。得られた式ＶＩＩのジエステルは、シリカゲルクロマトグラフィーにより、または他の適切な支持体を用いて単離され、あるいは混入した非ヌクレオチド物質は、Ｄｏｗｅｘ ５０のような陽イオン交換体上での脱イオン化によって、または疎水性シリカクロマトグラフィーによって除去され得る。次いで、精製された式ＶＩＩの中間体は、工程７において、例えば、極性非プロトン性溶媒（アセトニトリル、またはＤＭＦなど）中で、ハロトリアルキルシラン（ブロモトリメチルシラン、またはヨードトリメチルシランなど）で４〜２０時間室温で処理することによって加水分解される。次いで、揮発分は真空下でエバポレートされ、次いで最終生成物は、その特性に依存してさらなる精製および単離技術によって得られ得る。マイナスに荷電されたホスホネート基の存在を利用するイオン交換クロマトグラフィーが好ましい。
【０１０９】
あるいは、式Ｉの化合物は、反応スキーム２によって調製され得る。
スキーム２
【０１１０】
【化４１】
スキーム２において、式ＸＶＩＩのシントンは、最後に、キラルなＰＭＰ前駆体を提供するために用いられる。そのシントンは、トシル脱離基を結合しており、そして複素環塩基またはその保護された誘導体のアルキル化に用いられて、式ＶＩＩ、すなわち本発明の化合物の保護されたジエステル体を与える。
【０１１１】
反応スキーム２において、反応スキーム１におけるように、式Ｘの２−Ｏ−（テトラヒドロピラニル）−プロパン−１，２−ジオールの分割体は、所望の分割されたエナンチオマーを提供する。式Ｘの分割された化合物は、工程１において、標準条件下でベンジル化（例えば、ＤＭＦ中で水素化ナトリウムの存在下ベンジルブロマイドとの反応）により、ベンジルエーテルＸＩＩを与える。次いで、このベンジルエーテルは、工程２において、酸加水分解により、式ＸＩＩＩの分割されたエナンチオマーの２−Ｏ−ベンジルプロパン−１，２−ジオールに変換される。いずれかのエナンチオマー（蒸留可能なオイル）は、工程３において、塩化水素の存在下で１，３，５−トリオキサンまたはパラホルムアルデヒドとのクロロメチル化により、中間体の式ＸＩＶのクロロメチルエーテルを与える。この式ＸＩＶのクロロメチルエーテルは、精製することなく、工程４において、同時に２−プロピルクロライドを除去しながらトリ（２−プロピル）ホスファイトと加熱することによって、ホスホネートジエステルＸＶに変換される。式ＸＶの中間体は、高い真空度で蒸留可能であるが、この手法によりラセミ化が起こり得る。次いで、この反応物の部分的に精製された生成物は、パラジウム／活性炭触媒のメタノール液の存在下での水素化のような標準条件下で加水素分解され、そして工程５から得られた中間体の式ＸＶＩのジエステルは、単離することなく、工程６において、トシルクロライドのピリジン液の作用により、トシル誘導体ＸＶＩＩに変換される。
【０１１２】
Ｘ→ＸＶＩＩの系列は、６つの工程を含むが、中間体の精製を必要としない。すべての反応は高い転換率で進み、その結果、この系列の全体の収率は４０％を越える。ホスホネートの２−プロピルエステルが好ましいが、他のホスホネート保護エステル基（メチル、エチル、ベンジル、および環状ジエステルなど）は同様な効果に用いられ得る。さらに、式ＸＶＩＩのシントン内のトシル基は、例えば、メシル、トリフリル、ｐ−ニトロフェニルスルホニルなどの他の脱離基によっても置き換えら得る。
【０１１３】
この合成系列の工程７は、式ＸＶＩＩのシントンによる複素環塩基のアルキル化にある。これは、複素環に対して当モル量の塩基を必要とする。アルキル化は、水素化ナトリウム反応による複素環塩基から生じるナトリウム塩、あるいは複素環塩基と、やや過剰の炭酸カリウムまたは有利には炭酸セシウムとの混合物のいずれかを用いて、上昇した温度でＤＭＦ中で最適に行われる。この反応は、非保護または保護（例えば、Ｎ−ベンゾイル化）の塩基、あるいはスキーム１による反応の記載で述べたようなそれらの前駆体のいずれかを用いて行われ得る。
【０１１４】
式ＶＩの保護された中間体は、複素環塩基のところを変換するのに都合よく適用し得、式Ｉの広範な種類の付加化合物を与える。式ＶＩＩの２−アミノ−６−クロロプリン誘導体の６位のハロゲン（例えば、塩素）原子の反応性は、広範な種類の６−置換２−アミノプリン化合物の調製に適用可能である；従って、アジ化ナトリウムまたはアジ化リチウムと加熱することによって、２−アミノ−６−アジドプリン誘導体を調製することが可能になり、その誘導体はさらに、２，６−ジアミノプリン化合物に還元され得る。あるいは、クロロ誘導体をチオ尿素で処理すると、６−チオグアニン化合物を与えるが、一方、それと一級または二級アミンとの反応は、Ｎ６置換の、または二置換の２，６−ジアミノプリン誘導体を与える。
【０１１５】
類似の変換もまた、６−クロロプリンから誘導される式ＶＩのジエステルに適用可能である。このジエステルは、最終的に、６−メルカプトプリン、あるいは、Ｎ６−モノまたは二置換アデニンを含む式Ｉの化合物になる。
【０１１６】
アルキル化は、速やかに進み、そして所望の式ＶＩＩの中間体は、反応混合物から容易に単離され、そしてクロマトグラフィーにより精製され得る。式ＩＡおよびＩＢの化合物になるこれらの中間体のさらなる処理はスキーム１に記載の手順と同一である。
【０１１７】
スキーム１により記載の方法に比べた、式Ｉの化合物のこの調製方法の利点は、塩基の保護の回避が可能であることに加えて、中間体の式ＩＩのＮ−（２−ヒドロキシプロピル）誘導体の調製に必須の酸性条件、および、最終のハロトリメチルシラン処理を除く任意の他の脱保護、がいらないということにある。従って、この代替の手順は、鋭敏な複素環塩基の結合している式Ｉの化合物の合成に適用され得る。
【０１１８】
両反応スキーム１および２に関して、本発明の化合物は、示されるような所望の複素環塩基Ｂのアルキル化により、あるいは、ある場合には、Ｂの前駆体のアルキル化により、調製され得る。従って、グアニン誘導体は、２−アミノ−６−クロロプリンのアルキル化、次いでＣ−Ｃｌ結合の酸加水分解によって最適に合成され得る。シトシン誘導体は、炭酸セシウムの存在下でのシトシンの直接アルキル化により、適度な収量で合成され得る；より高い収量は、シントンＸＩによる４−メトキシ−２−ピリミドンのアルキル化により形成される中間体の加アンモニア分解により得られる。
【０１１９】
複素環塩基での同様のその後の変更は、そのスキームの最終生成物、すなわち、本発明の主題である式Ｉの化合物を用いて行われ得る：アデニン、２，６−ジアミノプリンまたはグアニンの誘導体は、亜硝酸またはそのエステルで脱アミノ化することにより、対応するヒポキサンチン、２−ヒドロキシアデニンまたはキサンチンの誘導体に変換され得る；同様に、ウラシル誘導体は、シトシン誘導体に同様に転換され得る。式Ｉの化合物のさらなる変換は、核酸化学の常法により実現され得る：例えば、アデニン部分とクロロアセトアルデヒドとの反応は、Ｎ１，６−エテノ誘導体を与える；８−ブロモ誘導体を得るためのプリン塩基の臭素化；プリンおよびピリミジン化合物の両方におけるＮＨ−官能基のＮ−アルキル化など。これらその後の変換のどれも、式Ｉの化合物の側鎖またはホスホネート基でのいかなる変化にも関与しない。
【０１２０】
スキーム１および２の経路の一部である中間体化合物は、それ自身、新規化合物であり、従って、本発明の一部であることが認められる。
【０１２１】
スキーム１および２のプロセスを用いることの利点は、光学的に純粋な形として容易に入手可能である式Ｘの出発物質の利用にある。スキーム１およびスキーム２の両方において用いられるキラルなシントンＸを調製するための反応系列は、スキーム３に記載される。
スキーム３
【０１２２】
【化４２】
あらゆる非対照合成の極めて重要な工程は、光学的に純粋なキラルな出発物質の入手可能性に依存する。本発明に用いられる方法は、市販の（Ｍｅｒｃｋ）、式ＶＩＩＩの乳酸アルキルエステルのエナンチオマーを使用する。最初に、これらのエステルは、テトラヒドロピラニル基によってヒドロキシル官能基のところで保護される；この反応は、酸触媒の存在下、直接の添加により溶媒なしで行われる。式ＩＸのエステルは、真空下での分留により得られる。これらの中間体は、エーテル中で水素化リチウムアルミニウムにより、あるいは、エーテルまたは他の不活性溶媒中で水素化ビス（２−メトキシエトキシ）アルミニウムにより還元されて、式Ｘの化合物になる。
生物学的活性および使用
エナンチオマー的に分割された本発明の化合物は、インビトロおよびインビボの両方において、顕著な抗レトロウィルス活性を示す。これらのインビトロでの有効性は、ＭＴ４およびＣＥＭ細胞中のヒト免疫不全ウィルス１型（ＨＩＶ−１）および２型（ＨＩＶ−２）について、およびＣ３Ｈ／３Ｔ３細胞中のモロニィネズミ肉腫ウィルス（ＭＳＶ）について実証された。これらのインビボでの有効性は、ＭＳＶ感染したＮＭＲＩマウスにおいて証明された。ここで、この化合物は、非経口投与および経口投与のいずれの場合でも、腫瘍のイニシエーションの平均日数を著しく延ばし、そして平均生存日数を実質的に延長した。
【０１２３】
本発明の化合物は、プロトタイプ化合物（ＰＭＥＡ、ＰＭＥＡＤＡＰ、ＰＭＥＧ）および／またはＦＰＭＰ誘導体、例えば、ＦＰＭＰＡ、ＦＰＭＰ−ＤＡＰ）、および最も関連のある未分割のＰＭＰＧ＋ＰＭＰＡに比べていくつかの利点を有している：（ａ）これらの抗レトロウィルス活性は、明らかに、他の抗ウィルス活性と区別される（例えば、ヘルペスウィルスに対して）；（ｂ）これらの抗レトロウィルス活性は、細胞毒性によるものではない。従って、これらの化合物のインビトロでの治療指数は、プロトタイプ化合物の治療指数より非常に高く、そしていくつかの場合、＞２０００の値に達する。このような化合物は、理想的には、慢性疾患、例えば、ＡＩＤＳの長期治療に適し得る。
【０１２４】
本発明の主題を提示する試験化合物の構造は、ＡＩＤＳ患者の臨床試験に一般に用いられてきた化合物のいずれとも、全く無関係である。これにより、このような治療（例えば、ＡＺＴ、ＤＤＩ、ＤＤＣ、ＴＩＢＯ、ネビラピン（ｎｅｖｉｒａｐｉｎｅ）、ピリジノンなど）に対して耐性になったそれらのウィルス株に対して、これらの化合物の交差耐性が避けられる
これらの化合物の生物学的活性は、高度にエナンチオマー性特異的である。一般に、抗レトロウィルス活性の原因は、（Ｒ）−エナンチオマーである。グアニン系における（Ｓ）−エナンチオマーの活性は、実質的に増大した毒性を伴う。
【０１２５】
本発明の化合物は、レトロウィルス、例えば、ヒト免疫不全ウィルス（ＡＩＤＳ）、ヒトＴ細胞白血病ウィルス（ヘアリーセル白血病、急性Ｔ細胞白血病（ＨＴＬ））によって引き起こされる疾患の治療に適用され得る。これらの化合物の抗ウィルス作用の分子標的が、ウィルスにコードされる逆転写酵素であるので、これらはまた、抗ヘパドナ（ｈｅｐａｄｎａ）ウィルス活性（例えば、Ｂ型肝炎ウィルス）を有するべきである。
【０１２６】
本発明の化合物はまた、インビトロでの方法で有用な他の化合物の調製において、中間体としても有用である。例えば、ワトソン−クリック塩基対形成が可能な塩基を含有する化合物は、公知の方法によってジホスホリル化され、そしてこれまで通常、核酸配列決定に用いられていたジデオキシＮＴＰ類に対するアナログとして使用される。本発明の化合物は、ジデオキシＮＴＰ類と同様に、核酸鎖ターミネーターとして作用する。この特性に基づく他の用途は、当業者には明白である。
【０１２７】
本発明の化合物はまた、オリゴヌクレオチドまたは核酸のハイブリダイゼーションに基づく予備的方法または診断方法にも有用である。例えば、この化合物は、非酵素的合成法（例えば、Ｈ−ホスホネート化学またはホスホルアミダイト化学）を用いてオリゴヌクレオチド中に組み込まれるのに適したモノマーに転換される。次いで、このモノマーは、このような方法を用いるオリゴヌクレオチド合成において、３’末端塩基として用いられる。モノマーのＰＭＰ部分、モノマー中に存在する任意の改変された塩基、またはその両者は、抗体による認識および結合のために容易に利用可能である。この抗体は、次々に、（標的分析物の配列に対するモノマーでラベルされたプローブのハイブリダイゼーションを検出するために）ラベルされ、あるいはこの抗体は（プローブに結合した核酸の予備的分離のために）固定化される。この種の方法の例は、ＥＰ １４４，９１３；ＥＰ １４６，０３９；ＷＯ ８５／０２４１５；ＵＫ ２，１２５，９６４Ａにさらに記載されている；これらは、本発明のモノマーがワトソン−クリック塩基対形成可能であること、または本発明のモノマーが任意のポリメラーゼによって認識されることを必要としない。
【０１２８】
この化合物は、局所的または全身的に、すなわち、経口的、経直腸的、経膣内的、および非経口的（筋間、静脈内、皮下、および鼻内の経路により）に投与され得る。一般に、経口での適用は、非経口的に与えられた量に匹敵する治療効果を生じさせるためには、多量の活性物質を必要とする。
【０１２９】
ヒトレトロウィルス疾患の治療のための薬学的組成物は、少なくとも１種の式ＩＡまたはＩＢの化合物、またはそれらの薬学的に受容可能な塩を含有し、この化合物は、一般には、薬学的に受容可能な担体および非毒性の不活性アジュバントを組み合わせて、この組成物の重量に対して９５〜０．５重量％を含有する。他の治療剤もまた存在し得る。さらに、式ＩＡおよび／またはＩＢの化合物の混合物も、このような混合物の各成分が実質的にそのエナンチオマーを含まないならば、使用され得る。
【０１３０】
式Ｉの化合物を含有する薬学的組成物は、通常、錠剤、トローチ剤（ｌｏｚｅｎｇｅ）、カプセル、散剤、水性または油性懸濁液、シロップ、および水性溶液として調製される。この化合物は、全身投与、局所（ｔｏｐｉｃａｌ）投与、または局在性（ｌｏｃａｌｉｚｅｄ）投与を包含する種々の投与形態のために処方され得る。技術および処方は、一般に、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ， Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ．， Ｅａｓｔｏｎ， ＰＡ， 最新版に、見い出され得る。活性成分は、一般に、投与形態および投与剤型の性質に依存して、希釈剤または賦形剤のような担体と組み合わせられ、この担体は充填剤、増量剤、結合剤、湿潤剤、崩壊剤、界面活性剤、または潤滑剤を包含し得る。典型的な投与剤型は、錠剤、散剤、液体調製物（懸濁液、乳濁液、液剤など）、顆粒、カプセル、および坐剤、ならびにリポソーム調製物を包含する注射用液体調製物を包含する。
【０１３１】
全身投与に対しては、注射が好ましく、これには、経筋肉、静脈内、腹腔内、および皮下が包含される。注射に対しては、本発明の化合物は、液状溶液、好ましくは、ハンクス液またはリンゲル液のような生理学的に適合可能な緩衝液中に処方される。さらに、この化合物は、固形状に処方され得、そして使用の直前に再溶解または懸濁され得る。凍結乾燥体もまた包含される。系統的投与はまた、経粘膜または経皮的な手段によっても行われ得、あるいはこの化合物は、経口で投与され得る。経粘膜または経皮的投与に対しては、浸透されるべき障壁に適した浸透剤が処方物中に用いられる。このような浸透剤は、一般に、当該分野で公知であり、そして、例えば、経粘膜投与のための胆汁酸塩およびフシジン酸誘導体を包含する。さらに、浸透を促進するために、界面活性剤が用られ得る。経粘膜投与は、例えば、鼻内用スプレーまたは坐剤の使用により行われ得る。経口投与に対しては、この化合物は、カプセル、錠剤、およびトニックのような通常の経口投与剤型中に処方される。
【０１３２】
局所投与に対しては、本発明の化合物は、当該分野で一般に公知であるように、軟膏剤（ｏｉｎｔｍｅｎｔ）、軟膏剤（ｓａｌｖｅ）、ゲル剤、またはクリーム中に処方される。この化合物はまた、適切に処方される場合、眼の適応症（ｏｐｔａｌｍｉｃ ｏｒ ｏｃｕｌａｒ）に対しても投与され得る。
【０１３３】
本発明の活性化合物の有効量は、約０．０１〜５０ｍｇ／ｋｇ体重であることが期待され、１〜２０ｍｇ／ｋｇの範囲であることが好ましい。臨床的な適用における投与量は、患者の年齢、体重および症状、投与経路、病気の性質および重篤度を考慮して、専門的に調整されなければならない。一般的に、調製物は、１日当たり約１００ｍｇから約１０００ｍｇ、１日１回〜３回、経口経路により投与されることが期待される。
【０１３４】
本発明の化合物、その調製方法およびその生物学的活性は、以下の実施例の実験からさらに明らかとなる。これらの実施例は、単に例示として示されており、そして本発明をこの実施例の範囲に限定するものとは見なされない。全ての融点は、Ｋｏｆｌｅｒのブロックの使用により算定されており、未補正である。溶液は、特定されない場合は、４０℃／２ｋＰａでエバポレートされた。薄層クロマトグラフィーは、蛍光指示薬を含有するシリカプレートの使用によって行われた；ＵＶ光によって検出される。核磁気共鳴（ＮＭＲ）スペクトル特性は、基準化合物としてのテトラメチルシラン（ＴＭＳ）に対して百万分率（ｐｐｍ）で表される化学シフト（δ）を示す。シグナルの多重度は、一重線（ｓ）、二重線（ｄ）、二重の二重線（ｄｄ）、多重線（ｍ）、三重線（ｔ）、または四重線（ｑ）として報告される；他の略号には、ブロード（ｂｒ）なシグナル、芳香環プロトン（ａｒｏｍ．）、ヘキサジューテリオジメチルスルホキシドに対するｄ６−ＤＭＳＯ、酸化重水素に対するＤ２Ｏ、重水素化ナトリウムに対するＮａＯＤ、およびジューテリオクロロホルムに対するＣＤＣｌ３が包含される。他の略号は通常どおりである。
【０１３５】
以下の実施例は、例示を意図するものであり、本発明の限定を意図するものではない。
【実施例】
【０１３６】
Ｉ．式ＩＩの中間体の合成
Ａ．分割された式ＸＩの前駆体
実施例１
（Ｒ）−２−Ｏ−テトラヒドロピラニル−１−Ｏ−ｐ−トルエンスルホニルプロパン−１，２−ジオール．
イソブチル（Ｒ）−ラクテート（７３ｇ， ０．５モル，Ｍｅｒｃｋ）と３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン（７０ｇ， ０．８３モル，Ｍｅｒｃｋ）との混合物を、ジメチルホルムアミド（４ｍｌ）中で５Ｍ塩化水素で処理し、塩化カルシウムで保護された２５０ｍｌの丸底フラスコ中で室温にて一晩放置した。酸化銀（１５ｇ）を加え、混合物を２時間マグネチックスターラーを用いて撹拌し、次いで濾過した。この生成物を蒸留（１３Ｐａ，沸点９４〜９６℃）によって単離して、イソブチル２−Ｏ−テトラヒドロピラニル−（Ｒ）−ラクテート（１０２．５ｇ， ８９％）を無色のオイルとして得た。
【０１３７】
１リットルの三ツ口丸底フラスコをオーブンで乾燥し、そして塩化カルシウム保護管を有する還流冷却器、２５０ｍｌの滴下ロート、および磁気撹拌子を取り付けた。次いで、それに、水素化リチウムアルミニウム（１５．８ｇ， ０．４１５モル）とエーテル（５００ｍｌ， 五酸化リンから蒸留した）との懸濁液を入れ、そして氷水浴中に置いた。
【０１３８】
混合物が連続して穏やかな還流状態になるようなスピードで撹拌しながら、イソブチル２−Ｏ−テトラヒドロピラニル−（Ｒ）−ラクテートの溶液を（約３０分）滴下した。冷却浴を取り除き、混合物を外から加熱することによって、さらに３時間還流下で撹拌した。次いで、氷水浴によって再び冷却し、そして酢酸エチル（７５ｍｌ）を２０分間にわたって加え、次いで水（１５ｍｌ）および４Ｍ ＮａＯＨ（１５ｍｌ）を加えた。次いで、得られた混合物をＣｅｌｉｔｅ ５２１（Ｊａｎｓｓｅｎ）上で吸引濾過し、そしてクロロホルム（５００ｍｌ）で洗浄した。合わせた濾液を真空下に置き、残渣をエーテル（３００ｍｌ）中に再溶解させ、そして無水硫酸マグネシウム（５０ｇ）を加えた。室温で一晩放置した後、この混合物を吸引濾過し、エーテル（２００ｍｌ）で洗浄し、そしてその濾液の溶媒を真空下で除いた。残留したオイルを蒸留（１３Ｐａ，７５〜７６℃）することによって、２−Ｏ−テトラヒドロピラニル−（Ｒ）−プロパン−１，２−ジオール（６７．５ｇ， ０．４２２モル， ９５％）を無色のオイルとして得た。
【０１３９】
２−Ｏ−テトラヒドロピラニル−（Ｒ）−プロパン−１，２−ジオール（６７．２ｇ， ０．４２モル）のピリジン（６００ｍｌ）溶液を、磁気撹拌子および塩化カルシウム管で保護されているサイドチューブを有する５００ｍｌの滴下ロートを備えた２リットルの丸底フラスコに入れた。４−ジメチルアミノピリジン（２ｇ）を加え、このフラスコを氷水冷浴に入れ、そしてｐ−トルエンスルホニルクロライド（９１ｇ， ０．４７７モル）のピリジン（３００ｍｌ）溶液を撹拌しながら１時間にわたって加えた。この混合物を氷冷しながらさらに３時間撹拌し、そして一晩冷蔵装置内で４℃に保った。次いで、水（２０ｍｌ）をこの混合物に加え、そして１時間放置した後、ピリジン（約３００ｍｌ）を真空下で留去した。残渣を酢酸エチル（２．５リットル）で希釈し、そして水（３００ｍｌ）と共に振とうした。下側の水層を分離した後、有機層を水で洗浄（３００ｍｌで２度）し、真空下でエバポレートし、そして残渣を真空下でトルエンと共にエバポレートした（２５０ｍｌで４度）。残留したコハク色のオイルをシリカゲルクロマトグラフィー（クロロホルムで溶出）によって精製することにより、（Ｒ）−２−Ｏ−テトラヒドロピラニル−１−Ｏ−ｐ−トルエンスルホニルプロパン−１，２ジオール１２２ｇ（０．３９モル，９３％）を濃厚な無色のオイル（ＲＦ ０．６０（ＴＬＣ，クロロホルム））として得た。この生成物を、＋４℃で数カ月間、明らかな分解なしに保存した。
【０１４０】
【化４３】
実施例２
（Ｓ）−２−Ｏ−テトラヒドロピラニル−１−Ｏ−ｐ−トルエンスルホニルプロパン−１，２−ジオール．
エチルＬ−（−）ラクテート（５９ｇ， ０．５モル，Ｍｅｒｃｋ）と３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン（７０ｇ， ０．８３モル）との混合物を、実施例１に記載のようにして、正確に扱い、そして処理して、蒸留（２ｋＰａ， １０２−１０４℃）後、エチル２−Ｏ−テトラヒドロピラニル−（Ｓ）−ラクテート（９８ｇ， ０．４８５モル，９７％）を無色のオイルとして得た。
【０１４１】
この物質（９１ｇ， ０．４５モル）を水素化リチウムアルミニウムで実施例２に記載のように処理して、蒸留（１３Ｐａ， ７２−７５℃）後、２−Ｏ−テトラヒドロピラニル−（Ｓ）−プロパン−１，２−ジオール（６７．７ｇ， ０．４２３モル，９４％）を無色のオイルとして得た。
【０１４２】
実施例１に記載の条件にした後、２−Ｏ−テトラヒドロピラニル−（Ｓ）−プロパン−１，２−ジオール（６７．２ｇ，０．４２モル）を、（Ｓ）−２−Ｏ−テトラヒドロピラニル−１−Ｏ−ｐ−トルエンスルホニルプロパン−１，２−ジオールに変換した。シリカゲルクロマトグラフィー（クロロホルムで溶出）によって精製することにより、生成物（１２１ｇ， ０．３８６モル，９２％）を濃厚な無色のオイル（クロマトグラフィー的に、ＴＬＣ， ＲＦ ０．６０（クロロホルム）で均一）として得た。
【０１４３】
【化４４】
Ｂ．式ＩＩの化合物
実施例３
９−（Ｓ）−（２−ヒドロキシプロピル）アデニン
微粉末化したアデニン（１３．６ｇ； ０．１モル）と炭酸セシウム（１６．４ｇ； ０．０５モル）とのジメチルホルムアミド（４００ｍｌ， 五酸化リンから蒸留）中の懸濁液を、２５０ｍｌの滴下ロートおよび塩化カルシウム保護管を備えた１リットルの丸底フラスコ中に入れた。この混合物を１００℃に予熱し、そして（Ｓ）−（２−Ｏ−テトラヒドロピラニル−１−Ｏ−ｐ−トルエンスルホニル）プロパン−１，２−ジオール（３１．４ｇ， ０．１モル）のジメチルホルムアミド（２００ｍｌ）溶液をマグネチックスターラーで撹拌しながら３０分間にわたって滴下した。得られた透明の溶液をさらに６時間１００℃で加熱し、冷却し、そして溶媒を５０℃／１３Ｐａで留去した。残渣を沸騰したクロロホルムで抽出（３００ｍｌで３度）し、濾過し、そして真空下でその濾液の溶媒を除いた。残渣を、沸騰エタノールから結晶化することにより、９−（Ｓ）−（２−Ｏ−テトラヒドロピラニルオキシプロピル）アデニン（１３．２ｇ， ０．０４８モル，４８％）、ＲＦ ０．４０（ＴＬＣ，クロロホルム−メタノール，４：１）を得た。融点１７２℃。
【０１４４】
【化４５】
９−（Ｓ）−（２−Ｏ−テトラヒドロピラニルオキシプロピル）アデニン（１３ｇ， ０．０４７モル）の０．２５Ｍ硫酸（３００ｍｌ）溶液を、一晩室温で放置し、そして飽和水酸化バリウム水溶液でｐＨ７．０−７．１まで中和した（ｐＨメーター使用）。得られた懸濁液を８０℃まで昇温し、そして３０分間放置した後、Ｃｅｌｉｔｅ ５２１（Ｊａｎｓｓｅｎ）層を通して濾過し、沈澱物を沸騰水（５００ｍｌ）で洗浄した。合わせた濾液および洗浄液を真空下でエバポレートして、乾燥させ、その残渣をエタノールと共にエバポレート（２００ｍｌで２度）し、そして沸騰エタノール（エーテルを添加して濁った状態）から結晶化した。この生成物を濾過により回収して、９−（Ｓ）−（２−ヒドロキシプロピル）アデニン（７．７ｇ， ０．０４モル，８５％）を得た。融点２０２℃。
【０１４５】
【化４６】
実施例４
９−（Ｒ）−（２−ヒドロキシプロピル）アデニン．
アデニン（１３．６ｇ， ０．１モル）と（Ｒ）−（２−Ｏ−テトラヒドロピラニル−１−Ｏ−ｐ−トルエンスルホニルプロパン−１，２−ジオール（３１．４ｇ， ０．１モル）との縮合を、炭酸セシウム（１６．４ｇ， ０．０５モル）の存在下で、実施例３に記載のようにして行った。沸騰クロロホルムによる抽出の後、エタノール（エーテルを添加して濁った状態）から残渣を結晶化して、９−（Ｒ）−（２−Ｏ−テトラヒドロピラニルオキシプロピル）アデニン（１４．６ｇ， ０．０５３モル，５３％）を得た。融点１７１〜１７２℃。
【０１４６】
【化４７】
９−（Ｒ）−（２−テトラヒドロピラニルオキシプロピル）アデニン（１４．０ｇ， ０．０５モル）の０．２５Ｍ硫酸溶液を、一晩室温で放置し、そして実施例３に記載のように処理した。この生成物を単離することにより、９−（Ｒ）−（２−ヒドロキシプロピル）アデニン（８．１ｇ， ０．０４２モル，８４％）を得た。融点２０２℃。
【０１４７】
【化４８】
実施例５
９−（Ｒ）−（２−ヒドロキシプロピル）−２，６−ジアミノプリン
２，６−ジアミノプリン（１５ｇ， ０．１モル）と炭酸セシウム（１６．４ｇ， ０．０５モル）とのジメチルホルムアミド（２５０ｍｌ）懸濁液を、磁気撹拌子および塩化カルシウム保護管を備えた５００ｍｌ丸底フラスコに入れ、そして１００℃に予熱した。（Ｒ）−（２−Ｏ−テトラヒドロピラニル−１−Ｏ−ｐ−トルエンスルホニルプロパン−１，２−ジオール（３２．８ｇ， ０．１０４モル）を一度に加え、そしてこの混合物を１００℃で２０時間撹拌した。溶媒を５０℃／１３Ｐａでエバポレートし、そして残渣を沸騰クロロホルムで抽出した（３００ｍｌで３度）。濾液をシリカゲルカラム（５００ｍｌ）で分離して、生成物をクロロホルム−メタノール混合液（９５：５）で溶出し、酢酸エチル（エーテルを添加して濁った状態）から結晶化した後、９−（Ｒ）−（２−テトラヒドロピラニルオキシプロピル）−２，６−ジアミノプリン（１４．２ｇ， ０．０４８５モル， ４８．５％）を得た。融点１５０〜１５２℃。
【０１４８】
【化４９】
９−（Ｒ）−（２−テトラヒドロピラニルオキシプロピル）−２，６−ジアミノプリン（１１．７ｇ， ０．０４モル）の０．２５Ｍ硫酸（４００ｍｌ）溶液を一晩室温に放置し、アンモニア水で中和し、そして真空下で濃縮した。この溶液をＤｏｗｅｘ ５０Ｘ８のカラム（２５０ｍｌ， １００〜２００メッシュ，酸型）にかけ、そして溶出物のＵＶ吸収および導電率が初期値まで低下するまで、このカラムを水で洗浄した。この生成物を希釈した（１：１０）アンモニア水で溶出し、ＵＶ吸収を示す溶出液を集めて、そして真空下で溶媒を除いた。残渣をエタノールから結晶化することにより、９−（Ｒ）−（２−ヒドロキシプロピル）−２，６−ジアミノプリン（６．５ｇ， ０．０３１モル， ７７．５％）を得た。融点１９２℃。
【０１４９】
【化５０】
実施例６
９−（Ｓ）−（２−ヒドロキシプロピル）−２，６−ジアミノプリン
実施例５と同様にして、（Ｓ）−２−Ｏ−テトラヒドロピラニル−１−Ｏ−ｐ−トルエンスルホニルプロパン−１，２−ジオール（３４．５ｇ， ０．１１モル）を用いて、合成を行った。粗反応生成物を０．２５Ｍ硫酸（３００ｍｌ）に溶解し、そして一晩室温で放置した。この混合物をアンモニアによってアルカリ性にし、そして真空下でエバポレートしておよその容量とした。次いで、その１５０ｍｌをＤｏｗｅｘ ５０Ｘ８（酸型）のカラム（３００ｍｌ， １００〜２００メッシュ）にかけた。溶出物のＵＶ吸収が消失するまで、カラムを完全に洗浄した。希釈した（１：１０）アンモニアで引き続き溶出してＵＶ吸収を示す画分を得、真空下で溶媒を除き、そしてメタノールから結晶化することにより、粗９−（Ｓ）−（２−ヒドロキシプロピル）−２，６−ジアミノプリンを得た（含量、＞９５％； ９．２ｇ， ０．０４４モル，４４％）。これは次の合成工程に続けて用いた。［α］Ｄ＝＋４１．２°（ｃ＝０．５， ０．１Ｍ ＨＣｌ）。
【０１５０】
実施例７
９−（Ｒ）−（２−ヒドロキシプロピル）グアニン
２−アミノ−６−クロロプリン（１８．６ｇ， ０．１１モル，Ｍａｃｋ）と炭酸セシウム（１７．９ｇ， ０．０５５モル）とのジメチルホルムアミド（３５０ｍｌ）懸濁液を、塩化カルシウム保護管下で１００℃で撹拌し、そして（Ｒ）−（２−Ｏ−テトラヒドロピラニル−１−Ｏ−ｐ−トルエンスルホニルプロパン−１，２−ジオール（４２ｇ， ０．１３４モル）のジメチルホルムアミド（１００ｍｌ）溶液を３０分間にわたる間隔で滴下した。この混合物をさらに６時間１００℃で撹拌し、冷却し、そして５０℃／１３Ｐａでエバポレートした。残渣を沸騰クロロホルムで抽出（３００ｍｌで３度）し、そしてこの抽出液を真空下で濃縮した。この物質をクロロホルム中シリカゲル（５００ｍｌ）カラムにかけ、そして同じ溶媒で溶出した。関係あるＵＶ吸収画分をプールし、エバポレートし、そして真空下で乾燥した。９−（Ｒ）−（２−テトラヒドロピラニルオキシプロピル）−２−アミノ−６−クロロプリンを黄色の不定形の泡状物として得た（ＲＦ ０．６４（クロロホルム−メタノール、９５：５中でのＴＬＣ）。
【０１５１】
【化５１】
９−（Ｒ）−（２−テトラヒドロピラニルオキシプロピル）−２−アミノ−６−クロロプリン（１０ｇ， ０．０３２モル）の１Ｍ塩酸（２００ｍｌ）溶液を、１時間撹拌しながら還流し、冷却し、アンモニアでアルカリ性にし、そして真空下でエバポレートした。残渣を沸騰水から結晶化（活性炭で脱色）することにより、９−（Ｒ）−（２−ヒドロキシプロピル）グアニン（６．０ｇ， ０．０２９モル， ９１％）を得た。融点２５５℃。
【０１５２】
【化５２】
実施例８
９−（Ｓ）−（２−ヒドロキシプロピル）グアニン．
