ガドリニウム化合物及びＭＲＩ用造影剤
【課題】Ｔ１緩和能が高く、少ない投与量でも高感度に造影可能であり、全身血管及び肝臓の造影に優れ、さらに２４時間以内に体外に大部分が排泄される安全性を有する新規なガドリニウム化合物及びそれを含むＭＲＩ用造影剤を提供する。
【解決手段】Ｇｌｕ−４Ａｃ−Ｇｄ−ＤＴＰＡ、Ｇｌｕ−４−Ｇｄ−ＤＴＰＡ−６、Ｇｌｕ−４−Ｇｄ−ＤＴＰＡ−３（Ｇｌｕはグルコース、Ａｃはアセチル、ＤＴＰＡはジエチレントリアミンペンタ酢酸を示す。）等のガドリニウム錯体及びそれ等を含むＭＲＩ用造影剤。
【解決手段】Ｇｌｕ−４Ａｃ−Ｇｄ−ＤＴＰＡ、Ｇｌｕ−４−Ｇｄ−ＤＴＰＡ−６、Ｇｌｕ−４−Ｇｄ−ＤＴＰＡ−３（Ｇｌｕはグルコース、Ａｃはアセチル、ＤＴＰＡはジエチレントリアミンペンタ酢酸を示す。）等のガドリニウム錯体及びそれ等を含むＭＲＩ用造影剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規なガドリニウム化合物及びそれを含有するＭＲＩ用造影剤に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
ＭＲＩは生体内の断層画像を得る方法で、病理学的構造が詳細に画像化できるため，画像診断法として幅広く活用されている。ＭＲＩのメカニズムは、高磁場中で人体に電波を当てることにより、人体中に含まれる水や脂肪の水素原子を核磁気共鳴させ、組織の違いによる信号を読み取り、画像化するものである。実際、医療の現場ではより鮮明な画像を得るために、ガドリニウム錯体を含有するＭＲＩ造影剤を使用する。その中で、Ｇｄ（III）−ＤＴＰＡ（ジエチレントリアミンペンタ酢酸のガドリニウム（III）錯体（以下マグネビストと呼称する。）は、ガドリニウム化合物として初めてＭＲＩ（核磁気共鳴撮像）用造影剤として１９８８年に実用化されたものであり、全世界で４５００万以上の症例に使用されてきた（例えば、非特許文献１参照）。マグネビストは水溶性で分子量が小さいため、血管から臓器や組織への移行が早く、血管、特に静脈を明確に造影することが困難であった。一方、近年、特定の臓器の微小な疾患（例えば肝臓、膵臓、肺等の転移性癌）の造影が強く求められている。しかしながら、マグネビストには臓器特異性がないため、要望を満たすことが困難である。
【０００３】
一方、グルコースラクトンやガラクトースラクトンで末端を修飾したガドリニウム錯体（例えば、非特許文献２、３及び特許文献１参照）が提案されている。これらは、マグネビストと比較して、Ｔ１緩和能が高く、少量の投与量で十分な造影効果を得ることができるため、血流の少ない末梢血管の造影が十分に可能である。また、肝臓への集積効果が高いため肝臓の病変を高感度、高解像度で造影することが可能であり、肝臓の微細な転移性癌の早期発見に多いに貢献することが期待される。そこで我々はマグネビストに組織認識部位として糖を４分子し導入した新規ガドリニウム錯体を近年発明した（例えば、非特許文献２参照）。このガドリニウム錯体は血管貯留性が高く、肝臓、腎臓、血管に高い組織選択性が示唆された。さらにＧｄ−ＤＴＰＡで全く造影できなかった肝細胞がんを鮮明に画像化できた。しかしながら、血管貯留性が高く、２４時間経過しても血管から十分に排出されず、体の中に必要以上に留まってしまう欠点を有していた。
【特許文献１】特開２００４−３０７３５６号公報
【非特許文献１】Ｃｈｅｍ．Ｒｅｖ．，１９９９，Ｖｏｌ．９９，２２９３−２３５２
【非特許文献２】Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔ．，４１（２０００）８４８５−８４８８
【非特許文献３】Ｇａｏｄｅｎｇ Ｘｕｅｘｉａｏ Ｈｕａｘｕｅ Ｘｕｅｂａｏ，（１９９７），１８（７），１０７１−１０７９
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
本発明の目的は、（１）Ｔ１緩和能が高く、少ない投与量でも高感度に造影可能であり、（２）全身血管及び肝臓の造影に優れ、（３）さらに２４時間以内に体外に大部分が排泄される安全性を有する新規なガドリニウム化合物及びそれを含むＭＲＩ用造影剤を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明の上記課題は、以下の構成により達成される。
１．下記一般式（１）で表されることを特徴とするガドリニウム化合物。
【０００６】
【化１】
【０００７】
（式中、波線はアクシャルまたはエカトリアルの立体配置であることを表す。）
２．下記一般式（２）で表されることを特徴とするガドリニウム化合物。
【０００８】
【化２】
【０００９】
（式中、Ｇ１は糖ラクトンとアミノ基が反応した残基を表す。ｎは３から８の整数を表す。）
３．前記糖ラクトンの糖が、アロース、アルトロース、グルコース、マンノース、ギュロース、イドース、ガラクトース、タロース、リボース、アラビノース、キシロース、リキソース、エリトロース、トレオース、セロビオース、マルトース、ラクトースまたはマルトリオロースから選ばれる少なくとも一種であることを特徴とする前記２に記載のガドリニウム化合物。
４．前記糖ラクトンの糖がグルコースであることを特徴とする前記３に記載のガドリニウム化合物。
５．下記一般式（３）で表されることを特徴とするガドリニウム化合物。
【００１０】
【化３】
【００１１】
（式中、Ｇ３は糖ラクトンとアミノ基が反応した残基を表す。）
６．前記糖ラクトンの糖が、アロース、アルトロース、グルコース、マンノース、ギュロース、イドース、ガラクトース、タロース、リボース、アラビノース、キシロース、リキソース、エリトロース、トレオース、セロビオース、マルトース、ラクトースまたはマルトリオロースから選ばれる少なくとも一種であることを特徴とする前記５に記載のガドリニウム化合物。
７．前記糖ラクトンの糖がグルコースであることを特徴とする前記６に記載のガドリニウム化合物。
８．前記１〜７のいずれか１項に記載のガドリニウム化合物の少なくとも１種を含有することを特徴とするＭＲＩ用造影剤。
【発明の効果】
【００１２】
本発明によれば、（１）Ｔ１緩和能が高く、少ない投与量でも高感度に造影可能であり、（２）全身血管及び肝臓の造影に優れ、（３）さらに２４時間以内に体外に大部分が排泄される安全性を有する新規なガドリニウム化合物及びそれを含むＭＲＩ用造影剤を提供することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１３】
本発明者は、上記課題に鑑み鋭意検討の結果、前記一般式（１）で表される特定構造のガドリニウム化合物は、（１）Ｔ１緩和能が高く、少ない投与量でも高感度に造影可能であり、（２）全身血管及び肝臓の造影に優れ、（３）さらに２４時間以内に体外に大部分が排泄される安全性を有する新規なガドリニウム化合物であり、これを含むＭＲＩ用造影剤（以下、造影剤ともいう）は優れた造影剤であることを見出した。
【００１４】
以下、本発明を詳細に説明する。
【００１５】
《一般式（１）〜（３）で表されるガドリニウム化合物》
一般式（１）において、波線はアクシャルまたはエカトリアルの立体配置であることを表すが、一般式（１）の合成原料であるパーアセチル糖ラクトンのアセトキシル基の立体配置を反映したものであることが好ましい。
【００１６】
パーアセチル糖ラクトンの糖としては、アロース、アルトロース、グルコース、マンノース、ギュロース、イドースまたはガラクトースであることが好ましく、特に好ましくはグルコースである。
【００１７】
一般式（２）及び（３）において、Ｇ１及びＧ３は糖ラクトンとアミノ基が反応した残基を表す。糖ラクトンの糖は、単糖、二糖、三糖、多糖の全てのアルドペントース、アルドヘキソースを表すが、糖としてはアロース、アルトロース、グルコース、マンノース、ギュロース、イドース、ガラクトース、タロース、リボース、アラビノース、キシロース、リキソース、エリトロース、トレオース、セロビオース、フコース、マルトース、イソマルトース、ラクトースまたはマルトリオロースが挙げられる。好ましくは、アロース、アルトロース、グルコース、マンノース、ギュロース、イドース、ガラクトース、タロース、リボース、アラビノース、キシロース、リキソース、エリトロース、トレオース、セロビオース、マルトース、ラクトースまたはマルトリオロースであり、より好ましくはグルコース、ガラクトースまたはマンノースである。特に好ましくはグルコースである。
【００１８】
一般式（２）において、ｎは３から８の整数を表すが、好ましくは３から６の整数である。
【００１９】
次に、本発明の一般式（１）〜（３）で表されるガドリニウム化合物の具体例を示す。しかし本発明はこれらに限定されない。
【００２０】
【化４】
【００２１】
【化５】
【００２２】
【化６】
【００２３】
【化７】
【００２４】
【化８】
【００２５】
【化９】
【００２６】
【化１０】
【００２７】
【化１１】
【００２８】
【化１２】
【００２９】
【化１３】
【００３０】
【化１４】
【００３１】
【化１５】
【００３２】
【化１６】
【００３３】
【化１７】
【００３４】
【化１８】
【００３５】
【化１９】
【００３６】
【化２０】
【００３７】
【化２１】
【００３８】
【化２２】
【００３９】
【化２３】
【００４０】
【化２４】
【００４１】
これらの例示化合物の合成方法は実施例に示す。
【００４２】
《造影剤》
次に、本発明のガドリニウム化合物を含有するＭＲＩ用造影剤について詳述する。
【００４３】
本発明の造影剤は、本発明のガドリニウム化合物の少なくとも１種を含有する。ガドリニウム化合物は２種以上を併用してもよいが、好ましくは１種のみの化合物を含有することである。
【００４４】
本発明のガドリニウム化合物は良好な水溶性を有する。好ましくは、室温において少なくとも１．０ｍＭ、好ましくは１０ｍＭ、そしてより好ましくは１００ｍＭの濃度まで水に溶解する。注射のために製剤化された本発明の造影剤は、迅速で簡便な注射を可能にするよう適度な粘度のみを有するべきである。粘度は、１０．２０×１０−４ｋｇｆ・ｓ／ｍ２（１０ｍＰａ・ｓ、１０ｃＰ）未満、または好ましくは５．１０×１０−４ｋｇｆ・ｓ／ｍ２（５ｍＰａ・ｓ、５ｃＰ）未満、またはより好ましくは２．０４×１０−４ｋｇｆ・ｓ／ｍ２（２ｍＰａ・ｓ、２ｃＰ）未満である。また、注射のために製剤化された本発明の造影剤は過度の浸透圧を有するべきではない。なぜなら、これは毒性を増加させ得るからである。浸透圧は、３０００ミリオスモル／ｋｇ未満、または好ましくは２５００ミリオスモル／ｋｇ未満、または最も好ましくは９００ミリオスモル／ｋｇ未満である。
【００４５】
本発明の造影剤は、無機または有機の酸及び塩基から誘導される塩を含有することができる。塩の具体例としては、酢酸塩、アジピン酸塩、アルギン酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、重硫酸塩、酪酸塩、クエン酸塩、ショウノウ酸塩、ショウノウスルホン酸塩、シクロペンタンプロピオン酸塩、ジグルコン酸塩、ドデシル硫酸塩、エタンスルホン酸塩、フマル酸塩、グルコヘプタン酸塩、グリセロリン酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、２−ヒドロキシエタンスルホン酸塩、乳酸塩、マレイン酸塩、メタンスルホン酸塩、２−ナフタレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、シュウ酸塩、パモエート、ペクチン酸塩、過硫酸塩、３−フェニルプロピオン酸塩、ピクリン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、チオシアン酸塩、トシル酸塩、ウンデカン酸塩、アンモニウム塩、アルカリ金属塩（例えば、ナトリウム及びカリウム塩）、アルカリ土類金属塩（例えば、カルシウム、マグネシウム及び亜鉛塩）、有機塩基を有する塩（例えば、ジシクロヘキシルアミン塩、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン）、及びアミノ酸（例えば、アルギニン、リジン）を有する塩等を包含する。また、塩基性窒素含有基は、低級アルキルハライド（例えば、メチル、エチル、プロピル及びブチルクロライド、ブロマイド及びヨージド）、ジアルキル硫酸（例えば、ジメチル、ジエチル、ジブチル及びジアミル硫酸）、長鎖ハライド（例えば、デシル、ラウリル、ミリスチル及びステアリルクロライド、ブロマイド及びヨージド）、アラルキルハライド（例えば、ベンジル及びフェネチルブロマイド）ならびにその他のような薬剤で４級化され得る。それによって、水溶性または油溶性あるいは水分散性または油分散性の生成物が得られる。本発明の好ましい塩は、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン、カルシウム及びナトリウム塩である。
