ヘルペス感染症を処置するための方法および組成物
プールされたヒト血漿から調製された免疫グロブリンを含んでなる組成物の投与によるヘルペス感染症および付随する疾病症状の処置または予防方法。免疫グロブリンの静脈および局所投与を含んでなる方法が提供される。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明はヘルペス感染症および付随する疾病症状の処置および／または予防のための免疫グロブリンを含んでなる組成物の投与に関する。本発明は本発明の組成物の静脈および局所投与に関する面を提供する。
【背景技術】
【０００２】
ヘルペスウイルスは数百万年にわたり発生しておりそして天然に大量に散在している。族の構成員はヒト、ヒト以外の霊長類並びにほとんどの他の哺乳動物および脊椎動物において同定されていた。ヘルペスウイルスは、負に荷電された構造、例えば硫酸ヘパリンおよび／またはグリコサミドグリカン類を細胞表面上にヘルペスウイルス進入媒介物質の他に有する感染性細胞である包囲された二重ストランドＤＮＡウイルスである。これらのウイルスの特徴は、それらが最初の感染後にそれらの宿主内に一生潜伏して残存しそして種々の内的および外的刺激で潜伏している感染された細胞のプールから多かれ少なかれしばしば再活性化することである。
【０００３】
単純ヘルペスウイルス（ＨＳＶ）は、免疫適格宿主中では自己限定性疾病を示す一方で、免疫無防備状態にある患者および新生児においては重篤な生命を脅かす感染症を引き起こしうる。ＨＳＶは西洋では散在性急性脳炎の主要原因であり、未処置時には死亡率は７０％を越える。新生児ＨＳＶ感染症は、抗ヘルペス療法（アシクロヴィル（ａｃｙｃｌｏｖｉｒ））にもかかわらず、劣悪な予後を有する。分娩時にヘルペスに接触する新生児の２５％は散在性ヘルペス感染症に進行しそして抗ウイルス療法にもかかわらず４０％の死亡率をこうむる。従って、生命を脅かすＨＳＶ疾病を処置するための新方法が緊急に要望されている。
【０００４】
免疫応答性人間でも、ＨＳＶは角膜感染症を引き起こして、永久的瘢痕、視力損失、および盲目をもたらしうる。上皮角膜炎が、ＨＳＶによる眼感染症の最も普遍的な表象である。急性ヘルペス疾病に伴う炎症を抑制するための抗ウイルス類およびステロイド類の利用にもかかわらず、慢性ＨＳＶは有意な眼の病的症状を引き起こし続ける。従って、ＨＳＶ眼疾病を処置するための新方法が緊急に要望されている。
【発明の開示】
【０００５】
発明の要旨
従って、一面において、本発明はプールされたヒト血漿から調製された免疫グロブリンＡ（ＩｇＡ）を含んでなる有効量の組成物を哺乳動物に静脈投与することによる哺乳動物における単純ヘルペスウイルス（ＨＳＶ）感染症の処置または予防方法に関する。哺乳動物はヒト新生児でありうる。哺乳動物は免疫無防備状態にありおよび／またはヘルペス疾病に罹っていることもありうる。ヘルペス疾病は、脳炎、肺炎、肝炎、眼ヘルペス、水痘、帯状ヘルペス、耳帯状ヘルペス、帯状ヘルペス水痘、角膜炎、指ヘルペス、顔面ヘルペス、陰部ヘルペス、剣状ヘルペス、または口腔ヘルペスでありうる。前記のいずれかの１つより多いものが哺乳動物を苦しめるヘルペス疾病を特徴づける。
【０００６】
ある態様では、ＩｇＡは組成物中に存在するいずれの免疫グロブリンの少なくとも約３５％〜約５５％を含んでなる（存在する合計免疫グロブリンの百分率としてのＩｇＡの最少量は約３５％〜約５５％でありうる）。他の態様では、ＩｇＡは組成物中に存在するいずれの免疫グロブリンの少なくとも約６０％〜約８０％を含んでなる。
【０００７】
別の面では、本発明はプールされたヒト血漿から調製された単量体状ＩｇＡ、二量体状
ＩｇＡ、および免疫グロブリンＧ（ＩｇＧ）を含んでなる有効量の組成物を哺乳動物に静脈投与することによる哺乳動物における単純ヘルペスウイルス（ＨＳＶ）感染症の処置または予防方法であって、単量体状および二量体状ＩｇＡが組成物中に存在する合計免疫グロブリンの少なくとも約３５％〜約５５％を含んでなる方法に関する。ある態様では、単量体状および二量体状ＩｇＡが組成物中に存在する合計免疫グロブリンの少なくとも約６０％〜約８０％を含んでなる。他の態様では、単量体状および二量体状ＩｇＡが組成物中に存在する合計免疫グロブリンの少なくとも約７０％〜約９５％を含んでなる。さらに別の態様では、単量体状および二量体状ＩｇＡが組成物中に存在する合計免疫グロブリンの少なくとも約６０％、少なくとも約８０％、または組成物中に存在する合計免疫グロブリンの少なくとも約９０％を含んでなる。
【０００８】
別の面では、本発明はプールされたヒト血漿から調製されたＩｇＧを含んでなる有効量の組成物を哺乳動物に局所投与することを含んでなる哺乳動物におけるヘルペス疾病の処置または予防方法に関する。ヘルペス疾病は、水痘、帯状ヘルペス、耳帯状ヘルペス、帯状ヘルペス水痘、角膜炎、指ヘルペス、顔面ヘルペス、陰部ヘルペス、剣状ヘルペス、または口腔ヘルペスでありうる。
【０００９】
別の面では、本発明はプールされたヒト血漿から調製されたＩｇＧを含んでなる有効量の組成物を哺乳動物に局所投与することによる哺乳動物における眼ヘルペス疾病の処置または予防方法に関する。
【００１０】
さらに別の面では、本発明はプールされたヒト血漿から調製された有効量のＩｇＧを含んでなる懸濁剤を哺乳動物の感染した眼に直接投与することによる哺乳動物における眼ヘルペス疾病の処置または予防方法に関する。
図面の簡単な記述
図１Ａおよび１Ｂは、それぞれ、第一および第二のサイズ排除（ゲル濾過）クロマトグラフィーカラムからの免疫グロブリンの溶離曲線のグラフ表示を示す。
【００１１】
図２は１５０ｋＤａにおける小さい帯を有する１６０ｋＤａにおける主要な帯として泳動する精製されたＩｇＡ（第二のサイズ排除クロマトグラフィー精製段階後）のＳＤＳ−ＰＡＧＥを示す。
【００１２】
図３Ａおよび３Ｂは本発明のＩｇＡ調合物（第二のサイズ排除クロマトグラフィー精製段階後）の、それぞれ、非還元ＳＤＳ−ＰＡＧＥおよびウェスタンブロットを示す。図３Ａにおいて、特定の帯を囲む「箱」は、右から左に、完全なＩｇＡ、完全なＩｇＧ、ＩｇＭのμｈ−連鎖、および完全なＩｇＡを表し、「ＩｇＡ Ｂａｙｅｒ」は本発明の方法に従い製造されたＩｇＡである。
【００１３】
図４Ａおよび４Ｂは図３Ａおよび３Ｂに表示された通りの非還元条件下における分析に対応するそれぞれ還元されたＳＤＳ−ＰＡＧＥおよびウェスタンブロットを示す。図４Ａにおいて、特定の帯を囲む箱は、右から左に、αｈ−連鎖（６０ｋＤａ）、γｈ−連鎖（５５ｋＤａ）、μｈ−連鎖（７０ｋＤａ）、およびαｈ−連鎖（６０ｋＤａ）を表す。
