ＬＯＸ−１アンタゴニスト作用を高活性に有する味の品質が確保されたバナバエキス
【課題】分析機器によって一定以上の味の品質を有することが客観的に評価され、同時にＬＯＸ−１アンタゴニスト作用を高活性に有するバナバエキスを提供すること。
【解決手段】カラム「ＨｉＴｒａｐ ＤＥＡＥ ＦＦ」（ＧＥヘルスケア社製）１ｍｌを内装した液体クロマトグラフィー装置を用い、その測定条件が、溶媒は５０ｍＭ ＨＥＰＥＳ（ｐＨ８．０）、０−１Ｍ ＮａＣｌ、グラジェントは２０カラムボリューム、流速は１ｍｌ／ｍｉｎ、バナバエキスは０．５ｍｇを負荷した場合のクロマトグラフィーにおいて、ＮａＣｌ濃度が０．１−０．３Ｍ付近で得られる２３０ｎｍのピーク中でピーク面積が最大であるピークＢと、素通り画分で得られる２３０ｎｍのピークＡの面積をそれぞれ求め、Ｂに対するＡの面積比が２０％以下となることを特徴とするバナバエキス。
【解決手段】カラム「ＨｉＴｒａｐ ＤＥＡＥ ＦＦ」（ＧＥヘルスケア社製）１ｍｌを内装した液体クロマトグラフィー装置を用い、その測定条件が、溶媒は５０ｍＭ ＨＥＰＥＳ（ｐＨ８．０）、０−１Ｍ ＮａＣｌ、グラジェントは２０カラムボリューム、流速は１ｍｌ／ｍｉｎ、バナバエキスは０．５ｍｇを負荷した場合のクロマトグラフィーにおいて、ＮａＣｌ濃度が０．１−０．３Ｍ付近で得られる２３０ｎｍのピーク中でピーク面積が最大であるピークＢと、素通り画分で得られる２３０ｎｍのピークＡの面積をそれぞれ求め、Ｂに対するＡの面積比が２０％以下となることを特徴とするバナバエキス。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、バナバ（Ｌａｇｅｒｓｔｒｏｅｍｉａ ｓｐｅｃｉｏｓａ Ｌ．）植物から調整したエキスに関し、より詳細には、ＬＯＸ−１（レクチン様酸化低密度リポ蛋白質受容体）アンタゴニスト作用を有する味の品質が確保されたバナバエキス、及びその製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
バナバは、フトモモ目ミソハギ科に属する植物で、通称「オオサルスベリ」とも称され、フィリピンをはじめ、インド、マレーシア、中国南部などの東南アジア、オーストラリアなどに広く生育している植物である。古来、フィリピンにおいては、乾燥したバナバ葉を煎じて飲用されており、糖尿病の民間治療剤としても広く知られている。また血糖値上昇抑制作用のみならず、本発明者らにより、水溶性・脂溶性を問わずバナバエキスは動脈硬化の初期病変に関わるＬＯＸ−１に対するアンタゴニスト作用を有することが開示されている（特許文献１）。よって、これらの効果効能を考慮すると、長期的・経時的にバナバエキスを服用することは健康を維持することからも有効な手段と考えられる。
【０００３】
しかしながら通常のバナバエキスは他の有用植物由来エキスでよく見られるのと同様に、苦味や渋み、あるいはえぐ味などを有するために適用範囲が限定され、これを広範囲の分野で有効活用するうえで大きな阻害要因となっている。これらの苦味や渋みを抑制するために、特に茶の分野では活性炭と接触させる方法（特許文献２〜４）、サイクロデキストリンを用いる方法（特許文献５〜８）、アスコルビン酸とアルカリ金属を用いる方法（特許文献９）、ポリビニルポリピロリドンを用いる方法（特許文献１０，１１）、焙煎する方法（特許文献１２〜１６）などが開示されている。また、バナバエキスにおいては血糖値降下作用のあるコロソリン酸を濃縮する方法（特許文献１７〜２４）、あるいはバナバエキスの苦味を改善する方法（特許文献２５）などが開示されている。
【０００４】
一方で風味の改善方法とは異なり、味の品質を確保する（特許文献２６〜２８）、あるいはその組成物の機能を確保するための特許（特許文献２９，３０）も開示されている。特に味の品質を確保することにおいては、官能試験での評価員の好みや体調に左右されることを排除し、且つ客観的な評価系を構築し、更にその方法に準じた組成物を得ることが目的である。これらの方法の多くはカラムクロマトグラフィーによる味の品質の確保や機能の確保が行われており、有用な手段として利用されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】国際公開第２００７／１１９７８９号パンフレット
【特許文献２】特開２００５−２６３６５０号公報
【特許文献３】特開平１１−１０３８１７号公報
【特許文献４】特開２００２−１５３２１１号公報
【特許文献５】特開２００８−１１８９３３号公報
【特許文献６】特開２００６−１３６２４４号公報
【特許文献７】特開２００５−０７３５３４号公報
【特許文献８】特開平１０−００４９１９号公報
【特許文献９】特開２００２−９７１８７号公報
【特許文献１０】特開２００２−２３８４５８号公報
【特許文献１１】特開２００４−１５９５９７号公報
【特許文献１２】特開２００８−１３６３６７号公報
【特許文献１３】特開２００７−０８９４４４号公報
【特許文献１４】特開２００５−１８５１２８号公報
【特許文献１５】特開２００３−２８４５２３号公報
【特許文献１６】特開平１１−２２５７１８号公報
【特許文献１７】特開２０００−１６９３８４号公報
【特許文献１８】特開２００５−２６３６５０号公報
【特許文献１９】特開２００５−３０６７８０号公報
【特許文献２０】特表２００８−５２５４９７号公報
【特許文献２１】特許第３６３１７４２号公報
【特許文献２２】特許第３６３１７４５号公報
【特許文献２３】特許第３６３１７４６号公報
【特許文献２４】特許第３６４１４８０号公報
【特許文献２５】国際公開第２００５／０９９４８６号パンフレット
【特許文献２６】特許第３６２４２７２号公報
【特許文献２７】特許第３６７１１７９号公報
【特許文献２８】特許第３９４６４６２号公報
【特許文献２９】特許第４１９７３４７号公報
【特許文献３０】特公平７−８４３９０号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
ところが、バナバエキスについては上述のようにコロソリン酸の濃縮、あるいは５０〜９９％有機溶媒を含む溶媒で抽出された脂溶性バナバエキスの苦味をアルカリ処理及び酸処理により改善した技術は公知であるが、ＬＯＸ−１アンタゴニスト作用を高活性に有する味の品質が客観的に確保されたエキスは全く知られていない。
【０００７】
本発明は、これらの背景を考慮してなされたものであり、その目的とするところは、バナバエキスの味についての一定の基準を設定することにより、分析機器によって一定以上の味の品質を有することが客観的に評価され、同時にＬＯＸ−１アンタゴニスト作用を高活性に有するバナバエキスを提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明の要旨は、