塩化カルシウム保護管を備えた１リットルの丸底フラスコ中の蒸留ジメチルホルムアミド（３００ｍｌ）中のミネラルオイル（Ｊａｎｓｓｅｎ）中の６０％ ＮａＨ分散液の４ｇ（０．１モル）のスラリーに、２−アミノ−６−クロロプリン（１７．５ｇ， ０．１モル，Ｍａｃｋ）を一度に加え、そしてこの混合物を１時間室温でマグネチックスターラーで撹拌した。次いで、（Ｓ）−（２−Ｏ−テトラヒドロピラニル−１−Ｏ−ｐ−トルエンスルホニルプロパン−１，２−ジオール（３４．５ｇ， ０．１１モル）を、一度に加え、この混合物を６０℃で３時間および８０℃で８時間撹拌した。次いで、溶媒を５０℃／１３Ｐａで除去し、そして残渣を沸騰クロロホルムで粉砕（３００ｍｌで２度）し、そして濾過した。この濾液をシリカゲルカラム（３００ｍｌ）でクロマトグラフすることにより、９−（Ｓ）−（２−Ｏ−テトラヒドロピラニルオキシプロピル）−２−アミノ−６−クロロプリン（１０．９ｇ， ０．０３５モル，３５％）を不定形の泡状物として得た。この物質を、２Ｍ塩酸（１００ｍｌ）とジオキサン（１００ｍｌ）との混合物中で１時間還流し、冷却し、アンモニア水で中和し、そして真空下でエバポレートした。この残渣を水から結晶化することにより（活性炭で脱色）、９−（Ｓ）−（２−ヒドロキシプロピル）グアニン（５．７ｇ， ０．０２７モル，７７％）を得た。融点２５６℃。
【０１５３】
【化５３】
実施例９
１−（Ｒ）−（２−ヒドロキシプロピル）シトシン
蒸留ジメチルホルムアミド（３００ｍｌ）中のシトシン（８．５ｇ， ７６ミリモル，Ｆｌｕｋａ）と、炭酸セシウム（１３ｇ， ４０ミリモル）と、（Ｒ）−２−Ｏ−テトラヒドロピラニル−１−Ｏ−ｐ−トルエンスルホニルプロパン−１，２−ジオール（２４ｇ， ７６ミリモル）との混合物を、１００℃で１２時間撹拌し、そして熱い状態で濾過した。この濾液の溶媒を高真空で除き、そして残渣を沸騰クロロホルムで粉砕（２００ｍｌで３度）し、そして濾過した。この濾液をシリカゲルカラムでクロマトグラフィーにかけることにより、１−（Ｒ）−（２−テトラヒドロピラニルオキシプロピル）シトシン（４．６ｇ，１８ミリモル，２３．５％）を得た（酢酸エチル−石油エーテル混合物から結晶化した）。融点２５９〜２６０℃。
【０１５４】
【化５４】
１−（Ｒ）−（２−テトラヒドロピラニルオキシプロピル）シトシン（４．０ｇ， １６ミリモル）の０．２５Ｍ硫酸（５０ｍｌ）溶液を一晩室温で放置し、そして飽和水酸化バリウム水溶液でｐＨ７．０〜７．１まで中和した。この懸濁液を８０℃に加温し、Ｃｅｌｉｔｅ ５２１（Ｊａｎｓｓｅｎ）層を通して濾過し、そして沸騰水（５００ｍｌ）でフィルターを洗浄した。この濾液を真空下で乾燥状態にし、そして残渣をエタノール（２００ｍｌ）で共蒸留（ｃｏｄｉｓｔｉｌｌｅｄ）した。この残渣をエタノール（エーテルを添加して濁った状態）から結晶化することにより、１−（Ｒ）−（２−ヒドロキシプロピル）シトシン（２．５ｇ， １５ミリモル， ９４％）を得た。融点２４６℃。
【０１５５】
【化５５】
実施例１０
１−（Ｒ）−（２−ヒドロキシプロピル）シトシン
蒸留ジメチルホルムアミド（３００ｍｌ）中の水素化ナトリウム（４ｇ， ０．１モル， ６０％懸濁液）のスラリーに、４−メトキシ−２−ピリミドン（１２．６ｇ， ０．１モル）を撹拌しながら加え、そしてこの混合物を水分を除いた状態（塩化カルシウム保護管）で１時間撹拌した。得られた透明の溶液を（Ｒ）−２−Ｏ−−テトラヒドロピラニル−１−Ｏ−ｐ−トルエンスルホニルプロパン−１，２−ジオール（３１．４ｇ， ０．１モル）で処理し、そしてこの反応混合物を撹拌しながら８時間８０℃で加熱した。次いで、溶媒を真空下で除去し、そして残渣を沸騰クロロホルムで粉砕（２００ｍｌで３度）し、そして濾過した。この濾液を、シリカクロマトグラフィーによって精製することにより、１−（Ｒ）−（２−Ｏ−テトラヒドロピラニルオキシプロピル）−４−メトキシ−２−ピリミドン（１６．９ｇ， ６３ミリモル， ６３％）を不定形の泡状物として得た。
【０１５６】
この生成物をアンモニアのメタノール溶液（５００ｍｌ， ０℃で飽和）と共に１１０℃で８時間スチール製のオートクレーブ中で加熱し、冷却し、そしてこの懸濁液を真空下でエバポレートした。残渣を０．２５Ｍ硫酸（３００ｍｌ）に溶解し、そしてこの溶液を７０℃で５時間加温した。混合物をアンモニア水で中和し、Ｃｅｌｉｔｅ ５２１（Ｊａｎｓｓｅｎ）層を通して濾過し、そして濾液を真空下で濃縮した。得られた溶液をＤｏｗｅｘ ５０Ｘ８のカラム（２５０ｍｌ， １００〜２００メッシュ（酸型））にかけ、そしてこのカラムを溶出物のＵＶ吸収が消失するまで水で溶出した。希釈した（１：１０）アンモニア水で引き続き溶出することにより、ＵＶ吸収を示す画分を得、これをプールし、そして真空下でエバポレートした。エタノールから結晶化することにより、１−（Ｒ）−（２−ヒドロキシプロピル）シトシン（７．８ｇ， ４６ミリモル， ７３％）を得、これは実施例９に従って調製した生成物と一致した。
【０１５７】
実施例１１
９−（Ｒ）−（２−ヒドロキシプロピル）−Ｎ６−ベンゾイルアデニン
９−（Ｒ）−（２−ヒドロキシプロピル）アデニン（５．８ｇ， ３０ミリモル）のピリジン（１６０ｍｌ）懸濁液を、クロロトリメチルシラン（２６ｍｌ）で処理し、そしてこの混合物を１時間撹拌した。次いで、塩化ベンゾイル（２０ｍｌ）を加えて、そしてこの混合物をさらに２時間撹拌した。反応混合物を氷水浴中に入れ、そして氷冷水（３０ｍｌ）、その後に濃アンモニア水（７０ｍｌ）を撹拌しながら１５分間かけて滴下した。混合物を真空下でエバポレートした。残渣をエタノールと共蒸留（１５０ｍｌで３度）し、そして沸騰水から結晶化した。この結晶生成物を回収し、エタノール（エーテルを添加して濁った状態）から再結晶することにより、９−（Ｒ）−（２−ヒドロキシプロピル）−Ｎ６−ベンゾイルアデニン（７．８ｇ， ２６ミリモル，８７％）得た。融点２２７℃。ＲＦ ０．４０（ＴＬＣ， クロロホルム−メタノール，４：１）。
【０１５８】
【化５６】
実施例１２
９−（Ｓ）−（２−ヒドロキシプロピル）−Ｎ６−ベンゾイルアデニン
９−（Ｓ）−（２−ヒドロキシプロピル）アデニン（６．８ｇ， ３５ミリモル）のピリジン（１６０ｍｌ）撹拌懸濁液に、クロロトリメチルシラン（２６ｍｌ）を加え、そしてこの混合物を１時間撹拌した。塩化ベンゾイル（２０ｍｌ）を一度に加え、混合物をさらに２時間撹拌し、そして氷水浴で冷却した。氷冷水（３０ｍｌ）および濃アンモニア水（７０ｍｌ）を１５分間隔にわたって加え、そして混合物をさらに３０分間０℃で撹拌した。溶媒を真空下でエバポレートし、そして残渣を水と共蒸留した。水から結晶化した後、生成物を回収し、そしてエタノールから再結晶することにより、９−（Ｓ）−（２−ヒドロキシプロピル）−Ｎ６−ベンゾイルアデニン（４．４ｇ， １５ミリモル，４３％）、融点２３０℃を得た。合わせた母液を真空下でエバポレートし、そして残渣をエタノール（１５０ｍｌ）と共に３０分間撹拌した。懸濁液を濾過し、そして無機塩の沈澱物をエタノール（５０ｍｌ）で洗浄し、そして捨てた。濾液を真空下で乾燥状態にし、そして残渣をクロロホルムで粉砕（１５０ｍｌで２度）し、そして濾過した。濾液をシリカゲルカラム（２００ｍｌ）でクロマトグラフィーにかけ、酢酸エチル（石油エーテルを添加して濁った状態）から結晶化した後、さらに生成物を得た。総収量、７．４ｇ（２５ミリモル，７１．５％）。
【０１５９】
【化５７】
実施例１３
９−（Ｓ）−（２−ヒドロキシプロピル）−Ｎ２−ベンゾイルグアニン
クロロトリメチルシラン（２０ｍｌ）を、９−（Ｒ）−（２−ヒドロキシプロピル）グアニン（５．０ｇ， ２４ミリモル）のピリジン（１３０ｍｌ）撹拌懸濁液に一度に加え、そして１時間撹拌した後、塩化ベンゾイル（１６ｍｌ）を一度に加えた。この混合物をさらに２時間撹拌し、氷水浴で冷却し、そして氷水（２４ｍｌ）次いで、濃アンモニア水（５６ｍｌ）を１０分間隔にわたって滴下した。この反応混合物をさらに３０分間撹拌し、そして真空下でエバポレートした。残渣を水（２００ｍｌ）と酢酸エチル（２００ｍｌ）との混合物で粉砕し、濾過し、水、エーテルで洗浄し、そして真空下で乾燥した。得られた９−（Ｓ）−（２−ヒドロキシプロピル）−Ｎ２−ベンゾイルグアニン（３．４ｇ， １１ミリモル， ４５％）はクロマトグラフィー的に純粋であった：ＲＦ ０．３３（ＴＬＣ， クロロホルム−メタノール，４：１）。融点２７８℃。
【０１６０】
【化５８】
実施例１４
９−（Ｒ）−（２−ヒドロキシプロピル）−Ｎ２−ベンゾイルグアニン
９−（Ｒ）−（２−ヒドロキシプロピル）グアニン（２．５ｇ， １２ミリモル）と、ピリジン（６５ｍｌ）と、クロロトリメチルシラン（１０ｍｌ）とからなる反応混合物を、栓付きフラスコ中で１時間室温にて撹拌し、そして塩化ベンゾイル（８ｍｌ）を一度に加えた。さらに２時間撹拌した後、この混合物を氷および氷水（１２ｍｌ）で冷却し、次いで、濃アンモニア水（２８ｍｌ）を５分間にわたって加えた。０℃で３０分後、溶媒を真空下でエバポレートし、そして残渣をエタノールと共蒸留した。８０％エタノール水溶液から結晶化することにより、９−（Ｒ）−（２−ヒドロキシプロピル）−Ｎ２−ベンゾイルグアニン（２．４ｇ， ７．６ミリモル，６３．５％）、融点２７６℃を得た。
【０１６１】
【化５９】
ＩＩ． 式ＸＶＩＩの中間体の合成
実施例１５
（Ｓ）−２−（ジ（２−プロピル）ホスホニルメトキシ）−１−（ｐ−トルエンスルホニルオキシ）プロパン
滴下ロートおよび塩化カルシウム保護管を備えた１リットルの丸底フラスコ中に入れた水素化ナトリウム（１７．２ｇ， オイル中６０％分散液，０．４３モル）のジメチルホルムアミド（４００ｍｌ）中の懸濁液に、撹拌し、そして氷で冷却しながら、３０分間にわたって（Ｓ）−２−Ｏ−テトラヒドロピラニル−１，２−プロパンジオール（６９．２ｇ， ０．４３モル）を滴下した。この懸濁液を０℃でさらに１時間撹拌し、そして臭化ベンジル（５１ｍｌ， ０．４３モル）を０℃で滴下した。混合物を０℃で４時間撹拌し、そして室温で４８時間放置した。メタノール性アンモニア（３０％溶液、２０ｍｌ）を加え、そして２時間放置後、溶媒を真空下で除去した。酢酸エチル（５００ｍｌ）を加え、そしてこの混合物を水（１００ｍｌで４度）で洗浄した。有機層をエバポレートし、そして７０％メタノール水溶液（４００ｍｌ）中の得られたオイルを５０ｍｌのＤｏｗｅｘ ５０Ｘ８（酸型）で４時間還流しながら撹拌した。温かい混合物を濾過し、メタノールで洗浄し、そしてこの濾液を真空下でエバポレートした。残留オイルをエーテル（２００ｍｌ）中にとり、水（５０ｍｌ）で洗浄し、乾燥し、そして真空下で蒸留した。収量、６０．８ｇ（８５％，沸点１００〜１０５℃／２０Ｐａ）（Ｓ）−１−Ｏ−ベンジル−１，２−プロパノール、［α］Ｄ＝−１３．６°（ｃ＝０．５， ＣＨＣｌ３）。
【０１６２】
１，２−ジクロルエタン（２００ｍｌ）中のこの物質（０．３７モル）を、乾燥塩化水素を０℃で２時間同時に導入しながら、パラホルムアルデヒド（２０ｇ）および塩化カルシウム（１０ｇ）と共に撹拌した。この混合物を真空下に置き、残渣をトルエン（５０ｍｌで３度）と共蒸留し、そしてトリ（２−プロピル）ホスファイト（５０ｇ）を加えた。この混合物を撹拌しながら１１０℃まで加熱し、そして発生した揮発物質を留去した。発熱反応がおさまった後、混合物を１５０℃まで加熱し、そして最後に揮発物を１４０℃／１ｋＰａで留去した。得られた物質をアルミナのカラム（２００ｍｌ）を通して濾過し、ベンゼン（０．５リットル）で溶出した。この溶出物をエバポレートし、そして残渣を真空下で蒸留して、（Ｓ）−１−ベンジルオキシ−２−［ジ（２−プロピル）ホスホニルメトキシ］プロパン（４４ｇ， ３５％， 沸点１２５〜１３０℃／１３Ｐａ）を得た。
【０１６３】
【化６０】
メタノール（４００ｍｌ）中のこの生成物（４４ｇ， ０．１２８モル）を、大気圧下で、１０％の活性炭担持パラジウム（１．５ｇ， Ｍｅｒｃｋ）および濃塩酸（０．７モル）と共に、水素化した。この混合物を濾過し、濾液をトリエチルアミンを加えることによりアルカリ性にし、そして真空下でエバポレートした。エーテル（２００ｍｌ）中の残渣を水（２０ｍｌで２度）で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、そして真空下でエバポレートすることにより、（Ｓ）−２−（ジ−（２−プロピル）ホスホニルメチル）プロパン−１，２−ジオール（２４．４ｇ， ７５％）を無色のオイルとして得た。
【０１６４】
ピリジン（２００ｍｌ）中のこの残渣（２４．４ｇ， ９６ミリモル）およびジメチルアミノピリジン（１ｇ）を、０℃で撹拌しながら塩化トシル（２２ｇ， ０．１１５モル）のピリジン（１００ｍｌ）溶液を滴下して処理し、そしてこの混合物を０℃で一晩置いた。水（１０ｍｌ）を加え、そしてこの溶媒を元の容量の約半量になるまで真空下でエバポレートした。酢酸エチル（３００ｍｌ）を加え、この混合物を、水、１Ｍ ＨＣｌ（酸性にする）、水、飽和炭酸水素ナトリウム、および水（１００ｍｌずつ）で連続的に洗浄した。最後にこの溶液を硫酸マグネシウムで乾燥し、そして真空下でエバポレートすることにより、粗生成物を得た。この粗生成物をシリカゲルカラムのクロマトグラフィー（クロロホルムによって溶出）によって精製した。（Ｓ）−２−［ジ（２−プロピル）ホスホニルメトキシ］−１−ｐ−トルエンスルホニルオキシプロパンが、濃厚な黄色のオイルとして得られた。これはさらなる調製物のために用いられた（２８ｇ， ６９ミリモル）。
【０１６５】
実施例１６
（Ｒ）−２−［ジ（２−プロピル）ホスホニルメトキシ］−１−ｐ−トルエンスルホニルオキシプロパン
実施例１５と本質的に同様にして、この合成を行ったが、（Ｒ）−２−Ｏ−テトラヒドロピラニル−１，２−プロパンジオール（４２ｇ， ０．２６２モル）を用いて開始した。１−Ｏ−ベンジル−（Ｒ）−プロパン−１，２−ジオールを、真空下で蒸留することによって得た（３３ｇ， ７６％，沸点９８〜１０２℃／Ｐａ）。［α］Ｄ＝−１２．２°（ｃ＝０．５， ＣＨＣｌ３）。クロロメチル化およびトリ（２−プロピル）ホスファイトとの反応により、粗リン酸ジエステル（３２ｇ）が得られた。これは１０％の活性炭担持パラジウム触媒（１ｇ）および塩酸（０．５ｍｌ）を有するメタノール中で水素化した。中間体を実施例１５に記載のように操作した後、（Ｒ）−２−［ジ（２−プロピル）ホスホニルメトキシ］−１−ｐ−トルエンスルホニルオキシプロパン（２４ｇ， ５９ミリモル）が得られた。
【０１６６】
ＩＩＩ． 式Ｉの生成物の合成
実施例１７
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）アデニン
９−（Ｒ）−（２−ヒドロキシプロピル）−Ｎ６−ベンゾイルアデニン（３ｇ， １０ミリモル）とジ（２−プロピル）ｐ−トルエンスルホニルオキシメチルホスホネート（４．２ｇ， １２ミリモル）との混合物を、ジメチルホルムアミド（２５ｍｌで２度）と４０℃／１３Ｐａで共蒸留した。この残渣をジメチルホルムアミド（５０ｍｌ）中に再溶解し、氷で冷却し、そして水素化ナトリウム（１．２ｇ， ３０ミリモル，オイル中６０％分散液）を一度に加えた。得られた混合物を塩化カルシウム保護管をつけて室温下で４８時間撹拌した。メタノール（１５０ｍｌ）中の０．１Ｍナトリウムメトキシド溶液を加え、そしてこの混合物を湿気を遮断して一晩置いた。次いで、Ｄｏｗｅｘ ５０Ｘ８（酸型）を加えて混合物を酸に反応させ、次いでトリエチルアミンを加えて懸濁液をアルカリに反応させた。濾過し、そしてメタノール（２００ｍｌ）で樹脂を洗浄した後、濾液を乾燥状態までエバポレートした（最終的に４０℃／１３Ｐａ）。水（２００ｍｌ）中の残渣を、エーテル（１００ｍｌで２度）で抽出し、そして水相を真空下で濃縮した（約１００ｍｌまで）。この溶液をＤｏｗｅｘ ５０Ｘ８カラム（２５０ｍｌ）上に付与し、そして溶出物のＵＶ吸収が初期レベルまで下がるまで、２０％メタノール水溶液で洗浄した。次いで、この生成物を希（１：１０）アンモニアで溶出し、適切なＵＶ吸収性画分をプールし、そして真空下でエバポレートした。残渣をエタノール（５０ｍｌで２度）と共蒸留し、そして一晩五酸化リンで１３Ｐａで乾燥することにより、粗ジ（２−プロピル）エステル（３ｇ）， ＲＦ＝０．５５（ＴＬＣ クロロホルム−メタノール， ４：１）が得られた。
【０１６７】
アセトニトリル（５０ｍｌ）およびブロモトリメチルシラン（５ｍｌ）を、この残渣に加え、そしてこの懸濁液を撹拌によって溶解した。栓付きフラスコ中に室温で一晩置いた後、この混合物を真空下でエバポレートし、そして水（１００ｍｌ）をこの残渣に加えた。この混合物をアンモニア水でアルカリ性にし、そして真空下でエバポレートした。水に溶解した残渣を、Ｄｏｗｅｘ ５０Ｘ８のカラム（２５０ｍｌ， 酸型）に付与した。これを溶出液のＵＶ吸収が下がるまで水で洗浄し、次いでアンモニア水（１：１０）溶液で溶出した。この生成物を含有する画分を真空下で乾燥状態までエバポレートし、そして残渣を濃アンモニアでｐＨ９〜９．５までアルカリ性にすることにより、水（５０ｍｌ）中に再溶解した。この溶液をＤｏｗｅｘ １Ｘ２のカラム（２５０ｍｌ，酢酸型）上に付与した。次いでこれを溶出物のＵＶ吸収が下がるまで０．０２Ｍ酢酸で洗浄した。次いで、酢酸濃度を直線的に上昇させることによって（２リットルで０．０２Ｍ〜１Ｍ）この溶出を持続させ；この生成物を１Ｍ酢酸で溶出した。関連する画分をプールし、真空下でエバポレートし、そして残渣を水（５０ｍｌで３度）と共蒸留した。沸騰水からの結晶化（３容量のエタノールを溶解後に加えた）により、９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）アデニン（１．３５ｇ， ４．７ミリモル，４７％）、融点２７９°を得た。
【０１６８】
【化６１】
実施例１８
９−（Ｓ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）アデニン
９−（Ｓ）−（２−ヒドロキシプロピル）−Ｎ６−ベンゾイルアデニン（３．５７ｇ， １２ミリモル）とジ（２−プロピル）ｐ−トルエンスルホニルオキシメチルホスホネート（５．２５ｇ， １５ミリモル）とのジメチルホルムアミド（５０ｍｌ）溶液を、−２０℃まで冷却し、そして水素化ナトリウム（１．４４ｇ， ３６ミリモル）をオイル中の６０％分散液として一度に加えた。この混合物を０℃で３時間および室温で４８時間湿気から保護しながら撹拌した。さらに、この反応混合物を実施例１７に記載のようにして処理した。Ｄｏｗｅｘ １Ｘ２のカラムでのクロマトグラフィーによって精製した後、生成物を水−エタノールから結晶化することにより、９−（Ｓ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）アデニン（１．９ｇ， ６．７ミリモル，５６％）が得られた。融点２７６〜２７８℃。
【０１６９】
【化６２】
実施例１９
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２，６−ジアミノプリン
９−（Ｒ）−（２−ヒドロキシプロピル）−２，６−ジアミノプリン（２．１ｇ，１０ミリモル）を、ジメチルホルムアミド（４０ｍｌ）とジメチルホルムアミドジメチルアセタール（２５ｍｌ）との混合物中で加温することによって溶解し、そしてこの溶液を栓付きフラスコ中に一晩置いた。混合物を４０℃／１３Ｐａでエバポレートし、そしてジメチルホルムアミド（２０ｍｌで２度）と共蒸留した。５０％のピリジン水溶液（５０ｍｌ）を残渣に加え、次いでドライアイスを加え、この混合物を４０℃／１３Ｐａでエバポレートし、ピリジン（２５ｍｌで４度）と共蒸留し、そしてジ（２−プロピル）ｐ−トルエンスルホニルオキシメチルホスホネート（４．２ｇ， １２ミリモル）を残渣に加えた。次いで、混合物をジメチルホルムアミド（２５ｍｌで２度）と共蒸留し、同じ溶媒（４０ｍｌ）中に再溶解し、そして−１０℃まで冷却した。水素化ナトリウムをオイル中の６０％懸濁液として一度に加え、そしてこの混合物を０℃で３時間および室温で４８時間、湿気から保護した状態で撹拌した。酢酸（１．８ｍｌ， ３０ミリモル）を加え、この混合物を４０℃／１３Ｐａで乾燥状態までエバポレートした。この残渣を希釈した（１：１）アンモニア水に溶解し、（１００ｍｌ）、一晩置き、そして真空下で乾燥状態までエバポレートした。残渣を実施例１５に記載のように、Ｄｏｗｅｘ ５０Ｘ８のカラム（２００ｍｌ）上で脱イオン化し、そしてこのアンモニア溶出物を１３Ｐａで一晩、五酸化リンで乾燥した。
【０１７０】
アセトニトリル（３０ｍｌ）およびブロモトリメチルシラン（３ｍｌ）を加え、そしてこの混合物を栓付きフラスコ中で穏やかに振とうすることによってホモジナイズした。この溶液を一晩置き、そして真空下でエバポレートした。残渣を水（１００ｍｌ）に溶解し、そして３０分間放置後、この溶液をアンモニアによってアルカリ性にし、そしてエバポレートした。残渣を実施例１７に記載のように、Ｄｏｗｅｘ ５０Ｘ８カラム（２００ｍｌ， 酸型）上で脱イオン化した。アンモニア塩の残渣を水（５０ｍｌ）に溶解し、アンモニアを加えることによってｐＨ９〜９．５とし、そしてこの溶液をＳｅｐｈａｄｅｘ Ａ−２５のカラム（２００ｍｌ）上に炭酸水素塩型で付与し、０．０２Ｍ炭酸水素トリエチルアンモニウムによって平衡化した。このカラムを、まずＵＶ吸収が下がるまで平衡化緩衝液によって、次いで直線的なグラジエントの炭酸水素トリエチルアンモニウム（ｐＨ７．５）（０．０２Ｍおよび０．３Ｍ緩衝液、各１リットルから形成された）によって溶出した。この生成物を０．１０〜０．１５Ｍ濃度で溶出し、関連の画分をプールし、真空下でエバポレートし、そして残渣をメタノール（５０ｍｌで３度）と共にエバポレートした。水（２５ｍｌ）に溶解した残渣をＤｏｗｅｘ １Ｘ２のカラム（５０ｍｌ）（アセテート）上に付与し、まず、ＵＶ吸収が消失するまで水で洗浄した。樹脂を３００ｍｌのビーカーに移し、そして１Ｍ酢酸（２００ｍｌ）と共に撹拌した。懸濁液を濾過し、そして樹脂を沸騰水（１リットル）で洗浄した。合わせた濾液を真空下でエバポレートし、そして残渣を水（５０ｍｌで３度）と共蒸留した。残渣を、沸騰水（１００ｍｌ）に溶解し、熱いうちに濾過し、そしてエタノール（１５０ｍｌ）をこの濾液に加えた。氷冷により結晶化した生成物を、濾過により集め、エタノール、エーテルで洗浄し、そして真空下で乾燥した。９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２，６−ジアミノプリン（１．４ｇ， ４．７ミリモル， ４７％）が、遊離の酸（融点２８７℃）として得られた。
【０１７１】
【化６３】
実施例２０
９−（Ｓ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２，６−ジアミノプリン
この化合物を、９−（Ｓ）−（２−ヒドロキシプロピル）−２，６−ジアミノプリンから、本質的にその（Ｒ）−エナンチオマーについての実施例１９に記載のように、調製した。水−エタノールからの遊離酸として結晶化された９−（Ｓ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２，６−ジアミノプリンの収量は、３３％（１．０ｇ， ３．３ミリモル）に達した。融点２７５〜２７８℃。
【０１７２】
【化６４】
実施例２１
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）グアニン
９−（Ｒ）−（２−ヒドロキシプロピル）−Ｎ２−ベンゾイルグアニン（２．５ｇ， ７ミリモル）とジ（２−プロピル）ｐ−トルエンスルホニルオキシメチルホスホネート（２．９ｇ， ８．４ミリモル）との混合物を、ジメチルホルムアミド（２５ｍｌで２度）と４０℃／１３Ｐａで共蒸留し、そして残渣をジメチルホルムアミド（３０ｍｌ）で再溶解した。オイル中の６０％分散液中の水素化ナトリウム（０．８４ｇ， ２１ミリモル）を、一度に加え、そしてこの混合物を室温で湿気を遮断して２４時間撹拌した。メタノール（１００ｍｌ）をこの混合物に加え、次いで、一晩置いて、Ｄｏｗｅｘ ５０Ｘ８（酸型）で中和し、そして濾過した。濾液を高圧で乾燥状態までエバポレートし、そして水（１５０ｍｌ）中の残渣をエーテル（５０ｍｌで２度）で抽出した。この水溶液を真空下で約５０ｍｌまで濃縮し、そしてＤｏｗｅｘ ５０Ｘ８のカラム（１５０ｍｌ）（酸型）上に付与した。これをまず、ＵＶ吸収が下がるまで水で、次いで希釈した（１：１０）アンモニアで洗浄した。このアンモニア画分をエバポレートし、残渣をエタノール（５０ｍｌで２度）と共蒸留し、そして最後に一晩、１３Ｐａで五酸化リンで乾燥した。
【０１７３】
アセトニトリル（４０ｍｌ）およびブロモトリメチルシラン（４ｍｌ）を残渣に加え、そして栓付きフラスコ中で撹拌することによってこの混合物を溶解した。一晩室温で放置後、この混合物を真空下でエバポレートし、そして残渣を水（１００ｍｌ）中に溶解した。３０分後、溶液をアンモニアでアルカリ性にし、そしてエバポレートした。Ｄｏｗｅｘ １Ｘ２での脱イオン化および精製を、本質的に、実施例１７に記載のように行った。最終的な精製された遊離酸型の９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）グアニンを、エーテルを含むエタノールから沈澱させることにより、融点２８６℃を有する物質０．９０ｇ（３ミリモル， ４３％）が得られた。
【０１７４】
【化６５】
実施例２２
９−（Ｓ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）グアニン
９−（Ｓ）−（２−ヒドロキシプロピル）グアニン（１．５７ｇ， ５ミリモル）とジ（２−プロピル）ｐ−トルエンスルホニルオキシメチルホスホネート（２．１ｇ， ６ミリモル）との混合物を、ジメチルホルムアミド（２０ｍｌで２度）と４０℃／１３Ｐａで共蒸留し、そして残渣をジメチルホルムアミド（２０ｍｌ）に再溶解した。水素化ナトリウム（０．６ｇ， １５ミリモル）をオイル中の６０％分散液として一度に加え、そしてこの混合物を３日間室温で湿気を遮断して撹拌した。メタノール（３０ｍｌ）を加え、そして溶液を一晩置いた。Ｄｏｗｅｘ ５０Ｘ８（酸型）での中和、および、濾過の後、濾液を真空下で乾燥状態までエバポレートし、そして実施例１７に記載のように残渣を脱イオン化した。粗ジエステルのアンモニア溶出物を、五酸化リンで１３Ｐａで乾燥した。アセトニトリル（３０ｍｌ）およびブロモトリメチルシラン（３ｍｌ）を加え、そしてこの混合物を撹拌することによって溶解した。室温で一晩置いた後、実施例１７に記載のように反応混合物を処理した。９−（Ｓ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）グアニンが、その（Ｒ）−エナンチオマー（実施例２１）についての記載と同様に、遊離酸として４３％収率（０．６５ｇ， ２．１５ミリモル）で単離された。融点２８７℃。
【０１７５】
【化６６】
実施例２３
１−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）シトシン
１−（Ｒ）−（２−ヒドロキシプロピル）シトシン（１．７ｇ， １０ミルモル）と、ジメチルホルムアミド（４０ｍｌ）と、ジメチルホルムアミドジメチルアセタール（１５ｍｌ）との混合物を、一晩撹拌し、そして４０℃／１３Ｐａでエバポレートした。５０％のピリジン水溶液（２０ｍｌ）および十分な量のドライアイスを加えて、１５分間過剰量を保った。この混合物を再びエバポレートし、そして４０°／１３Ｐａにてピリジン（２５ｍｌで３度）と共蒸留した。ジ−（２−プロピル）ｐ−トルエンスルホニルオキシホスホネート（４．２ｇ， １２ミリモル）を加え、そしてこの混合物を同様の条件下でジメチルホルムアミド（２５ｍｌで２度）と共蒸留した。ジメチルホルムアミド（４０ｍｌ）中の残渣を水素化ナトリウム（７２０ｍｇ， ３０ミリモル）と共に−１０℃で処理し、そしてこの混合物を湿気を遮断して室温で４８時間撹拌した。０．１Ｍのナトリウムメトキシド（メタノール（１００ｍｌ）中）を加え、そして一晩置いた後、この混合物をＤｏｗｅｘ ５０Ｘ８（酸型）で中和した。懸濁液を濾過し、真空下で乾燥状態までエバポレートし、そして残渣をＤｏｗｅｘ ５０Ｘ８（酸型、１５０ｍｌ）のカラム上で脱イオン化した 。アンモニア溶出物をエバポレートし、五酸化リンで真空下で乾燥し、そして残渣をブロモトリメチルシラン（３ｍｌ）およびアセトニトリル（３０ｍｌ）で一晩処理した。真空下でエバポレートした後、残渣を水（５０ｍｌ）で処理し、アンモニアでアルカリ性にし、そして真空下でエバポレートした。残渣をＤｏｗｅｘ ５０Ｘ８（上記参照）のカラム上で脱イオン化し、そして粗製の物質をＤｏｗｅｘ １Ｘ２（アセテート）カラム（１００ｍｌ）の陰イオン交換クロマトグラフィーによって、直線的なグラジエントの酢酸（１リットルの水および１リットルの０．３Ｍ酢酸からなる）によって精製した。この生成物画分をエバポレートし、水（３０ｍｌで３度）と共蒸留し、そして１−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）シトシン（０．９０ｇ， １９％）を水−エタノールから結晶化することにより得た。融点２６１℃。
【０１７６】
【化６７】
実施例２４
９−（Ｓ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）アデニン
アデニン（１．６２ｇ， １２ミリモル）と炭酸セシウム（２．１ｇ， ６．５ミリモル）とのジメチルホルムアミド中の混合物を、１００℃で撹拌し、そして（Ｓ）−２−［（ジ（２−プロピル）ホスホニルメトキシ］−１−トルエンスルホニルオキシプロパン（４．１ｇ， １０ミリモル）のジメチルホルムアミド（１０ｍｌ）溶液を一度に加えた。この混合物を湿気を遮断して撹拌しながら８時間１１０℃で加熱し、そして真空下でエバポレートした。この残渣を沸騰クロロホルム（５０ｍｌで３度）で粉砕し、濾過し、そして真空下でエバポレートした。この粗製の物質をシリカゲルクロマトグラフィー（１５０ｍｌ）によって精製することにより、ジ−（２−プロピル）（Ｓ）−９−（２−ホスホノメトキシプロピル）アデニンが得られた。これはエーテルから結晶化し（１．７ｇ， ４６％）、融点９７〜９８℃であった。
【０１７７】
【化６８】
アセトニトリル（２５ｍｌ）中のこの生成物（１．４ｇ， ３．９ミリモル）をブロモトリメチルシラン（２．５ｍｌ）で一晩室温で処理した。この混合物を真空下に置き、そしてこの生成物を脱塩し、そして実施例１７に記載のように、Ｄｏｗｅｘ １Ｘ２カラム（１００ｍｌ）のクロマトグラフィーで精製した。収率７６％，融点２７７〜２７８℃。［α］Ｄ＝＋２１．７。
【０１７８】
実施例２５
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）アデニン
実施例２２に記載のように、１２ミリモルのアデニンおよび１０ミリモルの（Ｒ）−２−［（ジ（２−プロピル）ホスホニルメトキシ］−１−トルエンスルホニルオキシプロパンを用いて、反応させた。ジ（２−プロピル）（Ｒ）−９−（２−ホスホノメトキシプロピル）アデニン（融点９７℃）が、シリカゲルのクロマトグラフィーによって得られ、そしてエーテルから結晶化された（２．８ｇ， ７５．５％）。
【０１７９】
【化６９】