【００４６】
本発明の造影剤は、任意のキャリア、アジュバントもしくはビヒクルを含有することができる。本発明の造影剤に使用され得るキャリア、アジュバント及びビヒクルは、イオン交換物質、アルミナ、ステアリン酸アルミニウム、レシチン、血清タンパク質（例えば、ヒト血清アルブミン）、緩衝性物質（例えば、ホスフェート）、グリシン、ソルビン酸、ソルビン酸カリウム、ＴＲＩＳ（トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン）、植物性飽和脂肪酸の部分グリセリド混合物、水、塩または電解質（例えば、硫酸プロタミン、リン酸水素二ナトリウム、リン酸水素カリウム、塩化ナトリウム、亜鉛塩）、コロイド状シリカ、三ケイ酸マグネシウム、ポリビニルピロリドン、セルロースベースの物質、ポリエチレングリコール、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ポリアクリレート、ワックス、ポリエチレン−ポリオキシプロピレン−ブロックポリマー、ポリエチレングリコール及びラノリンを包含するが、これらに限定されない。
【００４７】
本発明の造影剤は、注射可能な無菌の調合薬の形態（例えば、注射可能な無菌の水性または油性の懸濁液）であり得る。この懸濁液は、当該分野で公知の技術に従い、適切な分散剤または湿潤剤及び懸濁剤を用いて製剤され得る。注射可能な無菌の調合薬はまた、無毒性の非経口で受容可能な希釈剤または溶媒中における、無菌の注射可能な溶液または懸濁液（例えば、１，３−ブタンジオール中の溶液として）であってもよい。用いられ得る受容可能なビヒクル及び溶媒は、水、リンガー溶液及び等張食塩水である。さらに、無菌の不揮発油が溶媒または懸濁媒体として使用される。この目的のために、合成のモノ−またはジ−グリセリドを含む任意の刺激のない不揮発油が使用され得る。脂肪酸（例えば、オレイン酸及びそのグリセリド誘導体）は、天然の薬学的に受容可能なオイル（例えば、オリーブオイルまたはヒマシ油）と同様に、注射可能物の調製、特にこれらのポリオキシエチル化した変形物において有用である。これらのオイル溶液または懸濁液はまた、長鎖アルコールの希釈剤または分散剤（例えば、Ｐｈ．Ｈｅｌｖまたは類似のアルコール）を含み得る。
【００４８】
本発明の造影剤は、経口投与、非経口投与、吸入スプレーによる投与、局所投与、直腸投与、鼻腔投与、頬投与、膣投与または従来の無毒性の薬学的に受容可能なキャリア、アジュバント及びビヒクルを含有する投薬製剤中に埋め込まれたリザーバを介して投与され得る。本明細書に使用されるように用語「非経口」は、皮下、静脈内、筋肉内、関節内、滑液包内、胸骨内、くも膜下、肝臓内、病変内及び頭蓋内注射または点滴技術を含む。
【００４９】
経口投与される場合、本発明の造影剤を含む薬学的組成物は、任意の経口的に受容可能な投薬形態（カプセル、錠剤、水性の懸濁液または溶液が挙げられるがこれらに限定されない）で投与され得る。錠剤を経口使用する場合、一般的に使用されるキャリアには、ラクトース及びコーンスターチが挙げられる。代表的には、ステアリン酸マグネシウムのような潤滑剤もまた添加される。カプセル形態の経口投与に対して、有用な希釈剤としては、ラクトース及び乾燥コーンスターチが挙げられる。経口使用に水性懸濁液を必要とする場合、活性成分は乳化剤及び懸濁剤と配合される。所望の場合、特定の甘味料、香味料または着色料もまた添加してもよい。あるいは、直腸投与のために座薬形態で投与される場合には、本発明の造影剤は、室温で固体であるが直腸温で液体である適切な非刺激性の賦形剤を混合して調製され得、その結果直腸内で溶け薬剤を放出する。このような物質として、ココアバター、ビーズワックス及びポリエチレングリコールが挙げられる。
【００５０】
また、前述のように、特に、処置標的が局所施用によって容易に接近可能な領域または器官（目、皮膚または下部腸道（ｌｏｗｅｒ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｔｒａｃｔ）を含む）を含む場合に、本発明の造影剤は局所投与され得る。適切な局所製剤は、これらの各領域または器官用に容易に調製される。
【００５１】
下部腸道に対する局所施用は、直腸用座薬製剤または適切な浣腸製剤でなされ得る。局所−経皮性パッチもまた使用してよい。局所施用に対して、本発明の造影剤は、１つ以上のキャリア中に懸濁または溶解される活性成分を含有する、適切な軟膏に製剤され得る。
【００５２】
本発明の造影剤の局所投与のためのキャリアは、鉱油、液体ペトロラタム、白色ペトロラタム、プロピレングリコール、ポリオキシエチレン、ポリオキシプロピレン化合物、乳化ワックス及び水を包含するが、それらに限定されない。あるいは、本発明の造影剤は、１つ以上のキャリア中に懸濁または溶解された活性成分を含有する、適切なローションまたはクリームに製剤されてもよい。適切なキャリアは、鉱油、ソルビタンモノステアレート、ポリソルベート６０、セチルエステルワックス、セテアリールアルコール、２−オクチルドデカノール、ベンジルアルコール及び水を包含するが、それらに限定されない。
【００５３】
眼使用に対して、本発明の造影剤は防腐剤（例えば、ベンジルアルコニウムクロライド）を含有してもしなくてもよい。ｐＨ調節された等張の無菌生理食塩水中に微小化された懸濁液として、または好ましくはｐＨ調節された等張の無菌生理食塩水中の溶液として製剤され得る。あるいは、眼使用に対して本発明の造影剤は、ペトロラタムのような軟膏に製剤され得る。
【００５４】
鼻腔エーロゾルまたは吸入による投与に対して、本発明の造影剤は、製薬的製剤の分野で周知の技術に従って調製され、そしてベンジルアルコールもしくは他の適切な防腐剤、生体利用性を増大させる吸収促進剤、フルオロカーボン、及び／または他の従来の可溶化剤もしくは分散剤を使用し、生理食塩水中の溶液として調製され得る。
【００５５】
投薬は、診断用画像化機器の感度、ならびに造影剤の組成に依存する。例えば、ＭＲＩ画像化に対して、本発明のガドリニウム化合物を含有する造影剤は、一般的に、より低い磁気モーメントを有する常磁性物質、例えば、鉄（III）を含有する造影剤より、より低い投薬を必要とする。好ましくは、投薬は、１日当たり約０．００１〜１ｍｍｏｌ／ｋｇ体重の活性金属−リガンド錯体の範囲である。より好ましくは、投薬は、１日当たり約０．００５〜０．０５ｍｍｏｌ／ｋｇ体重の範囲である。
【００５６】
しかし、任意の特定の患者に対する特定の投薬処方もまた、種々の因子（年齢、体重、健康状態、性別、治療食、投与時間、排泄速度、薬物の組み合わせ及び処置する内科医の判断を含む）に依存することが理解されるべきである。
【００５７】
本発明では造影剤の適切な投薬の投与に続いて、ＭＲＩ画像化が行われる。パルス系列（反転回復（ＩＲ）；スピンエコー（ＳＥ）；エコー断層（ＥＰＩ）；飛行時間（ＴＯＦ）；ターボフラッシュ；グラディエントエコー（ＧＥ））及び画像化パラメーターの値（エコー時間（ＴＥ）；反転時間（ＴＩ）；繰り返し時間（ＴＲ）；フリップ角等）の選択は、要求される診断情報に支配される。一般的には、Ｔ１−加重された画像を得ることが望まれる場合、ＴＥはＴ１−加重を最大とするために３０ミリ秒未満（または最小値）であるべきである。逆に、Ｔ２の測定が所望される場合、ＴＥは競合するＴ１効果を最小にするために３０ミリ秒より大きくあるべきである。ＴＩ及びＴＲは、Ｔ１−及びＴ２−加重された画像の両方に対して、ほぼ同じに保たれる。一般的に、ＴＩ及びＴＲは、それぞれ、約５〜１０００ミリ秒及び２〜１０００ミリ秒のオーダーである。
【実施例】
【００５８】
以下、実施例を挙げて本発明を詳細に説明するが、本発明はこれらに限定されない。なお、特に断りない限り、実施例中の「％」は「質量％」を表す。
【００５９】
（実験方法）
機器
元素分析：Ｐｅｒｋｉｎ−Ｅｌｍｅｒ−２４０
ＦＴ−ＩＲ：ＪＡＳＣＯ ＦＴ／ＩＲ−４１０赤外分光計
ＮＭＲ：ＪＥＯＬ ＪＮＭ−ＡＬ３００核磁気共鳴分光計
重溶媒としては重クロロホルム（ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ−ｄ）、重水（Ｄ２Ｏ）、重ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ−ｄ６）を使用し、内部標準としてはＴＭＳを使用した。
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ−ＭＳ：ＧＬ Ｓｃｉｅｎｃｅ社製Ｖｏｙａｇｅｒ−ＤＥ ｐｏｒｉｍｅｒｉｘ
マトリクスとしてα−ＣＨＣＡを使用した。
示差熱・熱重量測定：島津製作所 ＤＴＧ６０Ａ／６０ＡＨ
薄層クロマトグラフィー：和光純薬工業のクロマトシートを用いた。スポットの呈色にはヨウ素蒸気を利用した。
複合ＴＥＭ；元素分析装置付き高圧透過型電子顕微鏡
日本電子製ＪＥＭ２００ＣＸ型
元素分析装置部（ＫＥＶＥＸ ７０２５ Ｊ型エネルギー分散形）
緩和速度測定：１．５Ｔ 超伝導ＭＲ撮影装置Ｍａｇｎｅｔｏｍ ＳＰ（Ｓｉｅｍｅｎｓ社製、Ｅｒｌａｎｇｅｎ）に送受信ｋｎｅｅ−ｃｏｉｌを併用して計測を行なった。撮像ｐｕｌｓｅ ｓｅｑｕｅｎｃｅはｓｐｉｎ ｅｃｈｏ系列 ＴＲ１（ｍｓ）＝３０００、ＴＲ２（ｍｓ）＝６０、ＴＥ（ｍｓ）＝１５、ｍａｔｒｉｘ＝２５６ｘ１９２、ＦＯＶ（ｃｍ）＝１６、ＮＥＸ＝２である。
【００６０】
試薬
全ての試薬類及び溶媒類は、和光純薬工業株式会社・シグマ アルドリッチ・東京化成工業株式会社・関東化学株式会社からの市販品を使用した。
【００６１】
〔合成例１：Ｇｌｕ−４Ａｃ−Ｇｄ−ＤＴＰＡの合成〕
下記反応スキームにより、例示化合物Ｇｌｕ−４Ａｃ−Ｇｄ−ＤＴＰＡを合成した。
【００６２】
【化２５】
【００６３】
（第１工程）
アルゴン雰囲気下、ナスフラスコに２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−ｄ（＋）−グルコノ−１，５−ラクトン１を入れ、ピリジンに溶解し、氷水浴中で撹拌しながらジエチレントリアミンをゆっくり滴下した。減圧下で溶媒を除去し、クロロホルムに溶解し、有機相を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（５ｍｌ）、飽和塩化ナトリウム水溶液（５ｍｌ）の順で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過、濃縮後、目的化合物である黄色結晶２（２．０６ｇ、２．５９ｍｍｏｌ）を粗収率９０％で得た。
分子式：Ｃ３２Ｈ４９Ｎ３Ｏ２０；Ｍ．Ｗ．：７９５．７４
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ−ＭＳ（＋）：７９６．４４［Ｍ＋Ｈ］＋
ｍ．ｐ．：２２５℃
ＩＲ（ＫＢｒ）
