RAGEポリペプチドを含む融合タンパク質であって、当該RAGEポリペプチドが哺乳類野生型RAGEペプチドの断片を含み、そして当該融合タンパク質のRAGEポリペプチド部分に、野生型RAGEペプチドに対して1つ以上の点突然変異を有する、当該融合タンパク質を開示する。前記点突然変異は、グリコシル化部位又は酵素開裂部位を除去及び／又は変換してもよい。また、そのようなタンパク質をコードする核酸、及びRAGEが介在する疾患を処置するためのそのようなタンパク質の使用方法も開示される。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
免疫グロブリンポリペプチドに結合した終末糖化産物受容体(RAGE)ポリペプチドを含む融合タンパク質であり、当該RAGEポリペプチドが、リガンド結合ドメインを有する哺乳類RAGEの断片を含み、当該RAGE融合タンパク質が、1つ以上の前記RAGEポリペプチド又は前記免疫グロブリンポリペプチドにおいて野生型の配列と比較して1つ以上の突然変異を含み、そして当該突然変異が、1つ以上のグリコシル化部位又は酵素開裂部位を除去及び/又は変換するものである、前記融合タンパク質。
【請求項２】
前記RAGEポリペプチドがヒトRAGEポリペプチドである、請求項１に記載の融合タンパク質。
【請求項３】
前記突然変異が、野生型RAGEポリペプチド中のグリコシル化部位に存在する配列を変更するものである、請求項１又は２のいずれかに記載の融合タンパク質。
【請求項４】
前記グリコシル化部位が、アミノ酸配列NXS又はNXTを有し、ここでXがいずれかのアミノ酸である、請求項１〜３のいずれか1項に記載の融合タンパク質。
【請求項５】
前記突然変異が、1つ以上のグリコシル化部位を除去するため、野生型RAGEポリペプチド配列のNITをQITに、NGSをQGSに、NGSをNSSに、又はNSTをQSTに変更する突然変異を1つ以上含むものである、請求項１〜４のいずれか1項に記載の融合タンパク質。
【請求項６】
前記グリコシル化部位が、RAGEポリペプチドのリガンド結合部位又はリガンド結合ドメインの内部にある、請求項１〜５のいずれか1項に記載の融合タンパク質。
【請求項７】
前記酵素開裂部位がフリン開裂部位であることにより、前記突然変異がRAGEポリペプチドのフリン(furin)開裂の認識部位に存在する野生型ポリペプチドの配列を変化させる、請求項１に記載の融合タンパク質。
【請求項８】
前記突然変異が、野生型RAGEポリペプチドのアミノ酸配列の：(i) PRHRALRをPHRAALRに；(ii) PRHRALRをPRHKALRに；(iii) PRHRALRをPRHRALAに；(iv) PRHRALRをPRHRALKに；(v) PRHRALRをPRHRALHに；又は(vi) PRHRALRをPRHRALTに変更する突然変異を1つ以上含むことにより、フリン開裂部位を除去するものである、請求項１及び７のいずれかに記載の融合タンパク質。
【請求項９】
前記RAGEポリペプチドが野生型RAGEポリペプチドのアミノ酸１〜２３を占めるN末端リーダーペプチドを含まない、請求項１〜８のいずれか1項に記載の融合タンパク質。
【請求項１０】
1つ以上の突然変異が：野生型RAGEポリペプチドのアミノ酸１〜２３を占めるN末端リーダーペプチドを含まないヒトRAGEポリペプチドの(i) N2Q; (ii) N58Q; (iii) G59S; (iv) N2Q及びN58Q;又は(v) N2Q及びG59Sの1つ以上を含むものである、請求項１に記載の融合タンパク質。
【請求項１１】
前記野生型RAGEポリペプチドのアミノ酸１〜２３を占めるN末端リーダーペプチドを含まないヒトRAGEポリペプチドが：(i)配列番号：8、配列番号：16、若しくは配列番号：20;又は(ii) N末端のグルタミンが環状化してピログルタミン酸を有する、配列番号：8、配列番号：16、若しくは配列番号：20の1つ以上に記載の配列を有する、請求項１０に記載の融合タンパク質。
【請求項１２】
前記突然変異がフリン開裂部位を除去するためのものであって、前記野生型RAGEポリペプチドのアミノ酸１〜２３を占めるN末端リーダーペプチドを含まないヒトRAGEポリペプチドのR195A, R195K, R195T, R195H, R198A, R198K, R198H, R198Tの１つ以上を含む、請求項１に記載の融合タンパク質。
【請求項１３】
前記野生型RAGEポリペプチドのアミノ酸１〜２３を占めるN末端リーダーペプチドを含まないヒトRAGEポリペプチドが、配列番号：２０、又はN末端のグルタミンが環状化してピログルタミン酸を有する配列番号２０に記載の配列を有する、請求項１２に記載の融合タンパク質。
【請求項１４】
前記免疫グロブリンポリペプチドが、ヒンジ領域の部分以上を含まないC_H2ドメインの断片を含む、請求項１〜１３のいずれか1項に記載の融合タンパク質。
【請求項１５】
前記C_H2ドメインの断片に含まれないヒンジ領域が配列番号：223又は配列番号：224に記載の配列を有する、請求項１４に記載の融合タンパク質。
【請求項１６】
前記C_H2ドメインがC末端を介して免疫グロブリンポリペプチドのC_H3ドメインのN末端と連結する、請求項１４又は１５のいずれかに記載の融合タンパク質。
【請求項１７】
前記免疫グロブリンがヒトIgGを含む、請求項1に記載の融合タンパク質。
【請求項１８】
前記免疫グロブリンのC_H2ドメインが、配列番号：３８、又はC末端にリシンを有しない配列番号：３８を有する、請求項１に記載の融合タンパク質。
【請求項１９】
配列番号：５８〜８２、配列番号９２〜１９０、又は配列番号：２００若しくは２０１のいずれか１つに記載のアミノ酸配列を含むRAGEポリペプチドを含む融合タンパク質。
【請求項２０】
RAGEポリペプチドを含む融合タンパク質であり、当該RAGEポリペプチドが、配列番号：５８〜８２、配列番号９２〜１９０、又は配列番号：２００若しくは２０１のいずれか１つに記載されている、前記融合タンパク質。
【請求項２１】
モノマー、ダイマー、トリマー、テトラマー、又はそれらの混合物の形態をとる、請求項１〜２０のいずれか1項に記載の融合タンパク質。
【請求項２２】
請求項１〜２１のいずれか1項に記載の融合タンパク質及び医薬として許容される担体を含む組成物。
【請求項２３】
請求項１〜２１のいずれか１項に記載の融合タンパク質をコードする単離された核酸。
【請求項２４】
請求項１〜２１のいずれか1項に記載の融合タンパク質をコードする核酸を含む発現ベクター。
【請求項２５】
請求項１〜２１のいずれか1項に記載の融合タンパク質をコードする核酸を含む発現ベクターをトランスフェクションした宿主細胞。
【請求項２６】
請求項１〜２１のいずれか1項に記載の融合タンパク質又は請求項２２に記載の組成物を対象に投与することを含む、対象中のRAGE介在疾患を治療する方法。
【請求項２７】
前記RAGE介在疾患が、糖尿病又は糖尿病後期合併症の症状を含む、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
前記前記糖尿病又は糖尿病後期合併症の症状が、糖尿病性腎症、糖尿病性網膜症、糖尿病性脚部潰瘍、心臓血管合併症、又は糖尿病性神経症の１つ以上を含む、請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
前記RAGE介在疾患が、アミロイドーシス、アルツハイマー症、癌、腎不全、自己免疫疾患に関連する炎症、炎症性腸疾患、関節リウマチ、乾癬、多発性硬化症、低酸素症、脳卒中、心臓発作、出血性ショック、敗血症、臓器移植、又は創傷治癒の障害の1つ以上を含む、請求項２６に記載の方法。