この生成物（１．８ｇ， ４．９ミリモル）とブロモトリメチルシラン（３ｍｌ）およびアセトニトリル（３０ｍｌ）とを、実施例２２に記載のように反応させた。収率、８０％の９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）アデニン。［α］Ｄ＝２１．５°、融点２７９℃。
【０１８０】
実施例２６
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノプリン
水素化ナトリウム（１．４ｇ， ６０％分散液， ３５ミリモル）を、撹拌した２−アミノ−６−クロロプリン（５．９４ｇ， ３５ミリモル）のジメチルホルムアミド（６０ｍｌ）溶液に加え、そして１時間室温で撹拌後、ジメチルホルムアミド（２０リットル）中の（Ｒ）−２−［ジ（２−プロピル）ホスホニルメトキシ］−１−ｐ−トルエンスルホニルオキシプロパン（１２．２ｇ， ３０ミリモル）を一度に加えた。この混合物を８０℃で１０時間撹拌し、そして真空下でエバポレートした。残渣を沸騰クロロホルム（３００ｍｌ）で抽出し、濾過し、そしてこの濾液を真空下でエバポレートした。この残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム−メタノール混合物、９５：５で溶出）にかけることにより、ジ（２−プロピル）９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−クロロプリン（７．５ｇ， ５３％）が濃厚なオイルとして得られた（ＲＦ ０．５５（クロロホルム−メタノール、９：１におけるシリカゲルでのＴＬＣ））。
【０１８１】
２００ｍｌメタノールおよび０．５ｍｌ濃塩酸中のこのジエステル（２．５ｇ， ６．２ミリモル）の溶液を、室温で一晩、１０％ Ｐｄ／Ｃ触媒（１ｇ）で水素化し、この混合物を濾過し、濾液をトリエチルアミンでアルカリ性にし、そして真空下でエバポレートした。この残渣を実施例２４に記載のように、Ｄｏｗｅｘ ５０ ｘ ８（酸型）（１００ｍｌ）で脱イオン化し、そしてアンモニア溶出物をエバポレートし、そして真空下で五酸化リンで乾燥した。アセトニトリル（２５ｍｌ）およびブロモトリメチルシラン（２．５ｍｌ）を加え、そしてこの溶液を室温で一晩置いた。この混合物を乾燥状態までエバポレートし、そして残渣を水（２５ｍｌ）中に取り出した。３０分後、この溶液をアンモニアでアルカリ性にし、そしてエバポレートした。この残渣をＤｏｗｅｘ １ ｘ ２（アセテート）（１５０ｍｌ）で直線的なグラジエントの酢酸（０．７５リットルの水、０．７５リットルの０．５Ｍ酢酸）を用いて脱イオン化することによって、生成物が得られた。これを水−エタノール（１：１）から結晶化することによって、プールされた画分から単離した。収量、０．６２ｇ（３５．５％）の９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノプリン、融点１５６℃。
【０１８２】
【化７０】
実施例２７
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−チオプリン
ジ（２−プロピル）−９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−クロロプリン（２．５ｇ、６．２ミリモル）溶液（実施例２６に従って調製）、チオ尿素（２．０ｇ）および無水エタノール（１００ｍｌ）を還流しながら１時間撹拌し、トリエチルアミンでアルカリ性にし、そしてエバポレートした。残渣をクロロホルム（２×１００ｍｌ）で抽出し、濾過し、そして濾液を乾燥し、そして真空下でエバポレートした。残渣（ＲＦ ０．４０、シリカゲルでのＴＬＣ、クロロホルム−メタノール、４：１）を五酸化リンで一晩乾燥し、そしてアセトニトリル（３０ｍｌ）およびブロモトリメチルシラン（３ｍｌ）で処理した。室温で一晩置いた後、混合物を乾燥状態までエバポレートし、水中（５０ｍｌ）に取った。３０分後、アンモニアでアルカリ性にし、真空でエバポレートし、残渣をＤｏｗｅｘ ５０で脱イオン化した（実施例２５を参照）。アンモニア溶出物を真空下に置き、Ｄｏｗｅｘ １×２（アセテート）のカラム（１５０ｍｌ）にかけ、まず水で、そして１Ｍの酢酸で（各５００ｍｌ）洗浄した。これらの溶出物を捨て、樹脂を２Ｍのギ酸（５００ｍｌ）と共に撹拌し、濾過し、そして沸騰水（合計で１リットル）で洗浄した。濾液を乾燥状態までエバポレートし、残渣を水（５０ｍｌで３回）と共蒸留し、そして水から結晶化した（溶解後、等容量のエタノールを添加）。収量、１．０ｇ（５０％） ９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−チオプリン、融点１８８℃（分解）。
【０１８３】
【化７１】
実施例２８
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−アジドプリン
ジ（２−プロピル） ９−（Ｒ）−（２− ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−クロロプリン （２．５ｇ， ６．２ミリモル）（実施例２６に従って調製）およびアジ化リチウム（１．０ｇ）のジメチルホルムアミド（４０ｍｌ）溶液を、１００℃で４時間、湿気を遮断して撹拌し、セライト（Ｃｅｌｉｔｅ）上で濾過し、ジメチルホルムアミド（２０ｍｌ）で洗浄し、そして濾液を真空下でエバポレートした。残渣（ＲＦ ０．３０、シリカゲルでのＴＬＣ、クロロホルム−メタノール、９：１）を五酸化リンで一晩乾燥し、そしてアセトニトリル（２０ｍｌ）およびブロモトリメチルシラン（２ ｍｌ） で処理した。室温で一晩置いた後、混合物を乾燥状態までエバポレートしそして水（５０ｍｌ）中に置いた。３０分後、アンモニアでアルカリ性にし、真空下でエバポレートし、そして残渣をＤｏｗｅｘ ５０（酸型）カラム（１００ｍｌ）にかけた。水で洗浄することにより、生成物のＵＶ吸収ピークを保持しながら溶出した。これを真空下でエバポレートし、そして残渣を水から結晶化した（溶解後、等量のエタノールを添加）。収量、０．９５ｇ（４７％）、 ９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−アジドプリン、３００℃まで溶融せず。
【０１８４】
【化７２】
実施例２９
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２，６−ジアミノプリン
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−アジドプリン（０．３０ｇ、実施例２７に従って調製）の、塩酸（０．５ｍｌ）含有５０％水性メタノール（２００ｍｌ）を、室温で一晩、１０％Ｐｄ／Ｃ（０．５ｇ）上で水素化した。混合物を濾過し、水で洗浄し、濾液をアンモニアでアルカリ性にし、そして真空下でエバポレートした。残渣をＤｏｗｅｘ ５０×８（５０ｍｌ）のカラムで脱イオン化し（実施例２５を参照）、そしてアンモニア溶出物を乾燥状態までエバポレートした。水中の残渣（ｐＨを９に調整）をＤｏｗｅｘ １×２（アセテート）のカラムにかけ、まず水で洗浄して塩を除去し、次いで生成物を１Ｍの酢酸で溶出した。生成物を含有する画分をプールし、乾燥状態までエバポレートし、そして水（２０ｍｌで３回）と共蒸留した。残渣を水から結晶化し（濁りを生ずるまでエタノールを添加した）、実施例１９に従った調製と同様にして、９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２，６−ジアミノプリン（１２０ｍｇ）を得た。
【０１８５】
実施例３０
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−３−デアザアデニン
３−デアザアデニン（１．４５ｇ、１０．８ミリモル）、炭酸セシウム（１．７５ｇ、５．４ミリモル）、およびジメチルホルムアミド（２５ｍｌ）を１００℃で１時間撹拌し、そして（Ｒ）−２−［ジ（２−プロピル）ホスホニルメトキシ］−１−ｐ−トルエンスルホニルオキシプロパン（３．６７ｇ、９ミリモル）のジメチルホルムアミド（１０ｍｌ）溶液を一度に加えた。次いで、混合物を１１０℃で２４時間、湿気を遮断して加熱し、そして乾燥した。残渣を沸騰クロロホルム（合計３００ｍｌ）で抽出し、濾過し、そして濾液をエバポレートした。残渣をクロロホルム中のシリカゲル（３００ｍｌ）のカラムでクロマトグラフし、酢酸エチル−石油エーテルから関連する画分を結晶化した後、ジ（２−プロピル） ９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−３−デアザアデニンを、１．０７ｇ（３２．２％）の収量で得た。（融点１２２℃）。
【０１８６】
【化７３】
このジエステル（１．０ｇ， ２．７ミリモル）をアセトニトリル（２５ｍｌ）およびブロモトリメチルシラン（２．５ｍｌ）で一晩処理した。次いで、実施例２７に記載されるように混合物を処理し、脱イオン化し、そしてＤｏｗｅｘ １×２でクロマトグラフした後、９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−３−デアザアデニンを７８％の収率で得た（３００℃まで融解せず）。
【０１８７】
【化７４】
実施例３１
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−８−アザアデニンおよび８−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−８−アザアデニン
８−アザアデニン（１．４５ｇ， １０．８ミリモル）、炭酸セシウム（１．７５ｇ、５．４ミリモル）、およびジメチルホルムアミド（２５ｍｌ）の混合物を１００℃まで予備加熱し、そして （Ｒ）−２−［ジ（２−プロピル）ホスホニルメトキシ］−１−ｐ−トルエンスルホニルオキシプロパン（３．６７ｇ， ９ミリモル）のジメチルホルムアミド（１０ｍｌ）溶液を一度に加えた。次いで、混合物を１１０℃で６時間、湿気を遮断して加熱し、そして乾燥した。残渣を沸騰クロロホルム（合計３００ｍｌ）で抽出し、濾過し、そして濾液をエバポレートした。残渣をシリカゲル（３００ｍｌ）のカラムでクロマトグラフした。５％メタノールを含有するクロロホルムでの溶出により、濃厚なオイルとして、ジ（２−プロピル） ９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−８−アザアデニンを０．９０ｇ（３７％）の収量で得た。
【０１８８】
【化７５】
同様の溶媒でのさらなる溶出により、ジ（２−プロピル）８−（Ｒ）−２−ホスホノメトキシプロピル）−８−アザアデニンを、半固体状物質として、０．７５ｇ（２２％）の収量で得た。
【０１８９】
【化７６】
それぞれの画分を別々に、アセトニトリル（２５ ｍｌ）およびブロモトリメチルシラン（２．５ｍｌ）で一晩処理し、そして混合物を実施例２７に記載されるように処理した。Ｄｏｗｅｘ １×２ カラム（５０ｍｌ）のクロマトグラフィーの２Ｍの酢酸による溶出により、９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−８−アザアデニンが生じた。収率（水−エタノールからの結晶化後）７９％。
【０１９０】
【化７７】
８−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−８−アザアデニンを、同様に１Ｍ酢酸を用いた溶出により得た。収率、７２％。
【０１９１】
【化７８】
実施例３２
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）ヒポキサンチン
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）アデニン（４００ｍｇ、 １．４ミリモル）および亜硝酸ナトリウム（１．４ｇ， ２０ミリモル）の水（４０ｍｌ）溶液を氷浴で冷却し、そして濃塩酸（２ｍｌ）を加えた。混合物をアルゴン雰囲気下、０℃で３時間、次いで室温で一晩撹拌した。混合物を、Ｄｏｗｅｘ ５０×８（酸型）のカラム（１００ ｍｌ）にかけ、そしてカラムを水で溶出した。生成物を保持しながら溶出した；関連する画分を真空下でエバポレートし、残渣をエタノール（２×５０ｍｌ）と共蒸留し、そして結晶状残渣をエーテルと共に濾過した。収量、２５０ ｍｇ（６２％） ９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）ヒポキサンチン、
【０１９２】
【化７９】
実施例３３
９−（Ｓ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）ヒポキサンチン
９−（Ｓ）−ホスホノメトキシプロピル）アデニン（４００ｍｇ、１．４ミリモル）および亜硝酸ナトリウム（１．４ｇ、 ２０ミリモル）の水（４０ｍｌ）溶液を氷浴で冷却し、そして濃塩酸（２ｍｌ）を加えた。実施例３１に記載されるようにさらに反応させた。収率、６６％、９−（Ｓ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）ヒポキサンチン収量、６６％。
【０１９３】
【化８０】
実施例３４
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−ジメチルアミノプリン
ジ（２−プロピル） ９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−クロロプリン（０．５０ｇ、実施例２６に従って調製）の、２０％ジメチルアミンのメタノール溶液を、１１０℃で２０時間、耐圧容器内で加熱し、そして溶液を真空下でエバポレートする。５０％水性メタノール（２０ｍｌ）中の残渣を、２０％水性メタノール中のＤｏｗｅｘ ５０×８ （Ｈ＋型）のカラム（５０ｍｌ）にかけ、そしてＵＶ吸収が最初の値に低下するまで、カラムを同じ溶出液で洗浄する。 次いで、カラムを２０％水性メタノールの２．５％アンモニア溶液で洗浄し、そしてＵＶ吸収溶出物を乾燥するために取り出し、エタノール（各２５ｍｌ）と２回共蒸留し、そして１３Ｐａ下で五酸化リン上で乾燥する。得られた生成物をアセトニトリル（３０ｍｌ）およびブロモトリメチルシラン（３ｍｌ）で室温で一晩処理し、そして溶液を真空下でエバポレートする。水（５０ｍｌ）を加え、混合物を濃アンモニア水を加えてアルカリ性にし、そして溶液をエバポレートする。さらなる処理および精製は、本質的に、実施例１７に記載されるように行われる。収量、０．４０ｇ （９５％） ９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−ジメチルアミノプリン、融点１５４〜１５６℃、
【０１９４】
【化８１】
実施例３５
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−ジメチルアミノプリン
ジ（２−プロピル） ９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−クロロプリン（０．５０ｇ、実施例２６に従って調製）とジエチルアミン（２ ｍｌ）のメタノール（２０ｍｌ）の混合物を、加圧容器中で、１１０℃で２０時間加熱し、そして溶液を真空下でエバポレートする。５０％水性メタノール（２０ｍｌ）中の残渣を、２０％水性メタノール中のＤｏｗｅｘ ５０×８（Ｈ＋型）のカラム（５０ｍｌ）にかけ、そしてＵＶ吸収が最初の値に低下するまで、カラムを同じ溶出液で洗浄する。次いで、カラムを、２０％水性メタノールの２．５％アンモニア溶液で洗浄し、そしてＵＶ吸収溶出物を乾燥するために取り出し、エタノール（各 ２５ｍｌ）と２回共蒸留し、そして１３Ｐａ下で五酸化リン上で乾燥する。得られた生成物をアセトニトリル（３０ｍｌ）およびブロモトリメチルシラン（３ｍｌ）で一晩室温で処理し、そして溶液を真空下でエバポレートする。水（５０ ｍｌ）を加え、混合物を濃アンモニア水を加えてアルカリ性にし、そして溶液をエバポレートする。さらなる処理および精製は、本質的に実施例１７に記載されるように行われる。収量、０．４０ｇ（９５％）、９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−ジメチルアミノプリン、融点１６２〜１６４℃、
【０１９５】
【化８２】
実施例３６
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−ブチルアミノプリン
ジ（２−プロピル） ９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−クロロプリン（０．５０ｇ、実施例２６に従って調製）、ブチルアミン（２．０ｍｌ）およびエタノール（２０ｍｌ）の混合物を、湿気を遮断して６時間還流し、そして真空下でエバポレートする。ブロモトリメチルシランとの反応に続いて、反応混合物の処理および生成物の単離を、本質的に実施例３４に記載されるように行う。９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−ブチルアミノプリンの収量、０．４０ｇ（８７％） 、融点１４０〜１４２℃、
【０１９６】
【化８３】
実施例３７
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−（２−ブチル）アミノプリン
ジ（２−プロピル） ９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−クロロプリン（０．５０ｇ、実施例２６に従って調製）、２−ブチルアミン（２．０ ｍｌ）およびエタノール（２０ ｍｌ）の混合物を、湿気を遮断して８時間還流し、そして真空下でエバポレートする。ブロモトリメチルシランとの反応に続いて、反応混合物の処理および生成物の単離を、本質的に実施例３４に記載されるように行う。９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−（２−ブチル）アミノプリンの収量、０．３５ｇ（７５％）、融点１４８〜１４９℃、
【０１９７】
【化８４】
実施例３８
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−シクロプロピルアミノプリン
ジ（２−プロピル）９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−クロロプリン（０．５０ｇ， 実施例２６に従って調製）、シクロプロピルアミン（２．０ｍｌ）およびエタノール（２０ｍｌ）の混合物を、湿気を遮断して１２時間環流し、そして真空下でエバポレートする。ブロモトリメチルシランとの反応に続いて、反応混合物の処理および生成物の単離を、本質的に実施例３４に記載されるように行う。９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−シクロプロピルアミノプリンの収量、０．３５ｇ（８０％）、融点１７８〜１７９℃、
【０１９８】
【化８５】
実施例３９
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−シクロペンチルアミノプリン
ジ（２−プロピル）９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−クロロプリン（０．５０ｇ、実施例２６に従って調製）、シクロペンチルアミン（２．０ｍｌ）およびエタノール（２０ｍｌ）の混合物を、湿気を遮断して１２時間環流し、そして真空下でエバポレートする。ブロモトリメチルシランとの反応に続いて、反応混合物の処理および生成物の単離を、本質的に実施例３４に記載されるように行う。９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−シクロペンチルアミノプリンの収量、０．３６ ｇ（７６％）、融点１６７〜１７０℃、
【０１９９】
【化８６】
実施例４０
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−シクロヘキシルアミノプリン
ジ（２−プロピル）９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−クロロプリン（０．５０ｇ、実施例２６に従って調製）、シクロヘキシルアミン（２．０ｍｌ）およびエタノール（２０ｍｌ）の混合物を、湿気を遮断して１０時間環流し、そして真空下でエバポレートする。ブロモトリメチルシランとの反応に続いて、反応混合物の処理および生成物の単離を、本質的に実施例３４に記載されるように行う。９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−シクロヘキシルアミノプリンの収量、０．３２ ｇ（６５％）融点１６４〜１６５℃、
【０２００】
【化８７】
実施例４１
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−ピロリジノプリン
ジ（２−プロピル）９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−クロロプリン（０．５０ｇ、実施例２６に従って調製）、ピロリジン（２．０ｍｌ）およびエタノール（２０ｍｌ）の混合物を、湿気を遮断して６時間環流し、そして真空下でエバポレートする。ブロモトリメチルシランとの反応に続いて、反応混合物の処理および生成物の単離を、本質的に実施例３４に記載されるように行う。９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−ピロリジノプリンの収量、０．３５ｇ（７８％）、融点１８１〜１８２℃
【０２０１】
【化８８】
実施例４２
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−ピペリジノプリン
ジ（２−プロピル）９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−クロロプリン（０．５０ｇ、実施例２６に従って調製）、ピペリジン（２．０ｍｌ）およびエタノール（２０ｍｌ）の混合物を、湿気を遮断して３時間環流し、そして真空下でエバポレートする。ブロモトリメチルシランとの反応に続いて、反応混合物の処理および生成物の単離を、本質的に実施例３４に記載されるように行う。９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−ピペリジノプリンの収量、０．４０ｇ（８４％）融点１５４〜１５６℃、
【０２０２】
【化８９】
実施例４３
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−モルホリノプリン
ジ（２−プロピル）９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−クロロプリン（０．５０ｇ、実施例２６に従って調製）、モルホリン（２．０ｍｌ）およびエタノール（２０ｍｌ）の混合物を、湿気を遮断して２時間環流し、そして真空下でエバポレートする。ブロモトリメチルシランとの反応に続いて、反応混合物の処理および生成物の単離を、本質的に実施例３４に記載されるように行う。９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−モルホリノプリンの収量、０．４５ｇ（９４．５％）、融点１６０〜１６２℃、
【０２０３】
【化９０】
実施例４４
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−ベンジルアミノプリン
ジ（２−プロピル）９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−クロロプリン（０．５０ｇ、実施例２６に従って調製）、ベンジルアミン（２．０ｍｌ）およびエタノール（２０ｍｌ）の混合物を、湿気を遮断して６時間環流し、そして真空下でエバポレートする。ブロモトリメチルシランとの反応に続いて、反応混合物の処理および生成物の単離を、本質的に実施例３４に記載されるように行う。９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−ベンジルアミノプリンの収量、０．４５ ｇ（９０％）、融点１５８〜１６０℃、
【０２０４】
【化９１】
実施例４５
９−（Ｓ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−８−アザグアニンおよび８−（Ｓ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−８−アザグアニン
８−アザグアニン（３．５ｇ）、ジメチルホルムアミド（３５ｍｌ）およびジメチルホルムアミドジネオペンチルアセタール（１５ｍｌ）の混合物を、湿気を遮断して８０℃で１６時間加熱する。室温で冷却後、沈殿生成物を吸引濾過し、エタノールおよびエーテルで洗浄し、真空下で乾燥する。Ｎ２−ジメチルアミノメチレン−８−アザグアニンの収量、３．１ｇ（６５％）、ＨＰＬＣ的に純粋。この化合物（２．１ｇ、１０ミリモル）、炭酸セシウム（１．７５ｇ、５．４ミリモル）および（Ｓ）−２−［（ジ（２−プロピル）ホスホニルメトキシ］−１−トルエンスルホニルオキシプロパンのジメチルホルムアミド（４０ｍｌ）混合物を、湿気を遮断して１００℃で４時間撹拌を行う。混合物を熱いうちに濾過し、４０℃／１３Ｐａでエバポレートし、そして残渣をメタノールと濃アンモニア水との混合液（１：１、２００ｍｌ）で周囲温度で一晩処理する。溶媒を真空下でエバポレートし、そしてメタノール−クロロホルム混合液（５：９５）のシリカゲルカラム（２００ｍｌ）上で残渣をクロマトグラフィーにかける。非結晶性泡状物である蛍光性生成物（Ｒｆ＝０．４２、ＴＬＣ／メタノール−クロロホルム、１：９、シリカゲルプレート）、収量０．９ｇ（２３％）を真空下で乾燥し、アセトニトリル（２５ｍｌ）およびブロモトリメチルシラン（２．５ｍｌ）で室温で一晩処理する。この混合物の処理は、実施例３４に記載されるように行う。生成物を、イオン交換クロマトグラフィーによりＤｏｗｅｘ ５０×８（Ｈ＋型）上で単離し、そして水から結晶化する。収量、０．４５ｇ。
【０２０５】
シリカゲルカラムのさらなる溶出物、９−異性体（Ｒｆ＝０．３６、ＴＬＣ／メタノール−クロロホルム、１：９、シリカゲルプレート）を０．９ｇ（２３％）の収量で与える。アセトニトリル中のブロモトリメチルシランによる転換（実施例３４）により、脱イオン化および水からの結晶化の後、９−（Ｓ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−８−アザグアニン（０．５０ｇ， ＨＰＬＣ的に純粋）を生ずる。
【０２０６】
実施例４６
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−８−アザグアニン、８−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−８−アザグアニンおよび７−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−８−アザグアニン
（Ｓ）−エナンチオマーに関して、本質的に実施例４４に記載されるように反応を行う。メタノール性アンモニア水との縮合混合物の処理後、ビス（２−プロピル）エステルの粗混合物をＤｏｗｅｘ ５０×８（Ｈ＋型）（１５０ｍｌ）のカラムにかけ、そして２０％水性メタノールでカラムから溶出させた。ＵＶ吸収画分を真空下で採取し、乾燥して、非結晶性泡状物の９−異性体を与える。残渣をアセトニトリル（３０ｍｌ）およびブロモトリメチルシラン（３ｍｌ）により一晩処理し、真空下でエバポレートし、残渣を２．５％アンモニア中に溶解し、そして真空下で再エバポレートする。この残渣を、Ｄｏｗｅｘ １×２（アセテート型）のカラム（１００ｍｌ）にかけ、そして水（１リットル）で洗浄し、そして１Ｍ酢酸（５００ｍｌ）で洗浄する。溶出物を捨て、そして樹脂を沸騰水（５００ｍｌ）により、フィルター上で抽出する。この溶出物を真空下でエバポレートし、そして残渣を水から結晶化して（微溶解性）、９−（Ｒ）−異性体（０．５０ｇ）を生ずる。
【０２０７】
【化９２】
２．５％アンモニア水によるＤｏｗｅｘ５０のカラムのさらなる溶出は、ＵＶ吸収画分を与える。その画分を真空下でエバポレートし、乾燥し、アセトニトリル（２０ｍｌ）およびブロモトリメチルシラン（２ｍｌ）で処理する。反応混合物をエバポレートし、そして残渣を５％アンモニア水（１００ｍｌ）を加えて溶解し、そして混合物を、Ｄｏｗｅｘ ５０×８（Ｈ＋型）のカラム（１００ｍｌ）上で脱イオン化する。アンモニア溶出物は、ゲル形成混合物を生じ、これは、アンモニアを加えると水に溶解し、そして０．０２Ｍ炭酸水素トリエチルアンモニウム中でＳｅｐｈａｄｅｘ Ａ−２５（１５０ｍｌ）のカラムにかける。カラムから、直線勾配をかけた同一緩衝液（０．０２〜０．２０Ｍ、各１リットル）で溶出することにより、７−および８−異性体（ＥＵｐ ０．９２， 蛍光スポット）の混合物からなる主画分を与える。メタノールで共蒸留後の残渣を、Ｄｏｗｅｘ １×２（アセテート）のカラム（２０ｍｌ）にかけ、そのカラムを水（１００ｍｌ）で洗浄し、そして生成物を１Ｍ酢酸で溶出する。真空下でエバポレートし、水との共蒸留を行い、そしてエタノールと共にすり潰してから、生成物を濾過し、エタノールおよびエーテルで洗浄し、そして乾燥すると、７−異性体と８−異性体との比率が１：４の混合物０．５０ｇを生ずる（１３Ｃ−ＮＭＲによる）。７−および８−位置異性体（ｒｅｇｉｏｉｓｏｍｅｒ）は、ＤＥＡＥ Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ａ２５上でのクロマトグラフィーにより、０．０２モル〜０．２モルの勾配をかけた水性炭酸水素トリエチルアンモニウム（ｐＨ７．５）による溶出を用いて、分離した。
【０２０８】
【化９３】
実施例４７
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−８−アザ−２，６−ジアミノプリンおよび８−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−８−アザ−２，６−ジアミノプリン
８−アザ−２，６−ジアミノプリンヘミスルフェート（２５ミリモル）の水（１００ｍｌ）懸濁液を、Ｄｏｗｅｘ ５０×８（Ｈ＋型）を加えながら溶解するまで撹拌し、懸濁液を同じ陽イオン交換体のカラム（１００ｍｌ）上に注ぎ、そして中性になるまでカラムを水で洗浄する。次いで、樹脂を水（２００ｍｌ）に懸濁させ、そしてアルカリになるまでアンモニア水で処理し、濾過し、そして沸騰水（合計、１リットル）で洗浄する。濾液と洗浄物を真空下で乾燥し、残渣をエタノール（２×５０ ｍｌ）で共蒸留し、そして得られた遊離の８−アザ−２，６−ジアミノプリンをエーテルから濾過し、同じ溶媒で洗浄し、そして真空下で五酸化リン上で乾燥する。
【０２０９】