ν（ｃｍ−１）：３４６３（Ｏ−Ｈ）、１７４３（Ｃ＝Ｏ ｏｆ ｅｓｔｅｒ）、１６５８（Ｃ＝Ｏ ｏｆ ａｍｉｄｅ）、１５４２（Ｎ−Ｈ ｏｆ ａｍｉｄｅ）、１２３４（Ｃ−Ｏ ｏｆ ｅｓｔｅｒ）
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）
σ（ｐｐｍ）：２．０７，２．１４，２．１９，２．２３（ｓ×４，２４Ｈ，ＣＨ３Ｃ＝Ｏ×８）、２．７４−３．７０（ｍ，１０Ｈ，ＯＨ×２，ＣＨ２ＮＨ×２，ＣＨ２ＮＨＣ＝Ｏ×２）、３．９８−４．４５（ｍ，６Ｈ，ＣＨ２×２，ＣＨ×２（ｓｕｇａｒ ｈｙｄｒｏｇｅｎｓ））、４．９７−５．５５（ｍ，６Ｈ，ＣＨ×６（ｓｕｇａｒ ｈｙｄｒｏｇｅｎｓ ））
（第２工程）
アルゴン雰囲気下、ナスフラスコにＤＴＰＡ二無水物３（０．４８３ｇ、１．３５ｍｍｏｌ）と化合物２（２．１５ｇ、２．７０ｍｍｏｌを入れ、ＤＭＦ（１０ｍｌ）に溶解し、５０℃で２４時間撹拌した。減圧下で溶媒を除去し、粗生成物を再結晶（イソプロパノール）にて単離精製し、白色結晶４（１．９５ｇ、１．００ｍｍｏｌ）を収率７４％で得た。
分子式：Ｃ７８Ｈ１１７Ｎ９Ｏ４８；Ｍ．Ｗ．：１９４８．８０
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ−ＭＳ（−）：１９４５．６１［Ｍ−３Ｈ］−
ｍ．ｐ．：１８０℃
ＩＲ（ＫＢｒ）
ν（ｃｍ−１）：３４４０（Ｏ−Ｈ）、１７４３（Ｃ＝Ｏ ｏｆ ｅｓｔｅｒ）、１６５８（Ｃ＝Ｏ ｏｆ ａｍｉｄｅ）、１５４２（Ｎ−Ｈ ｏｆ ａｍｉｄｅ）、１２２６（Ｃ−Ｏ ｏｆ ｅｓｔｅｒ）
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）
σ（ｐｐｍ）：１．９７，２．００，２．１０，２．１３（ｓ×４，４８Ｈ，ＣＨ３Ｃ＝Ｏ×１６）、３．００−３．８４（ｍ，３８Ｈ，ＯＨ×４，ＣＨ２ＮＣ＝Ｏ×４，ＣＨ２ＮＨＣ＝Ｏ×４，ＣＨ２Ｎ×４，ＮＣＨ２Ｃ＝Ｏ）、３．９２−４．３４（ｍ，１２Ｈ，ＣＨ２×２，ＣＨ×２（ｓｕｇａｒ ｈｙｄｒｏｇｅｎｓ））、４．７８−５．５３（ｍ，６Ｈ，ＣＨ×６（ｓｕｇａｒ ｈｙｄｒｏｇｅｎｓ））
（第３工程）
ナスフラスコに４（０．１５０ｇ、０．０６７６ｍｍｏｌ）とＧｄＣｌ３・６Ｈ２Ｏ（０．３００ｇ、０．０８１１ｍｍｏｌ）を入れ、水（３ ｍｌ）に溶解し、６０℃で１時間撹拌した。反応終了後水溶液をエーテル（３ｍｌ×３）で洗浄した。減圧下で溶媒を除去し、白色結晶の目的物Ｇｌｕ−４Ａｃ−Ｇｄ−ＤＴＰＡを８１ｍｇ得た。（収率５０％）
分子式：Ｃ７８Ｈ１２５Ｎ９Ｏ５２；Ｍ．Ｗ．：２１１６．９４
ＩＲ（ＫＢｒ）
ν（ｃｍ−１）：３４６０（Ｏ−Ｈ）
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ−ＭＳ（＋）：２０９８ ［Ｍ−Ｈ２Ｏ］−
〔合成例２：Ｇｌｕ−４−Ｇｄ−ＤＴＰＡ−６の合成〕
下記反応スキームにより、例示化合物Ｇｌｕ−４−Ｇｄ−ＤＴＰＡ−６を合成した。
【００６４】
【化２６】
【００６５】
（第１工程）
アルゴン雰囲気下、ナスフラスコにＤ−（＋）−Ｇｌｕｃｏｎｏ−１，５−ｌａｃｔｏｎｅ（３．００１ｇ、１６．８ｍｍｏｌ）を入れ、ＤＭＦ（３０ｍｌ）に溶解し、室温で撹拌しながらＢｉｓ（ｈｅｘａｍｅｔｈｙｌｅｎｅ）ｔｒｉａｍｉｎｅ（１．８２９ｇ、８．４９ｍｍｏｌ）を少しずつ加えた。８時間７０℃で撹拌した後、３０分間氷水浴し、析出した結晶を減圧ろ過し、乾燥して白色結晶のジグルコシルアミン（Ｃ６）５を収率８１．２％で得た。
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ−ＭＳ（＋），５７２［Ｍ＋Ｈ］＋
１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）
δ（ｐｐｍ）：１．２５−１．４０（ｍ，１６Ｈ；ＣＨ２×８（Ｂｒａｎｃｈ ｈｙｄｒｏｇｅｎｓ））、２．４２−２．４９（ｍ，４Ｈ；ＮＨＣＨ２×２）、３．０１−３．３４（ｍ，４Ｈ；Ｏ＝ＣＮＨＣＨ２×２）、３．３４−３．８９（ｍ，８Ｈ；ＣＨ×８（Ｓｕｇａｒ ｈｙｄｒｏｇｅｎｓ））、３．８９−４．３８（ｍ，４Ｈ；ＣＨ２×２（Ｓｕｇａｒ ｈｙｄｒｏｇｅｎｓ））、４．３８−４．５３，５．３５（ｂｍ，１０Ｈ；ＯＨ×１０）、７．５９（ｔ，２Ｈ，Ｏ＝ＣＮＨ×２）
（第２工程）
アルゴン雰囲気下、ナスフラスコに化合物５（１．０２５ｇ、１．７９ｍｍｏｌ）と化合物３（０．３７８ｇ、１．５８ｍｍｏｌ）を入れ、ＤＭＳＯ（１２ｍｌ）に溶解し、Ｐｙｒｉｄｉｎｅ（０．２８ｍｌ）を加え、６０℃で１日撹拌した。反応終了後、超純水（１ｍｌ）を加え１時間撹拌した。その後、２−Ｐｒｏｐａｎｏｌ（２５ｍｌ）を加えると白色結晶が析出した。その結晶をろ過し、乾燥することにより化合物６を収率８５．８％で得た。
【００６６】
ここでの収率は６が１当量に対してＤＴＰＡが０．２当量存在しているとし、その質量パーセントの収率とした。
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ−ＭＳ（＋），１４９９［Ｍ＋Ｈ］−
１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）
δ（ｐｐｍ）：１．２４−１．４２（ｄｂ，３２Ｈ；ＣＨ２×１６（Ｂｒａｎｃｈ ｈｙｄｒｏｇｅｎｓ））、２．９３−３．６２（ｍ，５６Ｈ；ＮＨＣＨ２×４，Ｎ（ＣＨ２）２Ｎ×２，ＣＨ２ＣＯＯＨ×３，Ｏ＝ＣＮＨＣＨ２×４，ＣＨ×１６（Ｓｕｇａｒ ｈｙｄｒｏｇｅｎｓ），ＯＨ×１０）、３．９０−３．９８（ｂｄ，８Ｈ；ＣＨ２×４（Ｓｕｇａｒ ｈｙｄｒｏｇｅｎｓ））、７．６２−７．６８（ｍ，４Ｈ；Ｏ＝ＣＮＨ×２）
（第３工程）
ナスフラスコに化合物６とＤＴＰＡとの混合物（０．５１６ｇ［６；０．４３０ｇ、０．２９ｍｍｏｌ、ＤＴＰＡ；０．８６１ｇ、０．２４ｍｍｏｌ］と仮定）とＧｄＣｌ３・６Ｈ２Ｏ（０．１０６ｇ、０．２８ｍｍｏｌ）とＰｙｒｉｄｉｎｅ（０．０８ｍｌ）を超純水（４．０ｍｌ）に溶解し、４０℃で１２時間撹拌した。反応終了後２−Ｐｒｏｐａｎｏｌ（２５ｍｌ）を加えると無色結晶が析出した。さらにこの結晶をＭｅｔｈａｎｏｌでリフラックス３回洗浄することによって、未反応のＧｄＣｌ３・６Ｈ２Ｏと反応副生成物であるＧｄ−ＤＴＰＡを除去し、減圧ろ過を行い、真空により乾燥した。その後、結晶を再び超純水（１０ｍｌ）に溶解し、溶液を１０μｌ採取し、１００μｌの超純水で希釈したものと、超純水のみを１１０μｌ入れたマイクロピペットを用意した。それぞれにＰｙｒｉｄｉｎｅ（１０μｌ）、酢酸緩衝溶液（１０μｌ）を加え撹拌し、その溶液にキシレノールオレンジ（１０μｌ）を加え、呈色した色を比較した。結晶を溶解したものが青色に呈色した場合、Ｃｈｉｌｅｘを加え、２時間撹拌し、再び呈色させた。コントロールと同じ色になるまでこの作業を繰り返した。その後、イオン交換樹脂を濾別し、溶液を真空乾燥することで、白色結晶の目的物Ｇｌｕ−４−Ｇｄ−ＤＴＰＡ−６を収率９８．９％で得た。
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ−ＭＳ（＋），１６５３［Ｍ−Ｈ２Ｏ］−
〔合成例３：Ｇｌｕ−４−Ｇｄ−ＤＴＰＡ−３の合成〕
下記反応スキームにより、例示化合物Ｇｌｕ−４−Ｇｄ−ＤＴＰＡ−３を合成した。
【００６７】
【化２７】
【００６８】
（第１工程）
アルゴン雰囲気下、ナスフラスコにＤ−（＋）−Ｇｌｕｃｏｎｏ−１，５−ｌａｃｔｏｎｅ（７．０４２ｇ、３９．５ｍｍｏｌ）を入れ、ＤＭＦ（５０ｍｌ）に溶解し、室温で撹拌しながらＤｉｐｒｏｐｙｌｅｎｅｔｒｉａｍｉｎｅ（２．７５ｍｌ、１９．６ｍｍｏｌ）を少しずつ加えた。５時間５５℃で撹拌した後、３０分間氷水浴し、析出した結晶を減圧ろ過し、乾燥して白色結晶の７を収率８３．６％で得た。
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ−ＭＳ（＋），４８８［Ｍ＋Ｈ］＋
１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）
δ（ｐｐｍ）：１．５４（ｍ，４Ｈ；ＣＨ２×２（Ｂｒａｎｃｈ ｈｙｄｒｏｇｅｎｓ））、２．４５−２．５４（ｍ，４Ｈ；ＮＨＣＨ２×２）、３．１２−３．１４（ｍ，４Ｈ；Ｏ＝ＣＮＨＣＨ２×２）、３．３４−３．９８（ｍ，１２Ｈ；ＣＨ２×２，ＣＨ×８（Ｓｕｇａｒ ｈｙｄｒｏｇｅｎｓ））、４．４２（ｂｓ，１０Ｈ；ＯＨ×１０）、７．６２（ｔ，２Ｈ，Ｏ＝ＣＮＨ×２）
（第２工程）
アルゴン雰囲気下、ナスフラスコに化合物７（２．００８ｇ、４．１２ｍｍｏｌ）と化合物３（０．８８１ｇ、２．４７ｍｍｏｌ）を入れ、ＤＭＳＯ（１５ｍｌ）に溶解し、Ｐｙｒｉｄｉｎｅ（０．４７ｍｌ）を加え、６０℃で１日撹拌した。反応終了後、超純水（１．０ｍｌ）を加え１時間撹拌した。その後、Ｍｅｔｈａｎｏｌ（５０ｍｌ）を加えると白色結晶が析出した。その結晶をろ過し、乾燥することにより化合物８を収率９１．８％で得た。
【００６９】
ここでの収率は化合物８が１当量に対してＤＴＰＡが０．２当量存在しているとし、その質量パーセントの収率とした。
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ−ＭＳ（＋），１３３０［Ｍ＋Ｈ］−，１３５２［Ｍ＋Ｎａ］−
１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）
δ（ｐｐｍ）：１．５９−１．６７（ｍ，８Ｈ；ＣＨ２×４（Ｂｒａｎｃｈ ｈｙｄｒｏｇｅｎｓ））、２．８６−３．５９（ｍ，５６Ｈ；ＮＨＣＨ２×４，Ｎ（ＣＨ２）２Ｎ×２，ＣＨ２ＣＯＯＨ×３，Ｏ＝ＣＮＨＣＨ２×４，ＣＨ×１６（Ｓｕｇａｒ ｈｙｄｒｏｇｅｎｓ）、ＯＨ×１０）、３．９１−４．０３（ｍ，８Ｈ；ＣＨ２×４（Ｓｕｇａｒ ｈｙｄｒｏｇｅｎｓ））、７．７４−７．９３（ｍ，４Ｈ；Ｏ＝ＣＮＨ×２）
（第３工程）
ナスフラスコに化合物８とＤＴＰＡとの混合物（１．００７ｇ［８；０．８３５ｇ、０．６３ｍｍｏｌ、ＤＴＰＡ；０．１６７ｇ、０．４７ｍｍｏｌ］と仮定）とＧｄＣｌ３・６Ｈ２Ｏ（０．２２５ｇ、０．６１ｍｍｏｌ）とＰｙｒｉｄｉｎｅ（０．０１９ｍｌ）を超純水（４．０ｍｌ）に溶解し、４０℃で１２時間撹拌した。反応終了後Ｍｅｔｈａｎｏｌ（２５ｍｌ）を加えると無色結晶が析出した。さらにこの結晶をＭｅｔｈａｎｏｌでリフラックス３回洗浄することによって未反応のＧｄＣｌ３・６Ｈ２Ｏと反応副生成物であるＧｄ−ＤＴＰＡを除去し、減圧ろ過を行い、真空により乾燥した。その後、結晶を再び超純水（１０ｍｌ）に溶解し、溶液を１０μｌ採取し、１００μｌの超純水で希釈したものと、超純水のみを１１０μｌ入れたマイクロピペットを用意した。それぞれにＰｙｒｉｄｉｎｅ（１０μｌ）、酢酸緩衝溶液（１０μｌ）を加え撹拌し、その溶液にキシレノールオレンジ（１０μｌ）を加え、呈色した色を比較した。結晶を溶解したものが青色に呈色した場合、Ｃｈｉｌｅｘを加え、２時間撹拌し、再び呈色させた。コントロールと同じ色になるまでこの作業を繰り返した。その後、イオン交換樹脂を濾別し、溶液を真空乾燥することで、白色結晶の目的物Ｇｌｕ−４−Ｇｄ−ＤＴＰＡ−３を収率７９．０％で得た。
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ−ＭＳ（＋）， １４８５［Ｍ−Ｈ２Ｏ］−
〔合成例４：Ｇｌｕ−６Ａｓ−Ｇｄ−ＤＴＰＡの合成〕
下記反応スキームにより、例示化合物Ｇｌｕ−６Ａｓ−Ｇｄ−ＤＴＰＡを合成した。
【００７０】
【化２８】
【００７１】
【化２９】
【００７２】
（第１工程）