発明の詳細な記述
本発明は、ヒト血清の単量体状ＩｇＡＡ（ｍＩｇＡ）および／または二量体状ＩｇＡ（ｄＩｇＡ）画分の静脈投与による散在性ＨＳＶ疾病の処置および予防のための新規な方法を提供する。本発明により得られる結果とは対照的に、ＩｇＧ−枯渇血清によりＨＳＶ保護が得られないことはこれまでに示唆されていた（Ｒａｉｚｍａｎ，Ｍ．Ｂ．ａｎｄ Ｃ．Ｓ．Ｆｏｓｔｅｒ，Ｃｕｒｒ．Ｅｙｅ．Ｒｅｓ．７：８２３−８２９（１９８８）参照）。従って、本発明のＩｇＡ組成物はＨＳＶ感染症の処置のためにこれまでに使用されていなかった。
【００１４】
ＩｇＡ画分は、それらが典型的にはヒト血清からのＩｇＧ精製の副生物として廃棄されるため、莫大な商業的価値を有する。さらに、他の免疫グロブリンに優るＩｇＡの使用は、ＩｇＡが補体系統の古典的経路を活性化せず且つ代替補体経路だけをゆっくり活性化させるため、有利である。従って、ＩｇＡは炎症を促進させない。
【００１５】
本発明はまた、プールされたヒト血漿からの精製されたヒトＩｇＧを局所処置により使用することによるＨＳＶ疾病の処置および予防のための新規な方法も提供する。本発明のこの面は、免疫グロブリンの注射が必要ないという追加利点を有する。患者は眼調剤中の局所用ＩｇＧを用いて患者自身で処置できる。プールされたヒト血漿からのＩｇＧは、供血者のＨＳＶ−中和抗体水準に基づく供血者のスクリーニングを必要とせず、この目的に適格である。眼ヘルペス疾病の処置または予防に関しては、本発明の組成物は感染した眼の角膜に直接投与することができる。しかしながら、本発明に従う局所投与は眼疾病に限定されない。本発明のＩｇＧ組成物はＨＳＶ−関連疾病の他の症状発現に対して局所投与することができる。
【００１６】
ここで提供される化合物は単純ヘルペスウイルスにより引き起こされる疾病の処置および予防のために使用することができる。下記の適応症は説明例として挙げられておりそして本発明の範囲を限定しようとするものでない：１）ヘルペスウイルスにより引き起こされる疾病兆候、例えば眼ヘルペス、口唇炎、生殖器炎、角膜炎、脳炎、肺炎、肝炎などのある患者における単純ヘルペスウイルス感染症の処置および／または予防；２）免疫無防備状態にある患者（例えば、エイズ患者、移植受容者、癌患者、遺伝ベースの免疫不全症のある患者）における単純ヘルペスウイルス感染症の処置および／または予防；３）新生児、乳児、幼児および子供における単純ヘルペスウイルス感染症の処置および／または予防；４）再発性ヘルペス疾病の維持または抑制療法のための単純ヘルペスウイルス陽性患者のための処置および／または予防；並びに５）老人における単純ヘルペスウイルス疾病の処置および／または予防。
【００１７】
ここで使用される用語「有効量」は治療結果を生ずるのに充分な量を意味する。一般的に、治療結果は、生理学的工程を誘発もしくは促進させることにより、生理学的工程を遮断もしくは抑制することにより、または一般的に述べると疾病もしくは症状の排除もしくは減少を補助するかもしくはそれに寄与する生物学的作用を行うことにより得られる疾病または症状の客観的または主観的改良である。
【００１８】
断らない限り、用語「精製された」は物質がその元の環境から除去されて相対的に大量の物質が組成物の他の成分と比べて増加したことを意味する。或いはまたはさらに、この用語は少なくとも１種の特定不純物が物質を含んでなる組成物から減少または除去されたことだけを示すために使用することができる。
【００１９】
用語「製薬学的に許容可能な担体」は、本発明の活性化合物との混合用に適するいずれかの相容性無毒物質をさす。
【００２０】
句「プールされた血漿から製造された」は、この句により修飾された免疫グロブリン調剤が供血者から生じたプールされた血漿から回収されたことを意味する。本発明の組成物はそのような供血者をＨＳＶ−中和抗体のそれらの水準を測定するためのスクリーニングにかける必要がない。
【００２１】
本発明は、単純ヘルペスウイルスタイプ−１およびタイプ−２（ＨＳＶ−１およびＨＳＶ−２）、水痘帯状ヘルペスウイルス（ＶＺＶ）、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）、およびエプステイン−バルウイルス（ＥＢＶ）を包含するヘルペスウイルス感染症の処置お
よび／または予防のための医学療法における組成物およびそれらの使用に関する。本発明は、再発性単純ヘルペスタイプ１または２、帯状ヘルペス（水痘、帯状ヘルペス）、耳帯状ヘルペス、帯状ヘルペス水痘、生殖器いぼ、またはヘルペス角膜炎、指ヘルペス、顔面ヘルペス、生殖器ヘルペス、剣状ヘルペス、および口腔ヘルペスの処置および／または予防において使用することができる。そのような疾病および症状は既知でありそして通常技術の医師により容易に診断される。
【００２２】
本発明の静脈投与される組成物は散在性感染症の処置および／または予防のために使用することができ、それによりヘルペス関連疾病、例えばヘルペス脳炎を予防する。そのような組成物は新生児感染症の処置および／または予防のために使用することができ、それにより高い死亡率を一般に生ずる散在性感染症を処置または予防する。新生児および老人を包含する免疫無防備状態にあるヒトはそのような疾病に特に敏感でありそして本発明の組成物の投与から利点を受ける。
【００２３】
ＩｇＡを含んでなる組成物の静脈投与は潜在性ヘルペス感染症、例えば脳炎をもたらす感染症に罹っている患者に特に利点を与えるが、そのような処置はヘルペス感染症の一般的な症状発現のいずれかに罹っている患者にとっても有利でありうることは認識されよう。同様に、本発明の免疫グロブリン組成物の局所投与はヘルペス感染症、例えば、角膜炎の局所的症状発現に罹っている患者に直接的に有利であるが、そのような組成物の投与は散在性ヘルペス感染症の影響に罹っている患者にも利点を与えうる。
【００２４】
本発明の組成物は、本発明の化合物を製薬学的に許容可能な担体、および場合により、製薬学的に許容可能な賦形剤と標準的従来技術を用いて組み合わせるための従来技術を使用することにより製造することができる。局所調剤は、皮膚または他の影響を受けた領域を通る式ＩＩまたはＩＩＩの化合物の吸収または浸透を促進する物質も包含しうる。
【００２５】
製薬学的組成物中の活性成分、例えば本発明の免疫グロブリン調剤の量は患者の条件、ヘルペス感染症の重篤度、使用する特定化合物の効力、特定調剤および所望する濃度により広く変動または調節することができる。一般に、活性成分の量は組成物の約０．０５％〜約２５重量％、約０．１％〜約１０重量％、または組成物の約３％〜約１６％の範囲であろう。
