新規処方物
ＩＬ１３Ｒα１に対する抗体の医薬処方物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ＩＬ１３Ｒα１に対する抗体の医薬処方物、前記処方物の調製のための方法および使用に関する。
【０００２】
第１の局面において、本発明は、
１〜２００ｍｇ／ｍＬの抗体；
１〜１００ｍＭのバッファー；
０．００１〜１％の界面活性剤；
（ａ）１０〜５００ｍＭの安定化剤；または
（ｂ）１０〜５００ｍＭの安定化剤および５〜５００ｍＭの浸透圧剤；または
（ｃ）５〜５００ｍＭの浸透圧剤；
（ｐＨ４．０〜７．０の範囲）
を含み、
抗体はＩＬ１３Ｒα１に対する抗体である、医薬処方物に関する。
【０００３】
１つの実施態様において、本発明は、液体形態の処方物を提供する。別の実施態様において、本発明は、凍結乾燥形態の処方物を提供する。別の実施態様において、本発明は、凍結乾燥形態から再構成された液体形態の処方物を提供する。
【０００４】
ＩＬ１３Ｒα１に対する抗体は、例えばＷＯ９６／２９４１７、ＷＯ９７／１５６６３、ＷＯ ０３／０８０６７５、Graber et al., Eur. J. Immunol. 28:4286-4298 (1998)；Poudrier et al., J. Immunol. 163:1153-1161 (1999)；Poudrier et al., Eur. J. Immunol. 30:3157-3164 (2000)；Aikawa et al., Cytokine 13:75-84 (2001)から公知であり、そして例えばR&D Systems Inc. USAから市販されている。
【０００５】
ＩＬ１３Ｒα１に対する例示的な抗体は、ＷＯ２００６／０７２５６４に記載されており、そして重鎖ＣＤＲとして配列番号１のＣＤＲおよび軽鎖ＣＤＲとして配列番号２のＣＤＲ；重鎖ＣＤＲとして配列番号３のＣＤＲおよび軽鎖ＣＤＲとして配列番号４のＣＤＲ；重鎖ＣＤＲとして配列番号５のＣＤＲおよび軽鎖ＣＤＲとして配列番号６のＣＤＲ；重鎖ＣＤＲとして配列番号７のＣＤＲおよび軽鎖ＣＤＲとして配列番号８のＣＤＲ；または重鎖ＣＤＲとして配列番号９のＣＤＲおよび軽鎖ＣＤＲとして配列番号１０のＣＤＲを含むことを特徴とする抗体を含む。
【０００６】
ＣＤＲ配列を、Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th ed., Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD (1991)の標準定義に従って決定することができる。これに基づいて、相補性決定領域（ＣＤＲ）は以下の配列を有する：
重鎖ＣＤＲ：
配列番号１、３、５、７、９のＣＤＲ１（ａａ３１〜３５）、
配列番号１、３、５、７、９のＣＤＲ２（ａａ５０〜６６）、
配列番号１、３、９のＣＤＲ３（ａａ９９〜１０８）、
配列番号５のＣＤＲ３（ａａ９９〜１０７）、
配列番号７のＣＤＲ３（ａａ９９〜１１２）；
軽鎖ＣＤＲ：
配列番号２、４、６、１０のＣＤＲ１（ａａ２４〜３４）、
配列番号８のＣＤＲ１（ａａ２４〜３５）、
配列番号２、４、６、１０のＣＤＲ２（ａａ５０〜５６）、
配列番号８のＣＤＲ２（ａａ５１〜５７）および
配列番号２、４、６、１０のＣＤＲ３（ａａ８９〜９７）、
配列番号８のＣＤＲ３（ａａ９０〜９７）。
【０００７】
好ましい抗体は以下を含むことを特徴とする：
ａ）重鎖可変領域として配列番号１、軽鎖可変領域として配列番号２、κ軽鎖定常領域として配列番号１１およびγ１重鎖定常領域として配列番号１２（場合により変異Ｌ２３４ＡおよびＬ２３５ＡまたはＤ２６５ＡおよびＮ２９７Ａを有する）、
ｂ）重鎖可変領域として配列番号３および軽鎖可変領域として配列番号４、κ軽鎖定常領域として配列番号１１およびγ１重鎖定常領域として配列番号１２（場合により変異Ｌ２３４ＡおよびＬ２３５ＡまたはＤ２６５ＡおよびＮ２９７Ａを有する）、
ｃ）重鎖可変領域として配列番号５および軽鎖可変領域として配列番号６、κ軽鎖定常領域として配列番号１１およびγ１重鎖定常領域として配列番号１２（場合により変異Ｌ２３４ＡおよびＬ２３５ＡまたはＤ２６５ＡおよびＮ２９７Ａを有する）、
ｄ）重鎖可変領域として配列番号７および軽鎖可変領域として配列番号８、κ軽鎖定常領域として配列番号１１およびγ１重鎖定常領域として配列番号１２（場合により変異Ｌ２３４ＡおよびＬ２３５ＡまたはＤ２６５ＡおよびＮ２９７Ａを有する）、または
ｅ）重鎖可変領域として配列番号９および軽鎖可変領域として配列番号１０、κ軽鎖定常領域として配列番号１１およびγ１重鎖定常領域として配列番号１２（場合により変異Ｌ２３４ＡおよびＬ２３５ＡまたはＤ２６５ＡおよびＮ２９７Ａを有する）。
【０００８】
１つの実施態様において、抗体は、抗体ＬＣ５００２−００２、ＬＣ５００２−００３、ＬＣ５００２−００５、ＬＣ５００２−００７および／またはＬＣ５００２−０１８に対して競合してＩＬ−１３Ｒα１に結合することを特徴とする。好ましくは、抗体は、可変領域としてＬＣ５００２−００２、ＬＣ５００２−００３、ＬＣ５００２−００５、ＬＣ５００２−００７またはＬＣ５００２−０１８の可変領域を含むことを特徴とする。これらの抗体の可変領域を配列番号１〜１０に示す。有用な定常領域は当技術分野の水準で周知である。例を配列番号１１〜１２に示す。
【０００９】
表
配列番号１ ＨｕＭａｂ ＬＣ５００２−００２の重鎖可変ドメイン
配列番号２ ＨｕＭａｂ ＬＣ５００２−００２の軽鎖可変ドメイン
配列番号３ ＨｕＭａｂ ＬＣ５００２−００３の重鎖可変ドメイン
配列番号４ ＨｕＭａｂ ＬＣ５００２−００３の軽鎖可変ドメイン
配列番号５ ＨｕＭａｂ ＬＣ５００２−００５の重鎖可変ドメイン
配列番号６ ＨｕＭａｂ ＬＣ５００２−００５の軽鎖可変ドメイン
配列番号７ ＨｕＭａｂ ＬＣ５００２−００７の重鎖可変ドメイン
配列番号８ ＨｕＭａｂ ＬＣ５００２−００７の軽鎖可変ドメイン
配列番号９ ＨｕＭａｂ ＬＣ５００２−０１８の重鎖可変ドメイン
配列番号１０ ＨｕＭａｂ ＬＣ５００２−０１８の軽鎖可変ドメイン
配列番号１１ κ軽鎖定常領域
配列番号１２ γ１重鎖定常領域
【００１０】
本発明の好ましい実施態様において、抗体は、
ａ）Ｇｌｙ２３６の欠失を有するアミノ酸配列Ｐｒｏ２３３Ｖａｌ２３４Ａｌａ２３５および／またはアミノ酸配列Ｇｌｙ３２７Ｌｅｕ３２８Ｐｒｏ３２９Ｓｅｒ３３０Ｓｅｒ３３１、
ｂ）アミノ酸配列Ａｌａ２３４Ａｌａ２３５または
ｃ）アミノ酸Ａｌａ２６５およびＡｌａ２９７
を含むヒトγ１重鎖を含む。
【００１１】
１つの実施態様において、本発明は、抗体が１０〜１５０ｍｇ／ｍＬ、好ましくは１０〜５０ｍｇ／ｍＬの範囲の量で存在する処方物を提供する。
【００１２】
ＩＬ−１３Ｒα１に対するアンタゴニストモノクローナル抗体をハイブリドーマ細胞株によって産生しうる。好ましいハイブリドーマ細胞株は（ｈｕ−ＭＡＢ＜ｈ−ＩＬ−１３Ｒα＞ＬＣ．５００２−００２（ＤＳＭ ＡＣＣ２７０９）、ｈｕ−ＭＡＢ＜ｈ−ＩＬ−１３Ｒα＞ＬＣ．５００２−００３（ＤＳＭ ＡＣＣ２７１０）、ｈｕ−ＭＡＢ＜ｈ−ＩＬ−１３Ｒα＞ＬＣ．５００２−００５（ＤＳＭ ＡＣＣ２７１１）、ｈｕ−ＭＡＢ＜ｈ−ＩＬ−１３Ｒα＞ＬＣ．５００２−００７（ＤＳＭ ＡＣＣ２７１２））であり、これらは１３．０１．２００５にDeutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH (DSMZ), Germanyに寄託された。
【００１３】
