【課題】組織もしくは細胞から得られたＤＮＡのサンプル中のＡＡＶ配列の検出および単離方法、及び、本方法により同定されるＡＡＶ配列およびこれらの方法を使用して構築されるベクターを提供する。
【解決手段】核に侵入しならびにヘルパーウイルスの共感染の非存在下で細胞ＤＮＡ中に組込み、そして潜在性感染を確立するアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）の能力を利用する方法。ヒトおよび非ヒト霊長類起源の組織ならびに他の供給源からのＤＮＡからのＡＡＶの配列の検出、同定および／もしくは単離のためのポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）に基づく戦略。有利には、他の組込まれたウイルスおよび非ウイルス配列の検出、同定および／もしくは単離。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＡＡＶｃｙ．５、配列番号１０３のアミノ酸１から７２８のアミノ酸配列またはそれと９５％同一である配列を有するＡＡＶキャプシド、およびＡＡＶ逆方向末端反復配列（ＩＴＲ）並びに宿主細胞中での発現を導く調節配列に操作可能に連結されたヘテロロガスな遺伝子を有するミニ遺伝子、を含んでなるアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）。
【請求項２】
ＩＴＲがＡＡＶ２からのものである、請求項１に記載のＡＡＶ。
【請求項３】
ｖｐ１キャプシドタンパク質、配列番号１０３のアミノ酸（ａａ）１から７２８；
ｖｐ２キャプシドタンパク質、配列番号１０３のａａ１３８から７２８；および
ｖｐ３キャプシドタンパク質、配列番号１０３のａａ１９７から７２８；
から成る群から選択されるＡＡＶｃｙ．５タンパク質を含んでなる、単離されたキャプシドタンパク質。
【請求項４】
配列番号１０３の１９７から７２８のａａ配列またはそれと９５％同一である配列を有するＡＡＶｃｙ．５を少なくとも含んでなるＡＡＶキャプシド、およびＡＡＶ逆方向末端反復配列（ＩＴＲ）並びに宿主細胞中での発現を導く調節配列に操作可能に連結されたヘテロロガスな遺伝子を有するミニ遺伝子、を含んでなるアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）。
【請求項５】
請求項３に記載のタンパク質をコードする単離された核酸分子。
【請求項６】
前記分子がプラスミドである、請求項５に記載の分子。
【請求項７】
前記分子が機能的ＡＡＶ ｒｅｐ遺伝子をさらに含んでなる、請求項５または６に記載の分子。
【請求項８】
ＡＡＶ血清型キャプシドを含んでなる組換えアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）の生成方法であって、（ａ）アデノ随伴ウイルスキャプシドをコードする請求項５に記載の分子；（ｂ）機能的ｒｅｐ遺伝子；（ｃ）ＡＡＶ逆方向末端反復配列（ＩＴＲ）およびトランスジーンを含んでなるミニ遺伝子；ならびに（ｄ）ＡＡＶキャプシドタンパク質中へのミニ遺伝子のパッケージングを可能にするのに十分なヘルパー機能、を含有する宿主細胞を培養する工程を含んでなる、上記方法。
【請求項９】
請求項１、２または４のいずれかに記載のアデノ随伴ウイルスまたは請求項５から７のいずれかに記載の分子でトランスフェクトされた宿主細胞。
【請求項１０】
請求項１、２または４のいずれかに記載のＡＡＶおよび生理学的に適合性の担体を含んでなる組成物。
【請求項１１】
請求項５から７のいずれかに記載の分子および生理学的に適合性の担体を含んでなる組成物。

【公開番号】特開２０１３−１３４１４（Ｐ２０１３−１３４１４Ａ）
【公開日】平成２５年１月２４日（２０１３．１．２４）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１２−２００５００（Ｐ２０１２−２００５００）
【出願日】平成２４年９月１２日（２０１２．９．１２）
【分割の表示】特願２００９−１０２９８８（Ｐ２００９−１０２９８８）の分割
【原出願日】平成１４年１１月１２日（２００２．１１．１２）
【出願人】（５０２４０９８１３）ザ・トラステイーズ・オブ・ザ・ユニバーシテイ・オブ・ペンシルベニア (37)
【Ｆターム（参考）】