生活習慣病予防又は改善剤
【課題】天然物由来の成分から、肥満症、内臓脂肪蓄積、高脂血症、高尿酸血症、肝臓疾患等の生活習慣病の予防、治療又は改善剤を見出すこと。
【解決手段】オキアミタンパク質を有効成分とする生活習慣病の予防又は改善剤。
【解決手段】オキアミタンパク質を有効成分とする生活習慣病の予防又は改善剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、生活習慣病予防又は改善剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、食生活や運動などのライフスタイルの変化に伴い、肥満症、内臓脂肪蓄積、高脂血症、高尿酸血症（特に痛風）、糖尿病、高血圧症、肝臓疾患、心疾患等の生活習慣病が急激に増えつつあり、大きな社会問題となっている。生活習慣病を予防又は改善できる物質の探索は重要であるが、そのような物質としては、クオリティオブライフ（ＱＯＬ）の点から、日々食するような特定健康食品や機能性食品等の食品に配合しても、安全かつ長期間摂取できる天然由来の素材が望まれている。
【０００３】
ところで、オキアミには、エイコサペンタエン酸やドコサヘキサエン酸等のｎ−３系脂肪酸を含む中性脂肪やリン脂質が多く含まれ、オキアミから抽出したこれらの成分を含有するオイルが、高脂血症等を改善することが知られている（非特許文献１）。
【０００４】
また、オキアミを煮熟処理したキチン等を含む煮熟オキアミ（主として身部分）は、体重増加量を減少させる作用を有することが知られているが、一方でその作用は血清コレステロールの上昇が認められなかった程度に留まると共に、高濃度で摂取すると鉄欠乏性貧血症状が発現してしまうことが知られている（非特許文献２）。
また、オキアミ等に含まれるキチンは、消化管からのプリン体吸収を阻害することにより尿酸値上昇を抑える作用を有することが実験的には知られているが、高尿酸血症の改善にあたって、食物からのプリン体吸収を阻害することの重要性は低く、むしろ血中の尿酸値上昇の原因は内因性の尿酸が原因となるので、血中の尿酸値上昇が抑制できることが重要である。
【０００５】
また、オキアミのアルコール水抽出物には、レプチン分泌促進作用があること（特許文献１）、またオキアミの熱水抽出物には、発ガンプロモーション阻害作用があること（特許文献２）が知られている。
【０００６】
しかしながら、オキアミタンパク質に、生活習慣病予防又は改善作用があることは知られていない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】特開２００８−２３９５００号公報
【特許文献２】特開平６−２９３６４７号公報
【非特許文献】
【０００８】
【非特許文献１】栄養学雑誌，Vol.48,No.5,213-220(1990).
【非特許文献２】栄養学雑誌，Vol.38,No.6,311-319(1980).
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
本発明の目的は、天然物由来の成分から、肥満症、内臓脂肪蓄積、高脂血症、高尿酸血症、肝臓疾患等の生活習慣病の予防、治療又は改善剤を見出すことにある。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
かかる実状に鑑み、本発明者は鋭意検討を行った結果、オキアミ由来の成分のうち、油脂でなくオキアミタンパク質に、優れた内臓脂肪（特に腸間膜脂肪）蓄積、肥満症、高脂血症、高尿酸血症や肝臓疾患等の生活習慣病の予防、治療又は改善効果があることを見出した。
【００１１】
すなわち、本発明は、オキアミタンパク質を有効成分とする生活習慣病予防又は改善剤を提供するものである。
【発明の効果】
【００１２】
オキアミタンパク質は、優れた抗尿酸上昇効果、抗内臓脂肪蓄積効果、抗遊離脂肪酸上昇効果や抗ＡＳＴ上昇効果を有するので、本発明の生活習慣病予防又は改善剤は、高尿酸血症、内臓脂肪（特に腸間膜脂肪）蓄積、肥満症、高脂血症や肝臓疾患等を予防、治療、改善することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
【図１】実施例１（脱脂凝固物あり）又は比較例１（脱脂凝固物なし）の高脂肪餌、比較例２の無処置餌（脱脂凝固物及びラードなし）を摂取させた各ラット群の腸間膜脂肪重量を示す。
【図２】実施例１（脱脂凝固物あり）又は比較例１（脱脂凝固物なし）の高脂肪餌、比較例２の無処置餌（脱脂凝固物及びラードなし）を摂取させた各ラット群の合計内臓脂肪重量を示す。
【図３】実施例１（脱脂凝固物あり）又は比較例１（脱脂凝固物なし）の高脂肪餌、比較例２の無処置餌（脱脂凝固物及びラードなし）を摂取させた各ラット群の血清中尿酸値を示す。
【図４】実施例１（脱脂凝固物あり）又は比較例１（脱脂凝固物なし）の高脂肪餌、比較例２の無処置餌（脱脂凝固物及びラードなし）を摂取させた各ラット群の血清中遊離脂肪酸量を示す。
【図５】実施例１（脱脂凝固物あり）又は比較例１（脱脂凝固物なし）の高脂肪餌、比較例２の無処置餌（脱脂凝固物及びラードなし）を摂取させた各ラット群の血清中ＡＳＴ値を示す。
【図６】実施例２（脱脂凝固物あり）又は比較例３（脱脂凝固物なし）のイノシン酸Na餌、比較例４の無処置餌（脱脂凝固物及びイノシン酸Naなし）を摂取させた各ラット群の血清中尿酸値を示す。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
本発明において有効成分として含有するオキアミタンパク質は、オキアミに含まれるタンパク質である。
【００１５】