【００２６】
外部組織、例えば口、眼および皮膚の感染症に関しては、調剤は活性成分を例えば組成物の約０．０５〜約２５重量％の、または約０．１〜約１０％ｗ／ｗの量で含有する局所軟膏剤またはクリーム剤として適用することができる。軟膏剤に調合される場合には、活性成分をパラフィン系または水−混和性軟膏ベースのいずれかと共に使用することができる。或いは、活性成分を水中油滴型クリームベースを含むクリーム剤の中に調合することもできる。
【００２７】
眼内への局所投与に適する調剤は点眼剤を包含し、ここで本発明の組成物を適当な担体、とくに水性溶媒中に溶解または懸濁させる。活性成分はそのような調剤中に約０．０５〜約２５％の、有利には約０．５〜約１０％の濃度で存在しうる。
【００２８】
口内への局所投与に適する調剤は、本発明の組成物を香料入りベース、例えばスクロースおよびアカシアまたはタオラガカント中に含んでなるロゼンジ剤；活性成分を不活性ベース、例えば、ゼラチンおよびグリセリン中に含んでなる香錠；並びに活性成分を適当な液体担体中に含んでなる口洗浄剤を包含する。
【００２９】
眼用薬用量形態は、本発明の組成物の治療水準を即座に与えるための点眼剤およびより遅い放出速度または就寝時使用のために設計された眼の軟膏剤を包含する。
【００３０】
本発明の点眼剤薬用量は、場合により、塩化ベンズアルコニウム、メチルパラベン、エデト酸二ナトリウム、チメルソル、およびクロルブタノールを包含するがそれらに限定されない群からの防腐剤；クエン酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、クエン酸、および乳酸ナトリウムを包含するがそれらに限定されない群からの緩衝剤；ポリビニルアルコール、ヒドロキシメチルセルロース、セチルアルコール、カルボキシメチルセルロース、およびヒドロキシ−プロピレンメチルセルロースを包含するがそれらに限定されない群からの賦形剤；硫酸、塩酸、水酸化ナトリウム、燐酸一ナトリウムまたは二ナトリウムを包含するがそれらに限定されない群からのｐＨ調節剤；精製水ＵＳＰ；ポロキサマー４０７または１８８、ポリソルベート８０；ポリオキシエチレンポリオキシプロピレン化合物；並びに鉱油ＵＳＰを包含するがそれらに限定されない１種もしくはそれ以上の適当な製薬学的に許容可能な不活性賦形剤を包含するであろう。前記の不活性賦形剤は、担体、賦形剤、希釈剤、結合剤、防腐剤、緩衝剤、ｐＨ調節剤、乳化剤、および他の調剤助剤としての種々の機能に役立つ。
【００３１】
調剤の長期分配のためまたは睡眠中の使用のための眼の軟膏剤薬用量形態は、場合により、クロルブタノール、ポリエチレン鉱油ゲル、白色ペトロラタムＵＳＰ、鉱油ＵＳＰ、ペトロラタムおよびラノリンアルコール、精製水ＵＳＰ、ポリビニルアルコールゲルおよび同様な生成物を包含するがそれらに限定されない１種もしくはそれ以上の製薬学的に許容可能な不活性賦形剤を包含するであろう。上記の賦形剤は、担体、賦形剤、希釈剤、結合剤、防腐剤、緩衝剤、ｐＨ調節剤、乳化剤、および他の調剤助剤としての種々の機能に役立つ。
【００３２】
本発明の組成物はまた、調剤の即座の治療水準を与えるための頬粘膜への適用使用のために製造された溶液および懸濁液を含んでなる薬用量形態も包含する。
【００３３】
本発明の頬粘膜薬用量形態は場合により、以上で「点眼剤」薬用量形態に関して挙げられた防腐剤、緩衝剤、賦形剤、およびｐＨ調節剤を包含するがそれらに限定されない１種もしくはそれ以上の適当な製薬学的に許容可能な不活性賦形剤を包含するであろう。前記のように、上記の不活性賦形剤は、担体、賦形剤、希釈剤、結合剤、防腐剤、緩衝剤、ｐＨ調節剤、乳化剤、および他の調剤助剤としての種々の機能に役立つ。
【００３４】
本発明の組成物はまた、軟膏剤、ゲル剤、およびクリーム剤を包含する種々の形態で製造されるＨＳＶ感染症の皮膚症状発現の局所処理における使用のための薬用量形態も包含する。これらの調剤は、場合により、１種もしくはそれ以上の下記の適当な製薬学的に許容可能な賦形剤を包含する：ミリスチン酸イソプロピルＮＦ、トロールアミンＮＦ、ＳＤアルコール４０（２０％）、白色ペトロラタムＵＳＰ、ラノリンアルコール類ＮＦ、鉱油ＵＳＰ、ポリビニルアルコールゲル、セトステアリルアルコールＮＦ、乳酸ＵＳＰ、ステアリン酸カルシウム、デキストラン、ステアリン酸ポリオキシル４０、メチルパラベン、プロピレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウム、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）ベース、合成蜜蝋（Ｂワックス）、酢酸カルシウム、精製水ＵＳＰおよび同様な生成物。上記の賦形剤は、担体、賦形剤、希釈剤、結合剤、防腐剤、緩衝剤、ｐＨ調節剤、乳化剤、および他の調剤助剤としての種々の機能に役立つ。
【００３５】
本発明の組成物はまた、膣坐剤、ゲル剤、および錠剤を包含する膣挿入用の薬用量形態で製造されるＨＳＶ感染症、とくにＨＳＶ−２の女性生殖器症状発現処置における局所使用のための薬用量形態も包含する。これらの調剤は、場合により、ミリスチン酸イソプロピルＮＦ、鉱油ＵＳＰ、ステアリルアルコールＮＦ、安息香酸ＵＳＰ、ステアリン酸ペゴキシル７、メチルパラベン、プロピルパラベン、プロピレングリコール、ブチル化されたヒドロキシアニソール、ヤシまたはパーム核油トリグリセリド類、ポリソルベート６０ま
たはポリソルベート８、ペグリコル５、ステアリン酸ＰＥＧ−１００およびモノステアリン酸ソルビタン、乳酸カルシウム、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、多糖カラゲナンコーンスターチ、ラクトース、乳酸カルシウム、二酸化珪素および精製水ＵＳＰをとりわけ包含するがそれらに限定されない１種もしくはそれ以上の適当な製薬学的に許容可能な賦形剤を包含しうる。上記の賦形剤は、担体、賦形剤、希釈剤、結合剤、防腐剤、緩衝剤、ｐＨ調節剤、乳化剤、および他の調剤助剤としての種々の機能に役立つ。
【００３６】
静脈投与に関して、本発明の免疫グロブリン組成物の薬用量および投与方法は、処置される特定症状の重篤度および性質、処置期間、使用される補助療法、処置対象の年齢および身体症状に応じて変動するであろう。しかしながら、静脈投与用の１回薬用量は、典型的には、１キログラムの体重当たり約５０ｍｇ〜約１０ｇ、または１キログラムの体重当たり約１００ｍｇ〜約５ｇの範囲でありうる（断らない限り、ここで使用される「ｍｇ／ｋｇ」または「ｇ／ｋｇ」で表示される単位は１キログラムの体重当たりのミリグラムまたはグラムをさす）。
