ＩＧＦ−１活性を調節するペプチドおよびその応用
本発明は、ＩＧＦ−１の活性を調節できるペプチド、該ペプチドを含有する医薬組成物、および、医薬およびインビトロの細胞増殖の調節用の物質としてのそれらの応用に関する。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ＩＧＦ−１のモジュレーターであるペプチドに関する。
【背景技術】
【０００２】
技術的背景：
無制御の細胞増殖として現れる癌の過程は、しばしば、全く同じ細胞における増殖因子および／または増殖因子受容体の過剰発現の反映である（Moyse et al. 1985, Cassoni et al. 2006, Hanahan et al. 2000）。
【０００３】
ネットワークで作用する多数の因子が、細胞周期進行および細胞増殖を担う。特に、「増殖因子」と呼ばれるこれらの因子の一群は、Ｓ期への移行、そして、最終的には細胞分裂を刺激できるペプチドに代表される。これは、ＩＧＦ（インシュリン様増殖因子）にも該当する（Pardee 1989, Cross et al. 1991)。
【０００４】
ＩＧＦ−１は、特に、成長ホルモン（ＧＨ）による刺激の後に合成され、内分泌ホルモンとして作用し、成長ホルモンそのものとみなされることもある（Laron, 2001）。また、傍分泌／自己分泌メカニズムに従って作用し、このホルモンは、それが成長を刺激する小児で重要な役割を果たし、一方、成人では同化作用を高める。
【０００５】
このホルモンの特異的受容体（ＩＧＦ−１Ｒ）は、多数の異なる細胞タイプで発現され、従って、いくつかの生物の組織は、ＩＧＦ−１の作用に依存する：肝臓、腎臓、肺、筋肉、骨組織および軟骨、並びに、神経組織が挙げられる。さらに、ＩＧＦ−１は、低い親和性でインシュリン受容体に結合できるのでインシュリンに似た作用を有し、神経細胞の発生を調節し、ＤＮＡ合成を調節する。
【０００６】
ＩＧＦ−１の受容体への結合は、細胞の成長および増殖を刺激する細胞内シグナルを誘起する（Perona, 2006）。この活性のために、ＩＧＦ−１は、強力なアポトーシス（プログラムされた細胞死）阻害因子であり、かつ、タンパク質合成の活性化因子である（Yanochko et al. 2006, Colon et al. 2007, Inoue et al. 2005）。最後に、ある種の条件では、ＩＧＦ−１は、アポトーシス誘導因子および細胞増殖刺激因子のデュアルの役割を有し得る（Fu et al. 2007, Rabinovsky 2004 a）。
【０００７】
ＩＧＦのシグナル伝達網は、腫瘍進行および転移に重要な役割を有し（Hofmann et al. 2005）、多くの実験的研究並びに疫学的研究は、高レベルのＩＧＦ−１および／またはその受容体と、癌性増殖のリスクの増加またはその確立自体との、有意な相関を立証している（Vella et al. 2001, Talapatra et al. 2001, Kucab et al. 2003, Kambhampati et al. 2005, Bjorndahl et al. 2005, Gennigens et al. 2006, Velcheti et al. 2006, Yanochko et al. 2006, Sisci et al. 2007, Samani et al. 2007）。一般に、発癌における、特に腫瘍進行の刺激におけるＧＨ／ＩＧＦ−１軸の役割は、従って、多くの疫学的研究、および、ＩＧＦ−１の先天的欠損が癌の発生に対して防御すると思われることを示す最近の研究に示される通り、十分に確立されている（Sheva et al. 2007）。
【０００８】
ＩＧＦ活性を阻害する分子の臨床研究は、様々なタイプの癌におけるそれらの使用の利点、化学療法および照射と相乗作用するそれらの治療効果を示している（Min et al. 2005, Carmiraud et al. 2005, Chinnavian et al. 2006, Wu et al. 2006, Deutsch et al. 2005, Warshamana-Greene et al. 2005）。ＩＧＦ−１は、成長ホルモンのメディエーターであるので、その産生は、上流の成長ホルモン（ＧＨ）で、ソマトスタチンにより遅延または阻害できる。
【０００９】
視床下部で分泌されるソマトスタチン（成長ホルモン産生細胞放出阻害因子、または、ＳＲＩＦ）は、天然のＧＨＲＨ（ＧＨ合成を刺激する神経ペプチド）のアンタゴニストである。特に、ＧＨを阻害することにより、ＳＲＩＦはＩＧＦ−１合成の阻害作用を有する。しかしながら、ＳＲＩＦは末梢性の作用も有し、特に、例えば、胃腸および膵臓のホルモンの分泌を阻害する消化ホルモンとして作用する。
【００１０】
ＳＲＩＦおよびその合成類似体が、直接的または間接的メカニズムにより細胞増殖を阻害し、細胞死を引き起こす能力は、ヒトの医療において、様々なタイプの癌のいくつかの治療プロトコールで利用されている。さらに、ＳＲＩＦは、血管新生を阻害でき、それは、腫瘍成長の間接的制御のための臨床的実務において潜在的に興味深いものである（Ferjoux et al. 2000）。実際に、腫瘍は栄養を新血管形成（血管新生）により得、細胞増殖を阻害するＳＲＩＦの類似体は、血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）などの増殖因子の分泌に対する間接的阻害作用も有し、一方で、単球の走化性を低下させる（Dasgupta 2004, Garcia de la Torre et al. 2002）。
【００１１】
しかしながら、ＳＲＩＦの類似体の使用は、ＳＲＩＦ受容体を発現する癌でのみ可能である。従って、臨床的実務で使用されるＳＲＩＦ類似体の効力は、神経内分泌、胃腸膵、脳、乳房、前立腺および肺の腫瘍の処置で明示的に立証されたのみである（Ferjoux et al. 2000）。さらに、ＳＲＩＦ受容体の発現のレベルおよびプロフィールは、癌腫ごとに非常に異なることに留意すべきである。
【００１２】
「ＩＧＦ系」の阻害剤であるソマトスタチン類似分子（Pawlikowski M. et al., 2004）は、既に提唱された。これらは、特に、ＢＩＭ２３Ａ３８７、オクトレオチドおよびランレオチド（２個の８−ｍｅｒペプチド）である。これらの分子は、受容体またはそのリガンドの発現を調節し、様々なタイプの癌および先端巨大症の処置において興味深い候補である。他の例として、二重特異性合成リガンドＢＩＭ−２３２４４（Rani C., 2004, Rani C., 2006, Pandit A., 2008）は、成長ホルモン分泌腺腫における成長ホルモンの分泌を阻害できる。
【発明の概要】
【００１３】
発明の概要：
本発明者は、この度、ＩＧＦ−１の作用を調節するための新規のペプチドを提案する。これらのペプチドは、以下の配列（Ｉ）の２０個ないし２４個のアミノ酸を含む：
Ｐａ−Ｘ１−Ｐｈｅ−Ｔｒｐ−Ｘ２−Ｘ３−Ｐｂ（Ｉ）（配列番号１）
ここで：
−Ｐａは、
Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｙｓ−Ａｌａ（配列番号３）
Ａｓｎ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｙｓ−Ａｌａ（配列番号４）
Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｙｓ−Ａｌａ（配列番号５）
の配列から選択される１０個ないし１２個のアミノ酸を含む配列を表し、
−Ｘ１は、リジン、アルギニンまたはヒスチジン残基であり；
−Ｘ２は、スレオニンまたはリジン残基であり；
−Ｘ３は、アスパラギン酸またはグルタミン酸残基であり；そして、
−Ｐｂは、
Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ（配列番号６）
Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｌｅｕ（配列番号７）
Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ（配列番号８）
の配列から選択される５個ないし７個のアミノ酸を含む配列を表す。
【００１４】
本発明は、また、１またはそれ以上の化学修飾により配列（Ｉ）から誘導されるタンパク質分解に抵抗性のペプチド、または、１またはそれ以上の保存的置換により配列（Ｉ）から誘導される実質的に相同のペプチドに関する。
【００１５】
これらのペプチドは、インビトロで細胞増殖を調節するのに、好ましくは刺激するのに有用である。
本発明は、また、１種またはそれ以上の生理的に許容し得る補助剤と共に少なくとも１種のそのようなペプチドを有効成分として含む医薬組成物に関する。
本発明は、また、医薬品として使用するための、本明細書で定義するペプチドに関する。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
発明の詳細な説明：
定義：
用語「調節」は、本発明のペプチドのＩＧＦ−１機能の阻害および／または活性化の活性を表す。