（１）カラム「ＨｉＴｒａｐ ＤＥＡＥ ＦＦ」（ＧＥヘルスケア社製）１ｍｌを内装した液体クロマトグラフィー装置を用い、その測定条件が、溶媒は５０ｍＭ ＨＥＰＥＳ（ｐＨ８．０）、０−１Ｍ ＮａＣｌ、グラジェントは２０カラムボリューム、流速は１ｍｌ／ｍｉｎ、バナバエキスは０．５ｍｇを負荷した場合のクロマトグラフィーにおいて、ＮａＣｌ濃度が０．１−０．３Ｍ付近で得られる２３０ｎｍのピーク中でピーク面積が最大であるピークＢと、素通り画分で得られる２３０ｎｍのピークＡの面積をそれぞれ求め、Ｂに対するＡの面積比が２０％以下となることを特徴とするバナバエキス、
（２）レクチン様酸化低密度リポ蛋白質受容体（ＬＯＸ−１）アンタゴニスト作用を有する前記（１）記載のバナバエキス、
（３）水又は４０％以下の有機溶媒を含有する水溶液を用いてバナバから得られた抽出物を、活性炭、芳香族系合成吸着剤及びメタクリル系合成吸着剤からなる群より選ばれる１種以上で接触処理して得られる、前記（１）又は（２）記載のバナバエキス、
（４）水又は４０％以下の有機溶媒を含有する水溶液を用いてバナバを抽出処理し、次いで、得られた抽出物を活性炭、芳香族系合成吸着剤及びメタクリル系合成吸着剤からなる群より選ばれる１種以上で接触処理する工程を有する、前記（１）〜（３）いずれか記載のバナバエキスの製造方法に関する。
【発明の効果】
【０００９】
本発明によれば、液体カラムクロマトグラフィーによってバナバエキスを客観的に評価するために、ＬＯＸ−１アンタゴニスト作用を高活性に有する「良い味」の基準が一定なバナバエキスが明らかとなる。したがって、従来のようにバナバエキス特有の苦味・渋みを含まない又は顕著に低減されており、しかも一定水準以上のＬＯＸ−１アンタゴニスト作用を高活性に有するバナバエキスを簡便に判別して、提供することが可能となる。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１】図１は実施例１において、各バナバエキスのサンプル（終濃度０．０１ｍｇ／ｍｌ）を用いてＬＯＸ−１アンタゴニスト活性を検証した結果を示すグラフである。
【図２】図２は実施例２について、水抽出した場合のクロマトグラフィーのクロマトグラムを示している。縦軸は２３０ｎｍの吸収曲線を示しており、横軸は溶出時間を示している。
【図３】図３は実施例３について、２０％エタノール抽出した場合のクロマトグラフフィーのクロマトグラムを示している。縦軸は２３０ｎｍの吸収曲線を示しており、横軸は溶出時間を示している。
【図４】図４は比較例１について、水抽出した場合のクロマトグラフフィーのクロマトグラムを示している。縦軸は２３０ｎｍの吸収曲線を示しており、横軸は溶出時間を示している。
【図５】図５は実施例１で得られたバナバエキスを２３０ｎｍ、２８０ｎｍ、２１４ｎｍの吸光度で測定して得られるクロマトグラムを示している。なお、図中、実線は２３０ｎｍ、太い破線は２８０ｎｍ、細かい破線は２１４ｎｍの場合を示す。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
第一の本発明は、カラム「ＨｉＴｒａｐ ＤＥＡＥ ＦＦ１ｍｌ」（ＧＥヘルスケア社製）を内装した液体クロマトグラフィー装置を用い、その測定条件が、溶媒は５０ｍＭ ＨＥＰＥＳ（ｐＨ８．０），０−１Ｍ ＮａＣｌ、グラジェントは２０カラムボリューム、流速は１ｍｌ／ｍｉｎ、バナバエキスは０．５ｍｇを負荷した場合のクロマトグラフィーにおいて、ＮａＣｌ濃度が０．１−０．３Ｍ付近で得られる２３０ｎｍのピーク中でピーク面積が最大であるピークＢと、素通り画分で得られる２３０ｎｍのピークＡの面積をそれぞれ求め、Ｂに対するＡの面積比が２０％以下となることを特徴とするバナバエキスである。
【００１２】
本発明に用いる液体クロマトグラフィー装置としては、２３０ｎｍの吸光度を測定できる市販の装置であればよく、例えばＧＥヘルスケア社製の「アクタデザインシリーズ」、バイオラッドラボラトリーズ社製の「ＢｉｏＬｏｇｉｃシリーズ」などが挙げられる。
【００１３】
本発明では、前記液体クロマトグラフィー装置に装着するカラムとしては、イオン交換樹脂として「ＨｉＴｒａｐ ＤＥＡＥ ＦＦ」（商品名、ＧＥヘルスケア社製）を１ｍＬ充填されたものを用いる。この樹脂は、ジエチルアミノエチル（ＤＥＡＥ）をイオン交換体として有する樹脂である。カラムの容量については、前記イオン交換樹脂が１ｍＬ充填できるものであればよく、また、カラムの材質については、特に限定はない。
【００１４】
前記液体クロマトグラフィーに用いる溶媒としては、５０ｍＭ ＨＥＰＥＳ（ｐＨ８．０）を使用し、０〜１Ｍ ＮａＣｌのグラジエントを２０カラムボリュームで行う。また、流速は１ｍｌ／ｍｉｎであり、カラムに付加するバナバエキスは０．５ｍｇとする。なお、装置で測定する時のカラム温度は、４〜３７℃で行えばよい。
【００１５】
本発明では、苦味、渋味など不快な味があったバナバエキスを前記カラムに供し、前記の条件下で液体クロマトグラフィーを行って、経時的に溶出される成分を含む溶媒の２３０ｎｍの吸光度を測定することで、苦味、渋味などの原因となる成分が判別できる。
【００１６】
苦味、渋味などの原因となる成分については、前記カラムには吸着しないため、素通り画分のピークで表される。このピークを本発明ではピークＡと認定する。
【００１７】
一方、他の成分は、ＮａＣｌ０〜０．３Ｍ付近で溶出されるピークとして現れる。このピークには複数の成分が含有されていると考えられるが、２３０ｎｍの吸光度で測定することで、１本または数本のピークとしてまとめて表現することができる。本発明では、複数のピークトップに分かれることもあるが、これらの中で最大のピーク面積を有するピークを本発明ではピークＢと認定する。
【００１８】
中でも、本発明のバナバエキスは、ＬＯＸ−１アンタゴニスト作用を有することが好ましい。本発明においてＬＯＸ−１アンタゴニスト作用とは、ＬＯＸ−１への酸化ＬＤＬの結合を阻害することを意味する。ＬＯＸ−１アンタゴニスト作用については、例えば、アンタゴニスト活性として、前記特許文献１に記載の方法に準じてＬＯＸ−１に対する酸化ＬＤＬ結合率を測定することで評価することができる。
【００１９】
