【課題】光学的分析法と両立し、高い処理量を得られる生態細胞の膜電位を調整する確実で特定の方法を提供すること。
【解決手段】候補化合物の生物学的活動を特徴付けする方法は、細胞を候補化合物に曝すことと、その後で、トランスメンブレン電位をターゲットイオンチャネルの予め選択された電圧依存状態に対応するレベルに設定するように、細胞を電界に繰り返し曝すこととを含むことができる。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
候補化合物の生物学的活性度を測定する方法であって、
標本ウェル内の観察エリア内に細胞の集団を設置する工程と、
前記細胞の集団を前記化合物に曝露する工程と、
前記細胞の集団を電界に曝露して前記細胞の集団の膜内外電位の変化の制御を生じさせる工程であり、前記電界は第１のパルスの連続と第２のパルスの連続との間には一時停止がある第１のパルスの連続および第２のパルスの連続を含んでいる工程と、
前記第１のパルスの連続および前記第２のパルスの連続の少なくとも一部の間に前記細胞の集団の膜内外電位の変化をモニタリングする工程とを含む方法。
【請求項２】
モニタリングは光学的モニタリングを含む請求項１に記載の方法。
【請求項３】
光学的モニタリングには、前記細胞集団を含んだ観察エリアからのＦＲＥＴベースの電
圧センサの蛍光放出を検出する工程を含む請求項２に記載の方法。
【請求項４】
前記第１のパルスの連続から収集したデータを前記第２のパルスの連続から収集したデータとを比較する工程をさらに含む請求項１に記載の方法。
【請求項５】
内外膜電位の変化は前記化合物によるブロックからのイオンチャネル回復を表す請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記一時停止は前記第１のパルスの連続における任意の２つのパルス間の時間間隔の少なくとも２倍長い持続時間を有する請求項１に記載の方法。
【請求項７】
候補化合物の生物学的活性度を測定する方法であって、
標本ウェル内の観察エリア内に細胞の集団を設置する工程と、
前記細胞の集団を前記化合物に曝露する工程と、
前記細胞の集団を電界に曝露して前記細胞の集団の膜内外電位の変化の制御を生じさせる工程であり、前記電界はパルスの連続を含んでいる工程と、
前記細胞の集団の膜内外電位の変化をモニタリングする工程と、
前記パルスの連続の第１の部分の前記電界に対する膜内外電位反応の濃度依存性を、前記パルスの連続の第２部分の前記電界に対する膜内外電位反応の濃度依存性とを比較する工程とを含む方法。
【請求項８】
モニタリングは光学的モニタリングを含む請求項７に記載の方法。
【請求項９】
光学的モニタリングには、前記細胞集団を含んだ観察エリアからのＦＲＥＴベースの電圧センサの蛍光放出を検出する工程を含む請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
内外膜電位の変化は前記細胞の集団におけるイオンチャネルの使用依存性ブロックを表す請求項７に記載の方法。

【図１】

【図２】

【図３】

【図４】

【図５】

【図６】

【図７】

【図８】

【図９】

【図１０】

【図１１】

【図１２】

【図１３】

【図１４】

【図１５】

【図１６】

【図１７】

【図１８】

【図１９】

【図２０】

【図２１】

【図２２】

【図２３】

【図２４】

【図２５】

【図２６】

【図２７】

【図２８】

【図２９】

【図３０】

【図３１】

【図３２】

【図３３】

【図３４】

【図３５】

【図３６】

【図３７】

【図３８】

【図３９】

【図４０】

【図４１】

【図４２】

【公開番号】特開２０１１−１７４９３９（Ｐ２０１１−１７４９３９Ａ）
【公開日】平成２３年９月８日（２０１１．９．８）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１１−８９６３７（Ｐ２０１１−８９６３７）
【出願日】平成２３年４月１３日（２０１１．４．１３）
【分割の表示】特願２００６−５２０２３７（Ｐ２００６−５２０２３７）の分割
【原出願日】平成１６年７月８日（２００４．７．８）
【出願人】（５０６０１４８７１）ヴァーテックス　ファーマシューティカルズ、　インコーポレイテッド (6)
【氏名又は名称原語表記】ＶＥＲＴＥＸ　ＰＨＡＲＭＡＣＥＵＴＩＣＡＬＳ，　ＩＮＣ．
【Ｆターム（参考）】