この化合物（３．０２ｇ、２０ミリモル）および炭酸セシウム（３．３ｇ、１０ミリモル）のジメチルホルムアミド（６０ｍｌ）懸濁液を、１００℃で１時間加熱し、そして（Ｒ）−２−［（ジ（２−プロピル）ホスホニルメトキシ］−１−トルエンスルホニルオキシプロパン（８．６ｇ、２１ ミリモル）のジメチルホルムアミド（３０ｍｌ）溶液を、撹拌しながら１５分間かけて加える。次いで、加熱と撹拌をさらに１６時間続け、真空下で混合物から溶媒を取り除き、そして残渣を沸騰クロロホルム（合計、３００ｍｌ）で抽出する。抽出物を、クロロホルムを用いてシリカゲルカラム（２５０ｍｌ）上でクロマトグラフィーにかけ、そしてカラムからクロロホルム−メタノール混合液（９５：５）により溶出する。溶出により、ジ（２−プロピル）９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−８−アザ−２，６−ジアミノプリン（ＲＦ０．７０、ＴＬＣ／シリカゲル、クロロホルム−メタノール、４：１）を生じ、その後、関連画分をエバポレートし、そして酢酸エチル−石油エーテルから結晶化すると、１．７５ｇ （２２．５％）の結晶物質を与える。融点１２０〜１２２℃、
【０２１０】
【化９４】
この生成物を、アセトニトリル（２５ ｍｌ）およびブロモトリメチルシラン（２．５ ｍｌ）で一晩室温で処理し、そして溶液を真空下でエバポレートする。水（５０ｍｌ）を加え、混合物に濃アンモニア水を加えてアルカリ性にし、そして溶液をエバポレートする。さらなる処理および精製を、本質的に実施例１７に記載されるように行う。９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２，６−ジアミノ−８−アザアデニンの収量、０．９０ｇ（６５．５％）、融点２３８〜２４２℃、
【０２１１】
【化９５】
シリカゲルカラムのさらなる溶出により、ジ（２−プロピル）８−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−８−アザ−２，６−ジアミノプリンの１．４０ｇ（１８％）を得る。（ＲＦ ０．５０、ＴＬＣ／シリカゲル、クロロホルム−メタノール、４：１）、融点１４８〜１５０℃（酢酸エチル−石油エーテル）、
【０２１２】
【化９６】
ブロモトリメチルシランとの反応を、本質的に９−異性体に関して記載されるように行う；８−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−８−アザ−２，６−ジアミノプリンの収量、０．８０ｇ（７２．５％）、融点２３８〜２４０℃、
【０２１３】
【化９７】
実施例４８
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−６−メルカプトプリン 水素化ナトリウム（０．４０ｇ， パラフィン中に６０％分散、１０ミリモル）を、６−クロロプリン（１．５５ｇ、１０ミリモル）のジメチルホルムアミド（２５ｍｌ）溶液に加え、そしてその混合物を周囲温度で１時間撹拌する。（Ｒ）−２−［（ジ（２−プロピル）ホスホニルメトキシ］−１−トルエンスルホニルオキシプロパン（６．５ｇ、１５．９ ミリモル）のジメチルホルムアミド（５０ｍｌ）溶液を加え、そしてその混合物を６０℃で８時間撹拌する。次いで、混合物から真空下で溶媒を取り除き、そして残渣を熱クロロホルム（合計、２５０ｍｌ）で抽出する。次いで、抽出液を真空下でエバポレートし、そしてクロロホルムによりシリカゲルカラム（２５０ ｍｌ）上で残渣をクロマトグラフィーにかける。生成物をクロロホルム−メタノール（９５：５）で溶出し、そして生成物を含む関連画分を乾燥するまでエバポレートする。油状のジ（２−プロピル） ８−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−６−クロロプリンの収量、２．３５ｇ、（６０％）（ＲＦ ０．７０、ＴＬＣ／シリカゲル、クロロホルム−メタノール、４：１）、融点１４８〜１５０℃（酢酸エチル−石油エーテル）、
【０２１４】
【化９８】
この生成物を、チオ尿素（２ｇ）のエタノール液と共に１時間環流して処理し、その溶液をトリエチルアミンでアルカリ性にし、乾燥し、そして残渣をクロロホルム（２００ｍｌ）で抽出する。抽出液を真空下でエバポレートし、そして残渣（ＲＦ０．６３、ＴＬＣ／シリカゲル、クロロホルム−メタノール、４：１）を真空下で乾燥する。アセトニトリル（４０ｍｌ）とブロモトリメチルシラン（４ｍｌ）を加え、そして混合物を溶解するまで撹拌する。混合物を室温で一晩静置し、真空下で乾燥し、そして濃アンモニア水でアルカリ性にすることにより水（１００ｍｌ）に溶解する。次いで、アルカリ溶液を真空下でエバポレートし、そして水（２０ｍｌ）に溶かした残渣（アンモニアでアルカリ性にしたもの）を、０．０５Ｍ炭酸水素トリエチルアンモニウム（ｐＨ７．５）で平衡化したＳｅｐｈａｄｅｘ Ａ−２５のカラム（１５０ｍｌ）にかける。溶出物の吸収値が初期の値に低下するまで、そのカラムから同じ緩衝液で溶出し、次いで０．０２Ｍ〜０．２Ｍの炭酸水素トリエチルアンモニウム（ｐＨ ７．５）（各１リットル）により直線勾配をかけて溶出を行う。主要なＵＶ吸収画分を乾燥し、そしてメタノール（５×５０ｍｌ）と共に真空下で共蒸留する。残渣を１０ｍｌの水に溶かして、Ｄｏｗｅｘ １×２（アセテート型）カラム（５０ｍｌ）にかけ、カラムを水で洗浄し、そしてイオン交換体（ｉｏｎｅｘ）を１０％水性ギ酸（２００ｍｌ）中で１５分間撹拌する。懸濁物を濾過し、そして樹脂を沸騰水（合計、１ リットル）で繰り返し洗浄する。濾液を真空下で濃縮し、そして水から再結晶して、９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−６−チオプリン（０．９０ｇ， ４９％）、融点１５６〜１５８℃を生ずる。
【０２１５】
【化９９】
実施例４９
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−Ｎ１，Ｎ６−エテノアデニン ９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）アデニン（０．４０ｇ）を１Ｍクロロアセトアルデヒド溶液−水（２０ｍｌ）に溶かした溶液を、３７℃で４８時間インキュベートし、そして真空下でエバポレートする。水（１０ｍｌ）に溶かした残渣を、オクタデシルシリカゲル（２０−３０μ）のカラム（２５０ｍｌ）にかけ、そして水（３ ｍｌ／ｍｉｎ）で洗浄する。画分（２０ｍｌ）を０．０５Ｍ炭酸水素トリエチルアンモニウム（ｐＨ７．５）を用いてＨＰＬＣにより分析し、そして適切な画分をプールして、そして真空下で処理する。生成物をエタノールと共にすり潰し、そして濾過する。収量、０．３５ｇ（８０％）、融点１８０〜１８２℃、
【０２１６】
【化１００】
実施例５０
ヒト免疫不全ウィルス（ＨＩＶ）およびモロニィネズミ肉腫ウィルス（ＭＳＶ）に対するインビトロでの評価
細胞変性を誘発するＨＩＶ−１およびＨＩＶ−２に対する化合物の活性を、ヒトリンパ球ＭＴ−４細胞において試験した。細胞（２５００００細胞／ｍｌ）を、ＨＩＶ−１あるいはＨＩＶ−２の１００ ＣＣＩＤ５０（１ ＣＣＩＤ５０は、実験条件下で細胞の５０％に細胞変性効果を起こすウィルス量である）で感染させ、そして試験化合物の異なる希釈液を含むマイクロタイタープレートの２００μｌ−ウェルに加える。次いで、感染した細胞培養物を、３７℃で５日間、加湿ＣＯ２制御のインキュベーター中でインキュベートした。次いで、ウィルスの細胞変性を、トリパンブルー染料の染色によるＭＴ−４の生存率の測定により試験した。プロトタイプ化合物のデータと比較して、結果を表 １にまとめる。
【０２１７】
さらに、ネズミ胎児線維芽細胞Ｃ３Ｈ／３Ｔ３細胞において、ＭＳＶ誘発形質転換に対する化合物の活性の試験結果も、表１に示されている。４８ウェルマイクロタイタープレートの１−ｍｌ−ウェル内に細胞を接種し、６０〜９０分間８０ ＰＦＵ（プラーグ形成単位）に曝した。次いで、ウィルスを除去し、そして適切な濃度の試験化合物を含む培地を加えた（１ｍｌ／ウェル）。感染後６日目に、細胞培養物のＭＳＶ誘発形質転換を顕微鏡により調べた。プロトタイプ化合物のデータと比較して、結果を表１にまとめる。
【０２１８】
【表１】
結論：
（１）試験された式Ｉの分割された化合物の大部分は、インビトロで、顕著な抗ＨＩＶ活性を示した。ＨＩＶ−１およびＨＩＶ−２は、試験化合物に対する感受性に差は無かった。
【０２１９】
（２）（Ｒ）−ＰＭＰＡは、レトロウィルスの複製に対して、１〜２μｇ／ｍｌで著しく阻害し、そして１００ ｍｇ／ｍｌで細胞に対して非毒性であった。その選択指数（細胞毒性用量／抗ウィルス活性用量の比率）は、プロトタイプ化合物ＰＭＥＡの選択指数より優れていることがわかった。ＰＭＥＡの（Ｓ）−エナンチオマーは、顕著な抗レトロウィルス活性に欠けていた。
【０２２０】
（３）（Ｒ）−ＰＭＰＤＡＰは、レトロウィルスの複製を強く阻害し、（ＥＣ５０ ０．０１〜０．１μｇ／ｍｌ）、そして１００μｇ／ｍｌで細胞に対して非毒性であった。それは、ＰＭＥＡおよび他のプロトタイプ化合物より、抗ウィルス活性および毒性の欠如の両方の点で、優れていることがわかった。その選択指数は、ＨＩＶ−１およびＨＩＶ−２に対して、＞２０００であった。
【０２２１】
実施例５１
腹腔内投与によるマウスにおけるモロニィネズミ肉腫ウィルス（ＭＳＶ）感染の処置
２グラムの新生児ＮＭＲＩマウスに、モロニィネズミ肉腫ウィルスの２５０倍希釈した貯蔵調製物５０μｌを左後脚に筋肉内注射した。ウィルス感染の２〜４時間前から開始して、１０匹からなる群において、各動物に、式Ｉの分割された化合物あるいはプロトタイプ化合物の５０、２０、または１０ｍｇ／ｋｇの試験化合物を、単回投与により、腹腔内に注入した（略語は、表１の脚注を参照のこと）；化合物（Ｒ）−ＰＭＰＡおよび（Ｒ）−ＰＭＰＤＡＰを、５および２ｍｇ／ｋｇの用量でも投与した。マウスの別の群（２０匹の動物）には、ＲＰＭＩ−１６４０培地をプラセボとして投与した。全ての化合物をＲＰＭＩ−１６４０培地に溶解した。マウスを２０日間毎日観察し、そして腫瘍のイニシエーションの日と、動物の死亡した日を各動物に対して記録した。標準偏差を計算することにより、統計解析を行った。まとめた結果を表２に示す。
【０２２２】
【表２】
ＰＭＰＡ（およびＦＰＭＰＡ）の（Ｓ）−エナンチオマーは、５０ｍｇ／ｋｇの用量では、インビボで顕著な抗レトロウィルス活性を有さないが、（Ｒ）−ＰＭＰＡ、（Ｒ）−ＰＭＰＤＡＰは、腫瘍のイニシエーションの阻害およびＭＳＶ感染したマウスの寿命の延長に非常に有効であることがわかった。１回の（Ｒ）−ＰＭＰＡの５０ｍｇ／ｋｇの用量は、ＭＳＶ誘発された腫瘍の発生に対して完全に防御した。低用量では、この化合物は、腫瘍のイニシエーションの日および動物の死亡の平均日数を延長する点において、（Ｓ）−ＦＰＭＰＡより優れていた。１回の（Ｒ）−ＰＭＰＤＡＰの１０〜２０ｍｇ／ｋｇの用量は、ＭＳＶ誘発された腫瘍の発生に対して、動物（９０〜９５％）を実質的に完全に防御した； ２ｍｇ／ｋｇの用量では、腫瘍形成を有意に予防し（動物の３６％）、そして７０％もの長期間生存動物が観察された。
【０２２３】
結論：
（１） （Ｒ）−ＰＭＰＡは、１回の１０〜５０ｍｇ／ｋｇの用量で、腫瘍のイニシエーションおよび動物の死亡の平均日数の増加において顕著に有効であることがわかった。それは、これらのアッセイにおいて、プロトタイプ化合物ＰＭＥＡより優れている。
【０２２４】
（２）（Ｒ）−ＰＭＰＤＡＰは、インビボで試験した一連の化合物の中で最も活性な抗ＭＳＶ化合物の１つであった。それは、（Ｒ）−ＰＭＰＡ より５倍も優れていることがわかった。それは、アデニン誘導体の方が、アッセイにおいて、ジアミノプリン対応物よりも活性があるというＦＰＭＰ系と対照的である。
【０２２５】
（３）式Ｉの化合物のインビボの活性は、インビトロにおけるＨＩＶおよびＭＳＶに対するそれらの抗ウィルス活性と一致する。
【０２２６】
実施例５２
経口投与によるマウスにおけるモロニィネズミ肉腫ウィルス（ＭＳＶ）感染の処置
３週齢のＮＭＲＩマウス（体重約１０グラム）に、モロニィネズミ肉腫ウィルスの２０倍希釈した貯蔵調製物５０μｌを、左後脚に筋肉内注射した。ウィルス感染の２〜４時間前に開始して、６匹の動物に、試験化合物を１日当たり１００ｍｇ／ｋｇ（合計用量）で１日２回連続５日間経口投与した。コントロール（プラセボ）群は、１４匹の動物からなっていた。実験は、実施例３５に記載されるように評価した。まとめた結果を表３に示す。
【０２２７】
【表３】
１００ｍｇ／ｋｇ／日の用量では、（Ｒ）−ＰＭＰＤＡＰは、腫瘍のイニシエーションの平均日数を５０％増加させた；マウスの６７％にしか腫瘍が発生しなかった。
【技術分野】
【０００１】
発明の分野
本発明は、非環式ヌクレオチドアナログ、それらの調製および使用に関する。特に、本発明は、プリン塩基およびピリミジン塩基の２−ホスホノメトキシプロピル誘導体の個々のエナンチオマーに関する。
【背景技術】
【０００２】
発明の背景
ウィルス性疾患の治療における化学療法剤の開発が緊急に必要である。特に、レトロウィルスによって引き起こされる疾患の治療は、人間医療における最も困難な挑戦の１つである。登録済みまたは現在研究中の多数の抗ウィルス剤は、効果的に疾患を治癒し、症状を緩和し、またはある種の慢性ウィルス性感染症の再発の間隔を実質的に延ばし得るが、多くの場合、レトロウィルス性疾患の例として特にＡＩＤＳの場合、確実な成果は未だ達成されていなかった。新しい抗ウィルス剤に対して重要な要件である抗ウィルス作用の選択性は、達成されていなかった。
【０００３】
抗ウィルス性化学療法に臨床的に有用である大部分の化合物は、プリン塩基またはピリミジン塩基のいずれかおよび／または炭水化物部分において修飾されたヌクレオシドである。このような化合物は、主として、ウィルスの核酸の合成に関するプロセスにおいて作用する；それらの作用は、リン酸化、それに続くトリホスフェートへの変換を受ける能力に依存する。修飾ヌクレオシドを投与する１つの問題は、宿主細胞における適切なリン酸化活性の欠如およびウィルス特異性リン酸化活性を欠いたウィルス株の存在である。酵素的に耐性のヌクレオチドアナログは、可能性のある抗ウィルス剤として特に有用のようであるが、それらの極性の特性は、細胞膜の適切なヌクレオチドレセプターを欠いているので、これらアナログの細胞への効果的な侵入を妨げる。
【０００４】
この困難性は、ヒドロキシル基を有し、糖部分を置換している脂肪族鎖を含む一連の非環式ヌクレオチドアナログにより克服されるように思われる。例えば、抗ウィルス性ヌクレオシドアナログのガンシクロビル（Ｃｙｔｏｖｅｎｅ）から誘導されるホスフェートまたはホスホン酸誘導体が、抗ヘルペスウィルス活性を有すると報告されている（Ｒｅｉｓｔらの「抗ウィルス剤としてのヌクレオチドアナログ」， ＡＣＳシンポジウムシリーズ，第４０１号， １７ー３４頁 （１９８９）；Ｔｏｌｍａｎ， 同上， ３５−５０頁；Ｐｒｉｓｂｅら， Ｊ Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ （１９８６）， ２９：６７１）。
【０００５】
以下の式により、幾つかのクラスの先行技術の化合物が記載される。
【０００６】
【化１０】
抗ウィルス作用が複素環塩基の性質によってそれほど厳密に制限されない別の群の抗ウィルス化合物は、ホスホン酸部分がメチレン単位を介して脂肪族鎖糖置換基のヒドロキシル基に結合しているホスホン酸アナログを包含する。このような化合物の例としては、ＨＰＭＰ誘導体（１）があり、ＵＫ特許出願第２１３４９０７号およびＨｏｌｙらのＥＰ２０６，４５９として１９８６年１２月３０日付けで現在公開されたＰＶ−３０１７により開示されていた。このような化合物は、もっぱらＤＮＡウィルスに対して作用し、Ｄｅ ＣｌｅｒｃｑらのＮａｔｕｒｅ （１９８６） ３２３：４６４−４６７に報告され、そしてＨｏｌｙらのＡｎｔｉｖｉｒａｌ Ｒｅｓ （１９９０） １３：２９５に概説されている。
【０００７】
類似のタイプの抗ウィルス剤は、ＰＭＥ誘導体（２）により表され、これは、Ｈｏｌｙらの欧州特許出願第０２０６４５９号により開示され、そしてＤｅ ＣｌｅｒｃｑらのＡｎｔｉｖｉｒａｌ Ｒｅｓ （１９８７） ８：２６１およびＨｏｌｙらのＣｏｌｌｅｃｔｉｏｎ Ｃｚｅｃｈ Ｃｈｅｍ Ｃｏｍｍｕｎ （１９８７） ５２：２８０１；同上 （１９８９）， ５４：２１９０に詳細に記載されている。これらの化合物は、ＤＮＡウィルスおよびレトロウィルス（ＨＩＶ−１およびＨＩＶ−２を包含する）の両方に対して作用する。アデニン誘導体、すなわちＰＭＥＡは、マウスにおけるモロニィ（Ｍｏｌｏｎｅｙ）肉腫ウィルス、アカゲザルにおけるサル免疫不全ウィルス、および、ネコにおけるネコ免疫不全ウィルスに対して顕著な活性を示すことが実証された（Ｂａｌｚａｒｉｎｉら， ＡＩＤＳ （１９９１） ５：２１； Ｅｇｂｅｒｉｎｋら， Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ Ｕ．Ｓ．Ａ． （１９９０） ８７：３０８７）。
【０００８】
側鎖の修飾に集中した広範な構造−活性の調査（Ｈｏｌｙらの「抗ウィルス剤としてのヌクレオチドアナログ」， ＡＣＳシンポジウムシリーズ， 第４０１号 （１９８９）， ５１頁に記載されている）は、さらなる実質的に活性な抗ウィルス剤を示さなかった。フッ素原子によりこのヒドロキシルを置換すると、ＦＰＭＰ化合物（３）が得られ、これは、幾らかの抗ＤＮＡ−ウィルス活性を有するのに加えて、ＨＩＶ−１、ＨＩＶ−２、およびネズミ肉腫ウィルスの両方に対して実質的な効果を示す（ＥＰ ４５４，１２７として１９９１年１０月３０日付けで現在公開されたＨｏｌｙらのチェコスロバキア特許出願ＰＶ２０４７−９０、および、Ｂａｌｚａｒｉｎｉら， Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ Ｕ．Ｓ．Ａ．（１９９１） ８８：４９６１に開示されている）。
【０００９】
９−（２−ホスホノメトキシプロピル）アデニンおよび９−（２−ホスホノメトキシプロピル）グアニン（ＰＭＰＡおよびＰＭＰＧ）のラセミ混合物もまた、Ｈｏｌｙらの欧州特許出願第０２０６４５９号（ＰＭＰＡ）およびＨｏｌｙら，Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ Ｃｚｅｃｈ Ｃｈｅｍ Ｃｏｍｍｕｎ （１９８８） ５３：２７５３ （ＰＭＰＡ）、ならびに米国特許出願第９３２，１１２ （ＰＭＰＧ）に記載されていた。ＰＭＰＡは、評価可能な抗ヘルペス効果を全く欠いているが、ＰＭＰＧの抗ヘルペス効果は、その実質的な細胞毒性によるようであった。ＰＭＰＧの臨床的な形、およびその関連化合物、すなわち９−（３−ヒドロキシ−２−（ホスホノメトキシ）プロピル）グアニン（ＨＰＭＰＧ）の臨床的な形が、ＥＰ出願第４５２９３５号に開示されている。これらのグアニン形に関して、Ｒ−エナンチオマーは、特にレトロウィルスのＨＩＶに関して、より大きい抗ウィルス活性を一貫して与えた。ある種のＤＮＡウィルスに関して、抗ウィルス活性において、ＲおよびＳのエナンチオマーの間の差はほとんどなかった。この活性のパターンが、グアニン以外のＰＭＰ化合物にまで広げられるかどうかは予測できない。
【００１０】
上記の文献またはそれらの組み合わせによって、本発明の分割されたエナンチオマーが抗レトロウィルス活性を示すということ、あるいは、好適なエナンチオマーは何かということを予測することはできない。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
本発明の目的は、非環式ヌクレオチドアナログ、それらの調製および使用方法を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明は、以下の式：
【００１３】
【化１１】
で示される化合物を提供し、この化合物は、この化合物の塩を包含し、ここで、式ＩＡまたはＩＢの化合物は、実質的にこの化合物のエナンチオマーを含まず、Ｂは、置換または非置換のプリンまたはピリミジン部分、もしくはそのアザおよび／またはデアザのアナログであり、そしてＢは、グアニン以外であり、そしてＲは、独立して、Ｈ、アルキル（１〜６Ｃ）、アリールまたはアラルキルである。
【００１４】
１つの実施形態において、ＲがＨであり、そしてＢが、アデニン、２，６−ジアミノプリン、２−アミノプリン、ヒポキサンチン、およびキサンチン、およびそれらの１−デアザアナログ、３−デアザアナログおよび８−アザアナログからなる群より選択されるプリン部分であり、このプリン部分は、非置換の、プリンまたはアナログの誘導体、あるいは、２位および／または６位および／または８位をアミノ、ハロゲン、ヒドロキシ、アルコキシ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アラルキルアミノ、ヘテロアラルキルアミノ、複素環式アミノ、ヒドロキシアミノ、アルコキシアミノ、ヒドラジノ、アジド、メルカプトまたはアルキルチオで置換された、プリンまたはアナログの誘導体のいずれかであり、そしてこの誘導体はグアニン以外である。
【００１５】
１つの実施形態において、ＲがＨであり、そしてＢが、シトシン、ウラシル、チミンおよび５−メチルシトシンおよびそれらの６−アザアナログからなる群より選択されるピリミジンであり、このピリミジンが、非置換か、あるいは、４位の任意の環外アミノ基がアルキル、アラルキル、ヒドロキシまたはアミノで置換されているかのいずれかである。
【００１６】
１つの実施形態において、Ｂが、アデニン、２，６−ジアミノプリン、２−アミノプリン、８−ブロモアデニン、６−メルカプトプリン、６−チオグアニン、２−メチルチオアデニン、３−デアザアデニン、８−アザアデニン、８−アザグアニン、１−デアザアデニンまたは８−アザ−２，６−ジアミノプリンであり、上記化合物は、式ＩＡで示される。
【００１７】
１つの実施形態において、Ｂが、アデニン、２，６−ジアミノプリン、２−アミノプリン、８−ブロモアデニン、６−メルカプトプリン、６−チオグアニン、２−メチルチオアデニン、３−デアザアデニン、８−アザアデニン、８−アザグアニン、１−デアザアデニンまたは８−アザ−２，６−ジアミノプリンであり、上記化合物は、式ＩＢで表される。
【００１８】
１つの実施形態において、Ｂが、アデニン、８−アザグアニンまたは２，６−ジアミノプリンである。
【００１９】
１つの実施形態において、Ｂが、２，６−ジアミノプリンである。
【００２０】
１つの実施形態において、Ｂが、８−アザグアニンである。
【００２１】
１つの実施形態において、Ｂが、シトシン、チミン、ウラシル、５−メチルシトシン、６−アザウラシルまたは６−アザシトシンである。
【００２２】
別の局面において、本発明は、以下の式：
【００２３】
【化１２】
（ここで、Ｂは上記で定義されたのと同様である）
で示される化合物を調製する方法を提供し、この方法は、以下の式：
【００２４】
【化１３】
（ここで、Ｒは、独立して、アルキル（１〜６Ｃ）、アリールまたはアラルキルである）
で示される化合物を、極性非プロトン性溶媒媒質中でハロトリアルキルシランで処理することによって加水分解する工程を包含する。
【００２５】
１つの実施形態において、両Ｒが、２−プロピルである。
【００２６】
１つの実施形態において、上記式ＶＩＩＡまたはＶＩＩＢで示される化合物が、以下の式：
【００２７】
【化１４】
（ここで、Ｂ’は、明細書中で定義されるようなＢの保護された形である）
で示される化合物を、式ＶＩＡまたはＶＩＢで示される化合物を少なくとも１種の脱保護試薬で処理することによって脱保護する工程を包含するプロセスにより調製される。
【００２８】
１つの実施形態において、上記式ＶＩＡまたはＶＩＢで示される化合物が、以下の式：
【００２９】
【化１５】
（ここで、Ｂ’は、明細書中で定義されるようなＢの保護された形である）
で示される化合物を、以下の式：
【００３０】
【化１６】
（ここで、ＬｖＯは、脱離基であり、そして各Ｒは、独立して、アルキル（１〜６Ｃ）である）
で示される化合物と、式ＶおよびＩＶで示される化合物が反応して式ＶＩＡまたはＶＩＢで示される化合物を形成する条件下で、反応させる工程を包含するプロセスにより調製される。
【００３１】
１つの実施形態において、ＬｖＯが、ｐ−トルエンスルホニルオキシ（ＴｓＯ）基である。
【００３２】
１つの実施形態において、上記ＶＩＩＡまたはＶＩＩＢの化合物が、水素化アルカリ金属または炭酸アルカリ金属の存在下、上記で定義されるようなプリンまたはピリミジン部分Ｂを、以下の式：
【００３３】
【化１７】
（ここで、ＬｖＯは、脱離基であり、そしてＲは、独立して、アルキル（１〜６Ｃ）、アリールまたはアラルキルである）
で示される（Ｒ）−または（Ｓ）−２−Ｏ−ジアルキルホスホニルメチル化合物でアルキル化することにより調製される。
【００３４】
１つの実施形態において、上記炭酸アルカリが、炭酸セシウムである。
【００３５】
１つの実施形態において、ＬｖＯが、ｐ−トルエンスルホニルオキシ（ＴｓＯ）基である。
【００３６】
別の局面において、本発明は、本発明の化合物を合成する方法を提供し、この方法は、 以下の式ＩＩ：
【００３７】
【化１８】
（ここで、Ｂは、上記に定義されるのと同様である）
で示されるプリンまたはピリミジン塩基の（Ｒ）−または（Ｓ）−Ｎ−（２−ヒドロキシプロピル）誘導体を保護して、以下の式ＩＩＩ：
【００３８】
【化１９】
（ここで、Ｂ’残基は、少なくとも１つのＮ−アセチル、Ｎ−ベンゾイル、Ｎ−ピバロイル、Ｎ−ジメチルアミノメチレン、Ｎ−トリチルまたはＮ−テトラヒドロピラニル基で置換された塩基Ｂの残基を表す）
で示される塩基が保護された誘導体を得る工程；
次いで不活性非プロトン性溶媒中−２０℃〜１００℃で、式ＩＩＩの化合物をジアルキル ｐ−トルエンスルホニルオキシメチルホスホネートおよび水素化ナトリウムで処理して、以下の式ＩＶ：
【００３９】
【化２０】
（ここで、各Ｒは、独立して、アルキル（１〜６Ｃ）、アリールまたはアラルキルである）
で示される中間体を得、次いで不活性非プロトン性溶媒中で、式ＩＶの中間体をハロトリメチルシランと反応させる工程を包含する。
【００４０】
１つの実施形態において、上記ハロトリメチルシランが、ブロモトリメチルシランである。
【００４１】
１つの実施形態において、上記不活性非プロトン性溶媒が、アセトニトリル、ジメチルホルムアミド、または塩素化炭化水素である。
【００４２】
別の局面において、本発明は、本発明の化合物を調製する方法を提供し、この方法は、水素化アルカリ金属または炭酸アルカリの存在下、不活性有機溶媒中で複素環式プリンまたはピリミジン塩基Ｂを、以下の式ＸＶＩ：
【００４３】
【化２１】
（ここで、各Ｒは、独立して、アルキル（１〜６Ｃ）、アリールまたはアラルキルである）
で示される（Ｒ）−または（Ｓ）−２−Ｏ−ジアルキルホスホニルメチル−１−Ｏ−ｐ−トルエンスルホニル−１，２−プロパンジオールで処理して、以下の式ＶＩ：
【００４４】
【化２２】
で示される（Ｒ）−または（Ｓ）−Ｎ−（２−ジアルキルホスホニルメトキシプロピル）誘導体を得、次いで不活性非プロトン性溶媒の存在下、式ＶＩの誘導体をハロトリメチルシランで処理する工程を包含する。
【００４５】
１つの実施形態において、上記炭酸アルカリが、炭酸セシウムである。
【００４６】
１つの実施形態において、上記不活性非プロトン性溶媒が、アセトニトリル、ジメチルホルムアミドまたはハロゲン化炭化水素である。
【００４７】
１つの実施形態において、上記ハロトリメチルシランが、ブロモトリメチルシランである。
【００４８】
別の局面において、本発明は、ラセミ体としての、あるいはエンリッチされたまたは分割されたエナンチオマーとしての、以下の式：
【００４９】
【化２３】
（ＬｖＯは脱離基である）
で示される化合物を提供する。
【００５０】
別の局面において、本発明は、ラセミ体としての、あるいはエンリッチされたまたは分割されたエナンチオマーとしての、以下の式：
【００５１】
【化２４】
（Ｂは、上記に定義されるのと同様であるか、またはその保護形である）
で示される化合物を提供する。
【００５２】
別の局面において、本発明は、ラセミ体としての、あるいはエンリッチされたまたは分割されたエナンチオマーとしての、以下の式：
【００５３】
【化２５】
（Ｂは、置換または非置換のプリンまたはピリミジン部分、グアニン以外のそのアザおよび／またはデアザのアナログ、または明細書中で定義されたのと同様の保護形である）
で示される化合物の、エンリッチされたまたは分割されたエナンチオマーを提供する。
【００５４】
別の局面において、本発明は、エンリッチされたまたは分割されたＲエナンチオマーとしての、以下の式：
【００５５】
【化２６】
で示される化合物を提供する。
【００５６】
別の局面において、本発明は、エンリッチされたまたは分割されたＲエナンチオマーとしての、以下の式：
【００５７】
【化２７】
で示される化合物を提供する。
【００５８】
別の局面において、本発明は、ラセミ体としての、あるいはエンリッチされたまたは分割されたエナンチオマーとしての、以下の式：
【００５９】
【化２８】
（ここで、Ｒは、独立して、アルキル（１〜６Ｃ）、アリールまたはアラルキルである）
で示される化合物を提供する。
【００６０】
別の局面において、本発明は、ラセミ体としての、あるいはエンリッチされたまたは分割されたエナンチオマーとしての、以下の式：
【００６１】
【化２９】
（ここで、Ｒは、アルキル（１〜６Ｃ）、アリールまたはアラルキルである）
で示される化合物を提供する。
【００６２】
別の局面において、本発明は、ラセミ体としての、あるいはエンリッチされたまたは分割されたエナンチオマーとしての、以下の式：
【００６３】
【化３０】
（ここで、ＬｖＯは、脱離基であり、そしてＲは、独立して、アルキル（１〜６Ｃ）、アリールまたはアラルキルである）
で示される化合物を提供する。
【００６４】
別の局面において、本発明は、薬学的に受容可能な担体と混合して、抗ウィルス的に有効な量の、本発明の化合物を含有する、抗レトロウィルス的に使用するための薬学的組成物を提供する。
【００６５】
１つの実施形態において、上記抗ウィルス化合物が、９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）アデニンである。
【００６６】
１つの実施形態において、上記抗ウィルス化合物が、９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２，６−ジアミノプリンである。
【００６７】
別の局面において、本発明は、治療を必要とする哺乳動物に抗ウィルス効果を達成する薬学的組成物であって、抗ウィルス的に有効な量の、本発明の化合物を含む、薬学的組成物を提供する。
【００６８】
１つの実施形態において、上記抗ウィルス化合物が、９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）アデニンである。
【００６９】
１つの実施形態において、上記抗ウィルス化合物が、９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２，６−ジアミノプリンである。
【００７０】