本発明のバナバエキスは、ピークＡ及びピークＢのピーク面積を測定した場合に、ピークＢの面積に対するピークＡの面積の比率が２０％以下となるものである。このように、ピークＡの面積がピークＢの面積に比べて顕著に低いクロマトグラムを示すバナバエキスは、苦味、渋味などの成分が低減されたものとなり、従来のバナバエキスに比べて、顕著に味の品質が向上されたものである。本発明において、ゼロベースで行った場合のピークＢに対するピークＡの面積比は、好ましくは１〜１５％である。なお、前記面積比が大きくなる、つまりピークＢに対するピークＡの面積が大きくなると、バナバエキスの苦味や渋みが強くなる。
ピーク面積の測定方法については、液体クロマトグラフィーに接続している吸光度計に組み込まれた計算プログラムに準じて算出された数値を用いればよい。
【００２０】
以上のような物性を有するバナバエキスは、例えば、以下のようにして調製することができる。
【００２１】
本発明に用いるバナバ（学名：ラジャーストロエミア スペシオサ パース（Ｌａｇｅｒｓｔｒｏｅｍｉａ ｓｐｅｃｉｏｓａ Ｐａｒｓ．））は、ミソハギ科サルスベリ属に属する植物で、同じ科に属する植物として例えばサルスベリ、バナバ等が挙げられるが、バナバが本発明においては好ましく用いられる。抽出処理時に供するバナバとしては、バナバを所望の大きさにカットしたり、粉砕処理したものを用いればよいが、特に限定はない。
【００２２】
本発明では、前記バナバの植物体からの抽出物を用いる。例えば、前記抽出物としては、前記バナバの葉、茎又は根由来抽出物、該抽出物の分画物、又はこれらの濃縮物のいずれでもよく、またこれらの混合物でもよい。また、抽出に用いた溶媒を乾燥させて乾固した固体状物でも、該固体状物を水等の溶媒に溶解させたものでもよい。なお、植物体の粉砕物を取り除かず、混合した状態のものも植物抽出物として使用できる。
【００２３】
バナバからの抽出処理は、連続式、還流式、バッチ式、浸漬式、超音波処理等の方法で常法により任意の温度・時間で行う。例えば、バナバの葉、茎又は根をミキサー等で破砕処理し、抽出溶媒に室温で数時間〜数日間の浸漬、抽出溶媒の煮沸温度で１〜５時間還流しながら、あるいは抽出溶媒中での短時間の超音波処理をして、抽出を行う。その後、抽出液から破砕残渣を取り除き、減圧又は限外濾過により抽出液を濃縮する。さらに必要に応じて溶媒を完全に除去して乾固するか凍結乾燥を行ってもよい。また、破砕残渣は取り除かずに濃縮等の処理を行ってもよい。
【００２４】
前記抽出に用いる溶媒としては、水又は４０％以下の有機溶媒を含有する水溶液が好ましい。有機溶媒としては、水と混和可能な溶媒であればよい。中でも、食品として用いる観点から、水又は２０％以下のエタノールを含有する水溶液で抽出処理することが好ましい。
【００２５】
このようにして得られた抽出物は、特有の苦味、渋味を有するものであり、前記液体クロマトグラフィーに供した場合、ピークＢに対するピークＡの面積比が３０％を超えるものとなる。
【００２６】
これに対して、本発明では、前記抽出物を、活性炭、芳香族系合成吸着剤及びメタクリル系合成吸着剤からなる群より選ばれる１種以上で接触処理することで、苦味、渋み成分を顕著に低減させることが可能となる。
なお、合成吸着剤とは、各種の合成技術により活性炭よりも比較的大きな多孔質構造を持たせた球状の架橋高分子をいい、樹脂内の細孔表面と被吸着物質間の物理的相互作用により溶液中から種々の有機物を吸着することができるものである。
【００２７】
前記芳香族系合成吸着剤としては、三菱化学（株）製のＨＰシリーズ、ＳＰ８００シリーズ、ＳＰ７００、ＳＰ７０、芳香族系修飾型ＳＰ２０７等が挙げられる。メタクリル系合成吸着剤としては、三菱化学（株）製のメタクリル酸エステル系ＨＰ２ＭＧ等が挙げられる。
中でも、活性炭又は三菱化学（株）製のＳＰ８００シリーズ、ＳＰ７００、ＳＰ７０、芳香族系修飾型ＳＰ２０７等の芳香族系合成吸着剤を用いた場合には、ＬＯＸ−１アンタゴニスト作用が顕著に保持されるため、好ましい。
【００２８】
前記接触処理は、溶媒中で前記抽出物と活性炭、芳香族系合成吸着剤又はメタクリル系合成吸着剤等の担体とをバッチまたはカラムを用いて接触させる処理であればよい。
例えば、バッチ法による接触処理では、抽出物と前記担体とを攪拌してもよいし、静置してもよい。また、カラムによる接触処理では、所望の容量のカラムに前記担体を充填したのち、所望の流速で抽出物を流せばよい。なお、接触処理における温度条件としては、室温下であればよく、特に限定はない。
また、接触処理に使用する溶媒としては、水又は４０％以下の有機溶媒を含有する水溶液等が挙げられる。有機溶媒としては、エタノールが好ましい。
また、溶媒中において、バナバの抽出物と前記担体との混合量は、効率よく処理できる観点から、１０００：１〜１０：１（重量比）であることが好ましいが、特に限定はない。
【００２９】
以上のようにして得られたバナバエキスは、苦味等が顕著に低減されたものであるため、そのまま飲食品に添加することができるし、必要であれば、濃縮、ドライパウダー化、凍結乾燥等の処理を施した後に、飲食品に添加してもよい。
【実施例】
【００３０】
次に、本発明をその実施例によって具体的に説明する。
【００３１】
［実施例１］
各実施例において、液体クロマトグラフィーの測定条件は以下の通りである。
【００３２】
使用装置：ＧＥヘルスケア社製の「ＡＫＴＡ Ｐｕｒｉｆｉｅｒ」
カラム：ＧＥヘルスケア社製の「ＨｉＴｒａｐ ＤＥＡＥ ＦＦ」１ｍｌ
溶媒：５０ｍＭ ＨＥＰＥＳ（ｐＨ８．０）、０−１Ｍ ＮａＣｌ
流速：１ｍｌ／ｍｉｎ
試料：５ｍｍ角にカットしたバナバ葉１重量部に対して２０倍量の水で６０℃、１時間抽出し、得られた抽出液をコントロール１とした。さらにこの抽出液１容量に対して重量で１０％となるように活性炭で３０分間処理したものを試料１とした。また、活性炭の代わりにポリクラールＶＴ（ＩＳＰ Ｉｎｃ．社製）で３０分間処理したものを試料２とした。なお、ポリクラールＶＴ（商品名、ＩＳＰ Ｉｎｃ．社製）は、飲料において一般的に使用されているポリビニルポリピロリドン製の清澄ろ過助剤である。
【００３３】
また、水の代わりに２０％エタノールで抽出した同様のものをコントロール２、活性炭処理後のものを試料３とした。
【００３４】
評価方法：液体クロマトグラフィー測定において、０．１−０．３Ｍ ＮａＣｌ溶出付近に出現したピークＢの面積と素通り画分のピークＡの面積比をゼロベースとして算出した。また、上記のコントロールと試料の各々を１０名でその味を評価した。
【００３５】
ＬＯＸ−１アンタゴニスト活性測定方法：コントロール及び各試料のＬＯＸ−１アンタゴニスト活性については、本件出願人が既に提出している特許文献１に記載の方法と同様にして、ＬＯＸ−１に対する酸化ＬＤＬ結合阻害率を測定して評価した。