本発明による処方物において有用な抗体は、好ましくは組換え手段によって、例えばＷＯ２００６／０７２５６４に記載されるものによって産生される。そのような方法は、当技術分野の水準で広く知られており、そして、その後の抗体ポリペプチドの単離および通常薬学的に許容されうる純度への精製を伴う、原核細胞および真核細胞におけるタンパク質発現を含む。タンパク質発現のために、軽鎖および重鎖またはそのフラグメントをコードする核酸を標準的な方法によって発現ベクター中に挿入する。発現を、ＣＨＯ細胞、ＮＳ０細胞、ＳＰ２／０細胞、ＨＥＫ２９３細胞、ＣＯＳ細胞、酵母、またはＥ．ｃｏｌｉ細胞のような適切な原核または真核宿主細胞中で行い、そして抗体を、アルカリ／ＳＤＳ処理、ＣｓＣｌバンド形成、カラムクロマトグラフィー、アガロースゲル電気泳動、および例えばＷＯ２００６／０７２５６４に記載されるような当技術分野において周知のその他の技術を含む標準的な技術によって細胞（上清または溶解後の細胞）から回収する。
【００１４】
本明細書において使用する「バッファー」という用語は、医薬調製物のｐＨを安定化する薬学的に許容されうる賦形剤を示す。適切なバッファーは、当技術分野において周知であり、そして文献において見出されうる。好ましい薬学的に許容されうるバッファーは、ヒスチジンバッファー、クエン酸バッファー、コハク酸バッファー、酢酸バッファーおよびリン酸バッファーを含むがそれらに限定されない。さらに好ましいバッファーは、当技術分野において公知の酸または塩基を用いてｐＨ調整したＬ−ヒスチジンまたはＬ−ヒスチジンとＬ−ヒスチジン塩酸塩との混合物を含む。上記のバッファーは、一般に、約１ｍＭ〜約１００ｍＭ、好ましくは約５ｍＭ〜約５０ｍＭ、より好ましくは約１０〜２０ｍＭの量で使用される。使用するバッファーとは独立して、ｐＨを、約４．０〜約７．０、好ましくは約５．０〜約６．５、さらに好ましくは約５．５〜約６．０の値に、当技術分野において公知の酸または塩基、例えば、塩酸、酢酸、リン酸、硫酸およびクエン酸、水酸化ナトリウムおよび水酸化カリウムを用いて調整することができる。
【００１５】
本明細書において使用する「界面活性剤」という用語は、攪拌および剪断のような機械的ストレスに対してタンパク質処方物を保護するために使用される薬学的に許容されうる賦形剤を示す。薬学的に許容されうる界面活性剤の例は、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル（Ｔｗｅｅｎ）、ポリオキシエチレンアルキルエーテル（Ｂｒｉｊ）、アルキルフェニルポリオキシエチレンエーテル（Ｔｒｉｔｏｎ−Ｘ）、ポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレンコポリマー（Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ）、およびドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）を含む。好ましいポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステルは、ポリソルベート２０（商標Ｔｗｅｅｎ ２０（商標）の下に販売されている）およびポリソルベート８０（商標Ｔｗｅｅｎ ８０（商標）の下に販売されている）である。好ましいポリエチレン−ポリプロピレンコポリマーは、名称Ｐｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標）Ｆ６８またはＰｏｌｏｘａｍｅｒ １８８（商標）の下に販売されているものである。好ましいポリオキシエチレンアルキルエーテルは、商標Ｂｒｉｊ（商標）の下に販売されているものである。好ましいアルキルフェノールポリオキシエチレンエーテルは、商標Ｔｒｉｔｏｎ−Ｘの下に販売されている。ポリソルベート２０（Ｔｗｅｅｎ ２０（商標））およびポリソルベート８０（Ｔｗｅｅｎ ８０（商標））を使用する場合、それらは、一般に、約０．００１〜約１％、好ましくは約０．００５〜約０．１％、より好ましくは約０．０１％〜約０．０４％（ｗ／ｖ）（重量／容量）の濃度範囲で使用される。
【００１６】
「安定化剤」という用語は、製造、貯蔵および適用の間の化学的および／または物理的分解から活性医薬成分および／または処方物を保護する薬学的に許容されうる賦形剤を示す。タンパク質医薬の化学的および物理的分解経路は、Cleland et al. (1993), Crit Rev Ther Drug Carrier Syst 10(4):307-77、Wang (1999) Int J Pharm 185(2):129-88、Wang (2000) Int J Pharm 203(1-2):1-60およびChi et al. (2003) Pharm Res 20(9):1325-36によって概説されている。安定化剤は、本明細書中以下で定義するような、糖、アミノ酸、ポリオール、シクロデキストリン、例えばヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン、スルホブチルエチル−β−シクロデキストリン、β−シクロデキストリン、ポリエチレングリコール、例えばＰＥＧ ３０００、ＰＥＧ ３３５０、ＰＥＧ ４０００、ＰＥＧ ６０００、アルブミン、ヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）、ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）、塩、例えば塩化ナトリウム、塩化マグネシウム、塩化カルシウム、キレート剤、例えばＥＤＴＡを含むがそれらに限定されない。本明細書中上記のように、安定化剤は、約１０〜約５００ｍＭの量、好ましくは約１０〜約３００ｍＭの量、より好ましくは約１００ｍＭ〜約３００ｍＭの量で処方物中に存在することができる。
【００１７】
本明細書において使用する「糖」という用語は、単糖またはオリゴ糖を示す。単糖は、酸によって加水分解可能でない単量体炭水化物であり、単純糖およびその誘導体、例えばアミノ糖を含む。単糖の例は、グルコース、フルクトース、ガラクトース、マンノース、ソルボース、リボース、デオキシリボース、ノイラミン酸を含む。オリゴ糖は、分岐または鎖状のいずれかの、グリコシド結合を介して連結された１個より多くの単量体糖単位からなる炭水化物である。オリゴ糖内の単量体糖単位は、同一であることができ、または異なることができる。単量体糖単位の数に応じて、オリゴ糖は、ジ、トリ、テトラ、ペンタなどの糖である。多糖とは対照的に、単糖およびオリゴ糖は水溶性である。オリゴ糖の例は、スクロース、トレハロース、ラクトース、マルトースおよびラフィノースを含む。好ましい糖はスクロースおよびトレハロースであり、トレハロースが最も好ましい。
【００１８】
本明細書において使用する「アミノ酸」という用語は、カルボキシル基に対してα位に位置するアミノ部分を有する薬学的に許容されうる有機分子を示す。アミノ酸の例は、アルギニン、グリシン、オルニチン、リジン、ヒスチジン、グルタミン酸、アスパラギン酸、イソロイシン、ロイシン、アラニン、フェニルアラニン、チロシン、トリプトファン、メチオニン、セリン、プロリンを含む。アミノ酸は、一般に、約１０〜５００ｍＭの量、好ましくは約１０〜約３００ｍＭの量、より好ましくは約１００〜約３００ｍＭの量で使用される。
【００１９】
本明細書において使用する「ポリオール」という用語は、１個より多いヒドロキシ基を有する薬学的に許容されうるアルコールを示す。適切なポリオールは、マンニトール、ソルビトール、グリセリン、デキストラン、グリセロール、アラビトール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、およびその組み合わせを含むがそれらに限定されない。ポリオールを、約１０ｍＭ〜約５００ｍＭの量、好ましくは約１０〜約３００ｍＭの量、より好ましくは約１００〜約３００ｍＭの量で使用することができる。
【００２０】
