本発明は、ニコチンを特異的に結合する組換えにより作成されたヒト・モノクローナル抗体及びそれをコードする核酸に関する。更に本発明は、ニコチン中毒の治療における当該抗体の使用に関する。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
ニコチンを特異的に結合するモノクローナル抗体であって、前記モノクローナル抗体はヒト・モノクローナル抗体であり、
（ａ）前記モノクローナル抗体は、少なくとも一つのＨＣＶＲを含み、前記ＨＣＶＲは、
（ｉ）１つのＨＣ ＣＤＲ１であって、配列番号１のペプチドから成るＨＣ ＣＤＲ１；
（ｉｉ）１つのＨＣ ＣＤＲ２であって、配列番号２のペプチドから成るＨＣ ＣＤＲ２；及び
（ｉｉｉ）１つのＨＣ ＣＤＲ３であって、配列番号３及び４の何れか一つのペプチド、好ましくは配列番号３のペプチドから成るＨＣ ＣＤＲ３を含み；且つ
（ｂ）前記モノクローナル抗体は、少なくとも一つのＬＣＶＲを含み、前記ＬＣＶＲは、
（ｉ）１つのＬＣ ＣＤＲ１であって、配列番号５、６及び７の何れか一つのペプチド、好ましくは配列番号５のペプチドから成るＬＣ ＣＤＲ１；
（ｉｉ）１つのＬＣ ＣＤＲ２であって、配列番号８のペプチドから成るＬＣ ＣＤＲ２；
（ｉｉｉ）１つのＬＣ ＣＤＲ３であって、配列番号９及び１０の何れか一つのペプチド、好ましくは配列番号９のペプチドから成るＬＣ ＣＤＲ３を含む、モノクローム抗体。
【請求項２】
（ａ）前記ＨＣＶＲの位置７から１１７は配列番号２４、２８、３３及び３９の何れか一つのペプチドから成り、好ましくは前記ＨＣＶＲの位置７から１１７は配列番号２４のペプチドから成り；
（ｂ）前記ＬＣＶＲの位置５から１０７は配列番号２６、３１、３５、３７及び４１の何れか一つのペプチドから成り、好ましくは前記ＬＣＶＲの位置５から１０７は配列番号２６のペプチドから成る、請求項１に記載のモノクローム抗体。
【請求項３】
（ａ）前記ＨＣＶＲの位置７から１１７が配列番号２４のペプチドから成り、前記ＬＣＶＲの位置５から１０７は配列番号２６のペプチドから成るか；
（ｂ）前記ＨＣＶＲの位置７から１１７が配列番号２８のペプチドから成り、前記ＬＣＶＲの位置５から１０７は配列番号３１のペプチドから成るか；
（ｃ）前記ＨＣＶＲの位置７から１１７が配列番号３３のペプチドから成り、前記ＬＣＶＲの位置５から１０７は配列番号３５のペプチドから成るか；
（ｄ）前記ＨＣＶＲの位置７から１１７が配列番号２８のペプチドから成り、前記ＬＣＶＲの位置５から１０７は配列番号３７のペプチドから成るか；又は
（ｅ）前記ＨＣＶＲの位置７から１１７が配列番号３９のペプチドから成り、前記ＬＣＶＲの位置５から１０７は配列番号４１のペプチドから成り；
好ましくは前記ＨＣＶＲの位置７から１１７が配列番号２４のペプチドから成り、前記ＬＣＶＲの位置５から１０７は配列番号２６のペプチドから成る、請求項１又は２に記載のモノクローム抗体。
【請求項４】
前記モノクローナル抗体は、少なくとも一つのガンマ２重鎖及び少なくとも一つのラムダ軽鎖を含み、
（ａ）前記ガンマ２重鎖は配列番号７３のペプチドを含むかまたは好ましくはそれから成り、前記ラムダ軽鎖は配列番号７４のペプチドを含むかまたは好ましくはそれから成るか；
（ｂ）前記ガンマ２重鎖は、配列番号７５のペプチドを含むかまたは好ましくはそれから成り、前記ラムダ軽鎖は配列番号７６のペプチドを含むかまたは好ましくはそれから成るか；
（ｃ）前記ガンマ２重鎖は、配列番号７７のペプチドを含むかまたは好ましくはそれから成り、前記ラムダ軽鎖は配列番号７８のペプチドを含むかまたは好ましくはそれから成るか；
（ｄ）前記ガンマ２重鎖は、配列番号７５のペプチドを含むかまたは好ましくはそれから成り、前記ラムダ軽鎖は配列番号７９のペプチドを含むかまたは好ましくはそれから成るか；または
（ｅ）前記ガンマ２重鎖は、配列番号８０のペプチドを含むかまたは好ましくはそれから成り、前記ラムダ軽鎖は配列番号８１のペプチドを含むかまたは好ましくはそれから成り；
好ましくは前記ガンマ２重鎖は、配列番号７３のペプチドを含むかまたは好ましくはそれから成り、前記ラムダ軽鎖は配列番号７４のペプチドを含むかまたは好ましくはそれから成る、請求項１から３の何れか一項に記載のモノクローム抗体。