【００３６】
上記のコントロール１、２および試料１〜３について、ピークＡとピークＢの面積比、及び１０名の評価員が飲んでその味を確認した結果を表１に示す。表１の結果より、水又はエタノールの抽出物に活性炭処理したものは「美味しい」との評価を受けたが、ポリクラールＶＴ処理したものは「苦い」との評価であった。なお、エタノール抽出されたバナバエキスについてはエタノール除去後に味の評価を行った。
【００３７】
【表１】
【００３８】
また、上記のコントロール１、２および試料１〜３についてのＬＯＸ−１アンタゴニスト活性の結果を図１に示す。図１の結果から明らかなように、活性炭処理した試料については、コントロールと同等、あるいはそれ以上に酸化ＬＤＬの結合率を阻害していることから、比活性が高くなっており、ＬＯＸ−１アンタゴニスト活性が濃縮されていることが示された。一方、ポリクラールＶＴで処理したものは比活性が低下していた。
【００３９】
［実施例２］
水抽出したバナバエキスについて、未処理と活性炭処理した各サンプルをカラムクロマトグラフィー供し、ピークＡとピークＢの面積比を上記のような評価方法で算出したところ、未処理が４２．７３％、活性炭処理が９．３％であった（図２に得られたクロマトグラムを示す）。
【００４０】
［実施例３］
２０％エタノール抽出したバナバエキスについて、未処理と活性炭処理した各サンプルをカラムクロマトグラフィー供し、ピークＡとピークＢの面積比を上記のような評価方法で算出したところ、未処理が３３．６８％、活性炭処理が９．４６％であった（図３に得られたクロマトグラムを示す）。
【００４１】
［比較例１］
水抽出したバナバエキスについて、未処理とポリクラールＶＴ処理した各サンプルをカラムクロマトグラフィー供し、ピークＡとピークＢの面積比を上記のような評価方法で算出したところ、未処理が４２．７３％、活性炭処理が３６．３７％であった（図４に得られたクロマトグラムを示す）。
【００４２】
上述した実施例以外にも種々の条件で抽出したバナバエキスについて同様の評価方法により、味の評価を行い、その結果を総合的に検討した。その結果、カラムクロマトグラフィーによって求めたピークＢに対するピークＡの面積比が２０％以下では「美味しい」となり２０〜３０％では「やや苦い」となり、３０％以上の場合には「苦い」となることが判明した。
【００４３】
［実施例４］
コントロール２を、活性炭を含む複数の担体で接触処理した以外は、実施例１と同様にしてバナバエキスを得て、味の評価とＬＯＸ−１アンタゴニスト活性の有無を測定した。これらの結果を表２に示す。
なお、使用した担体としては、以下のとおり。
「ＷＡ３０」：弱塩基性陰イオン交換樹脂「ダイヤイオンＷＡ３０」（製品名）
「ＳＫ１Ｂ」：強酸性陽イオン交換樹脂「ダイヤイオンＳＫ１Ｂ」（製品名）
「ＨＰ2ＭＧ」：メタクリル酸エステル系合成吸着剤「ダイヤイオンＨＰ2ＭＧ」（製品名）
「ＨＰ２０」：芳香族系合成吸着剤「ダイヤイオンＨＰ２０」（製品名）
「ＳＰ８５０」：芳香族系合成吸着剤「セパビーズＳＰ８５０」（製品名）
「ＳＰ７００」：芳香族系合成吸着剤「セパビーズＳＰ７００」（製品名）
「ＳＰ２０７」：芳香族系修飾型合成吸着剤「セパビーズＳＰ２０７」（製品名）
「ＳＰ７０」：芳香族系合成吸着剤「セパビーズＳＰ７０」（製品名）
いずれも三菱化学（株）製のものである。
【００４４】
【表２】
【００４５】
なお、味の評価については、「０」苦味なし、「１」苦味を少し感じる、「２」苦味を感じる、「３」苦味を強く感じるという基準で行った。
【００４６】
表２の結果より、メタクリル酸エステル系合成吸着剤、芳香族系合成吸着剤及び活性炭を用いた接触処理により、苦味が顕著に低減したバナバエキスが得られることがわかる。
さらに、セパビーズＳＰ８５０、ＳＰ７００、ＳＰ２０７、ＳＰ７０と活性炭を用いた接触処理により、ＬＯＸ−１アンタゴニスト活性も顕著に保持されていることがわかる。
【００４７】
［実施例５］
実施例１で得られた試料２のバナバエキスを２３０ｎｍ、２８０ｎｍ、２１４ｎｍの吸光度で測定して得られたクロマトグラムを比較した。結果を図５に示す。図５の結果より、２１４ｎｍの場合（細かい破線）では、ピークが細かすぎ、一方、２８０ｎｍの場合（太い破線）ではピークＡが低く、またピークＢが不明確であった。これに対して、２３０ｎｍの場合（実線）では、ピークＡ、ピークＢがほぼ一本で見られるため、区別し易いことがわかる。特に、ピークＢについては、バナバエキスの処理条件を変えた場合でも２３０ｎｍの吸収波長で測定すれば、ピークの出方に処理条件の違いによる影響がほとんど見られないことから、２３０ｎｍの吸収波長で測定した場合にピークＢは安定なベースとすることが可能であった。
なお、２８０ｎｍは一般的に蛋白質を、２１４ｎｍはペプチドをそれぞれ測定する場合に使用される波長とされている。
【００４８】
また、上記の２３０ｎｍのクロマトグラムにおいてピークＡ，ピークＢを含む画分について、２２０〜８００ｎｍの範囲で１ｎｍ毎に吸光度をスキャンしたところ、ピークＡ、Ｂともに、２３０ｎｍが吸収極大波長であることがわかった。
【００４９】
［実施例６］
下記成分を水に添加・混合し、常法に基づいて、ゼリーを作製した。
ハイフラクトＭ ２０％
ゲル化剤 ０．１−０．５％
砂糖 １％
バナバエキス ０．３％
クエン酸 ０．３％
フレーバー ０．１％
最終的にクエン酸ＮａでｐＨを３．７に調製した。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、バナバ（Ｌａｇｅｒｓｔｒｏｅｍｉａ ｓｐｅｃｉｏｓａ Ｌ．）植物から調整したエキスに関し、より詳細には、ＬＯＸ−１（レクチン様酸化低密度リポ蛋白質受容体）アンタゴニスト作用を有する味の品質が確保されたバナバエキス、及びその製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
バナバは、フトモモ目ミソハギ科に属する植物で、通称「オオサルスベリ」とも称され、フィリピンをはじめ、インド、マレーシア、中国南部などの東南アジア、オーストラリアなどに広く生育している植物である。古来、フィリピンにおいては、乾燥したバナバ葉を煎じて飲用されており、糖尿病の民間治療剤としても広く知られている。また血糖値上昇抑制作用のみならず、本発明者らにより、水溶性・脂溶性を問わずバナバエキスは動脈硬化の初期病変に関わるＬＯＸ−１に対するアンタゴニスト作用を有することが開示されている（特許文献１）。よって、これらの効果効能を考慮すると、長期的・経時的にバナバエキスを服用することは健康を維持することからも有効な手段と考えられる。
