ケトレダクターゼポリペプチドおよびその使用
本開示は、天然に存在する野生型ケトレダクターゼ酵素と比較して改善された特性を有する操作されたケトレダクターゼ酵素を提供する。その操作されたケトレダクターゼ酵素をコードするポリヌクレオチド、その操作されたケトレダクターゼ酵素を発現することができる宿主細胞、およびその操作されたケトレダクターゼ酵素を使用して種々のキラル化合物を合成する方法もまた提供される。１つの局面において、本開示は、２−［３−［３−［２−（７−クロロ−２−キノリニル）エテニル］フェニル］−３−オキソプロピル］安息香酸メチルエステル（「基質」）を（Ｓ，Ｅ）−メチル２−（３−（３−（２−（７−クロロキノリン−２−イル）ビニル）フェニル）−３−ヒドロキシプロピル）ベンゾエート（「生成物」）に還元することができるか、または変換することができるケトレダクターゼポリペプチドを提供する。
Notice: Undefined index: DEJ in /mnt/www/gzt_disp.php on line 298
【特許請求の範囲】
【請求項１】
配列番号４のポリペプチドの速度の少なくとも１．５倍の速度で基質２−［３−［３−［２−（７−クロロ−２−キノリニル）エテニル］フェニル］−３−オキソプロピル］安息香酸メチルエステルを生成物（Ｓ，Ｅ）−メチル２−（３−（３−（２−（７−クロロキノリン−２−イル）ビニル）フェニル）−３−ヒドロキシプロピル）ベンゾエートに変換することができるケトレダクターゼポリペプチド。
【請求項２】
少なくとも約９５％の立体異性体過剰率で前記基質を前記生成物に変換することができる、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項３】
少なくとも約９９％の立体異性体過剰率で前記基質を前記生成物に変換することができる、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項４】
以下の特徴：Ｘ１９０に対応する残基がプロリンである、およびＸ２０２に対応する残基がトリプトファンである；を有するが、但し、前記ケトレダクターゼポリペプチドは、Ｘ１９０に対応する残基が拘束残基であり、且つ、Ｘ２０２に対応する残基が芳香族残基である、アミノ酸配列を有することを条件とする、配列番号２、４または１１４に基づく参照配列と少なくとも約８５％同一であるアミノ酸配列を含む、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項５】
以下の特徴：Ｘ１９０に対応する残基がプロリンである；Ｘ１９５に対応する残基がアルギニンである；およびＸ２０２に対応する残基がトリプトファンである；を有するが、但し、前記ケトレダクターゼポリペプチドは、該Ｘ１９０に対応する残基が拘束残基であり、Ｘ１９５に対応する残基が塩基性、酸性、非極性または極性残基であり；且つ、Ｘ２０２に対応する残基が芳香族残基である、アミノ酸配列を有することを条件とする、配列番号２、４または１１４に基づく参照配列と少なくとも約８５％同一であるアミノ酸配列を含む、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項６】
前記Ｘ１９０に対応する残基がプロリンであり、且つ、前記Ｘ２０２に対応する残基がトリプトファンである、アミノ酸配列を含む、請求項４に記載のポリペプチド。
【請求項７】
Ｘ１９０に対応する残基がプロリンであり、Ｘ１９５に対応する残基がアルギニンであり、且つ、Ｘ２０２に対応する残基がトリプトファンである、アミノ酸配列を含む、請求項５に記載のポリペプチド。
【請求項８】
前記ケトレダクターゼアミノ酸配列が、以下の特徴：
Ｘ７に対応する残基が、拘束または非極性残基である；
Ｘ１７に対応する残基が、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ２５に対応する残基が、極性または酸性残基である；
Ｘ２７に対応する残基が、芳香族残基である；
Ｘ４１に対応する残基が、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ５３に対応する残基が、極性、非極性または酸性残基である；
Ｘ５７に対応する残基が、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ６４に対応する残基が、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ６６に対応する残基が、酸性残基である；
Ｘ６８に対応する残基が、極性、酸性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ７２に対応する残基が、塩基性残基である；
Ｘ７６に対応する残基が、脂肪族、非極性または極性残基である；
Ｘ８０に対応する残基が、脂肪族、非極性または極性残基である；
Ｘ９３に対応する残基が、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ９４に対応する残基が、システイン、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ９５に対応する残基が、脂肪族、非極性または酸性残基である；
Ｘ９６に対応する残基が、システイン、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ９７に対応する残基が、塩基性、拘束または極性残基である；
Ｘ１００に対応する残基が、塩基性、酸性、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１０８に対応する残基が、塩基性または拘束残基である；
Ｘ１１１に対応する残基が、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ１３９に対応する残基が、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ１４５に対応する残基が、酸性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１４７に対応する残基が、芳香族、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１４８に対応する残基が、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ１５１に対応する残基が、拘束、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ１５２に対応する残基が、極性、芳香族、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１６３に対応する残基が、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ１６５に対応する残基が、極性、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ１７３に対応する残基が、酸性、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ１７９に対応する残基が、芳香族、塩基性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１９４に対応する残基が、拘束、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１９６に対応する残基が、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ１９７に対応する残基が、酸性残基である；
Ｘ１９８に対応する残基が、酸性または極性残基である；
Ｘ２１０に対応する残基が、極性または塩基性残基である；
Ｘ２１１に対応する残基が、塩基性、脂肪族、非極性、酸性または極性残基である；
Ｘ２１２に対応する残基が、極性、脂肪族または非極性である；
Ｘ２１６に対応する残基が、拘束または塩基性残基である；
Ｘ２２３に対応する残基が、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ２２６に対応する残基が、非極性または極性残基である；
Ｘ２３３に対応する残基が、極性または酸性である；
Ｘ２３５に対応する残基が、極性または芳香族残基である；
Ｘ２４８に対応する残基が、非極性または芳香族残基である；
Ｘ２４９に対応する残基が、芳香族残基である；
のうちの１つ以上をさらに有し、ここで、該アミノ酸配列は、前記参照配列と比較して他のアミノ酸残基の位置に１つ以上の残基の相違を場合によっては有する、請求項４から７のいずれか１項に記載のポリペプチド。
【請求項９】
前記ケトレダクターゼアミノ酸配列が、以下の特徴：
Ｘ７に対応する残基が、ヒスチジンである；
Ｘ１７に対応する残基が、メチオニンである；
Ｘ２５に対応する残基が、アスパラギン酸である；
Ｘ２７に対応する残基が、チロシンである；
Ｘ４１に対応する残基が、セリンまたはアラニンである；
Ｘ５３に対応する残基が、アスパラギン酸である；
Ｘ５７に対応する残基が、バリンである；
Ｘ６４に対応する残基が、バリンである；
Ｘ６６に対応する残基が、グルタミン酸である；
Ｘ６８に対応する残基が、バリンである；
Ｘ７２に対応する残基が、アルギニンである；
Ｘ７６に対応する残基が、アラニンである；
Ｘ８０に対応する残基が、トレオニンまたはバリンである；
Ｘ９３に対応する残基が、セリンである；
Ｘ９４に対応する残基が、システインまたはグリシンである；
Ｘ９５に対応する残基が、ロイシンまたはグルタミン酸である；
Ｘ９６に対応する残基が、システイン、アスパラギン、バリン、ロイシン、イソロイシンまたはトレオニンである；
Ｘ９７に対応する残基が、ヒスチジンまたはセリンである；
Ｘ１００に対応する残基が、リシンである；
Ｘ１０８に対応する残基が、ヒスチジンである；
Ｘ１１１に対応する残基が、メチオニンである；
Ｘ１３９に対応する残基が、ロイシンである；
Ｘ１４５に対応する残基が、グルタミンまたはロイシンである；
Ｘ１４７に対応する残基が、ロイシンである；
Ｘ１４８に対応する残基が、バリンである；
Ｘ１５１に対応する残基が、アラニンである；
Ｘ１５２に対応する残基が、セリンである；
Ｘ１６３に対応する残基が、イソロイシンである；
Ｘ１６５に対応する残基が、アスパラギンである；
Ｘ１７３に対応する残基が、バリンである；
Ｘ１７９に対応する残基が、フェニルアラニン、リシンまたはロイシンである；
Ｘ１９４に対応する残基が、グルタミン、セリンまたはロイシンである；
Ｘ１９６に対応する残基が、ロイシンである；
Ｘ１９７に対応する残基が、グルタミン酸である；
Ｘ１９８に対応する残基が、グルタミン酸またはグルタミンである；
Ｘ２１０に対応する残基が、アルギニンである；
Ｘ２１１に対応する残基が、バリン、ロイシン、トレオニンまたはイソロイシンである；
Ｘ２１２に対応する残基が、セリンまたはバリンである；
Ｘ２１６に対応する残基が、アルギニンである；
Ｘ２２３に対応する残基が、バリンである；
Ｘ２２６に対応する残基が、トレオニンである；
Ｘ２３３に対応する残基が、アスパラギンまたはアスパラギン酸である；
Ｘ２３５に対応する残基が、トリプトファンである；
Ｘ２４８に対応する残基が、グリシンまたはトリプトファンである；
Ｘ２４９に対応する残基が、トリプトファンである；
のうちの１つ以上をさらに有し、ここで、該アミノ酸配列は、前記参照配列と比較して他のアミノ酸残基の位置に１つ以上の残基の相違を場合によっては有する、請求項４から７のいずれか１項に記載のポリペプチド。
【請求項１０】
前記ケトレダクターゼアミノ酸配列が、以下の特徴：
Ｘ９４に対応する残基が、システイン、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ９６に対応する残基が、システイン、極性、脂肪族または非極性残基である、および
Ｘ２１１に対応する残基が、塩基性、脂肪族、非極性、酸性または極性残基である；
のうちの１つ以上または少なくともすべてをさらに有し、ここで、該アミノ酸配列は、前記参照配列と比較して他のアミノ酸残基の位置に１つ以上の残基の相違を場合によっては有する、請求項４に記載のポリペプチド。
【請求項１１】