本発明で用いられるオキアミとしては、この種類は特に限定されないが、ナンキョク（南極）オキアミ（Euphausia superba）が好ましく、原料として使用する形態は特に限定されず、非加熱品又は加熱品の何れでもよいが、該オキアミの非加熱品が好ましい。該非加熱品としては、例えば、漁獲後すぐのものだけではなく、通常の保管方法で保管されるもの、具体的には、冷蔵品、冷凍品、乾燥品（例えば、冷風乾燥品、自然乾燥品、凍結乾燥品等）等が挙げられ、このうち、品質管理上、冷凍品であるが好ましい。また、これらは原料として使用する際に、適宜加水、解凍、乾燥等を行った後に使用してもよく、例えば、乾燥品は水を含ませて、また冷凍品は解凍して、使用すればよい。
オキアミタンパク質としては、例えば、オキアミを圧搾して得られた圧搾液やオキアミから水抽出して得られた水抽出物をそのまま、またこれらを脱塩処理したものを利用することもできる。また例えば、オキアミ、該圧搾液や該水抽出物等から加熱凝固や塩析等の一般的な採取方法にて得られたタンパク質（例えば、加熱凝固物、塩析物等）を利用してもよく、必要に応じてこれらを凍結乾燥や噴霧乾燥等の乾燥により固化物としたものを利用してもよい。この固化物の形態は、配合する対象によって、適宜、液状、ペースト状、粉末状、粉砕状等にすればよい。
【００１６】
水抽出は、一例として、オキアミの０．０１〜１０倍量の水を用い、低温、常温又は加温下で、液液分液や固液分液、浸漬、攪拌、超音波、水蒸気、還流、超臨界抽出等の一般的な抽出手段にて、１分間〜１０日間行う。抽出温度は、４〜１０５℃であるのが好ましく、具体的には、低温抽出の場合４〜１０℃が好ましく、常温抽出の場合１０〜３０℃が好ましく、加温抽出の場合７０〜１０５℃が好ましい。
【００１７】
加熱凝固は、オキアミ、又は該圧搾液や該水抽出物に、水蒸気や熱水、ヒーター、直火等により、好ましくは６０〜１２１℃、より好ましくは７０〜１０５℃、更に好ましくは９０〜１００℃まで加温し、必要に応じて撹拌しながら行う。
また、塩析は、オキアミ、又は該圧搾液や該水抽出物等のタンパク質含有の水溶液に、他の物質（主として無機塩類）を加えて、必要に応じて撹拌しながら、溶けているタンパク質を析出させる。
加熱凝固物や塩析物の採取は、特に限定されず、例えば、遠心分離、デカンテーション、ろ別等にて行うことができる。
【００１８】
なお、脱塩処理は、特に限定されず、例えば限外ろ過、ゲルろ過、逆浸透、電気透析等にて行うことができる。脱塩処理により、オキアミに多く含まれる食塩等の塩類を低減又は除去することができる。
前記圧搾液や水抽出物、前記加熱凝固物や塩析物等が水分を多く含む場合には、本発明の薬理作用が損なわれない範囲で適宜水洗や乾燥をしてもよい。これにより、取り扱いを容易にしたり、夾雑物を除去することができる。
【００１９】
本発明においては、タンパク質の純度を高め、脂質を除去するために、前記圧搾液や水抽出物、また前記加熱凝固物や塩析物等の上記で得られたものを、一般的な脱脂方法にて、脱脂するのが望ましい。
脱脂方法としては、特に限定されず、例えば、遠心分離、デカンテーション等の物理的方法；アルコール類（好ましくは、メタノール、エタノール、ブタノール等の炭素数１〜４のもの）、アセトン、ヘキサン等の脂溶性有機溶媒を用いる方法（例えば、固液分液、攪拌、還流等）；二酸化炭素等を用いた超臨界抽出法等が挙げられる。なお、脂溶性有機溶媒は水を含んでいてもよく、例えば、含水脂溶性有機溶剤としては、アルコール類濃度６０〜１００容量％の含水アルコール類等が挙げられる。なお、安全性の面から、食品用途に用いることができる有機溶媒で脱脂することが特に好ましい。
このうち、加熱凝固物の脱脂処理の一例として、適宜粉砕や細断等を行った加熱凝固物１ｋｇに対して、エタノール濃度６０〜１００容量％（好ましくは９０〜１００容量％）の含水エタノール０．０５〜１０Ｌ（好ましくは０．１〜６Ｌ）を添加して、室温（好ましくは１０〜３０℃）で、適宜１〜６０分間撹拌し、ろ別して、固形分（脱脂加熱凝固物）を得る。脱脂加熱凝固物中の脂質を更に低減するため、必要に応じて前記脱脂方法にて、再び脱脂を行えばよい。例えば、該固形分に更に前記含水エタノールを０．０５〜１０Ｌ添加して、常圧で、３０分間〜４時間（好ましくは１〜３時間）還流を行い、より脱脂された固形分（脱脂加熱凝固物）を得る。還流は、更に１〜２回繰り返し行ってもよい。また、適宜粉砕や細断等を行った加熱凝固物１ｋｇに対して、上記含水エタノール等を用いた直接還流を行ってもよい。
得られた脱脂加熱凝固物は、自然乾燥、冷風乾燥、熱風乾燥、凍結乾燥等の乾燥にて乾燥品としてもよい。
【００２０】
本発明においては、オキアミタンパク質を多量に含むオキアミ加熱凝固物の脱脂物を用いるのが好ましい。
【００２１】
斯様にして得られたオキアミ加熱凝固物の脱脂物中のタンパク質含量は、乾燥重量換算で、４０〜１００重量％、より５０〜９９．９９重量％、更に６０〜９９．９９重量％、より更に８０〜９９．９９重量％、特に８５〜９９．９９重量％であるのが好ましい。またオキアミ加熱凝固物の脱脂物中には脂質を含んでいてもよいが、この場合の脂質含量は、乾燥重量換算で、０．０１〜２０重量％、より０．０１〜１５重量％、更に０．０１〜１０重量％、より更に０．０１〜５重量％、特に０．０１〜３重量であるのが好ましい。
ここで、タンパク質含量は、粗タンパク質含量を意味し、これは、ケルダール法にて算出したものである。
また、ここで、乾燥重量換算とは、全重量から水分重量を引いた重量当たりの各成分の重量％である。
なお、キチンを含有することは妨げない。
【００２２】