【０００３】
しかしながら通常のバナバエキスは他の有用植物由来エキスでよく見られるのと同様に、苦味や渋み、あるいはえぐ味などを有するために適用範囲が限定され、これを広範囲の分野で有効活用するうえで大きな阻害要因となっている。これらの苦味や渋みを抑制するために、特に茶の分野では活性炭と接触させる方法（特許文献２〜４）、サイクロデキストリンを用いる方法（特許文献５〜８）、アスコルビン酸とアルカリ金属を用いる方法（特許文献９）、ポリビニルポリピロリドンを用いる方法（特許文献１０，１１）、焙煎する方法（特許文献１２〜１６）などが開示されている。また、バナバエキスにおいては血糖値降下作用のあるコロソリン酸を濃縮する方法（特許文献１７〜２４）、あるいはバナバエキスの苦味を改善する方法（特許文献２５）などが開示されている。
【０００４】
一方で風味の改善方法とは異なり、味の品質を確保する（特許文献２６〜２８）、あるいはその組成物の機能を確保するための特許（特許文献２９，３０）も開示されている。特に味の品質を確保することにおいては、官能試験での評価員の好みや体調に左右されることを排除し、且つ客観的な評価系を構築し、更にその方法に準じた組成物を得ることが目的である。これらの方法の多くはカラムクロマトグラフィーによる味の品質の確保や機能の確保が行われており、有用な手段として利用されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】国際公開第２００７／１１９７８９号パンフレット
【特許文献２】特開２００５−２６３６５０号公報
【特許文献３】特開平１１−１０３８１７号公報
【特許文献４】特開２００２−１５３２１１号公報
【特許文献５】特開２００８−１１８９３３号公報
【特許文献６】特開２００６−１３６２４４号公報
【特許文献７】特開２００５−０７３５３４号公報
【特許文献８】特開平１０−００４９１９号公報
【特許文献９】特開２００２−９７１８７号公報
【特許文献１０】特開２００２−２３８４５８号公報
【特許文献１１】特開２００４−１５９５９７号公報
【特許文献１２】特開２００８−１３６３６７号公報
【特許文献１３】特開２００７−０８９４４４号公報
【特許文献１４】特開２００５−１８５１２８号公報
【特許文献１５】特開２００３−２８４５２３号公報
【特許文献１６】特開平１１−２２５７１８号公報
【特許文献１７】特開２０００−１６９３８４号公報
【特許文献１８】特開２００５−２６３６５０号公報
【特許文献１９】特開２００５−３０６７８０号公報
【特許文献２０】特表２００８−５２５４９７号公報
【特許文献２１】特許第３６３１７４２号公報
【特許文献２２】特許第３６３１７４５号公報
【特許文献２３】特許第３６３１７４６号公報
【特許文献２４】特許第３６４１４８０号公報
【特許文献２５】国際公開第２００５／０９９４８６号パンフレット
【特許文献２６】特許第３６２４２７２号公報
【特許文献２７】特許第３６７１１７９号公報
【特許文献２８】特許第３９４６４６２号公報
【特許文献２９】特許第４１９７３４７号公報
【特許文献３０】特公平７−８４３９０号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
ところが、バナバエキスについては上述のようにコロソリン酸の濃縮、あるいは５０〜９９％有機溶媒を含む溶媒で抽出された脂溶性バナバエキスの苦味をアルカリ処理及び酸処理により改善した技術は公知であるが、ＬＯＸ−１アンタゴニスト作用を高活性に有する味の品質が客観的に確保されたエキスは全く知られていない。
【０００７】
本発明は、これらの背景を考慮してなされたものであり、その目的とするところは、バナバエキスの味についての一定の基準を設定することにより、分析機器によって一定以上の味の品質を有することが客観的に評価され、同時にＬＯＸ−１アンタゴニスト作用を高活性に有するバナバエキスを提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明の要旨は、
（１）カラム「ＨｉＴｒａｐ ＤＥＡＥ ＦＦ」（ＧＥヘルスケア社製）１ｍｌを内装した液体クロマトグラフィー装置を用い、その測定条件が、溶媒は５０ｍＭ ＨＥＰＥＳ（ｐＨ８．０）、０−１Ｍ ＮａＣｌ、グラジェントは２０カラムボリューム、流速は１ｍｌ／ｍｉｎ、バナバエキスは０．５ｍｇを負荷した場合のクロマトグラフィーにおいて、ＮａＣｌ濃度が０．１−０．３Ｍ付近で得られる２３０ｎｍのピーク中でピーク面積が最大であるピークＢと、素通り画分で得られる２３０ｎｍのピークＡの面積をそれぞれ求め、Ｂに対するＡの面積比が２０％以下となることを特徴とするバナバエキス、
（２）レクチン様酸化低密度リポ蛋白質受容体（ＬＯＸ−１）アンタゴニスト作用を有する前記（１）記載のバナバエキス、
（３）水又は４０％以下の有機溶媒を含有する水溶液を用いてバナバから得られた抽出物を、活性炭、芳香族系合成吸着剤及びメタクリル系合成吸着剤からなる群より選ばれる１種以上で接触処理して得られる、前記（１）又は（２）記載のバナバエキス、
（４）水又は４０％以下の有機溶媒を含有する水溶液を用いてバナバを抽出処理し、次いで、得られた抽出物を活性炭、芳香族系合成吸着剤及びメタクリル系合成吸着剤からなる群より選ばれる１種以上で接触処理する工程を有する、前記（１）〜（３）いずれか記載のバナバエキスの製造方法に関する。
【発明の効果】
【０００９】
本発明によれば、液体カラムクロマトグラフィーによってバナバエキスを客観的に評価するために、ＬＯＸ−１アンタゴニスト作用を高活性に有する「良い味」の基準が一定なバナバエキスが明らかとなる。したがって、従来のようにバナバエキス特有の苦味・渋みを含まない又は顕著に低減されており、しかも一定水準以上のＬＯＸ−１アンタゴニスト作用を高活性に有するバナバエキスを簡便に判別して、提供することが可能となる。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１】図１は実施例１において、各バナバエキスのサンプル（終濃度０．０１ｍｇ／ｍｌ）を用いてＬＯＸ−１アンタゴニスト活性を検証した結果を示すグラフである。
【図２】図２は実施例２について、水抽出した場合のクロマトグラフィーのクロマトグラムを示している。縦軸は２３０ｎｍの吸収曲線を示しており、横軸は溶出時間を示している。
【図３】図３は実施例３について、２０％エタノール抽出した場合のクロマトグラフフィーのクロマトグラムを示している。縦軸は２３０ｎｍの吸収曲線を示しており、横軸は溶出時間を示している。
