３−シクロプロップ−Ｉ−エニル−プロパン酸塩を用いた、植物のエチレン応答を遮断するための組成物及び方法
本発明は、植物の少なくとも一部に、エチレン応答を阻害するのに有効な量の、Ｈ１−シクロプロペン−１−プロパン酸塩（ＣＰＡＳ）を適用することを含む、植物のエチレン応答を阻害する方法を開示する。切花に、寿命を延ばすのに有効な量のＣＰＡＳを適用することを含む、切花の寿命を延ばす方法、及び、（ｉ）４−ブロモ−４−ペンテン酸又はその誘導体を調製する工程と、（ｉｉ）１−シクロプロペン−１−プロパン酸を生成する工程と、（ｉｉｉ）この塩を、その水溶性塩、特にナトリウム塩に変換する工程と、を含む、ＣＰＡＳの生成方法を提示する。更に、植物のエチレン応答に対する、水溶性ＣＰＡＳ阻害剤の新規ファミリーを開示する。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、一般に、植物及び植物器官又は組織のエチレン応答を遮断する水溶性組成物並びに方法、具体的には、３−シクロプロピル−１−エニル−プロパン酸ナトリウム（又は他の正に帯電した対イオン）塩（ＣＰＡＳ）を植物に適用することにより、植物における種々のエチレンに制御された、生長、再生及び生殖過程を阻害する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
エチレンは、多数の発生過程、具体的には果実の成熟、器官脱離（落果及び落葉）及び老化に関与する天然の植物成長調節因子である。エチレンの有害作用は、農業生産高に被害を与える。
【０００３】
エチレン作用の拮抗剤は、農業利用に非常に有益であると考えられる、なぜなら、内因性及び外因性エチレンの双方から組織を保護するためである。エチレン拮抗剤（ＥＡ）は、その受容体部位を遮断することにより、分子レベルでエチレンの作用を阻害する。したがって、ＥＡを適用することにより、作物の収穫期を延長する、果実、ハーブ及び葉菜の貯蔵性及び保存寿命を延ばす、並びに切花の花持ちを延長することを可能にできる。一部のＥＡの使用は特許により保護されている：ホスホン酸誘導体（米国特許第３８７９１８８号）、チオ硫酸銀（米国特許第５５１０３１５号）、有機ハロゲン化合物（米国特許第５６７９６１７号）、２，５−ノルボルナジエン（米国特許第５８３４４０３号）、１−メチルシクロプロペン（1-methylecyclopropene）（米国特許第６１９３５０号、同第６３６５５４９号）。
【０００４】
エチレン応答を遮断する方法の進歩にもかかわらず、安全かつ便利な水溶性遮断剤に対する要求が依然として存在している。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
現在利用可能な最も有望なエチレン拮抗剤である、１−メチルシクロプロペン（１−ＭＣＰ）の使用は、主にそれが水に対して不溶性であるために制限されており、それ故密封した容器内でのみ揮発性形で使用されている。切花への浸漬負荷（dip loading）又は野外における噴霧による適用に使用することはできない。更に、エチレン拮抗剤の選択肢が増えることは、種々の期間エチレン受容体を遮断する阻害剤に対する強い要望を満たすために、商業的に望ましい。１７種のエチレン作用のシクロプロペン推定阻害剤が合成され、エチレン拮抗剤としての効力についてスクリーニングされた。新規水かつ安定なシクロプロペン誘導体（ＣＰＡＳ）を更に合成するために、少なくとも１２日間バナナの皮の催色を遅延させる、及び少なくとも５日間「ハス（Hass）」アボカド果実の色変化を遅延させる、少なくとも１４日間カーネーション及びペチュニアの切花の花持ちを延ばす、並びに少なくとも７日間柑橘類の葉外植片の器官脱離を遅延させる等、農作物におけるエチレン誘導性の有害応答の有効な阻害剤であることが見出されている、最も有望なものを選択した。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
以後、植物のエチレン応答を阻害する方法を本明細書に開示する。本明細書によると、このような方法の１つは、植物に、エチレン応答を阻害するのに有効な量の、更に詳細に記載するＣＰＡＳを適用することを含む。
【０００７】
本発明の別の態様は、植物に、エチレン受容体を遮断するのに有効な量のＣＰＡＳを適用することにより、植物のエチレン受容体を遮断する方法である。
【０００８】
本発明の別の態様は、上記定義の方法により、植物のエチレン受容体を遮断する方法であって、前記方法は、表面活性ＣＰＡＳ含有水溶液が得られるように、有効な量のＣＰＡＳを界面活性剤と混合する工程を更に含む。
【０００９】
また、植物に、器官脱離を阻害するのに有効な量のＣＰＡＳを適用することを含む、植物の器官脱離を阻害する方法を開示する。
【００１０】
また、切花に、寿命を延ばすのに有効な量のＣＰＡＳを適用することを含む、切花の寿命を延ばす方法を開示する。
【００１１】
また、収穫した果実に、阻害に有効な量のＣＰＡＳを適用することを含む、収穫した果実の成熟を阻害する方法を開示する。また、収穫した野菜に、阻害に有効な量のＣＰＡＳを適用することを含む、収穫した野菜の成熟を阻害する方法を開示する。本明細書に記載する方法は、（ｉ）水溶液若しくはエアゾール、若しくは懸濁液、若しくはエマルションの；（ｉｉ）又は植物、切花、摘み取った果実若しくは摘み取った野菜を、ＣＰＡＳ水溶液を含有する雰囲気中に導入することにより；（ｉｉｉ）又は粉末、微粒子、例えばナノ粉末、粒子状物質等のいずれかの、ＣＰＡＳで植物を処理することによる等の、多数の好適な方式で実施してよい。これらの及び他の好適な適用方法を以下に詳細に論じる。
【００１２】
したがって、本発明の目的は、植物の少なくとも一部に、エチレン応答を阻害するのに有効な量の、式（１）：
【化１】
（式中のナトリウム（Ｎａ＋）は以後、任意の好適な正に帯電した対イオンとして定義される）により定義される、シクロプロピル−１−エニル−プロパン酸ナトリウム塩（ＣＰＡＳ）を適用することを含む、植物のエチレン応答を阻害する方法を開示することである。
【００１３】
適用工程は、前記化合物を、前記化合物を含む水溶液に接触させることにより実施されると思われる。本発明によるＣＰＡＳは、リチウム、ナトリウム、カリウム、アンモニウム、カルシウム、マグネシウム等、及び少なくとも１つの硫酸塩若しくはリン酸塩分子を含む正に帯電した対イオン、又はこれらの組み合わせの群から非限定的な方式で選択された塩であり、特にナトリウム塩である。適用工程は、前記植物の少なくとも一部を溶液に浸漬する、溶液を噴霧する、かける又は液滴を放出する、接触させる、及びはけ塗りする、のうち１つ又はそれ以上の手順により実施されると思われる。エチレン応答は、果実の成熟、野菜の成熟、花の老化、器官脱離、収穫した果実、収穫した野菜又はこれらの組み合わせから、非限定的な方式で選択される。
【００１４】
本発明の別の目的は、カットフルーツに、寿命を延ばすのに有効な量の、式（１）により定義される化合物を適用することを含む、収穫した果実の寿命を延ばす方法を開示することである。適用工程は、前記植物の少なくとも一部に、溶液を接触させる、浸漬する、噴霧する、かける又は液滴を放出する、はけ塗りする、のうち１つ又はそれ以上の手順により実施されると思われる。エチレン応答は、果実の成熟、野菜の成熟、花の老化、器官脱離、収穫した果実、収穫した野菜又はこれらの組み合わせから、非限定的な方式で選択される。
【００１５】
本発明の別の目的は、切花に、寿命を延ばすのに有効な量の、式（１）により定義される化合物を適用することを含む、切花の寿命を延ばす方法を開示することである。適用工程は、前記植物の少なくとも一部に、溶液を接触させる、浸漬する、噴霧する、かける又は液滴を放出する、はけ塗りする、のうち１つ又はそれ以上の手順により実施されると思われる。
【００１６】
本発明の別の目的は、式（１）により特徴付けられる、植物のエチレン応答のシクロプロピル−１−エニル−プロパン酸ナトリウム塩（ＣＰＡＳ）阻害剤を開示することである。ＣＰＡＳ阻害剤は、浸漬する、はけ塗りする、かける若しくは液滴を放出する、噴霧する又はこれらの任意の組み合わせの群から選択される、市販の手段により植物の少なくとも一部に適用するのに適合した、周囲条件（温度及び圧力）で優位に液体形であると思われる。あるいは又は更に、上記のいずれかで定義したようなＣＰＡＳを、有効な量まで、水溶液に溶解、分散又は混合する。
【００１７】
本発明の別の目的は、上記定義のようなＣＰＡＳを開示することであって、前記ＣＰＡＳは表面活性ＣＰＡＳ含有水溶液が得られるように提供される。
【図面の簡単な説明】
【００１８】
本発明は、添付図面を参照して、実施例を用いて、より詳細に記載される。
【００１９】
【図１】ＣＰＡＳ処理した及び処理していないカーネーションの花弁の写真である。
【図２】ＣＰＡＳ処理した及び処理していないカーネーションの切花の写真である。
【図３】ＣＰＡＳ処理した及び処理していないペチュニアの切花の写真である。
【図４】ＣＰＡＳ処理した及び処理していないバナナの果実の写真である。
【図５】ＣＰＡＳ及びエチレン負荷に対する、バナナの果実の堅さ及び色の依存性を示す図である。
【図６】ＣＰＡＳ処理した及び処理していないアボカドの果実の写真である。
【図７】柑橘類の葉外植片の器官脱離の遅延に対する、ＣＰＡＳの効果を示す図である。
【図８】エチレンに誘導される葉の葉柄の上偏生長に対する、トマト植物体へのＣＰＡＳ噴霧の効果を表す。
【図９】エチレンに誘導される葉の葉柄の上偏生長に対する、トマト植物体へのＣＰＡＳ噴霧の効果を表す。
【図１０】エチレンに誘導される葉の葉柄の上偏生長に対する、切り取ったトマト植物体へのＣＰＡＳ負荷の効果を表す。
【図１１】モモの果実へのＣＰＡＳ噴霧の効果を表す。
【図１２】カーネーションの切花の花序の直径に対する、ＣＰＡＳ負荷の効果を表す。
【図１３】処理１４日後の、切り取った花弁のエチレンに誘導される老化の遅延に対する、ＣＰＡＳ負荷の効果を表す。
【図１４】切り取った花弁への、ＣＰＡＳ負荷に続く空気又はエチレン処理の効果を表す。
【図１５】処理１５日後の、ペチュニアの花のエチレンに誘導される老化の遅延に対する、ＣＰＡＳ負荷の効果を表す。
【図１６】柑橘類の葉外植片のモデル系；（Ａ）負荷：葉外植片に、葉柄の切断面を処理溶液に浸すことにより、種々の濃度のＣＰＡＳを含有する水道水中で、６時間阻害剤を負荷する；（Ｂ）浸漬：葉外植片を種々の濃度のＣＰＡＳとツイーン−２０（０．０２５％）を含有する水道水に３０秒間浸す、を表す。
【図１７】柑橘類の葉外植片の器官脱離の遅延に対する、ＣＰＡＳの効果を表す。
【図１８】柑橘類の葉外植片の器官脱離の遅延に対する、ＣＰＡＳの緩衝液の効果を表す。
【図１９】エチレンに誘導される葉の葉柄の上偏生長に対する、トマト植物体へのＣＰＡＳ噴霧の効果を表す；温室で育てた５週齢の植物に、０．０２５〜０．１％のＬ−７７界面活性剤＋ＣＰＡＳを含有する、リン酸カリウム緩衝液（ｐＨ７．８、１０ｍＭ）を噴霧することにより、前処理し；１８時間後、前処理した植物をエチレン３μＬ／Ｌに２４時間曝露した。
【図２０】エチレンに誘導される葉の葉柄の上偏生長に対する、トマト植物体へのＣＰＡＳ噴霧の効果を表す；温室で育てた５週齢の植物に、０．０２５〜０．１％の「キネティック（Kinetic）」界面活性剤＋ＣＰＡＳを含有する、リン酸カリウム緩衝液（ｐＨ７．８、１０ｍＭ）を噴霧することにより、前処理し；１８時間後、前処理した植物をエチレン３μＬ／Ｌに２４時間曝露した。
【図２１】エチレンに誘導される葉の葉柄の上偏生長に対する、トマト植物体へのＣＰＡＳ噴霧の効果を表す。
【図２２】エチレンに誘導される葉の葉柄の上偏生長に対する、トマトの枝へのＣＰＡＳ負荷の効果を表す。