【実施例】
【００３７】
実施例１ ＨＳＶの成長およびウイルス株の調製
単純ヘルペスウイルス（ＨＳＶ−１ Ｗａｌｋｉ）をアフリカ・グリーン・モンキー腎細胞（ベロ細胞；ＡＴＣＣ ＣＣＬ−８１）上で定型的に増殖させたが、多くの組織−培養系統をＨＳＶの成長および定量化用に使用することができる（Ｈｅｒｐｅｓ Ｓｉｍｐｌｅｘ Ｖｉｒｕｓ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ，１９９８，Ｅｄ．Ｓ．Ｍ．Ｂｒｏｗｎ ＆ Ａ．Ｒ．ＭａｃＬｅａｎ，Ｈｕｍａｎａ Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，Ｎｅｗ ＪｅｒｓｅＹ）。ベロ細胞を、５％の胎牛血清（ＦＣＳ）、２ｍＭのグルタミン、１００ＩＵ／ｍｌのペニシリン、１００μｇ／ｍｌのストレプトマイシンが補充されたＭ１９９培地の中で細胞培養フラスコ（例えば、１７５ｃｍ２／２５−５０ｍｌ）中で３７℃において５％のＣＯ２の存在下で成長させた。細胞を１週間に２回１：４分裂させた（細胞生存率＞９５％）。ウイルス感染用に、培地を回収し、細胞をハンク溶液で洗浄し、０．０５％のトリプシン、０．０２％のＥＤＴＡ（セロメド（Ｓｅｒｏｍｅｄ）、Ｌ２１４３）でトリプシン処理し、細胞培養フラスコ中で１ｍｌ当たり４×１０５個の細胞濃度で接種し、そして２４時間にわたり３７℃において５％のＣＯ２の存在下でインキュベートした。培地を回収しそしてウイルス懸濁液を＜０．０５の感染多重度で１７５ｃｍ２の表面積当たり２ｍｌの量で加えた。フラスコを３７℃において５％のＣＯ２の存在下で時々攪拌しながら１時間放置してウイルスを細胞全体に分布させた。培地を１７５ｃｍ２の組織培養フラスコ当たり５０ｍｌの最終容量となるまで加えた。全ての細胞が感染の兆候を示すまで（約２−３日間）、培養物をインキュベートした。ウイルスを回収するために、フラスコを２回にわたり−８０℃において凍結させそして３７℃において（水浴中で）解凍した。細胞破片を遠心（３００ｇ、１０分間、４℃）により回収しそして上澄み液をアリコート中で−８０℃において貯蔵した。
【００３８】
ウイルス株の力価をプラーク検定で測定した。簡単に述べると、ベロ細胞を２４−ウエル組織培養板のウエル当たり４×１０５個の細胞の濃度で接種した。２４時間のインキュベーション時間（３７℃、５％のＣＯ２）後に、細胞に１０−２〜１０−８の範囲内のウイルス株の希釈物を感染させた。感染容量はウエル当たり１００μｌであった。感染後の３７℃、５％のＣＯ２における１時間のインキュベーション後に、細胞を静かに除去し、１ｍｌの被覆培地（ＭＥＭＥ（イーグル塩を含むＭＥＭＥ−イーグル）中の０．５％のメチルセルロース、０．２２５％の炭酸水素ナトリウム、２ｍＭのグルタミン、１００ＩＵ／ｍｌのペニシリン、１００μｇ／ｍｌのストレプトマイシン、５％のＦＣＳ）で被覆し、そして３日間にわたり３７℃において５％のＣＯ２の存在下で放置した。細胞を４％のホルマリンを用いて少なくとも３０分間にわたり固定し、水で洗浄し、ギームザ溶液（メルク（Ｍｅｒｃｋ）、ダルムスタッド）で３０分間にわたり染色しそして再び洗浄した。
板を乾燥した後に、プラークを計数しそしてウイルス株の力価を計算した。
実施例２ 致死攻撃モデル
Ｂａｌｂ／ｃＡＢｏｍ雌マウス（体重１９ｇ、年齢７週間）を購入し（Ｍ＆Ｂ Ａ／Ｓ、デンマーク）、そして１週間後に接種した。氷冷ＰＢＳ（〜５×１０４ｐｆｕ）中の５０μｌの希釈されたウイルス懸濁液を軽くエーテル麻酔がかけられたマウスの外鼻腔に適用すると、７−１０日間後に９０−１００％の死亡率を生じた。感染させた動物を毎日疾病の兆候（脳炎、麻痺、呼吸症状）に関して点検しそして死にかけた動物は安楽死させた。
実施例３ 眼ヘルペスモデル
Ｂａｌｂ／ｃＡＢｏｍ雌マウス（体重１９ｇ、年齢７週間）を購入し（Ｍ＆Ｂ Ａ／Ｓ、デンマーク）、そして１週間後に接種した。マウスをエーテルにより麻酔をかけそして右角膜を、垂直に３回そして水平に３回、殺菌３０−ゲージ針を用いて剥離した。５μｌのウイルス懸濁液（５×１０６ｐｆｕ ＨＳＶ−１ Ｗａｌｋｉ）を乱切りされた角膜に適用した。マウスを毎日ヘルペス感染症の兆候（眼瞼炎、角膜炎、脳炎）に関して点検した。死にかけた動物は安楽死させた。
実施例４ 免疫グロブリン画分
ヒト免疫グロブリン画分である、ＩｇＧ、単量体状ＩｇＡ（ｍＩｇＡ）、および二量体状ＩｇＡ（ｄＩｇＡ）を下記の通りにして製造した。
【００３９】
実施例で使用されたＩｇＧは、出発物質としてコーン（Ｃｏｈｎ）画分ＩＩ＋ＩＩＩを用いてプールされたヒト血漿から精製された商業等級ＩｇＧ（５％のＧＡＭＩＭＭＵＮＥ
Ｎ、バイエル・コープ（Ｂａｙｅｒ Ｃｏｒｐ．）、ピッツバーグ、ペンシルバニア州）であった。ヒト血漿からの単量体状ＩｇＡおよびｄＩｇＡを２つの連続的なサイズ排除クロマトグラフィー段階によりスーパーデックス（ＳＵＰＥＲＤＥＸ）２００上でバイオロジック（ＢＩＯＬＯＧＩＣ）クロマトグラフィー台（バイオ・ラド（Ｂｉｏ Ｒａｄ）、リッチモンド、カリフォルニア州）を用いて精製した。ＩＧＩＶ−Ｃ方法（引用することにより全てが本発明の内容となる米国特許第６，３０７，０２８号明細書参照）の廃棄流であるＱ−セファロース（Ｑ−ＳＥＰＨＡＲＯＳＥ）クロマトグラフィー段階の高−塩片が出発物質として使用されそして１３ｍｇ／ｍｌのＩｇＡを４５％の純度で含有していた。
【００４０】
簡単に述べると、２０ｍｌの出発物質を２−リットルの２００ＸＫ ５０／１ ００ スーパーデックス２００カラム（５ｃｍ×９３ｃｍ、ファーマシア（Ｐｈａｒｍａｃｉａ）、アップサラ、スウェーデン）に適用しそしてトリス緩衝食塩水緩衝液（シグマ（Ｓｉｇｍａ）、セントルイス、ミズーリ州）の中で１０ｍｌ／分で実験した。画分を比濁法であるＳＤＳ−ＰＡＧＥおよびサイズ排除−ＦＰＬＣにより分析した。単量体状ＩｇＡに関して陽性である画分をプールし、アミコン（ＡＭＩＣＯＮ）濃縮室（ＹＭ １０ 膜、室温）を用いて１０ｍｌの最終容量に濃縮し、そしてスーパーデックス２００カラムに最初の実験と同じ実験条件を用いて再適用した。最終生成物をｐＨ４．２５の０．２Ｍグリシン中で調合しそして０．２μｍ膜を用いて殺菌濾過した。第一クロマトグラフィーの溶離曲線（２８０ｎｍ）は５個の蛋白質ピークを有し、それらは免疫比濁法によりＩｇＭ、ｄＩｇＡ、ｍＩｇＡ、ＩｇＧおよびアルブミンとして同定された（図１Ａ参照）。スーパーデックス２００上のｍＩｇＡおよびｄＩｇＡピークの再クロマトグラフィーは１個の主要蛋白質ピークおよび２個の小さい肩を生じ、それらはｍＩｇ、ｄＩｇＡ、およびＩｇＧをそれぞれ含有していた（図１Ｂ参照）。ｍＩｇＡまたはｄＩｇＡを含有する画分がプールされた。ＩｇＡの同一性はＳＤＳ−ＰＡＧＥおよびウェスタンブロットによりさらに確認された（図２、３Ａ、３Ｂ、４Ａ、および４Ｂ参照）。アリコートを−７０℃において貯蔵した。