前記ケトレダクターゼアミノ酸配列が、以下の特徴：
Ｘ９４に対応する残基が、システイン、脂肪族または非極性残基である、
Ｘ９６に対応する残基が、システイン、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１４７に対応する残基が、芳香族、脂肪族または非極性残基である；
のうちの１つ以上または少なくともすべてをさらに有し、ここで、該アミノ酸配列は、前記参照配列と比較して他のアミノ酸残基の位置に１つ以上の残基の相違を場合によっては有する、請求項４に記載のポリペプチド。
【請求項１２】
前記ケトレダクターゼアミノ酸配列が、以下の特徴：
Ｘ９４に対応する残基が、システイン、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ９６に対応する残基が、システイン、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１４７に対応する残基が、芳香族、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ２１１に対応する残基が、塩基性、脂肪族、非極性、酸性または極性残基である；
のうちの１つ以上または少なくともすべてをさらに有し、ここで、該アミノ酸配列は、前記参照配列と比較して他のアミノ酸残基の位置に１つ以上の残基の相違を場合によっては有する、請求項４に記載のポリペプチド。
【請求項１３】
前記ケトレダクターゼアミノ酸配列が、以下の特徴：
Ｘ９４に対応する残基が、システイン、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ９６に対応する残基が、システイン、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１９４に対応する残基が、拘束、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ２１１に対応する残基が、塩基性、脂肪族、非極性、酸性または極性残基である；
のうちの１つ以上または少なくともすべてをさらに有し、ここで、該アミノ酸配列は、前記参照配列と比較して他のアミノ酸残基の位置に１つ以上の残基の相違を場合によっては有する、請求項４に記載のポリペプチド。
【請求項１４】
前記ケトレダクターゼアミノ酸配列が、以下の特徴：
Ｘ９４に対応する残基が、システイン、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ９６に対応する残基が、システイン、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１４７に対応する残基が、芳香族、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１９４に対応する残基が、拘束、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ２１１に対応する残基が、塩基性、脂肪族、非極性、酸性または極性残基である；；
のうちの１つ以上または少なくともすべてをさらに有し、ここで、該アミノ酸配列は、前記参照配列と比較して他のアミノ酸残基の位置に１つ以上の残基の相違を場合によっては有する、請求項４に記載のポリペプチド。
【請求項１５】
前記ケトレダクターゼアミノ酸配列が、以下の特徴：
Ｘ９３に対応する残基が、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ９４に対応する残基が、システイン、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ９６に対応する残基が、システイン、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ２１１に対応する残基が、塩基性、脂肪族、非極性、酸性または極性残基である；
のうちの１つ以上または少なくともすべてをさらに有し、ここで、該アミノ酸配列は、前記参照配列と比較して他のアミノ酸残基の位置に１つ以上の残基の相違を場合によっては有する、請求項４に記載のポリペプチド。
【請求項１６】
前記ケトレダクターゼアミノ酸配列が、以下の特徴：
Ｘ９３に対応する残基が、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ９４に対応する残基が、システイン、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ９６に対応する残基が、システイン、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１００に対応する残基が、塩基性、酸性、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１４７に対応する残基が、芳香族、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１５２に対応する残基が、極性、芳香族、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１９４に対応する残基が、拘束、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１９６に対応する残基が、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ２１１に対応する残基が、塩基性、脂肪族、非極性、酸性または極性残基である；
のうちの１つ以上または少なくともすべてをさらに有し、ここで、該アミノ酸配列は、前記参照配列と比較して他のアミノ酸残基の位置に１つ以上の残基の相違を場合によっては有する、請求項４に記載のポリペプチド。
【請求項１７】
前記ケトレダクターゼアミノ酸配列が、以下の特徴：
Ｘ７に対応する残基が、拘束または非極性残基である；
Ｘ６６に対応する残基が、酸性残基である；
Ｘ９３に対応する残基が、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ９４に対応する残基が、システイン、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ９６に対応する残基が、システイン、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１４７に対応する残基が、芳香族、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１９４に対応する残基が、拘束、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１９６に対応する残基が、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ１９８に対応する残基が、酸性または極性残基である；
Ｘ２１１に対応する残基が、塩基性、脂肪族、非極性、酸性または極性残基である；
のうちの１つ以上または少なくともすべてをさらに有し、ここで、該アミノ酸配列は、前記参照配列と比較して他のアミノ酸残基の位置に１つ以上の残基の相違を場合によっては有する、請求項４に記載のポリペプチド。
【請求項１８】
前記ケトレダクターゼアミノ酸配列が、以下の特徴：
Ｘ７に対応する残基が、拘束または非極性残基である；
Ｘ１７に対応する残基が、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ２７に対応する残基が、芳香族残基である；
Ｘ６４に対応する残基が、極性、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ６６に対応する残基が、酸性残基である；
Ｘ８０に対応する残基が、脂肪族、非極性または極性残基である；
Ｘ９３に対応する残基が、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ９４に対応する残基が、システイン、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ９６に対応する残基が、システイン、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１００に対応する残基が、塩基性または拘束残基である；
Ｘ１４７に対応する残基が、芳香族、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１９４に対応する残基が、拘束、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１９６に対応する残基が、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ１９８に対応する残基が、酸性または極性残基である；
Ｘ２１１に対応する残基が、塩基性、脂肪族、非極性、酸性または極性残基である；
Ｘ２１６に対応する残基が、拘束または塩基性残基である；
のうちの１つ以上または少なくともすべてをさらに有し、ここで、該アミノ酸配列は、前記参照配列と比較して他のアミノ酸残基の位置位置に１つ以上の残基の相違を場合によっては有する、請求項４に記載のポリペプチド。
【請求項１９】
前記ケトレダクターゼアミノ酸配列が、以下の特徴：
Ｘ７に対応する残基が、拘束または非極性残基である；
Ｘ１７に対応する残基が、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ２７に対応する残基が、芳香族残基である；
Ｘ６４に対応する残基が、極性、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ８０に対応する残基が、脂肪族、非極性または極性残基である；
Ｘ９３に対応する残基が、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ９４に対応する残基が、システイン、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ９６に対応する残基が、システイン、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１００に対応する残基が、塩基性または拘束残基である；
Ｘ１４７に対応する残基が、芳香族、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１９４に対応する残基が、拘束、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１９６に対応する残基が、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ１９８に対応する残基が、酸性または極性残基である；
Ｘ２１１に対応する残基が、塩基性、脂肪族、非極性、酸性または極性残基である；
Ｘ２１６に対応する残基が、拘束または塩基性残基である；
のすべてをさらに有し、ここで、該アミノ酸配列は、前記参照配列と比較して他のアミノ酸残基の位置に１つ以上の残基の相違を場合によっては有する、請求項４に記載のポリペプチド。
【請求項２０】
前記ケトレダクターゼアミノ酸配列が、以下の特徴：
Ｘ７に対応する残基が、ヒスチジンである；
Ｘ１７に対応する残基が、メチオニンである；
Ｘ２７に対応する残基が、芳香族残基である；
Ｘ６４に対応する残基が、チロシンである；
Ｘ８０に対応する残基が、トレオニンである；
Ｘ９３に対応する残基が、セリンである；
Ｘ９４に対応する残基が、システインである；
Ｘ９６に対応する残基が、バリン、ロイシンまたはイソロイシンである；
Ｘ１００に対応する残基が、リシンである；
Ｘ１４７に対応する残基が、ロイシンである；
Ｘ１９４に対応する残基が、グルタミンである；
Ｘ１９６に対応する残基が、ロイシンである；
Ｘ１９８に対応する残基が、グルタミン酸である；
Ｘ２１１に対応する残基が、バリンである；
Ｘ２１６に対応する残基が、アルギニンである；
のすべてをさらに有し、ここで、該アミノ酸配列は、前記参照配列と比較して他のアミノ酸残基の位置に１つ以上の残基の相違を場合によっては有する、請求項４に記載のポリペプチド。
【請求項２１】