【図２３】処理５日後のアボカド「ハス」品種のエチレンに誘導される成熟の遅延に対する、ＣＰＡＳのはけ塗りの効果を表す；緑の熟した「ハス」品種の果実を、ＣＰＡＳの水道水溶液（１００μｇ／ｍＬ＋界面活性剤としての０．１％「キネティック」）を、皮にそっとはけ塗りすることにより前処理した。１８時間後、未処理の果実（Ａ）及び前処理した果実（Ｂ）を、エチレン（２５０μＬ／Ｌ）に２４時間曝露した。
【図２４】処理１０日後の、バナナのエチレンに誘導される成熟の遅延に対する、ＣＰＡＳのはけ塗りの効果を表す；緑のバナナ果実を、ＣＰＡＳの水道水溶液（＋界面活性剤としての０．０２５％ツイーン−２０）を、皮にそっとはけ塗りすることにより前処理した。１８時間後、前処理した果実を、エチレン（２５０μＬ／Ｌ）に２４時間曝露した。
【図２５】処理１０日後の、バナナのエチレンに誘導される成熟の遅延に対する、ＣＰＡＳの効果を表す；緑のバナナ果実を、ＣＰＡＳの水道水溶液（＋界面活性剤としての０．０２５％ツイーン−２０）を、皮にそっとはけ塗りすることにより前処理した。１８時間後、前処理した果実を、エチレン（２５０μＬ／Ｌ）に２４時間曝露した。
【発明を実施するための形態】
【００２０】
本発明を実施するために用いてよいＣＰＡＳは、式Ｉ：
【化１】
（ナトリウムは、本明細書では、正に帯電した対イオンとして提供される）により定義される。
【００２１】
用語「植物」は、本明細書では一般的な意味で用いられ、草本性、並びに、木及び低木のような木質茎植物を含む。本明細書に記載の方法により処理される植物としては、植物全体、並びに、農作物、鉢植え植物、切花（茎及び花）及び収穫した果実及び野菜のようなその任意の一部が挙げられる。前記化合物で及び本発明の方法により処理された植物は、好ましくは、非植物毒性量のＣＰＡＳで処理される。
【００２２】
用語「水溶液」は、以後、少なくとも部分的に水に混和性である溶液を指す。上記にかかわらず、ＣＰＡＳは粉末形、錠剤、エアゾール、エマルション、懸濁液、水混和性若しくは水不混和性溶液、又は任意の他の農業的方式で提供されると思われる。
【００２３】
本発明を使用して、様々な異なるエチレン応答を調整することができる。エチレン応答は、内因性及び外因性源のエチレンのいずれによっても開始され得る。エチレン応答としては、例えば、花、果実及び野菜の成熟及び／又は老化、葉、花及び果実の器官脱離、鉢植え植物、切花、植え込み、種子及び休眠中の苗のような観賞植物の寿命を縮める、一部の植物（例えばエンドウマメ）で生長を阻害する、並びに他の植物（例えば、イネ）で生長を刺激することが挙げられる。
【００２４】
本発明のＣＰＡＳにより阻害できる更なるエチレン応答又はエチレン型応答としては、直接又は間接的オーキシン活性、頂端生長の阻害、頂芽優勢の制御、分枝の増加、代謝産物及び副生成物の代謝及び濃度の増加又は減少、植物の生化学組成の変化（茎面積に対する葉面積の増加等）、開花及び種子の発生の失敗又は阻害、倒伏作用、種子の発芽の刺激及び休眠の中断、並びにホルモン又は上偏生長作用が挙げられるが、これらに限定されない。
【００２５】
本発明の実施形態による方法は、野菜の成熟及び／又は老化を阻害する。本明細書で使用するとき、「野菜の成熟」とは、まだ植物に実っている状態の野菜の成熟及び野菜が実っている植物から収穫された後の野菜の成熟を含む。成熟及び／又は老化を阻害するために、本発明の方法により処理できる野菜としては、レタス（例えば、Lactuea sativa）、ホウレンソウ（Spinaca oleracea）、及びキャベツ（Brassica oleracea）のような葉物野菜、ジャガイモ（Solanum tuberosum）及びニンジン（Daucus）のような種々の根菜、タマネギ（Allium sp.）のような鱗茎、バジル（Ocimum basilicum）、オレガノ（Origanum vulgare）、ディル（Anethum graveolens）のようなハーブ、並びにダイズ（Glycine max）、ライマメ（Phaseolus limensis）、エンドウマメ（Lathyrus spp.）、トウモロコシ（Zea mays）、ブロッコリー（Brassica oleracea
italica）、カリフラワー（Brassica oleracea
botrytis）及びアスパラガス（Asparagus officinalis）が挙げられる。
【００２６】
本発明の実施形態による方法は果実の成熟を阻害する。本明細書で使用するとき、「果実の成熟」とは、まだ植物に実っている状態の果実の成熟に加えて、果実が実っている植物から収穫された後の果実の成熟を含む。成熟を阻害するために本発明の方法により処理できる果実としては、トマト（Lycopersicon esculentum）、リンゴ（Malus domestica）、バナナ（Musa sapientum）、セイヨウナシ（Pyrus communis）、パパイヤ（Carica papaya）、マンゴー（Mangifera indica）、モモ（Prunus persica）、アプリコット（Prunus armeniaca）、ネクタリン（Prunus persica nectarina）、オレンジ（Citrus sp.）、レモン（Citrus limonia）、ライム（Citrus aurantifolia）、グレープフルーツ（Citrus paradisi）、タンジェリン（Citrus
nobilis deliciosa）並びに他の市販品種、雑種、及び新たに開発された品種、キウィ（Actinidia chinenus）、パイナップル（Aranas comosus）、カキ（Diospyros sp.）、アボカド（Persea americana）並びに他の市販品種、雑種及び新たに開発された品種が挙げられる。
【００２７】
老化を阻害する並びに／又は花の寿命及び外観を長持ちさせる（黄変及び器官脱離を遅延させる）ために本発明の方法により処理できる観賞植物としては、鉢植え観賞植物及び切花が挙げられる。本発明で処理できる鉢植え観賞植物及び切花としては、ツツジ（Rhododendron spp.）、アジサイ（Mαcrophyllα hydrangea）、ハイビスカス（Hibiscus rosasanensis）、スナップドラゴン（Antirrhinum sp.）、ポインセチア（Euphorbia pulcherima）、サボテン（例えば、Cactaceae schlumbergera
truncata）、ベゴニア（Begonia sp.）、バラ（Rosa spp.）、チューリップ（Tulipa sp.）、スイセン（Narcissus spp.）、ペチュニア（Petunia hybrida）、カーネーション（Dianthus caryophyllus）、ユリ（例えば、Lilium sp.）、グラジオラス（Gladiolus sp.）、アルストロメリア（Alstoemeria brasiliensis）、アネモネ（例えば、Anemone
blanda）、オダマキ（Aquilegia sp.）、アラリア（例えば、Aralia chinensis）、シオン（例えば、Aster carolinianus）、ブーゲンビリア（Bougainvillea
sp.）、ツバキ（Camellia sp.）、ホタルブクロ（Campanula
sp.）、ケイトウ（celosia sp.）、フォールスサイプレス（Chamaecyparis sp.）、キク（Chrysanthemum sp.）、クレマチス（Clematis sp.）、シクラメン（Cyclamen sp.）、フリージア（例えば、Freesia refracta）、及びラン科のラン、並びに他の市販品種、雑種及び新たに開発された品種が挙げられる。
【００２８】
葉、花及び果実の器官脱離を阻害するために本発明の方法により処理できる植物としては、リンゴ、セイヨウナシ、サクランボ（Prunus avium）、ペカン（Carva illinoensis）、ブドウ（Vitis vinifera）、オリーブ（例えば、Vitis vinifera及びOlea europaea）、コーヒー（Coffea arabica）、インゲンマメ（Phaseolus vulgaris）、オレンジ（Citrus sp.）、レモン（Citrus limonia）、ライム（Citrus
aurantifolia）、グレープフルーツ（Citrus paradisi）、タンジェリン（Citrus nobilis deliciosa）及び他の市販品種、雑種及び新たに開発された品種、並びにシダレガジュマル（Ficus benjamina）に加えて、リンゴ、観賞植物、低木及び苗木を含む種々の果樹のような休眠苗が挙げられる。更に、葉の器官脱離を阻害するために本発明により処理できる低木としては、イボタ（Ligustrum sp.）、カナメモチ（Photinia sp.）、モチノキ（Ilex sp.）、ウラボシ科のシダ、フカノキ（Schefflera sp.）、アグラオネマ（Aglaonema sp.）、コトネアスター（Cotoneaster sp.）、メギ（Berberis sp.）、ヤマモモ（Myrica sp.）、アベリア（Abelia sp.）、アカシア（Acacia sp.）及びパイナップル科のブロミリアド、並びに他の市販品種、雑種及び新たに開発された品種が挙げられる。
【００２９】
ＣＰＡＳは、低濃度で適用されたときでさえ、植物、果実及び野菜に対するエチレン作用の予想以上に強力な阻害剤であることが証明されている。とりわけ、この化合物は、水に可溶性かつ安定性であり、そのため植物、カットフルーツ及びカット野菜、切花に活性物質を送達するための種々の方法の使用が可能になる。全ての対象に、ＣＰＡＳ水溶液をはけ塗り又は浸漬することができ、又はその溶液を噴霧することができ、界面活性剤の負荷は阻害剤の浸透を向上させることができる。更に、果実、野菜及び花の切断面を、一定の時間ＣＰＡＳ溶液に浸漬することができる。
【００３０】
水溶性３−（１−シクロプロペニル）プロパン酸及びそのナトリウム又は他の正に帯電した（１価又は２価）対イオン塩の合成を以下に記載する。
【００３１】
シクロプロペン化合物の最も簡単かつ最も信頼できる方法を示した参考文献の分析は、リチウム有機化合物の作用により、１，２，２−シクロプロパン又はその誘導体から３つの臭素原子を脱離させることである。１，２，２−トリブロモシクロプロパン化合物は、ジブロモカルベンと２−ブロモ−１−アルケン又はその誘導体との反応により調整される。それ故、市販の試薬から、規則化合物を生成する手順は、３つの主な合成工程から成る：第１は、４−ブロモ−４−ペンテン酸又はその誘導体の調製であり；第２工程は、３−（１−シクロプロペニル）プロパン酸の生成であり；第３工程は、この酸のナトリウム塩への変換である。リチウム、ナトリウム、カリウム、アンモニウム、カルシウム、マグネシウム及び、例えば少なくとも１つの硫酸塩又はリン酸塩分子を含む正に帯電した対イオン塩のような他の塩も可能である。とりわけ正に帯電したアルキル含有化合物を含む有機塩もまた可能である。
【００３２】
本発明の１つの実施形態による合成の全スキームは、以下の６つの段階を含み、ここでは、例として、非限定的な方式で、水溶性ナトリウムＣＰＡＳの合成を提供する：
1. BrCH2CH2OH
+ CH2=CH-OC2H5 → BrCH2CH2OCH(CH3)OC2H5.
2a.
Mg + BrCH2CH2OR → BrMgCH2CH2OR
(式中、RはCH(CH3)OC2H5である)
2b.
BrMgCH2CH2OR + CH2=CBr-CH2Br → CH2=CBr-CH2CH2CH2OR
3a.
CHBr3 + NaOH → CBr2 + NaBr +H2O
3b.
【化２】
4.
【化３】
5.
【化４】
6.