安定化剤内の１つのサブグループは凍結乾燥保護剤（lyoprotectant）である。「凍結乾燥保護剤」という用語は、凍結乾燥プロセス、その後の貯蔵および再構成の間に不安定化条件に対して不安定な活性成分（例えばタンパク質）を保護する薬学的に許容されうる賦形剤を示す。凍結乾燥保護剤は、糖、ポリオール（例えば糖アルコールのような）およびアミノ酸からなる群を含むがそれらに限定されない。好ましい凍結乾燥保護剤を、糖、例えばスクロース、トレハロース、ラクトース、グルコース、マンノース、マルトース、ガラクトース、フルクトース、ソルボース、ラフィノース、ノイラミン酸、アミノ糖、例えばグルコサミン、ガラクトサミン、Ｎ−メチルグルコサミン（「Ｍｅｇｌｕｍｉｎｅ」）、ポリオール、例えばマンニトールおよびソルビトール、ならびにアミノ酸、例えばアルギニンおよびグリシンからなる群より選択することができる。凍結乾燥保護剤は、一般に、約１０〜５００ｍＭの量、好ましくは約１０〜約３００ｍＭの量、より好ましくは約１００〜約３００ｍＭの量で使用される。
【００２１】
安定化剤内の１つのサブグループは抗酸化剤である。「抗酸化剤」という用語は、活性医薬成分の酸化を防止する薬学的に許容されうる賦形剤を示す。抗酸化剤は、アスコルビン酸、グルタチオン（gluthadion）、システイン、メチオニン、クエン酸、ＥＤＴＡを含むがそれらに限定されない。抗酸化剤を、約１〜約１００ｍＭの量、好ましくは約５〜約５０ｍＭの量、より好ましくは約５〜約２０ｍＭの量で使用することができる。
【００２２】
本明細書において使用する「浸透圧剤」という用語は、薬学的に許容されうる浸透圧剤を示す。浸透圧剤は処方物の浸透圧を調節するために使用される。処方物は、低張性、等張性または高張性であることができる。等張性は、一般に、通常ヒト血清のものに対する、溶液の相対的浸透圧に関する。本発明による処方物は、低張性、等張性または高張性であることができるが、好ましくは等張性である。等張性処方物は、液体、または固体形態から、例えば凍結乾燥形態から再構成された液体であり、そしてそれが比較される何らかの他の溶液、例えば生理塩溶液および血清と同じ浸透圧を有する溶液を示す。適切な浸透圧剤は、塩化ナトリウム、塩化カリウム、グリセリン、およびアミノ酸、糖、特にグルコースの群からの任意の成分を含むがそれらに限定されない。浸透圧剤は、一般に、約５ｍＭ〜約５００ｍＭの量で使用される。好ましい処方物において、浸透圧剤の量は、５０ｍＭ〜３００ｍＭの範囲にある。
【００２３】
安定化剤および浸透圧剤内に、両方の方法で機能することができる化合物の群が存在する。すなわち、それらは同時に安定化剤および浸透圧剤であることができる。その例を、糖、アミノ酸、ポリオール、シクロデキストリン、ポリエチレングリコールおよび塩の群において見出すことができる。同時に安定化剤および浸透圧剤であることができる糖の一例はトレハロースである。
【００２４】
組成物はまた、佐剤、例えば保存料、湿潤剤、乳化剤および分散剤を含んでもよい。微生物の存在の防止は、滅菌プロセスによって、および種々の抗細菌および抗真菌剤、例えばパラベン、クロロブタノール、フェノール、ソルビン酸などを含めることによっての両方で確実にされうる。保存料は、一般に、約０．００１〜約２％（ｗ／ｖ）の量で使用される。保存料は、エタノール、ベンジルアルコール、フェノール、ｍ−クレゾール、ｐ−クロロ−ｍ−クレゾール、メチルまたはプロピルパラベン、塩化ベンザルコニウムを含むがそれらに限定されない。
【００２５】
本発明による処方物に関連して本明細書において使用する「液体」という用語は、大気圧下で少なくとも約２〜約８℃の温度で液体である処方物を示す。
【００２６】
本発明による処方物に関連して本明細書において使用する「凍結乾燥物」という用語は、それ自体当技術分野において公知の凍結乾燥方法によって製造される処方物を示す。溶媒（例えば水）は、凍結およびそれに続く真空下での昇華および上昇した温度での残存する水の脱着によって除去される。凍結乾燥物は、通常、約０．１〜５％（ｗ／ｗ）の残存水分を有し、そして粉末または物理的安定ケークとして存在する。凍結乾燥物は、再構成媒質の添加後の迅速な溶解によって特徴付けられる。
【００２７】
本発明による処方物に関連して本明細書において使用する「再構成処方物」という用語は、凍結乾燥され、そして再構成媒質の添加によって再溶解される処方物を示す。再構成媒質は、注射用水（ＷＦＩ）、注射用静菌水（ＢＷＦＩ）、塩化ナトリウム溶液（例えば０．９％（ｗ／ｖ）ＮａＣｌ）、グルコース溶液（例えば５％グルコース）、界面活性剤含有溶液（例えば０．０１％ポリソルベート２０）、ｐＨ緩衝溶液（例えばリン酸緩衝溶液）を含むがそれらに限定されない。
【００２８】
好ましい実施態様において、本発明は、
１〜５０ｍｇ／ｍＬ ｈｕＭＡｂ−ＩＬ−１３Ｒα１、
２０ｍＭ Ｌ−ヒスチジンＨＣｌ、
２４０ｍＭトレハロース、
０．０２％ポリソルベート２０、
（ｐＨ６．０）
または
１〜５０ｍｇ／ｍＬ ｈｕＭＡｂ−ＩＬ−１３Ｒα１、
２０ｍＭ Ｌ−ヒスチジンＨＣｌ、
２４０ｍＭトレハロース、
０．０４％ポリソルベート２０、
（ｐＨ６．０）
または
１〜５０ｍｇ／ｍＬ ｈｕＭＡｂ−ＩＬ−１３Ｒα１、
２０ｍＭ Ｌ−ヒスチジンＨＣｌ、
１６０ｍＭトレハロース、
１００ｍＭグリシン、
０．０２％ポリソルベート２０、
（ｐＨ６．０）
または
１〜５０ｍｇ／ｍＬ ｈｕＭＡｂ−ＩＬ−１３Ｒα１、
２０ｍＭ酢酸ナトリウム、
２４０ｍＭトレハロース、
０．０２％ポリソルベート２０、
（ｐＨ５．５）
または
１〜５０ｍｇ／ｍＬ ｈｕＭＡｂ−ＩＬ−１３Ｒα１、
２０ｍＭ酢酸ナトリウム、
２４０ｍＭトレハロース、
０．０４％ポリソルベート２０、
（ｐＨ５．５）
または
１〜５０ｍｇ／ｍＬ ｈｕＭＡｂ−ＩＬ−１３Ｒα１、
２０ｍＭコハク酸ナトリウム、
２４０ｍＭトレハロース、
０．０２％ポリソルベート２０、
（ｐＨ５．５）
または
１〜５０ｍｇ／ｍＬ ｈｕＭＡｂ−ＩＬ−１３Ｒα１、
２０ｍＭ Ｌ−ヒスチジンＨＣｌ、
２４０ｍＭトレハロース、
０．０４％ポリソルベート２０、
（ｐＨ６．０）
を含む液体処方物を提供する。
【００２９】
本発明による処方物は、喘息またはアレルギー性疾患に罹患した患者のために利益をもたらす新たなそして発明性の特性を有する。
【００３０】
本発明はさらに、喘息の処置のための医薬の製造のための本発明による処方物の使用を含む。
【００３１】
本発明の組成物を、当技術分野において公知の種々の方法によって投与することができる。当業者によって理解されるように、投与の経路および／または様式は、所望される結果に応じて変動する。
【００３２】
特定の投与経路によって本発明の組成物を投与するために、組成物を希釈剤中で希釈することが必要でありうる。薬学的に許容されうる希釈剤は、生理食塩水、グルコース、リンゲルおよび水性緩衝溶液を含む。
【００３３】
本明細書において使用する「非経口投与」および「非経口で投与される」という用語は、通常注射による、経腸および局所投与以外の投与様式を意味し、そして静脈内、筋肉内、動脈内、髄腔内、嚢内、眼窩内、心臓内、皮内、腹腔内、経気管、皮下、表皮下、関節内、嚢下、クモ膜下、脊髄内、硬膜外および胸骨内の注射および注入を含むがそれらに限定されない。
【００３４】
組成物は無菌でなければならず、そして組成物がシリンジによって送達可能である程度に流動性でなければならない。水に加えて、担体は、等張性緩衝生理食塩水、エタノール、ポリオール（例えばグリセロール、プロピレングリコール、および液体ポリエチレングリコールなど）、およびその適切な混合物であることができる。
【００３５】
本発明による処方物を、静脈内（ｉ．ｖ．）、皮下（ｓ．ｃ．）または医薬の技術分野において公知のもののような任意の他の非経口投与手段によって投与することができる。
【００３６】
本発明による処方物を、当技術分野において公知の方法、例えば限外ろ過−ダイアフィルトレーション、透析、添加および混合、凍結乾燥、再構成、およびその組み合わせによって調製することができる。本発明による処方物の調製の例を、本明細書中以下に見出すことができる。