「阻害」は、ＩＧＦ−１の活性、活性化、機能および／または発現を低減する阻害および／または下方調節を含む、ＩＧＦ−１合成および／またはＩＧＦ−１Ｒの発現に対する阻害作用を意味する。「活性化」は、ＩＧＦ−１の活性、機能および／または発現の活性化および／または上方調節を含む、ＩＧＦ−１合成および／またはＩＧＦ−１Ｒの発現を増強、刺激または活性化するいかなる作用も意味する。ペプチドの阻害および／または活性化作用は、ＩＧＦ−１および／またはＩＧＦ−１Ｒの発現を測定することにより調べる。ＩＧＦ−１および／またはＩＧＦ−１Ｒを発現する細胞培養を利用して、本発明のペプチドにより誘導される阻害および／または活性化を調べることも可能である。
【００１７】
用語「患者」は、ＩＧＦ−１合成および／またはＩＧＦ−１受容体発現を調節する処置を必要としているオス、メス、成体および／または子供を含む、任意のヒトまたは非ヒト動物、好ましくは哺乳動物を表す。
【００１８】
用語「処置」または「治療」は、疾患の治癒的処置および予防的処置の両方を含む。治癒的処置は、治癒をもたらす処置、または、疾患の症状またはそれが引き起こす苦痛を軽減、改善および／または除去、低減および／または安定化する処置と定義される。予防的処置は、疾患の予防をもたらす処置、および、疾患の発生またはその発症リスクを低減および／または遅延させる処置の両方を含む。
【００１９】
「保存的置換」という表現は、ペプチドの全般的構造または機能の変化を伴わない、アミノ酸残基の他のものとの任意の置換を表す。保存的置換には、類似の特性を有するアミノ酸による置換（例えば、形状、極性、水素結合能、酸性度、塩基性度、疎水性など）が含まれるが、これらに限定されない。類似の特性を有するアミノ酸は、先行技術で周知である。例えば、アルギニン、ヒスチジンおよびリジンは、親水性塩基性アミノ酸であり、交換可能であり得る。同様に、疎水性アミノ酸のイソロイシンは、ロイシン、メチオニンまたはバリンで置き換えることができる。相互に置換できる親水性中性アミノ酸には、アスパラギン、グルタミン、セリンおよびスレオニンが含まれる。「置換された」および「修飾された」により、本発明は、天然アミノ酸に対して変更または修飾されたアミノ酸を意味する。「実質的に相同な配列」という表現は、１個またはそれ以上の保存的置換を有する任意の配列を含む。
【００２０】
従って、本発明に関して、保存的置換は、あるアミノ酸の、同様の特性を有する他のものによる置換として、先行技術で知られている。保存的置換の例を、下表１に示す：
表１. 保存的置換Ｉ
【表１】
【００２１】
Lehninger, 1975 に記載の通り、保存的アミノ酸は、下表２に示す通りにグループ化できる：
表２. 保存的置換ＩＩ
【表２】
【００２２】
また他の保存的置換の選択肢を下表３に示す：
表３. 保存的置換ＩＩＩ
【表３】
【００２３】
ペプチドの製造：
本発明によるペプチドは、当分野で使用される全ての標準的なペプチド合成の技法、即ち、特に、化学合成または遺伝子組換えにより製造できる。好ましい実施態様では、ペプチドは、化学合成により得られる。より好ましくは、ペプチドは、必要な順序でのアミノ酸残基の連続的縮合により、または、以前に形成され既にいくつかのアミノ酸を含む断片上の残基を適切な順序で縮合することにより、または、以前に製造されたいくつかの断片の縮合により得られ、事前に、縮合中にペプチド結合に使用されるアミンおよびカルボキシル基を除くアミノ酸残基の全ての反応性官能基を保護するように注意し、特に、Merrifield の固相合成法による。
【００２４】
ペプチドの特性：
本発明のペプチドは、ＩＧＦ−１の作用を調節できる。これらのペプチドは、以下の配列（Ｉ）：
Ｐａ−Ｘ１−Ｐｈｅ−Ｔｒｐ−Ｘ２−Ｘ３−Ｐｂ（Ｉ）（配列番号１）
｛ここで：
−Ｐａは、
Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｙｓ−Ａｌａ（配列番号３）
Ａｓｎ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｙｓ−Ａｌａ（配列番号４）
Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｙｓ−Ａｌａ（配列番号５）
の配列から選択される１０個ないし１２個のアミノ酸を含む配列を表し、
−Ｘ１は、リジン、アルギニンまたはヒスチジン残基であり；
−Ｘ２は、スレオニンまたはリジン残基であり；
−Ｘ３は、アスパラギン酸またはグルタミン酸残基であり；そして、
−Ｐｂは、
Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ（配列番号６）
Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｌｅｕ（配列番号７）
Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ（配列番号８）
の配列から選択される５個ないし７個のアミノ酸を含む配列を表す｝
の２０ないし２４個のアミノ酸を含むか、またはこれらからなる。
【００２５】
本発明は、また、１またはそれ以上の化学修飾により配列（Ｉ）から誘導されるタンパク質分解に抵抗性のペプチド、または、１またはそれ以上の保存的置換により配列（Ｉ）から誘導される実質的に相同のペプチドを含む。
【００２６】
好ましくは、Ｘ１はリジン残基であり、Ｘ２はスレオニン残基であり、Ｘ３はアスパラギン酸残基である。
好ましい実施態様では、ペプチドは、以下のアミノ酸配列を含む：
ＳＮＦＧＳＲＫＦＳＹＫＡＫＦＷＴＤＶＴＴＳＥＬＧ（配列番号２）。
【００２７】
好ましくは、Ｎおよび／またはＣ末端の位置は、タンパク質分解から保護されている。例えば、Ｎ末端はアセチルの形態であり得、かつ／または、Ｃ末端はアミド基の形態であり得る。本発明のペプチドに耐性を与えるいかなる修飾も企図されており、例えば、少なくとも１個のペプチド結合が修飾され、（ＣＨ２ＮＨ）結合、（ＮＨＣＯ）結合、（ＣＨ２−Ｏ）結合、（ＣＨ２−Ｓ）結合、（ＣＨ２ＣＨ２）結合、（ＣＯ−ＣＨ２）結合、（ＣＨＯＨ−ＣＨ２）結合、（Ｎ−Ｎ）結合、アルケン−Ｅ結合または−ＣＨ＝ＣＨ結合で置き換えられているペプチドである。
タンパク質分解に耐性であるために化学的に修飾された全てのペプチドは、本発明に含まれる。
例えば、Ｐ７０と呼ばれる上記のペプチドは、アセチル−ＳＮＦＧＳＲＫＦＳＹＫＡＫＦＷＴＤＶＴＴＳＥＬＧ−アミドの形態であり得る。
【００２８】
本発明は、また、１またはそれ以上の保存的置換により配列（Ｉ）から誘導される実質的に相同のペプチドを包含する。２個のアミノ酸配列は、１個またはそれ以上のアミノ酸残基が、生物学的観点で類似する１個またはそれ以上の残基で置換されているとき、または、８０％を超えるアミノ酸が同一であるとき、または、好ましくは、９０％を超える残基が同一（機能的に同一）であるとき、「実質的に相同」または「実質的に類似」と呼ばれる。類似または相同の配列は、好ましくは、例えば、GCG "Pileup" プログラム (Genetics Computer Group, software manual for the GCG Package, Version 7, Madison, Wisconsin) または当業者に知られている任意の他のプログラム (BLAST、FASTA など) を使用する配列比較により同定される。
【００２９】
本発明によると、ペプチドの全てのアミノ酸残基は、Ｌ型（左旋性（levogyral））に属する。しかしながら、配列（Ｉ）のアミノ酸のいずれでも、Ｄ型（右旋性（dextrogyral））をＬ体に置き換えることも包含する。特に、ペプチドがペプチダーゼに対してより耐性であるために、いくつかのアミノ酸（配列（Ｉ）の位置１１ないし１８に位置するアミノ酸、特に位置１５のトリプトファン）がＤ型に属することが包含される。
【００３０】
有利には、血漿中の半減期を延ばすために、そして、使用する治療用量を減らすために、ペプチドは、それらのＣ末端またはリジン残基により、１個またはそれ以上のポリエチレングリコール（ＰＥＧ）分子、特に１５００または４０００ＭＷのＰＥＧに共有結合している。ＰＥＧの結合は、Abuchowski et al. (J. Biol. Chenu., 1977,252 : 3582-3586）に記載の通りである。本発明のさらなる態様では、ペプチドは、ミクロスフェアを形成する生物分解性ポリマーまたはコポリマー、例えば、ポリ（Ｄ,Ｌ−ラクチド−コ−グリコリド）（ＰＬＧＡ）に含まれる（ＵＳ２００７／０１８４０１５、SoonKap Hahn et alに記載の通り）。
【００３１】
本発明のペプチドは、内在性（天然）ソマトスタチンまたは当分野で既知のペプチドと異なり、疎水性媒体中と同様に生理的媒体中で安定であるβ−ヘアピン分子構造を示す。有利なことに、媒体のいかなる条件も、このペプチド構造のαへリックスへの遷移を誘導できない。
【００３２】