【請求項５】
前記モノクローナル抗体がＩｇＧ２である、請求項１から４の何れか一項に記載のモノクローム抗体。
【請求項６】
前記モノクローナル抗体は、(S)-(-)-ニコチン及び(R)-(+)-ニコチンを特異的に結合する、請求項１から５の何れか一項に記載のモノクローム抗体。
【請求項７】
前記モノクローナル抗体は(S)-(-)-ニコチン及び(R)-(+)-ニコチンを特異的に結合し、前記(S)-(-)-ニコチンへの前記モノクローム抗体の前記結合の解離定数Ｋｄは１から１００ｎＭであり、前記(R)-(+)-ニコチンへの前記モノクローム抗体の前記結合の解離定数Ｋｄは１から１００ｎＭであり、
好ましくは前記(S)-(-)-ニコチンへの前記モノクローム抗体の前記結合の解離定数Ｋｄは１から７０ｎＭであり、前記(R)-(+)-ニコチンへの前記モノクローム抗体の前記結合の解離定数Ｋｄは１から５０ｎＭであり、
更に好ましくは、前記(S)-(-)-ニコチンへの前記モノクローム抗体の前記結合の解離定数Ｋｄは１から１０ｎＭであり、前記(R)-(+)-ニコチンへの前記モノクローム抗体の前記結合の解離定数Ｋｄは１から１０ｎＭである、請求項１から６の何れか一項に記載のモノクローム抗体。
【請求項８】
モノクローナル抗体のＨＣＶＲであって、前記モノクローナル抗体はヒト・モノクローナル抗体であり、前記モノクローム抗体は(S)-(-)-ニコチン及び(R)-(+)-ニコチンを特異的に結合し、
好ましくは前記(S)-(-)-ニコチンへの前記モノクローム抗体の前記結合の解離定数Ｋｄは１から１００ｎＭであり、前記(R)-(+)-ニコチンへの前記モノクローム抗体の前記結合の解離定数Ｋｄは１から１００ｎＭであり、
更に好ましくは前記(S)-(-)-ニコチンへの前記モノクローム抗体の前記結合の解離定数Ｋｄは１から７０ｎＭであり、前記(R)-(+)-ニコチンへの前記モノクローム抗体の前記結合の解離定数Ｋｄは１から５０ｎＭ、更に好ましくは１から２０ｎＭ、再度更に好ましくは１から１０ｎＭであり；且つ
前記ＨＣＶＲは、
（ａ）１つのＨＣ ＣＤＲ１であって、配列番号１のペプチドから成るＨＣ ＣＤＲ１；
（ｂ）１つのＨＣ ＣＤＲ２であって、配列番号２のペプチドから成るＨＣ ＣＤＲ２；
及び
（ｃ）１つのＨＣ ＣＤＲ３であって、配列番号３及び４の何れか一つのペプチド、好ましくは前記ＨＣ ＣＤＲ３は配列番号３のペプチドから成るＨＣ ＣＤＲ３を含む、モノクローナル抗体のＨＣＶＲ。
【請求項９】
前記ＨＣＶＲの位置７から１１７は配列番号２４、２８、３３及び３９の何れか一つのペプチドから成り、好ましくは前記ＨＣＶＲの位置７から１１７は配列番号２４のペプチドから成る、請求項８に記載のＨＣＶＲ。
【請求項１０】
モノクローナル抗体のＬＣＶＲであって、前記モノクローナル抗体はヒト・モノクローナル抗体であり、前記モノクローム抗体は(S)-(-)-ニコチン及び(R)-(+)-ニコチンを特異的に結合し、
好ましくは前記(S)-(-)-ニコチンへの前記モノクローム抗体の前記結合の解離定数Ｋｄは１から１００ｎＭであり、前記(R)-(+)-ニコチンへの前記モノクローム抗体の前記結合の解離定数Ｋｄは１から１００ｎＭであり、
更に好ましくは前記(S)-(-)-ニコチンへの前記モノクローム抗体の前記結合の解離定数Ｋｄは１から７０ｎＭであり、前記(R)-(+)-ニコチンへの前記モノクローム抗体の前記結合の解離定数Ｋｄは１から５０ｎＭ、更に好ましくは１から２０ｎＭ、再度更に好ましくは１から１０ｎＭであり；且つ
前記ＬＣＶＲは、
（ａ）１つのＬＣ ＣＤＲ１であって、配列番号５、６及び７の何れか一つのペプチド、好ましくは配列番号５のペプチドから成るＬＣ ＣＤＲ１；
（ｂ）１つのＬＣ ＣＤＲ２であって、前記ＬＣ ＣＤＲ２は配列番号８のペプチドから成るＬＣ ＣＤＲ２；及び
（ｃ）１つのＬＣ ＣＤＲ３であって、配列番号９及び１０の何れか一つのペプチド、好ましくは配列番号９のペプチドから成るＬＣ ＣＤＲ３を含む、モノクローナル抗体のＬＣＶＲ。
【請求項１１】
前記ＬＣＶＲの位置５から１０７は配列番号２６、３１、３５、３７及び４１の何れか一つのペプチドから成り、好ましくは前記ＬＣＶＲの位置５から１０７は配列番号２６のペプチドから成る、請求項１０に記載のＬＣＶＲ。