【化５】
【００３３】
得られる最終生成物の構造は、いくつかのスペクトル法：１Ｈ、１３Ｃ、２３Ｎａ ＮＭＲ、ＭＳ、赤外分光法により明らかになる。純度は、ＨＰＬＣ及びＨＰＴＬＣ方法により定められる。約０．２ｇの３−（１−シクロプロペニル）プロパン酸が得られ、その精製方法が開発されている。
【実施例】
【００３４】
本発明は、以下の非限定的な実施例でより詳細に説明される。
【実施例１】
【００３５】
エチレン作用の拮抗における水溶性ＣＰＡＳの最低有効濃度を決定するために、熟しているが成熟していない果実：緑のバナナ果実；緑のアボカド「ハス」果実；及び熟しているが成熟していないモモ果実、切花：カーネーション；カーネーションの花弁；及びペチュニアの花、トマト苗；及び柑橘類の葉外植片を用いて、試験を実施した。上記に列挙した植物材料をＣＰＡＳ溶液±エチレン曝露で処理した。ＣＰＡＳ（μｇ／ｍＬ）の最低の見かけ上の濃度及びそれらの植物材料が保護された時間（日）を表１に示す。
【表１】
【００３６】
各種類のモデル植物を、前処理として６〜１８時間、様々な濃度の水溶液中のＣＰＡＳに曝露し、続いて２４時間様々な濃度のエチレンに曝露した。バナナ及びアボカド果実の場合、エチレン前処理として市販のツイーン−２０界面活性剤（０．０２５％）の存在下で、様々な濃度のＣＰＡＳ水溶液を皮にはけ塗りし、空気対照に対する、色が分解するまで（バナナでは緑から黄色に（表１、図４）、アボカドでは緑から黒に（表１、図６））に経過した遅延日数を、エチレン拮抗剤の効率の基準として記録した。モモ果実の場合は、界面活性剤ＢＡＳ７０（ドイツのBＡＳＦにより大量に供給されている）を用いた。制御条件下で２〜４日間インキュベートした後、結果を記録した（表１、図１１）。切花モデルを用いたときは（図１〜３）、ＣＰＡＳ水溶液±界面活性剤を、エチレン処理前にＣＰＡＳ水溶液中で１８時間、切花又は分離した花弁のいずれかに負荷することにより適用した。花の視覚的しおれに従って、水対照に対する、試験した植物材料の老化の遅延日数を記録した。葉の葉柄のエチレン誘導性上偏生長を拮抗するために（表１、図８〜９）、ＣＰＡＳ溶液を噴霧する前又は下方茎切断面を介して切り取った苗によりＣＰＡＳ負荷する前（表１、図１０）、８〜１０時間生育箱内で検定のために維持された、市販の「キネティック」オルガノシリコーン界面活性剤ブレンドの存在下で、ＣＰＡＳ水溶液をトマト苗に噴霧した。柑橘類の葉外植片の場合では、薄層器官脱離領域で、器官脱離を試験した。水溶液中のＣＰＡＳは、１７時間外植片の近位側に処理溶液を直接負荷することにより、又は市販のツイーン−２０（登録商標）界面活性剤（０．０２５％）の存在下で３０〜６０秒間試験した溶液中に外植片全体を浸漬することにより、前処理した。全ての場合、検査した全ての植物系で、エチレンに誘導される応答の作用の著しい遅延が記録された（表１、図７）。更なる実施例では、ＣＰＡＳ水溶液濃度を、上記実験で得られた結果の範囲で用いた。
【実施例２】
【００３７】
以下の試験は、水溶液中の水溶性ＣＰＡＳの、分離したカーネーションの花弁のエチレンに誘導される老化を遅延させる能力を更に定めるために設計した。実験は、最適な環境条件（光、温度及び相対湿度）を保証するために生育箱内で実施した。カーネーションの花弁は、その切断面を１８時間、８１μｇ／ｍＬのＣＰＡＳを含有する水溶液中に浸漬することにより、ＣＰＡＳ負荷した。未処理の花弁は水中に保持された。１８時間後、処理した花弁を水に移した。その後、全ての花弁を２４時間エチレン（５μｌ／L）に曝露した。処理の終わりに、その老化値を評価するために、水中に浸漬された切断面を有する花弁を、連続蛍光灯下で２２℃及びＲＨ８０％に維持した。６日目に写真を撮影した（未処理−図１Ａ、処理−図１Ｂ）。
【００３８】
６日後に測定された水溶液中のＣＰＡＳのエチレン拮抗効果は、非常に著しかった。実験の過程で、毒性症状は観察されなかった。
【実施例３】
【００３９】
カーネーションの切花を、８μｇ／ｍＬのＣＰＡＳを含有する水溶液中に１８時間切断面を浸漬することにより処理した。未処理の花は、水中に保持した。処理後、花持ちを評価するために、全ての花を、連続蛍光灯下にて、２２℃及びＲＨ８０％で水中に維持した。１４日目に写真を撮影した。得られた結果は、未処理の花に比べて（図２Ａ）、水溶液中にＣＰＡＳが存在する場合は（図２Ｂ）花持ちに関してカーネーションの切花の寿命増加を示す。
【実施例４】
【００４０】
短茎ペチュニア切花を、９８μｇ／ｍＬのＣＰＡＳを含有する水溶液中に１８時間切断面を浸漬することにより、水溶性ＣＰＡＳを負荷した。未処理の花は水中に保持した。負荷の１８時間後、処理した花を水に移動させた。次いで、花を２４時間エチレン（５μｌ／Ｌ）に曝露して、花の老化を加速させた。処理の終わりに、切断面を水に浸漬した花を、花持ちを評価するために、連続蛍光灯下にて、２２℃及びＲＨ８０％でインキュベートした。１４日目に写真を撮影した（未処理−図３Ａ、処理−図３Ｂ）。
【００４１】
ペチュニアは、エチレンに感受性であることが既知であり、したがって、エチレン応答を研究するためのモデル系として用いられることが多い。この実験の結果は、前の実験に完全に一致し、水中に可溶性形で適用されるときの、エチレン拮抗剤としてのＣＰＡＳの有効性を更に支持する。
【実施例５】
【００４２】
バナナの果実を、水溶性ＣＰＡＳの水溶液（２００μｇ／ｍＬ）ではけ塗りすることにより処理した。１８時間後、全ての処理した及び未処理の果実を、エチレン（３００μｌ／Ｌ）に曝露し、成熟を加速させた。全ての果実に酸素を供給し、成熟値を評価するために、２２℃及びＲＨ９２％で空気中に保持した。１２日目に写真を撮影した（未処理−図４Ａ、処理−図４Ｂ）。
【００４３】
更に、バナナ果実を、ＣＰＡＳの水溶液（０．６〜１０００μｇ／μＬ、及び市販の界面活性剤ツイーン−２０（０．０２５％））をはけ塗りすることにより処理し、１８時間後エチレン（３００μｌ／Ｌ）に２４時間曝露して、成熟を加速させた。果実を２４℃及びＲＨ９２％で保持した。果実を空気中に保持し、ＣＰＡＳのみで処理し、これを比較例とする。結果を７日目に収集した（図５Ａ）。
【００４４】
ＣＰＡＳの水溶液（１０００μｇ／ｍＬ）は、果実の堅さの減少の遅延に関して効果がなく、これは果実の貯蔵寿命を延長しないことを意味する。それにもかかわらず、果実の色分解を著しく遅延させることは見出されていた（図４）。図５Ａは、ＣＰＡＳ及びエチレン曝露に関して、バナナ果実の堅さ及び色の依存性を示す図を表す。ここに見られるように、それぞれ堅さ及び色に対して、水溶液中のＣＰＡＳの二重の負及び正の効果が存在する。堅さは２５Ｎを著しく下回るまで低下し、果実は、１８時間の空気による前処理と、それに続く２４時間のエチレンへの曝露後、十分食用に適していた。色分解のパターンはまさに逆であり、その時点でほぼ完了していた。ＣＰＡＳの負荷は、全ての濃度において、果実の堅さの低下をほとんど防がなかったが、一方色分解の防止については、高濃度で有効であった。
【実施例６】
【００４５】
長い花柄を有する「ハス」アボカド果実を、１００μｇ／ｍＬのＣＰＡＳを含有する水溶液中に３０時間、花柄切断面を浸漬することにより、水溶性ＣＰＡＳを負荷した。未処理の花柄を有する果実は水に浸漬した。ＣＰＡＳ処理後、全ての果実を２４時間エチレン（２５０μｌ／Ｌ）に曝露した。その後、果実を、成熟パラメータ（皮の色変化及び果肉の堅さ）及び花柄の器官脱離を評価するために、２４℃及びＲＨ９２％で保持した。処理の５日後に写真を撮影した（未処理−図６Ａ、処理−図６Ｂ）。
【００４６】
成熟するにつれて、アボカドの緑の皮の色は紫〜黒になる。長い花柄を有する果実を、前処理として水溶液中のＣＰＡＳに浸し、続いてエチレン処理した。拮抗剤によって、皮の色の進行及び花柄の器官脱離は著しく遅延したが、恐らく化合物の嵩高い（bulky）組織への浸透が制限されたため、果実の軟化に対してはほんの少しの遅延効果しか記録されなかった。
【００４７】
したがって、得られた実験結果は、ＣＰＡＳが有効なエチレン拮抗剤であることを確認する。エチレン応答を阻害するのに有効な量のＣＰＡＳの適用は、作物の収穫期を延長し、果実の貯蔵性及び保存寿命、並びに切花、また恐らくハーブ及び葉菜の花持ちを延ばすことを可能にする。しかしながら、ＣＰＡＳは、その水への溶解性、安定性、及び種々の条件下で種々の植物系のエチレン応答を阻害する高い効力のために、実用的に用いることができる唯一の化合物である。
【実施例７】
【００４８】
６時間ＣＰＡＳ水溶液に葉柄切断面を浸漬することによる、又は外植片全体を３０秒間、同じ処理溶液±界面活性剤に浸漬する、のいずれかである２種の適用方法を比較し、外因性エチレン誘導性器官脱離を拮抗する、水溶性ＣＰＡＳの柑橘類の葉外植片への適用を、空気下で研究した。この実験では、ツイーン−２０（０．０２５％）を界面活性剤として選択したが、任意の非イオン性界面活性剤を選択してよい。実験は、予想通り、界面活性剤が植物組織への浸透を向上させることを示す。しかしながら、切花のように切断面を介した適用が好ましい場合、処理溶液に界面活性剤を負荷する必要はない（図７）。
【００４９】
図７は、一連の３つの図を表し、ここでは外植片に、ＣＰＡＳ水溶液に６時間葉柄の切断面を浸漬することにより（Ａ）；同じ処理溶液に３０秒間浸漬することにより（Ｂ）；及びＢと同様であるが、ツイーン−２０（０．０２５％）を含む溶液により（Ｃ）、ＣＰＡＳを負荷する。
【実施例８】
【００５０】
水溶液ＣＰＡＳの有効性を試験するために選択した別の植物モデルは、３週齢のトマトの苗であった。これらの苗は、若葉の上偏成長作用を誘導するエチレンに対して非常に感受性である（図８参照）。ＣＰＡＳが活性である場合、それはこの作用を拮抗するはずである。実験は、可溶性エチレン拮抗剤を噴霧により供給できるかどうかについても回答するように設計した。この理由のために、植物成長制御因子のような化学物質を用いるとき、野外で日常的に行われるのと同様に、界面活性剤を噴霧溶液に加えた。器官脱離の研究は（実施例７）、外植片を処理溶液に浸漬したとき、ＣＰＡＳの効果がより顕著であることを示した（図７）。実験の設計は、比較のための負荷処理を含んでいた（図９）。
【００５１】
噴霧実験では（図８）、温室で育てたトマト植物体（３週齢）を、検定のために生育箱（８〜１０時間、２２℃及びＲＨ８０％、連続蛍光灯下）に運んだ。その後、植物全体に、界面活性剤として０．１％の「キネティック」を含有するリン酸緩衝液（ｐＨ７．８；１０ｍＭ）に溶解したＣＰＡＳを、０（Ａ及びＢ）、８０（Ｃ）、１６０（Ｄ）μｇ／ｍＬ噴霧した。緩衝液の使用は、ｐＨの安定化を補助するが、必須ではない。水道水の使用も可能である。１８時間後、前処理した植物（Ｂ、Ｃ及びＤ）を１μｌ／Ｌのエチレンに２４時間曝露した。ＣＰＡＳ±エチレンを含まない同じ処理溶液を噴霧した植物（Ａ及びＢ）は、空気又はエチレン対照として機能した。
【００５２】
第２の実験では、上偏成長応答を表す、枝からの葉柄の角度の変化を算出した（図９）。実験条件は、ＣＰＡＳによる前処理後、トマト植物体を３μｌ／Ｌのエチレンに２４時間曝露し、各葉の葉柄の上偏成長（apinasty）（枝と葉の葉柄との間の角度）を評価するために、処理の終わりに植物を棚に移動させたことを除き、図８に記載したものであった。値は、平均±標準誤差である（ｎ＝９〜１２）。
【００５３】
温室で育てたトマト植物体（４週齢）を、葉の葉柄のエチレンに誘導される上偏成長に対する、切り取ったトマト植物体（約１５ｃｍ、長茎）へのＣＰＡＳ負荷の効果を研究するために運んだ。ここで、切り取ったトマト植物体への、葉の葉柄のエチレンに誘導される上偏成長に対する、ＣＰＡＳ負荷の効果を表す図１０を参照する。各葉の葉柄の上偏成長（枝と葉の葉柄との間の角度）を評価するために、処理の終わりに、切断面を水道水に漬けた状態の、切断された植物を棚に移動させたことを除き、他の詳細は全て実施例８に記載したものであり、値は、平均±標準誤差である（ｎ＝９〜１２）。各植物を切断し、基部を前検定（上記定義のような）した後、直ちに水道水下でその切断面を新しくし、光及び湿潤条件下で、３０ｍｌの水道水中に８〜１０時間定置した。その後、枝の切断面を０〜８１μｇ／ｍＬのＣＰＡＳを含有する１５ｍｌのリン酸緩衝液（ｐＨ７．８；１０ｍＭ）に浸漬した。１８時間負荷した後、全ての前処理した枝を水道水に移し、２４時間エチレン（３μｌ／Ｌ）に曝露した。ＣＰＡＳを含まない同じ処理溶液を負荷した外植片は、空気又はエチレン対照として機能した。
【００５４】
これらの３つの実験は、ＣＰＡＳを水溶性噴霧農産品加工業的用具として用いることができ、界面活性剤の存在下では、ＣＰＡＳは植物器官のクチクラを介して組織に容易に浸透することを示す。
【実施例９】
【００５５】