１つの実施形態において、上記複素環式アミノ基が、酸素ヘテロ原子を含有する。
【００７１】
１つの実施形態において、上記複素環式アミノ基が、飽和である。
【００７２】
別の局面において、本発明の化合物は、以下から選択される：
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−ジメチルアミノプリン；
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−ジエチルアミノプリン；
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−ブチルアミノプリン；
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−（２−ブチル）アミノプリン；
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−シクロプロピルアミノプリン；
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−シクロペンチルアミノプリン；
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−シクロヘキシルアミノプリン；
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−ピロリジノプリン；
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−ピペリジノプリン；
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−モルホリノプリン；
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−ベンジルアミノプリン；
９−（Ｓ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−８−アザグアニン；
８−（Ｓ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−８−アザグアニン；
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−８−アザグアニン；
８−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−８−アザグアニン；
７−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−８−アザグアニン；
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−８−アザ−２，６−ジアミノプリン；
８−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−８−アザ−２，６−ジアミノプリン；
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−６−メルカプトプリン；
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−Ｎ１，Ｎ６−エテノアデニン；ならびに
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２，６−ジアミノプリンおよびその１，３−ジデアザ、１−デアザ、３−デアザまたは８−アザのアナログからなる群より選択される化合物。
【００７３】
別の局面において、本発明は、Ｂが、６位をアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アラルキルアミノ、ヘテロアルキルアミノまたは複素環式アミノで置換された２−アミノプリンである、本発明の化合物を合成する方法を提供し、この方法は、対応するアミンまたは複素環式アミンを、９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−クロロプリンのアルキル（１〜６Ｃ）、アリールまたはアラルキルジエステルと反応させる工程を包含する。
【００７４】
別の局面において、本発明は、ラセミ体としての、あるいはエンリッチされたまたは分割されたエナンチオマーとしての、以下の式：
【００７５】
【化３１】
（ここで、Ｂは、置換または非置換のプリンまたはピリミジン部分、そのアザおよび／またはデアザアナログ、またはその保護形である）
で示される化合物を提供し、ただしＢは、アデニン、８−アザアデニン、２−アミノプリン、または６位をハロゲン、ヒドロキシ、アルコキシ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、メルカプト、−ＮＨＮＨ２または−ＮＨＯＨで置換されたアデニン、ではない。
【００７６】
１つの実施形態において、Ｂが、置換または非置換のプリン部分、そのアザおよび／またはデアザのアナログ、またはその保護形である。
【００７７】
１つの実施形態において、Ｂが、置換または非置換のプリン部分、そのアザおよび／またはデアザのアナログ、またはその保護形である。
【００７８】
発明の要旨
プリン塩基およびピリミジン塩基のＮ−（２−ホスホノメトキシプロピル）誘導体の分割されたエナンチオマー形が合成されて、特にレトロウィルスに対しての有用かつ予期せぬ抗ウィルス活性を有することが見い出された。これらの化合物は、式ＩＡおよびＩＢからなり、ＩＡはＲエナンチオマーを表し、そしてＩＢはＳエナンチオマーを表す。
【００７９】
【化３２】
式ＩＡおよびＩＢにおいて、Ｂはプリン塩基またはピリミジン塩基、もしくはグアニン以外のそれらのアザおよび／またはデアザアナログであり、そしてＲは、独立して、Ｈ、アルキル（１−６Ｃ）、アリールまたはアラルキルである。
【００８０】
従って、１つの局面では、本発明は、対応する式ＩＢの化合物の実質的な量を伴わない式ＩＡを含む組成物に関し、そして対応する式ＩＡの化合物の実質的な量を伴わない式ＩＢを含む組成物に関する。
【００８１】
「実質的な量」とは、約５モル％より少ないこと、好ましくは約２モル％より少ないこと、より好ましくは約１モル％より少ないこと、最も好ましくは検出不可能な量のことを意味する。「対応する化合物」とは、示された化合物のエナンチオマーを意味する。
【００８２】
本発明の他の局面は、これら組成物の調製、抗ウィルス性薬学的組成物へのそれらの処方物およびレトロウィルス感染症を治療するためのこれら処方物の使用を包含する。
【発明の効果】
【００８３】
本発明により、非環式ヌクレオチドアナログ、それらの調製および使用方法が提供される。
【発明を実施するための最良の形態】
【００８４】
発明の詳細な説明
本発明の化合物は、構造式Ｉを有する、プリン塩基およびピリミジン塩基のＮ−（２−ホスホノメトキシプロピル）誘導体の分割された（Ｒ）−エナンチオマーおよび（Ｓ）−エナンチオマーである。
【００８５】
【化３３】
Ｂは、プリン塩基またはピリミジン塩基、もしくはグアニン以外のそれらのアザおよび／またはデアザアナログである。Ｒエナンチオマーが好ましい。本明細書中で用いられるように、「プリン」は、置換または非置換の以下の式（以下の式において、遊離原子価および水素は示されていない）で表される部分を示す：
【００８６】
【化３４】
そして「ピリミジン」は、置換または非置換の以下の式で表される部分を示す：
【００８７】
【化３５】
アザアナログにおいては、上記式において少なくとも１つのＣは、Ｎで置き換えられる；デアザアナログにおいては、少なくとも１つのＮは、Ｃで置き換えられる。このような置換の組み合わせはまた、本発明の範囲内に含まれる。
【００８８】
従って、１−デアザプリンアナログは以下の式：
【００８９】
【化３６】
である；
３−デアザプリンアナログは以下の式：
【００９０】
【化３７】
である；
８−アザプリンアナログは以下の式：
【００９１】
【化３８】
である；そして
１−デアザ−８−アザプリンアナログは以下の式：
【００９２】
【化３９】
である。
【００９３】
Ｂの好ましい実施態様として、Ｂは、アデニン、２，６−ジアミノプリン、２−アミノプリン、ヒポキサンチン、キサンチン；およびそれらの１−デアザアナログ、３−デアザアナログまたは８−アザアナログ；および
プリンまたは上記アナログの誘導体からなる群から選択されるプリン塩基であり、この誘導体は、グアニン以外であり、アミノ、ハロゲン、ヒドロキシ、アルコキシ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アラルキルアミノ、ヘテロアラルキルアミノ、ヒドロキシアミノ、アルコキシアミノ、ヒドラジノ、複素環式アミノ、アジド、メルカプトまたはアルキルチオにより２位および／または６位および／または８位が置換されている。
【００９４】
本明細書中の記載の目的では、互変異性体は、特定の基の記載に含まれ、例えば、チオ／メルカプト、またはオキソ／ヒドロキシルである。
【００９５】
本発明に包含される実施態様として、Ｂは、シトシン、ウラシル、チミン、５−メチルシトシン、およびそれらの６−アザアナログ；および
アルキル、アラルキル、ヒドロキシまたはアミノにより４位の環外アミノ基が置換されたピリミジン誘導体からなる群から選択されるピリミジン塩基である。
【００９６】
本明細書中に示されるように、ハロゲンは、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩを示す；アルキルは、１−６Ｃを含む直鎖または分岐鎖の飽和炭化水素基を示し、例えば、メチル、エチル、２−プロピル、ｎ−ペンチル、ネオペンチルなどである；アルコキシは、式−ＯＲの基であり、ここで、Ｒは上記で定義されるようなアルキルである；アルキルチオは、式−ＳＲの基であり、ここで、Ｒは上記で定義されるようなアルキルである；アラルキルまたはヘテロアラルキルは、式−Ｒ−Ａｒの基であり、ここで、−Ｒ−は上記で定義されるようなアルキル（−Ｒ）に対応するアルキレンであり、Ａｒは置換（ヒドロキシル、ハロ、アミノ、スルホニル、カルボニル、あるいはヒドロキシル、ハロ、アミノ、スルホニルまたはカルボニルで置換されたＣ１−Ｃ３アルキルによる）または非置換で、６−１０Ｃを有し、そして必要に応じて酸素または窒素から選ばれるヘテロ原子を有する芳香族基（例えば、フェニル、ナフチル（ｎａｐｔｈｙｌ）、キノリル、およびベンジル）である；アラルキルアミノまたはヘテロアラルキルアミノは、式−Ｎ（Ｚ）２の基であり、ここで、Ｚは、独立して、Ｈまたは−Ｒ−Ａｒである（しかし、少なくとも１個のＺは−Ｒ−Ａｒである）；複素環式アミノは、少なくとも１個のＮ原子（通常１個）および必要に応じてさらに少なくとも１個の他のヘテロ原子を含む置換または非置換の複素環（例えば、ピロリジン、モルホリノ、ピペリジンなどの基）である。典型的には、環状構造は、３〜６員環原子を含み、単環式である。ある実施態様では、プリンの６−アミノ基の置換基は、プリンのＮ１と結合し合って、例えば、Ｎ１，Ｎ６−エテノ−アデニンにおけるように、プリニル部分に融合したＮ−複素環を形成する。
【００９７】
本発明の化合物は、遊離酸、塩の形で、あるいは少なくとも１個のアミノ官能基の付いた複素環塩基を有する化合物の場合には、両性イオンの形で単離され得る。酸または両性イオンの形は、陰イオン交換クロマトグラフィーにより、溶出液として揮発性有機酸（酢酸またはギ酸）を用いて、脱イオン化された粗物質を精製して得られ得る。遊離酸は、当該分野で公知の方法により、生理学的に受容可能な塩に容易に変換され得る。このような塩は、アンモニウムイオン、Ｌｉ＋、Ｎａ＋、Ｋ＋、Ｍｇ＋＋、およびＣａ＋＋、あるいは薬学的に受容可能な有機陽イオンの塩を包含する；それらの塩は一塩基性または二塩基性であり得る。Ｂに含まれる少なくとも１個のアミノ官能基もまた、ＨＢｒ、ＨＣｌ、Ｈ２ＳＯ４またはＨＯＡｃなどの無機酸または有機酸との酸付加塩として調製され得る。
【００９８】
ある場合には、式ＩＡおよびＩＢの化合物の酸または両性イオンの形は、水に難溶性である。このような環境下では、炭酸水素トリエチルアンモニウムなどの弱アルカリ揮発性緩衝液中で、中程度の塩基性陰イオン交換体（例えば、ＤＥＡＥ−セルロース、ＤＥＡＥ−セファデックス）上で精製が行われる。得られた水溶性トリエチルアンモニウム塩は、対応する形の陽イオン交換体を用いて、例えば陽イオン交換により他の陽イオンの塩に変換され得る。
【００９９】
式ＩＡまたはＩＢの化合物の遊離酸、両性イオンまたは塩は、固体状態において、あるいは、無菌の水溶液または水−アルコール溶液において安定である。
調製方法
本発明の化合物は、スキーム１または２を用いて、分割された乳酸エステルエナンチオマーから誘導されて容易に調製されるキラルな中間体Ｘから調製され得る。
【０１００】
反応スキーム１は以下の通りである：
スキーム１
【０１０１】
【化４０】
ここで、Ｂは、上記で定義される通りであり、そしてＢ’はその適切に保護された形である；キラルな中心の上の ＊は、分割されたエナンチオマーが用いられることを示す。Ｂの保護は、ヒドロキシ、アミノまたはカルバミド基などの、Ｂに含まれる活性水素原子のブロッキングを包含する。アセチル、ベンゾイル、ピバロイルまたはアミジン（ジメチルアミノメチレン基など）などの、アルカリに不安定な基の導入により、あるいは、トリチル、置換トリチル、テトラヒドロピラニル基などの、酸に不安定な基により、保護は達成され得る。
【０１０２】
式Ｘの２−Ｏ−テトラヒドロ−ピラニルプロパン−１，２−ジオールの所望のエナンチオマーは、通常の条件下で、すなわち、ｐ−トルエンスルホニルクロライドとピリジン中で反応させて、工程１において対応する１−Ｏ−ｐ−トルエンスルホニルエステルに変換される。示されるトシル基が好ましいが、メシレート、トリフレートまたはハライドなどの標準的な有機脱離基もまた用いられ得る。
【０１０３】
式ＸＩの保護された中間体は、直接の結晶化またはシリカゲルクロマトグラフィーのいずれかにより単離され、複雑なＮＭＲスペクトルを与えるジアステレオマーの混合物として得られる。
【０１０４】
工程２における式ＸＩのシントンによる複素環塩基のアルキル化は、不活性溶媒（ジメチルホルムアミドなど）中で塩基を水素化アルカリで前処理すること、あるいは炭酸アルカリによりインサイチュで生じる陰イオン形成のいずれかにより生じ得る陰イオンの形成により媒介される。後者の場合には、触媒として炭酸セシウムの重要性が認識されなければならない。この触媒は、塩基のアルキル化を実質的に促進するだけでなく、プリン環系におけるシントンＸＩによるアルキル化の位置特異性（ｒｅｇｉｏｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ）に有利に影響し、これにより、プリンの好ましいＮ９の位置あるいはアザまたはデアザ塩基内の対応する位置のところでアルキル化を行う。
【０１０５】
テトラヒドロピラン−２−イル基は、工程３において、酸性媒質中で開裂されて、中間体ＩＩＩを与える。この開裂は、無機酸（例えば、硫酸）陰イオン交換樹脂、または、有機酸（例えば、酢酸、ギ酸）の作用、それに続く脱イオン化により達成され得る。
【０１０６】
式ＩＩＩのＮ−（２−ヒドロキシプロピル） 誘導体は、工程４において、選択的Ｎ−アセチル化、Ｎ−ベンゾイル化、ジメチルホルムアミドジアルキルアセタールとの反応、Ｎ−トリチル化、３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピランとの反応などのような、この目的に一般に利用可能な種々の方法のうち任意の方法を用いて、式Ｖの塩基の保護された誘導体に変換される。
【０１０７】
スキーム１の工程５において、式Ｖの保護された中間体は、非反応性溶媒（ジメチルホルムアミドなど）中で、適切な塩基（水素化アルカリ金属など）で処理することによって、アルコキシド陰イオンに転換し、そしてそのアルコキシドは、ジアルキル ｐ−トルエンスルホニルオキシメチルホスホネート（式ＩＶ）で処理される。好ましくは、ホスホネートエステルは、２−プロピルアルコールのエステルである。反応は、式Ｖの中間体と式ＩＶのトシル誘導体との混合物を、３当量（中間体Ｖに対して）の水素化アルカリ（例えば、ＮａＨ、ＫＨ）または他の適切な試薬の存在下、−１０℃から８０℃まで、大抵は０℃から２０ ℃までの範囲の温度で撹拌することによって行われる。反応は、反応成分の性質および濃度に依存して、数時間から数日間続ける。ガス状水素が反応中放出されるので、反応は、湿気に対して適切に保護された開放系において行われることが必須である。
【０１０８】
次いで、保護基はＢ’から除去され、そしてホスホネートエステル結合は加水分解される。工程６において、Ｂ’からの保護基の除去は、加メタノール分解、酸加水分解などのような一般に受容可能な方法によって達成され得る。アルカリに不安定な基は、混合物をメタノールで希釈することによって簡単に除去され得る。得られた式ＶＩＩのジエステルは、シリカゲルクロマトグラフィーにより、または他の適切な支持体を用いて単離され、あるいは混入した非ヌクレオチド物質は、Ｄｏｗｅｘ ５０のような陽イオン交換体上での脱イオン化によって、または疎水性シリカクロマトグラフィーによって除去され得る。次いで、精製された式ＶＩＩの中間体は、工程７において、例えば、極性非プロトン性溶媒（アセトニトリル、またはＤＭＦなど）中で、ハロトリアルキルシラン（ブロモトリメチルシラン、またはヨードトリメチルシランなど）で４〜２０時間室温で処理することによって加水分解される。次いで、揮発分は真空下でエバポレートされ、次いで最終生成物は、その特性に依存してさらなる精製および単離技術によって得られ得る。マイナスに荷電されたホスホネート基の存在を利用するイオン交換クロマトグラフィーが好ましい。
【０１０９】
あるいは、式Ｉの化合物は、反応スキーム２によって調製され得る。
スキーム２
【０１１０】
【化４１】
スキーム２において、式ＸＶＩＩのシントンは、最後に、キラルなＰＭＰ前駆体を提供するために用いられる。そのシントンは、トシル脱離基を結合しており、そして複素環塩基またはその保護された誘導体のアルキル化に用いられて、式ＶＩＩ、すなわち本発明の化合物の保護されたジエステル体を与える。
【０１１１】
反応スキーム２において、反応スキーム１におけるように、式Ｘの２−Ｏ−（テトラヒドロピラニル）−プロパン−１，２−ジオールの分割体は、所望の分割されたエナンチオマーを提供する。式Ｘの分割された化合物は、工程１において、標準条件下でベンジル化（例えば、ＤＭＦ中で水素化ナトリウムの存在下ベンジルブロマイドとの反応）により、ベンジルエーテルＸＩＩを与える。次いで、このベンジルエーテルは、工程２において、酸加水分解により、式ＸＩＩＩの分割されたエナンチオマーの２−Ｏ−ベンジルプロパン−１，２−ジオールに変換される。いずれかのエナンチオマー（蒸留可能なオイル）は、工程３において、塩化水素の存在下で１，３，５−トリオキサンまたはパラホルムアルデヒドとのクロロメチル化により、中間体の式ＸＩＶのクロロメチルエーテルを与える。この式ＸＩＶのクロロメチルエーテルは、精製することなく、工程４において、同時に２−プロピルクロライドを除去しながらトリ（２−プロピル）ホスファイトと加熱することによって、ホスホネートジエステルＸＶに変換される。式ＸＶの中間体は、高い真空度で蒸留可能であるが、この手法によりラセミ化が起こり得る。次いで、この反応物の部分的に精製された生成物は、パラジウム／活性炭触媒のメタノール液の存在下での水素化のような標準条件下で加水素分解され、そして工程５から得られた中間体の式ＸＶＩのジエステルは、単離することなく、工程６において、トシルクロライドのピリジン液の作用により、トシル誘導体ＸＶＩＩに変換される。
【０１１２】
Ｘ→ＸＶＩＩの系列は、６つの工程を含むが、中間体の精製を必要としない。すべての反応は高い転換率で進み、その結果、この系列の全体の収率は４０％を越える。ホスホネートの２−プロピルエステルが好ましいが、他のホスホネート保護エステル基（メチル、エチル、ベンジル、および環状ジエステルなど）は同様な効果に用いられ得る。さらに、式ＸＶＩＩのシントン内のトシル基は、例えば、メシル、トリフリル、ｐ−ニトロフェニルスルホニルなどの他の脱離基によっても置き換えら得る。
【０１１３】
この合成系列の工程７は、式ＸＶＩＩのシントンによる複素環塩基のアルキル化にある。これは、複素環に対して当モル量の塩基を必要とする。アルキル化は、水素化ナトリウム反応による複素環塩基から生じるナトリウム塩、あるいは複素環塩基と、やや過剰の炭酸カリウムまたは有利には炭酸セシウムとの混合物のいずれかを用いて、上昇した温度でＤＭＦ中で最適に行われる。この反応は、非保護または保護（例えば、Ｎ−ベンゾイル化）の塩基、あるいはスキーム１による反応の記載で述べたようなそれらの前駆体のいずれかを用いて行われ得る。
【０１１４】
式ＶＩの保護された中間体は、複素環塩基のところを変換するのに都合よく適用し得、式Ｉの広範な種類の付加化合物を与える。式ＶＩＩの２−アミノ−６−クロロプリン誘導体の６位のハロゲン（例えば、塩素）原子の反応性は、広範な種類の６−置換２−アミノプリン化合物の調製に適用可能である；従って、アジ化ナトリウムまたはアジ化リチウムと加熱することによって、２−アミノ−６−アジドプリン誘導体を調製することが可能になり、その誘導体はさらに、２，６−ジアミノプリン化合物に還元され得る。あるいは、クロロ誘導体をチオ尿素で処理すると、６−チオグアニン化合物を与えるが、一方、それと一級または二級アミンとの反応は、Ｎ６置換の、または二置換の２，６−ジアミノプリン誘導体を与える。
【０１１５】
類似の変換もまた、６−クロロプリンから誘導される式ＶＩのジエステルに適用可能である。このジエステルは、最終的に、６−メルカプトプリン、あるいは、Ｎ６−モノまたは二置換アデニンを含む式Ｉの化合物になる。
【０１１６】
アルキル化は、速やかに進み、そして所望の式ＶＩＩの中間体は、反応混合物から容易に単離され、そしてクロマトグラフィーにより精製され得る。式ＩＡおよびＩＢの化合物になるこれらの中間体のさらなる処理はスキーム１に記載の手順と同一である。
【０１１７】
スキーム１により記載の方法に比べた、式Ｉの化合物のこの調製方法の利点は、塩基の保護の回避が可能であることに加えて、中間体の式ＩＩのＮ−（２−ヒドロキシプロピル）誘導体の調製に必須の酸性条件、および、最終のハロトリメチルシラン処理を除く任意の他の脱保護、がいらないということにある。従って、この代替の手順は、鋭敏な複素環塩基の結合している式Ｉの化合物の合成に適用され得る。
【０１１８】
両反応スキーム１および２に関して、本発明の化合物は、示されるような所望の複素環塩基Ｂのアルキル化により、あるいは、ある場合には、Ｂの前駆体のアルキル化により、調製され得る。従って、グアニン誘導体は、２−アミノ−６−クロロプリンのアルキル化、次いでＣ−Ｃｌ結合の酸加水分解によって最適に合成され得る。シトシン誘導体は、炭酸セシウムの存在下でのシトシンの直接アルキル化により、適度な収量で合成され得る；より高い収量は、シントンＸＩによる４−メトキシ−２−ピリミドンのアルキル化により形成される中間体の加アンモニア分解により得られる。
【０１１９】
複素環塩基での同様のその後の変更は、そのスキームの最終生成物、すなわち、本発明の主題である式Ｉの化合物を用いて行われ得る：アデニン、２，６−ジアミノプリンまたはグアニンの誘導体は、亜硝酸またはそのエステルで脱アミノ化することにより、対応するヒポキサンチン、２−ヒドロキシアデニンまたはキサンチンの誘導体に変換され得る；同様に、ウラシル誘導体は、シトシン誘導体に同様に転換され得る。式Ｉの化合物のさらなる変換は、核酸化学の常法により実現され得る：例えば、アデニン部分とクロロアセトアルデヒドとの反応は、Ｎ１，６−エテノ誘導体を与える；８−ブロモ誘導体を得るためのプリン塩基の臭素化；プリンおよびピリミジン化合物の両方におけるＮＨ−官能基のＮ−アルキル化など。これらその後の変換のどれも、式Ｉの化合物の側鎖またはホスホネート基でのいかなる変化にも関与しない。
【０１２０】
スキーム１および２の経路の一部である中間体化合物は、それ自身、新規化合物であり、従って、本発明の一部であることが認められる。
【０１２１】
スキーム１および２のプロセスを用いることの利点は、光学的に純粋な形として容易に入手可能である式Ｘの出発物質の利用にある。スキーム１およびスキーム２の両方において用いられるキラルなシントンＸを調製するための反応系列は、スキーム３に記載される。
スキーム３
【０１２２】
【化４２】
あらゆる非対照合成の極めて重要な工程は、光学的に純粋なキラルな出発物質の入手可能性に依存する。本発明に用いられる方法は、市販の（Ｍｅｒｃｋ）、式ＶＩＩＩの乳酸アルキルエステルのエナンチオマーを使用する。最初に、これらのエステルは、テトラヒドロピラニル基によってヒドロキシル官能基のところで保護される；この反応は、酸触媒の存在下、直接の添加により溶媒なしで行われる。式ＩＸのエステルは、真空下での分留により得られる。これらの中間体は、エーテル中で水素化リチウムアルミニウムにより、あるいは、エーテルまたは他の不活性溶媒中で水素化ビス（２−メトキシエトキシ）アルミニウムにより還元されて、式Ｘの化合物になる。
生物学的活性および使用
エナンチオマー的に分割された本発明の化合物は、インビトロおよびインビボの両方において、顕著な抗レトロウィルス活性を示す。これらのインビトロでの有効性は、ＭＴ４およびＣＥＭ細胞中のヒト免疫不全ウィルス１型（ＨＩＶ−１）および２型（ＨＩＶ−２）について、およびＣ３Ｈ／３Ｔ３細胞中のモロニィネズミ肉腫ウィルス（ＭＳＶ）について実証された。これらのインビボでの有効性は、ＭＳＶ感染したＮＭＲＩマウスにおいて証明された。ここで、この化合物は、非経口投与および経口投与のいずれの場合でも、腫瘍のイニシエーションの平均日数を著しく延ばし、そして平均生存日数を実質的に延長した。
【０１２３】
本発明の化合物は、プロトタイプ化合物（ＰＭＥＡ、ＰＭＥＡＤＡＰ、ＰＭＥＧ）および／またはＦＰＭＰ誘導体、例えば、ＦＰＭＰＡ、ＦＰＭＰ−ＤＡＰ）、および最も関連のある未分割のＰＭＰＧ＋ＰＭＰＡに比べていくつかの利点を有している：（ａ）これらの抗レトロウィルス活性は、明らかに、他の抗ウィルス活性と区別される（例えば、ヘルペスウィルスに対して）；（ｂ）これらの抗レトロウィルス活性は、細胞毒性によるものではない。従って、これらの化合物のインビトロでの治療指数は、プロトタイプ化合物の治療指数より非常に高く、そしていくつかの場合、＞２０００の値に達する。このような化合物は、理想的には、慢性疾患、例えば、ＡＩＤＳの長期治療に適し得る。
【０１２４】
本発明の主題を提示する試験化合物の構造は、ＡＩＤＳ患者の臨床試験に一般に用いられてきた化合物のいずれとも、全く無関係である。これにより、このような治療（例えば、ＡＺＴ、ＤＤＩ、ＤＤＣ、ＴＩＢＯ、ネビラピン（ｎｅｖｉｒａｐｉｎｅ）、ピリジノンなど）に対して耐性になったそれらのウィルス株に対して、これらの化合物の交差耐性が避けられる
これらの化合物の生物学的活性は、高度にエナンチオマー性特異的である。一般に、抗レトロウィルス活性の原因は、（Ｒ）−エナンチオマーである。グアニン系における（Ｓ）−エナンチオマーの活性は、実質的に増大した毒性を伴う。
【０１２５】
本発明の化合物は、レトロウィルス、例えば、ヒト免疫不全ウィルス（ＡＩＤＳ）、ヒトＴ細胞白血病ウィルス（ヘアリーセル白血病、急性Ｔ細胞白血病（ＨＴＬ））によって引き起こされる疾患の治療に適用され得る。これらの化合物の抗ウィルス作用の分子標的が、ウィルスにコードされる逆転写酵素であるので、これらはまた、抗ヘパドナ（ｈｅｐａｄｎａ）ウィルス活性（例えば、Ｂ型肝炎ウィルス）を有するべきである。
【０１２６】
本発明の化合物はまた、インビトロでの方法で有用な他の化合物の調製において、中間体としても有用である。例えば、ワトソン−クリック塩基対形成が可能な塩基を含有する化合物は、公知の方法によってジホスホリル化され、そしてこれまで通常、核酸配列決定に用いられていたジデオキシＮＴＰ類に対するアナログとして使用される。本発明の化合物は、ジデオキシＮＴＰ類と同様に、核酸鎖ターミネーターとして作用する。この特性に基づく他の用途は、当業者には明白である。
【０１２７】
本発明の化合物はまた、オリゴヌクレオチドまたは核酸のハイブリダイゼーションに基づく予備的方法または診断方法にも有用である。例えば、この化合物は、非酵素的合成法（例えば、Ｈ−ホスホネート化学またはホスホルアミダイト化学）を用いてオリゴヌクレオチド中に組み込まれるのに適したモノマーに転換される。次いで、このモノマーは、このような方法を用いるオリゴヌクレオチド合成において、３’末端塩基として用いられる。モノマーのＰＭＰ部分、モノマー中に存在する任意の改変された塩基、またはその両者は、抗体による認識および結合のために容易に利用可能である。この抗体は、次々に、（標的分析物の配列に対するモノマーでラベルされたプローブのハイブリダイゼーションを検出するために）ラベルされ、あるいはこの抗体は（プローブに結合した核酸の予備的分離のために）固定化される。この種の方法の例は、ＥＰ １４４，９１３；ＥＰ １４６，０３９；ＷＯ ８５／０２４１５；ＵＫ ２，１２５，９６４Ａにさらに記載されている；これらは、本発明のモノマーがワトソン−クリック塩基対形成可能であること、または本発明のモノマーが任意のポリメラーゼによって認識されることを必要としない。
【０１２８】
この化合物は、局所的または全身的に、すなわち、経口的、経直腸的、経膣内的、および非経口的（筋間、静脈内、皮下、および鼻内の経路により）に投与され得る。一般に、経口での適用は、非経口的に与えられた量に匹敵する治療効果を生じさせるためには、多量の活性物質を必要とする。
【０１２９】
ヒトレトロウィルス疾患の治療のための薬学的組成物は、少なくとも１種の式ＩＡまたはＩＢの化合物、またはそれらの薬学的に受容可能な塩を含有し、この化合物は、一般には、薬学的に受容可能な担体および非毒性の不活性アジュバントを組み合わせて、この組成物の重量に対して９５〜０．５重量％を含有する。他の治療剤もまた存在し得る。さらに、式ＩＡおよび／またはＩＢの化合物の混合物も、このような混合物の各成分が実質的にそのエナンチオマーを含まないならば、使用され得る。
【０１３０】
式Ｉの化合物を含有する薬学的組成物は、通常、錠剤、トローチ剤（ｌｏｚｅｎｇｅ）、カプセル、散剤、水性または油性懸濁液、シロップ、および水性溶液として調製される。この化合物は、全身投与、局所（ｔｏｐｉｃａｌ）投与、または局在性（ｌｏｃａｌｉｚｅｄ）投与を包含する種々の投与形態のために処方され得る。技術および処方は、一般に、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ， Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ．， Ｅａｓｔｏｎ， ＰＡ， 最新版に、見い出され得る。活性成分は、一般に、投与形態および投与剤型の性質に依存して、希釈剤または賦形剤のような担体と組み合わせられ、この担体は充填剤、増量剤、結合剤、湿潤剤、崩壊剤、界面活性剤、または潤滑剤を包含し得る。典型的な投与剤型は、錠剤、散剤、液体調製物（懸濁液、乳濁液、液剤など）、顆粒、カプセル、および坐剤、ならびにリポソーム調製物を包含する注射用液体調製物を包含する。