前記ケトレダクターゼアミノ酸配列が、以下の特徴：Ｘ７に対応する残基が、ヒスチジンである；Ｘ９６に対応する残基が、トレオニンである；Ｘ１４７に対応する残基が、ロイシンである；およびＸ１９６に対応する残基が、ロイシンである、を有する、請求項８に記載のポリペプチド。
【請求項２２】
前記ケトレダクターゼアミノ酸配列が、以下の特徴：Ｘ９３に対応する残基が、セリンである；Ｘ９４に対応する残基が、システインである；Ｘ９６に対応する残基が、ロイシンである；およびＸ２１１に対応する残基が、バリンである、をさらに有する、請求項２１に記載のポリペプチド。
【請求項２３】
前記ケトレダクターゼアミノ酸配列が、以下の特徴：Ｘ１７に対応する残基が、メチオニンである；Ｘ２７に対応する残基が、チロシンである；Ｘ６４に対応する残基が、バリンである；Ｘ８０に対応する残基が、トレオニンである；およびＸ１００に対応する残基が、リシンである、をさらに有する、請求項２２に記載のポリペプチド。
【請求項２４】
前記ケトレダクターゼアミノ酸配列が、以下の特徴：Ｘ６６に対応する残基が、グルタミン酸である；Ｘ９６に対応する残基が、イソロイシンである；Ｘ１９４に対応する残基が、グルタミンである；Ｘ１９８に対応する残基が、グルタミン酸である；およびＸ２１６に対応する残基が、アルギニンである、をさらに有する、請求項２２に記載のポリペプチド。
【請求項２５】
前記ケトレダクターゼアミノ酸配列が、さらなる以下の特徴：Ｘ６６に対応する残基が、グルタミン酸である；Ｘ９６に対応する残基が、イソロイシンである；Ｘ１９４に対応する残基が、グルタミンである；およびＸ１９８に対応する残基が、グルタミン酸である、を有する、請求項２２に記載のポリペプチド。
【請求項２６】
前記ケトレダクターゼアミノ酸配列が、以下の特徴：Ｘ１９４に対応する残基が、グルタミンである；Ｘ１９８に対応する残基が、グルタミン酸である；およびＸ２１６に対応する残基が、アルギニンである、をさらに有する、請求項２３に記載のポリペプチド。
【請求項２７】
前記ケトレダクターゼアミノ酸配列が、以下の特徴：Ｘ１７に対応する残基が、メチオニンである；Ｘ２７に対応する残基が、チロシンである；Ｘ６４に対応する残基が、バリンである；Ｘ６６に対応する残基が、アスパラギン酸である；Ｘ８０に対応する残基が、トレオニンである；Ｘ９６に対応する残基が、イソロイシンまたはロイシンである；およびＸ１００に対応する残基が、リシンである、をさらに有する、請求項２４に記載のポリペプチド。
【請求項２８】
前記ケトレダクターゼポリペプチドが、以下の特徴：Ｘ１９０に対応する残基が、プロリンである、およびＸ２０２に対応する残基が、トリプトファンである；を有するが、但し、ケトレダクターゼドメインまたは領域が、Ｘ１９０に対応する残基が拘束残基であり、且つ、Ｘ２０２に対応する残基が芳香族残基である、アミノ酸配列を有することを条件とする、配列番号２、４または１１４に基づく参照配列の残基９０から２１１と少なくとも８５％同一であるアミノ酸配列を有する領域またはドメインを含む、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項２９】
前記ケトレダクターゼポリペプチドが、以下の特徴：Ｘ１９０に対応する残基が、プロリンである；Ｘ１９５に対応する残基が、アルギニンである；およびＸ２０２に対応する残基が、トリプトファンである；を有するが、但し、ケトレダクターゼドメインまたは領域が、Ｘ１９０に対応する残基が拘束残基であり、Ｘ１９５に対応する残基が塩基性、酸性、非極性または極性残基であり；且つ、Ｘ２０２に対応する残基が、芳香族残基である、アミノ酸配列を有することを条件とする、配列番号２、４または１１４に基づく参照配列の残基９０から２１１と少なくとも８５％同一であるアミノ酸配列を有する領域またはドメインを含む、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項３０】
前記ケトレダクターゼドメインまたは領域が、Ｘ１９０に対応する残基がプロリンであり、且つ、Ｘ２０２に対応する残基がトリプトファンである、アミノ酸配列を含む、請求項２８に記載のポリペプチド。
【請求項３１】
前記ケトレダクターゼドメインまたは領域が、Ｘ１９０に対応する残基がプロリンであり、Ｘ１９５に対応する残基がアルギニンであり、且つ、Ｘ２０２に対応する残基がトリプトファンである、アミノ酸配列を含む、請求項２９に記載のポリペプチド。
【請求項３２】
前記ケトレダクターゼドメインまたは領域が、以下の特徴：
Ｘ９３に対応する残基が、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ９４に対応する残基が、システイン、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ９５に対応する残基が、脂肪族、非極性または酸性残基である；
Ｘ９６に対応する残基が、システイン、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ９７に対応する残基が、塩基性、拘束または極性残基である；
Ｘ１００に対応する残基が、塩基性、酸性、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１０８に対応する残基が、塩基性または拘束残基である；
Ｘ１１１に対応する残基が、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ１３９に対応する残基が、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ１４５に対応する残基が、酸性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１４７に対応する残基が、芳香族、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１４８に対応する残基が、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ１５１に対応する残基が、拘束、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ１５２に対応する残基が、極性、芳香族、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１６３に対応する残基が、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ１６５に対応する残基が、極性、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ１７３に対応する残基が、酸性、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ１７９に対応する残基が、芳香族、塩基性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１９４に対応する残基が、拘束、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１９６に対応する残基が、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ１９７に対応する残基が、酸性残基である；
Ｘ１９８に対応する残基が、酸性または極性残基である；
Ｘ２１０に対応する残基が、極性または塩基性残基である；
Ｘ２１１に対応する残基が、塩基性、脂肪族、非極性、酸性または極性残基である；
のうちの１つ以上をさらに有し、ここで、該アミノ酸配列は、前記参照配列と比較して残基９０〜２１１に対応するドメイン内の他のアミノ酸残基の位置に１つ以上の相違を場合によっては有し得る、請求項２８から３１のいずれか１項に記載のポリペプチド。
【請求項３３】
前記ケトレダクターゼドメインまたは領域が、以下の特徴：
Ｘ９３に対応する残基が、セリンである；
Ｘ９４に対応する残基が、システインまたはグリシンである；
Ｘ９５に対応する残基が、ロイシンまたはグルタミン酸である；
Ｘ９６に対応する残基が、システイン、アスパラギン、バリン、ロイシン、イソロイシンまたはトレオニンである；
Ｘ９７に対応する残基が、ヒスチジンまたはセリンである；
Ｘ１００に対応する残基が、リシンである；
Ｘ１０８に対応する残基が、ヒスチジンである；
Ｘ１１１に対応する残基が、メチオニンである；
Ｘ１３９に対応する残基が、ロイシンである；
Ｘ１４５に対応する残基が、グルタミンまたはロイシンである；
Ｘ１４７に対応する残基が、ロイシンである；
Ｘ１５１に対応する残基が、アラニンである；
Ｘ１５２に対応する残基が、セリンである；
Ｘ１６３に対応する残基が、イソロイシンである；
Ｘ１６５に対応する残基が、アスパラギンである；
Ｘ１７３に対応する残基が、バリンである；
Ｘ１７９に対応する残基が、フェニルアラニン、リシンまたはロイシンである；
Ｘ１９４に対応する残基が、グルタミン、セリンまたはロイシンである；
Ｘ１９６に対応する残基が、ロイシンである；
Ｘ１９７に対応する残基が、グルタミン酸である；
Ｘ１９８に対応する残基が、グルタミン酸またはグルタミンである；
Ｘ２１０に対応する残基が、アルギニンである；
Ｘ２１１に対応する残基が、バリン、ロイシン、アルギニン、トレオニンまたはイソロイシンである；
のうちの１つ以上をさらに有し、ここで、該アミノ酸配列は、前記参照配列と比較して残基９０〜２１１に対応するドメイン内の他のアミノ酸残基の位置に１つ以上の相違を場合によっては有し得る、請求項２８から３１のいずれか１項に記載のポリペプチド。
【請求項３４】
前記ケトレダクターゼドメインまたは領域が、以下の特徴：
Ｘ９３に対応する残基が、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ９４に対応する残基が、システイン、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ９６に対応する残基が、システイン、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１００に対応する残基が、塩基性、酸性、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１４７に対応する残基が、芳香族、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１９４に対応する残基が、拘束、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１９６に対応する残基が、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ１９８に対応する残基が、酸性または極性残基である；
Ｘ２１１に対応する残基が、塩基性、脂肪族、非極性、酸性または極性残基である；
のすべてをさらに有し、ここで、該アミノ酸配列は、前記参照配列と比較して残基９０〜２１１に対応するドメイン内の他のアミノ酸残基の位置に１つ以上の相違を場合によっては有し得る、請求項２８から３１のいずれか１項に記載のポリペプチド。
【請求項３５】
前記ケトレダクターゼが、配列番号６、８、１０、１２、１４、１６、１８、２０、２２、２４、２６、２８、３０、３２、３４、３６、３８、４０、４２、４４、４６、４８、５０、５２、５４、５６、５８、６０、６２、６４、６６、６８、７０、７２、７４、７６、７８、８０、８２、８４、８６、８８、９２、９４、９６、９８、１００、１０２、１０４、１０６、１０８および１１０から選択されるアミノ酸配列を含む、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項３６】
前記ケトレダクターゼが、前記参照ポリペプチドよりも少なくとも１〜５０倍速い速度で前記基質を前記生成物に変換することができる、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項３７】
前記ケトレダクターゼが、配列番号４２、４４、４６、４８、８６、８８、９２、９４、９６、１００または１０２に対応するアミノ酸配列を含む、請求項３６に記載のポリペプチド。
【請求項３８】