【００３７】
実施例
実施例１：液体処方物の調製
ＷＯ２００６／０７２５６４に記載のように調製しそして得たｈｕＭＡｂ−ＩＬ１３−Ｒα１は、約６．０のｐＨの２０ｍＭヒスチジンバッファー中約１０〜１５ｍｇ／ｍＬの濃度で提供された。
【００３８】
液体処方物の調製のために、ｈｕＭＡｂ−ＩＬ１３−Ｒα１を、予期されるバッファー組成を含むダイアフィルトレーションバッファーに対してバッファー交換し、そして約１５ｍｇ／ｍＬの抗体濃度に限外ろ過によって濃縮した。限外ろ過操作の完了後、賦形剤（例えばトレハロース）を抗体溶液に２〜１０倍ストック溶液として添加した。次いで、界面活性剤を１００〜２００倍ストック溶液として添加した。最後に、タンパク質濃度を、バッファーを用いて約１０ｍｇ／ｍＬの最終ｈｕＭＡｂ−ＩＬ１３−Ｒα１濃度に調整した。
【００３９】
全ての処方物を、０．２２μｍ低タンパク質結合フィルターを通して無菌ろ過し、そしてＥＴＦＥ（エチレンおよびテトラフルオロエチレンのコポリマー）コートゴム栓およびａｌｕｃｒｉｍｐキャップで閉じた無菌６ｍＬガラスバイアル中に窒素雰囲気下で無菌的に充填した。充填容量は約２．４ｍＬであった。これらの処方物を様々な気候条件で（５℃、２５℃および４０℃）様々な時間間隔で貯蔵し、そして振とう（５℃で２００分−１の振とう頻度で１週間）および凍結融解ストレス方法によってストレスをかけた。試料をストレス試験を適用する前および後に、分析方法１）ＵＶ分光光度法、および２）サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）によって分析した。
【００４０】
サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）を使用して、処方物中の可溶性高分子量種（凝集物）および低分子量加水分解産物（ＬＭＷ）検出した。方法を、Ｔｏｓｏｈａａｓ ＴＳＫ Ｇ３０００ ＳＷＸＬカラムを備えたＷａｔｅｒ Ａｌｌｉａｎｃｅ ２７９５ ＨＰＬＣ機器で行った。インタクトな単量体、凝集物および加水分解産物を、アイソクラチック溶出プロファイルによって、０．２Ｍ Ｋ２ＨＰＯ４／０．２５Ｍ ＫＣＬ、ｐＨ７．０を移動相として使用して分離し、そして２２０ｎｍの波長で検出した。タンパク質含量の決定のために使用したＵＶ分光光度法を、Ｖａｒｉａｎ Ｃａｒｙ Ｂｉｏ ＵＶ分光光度計で、２４０ｎｍ〜４００ｎｍの波長範囲で行った。原液（neat）のタンパク質試料を、対応する処方バッファーを用いて約０．５ｍｇ／ｍＬに希釈した。タンパク質濃度を式１に従って算出した。
【００４１】
【数１】
【００４２】
２８０ｎｍでのＵＶ光吸収を、３２０ｎｍでの光散乱について補正し、そしてそれに原液の試料および希釈バッファーの秤量した質量および密度から決定した希釈因子を掛けた。分子を、キュベットの経路長ｄおよび吸光係数εの積で割った。
【００４３】
表１：
【表１】
【００４４】
実施例２：凍結乾燥処方物および凍結乾燥処方物から再構成された液体処方物の調製
約１０ｍｇ／ｍｌ ｈｕＭＡｂ−ＩＬ１３−Ｒα１の溶液を、実施例２に記載のように調製し、そして表２に報告する凍結−乾燥サイクルを使用して凍結乾燥した。
【００４５】
表２ 凍結乾燥サイクルタイプＩ
【表２】
【００４６】
産物をまず室温から約５℃に冷却し（前冷却）、続いて約１℃／分のプレート冷却速度での−４０℃での凍結工程、続いて−４０℃で約２時間の保持工程を行った。第１の乾燥工程を約−２５℃のプレート温度および約８０μｂａｒのチャンバー圧で約６２時間行った。その後、第２の乾燥工程を−２５℃から２５℃まで０．２℃／分の温度勾配で開始し、続いて２５℃で少なくとも５時間、約８０μｂａｒのチャンバー圧での保持工程を行った。
【００４７】
凍結乾燥をＵｓｉｆｒｏｉｄ ＳＭＨ−９０ ＬＮ２凍結乾燥機（Usifroid, Maurepas, France）中で行った。全ての凍結乾燥ケークは、Ｋａｒｌ−Ｆｉｓｃｈｅｒ法によって決定したところ、約０．１〜２．０％の残存含水量を有していた。凍結乾燥試料を様々な温度で様々な時間間隔でインキュベートした。
【００４８】
凍結乾燥処方物を、注射用水（ＷＦＩ）を用いて２．４ｍＬの最終容量に再構成し、約１０ｍｇ／ｍＬの抗体を有する等張性処方物を得た。凍結乾燥ケークの再構成時間は１分未満であった。再構成試料の分析を、再構成の直後、または２５℃での再構成液体試料の２４時間のインキュベーション期間の後のいずれかで行った。
【００４９】
試料を１）ＵＶ分光光度法および２）サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）によって分析した。
【００５０】
表３
【表３】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ＩＬ１３Ｒα１に対する抗体の医薬処方物、前記処方物の調製のための方法および使用に関する。
【０００２】
第１の局面において、本発明は、
１〜２００ｍｇ／ｍＬの抗体；
１〜１００ｍＭのバッファー；
０．００１〜１％の界面活性剤；
（ａ）１０〜５００ｍＭの安定化剤；または
（ｂ）１０〜５００ｍＭの安定化剤および５〜５００ｍＭの浸透圧剤；または
（ｃ）５〜５００ｍＭの浸透圧剤；
（ｐＨ４．０〜７．０の範囲）
を含み、
抗体はＩＬ１３Ｒα１に対する抗体である、医薬処方物に関する。
【０００３】
１つの実施態様において、本発明は、液体形態の処方物を提供する。別の実施態様において、本発明は、凍結乾燥形態の処方物を提供する。別の実施態様において、本発明は、凍結乾燥形態から再構成された液体形態の処方物を提供する。
【０００４】
ＩＬ１３Ｒα１に対する抗体は、例えばＷＯ９６／２９４１７、ＷＯ９７／１５６６３、ＷＯ ０３／０８０６７５、Graber et al., Eur. J. Immunol. 28:4286-4298 (1998)；Poudrier et al., J. Immunol. 163:1153-1161 (1999)；Poudrier et al., Eur. J. Immunol. 30:3157-3164 (2000)；Aikawa et al., Cytokine 13:75-84 (2001)から公知であり、そして例えばR&D Systems Inc. USAから市販されている。
【０００５】
ＩＬ１３Ｒα１に対する例示的な抗体は、ＷＯ２００６／０７２５６４に記載されており、そして重鎖ＣＤＲとして配列番号１のＣＤＲおよび軽鎖ＣＤＲとして配列番号２のＣＤＲ；重鎖ＣＤＲとして配列番号３のＣＤＲおよび軽鎖ＣＤＲとして配列番号４のＣＤＲ；重鎖ＣＤＲとして配列番号５のＣＤＲおよび軽鎖ＣＤＲとして配列番号６のＣＤＲ；重鎖ＣＤＲとして配列番号７のＣＤＲおよび軽鎖ＣＤＲとして配列番号８のＣＤＲ；または重鎖ＣＤＲとして配列番号９のＣＤＲおよび軽鎖ＣＤＲとして配列番号１０のＣＤＲを含むことを特徴とする抗体を含む。
【０００６】
ＣＤＲ配列を、Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th ed., Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD (1991)の標準定義に従って決定することができる。これに基づいて、相補性決定領域（ＣＤＲ）は以下の配列を有する：
重鎖ＣＤＲ：
配列番号１、３、５、７、９のＣＤＲ１（ａａ３１〜３５）、
配列番号１、３、５、７、９のＣＤＲ２（ａａ５０〜６６）、
配列番号１、３、９のＣＤＲ３（ａａ９９〜１０８）、
配列番号５のＣＤＲ３（ａａ９９〜１０７）、
配列番号７のＣＤＲ３（ａａ９９〜１１２）；
軽鎖ＣＤＲ：
配列番号２、４、６、１０のＣＤＲ１（ａａ２４〜３４）、
配列番号８のＣＤＲ１（ａａ２４〜３５）、