【０１３１】
全身投与に対しては、注射が好ましく、これには、経筋肉、静脈内、腹腔内、および皮下が包含される。注射に対しては、本発明の化合物は、液状溶液、好ましくは、ハンクス液またはリンゲル液のような生理学的に適合可能な緩衝液中に処方される。さらに、この化合物は、固形状に処方され得、そして使用の直前に再溶解または懸濁され得る。凍結乾燥体もまた包含される。系統的投与はまた、経粘膜または経皮的な手段によっても行われ得、あるいはこの化合物は、経口で投与され得る。経粘膜または経皮的投与に対しては、浸透されるべき障壁に適した浸透剤が処方物中に用いられる。このような浸透剤は、一般に、当該分野で公知であり、そして、例えば、経粘膜投与のための胆汁酸塩およびフシジン酸誘導体を包含する。さらに、浸透を促進するために、界面活性剤が用られ得る。経粘膜投与は、例えば、鼻内用スプレーまたは坐剤の使用により行われ得る。経口投与に対しては、この化合物は、カプセル、錠剤、およびトニックのような通常の経口投与剤型中に処方される。
【０１３２】
局所投与に対しては、本発明の化合物は、当該分野で一般に公知であるように、軟膏剤（ｏｉｎｔｍｅｎｔ）、軟膏剤（ｓａｌｖｅ）、ゲル剤、またはクリーム中に処方される。この化合物はまた、適切に処方される場合、眼の適応症（ｏｐｔａｌｍｉｃ ｏｒ ｏｃｕｌａｒ）に対しても投与され得る。
【０１３３】
本発明の活性化合物の有効量は、約０．０１〜５０ｍｇ／ｋｇ体重であることが期待され、１〜２０ｍｇ／ｋｇの範囲であることが好ましい。臨床的な適用における投与量は、患者の年齢、体重および症状、投与経路、病気の性質および重篤度を考慮して、専門的に調整されなければならない。一般的に、調製物は、１日当たり約１００ｍｇから約１０００ｍｇ、１日１回〜３回、経口経路により投与されることが期待される。
【０１３４】
本発明の化合物、その調製方法およびその生物学的活性は、以下の実施例の実験からさらに明らかとなる。これらの実施例は、単に例示として示されており、そして本発明をこの実施例の範囲に限定するものとは見なされない。全ての融点は、Ｋｏｆｌｅｒのブロックの使用により算定されており、未補正である。溶液は、特定されない場合は、４０℃／２ｋＰａでエバポレートされた。薄層クロマトグラフィーは、蛍光指示薬を含有するシリカプレートの使用によって行われた；ＵＶ光によって検出される。核磁気共鳴（ＮＭＲ）スペクトル特性は、基準化合物としてのテトラメチルシラン（ＴＭＳ）に対して百万分率（ｐｐｍ）で表される化学シフト（δ）を示す。シグナルの多重度は、一重線（ｓ）、二重線（ｄ）、二重の二重線（ｄｄ）、多重線（ｍ）、三重線（ｔ）、または四重線（ｑ）として報告される；他の略号には、ブロード（ｂｒ）なシグナル、芳香環プロトン（ａｒｏｍ．）、ヘキサジューテリオジメチルスルホキシドに対するｄ６−ＤＭＳＯ、酸化重水素に対するＤ２Ｏ、重水素化ナトリウムに対するＮａＯＤ、およびジューテリオクロロホルムに対するＣＤＣｌ３が包含される。他の略号は通常どおりである。
【０１３５】
以下の実施例は、例示を意図するものであり、本発明の限定を意図するものではない。
【実施例】
【０１３６】
Ｉ．式ＩＩの中間体の合成
Ａ．分割された式ＸＩの前駆体
実施例１
（Ｒ）−２−Ｏ−テトラヒドロピラニル−１−Ｏ−ｐ−トルエンスルホニルプロパン−１，２−ジオール．
イソブチル（Ｒ）−ラクテート（７３ｇ， ０．５モル，Ｍｅｒｃｋ）と３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン（７０ｇ， ０．８３モル，Ｍｅｒｃｋ）との混合物を、ジメチルホルムアミド（４ｍｌ）中で５Ｍ塩化水素で処理し、塩化カルシウムで保護された２５０ｍｌの丸底フラスコ中で室温にて一晩放置した。酸化銀（１５ｇ）を加え、混合物を２時間マグネチックスターラーを用いて撹拌し、次いで濾過した。この生成物を蒸留（１３Ｐａ，沸点９４〜９６℃）によって単離して、イソブチル２−Ｏ−テトラヒドロピラニル−（Ｒ）−ラクテート（１０２．５ｇ， ８９％）を無色のオイルとして得た。
【０１３７】
１リットルの三ツ口丸底フラスコをオーブンで乾燥し、そして塩化カルシウム保護管を有する還流冷却器、２５０ｍｌの滴下ロート、および磁気撹拌子を取り付けた。次いで、それに、水素化リチウムアルミニウム（１５．８ｇ， ０．４１５モル）とエーテル（５００ｍｌ， 五酸化リンから蒸留した）との懸濁液を入れ、そして氷水浴中に置いた。
【０１３８】
混合物が連続して穏やかな還流状態になるようなスピードで撹拌しながら、イソブチル２−Ｏ−テトラヒドロピラニル−（Ｒ）−ラクテートの溶液を（約３０分）滴下した。冷却浴を取り除き、混合物を外から加熱することによって、さらに３時間還流下で撹拌した。次いで、氷水浴によって再び冷却し、そして酢酸エチル（７５ｍｌ）を２０分間にわたって加え、次いで水（１５ｍｌ）および４Ｍ ＮａＯＨ（１５ｍｌ）を加えた。次いで、得られた混合物をＣｅｌｉｔｅ ５２１（Ｊａｎｓｓｅｎ）上で吸引濾過し、そしてクロロホルム（５００ｍｌ）で洗浄した。合わせた濾液を真空下に置き、残渣をエーテル（３００ｍｌ）中に再溶解させ、そして無水硫酸マグネシウム（５０ｇ）を加えた。室温で一晩放置した後、この混合物を吸引濾過し、エーテル（２００ｍｌ）で洗浄し、そしてその濾液の溶媒を真空下で除いた。残留したオイルを蒸留（１３Ｐａ，７５〜７６℃）することによって、２−Ｏ−テトラヒドロピラニル−（Ｒ）−プロパン−１，２−ジオール（６７．５ｇ， ０．４２２モル， ９５％）を無色のオイルとして得た。
【０１３９】
２−Ｏ−テトラヒドロピラニル−（Ｒ）−プロパン−１，２−ジオール（６７．２ｇ， ０．４２モル）のピリジン（６００ｍｌ）溶液を、磁気撹拌子および塩化カルシウム管で保護されているサイドチューブを有する５００ｍｌの滴下ロートを備えた２リットルの丸底フラスコに入れた。４−ジメチルアミノピリジン（２ｇ）を加え、このフラスコを氷水冷浴に入れ、そしてｐ−トルエンスルホニルクロライド（９１ｇ， ０．４７７モル）のピリジン（３００ｍｌ）溶液を撹拌しながら１時間にわたって加えた。この混合物を氷冷しながらさらに３時間撹拌し、そして一晩冷蔵装置内で４℃に保った。次いで、水（２０ｍｌ）をこの混合物に加え、そして１時間放置した後、ピリジン（約３００ｍｌ）を真空下で留去した。残渣を酢酸エチル（２．５リットル）で希釈し、そして水（３００ｍｌ）と共に振とうした。下側の水層を分離した後、有機層を水で洗浄（３００ｍｌで２度）し、真空下でエバポレートし、そして残渣を真空下でトルエンと共にエバポレートした（２５０ｍｌで４度）。残留したコハク色のオイルをシリカゲルクロマトグラフィー（クロロホルムで溶出）によって精製することにより、（Ｒ）−２−Ｏ−テトラヒドロピラニル−１−Ｏ−ｐ−トルエンスルホニルプロパン−１，２ジオール１２２ｇ（０．３９モル，９３％）を濃厚な無色のオイル（ＲＦ ０．６０（ＴＬＣ，クロロホルム））として得た。この生成物を、＋４℃で数カ月間、明らかな分解なしに保存した。
【０１４０】
【化４３】
実施例２
（Ｓ）−２−Ｏ−テトラヒドロピラニル−１−Ｏ−ｐ−トルエンスルホニルプロパン−１，２−ジオール．
エチルＬ−（−）ラクテート（５９ｇ， ０．５モル，Ｍｅｒｃｋ）と３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン（７０ｇ， ０．８３モル）との混合物を、実施例１に記載のようにして、正確に扱い、そして処理して、蒸留（２ｋＰａ， １０２−１０４℃）後、エチル２−Ｏ−テトラヒドロピラニル−（Ｓ）−ラクテート（９８ｇ， ０．４８５モル，９７％）を無色のオイルとして得た。
【０１４１】
この物質（９１ｇ， ０．４５モル）を水素化リチウムアルミニウムで実施例２に記載のように処理して、蒸留（１３Ｐａ， ７２−７５℃）後、２−Ｏ−テトラヒドロピラニル−（Ｓ）−プロパン−１，２−ジオール（６７．７ｇ， ０．４２３モル，９４％）を無色のオイルとして得た。
【０１４２】
実施例１に記載の条件にした後、２−Ｏ−テトラヒドロピラニル−（Ｓ）−プロパン−１，２−ジオール（６７．２ｇ，０．４２モル）を、（Ｓ）−２−Ｏ−テトラヒドロピラニル−１−Ｏ−ｐ−トルエンスルホニルプロパン−１，２−ジオールに変換した。シリカゲルクロマトグラフィー（クロロホルムで溶出）によって精製することにより、生成物（１２１ｇ， ０．３８６モル，９２％）を濃厚な無色のオイル（クロマトグラフィー的に、ＴＬＣ， ＲＦ ０．６０（クロロホルム）で均一）として得た。
【０１４３】
【化４４】
Ｂ．式ＩＩの化合物
実施例３
９−（Ｓ）−（２−ヒドロキシプロピル）アデニン
微粉末化したアデニン（１３．６ｇ； ０．１モル）と炭酸セシウム（１６．４ｇ； ０．０５モル）とのジメチルホルムアミド（４００ｍｌ， 五酸化リンから蒸留）中の懸濁液を、２５０ｍｌの滴下ロートおよび塩化カルシウム保護管を備えた１リットルの丸底フラスコ中に入れた。この混合物を１００℃に予熱し、そして（Ｓ）−（２−Ｏ−テトラヒドロピラニル−１−Ｏ−ｐ−トルエンスルホニル）プロパン−１，２−ジオール（３１．４ｇ， ０．１モル）のジメチルホルムアミド（２００ｍｌ）溶液をマグネチックスターラーで撹拌しながら３０分間にわたって滴下した。得られた透明の溶液をさらに６時間１００℃で加熱し、冷却し、そして溶媒を５０℃／１３Ｐａで留去した。残渣を沸騰したクロロホルムで抽出（３００ｍｌで３度）し、濾過し、そして真空下でその濾液の溶媒を除いた。残渣を、沸騰エタノールから結晶化することにより、９−（Ｓ）−（２−Ｏ−テトラヒドロピラニルオキシプロピル）アデニン（１３．２ｇ， ０．０４８モル，４８％）、ＲＦ ０．４０（ＴＬＣ，クロロホルム−メタノール，４：１）を得た。融点１７２℃。
【０１４４】
【化４５】
９−（Ｓ）−（２−Ｏ−テトラヒドロピラニルオキシプロピル）アデニン（１３ｇ， ０．０４７モル）の０．２５Ｍ硫酸（３００ｍｌ）溶液を、一晩室温で放置し、そして飽和水酸化バリウム水溶液でｐＨ７．０−７．１まで中和した（ｐＨメーター使用）。得られた懸濁液を８０℃まで昇温し、そして３０分間放置した後、Ｃｅｌｉｔｅ ５２１（Ｊａｎｓｓｅｎ）層を通して濾過し、沈澱物を沸騰水（５００ｍｌ）で洗浄した。合わせた濾液および洗浄液を真空下でエバポレートして、乾燥させ、その残渣をエタノールと共にエバポレート（２００ｍｌで２度）し、そして沸騰エタノール（エーテルを添加して濁った状態）から結晶化した。この生成物を濾過により回収して、９−（Ｓ）−（２−ヒドロキシプロピル）アデニン（７．７ｇ， ０．０４モル，８５％）を得た。融点２０２℃。
【０１４５】
【化４６】
実施例４
９−（Ｒ）−（２−ヒドロキシプロピル）アデニン．
アデニン（１３．６ｇ， ０．１モル）と（Ｒ）−（２−Ｏ−テトラヒドロピラニル−１−Ｏ−ｐ−トルエンスルホニルプロパン−１，２−ジオール（３１．４ｇ， ０．１モル）との縮合を、炭酸セシウム（１６．４ｇ， ０．０５モル）の存在下で、実施例３に記載のようにして行った。沸騰クロロホルムによる抽出の後、エタノール（エーテルを添加して濁った状態）から残渣を結晶化して、９−（Ｒ）−（２−Ｏ−テトラヒドロピラニルオキシプロピル）アデニン（１４．６ｇ， ０．０５３モル，５３％）を得た。融点１７１〜１７２℃。
【０１４６】
【化４７】
９−（Ｒ）−（２−テトラヒドロピラニルオキシプロピル）アデニン（１４．０ｇ， ０．０５モル）の０．２５Ｍ硫酸溶液を、一晩室温で放置し、そして実施例３に記載のように処理した。この生成物を単離することにより、９−（Ｒ）−（２−ヒドロキシプロピル）アデニン（８．１ｇ， ０．０４２モル，８４％）を得た。融点２０２℃。
【０１４７】
【化４８】
実施例５
９−（Ｒ）−（２−ヒドロキシプロピル）−２，６−ジアミノプリン
２，６−ジアミノプリン（１５ｇ， ０．１モル）と炭酸セシウム（１６．４ｇ， ０．０５モル）とのジメチルホルムアミド（２５０ｍｌ）懸濁液を、磁気撹拌子および塩化カルシウム保護管を備えた５００ｍｌ丸底フラスコに入れ、そして１００℃に予熱した。（Ｒ）−（２−Ｏ−テトラヒドロピラニル−１−Ｏ−ｐ−トルエンスルホニルプロパン−１，２−ジオール（３２．８ｇ， ０．１０４モル）を一度に加え、そしてこの混合物を１００℃で２０時間撹拌した。溶媒を５０℃／１３Ｐａでエバポレートし、そして残渣を沸騰クロロホルムで抽出した（３００ｍｌで３度）。濾液をシリカゲルカラム（５００ｍｌ）で分離して、生成物をクロロホルム−メタノール混合液（９５：５）で溶出し、酢酸エチル（エーテルを添加して濁った状態）から結晶化した後、９−（Ｒ）−（２−テトラヒドロピラニルオキシプロピル）−２，６−ジアミノプリン（１４．２ｇ， ０．０４８５モル， ４８．５％）を得た。融点１５０〜１５２℃。
【０１４８】
【化４９】
９−（Ｒ）−（２−テトラヒドロピラニルオキシプロピル）−２，６−ジアミノプリン（１１．７ｇ， ０．０４モル）の０．２５Ｍ硫酸（４００ｍｌ）溶液を一晩室温に放置し、アンモニア水で中和し、そして真空下で濃縮した。この溶液をＤｏｗｅｘ ５０Ｘ８のカラム（２５０ｍｌ， １００〜２００メッシュ，酸型）にかけ、そして溶出物のＵＶ吸収および導電率が初期値まで低下するまで、このカラムを水で洗浄した。この生成物を希釈した（１：１０）アンモニア水で溶出し、ＵＶ吸収を示す溶出液を集めて、そして真空下で溶媒を除いた。残渣をエタノールから結晶化することにより、９−（Ｒ）−（２−ヒドロキシプロピル）−２，６−ジアミノプリン（６．５ｇ， ０．０３１モル， ７７．５％）を得た。融点１９２℃。
【０１４９】
【化５０】
実施例６
９−（Ｓ）−（２−ヒドロキシプロピル）−２，６−ジアミノプリン
実施例５と同様にして、（Ｓ）−２−Ｏ−テトラヒドロピラニル−１−Ｏ−ｐ−トルエンスルホニルプロパン−１，２−ジオール（３４．５ｇ， ０．１１モル）を用いて、合成を行った。粗反応生成物を０．２５Ｍ硫酸（３００ｍｌ）に溶解し、そして一晩室温で放置した。この混合物をアンモニアによってアルカリ性にし、そして真空下でエバポレートしておよその容量とした。次いで、その１５０ｍｌをＤｏｗｅｘ ５０Ｘ８（酸型）のカラム（３００ｍｌ， １００〜２００メッシュ）にかけた。溶出物のＵＶ吸収が消失するまで、カラムを完全に洗浄した。希釈した（１：１０）アンモニアで引き続き溶出してＵＶ吸収を示す画分を得、真空下で溶媒を除き、そしてメタノールから結晶化することにより、粗９−（Ｓ）−（２−ヒドロキシプロピル）−２，６−ジアミノプリンを得た（含量、＞９５％； ９．２ｇ， ０．０４４モル，４４％）。これは次の合成工程に続けて用いた。［α］Ｄ＝＋４１．２°（ｃ＝０．５， ０．１Ｍ ＨＣｌ）。
【０１５０】
実施例７
９−（Ｒ）−（２−ヒドロキシプロピル）グアニン
２−アミノ−６−クロロプリン（１８．６ｇ， ０．１１モル，Ｍａｃｋ）と炭酸セシウム（１７．９ｇ， ０．０５５モル）とのジメチルホルムアミド（３５０ｍｌ）懸濁液を、塩化カルシウム保護管下で１００℃で撹拌し、そして（Ｒ）−（２−Ｏ−テトラヒドロピラニル−１−Ｏ−ｐ−トルエンスルホニルプロパン−１，２−ジオール（４２ｇ， ０．１３４モル）のジメチルホルムアミド（１００ｍｌ）溶液を３０分間にわたる間隔で滴下した。この混合物をさらに６時間１００℃で撹拌し、冷却し、そして５０℃／１３Ｐａでエバポレートした。残渣を沸騰クロロホルムで抽出（３００ｍｌで３度）し、そしてこの抽出液を真空下で濃縮した。この物質をクロロホルム中シリカゲル（５００ｍｌ）カラムにかけ、そして同じ溶媒で溶出した。関係あるＵＶ吸収画分をプールし、エバポレートし、そして真空下で乾燥した。９−（Ｒ）−（２−テトラヒドロピラニルオキシプロピル）−２−アミノ−６−クロロプリンを黄色の不定形の泡状物として得た（ＲＦ ０．６４（クロロホルム−メタノール、９５：５中でのＴＬＣ）。
【０１５１】
【化５１】
９−（Ｒ）−（２−テトラヒドロピラニルオキシプロピル）−２−アミノ−６−クロロプリン（１０ｇ， ０．０３２モル）の１Ｍ塩酸（２００ｍｌ）溶液を、１時間撹拌しながら還流し、冷却し、アンモニアでアルカリ性にし、そして真空下でエバポレートした。残渣を沸騰水から結晶化（活性炭で脱色）することにより、９−（Ｒ）−（２−ヒドロキシプロピル）グアニン（６．０ｇ， ０．０２９モル， ９１％）を得た。融点２５５℃。
【０１５２】
【化５２】
実施例８
９−（Ｓ）−（２−ヒドロキシプロピル）グアニン．
塩化カルシウム保護管を備えた１リットルの丸底フラスコ中の蒸留ジメチルホルムアミド（３００ｍｌ）中のミネラルオイル（Ｊａｎｓｓｅｎ）中の６０％ ＮａＨ分散液の４ｇ（０．１モル）のスラリーに、２−アミノ−６−クロロプリン（１７．５ｇ， ０．１モル，Ｍａｃｋ）を一度に加え、そしてこの混合物を１時間室温でマグネチックスターラーで撹拌した。次いで、（Ｓ）−（２−Ｏ−テトラヒドロピラニル−１−Ｏ−ｐ−トルエンスルホニルプロパン−１，２−ジオール（３４．５ｇ， ０．１１モル）を、一度に加え、この混合物を６０℃で３時間および８０℃で８時間撹拌した。次いで、溶媒を５０℃／１３Ｐａで除去し、そして残渣を沸騰クロロホルムで粉砕（３００ｍｌで２度）し、そして濾過した。この濾液をシリカゲルカラム（３００ｍｌ）でクロマトグラフすることにより、９−（Ｓ）−（２−Ｏ−テトラヒドロピラニルオキシプロピル）−２−アミノ−６−クロロプリン（１０．９ｇ， ０．０３５モル，３５％）を不定形の泡状物として得た。この物質を、２Ｍ塩酸（１００ｍｌ）とジオキサン（１００ｍｌ）との混合物中で１時間還流し、冷却し、アンモニア水で中和し、そして真空下でエバポレートした。この残渣を水から結晶化することにより（活性炭で脱色）、９−（Ｓ）−（２−ヒドロキシプロピル）グアニン（５．７ｇ， ０．０２７モル，７７％）を得た。融点２５６℃。
【０１５３】
【化５３】
実施例９
１−（Ｒ）−（２−ヒドロキシプロピル）シトシン
蒸留ジメチルホルムアミド（３００ｍｌ）中のシトシン（８．５ｇ， ７６ミリモル，Ｆｌｕｋａ）と、炭酸セシウム（１３ｇ， ４０ミリモル）と、（Ｒ）−２−Ｏ−テトラヒドロピラニル−１−Ｏ−ｐ−トルエンスルホニルプロパン−１，２−ジオール（２４ｇ， ７６ミリモル）との混合物を、１００℃で１２時間撹拌し、そして熱い状態で濾過した。この濾液の溶媒を高真空で除き、そして残渣を沸騰クロロホルムで粉砕（２００ｍｌで３度）し、そして濾過した。この濾液をシリカゲルカラムでクロマトグラフィーにかけることにより、１−（Ｒ）−（２−テトラヒドロピラニルオキシプロピル）シトシン（４．６ｇ，１８ミリモル，２３．５％）を得た（酢酸エチル−石油エーテル混合物から結晶化した）。融点２５９〜２６０℃。
【０１５４】
【化５４】
１−（Ｒ）−（２−テトラヒドロピラニルオキシプロピル）シトシン（４．０ｇ， １６ミリモル）の０．２５Ｍ硫酸（５０ｍｌ）溶液を一晩室温で放置し、そして飽和水酸化バリウム水溶液でｐＨ７．０〜７．１まで中和した。この懸濁液を８０℃に加温し、Ｃｅｌｉｔｅ ５２１（Ｊａｎｓｓｅｎ）層を通して濾過し、そして沸騰水（５００ｍｌ）でフィルターを洗浄した。この濾液を真空下で乾燥状態にし、そして残渣をエタノール（２００ｍｌ）で共蒸留（ｃｏｄｉｓｔｉｌｌｅｄ）した。この残渣をエタノール（エーテルを添加して濁った状態）から結晶化することにより、１−（Ｒ）−（２−ヒドロキシプロピル）シトシン（２．５ｇ， １５ミリモル， ９４％）を得た。融点２４６℃。
【０１５５】
【化５５】
実施例１０
１−（Ｒ）−（２−ヒドロキシプロピル）シトシン
蒸留ジメチルホルムアミド（３００ｍｌ）中の水素化ナトリウム（４ｇ， ０．１モル， ６０％懸濁液）のスラリーに、４−メトキシ−２−ピリミドン（１２．６ｇ， ０．１モル）を撹拌しながら加え、そしてこの混合物を水分を除いた状態（塩化カルシウム保護管）で１時間撹拌した。得られた透明の溶液を（Ｒ）−２−Ｏ−−テトラヒドロピラニル−１−Ｏ−ｐ−トルエンスルホニルプロパン−１，２−ジオール（３１．４ｇ， ０．１モル）で処理し、そしてこの反応混合物を撹拌しながら８時間８０℃で加熱した。次いで、溶媒を真空下で除去し、そして残渣を沸騰クロロホルムで粉砕（２００ｍｌで３度）し、そして濾過した。この濾液を、シリカクロマトグラフィーによって精製することにより、１−（Ｒ）−（２−Ｏ−テトラヒドロピラニルオキシプロピル）−４−メトキシ−２−ピリミドン（１６．９ｇ， ６３ミリモル， ６３％）を不定形の泡状物として得た。
【０１５６】
この生成物をアンモニアのメタノール溶液（５００ｍｌ， ０℃で飽和）と共に１１０℃で８時間スチール製のオートクレーブ中で加熱し、冷却し、そしてこの懸濁液を真空下でエバポレートした。残渣を０．２５Ｍ硫酸（３００ｍｌ）に溶解し、そしてこの溶液を７０℃で５時間加温した。混合物をアンモニア水で中和し、Ｃｅｌｉｔｅ ５２１（Ｊａｎｓｓｅｎ）層を通して濾過し、そして濾液を真空下で濃縮した。得られた溶液をＤｏｗｅｘ ５０Ｘ８のカラム（２５０ｍｌ， １００〜２００メッシュ（酸型））にかけ、そしてこのカラムを溶出物のＵＶ吸収が消失するまで水で溶出した。希釈した（１：１０）アンモニア水で引き続き溶出することにより、ＵＶ吸収を示す画分を得、これをプールし、そして真空下でエバポレートした。エタノールから結晶化することにより、１−（Ｒ）−（２−ヒドロキシプロピル）シトシン（７．８ｇ， ４６ミリモル， ７３％）を得、これは実施例９に従って調製した生成物と一致した。
【０１５７】
実施例１１
９−（Ｒ）−（２−ヒドロキシプロピル）−Ｎ６−ベンゾイルアデニン
９−（Ｒ）−（２−ヒドロキシプロピル）アデニン（５．８ｇ， ３０ミリモル）のピリジン（１６０ｍｌ）懸濁液を、クロロトリメチルシラン（２６ｍｌ）で処理し、そしてこの混合物を１時間撹拌した。次いで、塩化ベンゾイル（２０ｍｌ）を加えて、そしてこの混合物をさらに２時間撹拌した。反応混合物を氷水浴中に入れ、そして氷冷水（３０ｍｌ）、その後に濃アンモニア水（７０ｍｌ）を撹拌しながら１５分間かけて滴下した。混合物を真空下でエバポレートした。残渣をエタノールと共蒸留（１５０ｍｌで３度）し、そして沸騰水から結晶化した。この結晶生成物を回収し、エタノール（エーテルを添加して濁った状態）から再結晶することにより、９−（Ｒ）−（２−ヒドロキシプロピル）−Ｎ６−ベンゾイルアデニン（７．８ｇ， ２６ミリモル，８７％）得た。融点２２７℃。ＲＦ ０．４０（ＴＬＣ， クロロホルム−メタノール，４：１）。
【０１５８】
【化５６】
実施例１２
９−（Ｓ）−（２−ヒドロキシプロピル）−Ｎ６−ベンゾイルアデニン
９−（Ｓ）−（２−ヒドロキシプロピル）アデニン（６．８ｇ， ３５ミリモル）のピリジン（１６０ｍｌ）撹拌懸濁液に、クロロトリメチルシラン（２６ｍｌ）を加え、そしてこの混合物を１時間撹拌した。塩化ベンゾイル（２０ｍｌ）を一度に加え、混合物をさらに２時間撹拌し、そして氷水浴で冷却した。氷冷水（３０ｍｌ）および濃アンモニア水（７０ｍｌ）を１５分間隔にわたって加え、そして混合物をさらに３０分間０℃で撹拌した。溶媒を真空下でエバポレートし、そして残渣を水と共蒸留した。水から結晶化した後、生成物を回収し、そしてエタノールから再結晶することにより、９−（Ｓ）−（２−ヒドロキシプロピル）−Ｎ６−ベンゾイルアデニン（４．４ｇ， １５ミリモル，４３％）、融点２３０℃を得た。合わせた母液を真空下でエバポレートし、そして残渣をエタノール（１５０ｍｌ）と共に３０分間撹拌した。懸濁液を濾過し、そして無機塩の沈澱物をエタノール（５０ｍｌ）で洗浄し、そして捨てた。濾液を真空下で乾燥状態にし、そして残渣をクロロホルムで粉砕（１５０ｍｌで２度）し、そして濾過した。濾液をシリカゲルカラム（２００ｍｌ）でクロマトグラフィーにかけ、酢酸エチル（石油エーテルを添加して濁った状態）から結晶化した後、さらに生成物を得た。総収量、７．４ｇ（２５ミリモル，７１．５％）。
【０１５９】
【化５７】
実施例１３
９−（Ｓ）−（２−ヒドロキシプロピル）−Ｎ２−ベンゾイルグアニン
クロロトリメチルシラン（２０ｍｌ）を、９−（Ｒ）−（２−ヒドロキシプロピル）グアニン（５．０ｇ， ２４ミリモル）のピリジン（１３０ｍｌ）撹拌懸濁液に一度に加え、そして１時間撹拌した後、塩化ベンゾイル（１６ｍｌ）を一度に加えた。この混合物をさらに２時間撹拌し、氷水浴で冷却し、そして氷水（２４ｍｌ）次いで、濃アンモニア水（５６ｍｌ）を１０分間隔にわたって滴下した。この反応混合物をさらに３０分間撹拌し、そして真空下でエバポレートした。残渣を水（２００ｍｌ）と酢酸エチル（２００ｍｌ）との混合物で粉砕し、濾過し、水、エーテルで洗浄し、そして真空下で乾燥した。得られた９−（Ｓ）−（２−ヒドロキシプロピル）−Ｎ２−ベンゾイルグアニン（３．４ｇ， １１ミリモル， ４５％）はクロマトグラフィー的に純粋であった：ＲＦ ０．３３（ＴＬＣ， クロロホルム−メタノール，４：１）。融点２７８℃。
【０１６０】
【化５８】
実施例１４
９−（Ｒ）−（２−ヒドロキシプロピル）−Ｎ２−ベンゾイルグアニン
９−（Ｒ）−（２−ヒドロキシプロピル）グアニン（２．５ｇ， １２ミリモル）と、ピリジン（６５ｍｌ）と、クロロトリメチルシラン（１０ｍｌ）とからなる反応混合物を、栓付きフラスコ中で１時間室温にて撹拌し、そして塩化ベンゾイル（８ｍｌ）を一度に加えた。さらに２時間撹拌した後、この混合物を氷および氷水（１２ｍｌ）で冷却し、次いで、濃アンモニア水（２８ｍｌ）を５分間にわたって加えた。０℃で３０分後、溶媒を真空下でエバポレートし、そして残渣をエタノールと共蒸留した。８０％エタノール水溶液から結晶化することにより、９−（Ｒ）−（２−ヒドロキシプロピル）−Ｎ２−ベンゾイルグアニン（２．４ｇ， ７．６ミリモル，６３．５％）、融点２７６℃を得た。
【０１６１】
【化５９】
ＩＩ． 式ＸＶＩＩの中間体の合成
実施例１５
（Ｓ）−２−（ジ（２−プロピル）ホスホニルメトキシ）−１−（ｐ−トルエンスルホニルオキシ）プロパン
滴下ロートおよび塩化カルシウム保護管を備えた１リットルの丸底フラスコ中に入れた水素化ナトリウム（１７．２ｇ， オイル中６０％分散液，０．４３モル）のジメチルホルムアミド（４００ｍｌ）中の懸濁液に、撹拌し、そして氷で冷却しながら、３０分間にわたって（Ｓ）−２−Ｏ−テトラヒドロピラニル−１，２−プロパンジオール（６９．２ｇ， ０．４３モル）を滴下した。この懸濁液を０℃でさらに１時間撹拌し、そして臭化ベンジル（５１ｍｌ， ０．４３モル）を０℃で滴下した。混合物を０℃で４時間撹拌し、そして室温で４８時間放置した。メタノール性アンモニア（３０％溶液、２０ｍｌ）を加え、そして２時間放置後、溶媒を真空下で除去した。酢酸エチル（５００ｍｌ）を加え、そしてこの混合物を水（１００ｍｌで４度）で洗浄した。有機層をエバポレートし、そして７０％メタノール水溶液（４００ｍｌ）中の得られたオイルを５０ｍｌのＤｏｗｅｘ ５０Ｘ８（酸型）で４時間還流しながら撹拌した。温かい混合物を濾過し、メタノールで洗浄し、そしてこの濾液を真空下でエバポレートした。残留オイルをエーテル（２００ｍｌ）中にとり、水（５０ｍｌ）で洗浄し、乾燥し、そして真空下で蒸留した。収量、６０．８ｇ（８５％，沸点１００〜１０５℃／２０Ｐａ）（Ｓ）−１−Ｏ−ベンジル−１，２−プロパノール、［α］Ｄ＝−１３．６°（ｃ＝０．５， ＣＨＣｌ３）。
【０１６２】
１，２−ジクロルエタン（２００ｍｌ）中のこの物質（０．３７モル）を、乾燥塩化水素を０℃で２時間同時に導入しながら、パラホルムアルデヒド（２０ｇ）および塩化カルシウム（１０ｇ）と共に撹拌した。この混合物を真空下に置き、残渣をトルエン（５０ｍｌで３度）と共蒸留し、そしてトリ（２−プロピル）ホスファイト（５０ｇ）を加えた。この混合物を撹拌しながら１１０℃まで加熱し、そして発生した揮発物質を留去した。発熱反応がおさまった後、混合物を１５０℃まで加熱し、そして最後に揮発物を１４０℃／１ｋＰａで留去した。得られた物質をアルミナのカラム（２００ｍｌ）を通して濾過し、ベンゼン（０．５リットル）で溶出した。この溶出物をエバポレートし、そして残渣を真空下で蒸留して、（Ｓ）−１−ベンジルオキシ−２−［ジ（２−プロピル）ホスホニルメトキシ］プロパン（４４ｇ， ３５％， 沸点１２５〜１３０℃／１３Ｐａ）を得た。
【０１６３】
【化６０】
メタノール（４００ｍｌ）中のこの生成物（４４ｇ， ０．１２８モル）を、大気圧下で、１０％の活性炭担持パラジウム（１．５ｇ， Ｍｅｒｃｋ）および濃塩酸（０．７モル）と共に、水素化した。この混合物を濾過し、濾液をトリエチルアミンを加えることによりアルカリ性にし、そして真空下でエバポレートした。エーテル（２００ｍｌ）中の残渣を水（２０ｍｌで２度）で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、そして真空下でエバポレートすることにより、（Ｓ）−２−（ジ−（２−プロピル）ホスホニルメチル）プロパン−１，２−ジオール（２４．４ｇ， ７５％）を無色のオイルとして得た。
【０１６４】
ピリジン（２００ｍｌ）中のこの残渣（２４．４ｇ， ９６ミリモル）およびジメチルアミノピリジン（１ｇ）を、０℃で撹拌しながら塩化トシル（２２ｇ， ０．１１５モル）のピリジン（１００ｍｌ）溶液を滴下して処理し、そしてこの混合物を０℃で一晩置いた。水（１０ｍｌ）を加え、そしてこの溶媒を元の容量の約半量になるまで真空下でエバポレートした。酢酸エチル（３００ｍｌ）を加え、この混合物を、水、１Ｍ ＨＣｌ（酸性にする）、水、飽和炭酸水素ナトリウム、および水（１００ｍｌずつ）で連続的に洗浄した。最後にこの溶液を硫酸マグネシウムで乾燥し、そして真空下でエバポレートすることにより、粗生成物を得た。この粗生成物をシリカゲルカラムのクロマトグラフィー（クロロホルムによって溶出）によって精製した。（Ｓ）−２−［ジ（２−プロピル）ホスホニルメトキシ］−１−ｐ−トルエンスルホニルオキシプロパンが、濃厚な黄色のオイルとして得られた。これはさらなる調製物のために用いられた（２８ｇ， ６９ミリモル）。
【０１６５】
実施例１６
（Ｒ）−２−［ジ（２−プロピル）ホスホニルメトキシ］−１−ｐ−トルエンスルホニルオキシプロパン
実施例１５と本質的に同様にして、この合成を行ったが、（Ｒ）−２−Ｏ−テトラヒドロピラニル−１，２−プロパンジオール（４２ｇ， ０．２６２モル）を用いて開始した。１−Ｏ−ベンジル−（Ｒ）−プロパン−１，２−ジオールを、真空下で蒸留することによって得た（３３ｇ， ７６％，沸点９８〜１０２℃／Ｐａ）。［α］Ｄ＝−１２．２°（ｃ＝０．５， ＣＨＣｌ３）。クロロメチル化およびトリ（２−プロピル）ホスファイトとの反応により、粗リン酸ジエステル（３２ｇ）が得られた。これは１０％の活性炭担持パラジウム触媒（１ｇ）および塩酸（０．５ｍｌ）を有するメタノール中で水素化した。中間体を実施例１５に記載のように操作した後、（Ｒ）−２−［ジ（２−プロピル）ホスホニルメトキシ］−１−ｐ−トルエンスルホニルオキシプロパン（２４ｇ， ５９ミリモル）が得られた。
【０１６６】
ＩＩＩ． 式Ｉの生成物の合成