後記実施例に示すように、本発明のオキアミタンパク質は腸間膜脂肪重量減少作用、総内臓脂肪重量減少作用、血中尿酸上昇抑制作用、血中遊離脂肪酸上昇抑制作用、及び血中ＡＳＴ上昇抑制作用を有するので、内臓脂肪蓄積、肥満症、高尿酸血症、高脂血症（例えば、高コレステロール血症、高中性脂肪血症）又は肝疾患（例えば、急性肝炎、劇症肝炎、 慢性肝炎、アルコール性肝炎、脂肪肝、肝硬変、肝癌等）等の生活習慣病の予防、治療又は改善に有効である。従って、本発明のオキアミタンパク質は、生活習慣病予防又は改善剤として使用でき、更にこの製剤を製造するために使用することができる。斯かる生活習慣病予防又は改善剤は、上述のような各効果を発揮する、ヒト若しくは非ヒト動物用の医薬品、食品、機能性食品等として又はこれらの有効成分として配合して使用することができる。
【００２３】
本発明の生活習慣病予防又は改善剤を、医薬品として使用する場合には、本発明のオキアミタンパク質単体でも使用することができるが、この他の配合成分として、内臓脂肪蓄積や生活習慣病等の予防及び治療効果を損なわない範囲において、例えば、セルロース及びその誘導体、デンプン及びその誘導体、天然及び合成高分子等の賦形剤、ステアリン酸及びその塩類、天然及び合成ワックス等の滑沢剤、糖類、酸味剤、香料等の種々の担体を配合することができる。また、本発明の医薬品は、投与方法、投与経路に応じて散剤、顆粒剤、錠剤、丸剤、硬カプセル剤、軟カプセル剤、シロップ剤等の剤型とすることができる。
【００２４】
また、本発明のオキアミタンパク質は天然由来の素材なので、本発明の生活習慣病予防又は改善剤を食品として又は食品に配合して用いてもよく、本発明のオキアミタンパク質をそのまま食材に混合したり、原材料として加工して用いたりすることができる。本発明の食品は、例えば、飲料、茶、スープ、ゼリー、ヨーグルト、プリン、ドレッシング、ジャム、マヨネーズなどの液状あるいは半固形食品や、ふりかけ、アイスクリーム、シャーベット、麺類、パン、菓子類、ハム、ソーセージなど粉末状あるいは固形状の食品や、味噌、醤油、焼肉のたれ等の調味料等が挙げられる。
【００２５】
さらに、本発明の薬理効果を損なわない範囲で、内臓脂肪蓄積や生活習慣病等の予防、治療又は改善効果が知られている公知の他の素材、内臓脂肪蓄積や生活習慣病等の予防、治療又は改善効果以外の生理活性効果が知られている公知の他の素材を配合しても良い。例えば、ガルシニアエキス、オキアミオイル、魚油、月見草油、ビタミン類、食物繊維、大豆イソフラボン、イチョウ葉エキスなどが挙げられる。
【００２６】
本発明の製剤中のオキアミタンパク質の含有量は、乾燥物換算で、通常０．０１〜１００重量％、０．１〜１００重量％であるのが好ましい。本発明のオキアミタンパク質の投与量又は摂取量は、特に限定されないが、成人（６０ｋｇ）１日当たり、通常１０〜１００，０００ｍｇ、より１００〜１０，０００ｍｇであるのが好ましく、１回〜数回に分けて投与又は摂取するのが好ましい。
【実施例】
【００２７】
以下、実施例を挙げて本発明を詳細に説明するが、本発明は何らこれに限定されるものではない。
【００２８】
製造例１
南極海にて漁獲し、冷凍したオキアミ（Euphausia superba）（生冷）を室温で解凍した。この解凍オキアミをフィルタースクリュープレスを用いて圧搾した。得られた圧搾液を蒸気式加熱釜（ライスボイラー）にて９５℃まで加温し、発生した加熱凝固物をステンレス製市販ザルにて自然落下法にて分別した。得られた加熱凝固物の組成を表１に示す。
水分は、１０５℃恒量での減量にて測定した。
粗タンパク質は、ケルダール法にて測定した。
脂質は、Bligh-Dyer法にて測定した。
脂質組成は、ベンゼン：クロロホルム：酢酸＝150：60：1.5の展開溶媒により分離した各脂質成分を薄層自動検出装置（三菱化学ヤトロン社製、型式イアトロスキャン（登録商標）MK-6）を用いて測定した。
灰分は、直接灰化法にて測定した。
【００２９】
【表１】
【００３０】
製造例２
製造例１で得られた加熱凝固物（冷凍品）３００ｋｇをフローズンカッターにて粉砕し、９２％エタノールを１０００リットル添加して、１５分間撹拌し、６０メッシュにて排液することにより固形分を得た。さらに固形分に９２％エタノールを１０００リットル添加して常圧で２時間還流させ脂質を洗浄した後、６０メッシュにて排液することを２回繰り返して、さらに自然乾燥させて、脱脂加熱凝固物５０ｋｇを得た。得られた脱脂加熱凝固物の組成を表２に示す。
粗繊維は、粗繊維測定法にて測定した。
【００３１】
【表２】
【００３２】
製造例３
南極海にて漁獲し、冷凍したオキアミ（Euphausia superba）（生冷）を室温で解凍した。この解凍オキアミを２倍量の水に５時間浸し、ガーゼにてろ過したろ液を凍結乾燥して固形物を得た。
【００３３】
実施例１
製造例２で製造されたオキアミ脱脂加熱凝固物を配合した高脂肪餌（表３）をウィスターラット（６週齢、ｎ＝７）に２８日間摂取させた。給餌は、後述の比較例１と比較例２と実施例１が同じ摂餌量になるように行った。具体的には、比較例１に自由摂取させた摂餌量と同じになるように給餌量を調整し、いずれの例も摂取期間１日あたりの摂餌量は、２０．５ｇと十分な量であった。実施例１と比較例１に体重の有意差は無かった。２９日目にエーテル麻酔下で下大静脈より血液採取を行い、さらに、内臓脂肪（腸間膜脂肪）を採取・秤量した。採取した血液は血清を分離し、自動分析機（日立製作所製）により、尿酸（酵素法）、遊離脂肪酸（酵素法）及びＡＳＴ（ＪＳＣＣ標準化対応法）等の分析を行った。
【００３４】
比較例１
対照の高脂肪餌（表３）をウィスターラット（６週齢、ｎ＝７）に２８日間摂取させた。給餌は、実施例１と同様に行った。以下、実施例１と同様に行った。
【００３５】
比較例２
