ＰＰＡＲγ発現抑制剤
【課題】安全性に優れ、ニキビ等の皮脂脂質異常を伴う皮膚疾患あるいは皮膚トラブルの予防および改善のための医薬品又は食品等として有用なＰＰＡＲγ発現抑制剤の提供。
【解決手段】リン脂質を有効成分とするＰＰＡＲγ発現抑制剤。
【解決手段】リン脂質を有効成分とするＰＰＡＲγ発現抑制剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、皮膚疾患、皮膚トラブルの予防又は改善に有用なペルオキシソーム増殖剤活性化受容体γ（Peroxisome Proliferator Activated Receptor γ：以下、「ＰＰＡＲγ」という。）発現抑制剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
ペルオキシソーム増殖剤活性化受容体（ＰＰＡＲ）は、Ｃ末端側のリガンド結合領域にリガンドが結合することで活性化される転写因子であり、グルココルチコイド、エストロジェン及びビタミンＤ等をリガンドとする核内受容体のスーパーファミリーの一つである（非特許文献１）。ＰＰＡＲはリガンドとの結合により活性化されると、ＰＰＡＲはレチノイドＸレセプター（retinoid X receptor：ＲＸＲ）とヘテロダイマーを形成し標的遺伝子の上流に存在する応答配列peroxisome proliferator response element（ＰＰＲＥ）に結合して標的遺伝子の発現を活性化する。
【０００３】
ＰＰＡＲα及びＰＰＡＲδ及びＰＰＡＲγと呼ばれる３種のアイソフォームが同定されているが、これらは、発現組織が異なっており、それぞれ違った生体機能を有していると報告されている（非特許文献２）。このうち、ＰＰＡＲγは皮脂腺細胞（sebaceous cell）に発現していることが明らかにされ（非特許文献３）、ラット皮脂腺細胞を用いた培養試験においては、ＰＰＡＲγのアゴニストＢＲＬ−４９６５３は、皮脂腺細胞の脂質産生細胞への分化を促進することが示されている。
【０００４】
また、最近の研究では、Ｂ領域の紫外線（ＵＶＢ）や薬剤誘導性の酸化ストレス刺激により、表皮癌細胞や皮脂腺細胞のＰＰＡＲγが活性化され、ＰＰＡＲγ活性に依存的なシクロオキシゲナーゼ２の発現亢進が起こり、炎症反応が惹起されることも示されている（非特許文献４）。
これらのことから、ＰＰＡＲγの発現抑制は、皮脂腺における過剰な脂質産生の抑制を介して、ニキビ等の皮膚脂質以上を伴う皮膚疾患あるいは皮膚トラブルの予防あるいは改善に有効であると考えられる。
ＰＰＡＲγのアンタゴニスト、阻害剤又は発現抑制剤については、２，４−チアゾリジンジオン誘導体及び脂肪酸ＣｏＡチオエステルについてＰＰＡＲγのアンタゴニストとしての作用が報告されているものの（非特許文献５、特許文献１）、これらのＰＰＡＲγアンタゴニストを長期服用する場合においては副作用も懸念されている。
従って、食経験が豊富で安全性が高く副作用の心配のないＰＰＡＲγ抑制剤が望まれている。
【０００５】
一方、リン脂質は、血中コレステロールの低下作用（特許文献２）、抗アレルギー作用（特許文献３）等の作用があることが報告されている。
しかしながら、リン脂質とＰＰＡＲγの発現との関係については全く知られてはいない。
【特許文献１】国際公開第０１／０２１１８１号パンフレット
【特許文献２】特開２００４−１８５９１号公報
【特許文献３】特開２００４−２８５００６号公報
【非特許文献１】Keller, H., Ann. N.Y. Acad. Sci., 684, 157-173 (1993)
【非特許文献２】Braissant, O., Endcrinology, 137, 354-366 (1996)
【非特許文献３】Rosenfield, R. L. Dermatol.,196,43-46,(1998)
【非特許文献４】Zang, Q. J. Invest. Dermatol., 126,42-48,(2006)
【非特許文献５】Oberfield, J.L., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 96, 6102-6106 (1999)
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明は、安全性に優れ、ニキビ等の皮脂脂質異常を伴う皮膚疾患あるいは皮膚トラブルの予防又は改善のための医薬品又は食品等として有用なＰＰＡＲγ発現抑制剤を提供することに関する。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者らは、種々の天然成分について検討した結果、リン脂質にＰＰＡＲγの発現を抑制する効果があることを見出した。
【０００８】
すなわち、本発明は、リン脂質を有効成分とするＰＰＡＲγ発現抑制剤を提供するものである。
【発明の効果】
【０００９】
本発明のＰＰＡＲγ発現抑制剤は、優れたＰＰＡＲγ発現抑制作用を有し、かつ安全性も高いので、ニキビ等の皮脂脂質異常を伴う皮膚疾患あるいは皮膚トラブルの予防又は改善するための医薬品又は食品等として有用である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１０】
本発明のリン脂質としては、ホスファチジルセリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルコリン、ホスファチジルグリセロール、ホスファチジルイノシトール、ホスファチジン酸等のグリセロリン脂質、及び当該リン脂質のリゾ体が好ましく、特に、ホスファチジルエタノールアミン及び／又はリゾホスファチジルエタノールアミン、並びにこれらとホスファチジルコリン、ホスファチジルイノシトール、ホスファチジン酸等の他のグリセロリン脂質との混合物を用いるのが好ましい。
【００１１】