実施例１７
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）アデニン
９−（Ｒ）−（２−ヒドロキシプロピル）−Ｎ６−ベンゾイルアデニン（３ｇ， １０ミリモル）とジ（２−プロピル）ｐ−トルエンスルホニルオキシメチルホスホネート（４．２ｇ， １２ミリモル）との混合物を、ジメチルホルムアミド（２５ｍｌで２度）と４０℃／１３Ｐａで共蒸留した。この残渣をジメチルホルムアミド（５０ｍｌ）中に再溶解し、氷で冷却し、そして水素化ナトリウム（１．２ｇ， ３０ミリモル，オイル中６０％分散液）を一度に加えた。得られた混合物を塩化カルシウム保護管をつけて室温下で４８時間撹拌した。メタノール（１５０ｍｌ）中の０．１Ｍナトリウムメトキシド溶液を加え、そしてこの混合物を湿気を遮断して一晩置いた。次いで、Ｄｏｗｅｘ ５０Ｘ８（酸型）を加えて混合物を酸に反応させ、次いでトリエチルアミンを加えて懸濁液をアルカリに反応させた。濾過し、そしてメタノール（２００ｍｌ）で樹脂を洗浄した後、濾液を乾燥状態までエバポレートした（最終的に４０℃／１３Ｐａ）。水（２００ｍｌ）中の残渣を、エーテル（１００ｍｌで２度）で抽出し、そして水相を真空下で濃縮した（約１００ｍｌまで）。この溶液をＤｏｗｅｘ ５０Ｘ８カラム（２５０ｍｌ）上に付与し、そして溶出物のＵＶ吸収が初期レベルまで下がるまで、２０％メタノール水溶液で洗浄した。次いで、この生成物を希（１：１０）アンモニアで溶出し、適切なＵＶ吸収性画分をプールし、そして真空下でエバポレートした。残渣をエタノール（５０ｍｌで２度）と共蒸留し、そして一晩五酸化リンで１３Ｐａで乾燥することにより、粗ジ（２−プロピル）エステル（３ｇ）， ＲＦ＝０．５５（ＴＬＣ クロロホルム−メタノール， ４：１）が得られた。
【０１６７】
アセトニトリル（５０ｍｌ）およびブロモトリメチルシラン（５ｍｌ）を、この残渣に加え、そしてこの懸濁液を撹拌によって溶解した。栓付きフラスコ中に室温で一晩置いた後、この混合物を真空下でエバポレートし、そして水（１００ｍｌ）をこの残渣に加えた。この混合物をアンモニア水でアルカリ性にし、そして真空下でエバポレートした。水に溶解した残渣を、Ｄｏｗｅｘ ５０Ｘ８のカラム（２５０ｍｌ， 酸型）に付与した。これを溶出液のＵＶ吸収が下がるまで水で洗浄し、次いでアンモニア水（１：１０）溶液で溶出した。この生成物を含有する画分を真空下で乾燥状態までエバポレートし、そして残渣を濃アンモニアでｐＨ９〜９．５までアルカリ性にすることにより、水（５０ｍｌ）中に再溶解した。この溶液をＤｏｗｅｘ １Ｘ２のカラム（２５０ｍｌ，酢酸型）上に付与した。次いでこれを溶出物のＵＶ吸収が下がるまで０．０２Ｍ酢酸で洗浄した。次いで、酢酸濃度を直線的に上昇させることによって（２リットルで０．０２Ｍ〜１Ｍ）この溶出を持続させ；この生成物を１Ｍ酢酸で溶出した。関連する画分をプールし、真空下でエバポレートし、そして残渣を水（５０ｍｌで３度）と共蒸留した。沸騰水からの結晶化（３容量のエタノールを溶解後に加えた）により、９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）アデニン（１．３５ｇ， ４．７ミリモル，４７％）、融点２７９°を得た。
【０１６８】
【化６１】
実施例１８
９−（Ｓ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）アデニン
９−（Ｓ）−（２−ヒドロキシプロピル）−Ｎ６−ベンゾイルアデニン（３．５７ｇ， １２ミリモル）とジ（２−プロピル）ｐ−トルエンスルホニルオキシメチルホスホネート（５．２５ｇ， １５ミリモル）とのジメチルホルムアミド（５０ｍｌ）溶液を、−２０℃まで冷却し、そして水素化ナトリウム（１．４４ｇ， ３６ミリモル）をオイル中の６０％分散液として一度に加えた。この混合物を０℃で３時間および室温で４８時間湿気から保護しながら撹拌した。さらに、この反応混合物を実施例１７に記載のようにして処理した。Ｄｏｗｅｘ １Ｘ２のカラムでのクロマトグラフィーによって精製した後、生成物を水−エタノールから結晶化することにより、９−（Ｓ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）アデニン（１．９ｇ， ６．７ミリモル，５６％）が得られた。融点２７６〜２７８℃。
【０１６９】
【化６２】
実施例１９
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２，６−ジアミノプリン
９−（Ｒ）−（２−ヒドロキシプロピル）−２，６−ジアミノプリン（２．１ｇ，１０ミリモル）を、ジメチルホルムアミド（４０ｍｌ）とジメチルホルムアミドジメチルアセタール（２５ｍｌ）との混合物中で加温することによって溶解し、そしてこの溶液を栓付きフラスコ中に一晩置いた。混合物を４０℃／１３Ｐａでエバポレートし、そしてジメチルホルムアミド（２０ｍｌで２度）と共蒸留した。５０％のピリジン水溶液（５０ｍｌ）を残渣に加え、次いでドライアイスを加え、この混合物を４０℃／１３Ｐａでエバポレートし、ピリジン（２５ｍｌで４度）と共蒸留し、そしてジ（２−プロピル）ｐ−トルエンスルホニルオキシメチルホスホネート（４．２ｇ， １２ミリモル）を残渣に加えた。次いで、混合物をジメチルホルムアミド（２５ｍｌで２度）と共蒸留し、同じ溶媒（４０ｍｌ）中に再溶解し、そして−１０℃まで冷却した。水素化ナトリウムをオイル中の６０％懸濁液として一度に加え、そしてこの混合物を０℃で３時間および室温で４８時間、湿気から保護した状態で撹拌した。酢酸（１．８ｍｌ， ３０ミリモル）を加え、この混合物を４０℃／１３Ｐａで乾燥状態までエバポレートした。この残渣を希釈した（１：１）アンモニア水に溶解し、（１００ｍｌ）、一晩置き、そして真空下で乾燥状態までエバポレートした。残渣を実施例１５に記載のように、Ｄｏｗｅｘ ５０Ｘ８のカラム（２００ｍｌ）上で脱イオン化し、そしてこのアンモニア溶出物を１３Ｐａで一晩、五酸化リンで乾燥した。
【０１７０】
アセトニトリル（３０ｍｌ）およびブロモトリメチルシラン（３ｍｌ）を加え、そしてこの混合物を栓付きフラスコ中で穏やかに振とうすることによってホモジナイズした。この溶液を一晩置き、そして真空下でエバポレートした。残渣を水（１００ｍｌ）に溶解し、そして３０分間放置後、この溶液をアンモニアによってアルカリ性にし、そしてエバポレートした。残渣を実施例１７に記載のように、Ｄｏｗｅｘ ５０Ｘ８カラム（２００ｍｌ， 酸型）上で脱イオン化した。アンモニア塩の残渣を水（５０ｍｌ）に溶解し、アンモニアを加えることによってｐＨ９〜９．５とし、そしてこの溶液をＳｅｐｈａｄｅｘ Ａ−２５のカラム（２００ｍｌ）上に炭酸水素塩型で付与し、０．０２Ｍ炭酸水素トリエチルアンモニウムによって平衡化した。このカラムを、まずＵＶ吸収が下がるまで平衡化緩衝液によって、次いで直線的なグラジエントの炭酸水素トリエチルアンモニウム（ｐＨ７．５）（０．０２Ｍおよび０．３Ｍ緩衝液、各１リットルから形成された）によって溶出した。この生成物を０．１０〜０．１５Ｍ濃度で溶出し、関連の画分をプールし、真空下でエバポレートし、そして残渣をメタノール（５０ｍｌで３度）と共にエバポレートした。水（２５ｍｌ）に溶解した残渣をＤｏｗｅｘ １Ｘ２のカラム（５０ｍｌ）（アセテート）上に付与し、まず、ＵＶ吸収が消失するまで水で洗浄した。樹脂を３００ｍｌのビーカーに移し、そして１Ｍ酢酸（２００ｍｌ）と共に撹拌した。懸濁液を濾過し、そして樹脂を沸騰水（１リットル）で洗浄した。合わせた濾液を真空下でエバポレートし、そして残渣を水（５０ｍｌで３度）と共蒸留した。残渣を、沸騰水（１００ｍｌ）に溶解し、熱いうちに濾過し、そしてエタノール（１５０ｍｌ）をこの濾液に加えた。氷冷により結晶化した生成物を、濾過により集め、エタノール、エーテルで洗浄し、そして真空下で乾燥した。９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２，６−ジアミノプリン（１．４ｇ， ４．７ミリモル， ４７％）が、遊離の酸（融点２８７℃）として得られた。
【０１７１】
【化６３】
実施例２０
９−（Ｓ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２，６−ジアミノプリン
この化合物を、９−（Ｓ）−（２−ヒドロキシプロピル）−２，６−ジアミノプリンから、本質的にその（Ｒ）−エナンチオマーについての実施例１９に記載のように、調製した。水−エタノールからの遊離酸として結晶化された９−（Ｓ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２，６−ジアミノプリンの収量は、３３％（１．０ｇ， ３．３ミリモル）に達した。融点２７５〜２７８℃。
【０１７２】
【化６４】
実施例２１
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）グアニン
９−（Ｒ）−（２−ヒドロキシプロピル）−Ｎ２−ベンゾイルグアニン（２．５ｇ， ７ミリモル）とジ（２−プロピル）ｐ−トルエンスルホニルオキシメチルホスホネート（２．９ｇ， ８．４ミリモル）との混合物を、ジメチルホルムアミド（２５ｍｌで２度）と４０℃／１３Ｐａで共蒸留し、そして残渣をジメチルホルムアミド（３０ｍｌ）で再溶解した。オイル中の６０％分散液中の水素化ナトリウム（０．８４ｇ， ２１ミリモル）を、一度に加え、そしてこの混合物を室温で湿気を遮断して２４時間撹拌した。メタノール（１００ｍｌ）をこの混合物に加え、次いで、一晩置いて、Ｄｏｗｅｘ ５０Ｘ８（酸型）で中和し、そして濾過した。濾液を高圧で乾燥状態までエバポレートし、そして水（１５０ｍｌ）中の残渣をエーテル（５０ｍｌで２度）で抽出した。この水溶液を真空下で約５０ｍｌまで濃縮し、そしてＤｏｗｅｘ ５０Ｘ８のカラム（１５０ｍｌ）（酸型）上に付与した。これをまず、ＵＶ吸収が下がるまで水で、次いで希釈した（１：１０）アンモニアで洗浄した。このアンモニア画分をエバポレートし、残渣をエタノール（５０ｍｌで２度）と共蒸留し、そして最後に一晩、１３Ｐａで五酸化リンで乾燥した。
【０１７３】
アセトニトリル（４０ｍｌ）およびブロモトリメチルシラン（４ｍｌ）を残渣に加え、そして栓付きフラスコ中で撹拌することによってこの混合物を溶解した。一晩室温で放置後、この混合物を真空下でエバポレートし、そして残渣を水（１００ｍｌ）中に溶解した。３０分後、溶液をアンモニアでアルカリ性にし、そしてエバポレートした。Ｄｏｗｅｘ １Ｘ２での脱イオン化および精製を、本質的に、実施例１７に記載のように行った。最終的な精製された遊離酸型の９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）グアニンを、エーテルを含むエタノールから沈澱させることにより、融点２８６℃を有する物質０．９０ｇ（３ミリモル， ４３％）が得られた。
【０１７４】
【化６５】
実施例２２
９−（Ｓ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）グアニン
９−（Ｓ）−（２−ヒドロキシプロピル）グアニン（１．５７ｇ， ５ミリモル）とジ（２−プロピル）ｐ−トルエンスルホニルオキシメチルホスホネート（２．１ｇ， ６ミリモル）との混合物を、ジメチルホルムアミド（２０ｍｌで２度）と４０℃／１３Ｐａで共蒸留し、そして残渣をジメチルホルムアミド（２０ｍｌ）に再溶解した。水素化ナトリウム（０．６ｇ， １５ミリモル）をオイル中の６０％分散液として一度に加え、そしてこの混合物を３日間室温で湿気を遮断して撹拌した。メタノール（３０ｍｌ）を加え、そして溶液を一晩置いた。Ｄｏｗｅｘ ５０Ｘ８（酸型）での中和、および、濾過の後、濾液を真空下で乾燥状態までエバポレートし、そして実施例１７に記載のように残渣を脱イオン化した。粗ジエステルのアンモニア溶出物を、五酸化リンで１３Ｐａで乾燥した。アセトニトリル（３０ｍｌ）およびブロモトリメチルシラン（３ｍｌ）を加え、そしてこの混合物を撹拌することによって溶解した。室温で一晩置いた後、実施例１７に記載のように反応混合物を処理した。９−（Ｓ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）グアニンが、その（Ｒ）−エナンチオマー（実施例２１）についての記載と同様に、遊離酸として４３％収率（０．６５ｇ， ２．１５ミリモル）で単離された。融点２８７℃。
【０１７５】
【化６６】
実施例２３
１−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）シトシン
１−（Ｒ）−（２−ヒドロキシプロピル）シトシン（１．７ｇ， １０ミルモル）と、ジメチルホルムアミド（４０ｍｌ）と、ジメチルホルムアミドジメチルアセタール（１５ｍｌ）との混合物を、一晩撹拌し、そして４０℃／１３Ｐａでエバポレートした。５０％のピリジン水溶液（２０ｍｌ）および十分な量のドライアイスを加えて、１５分間過剰量を保った。この混合物を再びエバポレートし、そして４０°／１３Ｐａにてピリジン（２５ｍｌで３度）と共蒸留した。ジ−（２−プロピル）ｐ−トルエンスルホニルオキシホスホネート（４．２ｇ， １２ミリモル）を加え、そしてこの混合物を同様の条件下でジメチルホルムアミド（２５ｍｌで２度）と共蒸留した。ジメチルホルムアミド（４０ｍｌ）中の残渣を水素化ナトリウム（７２０ｍｇ， ３０ミリモル）と共に−１０℃で処理し、そしてこの混合物を湿気を遮断して室温で４８時間撹拌した。０．１Ｍのナトリウムメトキシド（メタノール（１００ｍｌ）中）を加え、そして一晩置いた後、この混合物をＤｏｗｅｘ ５０Ｘ８（酸型）で中和した。懸濁液を濾過し、真空下で乾燥状態までエバポレートし、そして残渣をＤｏｗｅｘ ５０Ｘ８（酸型、１５０ｍｌ）のカラム上で脱イオン化した 。アンモニア溶出物をエバポレートし、五酸化リンで真空下で乾燥し、そして残渣をブロモトリメチルシラン（３ｍｌ）およびアセトニトリル（３０ｍｌ）で一晩処理した。真空下でエバポレートした後、残渣を水（５０ｍｌ）で処理し、アンモニアでアルカリ性にし、そして真空下でエバポレートした。残渣をＤｏｗｅｘ ５０Ｘ８（上記参照）のカラム上で脱イオン化し、そして粗製の物質をＤｏｗｅｘ １Ｘ２（アセテート）カラム（１００ｍｌ）の陰イオン交換クロマトグラフィーによって、直線的なグラジエントの酢酸（１リットルの水および１リットルの０．３Ｍ酢酸からなる）によって精製した。この生成物画分をエバポレートし、水（３０ｍｌで３度）と共蒸留し、そして１−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）シトシン（０．９０ｇ， １９％）を水−エタノールから結晶化することにより得た。融点２６１℃。
【０１７６】
【化６７】
実施例２４
９−（Ｓ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）アデニン
アデニン（１．６２ｇ， １２ミリモル）と炭酸セシウム（２．１ｇ， ６．５ミリモル）とのジメチルホルムアミド中の混合物を、１００℃で撹拌し、そして（Ｓ）−２−［（ジ（２−プロピル）ホスホニルメトキシ］−１−トルエンスルホニルオキシプロパン（４．１ｇ， １０ミリモル）のジメチルホルムアミド（１０ｍｌ）溶液を一度に加えた。この混合物を湿気を遮断して撹拌しながら８時間１１０℃で加熱し、そして真空下でエバポレートした。この残渣を沸騰クロロホルム（５０ｍｌで３度）で粉砕し、濾過し、そして真空下でエバポレートした。この粗製の物質をシリカゲルクロマトグラフィー（１５０ｍｌ）によって精製することにより、ジ−（２−プロピル）（Ｓ）−９−（２−ホスホノメトキシプロピル）アデニンが得られた。これはエーテルから結晶化し（１．７ｇ， ４６％）、融点９７〜９８℃であった。
【０１７７】
【化６８】
アセトニトリル（２５ｍｌ）中のこの生成物（１．４ｇ， ３．９ミリモル）をブロモトリメチルシラン（２．５ｍｌ）で一晩室温で処理した。この混合物を真空下に置き、そしてこの生成物を脱塩し、そして実施例１７に記載のように、Ｄｏｗｅｘ １Ｘ２カラム（１００ｍｌ）のクロマトグラフィーで精製した。収率７６％，融点２７７〜２７８℃。［α］Ｄ＝＋２１．７。
【０１７８】
実施例２５
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）アデニン
実施例２２に記載のように、１２ミリモルのアデニンおよび１０ミリモルの（Ｒ）−２−［（ジ（２−プロピル）ホスホニルメトキシ］−１−トルエンスルホニルオキシプロパンを用いて、反応させた。ジ（２−プロピル）（Ｒ）−９−（２−ホスホノメトキシプロピル）アデニン（融点９７℃）が、シリカゲルのクロマトグラフィーによって得られ、そしてエーテルから結晶化された（２．８ｇ， ７５．５％）。
【０１７９】
【化６９】
この生成物（１．８ｇ， ４．９ミリモル）とブロモトリメチルシラン（３ｍｌ）およびアセトニトリル（３０ｍｌ）とを、実施例２２に記載のように反応させた。収率、８０％の９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）アデニン。［α］Ｄ＝２１．５°、融点２７９℃。
【０１８０】
実施例２６
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノプリン
水素化ナトリウム（１．４ｇ， ６０％分散液， ３５ミリモル）を、撹拌した２−アミノ−６−クロロプリン（５．９４ｇ， ３５ミリモル）のジメチルホルムアミド（６０ｍｌ）溶液に加え、そして１時間室温で撹拌後、ジメチルホルムアミド（２０リットル）中の（Ｒ）−２−［ジ（２−プロピル）ホスホニルメトキシ］−１−ｐ−トルエンスルホニルオキシプロパン（１２．２ｇ， ３０ミリモル）を一度に加えた。この混合物を８０℃で１０時間撹拌し、そして真空下でエバポレートした。残渣を沸騰クロロホルム（３００ｍｌ）で抽出し、濾過し、そしてこの濾液を真空下でエバポレートした。この残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム−メタノール混合物、９５：５で溶出）にかけることにより、ジ（２−プロピル）９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−クロロプリン（７．５ｇ， ５３％）が濃厚なオイルとして得られた（ＲＦ ０．５５（クロロホルム−メタノール、９：１におけるシリカゲルでのＴＬＣ））。
【０１８１】
２００ｍｌメタノールおよび０．５ｍｌ濃塩酸中のこのジエステル（２．５ｇ， ６．２ミリモル）の溶液を、室温で一晩、１０％ Ｐｄ／Ｃ触媒（１ｇ）で水素化し、この混合物を濾過し、濾液をトリエチルアミンでアルカリ性にし、そして真空下でエバポレートした。この残渣を実施例２４に記載のように、Ｄｏｗｅｘ ５０ ｘ ８（酸型）（１００ｍｌ）で脱イオン化し、そしてアンモニア溶出物をエバポレートし、そして真空下で五酸化リンで乾燥した。アセトニトリル（２５ｍｌ）およびブロモトリメチルシラン（２．５ｍｌ）を加え、そしてこの溶液を室温で一晩置いた。この混合物を乾燥状態までエバポレートし、そして残渣を水（２５ｍｌ）中に取り出した。３０分後、この溶液をアンモニアでアルカリ性にし、そしてエバポレートした。この残渣をＤｏｗｅｘ １ ｘ ２（アセテート）（１５０ｍｌ）で直線的なグラジエントの酢酸（０．７５リットルの水、０．７５リットルの０．５Ｍ酢酸）を用いて脱イオン化することによって、生成物が得られた。これを水−エタノール（１：１）から結晶化することによって、プールされた画分から単離した。収量、０．６２ｇ（３５．５％）の９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノプリン、融点１５６℃。
【０１８２】
【化７０】
実施例２７
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−チオプリン
ジ（２−プロピル）−９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−クロロプリン（２．５ｇ、６．２ミリモル）溶液（実施例２６に従って調製）、チオ尿素（２．０ｇ）および無水エタノール（１００ｍｌ）を還流しながら１時間撹拌し、トリエチルアミンでアルカリ性にし、そしてエバポレートした。残渣をクロロホルム（２×１００ｍｌ）で抽出し、濾過し、そして濾液を乾燥し、そして真空下でエバポレートした。残渣（ＲＦ ０．４０、シリカゲルでのＴＬＣ、クロロホルム−メタノール、４：１）を五酸化リンで一晩乾燥し、そしてアセトニトリル（３０ｍｌ）およびブロモトリメチルシラン（３ｍｌ）で処理した。室温で一晩置いた後、混合物を乾燥状態までエバポレートし、水中（５０ｍｌ）に取った。３０分後、アンモニアでアルカリ性にし、真空でエバポレートし、残渣をＤｏｗｅｘ ５０で脱イオン化した（実施例２５を参照）。アンモニア溶出物を真空下に置き、Ｄｏｗｅｘ １×２（アセテート）のカラム（１５０ｍｌ）にかけ、まず水で、そして１Ｍの酢酸で（各５００ｍｌ）洗浄した。これらの溶出物を捨て、樹脂を２Ｍのギ酸（５００ｍｌ）と共に撹拌し、濾過し、そして沸騰水（合計で１リットル）で洗浄した。濾液を乾燥状態までエバポレートし、残渣を水（５０ｍｌで３回）と共蒸留し、そして水から結晶化した（溶解後、等容量のエタノールを添加）。収量、１．０ｇ（５０％） ９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−チオプリン、融点１８８℃（分解）。
【０１８３】
【化７１】
実施例２８
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−アジドプリン
ジ（２−プロピル） ９−（Ｒ）−（２− ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−クロロプリン （２．５ｇ， ６．２ミリモル）（実施例２６に従って調製）およびアジ化リチウム（１．０ｇ）のジメチルホルムアミド（４０ｍｌ）溶液を、１００℃で４時間、湿気を遮断して撹拌し、セライト（Ｃｅｌｉｔｅ）上で濾過し、ジメチルホルムアミド（２０ｍｌ）で洗浄し、そして濾液を真空下でエバポレートした。残渣（ＲＦ ０．３０、シリカゲルでのＴＬＣ、クロロホルム−メタノール、９：１）を五酸化リンで一晩乾燥し、そしてアセトニトリル（２０ｍｌ）およびブロモトリメチルシラン（２ ｍｌ） で処理した。室温で一晩置いた後、混合物を乾燥状態までエバポレートしそして水（５０ｍｌ）中に置いた。３０分後、アンモニアでアルカリ性にし、真空下でエバポレートし、そして残渣をＤｏｗｅｘ ５０（酸型）カラム（１００ｍｌ）にかけた。水で洗浄することにより、生成物のＵＶ吸収ピークを保持しながら溶出した。これを真空下でエバポレートし、そして残渣を水から結晶化した（溶解後、等量のエタノールを添加）。収量、０．９５ｇ（４７％）、 ９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−アジドプリン、３００℃まで溶融せず。
【０１８４】
【化７２】
実施例２９
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２，６−ジアミノプリン
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−アジドプリン（０．３０ｇ、実施例２７に従って調製）の、塩酸（０．５ｍｌ）含有５０％水性メタノール（２００ｍｌ）を、室温で一晩、１０％Ｐｄ／Ｃ（０．５ｇ）上で水素化した。混合物を濾過し、水で洗浄し、濾液をアンモニアでアルカリ性にし、そして真空下でエバポレートした。残渣をＤｏｗｅｘ ５０×８（５０ｍｌ）のカラムで脱イオン化し（実施例２５を参照）、そしてアンモニア溶出物を乾燥状態までエバポレートした。水中の残渣（ｐＨを９に調整）をＤｏｗｅｘ １×２（アセテート）のカラムにかけ、まず水で洗浄して塩を除去し、次いで生成物を１Ｍの酢酸で溶出した。生成物を含有する画分をプールし、乾燥状態までエバポレートし、そして水（２０ｍｌで３回）と共蒸留した。残渣を水から結晶化し（濁りを生ずるまでエタノールを添加した）、実施例１９に従った調製と同様にして、９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２，６−ジアミノプリン（１２０ｍｇ）を得た。
【０１８５】
実施例３０
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−３−デアザアデニン
３−デアザアデニン（１．４５ｇ、１０．８ミリモル）、炭酸セシウム（１．７５ｇ、５．４ミリモル）、およびジメチルホルムアミド（２５ｍｌ）を１００℃で１時間撹拌し、そして（Ｒ）−２−［ジ（２−プロピル）ホスホニルメトキシ］−１−ｐ−トルエンスルホニルオキシプロパン（３．６７ｇ、９ミリモル）のジメチルホルムアミド（１０ｍｌ）溶液を一度に加えた。次いで、混合物を１１０℃で２４時間、湿気を遮断して加熱し、そして乾燥した。残渣を沸騰クロロホルム（合計３００ｍｌ）で抽出し、濾過し、そして濾液をエバポレートした。残渣をクロロホルム中のシリカゲル（３００ｍｌ）のカラムでクロマトグラフし、酢酸エチル−石油エーテルから関連する画分を結晶化した後、ジ（２−プロピル） ９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−３−デアザアデニンを、１．０７ｇ（３２．２％）の収量で得た。（融点１２２℃）。
【０１８６】
【化７３】
このジエステル（１．０ｇ， ２．７ミリモル）をアセトニトリル（２５ｍｌ）およびブロモトリメチルシラン（２．５ｍｌ）で一晩処理した。次いで、実施例２７に記載されるように混合物を処理し、脱イオン化し、そしてＤｏｗｅｘ １×２でクロマトグラフした後、９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−３−デアザアデニンを７８％の収率で得た（３００℃まで融解せず）。
【０１８７】
【化７４】
実施例３１
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−８−アザアデニンおよび８−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−８−アザアデニン
８−アザアデニン（１．４５ｇ， １０．８ミリモル）、炭酸セシウム（１．７５ｇ、５．４ミリモル）、およびジメチルホルムアミド（２５ｍｌ）の混合物を１００℃まで予備加熱し、そして （Ｒ）−２−［ジ（２−プロピル）ホスホニルメトキシ］−１−ｐ−トルエンスルホニルオキシプロパン（３．６７ｇ， ９ミリモル）のジメチルホルムアミド（１０ｍｌ）溶液を一度に加えた。次いで、混合物を１１０℃で６時間、湿気を遮断して加熱し、そして乾燥した。残渣を沸騰クロロホルム（合計３００ｍｌ）で抽出し、濾過し、そして濾液をエバポレートした。残渣をシリカゲル（３００ｍｌ）のカラムでクロマトグラフした。５％メタノールを含有するクロロホルムでの溶出により、濃厚なオイルとして、ジ（２−プロピル） ９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−８−アザアデニンを０．９０ｇ（３７％）の収量で得た。
【０１８８】
【化７５】
同様の溶媒でのさらなる溶出により、ジ（２−プロピル）８−（Ｒ）−２−ホスホノメトキシプロピル）−８−アザアデニンを、半固体状物質として、０．７５ｇ（２２％）の収量で得た。
【０１８９】
【化７６】
それぞれの画分を別々に、アセトニトリル（２５ ｍｌ）およびブロモトリメチルシラン（２．５ｍｌ）で一晩処理し、そして混合物を実施例２７に記載されるように処理した。Ｄｏｗｅｘ １×２ カラム（５０ｍｌ）のクロマトグラフィーの２Ｍの酢酸による溶出により、９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−８−アザアデニンが生じた。収率（水−エタノールからの結晶化後）７９％。
【０１９０】
【化７７】
８−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−８−アザアデニンを、同様に１Ｍ酢酸を用いた溶出により得た。収率、７２％。
【０１９１】
【化７８】
実施例３２
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）ヒポキサンチン
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）アデニン（４００ｍｇ、 １．４ミリモル）および亜硝酸ナトリウム（１．４ｇ， ２０ミリモル）の水（４０ｍｌ）溶液を氷浴で冷却し、そして濃塩酸（２ｍｌ）を加えた。混合物をアルゴン雰囲気下、０℃で３時間、次いで室温で一晩撹拌した。混合物を、Ｄｏｗｅｘ ５０×８（酸型）のカラム（１００ ｍｌ）にかけ、そしてカラムを水で溶出した。生成物を保持しながら溶出した；関連する画分を真空下でエバポレートし、残渣をエタノール（２×５０ｍｌ）と共蒸留し、そして結晶状残渣をエーテルと共に濾過した。収量、２５０ ｍｇ（６２％） ９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）ヒポキサンチン、
【０１９２】
【化７９】
実施例３３
９−（Ｓ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）ヒポキサンチン
９−（Ｓ）−ホスホノメトキシプロピル）アデニン（４００ｍｇ、１．４ミリモル）および亜硝酸ナトリウム（１．４ｇ、 ２０ミリモル）の水（４０ｍｌ）溶液を氷浴で冷却し、そして濃塩酸（２ｍｌ）を加えた。実施例３１に記載されるようにさらに反応させた。収率、６６％、９−（Ｓ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）ヒポキサンチン収量、６６％。
【０１９３】
【化８０】
実施例３４
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−ジメチルアミノプリン
ジ（２−プロピル） ９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−クロロプリン（０．５０ｇ、実施例２６に従って調製）の、２０％ジメチルアミンのメタノール溶液を、１１０℃で２０時間、耐圧容器内で加熱し、そして溶液を真空下でエバポレートする。５０％水性メタノール（２０ｍｌ）中の残渣を、２０％水性メタノール中のＤｏｗｅｘ ５０×８ （Ｈ＋型）のカラム（５０ｍｌ）にかけ、そしてＵＶ吸収が最初の値に低下するまで、カラムを同じ溶出液で洗浄する。 次いで、カラムを２０％水性メタノールの２．５％アンモニア溶液で洗浄し、そしてＵＶ吸収溶出物を乾燥するために取り出し、エタノール（各２５ｍｌ）と２回共蒸留し、そして１３Ｐａ下で五酸化リン上で乾燥する。得られた生成物をアセトニトリル（３０ｍｌ）およびブロモトリメチルシラン（３ｍｌ）で室温で一晩処理し、そして溶液を真空下でエバポレートする。水（５０ｍｌ）を加え、混合物を濃アンモニア水を加えてアルカリ性にし、そして溶液をエバポレートする。さらなる処理および精製は、本質的に、実施例１７に記載されるように行われる。収量、０．４０ｇ （９５％） ９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−ジメチルアミノプリン、融点１５４〜１５６℃、