実施例５ 眼ＨＳＶ−疾病の予防／処置用のヒトＩｇＧ
眼ヘルペスモデル用に、免疫グロブリン懸濁液をＰＢＳ中で感染動物の処置前に２５ｍ
ｇ／ｍｌの最終濃度に希釈した。５マイクロｌの希釈された免疫グロブリン懸濁液を感染した眼の角膜上に１日３回直接適用することにより、マウスを局所処置した。感染当日には、感染前１時間、感染後（ｐ．ｉ．）１時間、および感染後５時間に処置を行った。感染後１日目から感染後４日目まで、動物を午前７時、午後２時および午後７時に１日３回処置した。
【００４１】
マウスにＨＳＶを一方の眼の角膜上に感染させそして感染当日およびその後の４日間にわたり１日３回、上記の通りにしてヒトＩｇＧ、ｍＩｇＡおよびｄＩｇＡ、またはプラシーボ（燐酸塩緩衝食塩水、ＰＢＳ＝１５０ｍＭのＮａＣｌ、２０ｍＭの燐酸塩、ｐＨ７．０−７．４）で処置した。感染後７日目に、各処置を受けている合計１０匹の感染マウスの中で、下記の数が生存した：
【００４２】
【表１】
【００４３】
感染後７日間に、プラシーボだけで処置された全ての動物は眼ＨＳＶ疾病を致死的なＨＳＶ脳炎と合併して発症したが、局所ＩｇＧで１日３回処置された１０匹の動物の中の７匹が生存しておりそして眼ＨＳＶ−疾病の兆候を示さなかった。
実施例６ 散在性ＨＳＶ疾病の予防／処置用のヒトｄＩｇＡ
致死攻撃モデルにおいて、動物を尾静脈内への免疫グロブリン懸濁液の注射により処置した。処置は感染前１時間および感染後２４時間に行った。感染当日に、２ｍｇの免疫グロブリンを適用し、感染翌日にはさらに２ｍｇを与えた。
【００４４】
マウスにＨＳＶを鼻内感染させそして感染当日および感染翌日にＩｇＧ、ｍＩｇＡ、ｄＩｇＡまたはプラシーボ（燐酸塩緩衝食塩水、ＰＢＳ）の静脈注射により処置した。感染後７日目に、合計１０匹の感染マウスの中で、下記の数が生存した：
【００４５】
【表２】
【００４６】
感染後７日間に、全てのプラシーボ−処置動物は致死的な散在性ＨＳＶ−感染症に負けたが、静脈内ｄＩｇＡで処置された１０匹の動物の中の７匹および静脈内ｍＩｇＡで処置された１０匹の動物の中の５匹が生存した。
【００４７】
本発明の前記の実施例は説明のためだけであり、そして本発明を何らかの方法で限定しようとするものではない。当業者は前記事項の種々の改変が本発明の意図する範囲内にあることを認識するであろう。
【図面の簡単な説明】
【００４８】
【図１Ａ−１Ｂ】図１Ａおよび１Ｂは、それぞれ、第一および第二のサイズ排除（ゲル濾過）クロマトグラフィーカラムからの免疫グロブリンの溶離曲線のグラフ表示を示す。
【図２】図２は１５０ｋＤａにおける小さい帯を有する１６０ｋＤａにおける主要な帯として泳動する精製されたＩｇＡ（第二のサイズ排除クロマトグラフィー精製段階後）のＳＤＳ−ＰＡＧＥを示す。
【図３Ａ−３Ｂ】図３Ａおよび３Ｂは本発明のＩｇＡ調合物（第二のサイズ排除クロマトグラフィー精製段階後）の、それぞれ、非還元ＳＤＳ−ＰＡＧＥおよびウェスタンブロットを示す。
【図４Ａ−４Ｂ】図４Ａおよび４Ｂは図３Ａおよび３Ｂに表示された通りの非還元条件下における分析に対応するそれぞれ還元されたＳＤＳ−ＰＡＧＥおよびウェスタンブロットを示す。
【図１Ａ】
【図１Ｂ】
【技術分野】
【０００１】
本発明はヘルペス感染症および付随する疾病症状の処置および／または予防のための免疫グロブリンを含んでなる組成物の投与に関する。本発明は本発明の組成物の静脈および局所投与に関する面を提供する。
【背景技術】
【０００２】
ヘルペスウイルスは数百万年にわたり発生しておりそして天然に大量に散在している。族の構成員はヒト、ヒト以外の霊長類並びにほとんどの他の哺乳動物および脊椎動物において同定されていた。ヘルペスウイルスは、負に荷電された構造、例えば硫酸ヘパリンおよび／またはグリコサミドグリカン類を細胞表面上にヘルペスウイルス進入媒介物質の他に有する感染性細胞である包囲された二重ストランドＤＮＡウイルスである。これらのウイルスの特徴は、それらが最初の感染後にそれらの宿主内に一生潜伏して残存しそして種々の内的および外的刺激で潜伏している感染された細胞のプールから多かれ少なかれしばしば再活性化することである。
【０００３】
単純ヘルペスウイルス（ＨＳＶ）は、免疫適格宿主中では自己限定性疾病を示す一方で、免疫無防備状態にある患者および新生児においては重篤な生命を脅かす感染症を引き起こしうる。ＨＳＶは西洋では散在性急性脳炎の主要原因であり、未処置時には死亡率は７０％を越える。新生児ＨＳＶ感染症は、抗ヘルペス療法（アシクロヴィル（ａｃｙｃｌｏｖｉｒ））にもかかわらず、劣悪な予後を有する。分娩時にヘルペスに接触する新生児の２５％は散在性ヘルペス感染症に進行しそして抗ウイルス療法にもかかわらず４０％の死亡率をこうむる。従って、生命を脅かすＨＳＶ疾病を処置するための新方法が緊急に要望されている。
【０００４】
免疫応答性人間でも、ＨＳＶは角膜感染症を引き起こして、永久的瘢痕、視力損失、および盲目をもたらしうる。上皮角膜炎が、ＨＳＶによる眼感染症の最も普遍的な表象である。急性ヘルペス疾病に伴う炎症を抑制するための抗ウイルス類およびステロイド類の利用にもかかわらず、慢性ＨＳＶは有意な眼の病的症状を引き起こし続ける。従って、ＨＳＶ眼疾病を処置するための新方法が緊急に要望されている。
【発明の開示】
【０００５】
発明の要旨
従って、一面において、本発明はプールされたヒト血漿から調製された免疫グロブリンＡ（ＩｇＡ）を含んでなる有効量の組成物を哺乳動物に静脈投与することによる哺乳動物における単純ヘルペスウイルス（ＨＳＶ）感染症の処置または予防方法に関する。哺乳動物はヒト新生児でありうる。哺乳動物は免疫無防備状態にありおよび／またはヘルペス疾病に罹っていることもありうる。ヘルペス疾病は、脳炎、肺炎、肝炎、眼ヘルペス、水痘、帯状ヘルペス、耳帯状ヘルペス、帯状ヘルペス水痘、角膜炎、指ヘルペス、顔面ヘルペス、陰部ヘルペス、剣状ヘルペス、または口腔ヘルペスでありうる。前記のいずれかの１つより多いものが哺乳動物を苦しめるヘルペス疾病を特徴づける。
【０００６】