ラードを含まない餌（表３）をウィスターラット（６週齢、ｎ＝７）に２８日間摂取させた。給餌は、実施例１と同様に行った。以下、実施例１と同様に行った。
【００３６】
【表３】
【００３７】
結果
オキアミの脱脂加熱凝固物（実施例１）は、オキアミの脱脂加熱凝固物無添加（比較例１）に比べ、ラットに対して抗内臓脂肪蓄積効果を示した。（図１）この効果は、特に腸間膜脂肪において顕著であった。（図２）
オキアミの脱脂加熱凝固物（実施例１）は、オキアミの脱脂加熱凝固物無添加（比較例１）に比べ、抗尿酸上昇効果を示した（図３）。
また、オキアミの脱脂加熱凝固物（実施例１）は、オキアミの脱脂加熱凝固物無添加（比較例１）に比べ、抗遊離脂肪酸上昇効果を示した（図４）。
また、オキアミの脱脂加熱凝固物（実施例１）は、オキアミの脱脂加熱凝固物無添加（比較例１）に比べ、抗肝臓疾患効果を示した（図５）。
【００３８】
実施例２
製造例２の脱脂加熱凝固物配合餌（表４、実施例２−１）をウィスターラット（７週齢、ｎ＝６）に７日間摂取させた。その後、製造例２の脱脂加熱凝固物配合のイノシン酸Na負荷餌（表５、実施例２−２）をウィスターラットに７日間摂取させた。給餌は、後述の比較例３と比較例４と実施例２が同じ摂餌量になるように行った。具体的には、比較例４に自由摂取させた摂餌量と同じ摂餌量になるように給餌量を調整した。いずれの例も摂取期間１日あたりの摂餌量は、前半が２４．７ｇ、後半が２６．６ｇと十分な量であった。実施例２と比較例３および４に体重の有意差は無かった。１５日目にエーテル麻酔下で下大静脈より血液採取を行い、血清を分離し、自動分析機（日立製作所製）により、尿酸（酵素法）の分析を行った。
【００３９】
比較例３
ウィスターラット（７週齢、ｎ＝６）に無処置の餌（表４、比較例３−１）を７日間摂取させた。その後、対照のイノシン酸Na負荷餌（表５、比較例３−２）をウィスターラットに７日間摂取させた。給餌量は実施例２と同様に行った。以下、実施例２と同様に行った。
【００４０】
比較例４
ウィスターラット（７週齢、ｎ＝６）に無処置の餌（表４、比較例４−１）を７日間摂取させた。その後、無処置の餌（表５、比較例４−２）をウィスターラットに７日間摂取させた。給餌量は実施例２と同様に行った。以下、実施例２と同様に行った。
【００４１】
【表４】
【００４２】
【表５】
【００４３】
オキアミ脱脂加熱凝固物（実施例２）は、イノシン酸Na負荷餌（比較例３）に比べ、抗尿酸上昇効果を示した。実施例２の尿酸値は、イノシン酸Na負荷にも拘わらず、比較例４のイノシン酸Naを負荷しない例と同程度であった（図６）。すなわち、抗尿酸上昇効果は、図３及び図６から明らかなように、高脂肪負荷であっても、プリン体（イノシン酸Na）負荷であっても認められることから、脂質代謝やプリン体吸収阻害ではない作用機序によってなされているものである。
【００４４】
以上のことから、オキアミタンパク質には、抗尿酸上昇効果、抗遊離脂肪酸上昇効果、抗内臓脂肪蓄積効果や抗肝臓疾患効果があることが認められたので、本発明のオキアミタンパク質を有効成分とする医薬やこれを配合して含有する食品等には、高尿酸血症、高脂血症、内臓脂肪蓄積、肥満症や肝臓疾患等の生活習慣病の予防、治療や改善効果が期待できる。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、生活習慣病予防又は改善剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、食生活や運動などのライフスタイルの変化に伴い、肥満症、内臓脂肪蓄積、高脂血症、高尿酸血症（特に痛風）、糖尿病、高血圧症、肝臓疾患、心疾患等の生活習慣病が急激に増えつつあり、大きな社会問題となっている。生活習慣病を予防又は改善できる物質の探索は重要であるが、そのような物質としては、クオリティオブライフ（ＱＯＬ）の点から、日々食するような特定健康食品や機能性食品等の食品に配合しても、安全かつ長期間摂取できる天然由来の素材が望まれている。
【０００３】
ところで、オキアミには、エイコサペンタエン酸やドコサヘキサエン酸等のｎ−３系脂肪酸を含む中性脂肪やリン脂質が多く含まれ、オキアミから抽出したこれらの成分を含有するオイルが、高脂血症等を改善することが知られている（非特許文献１）。
【０００４】
また、オキアミを煮熟処理したキチン等を含む煮熟オキアミ（主として身部分）は、体重増加量を減少させる作用を有することが知られているが、一方でその作用は血清コレステロールの上昇が認められなかった程度に留まると共に、高濃度で摂取すると鉄欠乏性貧血症状が発現してしまうことが知られている（非特許文献２）。
また、オキアミ等に含まれるキチンは、消化管からのプリン体吸収を阻害することにより尿酸値上昇を抑える作用を有することが実験的には知られているが、高尿酸血症の改善にあたって、食物からのプリン体吸収を阻害することの重要性は低く、むしろ血中の尿酸値上昇の原因は内因性の尿酸が原因となるので、血中の尿酸値上昇が抑制できることが重要である。
【０００５】
また、オキアミのアルコール水抽出物には、レプチン分泌促進作用があること（特許文献１）、またオキアミの熱水抽出物には、発ガンプロモーション阻害作用があること（特許文献２）が知られている。
【０００６】
しかしながら、オキアミタンパク質に、生活習慣病予防又は改善作用があることは知られていない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】特開２００８−２３９５００号公報
【特許文献２】特開平６−２９３６４７号公報
【非特許文献】
【０００８】
【非特許文献１】栄養学雑誌，Vol.48,No.5,213-220(1990).