【０１９４】
【化８１】
実施例３５
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−ジメチルアミノプリン
ジ（２−プロピル） ９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−クロロプリン（０．５０ｇ、実施例２６に従って調製）とジエチルアミン（２ ｍｌ）のメタノール（２０ｍｌ）の混合物を、加圧容器中で、１１０℃で２０時間加熱し、そして溶液を真空下でエバポレートする。５０％水性メタノール（２０ｍｌ）中の残渣を、２０％水性メタノール中のＤｏｗｅｘ ５０×８（Ｈ＋型）のカラム（５０ｍｌ）にかけ、そしてＵＶ吸収が最初の値に低下するまで、カラムを同じ溶出液で洗浄する。次いで、カラムを、２０％水性メタノールの２．５％アンモニア溶液で洗浄し、そしてＵＶ吸収溶出物を乾燥するために取り出し、エタノール（各 ２５ｍｌ）と２回共蒸留し、そして１３Ｐａ下で五酸化リン上で乾燥する。得られた生成物をアセトニトリル（３０ｍｌ）およびブロモトリメチルシラン（３ｍｌ）で一晩室温で処理し、そして溶液を真空下でエバポレートする。水（５０ ｍｌ）を加え、混合物を濃アンモニア水を加えてアルカリ性にし、そして溶液をエバポレートする。さらなる処理および精製は、本質的に実施例１７に記載されるように行われる。収量、０．４０ｇ（９５％）、９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−ジメチルアミノプリン、融点１６２〜１６４℃、
【０１９５】
【化８２】
実施例３６
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−ブチルアミノプリン
ジ（２−プロピル） ９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−クロロプリン（０．５０ｇ、実施例２６に従って調製）、ブチルアミン（２．０ｍｌ）およびエタノール（２０ｍｌ）の混合物を、湿気を遮断して６時間還流し、そして真空下でエバポレートする。ブロモトリメチルシランとの反応に続いて、反応混合物の処理および生成物の単離を、本質的に実施例３４に記載されるように行う。９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−ブチルアミノプリンの収量、０．４０ｇ（８７％） 、融点１４０〜１４２℃、
【０１９６】
【化８３】
実施例３７
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−（２−ブチル）アミノプリン
ジ（２−プロピル） ９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−クロロプリン（０．５０ｇ、実施例２６に従って調製）、２−ブチルアミン（２．０ ｍｌ）およびエタノール（２０ ｍｌ）の混合物を、湿気を遮断して８時間還流し、そして真空下でエバポレートする。ブロモトリメチルシランとの反応に続いて、反応混合物の処理および生成物の単離を、本質的に実施例３４に記載されるように行う。９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−（２−ブチル）アミノプリンの収量、０．３５ｇ（７５％）、融点１４８〜１４９℃、
【０１９７】
【化８４】
実施例３８
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−シクロプロピルアミノプリン
ジ（２−プロピル）９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−クロロプリン（０．５０ｇ， 実施例２６に従って調製）、シクロプロピルアミン（２．０ｍｌ）およびエタノール（２０ｍｌ）の混合物を、湿気を遮断して１２時間環流し、そして真空下でエバポレートする。ブロモトリメチルシランとの反応に続いて、反応混合物の処理および生成物の単離を、本質的に実施例３４に記載されるように行う。９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−シクロプロピルアミノプリンの収量、０．３５ｇ（８０％）、融点１７８〜１７９℃、
【０１９８】
【化８５】
実施例３９
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−シクロペンチルアミノプリン
ジ（２−プロピル）９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−クロロプリン（０．５０ｇ、実施例２６に従って調製）、シクロペンチルアミン（２．０ｍｌ）およびエタノール（２０ｍｌ）の混合物を、湿気を遮断して１２時間環流し、そして真空下でエバポレートする。ブロモトリメチルシランとの反応に続いて、反応混合物の処理および生成物の単離を、本質的に実施例３４に記載されるように行う。９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−シクロペンチルアミノプリンの収量、０．３６ ｇ（７６％）、融点１６７〜１７０℃、
【０１９９】
【化８６】
実施例４０
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−シクロヘキシルアミノプリン
ジ（２−プロピル）９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−クロロプリン（０．５０ｇ、実施例２６に従って調製）、シクロヘキシルアミン（２．０ｍｌ）およびエタノール（２０ｍｌ）の混合物を、湿気を遮断して１０時間環流し、そして真空下でエバポレートする。ブロモトリメチルシランとの反応に続いて、反応混合物の処理および生成物の単離を、本質的に実施例３４に記載されるように行う。９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−シクロヘキシルアミノプリンの収量、０．３２ ｇ（６５％）融点１６４〜１６５℃、
【０２００】
【化８７】
実施例４１
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−ピロリジノプリン
ジ（２−プロピル）９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−クロロプリン（０．５０ｇ、実施例２６に従って調製）、ピロリジン（２．０ｍｌ）およびエタノール（２０ｍｌ）の混合物を、湿気を遮断して６時間環流し、そして真空下でエバポレートする。ブロモトリメチルシランとの反応に続いて、反応混合物の処理および生成物の単離を、本質的に実施例３４に記載されるように行う。９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−ピロリジノプリンの収量、０．３５ｇ（７８％）、融点１８１〜１８２℃
【０２０１】
【化８８】
実施例４２
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−ピペリジノプリン
ジ（２−プロピル）９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−クロロプリン（０．５０ｇ、実施例２６に従って調製）、ピペリジン（２．０ｍｌ）およびエタノール（２０ｍｌ）の混合物を、湿気を遮断して３時間環流し、そして真空下でエバポレートする。ブロモトリメチルシランとの反応に続いて、反応混合物の処理および生成物の単離を、本質的に実施例３４に記載されるように行う。９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−ピペリジノプリンの収量、０．４０ｇ（８４％）融点１５４〜１５６℃、
【０２０２】
【化８９】
実施例４３
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−モルホリノプリン
ジ（２−プロピル）９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−クロロプリン（０．５０ｇ、実施例２６に従って調製）、モルホリン（２．０ｍｌ）およびエタノール（２０ｍｌ）の混合物を、湿気を遮断して２時間環流し、そして真空下でエバポレートする。ブロモトリメチルシランとの反応に続いて、反応混合物の処理および生成物の単離を、本質的に実施例３４に記載されるように行う。９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−モルホリノプリンの収量、０．４５ｇ（９４．５％）、融点１６０〜１６２℃、
【０２０３】
【化９０】
実施例４４
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−ベンジルアミノプリン
ジ（２−プロピル）９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−クロロプリン（０．５０ｇ、実施例２６に従って調製）、ベンジルアミン（２．０ｍｌ）およびエタノール（２０ｍｌ）の混合物を、湿気を遮断して６時間環流し、そして真空下でエバポレートする。ブロモトリメチルシランとの反応に続いて、反応混合物の処理および生成物の単離を、本質的に実施例３４に記載されるように行う。９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２−アミノ−６−ベンジルアミノプリンの収量、０．４５ ｇ（９０％）、融点１５８〜１６０℃、
【０２０４】
【化９１】
実施例４５
９−（Ｓ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−８−アザグアニンおよび８−（Ｓ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−８−アザグアニン
８−アザグアニン（３．５ｇ）、ジメチルホルムアミド（３５ｍｌ）およびジメチルホルムアミドジネオペンチルアセタール（１５ｍｌ）の混合物を、湿気を遮断して８０℃で１６時間加熱する。室温で冷却後、沈殿生成物を吸引濾過し、エタノールおよびエーテルで洗浄し、真空下で乾燥する。Ｎ２−ジメチルアミノメチレン−８−アザグアニンの収量、３．１ｇ（６５％）、ＨＰＬＣ的に純粋。この化合物（２．１ｇ、１０ミリモル）、炭酸セシウム（１．７５ｇ、５．４ミリモル）および（Ｓ）−２−［（ジ（２−プロピル）ホスホニルメトキシ］−１−トルエンスルホニルオキシプロパンのジメチルホルムアミド（４０ｍｌ）混合物を、湿気を遮断して１００℃で４時間撹拌を行う。混合物を熱いうちに濾過し、４０℃／１３Ｐａでエバポレートし、そして残渣をメタノールと濃アンモニア水との混合液（１：１、２００ｍｌ）で周囲温度で一晩処理する。溶媒を真空下でエバポレートし、そしてメタノール−クロロホルム混合液（５：９５）のシリカゲルカラム（２００ｍｌ）上で残渣をクロマトグラフィーにかける。非結晶性泡状物である蛍光性生成物（Ｒｆ＝０．４２、ＴＬＣ／メタノール−クロロホルム、１：９、シリカゲルプレート）、収量０．９ｇ（２３％）を真空下で乾燥し、アセトニトリル（２５ｍｌ）およびブロモトリメチルシラン（２．５ｍｌ）で室温で一晩処理する。この混合物の処理は、実施例３４に記載されるように行う。生成物を、イオン交換クロマトグラフィーによりＤｏｗｅｘ ５０×８（Ｈ＋型）上で単離し、そして水から結晶化する。収量、０．４５ｇ。
【０２０５】
シリカゲルカラムのさらなる溶出物、９−異性体（Ｒｆ＝０．３６、ＴＬＣ／メタノール−クロロホルム、１：９、シリカゲルプレート）を０．９ｇ（２３％）の収量で与える。アセトニトリル中のブロモトリメチルシランによる転換（実施例３４）により、脱イオン化および水からの結晶化の後、９−（Ｓ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−８−アザグアニン（０．５０ｇ， ＨＰＬＣ的に純粋）を生ずる。
【０２０６】
実施例４６
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−８−アザグアニン、８−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−８−アザグアニンおよび７−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−８−アザグアニン
（Ｓ）−エナンチオマーに関して、本質的に実施例４４に記載されるように反応を行う。メタノール性アンモニア水との縮合混合物の処理後、ビス（２−プロピル）エステルの粗混合物をＤｏｗｅｘ ５０×８（Ｈ＋型）（１５０ｍｌ）のカラムにかけ、そして２０％水性メタノールでカラムから溶出させた。ＵＶ吸収画分を真空下で採取し、乾燥して、非結晶性泡状物の９−異性体を与える。残渣をアセトニトリル（３０ｍｌ）およびブロモトリメチルシラン（３ｍｌ）により一晩処理し、真空下でエバポレートし、残渣を２．５％アンモニア中に溶解し、そして真空下で再エバポレートする。この残渣を、Ｄｏｗｅｘ １×２（アセテート型）のカラム（１００ｍｌ）にかけ、そして水（１リットル）で洗浄し、そして１Ｍ酢酸（５００ｍｌ）で洗浄する。溶出物を捨て、そして樹脂を沸騰水（５００ｍｌ）により、フィルター上で抽出する。この溶出物を真空下でエバポレートし、そして残渣を水から結晶化して（微溶解性）、９−（Ｒ）−異性体（０．５０ｇ）を生ずる。
【０２０７】
【化９２】
２．５％アンモニア水によるＤｏｗｅｘ５０のカラムのさらなる溶出は、ＵＶ吸収画分を与える。その画分を真空下でエバポレートし、乾燥し、アセトニトリル（２０ｍｌ）およびブロモトリメチルシラン（２ｍｌ）で処理する。反応混合物をエバポレートし、そして残渣を５％アンモニア水（１００ｍｌ）を加えて溶解し、そして混合物を、Ｄｏｗｅｘ ５０×８（Ｈ＋型）のカラム（１００ｍｌ）上で脱イオン化する。アンモニア溶出物は、ゲル形成混合物を生じ、これは、アンモニアを加えると水に溶解し、そして０．０２Ｍ炭酸水素トリエチルアンモニウム中でＳｅｐｈａｄｅｘ Ａ−２５（１５０ｍｌ）のカラムにかける。カラムから、直線勾配をかけた同一緩衝液（０．０２〜０．２０Ｍ、各１リットル）で溶出することにより、７−および８−異性体（ＥＵｐ ０．９２， 蛍光スポット）の混合物からなる主画分を与える。メタノールで共蒸留後の残渣を、Ｄｏｗｅｘ １×２（アセテート）のカラム（２０ｍｌ）にかけ、そのカラムを水（１００ｍｌ）で洗浄し、そして生成物を１Ｍ酢酸で溶出する。真空下でエバポレートし、水との共蒸留を行い、そしてエタノールと共にすり潰してから、生成物を濾過し、エタノールおよびエーテルで洗浄し、そして乾燥すると、７−異性体と８−異性体との比率が１：４の混合物０．５０ｇを生ずる（１３Ｃ−ＮＭＲによる）。７−および８−位置異性体（ｒｅｇｉｏｉｓｏｍｅｒ）は、ＤＥＡＥ Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ａ２５上でのクロマトグラフィーにより、０．０２モル〜０．２モルの勾配をかけた水性炭酸水素トリエチルアンモニウム（ｐＨ７．５）による溶出を用いて、分離した。
【０２０８】
【化９３】
実施例４７
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−８−アザ−２，６−ジアミノプリンおよび８−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−８−アザ−２，６−ジアミノプリン
８−アザ−２，６−ジアミノプリンヘミスルフェート（２５ミリモル）の水（１００ｍｌ）懸濁液を、Ｄｏｗｅｘ ５０×８（Ｈ＋型）を加えながら溶解するまで撹拌し、懸濁液を同じ陽イオン交換体のカラム（１００ｍｌ）上に注ぎ、そして中性になるまでカラムを水で洗浄する。次いで、樹脂を水（２００ｍｌ）に懸濁させ、そしてアルカリになるまでアンモニア水で処理し、濾過し、そして沸騰水（合計、１リットル）で洗浄する。濾液と洗浄物を真空下で乾燥し、残渣をエタノール（２×５０ ｍｌ）で共蒸留し、そして得られた遊離の８−アザ−２，６−ジアミノプリンをエーテルから濾過し、同じ溶媒で洗浄し、そして真空下で五酸化リン上で乾燥する。
【０２０９】
この化合物（３．０２ｇ、２０ミリモル）および炭酸セシウム（３．３ｇ、１０ミリモル）のジメチルホルムアミド（６０ｍｌ）懸濁液を、１００℃で１時間加熱し、そして（Ｒ）−２−［（ジ（２−プロピル）ホスホニルメトキシ］−１−トルエンスルホニルオキシプロパン（８．６ｇ、２１ ミリモル）のジメチルホルムアミド（３０ｍｌ）溶液を、撹拌しながら１５分間かけて加える。次いで、加熱と撹拌をさらに１６時間続け、真空下で混合物から溶媒を取り除き、そして残渣を沸騰クロロホルム（合計、３００ｍｌ）で抽出する。抽出物を、クロロホルムを用いてシリカゲルカラム（２５０ｍｌ）上でクロマトグラフィーにかけ、そしてカラムからクロロホルム−メタノール混合液（９５：５）により溶出する。溶出により、ジ（２−プロピル）９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−８−アザ−２，６−ジアミノプリン（ＲＦ０．７０、ＴＬＣ／シリカゲル、クロロホルム−メタノール、４：１）を生じ、その後、関連画分をエバポレートし、そして酢酸エチル−石油エーテルから結晶化すると、１．７５ｇ （２２．５％）の結晶物質を与える。融点１２０〜１２２℃、
【０２１０】
【化９４】
この生成物を、アセトニトリル（２５ ｍｌ）およびブロモトリメチルシラン（２．５ ｍｌ）で一晩室温で処理し、そして溶液を真空下でエバポレートする。水（５０ｍｌ）を加え、混合物に濃アンモニア水を加えてアルカリ性にし、そして溶液をエバポレートする。さらなる処理および精製を、本質的に実施例１７に記載されるように行う。９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−２，６−ジアミノ−８−アザアデニンの収量、０．９０ｇ（６５．５％）、融点２３８〜２４２℃、
【０２１１】
【化９５】
シリカゲルカラムのさらなる溶出により、ジ（２−プロピル）８−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−８−アザ−２，６−ジアミノプリンの１．４０ｇ（１８％）を得る。（ＲＦ ０．５０、ＴＬＣ／シリカゲル、クロロホルム−メタノール、４：１）、融点１４８〜１５０℃（酢酸エチル−石油エーテル）、
【０２１２】
【化９６】
ブロモトリメチルシランとの反応を、本質的に９−異性体に関して記載されるように行う；８−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−８−アザ−２，６−ジアミノプリンの収量、０．８０ｇ（７２．５％）、融点２３８〜２４０℃、
【０２１３】
【化９７】
実施例４８
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−６−メルカプトプリン 水素化ナトリウム（０．４０ｇ， パラフィン中に６０％分散、１０ミリモル）を、６−クロロプリン（１．５５ｇ、１０ミリモル）のジメチルホルムアミド（２５ｍｌ）溶液に加え、そしてその混合物を周囲温度で１時間撹拌する。（Ｒ）−２−［（ジ（２−プロピル）ホスホニルメトキシ］−１−トルエンスルホニルオキシプロパン（６．５ｇ、１５．９ ミリモル）のジメチルホルムアミド（５０ｍｌ）溶液を加え、そしてその混合物を６０℃で８時間撹拌する。次いで、混合物から真空下で溶媒を取り除き、そして残渣を熱クロロホルム（合計、２５０ｍｌ）で抽出する。次いで、抽出液を真空下でエバポレートし、そしてクロロホルムによりシリカゲルカラム（２５０ ｍｌ）上で残渣をクロマトグラフィーにかける。生成物をクロロホルム−メタノール（９５：５）で溶出し、そして生成物を含む関連画分を乾燥するまでエバポレートする。油状のジ（２−プロピル） ８−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−６−クロロプリンの収量、２．３５ｇ、（６０％）（ＲＦ ０．７０、ＴＬＣ／シリカゲル、クロロホルム−メタノール、４：１）、融点１４８〜１５０℃（酢酸エチル−石油エーテル）、
【０２１４】
【化９８】
この生成物を、チオ尿素（２ｇ）のエタノール液と共に１時間環流して処理し、その溶液をトリエチルアミンでアルカリ性にし、乾燥し、そして残渣をクロロホルム（２００ｍｌ）で抽出する。抽出液を真空下でエバポレートし、そして残渣（ＲＦ０．６３、ＴＬＣ／シリカゲル、クロロホルム−メタノール、４：１）を真空下で乾燥する。アセトニトリル（４０ｍｌ）とブロモトリメチルシラン（４ｍｌ）を加え、そして混合物を溶解するまで撹拌する。混合物を室温で一晩静置し、真空下で乾燥し、そして濃アンモニア水でアルカリ性にすることにより水（１００ｍｌ）に溶解する。次いで、アルカリ溶液を真空下でエバポレートし、そして水（２０ｍｌ）に溶かした残渣（アンモニアでアルカリ性にしたもの）を、０．０５Ｍ炭酸水素トリエチルアンモニウム（ｐＨ７．５）で平衡化したＳｅｐｈａｄｅｘ Ａ−２５のカラム（１５０ｍｌ）にかける。溶出物の吸収値が初期の値に低下するまで、そのカラムから同じ緩衝液で溶出し、次いで０．０２Ｍ〜０．２Ｍの炭酸水素トリエチルアンモニウム（ｐＨ ７．５）（各１リットル）により直線勾配をかけて溶出を行う。主要なＵＶ吸収画分を乾燥し、そしてメタノール（５×５０ｍｌ）と共に真空下で共蒸留する。残渣を１０ｍｌの水に溶かして、Ｄｏｗｅｘ １×２（アセテート型）カラム（５０ｍｌ）にかけ、カラムを水で洗浄し、そしてイオン交換体（ｉｏｎｅｘ）を１０％水性ギ酸（２００ｍｌ）中で１５分間撹拌する。懸濁物を濾過し、そして樹脂を沸騰水（合計、１ リットル）で繰り返し洗浄する。濾液を真空下で濃縮し、そして水から再結晶して、９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−６−チオプリン（０．９０ｇ， ４９％）、融点１５６〜１５８℃を生ずる。
【０２１５】
【化９９】
実施例４９
９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）−Ｎ１，Ｎ６−エテノアデニン ９−（Ｒ）−（２−ホスホノメトキシプロピル）アデニン（０．４０ｇ）を１Ｍクロロアセトアルデヒド溶液−水（２０ｍｌ）に溶かした溶液を、３７℃で４８時間インキュベートし、そして真空下でエバポレートする。水（１０ｍｌ）に溶かした残渣を、オクタデシルシリカゲル（２０−３０μ）のカラム（２５０ｍｌ）にかけ、そして水（３ ｍｌ／ｍｉｎ）で洗浄する。画分（２０ｍｌ）を０．０５Ｍ炭酸水素トリエチルアンモニウム（ｐＨ７．５）を用いてＨＰＬＣにより分析し、そして適切な画分をプールして、そして真空下で処理する。生成物をエタノールと共にすり潰し、そして濾過する。収量、０．３５ｇ（８０％）、融点１８０〜１８２℃、
【０２１６】
【化１００】
実施例５０
ヒト免疫不全ウィルス（ＨＩＶ）およびモロニィネズミ肉腫ウィルス（ＭＳＶ）に対するインビトロでの評価
細胞変性を誘発するＨＩＶ−１およびＨＩＶ−２に対する化合物の活性を、ヒトリンパ球ＭＴ−４細胞において試験した。細胞（２５００００細胞／ｍｌ）を、ＨＩＶ−１あるいはＨＩＶ−２の１００ ＣＣＩＤ５０（１ ＣＣＩＤ５０は、実験条件下で細胞の５０％に細胞変性効果を起こすウィルス量である）で感染させ、そして試験化合物の異なる希釈液を含むマイクロタイタープレートの２００μｌ−ウェルに加える。次いで、感染した細胞培養物を、３７℃で５日間、加湿ＣＯ２制御のインキュベーター中でインキュベートした。次いで、ウィルスの細胞変性を、トリパンブルー染料の染色によるＭＴ−４の生存率の測定により試験した。プロトタイプ化合物のデータと比較して、結果を表 １にまとめる。
【０２１７】
さらに、ネズミ胎児線維芽細胞Ｃ３Ｈ／３Ｔ３細胞において、ＭＳＶ誘発形質転換に対する化合物の活性の試験結果も、表１に示されている。４８ウェルマイクロタイタープレートの１−ｍｌ−ウェル内に細胞を接種し、６０〜９０分間８０ ＰＦＵ（プラーグ形成単位）に曝した。次いで、ウィルスを除去し、そして適切な濃度の試験化合物を含む培地を加えた（１ｍｌ／ウェル）。感染後６日目に、細胞培養物のＭＳＶ誘発形質転換を顕微鏡により調べた。プロトタイプ化合物のデータと比較して、結果を表１にまとめる。
【０２１８】
【表１】
結論：
（１）試験された式Ｉの分割された化合物の大部分は、インビトロで、顕著な抗ＨＩＶ活性を示した。ＨＩＶ−１およびＨＩＶ−２は、試験化合物に対する感受性に差は無かった。
【０２１９】
（２）（Ｒ）−ＰＭＰＡは、レトロウィルスの複製に対して、１〜２μｇ／ｍｌで著しく阻害し、そして１００ ｍｇ／ｍｌで細胞に対して非毒性であった。その選択指数（細胞毒性用量／抗ウィルス活性用量の比率）は、プロトタイプ化合物ＰＭＥＡの選択指数より優れていることがわかった。ＰＭＥＡの（Ｓ）−エナンチオマーは、顕著な抗レトロウィルス活性に欠けていた。
【０２２０】
（３）（Ｒ）−ＰＭＰＤＡＰは、レトロウィルスの複製を強く阻害し、（ＥＣ５０ ０．０１〜０．１μｇ／ｍｌ）、そして１００μｇ／ｍｌで細胞に対して非毒性であった。それは、ＰＭＥＡおよび他のプロトタイプ化合物より、抗ウィルス活性および毒性の欠如の両方の点で、優れていることがわかった。その選択指数は、ＨＩＶ−１およびＨＩＶ−２に対して、＞２０００であった。
【０２２１】
実施例５１
腹腔内投与によるマウスにおけるモロニィネズミ肉腫ウィルス（ＭＳＶ）感染の処置
２グラムの新生児ＮＭＲＩマウスに、モロニィネズミ肉腫ウィルスの２５０倍希釈した貯蔵調製物５０μｌを左後脚に筋肉内注射した。ウィルス感染の２〜４時間前から開始して、１０匹からなる群において、各動物に、式Ｉの分割された化合物あるいはプロトタイプ化合物の５０、２０、または１０ｍｇ／ｋｇの試験化合物を、単回投与により、腹腔内に注入した（略語は、表１の脚注を参照のこと）；化合物（Ｒ）−ＰＭＰＡおよび（Ｒ）−ＰＭＰＤＡＰを、５および２ｍｇ／ｋｇの用量でも投与した。マウスの別の群（２０匹の動物）には、ＲＰＭＩ−１６４０培地をプラセボとして投与した。全ての化合物をＲＰＭＩ−１６４０培地に溶解した。マウスを２０日間毎日観察し、そして腫瘍のイニシエーションの日と、動物の死亡した日を各動物に対して記録した。標準偏差を計算することにより、統計解析を行った。まとめた結果を表２に示す。
【０２２２】
【表２】
ＰＭＰＡ（およびＦＰＭＰＡ）の（Ｓ）−エナンチオマーは、５０ｍｇ／ｋｇの用量では、インビボで顕著な抗レトロウィルス活性を有さないが、（Ｒ）−ＰＭＰＡ、（Ｒ）−ＰＭＰＤＡＰは、腫瘍のイニシエーションの阻害およびＭＳＶ感染したマウスの寿命の延長に非常に有効であることがわかった。１回の（Ｒ）−ＰＭＰＡの５０ｍｇ／ｋｇの用量は、ＭＳＶ誘発された腫瘍の発生に対して完全に防御した。低用量では、この化合物は、腫瘍のイニシエーションの日および動物の死亡の平均日数を延長する点において、（Ｓ）−ＦＰＭＰＡより優れていた。１回の（Ｒ）−ＰＭＰＤＡＰの１０〜２０ｍｇ／ｋｇの用量は、ＭＳＶ誘発された腫瘍の発生に対して、動物（９０〜９５％）を実質的に完全に防御した； ２ｍｇ／ｋｇの用量では、腫瘍形成を有意に予防し（動物の３６％）、そして７０％もの長期間生存動物が観察された。
【０２２３】
結論：
（１） （Ｒ）−ＰＭＰＡは、１回の１０〜５０ｍｇ／ｋｇの用量で、腫瘍のイニシエーションおよび動物の死亡の平均日数の増加において顕著に有効であることがわかった。それは、これらのアッセイにおいて、プロトタイプ化合物ＰＭＥＡより優れている。
【０２２４】
（２）（Ｒ）−ＰＭＰＤＡＰは、インビボで試験した一連の化合物の中で最も活性な抗ＭＳＶ化合物の１つであった。それは、（Ｒ）−ＰＭＰＡ より５倍も優れていることがわかった。それは、アデニン誘導体の方が、アッセイにおいて、ジアミノプリン対応物よりも活性があるというＦＰＭＰ系と対照的である。
【０２２５】
（３）式Ｉの化合物のインビボの活性は、インビトロにおけるＨＩＶおよびＭＳＶに対するそれらの抗ウィルス活性と一致する。
【０２２６】
実施例５２
経口投与によるマウスにおけるモロニィネズミ肉腫ウィルス（ＭＳＶ）感染の処置
３週齢のＮＭＲＩマウス（体重約１０グラム）に、モロニィネズミ肉腫ウィルスの２０倍希釈した貯蔵調製物５０μｌを、左後脚に筋肉内注射した。ウィルス感染の２〜４時間前に開始して、６匹の動物に、試験化合物を１日当たり１００ｍｇ／ｋｇ（合計用量）で１日２回連続５日間経口投与した。コントロール（プラセボ）群は、１４匹の動物からなっていた。実験は、実施例３５に記載されるように評価した。まとめた結果を表３に示す。
【０２２７】
【表３】
１００ｍｇ／ｋｇ／日の用量では、（Ｒ）−ＰＭＰＤＡＰは、腫瘍のイニシエーションの平均日数を５０％増加させた；マウスの６７％にしか腫瘍が発生しなかった。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
明細書に記載のヌクレオチドアナログ。
【請求項１】
明細書に記載のヌクレオチドアナログ。
【公開番号】特開２００８−１２０８２０（Ｐ２００８−１２０８２０Ａ）
【公開日】平成２０年５月２９日（２００８．５．２９）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００７−３２６６０７（Ｐ２００７−３２６６０７）
【出願日】平成１９年１２月１８日（２００７．１２．１８）
【分割の表示】特願２００４−２９９９４（Ｐ２００４−２９９９４）の分割
【原出願日】平成５年８月４日（１９９３．８．４）
【出願人】（５０２２７４７０５）インスティテュート オブ オーガニック ケミストリー アンド バイオケミストリー アーエスツェーエル (1)
【出願人】（５０４０４６８４３）
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２０年５月２９日（２００８．５．２９）
【国際特許分類】
【出願日】平成１９年１２月１８日（２００７．１２．１８）
【分割の表示】特願２００４−２９９９４（Ｐ２００４−２９９９４）の分割
【原出願日】平成５年８月４日（１９９３．８．４）
【出願人】（５０２２７４７０５）インスティテュート オブ オーガニック ケミストリー アンド バイオケミストリー アーエスツェーエル (1)
【出願人】（５０４０４６８４３）
【Ｆターム（参考）】
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