本発明においては、当該リン脂質の単体を単独又は２種以上混合して使用することができるが、当該リン脂質を含む動植物、例えば、大豆、米、とうもろこし、菜種、綿実、小麦、落花生、ひまし、ヒマワリ、大麦、エンバク、紅花、ゴマ等の植物、卵黄、乳、魚介類等の動物の組織から抽出される抽出レシチン、好適には、大豆油を製造する工程で発生する粗レシチンを、アセトン、エタノール等で処理した不溶画分を用いることできる。また、粗レシチンを精製した精製レシチンを使用することもでき、ＳＬＰ−ホワイト（辻製油）等の市販品を用いることもできる。
【００１２】
リゾリン脂質としては、上記リン脂質からホスホリパーゼＡ2等の酵素処理により生産したもの、またはＳＬＰ−ホワイトリゾ（辻製油）等の市販品などを用いることができる。
【００１３】
リン脂質を単体で用いる場合は、動植物等の組織から抽出・単離、あるいは化学合成により、入手することが可能である。例えば、ホスファチジルエタノールアミンは、大豆より得られる粗大豆リン脂質から定法に従って抽出・精製することにより得ることができる。例えば、大豆油の製造の際に生成する粗大豆リン脂質を溶媒分画（固液抽出法）、イオン交換クロマトグラフィー、シリカゲルカラムクロマトグラフィー、薄層クロマトグラフィー等により分離精製することによって得ることができる。また、酵素を用いた塩基交換法によってホスファチジルコリンから合成して得ることもできる。
【００１４】
後記実施例に示すように、本発明のリン脂質は、ＰＰＡＲγ遺伝子の発現抑制作用を有することから、ＰＰＡＲγの産生又は活性を抑制できるＰＰＡＲγ発現抑制剤として使用することができ、また、ＰＰＡＲγ発現抑制剤を製造するために使用することができる。ＰＰＡＲγの発現が抑制できれば、ＰＰＡＲγの過剰発現によって引き起こされる皮脂腺からの過剰な脂質産生を抑制できると考えられ、従って、ＰＰＡＲγ発現抑制剤は、ニキビ等の皮膚脂質異常を伴う皮膚疾患或いは皮膚トラブルの予防又は改善のための、ヒト若しくは動物用の医薬品、医薬部外品又は食品として使用可能である。
また、ＰＰＡＲγ発現抑制剤は、ニキビ等の皮膚脂質異常を伴う皮膚疾患或いは皮膚トラブルの予防又は改善をコンセプトとし、必要に応じてその旨を表示した美容食品、病者用食品若しくは特定保健用食品等の機能性食品として使用することができる。
【００１５】
本発明のＰＰＡＲγ発現抑制剤を医薬品として用いる場合の投与形態としては、例えば錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、シロップ剤、腸溶剤、トローチ剤、ドリンク剤等による経口投与又は注射剤、坐剤、経皮吸収剤、外用剤等による非経口投与が挙げられる。また、このような種々の剤型の医薬製剤を調製するには、本発明のリン脂質を単独で、又は他の薬学的に許容される賦形剤（ソルビトール、グルコース、乳糖、デキストリン、澱粉等の糖類、炭酸カルシウム等の無機物、結晶セルロース、蒸留水、ゴマ油、とうもろこし油、オリーブ油、菜種油等）、結合剤、滑沢剤、増量剤、崩壊剤、界面活性剤、滑沢剤、分散剤、懸濁剤、乳化剤、緩衝剤、保存剤、嬌味剤、香料、被膜剤、担体、希釈剤、抗酸化剤、細菌抑制剤等を適宜組み合わせて用いることができる。これらの投与形態のうち、好ましい形態は経口投与であり、経口投与用製剤として用いる場合の該製剤中の本発明のリン脂質の含有量は、一般的に０．０１〜９５質量％とするのが好ましく、１０〜８０質量％とするのがより好ましい。
【００１６】
本発明のＰＰＡＲγ発現抑制剤を食品として用いる場合の形態としては、例えば、パン、麺類等に代表される小麦粉加工食品、お粥、炊き込みご飯等の米加工食品、ビスケット、ケーキ、ゼリー、チョコレート、せんべい、アイスクリーム等の菓子類、豆腐、その加工食品等の大豆加工食品、清涼飲料、果汁飲料、乳飲料、炭酸飲料等の飲料類、ヨーグルト、チーズ、バター、牛乳等の乳製品、醤油、ソース、味噌、マヨネーズ、ドレッシング等の調味料、ハム、ベーコン、ソーセージ等の蓄肉、蓄肉加工食品、はんぺん、ちくわ、魚の缶詰等の水産加工食品、調理油ならびにフライ用油等が挙げられる。また、この他、カプセル等の錠剤食、濃厚流動食、自然流動食、半消化態栄養食、成分栄養食、ドリンク栄養食等の経口経腸栄養食品、機能性食品等の形態とすることもできる。
種々の形態の食品を調製するには、本発明のリン脂質を単独で、又は他の食品材料や、溶剤、軟化剤、油、乳化剤、防腐剤、香科、安定剤、着色剤、酸化防止剤、保湿剤、増粘剤等を適宜組み合わせて用いることができる。当該食品中の本発明のリン脂質の含有量は、一般的に０．０１〜２０質量％とするのが好ましく、０．１〜１０質量％とするのがより好ましい。
【００１７】
本発明のＰＰＡＲγ発現抑制剤を医薬品又は食品として使用する場合、成人１人当たりの１日の投与又は摂取量は、本発明のリン脂質として、例えば５０〜５０００ｍｇとするのが好ましく、更に１００〜３０００ｍｇ、特に５００〜２０００ｍｇとするのが好ましい。また、当該製剤は、１日１回〜数回に分けて投与することが好ましい。
【実施例】
【００１８】
実施例１ 大豆由来リン脂質のＰＰＡＲγ発現抑制作用
実験動物は、オリエンタル酵母より購入した雄性ＢＫＳ．Ｃｇ−＋Ｌｅｐｒdb／＋Ｌｅｐｒdb／Ｊｃｌマウス（ｄｂ／ｄｂ、６週齢）を市販固形飼料で１週間予備飼育した後、平均体重が等しくなるように、２群（１群当り６匹）に分け実験に用いた。
試験に用いたトリアシルグリセロール油は、菜種油と紅花油と精製エゴマ油の混合油を使用した。その脂肪酸組成としてＣ１６：０ ５．６％、Ｃ１８：０ ２．１％、Ｃ１８：１ ３６．７％、Ｃ１８：２ ４６．９％、Ｃ１８：３ ６．８％を含有していた。リン脂質は、辻製油より購入した大豆由来リン脂質（ＳＬＰ−ホワイト）を使用した。試験に用いたＳＬＰ−ホワイトは、リン脂質組成として、ホスファチジルコリン ３５．２％、ホスファチジルエタノールアミン ２８．５％、ホスファチジルイノシトール １８．３％、ホスファチジン酸 ８．４％、その他 ９．６％を含有しており、脂肪酸組成として、Ｃ１６：０ １９．８％、Ｃ１８：１ ４．８％、Ｃ１８：２ ７５．５％を含有していた。