ある態様では、ＩｇＡは組成物中に存在するいずれの免疫グロブリンの少なくとも約３５％〜約５５％を含んでなる（存在する合計免疫グロブリンの百分率としてのＩｇＡの最少量は約３５％〜約５５％でありうる）。他の態様では、ＩｇＡは組成物中に存在するいずれの免疫グロブリンの少なくとも約６０％〜約８０％を含んでなる。
【０００７】
別の面では、本発明はプールされたヒト血漿から調製された単量体状ＩｇＡ、二量体状
ＩｇＡ、および免疫グロブリンＧ（ＩｇＧ）を含んでなる有効量の組成物を哺乳動物に静脈投与することによる哺乳動物における単純ヘルペスウイルス（ＨＳＶ）感染症の処置または予防方法であって、単量体状および二量体状ＩｇＡが組成物中に存在する合計免疫グロブリンの少なくとも約３５％〜約５５％を含んでなる方法に関する。ある態様では、単量体状および二量体状ＩｇＡが組成物中に存在する合計免疫グロブリンの少なくとも約６０％〜約８０％を含んでなる。他の態様では、単量体状および二量体状ＩｇＡが組成物中に存在する合計免疫グロブリンの少なくとも約７０％〜約９５％を含んでなる。さらに別の態様では、単量体状および二量体状ＩｇＡが組成物中に存在する合計免疫グロブリンの少なくとも約６０％、少なくとも約８０％、または組成物中に存在する合計免疫グロブリンの少なくとも約９０％を含んでなる。
【０００８】
別の面では、本発明はプールされたヒト血漿から調製されたＩｇＧを含んでなる有効量の組成物を哺乳動物に局所投与することを含んでなる哺乳動物におけるヘルペス疾病の処置または予防方法に関する。ヘルペス疾病は、水痘、帯状ヘルペス、耳帯状ヘルペス、帯状ヘルペス水痘、角膜炎、指ヘルペス、顔面ヘルペス、陰部ヘルペス、剣状ヘルペス、または口腔ヘルペスでありうる。
【０００９】
別の面では、本発明はプールされたヒト血漿から調製されたＩｇＧを含んでなる有効量の組成物を哺乳動物に局所投与することによる哺乳動物における眼ヘルペス疾病の処置または予防方法に関する。
【００１０】
さらに別の面では、本発明はプールされたヒト血漿から調製された有効量のＩｇＧを含んでなる懸濁剤を哺乳動物の感染した眼に直接投与することによる哺乳動物における眼ヘルペス疾病の処置または予防方法に関する。
図面の簡単な記述
図１Ａおよび１Ｂは、それぞれ、第一および第二のサイズ排除（ゲル濾過）クロマトグラフィーカラムからの免疫グロブリンの溶離曲線のグラフ表示を示す。
【００１１】
図２は１５０ｋＤａにおける小さい帯を有する１６０ｋＤａにおける主要な帯として泳動する精製されたＩｇＡ（第二のサイズ排除クロマトグラフィー精製段階後）のＳＤＳ−ＰＡＧＥを示す。
【００１２】
図３Ａおよび３Ｂは本発明のＩｇＡ調合物（第二のサイズ排除クロマトグラフィー精製段階後）の、それぞれ、非還元ＳＤＳ−ＰＡＧＥおよびウェスタンブロットを示す。図３Ａにおいて、特定の帯を囲む「箱」は、右から左に、完全なＩｇＡ、完全なＩｇＧ、ＩｇＭのμｈ−連鎖、および完全なＩｇＡを表し、「ＩｇＡ Ｂａｙｅｒ」は本発明の方法に従い製造されたＩｇＡである。
【００１３】
図４Ａおよび４Ｂは図３Ａおよび３Ｂに表示された通りの非還元条件下における分析に対応するそれぞれ還元されたＳＤＳ−ＰＡＧＥおよびウェスタンブロットを示す。図４Ａにおいて、特定の帯を囲む箱は、右から左に、αｈ−連鎖（６０ｋＤａ）、γｈ−連鎖（５５ｋＤａ）、μｈ−連鎖（７０ｋＤａ）、およびαｈ−連鎖（６０ｋＤａ）を表す。
発明の詳細な記述
本発明は、ヒト血清の単量体状ＩｇＡＡ（ｍＩｇＡ）および／または二量体状ＩｇＡ（ｄＩｇＡ）画分の静脈投与による散在性ＨＳＶ疾病の処置および予防のための新規な方法を提供する。本発明により得られる結果とは対照的に、ＩｇＧ−枯渇血清によりＨＳＶ保護が得られないことはこれまでに示唆されていた（Ｒａｉｚｍａｎ，Ｍ．Ｂ．ａｎｄ Ｃ．Ｓ．Ｆｏｓｔｅｒ，Ｃｕｒｒ．Ｅｙｅ．Ｒｅｓ．７：８２３−８２９（１９８８）参照）。従って、本発明のＩｇＡ組成物はＨＳＶ感染症の処置のためにこれまでに使用されていなかった。
【００１４】
ＩｇＡ画分は、それらが典型的にはヒト血清からのＩｇＧ精製の副生物として廃棄されるため、莫大な商業的価値を有する。さらに、他の免疫グロブリンに優るＩｇＡの使用は、ＩｇＡが補体系統の古典的経路を活性化せず且つ代替補体経路だけをゆっくり活性化させるため、有利である。従って、ＩｇＡは炎症を促進させない。
【００１５】
本発明はまた、プールされたヒト血漿からの精製されたヒトＩｇＧを局所処置により使用することによるＨＳＶ疾病の処置および予防のための新規な方法も提供する。本発明のこの面は、免疫グロブリンの注射が必要ないという追加利点を有する。患者は眼調剤中の局所用ＩｇＧを用いて患者自身で処置できる。プールされたヒト血漿からのＩｇＧは、供血者のＨＳＶ−中和抗体水準に基づく供血者のスクリーニングを必要とせず、この目的に適格である。眼ヘルペス疾病の処置または予防に関しては、本発明の組成物は感染した眼の角膜に直接投与することができる。しかしながら、本発明に従う局所投与は眼疾病に限定されない。本発明のＩｇＧ組成物はＨＳＶ−関連疾病の他の症状発現に対して局所投与することができる。
【００１６】
ここで提供される化合物は単純ヘルペスウイルスにより引き起こされる疾病の処置および予防のために使用することができる。下記の適応症は説明例として挙げられておりそして本発明の範囲を限定しようとするものでない：１）ヘルペスウイルスにより引き起こされる疾病兆候、例えば眼ヘルペス、口唇炎、生殖器炎、角膜炎、脳炎、肺炎、肝炎などのある患者における単純ヘルペスウイルス感染症の処置および／または予防；２）免疫無防備状態にある患者（例えば、エイズ患者、移植受容者、癌患者、遺伝ベースの免疫不全症のある患者）における単純ヘルペスウイルス感染症の処置および／または予防；３）新生児、乳児、幼児および子供における単純ヘルペスウイルス感染症の処置および／または予防；４）再発性ヘルペス疾病の維持または抑制療法のための単純ヘルペスウイルス陽性患者のための処置および／または予防；並びに５）老人における単純ヘルペスウイルス疾病の処置および／または予防。
【００１７】
ここで使用される用語「有効量」は治療結果を生ずるのに充分な量を意味する。一般的に、治療結果は、生理学的工程を誘発もしくは促進させることにより、生理学的工程を遮断もしくは抑制することにより、または一般的に述べると疾病もしくは症状の排除もしくは減少を補助するかもしくはそれに寄与する生物学的作用を行うことにより得られる疾病または症状の客観的または主観的改良である。
【００１８】