【非特許文献２】栄養学雑誌，Vol.38,No.6,311-319(1980).
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
本発明の目的は、天然物由来の成分から、肥満症、内臓脂肪蓄積、高脂血症、高尿酸血症、肝臓疾患等の生活習慣病の予防、治療又は改善剤を見出すことにある。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
かかる実状に鑑み、本発明者は鋭意検討を行った結果、オキアミ由来の成分のうち、油脂でなくオキアミタンパク質に、優れた内臓脂肪（特に腸間膜脂肪）蓄積、肥満症、高脂血症、高尿酸血症や肝臓疾患等の生活習慣病の予防、治療又は改善効果があることを見出した。
【００１１】
すなわち、本発明は、オキアミタンパク質を有効成分とする生活習慣病予防又は改善剤を提供するものである。
【発明の効果】
【００１２】
オキアミタンパク質は、優れた抗尿酸上昇効果、抗内臓脂肪蓄積効果、抗遊離脂肪酸上昇効果や抗ＡＳＴ上昇効果を有するので、本発明の生活習慣病予防又は改善剤は、高尿酸血症、内臓脂肪（特に腸間膜脂肪）蓄積、肥満症、高脂血症や肝臓疾患等を予防、治療、改善することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
【図１】実施例１（脱脂凝固物あり）又は比較例１（脱脂凝固物なし）の高脂肪餌、比較例２の無処置餌（脱脂凝固物及びラードなし）を摂取させた各ラット群の腸間膜脂肪重量を示す。
【図２】実施例１（脱脂凝固物あり）又は比較例１（脱脂凝固物なし）の高脂肪餌、比較例２の無処置餌（脱脂凝固物及びラードなし）を摂取させた各ラット群の合計内臓脂肪重量を示す。
【図３】実施例１（脱脂凝固物あり）又は比較例１（脱脂凝固物なし）の高脂肪餌、比較例２の無処置餌（脱脂凝固物及びラードなし）を摂取させた各ラット群の血清中尿酸値を示す。
【図４】実施例１（脱脂凝固物あり）又は比較例１（脱脂凝固物なし）の高脂肪餌、比較例２の無処置餌（脱脂凝固物及びラードなし）を摂取させた各ラット群の血清中遊離脂肪酸量を示す。
【図５】実施例１（脱脂凝固物あり）又は比較例１（脱脂凝固物なし）の高脂肪餌、比較例２の無処置餌（脱脂凝固物及びラードなし）を摂取させた各ラット群の血清中ＡＳＴ値を示す。
【図６】実施例２（脱脂凝固物あり）又は比較例３（脱脂凝固物なし）のイノシン酸Na餌、比較例４の無処置餌（脱脂凝固物及びイノシン酸Naなし）を摂取させた各ラット群の血清中尿酸値を示す。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
本発明において有効成分として含有するオキアミタンパク質は、オキアミに含まれるタンパク質である。
【００１５】
本発明で用いられるオキアミとしては、この種類は特に限定されないが、ナンキョク（南極）オキアミ（Euphausia superba）が好ましく、原料として使用する形態は特に限定されず、非加熱品又は加熱品の何れでもよいが、該オキアミの非加熱品が好ましい。該非加熱品としては、例えば、漁獲後すぐのものだけではなく、通常の保管方法で保管されるもの、具体的には、冷蔵品、冷凍品、乾燥品（例えば、冷風乾燥品、自然乾燥品、凍結乾燥品等）等が挙げられ、このうち、品質管理上、冷凍品であるが好ましい。また、これらは原料として使用する際に、適宜加水、解凍、乾燥等を行った後に使用してもよく、例えば、乾燥品は水を含ませて、また冷凍品は解凍して、使用すればよい。
オキアミタンパク質としては、例えば、オキアミを圧搾して得られた圧搾液やオキアミから水抽出して得られた水抽出物をそのまま、またこれらを脱塩処理したものを利用することもできる。また例えば、オキアミ、該圧搾液や該水抽出物等から加熱凝固や塩析等の一般的な採取方法にて得られたタンパク質（例えば、加熱凝固物、塩析物等）を利用してもよく、必要に応じてこれらを凍結乾燥や噴霧乾燥等の乾燥により固化物としたものを利用してもよい。この固化物の形態は、配合する対象によって、適宜、液状、ペースト状、粉末状、粉砕状等にすればよい。
【００１６】
水抽出は、一例として、オキアミの０．０１〜１０倍量の水を用い、低温、常温又は加温下で、液液分液や固液分液、浸漬、攪拌、超音波、水蒸気、還流、超臨界抽出等の一般的な抽出手段にて、１分間〜１０日間行う。抽出温度は、４〜１０５℃であるのが好ましく、具体的には、低温抽出の場合４〜１０℃が好ましく、常温抽出の場合１０〜３０℃が好ましく、加温抽出の場合７０〜１０５℃が好ましい。
【００１７】
加熱凝固は、オキアミ、又は該圧搾液や該水抽出物に、水蒸気や熱水、ヒーター、直火等により、好ましくは６０〜１２１℃、より好ましくは７０〜１０５℃、更に好ましくは９０〜１００℃まで加温し、必要に応じて撹拌しながら行う。
また、塩析は、オキアミ、又は該圧搾液や該水抽出物等のタンパク質含有の水溶液に、他の物質（主として無機塩類）を加えて、必要に応じて撹拌しながら、溶けているタンパク質を析出させる。
加熱凝固物や塩析物の採取は、特に限定されず、例えば、遠心分離、デカンテーション、ろ別等にて行うことができる。
【００１８】