【００１９】
対照群には、１００ｇあたり、１０ｇトリアシルグリセロール油、１３ｇスクロース、２０ｇカゼイン、４ｇセルロールパウダー、３．５ｇミネラル混合、１ｇビタミン混合、４８．５ｇポテトスターチを含有する餌を与えて飼育した。試験群には、上記の餌から、３ｇのトリアシルグリセロール油をリン脂質に置き換えた餌を与え、１ヶ月間飼育した。試験期間中の試験食及び水は自由摂取させた。試験期間中の試験食、水の摂取量に群間差は認められなかった。
【００２０】
１ヶ月の飼育後、マウスをエーテル麻酔下で開腹し、腹部大静脈から採血した後、肝臓を摘出した。摘出した肝臓の一部よりＲＮＡ抽出試薬を用いてｔｏｔａｌ ＲＮＡを抽出した。抽出したｔｏｔａｌ ＲＮＡ１２５ｎｇを用いて、定法に従い、逆転写反応を行った。合成されたｃＤＮＡの一部（ｔｏｔａｌ ＲＮＡ ６．２５ｎｇ相当）に対しＡＢＩ ＰＲＩＳＭ７０００ Ｓｅａｑｕｅｎｃｅ Ｄｅｔｅｃｔｏｉｎ Ｓｙｓｔｅｍ（アプライドバイオジャパン）を用いて、ＳＹＢＲ Ｇｒｅｅｎ リアルタイムＰＣＲ解析法により、ＰＰＡＲγとその標的遺伝子であるｆａｔｔｙ ａｃｉｄ ｂｉｎｄｉｎｇ ｐｒｏｔｅｉｎ ４（Ｆａｂｐ４）、ｃｅｌｌ ｄｅａｔｈ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ ＤＦＦＡ−ｌｉｋｅ ｅｆｆｅｃｔｏｒ ｃ（Ｃｉｄｅｃ）、Ｐｌａｓｍａ ｍｅｍｂｒａｎｅ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｐｒｏｔｅｉｎ，Ｓ３−１２（Ｓ３−１２）、ｃｅｌｌ ｄｅａｔｈ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ ＤＦＦＡ−ｌｉｋｅ ｅｆｆｅｃｔｏｒ ａ（Ｃｉｄｅａ）、ｆａｔｔｙ ａｃｉｄ ｂｉｎｄｉｎｇ ｐｒｏｔｅｉｎ ５（Ｆａｂｐ５）、ｍｏｎｏｇｌｙｃｅｒｉｄｅ ｌｉｐａｓｅ（Ｍｇｌｌ）、ｍｏｎｏａｃｙｌｇｌｙｃｅｒｏｌ Ｏ−ａｃｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ１（Ｍｏｇａｔ１）の遺伝子発現の評価に用いた。また、それぞれの遺伝子発現量はハウスキーピング遺伝子の一つであるＡＣＩＤＩＣ ＲＩＢＯＳＯＭＡＬ ＰＨＯＳＰＨＯＰＲＯＴＥＩＮ ＰＯ（Ａｒｂｐ）の発現量を基準として補正を行い比較した。
各遺伝子のＰＣＲ増幅のために用いたプライマーは以下の通りである。
【００２１】
【表１】
【００２２】
図１に示すように、リン脂質の摂取により肝臓ＰＰＡＲγの遺伝子発現が有意に減少した。また、ＰＰＡＲγの標的遺伝子であるＦａｂｐ４、Ｃｉｄｅｃ、Ｓ３−１２、Ｃｉｄｅａ、Ｆａｂｐ５、Ｍｇｌｌ、Ｍｏｇａｔ１の発現も、リン脂質の摂取により有意に減少していた（図１）。このことから、リン脂質はＰＰＡＲγ発現抑制に有効であることが分る。
【００２３】
実施例２ 各リン脂質成分のＰＰＡＲγ発現抑制作用
実験動物は、オリエンタル酵母より購入した雄性ＢＫＳ．Ｃｇ−＋Ｌｅｐｒdb／＋Ｌｅｐｒdb／Ｊｃｌマウス（ｄｂ／ｄｂ、６週齢）を市販固形飼料で１週間予備飼育した後、平均体重が等しくなるように、５群（１群当り６匹）に分け実験に用いた。
試験に用いたトリアシルグリセロール油は、実施例１に示した混合油を使用した。ホスファチジルコリンは市販試薬（ＣＡＬＢＩＯＣＨＥＭ社製 Ｌ−α−Ｌｅｃｉｔｈｉｎｅ、大豆由来品）を用いた。ホスファチジルエタノールアミン及びホスファチジルイノシトールは大豆由来リン脂質ＳＬＰ−ホワイト（辻製油）から、エタノールによる溶媒分画により濃縮画分を得た後、シリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、得たものを使用した。ホスファチジン酸は、上記ホスファチジルコリンよりＳｔｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｃｈｒｏｍｏｆｕｃｕｓ由来ホスホリパーゼＤにより加水分解反応を行い、得たものを用いた。精製ホスファチジルコリンは、リン脂質組成として９０％以上のホスファチジルコリンを含有しており、脂肪酸組成としてＣ１６：０ １２．４％、Ｃ１８：１ ３．８％、Ｃ１８：２ ８３．８％を、精製ホスファチジルエタノールアミンはリン脂質組成として、９０％以上のホスファチジルエタノールアミンを含有しており、脂肪酸組成として、Ｃ１６：０ ２１．０％、Ｃ１８：１ ３．３％、Ｃ１８：２ ７５．７％を、精製ホスファチジルイノシトールはリン脂質組成として、９０％以上のホスファチジルイノシトールを含有しており、脂肪酸組成として、Ｃ１６：０ ３５．０％、Ｃ１８：１ ６．７％、Ｃ１８：２ ５８．２％を、精製ホスファチジン酸はリン脂質組成としてホスファチジン酸を９０％以上含有しており、脂肪酸組成として、Ｃ１６：０ １２．４％、Ｃ１８：１ ３．８％、Ｃ１８：２ ８３．８％含有していた。
【００２４】
対照群には、１００ｇあたり、１０ｇトリアシルグリセロール油、１３ｇスクロース、２０ｇカゼイン、４ｇセルロールパウダー、３．５ｇミネラル混合、１ｇビタミン混合、４８．５ｇポテトスターチを含有する餌を与えて飼育した。試験群には、上記の餌から、１ｇのトリアシルグリセロール油を精製リン脂質に置き換えた餌を与え、１ヶ月間飼育した。試験期間中の試験食及び水は自由摂取させた。試験期間中の試験食、水の摂取量に群間差は認められなかった。
１ヶ月の飼育後、実施例１と同様にして、肝臓におけるＰＰＡＲγの発現量を測定した。
【００２５】
肝臓遺伝子発現変化をリアルタイムＰＣＲにより解析した結果、ホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルイノシトール、ホスファチジン酸の摂取により、肝臓ＰＰＡＲγの遺伝子発現が減少した（図２）。特に、ホスファチジルエタノールアミンの摂取により最も強く肝臓ＰＰＡＲγの遺伝子発現が減少した（図２）。