界面活性剤の使用についてはまた、熟しているが成熟していないモモ果実に噴霧することにより試験された（図１１）。この実験はまた、水溶性ＣＰＡＳが、外因性エチレンのクライマクテリック上昇を拮抗し、したがって、果実の保存寿命を延長する（軟化を遅延させる）能力を研究するために設計した。追加のエチレン感受性クライマクテリック果実として、モモを選択した。この実験では、ＣＰＡＳ水溶液の浸透効率を更に研究した。
【００５６】
モモ果実を収穫し、研究室に運び、直ちに様々な濃度のＣＰＡＳ溶液を噴霧し（リン酸カリウム緩衝液、２０ｍＭ、及び０．１％オルガノシリコーン界面活性剤、つまりドイツのＢＡＳＦのＢＡＳ９０３７０Ｓ）、２２℃及びＲＨ９０％で４日間以下維持した。未処理果実は対照として機能した。続く処理は、（ａ）０時間に噴霧し、２日後堅さを検査する；（ｂ）（ａ）と同じであるが、３日後に堅さを検査する；（ｃ）（ａ）と同じであるが、２日目に２回目の噴霧を行い、３日後に堅さを検査する；及び（ｄ）（ｃ）と同じであるが、１日後に２回目の噴霧を行い、４日後に堅さを検査する、であった。堅さは、直接果実の果肉上で測定することを可能にするために、１５ｍｍの正方形の皮のストリップを取り除いた後、透過度計（chatillon、直径８ｍｍのディスクを用いる）により記録した。
【００５７】
この実験は、明らかに、ＣＰＡＳの、皮を介して果実の組織に浸透し、クライマクテリック型果実の保存寿命を延長する能力を示した。
【００５８】
したがって、得られた実験結果は、ＣＰＡＳが有効なエチレン拮抗剤であることを確認する。エチレン応答を阻害するのに有効な量のＣＰＡＳの適用は、作物の収穫期を延長する、果実の貯蔵性及び保存寿命並びに切花の花持ちを延ばす、葉の葉柄の上偏生長のようなエチレンの形態学的作用、また恐らくハーブ及び葉菜を可能にする。上記実施例に基づいて、ＣＰＡＳが、その水への溶解性、安定性、及び種々の条件下で種々の植物系のエチレン応答を阻害する高い効力に起因して、噴霧農産品加工業的用具として、又は水溶液に負荷若しくは浸漬処理するために、実用的に用いることができる化合物であると結論付けることが可能である。
【００５９】
図１２〜２５は、阻害剤を噴霧により適用するときにも示されるように、とりわけ、浸漬及び負荷の両方により適用されるとき、エチレン拮抗剤として非常に有効であることを開示する。負荷は、界面活性剤のethＣＰＡＳの水溶液への添加を必要としない。モモ果実への界面活性剤を含有するＣＰＡＳ水溶液の噴霧は、阻害剤の適用が、果実の成熟に対するエチレンのクライマクテリック作用を遅延させ、結果として果実の保存寿命を延長できることを示した。
【００６０】
ＣＰＡＳの有効量は、非限定的な方式で、約０．０３〜約１０００μｇ／μＬであることが見出された。ＣＰＡＳは、例えば０．１〜２００（μｇ／ｍＬ）に及ぶ有効な量まで、水溶液に溶解した。
【００６１】
ＣＰＡＳの浸透（Ａ）及び純度（Ｂ）
（Ａ）界面活性剤を含む及び含まないＣＰＡＳ水溶液の種々の植物への浸透を以下のように示した：ａ．バナナ果実（実施例５）；ｂ．柑橘類の葉外植片の器官脱離（実施例７）；トマトの葉柄苗の上偏生長（実施例８）；及びｃ．モモの堅さ（実施例９）。
【００６２】
様々な非イオン性界面活性剤の使用が、ＣＰＡＳの組織への浸透を著しく向上させ、エチレン誘導性作用の拮抗が向上することが更に見出された。
【００６３】
有効な量の界面活性剤は、非限定的な方式で、約０．０２５％（ｗ／ｗ）〜約０．１％（ｗ／ｗ）であることが見出された。
【００６４】
（Ｂ）純度−前述のＣＰＡＳ合成経路は、２つの異なるバッチで提供され、純度は約９０％であった。以下の分析証明書を参照のこと。
【００６５】
【表２】
【００６６】
【表３】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、一般に、植物及び植物器官又は組織のエチレン応答を遮断する水溶性組成物並びに方法、具体的には、３−シクロプロピル−１−エニル−プロパン酸ナトリウム（又は他の正に帯電した対イオン）塩（ＣＰＡＳ）を植物に適用することにより、植物における種々のエチレンに制御された、生長、再生及び生殖過程を阻害する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
エチレンは、多数の発生過程、具体的には果実の成熟、器官脱離（落果及び落葉）及び老化に関与する天然の植物成長調節因子である。エチレンの有害作用は、農業生産高に被害を与える。
【０００３】
エチレン作用の拮抗剤は、農業利用に非常に有益であると考えられる、なぜなら、内因性及び外因性エチレンの双方から組織を保護するためである。エチレン拮抗剤（ＥＡ）は、その受容体部位を遮断することにより、分子レベルでエチレンの作用を阻害する。したがって、ＥＡを適用することにより、作物の収穫期を延長する、果実、ハーブ及び葉菜の貯蔵性及び保存寿命を延ばす、並びに切花の花持ちを延長することを可能にできる。一部のＥＡの使用は特許により保護されている：ホスホン酸誘導体（米国特許第３８７９１８８号）、チオ硫酸銀（米国特許第５５１０３１５号）、有機ハロゲン化合物（米国特許第５６７９６１７号）、２，５−ノルボルナジエン（米国特許第５８３４４０３号）、１−メチルシクロプロペン（1-methylecyclopropene）（米国特許第６１９３５０号、同第６３６５５４９号）。
【０００４】
エチレン応答を遮断する方法の進歩にもかかわらず、安全かつ便利な水溶性遮断剤に対する要求が依然として存在している。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
現在利用可能な最も有望なエチレン拮抗剤である、１−メチルシクロプロペン（１−ＭＣＰ）の使用は、主にそれが水に対して不溶性であるために制限されており、それ故密封した容器内でのみ揮発性形で使用されている。切花への浸漬負荷（dip loading）又は野外における噴霧による適用に使用することはできない。更に、エチレン拮抗剤の選択肢が増えることは、種々の期間エチレン受容体を遮断する阻害剤に対する強い要望を満たすために、商業的に望ましい。１７種のエチレン作用のシクロプロペン推定阻害剤が合成され、エチレン拮抗剤としての効力についてスクリーニングされた。新規水かつ安定なシクロプロペン誘導体（ＣＰＡＳ）を更に合成するために、少なくとも１２日間バナナの皮の催色を遅延させる、及び少なくとも５日間「ハス（Hass）」アボカド果実の色変化を遅延させる、少なくとも１４日間カーネーション及びペチュニアの切花の花持ちを延ばす、並びに少なくとも７日間柑橘類の葉外植片の器官脱離を遅延させる等、農作物におけるエチレン誘導性の有害応答の有効な阻害剤であることが見出されている、最も有望なものを選択した。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
以後、植物のエチレン応答を阻害する方法を本明細書に開示する。本明細書によると、このような方法の１つは、植物に、エチレン応答を阻害するのに有効な量の、更に詳細に記載するＣＰＡＳを適用することを含む。
【０００７】
本発明の別の態様は、植物に、エチレン受容体を遮断するのに有効な量のＣＰＡＳを適用することにより、植物のエチレン受容体を遮断する方法である。
【０００８】
本発明の別の態様は、上記定義の方法により、植物のエチレン受容体を遮断する方法であって、前記方法は、表面活性ＣＰＡＳ含有水溶液が得られるように、有効な量のＣＰＡＳを界面活性剤と混合する工程を更に含む。
【０００９】
また、植物に、器官脱離を阻害するのに有効な量のＣＰＡＳを適用することを含む、植物の器官脱離を阻害する方法を開示する。
【００１０】
また、切花に、寿命を延ばすのに有効な量のＣＰＡＳを適用することを含む、切花の寿命を延ばす方法を開示する。
【００１１】
また、収穫した果実に、阻害に有効な量のＣＰＡＳを適用することを含む、収穫した果実の成熟を阻害する方法を開示する。また、収穫した野菜に、阻害に有効な量のＣＰＡＳを適用することを含む、収穫した野菜の成熟を阻害する方法を開示する。本明細書に記載する方法は、（ｉ）水溶液若しくはエアゾール、若しくは懸濁液、若しくはエマルションの；（ｉｉ）又は植物、切花、摘み取った果実若しくは摘み取った野菜を、ＣＰＡＳ水溶液を含有する雰囲気中に導入することにより；（ｉｉｉ）又は粉末、微粒子、例えばナノ粉末、粒子状物質等のいずれかの、ＣＰＡＳで植物を処理することによる等の、多数の好適な方式で実施してよい。これらの及び他の好適な適用方法を以下に詳細に論じる。
【００１２】
したがって、本発明の目的は、植物の少なくとも一部に、エチレン応答を阻害するのに有効な量の、式（１）：
【化１】
（式中のナトリウム（Ｎａ＋）は以後、任意の好適な正に帯電した対イオンとして定義される）により定義される、シクロプロピル−１−エニル−プロパン酸ナトリウム塩（ＣＰＡＳ）を適用することを含む、植物のエチレン応答を阻害する方法を開示することである。
【００１３】
適用工程は、前記化合物を、前記化合物を含む水溶液に接触させることにより実施されると思われる。本発明によるＣＰＡＳは、リチウム、ナトリウム、カリウム、アンモニウム、カルシウム、マグネシウム等、及び少なくとも１つの硫酸塩若しくはリン酸塩分子を含む正に帯電した対イオン、又はこれらの組み合わせの群から非限定的な方式で選択された塩であり、特にナトリウム塩である。適用工程は、前記植物の少なくとも一部を溶液に浸漬する、溶液を噴霧する、かける又は液滴を放出する、接触させる、及びはけ塗りする、のうち１つ又はそれ以上の手順により実施されると思われる。エチレン応答は、果実の成熟、野菜の成熟、花の老化、器官脱離、収穫した果実、収穫した野菜又はこれらの組み合わせから、非限定的な方式で選択される。
【００１４】
本発明の別の目的は、カットフルーツに、寿命を延ばすのに有効な量の、式（１）により定義される化合物を適用することを含む、収穫した果実の寿命を延ばす方法を開示することである。適用工程は、前記植物の少なくとも一部に、溶液を接触させる、浸漬する、噴霧する、かける又は液滴を放出する、はけ塗りする、のうち１つ又はそれ以上の手順により実施されると思われる。エチレン応答は、果実の成熟、野菜の成熟、花の老化、器官脱離、収穫した果実、収穫した野菜又はこれらの組み合わせから、非限定的な方式で選択される。
【００１５】
本発明の別の目的は、切花に、寿命を延ばすのに有効な量の、式（１）により定義される化合物を適用することを含む、切花の寿命を延ばす方法を開示することである。適用工程は、前記植物の少なくとも一部に、溶液を接触させる、浸漬する、噴霧する、かける又は液滴を放出する、はけ塗りする、のうち１つ又はそれ以上の手順により実施されると思われる。
【００１６】
本発明の別の目的は、式（１）により特徴付けられる、植物のエチレン応答のシクロプロピル−１−エニル−プロパン酸ナトリウム塩（ＣＰＡＳ）阻害剤を開示することである。ＣＰＡＳ阻害剤は、浸漬する、はけ塗りする、かける若しくは液滴を放出する、噴霧する又はこれらの任意の組み合わせの群から選択される、市販の手段により植物の少なくとも一部に適用するのに適合した、周囲条件（温度及び圧力）で優位に液体形であると思われる。あるいは又は更に、上記のいずれかで定義したようなＣＰＡＳを、有効な量まで、水溶液に溶解、分散又は混合する。
【００１７】
本発明の別の目的は、上記定義のようなＣＰＡＳを開示することであって、前記ＣＰＡＳは表面活性ＣＰＡＳ含有水溶液が得られるように提供される。
【図面の簡単な説明】
【００１８】
本発明は、添付図面を参照して、実施例を用いて、より詳細に記載される。
【００１９】
【図１】ＣＰＡＳ処理した及び処理していないカーネーションの花弁の写真である。
【図２】ＣＰＡＳ処理した及び処理していないカーネーションの切花の写真である。
【図３】ＣＰＡＳ処理した及び処理していないペチュニアの切花の写真である。
【図４】ＣＰＡＳ処理した及び処理していないバナナの果実の写真である。
【図５】ＣＰＡＳ及びエチレン負荷に対する、バナナの果実の堅さ及び色の依存性を示す図である。
【図６】ＣＰＡＳ処理した及び処理していないアボカドの果実の写真である。
【図７】柑橘類の葉外植片の器官脱離の遅延に対する、ＣＰＡＳの効果を示す図である。
【図８】エチレンに誘導される葉の葉柄の上偏生長に対する、トマト植物体へのＣＰＡＳ噴霧の効果を表す。
【図９】エチレンに誘導される葉の葉柄の上偏生長に対する、トマト植物体へのＣＰＡＳ噴霧の効果を表す。
【図１０】エチレンに誘導される葉の葉柄の上偏生長に対する、切り取ったトマト植物体へのＣＰＡＳ負荷の効果を表す。
【図１１】モモの果実へのＣＰＡＳ噴霧の効果を表す。
【図１２】カーネーションの切花の花序の直径に対する、ＣＰＡＳ負荷の効果を表す。
【図１３】処理１４日後の、切り取った花弁のエチレンに誘導される老化の遅延に対する、ＣＰＡＳ負荷の効果を表す。
【図１４】切り取った花弁への、ＣＰＡＳ負荷に続く空気又はエチレン処理の効果を表す。
【図１５】処理１５日後の、ペチュニアの花のエチレンに誘導される老化の遅延に対する、ＣＰＡＳ負荷の効果を表す。