【図４】図４は比較例１について、水抽出した場合のクロマトグラフフィーのクロマトグラムを示している。縦軸は２３０ｎｍの吸収曲線を示しており、横軸は溶出時間を示している。
【図５】図５は実施例１で得られたバナバエキスを２３０ｎｍ、２８０ｎｍ、２１４ｎｍの吸光度で測定して得られるクロマトグラムを示している。なお、図中、実線は２３０ｎｍ、太い破線は２８０ｎｍ、細かい破線は２１４ｎｍの場合を示す。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
第一の本発明は、カラム「ＨｉＴｒａｐ ＤＥＡＥ ＦＦ１ｍｌ」（ＧＥヘルスケア社製）を内装した液体クロマトグラフィー装置を用い、その測定条件が、溶媒は５０ｍＭ ＨＥＰＥＳ（ｐＨ８．０），０−１Ｍ ＮａＣｌ、グラジェントは２０カラムボリューム、流速は１ｍｌ／ｍｉｎ、バナバエキスは０．５ｍｇを負荷した場合のクロマトグラフィーにおいて、ＮａＣｌ濃度が０．１−０．３Ｍ付近で得られる２３０ｎｍのピーク中でピーク面積が最大であるピークＢと、素通り画分で得られる２３０ｎｍのピークＡの面積をそれぞれ求め、Ｂに対するＡの面積比が２０％以下となることを特徴とするバナバエキスである。
【００１２】
本発明に用いる液体クロマトグラフィー装置としては、２３０ｎｍの吸光度を測定できる市販の装置であればよく、例えばＧＥヘルスケア社製の「アクタデザインシリーズ」、バイオラッドラボラトリーズ社製の「ＢｉｏＬｏｇｉｃシリーズ」などが挙げられる。
【００１３】
本発明では、前記液体クロマトグラフィー装置に装着するカラムとしては、イオン交換樹脂として「ＨｉＴｒａｐ ＤＥＡＥ ＦＦ」（商品名、ＧＥヘルスケア社製）を１ｍＬ充填されたものを用いる。この樹脂は、ジエチルアミノエチル（ＤＥＡＥ）をイオン交換体として有する樹脂である。カラムの容量については、前記イオン交換樹脂が１ｍＬ充填できるものであればよく、また、カラムの材質については、特に限定はない。
【００１４】
前記液体クロマトグラフィーに用いる溶媒としては、５０ｍＭ ＨＥＰＥＳ（ｐＨ８．０）を使用し、０〜１Ｍ ＮａＣｌのグラジエントを２０カラムボリュームで行う。また、流速は１ｍｌ／ｍｉｎであり、カラムに付加するバナバエキスは０．５ｍｇとする。なお、装置で測定する時のカラム温度は、４〜３７℃で行えばよい。
【００１５】
本発明では、苦味、渋味など不快な味があったバナバエキスを前記カラムに供し、前記の条件下で液体クロマトグラフィーを行って、経時的に溶出される成分を含む溶媒の２３０ｎｍの吸光度を測定することで、苦味、渋味などの原因となる成分が判別できる。
【００１６】
苦味、渋味などの原因となる成分については、前記カラムには吸着しないため、素通り画分のピークで表される。このピークを本発明ではピークＡと認定する。
【００１７】
一方、他の成分は、ＮａＣｌ０〜０．３Ｍ付近で溶出されるピークとして現れる。このピークには複数の成分が含有されていると考えられるが、２３０ｎｍの吸光度で測定することで、１本または数本のピークとしてまとめて表現することができる。本発明では、複数のピークトップに分かれることもあるが、これらの中で最大のピーク面積を有するピークを本発明ではピークＢと認定する。
【００１８】
中でも、本発明のバナバエキスは、ＬＯＸ−１アンタゴニスト作用を有することが好ましい。本発明においてＬＯＸ−１アンタゴニスト作用とは、ＬＯＸ−１への酸化ＬＤＬの結合を阻害することを意味する。ＬＯＸ−１アンタゴニスト作用については、例えば、アンタゴニスト活性として、前記特許文献１に記載の方法に準じてＬＯＸ−１に対する酸化ＬＤＬ結合率を測定することで評価することができる。
【００１９】
本発明のバナバエキスは、ピークＡ及びピークＢのピーク面積を測定した場合に、ピークＢの面積に対するピークＡの面積の比率が２０％以下となるものである。このように、ピークＡの面積がピークＢの面積に比べて顕著に低いクロマトグラムを示すバナバエキスは、苦味、渋味などの成分が低減されたものとなり、従来のバナバエキスに比べて、顕著に味の品質が向上されたものである。本発明において、ゼロベースで行った場合のピークＢに対するピークＡの面積比は、好ましくは１〜１５％である。なお、前記面積比が大きくなる、つまりピークＢに対するピークＡの面積が大きくなると、バナバエキスの苦味や渋みが強くなる。
ピーク面積の測定方法については、液体クロマトグラフィーに接続している吸光度計に組み込まれた計算プログラムに準じて算出された数値を用いればよい。
【００２０】
以上のような物性を有するバナバエキスは、例えば、以下のようにして調製することができる。
【００２１】
本発明に用いるバナバ（学名：ラジャーストロエミア スペシオサ パース（Ｌａｇｅｒｓｔｒｏｅｍｉａ ｓｐｅｃｉｏｓａ Ｐａｒｓ．））は、ミソハギ科サルスベリ属に属する植物で、同じ科に属する植物として例えばサルスベリ、バナバ等が挙げられるが、バナバが本発明においては好ましく用いられる。抽出処理時に供するバナバとしては、バナバを所望の大きさにカットしたり、粉砕処理したものを用いればよいが、特に限定はない。
【００２２】
本発明では、前記バナバの植物体からの抽出物を用いる。例えば、前記抽出物としては、前記バナバの葉、茎又は根由来抽出物、該抽出物の分画物、又はこれらの濃縮物のいずれでもよく、またこれらの混合物でもよい。また、抽出に用いた溶媒を乾燥させて乾固した固体状物でも、該固体状物を水等の溶媒に溶解させたものでもよい。なお、植物体の粉砕物を取り除かず、混合した状態のものも植物抽出物として使用できる。
【００２３】
バナバからの抽出処理は、連続式、還流式、バッチ式、浸漬式、超音波処理等の方法で常法により任意の温度・時間で行う。例えば、バナバの葉、茎又は根をミキサー等で破砕処理し、抽出溶媒に室温で数時間〜数日間の浸漬、抽出溶媒の煮沸温度で１〜５時間還流しながら、あるいは抽出溶媒中での短時間の超音波処理をして、抽出を行う。その後、抽出液から破砕残渣を取り除き、減圧又は限外濾過により抽出液を濃縮する。さらに必要に応じて溶媒を完全に除去して乾固するか凍結乾燥を行ってもよい。また、破砕残渣は取り除かずに濃縮等の処理を行ってもよい。
【００２４】
前記抽出に用いる溶媒としては、水又は４０％以下の有機溶媒を含有する水溶液が好ましい。有機溶媒としては、水と混和可能な溶媒であればよい。中でも、食品として用いる観点から、水又は２０％以下のエタノールを含有する水溶液で抽出処理することが好ましい。
【００２５】
このようにして得られた抽出物は、特有の苦味、渋味を有するものであり、前記液体クロマトグラフィーに供した場合、ピークＢに対するピークＡの面積比が３０％を超えるものとなる。