なお、脱塩処理は、特に限定されず、例えば限外ろ過、ゲルろ過、逆浸透、電気透析等にて行うことができる。脱塩処理により、オキアミに多く含まれる食塩等の塩類を低減又は除去することができる。
前記圧搾液や水抽出物、前記加熱凝固物や塩析物等が水分を多く含む場合には、本発明の薬理作用が損なわれない範囲で適宜水洗や乾燥をしてもよい。これにより、取り扱いを容易にしたり、夾雑物を除去することができる。
【００１９】
本発明においては、タンパク質の純度を高め、脂質を除去するために、前記圧搾液や水抽出物、また前記加熱凝固物や塩析物等の上記で得られたものを、一般的な脱脂方法にて、脱脂するのが望ましい。
脱脂方法としては、特に限定されず、例えば、遠心分離、デカンテーション等の物理的方法；アルコール類（好ましくは、メタノール、エタノール、ブタノール等の炭素数１〜４のもの）、アセトン、ヘキサン等の脂溶性有機溶媒を用いる方法（例えば、固液分液、攪拌、還流等）；二酸化炭素等を用いた超臨界抽出法等が挙げられる。なお、脂溶性有機溶媒は水を含んでいてもよく、例えば、含水脂溶性有機溶剤としては、アルコール類濃度６０〜１００容量％の含水アルコール類等が挙げられる。なお、安全性の面から、食品用途に用いることができる有機溶媒で脱脂することが特に好ましい。
このうち、加熱凝固物の脱脂処理の一例として、適宜粉砕や細断等を行った加熱凝固物１ｋｇに対して、エタノール濃度６０〜１００容量％（好ましくは９０〜１００容量％）の含水エタノール０．０５〜１０Ｌ（好ましくは０．１〜６Ｌ）を添加して、室温（好ましくは１０〜３０℃）で、適宜１〜６０分間撹拌し、ろ別して、固形分（脱脂加熱凝固物）を得る。脱脂加熱凝固物中の脂質を更に低減するため、必要に応じて前記脱脂方法にて、再び脱脂を行えばよい。例えば、該固形分に更に前記含水エタノールを０．０５〜１０Ｌ添加して、常圧で、３０分間〜４時間（好ましくは１〜３時間）還流を行い、より脱脂された固形分（脱脂加熱凝固物）を得る。還流は、更に１〜２回繰り返し行ってもよい。また、適宜粉砕や細断等を行った加熱凝固物１ｋｇに対して、上記含水エタノール等を用いた直接還流を行ってもよい。
得られた脱脂加熱凝固物は、自然乾燥、冷風乾燥、熱風乾燥、凍結乾燥等の乾燥にて乾燥品としてもよい。
【００２０】
本発明においては、オキアミタンパク質を多量に含むオキアミ加熱凝固物の脱脂物を用いるのが好ましい。
【００２１】
斯様にして得られたオキアミ加熱凝固物の脱脂物中のタンパク質含量は、乾燥重量換算で、４０〜１００重量％、より５０〜９９．９９重量％、更に６０〜９９．９９重量％、より更に８０〜９９．９９重量％、特に８５〜９９．９９重量％であるのが好ましい。またオキアミ加熱凝固物の脱脂物中には脂質を含んでいてもよいが、この場合の脂質含量は、乾燥重量換算で、０．０１〜２０重量％、より０．０１〜１５重量％、更に０．０１〜１０重量％、より更に０．０１〜５重量％、特に０．０１〜３重量であるのが好ましい。
ここで、タンパク質含量は、粗タンパク質含量を意味し、これは、ケルダール法にて算出したものである。
また、ここで、乾燥重量換算とは、全重量から水分重量を引いた重量当たりの各成分の重量％である。
なお、キチンを含有することは妨げない。
【００２２】
後記実施例に示すように、本発明のオキアミタンパク質は腸間膜脂肪重量減少作用、総内臓脂肪重量減少作用、血中尿酸上昇抑制作用、血中遊離脂肪酸上昇抑制作用、及び血中ＡＳＴ上昇抑制作用を有するので、内臓脂肪蓄積、肥満症、高尿酸血症、高脂血症（例えば、高コレステロール血症、高中性脂肪血症）又は肝疾患（例えば、急性肝炎、劇症肝炎、 慢性肝炎、アルコール性肝炎、脂肪肝、肝硬変、肝癌等）等の生活習慣病の予防、治療又は改善に有効である。従って、本発明のオキアミタンパク質は、生活習慣病予防又は改善剤として使用でき、更にこの製剤を製造するために使用することができる。斯かる生活習慣病予防又は改善剤は、上述のような各効果を発揮する、ヒト若しくは非ヒト動物用の医薬品、食品、機能性食品等として又はこれらの有効成分として配合して使用することができる。
【００２３】
本発明の生活習慣病予防又は改善剤を、医薬品として使用する場合には、本発明のオキアミタンパク質単体でも使用することができるが、この他の配合成分として、内臓脂肪蓄積や生活習慣病等の予防及び治療効果を損なわない範囲において、例えば、セルロース及びその誘導体、デンプン及びその誘導体、天然及び合成高分子等の賦形剤、ステアリン酸及びその塩類、天然及び合成ワックス等の滑沢剤、糖類、酸味剤、香料等の種々の担体を配合することができる。また、本発明の医薬品は、投与方法、投与経路に応じて散剤、顆粒剤、錠剤、丸剤、硬カプセル剤、軟カプセル剤、シロップ剤等の剤型とすることができる。
【００２４】
また、本発明のオキアミタンパク質は天然由来の素材なので、本発明の生活習慣病予防又は改善剤を食品として又は食品に配合して用いてもよく、本発明のオキアミタンパク質をそのまま食材に混合したり、原材料として加工して用いたりすることができる。本発明の食品は、例えば、飲料、茶、スープ、ゼリー、ヨーグルト、プリン、ドレッシング、ジャム、マヨネーズなどの液状あるいは半固形食品や、ふりかけ、アイスクリーム、シャーベット、麺類、パン、菓子類、ハム、ソーセージなど粉末状あるいは固形状の食品や、味噌、醤油、焼肉のたれ等の調味料等が挙げられる。