図２に示すように、リン脂質の各種成分の単独摂取がＰＰＡＲγの発現抑制に有効であり、特に、ホスファチジルエタノールアミンが最も有効であることが分る。
【００２６】
実施例３ リゾリン脂質のＰＰＡＲγ発現抑制作用
実験動物は、オリエンタル酵母より購入した雄性ＢＫＳ．Ｃｇ−＋Ｌｅｐｒdb／＋Ｌｅｐｒdb／Ｊｃｌマウス（ｄｂ／ｄｂ、６週齢）を市販固形飼料で１週間予備飼育した後、平均体重が等しくなるように、２群（１群当り６匹）に分け実験に用いた。
試験に用いたトリアシルグリセロール油は、実施例１に示した混合油を使用した。リゾリン脂質は、辻製油より購入したリゾリン脂質（ＳＬＰ−ホワイトリゾ）を使用した。試験に用いたＳＬＰ−ホワイトリゾは、リン脂質組成として、リゾリン脂質を１８％〜３０％含有している。
【００２７】
対照群には、１００ｇあたり、１０ｇトリアシルグリセロール油、１３ｇスクロース、２０ｇカゼイン、４ｇセルロールパウダー、３．５ｇミネラル混合、１ｇビタミン混合、４８．５ｇポテトスターチを含有する餌を与えて飼育した。試験群には、上記の餌から、３ｇのトリアシルグリセロール油をリゾリン脂質に置き換えた餌を与え、１ヶ月間飼育した。試験期間中の試験食及び水は自由摂取させた。試験期間中の試験食、水の摂取量に群間差は認められなかった。
１ヶ月の飼育後、実施例１と同様にして、肝臓におけるＰＰＡＲγ、Ｆａｂｐ４、Ｃｉｄｅｃの発現量を測定した。
【００２８】
肝臓遺伝子発現変化をリアルタイムＰＣＲにより解析した結果、リゾリン脂質の摂取により、肝臓ＰＰＡＲγの遺伝子発現が有意に減少した（図３）。また、ＰＰＡＲγの標的遺伝子である脂肪細胞分化関連遺伝子Ｆａｂｐ４、Ｃｉｄｅｃの発現もリゾリン脂質の摂取により有意に減少した（図３）。
図３に示すように、リゾリン脂質はＰＰＡＲγ発現抑制に有効であることが分る。
実施例３と４の結果を総合するとリゾリン脂質中のリゾホスファチジルエタノールアミンがリゾリン脂質中でも最も有効であると考えられる。
【００２９】
実施例４
ＳＬＰ−ホワイト（辻製油）をゼラチンカプセルに充填し、１錠３００ｍｇの軟カプセル剤を得た。
【００３０】
実施例５
ＳＬＰ−ホワイト（辻製油） ２００ｍｇ、精製ホスファチジルエタノールアミン １００ｍｇをゼラチンカプセルに充填し、１錠３００ｍｇの軟カプセル剤を得た。
【００３１】
実施例６
下記成分を用い、定法に従って１錠３００ｍｇの錠剤を製造した。
組成（ｍｇ）； ＳＬＰ−ホワイト（辻製油） １００、ヒドロキシプロピルセルロース ６０、軽質無水ケイ酸 １０、乳糖 ３５、結晶セルロース ３５、タルク ３０、ジアシルグリセロール ３０
【００３２】
実施例７
下記成分を用い、定法に従って１錠３００ｍｇの錠剤を製造した。
組成（ｍｇ）； 精製ホスファチジルエタノールアミン １００、デンプン １５０、ステアリン酸マグネシウム １０、乳糖 ４０
【００３３】
実施例８
下記成分を用い、定法に従って１錠３００ｍｇの錠剤を製造した。
組成（ｍｇ）； 精製ホスファチジルエタノールアミン ５０、ＳＬＰ−ホワイトリゾ（辻製油） ５０、デンプン １５０、ステアリン酸マグネシウム １０、乳糖 ４０
【００３４】
実施例９
市販の１００ｇのブラックチョコレートを６０℃で１時間保持して溶解した。これに、精製ホスファチジルエタノールアミンを２重量％添加してテンパリングすることによりリン脂質配合チョコレートを得た。
【００３５】
実施例１０
下記成分を混捏した後、原料を発酵後、ねかし、整形、焙炉の工程を経てリン脂質配合パンを得た。
組成（ｇ）； ＳＬＰ−ホワイトリゾ １．０、強力粉 １００、イースト ２、食塩 ２、砂糖 ３、ショートニング ３、イーストフード ０．１５、水 ６０
【００３６】
実施例１１
下記成分を混合した原料を８０℃に加熱し、均質機を用いて６０ｋｇ／ｃｍ2 で均質し、５℃の冷蔵庫で１２時間保持した。５℃で１２時間保持した後、ホイップ用攪拌機を用いて４００ｒｐｍで４分間ホイップし、リン脂質含有ホイップクリームを得た。
組成（ｇ）； ＳＬＰ−ホワイト ０．５、水 ４４．３５、融点３０℃の植物油脂 ３０、脱脂乳 ２５、ショ糖脂肪酸エステル ０．４、モノグリセライド ０．１、リン酸三カリウム ０．１５
【００３７】
実施例１２
下記成分を混合した原料を８０℃に加温し、均質機を用いて１５０ｋｇ／ｃｍ2 で均質し、２５０ｍｌ容のステンレス製缶に２５０ｍｌ充填した後、巻き締め機で蓋をした。これをレトルト釜で１２０℃、１０分間の殺菌を行い、その後１０℃に冷却し、リン脂質含有コーヒーを得た。
組成（ｇ）； ＳＬＰ−ホワイト ０．２、水 ４０、牛乳 ８、砂糖 １０、インスタントコーヒー粉末 ２、モノグリセライド ０．１
【図面の簡単な説明】
【００３８】
【図１】リン脂質摂取によるＰＰＡＲγ及びＰＰＡＲγ標的遺伝子の発現変化を示すグラフ。
【図２】各リン脂質成分摂取によるＰＰＡＲγ遺伝子の発現変化を示すグラフ。
【図３】リゾリン脂質摂取によるＰＰＡＲγ及びＰＰＡＲγ標的遺伝子の遺伝子発現変化を示すグラフ。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、皮膚疾患、皮膚トラブルの予防又は改善に有用なペルオキシソーム増殖剤活性化受容体γ（Peroxisome Proliferator Activated Receptor γ：以下、「ＰＰＡＲγ」という。）発現抑制剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
ペルオキシソーム増殖剤活性化受容体（ＰＰＡＲ）は、Ｃ末端側のリガンド結合領域にリガンドが結合することで活性化される転写因子であり、グルココルチコイド、エストロジェン及びビタミンＤ等をリガンドとする核内受容体のスーパーファミリーの一つである（非特許文献１）。ＰＰＡＲはリガンドとの結合により活性化されると、ＰＰＡＲはレチノイドＸレセプター（retinoid X receptor：ＲＸＲ）とヘテロダイマーを形成し標的遺伝子の上流に存在する応答配列peroxisome proliferator response element（ＰＰＲＥ）に結合して標的遺伝子の発現を活性化する。