さらに、ヘアピン構造は、ペプチド配列の折り畳みにより形成される折り目において、ＳＲＩＦにおいて受容体結合に主要なものと認識されている４個の連続するアミノ酸（Ｐｈｅ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ）のうち、２個のアミノ酸（Ｐｈｅ−Ｔｒｐ）を露出できる。この仮説に縛られるわけではないが、本発明者は、本発明のペプチド配列において、位置１３のアミノ酸と位置１７のアミノ酸との間の静電気的引力が、「折れ曲がり」型の構造を可能にし、ペプチド全体にβ型の構造をもたせると考える（ＶＩＩＩβ型構造）。
【００３３】
本発明で有用なペプチドは、二相性作用を示す。従って、使用する濃度に依存して、ペプチドは、ＩＧＦ−１の産生およびその受容体（ＩＧＦ−１Ｒ）の発現を活性化または阻害できる。インビトロで、これらの作用は、細胞増殖の刺激または阻害を導く。
【００３４】
用量依存的なアゴニストまたはアンタゴニスト作用を示す生物学的分子の二相性作用は、他の分子について、そして様々な生物学的システムにおいて、周知である（酵素 [Gamage et al. 2003, He et al. 2003]、イオンチャネルおよび共輸送体（co-carriers）[Arias et al. 1996, Lombardi et al. 2001, Borst et al. 2002, Incerpi et al. 2003]、輸送体[Henry et al. 2002]、チロシンキナーゼ受容体 [Leiser et al. 1986, Schlessinger 1988]、Ｇタンパク質共役型受容体（ＧＰＣＲ）、神経伝達物質、ホルモンおよびケモカイン [Winding et al. 1993, Chidiac et al. 1996, Bronnikov et al. 1999, Cuthbert 2003, Hornigold et al. 2003, Griffin et al. 2003, Fuh et al. 1992, Talmadge 1998]、特に、ＧｎＲＨおよびそのアナログ [Browning J.Y et al.1983, Ho M.N. et al.1997, Barbarino A et al.1982, Imai, A et al.1993, Kang, Sung K et al.2000 et 2001, Gruendker C et al. 2003, Leung P.C.K et al. 2003, Bhasin S. et al. 2008]に関して）。
【００３５】
本明細書に記載のペプチドは、インビトロで、例えば、角膜実質細胞、軟骨細胞または肝実質細胞培養で、細胞増殖を刺激するのに、または、医学的興味のある組織の調製に有用である。
【００３６】
これらの優れた特徴で、本明細書に記載のペプチドは、様々な適用に、インビトロおよびインビボで、特にヒトまたは獣医学において、有用である。
【００３７】
本発明のペプチドは、
−ＩＧＦ−１合成および／またはＩＧＦ−１受容体発現を刺激するのに；
−または、ＩＧＦ−１合成および／またはＩＧＦ−１受容体発現を阻害するのに、
適する用量で使用できる。
【００３８】
ＩＧＦ−１の合成および／またはその受容体の発現の刺激は、様々な場合で望ましい：
−ペプチドを成長ホルモン代用薬として使用する場合。これらのペプチドは、先天性または後天性の内在性成長ホルモンまたはＩＧＦ−１の完全または部分的欠乏に伴う全ての治療適応症において、特に小児および成人の発育不全の処置において、特に有用である。他の治療的適用には、例えば、ターナー症候群、プラダー・ウィリー症候群、慢性腎不全が含まれる。本発明のペプチドは、後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）または癌に伴う悪液性症状などの、筋肉量の増加が必要とされ得る障害に、特に有用である。ペプチドは、また、獣医学の分野でも、特にウシ、ブタ、ヒツジ、ウマなどの飼育において、有用である。
−肥満症またはＩＩ型糖尿病などのメタボリックシンドロームの治療的処置において（特に、血液の脂質率を下げ、グルコース代謝を改善することによる）、そして、特に高齢または免疫抑制の対象において、免疫防御を刺激または回復するために、または、自己免疫疾患（Ｉ型糖尿病など）および／または神経変性疾患（多発性硬化症など）の処置のために。
−神経細胞の生存（抗アポトーシス作用）、分化または神経の発達、運動または感覚神経の再生、シナプス形成および再ミエリン化（remyelinization）を刺激するために。従って、ＩＧＦ−１の産生を刺激することにより、本発明のペプチドは、神経形成を刺激するための神経栄養性物質として、かつ／または、神経保護物質として（特に虚血性発作において）使用される。
【００３９】
ＩＧＦ−１合成および／またはその受容体の発現の阻害は、以下の場合で特に望ましい：
−オクトレオチドおよびランレオチドが適用される障害のように、これらのペプチドをソマトスタチンの代替薬として使用する場合。所望の生物学的作用は、例えば、下垂体のＧＨ分泌の阻害、胆汁分泌の阻害、膵臓および胃腸の外分泌および／または内分泌の阻害である。例えば、ソマトスタチンの代替薬として、ペプチドをアルツハイマー病の処置に使用する。
−先端巨大症の処置に、特に外科手術および／または放射線療法および他の薬物療法に不十分な応答をした患者において、または、これらの治療が適切ではない患者のために。処置の目標は、血清ＩＧＦ−１レベルを正常化し、臨床徴候および症状を改善することである。
−癌の処置において、限定されるわけではないが、特に、乳癌、膵臓癌、前立腺癌、下垂体腺腫または消化器系内分泌腺腫瘍の処置に。さらに、ペプチドを転移の処置に使用し得る（胃腸の転移を含む）。下痢および紅潮などの消化器系内分泌腺腫瘍に伴う症状を改善するための、阻害的用量での本発明のペプチドの使用も包含される。
【００４０】
医薬組成物：
このペプチドは、全身的（非経腸、静脈内…）、経口、直腸、局所、経皮、皮下、肺内（Agu et al, 2001 参照）および鼻腔内経路を含む任意の好都合な経路により投与し得る。好ましい実施態様では、ペプチドを鼻腔内経路により投与する。
【００４１】
インビトロで、ＩＧＦ−１合成および／またはＩＧＦ−１受容体発現を刺激するのに適する用量の例は約１０−７Ｍの濃度の用量であり、ＩＧＦ−１合成および／またはＩＧＦ−１受容体を阻害するのに適する用量の例は、少なくとも１０−６Ｍの濃度の用量である。
対応するインビボでの用量は、所望の効果が達成されるように処置する症状に関して、当業者により選択される。
【００４２】
ＩＧＦ−１合成および／またはＩＧＦ−１受容体の発現をインビボで刺激するのに有効な容量は、典型的には、少なくとも１日１００μｇ、好ましくは約１０μｇないし１００μｇの濃度を含む。ＩＧＦ−１合成および／またはＩＧＦ−１受容体の発現をインビボで阻害するのに有効な用量は、典型的には、少なくとも１日３００μｇ、好ましくは約３００μｇないし３ｍｇの濃度を含む。好ましくは、有効な一日量は、約１ｍｇないし３ｍｇ、さらにより好ましくは、約２ｍｇないし３ｍｇである。鼻腔内または肺内経路による投与には、または、徐放性製剤を使用する場合には、必要とされる刺激および／または阻害の用量は、１０ないし１００倍低いことができる。これらの投与は、長期間、好ましくは３ないし６ヶ月の期間にわたり、繰り返すことができる。
【００４３】
本発明のさらなる態様と利点を以下の実験の部に開示し、本発明によるペプチドの生物学的活性を立証する。
以下の実施例および図で使用する本発明のペプチド配列（Ｐ７０と名付けられた）は、以下のアミノ酸配列を含む：
アセチル−ＳＮＦＧＳＲＫＦＳＹＫＡＫＦＷＴＤＶＴＴＳＥＬＧ−アミド（配列番号２）
これらの実施例は、例示と認識されるべきものであり、本願の範囲を限定しない。
【図面の簡単な説明】
【００４４】
図の説明文
【図１】図１は、［Ｈ３］チミジンのＤＮＡへの取り込みに対するＰ７０の効果を示すグラフである。
【図２】図２は、吸光度測定により評価したＩＧＦ−１Ｒの発現に対するＰ７０の効果を示すグラフである。
【図３】図３は、免疫組織化学による、初代新生児マウス下顎軟骨細胞培養におけるＩＧＦ−１Ｒ発現に対するＰ７０の効果を示す。
【図４】図４は、免疫組織化学による、初代新生児マウス下顎軟骨細胞培養におけるＩＧＦ−１合成に対するＰ７０の効果を示す。
【図５】図５は、免疫組織化学による、初代新生児マウス下顎軟骨細胞培養におけるＩＩ型コラーゲンの産生に対するＰ７０の効果を示す。
【図６】図６は、初代新生児マウス下顎軟骨細胞培養における軟骨形成プロセスに対するＰ７０の効果を示す。矢印は、軟骨形成小結節を示す。
【実施例】
【００４５】
実施例：
実施例１：細胞増殖に対する本発明のペプチドの効果
本発明のペプチドの生物学的効果を、新生児マウス下顎の軟骨細胞初代培養モデルで立証する。
ペプチドが細胞増殖を誘導する能力を評価するために、本発明者は、Kurz et al., 1997 の方法に従い、ＤＮＡ複製中の［Ｈ３］チミジンの取り込みを示す試験を実施した。この試験を、本発明者が使用するモデル、即ち、初代マウス胚性軟骨細胞培養に適合させた。
【００４６】