【００２５】
さらに、本発明の薬理効果を損なわない範囲で、内臓脂肪蓄積や生活習慣病等の予防、治療又は改善効果が知られている公知の他の素材、内臓脂肪蓄積や生活習慣病等の予防、治療又は改善効果以外の生理活性効果が知られている公知の他の素材を配合しても良い。例えば、ガルシニアエキス、オキアミオイル、魚油、月見草油、ビタミン類、食物繊維、大豆イソフラボン、イチョウ葉エキスなどが挙げられる。
【００２６】
本発明の製剤中のオキアミタンパク質の含有量は、乾燥物換算で、通常０．０１〜１００重量％、０．１〜１００重量％であるのが好ましい。本発明のオキアミタンパク質の投与量又は摂取量は、特に限定されないが、成人（６０ｋｇ）１日当たり、通常１０〜１００，０００ｍｇ、より１００〜１０，０００ｍｇであるのが好ましく、１回〜数回に分けて投与又は摂取するのが好ましい。
【実施例】
【００２７】
以下、実施例を挙げて本発明を詳細に説明するが、本発明は何らこれに限定されるものではない。
【００２８】
製造例１
南極海にて漁獲し、冷凍したオキアミ（Euphausia superba）（生冷）を室温で解凍した。この解凍オキアミをフィルタースクリュープレスを用いて圧搾した。得られた圧搾液を蒸気式加熱釜（ライスボイラー）にて９５℃まで加温し、発生した加熱凝固物をステンレス製市販ザルにて自然落下法にて分別した。得られた加熱凝固物の組成を表１に示す。
水分は、１０５℃恒量での減量にて測定した。
粗タンパク質は、ケルダール法にて測定した。
脂質は、Bligh-Dyer法にて測定した。
脂質組成は、ベンゼン：クロロホルム：酢酸＝150：60：1.5の展開溶媒により分離した各脂質成分を薄層自動検出装置（三菱化学ヤトロン社製、型式イアトロスキャン（登録商標）MK-6）を用いて測定した。
灰分は、直接灰化法にて測定した。
【００２９】
【表１】
【００３０】
製造例２
製造例１で得られた加熱凝固物（冷凍品）３００ｋｇをフローズンカッターにて粉砕し、９２％エタノールを１０００リットル添加して、１５分間撹拌し、６０メッシュにて排液することにより固形分を得た。さらに固形分に９２％エタノールを１０００リットル添加して常圧で２時間還流させ脂質を洗浄した後、６０メッシュにて排液することを２回繰り返して、さらに自然乾燥させて、脱脂加熱凝固物５０ｋｇを得た。得られた脱脂加熱凝固物の組成を表２に示す。
粗繊維は、粗繊維測定法にて測定した。
【００３１】
【表２】
【００３２】
製造例３
南極海にて漁獲し、冷凍したオキアミ（Euphausia superba）（生冷）を室温で解凍した。この解凍オキアミを２倍量の水に５時間浸し、ガーゼにてろ過したろ液を凍結乾燥して固形物を得た。
【００３３】
実施例１
製造例２で製造されたオキアミ脱脂加熱凝固物を配合した高脂肪餌（表３）をウィスターラット（６週齢、ｎ＝７）に２８日間摂取させた。給餌は、後述の比較例１と比較例２と実施例１が同じ摂餌量になるように行った。具体的には、比較例１に自由摂取させた摂餌量と同じになるように給餌量を調整し、いずれの例も摂取期間１日あたりの摂餌量は、２０．５ｇと十分な量であった。実施例１と比較例１に体重の有意差は無かった。２９日目にエーテル麻酔下で下大静脈より血液採取を行い、さらに、内臓脂肪（腸間膜脂肪）を採取・秤量した。採取した血液は血清を分離し、自動分析機（日立製作所製）により、尿酸（酵素法）、遊離脂肪酸（酵素法）及びＡＳＴ（ＪＳＣＣ標準化対応法）等の分析を行った。
【００３４】
比較例１
対照の高脂肪餌（表３）をウィスターラット（６週齢、ｎ＝７）に２８日間摂取させた。給餌は、実施例１と同様に行った。以下、実施例１と同様に行った。
【００３５】
比較例２
ラードを含まない餌（表３）をウィスターラット（６週齢、ｎ＝７）に２８日間摂取させた。給餌は、実施例１と同様に行った。以下、実施例１と同様に行った。
【００３６】
【表３】
【００３７】
結果
オキアミの脱脂加熱凝固物（実施例１）は、オキアミの脱脂加熱凝固物無添加（比較例１）に比べ、ラットに対して抗内臓脂肪蓄積効果を示した。（図１）この効果は、特に腸間膜脂肪において顕著であった。（図２）
オキアミの脱脂加熱凝固物（実施例１）は、オキアミの脱脂加熱凝固物無添加（比較例１）に比べ、抗尿酸上昇効果を示した（図３）。
また、オキアミの脱脂加熱凝固物（実施例１）は、オキアミの脱脂加熱凝固物無添加（比較例１）に比べ、抗遊離脂肪酸上昇効果を示した（図４）。
また、オキアミの脱脂加熱凝固物（実施例１）は、オキアミの脱脂加熱凝固物無添加（比較例１）に比べ、抗肝臓疾患効果を示した（図５）。
【００３８】
実施例２
製造例２の脱脂加熱凝固物配合餌（表４、実施例２−１）をウィスターラット（７週齢、ｎ＝６）に７日間摂取させた。その後、製造例２の脱脂加熱凝固物配合のイノシン酸Na負荷餌（表５、実施例２−２）をウィスターラットに７日間摂取させた。給餌は、後述の比較例３と比較例４と実施例２が同じ摂餌量になるように行った。具体的には、比較例４に自由摂取させた摂餌量と同じ摂餌量になるように給餌量を調整した。いずれの例も摂取期間１日あたりの摂餌量は、前半が２４．７ｇ、後半が２６．６ｇと十分な量であった。実施例２と比較例３および４に体重の有意差は無かった。１５日目にエーテル麻酔下で下大静脈より血液採取を行い、血清を分離し、自動分析機（日立製作所製）により、尿酸（酵素法）の分析を行った。