断らない限り、用語「精製された」は物質がその元の環境から除去されて相対的に大量の物質が組成物の他の成分と比べて増加したことを意味する。或いはまたはさらに、この用語は少なくとも１種の特定不純物が物質を含んでなる組成物から減少または除去されたことだけを示すために使用することができる。
【００１９】
用語「製薬学的に許容可能な担体」は、本発明の活性化合物との混合用に適するいずれかの相容性無毒物質をさす。
【００２０】
句「プールされた血漿から製造された」は、この句により修飾された免疫グロブリン調剤が供血者から生じたプールされた血漿から回収されたことを意味する。本発明の組成物はそのような供血者をＨＳＶ−中和抗体のそれらの水準を測定するためのスクリーニングにかける必要がない。
【００２１】
本発明は、単純ヘルペスウイルスタイプ−１およびタイプ−２（ＨＳＶ−１およびＨＳＶ−２）、水痘帯状ヘルペスウイルス（ＶＺＶ）、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）、およびエプステイン−バルウイルス（ＥＢＶ）を包含するヘルペスウイルス感染症の処置お
よび／または予防のための医学療法における組成物およびそれらの使用に関する。本発明は、再発性単純ヘルペスタイプ１または２、帯状ヘルペス（水痘、帯状ヘルペス）、耳帯状ヘルペス、帯状ヘルペス水痘、生殖器いぼ、またはヘルペス角膜炎、指ヘルペス、顔面ヘルペス、生殖器ヘルペス、剣状ヘルペス、および口腔ヘルペスの処置および／または予防において使用することができる。そのような疾病および症状は既知でありそして通常技術の医師により容易に診断される。
【００２２】
本発明の静脈投与される組成物は散在性感染症の処置および／または予防のために使用することができ、それによりヘルペス関連疾病、例えばヘルペス脳炎を予防する。そのような組成物は新生児感染症の処置および／または予防のために使用することができ、それにより高い死亡率を一般に生ずる散在性感染症を処置または予防する。新生児および老人を包含する免疫無防備状態にあるヒトはそのような疾病に特に敏感でありそして本発明の組成物の投与から利点を受ける。
【００２３】
ＩｇＡを含んでなる組成物の静脈投与は潜在性ヘルペス感染症、例えば脳炎をもたらす感染症に罹っている患者に特に利点を与えるが、そのような処置はヘルペス感染症の一般的な症状発現のいずれかに罹っている患者にとっても有利でありうることは認識されよう。同様に、本発明の免疫グロブリン組成物の局所投与はヘルペス感染症、例えば、角膜炎の局所的症状発現に罹っている患者に直接的に有利であるが、そのような組成物の投与は散在性ヘルペス感染症の影響に罹っている患者にも利点を与えうる。
【００２４】
本発明の組成物は、本発明の化合物を製薬学的に許容可能な担体、および場合により、製薬学的に許容可能な賦形剤と標準的従来技術を用いて組み合わせるための従来技術を使用することにより製造することができる。局所調剤は、皮膚または他の影響を受けた領域を通る式ＩＩまたはＩＩＩの化合物の吸収または浸透を促進する物質も包含しうる。
【００２５】
製薬学的組成物中の活性成分、例えば本発明の免疫グロブリン調剤の量は患者の条件、ヘルペス感染症の重篤度、使用する特定化合物の効力、特定調剤および所望する濃度により広く変動または調節することができる。一般に、活性成分の量は組成物の約０．０５％〜約２５重量％、約０．１％〜約１０重量％、または組成物の約３％〜約１６％の範囲であろう。
【００２６】
外部組織、例えば口、眼および皮膚の感染症に関しては、調剤は活性成分を例えば組成物の約０．０５〜約２５重量％の、または約０．１〜約１０％ｗ／ｗの量で含有する局所軟膏剤またはクリーム剤として適用することができる。軟膏剤に調合される場合には、活性成分をパラフィン系または水−混和性軟膏ベースのいずれかと共に使用することができる。或いは、活性成分を水中油滴型クリームベースを含むクリーム剤の中に調合することもできる。
【００２７】
眼内への局所投与に適する調剤は点眼剤を包含し、ここで本発明の組成物を適当な担体、とくに水性溶媒中に溶解または懸濁させる。活性成分はそのような調剤中に約０．０５〜約２５％の、有利には約０．５〜約１０％の濃度で存在しうる。
【００２８】
口内への局所投与に適する調剤は、本発明の組成物を香料入りベース、例えばスクロースおよびアカシアまたはタオラガカント中に含んでなるロゼンジ剤；活性成分を不活性ベース、例えば、ゼラチンおよびグリセリン中に含んでなる香錠；並びに活性成分を適当な液体担体中に含んでなる口洗浄剤を包含する。
【００２９】
眼用薬用量形態は、本発明の組成物の治療水準を即座に与えるための点眼剤およびより遅い放出速度または就寝時使用のために設計された眼の軟膏剤を包含する。
【００３０】
本発明の点眼剤薬用量は、場合により、塩化ベンズアルコニウム、メチルパラベン、エデト酸二ナトリウム、チメルソル、およびクロルブタノールを包含するがそれらに限定されない群からの防腐剤；クエン酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、クエン酸、および乳酸ナトリウムを包含するがそれらに限定されない群からの緩衝剤；ポリビニルアルコール、ヒドロキシメチルセルロース、セチルアルコール、カルボキシメチルセルロース、およびヒドロキシ−プロピレンメチルセルロースを包含するがそれらに限定されない群からの賦形剤；硫酸、塩酸、水酸化ナトリウム、燐酸一ナトリウムまたは二ナトリウムを包含するがそれらに限定されない群からのｐＨ調節剤；精製水ＵＳＰ；ポロキサマー４０７または１８８、ポリソルベート８０；ポリオキシエチレンポリオキシプロピレン化合物；並びに鉱油ＵＳＰを包含するがそれらに限定されない１種もしくはそれ以上の適当な製薬学的に許容可能な不活性賦形剤を包含するであろう。前記の不活性賦形剤は、担体、賦形剤、希釈剤、結合剤、防腐剤、緩衝剤、ｐＨ調節剤、乳化剤、および他の調剤助剤としての種々の機能に役立つ。
【００３１】
調剤の長期分配のためまたは睡眠中の使用のための眼の軟膏剤薬用量形態は、場合により、クロルブタノール、ポリエチレン鉱油ゲル、白色ペトロラタムＵＳＰ、鉱油ＵＳＰ、ペトロラタムおよびラノリンアルコール、精製水ＵＳＰ、ポリビニルアルコールゲルおよび同様な生成物を包含するがそれらに限定されない１種もしくはそれ以上の製薬学的に許容可能な不活性賦形剤を包含するであろう。上記の賦形剤は、担体、賦形剤、希釈剤、結合剤、防腐剤、緩衝剤、ｐＨ調節剤、乳化剤、および他の調剤助剤としての種々の機能に役立つ。
【００３２】
本発明の組成物はまた、調剤の即座の治療水準を与えるための頬粘膜への適用使用のために製造された溶液および懸濁液を含んでなる薬用量形態も包含する。