文献（Ｃ．Ｓｕｎ，Ｐ．Ｗｉｒｓｃｈｉｎｇ ａｎｄ Ｋ．Ｄ． Ｊａｎｄａ，Ｂｉｏｏｒｇ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ．，１１（２００３）１７６１−１７６８）に従い合成した中間体Ａ（２１．１ｇ，０．０５０１ｍｏｌ）とトリエチルアミン（１３．９ｍｌ，０．１００ｍｏｌ）をＴＨＦ（１５０ｍｌ）に溶かし、二炭酸ジ−ｔ−ブチル（１０．９ｇ，０．０５０１ｍｏｌ）のＴＨＦ溶液（３０ｍｌ）を氷水浴中で滴下した。１日撹拌した後、減圧下で溶媒を除去した。それから残渣に水（１００ｍｌ）を加えて溶かし、ジクロロメタン（１５０ｍｌ）で３回抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した後、減圧下で溶媒を除去した。そして、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒へキサン：酢酸エチル＝４：１）によって単離精製し、無色透明のＢｏｃ化合物９（１６．２ｇ，０．０３１１ｍｏｌ）を収率６０％で得た。
１Ｈ−ＮＭＲ （ＣＤＣｌ３）
δ（ｐｐｍ）：１．２６（ｔ，９Ｈ，ＪＨＣＨ＝７．１１Ｈｚ；ＣＨ２ＣＨ３×３）、１．４２（ｓ，９Ｈ；（ＣＨ３）３Ｃ）、２．５４（ｔ，６Ｈ，ＪＨＣＨ＝６．４９Ｈｚ；ＣＨ２ＣＯ２Ｅｔ×３）、３．６４（ｓ，６Ｈ；ＯＣＨ２ＣＮＨＢｏｃ×３）、３．７０（ｔ，６Ｈ，ＪＨＣＨ＝６．６２Ｈｚ；ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＯ２Ｅｔ×３）、４．１５（ｑ，６Ｈ，ＪＨＣＨ＝７．１０Ｈｚ；ＣＯ２ＣＨ２ＣＨ３×３）
１３Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）
δ（ｐｐｍ）：１４．２（ＣＨ２ＣＨ３）、２８．３（（ＣＨ３）３Ｃ）、３５．１（ＣＨ２ＣＯ２Ｅｔ）、５８．４（ＢｏｃＮＨＣ）、６０．４（ＣＨ２ＣＨ３）、６６．８，６９．５（ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＯ２Ｅｔ）、６９．５（ＯＣＨ２ＣＮＨＢｏｃ）、７８．９（（ＣＨ３）３ＣＯＣ＝Ｏ）、１５４．８（（ＣＨ３）３ＣＯＣ＝Ｏ）、１７１．４（ＣＯ２Ｅｔ）
（第２工程）
化合物１０（２．００ｇ、２．２７ｍｍｏｌ）、化合物９（０．３２１ｇ、０．７３３ｍｍｏｌ）及び１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢＴ、０．３９６ｇ、２．９３ｍｍｏｌ）を乾燥ＴＨＦ（１５ｍｌ）とジクロロメタン（５ｍｌ）の混合溶媒に加え、アルゴン雰囲気下で０℃に冷却し撹拌しながら乾燥ＴＨＦ（５ｍｌ）に溶かしたジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ、０．６０５ｇ、２．９３ｍｍｏｌ）を加えた。その後、室温で１日間撹拌した。反応終了後析出したＮ，Ｎ′−ジシクロヘキシル尿素を濾別し、濾液を減圧濃縮した。残渣を酢酸エチル（３０ｍｌ）に溶かし、飽和炭酸水素ナトリウム（１５ｍｌ）で洗浄し、次に水（１５ｍｌ）で洗浄した。それから有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧濃縮した。最後にシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒クロロホルム：メタノール＝２０：１）により単離精製し、無色結晶であるデンドリマーウェッジ１１（１．８７ｇ、０．６１６ｍｍｏｌ）を収率８４％で得た。
ＩＲ（ＫＢｒ）
ν（ｃｍ−１）：１７５２（Ｏ＝ＣＯ）、１６７３，１５３３（Ｏ＝ＣＮＨ）、１６７３（Ｏ＝ＣＮ）
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）
δ（ｐｐｍ）：１．４２（ｓ，９Ｈ；（ＣＨ３）３Ｃ）、２．１０−２．２３（ｓ×６，９０Ｈ；ＣＨ３Ｃ＝Ｏ×３０）、２．５５（ｂｓ，６Ｈ；ＯＣＨ２ＣＨ２Ｃ＝Ｏ×３）、３．３４−３．６７（ｍ，３６Ｈ；Ｏ＝ＣＮＨＣＨ２×６Ｏ＝ＣＮＣＨ２×６，ＯＣＨ２ＣＮＨＢｏｃ×３，ＣＨ２ＣＨ２Ｃ＝Ｏ×３）、４．１０−４．３４（ｍ，１２Ｈ；ＣＨ２×６（ｓｕｇａｒ ｈｙｄｒｏｇｅｎｓ））、４．９８−５．６３（ｍ，２４Ｈ；ＣＨ×２４（ｓｕｇａｒ ｈｙｄｒｏｇｅｎｓ））、７．３３（ｂｓ，７Ｈ；Ｏ＝ＣＮＨ×７）
１３Ｃ−ＮＭＲ （ＣＤＣｌ３）
δ（ｐｐｍ）：２０．４，２０．７（ＣＨ３Ｃ＝Ｏ）、２５．０（ＯＣＨ２ＣＨ２Ｃ＝Ｏ）、３３．３，３９．２（Ｏ＝ＣＮＨＣＨ２，Ｏ＝ＣＮＣＨ２）、４５．７，４８．２（ＯＣＨ２ＣＮＨ２，ＯＣＨ２ＣＨ２Ｃ＝Ｏ）、６１．７（ＣＨ２（ｓｕｇａｒ ｃａｒｂｏｎｓ））、６８．９，６９．８，７０．１，７１．６（ＣＨ（ｓｕｇａｒ ｃａｒｂｏｎｓ））、１５５．４（（ＣＨ３）３ＣＯＣ＝Ｏ）、１６７．２，１６７．３，１６９．４，１６９．６，１６９．８，１６９．９，１７０．０，１７０．６，１７０．７，１７３．３（Ｏ＝ＣＮＨ，Ｏ＝ＣＮ，ＣＨ３Ｃ＝Ｏ）
（第３工程）
デンドリマーウェッジ１１（１．３８ｇ、０．４５５ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（５ｍｌ）に溶かし、溶液を撹拌しながらトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ、５ｍｌ、６７．３ｍｍｏｌ）を少しずつ加え、その後室温で１時間３０分撹拌した。反応終了後、減圧下で溶媒を除去し、残渣を酢酸エチル（４０ｍｌ）に溶かし、その溶液を飽和炭酸水素ナトリウム（２０ｍｌ）で洗浄し、次に水（２０ｍｌ）で洗浄した。最後に無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した後、減圧下で溶媒を除去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒クロロホルム：メタノール＝１５：１）で単離精製することで無色結晶のデンドリマーウェッジ１２（１．２０ｇ、０．４１０ｍｍｏｌ）を収率９０％で得た。
ＩＲ （ＫＢｒ）
ν（ｃｍ−１）：３３２６（ＮＨ２）、１７４９（Ｏ＝ＣＯ）、１６７５，１５４２（Ｏ＝ＣＮＨ）、１６７５ （Ｏ＝ＣＮ）
１Ｈ−ＮＭＲ （ＣＤＣｌ３）
δ（ｐｐｍ）：２．０５，２．０８，２．１０，２．２０，２．２５（ｓ×５，９０Ｈ；ＣＨ３Ｃ＝Ｏ×３０）、２．６７（ｂｓ，６Ｈ；ＯＣＨ２ＣＨ２Ｃ＝Ｏ×３）、３．２５−３．８１（ｍ，３６Ｈ；Ｏ＝ＣＮＨＣＨ２×６Ｏ＝ＣＮＣＨ２×６，ＯＣＨ２ＣＮＨ２×３，ＯＣＨ２ＣＨ２Ｃ＝Ｏ×３）、４．００−４．４０（ｍ，１２Ｈ；ＣＨ２×６（ｓｕｇａｒ ｈｙｄｒｏｇｅｎｓ））、５．００−５．８０（ｍ，２４Ｈ；ＣＨ×２４（ｓｕｇａｒ ｈｙｄｒｏｇｅｎｓ））、７．５０（ｂｓ，６Ｈ；Ｏ＝ＣＮＨ×６）
ＮＨ２のピークはプロトン数が少ないため観測されなかった。
１３Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）
δ（ｐｐｍ）：２０．０，２０．４，２０．６，２１．２，２１．５（ＣＨ３Ｃ＝Ｏ）、２５．２（ＯＣＨ２ＣＨ２Ｃ＝Ｏ）、３３．２，３９．３（Ｏ＝ＣＮＨＣＨ２，Ｏ＝ＣＮＣＨ２）、４６．０，４７．８（ＯＣＨ２ＣＮＨ２，ＯＣＨ２ＣＨ２Ｃ＝Ｏ）、６１．６（ＣＨ２（ｓｕｇａｒ ｃａｒｂｏｎｓ））、６８．９，６９．６，６９．８，７１．７（ＣＨ（ｓｕｇａｒ ｃａｒｂｏｎｓ））、１６７．１，１６７．３，１６９．４，１６９．５，１６９．８，１６９．９，１７０．０，１７０．５，１７０．６，１７３．４（Ｏ＝ＣＮＨ，Ｏ＝ＣＮ，ＣＨ３Ｃ＝Ｏ）
分子内に等価な炭素がないＯＣＨ２ＣＮＨ２のピークは観測されなかった。
【００７３】
（第４工程）
デンドリマーウェッジ１２（０．２６ｇ，０．０７８ｍｍｏｌ）を室温下イオン交換水（４．０ｍｌ）に攪拌下に溶解し、ＧｄＣｌ３・６Ｈ２Ｏ（２９ｍｇ、０．０７８ｍｍｏｌ）を添加した。その後、反応混合物を９５℃で加熱した。反応終了後、室温まで冷却し、固体をろ別した。ジエチルエーテル（１０ｍｌ）を用いて洗浄し、乾燥することでＧｄ錯体０．２６ｇ（９５％）を得た。これにイオン交換水（５ｍｌ）及び１Ｍ ＮａＯＨ（４ｍｌ）を加えて溶解し、室温で１〜２時間攪拌した。次に、陽イオン交換樹脂ＤＯＷＥＸ ５０Ｗ−Ｘ８（Ｈ ｆｏｒｍ １００−２００、１．２ｇ）を加えた。イオン交換反応が終了した後、樹脂をろ過により除き、ろ液を減圧下に留去し、目的物Ｇｌｕ−６Ａｓ−Ｇｄ−ＤＴＰＡを黄色結晶として０．１６ｇ（９６％）得た。
ＩＲ（ＫＢｒ）
ν（ｃｍ−１）：３３５５（ＯＨ）、１５８９（Ｏ＝ＣＮＨ，Ｏ＝ＣＮ）
実施例１
本発明及び下記比較のガドリニウム化合物の０．０５ｍＭ生理食塩水溶液を調製し、下記のように緩和時間の測定を行った。
【００７４】
（緩和時間の測定）
１．５Ｔ超伝導ＮＭＲ撮影装置（Ｍａｇｎｅｔｏｍ ＳＰ、Ｓｉｅｍｅｎｓ社製）に送受信ｋｎｅｅ−ｃｏｉｌを併用してスピン−格子緩和時間（Ｔ１）を計測した。撮像条件は、ｓｐｉｎ ｅｃｈｏ系列ＴＲ１（ｍｓ）＝３０００、ＴＲ２（ｍｓ）＝６０、ＴＥ（ｍｓ）＝１５、ｍａｔｒｉｘ＝２５６×１９２、ＦＯＶ（ｃｍ）＝１６、ＮＥＸ＝２である。測定結果を表１に示す。
【００７５】
【表１】
【００７６】
表１から、本発明のガドリニウム化合物は、比較化合物に対してＴ１値がより高率に短縮することが分かった。これは造影剤として信号増強効果が高いことを意味し、少ない投与量でも高感度に造影可能であることを示唆している。
【００７７】
実施例２
実施例１に用いた本発明及び比較のガドリニウム化合物を生理食塩水に溶解し、体重３０ｇのマウス一匹当たり０．３ｍｌで、０．１０ｍｍｏｌ／ｋｇの投与量となるＭＲＩ用造影剤を調製した。
【００７８】
この造影剤をｄｄｙマウスの尾静脈より投与することにより、造影剤の組織内分布を評価した。投入後、５分、３０分、２時間、２４時間後の肝臓及び血液内のガドリニウムの濃度を、誘導結合プラズマ発光分析装置（ＳＰＳ３０００、セイコーインスツルメンツ社製）にて測定した。検体数を２０として得られた結果の平均値を表２に示す。
【００７９】
【表２】
【００８０】
表２より、本発明の造影剤は、比較の造影剤に対し、全身血管及び肝臓の造影に優れ、さらに２４時間以内に体外に大部分が排泄される安全性を有することが分かる。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規なガドリニウム化合物及びそれを含有するＭＲＩ用造影剤に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
ＭＲＩは生体内の断層画像を得る方法で、病理学的構造が詳細に画像化できるため，画像診断法として幅広く活用されている。ＭＲＩのメカニズムは、高磁場中で人体に電波を当てることにより、人体中に含まれる水や脂肪の水素原子を核磁気共鳴させ、組織の違いによる信号を読み取り、画像化するものである。実際、医療の現場ではより鮮明な画像を得るために、ガドリニウム錯体を含有するＭＲＩ造影剤を使用する。その中で、Ｇｄ（III）−ＤＴＰＡ（ジエチレントリアミンペンタ酢酸のガドリニウム（III）錯体（以下マグネビストと呼称する。）は、ガドリニウム化合物として初めてＭＲＩ（核磁気共鳴撮像）用造影剤として１９８８年に実用化されたものであり、全世界で４５００万以上の症例に使用されてきた（例えば、非特許文献１参照）。マグネビストは水溶性で分子量が小さいため、血管から臓器や組織への移行が早く、血管、特に静脈を明確に造影することが困難であった。一方、近年、特定の臓器の微小な疾患（例えば肝臓、膵臓、肺等の転移性癌）の造影が強く求められている。しかしながら、マグネビストには臓器特異性がないため、要望を満たすことが困難である。
【０００３】
一方、グルコースラクトンやガラクトースラクトンで末端を修飾したガドリニウム錯体（例えば、非特許文献２、３及び特許文献１参照）が提案されている。これらは、マグネビストと比較して、Ｔ１緩和能が高く、少量の投与量で十分な造影効果を得ることができるため、血流の少ない末梢血管の造影が十分に可能である。また、肝臓への集積効果が高いため肝臓の病変を高感度、高解像度で造影することが可能であり、肝臓の微細な転移性癌の早期発見に多いに貢献することが期待される。そこで我々はマグネビストに組織認識部位として糖を４分子し導入した新規ガドリニウム錯体を近年発明した（例えば、非特許文献２参照）。このガドリニウム錯体は血管貯留性が高く、肝臓、腎臓、血管に高い組織選択性が示唆された。さらにＧｄ−ＤＴＰＡで全く造影できなかった肝細胞がんを鮮明に画像化できた。しかしながら、血管貯留性が高く、２４時間経過しても血管から十分に排出されず、体の中に必要以上に留まってしまう欠点を有していた。