【請求項１２】
モノクローム抗体であって、前記モノクローナル抗体はヒト・モノクローナル抗体であり、前記モノクローム抗体は(S)-(-)-ニコチン及び(R)-(+)-ニコチンを特異的に結合し、
前記(S)-(-)-ニコチンへの前記モノクローム抗体の前記結合の解離定数Ｋｄは１から１００ｎＭであり、前記(R)-(+)-ニコチンへの前記モノクローム抗体の前記結合の解離定数Ｋｄは１から１００ｎＭであり、
更に好ましくは前記(S)-(-)-ニコチンへの前記モノクローム抗体の前記結合の解離定数Ｋｄは１から７０ｎＭであり、前記(R)-(+)-ニコチンへの前記モノクローム抗体の前記結合の解離定数Ｋｄは１から５０ｎＭ、更に好ましくは１から２０ｎＭ、再度更に好ましくは１から１０ｎＭである、モノクローム抗体。
【請求項１３】
（ａ）前記モノクローナル抗体は少なくとも一つのＨＣＶＲを含み、前記ＨＣＶＲは、
（ｉ）１つのＨＣ ＣＤＲ１であって、配列番号１のペプチドから成るＨＣ ＣＤＲ１；
（ｉｉ）１つのＨＣ ＣＤＲ２であって、配列番号２のペプチドから成るＨＣ ＣＤＲ２；及び
（ｉｉｉ）１つのＨＣ ＣＤＲ３であって、配列番号３及び４の何れか一つのペプチド、好ましくは配列番号３のペプチドから成るＨＣ ＣＤＲ３を含み；且つ
（ｂ）前記モノクローナル抗体は少なくとも一つのＬＣＶＲを含み、前記ＬＣＶＲは、
（ｉ）１つのＬＣ ＣＤＲ１であって、配列番号５、６及び７の何れか一つのペプチド、好ましくは配列番号５のペプチドから成るＬＣ ＣＤＲ１；
（ｉｉ）１つのＬＣ ＣＤＲ２であって、配列番号８のペプチドから成るＬＣ ＣＤＲ２；
（ｉｉｉ）１つのＬＣ ＣＤＲ３であって、配列番号９及び１０の何れか一つのペプチド、好ましくは配列番号９の何れか一つのペプチドから成るＬＣ ＣＤＲ３を含む、請求項１２に記載のモノクローナル抗体。
【請求項１４】
（ａ）前記ＨＣＶＲの位置７から１１７は配列番号２４、２８、３３及び３９の何れか一つのペプチドから成り、好ましくは前記ＨＣＶＲの位置７から１１７は配列番号２４のペプチドから成り；且つ、
（ｂ）前記ＬＣＶＲの位置５から１０７は配列番号２６、３１、３５、３７及び４１の何れか一つのペプチドから成り、好ましくは前記ＬＣＶＲの位置５から１０７は配列番号２６のペプチドから成る、請求項１２または１３に記載のモノクローナル抗体。
【請求項１５】
（ａ）前記ＨＣＶＲの位置７から１１７は配列番号２４のペプチドから成り、前記ＬＣＶＲの位置５から１０７は配列番号２６のペプチドから成るか；
（ｂ）前記ＨＣＶＲの位置７から１１７は配列番号２８のペプチドから成り、前記ＬＣＶＲの位置５から１０７は配列番号３１のペプチドから成るか；
（ｃ）前記ＨＣＶＲの位置７から１１７は配列番号３３のペプチドから成り、前記ＬＣＶＲの位置５から１０７は配列番号３５のペプチドから成るか；
（ｄ）前記ＨＣＶＲの位置７から１１７は配列番号２８のペプチドから成り、前記ＬＣＶＲの位置５から１０７は配列番号３７のペプチドから成るか；
または
（ｅ）前記ＨＣＶＲの位置７から１１７は配列番号３９のペプチドから成り、前記ＬＣＶＲの位置５から１０７は配列番号４１のペプチドから成り；
好ましくは、前記ＨＣＶＲの位置７から１１７は配列番号２４のペプチドから成り、前記ＬＣＶＲの位置５から１０７は配列番号２６のペプチドから成る、請求項１２から１４の何れか一項に記載のモノクローム抗体。

【図１】

【公表番号】特表２０１１−５０４８９３（Ｐ２０１１−５０４８９３Ａ）
【公表日】平成２３年２月１７日（２０１１．２．１７）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１０−５３５３０９（Ｐ２０１０−５３５３０９）
【出願日】平成２０年９月１１日（２００８．９．１１）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＥＰ２００８／０６２１０４
【国際公開番号】ＷＯ２００９／０６８３３５
【国際公開日】平成２１年６月４日（２００９．６．４）
【出願人】（３０４０４２３７５）サイトス　バイオテクノロジー　アーゲー (26)
【Ｆターム（参考）】