配列番号２、４、６、１０のＣＤＲ２（ａａ５０〜５６）、
配列番号８のＣＤＲ２（ａａ５１〜５７）および
配列番号２、４、６、１０のＣＤＲ３（ａａ８９〜９７）、
配列番号８のＣＤＲ３（ａａ９０〜９７）。
【０００７】
好ましい抗体は以下を含むことを特徴とする：
ａ）重鎖可変領域として配列番号１、軽鎖可変領域として配列番号２、κ軽鎖定常領域として配列番号１１およびγ１重鎖定常領域として配列番号１２（場合により変異Ｌ２３４ＡおよびＬ２３５ＡまたはＤ２６５ＡおよびＮ２９７Ａを有する）、
ｂ）重鎖可変領域として配列番号３および軽鎖可変領域として配列番号４、κ軽鎖定常領域として配列番号１１およびγ１重鎖定常領域として配列番号１２（場合により変異Ｌ２３４ＡおよびＬ２３５ＡまたはＤ２６５ＡおよびＮ２９７Ａを有する）、
ｃ）重鎖可変領域として配列番号５および軽鎖可変領域として配列番号６、κ軽鎖定常領域として配列番号１１およびγ１重鎖定常領域として配列番号１２（場合により変異Ｌ２３４ＡおよびＬ２３５ＡまたはＤ２６５ＡおよびＮ２９７Ａを有する）、
ｄ）重鎖可変領域として配列番号７および軽鎖可変領域として配列番号８、κ軽鎖定常領域として配列番号１１およびγ１重鎖定常領域として配列番号１２（場合により変異Ｌ２３４ＡおよびＬ２３５ＡまたはＤ２６５ＡおよびＮ２９７Ａを有する）、または
ｅ）重鎖可変領域として配列番号９および軽鎖可変領域として配列番号１０、κ軽鎖定常領域として配列番号１１およびγ１重鎖定常領域として配列番号１２（場合により変異Ｌ２３４ＡおよびＬ２３５ＡまたはＤ２６５ＡおよびＮ２９７Ａを有する）。
【０００８】
１つの実施態様において、抗体は、抗体ＬＣ５００２−００２、ＬＣ５００２−００３、ＬＣ５００２−００５、ＬＣ５００２−００７および／またはＬＣ５００２−０１８に対して競合してＩＬ−１３Ｒα１に結合することを特徴とする。好ましくは、抗体は、可変領域としてＬＣ５００２−００２、ＬＣ５００２−００３、ＬＣ５００２−００５、ＬＣ５００２−００７またはＬＣ５００２−０１８の可変領域を含むことを特徴とする。これらの抗体の可変領域を配列番号１〜１０に示す。有用な定常領域は当技術分野の水準で周知である。例を配列番号１１〜１２に示す。
【０００９】
表
配列番号１ ＨｕＭａｂ ＬＣ５００２−００２の重鎖可変ドメイン
配列番号２ ＨｕＭａｂ ＬＣ５００２−００２の軽鎖可変ドメイン
配列番号３ ＨｕＭａｂ ＬＣ５００２−００３の重鎖可変ドメイン
配列番号４ ＨｕＭａｂ ＬＣ５００２−００３の軽鎖可変ドメイン
配列番号５ ＨｕＭａｂ ＬＣ５００２−００５の重鎖可変ドメイン
配列番号６ ＨｕＭａｂ ＬＣ５００２−００５の軽鎖可変ドメイン
配列番号７ ＨｕＭａｂ ＬＣ５００２−００７の重鎖可変ドメイン
配列番号８ ＨｕＭａｂ ＬＣ５００２−００７の軽鎖可変ドメイン
配列番号９ ＨｕＭａｂ ＬＣ５００２−０１８の重鎖可変ドメイン
配列番号１０ ＨｕＭａｂ ＬＣ５００２−０１８の軽鎖可変ドメイン
配列番号１１ κ軽鎖定常領域
配列番号１２ γ１重鎖定常領域
【００１０】
本発明の好ましい実施態様において、抗体は、
ａ）Ｇｌｙ２３６の欠失を有するアミノ酸配列Ｐｒｏ２３３Ｖａｌ２３４Ａｌａ２３５および／またはアミノ酸配列Ｇｌｙ３２７Ｌｅｕ３２８Ｐｒｏ３２９Ｓｅｒ３３０Ｓｅｒ３３１、
ｂ）アミノ酸配列Ａｌａ２３４Ａｌａ２３５または
ｃ）アミノ酸Ａｌａ２６５およびＡｌａ２９７
を含むヒトγ１重鎖を含む。
【００１１】
１つの実施態様において、本発明は、抗体が１０〜１５０ｍｇ／ｍＬ、好ましくは１０〜５０ｍｇ／ｍＬの範囲の量で存在する処方物を提供する。
【００１２】
ＩＬ−１３Ｒα１に対するアンタゴニストモノクローナル抗体をハイブリドーマ細胞株によって産生しうる。好ましいハイブリドーマ細胞株は（ｈｕ−ＭＡＢ＜ｈ−ＩＬ−１３Ｒα＞ＬＣ．５００２−００２（ＤＳＭ ＡＣＣ２７０９）、ｈｕ−ＭＡＢ＜ｈ−ＩＬ−１３Ｒα＞ＬＣ．５００２−００３（ＤＳＭ ＡＣＣ２７１０）、ｈｕ−ＭＡＢ＜ｈ−ＩＬ−１３Ｒα＞ＬＣ．５００２−００５（ＤＳＭ ＡＣＣ２７１１）、ｈｕ−ＭＡＢ＜ｈ−ＩＬ−１３Ｒα＞ＬＣ．５００２−００７（ＤＳＭ ＡＣＣ２７１２））であり、これらは１３．０１．２００５にDeutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH (DSMZ), Germanyに寄託された。
【００１３】
本発明による処方物において有用な抗体は、好ましくは組換え手段によって、例えばＷＯ２００６／０７２５６４に記載されるものによって産生される。そのような方法は、当技術分野の水準で広く知られており、そして、その後の抗体ポリペプチドの単離および通常薬学的に許容されうる純度への精製を伴う、原核細胞および真核細胞におけるタンパク質発現を含む。タンパク質発現のために、軽鎖および重鎖またはそのフラグメントをコードする核酸を標準的な方法によって発現ベクター中に挿入する。発現を、ＣＨＯ細胞、ＮＳ０細胞、ＳＰ２／０細胞、ＨＥＫ２９３細胞、ＣＯＳ細胞、酵母、またはＥ．ｃｏｌｉ細胞のような適切な原核または真核宿主細胞中で行い、そして抗体を、アルカリ／ＳＤＳ処理、ＣｓＣｌバンド形成、カラムクロマトグラフィー、アガロースゲル電気泳動、および例えばＷＯ２００６／０７２５６４に記載されるような当技術分野において周知のその他の技術を含む標準的な技術によって細胞（上清または溶解後の細胞）から回収する。
【００１４】
本明細書において使用する「バッファー」という用語は、医薬調製物のｐＨを安定化する薬学的に許容されうる賦形剤を示す。適切なバッファーは、当技術分野において周知であり、そして文献において見出されうる。好ましい薬学的に許容されうるバッファーは、ヒスチジンバッファー、クエン酸バッファー、コハク酸バッファー、酢酸バッファーおよびリン酸バッファーを含むがそれらに限定されない。さらに好ましいバッファーは、当技術分野において公知の酸または塩基を用いてｐＨ調整したＬ−ヒスチジンまたはＬ−ヒスチジンとＬ−ヒスチジン塩酸塩との混合物を含む。上記のバッファーは、一般に、約１ｍＭ〜約１００ｍＭ、好ましくは約５ｍＭ〜約５０ｍＭ、より好ましくは約１０〜２０ｍＭの量で使用される。使用するバッファーとは独立して、ｐＨを、約４．０〜約７．０、好ましくは約５．０〜約６．５、さらに好ましくは約５．５〜約６．０の値に、当技術分野において公知の酸または塩基、例えば、塩酸、酢酸、リン酸、硫酸およびクエン酸、水酸化ナトリウムおよび水酸化カリウムを用いて調整することができる。
【００１５】
本明細書において使用する「界面活性剤」という用語は、攪拌および剪断のような機械的ストレスに対してタンパク質処方物を保護するために使用される薬学的に許容されうる賦形剤を示す。薬学的に許容されうる界面活性剤の例は、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル（Ｔｗｅｅｎ）、ポリオキシエチレンアルキルエーテル（Ｂｒｉｊ）、アルキルフェニルポリオキシエチレンエーテル（Ｔｒｉｔｏｎ−Ｘ）、ポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレンコポリマー（Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ）、およびドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）を含む。好ましいポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステルは、ポリソルベート２０（商標Ｔｗｅｅｎ ２０（商標）の下に販売されている）およびポリソルベート８０（商標Ｔｗｅｅｎ ８０（商標）の下に販売されている）である。好ましいポリエチレン−ポリプロピレンコポリマーは、名称Ｐｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標）Ｆ６８またはＰｏｌｏｘａｍｅｒ １８８（商標）の下に販売されているものである。好ましいポリオキシエチレンアルキルエーテルは、商標Ｂｒｉｊ（商標）の下に販売されているものである。好ましいアルキルフェノールポリオキシエチレンエーテルは、商標Ｔｒｉｔｏｎ−Ｘの下に販売されている。ポリソルベート２０（Ｔｗｅｅｎ ２０（商標））およびポリソルベート８０（Ｔｗｅｅｎ ８０（商標））を使用する場合、それらは、一般に、約０．００１〜約１％、好ましくは約０．００５〜約０．１％、より好ましくは約０．０１％〜約０．０４％（ｗ／ｖ）（重量／容量）の濃度範囲で使用される。