【図１６】柑橘類の葉外植片のモデル系；（Ａ）負荷：葉外植片に、葉柄の切断面を処理溶液に浸すことにより、種々の濃度のＣＰＡＳを含有する水道水中で、６時間阻害剤を負荷する；（Ｂ）浸漬：葉外植片を種々の濃度のＣＰＡＳとツイーン−２０（０．０２５％）を含有する水道水に３０秒間浸す、を表す。
【図１７】柑橘類の葉外植片の器官脱離の遅延に対する、ＣＰＡＳの効果を表す。
【図１８】柑橘類の葉外植片の器官脱離の遅延に対する、ＣＰＡＳの緩衝液の効果を表す。
【図１９】エチレンに誘導される葉の葉柄の上偏生長に対する、トマト植物体へのＣＰＡＳ噴霧の効果を表す；温室で育てた５週齢の植物に、０．０２５〜０．１％のＬ−７７界面活性剤＋ＣＰＡＳを含有する、リン酸カリウム緩衝液（ｐＨ７．８、１０ｍＭ）を噴霧することにより、前処理し；１８時間後、前処理した植物をエチレン３μＬ／Ｌに２４時間曝露した。
【図２０】エチレンに誘導される葉の葉柄の上偏生長に対する、トマト植物体へのＣＰＡＳ噴霧の効果を表す；温室で育てた５週齢の植物に、０．０２５〜０．１％の「キネティック（Kinetic）」界面活性剤＋ＣＰＡＳを含有する、リン酸カリウム緩衝液（ｐＨ７．８、１０ｍＭ）を噴霧することにより、前処理し；１８時間後、前処理した植物をエチレン３μＬ／Ｌに２４時間曝露した。
【図２１】エチレンに誘導される葉の葉柄の上偏生長に対する、トマト植物体へのＣＰＡＳ噴霧の効果を表す。
【図２２】エチレンに誘導される葉の葉柄の上偏生長に対する、トマトの枝へのＣＰＡＳ負荷の効果を表す。
【図２３】処理５日後のアボカド「ハス」品種のエチレンに誘導される成熟の遅延に対する、ＣＰＡＳのはけ塗りの効果を表す；緑の熟した「ハス」品種の果実を、ＣＰＡＳの水道水溶液（１００μｇ／ｍＬ＋界面活性剤としての０．１％「キネティック」）を、皮にそっとはけ塗りすることにより前処理した。１８時間後、未処理の果実（Ａ）及び前処理した果実（Ｂ）を、エチレン（２５０μＬ／Ｌ）に２４時間曝露した。
【図２４】処理１０日後の、バナナのエチレンに誘導される成熟の遅延に対する、ＣＰＡＳのはけ塗りの効果を表す；緑のバナナ果実を、ＣＰＡＳの水道水溶液（＋界面活性剤としての０．０２５％ツイーン−２０）を、皮にそっとはけ塗りすることにより前処理した。１８時間後、前処理した果実を、エチレン（２５０μＬ／Ｌ）に２４時間曝露した。
【図２５】処理１０日後の、バナナのエチレンに誘導される成熟の遅延に対する、ＣＰＡＳの効果を表す；緑のバナナ果実を、ＣＰＡＳの水道水溶液（＋界面活性剤としての０．０２５％ツイーン−２０）を、皮にそっとはけ塗りすることにより前処理した。１８時間後、前処理した果実を、エチレン（２５０μＬ／Ｌ）に２４時間曝露した。
【発明を実施するための形態】
【００２０】
本発明を実施するために用いてよいＣＰＡＳは、式Ｉ：
【化１】
（ナトリウムは、本明細書では、正に帯電した対イオンとして提供される）により定義される。
【００２１】
用語「植物」は、本明細書では一般的な意味で用いられ、草本性、並びに、木及び低木のような木質茎植物を含む。本明細書に記載の方法により処理される植物としては、植物全体、並びに、農作物、鉢植え植物、切花（茎及び花）及び収穫した果実及び野菜のようなその任意の一部が挙げられる。前記化合物で及び本発明の方法により処理された植物は、好ましくは、非植物毒性量のＣＰＡＳで処理される。
【００２２】
用語「水溶液」は、以後、少なくとも部分的に水に混和性である溶液を指す。上記にかかわらず、ＣＰＡＳは粉末形、錠剤、エアゾール、エマルション、懸濁液、水混和性若しくは水不混和性溶液、又は任意の他の農業的方式で提供されると思われる。
【００２３】
本発明を使用して、様々な異なるエチレン応答を調整することができる。エチレン応答は、内因性及び外因性源のエチレンのいずれによっても開始され得る。エチレン応答としては、例えば、花、果実及び野菜の成熟及び／又は老化、葉、花及び果実の器官脱離、鉢植え植物、切花、植え込み、種子及び休眠中の苗のような観賞植物の寿命を縮める、一部の植物（例えばエンドウマメ）で生長を阻害する、並びに他の植物（例えば、イネ）で生長を刺激することが挙げられる。
【００２４】
本発明のＣＰＡＳにより阻害できる更なるエチレン応答又はエチレン型応答としては、直接又は間接的オーキシン活性、頂端生長の阻害、頂芽優勢の制御、分枝の増加、代謝産物及び副生成物の代謝及び濃度の増加又は減少、植物の生化学組成の変化（茎面積に対する葉面積の増加等）、開花及び種子の発生の失敗又は阻害、倒伏作用、種子の発芽の刺激及び休眠の中断、並びにホルモン又は上偏生長作用が挙げられるが、これらに限定されない。
【００２５】
本発明の実施形態による方法は、野菜の成熟及び／又は老化を阻害する。本明細書で使用するとき、「野菜の成熟」とは、まだ植物に実っている状態の野菜の成熟及び野菜が実っている植物から収穫された後の野菜の成熟を含む。成熟及び／又は老化を阻害するために、本発明の方法により処理できる野菜としては、レタス（例えば、Lactuea sativa）、ホウレンソウ（Spinaca oleracea）、及びキャベツ（Brassica oleracea）のような葉物野菜、ジャガイモ（Solanum tuberosum）及びニンジン（Daucus）のような種々の根菜、タマネギ（Allium sp.）のような鱗茎、バジル（Ocimum basilicum）、オレガノ（Origanum vulgare）、ディル（Anethum graveolens）のようなハーブ、並びにダイズ（Glycine max）、ライマメ（Phaseolus limensis）、エンドウマメ（Lathyrus spp.）、トウモロコシ（Zea mays）、ブロッコリー（Brassica oleracea
italica）、カリフラワー（Brassica oleracea
botrytis）及びアスパラガス（Asparagus officinalis）が挙げられる。
【００２６】
本発明の実施形態による方法は果実の成熟を阻害する。本明細書で使用するとき、「果実の成熟」とは、まだ植物に実っている状態の果実の成熟に加えて、果実が実っている植物から収穫された後の果実の成熟を含む。成熟を阻害するために本発明の方法により処理できる果実としては、トマト（Lycopersicon esculentum）、リンゴ（Malus domestica）、バナナ（Musa sapientum）、セイヨウナシ（Pyrus communis）、パパイヤ（Carica papaya）、マンゴー（Mangifera indica）、モモ（Prunus persica）、アプリコット（Prunus armeniaca）、ネクタリン（Prunus persica nectarina）、オレンジ（Citrus sp.）、レモン（Citrus limonia）、ライム（Citrus aurantifolia）、グレープフルーツ（Citrus paradisi）、タンジェリン（Citrus
nobilis deliciosa）並びに他の市販品種、雑種、及び新たに開発された品種、キウィ（Actinidia chinenus）、パイナップル（Aranas comosus）、カキ（Diospyros sp.）、アボカド（Persea americana）並びに他の市販品種、雑種及び新たに開発された品種が挙げられる。
【００２７】
老化を阻害する並びに／又は花の寿命及び外観を長持ちさせる（黄変及び器官脱離を遅延させる）ために本発明の方法により処理できる観賞植物としては、鉢植え観賞植物及び切花が挙げられる。本発明で処理できる鉢植え観賞植物及び切花としては、ツツジ（Rhododendron spp.）、アジサイ（Mαcrophyllα hydrangea）、ハイビスカス（Hibiscus rosasanensis）、スナップドラゴン（Antirrhinum sp.）、ポインセチア（Euphorbia pulcherima）、サボテン（例えば、Cactaceae schlumbergera
truncata）、ベゴニア（Begonia sp.）、バラ（Rosa spp.）、チューリップ（Tulipa sp.）、スイセン（Narcissus spp.）、ペチュニア（Petunia hybrida）、カーネーション（Dianthus caryophyllus）、ユリ（例えば、Lilium sp.）、グラジオラス（Gladiolus sp.）、アルストロメリア（Alstoemeria brasiliensis）、アネモネ（例えば、Anemone
blanda）、オダマキ（Aquilegia sp.）、アラリア（例えば、Aralia chinensis）、シオン（例えば、Aster carolinianus）、ブーゲンビリア（Bougainvillea
sp.）、ツバキ（Camellia sp.）、ホタルブクロ（Campanula
sp.）、ケイトウ（celosia sp.）、フォールスサイプレス（Chamaecyparis sp.）、キク（Chrysanthemum sp.）、クレマチス（Clematis sp.）、シクラメン（Cyclamen sp.）、フリージア（例えば、Freesia refracta）、及びラン科のラン、並びに他の市販品種、雑種及び新たに開発された品種が挙げられる。
【００２８】
葉、花及び果実の器官脱離を阻害するために本発明の方法により処理できる植物としては、リンゴ、セイヨウナシ、サクランボ（Prunus avium）、ペカン（Carva illinoensis）、ブドウ（Vitis vinifera）、オリーブ（例えば、Vitis vinifera及びOlea europaea）、コーヒー（Coffea arabica）、インゲンマメ（Phaseolus vulgaris）、オレンジ（Citrus sp.）、レモン（Citrus limonia）、ライム（Citrus
aurantifolia）、グレープフルーツ（Citrus paradisi）、タンジェリン（Citrus nobilis deliciosa）及び他の市販品種、雑種及び新たに開発された品種、並びにシダレガジュマル（Ficus benjamina）に加えて、リンゴ、観賞植物、低木及び苗木を含む種々の果樹のような休眠苗が挙げられる。更に、葉の器官脱離を阻害するために本発明により処理できる低木としては、イボタ（Ligustrum sp.）、カナメモチ（Photinia sp.）、モチノキ（Ilex sp.）、ウラボシ科のシダ、フカノキ（Schefflera sp.）、アグラオネマ（Aglaonema sp.）、コトネアスター（Cotoneaster sp.）、メギ（Berberis sp.）、ヤマモモ（Myrica sp.）、アベリア（Abelia sp.）、アカシア（Acacia sp.）及びパイナップル科のブロミリアド、並びに他の市販品種、雑種及び新たに開発された品種が挙げられる。
【００２９】
ＣＰＡＳは、低濃度で適用されたときでさえ、植物、果実及び野菜に対するエチレン作用の予想以上に強力な阻害剤であることが証明されている。とりわけ、この化合物は、水に可溶性かつ安定性であり、そのため植物、カットフルーツ及びカット野菜、切花に活性物質を送達するための種々の方法の使用が可能になる。全ての対象に、ＣＰＡＳ水溶液をはけ塗り又は浸漬することができ、又はその溶液を噴霧することができ、界面活性剤の負荷は阻害剤の浸透を向上させることができる。更に、果実、野菜及び花の切断面を、一定の時間ＣＰＡＳ溶液に浸漬することができる。
【００３０】
水溶性３−（１−シクロプロペニル）プロパン酸及びそのナトリウム又は他の正に帯電した（１価又は２価）対イオン塩の合成を以下に記載する。
【００３１】
シクロプロペン化合物の最も簡単かつ最も信頼できる方法を示した参考文献の分析は、リチウム有機化合物の作用により、１，２，２−シクロプロパン又はその誘導体から３つの臭素原子を脱離させることである。１，２，２−トリブロモシクロプロパン化合物は、ジブロモカルベンと２−ブロモ−１−アルケン又はその誘導体との反応により調整される。それ故、市販の試薬から、規則化合物を生成する手順は、３つの主な合成工程から成る：第１は、４−ブロモ−４−ペンテン酸又はその誘導体の調製であり；第２工程は、３−（１−シクロプロペニル）プロパン酸の生成であり；第３工程は、この酸のナトリウム塩への変換である。リチウム、ナトリウム、カリウム、アンモニウム、カルシウム、マグネシウム及び、例えば少なくとも１つの硫酸塩又はリン酸塩分子を含む正に帯電した対イオン塩のような他の塩も可能である。とりわけ正に帯電したアルキル含有化合物を含む有機塩もまた可能である。
【００３２】
本発明の１つの実施形態による合成の全スキームは、以下の６つの段階を含み、ここでは、例として、非限定的な方式で、水溶性ナトリウムＣＰＡＳの合成を提供する：
1. BrCH2CH2OH
+ CH2=CH-OC2H5 → BrCH2CH2OCH(CH3)OC2H5.