【００２６】
これに対して、本発明では、前記抽出物を、活性炭、芳香族系合成吸着剤及びメタクリル系合成吸着剤からなる群より選ばれる１種以上で接触処理することで、苦味、渋み成分を顕著に低減させることが可能となる。
なお、合成吸着剤とは、各種の合成技術により活性炭よりも比較的大きな多孔質構造を持たせた球状の架橋高分子をいい、樹脂内の細孔表面と被吸着物質間の物理的相互作用により溶液中から種々の有機物を吸着することができるものである。
【００２７】
前記芳香族系合成吸着剤としては、三菱化学（株）製のＨＰシリーズ、ＳＰ８００シリーズ、ＳＰ７００、ＳＰ７０、芳香族系修飾型ＳＰ２０７等が挙げられる。メタクリル系合成吸着剤としては、三菱化学（株）製のメタクリル酸エステル系ＨＰ２ＭＧ等が挙げられる。
中でも、活性炭又は三菱化学（株）製のＳＰ８００シリーズ、ＳＰ７００、ＳＰ７０、芳香族系修飾型ＳＰ２０７等の芳香族系合成吸着剤を用いた場合には、ＬＯＸ−１アンタゴニスト作用が顕著に保持されるため、好ましい。
【００２８】
前記接触処理は、溶媒中で前記抽出物と活性炭、芳香族系合成吸着剤又はメタクリル系合成吸着剤等の担体とをバッチまたはカラムを用いて接触させる処理であればよい。
例えば、バッチ法による接触処理では、抽出物と前記担体とを攪拌してもよいし、静置してもよい。また、カラムによる接触処理では、所望の容量のカラムに前記担体を充填したのち、所望の流速で抽出物を流せばよい。なお、接触処理における温度条件としては、室温下であればよく、特に限定はない。
また、接触処理に使用する溶媒としては、水又は４０％以下の有機溶媒を含有する水溶液等が挙げられる。有機溶媒としては、エタノールが好ましい。
また、溶媒中において、バナバの抽出物と前記担体との混合量は、効率よく処理できる観点から、１０００：１〜１０：１（重量比）であることが好ましいが、特に限定はない。
【００２９】
以上のようにして得られたバナバエキスは、苦味等が顕著に低減されたものであるため、そのまま飲食品に添加することができるし、必要であれば、濃縮、ドライパウダー化、凍結乾燥等の処理を施した後に、飲食品に添加してもよい。
【実施例】
【００３０】
次に、本発明をその実施例によって具体的に説明する。
【００３１】
［実施例１］
各実施例において、液体クロマトグラフィーの測定条件は以下の通りである。
【００３２】
使用装置：ＧＥヘルスケア社製の「ＡＫＴＡ Ｐｕｒｉｆｉｅｒ」
カラム：ＧＥヘルスケア社製の「ＨｉＴｒａｐ ＤＥＡＥ ＦＦ」１ｍｌ
溶媒：５０ｍＭ ＨＥＰＥＳ（ｐＨ８．０）、０−１Ｍ ＮａＣｌ
流速：１ｍｌ／ｍｉｎ
試料：５ｍｍ角にカットしたバナバ葉１重量部に対して２０倍量の水で６０℃、１時間抽出し、得られた抽出液をコントロール１とした。さらにこの抽出液１容量に対して重量で１０％となるように活性炭で３０分間処理したものを試料１とした。また、活性炭の代わりにポリクラールＶＴ（ＩＳＰ Ｉｎｃ．社製）で３０分間処理したものを試料２とした。なお、ポリクラールＶＴ（商品名、ＩＳＰ Ｉｎｃ．社製）は、飲料において一般的に使用されているポリビニルポリピロリドン製の清澄ろ過助剤である。
【００３３】
また、水の代わりに２０％エタノールで抽出した同様のものをコントロール２、活性炭処理後のものを試料３とした。
【００３４】
評価方法：液体クロマトグラフィー測定において、０．１−０．３Ｍ ＮａＣｌ溶出付近に出現したピークＢの面積と素通り画分のピークＡの面積比をゼロベースとして算出した。また、上記のコントロールと試料の各々を１０名でその味を評価した。
【００３５】
ＬＯＸ−１アンタゴニスト活性測定方法：コントロール及び各試料のＬＯＸ−１アンタゴニスト活性については、本件出願人が既に提出している特許文献１に記載の方法と同様にして、ＬＯＸ−１に対する酸化ＬＤＬ結合阻害率を測定して評価した。
【００３６】
上記のコントロール１、２および試料１〜３について、ピークＡとピークＢの面積比、及び１０名の評価員が飲んでその味を確認した結果を表１に示す。表１の結果より、水又はエタノールの抽出物に活性炭処理したものは「美味しい」との評価を受けたが、ポリクラールＶＴ処理したものは「苦い」との評価であった。なお、エタノール抽出されたバナバエキスについてはエタノール除去後に味の評価を行った。
【００３７】
【表１】
【００３８】
また、上記のコントロール１、２および試料１〜３についてのＬＯＸ−１アンタゴニスト活性の結果を図１に示す。図１の結果から明らかなように、活性炭処理した試料については、コントロールと同等、あるいはそれ以上に酸化ＬＤＬの結合率を阻害していることから、比活性が高くなっており、ＬＯＸ−１アンタゴニスト活性が濃縮されていることが示された。一方、ポリクラールＶＴで処理したものは比活性が低下していた。
【００３９】
［実施例２］
水抽出したバナバエキスについて、未処理と活性炭処理した各サンプルをカラムクロマトグラフィー供し、ピークＡとピークＢの面積比を上記のような評価方法で算出したところ、未処理が４２．７３％、活性炭処理が９．３％であった（図２に得られたクロマトグラムを示す）。
【００４０】
［実施例３］
２０％エタノール抽出したバナバエキスについて、未処理と活性炭処理した各サンプルをカラムクロマトグラフィー供し、ピークＡとピークＢの面積比を上記のような評価方法で算出したところ、未処理が３３．６８％、活性炭処理が９．４６％であった（図３に得られたクロマトグラムを示す）。
【００４１】
［比較例１］
水抽出したバナバエキスについて、未処理とポリクラールＶＴ処理した各サンプルをカラムクロマトグラフィー供し、ピークＡとピークＢの面積比を上記のような評価方法で算出したところ、未処理が４２．７３％、活性炭処理が３６．３７％であった（図４に得られたクロマトグラムを示す）。
【００４２】
上述した実施例以外にも種々の条件で抽出したバナバエキスについて同様の評価方法により、味の評価を行い、その結果を総合的に検討した。その結果、カラムクロマトグラフィーによって求めたピークＢに対するピークＡの面積比が２０％以下では「美味しい」となり２０〜３０％では「やや苦い」となり、３０％以上の場合には「苦い」となることが判明した。
【００４３】
［実施例４］
コントロール２を、活性炭を含む複数の担体で接触処理した以外は、実施例１と同様にしてバナバエキスを得て、味の評価とＬＯＸ−１アンタゴニスト活性の有無を測定した。これらの結果を表２に示す。
なお、使用した担体としては、以下のとおり。
「ＷＡ３０」：弱塩基性陰イオン交換樹脂「ダイヤイオンＷＡ３０」（製品名）