【００１６】
「安定化剤」という用語は、製造、貯蔵および適用の間の化学的および／または物理的分解から活性医薬成分および／または処方物を保護する薬学的に許容されうる賦形剤を示す。タンパク質医薬の化学的および物理的分解経路は、Cleland et al. (1993), Crit Rev Ther Drug Carrier Syst 10(4):307-77、Wang (1999) Int J Pharm 185(2):129-88、Wang (2000) Int J Pharm 203(1-2):1-60およびChi et al. (2003) Pharm Res 20(9):1325-36によって概説されている。安定化剤は、本明細書中以下で定義するような、糖、アミノ酸、ポリオール、シクロデキストリン、例えばヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン、スルホブチルエチル−β−シクロデキストリン、β−シクロデキストリン、ポリエチレングリコール、例えばＰＥＧ ３０００、ＰＥＧ ３３５０、ＰＥＧ ４０００、ＰＥＧ ６０００、アルブミン、ヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）、ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）、塩、例えば塩化ナトリウム、塩化マグネシウム、塩化カルシウム、キレート剤、例えばＥＤＴＡを含むがそれらに限定されない。本明細書中上記のように、安定化剤は、約１０〜約５００ｍＭの量、好ましくは約１０〜約３００ｍＭの量、より好ましくは約１００ｍＭ〜約３００ｍＭの量で処方物中に存在することができる。
【００１７】
本明細書において使用する「糖」という用語は、単糖またはオリゴ糖を示す。単糖は、酸によって加水分解可能でない単量体炭水化物であり、単純糖およびその誘導体、例えばアミノ糖を含む。単糖の例は、グルコース、フルクトース、ガラクトース、マンノース、ソルボース、リボース、デオキシリボース、ノイラミン酸を含む。オリゴ糖は、分岐または鎖状のいずれかの、グリコシド結合を介して連結された１個より多くの単量体糖単位からなる炭水化物である。オリゴ糖内の単量体糖単位は、同一であることができ、または異なることができる。単量体糖単位の数に応じて、オリゴ糖は、ジ、トリ、テトラ、ペンタなどの糖である。多糖とは対照的に、単糖およびオリゴ糖は水溶性である。オリゴ糖の例は、スクロース、トレハロース、ラクトース、マルトースおよびラフィノースを含む。好ましい糖はスクロースおよびトレハロースであり、トレハロースが最も好ましい。
【００１８】
本明細書において使用する「アミノ酸」という用語は、カルボキシル基に対してα位に位置するアミノ部分を有する薬学的に許容されうる有機分子を示す。アミノ酸の例は、アルギニン、グリシン、オルニチン、リジン、ヒスチジン、グルタミン酸、アスパラギン酸、イソロイシン、ロイシン、アラニン、フェニルアラニン、チロシン、トリプトファン、メチオニン、セリン、プロリンを含む。アミノ酸は、一般に、約１０〜５００ｍＭの量、好ましくは約１０〜約３００ｍＭの量、より好ましくは約１００〜約３００ｍＭの量で使用される。
【００１９】
本明細書において使用する「ポリオール」という用語は、１個より多いヒドロキシ基を有する薬学的に許容されうるアルコールを示す。適切なポリオールは、マンニトール、ソルビトール、グリセリン、デキストラン、グリセロール、アラビトール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、およびその組み合わせを含むがそれらに限定されない。ポリオールを、約１０ｍＭ〜約５００ｍＭの量、好ましくは約１０〜約３００ｍＭの量、より好ましくは約１００〜約３００ｍＭの量で使用することができる。
【００２０】
安定化剤内の１つのサブグループは凍結乾燥保護剤（lyoprotectant）である。「凍結乾燥保護剤」という用語は、凍結乾燥プロセス、その後の貯蔵および再構成の間に不安定化条件に対して不安定な活性成分（例えばタンパク質）を保護する薬学的に許容されうる賦形剤を示す。凍結乾燥保護剤は、糖、ポリオール（例えば糖アルコールのような）およびアミノ酸からなる群を含むがそれらに限定されない。好ましい凍結乾燥保護剤を、糖、例えばスクロース、トレハロース、ラクトース、グルコース、マンノース、マルトース、ガラクトース、フルクトース、ソルボース、ラフィノース、ノイラミン酸、アミノ糖、例えばグルコサミン、ガラクトサミン、Ｎ−メチルグルコサミン（「Ｍｅｇｌｕｍｉｎｅ」）、ポリオール、例えばマンニトールおよびソルビトール、ならびにアミノ酸、例えばアルギニンおよびグリシンからなる群より選択することができる。凍結乾燥保護剤は、一般に、約１０〜５００ｍＭの量、好ましくは約１０〜約３００ｍＭの量、より好ましくは約１００〜約３００ｍＭの量で使用される。
【００２１】
安定化剤内の１つのサブグループは抗酸化剤である。「抗酸化剤」という用語は、活性医薬成分の酸化を防止する薬学的に許容されうる賦形剤を示す。抗酸化剤は、アスコルビン酸、グルタチオン（gluthadion）、システイン、メチオニン、クエン酸、ＥＤＴＡを含むがそれらに限定されない。抗酸化剤を、約１〜約１００ｍＭの量、好ましくは約５〜約５０ｍＭの量、より好ましくは約５〜約２０ｍＭの量で使用することができる。
【００２２】
本明細書において使用する「浸透圧剤」という用語は、薬学的に許容されうる浸透圧剤を示す。浸透圧剤は処方物の浸透圧を調節するために使用される。処方物は、低張性、等張性または高張性であることができる。等張性は、一般に、通常ヒト血清のものに対する、溶液の相対的浸透圧に関する。本発明による処方物は、低張性、等張性または高張性であることができるが、好ましくは等張性である。等張性処方物は、液体、または固体形態から、例えば凍結乾燥形態から再構成された液体であり、そしてそれが比較される何らかの他の溶液、例えば生理塩溶液および血清と同じ浸透圧を有する溶液を示す。適切な浸透圧剤は、塩化ナトリウム、塩化カリウム、グリセリン、およびアミノ酸、糖、特にグルコースの群からの任意の成分を含むがそれらに限定されない。浸透圧剤は、一般に、約５ｍＭ〜約５００ｍＭの量で使用される。好ましい処方物において、浸透圧剤の量は、５０ｍＭ〜３００ｍＭの範囲にある。
【００２３】
安定化剤および浸透圧剤内に、両方の方法で機能することができる化合物の群が存在する。すなわち、それらは同時に安定化剤および浸透圧剤であることができる。その例を、糖、アミノ酸、ポリオール、シクロデキストリン、ポリエチレングリコールおよび塩の群において見出すことができる。同時に安定化剤および浸透圧剤であることができる糖の一例はトレハロースである。
【００２４】
組成物はまた、佐剤、例えば保存料、湿潤剤、乳化剤および分散剤を含んでもよい。微生物の存在の防止は、滅菌プロセスによって、および種々の抗細菌および抗真菌剤、例えばパラベン、クロロブタノール、フェノール、ソルビン酸などを含めることによっての両方で確実にされうる。保存料は、一般に、約０．００１〜約２％（ｗ／ｖ）の量で使用される。保存料は、エタノール、ベンジルアルコール、フェノール、ｍ−クレゾール、ｐ−クロロ−ｍ−クレゾール、メチルまたはプロピルパラベン、塩化ベンザルコニウムを含むがそれらに限定されない。