【０００３】
ＰＰＡＲα及びＰＰＡＲδ及びＰＰＡＲγと呼ばれる３種のアイソフォームが同定されているが、これらは、発現組織が異なっており、それぞれ違った生体機能を有していると報告されている（非特許文献２）。このうち、ＰＰＡＲγは皮脂腺細胞（sebaceous cell）に発現していることが明らかにされ（非特許文献３）、ラット皮脂腺細胞を用いた培養試験においては、ＰＰＡＲγのアゴニストＢＲＬ−４９６５３は、皮脂腺細胞の脂質産生細胞への分化を促進することが示されている。
【０００４】
また、最近の研究では、Ｂ領域の紫外線（ＵＶＢ）や薬剤誘導性の酸化ストレス刺激により、表皮癌細胞や皮脂腺細胞のＰＰＡＲγが活性化され、ＰＰＡＲγ活性に依存的なシクロオキシゲナーゼ２の発現亢進が起こり、炎症反応が惹起されることも示されている（非特許文献４）。
これらのことから、ＰＰＡＲγの発現抑制は、皮脂腺における過剰な脂質産生の抑制を介して、ニキビ等の皮膚脂質以上を伴う皮膚疾患あるいは皮膚トラブルの予防あるいは改善に有効であると考えられる。
ＰＰＡＲγのアンタゴニスト、阻害剤又は発現抑制剤については、２，４−チアゾリジンジオン誘導体及び脂肪酸ＣｏＡチオエステルについてＰＰＡＲγのアンタゴニストとしての作用が報告されているものの（非特許文献５、特許文献１）、これらのＰＰＡＲγアンタゴニストを長期服用する場合においては副作用も懸念されている。
従って、食経験が豊富で安全性が高く副作用の心配のないＰＰＡＲγ抑制剤が望まれている。
【０００５】
一方、リン脂質は、血中コレステロールの低下作用（特許文献２）、抗アレルギー作用（特許文献３）等の作用があることが報告されている。
しかしながら、リン脂質とＰＰＡＲγの発現との関係については全く知られてはいない。
【特許文献１】国際公開第０１／０２１１８１号パンフレット
【特許文献２】特開２００４−１８５９１号公報
【特許文献３】特開２００４−２８５００６号公報
【非特許文献１】Keller, H., Ann. N.Y. Acad. Sci., 684, 157-173 (1993)
【非特許文献２】Braissant, O., Endcrinology, 137, 354-366 (1996)
【非特許文献３】Rosenfield, R. L. Dermatol.,196,43-46,(1998)
【非特許文献４】Zang, Q. J. Invest. Dermatol., 126,42-48,(2006)
【非特許文献５】Oberfield, J.L., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 96, 6102-6106 (1999)
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明は、安全性に優れ、ニキビ等の皮脂脂質異常を伴う皮膚疾患あるいは皮膚トラブルの予防又は改善のための医薬品又は食品等として有用なＰＰＡＲγ発現抑制剤を提供することに関する。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者らは、種々の天然成分について検討した結果、リン脂質にＰＰＡＲγの発現を抑制する効果があることを見出した。
【０００８】
すなわち、本発明は、リン脂質を有効成分とするＰＰＡＲγ発現抑制剤を提供するものである。
【発明の効果】
【０００９】
本発明のＰＰＡＲγ発現抑制剤は、優れたＰＰＡＲγ発現抑制作用を有し、かつ安全性も高いので、ニキビ等の皮脂脂質異常を伴う皮膚疾患あるいは皮膚トラブルの予防又は改善するための医薬品又は食品等として有用である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１０】
本発明のリン脂質としては、ホスファチジルセリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルコリン、ホスファチジルグリセロール、ホスファチジルイノシトール、ホスファチジン酸等のグリセロリン脂質、及び当該リン脂質のリゾ体が好ましく、特に、ホスファチジルエタノールアミン及び／又はリゾホスファチジルエタノールアミン、並びにこれらとホスファチジルコリン、ホスファチジルイノシトール、ホスファチジン酸等の他のグリセロリン脂質との混合物を用いるのが好ましい。
【００１１】
本発明においては、当該リン脂質の単体を単独又は２種以上混合して使用することができるが、当該リン脂質を含む動植物、例えば、大豆、米、とうもろこし、菜種、綿実、小麦、落花生、ひまし、ヒマワリ、大麦、エンバク、紅花、ゴマ等の植物、卵黄、乳、魚介類等の動物の組織から抽出される抽出レシチン、好適には、大豆油を製造する工程で発生する粗レシチンを、アセトン、エタノール等で処理した不溶画分を用いることできる。また、粗レシチンを精製した精製レシチンを使用することもでき、ＳＬＰ−ホワイト（辻製油）等の市販品を用いることもできる。
【００１２】
リゾリン脂質としては、上記リン脂質からホスホリパーゼＡ2等の酵素処理により生産したもの、またはＳＬＰ−ホワイトリゾ（辻製油）等の市販品などを用いることができる。
【００１３】
リン脂質を単体で用いる場合は、動植物等の組織から抽出・単離、あるいは化学合成により、入手することが可能である。例えば、ホスファチジルエタノールアミンは、大豆より得られる粗大豆リン脂質から定法に従って抽出・精製することにより得ることができる。例えば、大豆油の製造の際に生成する粗大豆リン脂質を溶媒分画（固液抽出法）、イオン交換クロマトグラフィー、シリカゲルカラムクロマトグラフィー、薄層クロマトグラフィー等により分離精製することによって得ることができる。また、酵素を用いた塩基交換法によってホスファチジルコリンから合成して得ることもできる。