2a.
Mg + BrCH2CH2OR → BrMgCH2CH2OR
(式中、RはCH(CH3)OC2H5である)
2b.
BrMgCH2CH2OR + CH2=CBr-CH2Br → CH2=CBr-CH2CH2CH2OR
3a.
CHBr3 + NaOH → CBr2 + NaBr +H2O
3b.
【化２】
4.
【化３】
5.
【化４】
6.
【化５】
【００３３】
得られる最終生成物の構造は、いくつかのスペクトル法：１Ｈ、１３Ｃ、２３Ｎａ ＮＭＲ、ＭＳ、赤外分光法により明らかになる。純度は、ＨＰＬＣ及びＨＰＴＬＣ方法により定められる。約０．２ｇの３−（１−シクロプロペニル）プロパン酸が得られ、その精製方法が開発されている。
【実施例】
【００３４】
本発明は、以下の非限定的な実施例でより詳細に説明される。
【実施例１】
【００３５】
エチレン作用の拮抗における水溶性ＣＰＡＳの最低有効濃度を決定するために、熟しているが成熟していない果実：緑のバナナ果実；緑のアボカド「ハス」果実；及び熟しているが成熟していないモモ果実、切花：カーネーション；カーネーションの花弁；及びペチュニアの花、トマト苗；及び柑橘類の葉外植片を用いて、試験を実施した。上記に列挙した植物材料をＣＰＡＳ溶液±エチレン曝露で処理した。ＣＰＡＳ（μｇ／ｍＬ）の最低の見かけ上の濃度及びそれらの植物材料が保護された時間（日）を表１に示す。
【表１】
【００３６】
各種類のモデル植物を、前処理として６〜１８時間、様々な濃度の水溶液中のＣＰＡＳに曝露し、続いて２４時間様々な濃度のエチレンに曝露した。バナナ及びアボカド果実の場合、エチレン前処理として市販のツイーン−２０界面活性剤（０．０２５％）の存在下で、様々な濃度のＣＰＡＳ水溶液を皮にはけ塗りし、空気対照に対する、色が分解するまで（バナナでは緑から黄色に（表１、図４）、アボカドでは緑から黒に（表１、図６））に経過した遅延日数を、エチレン拮抗剤の効率の基準として記録した。モモ果実の場合は、界面活性剤ＢＡＳ７０（ドイツのBＡＳＦにより大量に供給されている）を用いた。制御条件下で２〜４日間インキュベートした後、結果を記録した（表１、図１１）。切花モデルを用いたときは（図１〜３）、ＣＰＡＳ水溶液±界面活性剤を、エチレン処理前にＣＰＡＳ水溶液中で１８時間、切花又は分離した花弁のいずれかに負荷することにより適用した。花の視覚的しおれに従って、水対照に対する、試験した植物材料の老化の遅延日数を記録した。葉の葉柄のエチレン誘導性上偏生長を拮抗するために（表１、図８〜９）、ＣＰＡＳ溶液を噴霧する前又は下方茎切断面を介して切り取った苗によりＣＰＡＳ負荷する前（表１、図１０）、８〜１０時間生育箱内で検定のために維持された、市販の「キネティック」オルガノシリコーン界面活性剤ブレンドの存在下で、ＣＰＡＳ水溶液をトマト苗に噴霧した。柑橘類の葉外植片の場合では、薄層器官脱離領域で、器官脱離を試験した。水溶液中のＣＰＡＳは、１７時間外植片の近位側に処理溶液を直接負荷することにより、又は市販のツイーン−２０（登録商標）界面活性剤（０．０２５％）の存在下で３０〜６０秒間試験した溶液中に外植片全体を浸漬することにより、前処理した。全ての場合、検査した全ての植物系で、エチレンに誘導される応答の作用の著しい遅延が記録された（表１、図７）。更なる実施例では、ＣＰＡＳ水溶液濃度を、上記実験で得られた結果の範囲で用いた。
【実施例２】
【００３７】
以下の試験は、水溶液中の水溶性ＣＰＡＳの、分離したカーネーションの花弁のエチレンに誘導される老化を遅延させる能力を更に定めるために設計した。実験は、最適な環境条件（光、温度及び相対湿度）を保証するために生育箱内で実施した。カーネーションの花弁は、その切断面を１８時間、８１μｇ／ｍＬのＣＰＡＳを含有する水溶液中に浸漬することにより、ＣＰＡＳ負荷した。未処理の花弁は水中に保持された。１８時間後、処理した花弁を水に移した。その後、全ての花弁を２４時間エチレン（５μｌ／L）に曝露した。処理の終わりに、その老化値を評価するために、水中に浸漬された切断面を有する花弁を、連続蛍光灯下で２２℃及びＲＨ８０％に維持した。６日目に写真を撮影した（未処理−図１Ａ、処理−図１Ｂ）。
【００３８】
６日後に測定された水溶液中のＣＰＡＳのエチレン拮抗効果は、非常に著しかった。実験の過程で、毒性症状は観察されなかった。
【実施例３】
【００３９】
カーネーションの切花を、８μｇ／ｍＬのＣＰＡＳを含有する水溶液中に１８時間切断面を浸漬することにより処理した。未処理の花は、水中に保持した。処理後、花持ちを評価するために、全ての花を、連続蛍光灯下にて、２２℃及びＲＨ８０％で水中に維持した。１４日目に写真を撮影した。得られた結果は、未処理の花に比べて（図２Ａ）、水溶液中にＣＰＡＳが存在する場合は（図２Ｂ）花持ちに関してカーネーションの切花の寿命増加を示す。
【実施例４】
【００４０】
短茎ペチュニア切花を、９８μｇ／ｍＬのＣＰＡＳを含有する水溶液中に１８時間切断面を浸漬することにより、水溶性ＣＰＡＳを負荷した。未処理の花は水中に保持した。負荷の１８時間後、処理した花を水に移動させた。次いで、花を２４時間エチレン（５μｌ／Ｌ）に曝露して、花の老化を加速させた。処理の終わりに、切断面を水に浸漬した花を、花持ちを評価するために、連続蛍光灯下にて、２２℃及びＲＨ８０％でインキュベートした。１４日目に写真を撮影した（未処理−図３Ａ、処理−図３Ｂ）。
【００４１】
ペチュニアは、エチレンに感受性であることが既知であり、したがって、エチレン応答を研究するためのモデル系として用いられることが多い。この実験の結果は、前の実験に完全に一致し、水中に可溶性形で適用されるときの、エチレン拮抗剤としてのＣＰＡＳの有効性を更に支持する。
【実施例５】
【００４２】
バナナの果実を、水溶性ＣＰＡＳの水溶液（２００μｇ／ｍＬ）ではけ塗りすることにより処理した。１８時間後、全ての処理した及び未処理の果実を、エチレン（３００μｌ／Ｌ）に曝露し、成熟を加速させた。全ての果実に酸素を供給し、成熟値を評価するために、２２℃及びＲＨ９２％で空気中に保持した。１２日目に写真を撮影した（未処理−図４Ａ、処理−図４Ｂ）。
【００４３】
更に、バナナ果実を、ＣＰＡＳの水溶液（０．６〜１０００μｇ／μＬ、及び市販の界面活性剤ツイーン−２０（０．０２５％））をはけ塗りすることにより処理し、１８時間後エチレン（３００μｌ／Ｌ）に２４時間曝露して、成熟を加速させた。果実を２４℃及びＲＨ９２％で保持した。果実を空気中に保持し、ＣＰＡＳのみで処理し、これを比較例とする。結果を７日目に収集した（図５Ａ）。
【００４４】
ＣＰＡＳの水溶液（１０００μｇ／ｍＬ）は、果実の堅さの減少の遅延に関して効果がなく、これは果実の貯蔵寿命を延長しないことを意味する。それにもかかわらず、果実の色分解を著しく遅延させることは見出されていた（図４）。図５Ａは、ＣＰＡＳ及びエチレン曝露に関して、バナナ果実の堅さ及び色の依存性を示す図を表す。ここに見られるように、それぞれ堅さ及び色に対して、水溶液中のＣＰＡＳの二重の負及び正の効果が存在する。堅さは２５Ｎを著しく下回るまで低下し、果実は、１８時間の空気による前処理と、それに続く２４時間のエチレンへの曝露後、十分食用に適していた。色分解のパターンはまさに逆であり、その時点でほぼ完了していた。ＣＰＡＳの負荷は、全ての濃度において、果実の堅さの低下をほとんど防がなかったが、一方色分解の防止については、高濃度で有効であった。
【実施例６】
【００４５】
長い花柄を有する「ハス」アボカド果実を、１００μｇ／ｍＬのＣＰＡＳを含有する水溶液中に３０時間、花柄切断面を浸漬することにより、水溶性ＣＰＡＳを負荷した。未処理の花柄を有する果実は水に浸漬した。ＣＰＡＳ処理後、全ての果実を２４時間エチレン（２５０μｌ／Ｌ）に曝露した。その後、果実を、成熟パラメータ（皮の色変化及び果肉の堅さ）及び花柄の器官脱離を評価するために、２４℃及びＲＨ９２％で保持した。処理の５日後に写真を撮影した（未処理−図６Ａ、処理−図６Ｂ）。
【００４６】
成熟するにつれて、アボカドの緑の皮の色は紫〜黒になる。長い花柄を有する果実を、前処理として水溶液中のＣＰＡＳに浸し、続いてエチレン処理した。拮抗剤によって、皮の色の進行及び花柄の器官脱離は著しく遅延したが、恐らく化合物の嵩高い（bulky）組織への浸透が制限されたため、果実の軟化に対してはほんの少しの遅延効果しか記録されなかった。
【００４７】
したがって、得られた実験結果は、ＣＰＡＳが有効なエチレン拮抗剤であることを確認する。エチレン応答を阻害するのに有効な量のＣＰＡＳの適用は、作物の収穫期を延長し、果実の貯蔵性及び保存寿命、並びに切花、また恐らくハーブ及び葉菜の花持ちを延ばすことを可能にする。しかしながら、ＣＰＡＳは、その水への溶解性、安定性、及び種々の条件下で種々の植物系のエチレン応答を阻害する高い効力のために、実用的に用いることができる唯一の化合物である。
【実施例７】
【００４８】
６時間ＣＰＡＳ水溶液に葉柄切断面を浸漬することによる、又は外植片全体を３０秒間、同じ処理溶液±界面活性剤に浸漬する、のいずれかである２種の適用方法を比較し、外因性エチレン誘導性器官脱離を拮抗する、水溶性ＣＰＡＳの柑橘類の葉外植片への適用を、空気下で研究した。この実験では、ツイーン−２０（０．０２５％）を界面活性剤として選択したが、任意の非イオン性界面活性剤を選択してよい。実験は、予想通り、界面活性剤が植物組織への浸透を向上させることを示す。しかしながら、切花のように切断面を介した適用が好ましい場合、処理溶液に界面活性剤を負荷する必要はない（図７）。
【００４９】
図７は、一連の３つの図を表し、ここでは外植片に、ＣＰＡＳ水溶液に６時間葉柄の切断面を浸漬することにより（Ａ）；同じ処理溶液に３０秒間浸漬することにより（Ｂ）；及びＢと同様であるが、ツイーン−２０（０．０２５％）を含む溶液により（Ｃ）、ＣＰＡＳを負荷する。
【実施例８】
【００５０】
水溶液ＣＰＡＳの有効性を試験するために選択した別の植物モデルは、３週齢のトマトの苗であった。これらの苗は、若葉の上偏成長作用を誘導するエチレンに対して非常に感受性である（図８参照）。ＣＰＡＳが活性である場合、それはこの作用を拮抗するはずである。実験は、可溶性エチレン拮抗剤を噴霧により供給できるかどうかについても回答するように設計した。この理由のために、植物成長制御因子のような化学物質を用いるとき、野外で日常的に行われるのと同様に、界面活性剤を噴霧溶液に加えた。器官脱離の研究は（実施例７）、外植片を処理溶液に浸漬したとき、ＣＰＡＳの効果がより顕著であることを示した（図７）。実験の設計は、比較のための負荷処理を含んでいた（図９）。
【００５１】
噴霧実験では（図８）、温室で育てたトマト植物体（３週齢）を、検定のために生育箱（８〜１０時間、２２℃及びＲＨ８０％、連続蛍光灯下）に運んだ。その後、植物全体に、界面活性剤として０．１％の「キネティック」を含有するリン酸緩衝液（ｐＨ７．８；１０ｍＭ）に溶解したＣＰＡＳを、０（Ａ及びＢ）、８０（Ｃ）、１６０（Ｄ）μｇ／ｍＬ噴霧した。緩衝液の使用は、ｐＨの安定化を補助するが、必須ではない。水道水の使用も可能である。１８時間後、前処理した植物（Ｂ、Ｃ及びＤ）を１μｌ／Ｌのエチレンに２４時間曝露した。ＣＰＡＳ±エチレンを含まない同じ処理溶液を噴霧した植物（Ａ及びＢ）は、空気又はエチレン対照として機能した。