マウス下顎骨関節突起（ＭＣＤＣ）の分離により得た軟骨細胞を、軟骨形成させる培養培地で培養し、特に、５ｘ１０５細胞／ｍｌを、１μＣｉ［３Ｈ］−チミジン／培地１ｍｌ（Amersham、コードＴＲＡ１２０、原液１ｍＣｉ／ｍｌ、比活性５Ｃｉ／ｍｍｏｌ）と共に、３時間、３７℃で、ＤＭＥＭ培地（ダルベッコ変法イーグル培地）中で、ウシ胎児血清（ＦＣＳ）なしで、しかし、アスコルビン酸１００μｇ／ｍｌ、塩化カルシウム１ｍｍｏｌ／Ｌ、β−グリセロリン酸１０ｍｍｏｌ／Ｌおよび抗生物質を添加して、インキュベートした。［３Ｈ］−チミジン５μｌを添加した同じ培地を２分間添加し、負の対照として使用した。上清を除去し、ｐＨ７.０で緩衝化した塩水（ＰＢＳ）で細胞を２回洗浄し、細胞を２回（５分間）メタノールで洗浄した。次いで、細胞を１０％トリクロロ酢酸（ＴＣＡ）の冷たい溶液で３回洗浄した。細胞をＤＤＷで２回洗浄した後、細胞を０.３Ｍ ＮａＯＨ２００μｌに１５分間混ぜた。次いで、細胞を０.３Ｍ ＨＣｌ２００μｌを含む中和したシンチレーション液３ｍｌに移す。最後に、細胞を含むサンプルをボルテックスで混合し、ベータカウンターに１分間置いた。
【００４７】
得られた結果（図１）は、ペプチドＰ７０が、軟骨細胞の増殖に対して、最高濃度（１０−６Ｍ）で、非処理対照（ペプチドまたは他の増殖因子なしでインキュベートした軟骨細胞）より５３％高い刺激効果を有するが、この刺激効果は低濃度（１０−７Ｍ）では観察されないことを示す。
【００４８】
実施例２：ＩＧＦ１合成およびＩＧＦ１受容体発現に対する本発明のペプチドの効果
本発明者は、培養物の軟骨細胞を利用して、ＩＧＦ−１合成およびその受容体（ＩＧＦ−１Ｒ）の発現に対するＰ７０の効果を調べた。本発明者は、軟骨細胞を低濃度のペプチド（１０−７Ｍ）とインキュベートすると、ペプチドがＩＧＦ−１産生およびその受容体（ＩＧＦ−１Ｒ）の発現に重要な刺激効果を有することを示す（図２）。
逆に、高濃度（１０−６Ｍ）では、ペプチドは実質的にＩＧＦ−１およびその受容体の産生を阻害する。
【００４９】
５日目の初代軟骨細胞培養に免疫組織化学（ＩＨＣ）を使用して（図３）、本発明者は、また、ペプチドＰ７０がＩＧＦ−１受容体発現を１０−６Ｍで阻害し（高濃度のペプチドで３６.８％阻害）、一方、それは同じ受容体の発現を１０−７Ｍで刺激する（低濃度のペプチドで２３.８％上昇）ことを示す。さらに（図４）、Ｐ７０は、ＩＧＦ−１合成を１０−６Ｍで阻害し（高濃度のペプチドで３０％阻害）、ＩＧＦ−１合成を１０−７Ｍで刺激する（低濃度のペプチドで９０％上昇）。
【００５０】
実施例３：細胞分化に対する本発明のペプチドの効果
上記と同じプロトコールで得たマウス胚の軟骨細胞を、１０−７ＭのペプチドＰ７０濃度で培養し、インキュベートした。培養５日目に、本発明者は、免疫化学（特異的抗ＩＩ型コラーゲン抗体で標識）により、ペプチドが、関節軟骨の産生に有用な細胞外マトリックスの主要成分であるＩＩ型コラーゲン産生を有意に刺激することを示す（図５）。実際に、非処理対照と比べて１５０％の増加が観察される。
【００５１】
図６では、１０−７Ｍの濃度のペプチドＰ７０の効果を、非処置軟骨細胞と比較する（対照）。培養７日目に、ペプチドの存在下で、軟骨の小結節形成の加速が明確に観察される。軟骨小結節の発達（体積／培養物）は、８５％早まる。
【００５２】
結論
ペプチドＰ７０は、二相性プロフィールを示す：
−低濃度（１０−７Ｍ）で：
・それは、特に軟骨形成の第１段階を加速することにより、細胞分化を刺激する（図５−ＩＩ型コラーゲンの発現、および、図６−軟骨形成を参照）
・それは、ＩＧＦ−１産生およびＩＧＦ−１受容体発現（図２−吸光度、および、図３−免疫組織化学を参照）およびＩＧＦ−１合成（図４−免疫組織化学を参照）を刺激する。
−高濃度（１０−６Ｍ）で：
・それは、細胞増殖（図１−トリチウム標識チミジンの取り込みを参照）を刺激する
・それは、ＩＧＦ−１産生（図４−免疫組織化学を参照）およびＩＧＦ−１受容体発現（図２−吸光度、および、図３−免疫組織化学を参照）を阻害する
【００５３】
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【技術分野】
【０００１】
本発明は、ＩＧＦ−１のモジュレーターであるペプチドに関する。
【背景技術】
【０００２】
技術的背景：
無制御の細胞増殖として現れる癌の過程は、しばしば、全く同じ細胞における増殖因子および／または増殖因子受容体の過剰発現の反映である（Moyse et al. 1985, Cassoni et al. 2006, Hanahan et al. 2000）。
【０００３】
ネットワークで作用する多数の因子が、細胞周期進行および細胞増殖を担う。特に、「増殖因子」と呼ばれるこれらの因子の一群は、Ｓ期への移行、そして、最終的には細胞分裂を刺激できるペプチドに代表される。これは、ＩＧＦ（インシュリン様増殖因子）にも該当する（Pardee 1989, Cross et al. 1991)。
【０００４】
ＩＧＦ−１は、特に、成長ホルモン（ＧＨ）による刺激の後に合成され、内分泌ホルモンとして作用し、成長ホルモンそのものとみなされることもある（Laron, 2001）。また、傍分泌／自己分泌メカニズムに従って作用し、このホルモンは、それが成長を刺激する小児で重要な役割を果たし、一方、成人では同化作用を高める。
【０００５】
このホルモンの特異的受容体（ＩＧＦ−１Ｒ）は、多数の異なる細胞タイプで発現され、従って、いくつかの生物の組織は、ＩＧＦ−１の作用に依存する：肝臓、腎臓、肺、筋肉、骨組織および軟骨、並びに、神経組織が挙げられる。さらに、ＩＧＦ−１は、低い親和性でインシュリン受容体に結合できるのでインシュリンに似た作用を有し、神経細胞の発生を調節し、ＤＮＡ合成を調節する。
【０００６】
ＩＧＦ−１の受容体への結合は、細胞の成長および増殖を刺激する細胞内シグナルを誘起する（Perona, 2006）。この活性のために、ＩＧＦ−１は、強力なアポトーシス（プログラムされた細胞死）阻害因子であり、かつ、タンパク質合成の活性化因子である（Yanochko et al. 2006, Colon et al. 2007, Inoue et al. 2005）。最後に、ある種の条件では、ＩＧＦ−１は、アポトーシス誘導因子および細胞増殖刺激因子のデュアルの役割を有し得る（Fu et al. 2007, Rabinovsky 2004 a）。
【０００７】
ＩＧＦのシグナル伝達網は、腫瘍進行および転移に重要な役割を有し（Hofmann et al. 2005）、多くの実験的研究並びに疫学的研究は、高レベルのＩＧＦ−１および／またはその受容体と、癌性増殖のリスクの増加またはその確立自体との、有意な相関を立証している（Vella et al. 2001, Talapatra et al. 2001, Kucab et al. 2003, Kambhampati et al. 2005, Bjorndahl et al. 2005, Gennigens et al. 2006, Velcheti et al. 2006, Yanochko et al. 2006, Sisci et al. 2007, Samani et al. 2007）。一般に、発癌における、特に腫瘍進行の刺激におけるＧＨ／ＩＧＦ−１軸の役割は、従って、多くの疫学的研究、および、ＩＧＦ−１の先天的欠損が癌の発生に対して防御すると思われることを示す最近の研究に示される通り、十分に確立されている（Sheva et al. 2007）。
【０００８】
ＩＧＦ活性を阻害する分子の臨床研究は、様々なタイプの癌におけるそれらの使用の利点、化学療法および照射と相乗作用するそれらの治療効果を示している（Min et al. 2005, Carmiraud et al. 2005, Chinnavian et al. 2006, Wu et al. 2006, Deutsch et al. 2005, Warshamana-Greene et al. 2005）。ＩＧＦ−１は、成長ホルモンのメディエーターであるので、その産生は、上流の成長ホルモン（ＧＨ）で、ソマトスタチンにより遅延または阻害できる。
【０００９】
視床下部で分泌されるソマトスタチン（成長ホルモン産生細胞放出阻害因子、または、ＳＲＩＦ）は、天然のＧＨＲＨ（ＧＨ合成を刺激する神経ペプチド）のアンタゴニストである。特に、ＧＨを阻害することにより、ＳＲＩＦはＩＧＦ−１合成の阻害作用を有する。しかしながら、ＳＲＩＦは末梢性の作用も有し、特に、例えば、胃腸および膵臓のホルモンの分泌を阻害する消化ホルモンとして作用する。
【００１０】
ＳＲＩＦおよびその合成類似体が、直接的または間接的メカニズムにより細胞増殖を阻害し、細胞死を引き起こす能力は、ヒトの医療において、様々なタイプの癌のいくつかの治療プロトコールで利用されている。さらに、ＳＲＩＦは、血管新生を阻害でき、それは、腫瘍成長の間接的制御のための臨床的実務において潜在的に興味深いものである（Ferjoux et al. 2000）。実際に、腫瘍は栄養を新血管形成（血管新生）により得、細胞増殖を阻害するＳＲＩＦの類似体は、血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）などの増殖因子の分泌に対する間接的阻害作用も有し、一方で、単球の走化性を低下させる（Dasgupta 2004, Garcia de la Torre et al. 2002）。