【００２５】
本発明による処方物に関連して本明細書において使用する「液体」という用語は、大気圧下で少なくとも約２〜約８℃の温度で液体である処方物を示す。
【００２６】
本発明による処方物に関連して本明細書において使用する「凍結乾燥物」という用語は、それ自体当技術分野において公知の凍結乾燥方法によって製造される処方物を示す。溶媒（例えば水）は、凍結およびそれに続く真空下での昇華および上昇した温度での残存する水の脱着によって除去される。凍結乾燥物は、通常、約０．１〜５％（ｗ／ｗ）の残存水分を有し、そして粉末または物理的安定ケークとして存在する。凍結乾燥物は、再構成媒質の添加後の迅速な溶解によって特徴付けられる。
【００２７】
本発明による処方物に関連して本明細書において使用する「再構成処方物」という用語は、凍結乾燥され、そして再構成媒質の添加によって再溶解される処方物を示す。再構成媒質は、注射用水（ＷＦＩ）、注射用静菌水（ＢＷＦＩ）、塩化ナトリウム溶液（例えば０．９％（ｗ／ｖ）ＮａＣｌ）、グルコース溶液（例えば５％グルコース）、界面活性剤含有溶液（例えば０．０１％ポリソルベート２０）、ｐＨ緩衝溶液（例えばリン酸緩衝溶液）を含むがそれらに限定されない。
【００２８】
好ましい実施態様において、本発明は、
１〜５０ｍｇ／ｍＬ ｈｕＭＡｂ−ＩＬ−１３Ｒα１、
２０ｍＭ Ｌ−ヒスチジンＨＣｌ、
２４０ｍＭトレハロース、
０．０２％ポリソルベート２０、
（ｐＨ６．０）
または
１〜５０ｍｇ／ｍＬ ｈｕＭＡｂ−ＩＬ−１３Ｒα１、
２０ｍＭ Ｌ−ヒスチジンＨＣｌ、
２４０ｍＭトレハロース、
０．０４％ポリソルベート２０、
（ｐＨ６．０）
または
１〜５０ｍｇ／ｍＬ ｈｕＭＡｂ−ＩＬ−１３Ｒα１、
２０ｍＭ Ｌ−ヒスチジンＨＣｌ、
１６０ｍＭトレハロース、
１００ｍＭグリシン、
０．０２％ポリソルベート２０、
（ｐＨ６．０）
または
１〜５０ｍｇ／ｍＬ ｈｕＭＡｂ−ＩＬ−１３Ｒα１、
２０ｍＭ酢酸ナトリウム、
２４０ｍＭトレハロース、
０．０２％ポリソルベート２０、
（ｐＨ５．５）
または
１〜５０ｍｇ／ｍＬ ｈｕＭＡｂ−ＩＬ−１３Ｒα１、
２０ｍＭ酢酸ナトリウム、
２４０ｍＭトレハロース、
０．０４％ポリソルベート２０、
（ｐＨ５．５）
または
１〜５０ｍｇ／ｍＬ ｈｕＭＡｂ−ＩＬ−１３Ｒα１、
２０ｍＭコハク酸ナトリウム、
２４０ｍＭトレハロース、
０．０２％ポリソルベート２０、
（ｐＨ５．５）
または
１〜５０ｍｇ／ｍＬ ｈｕＭＡｂ−ＩＬ−１３Ｒα１、
２０ｍＭ Ｌ−ヒスチジンＨＣｌ、
２４０ｍＭトレハロース、
０．０４％ポリソルベート２０、
（ｐＨ６．０）
を含む液体処方物を提供する。
【００２９】
本発明による処方物は、喘息またはアレルギー性疾患に罹患した患者のために利益をもたらす新たなそして発明性の特性を有する。
【００３０】
本発明はさらに、喘息の処置のための医薬の製造のための本発明による処方物の使用を含む。
【００３１】
本発明の組成物を、当技術分野において公知の種々の方法によって投与することができる。当業者によって理解されるように、投与の経路および／または様式は、所望される結果に応じて変動する。
【００３２】
特定の投与経路によって本発明の組成物を投与するために、組成物を希釈剤中で希釈することが必要でありうる。薬学的に許容されうる希釈剤は、生理食塩水、グルコース、リンゲルおよび水性緩衝溶液を含む。
【００３３】
本明細書において使用する「非経口投与」および「非経口で投与される」という用語は、通常注射による、経腸および局所投与以外の投与様式を意味し、そして静脈内、筋肉内、動脈内、髄腔内、嚢内、眼窩内、心臓内、皮内、腹腔内、経気管、皮下、表皮下、関節内、嚢下、クモ膜下、脊髄内、硬膜外および胸骨内の注射および注入を含むがそれらに限定されない。
【００３４】
組成物は無菌でなければならず、そして組成物がシリンジによって送達可能である程度に流動性でなければならない。水に加えて、担体は、等張性緩衝生理食塩水、エタノール、ポリオール（例えばグリセロール、プロピレングリコール、および液体ポリエチレングリコールなど）、およびその適切な混合物であることができる。
【００３５】
本発明による処方物を、静脈内（ｉ．ｖ．）、皮下（ｓ．ｃ．）または医薬の技術分野において公知のもののような任意の他の非経口投与手段によって投与することができる。
【００３６】
本発明による処方物を、当技術分野において公知の方法、例えば限外ろ過−ダイアフィルトレーション、透析、添加および混合、凍結乾燥、再構成、およびその組み合わせによって調製することができる。本発明による処方物の調製の例を、本明細書中以下に見出すことができる。
【００３７】
実施例
実施例１：液体処方物の調製
ＷＯ２００６／０７２５６４に記載のように調製しそして得たｈｕＭＡｂ−ＩＬ１３−Ｒα１は、約６．０のｐＨの２０ｍＭヒスチジンバッファー中約１０〜１５ｍｇ／ｍＬの濃度で提供された。
【００３８】
液体処方物の調製のために、ｈｕＭＡｂ−ＩＬ１３−Ｒα１を、予期されるバッファー組成を含むダイアフィルトレーションバッファーに対してバッファー交換し、そして約１５ｍｇ／ｍＬの抗体濃度に限外ろ過によって濃縮した。限外ろ過操作の完了後、賦形剤（例えばトレハロース）を抗体溶液に２〜１０倍ストック溶液として添加した。次いで、界面活性剤を１００〜２００倍ストック溶液として添加した。最後に、タンパク質濃度を、バッファーを用いて約１０ｍｇ／ｍＬの最終ｈｕＭＡｂ−ＩＬ１３−Ｒα１濃度に調整した。
【００３９】
全ての処方物を、０．２２μｍ低タンパク質結合フィルターを通して無菌ろ過し、そしてＥＴＦＥ（エチレンおよびテトラフルオロエチレンのコポリマー）コートゴム栓およびａｌｕｃｒｉｍｐキャップで閉じた無菌６ｍＬガラスバイアル中に窒素雰囲気下で無菌的に充填した。充填容量は約２．４ｍＬであった。これらの処方物を様々な気候条件で（５℃、２５℃および４０℃）様々な時間間隔で貯蔵し、そして振とう（５℃で２００分−１の振とう頻度で１週間）および凍結融解ストレス方法によってストレスをかけた。試料をストレス試験を適用する前および後に、分析方法１）ＵＶ分光光度法、および２）サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）によって分析した。
【００４０】
サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）を使用して、処方物中の可溶性高分子量種（凝集物）および低分子量加水分解産物（ＬＭＷ）検出した。方法を、Ｔｏｓｏｈａａｓ ＴＳＫ Ｇ３０００ ＳＷＸＬカラムを備えたＷａｔｅｒ Ａｌｌｉａｎｃｅ ２７９５ ＨＰＬＣ機器で行った。インタクトな単量体、凝集物および加水分解産物を、アイソクラチック溶出プロファイルによって、０．２Ｍ Ｋ２ＨＰＯ４／０．２５Ｍ ＫＣＬ、ｐＨ７．０を移動相として使用して分離し、そして２２０ｎｍの波長で検出した。タンパク質含量の決定のために使用したＵＶ分光光度法を、Ｖａｒｉａｎ Ｃａｒｙ Ｂｉｏ ＵＶ分光光度計で、２４０ｎｍ〜４００ｎｍの波長範囲で行った。原液（neat）のタンパク質試料を、対応する処方バッファーを用いて約０．５ｍｇ／ｍＬに希釈した。タンパク質濃度を式１に従って算出した。
【００４１】
【数１】
【００４２】
２８０ｎｍでのＵＶ光吸収を、３２０ｎｍでの光散乱について補正し、そしてそれに原液の試料および希釈バッファーの秤量した質量および密度から決定した希釈因子を掛けた。分子を、キュベットの経路長ｄおよび吸光係数εの積で割った。
【００４３】
表１：
【表１】
【００４４】
実施例２：凍結乾燥処方物および凍結乾燥処方物から再構成された液体処方物の調製