【特許文献１】特開２００４−３０７３５６号公報
【非特許文献１】Ｃｈｅｍ．Ｒｅｖ．，１９９９，Ｖｏｌ．９９，２２９３−２３５２
【非特許文献２】Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔ．，４１（２０００）８４８５−８４８８
【非特許文献３】Ｇａｏｄｅｎｇ Ｘｕｅｘｉａｏ Ｈｕａｘｕｅ Ｘｕｅｂａｏ，（１９９７），１８（７），１０７１−１０７９
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
本発明の目的は、（１）Ｔ１緩和能が高く、少ない投与量でも高感度に造影可能であり、（２）全身血管及び肝臓の造影に優れ、（３）さらに２４時間以内に体外に大部分が排泄される安全性を有する新規なガドリニウム化合物及びそれを含むＭＲＩ用造影剤を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明の上記課題は、以下の構成により達成される。
１．下記一般式（１）で表されることを特徴とするガドリニウム化合物。
【０００６】
【化１】
【０００７】
（式中、波線はアクシャルまたはエカトリアルの立体配置であることを表す。）
２．下記一般式（２）で表されることを特徴とするガドリニウム化合物。
【０００８】
【化２】
【０００９】
（式中、Ｇ１は糖ラクトンとアミノ基が反応した残基を表す。ｎは３から８の整数を表す。）
３．前記糖ラクトンの糖が、アロース、アルトロース、グルコース、マンノース、ギュロース、イドース、ガラクトース、タロース、リボース、アラビノース、キシロース、リキソース、エリトロース、トレオース、セロビオース、マルトース、ラクトースまたはマルトリオロースから選ばれる少なくとも一種であることを特徴とする前記２に記載のガドリニウム化合物。
４．前記糖ラクトンの糖がグルコースであることを特徴とする前記３に記載のガドリニウム化合物。
５．下記一般式（３）で表されることを特徴とするガドリニウム化合物。
【００１０】
【化３】
【００１１】
（式中、Ｇ３は糖ラクトンとアミノ基が反応した残基を表す。）
６．前記糖ラクトンの糖が、アロース、アルトロース、グルコース、マンノース、ギュロース、イドース、ガラクトース、タロース、リボース、アラビノース、キシロース、リキソース、エリトロース、トレオース、セロビオース、マルトース、ラクトースまたはマルトリオロースから選ばれる少なくとも一種であることを特徴とする前記５に記載のガドリニウム化合物。
７．前記糖ラクトンの糖がグルコースであることを特徴とする前記６に記載のガドリニウム化合物。
８．前記１〜７のいずれか１項に記載のガドリニウム化合物の少なくとも１種を含有することを特徴とするＭＲＩ用造影剤。
【発明の効果】
【００１２】
本発明によれば、（１）Ｔ１緩和能が高く、少ない投与量でも高感度に造影可能であり、（２）全身血管及び肝臓の造影に優れ、（３）さらに２４時間以内に体外に大部分が排泄される安全性を有する新規なガドリニウム化合物及びそれを含むＭＲＩ用造影剤を提供することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１３】
本発明者は、上記課題に鑑み鋭意検討の結果、前記一般式（１）で表される特定構造のガドリニウム化合物は、（１）Ｔ１緩和能が高く、少ない投与量でも高感度に造影可能であり、（２）全身血管及び肝臓の造影に優れ、（３）さらに２４時間以内に体外に大部分が排泄される安全性を有する新規なガドリニウム化合物であり、これを含むＭＲＩ用造影剤（以下、造影剤ともいう）は優れた造影剤であることを見出した。
【００１４】
以下、本発明を詳細に説明する。
【００１５】
《一般式（１）〜（３）で表されるガドリニウム化合物》
一般式（１）において、波線はアクシャルまたはエカトリアルの立体配置であることを表すが、一般式（１）の合成原料であるパーアセチル糖ラクトンのアセトキシル基の立体配置を反映したものであることが好ましい。
【００１６】
パーアセチル糖ラクトンの糖としては、アロース、アルトロース、グルコース、マンノース、ギュロース、イドースまたはガラクトースであることが好ましく、特に好ましくはグルコースである。
【００１７】
一般式（２）及び（３）において、Ｇ１及びＧ３は糖ラクトンとアミノ基が反応した残基を表す。糖ラクトンの糖は、単糖、二糖、三糖、多糖の全てのアルドペントース、アルドヘキソースを表すが、糖としてはアロース、アルトロース、グルコース、マンノース、ギュロース、イドース、ガラクトース、タロース、リボース、アラビノース、キシロース、リキソース、エリトロース、トレオース、セロビオース、フコース、マルトース、イソマルトース、ラクトースまたはマルトリオロースが挙げられる。好ましくは、アロース、アルトロース、グルコース、マンノース、ギュロース、イドース、ガラクトース、タロース、リボース、アラビノース、キシロース、リキソース、エリトロース、トレオース、セロビオース、マルトース、ラクトースまたはマルトリオロースであり、より好ましくはグルコース、ガラクトースまたはマンノースである。特に好ましくはグルコースである。
【００１８】
一般式（２）において、ｎは３から８の整数を表すが、好ましくは３から６の整数である。
【００１９】
次に、本発明の一般式（１）〜（３）で表されるガドリニウム化合物の具体例を示す。しかし本発明はこれらに限定されない。
【００２０】
【化４】
【００２１】
【化５】
【００２２】
【化６】
【００２３】
【化７】
【００２４】
【化８】
【００２５】
【化９】
【００２６】
【化１０】
【００２７】
【化１１】
【００２８】
【化１２】
【００２９】
【化１３】
【００３０】
【化１４】
【００３１】
【化１５】
【００３２】
【化１６】
【００３３】
【化１７】
【００３４】
【化１８】
【００３５】
【化１９】
【００３６】
【化２０】
【００３７】
【化２１】
【００３８】
【化２２】
【００３９】
【化２３】
【００４０】
【化２４】
【００４１】
これらの例示化合物の合成方法は実施例に示す。
【００４２】
《造影剤》
次に、本発明のガドリニウム化合物を含有するＭＲＩ用造影剤について詳述する。
【００４３】
本発明の造影剤は、本発明のガドリニウム化合物の少なくとも１種を含有する。ガドリニウム化合物は２種以上を併用してもよいが、好ましくは１種のみの化合物を含有することである。
【００４４】
本発明のガドリニウム化合物は良好な水溶性を有する。好ましくは、室温において少なくとも１．０ｍＭ、好ましくは１０ｍＭ、そしてより好ましくは１００ｍＭの濃度まで水に溶解する。注射のために製剤化された本発明の造影剤は、迅速で簡便な注射を可能にするよう適度な粘度のみを有するべきである。粘度は、１０．２０×１０−４ｋｇｆ・ｓ／ｍ２（１０ｍＰａ・ｓ、１０ｃＰ）未満、または好ましくは５．１０×１０−４ｋｇｆ・ｓ／ｍ２（５ｍＰａ・ｓ、５ｃＰ）未満、またはより好ましくは２．０４×１０−４ｋｇｆ・ｓ／ｍ２（２ｍＰａ・ｓ、２ｃＰ）未満である。また、注射のために製剤化された本発明の造影剤は過度の浸透圧を有するべきではない。なぜなら、これは毒性を増加させ得るからである。浸透圧は、３０００ミリオスモル／ｋｇ未満、または好ましくは２５００ミリオスモル／ｋｇ未満、または最も好ましくは９００ミリオスモル／ｋｇ未満である。
【００４５】
本発明の造影剤は、無機または有機の酸及び塩基から誘導される塩を含有することができる。塩の具体例としては、酢酸塩、アジピン酸塩、アルギン酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、重硫酸塩、酪酸塩、クエン酸塩、ショウノウ酸塩、ショウノウスルホン酸塩、シクロペンタンプロピオン酸塩、ジグルコン酸塩、ドデシル硫酸塩、エタンスルホン酸塩、フマル酸塩、グルコヘプタン酸塩、グリセロリン酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、２−ヒドロキシエタンスルホン酸塩、乳酸塩、マレイン酸塩、メタンスルホン酸塩、２−ナフタレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、シュウ酸塩、パモエート、ペクチン酸塩、過硫酸塩、３−フェニルプロピオン酸塩、ピクリン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、チオシアン酸塩、トシル酸塩、ウンデカン酸塩、アンモニウム塩、アルカリ金属塩（例えば、ナトリウム及びカリウム塩）、アルカリ土類金属塩（例えば、カルシウム、マグネシウム及び亜鉛塩）、有機塩基を有する塩（例えば、ジシクロヘキシルアミン塩、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン）、及びアミノ酸（例えば、アルギニン、リジン）を有する塩等を包含する。また、塩基性窒素含有基は、低級アルキルハライド（例えば、メチル、エチル、プロピル及びブチルクロライド、ブロマイド及びヨージド）、ジアルキル硫酸（例えば、ジメチル、ジエチル、ジブチル及びジアミル硫酸）、長鎖ハライド（例えば、デシル、ラウリル、ミリスチル及びステアリルクロライド、ブロマイド及びヨージド）、アラルキルハライド（例えば、ベンジル及びフェネチルブロマイド）ならびにその他のような薬剤で４級化され得る。それによって、水溶性または油溶性あるいは水分散性または油分散性の生成物が得られる。本発明の好ましい塩は、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン、カルシウム及びナトリウム塩である。
【００４６】
本発明の造影剤は、任意のキャリア、アジュバントもしくはビヒクルを含有することができる。本発明の造影剤に使用され得るキャリア、アジュバント及びビヒクルは、イオン交換物質、アルミナ、ステアリン酸アルミニウム、レシチン、血清タンパク質（例えば、ヒト血清アルブミン）、緩衝性物質（例えば、ホスフェート）、グリシン、ソルビン酸、ソルビン酸カリウム、ＴＲＩＳ（トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン）、植物性飽和脂肪酸の部分グリセリド混合物、水、塩または電解質（例えば、硫酸プロタミン、リン酸水素二ナトリウム、リン酸水素カリウム、塩化ナトリウム、亜鉛塩）、コロイド状シリカ、三ケイ酸マグネシウム、ポリビニルピロリドン、セルロースベースの物質、ポリエチレングリコール、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ポリアクリレート、ワックス、ポリエチレン−ポリオキシプロピレン−ブロックポリマー、ポリエチレングリコール及びラノリンを包含するが、これらに限定されない。
【００４７】
本発明の造影剤は、注射可能な無菌の調合薬の形態（例えば、注射可能な無菌の水性または油性の懸濁液）であり得る。この懸濁液は、当該分野で公知の技術に従い、適切な分散剤または湿潤剤及び懸濁剤を用いて製剤され得る。注射可能な無菌の調合薬はまた、無毒性の非経口で受容可能な希釈剤または溶媒中における、無菌の注射可能な溶液または懸濁液（例えば、１，３−ブタンジオール中の溶液として）であってもよい。用いられ得る受容可能なビヒクル及び溶媒は、水、リンガー溶液及び等張食塩水である。さらに、無菌の不揮発油が溶媒または懸濁媒体として使用される。この目的のために、合成のモノ−またはジ−グリセリドを含む任意の刺激のない不揮発油が使用され得る。脂肪酸（例えば、オレイン酸及びそのグリセリド誘導体）は、天然の薬学的に受容可能なオイル（例えば、オリーブオイルまたはヒマシ油）と同様に、注射可能物の調製、特にこれらのポリオキシエチル化した変形物において有用である。これらのオイル溶液または懸濁液はまた、長鎖アルコールの希釈剤または分散剤（例えば、Ｐｈ．Ｈｅｌｖまたは類似のアルコール）を含み得る。