【００１１】
しかしながら、ＳＲＩＦの類似体の使用は、ＳＲＩＦ受容体を発現する癌でのみ可能である。従って、臨床的実務で使用されるＳＲＩＦ類似体の効力は、神経内分泌、胃腸膵、脳、乳房、前立腺および肺の腫瘍の処置で明示的に立証されたのみである（Ferjoux et al. 2000）。さらに、ＳＲＩＦ受容体の発現のレベルおよびプロフィールは、癌腫ごとに非常に異なることに留意すべきである。
【００１２】
「ＩＧＦ系」の阻害剤であるソマトスタチン類似分子（Pawlikowski M. et al., 2004）は、既に提唱された。これらは、特に、ＢＩＭ２３Ａ３８７、オクトレオチドおよびランレオチド（２個の８−ｍｅｒペプチド）である。これらの分子は、受容体またはそのリガンドの発現を調節し、様々なタイプの癌および先端巨大症の処置において興味深い候補である。他の例として、二重特異性合成リガンドＢＩＭ−２３２４４（Rani C., 2004, Rani C., 2006, Pandit A., 2008）は、成長ホルモン分泌腺腫における成長ホルモンの分泌を阻害できる。
【発明の概要】
【００１３】
発明の概要：
本発明者は、この度、ＩＧＦ−１の作用を調節するための新規のペプチドを提案する。これらのペプチドは、以下の配列（Ｉ）の２０個ないし２４個のアミノ酸を含む：
Ｐａ−Ｘ１−Ｐｈｅ−Ｔｒｐ−Ｘ２−Ｘ３−Ｐｂ（Ｉ）（配列番号１）
ここで：
−Ｐａは、
Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｙｓ−Ａｌａ（配列番号３）
Ａｓｎ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｙｓ−Ａｌａ（配列番号４）
Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｙｓ−Ａｌａ（配列番号５）
の配列から選択される１０個ないし１２個のアミノ酸を含む配列を表し、
−Ｘ１は、リジン、アルギニンまたはヒスチジン残基であり；
−Ｘ２は、スレオニンまたはリジン残基であり；
−Ｘ３は、アスパラギン酸またはグルタミン酸残基であり；そして、
−Ｐｂは、
Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ（配列番号６）
Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｌｅｕ（配列番号７）
Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ（配列番号８）
の配列から選択される５個ないし７個のアミノ酸を含む配列を表す。
【００１４】
本発明は、また、１またはそれ以上の化学修飾により配列（Ｉ）から誘導されるタンパク質分解に抵抗性のペプチド、または、１またはそれ以上の保存的置換により配列（Ｉ）から誘導される実質的に相同のペプチドに関する。
【００１５】
これらのペプチドは、インビトロで細胞増殖を調節するのに、好ましくは刺激するのに有用である。
本発明は、また、１種またはそれ以上の生理的に許容し得る補助剤と共に少なくとも１種のそのようなペプチドを有効成分として含む医薬組成物に関する。
本発明は、また、医薬品として使用するための、本明細書で定義するペプチドに関する。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
発明の詳細な説明：
定義：
用語「調節」は、本発明のペプチドのＩＧＦ−１機能の阻害および／または活性化の活性を表す。
「阻害」は、ＩＧＦ−１の活性、活性化、機能および／または発現を低減する阻害および／または下方調節を含む、ＩＧＦ−１合成および／またはＩＧＦ−１Ｒの発現に対する阻害作用を意味する。「活性化」は、ＩＧＦ−１の活性、機能および／または発現の活性化および／または上方調節を含む、ＩＧＦ−１合成および／またはＩＧＦ−１Ｒの発現を増強、刺激または活性化するいかなる作用も意味する。ペプチドの阻害および／または活性化作用は、ＩＧＦ−１および／またはＩＧＦ−１Ｒの発現を測定することにより調べる。ＩＧＦ−１および／またはＩＧＦ−１Ｒを発現する細胞培養を利用して、本発明のペプチドにより誘導される阻害および／または活性化を調べることも可能である。
【００１７】
用語「患者」は、ＩＧＦ−１合成および／またはＩＧＦ−１受容体発現を調節する処置を必要としているオス、メス、成体および／または子供を含む、任意のヒトまたは非ヒト動物、好ましくは哺乳動物を表す。
【００１８】
用語「処置」または「治療」は、疾患の治癒的処置および予防的処置の両方を含む。治癒的処置は、治癒をもたらす処置、または、疾患の症状またはそれが引き起こす苦痛を軽減、改善および／または除去、低減および／または安定化する処置と定義される。予防的処置は、疾患の予防をもたらす処置、および、疾患の発生またはその発症リスクを低減および／または遅延させる処置の両方を含む。
【００１９】
「保存的置換」という表現は、ペプチドの全般的構造または機能の変化を伴わない、アミノ酸残基の他のものとの任意の置換を表す。保存的置換には、類似の特性を有するアミノ酸による置換（例えば、形状、極性、水素結合能、酸性度、塩基性度、疎水性など）が含まれるが、これらに限定されない。類似の特性を有するアミノ酸は、先行技術で周知である。例えば、アルギニン、ヒスチジンおよびリジンは、親水性塩基性アミノ酸であり、交換可能であり得る。同様に、疎水性アミノ酸のイソロイシンは、ロイシン、メチオニンまたはバリンで置き換えることができる。相互に置換できる親水性中性アミノ酸には、アスパラギン、グルタミン、セリンおよびスレオニンが含まれる。「置換された」および「修飾された」により、本発明は、天然アミノ酸に対して変更または修飾されたアミノ酸を意味する。「実質的に相同な配列」という表現は、１個またはそれ以上の保存的置換を有する任意の配列を含む。
【００２０】
従って、本発明に関して、保存的置換は、あるアミノ酸の、同様の特性を有する他のものによる置換として、先行技術で知られている。保存的置換の例を、下表１に示す：
表１. 保存的置換Ｉ
【表１】
【００２１】
Lehninger, 1975 に記載の通り、保存的アミノ酸は、下表２に示す通りにグループ化できる：
表２. 保存的置換ＩＩ
【表２】
【００２２】
また他の保存的置換の選択肢を下表３に示す：
表３. 保存的置換ＩＩＩ
【表３】
【００２３】
ペプチドの製造：
本発明によるペプチドは、当分野で使用される全ての標準的なペプチド合成の技法、即ち、特に、化学合成または遺伝子組換えにより製造できる。好ましい実施態様では、ペプチドは、化学合成により得られる。より好ましくは、ペプチドは、必要な順序でのアミノ酸残基の連続的縮合により、または、以前に形成され既にいくつかのアミノ酸を含む断片上の残基を適切な順序で縮合することにより、または、以前に製造されたいくつかの断片の縮合により得られ、事前に、縮合中にペプチド結合に使用されるアミンおよびカルボキシル基を除くアミノ酸残基の全ての反応性官能基を保護するように注意し、特に、Merrifield の固相合成法による。
【００２４】
ペプチドの特性：
本発明のペプチドは、ＩＧＦ−１の作用を調節できる。これらのペプチドは、以下の配列（Ｉ）：
Ｐａ−Ｘ１−Ｐｈｅ−Ｔｒｐ−Ｘ２−Ｘ３−Ｐｂ（Ｉ）（配列番号１）
｛ここで：
−Ｐａは、
Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｙｓ−Ａｌａ（配列番号３）
Ａｓｎ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｙｓ−Ａｌａ（配列番号４）
Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｙｓ−Ａｌａ（配列番号５）
の配列から選択される１０個ないし１２個のアミノ酸を含む配列を表し、
−Ｘ１は、リジン、アルギニンまたはヒスチジン残基であり；
−Ｘ２は、スレオニンまたはリジン残基であり；
−Ｘ３は、アスパラギン酸またはグルタミン酸残基であり；そして、
−Ｐｂは、
Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ（配列番号６）
Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｌｅｕ（配列番号７）
Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ（配列番号８）
の配列から選択される５個ないし７個のアミノ酸を含む配列を表す｝
の２０ないし２４個のアミノ酸を含むか、またはこれらからなる。
【００２５】