【００１４】
後記実施例に示すように、本発明のリン脂質は、ＰＰＡＲγ遺伝子の発現抑制作用を有することから、ＰＰＡＲγの産生又は活性を抑制できるＰＰＡＲγ発現抑制剤として使用することができ、また、ＰＰＡＲγ発現抑制剤を製造するために使用することができる。ＰＰＡＲγの発現が抑制できれば、ＰＰＡＲγの過剰発現によって引き起こされる皮脂腺からの過剰な脂質産生を抑制できると考えられ、従って、ＰＰＡＲγ発現抑制剤は、ニキビ等の皮膚脂質異常を伴う皮膚疾患或いは皮膚トラブルの予防又は改善のための、ヒト若しくは動物用の医薬品、医薬部外品又は食品として使用可能である。
また、ＰＰＡＲγ発現抑制剤は、ニキビ等の皮膚脂質異常を伴う皮膚疾患或いは皮膚トラブルの予防又は改善をコンセプトとし、必要に応じてその旨を表示した美容食品、病者用食品若しくは特定保健用食品等の機能性食品として使用することができる。
【００１５】
本発明のＰＰＡＲγ発現抑制剤を医薬品として用いる場合の投与形態としては、例えば錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、シロップ剤、腸溶剤、トローチ剤、ドリンク剤等による経口投与又は注射剤、坐剤、経皮吸収剤、外用剤等による非経口投与が挙げられる。また、このような種々の剤型の医薬製剤を調製するには、本発明のリン脂質を単独で、又は他の薬学的に許容される賦形剤（ソルビトール、グルコース、乳糖、デキストリン、澱粉等の糖類、炭酸カルシウム等の無機物、結晶セルロース、蒸留水、ゴマ油、とうもろこし油、オリーブ油、菜種油等）、結合剤、滑沢剤、増量剤、崩壊剤、界面活性剤、滑沢剤、分散剤、懸濁剤、乳化剤、緩衝剤、保存剤、嬌味剤、香料、被膜剤、担体、希釈剤、抗酸化剤、細菌抑制剤等を適宜組み合わせて用いることができる。これらの投与形態のうち、好ましい形態は経口投与であり、経口投与用製剤として用いる場合の該製剤中の本発明のリン脂質の含有量は、一般的に０．０１〜９５質量％とするのが好ましく、１０〜８０質量％とするのがより好ましい。
【００１６】
本発明のＰＰＡＲγ発現抑制剤を食品として用いる場合の形態としては、例えば、パン、麺類等に代表される小麦粉加工食品、お粥、炊き込みご飯等の米加工食品、ビスケット、ケーキ、ゼリー、チョコレート、せんべい、アイスクリーム等の菓子類、豆腐、その加工食品等の大豆加工食品、清涼飲料、果汁飲料、乳飲料、炭酸飲料等の飲料類、ヨーグルト、チーズ、バター、牛乳等の乳製品、醤油、ソース、味噌、マヨネーズ、ドレッシング等の調味料、ハム、ベーコン、ソーセージ等の蓄肉、蓄肉加工食品、はんぺん、ちくわ、魚の缶詰等の水産加工食品、調理油ならびにフライ用油等が挙げられる。また、この他、カプセル等の錠剤食、濃厚流動食、自然流動食、半消化態栄養食、成分栄養食、ドリンク栄養食等の経口経腸栄養食品、機能性食品等の形態とすることもできる。
種々の形態の食品を調製するには、本発明のリン脂質を単独で、又は他の食品材料や、溶剤、軟化剤、油、乳化剤、防腐剤、香科、安定剤、着色剤、酸化防止剤、保湿剤、増粘剤等を適宜組み合わせて用いることができる。当該食品中の本発明のリン脂質の含有量は、一般的に０．０１〜２０質量％とするのが好ましく、０．１〜１０質量％とするのがより好ましい。
【００１７】
本発明のＰＰＡＲγ発現抑制剤を医薬品又は食品として使用する場合、成人１人当たりの１日の投与又は摂取量は、本発明のリン脂質として、例えば５０〜５０００ｍｇとするのが好ましく、更に１００〜３０００ｍｇ、特に５００〜２０００ｍｇとするのが好ましい。また、当該製剤は、１日１回〜数回に分けて投与することが好ましい。
【実施例】
【００１８】
実施例１ 大豆由来リン脂質のＰＰＡＲγ発現抑制作用
実験動物は、オリエンタル酵母より購入した雄性ＢＫＳ．Ｃｇ−＋Ｌｅｐｒdb／＋Ｌｅｐｒdb／Ｊｃｌマウス（ｄｂ／ｄｂ、６週齢）を市販固形飼料で１週間予備飼育した後、平均体重が等しくなるように、２群（１群当り６匹）に分け実験に用いた。
試験に用いたトリアシルグリセロール油は、菜種油と紅花油と精製エゴマ油の混合油を使用した。その脂肪酸組成としてＣ１６：０ ５．６％、Ｃ１８：０ ２．１％、Ｃ１８：１ ３６．７％、Ｃ１８：２ ４６．９％、Ｃ１８：３ ６．８％を含有していた。リン脂質は、辻製油より購入した大豆由来リン脂質（ＳＬＰ−ホワイト）を使用した。試験に用いたＳＬＰ−ホワイトは、リン脂質組成として、ホスファチジルコリン ３５．２％、ホスファチジルエタノールアミン ２８．５％、ホスファチジルイノシトール １８．３％、ホスファチジン酸 ８．４％、その他 ９．６％を含有しており、脂肪酸組成として、Ｃ１６：０ １９．８％、Ｃ１８：１ ４．８％、Ｃ１８：２ ７５．５％を含有していた。
【００１９】
対照群には、１００ｇあたり、１０ｇトリアシルグリセロール油、１３ｇスクロース、２０ｇカゼイン、４ｇセルロールパウダー、３．５ｇミネラル混合、１ｇビタミン混合、４８．５ｇポテトスターチを含有する餌を与えて飼育した。試験群には、上記の餌から、３ｇのトリアシルグリセロール油をリン脂質に置き換えた餌を与え、１ヶ月間飼育した。試験期間中の試験食及び水は自由摂取させた。試験期間中の試験食、水の摂取量に群間差は認められなかった。
【００２０】