【００４８】
本発明の造影剤は、経口投与、非経口投与、吸入スプレーによる投与、局所投与、直腸投与、鼻腔投与、頬投与、膣投与または従来の無毒性の薬学的に受容可能なキャリア、アジュバント及びビヒクルを含有する投薬製剤中に埋め込まれたリザーバを介して投与され得る。本明細書に使用されるように用語「非経口」は、皮下、静脈内、筋肉内、関節内、滑液包内、胸骨内、くも膜下、肝臓内、病変内及び頭蓋内注射または点滴技術を含む。
【００４９】
経口投与される場合、本発明の造影剤を含む薬学的組成物は、任意の経口的に受容可能な投薬形態（カプセル、錠剤、水性の懸濁液または溶液が挙げられるがこれらに限定されない）で投与され得る。錠剤を経口使用する場合、一般的に使用されるキャリアには、ラクトース及びコーンスターチが挙げられる。代表的には、ステアリン酸マグネシウムのような潤滑剤もまた添加される。カプセル形態の経口投与に対して、有用な希釈剤としては、ラクトース及び乾燥コーンスターチが挙げられる。経口使用に水性懸濁液を必要とする場合、活性成分は乳化剤及び懸濁剤と配合される。所望の場合、特定の甘味料、香味料または着色料もまた添加してもよい。あるいは、直腸投与のために座薬形態で投与される場合には、本発明の造影剤は、室温で固体であるが直腸温で液体である適切な非刺激性の賦形剤を混合して調製され得、その結果直腸内で溶け薬剤を放出する。このような物質として、ココアバター、ビーズワックス及びポリエチレングリコールが挙げられる。
【００５０】
また、前述のように、特に、処置標的が局所施用によって容易に接近可能な領域または器官（目、皮膚または下部腸道（ｌｏｗｅｒ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｔｒａｃｔ）を含む）を含む場合に、本発明の造影剤は局所投与され得る。適切な局所製剤は、これらの各領域または器官用に容易に調製される。
【００５１】
下部腸道に対する局所施用は、直腸用座薬製剤または適切な浣腸製剤でなされ得る。局所−経皮性パッチもまた使用してよい。局所施用に対して、本発明の造影剤は、１つ以上のキャリア中に懸濁または溶解される活性成分を含有する、適切な軟膏に製剤され得る。
【００５２】
本発明の造影剤の局所投与のためのキャリアは、鉱油、液体ペトロラタム、白色ペトロラタム、プロピレングリコール、ポリオキシエチレン、ポリオキシプロピレン化合物、乳化ワックス及び水を包含するが、それらに限定されない。あるいは、本発明の造影剤は、１つ以上のキャリア中に懸濁または溶解された活性成分を含有する、適切なローションまたはクリームに製剤されてもよい。適切なキャリアは、鉱油、ソルビタンモノステアレート、ポリソルベート６０、セチルエステルワックス、セテアリールアルコール、２−オクチルドデカノール、ベンジルアルコール及び水を包含するが、それらに限定されない。
【００５３】
眼使用に対して、本発明の造影剤は防腐剤（例えば、ベンジルアルコニウムクロライド）を含有してもしなくてもよい。ｐＨ調節された等張の無菌生理食塩水中に微小化された懸濁液として、または好ましくはｐＨ調節された等張の無菌生理食塩水中の溶液として製剤され得る。あるいは、眼使用に対して本発明の造影剤は、ペトロラタムのような軟膏に製剤され得る。
【００５４】
鼻腔エーロゾルまたは吸入による投与に対して、本発明の造影剤は、製薬的製剤の分野で周知の技術に従って調製され、そしてベンジルアルコールもしくは他の適切な防腐剤、生体利用性を増大させる吸収促進剤、フルオロカーボン、及び／または他の従来の可溶化剤もしくは分散剤を使用し、生理食塩水中の溶液として調製され得る。
【００５５】
投薬は、診断用画像化機器の感度、ならびに造影剤の組成に依存する。例えば、ＭＲＩ画像化に対して、本発明のガドリニウム化合物を含有する造影剤は、一般的に、より低い磁気モーメントを有する常磁性物質、例えば、鉄（III）を含有する造影剤より、より低い投薬を必要とする。好ましくは、投薬は、１日当たり約０．００１〜１ｍｍｏｌ／ｋｇ体重の活性金属−リガンド錯体の範囲である。より好ましくは、投薬は、１日当たり約０．００５〜０．０５ｍｍｏｌ／ｋｇ体重の範囲である。
【００５６】
しかし、任意の特定の患者に対する特定の投薬処方もまた、種々の因子（年齢、体重、健康状態、性別、治療食、投与時間、排泄速度、薬物の組み合わせ及び処置する内科医の判断を含む）に依存することが理解されるべきである。
【００５７】
本発明では造影剤の適切な投薬の投与に続いて、ＭＲＩ画像化が行われる。パルス系列（反転回復（ＩＲ）；スピンエコー（ＳＥ）；エコー断層（ＥＰＩ）；飛行時間（ＴＯＦ）；ターボフラッシュ；グラディエントエコー（ＧＥ））及び画像化パラメーターの値（エコー時間（ＴＥ）；反転時間（ＴＩ）；繰り返し時間（ＴＲ）；フリップ角等）の選択は、要求される診断情報に支配される。一般的には、Ｔ１−加重された画像を得ることが望まれる場合、ＴＥはＴ１−加重を最大とするために３０ミリ秒未満（または最小値）であるべきである。逆に、Ｔ２の測定が所望される場合、ＴＥは競合するＴ１効果を最小にするために３０ミリ秒より大きくあるべきである。ＴＩ及びＴＲは、Ｔ１−及びＴ２−加重された画像の両方に対して、ほぼ同じに保たれる。一般的に、ＴＩ及びＴＲは、それぞれ、約５〜１０００ミリ秒及び２〜１０００ミリ秒のオーダーである。
【実施例】
【００５８】
以下、実施例を挙げて本発明を詳細に説明するが、本発明はこれらに限定されない。なお、特に断りない限り、実施例中の「％」は「質量％」を表す。
【００５９】
（実験方法）
機器
元素分析：Ｐｅｒｋｉｎ−Ｅｌｍｅｒ−２４０
ＦＴ−ＩＲ：ＪＡＳＣＯ ＦＴ／ＩＲ−４１０赤外分光計
ＮＭＲ：ＪＥＯＬ ＪＮＭ−ＡＬ３００核磁気共鳴分光計
重溶媒としては重クロロホルム（ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ−ｄ）、重水（Ｄ２Ｏ）、重ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ−ｄ６）を使用し、内部標準としてはＴＭＳを使用した。
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ−ＭＳ：ＧＬ Ｓｃｉｅｎｃｅ社製Ｖｏｙａｇｅｒ−ＤＥ ｐｏｒｉｍｅｒｉｘ
マトリクスとしてα−ＣＨＣＡを使用した。
示差熱・熱重量測定：島津製作所 ＤＴＧ６０Ａ／６０ＡＨ
薄層クロマトグラフィー：和光純薬工業のクロマトシートを用いた。スポットの呈色にはヨウ素蒸気を利用した。
複合ＴＥＭ；元素分析装置付き高圧透過型電子顕微鏡
日本電子製ＪＥＭ２００ＣＸ型
元素分析装置部（ＫＥＶＥＸ ７０２５ Ｊ型エネルギー分散形）
緩和速度測定：１．５Ｔ 超伝導ＭＲ撮影装置Ｍａｇｎｅｔｏｍ ＳＰ（Ｓｉｅｍｅｎｓ社製、Ｅｒｌａｎｇｅｎ）に送受信ｋｎｅｅ−ｃｏｉｌを併用して計測を行なった。撮像ｐｕｌｓｅ ｓｅｑｕｅｎｃｅはｓｐｉｎ ｅｃｈｏ系列 ＴＲ１（ｍｓ）＝３０００、ＴＲ２（ｍｓ）＝６０、ＴＥ（ｍｓ）＝１５、ｍａｔｒｉｘ＝２５６ｘ１９２、ＦＯＶ（ｃｍ）＝１６、ＮＥＸ＝２である。
【００６０】
試薬
全ての試薬類及び溶媒類は、和光純薬工業株式会社・シグマ アルドリッチ・東京化成工業株式会社・関東化学株式会社からの市販品を使用した。
【００６１】
〔合成例１：Ｇｌｕ−４Ａｃ−Ｇｄ−ＤＴＰＡの合成〕
下記反応スキームにより、例示化合物Ｇｌｕ−４Ａｃ−Ｇｄ−ＤＴＰＡを合成した。
【００６２】
【化２５】
【００６３】
（第１工程）
アルゴン雰囲気下、ナスフラスコに２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−ｄ（＋）−グルコノ−１，５−ラクトン１を入れ、ピリジンに溶解し、氷水浴中で撹拌しながらジエチレントリアミンをゆっくり滴下した。減圧下で溶媒を除去し、クロロホルムに溶解し、有機相を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（５ｍｌ）、飽和塩化ナトリウム水溶液（５ｍｌ）の順で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過、濃縮後、目的化合物である黄色結晶２（２．０６ｇ、２．５９ｍｍｏｌ）を粗収率９０％で得た。
分子式：Ｃ３２Ｈ４９Ｎ３Ｏ２０；Ｍ．Ｗ．：７９５．７４
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ−ＭＳ（＋）：７９６．４４［Ｍ＋Ｈ］＋
ｍ．ｐ．：２２５℃
ＩＲ（ＫＢｒ）
ν（ｃｍ−１）：３４６３（Ｏ−Ｈ）、１７４３（Ｃ＝Ｏ ｏｆ ｅｓｔｅｒ）、１６５８（Ｃ＝Ｏ ｏｆ ａｍｉｄｅ）、１５４２（Ｎ−Ｈ ｏｆ ａｍｉｄｅ）、１２３４（Ｃ−Ｏ ｏｆ ｅｓｔｅｒ）
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）
σ（ｐｐｍ）：２．０７，２．１４，２．１９，２．２３（ｓ×４，２４Ｈ，ＣＨ３Ｃ＝Ｏ×８）、２．７４−３．７０（ｍ，１０Ｈ，ＯＨ×２，ＣＨ２ＮＨ×２，ＣＨ２ＮＨＣ＝Ｏ×２）、３．９８−４．４５（ｍ，６Ｈ，ＣＨ２×２，ＣＨ×２（ｓｕｇａｒ ｈｙｄｒｏｇｅｎｓ））、４．９７−５．５５（ｍ，６Ｈ，ＣＨ×６（ｓｕｇａｒ ｈｙｄｒｏｇｅｎｓ ））
（第２工程）
アルゴン雰囲気下、ナスフラスコにＤＴＰＡ二無水物３（０．４８３ｇ、１．３５ｍｍｏｌ）と化合物２（２．１５ｇ、２．７０ｍｍｏｌを入れ、ＤＭＦ（１０ｍｌ）に溶解し、５０℃で２４時間撹拌した。減圧下で溶媒を除去し、粗生成物を再結晶（イソプロパノール）にて単離精製し、白色結晶４（１．９５ｇ、１．００ｍｍｏｌ）を収率７４％で得た。
分子式：Ｃ７８Ｈ１１７Ｎ９Ｏ４８；Ｍ．Ｗ．：１９４８．８０
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ−ＭＳ（−）：１９４５．６１［Ｍ−３Ｈ］−
ｍ．ｐ．：１８０℃
ＩＲ（ＫＢｒ）
ν（ｃｍ−１）：３４４０（Ｏ−Ｈ）、１７４３（Ｃ＝Ｏ ｏｆ ｅｓｔｅｒ）、１６５８（Ｃ＝Ｏ ｏｆ ａｍｉｄｅ）、１５４２（Ｎ−Ｈ ｏｆ ａｍｉｄｅ）、１２２６（Ｃ−Ｏ ｏｆ ｅｓｔｅｒ）
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）
σ（ｐｐｍ）：１．９７，２．００，２．１０，２．１３（ｓ×４，４８Ｈ，ＣＨ３Ｃ＝Ｏ×１６）、３．００−３．８４（ｍ，３８Ｈ，ＯＨ×４，ＣＨ２ＮＣ＝Ｏ×４，ＣＨ２ＮＨＣ＝Ｏ×４，ＣＨ２Ｎ×４，ＮＣＨ２Ｃ＝Ｏ）、３．９２−４．３４（ｍ，１２Ｈ，ＣＨ２×２，ＣＨ×２（ｓｕｇａｒ ｈｙｄｒｏｇｅｎｓ））、４．７８−５．５３（ｍ，６Ｈ，ＣＨ×６（ｓｕｇａｒ ｈｙｄｒｏｇｅｎｓ））
（第３工程）
ナスフラスコに４（０．１５０ｇ、０．０６７６ｍｍｏｌ）とＧｄＣｌ３・６Ｈ２Ｏ（０．３００ｇ、０．０８１１ｍｍｏｌ）を入れ、水（３ ｍｌ）に溶解し、６０℃で１時間撹拌した。反応終了後水溶液をエーテル（３ｍｌ×３）で洗浄した。減圧下で溶媒を除去し、白色結晶の目的物Ｇｌｕ−４Ａｃ−Ｇｄ−ＤＴＰＡを８１ｍｇ得た。（収率５０％）
分子式：Ｃ７８Ｈ１２５Ｎ９Ｏ５２；Ｍ．Ｗ．：２１１６．９４
ＩＲ（ＫＢｒ）
ν（ｃｍ−１）：３４６０（Ｏ−Ｈ）
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ−ＭＳ（＋）：２０９８ ［Ｍ−Ｈ２Ｏ］−
〔合成例２：Ｇｌｕ−４−Ｇｄ−ＤＴＰＡ−６の合成〕