約１０ｍｇ／ｍｌ ｈｕＭＡｂ−ＩＬ１３−Ｒα１の溶液を、実施例２に記載のように調製し、そして表２に報告する凍結−乾燥サイクルを使用して凍結乾燥した。
【００４５】
表２ 凍結乾燥サイクルタイプＩ
【表２】
【００４６】
産物をまず室温から約５℃に冷却し（前冷却）、続いて約１℃／分のプレート冷却速度での−４０℃での凍結工程、続いて−４０℃で約２時間の保持工程を行った。第１の乾燥工程を約−２５℃のプレート温度および約８０μｂａｒのチャンバー圧で約６２時間行った。その後、第２の乾燥工程を−２５℃から２５℃まで０．２℃／分の温度勾配で開始し、続いて２５℃で少なくとも５時間、約８０μｂａｒのチャンバー圧での保持工程を行った。
【００４７】
凍結乾燥をＵｓｉｆｒｏｉｄ ＳＭＨ−９０ ＬＮ２凍結乾燥機（Usifroid, Maurepas, France）中で行った。全ての凍結乾燥ケークは、Ｋａｒｌ−Ｆｉｓｃｈｅｒ法によって決定したところ、約０．１〜２．０％の残存含水量を有していた。凍結乾燥試料を様々な温度で様々な時間間隔でインキュベートした。
【００４８】
凍結乾燥処方物を、注射用水（ＷＦＩ）を用いて２．４ｍＬの最終容量に再構成し、約１０ｍｇ／ｍＬの抗体を有する等張性処方物を得た。凍結乾燥ケークの再構成時間は１分未満であった。再構成試料の分析を、再構成の直後、または２５℃での再構成液体試料の２４時間のインキュベーション期間の後のいずれかで行った。
【００４９】
試料を１）ＵＶ分光光度法および２）サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）によって分析した。
【００５０】
表３
【表３】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
１〜２００ｍｇ／ｍＬの抗体；
１〜１００ｍＭのバッファー；
０．００１〜１％の界面活性剤；
（ａ）１０〜５００ｍＭの安定化剤；または
（ｂ）１０〜５００ｍＭの安定化剤および５〜５００ｍＭの浸透圧剤；または
（ｃ）５〜５００ｍＭの浸透圧剤；
（ｐＨ４．０〜７．０の範囲）
を含み、
抗体はＩＬ１３Ｒα１に対する抗体である、医薬処方物。
【請求項２】
液体処方物または凍結乾燥処方物または凍結乾燥処方物から再構成された液体処方物である、請求項１記載の処方物。
【請求項３】
抗体濃度が１０ｍｇ／ｍＬ〜１５０ｍｇ／ｍＬの範囲である、請求項１または２記載の処方物。
【請求項４】
安定化剤がトレハロースである、請求項１〜３のいずれか１項記載の処方物。
【請求項５】
界面活性剤がポリソルベートである、請求項１〜３のいずれか１項記載の処方物。
【請求項６】
バッファーがヒスチジンバッファーである、請求項１〜３のいずれか１項記載の処方物。
【請求項７】
浸透圧剤を含む、請求項１〜４のいずれか１項記載の処方物。
【請求項８】
浸透圧剤がトレハロースである、請求項１〜７のいずれか１項記載の処方物。
【請求項９】
１〜約５０ｍｇ／ｍＬ ｈｕＭＡｂ−ＩＬ−１３Ｒα１、
２０ｍＭ Ｌ−ヒスチジンＨＣｌ、
２４０ｍＭトレハロース、
０．０２％ポリソルベート２０、
（ｐＨ６．０）
または
１〜５０ｍｇ／ｍＬ ｈｕＭＡｂ−ＩＬ−１３Ｒα１、
２０ｍＭ Ｌ−ヒスチジンＨＣｌ、
２４０ｍＭトレハロース、
０．０４％ポリソルベート２０、
（ｐＨ６．０）
または
１〜５０ｍｇ／ｍＬ ｈｕＭＡｂ−ＩＬ−１３Ｒα１、
２０ｍＭコハク酸ナトリウム、
２４０ｍＭトレハロース、
０．０２％ポリソルベート２０、
（ｐＨ５．５）
または
１〜５０ｍｇ／ｍＬ ｈｕＭＡｂ−ＩＬ−１３Ｒα１、
２０ｍＭ Ｌ−ヒスチジンＨＣｌ、
２４０ｍＭトレハロース、
０．０４％ポリソルベート２０、
（ｐＨ６．０）
を含む、請求項１記載の凍結乾燥処方物。
【請求項１０】
喘息またはアレルギーを処置するために有用な医薬の調製のための請求項１〜９のいずれか１項記載の処方物の使用。
【請求項１】
１〜２００ｍｇ／ｍＬの抗体；
１〜１００ｍＭのバッファー；
０．００１〜１％の界面活性剤；
（ａ）１０〜５００ｍＭの安定化剤；または
（ｂ）１０〜５００ｍＭの安定化剤および５〜５００ｍＭの浸透圧剤；または
（ｃ）５〜５００ｍＭの浸透圧剤；
（ｐＨ４．０〜７．０の範囲）
を含み、
抗体はＩＬ１３Ｒα１に対する抗体である、医薬処方物。
【請求項２】
液体処方物または凍結乾燥処方物または凍結乾燥処方物から再構成された液体処方物である、請求項１記載の処方物。
【請求項３】
抗体濃度が１０ｍｇ／ｍＬ〜１５０ｍｇ／ｍＬの範囲である、請求項１または２記載の処方物。
【請求項４】
安定化剤がトレハロースである、請求項１〜３のいずれか１項記載の処方物。
【請求項５】
界面活性剤がポリソルベートである、請求項１〜３のいずれか１項記載の処方物。
【請求項６】
バッファーがヒスチジンバッファーである、請求項１〜３のいずれか１項記載の処方物。
【請求項７】
浸透圧剤を含む、請求項１〜４のいずれか１項記載の処方物。
【請求項８】
浸透圧剤がトレハロースである、請求項１〜７のいずれか１項記載の処方物。
【請求項９】
１〜約５０ｍｇ／ｍＬ ｈｕＭＡｂ−ＩＬ−１３Ｒα１、
２０ｍＭ Ｌ−ヒスチジンＨＣｌ、
２４０ｍＭトレハロース、
０．０２％ポリソルベート２０、
（ｐＨ６．０）
または
１〜５０ｍｇ／ｍＬ ｈｕＭＡｂ−ＩＬ−１３Ｒα１、
２０ｍＭ Ｌ−ヒスチジンＨＣｌ、
２４０ｍＭトレハロース、
０．０４％ポリソルベート２０、
（ｐＨ６．０）
または
１〜５０ｍｇ／ｍＬ ｈｕＭＡｂ−ＩＬ−１３Ｒα１、
２０ｍＭコハク酸ナトリウム、
２４０ｍＭトレハロース、
０．０２％ポリソルベート２０、
（ｐＨ５．５）
または
１〜５０ｍｇ／ｍＬ ｈｕＭＡｂ−ＩＬ−１３Ｒα１、
２０ｍＭ Ｌ−ヒスチジンＨＣｌ、
２４０ｍＭトレハロース、
０．０４％ポリソルベート２０、
（ｐＨ６．０）
を含む、請求項１記載の凍結乾燥処方物。
【請求項１０】
喘息またはアレルギーを処置するために有用な医薬の調製のための請求項１〜９のいずれか１項記載の処方物の使用。
【公表番号】特表２０１０−５３１３４０（Ｐ２０１０−５３１３４０Ａ）
【公表日】平成２２年９月２４日（２０１０．９．２４）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１０−５１３９６９（Ｐ２０１０−５１３９６９）
【出願日】平成２０年７月１日（２００８．７．１）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＥＰ２００８／０５８４４６
【国際公開番号】ＷＯ２００９／００７２７２
【国際公開日】平成２１年１月１５日（２００９．１．１５）
【出願人】（５９１００３０１３）エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲー (1,754)
【氏名又は名称原語表記】Ｆ． ＨＯＦＦＭＡＮＮ−ＬＡ ＲＯＣＨＥ ＡＫＴＩＥＮＧＥＳＥＬＬＳＣＨＡＦＴ
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２２年９月２４日（２０１０．９．２４）
【国際特許分類】
【出願日】平成２０年７月１日（２００８．７．１）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＥＰ２００８／０５８４４６
【国際公開番号】ＷＯ２００９／００７２７２
【国際公開日】平成２１年１月１５日（２００９．１．１５）
【出願人】（５９１００３０１３）エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲー (1,754)
【氏名又は名称原語表記】Ｆ． ＨＯＦＦＭＡＮＮ−ＬＡ ＲＯＣＨＥ ＡＫＴＩＥＮＧＥＳＥＬＬＳＣＨＡＦＴ
【Ｆターム（参考）】
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