「ＳＫ１Ｂ」：強酸性陽イオン交換樹脂「ダイヤイオンＳＫ１Ｂ」（製品名）
「ＨＰ2ＭＧ」：メタクリル酸エステル系合成吸着剤「ダイヤイオンＨＰ2ＭＧ」（製品名）
「ＨＰ２０」：芳香族系合成吸着剤「ダイヤイオンＨＰ２０」（製品名）
「ＳＰ８５０」：芳香族系合成吸着剤「セパビーズＳＰ８５０」（製品名）
「ＳＰ７００」：芳香族系合成吸着剤「セパビーズＳＰ７００」（製品名）
「ＳＰ２０７」：芳香族系修飾型合成吸着剤「セパビーズＳＰ２０７」（製品名）
「ＳＰ７０」：芳香族系合成吸着剤「セパビーズＳＰ７０」（製品名）
いずれも三菱化学（株）製のものである。
【００４４】
【表２】
【００４５】
なお、味の評価については、「０」苦味なし、「１」苦味を少し感じる、「２」苦味を感じる、「３」苦味を強く感じるという基準で行った。
【００４６】
表２の結果より、メタクリル酸エステル系合成吸着剤、芳香族系合成吸着剤及び活性炭を用いた接触処理により、苦味が顕著に低減したバナバエキスが得られることがわかる。
さらに、セパビーズＳＰ８５０、ＳＰ７００、ＳＰ２０７、ＳＰ７０と活性炭を用いた接触処理により、ＬＯＸ−１アンタゴニスト活性も顕著に保持されていることがわかる。
【００４７】
［実施例５］
実施例１で得られた試料２のバナバエキスを２３０ｎｍ、２８０ｎｍ、２１４ｎｍの吸光度で測定して得られたクロマトグラムを比較した。結果を図５に示す。図５の結果より、２１４ｎｍの場合（細かい破線）では、ピークが細かすぎ、一方、２８０ｎｍの場合（太い破線）ではピークＡが低く、またピークＢが不明確であった。これに対して、２３０ｎｍの場合（実線）では、ピークＡ、ピークＢがほぼ一本で見られるため、区別し易いことがわかる。特に、ピークＢについては、バナバエキスの処理条件を変えた場合でも２３０ｎｍの吸収波長で測定すれば、ピークの出方に処理条件の違いによる影響がほとんど見られないことから、２３０ｎｍの吸収波長で測定した場合にピークＢは安定なベースとすることが可能であった。
なお、２８０ｎｍは一般的に蛋白質を、２１４ｎｍはペプチドをそれぞれ測定する場合に使用される波長とされている。
【００４８】
また、上記の２３０ｎｍのクロマトグラムにおいてピークＡ，ピークＢを含む画分について、２２０〜８００ｎｍの範囲で１ｎｍ毎に吸光度をスキャンしたところ、ピークＡ、Ｂともに、２３０ｎｍが吸収極大波長であることがわかった。
【００４９】
［実施例６］
下記成分を水に添加・混合し、常法に基づいて、ゼリーを作製した。
ハイフラクトＭ ２０％
ゲル化剤 ０．１−０．５％
砂糖 １％
バナバエキス ０．３％
クエン酸 ０．３％
フレーバー ０．１％
最終的にクエン酸ＮａでｐＨを３．７に調製した。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
カラム「ＨｉＴｒａｐ ＤＥＡＥ ＦＦ」（ＧＥヘルスケア社製）１ｍｌを内装した液体クロマトグラフィー装置を用い、その測定条件が、溶媒は５０ｍＭ ＨＥＰＥＳ（ｐＨ８．０）、０−１Ｍ ＮａＣｌ、グラジェントは２０カラムボリューム、流速は１ｍｌ／ｍｉｎ、バナバエキスは０．５ｍｇを負荷した場合のクロマトグラフィーにおいて、ＮａＣｌ濃度が０．１−０．３Ｍ付近で得られる２３０ｎｍのピーク中でピーク面積が最大であるピークＢと、素通り画分で得られる２３０ｎｍのピークＡの面積をそれぞれ求め、Ｂに対するＡの面積比が２０％以下となることを特徴とするバナバエキス。
【請求項２】
レクチン様酸化低密度リポ蛋白質受容体（ＬＯＸ−１）アンタゴニスト作用を有する請求項１記載のバナバエキス。
【請求項３】
水又は４０％以下の有機溶媒を含有する水溶液を用いてバナバから得られた抽出物を、活性炭、芳香族系合成吸着剤及びメタクリル系合成吸着剤からなる群より選ばれる１種以上で接触処理して得られる、請求項１又は２記載のバナバエキス。
【請求項４】
水又は４０％以下の有機溶媒を含有する水溶液を用いてバナバを抽出処理し、次いで、得られた抽出物を活性炭、芳香族系合成吸着剤及びメタクリル系合成吸着剤からなる群より選ばれる１種以上で接触処理する工程を有する、請求項１〜３いずれか記載のバナバエキスの製造方法。
【請求項１】
カラム「ＨｉＴｒａｐ ＤＥＡＥ ＦＦ」（ＧＥヘルスケア社製）１ｍｌを内装した液体クロマトグラフィー装置を用い、その測定条件が、溶媒は５０ｍＭ ＨＥＰＥＳ（ｐＨ８．０）、０−１Ｍ ＮａＣｌ、グラジェントは２０カラムボリューム、流速は１ｍｌ／ｍｉｎ、バナバエキスは０．５ｍｇを負荷した場合のクロマトグラフィーにおいて、ＮａＣｌ濃度が０．１−０．３Ｍ付近で得られる２３０ｎｍのピーク中でピーク面積が最大であるピークＢと、素通り画分で得られる２３０ｎｍのピークＡの面積をそれぞれ求め、Ｂに対するＡの面積比が２０％以下となることを特徴とするバナバエキス。
【請求項２】
レクチン様酸化低密度リポ蛋白質受容体（ＬＯＸ−１）アンタゴニスト作用を有する請求項１記載のバナバエキス。
【請求項３】
水又は４０％以下の有機溶媒を含有する水溶液を用いてバナバから得られた抽出物を、活性炭、芳香族系合成吸着剤及びメタクリル系合成吸着剤からなる群より選ばれる１種以上で接触処理して得られる、請求項１又は２記載のバナバエキス。
【請求項４】
水又は４０％以下の有機溶媒を含有する水溶液を用いてバナバを抽出処理し、次いで、得られた抽出物を活性炭、芳香族系合成吸着剤及びメタクリル系合成吸着剤からなる群より選ばれる１種以上で接触処理する工程を有する、請求項１〜３いずれか記載のバナバエキスの製造方法。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【公開番号】特開２０１０−２３５４６８（Ｐ２０１０−２３５４６８Ａ）
【公開日】平成２２年１０月２１日（２０１０．１０．２１）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００９−８３０６２（Ｐ２００９−８３０６２）
【出願日】平成２１年３月３０日（２００９．３．３０）
【出願人】（３９００２０１８９）ユーハ味覚糖株式会社 (242)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２２年１０月２１日（２０１０．１０．２１）
【国際特許分類】
【出願日】平成２１年３月３０日（２００９．３．３０）
【出願人】（３９００２０１８９）ユーハ味覚糖株式会社 (242)
【Ｆターム（参考）】
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