本発明は、また、１またはそれ以上の化学修飾により配列（Ｉ）から誘導されるタンパク質分解に抵抗性のペプチド、または、１またはそれ以上の保存的置換により配列（Ｉ）から誘導される実質的に相同のペプチドを含む。
【００２６】
好ましくは、Ｘ１はリジン残基であり、Ｘ２はスレオニン残基であり、Ｘ３はアスパラギン酸残基である。
好ましい実施態様では、ペプチドは、以下のアミノ酸配列を含む：
ＳＮＦＧＳＲＫＦＳＹＫＡＫＦＷＴＤＶＴＴＳＥＬＧ（配列番号２）。
【００２７】
好ましくは、Ｎおよび／またはＣ末端の位置は、タンパク質分解から保護されている。例えば、Ｎ末端はアセチルの形態であり得、かつ／または、Ｃ末端はアミド基の形態であり得る。本発明のペプチドに耐性を与えるいかなる修飾も企図されており、例えば、少なくとも１個のペプチド結合が修飾され、（ＣＨ２ＮＨ）結合、（ＮＨＣＯ）結合、（ＣＨ２−Ｏ）結合、（ＣＨ２−Ｓ）結合、（ＣＨ２ＣＨ２）結合、（ＣＯ−ＣＨ２）結合、（ＣＨＯＨ−ＣＨ２）結合、（Ｎ−Ｎ）結合、アルケン−Ｅ結合または−ＣＨ＝ＣＨ結合で置き換えられているペプチドである。
タンパク質分解に耐性であるために化学的に修飾された全てのペプチドは、本発明に含まれる。
例えば、Ｐ７０と呼ばれる上記のペプチドは、アセチル−ＳＮＦＧＳＲＫＦＳＹＫＡＫＦＷＴＤＶＴＴＳＥＬＧ−アミドの形態であり得る。
【００２８】
本発明は、また、１またはそれ以上の保存的置換により配列（Ｉ）から誘導される実質的に相同のペプチドを包含する。２個のアミノ酸配列は、１個またはそれ以上のアミノ酸残基が、生物学的観点で類似する１個またはそれ以上の残基で置換されているとき、または、８０％を超えるアミノ酸が同一であるとき、または、好ましくは、９０％を超える残基が同一（機能的に同一）であるとき、「実質的に相同」または「実質的に類似」と呼ばれる。類似または相同の配列は、好ましくは、例えば、GCG "Pileup" プログラム (Genetics Computer Group, software manual for the GCG Package, Version 7, Madison, Wisconsin) または当業者に知られている任意の他のプログラム (BLAST、FASTA など) を使用する配列比較により同定される。
【００２９】
本発明によると、ペプチドの全てのアミノ酸残基は、Ｌ型（左旋性（levogyral））に属する。しかしながら、配列（Ｉ）のアミノ酸のいずれでも、Ｄ型（右旋性（dextrogyral））をＬ体に置き換えることも包含する。特に、ペプチドがペプチダーゼに対してより耐性であるために、いくつかのアミノ酸（配列（Ｉ）の位置１１ないし１８に位置するアミノ酸、特に位置１５のトリプトファン）がＤ型に属することが包含される。
【００３０】
有利には、血漿中の半減期を延ばすために、そして、使用する治療用量を減らすために、ペプチドは、それらのＣ末端またはリジン残基により、１個またはそれ以上のポリエチレングリコール（ＰＥＧ）分子、特に１５００または４０００ＭＷのＰＥＧに共有結合している。ＰＥＧの結合は、Abuchowski et al. (J. Biol. Chenu., 1977,252 : 3582-3586）に記載の通りである。本発明のさらなる態様では、ペプチドは、ミクロスフェアを形成する生物分解性ポリマーまたはコポリマー、例えば、ポリ（Ｄ,Ｌ−ラクチド−コ−グリコリド）（ＰＬＧＡ）に含まれる（ＵＳ２００７／０１８４０１５、SoonKap Hahn et alに記載の通り）。
【００３１】
本発明のペプチドは、内在性（天然）ソマトスタチンまたは当分野で既知のペプチドと異なり、疎水性媒体中と同様に生理的媒体中で安定であるβ−ヘアピン分子構造を示す。有利なことに、媒体のいかなる条件も、このペプチド構造のαへリックスへの遷移を誘導できない。
【００３２】
さらに、ヘアピン構造は、ペプチド配列の折り畳みにより形成される折り目において、ＳＲＩＦにおいて受容体結合に主要なものと認識されている４個の連続するアミノ酸（Ｐｈｅ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ）のうち、２個のアミノ酸（Ｐｈｅ−Ｔｒｐ）を露出できる。この仮説に縛られるわけではないが、本発明者は、本発明のペプチド配列において、位置１３のアミノ酸と位置１７のアミノ酸との間の静電気的引力が、「折れ曲がり」型の構造を可能にし、ペプチド全体にβ型の構造をもたせると考える（ＶＩＩＩβ型構造）。
【００３３】
本発明で有用なペプチドは、二相性作用を示す。従って、使用する濃度に依存して、ペプチドは、ＩＧＦ−１の産生およびその受容体（ＩＧＦ−１Ｒ）の発現を活性化または阻害できる。インビトロで、これらの作用は、細胞増殖の刺激または阻害を導く。
【００３４】
用量依存的なアゴニストまたはアンタゴニスト作用を示す生物学的分子の二相性作用は、他の分子について、そして様々な生物学的システムにおいて、周知である（酵素 [Gamage et al. 2003, He et al. 2003]、イオンチャネルおよび共輸送体（co-carriers）[Arias et al. 1996, Lombardi et al. 2001, Borst et al. 2002, Incerpi et al. 2003]、輸送体[Henry et al. 2002]、チロシンキナーゼ受容体 [Leiser et al. 1986, Schlessinger 1988]、Ｇタンパク質共役型受容体（ＧＰＣＲ）、神経伝達物質、ホルモンおよびケモカイン [Winding et al. 1993, Chidiac et al. 1996, Bronnikov et al. 1999, Cuthbert 2003, Hornigold et al. 2003, Griffin et al. 2003, Fuh et al. 1992, Talmadge 1998]、特に、ＧｎＲＨおよびそのアナログ [Browning J.Y et al.1983, Ho M.N. et al.1997, Barbarino A et al.1982, Imai, A et al.1993, Kang, Sung K et al.2000 et 2001, Gruendker C et al. 2003, Leung P.C.K et al. 2003, Bhasin S. et al. 2008]に関して）。
【００３５】
本明細書に記載のペプチドは、インビトロで、例えば、角膜実質細胞、軟骨細胞または肝実質細胞培養で、細胞増殖を刺激するのに、または、医学的興味のある組織の調製に有用である。
【００３６】
これらの優れた特徴で、本明細書に記載のペプチドは、様々な適用に、インビトロおよびインビボで、特にヒトまたは獣医学において、有用である。
【００３７】
本発明のペプチドは、
−ＩＧＦ−１合成および／またはＩＧＦ−１受容体発現を刺激するのに；
−または、ＩＧＦ−１合成および／またはＩＧＦ−１受容体発現を阻害するのに、
適する用量で使用できる。
【００３８】
ＩＧＦ−１の合成および／またはその受容体の発現の刺激は、様々な場合で望ましい：
−ペプチドを成長ホルモン代用薬として使用する場合。これらのペプチドは、先天性または後天性の内在性成長ホルモンまたはＩＧＦ−１の完全または部分的欠乏に伴う全ての治療適応症において、特に小児および成人の発育不全の処置において、特に有用である。他の治療的適用には、例えば、ターナー症候群、プラダー・ウィリー症候群、慢性腎不全が含まれる。本発明のペプチドは、後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）または癌に伴う悪液性症状などの、筋肉量の増加が必要とされ得る障害に、特に有用である。ペプチドは、また、獣医学の分野でも、特にウシ、ブタ、ヒツジ、ウマなどの飼育において、有用である。
−肥満症またはＩＩ型糖尿病などのメタボリックシンドロームの治療的処置において（特に、血液の脂質率を下げ、グルコース代謝を改善することによる）、そして、特に高齢または免疫抑制の対象において、免疫防御を刺激または回復するために、または、自己免疫疾患（Ｉ型糖尿病など）および／または神経変性疾患（多発性硬化症など）の処置のために。
−神経細胞の生存（抗アポトーシス作用）、分化または神経の発達、運動または感覚神経の再生、シナプス形成および再ミエリン化（remyelinization）を刺激するために。従って、ＩＧＦ−１の産生を刺激することにより、本発明のペプチドは、神経形成を刺激するための神経栄養性物質として、かつ／または、神経保護物質として（特に虚血性発作において）使用される。
【００３９】
ＩＧＦ−１合成および／またはその受容体の発現の阻害は、以下の場合で特に望ましい：
−オクトレオチドおよびランレオチドが適用される障害のように、これらのペプチドをソマトスタチンの代替薬として使用する場合。所望の生物学的作用は、例えば、下垂体のＧＨ分泌の阻害、胆汁分泌の阻害、膵臓および胃腸の外分泌および／または内分泌の阻害である。例えば、ソマトスタチンの代替薬として、ペプチドをアルツハイマー病の処置に使用する。