前記ケトレダクターゼが、前記参照ポリペプチドよりも少なくとも５０〜２５０倍速い速度で前記基質を前記生成物に変換することができる、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項３９】
配列番号１０、３２、３４、３６、５０、６４、６６、６８、７０、７２、７４、７６、７８、８０、８２、８４、９８、１０４、１０６および１０８に対応するアミノ酸配列を含む、請求項３８に記載のポリペプチド。
【請求項４０】
前記参照ポリペプチドよりも少なくとも２５０〜１０００倍速い速度で前記基質を前記生成物に変換することができる、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項４１】
配列番号１２、１８、２２、２４、２６、２８、３０、３８、４０、５２、５４、５６、５８、６０、６２および１１０に対応するアミノ酸配列を含む、請求項４０に記載のポリペプチド。
【請求項４２】
前記参照ポリペプチドよりも少なくとも１０００倍速い速度で前記基質を前記生成物に変換することができる、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項４３】
配列番号６、８、１４、１６および２０に対応するアミノ酸配列を含む、請求項４２に記載のポリペプチド。
【請求項４４】
約１００ｇ／Ｌを超える基質および約５ｇ／Ｌ未満の前記ポリペプチドを用いて行われるとき、約２４時間未満で該基質の少なくとも約９５％を前記生成物に変換することができる、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項４５】
配列番号６、８、１４、１６および２０に対応するアミノ酸配列を含む、請求項４４に記載のポリペプチド。
【請求項４６】
前記参照ポリペプチドと比較して、前記基質の前記生成物への変換に対する競合的インヒビターとしてのアセトンに対して改善された抵抗性を有する、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項４７】
前記ケトレダクターゼが、配列番号６、８、１０、１２、１４、１６、１８、２０、２２、２４、２６、２８、３０、３２、３４、３６、３８、４０、５０、５２、５４、５６、５８、６０、６２、６４、６６、６８、７０、７２、７４、７６、７８、８０、８２、８４、８６、８８、９８、１０４、１０６、１０８および１１０から選択されるアミノ酸配列を含む、請求項４６に記載のポリペプチド。
【請求項４８】
請求項１〜４６のいずれか１項に記載のポリペプチドをコードするポリヌクレオチド。
【請求項４９】
配列番号に対応する配列から選択される、請求項４８に記載のポリヌクレオチド。
【請求項５０】
宿主細胞における発現の指図に適する制御配列に作動可能に連結された請求項４８に記載のポリヌクレオチドを含む、発現ベクター。
【請求項５１】
前記制御配列が、プロモーターを含む、請求項５０に記載の発現ベクター。
【請求項５２】
前記プロモーターが、Ｅ．ｃｏｌｉプロモーターを含む、請求項５１に記載の発現ベクター。
【請求項５３】
請求項５０に記載の発現ベクターを含む、宿主細胞。
【請求項５４】
Ｅ．ｃｏｌｉである、請求項５３に記載の宿主細胞。
【請求項５５】
前記ポリペプチドをコードする発現ベクターのコドンが、前記宿主細胞における発現のために最適化されている、請求項５３に記載の宿主細胞。
【請求項５６】
請求項１〜４６のいずれか１項に記載のケトレダクターゼ、および構造式（Ｉ）の基質２−［３−［３−［２−（７−クロロ−２−キノリニル）エテニル］フェニル］−３−オキソプロピル］安息香酸メチルエステル；構造式（ＩＩ）の生成物（Ｓ，Ｅ）−メチル２−（３−（３−（２−（７−クロロキノリン−２−イル）ビニル）フェニル）−３−ヒドロキシプロピル）ベンゾエート；構造式（ＩＩＩ）の基質２−［２−［３−［３−［２−（７−クロロ−２−キノリニル）エテニル］フェニル］−３−オキソプロピル］フェニル］−２−プロパノール；または構造式（ＩＶ）の生成物（Ｓ，Ｅ）−１−（３−（２−（７−クロロキノリン−２−イル）ビニル）フェニル）−３−（２−（２−ヒドロキシプロパン−２−イル）フェニル）プロパン−１−オールを含む、組成物。
【請求項５７】
前記基質が、構造式（Ｉ）の基質であり、そして前記組成物が、構造式（ＩＩ）の生成物をさらに含む、請求項５６に記載の組成物。
【請求項５８】
前記基質が、構造式（ＩＩ）の基質であり、そして前記組成物が、構造式（ＩＶ）の生成物をさらに含む、請求項５６に記載の組成物。
【請求項５９】
補因子再生系をさらに含む、請求項５６に記載の組成物。
【請求項６０】
前記補因子再生系が、グルコースデヒドロゲナーゼおよびグルコース；ギ酸デヒドロゲナーゼおよびホルマート；またはイソプロパノールおよび第二級アルコールデヒドロゲナーゼを含む、請求項５９に記載の組成物。
【請求項６１】
式（Ｉ）の基質２−［３−［３−［２−（７−クロロ−２−キノリニル）エテニル］フェニル］−３−オキソプロピル］安息香酸メチルエステルを式（ＩＩ）の生成物（Ｓ，Ｅ）−メチル２−（３−（３−（２−（７−クロロキノリン−２−イル）ビニル）フェニル）−３−ヒドロキシプロピル）ベンゾエートに還元するための方法であって、式（Ｉ）の該基質を式（ＩＩ）の該生成物に還元するか、または変換するのに適する反応条件下で、該基質と請求項１〜４６のいずれか１項に記載のケトレダクターゼポリペプチドとを接触させる工程を包含する、方法。
【請求項６２】
前記生成物が、約９９％より高い立体異性体過剰率で存在する、請求項６１に記載の方法。
【請求項６３】
前記基質の少なくとも約９５％が、約２４時間未満で前記生成物に還元され、ここで、該基質の濃度は、少なくとも１００ｇ／Ｌであり、且つ、前記ポリペプチドの濃度は、約５ｇ／Ｌ未満であり、そして該ポリペプチドは、配列番号６、８、１４、１６および２０に対応するアミノ酸配列を含む、請求項６３に記載の方法。
【請求項６４】
前記ケトレダクターゼ酵素を発現する全細胞またはそのような細胞の抽出物もしくは溶解産物を用いて行われる、請求項６１に記載の方法。
【請求項６５】
前記ケトレダクターゼが、単離され、そして／または精製され、そして前記還元反応が、該ケトレダクターゼのための補因子および場合によっては該補因子のための再生系の存在下において行われる、請求項６１に記載の方法。
【請求項６６】
前記補因子再生系が、グルコースデヒドロゲナーゼおよびグルコース；ギ酸デヒドロゲナーゼおよびホルマート；またはイソプロパノールおよび第二級アルコールデヒドロゲナーゼを含む、請求項６５に記載の方法。
【請求項６７】
前記第二級アルコールデヒドロゲナーゼが、前記ケトレダクターゼである、請求項６６に記載の方法。
【請求項６８】
式（ＩＩＩ）の基質２−［２−［３−［３−［２−（７−クロロ−２−キノリニル）エテニル］フェニル］−３−オキソプロピル］フェニル］−２−プロパノールを生成物（Ｓ，Ｅ）−１−（３−（２−（７−クロロキノリン−２−イル）ビニル）フェニル）−３−（２−（２−ヒドロキシプロパン−２−イル）フェニル）プロパン−１−オールに還元するための方法であって、式（ＩＩＩ）の該基質を式（ＩＶ）の生成物に還元するのに適する反応条件下で、該基質と請求項１〜４６のいずれか１項に記載のケトレダクターゼポリペプチドとを接触させる工程を包含する、方法。
【請求項６９】
前記生成物が、約９９％を超える立体異性体過剰率で存在する、請求項６８に記載の方法。
【請求項７０】
前記基質の少なくとも約９５％が、約２４時間未満で前記生成物に還元され、ここで、該基質の濃度は、少なくとも１００ｇ／Ｌであり、且つ、前記ポリペプチドの濃度は、約５ｇ／Ｌ未満であり、そして該ポリペプチドは、配列番号６、８、１４、１６および２０に対応するアミノ酸配列を含む、請求項６８に記載の方法。
【請求項７１】
前記ケトレダクターゼ酵素を発現する全細胞またはそのような細胞の抽出物もしくは溶解産物を用いて行われる、請求項６８に記載の方法。
【請求項７２】
前記ケトレダクターゼが、単離され、そして／または精製され、そして前記還元反応が、該ケトレダクターゼのための補因子および場合によっては該補因子のための再生系の存在下において行われる、請求項６８に記載の方法。
【請求項７３】
前記補因子再生系が、グルコースデヒドロゲナーゼおよびグルコース；ギ酸デヒドロゲナーゼおよびホルマート；またはイソプロパノールおよび第二級アルコールデヒドロゲナーゼを含む、請求項７２に記載の方法。
【請求項７４】
前記第二級アルコールデヒドロゲナーゼが、前記ケトレダクターゼである、請求項７３に記載の方法。
【請求項７５】
式（ＸＸ）：
【化２１】
の化合物を合成するための方法であって、
ここで、Ｒ１は、アルキルスルホニルまたはアリールスルホニルであり、該方法は：（ａ）式（Ｉ）の基質２−［３−［３−［２−（７−クロロ−２−キノリニル）エテニル］フェニル］−３−オキソプロピル］安息香酸メチルエステルを式（ＩＩ）の生成物（Ｓ，Ｅ）−メチル２−（３−（３−（２−（７−クロロキノリン−２−イル）ビニル）フェニル）−３−ヒドロキシプロピル）ベンゾエートに還元するか、または変換するのに適する反応条件下で、式（Ｉ）の該基質と請求項１〜４６のいずれか１項に記載のケトレダクターゼポリペプチドとを接触させることによって該基質を式（ＩＩ）の該生成物に還元する工程；および（ｂ）化合物（ＸＸ）の形成に適する条件下で、式（ＩＩ）の化合物とアルキルスルホニルハロゲン化物またはアリールスルホニルハロゲン化物とを反応させる工程を包含する、方法。
【請求項７６】
前記アルキルスルホニルハロゲン化物が、塩化メチルスルホニルである、請求項７５に記載の方法。
【請求項７７】
式（ＸＸＩ）：
【化２２】
の化合物を合成するための方法であって、
ここで、Ｒ１は、アルキルスルホニルまたはアリールスルホニルであり、該方法は：
（ａ）式（ＩＩＩ）の基質２−［２−［３−［３−［２−（７−クロロ−２−キノリニル）エテニル］フェニル］−３−オキソプロピル］フェニル］−２−プロパノールを式（ＩＶ）の生成物（Ｓ，Ｅ）−１−（３−（２−（７−クロロキノリン−２−イル）ビニル）フェニル）−３−（２−（２−ヒドロキシプロパン−２−イル）フェニル）プロパン−１−オールに還元するか、または変換するのに適する反応条件下で、式（ＩＩＩ）の該基質と請求項１〜４６のいずれか１項に記載のケトレダクターゼポリペプチドとを接触させることによって該基質を式（ＩＶ）の該生成物に還元する工程；および（ｂ）化合物（ＸＸＩ）の形成に適する条件下で、式（ＩＶ）の化合物とアルキルスルホニルハロゲン化物またはアリールスルホニルハロゲン化物とを反応させる工程を包含する、方法。
【請求項７８】
前記アルキルスルホニルハロゲン化物が、塩化メチルスルホニルである、請求項７５に記載の方法。
【請求項７９】
化合物（Ｖ）
【化２３】
またはその塩、水和物もしくは溶媒和化合物を合成するための方法であって、ここで、
該方法における工程は、式（Ｉ）の基質２−［３−［３−［２−（７−クロロ−２−キノリニル）エテニル］フェニル］−３−オキソプロピル］安息香酸メチルエステルを式（ＩＩ）の生成物（Ｓ，Ｅ）−メチル２−（３−（３−（２−（７−クロロキノリン−２−イル）ビニル）フェニル）−３−ヒドロキシプロピル）ベンゾエートに還元するか、または変換するのに適する反応条件下で、式（Ｉ）の該基質と請求項１〜４６のいずれか１項に記載のケトレダクターゼポリペプチドとを接触させることによって該基質を式（ＩＩ）の該生成物に還元する工程を包含する、方法。
【請求項８０】
化合物（Ｖ）
【化２４】
またはその塩、水和物もしくは溶媒和化合物を合成するための方法であって、ここで、該方法における工程は、式（ＩＩＩ）の基質２−［２−［３−［３−［２−（７−クロロ−２−キノリニル）エテニル］フェニル］−３−オキソプロピル］フェニル］−２−プロパノールを式（ＩＶ）の生成物（Ｓ，Ｅ）−１−（３−（２−（７−クロロキノリン−２−イル）ビニル）フェニル）−３−（２−（２−ヒドロキシプロパン−２−イル）フェニル）プロパン−１−オールに還元するのに適する反応条件下で、式（ＩＩＩ）の該基質と請求項１〜４６のいずれか１項に記載のケトレダクターゼポリペプチドとを接触させることによって該基質を式（ＩＶ）の該生成物に還元する工程を包含する、方法。
【請求項１】