下記反応スキームにより、例示化合物Ｇｌｕ−４−Ｇｄ−ＤＴＰＡ−６を合成した。
【００６４】
【化２６】
【００６５】
（第１工程）
アルゴン雰囲気下、ナスフラスコにＤ−（＋）−Ｇｌｕｃｏｎｏ−１，５−ｌａｃｔｏｎｅ（３．００１ｇ、１６．８ｍｍｏｌ）を入れ、ＤＭＦ（３０ｍｌ）に溶解し、室温で撹拌しながらＢｉｓ（ｈｅｘａｍｅｔｈｙｌｅｎｅ）ｔｒｉａｍｉｎｅ（１．８２９ｇ、８．４９ｍｍｏｌ）を少しずつ加えた。８時間７０℃で撹拌した後、３０分間氷水浴し、析出した結晶を減圧ろ過し、乾燥して白色結晶のジグルコシルアミン（Ｃ６）５を収率８１．２％で得た。
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ−ＭＳ（＋），５７２［Ｍ＋Ｈ］＋
１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）
δ（ｐｐｍ）：１．２５−１．４０（ｍ，１６Ｈ；ＣＨ２×８（Ｂｒａｎｃｈ ｈｙｄｒｏｇｅｎｓ））、２．４２−２．４９（ｍ，４Ｈ；ＮＨＣＨ２×２）、３．０１−３．３４（ｍ，４Ｈ；Ｏ＝ＣＮＨＣＨ２×２）、３．３４−３．８９（ｍ，８Ｈ；ＣＨ×８（Ｓｕｇａｒ ｈｙｄｒｏｇｅｎｓ））、３．８９−４．３８（ｍ，４Ｈ；ＣＨ２×２（Ｓｕｇａｒ ｈｙｄｒｏｇｅｎｓ））、４．３８−４．５３，５．３５（ｂｍ，１０Ｈ；ＯＨ×１０）、７．５９（ｔ，２Ｈ，Ｏ＝ＣＮＨ×２）
（第２工程）
アルゴン雰囲気下、ナスフラスコに化合物５（１．０２５ｇ、１．７９ｍｍｏｌ）と化合物３（０．３７８ｇ、１．５８ｍｍｏｌ）を入れ、ＤＭＳＯ（１２ｍｌ）に溶解し、Ｐｙｒｉｄｉｎｅ（０．２８ｍｌ）を加え、６０℃で１日撹拌した。反応終了後、超純水（１ｍｌ）を加え１時間撹拌した。その後、２−Ｐｒｏｐａｎｏｌ（２５ｍｌ）を加えると白色結晶が析出した。その結晶をろ過し、乾燥することにより化合物６を収率８５．８％で得た。
【００６６】
ここでの収率は６が１当量に対してＤＴＰＡが０．２当量存在しているとし、その質量パーセントの収率とした。
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ−ＭＳ（＋），１４９９［Ｍ＋Ｈ］−
１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）
δ（ｐｐｍ）：１．２４−１．４２（ｄｂ，３２Ｈ；ＣＨ２×１６（Ｂｒａｎｃｈ ｈｙｄｒｏｇｅｎｓ））、２．９３−３．６２（ｍ，５６Ｈ；ＮＨＣＨ２×４，Ｎ（ＣＨ２）２Ｎ×２，ＣＨ２ＣＯＯＨ×３，Ｏ＝ＣＮＨＣＨ２×４，ＣＨ×１６（Ｓｕｇａｒ ｈｙｄｒｏｇｅｎｓ），ＯＨ×１０）、３．９０−３．９８（ｂｄ，８Ｈ；ＣＨ２×４（Ｓｕｇａｒ ｈｙｄｒｏｇｅｎｓ））、７．６２−７．６８（ｍ，４Ｈ；Ｏ＝ＣＮＨ×２）
（第３工程）
ナスフラスコに化合物６とＤＴＰＡとの混合物（０．５１６ｇ［６；０．４３０ｇ、０．２９ｍｍｏｌ、ＤＴＰＡ；０．８６１ｇ、０．２４ｍｍｏｌ］と仮定）とＧｄＣｌ３・６Ｈ２Ｏ（０．１０６ｇ、０．２８ｍｍｏｌ）とＰｙｒｉｄｉｎｅ（０．０８ｍｌ）を超純水（４．０ｍｌ）に溶解し、４０℃で１２時間撹拌した。反応終了後２−Ｐｒｏｐａｎｏｌ（２５ｍｌ）を加えると無色結晶が析出した。さらにこの結晶をＭｅｔｈａｎｏｌでリフラックス３回洗浄することによって、未反応のＧｄＣｌ３・６Ｈ２Ｏと反応副生成物であるＧｄ−ＤＴＰＡを除去し、減圧ろ過を行い、真空により乾燥した。その後、結晶を再び超純水（１０ｍｌ）に溶解し、溶液を１０μｌ採取し、１００μｌの超純水で希釈したものと、超純水のみを１１０μｌ入れたマイクロピペットを用意した。それぞれにＰｙｒｉｄｉｎｅ（１０μｌ）、酢酸緩衝溶液（１０μｌ）を加え撹拌し、その溶液にキシレノールオレンジ（１０μｌ）を加え、呈色した色を比較した。結晶を溶解したものが青色に呈色した場合、Ｃｈｉｌｅｘを加え、２時間撹拌し、再び呈色させた。コントロールと同じ色になるまでこの作業を繰り返した。その後、イオン交換樹脂を濾別し、溶液を真空乾燥することで、白色結晶の目的物Ｇｌｕ−４−Ｇｄ−ＤＴＰＡ−６を収率９８．９％で得た。
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ−ＭＳ（＋），１６５３［Ｍ−Ｈ２Ｏ］−
〔合成例３：Ｇｌｕ−４−Ｇｄ−ＤＴＰＡ−３の合成〕
下記反応スキームにより、例示化合物Ｇｌｕ−４−Ｇｄ−ＤＴＰＡ−３を合成した。
【００６７】
【化２７】
【００６８】
（第１工程）
アルゴン雰囲気下、ナスフラスコにＤ−（＋）−Ｇｌｕｃｏｎｏ−１，５−ｌａｃｔｏｎｅ（７．０４２ｇ、３９．５ｍｍｏｌ）を入れ、ＤＭＦ（５０ｍｌ）に溶解し、室温で撹拌しながらＤｉｐｒｏｐｙｌｅｎｅｔｒｉａｍｉｎｅ（２．７５ｍｌ、１９．６ｍｍｏｌ）を少しずつ加えた。５時間５５℃で撹拌した後、３０分間氷水浴し、析出した結晶を減圧ろ過し、乾燥して白色結晶の７を収率８３．６％で得た。
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ−ＭＳ（＋），４８８［Ｍ＋Ｈ］＋
１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）
δ（ｐｐｍ）：１．５４（ｍ，４Ｈ；ＣＨ２×２（Ｂｒａｎｃｈ ｈｙｄｒｏｇｅｎｓ））、２．４５−２．５４（ｍ，４Ｈ；ＮＨＣＨ２×２）、３．１２−３．１４（ｍ，４Ｈ；Ｏ＝ＣＮＨＣＨ２×２）、３．３４−３．９８（ｍ，１２Ｈ；ＣＨ２×２，ＣＨ×８（Ｓｕｇａｒ ｈｙｄｒｏｇｅｎｓ））、４．４２（ｂｓ，１０Ｈ；ＯＨ×１０）、７．６２（ｔ，２Ｈ，Ｏ＝ＣＮＨ×２）
（第２工程）
アルゴン雰囲気下、ナスフラスコに化合物７（２．００８ｇ、４．１２ｍｍｏｌ）と化合物３（０．８８１ｇ、２．４７ｍｍｏｌ）を入れ、ＤＭＳＯ（１５ｍｌ）に溶解し、Ｐｙｒｉｄｉｎｅ（０．４７ｍｌ）を加え、６０℃で１日撹拌した。反応終了後、超純水（１．０ｍｌ）を加え１時間撹拌した。その後、Ｍｅｔｈａｎｏｌ（５０ｍｌ）を加えると白色結晶が析出した。その結晶をろ過し、乾燥することにより化合物８を収率９１．８％で得た。
【００６９】
ここでの収率は化合物８が１当量に対してＤＴＰＡが０．２当量存在しているとし、その質量パーセントの収率とした。
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ−ＭＳ（＋），１３３０［Ｍ＋Ｈ］−，１３５２［Ｍ＋Ｎａ］−
１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）
δ（ｐｐｍ）：１．５９−１．６７（ｍ，８Ｈ；ＣＨ２×４（Ｂｒａｎｃｈ ｈｙｄｒｏｇｅｎｓ））、２．８６−３．５９（ｍ，５６Ｈ；ＮＨＣＨ２×４，Ｎ（ＣＨ２）２Ｎ×２，ＣＨ２ＣＯＯＨ×３，Ｏ＝ＣＮＨＣＨ２×４，ＣＨ×１６（Ｓｕｇａｒ ｈｙｄｒｏｇｅｎｓ）、ＯＨ×１０）、３．９１−４．０３（ｍ，８Ｈ；ＣＨ２×４（Ｓｕｇａｒ ｈｙｄｒｏｇｅｎｓ））、７．７４−７．９３（ｍ，４Ｈ；Ｏ＝ＣＮＨ×２）
（第３工程）
ナスフラスコに化合物８とＤＴＰＡとの混合物（１．００７ｇ［８；０．８３５ｇ、０．６３ｍｍｏｌ、ＤＴＰＡ；０．１６７ｇ、０．４７ｍｍｏｌ］と仮定）とＧｄＣｌ３・６Ｈ２Ｏ（０．２２５ｇ、０．６１ｍｍｏｌ）とＰｙｒｉｄｉｎｅ（０．０１９ｍｌ）を超純水（４．０ｍｌ）に溶解し、４０℃で１２時間撹拌した。反応終了後Ｍｅｔｈａｎｏｌ（２５ｍｌ）を加えると無色結晶が析出した。さらにこの結晶をＭｅｔｈａｎｏｌでリフラックス３回洗浄することによって未反応のＧｄＣｌ３・６Ｈ２Ｏと反応副生成物であるＧｄ−ＤＴＰＡを除去し、減圧ろ過を行い、真空により乾燥した。その後、結晶を再び超純水（１０ｍｌ）に溶解し、溶液を１０μｌ採取し、１００μｌの超純水で希釈したものと、超純水のみを１１０μｌ入れたマイクロピペットを用意した。それぞれにＰｙｒｉｄｉｎｅ（１０μｌ）、酢酸緩衝溶液（１０μｌ）を加え撹拌し、その溶液にキシレノールオレンジ（１０μｌ）を加え、呈色した色を比較した。結晶を溶解したものが青色に呈色した場合、Ｃｈｉｌｅｘを加え、２時間撹拌し、再び呈色させた。コントロールと同じ色になるまでこの作業を繰り返した。その後、イオン交換樹脂を濾別し、溶液を真空乾燥することで、白色結晶の目的物Ｇｌｕ−４−Ｇｄ−ＤＴＰＡ−３を収率７９．０％で得た。
ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ−ＭＳ（＋）， １４８５［Ｍ−Ｈ２Ｏ］−
〔合成例４：Ｇｌｕ−６Ａｓ−Ｇｄ−ＤＴＰＡの合成〕
下記反応スキームにより、例示化合物Ｇｌｕ−６Ａｓ−Ｇｄ−ＤＴＰＡを合成した。
【００７０】
【化２８】
【００７１】
【化２９】
【００７２】
（第１工程）
文献（Ｃ．Ｓｕｎ，Ｐ．Ｗｉｒｓｃｈｉｎｇ ａｎｄ Ｋ．Ｄ． Ｊａｎｄａ，Ｂｉｏｏｒｇ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ．，１１（２００３）１７６１−１７６８）に従い合成した中間体Ａ（２１．１ｇ，０．０５０１ｍｏｌ）とトリエチルアミン（１３．９ｍｌ，０．１００ｍｏｌ）をＴＨＦ（１５０ｍｌ）に溶かし、二炭酸ジ−ｔ−ブチル（１０．９ｇ，０．０５０１ｍｏｌ）のＴＨＦ溶液（３０ｍｌ）を氷水浴中で滴下した。１日撹拌した後、減圧下で溶媒を除去した。それから残渣に水（１００ｍｌ）を加えて溶かし、ジクロロメタン（１５０ｍｌ）で３回抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した後、減圧下で溶媒を除去した。そして、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒へキサン：酢酸エチル＝４：１）によって単離精製し、無色透明のＢｏｃ化合物９（１６．２ｇ，０．０３１１ｍｏｌ）を収率６０％で得た。
１Ｈ−ＮＭＲ （ＣＤＣｌ３）
δ（ｐｐｍ）：１．２６（ｔ，９Ｈ，ＪＨＣＨ＝７．１１Ｈｚ；ＣＨ２ＣＨ３×３）、１．４２（ｓ，９Ｈ；（ＣＨ３）３Ｃ）、２．５４（ｔ，６Ｈ，ＪＨＣＨ＝６．４９Ｈｚ；ＣＨ２ＣＯ２Ｅｔ×３）、３．６４（ｓ，６Ｈ；ＯＣＨ２ＣＮＨＢｏｃ×３）、３．７０（ｔ，６Ｈ，ＪＨＣＨ＝６．６２Ｈｚ；ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＯ２Ｅｔ×３）、４．１５（ｑ，６Ｈ，ＪＨＣＨ＝７．１０Ｈｚ；ＣＯ２ＣＨ２ＣＨ３×３）
１３Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）
δ（ｐｐｍ）：１４．２（ＣＨ２ＣＨ３）、２８．３（（ＣＨ３）３Ｃ）、３５．１（ＣＨ２ＣＯ２Ｅｔ）、５８．４（ＢｏｃＮＨＣ）、６０．４（ＣＨ２ＣＨ３）、６６．８，６９．５（ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＯ２Ｅｔ）、６９．５（ＯＣＨ２ＣＮＨＢｏｃ）、７８．９（（ＣＨ３）３ＣＯＣ＝Ｏ）、１５４．８（（ＣＨ３）３ＣＯＣ＝Ｏ）、１７１．４（ＣＯ２Ｅｔ）
（第２工程）
化合物１０（２．００ｇ、２．２７ｍｍｏｌ）、化合物９（０．３２１ｇ、０．７３３ｍｍｏｌ）及び１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢＴ、０．３９６ｇ、２．９３ｍｍｏｌ）を乾燥ＴＨＦ（１５ｍｌ）とジクロロメタン（５ｍｌ）の混合溶媒に加え、アルゴン雰囲気下で０℃に冷却し撹拌しながら乾燥ＴＨＦ（５ｍｌ）に溶かしたジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ、０．６０５ｇ、２．９３ｍｍｏｌ）を加えた。その後、室温で１日間撹拌した。反応終了後析出したＮ，Ｎ′−ジシクロヘキシル尿素を濾別し、濾液を減圧濃縮した。残渣を酢酸エチル（３０ｍｌ）に溶かし、飽和炭酸水素ナトリウム（１５ｍｌ）で洗浄し、次に水（１５ｍｌ）で洗浄した。それから有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧濃縮した。最後にシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒クロロホルム：メタノール＝２０：１）により単離精製し、無色結晶であるデンドリマーウェッジ１１（１．８７ｇ、０．６１６ｍｍｏｌ）を収率８４％で得た。