【００３９】
比較例３
ウィスターラット（７週齢、ｎ＝６）に無処置の餌（表４、比較例３−１）を７日間摂取させた。その後、対照のイノシン酸Na負荷餌（表５、比較例３−２）をウィスターラットに７日間摂取させた。給餌量は実施例２と同様に行った。以下、実施例２と同様に行った。
【００４０】
比較例４
ウィスターラット（７週齢、ｎ＝６）に無処置の餌（表４、比較例４−１）を７日間摂取させた。その後、無処置の餌（表５、比較例４−２）をウィスターラットに７日間摂取させた。給餌量は実施例２と同様に行った。以下、実施例２と同様に行った。
【００４１】
【表４】
【００４２】
【表５】
【００４３】
オキアミ脱脂加熱凝固物（実施例２）は、イノシン酸Na負荷餌（比較例３）に比べ、抗尿酸上昇効果を示した。実施例２の尿酸値は、イノシン酸Na負荷にも拘わらず、比較例４のイノシン酸Naを負荷しない例と同程度であった（図６）。すなわち、抗尿酸上昇効果は、図３及び図６から明らかなように、高脂肪負荷であっても、プリン体（イノシン酸Na）負荷であっても認められることから、脂質代謝やプリン体吸収阻害ではない作用機序によってなされているものである。
【００４４】
以上のことから、オキアミタンパク質には、抗尿酸上昇効果、抗遊離脂肪酸上昇効果、抗内臓脂肪蓄積効果や抗肝臓疾患効果があることが認められたので、本発明のオキアミタンパク質を有効成分とする医薬やこれを配合して含有する食品等には、高尿酸血症、高脂血症、内臓脂肪蓄積、肥満症や肝臓疾患等の生活習慣病の予防、治療や改善効果が期待できる。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
オキアミタンパク質を有効成分とする生活習慣病の予防又は改善剤。
【請求項２】
生活習慣病が、高尿酸血症、内臓脂肪蓄積、肥満症、高脂血症、又は肝臓疾患である請求項１記載の生活習慣病の予防又は改善剤。
【請求項３】
腸間膜脂肪蓄積の予防若しくは改善剤、又は血中遊離脂肪酸濃度低下剤である請求項１又は２の記載の生活習慣病の予防又は改善剤。
【請求項４】
オキアミタンパク質として、オキアミ圧搾液の加熱凝固物の脱脂物を配合したものである請求項１〜３の何れか１項記載の生活習慣病の予防又は改善剤。
【請求項５】
オキアミ圧搾液の加熱凝固物の脱脂物が、タンパク質含量４０〜９９．９９重量％及び脂質含量０．０１〜２０重量％を含むものである請求項４記載の生活習慣病の予防又は改善剤。
【請求項６】
オキアミがナンキョクオキアミ（Euphausia superba）である請求項１〜５の何れか１項記載の生活習慣病の予防又は改善剤。
【請求項７】
オキアミタンパク質の含有量が、乾燥重量換算で、０．１〜１００重量％である請求項１〜６の何れか１項記載の生活習慣病の予防又は改善剤。
【請求項１】
オキアミタンパク質を有効成分とする生活習慣病の予防又は改善剤。
【請求項２】
生活習慣病が、高尿酸血症、内臓脂肪蓄積、肥満症、高脂血症、又は肝臓疾患である請求項１記載の生活習慣病の予防又は改善剤。
【請求項３】
腸間膜脂肪蓄積の予防若しくは改善剤、又は血中遊離脂肪酸濃度低下剤である請求項１又は２の記載の生活習慣病の予防又は改善剤。
【請求項４】
オキアミタンパク質として、オキアミ圧搾液の加熱凝固物の脱脂物を配合したものである請求項１〜３の何れか１項記載の生活習慣病の予防又は改善剤。
【請求項５】
オキアミ圧搾液の加熱凝固物の脱脂物が、タンパク質含量４０〜９９．９９重量％及び脂質含量０．０１〜２０重量％を含むものである請求項４記載の生活習慣病の予防又は改善剤。
【請求項６】
オキアミがナンキョクオキアミ（Euphausia superba）である請求項１〜５の何れか１項記載の生活習慣病の予防又は改善剤。
【請求項７】
オキアミタンパク質の含有量が、乾燥重量換算で、０．１〜１００重量％である請求項１〜６の何れか１項記載の生活習慣病の予防又は改善剤。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【公開番号】特開２０１１−１０５６２９（Ｐ２０１１−１０５６２９Ａ）
【公開日】平成２３年６月２日（２０１１．６．２）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００９−２６１１９６（Ｐ２００９−２６１１９６）
【出願日】平成２１年１１月１６日（２００９．１１．１６）
【出願人】（０００００４１８９）日本水産株式会社 (119)
【出願人】（０００２２６８６２）日水製薬株式会社 (35)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２３年６月２日（２０１１．６．２）
【国際特許分類】
【出願日】平成２１年１１月１６日（２００９．１１．１６）
【出願人】（０００００４１８９）日本水産株式会社 (119)
【出願人】（０００２２６８６２）日水製薬株式会社 (35)
【Ｆターム（参考）】
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