配列番号４のポリペプチドの速度の少なくとも１．５倍の速度で基質２−［３−［３−［２−（７−クロロ−２−キノリニル）エテニル］フェニル］−３−オキソプロピル］安息香酸メチルエステルを生成物（Ｓ，Ｅ）−メチル２−（３−（３−（２−（７−クロロキノリン−２−イル）ビニル）フェニル）−３−ヒドロキシプロピル）ベンゾエートに変換することができるケトレダクターゼポリペプチド。
【請求項２】
少なくとも約９５％の立体異性体過剰率で前記基質を前記生成物に変換することができる、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項３】
少なくとも約９９％の立体異性体過剰率で前記基質を前記生成物に変換することができる、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項４】
以下の特徴：Ｘ１９０に対応する残基がプロリンである、およびＸ２０２に対応する残基がトリプトファンである；を有するが、但し、前記ケトレダクターゼポリペプチドは、Ｘ１９０に対応する残基が拘束残基であり、且つ、Ｘ２０２に対応する残基が芳香族残基である、アミノ酸配列を有することを条件とする、配列番号２、４または１１４に基づく参照配列と少なくとも約８５％同一であるアミノ酸配列を含む、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項５】
以下の特徴：Ｘ１９０に対応する残基がプロリンである；Ｘ１９５に対応する残基がアルギニンである；およびＸ２０２に対応する残基がトリプトファンである；を有するが、但し、前記ケトレダクターゼポリペプチドは、該Ｘ１９０に対応する残基が拘束残基であり、Ｘ１９５に対応する残基が塩基性、酸性、非極性または極性残基であり；且つ、Ｘ２０２に対応する残基が芳香族残基である、アミノ酸配列を有することを条件とする、配列番号２、４または１１４に基づく参照配列と少なくとも約８５％同一であるアミノ酸配列を含む、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項６】
前記Ｘ１９０に対応する残基がプロリンであり、且つ、前記Ｘ２０２に対応する残基がトリプトファンである、アミノ酸配列を含む、請求項４に記載のポリペプチド。
【請求項７】
Ｘ１９０に対応する残基がプロリンであり、Ｘ１９５に対応する残基がアルギニンであり、且つ、Ｘ２０２に対応する残基がトリプトファンである、アミノ酸配列を含む、請求項５に記載のポリペプチド。
【請求項８】
前記ケトレダクターゼアミノ酸配列が、以下の特徴：
Ｘ７に対応する残基が、拘束または非極性残基である；
Ｘ１７に対応する残基が、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ２５に対応する残基が、極性または酸性残基である；
Ｘ２７に対応する残基が、芳香族残基である；
Ｘ４１に対応する残基が、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ５３に対応する残基が、極性、非極性または酸性残基である；
Ｘ５７に対応する残基が、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ６４に対応する残基が、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ６６に対応する残基が、酸性残基である；
Ｘ６８に対応する残基が、極性、酸性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ７２に対応する残基が、塩基性残基である；
Ｘ７６に対応する残基が、脂肪族、非極性または極性残基である；
Ｘ８０に対応する残基が、脂肪族、非極性または極性残基である；
Ｘ９３に対応する残基が、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ９４に対応する残基が、システイン、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ９５に対応する残基が、脂肪族、非極性または酸性残基である；
Ｘ９６に対応する残基が、システイン、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ９７に対応する残基が、塩基性、拘束または極性残基である；
Ｘ１００に対応する残基が、塩基性、酸性、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１０８に対応する残基が、塩基性または拘束残基である；
Ｘ１１１に対応する残基が、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ１３９に対応する残基が、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ１４５に対応する残基が、酸性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１４７に対応する残基が、芳香族、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１４８に対応する残基が、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ１５１に対応する残基が、拘束、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ１５２に対応する残基が、極性、芳香族、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１６３に対応する残基が、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ１６５に対応する残基が、極性、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ１７３に対応する残基が、酸性、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ１７９に対応する残基が、芳香族、塩基性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１９４に対応する残基が、拘束、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１９６に対応する残基が、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ１９７に対応する残基が、酸性残基である；
Ｘ１９８に対応する残基が、酸性または極性残基である；
Ｘ２１０に対応する残基が、極性または塩基性残基である；
Ｘ２１１に対応する残基が、塩基性、脂肪族、非極性、酸性または極性残基である；
Ｘ２１２に対応する残基が、極性、脂肪族または非極性である；
Ｘ２１６に対応する残基が、拘束または塩基性残基である；
Ｘ２２３に対応する残基が、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ２２６に対応する残基が、非極性または極性残基である；
Ｘ２３３に対応する残基が、極性または酸性である；
Ｘ２３５に対応する残基が、極性または芳香族残基である；
Ｘ２４８に対応する残基が、非極性または芳香族残基である；
Ｘ２４９に対応する残基が、芳香族残基である；
のうちの１つ以上をさらに有し、ここで、該アミノ酸配列は、前記参照配列と比較して他のアミノ酸残基の位置に１つ以上の残基の相違を場合によっては有する、請求項４から７のいずれか１項に記載のポリペプチド。
【請求項９】
前記ケトレダクターゼアミノ酸配列が、以下の特徴：
Ｘ７に対応する残基が、ヒスチジンである；
Ｘ１７に対応する残基が、メチオニンである；
Ｘ２５に対応する残基が、アスパラギン酸である；
Ｘ２７に対応する残基が、チロシンである；
Ｘ４１に対応する残基が、セリンまたはアラニンである；
Ｘ５３に対応する残基が、アスパラギン酸である；
Ｘ５７に対応する残基が、バリンである；
Ｘ６４に対応する残基が、バリンである；
Ｘ６６に対応する残基が、グルタミン酸である；
Ｘ６８に対応する残基が、バリンである；
Ｘ７２に対応する残基が、アルギニンである；
Ｘ７６に対応する残基が、アラニンである；
Ｘ８０に対応する残基が、トレオニンまたはバリンである；
Ｘ９３に対応する残基が、セリンである；
Ｘ９４に対応する残基が、システインまたはグリシンである；
Ｘ９５に対応する残基が、ロイシンまたはグルタミン酸である；
Ｘ９６に対応する残基が、システイン、アスパラギン、バリン、ロイシン、イソロイシンまたはトレオニンである；
Ｘ９７に対応する残基が、ヒスチジンまたはセリンである；
Ｘ１００に対応する残基が、リシンである；
Ｘ１０８に対応する残基が、ヒスチジンである；
Ｘ１１１に対応する残基が、メチオニンである；
Ｘ１３９に対応する残基が、ロイシンである；
Ｘ１４５に対応する残基が、グルタミンまたはロイシンである；
Ｘ１４７に対応する残基が、ロイシンである；
Ｘ１４８に対応する残基が、バリンである；
Ｘ１５１に対応する残基が、アラニンである；
Ｘ１５２に対応する残基が、セリンである；
Ｘ１６３に対応する残基が、イソロイシンである；
Ｘ１６５に対応する残基が、アスパラギンである；
Ｘ１７３に対応する残基が、バリンである；
Ｘ１７９に対応する残基が、フェニルアラニン、リシンまたはロイシンである；
Ｘ１９４に対応する残基が、グルタミン、セリンまたはロイシンである；
Ｘ１９６に対応する残基が、ロイシンである；
Ｘ１９７に対応する残基が、グルタミン酸である；
Ｘ１９８に対応する残基が、グルタミン酸またはグルタミンである；
Ｘ２１０に対応する残基が、アルギニンである；
Ｘ２１１に対応する残基が、バリン、ロイシン、トレオニンまたはイソロイシンである；
Ｘ２１２に対応する残基が、セリンまたはバリンである；
Ｘ２１６に対応する残基が、アルギニンである；
Ｘ２２３に対応する残基が、バリンである；
Ｘ２２６に対応する残基が、トレオニンである；
Ｘ２３３に対応する残基が、アスパラギンまたはアスパラギン酸である；
Ｘ２３５に対応する残基が、トリプトファンである；
Ｘ２４８に対応する残基が、グリシンまたはトリプトファンである；
Ｘ２４９に対応する残基が、トリプトファンである；
のうちの１つ以上をさらに有し、ここで、該アミノ酸配列は、前記参照配列と比較して他のアミノ酸残基の位置に１つ以上の残基の相違を場合によっては有する、請求項４から７のいずれか１項に記載のポリペプチド。
【請求項１０】
前記ケトレダクターゼアミノ酸配列が、以下の特徴：
Ｘ９４に対応する残基が、システイン、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ９６に対応する残基が、システイン、極性、脂肪族または非極性残基である、および
Ｘ２１１に対応する残基が、塩基性、脂肪族、非極性、酸性または極性残基である；
のうちの１つ以上または少なくともすべてをさらに有し、ここで、該アミノ酸配列は、前記参照配列と比較して他のアミノ酸残基の位置に１つ以上の残基の相違を場合によっては有する、請求項４に記載のポリペプチド。
【請求項１１】
前記ケトレダクターゼアミノ酸配列が、以下の特徴：
Ｘ９４に対応する残基が、システイン、脂肪族または非極性残基である、
Ｘ９６に対応する残基が、システイン、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１４７に対応する残基が、芳香族、脂肪族または非極性残基である；
のうちの１つ以上または少なくともすべてをさらに有し、ここで、該アミノ酸配列は、前記参照配列と比較して他のアミノ酸残基の位置に１つ以上の残基の相違を場合によっては有する、請求項４に記載のポリペプチド。
【請求項１２】
前記ケトレダクターゼアミノ酸配列が、以下の特徴：
Ｘ９４に対応する残基が、システイン、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ９６に対応する残基が、システイン、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１４７に対応する残基が、芳香族、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ２１１に対応する残基が、塩基性、脂肪族、非極性、酸性または極性残基である；