【００５２】
第２の実験では、上偏成長応答を表す、枝からの葉柄の角度の変化を算出した（図９）。実験条件は、ＣＰＡＳによる前処理後、トマト植物体を３μｌ／Ｌのエチレンに２４時間曝露し、各葉の葉柄の上偏成長（apinasty）（枝と葉の葉柄との間の角度）を評価するために、処理の終わりに植物を棚に移動させたことを除き、図８に記載したものであった。値は、平均±標準誤差である（ｎ＝９〜１２）。
【００５３】
温室で育てたトマト植物体（４週齢）を、葉の葉柄のエチレンに誘導される上偏成長に対する、切り取ったトマト植物体（約１５ｃｍ、長茎）へのＣＰＡＳ負荷の効果を研究するために運んだ。ここで、切り取ったトマト植物体への、葉の葉柄のエチレンに誘導される上偏成長に対する、ＣＰＡＳ負荷の効果を表す図１０を参照する。各葉の葉柄の上偏成長（枝と葉の葉柄との間の角度）を評価するために、処理の終わりに、切断面を水道水に漬けた状態の、切断された植物を棚に移動させたことを除き、他の詳細は全て実施例８に記載したものであり、値は、平均±標準誤差である（ｎ＝９〜１２）。各植物を切断し、基部を前検定（上記定義のような）した後、直ちに水道水下でその切断面を新しくし、光及び湿潤条件下で、３０ｍｌの水道水中に８〜１０時間定置した。その後、枝の切断面を０〜８１μｇ／ｍＬのＣＰＡＳを含有する１５ｍｌのリン酸緩衝液（ｐＨ７．８；１０ｍＭ）に浸漬した。１８時間負荷した後、全ての前処理した枝を水道水に移し、２４時間エチレン（３μｌ／Ｌ）に曝露した。ＣＰＡＳを含まない同じ処理溶液を負荷した外植片は、空気又はエチレン対照として機能した。
【００５４】
これらの３つの実験は、ＣＰＡＳを水溶性噴霧農産品加工業的用具として用いることができ、界面活性剤の存在下では、ＣＰＡＳは植物器官のクチクラを介して組織に容易に浸透することを示す。
【実施例９】
【００５５】
界面活性剤の使用についてはまた、熟しているが成熟していないモモ果実に噴霧することにより試験された（図１１）。この実験はまた、水溶性ＣＰＡＳが、外因性エチレンのクライマクテリック上昇を拮抗し、したがって、果実の保存寿命を延長する（軟化を遅延させる）能力を研究するために設計した。追加のエチレン感受性クライマクテリック果実として、モモを選択した。この実験では、ＣＰＡＳ水溶液の浸透効率を更に研究した。
【００５６】
モモ果実を収穫し、研究室に運び、直ちに様々な濃度のＣＰＡＳ溶液を噴霧し（リン酸カリウム緩衝液、２０ｍＭ、及び０．１％オルガノシリコーン界面活性剤、つまりドイツのＢＡＳＦのＢＡＳ９０３７０Ｓ）、２２℃及びＲＨ９０％で４日間以下維持した。未処理果実は対照として機能した。続く処理は、（ａ）０時間に噴霧し、２日後堅さを検査する；（ｂ）（ａ）と同じであるが、３日後に堅さを検査する；（ｃ）（ａ）と同じであるが、２日目に２回目の噴霧を行い、３日後に堅さを検査する；及び（ｄ）（ｃ）と同じであるが、１日後に２回目の噴霧を行い、４日後に堅さを検査する、であった。堅さは、直接果実の果肉上で測定することを可能にするために、１５ｍｍの正方形の皮のストリップを取り除いた後、透過度計（chatillon、直径８ｍｍのディスクを用いる）により記録した。
【００５７】
この実験は、明らかに、ＣＰＡＳの、皮を介して果実の組織に浸透し、クライマクテリック型果実の保存寿命を延長する能力を示した。
【００５８】
したがって、得られた実験結果は、ＣＰＡＳが有効なエチレン拮抗剤であることを確認する。エチレン応答を阻害するのに有効な量のＣＰＡＳの適用は、作物の収穫期を延長する、果実の貯蔵性及び保存寿命並びに切花の花持ちを延ばす、葉の葉柄の上偏生長のようなエチレンの形態学的作用、また恐らくハーブ及び葉菜を可能にする。上記実施例に基づいて、ＣＰＡＳが、その水への溶解性、安定性、及び種々の条件下で種々の植物系のエチレン応答を阻害する高い効力に起因して、噴霧農産品加工業的用具として、又は水溶液に負荷若しくは浸漬処理するために、実用的に用いることができる化合物であると結論付けることが可能である。
【００５９】
図１２〜２５は、阻害剤を噴霧により適用するときにも示されるように、とりわけ、浸漬及び負荷の両方により適用されるとき、エチレン拮抗剤として非常に有効であることを開示する。負荷は、界面活性剤のethＣＰＡＳの水溶液への添加を必要としない。モモ果実への界面活性剤を含有するＣＰＡＳ水溶液の噴霧は、阻害剤の適用が、果実の成熟に対するエチレンのクライマクテリック作用を遅延させ、結果として果実の保存寿命を延長できることを示した。
【００６０】
ＣＰＡＳの有効量は、非限定的な方式で、約０．０３〜約１０００μｇ／μＬであることが見出された。ＣＰＡＳは、例えば０．１〜２００（μｇ／ｍＬ）に及ぶ有効な量まで、水溶液に溶解した。
【００６１】
ＣＰＡＳの浸透（Ａ）及び純度（Ｂ）
（Ａ）界面活性剤を含む及び含まないＣＰＡＳ水溶液の種々の植物への浸透を以下のように示した：ａ．バナナ果実（実施例５）；ｂ．柑橘類の葉外植片の器官脱離（実施例７）；トマトの葉柄苗の上偏生長（実施例８）；及びｃ．モモの堅さ（実施例９）。
【００６２】
様々な非イオン性界面活性剤の使用が、ＣＰＡＳの組織への浸透を著しく向上させ、エチレン誘導性作用の拮抗が向上することが更に見出された。
【００６３】
有効な量の界面活性剤は、非限定的な方式で、約０．０２５％（ｗ／ｗ）〜約０．１％（ｗ／ｗ）であることが見出された。
【００６４】
（Ｂ）純度−前述のＣＰＡＳ合成経路は、２つの異なるバッチで提供され、純度は約９０％であった。以下の分析証明書を参照のこと。
【００６５】
【表２】
【００６６】
【表３】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
植物の少なくとも一部に、エチレン応答を阻害するのに有効な量の、式（１）：
【化１】
により定義される、シクロプロピル−１−エニル−プロパン酸塩（ＣＰＡＳ）を適用することを含む、植物のエチレン応答を阻害する方法。
【請求項２】
前記ＣＰＡＳが、（ｉ）リチウム、ナトリウム、カリウム、アンモニウム、カルシウム、若しくは（ｉｉ）少なくとも１つの硫酸塩若しくはリン酸塩分子を含む正に帯電した対イオン、又はこれらの任意の組み合わせの群から選択される水溶性塩である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記適用工程が、前記化合物を、前記化合物を含む水溶液に接触させることにより実施される、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記適用工程が、前記溶液に、前記植物の少なくとも一部を浸漬することにより実施される、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
前記適用工程が、前記溶液を、前記植物の少なくとも一部に噴霧することにより実施される、請求項３に記載の方法。
【請求項６】
前記適用工程が、前記溶液を、前記植物の少なくとも一部にかける又は液滴を放出することにより実施される、請求項３に記載の方法。
【請求項７】
前記適用工程が、前記溶液を、前記植物の少なくとも一部にはけ塗りすることにより実施される、請求項３に記載の方法。
【請求項８】
前記エチレン応答が果実の成熟である、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
前記エチレン応答が野菜の成熟である、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
前記エチレン応答が花の老化である、請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
前記エチレン応答が器官脱離である、請求項１に記載の方法。
【請求項１２】
前記植物が収穫された果実である、請求項１に記載の方法。
【請求項１３】
前記植物が収穫された野菜である、請求項１に記載の方法。
【請求項１４】
切花に、寿命を延ばすのに有効な量の、式（１）により定義される化合物を適用することを含む、カットフルーツの寿命を延ばす方法。
【請求項１５】
前記ＣＰＡＳが、（ｉ）リチウム、ナトリウム、カリウム、アンモニウム、カルシウム、若しくは（ｉｉ）少なくとも１つの硫酸塩若しくはリン酸塩分子を含む正に帯電した対イオン、又はこれらの任意の組み合わせの群から選択される塩である、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記適用工程が、前記植物を、前記化合物を含む水溶液に接触させることにより実施される、請求項１４に記載の方法。
【請求項１７】
前記適用工程が、前記溶液に、前記果実の少なくとも一部を浸漬することにより実施される、請求項１４に記載の方法。
【請求項１８】
前記適用工程が、前記溶液を、前記果実の少なくとも一部に噴霧することにより実施される、請求項１４に記載の方法。
【請求項１９】
前記適用工程が、前記溶液を、前記果実の少なくとも一部にはけ塗りすることにより実施される、請求項１４に記載の方法。
【請求項２０】
前記適用工程が、前記溶液を、前記果実物の少なくとも一部にかける又は液滴を放出することにより実施される、請求項１４に記載の方法。
【請求項２１】
表面活性ＣＰＡＳ含有水溶液が得られるように、ＣＰＡＳを、有効な量の界面活性剤と混合する工程を更に含む、請求項１に記載の方法。
【請求項２２】
切花に、寿命を延ばすのに有効な量の、式（１）により定義される化合物を適用することを含む、切花の寿命を延ばす方法。
【請求項２３】
前記ＣＰＡＳが、（ｉ）リチウム、ナトリウム、カリウム、アンモニウム、カルシウム、若しくは（ｉｉ）少なくとも１つの硫酸塩若しくはリン酸塩分子を含む正に帯電した対イオン、又はこれらの組み合わせの群から選択される塩である、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
前記適用工程が、前記切花を、前記化合物を含む水溶液に接触させることにより実施される、請求項２２に記載の方法。
【請求項２５】
前記適用工程が、前記溶液に、前記切花の少なくとも一部を浸漬することにより実施される、請求項２２に記載の方法。
【請求項２６】
前記適用工程が、前記溶液を、前記切花の少なくとも一部に噴霧することにより実施される、請求項２２に記載の方法。
【請求項２７】
前記適用工程が、前記溶液を、前記切花の少なくとも一部にかける又は液滴を放出することにより実施される、請求項２２に記載の方法。
【請求項２８】
前記適用工程が、前記溶液を、前記切花の少なくとも一部にはけ塗りすることにより実施される、請求項２２に記載の方法。
【請求項２９】
式（１）により特徴付けられる、植物のエチレン応答に対する、水溶性シクロプロピル−１−エニル−プロパン酸ナトリウム塩（ＣＰＡＳ）阻害剤。
【請求項３０】