ＩＲ（ＫＢｒ）
ν（ｃｍ−１）：１７５２（Ｏ＝ＣＯ）、１６７３，１５３３（Ｏ＝ＣＮＨ）、１６７３（Ｏ＝ＣＮ）
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）
δ（ｐｐｍ）：１．４２（ｓ，９Ｈ；（ＣＨ３）３Ｃ）、２．１０−２．２３（ｓ×６，９０Ｈ；ＣＨ３Ｃ＝Ｏ×３０）、２．５５（ｂｓ，６Ｈ；ＯＣＨ２ＣＨ２Ｃ＝Ｏ×３）、３．３４−３．６７（ｍ，３６Ｈ；Ｏ＝ＣＮＨＣＨ２×６Ｏ＝ＣＮＣＨ２×６，ＯＣＨ２ＣＮＨＢｏｃ×３，ＣＨ２ＣＨ２Ｃ＝Ｏ×３）、４．１０−４．３４（ｍ，１２Ｈ；ＣＨ２×６（ｓｕｇａｒ ｈｙｄｒｏｇｅｎｓ））、４．９８−５．６３（ｍ，２４Ｈ；ＣＨ×２４（ｓｕｇａｒ ｈｙｄｒｏｇｅｎｓ））、７．３３（ｂｓ，７Ｈ；Ｏ＝ＣＮＨ×７）
１３Ｃ−ＮＭＲ （ＣＤＣｌ３）
δ（ｐｐｍ）：２０．４，２０．７（ＣＨ３Ｃ＝Ｏ）、２５．０（ＯＣＨ２ＣＨ２Ｃ＝Ｏ）、３３．３，３９．２（Ｏ＝ＣＮＨＣＨ２，Ｏ＝ＣＮＣＨ２）、４５．７，４８．２（ＯＣＨ２ＣＮＨ２，ＯＣＨ２ＣＨ２Ｃ＝Ｏ）、６１．７（ＣＨ２（ｓｕｇａｒ ｃａｒｂｏｎｓ））、６８．９，６９．８，７０．１，７１．６（ＣＨ（ｓｕｇａｒ ｃａｒｂｏｎｓ））、１５５．４（（ＣＨ３）３ＣＯＣ＝Ｏ）、１６７．２，１６７．３，１６９．４，１６９．６，１６９．８，１６９．９，１７０．０，１７０．６，１７０．７，１７３．３（Ｏ＝ＣＮＨ，Ｏ＝ＣＮ，ＣＨ３Ｃ＝Ｏ）
（第３工程）
デンドリマーウェッジ１１（１．３８ｇ、０．４５５ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（５ｍｌ）に溶かし、溶液を撹拌しながらトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ、５ｍｌ、６７．３ｍｍｏｌ）を少しずつ加え、その後室温で１時間３０分撹拌した。反応終了後、減圧下で溶媒を除去し、残渣を酢酸エチル（４０ｍｌ）に溶かし、その溶液を飽和炭酸水素ナトリウム（２０ｍｌ）で洗浄し、次に水（２０ｍｌ）で洗浄した。最後に無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した後、減圧下で溶媒を除去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開溶媒クロロホルム：メタノール＝１５：１）で単離精製することで無色結晶のデンドリマーウェッジ１２（１．２０ｇ、０．４１０ｍｍｏｌ）を収率９０％で得た。
ＩＲ （ＫＢｒ）
ν（ｃｍ−１）：３３２６（ＮＨ２）、１７４９（Ｏ＝ＣＯ）、１６７５，１５４２（Ｏ＝ＣＮＨ）、１６７５ （Ｏ＝ＣＮ）
１Ｈ−ＮＭＲ （ＣＤＣｌ３）
δ（ｐｐｍ）：２．０５，２．０８，２．１０，２．２０，２．２５（ｓ×５，９０Ｈ；ＣＨ３Ｃ＝Ｏ×３０）、２．６７（ｂｓ，６Ｈ；ＯＣＨ２ＣＨ２Ｃ＝Ｏ×３）、３．２５−３．８１（ｍ，３６Ｈ；Ｏ＝ＣＮＨＣＨ２×６Ｏ＝ＣＮＣＨ２×６，ＯＣＨ２ＣＮＨ２×３，ＯＣＨ２ＣＨ２Ｃ＝Ｏ×３）、４．００−４．４０（ｍ，１２Ｈ；ＣＨ２×６（ｓｕｇａｒ ｈｙｄｒｏｇｅｎｓ））、５．００−５．８０（ｍ，２４Ｈ；ＣＨ×２４（ｓｕｇａｒ ｈｙｄｒｏｇｅｎｓ））、７．５０（ｂｓ，６Ｈ；Ｏ＝ＣＮＨ×６）
ＮＨ２のピークはプロトン数が少ないため観測されなかった。
１３Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）
δ（ｐｐｍ）：２０．０，２０．４，２０．６，２１．２，２１．５（ＣＨ３Ｃ＝Ｏ）、２５．２（ＯＣＨ２ＣＨ２Ｃ＝Ｏ）、３３．２，３９．３（Ｏ＝ＣＮＨＣＨ２，Ｏ＝ＣＮＣＨ２）、４６．０，４７．８（ＯＣＨ２ＣＮＨ２，ＯＣＨ２ＣＨ２Ｃ＝Ｏ）、６１．６（ＣＨ２（ｓｕｇａｒ ｃａｒｂｏｎｓ））、６８．９，６９．６，６９．８，７１．７（ＣＨ（ｓｕｇａｒ ｃａｒｂｏｎｓ））、１６７．１，１６７．３，１６９．４，１６９．５，１６９．８，１６９．９，１７０．０，１７０．５，１７０．６，１７３．４（Ｏ＝ＣＮＨ，Ｏ＝ＣＮ，ＣＨ３Ｃ＝Ｏ）
分子内に等価な炭素がないＯＣＨ２ＣＮＨ２のピークは観測されなかった。
【００７３】
（第４工程）
デンドリマーウェッジ１２（０．２６ｇ，０．０７８ｍｍｏｌ）を室温下イオン交換水（４．０ｍｌ）に攪拌下に溶解し、ＧｄＣｌ３・６Ｈ２Ｏ（２９ｍｇ、０．０７８ｍｍｏｌ）を添加した。その後、反応混合物を９５℃で加熱した。反応終了後、室温まで冷却し、固体をろ別した。ジエチルエーテル（１０ｍｌ）を用いて洗浄し、乾燥することでＧｄ錯体０．２６ｇ（９５％）を得た。これにイオン交換水（５ｍｌ）及び１Ｍ ＮａＯＨ（４ｍｌ）を加えて溶解し、室温で１〜２時間攪拌した。次に、陽イオン交換樹脂ＤＯＷＥＸ ５０Ｗ−Ｘ８（Ｈ ｆｏｒｍ １００−２００、１．２ｇ）を加えた。イオン交換反応が終了した後、樹脂をろ過により除き、ろ液を減圧下に留去し、目的物Ｇｌｕ−６Ａｓ−Ｇｄ−ＤＴＰＡを黄色結晶として０．１６ｇ（９６％）得た。
ＩＲ（ＫＢｒ）
ν（ｃｍ−１）：３３５５（ＯＨ）、１５８９（Ｏ＝ＣＮＨ，Ｏ＝ＣＮ）
実施例１
本発明及び下記比較のガドリニウム化合物の０．０５ｍＭ生理食塩水溶液を調製し、下記のように緩和時間の測定を行った。
【００７４】
（緩和時間の測定）
１．５Ｔ超伝導ＮＭＲ撮影装置（Ｍａｇｎｅｔｏｍ ＳＰ、Ｓｉｅｍｅｎｓ社製）に送受信ｋｎｅｅ−ｃｏｉｌを併用してスピン−格子緩和時間（Ｔ１）を計測した。撮像条件は、ｓｐｉｎ ｅｃｈｏ系列ＴＲ１（ｍｓ）＝３０００、ＴＲ２（ｍｓ）＝６０、ＴＥ（ｍｓ）＝１５、ｍａｔｒｉｘ＝２５６×１９２、ＦＯＶ（ｃｍ）＝１６、ＮＥＸ＝２である。測定結果を表１に示す。
【００７５】
【表１】
【００７６】
表１から、本発明のガドリニウム化合物は、比較化合物に対してＴ１値がより高率に短縮することが分かった。これは造影剤として信号増強効果が高いことを意味し、少ない投与量でも高感度に造影可能であることを示唆している。
【００７７】
実施例２
実施例１に用いた本発明及び比較のガドリニウム化合物を生理食塩水に溶解し、体重３０ｇのマウス一匹当たり０．３ｍｌで、０．１０ｍｍｏｌ／ｋｇの投与量となるＭＲＩ用造影剤を調製した。
【００７８】
この造影剤をｄｄｙマウスの尾静脈より投与することにより、造影剤の組織内分布を評価した。投入後、５分、３０分、２時間、２４時間後の肝臓及び血液内のガドリニウムの濃度を、誘導結合プラズマ発光分析装置（ＳＰＳ３０００、セイコーインスツルメンツ社製）にて測定した。検体数を２０として得られた結果の平均値を表２に示す。
【００７９】
【表２】
【００８０】
表２より、本発明の造影剤は、比較の造影剤に対し、全身血管及び肝臓の造影に優れ、さらに２４時間以内に体外に大部分が排泄される安全性を有することが分かる。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記一般式（１）で表されることを特徴とするガドリニウム化合物。
【化１】
（式中、波線はアクシャルまたはエカトリアルの立体配置であることを表す。）
【請求項２】
下記一般式（２）で表されることを特徴とするガドリニウム化合物。
【化２】
（式中、Ｇ１は糖ラクトンとアミノ基が反応した残基を表す。ｎは３から８の整数を表す。）
【請求項３】
前記糖ラクトンの糖が、アロース、アルトロース、グルコース、マンノース、ギュロース、イドース、ガラクトース、タロース、リボース、アラビノース、キシロース、リキソース、エリトロース、トレオース、セロビオース、マルトース、ラクトースまたはマルトリオロースから選ばれる少なくとも一種であることを特徴とする請求項２に記載のガドリニウム化合物。
【請求項４】
前記糖ラクトンの糖がグルコースであることを特徴とする請求項３に記載のガドリニウム化合物。
【請求項５】
下記一般式（３）で表されることを特徴とするガドリニウム化合物。
【化３】
（式中、Ｇ３は糖ラクトンとアミノ基が反応した残基を表す。）
【請求項６】
前記糖ラクトンの糖が、アロース、アルトロース、グルコース、マンノース、ギュロース、イドース、ガラクトース、タロース、リボース、アラビノース、キシロース、リキソース、エリトロース、トレオース、セロビオース、マルトース、ラクトースまたはマルトリオロースから選ばれる少なくとも一種であることを特徴とする請求項５に記載のガドリニウム化合物。
【請求項７】
前記糖ラクトンの糖がグルコースであることを特徴とする請求項６に記載のガドリニウム化合物。
【請求項８】
請求項１〜７のいずれか１項に記載のガドリニウム化合物の少なくとも１種を含有することを特徴とするＭＲＩ用造影剤。
【請求項１】
下記一般式（１）で表されることを特徴とするガドリニウム化合物。
【化１】
（式中、波線はアクシャルまたはエカトリアルの立体配置であることを表す。）
【請求項２】
下記一般式（２）で表されることを特徴とするガドリニウム化合物。
【化２】
（式中、Ｇ１は糖ラクトンとアミノ基が反応した残基を表す。ｎは３から８の整数を表す。）
【請求項３】
前記糖ラクトンの糖が、アロース、アルトロース、グルコース、マンノース、ギュロース、イドース、ガラクトース、タロース、リボース、アラビノース、キシロース、リキソース、エリトロース、トレオース、セロビオース、マルトース、ラクトースまたはマルトリオロースから選ばれる少なくとも一種であることを特徴とする請求項２に記載のガドリニウム化合物。
【請求項４】
前記糖ラクトンの糖がグルコースであることを特徴とする請求項３に記載のガドリニウム化合物。
【請求項５】
下記一般式（３）で表されることを特徴とするガドリニウム化合物。
【化３】
（式中、Ｇ３は糖ラクトンとアミノ基が反応した残基を表す。）
【請求項６】
前記糖ラクトンの糖が、アロース、アルトロース、グルコース、マンノース、ギュロース、イドース、ガラクトース、タロース、リボース、アラビノース、キシロース、リキソース、エリトロース、トレオース、セロビオース、マルトース、ラクトースまたはマルトリオロースから選ばれる少なくとも一種であることを特徴とする請求項５に記載のガドリニウム化合物。
【請求項７】
前記糖ラクトンの糖がグルコースであることを特徴とする請求項６に記載のガドリニウム化合物。
【請求項８】
請求項１〜７のいずれか１項に記載のガドリニウム化合物の少なくとも１種を含有することを特徴とするＭＲＩ用造影剤。
【公開番号】特開２００９−２８０５４０（Ｐ２００９−２８０５４０Ａ）
【公開日】平成２１年１２月３日（２００９．１２．３）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００８−１３６１３９（Ｐ２００８−１３６１３９）
【出願日】平成２０年５月２６日（２００８．５．２６）
【出願人】（０００００１２７０）コニカミノルタホールディングス株式会社 (4,463)
【出願人】（３０４０２３３１８）国立大学法人静岡大学 (416)
【出願人】（５０４３００１８１）国立大学法人浜松医科大学 (96)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２１年１２月３日（２００９．１２．３）
【国際特許分類】
【出願日】平成２０年５月２６日（２００８．５．２６）
【出願人】（０００００１２７０）コニカミノルタホールディングス株式会社 (4,463)
【出願人】（３０４０２３３１８）国立大学法人静岡大学 (416)
【出願人】（５０４３００１８１）国立大学法人浜松医科大学 (96)
【Ｆターム（参考）】
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