【図１Ａ】

【図１Ｂ】

【図１Ｃ】

【図１Ｄ】

【図１Ｅ】

【図１Ｆ】

【図１Ｇ】

【図１Ｈ】

【図１Ｉ】

【図１Ｊ】

【図１Ｋ】

【図１Ｌ】

【図１Ｍ】

【図２Ａ】

【図２Ｂ】

【図３Ａ】

【図３Ｂ】

【図４】

【図５】

【図６Ａ】

【図６Ｂ】

【図６Ｃ】

【図６Ｄ】

【図６Ｅ】

【図６Ｆ】

【図６Ｇ】

【図６Ｈ】

【図６Ｉ】

【図６Ｊ】

【図６Ｋ】

【図６Ｌ】

【図６Ｍ】

【図６Ｎ】

【図６Ｏ】

【図６Ｐ】

【図６Ｑ】

【図６Ｒ】

【図６Ｓ】

【図６Ｔ】

【図６Ｕ】

【図６Ｖ】

【図６Ｗ】

【図６Ｘ】

【図６Ｙ】

【図６Ｚ】

【図６ＡＡ】

【図６ＢＢ】

【図６ＣＣ】

【図６ＤＤ】

【図６ＥＥ】

【図６ＦＦ】

【図７Ａ】

【図７Ｂ】

【図８Ａ】

【図８Ｂ】

【図８Ｃ】

【図８Ｄ】

【図８Ｅ】

【図８Ｆ】

【図８Ｇ】

【図８Ｈ】

【図８Ｉ】

【図８Ｊ】

【図８Ｋ】

【図８Ｌ】

【図８Ｍ】

【図８Ｎ】

【図８Ｏ】

【図８Ｐ】

【図８Ｑ】

【図８Ｒ】

【図８Ｓ】

【図８Ｔ】

【図８Ｕ】

【図８Ｖ】

【図９Ａ】

【図９Ｂ】

【図１０】

【図１１】

【図１２】

【公表番号】特表２０１３−５２０１６６（Ｐ２０１３−５２０１６６Ａ）
【公表日】平成２５年６月６日（２０１３．６．６）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１２−５５３８７４（Ｐ２０１２−５５３８７４）
【出願日】平成２２年１０月１９日（２０１０．１０．１９）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２０１０／０５３１５７
【国際公開番号】ＷＯ２０１１／１０２８６０
【国際公開日】平成２３年８月２５日（２０１１．８．２５）
【出願人】（５０７０３６８３２）トランステック　ファーマ，インコーポレイティド (11)
【Ｆターム（参考）】