のうちの１つ以上または少なくともすべてをさらに有し、ここで、該アミノ酸配列は、前記参照配列と比較して他のアミノ酸残基の位置に１つ以上の残基の相違を場合によっては有する、請求項４に記載のポリペプチド。
【請求項１３】
前記ケトレダクターゼアミノ酸配列が、以下の特徴：
Ｘ９４に対応する残基が、システイン、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ９６に対応する残基が、システイン、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１９４に対応する残基が、拘束、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ２１１に対応する残基が、塩基性、脂肪族、非極性、酸性または極性残基である；
のうちの１つ以上または少なくともすべてをさらに有し、ここで、該アミノ酸配列は、前記参照配列と比較して他のアミノ酸残基の位置に１つ以上の残基の相違を場合によっては有する、請求項４に記載のポリペプチド。
【請求項１４】
前記ケトレダクターゼアミノ酸配列が、以下の特徴：
Ｘ９４に対応する残基が、システイン、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ９６に対応する残基が、システイン、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１４７に対応する残基が、芳香族、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１９４に対応する残基が、拘束、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ２１１に対応する残基が、塩基性、脂肪族、非極性、酸性または極性残基である；；
のうちの１つ以上または少なくともすべてをさらに有し、ここで、該アミノ酸配列は、前記参照配列と比較して他のアミノ酸残基の位置に１つ以上の残基の相違を場合によっては有する、請求項４に記載のポリペプチド。
【請求項１５】
前記ケトレダクターゼアミノ酸配列が、以下の特徴：
Ｘ９３に対応する残基が、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ９４に対応する残基が、システイン、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ９６に対応する残基が、システイン、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ２１１に対応する残基が、塩基性、脂肪族、非極性、酸性または極性残基である；
のうちの１つ以上または少なくともすべてをさらに有し、ここで、該アミノ酸配列は、前記参照配列と比較して他のアミノ酸残基の位置に１つ以上の残基の相違を場合によっては有する、請求項４に記載のポリペプチド。
【請求項１６】
前記ケトレダクターゼアミノ酸配列が、以下の特徴：
Ｘ９３に対応する残基が、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ９４に対応する残基が、システイン、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ９６に対応する残基が、システイン、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１００に対応する残基が、塩基性、酸性、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１４７に対応する残基が、芳香族、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１５２に対応する残基が、極性、芳香族、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１９４に対応する残基が、拘束、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１９６に対応する残基が、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ２１１に対応する残基が、塩基性、脂肪族、非極性、酸性または極性残基である；
のうちの１つ以上または少なくともすべてをさらに有し、ここで、該アミノ酸配列は、前記参照配列と比較して他のアミノ酸残基の位置に１つ以上の残基の相違を場合によっては有する、請求項４に記載のポリペプチド。
【請求項１７】
前記ケトレダクターゼアミノ酸配列が、以下の特徴：
Ｘ７に対応する残基が、拘束または非極性残基である；
Ｘ６６に対応する残基が、酸性残基である；
Ｘ９３に対応する残基が、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ９４に対応する残基が、システイン、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ９６に対応する残基が、システイン、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１４７に対応する残基が、芳香族、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１９４に対応する残基が、拘束、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１９６に対応する残基が、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ１９８に対応する残基が、酸性または極性残基である；
Ｘ２１１に対応する残基が、塩基性、脂肪族、非極性、酸性または極性残基である；
のうちの１つ以上または少なくともすべてをさらに有し、ここで、該アミノ酸配列は、前記参照配列と比較して他のアミノ酸残基の位置に１つ以上の残基の相違を場合によっては有する、請求項４に記載のポリペプチド。
【請求項１８】
前記ケトレダクターゼアミノ酸配列が、以下の特徴：
Ｘ７に対応する残基が、拘束または非極性残基である；
Ｘ１７に対応する残基が、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ２７に対応する残基が、芳香族残基である；
Ｘ６４に対応する残基が、極性、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ６６に対応する残基が、酸性残基である；
Ｘ８０に対応する残基が、脂肪族、非極性または極性残基である；
Ｘ９３に対応する残基が、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ９４に対応する残基が、システイン、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ９６に対応する残基が、システイン、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１００に対応する残基が、塩基性または拘束残基である；
Ｘ１４７に対応する残基が、芳香族、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１９４に対応する残基が、拘束、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１９６に対応する残基が、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ１９８に対応する残基が、酸性または極性残基である；
Ｘ２１１に対応する残基が、塩基性、脂肪族、非極性、酸性または極性残基である；
Ｘ２１６に対応する残基が、拘束または塩基性残基である；
のうちの１つ以上または少なくともすべてをさらに有し、ここで、該アミノ酸配列は、前記参照配列と比較して他のアミノ酸残基の位置位置に１つ以上の残基の相違を場合によっては有する、請求項４に記載のポリペプチド。
【請求項１９】
前記ケトレダクターゼアミノ酸配列が、以下の特徴：
Ｘ７に対応する残基が、拘束または非極性残基である；
Ｘ１７に対応する残基が、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ２７に対応する残基が、芳香族残基である；
Ｘ６４に対応する残基が、極性、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ８０に対応する残基が、脂肪族、非極性または極性残基である；
Ｘ９３に対応する残基が、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ９４に対応する残基が、システイン、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ９６に対応する残基が、システイン、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１００に対応する残基が、塩基性または拘束残基である；
Ｘ１４７に対応する残基が、芳香族、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１９４に対応する残基が、拘束、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１９６に対応する残基が、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ１９８に対応する残基が、酸性または極性残基である；
Ｘ２１１に対応する残基が、塩基性、脂肪族、非極性、酸性または極性残基である；
Ｘ２１６に対応する残基が、拘束または塩基性残基である；
のすべてをさらに有し、ここで、該アミノ酸配列は、前記参照配列と比較して他のアミノ酸残基の位置に１つ以上の残基の相違を場合によっては有する、請求項４に記載のポリペプチド。
【請求項２０】
前記ケトレダクターゼアミノ酸配列が、以下の特徴：
Ｘ７に対応する残基が、ヒスチジンである；
Ｘ１７に対応する残基が、メチオニンである；
Ｘ２７に対応する残基が、芳香族残基である；
Ｘ６４に対応する残基が、チロシンである；
Ｘ８０に対応する残基が、トレオニンである；
Ｘ９３に対応する残基が、セリンである；
Ｘ９４に対応する残基が、システインである；
Ｘ９６に対応する残基が、バリン、ロイシンまたはイソロイシンである；
Ｘ１００に対応する残基が、リシンである；
Ｘ１４７に対応する残基が、ロイシンである；
Ｘ１９４に対応する残基が、グルタミンである；
Ｘ１９６に対応する残基が、ロイシンである；
Ｘ１９８に対応する残基が、グルタミン酸である；
Ｘ２１１に対応する残基が、バリンである；
Ｘ２１６に対応する残基が、アルギニンである；
のすべてをさらに有し、ここで、該アミノ酸配列は、前記参照配列と比較して他のアミノ酸残基の位置に１つ以上の残基の相違を場合によっては有する、請求項４に記載のポリペプチド。
【請求項２１】
前記ケトレダクターゼアミノ酸配列が、以下の特徴：Ｘ７に対応する残基が、ヒスチジンである；Ｘ９６に対応する残基が、トレオニンである；Ｘ１４７に対応する残基が、ロイシンである；およびＸ１９６に対応する残基が、ロイシンである、を有する、請求項８に記載のポリペプチド。
【請求項２２】
前記ケトレダクターゼアミノ酸配列が、以下の特徴：Ｘ９３に対応する残基が、セリンである；Ｘ９４に対応する残基が、システインである；Ｘ９６に対応する残基が、ロイシンである；およびＸ２１１に対応する残基が、バリンである、をさらに有する、請求項２１に記載のポリペプチド。
【請求項２３】
前記ケトレダクターゼアミノ酸配列が、以下の特徴：Ｘ１７に対応する残基が、メチオニンである；Ｘ２７に対応する残基が、チロシンである；Ｘ６４に対応する残基が、バリンである；Ｘ８０に対応する残基が、トレオニンである；およびＸ１００に対応する残基が、リシンである、をさらに有する、請求項２２に記載のポリペプチド。
【請求項２４】
前記ケトレダクターゼアミノ酸配列が、以下の特徴：Ｘ６６に対応する残基が、グルタミン酸である；Ｘ９６に対応する残基が、イソロイシンである；Ｘ１９４に対応する残基が、グルタミンである；Ｘ１９８に対応する残基が、グルタミン酸である；およびＸ２１６に対応する残基が、アルギニンである、をさらに有する、請求項２２に記載のポリペプチド。