前記ＣＰＡＳが、（ｉ）リチウム、ナトリウム、カリウム、アンモニウム、カルシウム、若しくは（ｉｉ）少なくとも１つの硫酸塩若しくはリン酸塩分子を含む正に帯電した対イオン、又はこれらの組み合わせの群から選択される水溶性塩である、請求項２９に記載のシクロプロピル−１−エニル−プロパン酸塩（ＣＰＡＳ）。
【請求項３１】
浸漬する、はけ塗りする、かける若しくは液滴を放出する、噴霧する、又はこれらの任意の組み合わせの群から選択される、市販の手段により、植物の少なくとも一部に適用するよう適合した、周囲条件（温度及び圧力）で優位に液体形である、請求項３０に記載のＣＰＡＳ阻害剤。
【請求項３２】
有効な量まで、水溶液に溶解する、請求項３０に記載のＣＰＡＳ阻害剤。
【請求項３３】
前記ＣＰＡＳが、リチウム、ナトリウム、カリウム、カルシウム、若しくは、少なくとも１つの硫酸塩若しくはリン酸塩分子を含む他の正に帯電した対イオン、又はこれらの組み合わせの群から選択される塩である、請求項３０に記載のＣＰＡＳ阻害剤。
【請求項３４】
前記ＣＰＡＳが、表面活性ＣＰＡＳ含有水溶液が得られるよう提供される、請求項３０に記載のＣＰＡＳ阻害剤。
【請求項３５】
（ｉ）４−ブロモ−４−ペンテン酸又はその誘導体を調整する工程と、（ｉｉ）３−（１−シクロプロペニル）プロパン酸を生成する工程と、（ｉｉｉ）この酸を水溶性塩、特にそのナトリウム塩に変換する工程と、を含む、ＣＰＡＳの生成方法。
【請求項３６】
工程（ｉｉｉ）が、シクロプロピル−１−エニル−プロパン酸を、リチウム、ナトリウム、カリウム、アンモニウム、カルシウムの群から選択される正に帯電した対イオン、若しくは少なくとも１つの硫酸塩若しくはリン酸塩分子を含む正に帯電した対イオン、又はこれらの組み合わせを含む塩に変換する工程である、請求項３４に記載の方法。
【請求項１】
植物の少なくとも一部に、エチレン応答を阻害するのに有効な量の、式（１）：
【化１】
により定義される、シクロプロピル−１−エニル−プロパン酸塩（ＣＰＡＳ）を適用することを含む、植物のエチレン応答を阻害する方法。
【請求項２】
前記ＣＰＡＳが、（ｉ）リチウム、ナトリウム、カリウム、アンモニウム、カルシウム、若しくは（ｉｉ）少なくとも１つの硫酸塩若しくはリン酸塩分子を含む正に帯電した対イオン、又はこれらの任意の組み合わせの群から選択される水溶性塩である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記適用工程が、前記化合物を、前記化合物を含む水溶液に接触させることにより実施される、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記適用工程が、前記溶液に、前記植物の少なくとも一部を浸漬することにより実施される、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
前記適用工程が、前記溶液を、前記植物の少なくとも一部に噴霧することにより実施される、請求項３に記載の方法。
【請求項６】
前記適用工程が、前記溶液を、前記植物の少なくとも一部にかける又は液滴を放出することにより実施される、請求項３に記載の方法。
【請求項７】
前記適用工程が、前記溶液を、前記植物の少なくとも一部にはけ塗りすることにより実施される、請求項３に記載の方法。
【請求項８】
前記エチレン応答が果実の成熟である、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
前記エチレン応答が野菜の成熟である、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
前記エチレン応答が花の老化である、請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
前記エチレン応答が器官脱離である、請求項１に記載の方法。
【請求項１２】
前記植物が収穫された果実である、請求項１に記載の方法。
【請求項１３】
前記植物が収穫された野菜である、請求項１に記載の方法。
【請求項１４】
切花に、寿命を延ばすのに有効な量の、式（１）により定義される化合物を適用することを含む、カットフルーツの寿命を延ばす方法。
【請求項１５】
前記ＣＰＡＳが、（ｉ）リチウム、ナトリウム、カリウム、アンモニウム、カルシウム、若しくは（ｉｉ）少なくとも１つの硫酸塩若しくはリン酸塩分子を含む正に帯電した対イオン、又はこれらの任意の組み合わせの群から選択される塩である、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記適用工程が、前記植物を、前記化合物を含む水溶液に接触させることにより実施される、請求項１４に記載の方法。
【請求項１７】
前記適用工程が、前記溶液に、前記果実の少なくとも一部を浸漬することにより実施される、請求項１４に記載の方法。
【請求項１８】
前記適用工程が、前記溶液を、前記果実の少なくとも一部に噴霧することにより実施される、請求項１４に記載の方法。
【請求項１９】
前記適用工程が、前記溶液を、前記果実の少なくとも一部にはけ塗りすることにより実施される、請求項１４に記載の方法。
【請求項２０】
前記適用工程が、前記溶液を、前記果実物の少なくとも一部にかける又は液滴を放出することにより実施される、請求項１４に記載の方法。
【請求項２１】
表面活性ＣＰＡＳ含有水溶液が得られるように、ＣＰＡＳを、有効な量の界面活性剤と混合する工程を更に含む、請求項１に記載の方法。
【請求項２２】
切花に、寿命を延ばすのに有効な量の、式（１）により定義される化合物を適用することを含む、切花の寿命を延ばす方法。
【請求項２３】
前記ＣＰＡＳが、（ｉ）リチウム、ナトリウム、カリウム、アンモニウム、カルシウム、若しくは（ｉｉ）少なくとも１つの硫酸塩若しくはリン酸塩分子を含む正に帯電した対イオン、又はこれらの組み合わせの群から選択される塩である、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
前記適用工程が、前記切花を、前記化合物を含む水溶液に接触させることにより実施される、請求項２２に記載の方法。
【請求項２５】
前記適用工程が、前記溶液に、前記切花の少なくとも一部を浸漬することにより実施される、請求項２２に記載の方法。
【請求項２６】
前記適用工程が、前記溶液を、前記切花の少なくとも一部に噴霧することにより実施される、請求項２２に記載の方法。
【請求項２７】
前記適用工程が、前記溶液を、前記切花の少なくとも一部にかける又は液滴を放出することにより実施される、請求項２２に記載の方法。
【請求項２８】
前記適用工程が、前記溶液を、前記切花の少なくとも一部にはけ塗りすることにより実施される、請求項２２に記載の方法。
【請求項２９】
式（１）により特徴付けられる、植物のエチレン応答に対する、水溶性シクロプロピル−１−エニル−プロパン酸ナトリウム塩（ＣＰＡＳ）阻害剤。
【請求項３０】
前記ＣＰＡＳが、（ｉ）リチウム、ナトリウム、カリウム、アンモニウム、カルシウム、若しくは（ｉｉ）少なくとも１つの硫酸塩若しくはリン酸塩分子を含む正に帯電した対イオン、又はこれらの組み合わせの群から選択される水溶性塩である、請求項２９に記載のシクロプロピル−１−エニル−プロパン酸塩（ＣＰＡＳ）。
【請求項３１】
浸漬する、はけ塗りする、かける若しくは液滴を放出する、噴霧する、又はこれらの任意の組み合わせの群から選択される、市販の手段により、植物の少なくとも一部に適用するよう適合した、周囲条件（温度及び圧力）で優位に液体形である、請求項３０に記載のＣＰＡＳ阻害剤。
【請求項３２】
有効な量まで、水溶液に溶解する、請求項３０に記載のＣＰＡＳ阻害剤。
【請求項３３】
前記ＣＰＡＳが、リチウム、ナトリウム、カリウム、カルシウム、若しくは、少なくとも１つの硫酸塩若しくはリン酸塩分子を含む他の正に帯電した対イオン、又はこれらの組み合わせの群から選択される塩である、請求項３０に記載のＣＰＡＳ阻害剤。
【請求項３４】
前記ＣＰＡＳが、表面活性ＣＰＡＳ含有水溶液が得られるよう提供される、請求項３０に記載のＣＰＡＳ阻害剤。
【請求項３５】
（ｉ）４−ブロモ−４−ペンテン酸又はその誘導体を調整する工程と、（ｉｉ）３−（１−シクロプロペニル）プロパン酸を生成する工程と、（ｉｉｉ）この酸を水溶性塩、特にそのナトリウム塩に変換する工程と、を含む、ＣＰＡＳの生成方法。
【請求項３６】
工程（ｉｉｉ）が、シクロプロピル−１−エニル−プロパン酸を、リチウム、ナトリウム、カリウム、アンモニウム、カルシウムの群から選択される正に帯電した対イオン、若しくは少なくとも１つの硫酸塩若しくはリン酸塩分子を含む正に帯電した対イオン、又はこれらの組み合わせを含む塩に変換する工程である、請求項３４に記載の方法。
【図１】
【図２Ａ】
【図２Ｂ】
【図３】
【図４Ａ】
【図４Ｂ】
【図５】
【図６Ａ】
【図６Ｂ】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図１３】
【図１４】
【図１５】
【図１６Ａ】
【図１６Ｂ】
【図１７】
【図１８】
【図１９】
【図２０】
【図２１】
【図２２】
【図２３】
【図２４】
【図２５】
【図２Ａ】
【図２Ｂ】
【図３】
【図４Ａ】
【図４Ｂ】
【図５】
【図６Ａ】
【図６Ｂ】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図１３】
【図１４】
【図１５】
【図１６Ａ】
【図１６Ｂ】
【図１７】
【図１８】
【図１９】
【図２０】
【図２１】
【図２２】
【図２３】
【図２４】
【図２５】
【公表番号】特表２０１０−５３３７０６（Ｐ２０１０−５３３７０６Ａ）
【公表日】平成２２年１０月２８日（２０１０．１０．２８）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１０−５１６６５２（Ｐ２０１０−５１６６５２）
【出願日】平成２０年７月１７日（２００８．７．１７）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＩＬ２００８／０００９９５
【国際公開番号】ＷＯ２００９／０１０９８１
【国際公開日】平成２１年１月２２日（２００９．１．２２）
【出願人】（５１００１６１８４）イッサム リサーチ デベロップメント カンパニー オブ ザ ヘブリュー ユニバーシティー オブ エルサレム リミテッド (1)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２２年１０月２８日（２０１０．１０．２８）
【国際特許分類】
【出願日】平成２０年７月１７日（２００８．７．１７）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＩＬ２００８／０００９９５
【国際公開番号】ＷＯ２００９／０１０９８１
【国際公開日】平成２１年１月２２日（２００９．１．２２）
【出願人】（５１００１６１８４）イッサム リサーチ デベロップメント カンパニー オブ ザ ヘブリュー ユニバーシティー オブ エルサレム リミテッド (1)
【Ｆターム（参考）】
[ Back to top ]