１ヶ月の飼育後、マウスをエーテル麻酔下で開腹し、腹部大静脈から採血した後、肝臓を摘出した。摘出した肝臓の一部よりＲＮＡ抽出試薬を用いてｔｏｔａｌ ＲＮＡを抽出した。抽出したｔｏｔａｌ ＲＮＡ１２５ｎｇを用いて、定法に従い、逆転写反応を行った。合成されたｃＤＮＡの一部（ｔｏｔａｌ ＲＮＡ ６．２５ｎｇ相当）に対しＡＢＩ ＰＲＩＳＭ７０００ Ｓｅａｑｕｅｎｃｅ Ｄｅｔｅｃｔｏｉｎ Ｓｙｓｔｅｍ（アプライドバイオジャパン）を用いて、ＳＹＢＲ Ｇｒｅｅｎ リアルタイムＰＣＲ解析法により、ＰＰＡＲγとその標的遺伝子であるｆａｔｔｙ ａｃｉｄ ｂｉｎｄｉｎｇ ｐｒｏｔｅｉｎ ４（Ｆａｂｐ４）、ｃｅｌｌ ｄｅａｔｈ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ ＤＦＦＡ−ｌｉｋｅ ｅｆｆｅｃｔｏｒ ｃ（Ｃｉｄｅｃ）、Ｐｌａｓｍａ ｍｅｍｂｒａｎｅ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｐｒｏｔｅｉｎ，Ｓ３−１２（Ｓ３−１２）、ｃｅｌｌ ｄｅａｔｈ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ ＤＦＦＡ−ｌｉｋｅ ｅｆｆｅｃｔｏｒ ａ（Ｃｉｄｅａ）、ｆａｔｔｙ ａｃｉｄ ｂｉｎｄｉｎｇ ｐｒｏｔｅｉｎ ５（Ｆａｂｐ５）、ｍｏｎｏｇｌｙｃｅｒｉｄｅ ｌｉｐａｓｅ（Ｍｇｌｌ）、ｍｏｎｏａｃｙｌｇｌｙｃｅｒｏｌ Ｏ−ａｃｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ１（Ｍｏｇａｔ１）の遺伝子発現の評価に用いた。また、それぞれの遺伝子発現量はハウスキーピング遺伝子の一つであるＡＣＩＤＩＣ ＲＩＢＯＳＯＭＡＬ ＰＨＯＳＰＨＯＰＲＯＴＥＩＮ ＰＯ（Ａｒｂｐ）の発現量を基準として補正を行い比較した。
各遺伝子のＰＣＲ増幅のために用いたプライマーは以下の通りである。
【００２１】
【表１】
【００２２】
図１に示すように、リン脂質の摂取により肝臓ＰＰＡＲγの遺伝子発現が有意に減少した。また、ＰＰＡＲγの標的遺伝子であるＦａｂｐ４、Ｃｉｄｅｃ、Ｓ３−１２、Ｃｉｄｅａ、Ｆａｂｐ５、Ｍｇｌｌ、Ｍｏｇａｔ１の発現も、リン脂質の摂取により有意に減少していた（図１）。このことから、リン脂質はＰＰＡＲγ発現抑制に有効であることが分る。
【００２３】
実施例２ 各リン脂質成分のＰＰＡＲγ発現抑制作用
実験動物は、オリエンタル酵母より購入した雄性ＢＫＳ．Ｃｇ−＋Ｌｅｐｒdb／＋Ｌｅｐｒdb／Ｊｃｌマウス（ｄｂ／ｄｂ、６週齢）を市販固形飼料で１週間予備飼育した後、平均体重が等しくなるように、５群（１群当り６匹）に分け実験に用いた。
試験に用いたトリアシルグリセロール油は、実施例１に示した混合油を使用した。ホスファチジルコリンは市販試薬（ＣＡＬＢＩＯＣＨＥＭ社製 Ｌ−α−Ｌｅｃｉｔｈｉｎｅ、大豆由来品）を用いた。ホスファチジルエタノールアミン及びホスファチジルイノシトールは大豆由来リン脂質ＳＬＰ−ホワイト（辻製油）から、エタノールによる溶媒分画により濃縮画分を得た後、シリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、得たものを使用した。ホスファチジン酸は、上記ホスファチジルコリンよりＳｔｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｃｈｒｏｍｏｆｕｃｕｓ由来ホスホリパーゼＤにより加水分解反応を行い、得たものを用いた。精製ホスファチジルコリンは、リン脂質組成として９０％以上のホスファチジルコリンを含有しており、脂肪酸組成としてＣ１６：０ １２．４％、Ｃ１８：１ ３．８％、Ｃ１８：２ ８３．８％を、精製ホスファチジルエタノールアミンはリン脂質組成として、９０％以上のホスファチジルエタノールアミンを含有しており、脂肪酸組成として、Ｃ１６：０ ２１．０％、Ｃ１８：１ ３．３％、Ｃ１８：２ ７５．７％を、精製ホスファチジルイノシトールはリン脂質組成として、９０％以上のホスファチジルイノシトールを含有しており、脂肪酸組成として、Ｃ１６：０ ３５．０％、Ｃ１８：１ ６．７％、Ｃ１８：２ ５８．２％を、精製ホスファチジン酸はリン脂質組成としてホスファチジン酸を９０％以上含有しており、脂肪酸組成として、Ｃ１６：０ １２．４％、Ｃ１８：１ ３．８％、Ｃ１８：２ ８３．８％含有していた。
【００２４】
対照群には、１００ｇあたり、１０ｇトリアシルグリセロール油、１３ｇスクロース、２０ｇカゼイン、４ｇセルロールパウダー、３．５ｇミネラル混合、１ｇビタミン混合、４８．５ｇポテトスターチを含有する餌を与えて飼育した。試験群には、上記の餌から、１ｇのトリアシルグリセロール油を精製リン脂質に置き換えた餌を与え、１ヶ月間飼育した。試験期間中の試験食及び水は自由摂取させた。試験期間中の試験食、水の摂取量に群間差は認められなかった。
１ヶ月の飼育後、実施例１と同様にして、肝臓におけるＰＰＡＲγの発現量を測定した。
【００２５】
肝臓遺伝子発現変化をリアルタイムＰＣＲにより解析した結果、ホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルイノシトール、ホスファチジン酸の摂取により、肝臓ＰＰＡＲγの遺伝子発現が減少した（図２）。特に、ホスファチジルエタノールアミンの摂取により最も強く肝臓ＰＰＡＲγの遺伝子発現が減少した（図２）。
図２に示すように、リン脂質の各種成分の単独摂取がＰＰＡＲγの発現抑制に有効であり、特に、ホスファチジルエタノールアミンが最も有効であることが分る。
【００２６】
実施例３ リゾリン脂質のＰＰＡＲγ発現抑制作用
実験動物は、オリエンタル酵母より購入した雄性ＢＫＳ．Ｃｇ−＋Ｌｅｐｒdb／＋Ｌｅｐｒdb／Ｊｃｌマウス（ｄｂ／ｄｂ、６週齢）を市販固形飼料で１週間予備飼育した後、平均体重が等しくなるように、２群（１群当り６匹）に分け実験に用いた。
試験に用いたトリアシルグリセロール油は、実施例１に示した混合油を使用した。リゾリン脂質は、辻製油より購入したリゾリン脂質（ＳＬＰ−ホワイトリゾ）を使用した。試験に用いたＳＬＰ−ホワイトリゾは、リン脂質組成として、リゾリン脂質を１８％〜３０％含有している。
【００２７】
対照群には、１００ｇあたり、１０ｇトリアシルグリセロール油、１３ｇスクロース、２０ｇカゼイン、４ｇセルロールパウダー、３．５ｇミネラル混合、１ｇビタミン混合、４８．５ｇポテトスターチを含有する餌を与えて飼育した。試験群には、上記の餌から、３ｇのトリアシルグリセロール油をリゾリン脂質に置き換えた餌を与え、１ヶ月間飼育した。試験期間中の試験食及び水は自由摂取させた。試験期間中の試験食、水の摂取量に群間差は認められなかった。