−先端巨大症の処置に、特に外科手術および／または放射線療法および他の薬物療法に不十分な応答をした患者において、または、これらの治療が適切ではない患者のために。処置の目標は、血清ＩＧＦ−１レベルを正常化し、臨床徴候および症状を改善することである。
−癌の処置において、限定されるわけではないが、特に、乳癌、膵臓癌、前立腺癌、下垂体腺腫または消化器系内分泌腺腫瘍の処置に。さらに、ペプチドを転移の処置に使用し得る（胃腸の転移を含む）。下痢および紅潮などの消化器系内分泌腺腫瘍に伴う症状を改善するための、阻害的用量での本発明のペプチドの使用も包含される。
【００４０】
医薬組成物：
このペプチドは、全身的（非経腸、静脈内…）、経口、直腸、局所、経皮、皮下、肺内（Agu et al, 2001 参照）および鼻腔内経路を含む任意の好都合な経路により投与し得る。好ましい実施態様では、ペプチドを鼻腔内経路により投与する。
【００４１】
インビトロで、ＩＧＦ−１合成および／またはＩＧＦ−１受容体発現を刺激するのに適する用量の例は約１０−７Ｍの濃度の用量であり、ＩＧＦ−１合成および／またはＩＧＦ−１受容体を阻害するのに適する用量の例は、少なくとも１０−６Ｍの濃度の用量である。
対応するインビボでの用量は、所望の効果が達成されるように処置する症状に関して、当業者により選択される。
【００４２】
ＩＧＦ−１合成および／またはＩＧＦ−１受容体の発現をインビボで刺激するのに有効な容量は、典型的には、少なくとも１日１００μｇ、好ましくは約１０μｇないし１００μｇの濃度を含む。ＩＧＦ−１合成および／またはＩＧＦ−１受容体の発現をインビボで阻害するのに有効な用量は、典型的には、少なくとも１日３００μｇ、好ましくは約３００μｇないし３ｍｇの濃度を含む。好ましくは、有効な一日量は、約１ｍｇないし３ｍｇ、さらにより好ましくは、約２ｍｇないし３ｍｇである。鼻腔内または肺内経路による投与には、または、徐放性製剤を使用する場合には、必要とされる刺激および／または阻害の用量は、１０ないし１００倍低いことができる。これらの投与は、長期間、好ましくは３ないし６ヶ月の期間にわたり、繰り返すことができる。
【００４３】
本発明のさらなる態様と利点を以下の実験の部に開示し、本発明によるペプチドの生物学的活性を立証する。
以下の実施例および図で使用する本発明のペプチド配列（Ｐ７０と名付けられた）は、以下のアミノ酸配列を含む：
アセチル−ＳＮＦＧＳＲＫＦＳＹＫＡＫＦＷＴＤＶＴＴＳＥＬＧ−アミド（配列番号２）
これらの実施例は、例示と認識されるべきものであり、本願の範囲を限定しない。
【図面の簡単な説明】
【００４４】
図の説明文
【図１】図１は、［Ｈ３］チミジンのＤＮＡへの取り込みに対するＰ７０の効果を示すグラフである。
【図２】図２は、吸光度測定により評価したＩＧＦ−１Ｒの発現に対するＰ７０の効果を示すグラフである。
【図３】図３は、免疫組織化学による、初代新生児マウス下顎軟骨細胞培養におけるＩＧＦ−１Ｒ発現に対するＰ７０の効果を示す。
【図４】図４は、免疫組織化学による、初代新生児マウス下顎軟骨細胞培養におけるＩＧＦ−１合成に対するＰ７０の効果を示す。
【図５】図５は、免疫組織化学による、初代新生児マウス下顎軟骨細胞培養におけるＩＩ型コラーゲンの産生に対するＰ７０の効果を示す。
【図６】図６は、初代新生児マウス下顎軟骨細胞培養における軟骨形成プロセスに対するＰ７０の効果を示す。矢印は、軟骨形成小結節を示す。
【実施例】
【００４５】
実施例：
実施例１：細胞増殖に対する本発明のペプチドの効果
本発明のペプチドの生物学的効果を、新生児マウス下顎の軟骨細胞初代培養モデルで立証する。
ペプチドが細胞増殖を誘導する能力を評価するために、本発明者は、Kurz et al., 1997 の方法に従い、ＤＮＡ複製中の［Ｈ３］チミジンの取り込みを示す試験を実施した。この試験を、本発明者が使用するモデル、即ち、初代マウス胚性軟骨細胞培養に適合させた。
【００４６】
マウス下顎骨関節突起（ＭＣＤＣ）の分離により得た軟骨細胞を、軟骨形成させる培養培地で培養し、特に、５ｘ１０５細胞／ｍｌを、１μＣｉ［３Ｈ］−チミジン／培地１ｍｌ（Amersham、コードＴＲＡ１２０、原液１ｍＣｉ／ｍｌ、比活性５Ｃｉ／ｍｍｏｌ）と共に、３時間、３７℃で、ＤＭＥＭ培地（ダルベッコ変法イーグル培地）中で、ウシ胎児血清（ＦＣＳ）なしで、しかし、アスコルビン酸１００μｇ／ｍｌ、塩化カルシウム１ｍｍｏｌ／Ｌ、β−グリセロリン酸１０ｍｍｏｌ／Ｌおよび抗生物質を添加して、インキュベートした。［３Ｈ］−チミジン５μｌを添加した同じ培地を２分間添加し、負の対照として使用した。上清を除去し、ｐＨ７.０で緩衝化した塩水（ＰＢＳ）で細胞を２回洗浄し、細胞を２回（５分間）メタノールで洗浄した。次いで、細胞を１０％トリクロロ酢酸（ＴＣＡ）の冷たい溶液で３回洗浄した。細胞をＤＤＷで２回洗浄した後、細胞を０.３Ｍ ＮａＯＨ２００μｌに１５分間混ぜた。次いで、細胞を０.３Ｍ ＨＣｌ２００μｌを含む中和したシンチレーション液３ｍｌに移す。最後に、細胞を含むサンプルをボルテックスで混合し、ベータカウンターに１分間置いた。
【００４７】
得られた結果（図１）は、ペプチドＰ７０が、軟骨細胞の増殖に対して、最高濃度（１０−６Ｍ）で、非処理対照（ペプチドまたは他の増殖因子なしでインキュベートした軟骨細胞）より５３％高い刺激効果を有するが、この刺激効果は低濃度（１０−７Ｍ）では観察されないことを示す。
【００４８】
実施例２：ＩＧＦ１合成およびＩＧＦ１受容体発現に対する本発明のペプチドの効果
本発明者は、培養物の軟骨細胞を利用して、ＩＧＦ−１合成およびその受容体（ＩＧＦ−１Ｒ）の発現に対するＰ７０の効果を調べた。本発明者は、軟骨細胞を低濃度のペプチド（１０−７Ｍ）とインキュベートすると、ペプチドがＩＧＦ−１産生およびその受容体（ＩＧＦ−１Ｒ）の発現に重要な刺激効果を有することを示す（図２）。
逆に、高濃度（１０−６Ｍ）では、ペプチドは実質的にＩＧＦ−１およびその受容体の産生を阻害する。
【００４９】
５日目の初代軟骨細胞培養に免疫組織化学（ＩＨＣ）を使用して（図３）、本発明者は、また、ペプチドＰ７０がＩＧＦ−１受容体発現を１０−６Ｍで阻害し（高濃度のペプチドで３６.８％阻害）、一方、それは同じ受容体の発現を１０−７Ｍで刺激する（低濃度のペプチドで２３.８％上昇）ことを示す。さらに（図４）、Ｐ７０は、ＩＧＦ−１合成を１０−６Ｍで阻害し（高濃度のペプチドで３０％阻害）、ＩＧＦ−１合成を１０−７Ｍで刺激する（低濃度のペプチドで９０％上昇）。
【００５０】
実施例３：細胞分化に対する本発明のペプチドの効果
上記と同じプロトコールで得たマウス胚の軟骨細胞を、１０−７ＭのペプチドＰ７０濃度で培養し、インキュベートした。培養５日目に、本発明者は、免疫化学（特異的抗ＩＩ型コラーゲン抗体で標識）により、ペプチドが、関節軟骨の産生に有用な細胞外マトリックスの主要成分であるＩＩ型コラーゲン産生を有意に刺激することを示す（図５）。実際に、非処理対照と比べて１５０％の増加が観察される。
【００５１】
図６では、１０−７Ｍの濃度のペプチドＰ７０の効果を、非処置軟骨細胞と比較する（対照）。培養７日目に、ペプチドの存在下で、軟骨の小結節形成の加速が明確に観察される。軟骨小結節の発達（体積／培養物）は、８５％早まる。
【００５２】
結論
ペプチドＰ７０は、二相性プロフィールを示す：
−低濃度（１０−７Ｍ）で：
・それは、特に軟骨形成の第１段階を加速することにより、細胞分化を刺激する（図５−ＩＩ型コラーゲンの発現、および、図６−軟骨形成を参照）
・それは、ＩＧＦ−１産生およびＩＧＦ−１受容体発現（図２−吸光度、および、図３−免疫組織化学を参照）およびＩＧＦ−１合成（図４−免疫組織化学を参照）を刺激する。
−高濃度（１０−６Ｍ）で：
・それは、細胞増殖（図１−トリチウム標識チミジンの取り込みを参照）を刺激する
・それは、ＩＧＦ−１産生（図４−免疫組織化学を参照）およびＩＧＦ−１受容体発現（図２−吸光度、および、図３−免疫組織化学を参照）を阻害する
【００５３】
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の配列（Ｉ）：
Ｐａ−Ｘ１−Ｐｈｅ−Ｔｒｐ−Ｘ２−Ｘ３−Ｐｂ（Ｉ）（配列番号１）
｛ここで：
−Ｐａは、
Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｙｓ−Ａｌａ（配列番号３）
Ａｓｎ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｙｓ−Ａｌａ（配列番号４）
Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｙｓ−Ａｌａ（配列番号５）
の配列から選択される１０個ないし１２個のアミノ酸を含む配列を表し、
−Ｘ１は、リジン、アルギニンまたはヒスチジン残基であり；
−Ｘ２は、スレオニンまたはリジン残基であり；
−Ｘ３は、アスパラギン酸またはグルタミン酸残基であり；そして、
−Ｐｂは、
Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ（配列番号６）
Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｌｅｕ（配列番号７）
Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ（配列番号８）
の配列から選択される５個ないし７個のアミノ酸を含む配列を表す｝
の２０個ないし２４個のアミノ酸を含むペプチド、
１またはそれ以上の化学修飾により配列（Ｉ）から誘導されるタンパク質分解に抵抗性のペプチド、または、１またはそれ以上の保存的置換により配列（Ｉ）から誘導される実質的に相同のペプチド。
【請求項２】
Ｘ１がリジン残基であり、Ｘ２がスレオニン残基であり、Ｘ３がアスパラギン酸残基である、請求項１に記載のペプチド。
【請求項３】
配列ＳＮＦＧＳＲＫＦＳＹＫＡＫＦＷＴＤＶＴＴＳＥＬＧ（配列番号２）を含む、請求項２に記載のペプチド。
【請求項４】
１種またはそれ以上の医薬的に許容し得る補助剤と共に、有効成分として請求項１ないし請求項３のいずれかに記載のペプチドを含む医薬組成物。
【請求項５】
インビトロで細胞増殖を調節するための、請求項１ないし請求項３のいずれかに記載のペプチドの使用。
【請求項６】
医薬品としての請求項１ないし請求項３のいずれかに記載のペプチド。
【請求項７】
ＩＧＦ−１合成および／またはＩＧＦ−１受容体発現を刺激するのに適する用量で使用するための、請求項１ないし請求項３のいずれかに記載のペプチド。
【請求項８】
１００μｇ未満、好ましくは１０μｇないし１００μｇ、より好ましくは１０μｇないし５０μｇの有効一日量でインビボで使用される、請求項７に記載のペプチド。
【請求項９】
成長ホルモン代替薬として使用するための、請求項１ないし請求項３のいずれかに記載のペプチド。
【請求項１０】
慢性腎不全、ターナー症候群またはプラダー・ウィリー症候群の処置において使用するための、請求項１ないし請求項３のいずれかに記載のペプチド。
【請求項１１】
メタボリックシンドローム、自己免疫疾患および／または神経変性疾患の治療的処置において使用するための、請求項１ないし請求項３のいずれかに記載のペプチド。
【請求項１２】
神経栄養および／または神経保護薬として使用するための、請求項１ないし請求項３のいずれかに記載のペプチド。
【請求項１３】
ＩＧＦ−１合成および／またはＩＧＦ−１受容体発現を阻害するのに適する用量で使用するための、請求項１ないし請求項３のいずれかに記載のペプチド。
【請求項１４】
少なくとも３００μｇ／日、好ましくは３００μｇないし３ｍｇ／日、より好ましくは１ｍｇないし３ｍｇ、さらにより好ましくは２ｍｇないし３ｍｇの有効一日量でインビボで使用するための、請求項１３に記載のペプチド。
【請求項１５】
ソマトスタチン代替薬として使用するための、請求項１ないし請求項３のいずれかに記載のペプチド。
【請求項１６】
アルツハイマー病の処置において使用するための、請求項１ないし請求項３のいずれかに記載のペプチド。
【請求項１７】
先端巨大症または癌の処置において使用するための、請求項１ないし請求項３のいずれかに記載のペプチド。
【請求項１８】
転移の処置において使用するための、請求項１７に記載のペプチド。
【請求項１】
以下の配列（Ｉ）：
Ｐａ−Ｘ１−Ｐｈｅ−Ｔｒｐ−Ｘ２−Ｘ３−Ｐｂ（Ｉ）（配列番号１）
｛ここで：
−Ｐａは、
Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｙｓ−Ａｌａ（配列番号３）
Ａｓｎ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｙｓ−Ａｌａ（配列番号４）
Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｐｈｅ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｙｓ−Ａｌａ（配列番号５）
の配列から選択される１０個ないし１２個のアミノ酸を含む配列を表し、
−Ｘ１は、リジン、アルギニンまたはヒスチジン残基であり；
−Ｘ２は、スレオニンまたはリジン残基であり；
−Ｘ３は、アスパラギン酸またはグルタミン酸残基であり；そして、
−Ｐｂは、
Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ（配列番号６）
Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｌｅｕ（配列番号７）
Ｖａｌ−Ｔｈｒ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ（配列番号８）
の配列から選択される５個ないし７個のアミノ酸を含む配列を表す｝
の２０個ないし２４個のアミノ酸を含むペプチド、
１またはそれ以上の化学修飾により配列（Ｉ）から誘導されるタンパク質分解に抵抗性のペプチド、または、１またはそれ以上の保存的置換により配列（Ｉ）から誘導される実質的に相同のペプチド。
【請求項２】
Ｘ１がリジン残基であり、Ｘ２がスレオニン残基であり、Ｘ３がアスパラギン酸残基である、請求項１に記載のペプチド。
【請求項３】
配列ＳＮＦＧＳＲＫＦＳＹＫＡＫＦＷＴＤＶＴＴＳＥＬＧ（配列番号２）を含む、請求項２に記載のペプチド。
【請求項４】
１種またはそれ以上の医薬的に許容し得る補助剤と共に、有効成分として請求項１ないし請求項３のいずれかに記載のペプチドを含む医薬組成物。
【請求項５】
インビトロで細胞増殖を調節するための、請求項１ないし請求項３のいずれかに記載のペプチドの使用。
【請求項６】
医薬品としての請求項１ないし請求項３のいずれかに記載のペプチド。
【請求項７】
ＩＧＦ−１合成および／またはＩＧＦ−１受容体発現を刺激するのに適する用量で使用するための、請求項１ないし請求項３のいずれかに記載のペプチド。
【請求項８】
１００μｇ未満、好ましくは１０μｇないし１００μｇ、より好ましくは１０μｇないし５０μｇの有効一日量でインビボで使用される、請求項７に記載のペプチド。
【請求項９】
成長ホルモン代替薬として使用するための、請求項１ないし請求項３のいずれかに記載のペプチド。
【請求項１０】
慢性腎不全、ターナー症候群またはプラダー・ウィリー症候群の処置において使用するための、請求項１ないし請求項３のいずれかに記載のペプチド。
【請求項１１】
メタボリックシンドローム、自己免疫疾患および／または神経変性疾患の治療的処置において使用するための、請求項１ないし請求項３のいずれかに記載のペプチド。
【請求項１２】
神経栄養および／または神経保護薬として使用するための、請求項１ないし請求項３のいずれかに記載のペプチド。
【請求項１３】
ＩＧＦ−１合成および／またはＩＧＦ−１受容体発現を阻害するのに適する用量で使用するための、請求項１ないし請求項３のいずれかに記載のペプチド。
【請求項１４】
少なくとも３００μｇ／日、好ましくは３００μｇないし３ｍｇ／日、より好ましくは１ｍｇないし３ｍｇ、さらにより好ましくは２ｍｇないし３ｍｇの有効一日量でインビボで使用するための、請求項１３に記載のペプチド。
【請求項１５】
ソマトスタチン代替薬として使用するための、請求項１ないし請求項３のいずれかに記載のペプチド。
【請求項１６】
アルツハイマー病の処置において使用するための、請求項１ないし請求項３のいずれかに記載のペプチド。
【請求項１７】
先端巨大症または癌の処置において使用するための、請求項１ないし請求項３のいずれかに記載のペプチド。
【請求項１８】
転移の処置において使用するための、請求項１７に記載のペプチド。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【公表番号】特表２０１２−５２４７１３（Ｐ２０１２−５２４７１３Ａ）
【公表日】平成２４年１０月１８日（２０１２．１０．１８）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１２−５００３００（Ｐ２０１２−５００３００）
【出願日】平成２２年３月１８日（２０１０．３．１８）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＦＲ２０１０／０５０４９０
【国際公開番号】ＷＯ２０１０／１０６２９４
【国際公開日】平成２２年９月２３日（２０１０．９．２３）
【出願人】（５１００３５４６２）ウニヴェルシテ ピエール エ マリー キュリー（パリ ６） (4)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２４年１０月１８日（２０１２．１０．１８）
【国際特許分類】
【出願日】平成２２年３月１８日（２０１０．３．１８）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＦＲ２０１０／０５０４９０
【国際公開番号】ＷＯ２０１０／１０６２９４
【国際公開日】平成２２年９月２３日（２０１０．９．２３）
【出願人】（５１００３５４６２）ウニヴェルシテ ピエール エ マリー キュリー（パリ ６） (4)
【Ｆターム（参考）】
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