【請求項２５】
前記ケトレダクターゼアミノ酸配列が、さらなる以下の特徴：Ｘ６６に対応する残基が、グルタミン酸である；Ｘ９６に対応する残基が、イソロイシンである；Ｘ１９４に対応する残基が、グルタミンである；およびＸ１９８に対応する残基が、グルタミン酸である、を有する、請求項２２に記載のポリペプチド。
【請求項２６】
前記ケトレダクターゼアミノ酸配列が、以下の特徴：Ｘ１９４に対応する残基が、グルタミンである；Ｘ１９８に対応する残基が、グルタミン酸である；およびＸ２１６に対応する残基が、アルギニンである、をさらに有する、請求項２３に記載のポリペプチド。
【請求項２７】
前記ケトレダクターゼアミノ酸配列が、以下の特徴：Ｘ１７に対応する残基が、メチオニンである；Ｘ２７に対応する残基が、チロシンである；Ｘ６４に対応する残基が、バリンである；Ｘ６６に対応する残基が、アスパラギン酸である；Ｘ８０に対応する残基が、トレオニンである；Ｘ９６に対応する残基が、イソロイシンまたはロイシンである；およびＸ１００に対応する残基が、リシンである、をさらに有する、請求項２４に記載のポリペプチド。
【請求項２８】
前記ケトレダクターゼポリペプチドが、以下の特徴：Ｘ１９０に対応する残基が、プロリンである、およびＸ２０２に対応する残基が、トリプトファンである；を有するが、但し、ケトレダクターゼドメインまたは領域が、Ｘ１９０に対応する残基が拘束残基であり、且つ、Ｘ２０２に対応する残基が芳香族残基である、アミノ酸配列を有することを条件とする、配列番号２、４または１１４に基づく参照配列の残基９０から２１１と少なくとも８５％同一であるアミノ酸配列を有する領域またはドメインを含む、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項２９】
前記ケトレダクターゼポリペプチドが、以下の特徴：Ｘ１９０に対応する残基が、プロリンである；Ｘ１９５に対応する残基が、アルギニンである；およびＸ２０２に対応する残基が、トリプトファンである；を有するが、但し、ケトレダクターゼドメインまたは領域が、Ｘ１９０に対応する残基が拘束残基であり、Ｘ１９５に対応する残基が塩基性、酸性、非極性または極性残基であり；且つ、Ｘ２０２に対応する残基が、芳香族残基である、アミノ酸配列を有することを条件とする、配列番号２、４または１１４に基づく参照配列の残基９０から２１１と少なくとも８５％同一であるアミノ酸配列を有する領域またはドメインを含む、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項３０】
前記ケトレダクターゼドメインまたは領域が、Ｘ１９０に対応する残基がプロリンであり、且つ、Ｘ２０２に対応する残基がトリプトファンである、アミノ酸配列を含む、請求項２８に記載のポリペプチド。
【請求項３１】
前記ケトレダクターゼドメインまたは領域が、Ｘ１９０に対応する残基がプロリンであり、Ｘ１９５に対応する残基がアルギニンであり、且つ、Ｘ２０２に対応する残基がトリプトファンである、アミノ酸配列を含む、請求項２９に記載のポリペプチド。
【請求項３２】
前記ケトレダクターゼドメインまたは領域が、以下の特徴：
Ｘ９３に対応する残基が、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ９４に対応する残基が、システイン、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ９５に対応する残基が、脂肪族、非極性または酸性残基である；
Ｘ９６に対応する残基が、システイン、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ９７に対応する残基が、塩基性、拘束または極性残基である；
Ｘ１００に対応する残基が、塩基性、酸性、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１０８に対応する残基が、塩基性または拘束残基である；
Ｘ１１１に対応する残基が、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ１３９に対応する残基が、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ１４５に対応する残基が、酸性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１４７に対応する残基が、芳香族、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１４８に対応する残基が、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ１５１に対応する残基が、拘束、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ１５２に対応する残基が、極性、芳香族、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１６３に対応する残基が、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ１６５に対応する残基が、極性、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ１７３に対応する残基が、酸性、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ１７９に対応する残基が、芳香族、塩基性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１９４に対応する残基が、拘束、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１９６に対応する残基が、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ１９７に対応する残基が、酸性残基である；
Ｘ１９８に対応する残基が、酸性または極性残基である；
Ｘ２１０に対応する残基が、極性または塩基性残基である；
Ｘ２１１に対応する残基が、塩基性、脂肪族、非極性、酸性または極性残基である；
のうちの１つ以上をさらに有し、ここで、該アミノ酸配列は、前記参照配列と比較して残基９０〜２１１に対応するドメイン内の他のアミノ酸残基の位置に１つ以上の相違を場合によっては有し得る、請求項２８から３１のいずれか１項に記載のポリペプチド。
【請求項３３】
前記ケトレダクターゼドメインまたは領域が、以下の特徴：
Ｘ９３に対応する残基が、セリンである；
Ｘ９４に対応する残基が、システインまたはグリシンである；
Ｘ９５に対応する残基が、ロイシンまたはグルタミン酸である；
Ｘ９６に対応する残基が、システイン、アスパラギン、バリン、ロイシン、イソロイシンまたはトレオニンである；
Ｘ９７に対応する残基が、ヒスチジンまたはセリンである；
Ｘ１００に対応する残基が、リシンである；
Ｘ１０８に対応する残基が、ヒスチジンである；
Ｘ１１１に対応する残基が、メチオニンである；
Ｘ１３９に対応する残基が、ロイシンである；
Ｘ１４５に対応する残基が、グルタミンまたはロイシンである；
Ｘ１４７に対応する残基が、ロイシンである；
Ｘ１５１に対応する残基が、アラニンである；
Ｘ１５２に対応する残基が、セリンである；
Ｘ１６３に対応する残基が、イソロイシンである；
Ｘ１６５に対応する残基が、アスパラギンである；
Ｘ１７３に対応する残基が、バリンである；
Ｘ１７９に対応する残基が、フェニルアラニン、リシンまたはロイシンである；
Ｘ１９４に対応する残基が、グルタミン、セリンまたはロイシンである；
Ｘ１９６に対応する残基が、ロイシンである；
Ｘ１９７に対応する残基が、グルタミン酸である；
Ｘ１９８に対応する残基が、グルタミン酸またはグルタミンである；
Ｘ２１０に対応する残基が、アルギニンである；
Ｘ２１１に対応する残基が、バリン、ロイシン、アルギニン、トレオニンまたはイソロイシンである；
のうちの１つ以上をさらに有し、ここで、該アミノ酸配列は、前記参照配列と比較して残基９０〜２１１に対応するドメイン内の他のアミノ酸残基の位置に１つ以上の相違を場合によっては有し得る、請求項２８から３１のいずれか１項に記載のポリペプチド。
【請求項３４】
前記ケトレダクターゼドメインまたは領域が、以下の特徴：
Ｘ９３に対応する残基が、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ９４に対応する残基が、システイン、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ９６に対応する残基が、システイン、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１００に対応する残基が、塩基性、酸性、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１４７に対応する残基が、芳香族、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１９４に対応する残基が、拘束、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１９６に対応する残基が、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ１９８に対応する残基が、酸性または極性残基である；
Ｘ２１１に対応する残基が、塩基性、脂肪族、非極性、酸性または極性残基である；
のすべてをさらに有し、ここで、該アミノ酸配列は、前記参照配列と比較して残基９０〜２１１に対応するドメイン内の他のアミノ酸残基の位置に１つ以上の相違を場合によっては有し得る、請求項２８から３１のいずれか１項に記載のポリペプチド。
【請求項３５】
前記ケトレダクターゼが、配列番号６、８、１０、１２、１４、１６、１８、２０、２２、２４、２６、２８、３０、３２、３４、３６、３８、４０、４２、４４、４６、４８、５０、５２、５４、５６、５８、６０、６２、６４、６６、６８、７０、７２、７４、７６、７８、８０、８２、８４、８６、８８、９２、９４、９６、９８、１００、１０２、１０４、１０６、１０８および１１０から選択されるアミノ酸配列を含む、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項３６】
前記ケトレダクターゼが、前記参照ポリペプチドよりも少なくとも１〜５０倍速い速度で前記基質を前記生成物に変換することができる、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項３７】
前記ケトレダクターゼが、配列番号４２、４４、４６、４８、８６、８８、９２、９４、９６、１００または１０２に対応するアミノ酸配列を含む、請求項３６に記載のポリペプチド。
【請求項３８】
前記ケトレダクターゼが、前記参照ポリペプチドよりも少なくとも５０〜２５０倍速い速度で前記基質を前記生成物に変換することができる、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項３９】
配列番号１０、３２、３４、３６、５０、６４、６６、６８、７０、７２、７４、７６、７８、８０、８２、８４、９８、１０４、１０６および１０８に対応するアミノ酸配列を含む、請求項３８に記載のポリペプチド。
【請求項４０】
前記参照ポリペプチドよりも少なくとも２５０〜１０００倍速い速度で前記基質を前記生成物に変換することができる、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項４１】
配列番号１２、１８、２２、２４、２６、２８、３０、３８、４０、５２、５４、５６、５８、６０、６２および１１０に対応するアミノ酸配列を含む、請求項４０に記載のポリペプチド。
【請求項４２】
前記参照ポリペプチドよりも少なくとも１０００倍速い速度で前記基質を前記生成物に変換することができる、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項４３】