１ヶ月の飼育後、実施例１と同様にして、肝臓におけるＰＰＡＲγ、Ｆａｂｐ４、Ｃｉｄｅｃの発現量を測定した。
【００２８】
肝臓遺伝子発現変化をリアルタイムＰＣＲにより解析した結果、リゾリン脂質の摂取により、肝臓ＰＰＡＲγの遺伝子発現が有意に減少した（図３）。また、ＰＰＡＲγの標的遺伝子である脂肪細胞分化関連遺伝子Ｆａｂｐ４、Ｃｉｄｅｃの発現もリゾリン脂質の摂取により有意に減少した（図３）。
図３に示すように、リゾリン脂質はＰＰＡＲγ発現抑制に有効であることが分る。
実施例３と４の結果を総合するとリゾリン脂質中のリゾホスファチジルエタノールアミンがリゾリン脂質中でも最も有効であると考えられる。
【００２９】
実施例４
ＳＬＰ−ホワイト（辻製油）をゼラチンカプセルに充填し、１錠３００ｍｇの軟カプセル剤を得た。
【００３０】
実施例５
ＳＬＰ−ホワイト（辻製油） ２００ｍｇ、精製ホスファチジルエタノールアミン １００ｍｇをゼラチンカプセルに充填し、１錠３００ｍｇの軟カプセル剤を得た。
【００３１】
実施例６
下記成分を用い、定法に従って１錠３００ｍｇの錠剤を製造した。
組成（ｍｇ）； ＳＬＰ−ホワイト（辻製油） １００、ヒドロキシプロピルセルロース ６０、軽質無水ケイ酸 １０、乳糖 ３５、結晶セルロース ３５、タルク ３０、ジアシルグリセロール ３０
【００３２】
実施例７
下記成分を用い、定法に従って１錠３００ｍｇの錠剤を製造した。
組成（ｍｇ）； 精製ホスファチジルエタノールアミン １００、デンプン １５０、ステアリン酸マグネシウム １０、乳糖 ４０
【００３３】
実施例８
下記成分を用い、定法に従って１錠３００ｍｇの錠剤を製造した。
組成（ｍｇ）； 精製ホスファチジルエタノールアミン ５０、ＳＬＰ−ホワイトリゾ（辻製油） ５０、デンプン １５０、ステアリン酸マグネシウム １０、乳糖 ４０
【００３４】
実施例９
市販の１００ｇのブラックチョコレートを６０℃で１時間保持して溶解した。これに、精製ホスファチジルエタノールアミンを２重量％添加してテンパリングすることによりリン脂質配合チョコレートを得た。
【００３５】
実施例１０
下記成分を混捏した後、原料を発酵後、ねかし、整形、焙炉の工程を経てリン脂質配合パンを得た。
組成（ｇ）； ＳＬＰ−ホワイトリゾ １．０、強力粉 １００、イースト ２、食塩 ２、砂糖 ３、ショートニング ３、イーストフード ０．１５、水 ６０
【００３６】
実施例１１
下記成分を混合した原料を８０℃に加熱し、均質機を用いて６０ｋｇ／ｃｍ2 で均質し、５℃の冷蔵庫で１２時間保持した。５℃で１２時間保持した後、ホイップ用攪拌機を用いて４００ｒｐｍで４分間ホイップし、リン脂質含有ホイップクリームを得た。
組成（ｇ）； ＳＬＰ−ホワイト ０．５、水 ４４．３５、融点３０℃の植物油脂 ３０、脱脂乳 ２５、ショ糖脂肪酸エステル ０．４、モノグリセライド ０．１、リン酸三カリウム ０．１５
【００３７】
実施例１２
下記成分を混合した原料を８０℃に加温し、均質機を用いて１５０ｋｇ／ｃｍ2 で均質し、２５０ｍｌ容のステンレス製缶に２５０ｍｌ充填した後、巻き締め機で蓋をした。これをレトルト釜で１２０℃、１０分間の殺菌を行い、その後１０℃に冷却し、リン脂質含有コーヒーを得た。
組成（ｇ）； ＳＬＰ−ホワイト ０．２、水 ４０、牛乳 ８、砂糖 １０、インスタントコーヒー粉末 ２、モノグリセライド ０．１
【図面の簡単な説明】
【００３８】
【図１】リン脂質摂取によるＰＰＡＲγ及びＰＰＡＲγ標的遺伝子の発現変化を示すグラフ。
【図２】各リン脂質成分摂取によるＰＰＡＲγ遺伝子の発現変化を示すグラフ。
【図３】リゾリン脂質摂取によるＰＰＡＲγ及びＰＰＡＲγ標的遺伝子の遺伝子発現変化を示すグラフ。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
リン脂質を有効成分とするＰＰＡＲγ発現抑制剤。
【請求項２】
リン脂質がリゾリン脂質である請求項１記載のＰＰＡＲγ発現抑制剤。
【請求項３】
リン脂質がホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルイノシトール及びホスファチジン酸から選ばれる１種以上である請求項１記載のＰＰＡＲγ発現抑制剤。
【請求項４】
ＰＰＡＲγ発現抑制剤の製造のためのリン脂質の使用。
【請求項１】
リン脂質を有効成分とするＰＰＡＲγ発現抑制剤。
【請求項２】
リン脂質がリゾリン脂質である請求項１記載のＰＰＡＲγ発現抑制剤。
【請求項３】
リン脂質がホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルイノシトール及びホスファチジン酸から選ばれる１種以上である請求項１記載のＰＰＡＲγ発現抑制剤。
【請求項４】
ＰＰＡＲγ発現抑制剤の製造のためのリン脂質の使用。
【図１】
【図２】
【図３】
【図２】
【図３】
【公開番号】特開２００８−７４７９３（Ｐ２００８−７４７９３Ａ）
【公開日】平成２０年４月３日（２００８．４．３）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００６−２５７９６０（Ｐ２００６−２５７９６０）
【出願日】平成１８年９月２２日（２００６．９．２２）
【出願人】（００００００９１８）花王株式会社 (8,290)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２０年４月３日（２００８．４．３）
【国際特許分類】
【出願日】平成１８年９月２２日（２００６．９．２２）
【出願人】（００００００９１８）花王株式会社 (8,290)
【Ｆターム（参考）】
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