配列番号６、８、１４、１６および２０に対応するアミノ酸配列を含む、請求項４２に記載のポリペプチド。
【請求項４４】
約１００ｇ／Ｌを超える基質および約５ｇ／Ｌ未満の前記ポリペプチドを用いて行われるとき、約２４時間未満で該基質の少なくとも約９５％を前記生成物に変換することができる、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項４５】
配列番号６、８、１４、１６および２０に対応するアミノ酸配列を含む、請求項４４に記載のポリペプチド。
【請求項４６】
前記参照ポリペプチドと比較して、前記基質の前記生成物への変換に対する競合的インヒビターとしてのアセトンに対して改善された抵抗性を有する、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項４７】
前記ケトレダクターゼが、配列番号６、８、１０、１２、１４、１６、１８、２０、２２、２４、２６、２８、３０、３２、３４、３６、３８、４０、５０、５２、５４、５６、５８、６０、６２、６４、６６、６８、７０、７２、７４、７６、７８、８０、８２、８４、８６、８８、９８、１０４、１０６、１０８および１１０から選択されるアミノ酸配列を含む、請求項４６に記載のポリペプチド。
【請求項４８】
請求項１〜４６のいずれか１項に記載のポリペプチドをコードするポリヌクレオチド。
【請求項４９】
配列番号に対応する配列から選択される、請求項４８に記載のポリヌクレオチド。
【請求項５０】
宿主細胞における発現の指図に適する制御配列に作動可能に連結された請求項４８に記載のポリヌクレオチドを含む、発現ベクター。
【請求項５１】
前記制御配列が、プロモーターを含む、請求項５０に記載の発現ベクター。
【請求項５２】
前記プロモーターが、Ｅ．ｃｏｌｉプロモーターを含む、請求項５１に記載の発現ベクター。
【請求項５３】
請求項５０に記載の発現ベクターを含む、宿主細胞。
【請求項５４】
Ｅ．ｃｏｌｉである、請求項５３に記載の宿主細胞。
【請求項５５】
前記ポリペプチドをコードする発現ベクターのコドンが、前記宿主細胞における発現のために最適化されている、請求項５３に記載の宿主細胞。
【請求項５６】
請求項１〜４６のいずれか１項に記載のケトレダクターゼ、および構造式（Ｉ）の基質２−［３−［３−［２−（７−クロロ−２−キノリニル）エテニル］フェニル］−３−オキソプロピル］安息香酸メチルエステル；構造式（ＩＩ）の生成物（Ｓ，Ｅ）−メチル２−（３−（３−（２−（７−クロロキノリン−２−イル）ビニル）フェニル）−３−ヒドロキシプロピル）ベンゾエート；構造式（ＩＩＩ）の基質２−［２−［３−［３−［２−（７−クロロ−２−キノリニル）エテニル］フェニル］−３−オキソプロピル］フェニル］−２−プロパノール；または構造式（ＩＶ）の生成物（Ｓ，Ｅ）−１−（３−（２−（７−クロロキノリン−２−イル）ビニル）フェニル）−３−（２−（２−ヒドロキシプロパン−２−イル）フェニル）プロパン−１−オールを含む、組成物。
【請求項５７】
前記基質が、構造式（Ｉ）の基質であり、そして前記組成物が、構造式（ＩＩ）の生成物をさらに含む、請求項５６に記載の組成物。
【請求項５８】
前記基質が、構造式（ＩＩ）の基質であり、そして前記組成物が、構造式（ＩＶ）の生成物をさらに含む、請求項５６に記載の組成物。
【請求項５９】
補因子再生系をさらに含む、請求項５６に記載の組成物。
【請求項６０】
前記補因子再生系が、グルコースデヒドロゲナーゼおよびグルコース；ギ酸デヒドロゲナーゼおよびホルマート；またはイソプロパノールおよび第二級アルコールデヒドロゲナーゼを含む、請求項５９に記載の組成物。
【請求項６１】
式（Ｉ）の基質２−［３−［３−［２−（７−クロロ−２−キノリニル）エテニル］フェニル］−３−オキソプロピル］安息香酸メチルエステルを式（ＩＩ）の生成物（Ｓ，Ｅ）−メチル２−（３−（３−（２−（７−クロロキノリン−２−イル）ビニル）フェニル）−３−ヒドロキシプロピル）ベンゾエートに還元するための方法であって、式（Ｉ）の該基質を式（ＩＩ）の該生成物に還元するか、または変換するのに適する反応条件下で、該基質と請求項１〜４６のいずれか１項に記載のケトレダクターゼポリペプチドとを接触させる工程を包含する、方法。
【請求項６２】
前記生成物が、約９９％より高い立体異性体過剰率で存在する、請求項６１に記載の方法。
【請求項６３】
前記基質の少なくとも約９５％が、約２４時間未満で前記生成物に還元され、ここで、該基質の濃度は、少なくとも１００ｇ／Ｌであり、且つ、前記ポリペプチドの濃度は、約５ｇ／Ｌ未満であり、そして該ポリペプチドは、配列番号６、８、１４、１６および２０に対応するアミノ酸配列を含む、請求項６３に記載の方法。
【請求項６４】
前記ケトレダクターゼ酵素を発現する全細胞またはそのような細胞の抽出物もしくは溶解産物を用いて行われる、請求項６１に記載の方法。
【請求項６５】
前記ケトレダクターゼが、単離され、そして／または精製され、そして前記還元反応が、該ケトレダクターゼのための補因子および場合によっては該補因子のための再生系の存在下において行われる、請求項６１に記載の方法。
【請求項６６】
前記補因子再生系が、グルコースデヒドロゲナーゼおよびグルコース；ギ酸デヒドロゲナーゼおよびホルマート；またはイソプロパノールおよび第二級アルコールデヒドロゲナーゼを含む、請求項６５に記載の方法。
【請求項６７】
前記第二級アルコールデヒドロゲナーゼが、前記ケトレダクターゼである、請求項６６に記載の方法。
【請求項６８】
式（ＩＩＩ）の基質２−［２−［３−［３−［２−（７−クロロ−２−キノリニル）エテニル］フェニル］−３−オキソプロピル］フェニル］−２−プロパノールを生成物（Ｓ，Ｅ）−１−（３−（２−（７−クロロキノリン−２−イル）ビニル）フェニル）−３−（２−（２−ヒドロキシプロパン−２−イル）フェニル）プロパン−１−オールに還元するための方法であって、式（ＩＩＩ）の該基質を式（ＩＶ）の生成物に還元するのに適する反応条件下で、該基質と請求項１〜４６のいずれか１項に記載のケトレダクターゼポリペプチドとを接触させる工程を包含する、方法。
【請求項６９】
前記生成物が、約９９％を超える立体異性体過剰率で存在する、請求項６８に記載の方法。
【請求項７０】
前記基質の少なくとも約９５％が、約２４時間未満で前記生成物に還元され、ここで、該基質の濃度は、少なくとも１００ｇ／Ｌであり、且つ、前記ポリペプチドの濃度は、約５ｇ／Ｌ未満であり、そして該ポリペプチドは、配列番号６、８、１４、１６および２０に対応するアミノ酸配列を含む、請求項６８に記載の方法。
【請求項７１】
前記ケトレダクターゼ酵素を発現する全細胞またはそのような細胞の抽出物もしくは溶解産物を用いて行われる、請求項６８に記載の方法。
【請求項７２】
前記ケトレダクターゼが、単離され、そして／または精製され、そして前記還元反応が、該ケトレダクターゼのための補因子および場合によっては該補因子のための再生系の存在下において行われる、請求項６８に記載の方法。
【請求項７３】
前記補因子再生系が、グルコースデヒドロゲナーゼおよびグルコース；ギ酸デヒドロゲナーゼおよびホルマート；またはイソプロパノールおよび第二級アルコールデヒドロゲナーゼを含む、請求項７２に記載の方法。
【請求項７４】
前記第二級アルコールデヒドロゲナーゼが、前記ケトレダクターゼである、請求項７３に記載の方法。
【請求項７５】
式（ＸＸ）：
【化２１】
の化合物を合成するための方法であって、
ここで、Ｒ１は、アルキルスルホニルまたはアリールスルホニルであり、該方法は：（ａ）式（Ｉ）の基質２−［３−［３−［２−（７−クロロ−２−キノリニル）エテニル］フェニル］−３−オキソプロピル］安息香酸メチルエステルを式（ＩＩ）の生成物（Ｓ，Ｅ）−メチル２−（３−（３−（２−（７−クロロキノリン−２−イル）ビニル）フェニル）−３−ヒドロキシプロピル）ベンゾエートに還元するか、または変換するのに適する反応条件下で、式（Ｉ）の該基質と請求項１〜４６のいずれか１項に記載のケトレダクターゼポリペプチドとを接触させることによって該基質を式（ＩＩ）の該生成物に還元する工程；および（ｂ）化合物（ＸＸ）の形成に適する条件下で、式（ＩＩ）の化合物とアルキルスルホニルハロゲン化物またはアリールスルホニルハロゲン化物とを反応させる工程を包含する、方法。
【請求項７６】
前記アルキルスルホニルハロゲン化物が、塩化メチルスルホニルである、請求項７５に記載の方法。
【請求項７７】
式（ＸＸＩ）：
【化２２】
の化合物を合成するための方法であって、
ここで、Ｒ１は、アルキルスルホニルまたはアリールスルホニルであり、該方法は：
（ａ）式（ＩＩＩ）の基質２−［２−［３−［３−［２−（７−クロロ−２−キノリニル）エテニル］フェニル］−３−オキソプロピル］フェニル］−２−プロパノールを式（ＩＶ）の生成物（Ｓ，Ｅ）−１−（３−（２−（７−クロロキノリン−２−イル）ビニル）フェニル）−３−（２−（２−ヒドロキシプロパン−２−イル）フェニル）プロパン−１−オールに還元するか、または変換するのに適する反応条件下で、式（ＩＩＩ）の該基質と請求項１〜４６のいずれか１項に記載のケトレダクターゼポリペプチドとを接触させることによって該基質を式（ＩＶ）の該生成物に還元する工程；および（ｂ）化合物（ＸＸＩ）の形成に適する条件下で、式（ＩＶ）の化合物とアルキルスルホニルハロゲン化物またはアリールスルホニルハロゲン化物とを反応させる工程を包含する、方法。
【請求項７８】
前記アルキルスルホニルハロゲン化物が、塩化メチルスルホニルである、請求項７５に記載の方法。
【請求項７９】
化合物（Ｖ）
【化２３】
またはその塩、水和物もしくは溶媒和化合物を合成するための方法であって、ここで、
該方法における工程は、式（Ｉ）の基質２−［３−［３−［２−（７−クロロ−２−キノリニル）エテニル］フェニル］−３−オキソプロピル］安息香酸メチルエステルを式（ＩＩ）の生成物（Ｓ，Ｅ）−メチル２−（３−（３−（２−（７−クロロキノリン−２−イル）ビニル）フェニル）−３−ヒドロキシプロピル）ベンゾエートに還元するか、または変換するのに適する反応条件下で、式（Ｉ）の該基質と請求項１〜４６のいずれか１項に記載のケトレダクターゼポリペプチドとを接触させることによって該基質を式（ＩＩ）の該生成物に還元する工程を包含する、方法。
【請求項８０】
化合物（Ｖ）
【化２４】
またはその塩、水和物もしくは溶媒和化合物を合成するための方法であって、ここで、該方法における工程は、式（ＩＩＩ）の基質２−［２−［３−［３−［２−（７−クロロ−２−キノリニル）エテニル］フェニル］−３−オキソプロピル］フェニル］−２−プロパノールを式（ＩＶ）の生成物（Ｓ，Ｅ）−１−（３−（２−（７−クロロキノリン−２−イル）ビニル）フェニル）−３−（２−（２−ヒドロキシプロパン−２−イル）フェニル）プロパン−１−オールに還元するのに適する反応条件下で、式（ＩＩＩ）の該基質と請求項１〜４６のいずれか１項に記載のケトレダクターゼポリペプチドとを接触させることによって該基質を式（ＩＶ）の該生成物に還元する工程を包含する、方法。
【図１】
【公表番号】特表２０１０−５３９９４８（Ｐ２０１０−５３９９４８Ａ）
【公表日】平成２２年１２月２４日（２０１０．１２．２４）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１０−５２７２２７（Ｐ２０１０−５２７２２７）
【出願日】平成２０年９月２８日（２００８．９．２８）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００８／０７８０４６
【国際公開番号】ＷＯ２００９／０４２９８４
【国際公開日】平成２１年４月２日（２００９．４．２）
【出願人】（５０６０３８２５７）コデクシス， インコーポレイテッド (11)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２２年１２月２４日（２０１０．１２．２４）
【国際特許分類】
【出願日】平成２０年９月２８日（２００８．９．２８）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００８／０７８０４６
【国際公開番号】ＷＯ２００９／０４２９８４
【国際公開日】平成２１年４月２日（２００９．４．２）
【出願人】（５０６０３８２５７）コデクシス， インコーポレイテッド (11)
【Ｆターム（参考）】
[ Back to top ]