【００３３】
本発明の頬粘膜薬用量形態は場合により、以上で「点眼剤」薬用量形態に関して挙げられた防腐剤、緩衝剤、賦形剤、およびｐＨ調節剤を包含するがそれらに限定されない１種もしくはそれ以上の適当な製薬学的に許容可能な不活性賦形剤を包含するであろう。前記のように、上記の不活性賦形剤は、担体、賦形剤、希釈剤、結合剤、防腐剤、緩衝剤、ｐＨ調節剤、乳化剤、および他の調剤助剤としての種々の機能に役立つ。
【００３４】
本発明の組成物はまた、軟膏剤、ゲル剤、およびクリーム剤を包含する種々の形態で製造されるＨＳＶ感染症の皮膚症状発現の局所処理における使用のための薬用量形態も包含する。これらの調剤は、場合により、１種もしくはそれ以上の下記の適当な製薬学的に許容可能な賦形剤を包含する：ミリスチン酸イソプロピルＮＦ、トロールアミンＮＦ、ＳＤアルコール４０（２０％）、白色ペトロラタムＵＳＰ、ラノリンアルコール類ＮＦ、鉱油ＵＳＰ、ポリビニルアルコールゲル、セトステアリルアルコールＮＦ、乳酸ＵＳＰ、ステアリン酸カルシウム、デキストラン、ステアリン酸ポリオキシル４０、メチルパラベン、プロピレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウム、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）ベース、合成蜜蝋（Ｂワックス）、酢酸カルシウム、精製水ＵＳＰおよび同様な生成物。上記の賦形剤は、担体、賦形剤、希釈剤、結合剤、防腐剤、緩衝剤、ｐＨ調節剤、乳化剤、および他の調剤助剤としての種々の機能に役立つ。
【００３５】
本発明の組成物はまた、膣坐剤、ゲル剤、および錠剤を包含する膣挿入用の薬用量形態で製造されるＨＳＶ感染症、とくにＨＳＶ−２の女性生殖器症状発現処置における局所使用のための薬用量形態も包含する。これらの調剤は、場合により、ミリスチン酸イソプロピルＮＦ、鉱油ＵＳＰ、ステアリルアルコールＮＦ、安息香酸ＵＳＰ、ステアリン酸ペゴキシル７、メチルパラベン、プロピルパラベン、プロピレングリコール、ブチル化されたヒドロキシアニソール、ヤシまたはパーム核油トリグリセリド類、ポリソルベート６０ま
たはポリソルベート８、ペグリコル５、ステアリン酸ＰＥＧ−１００およびモノステアリン酸ソルビタン、乳酸カルシウム、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、多糖カラゲナンコーンスターチ、ラクトース、乳酸カルシウム、二酸化珪素および精製水ＵＳＰをとりわけ包含するがそれらに限定されない１種もしくはそれ以上の適当な製薬学的に許容可能な賦形剤を包含しうる。上記の賦形剤は、担体、賦形剤、希釈剤、結合剤、防腐剤、緩衝剤、ｐＨ調節剤、乳化剤、および他の調剤助剤としての種々の機能に役立つ。
【００３６】
静脈投与に関して、本発明の免疫グロブリン組成物の薬用量および投与方法は、処置される特定症状の重篤度および性質、処置期間、使用される補助療法、処置対象の年齢および身体症状に応じて変動するであろう。しかしながら、静脈投与用の１回薬用量は、典型的には、１キログラムの体重当たり約５０ｍｇ〜約１０ｇ、または１キログラムの体重当たり約１００ｍｇ〜約５ｇの範囲でありうる（断らない限り、ここで使用される「ｍｇ／ｋｇ」または「ｇ／ｋｇ」で表示される単位は１キログラムの体重当たりのミリグラムまたはグラムをさす）。
【実施例】
【００３７】
実施例１ ＨＳＶの成長およびウイルス株の調製
単純ヘルペスウイルス（ＨＳＶ−１ Ｗａｌｋｉ）をアフリカ・グリーン・モンキー腎細胞（ベロ細胞；ＡＴＣＣ ＣＣＬ−８１）上で定型的に増殖させたが、多くの組織−培養系統をＨＳＶの成長および定量化用に使用することができる（Ｈｅｒｐｅｓ Ｓｉｍｐｌｅｘ Ｖｉｒｕｓ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ，１９９８，Ｅｄ．Ｓ．Ｍ．Ｂｒｏｗｎ ＆ Ａ．Ｒ．ＭａｃＬｅａｎ，Ｈｕｍａｎａ Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，Ｎｅｗ ＪｅｒｓｅＹ）。ベロ細胞を、５％の胎牛血清（ＦＣＳ）、２ｍＭのグルタミン、１００ＩＵ／ｍｌのペニシリン、１００μｇ／ｍｌのストレプトマイシンが補充されたＭ１９９培地の中で細胞培養フラスコ（例えば、１７５ｃｍ２／２５−５０ｍｌ）中で３７℃において５％のＣＯ２の存在下で成長させた。細胞を１週間に２回１：４分裂させた（細胞生存率＞９５％）。ウイルス感染用に、培地を回収し、細胞をハンク溶液で洗浄し、０．０５％のトリプシン、０．０２％のＥＤＴＡ（セロメド（Ｓｅｒｏｍｅｄ）、Ｌ２１４３）でトリプシン処理し、細胞培養フラスコ中で１ｍｌ当たり４×１０５個の細胞濃度で接種し、そして２４時間にわたり３７℃において５％のＣＯ２の存在下でインキュベートした。培地を回収しそしてウイルス懸濁液を＜０．０５の感染多重度で１７５ｃｍ２の表面積当たり２ｍｌの量で加えた。フラスコを３７℃において５％のＣＯ２の存在下で時々攪拌しながら１時間放置してウイルスを細胞全体に分布させた。培地を１７５ｃｍ２の組織培養フラスコ当たり５０ｍｌの最終容量となるまで加えた。全ての細胞が感染の兆候を示すまで（約２−３日間）、培養物をインキュベートした。ウイルスを回収するために、フラスコを２回にわたり−８０℃において凍結させそして３７℃において（水浴中で）解凍した。細胞破片を遠心（３００ｇ、１０分間、４℃）により回収しそして上澄み液をアリコート中で−８０℃において貯蔵した。
【００３８】
ウイルス株の力価をプラーク検定で測定した。簡単に述べると、ベロ細胞を２４−ウエル組織培養板のウエル当たり４×１０５個の細胞の濃度で接種した。２４時間のインキュベーション時間（３７℃、５％のＣＯ２）後に、細胞に１０−２〜１０−８の範囲内のウイルス株の希釈物を感染させた。感染容量はウエル当たり１００μｌであった。感染後の３７℃、５％のＣＯ２における１時間のインキュベーション後に、細胞を静かに除去し、１ｍｌの被覆培地（ＭＥＭＥ（イーグル塩を含むＭＥＭＥ−イーグル）中の０．５％のメチルセルロース、０．２２５％の炭酸水素ナトリウム、２ｍＭのグルタミン、１００ＩＵ／ｍｌのペニシリン、１００μｇ／ｍｌのストレプトマイシン、５％のＦＣＳ）で被覆し、そして３日間にわたり３７℃において５％のＣＯ２の存在下で放置した。細胞を４％のホルマリンを用いて少なくとも３０分間にわたり固定し、水で洗浄し、ギームザ溶液（メルク（Ｍｅｒｃｋ）、ダルムスタッド）で３０分間にわたり染色しそして再び洗浄した。
板を乾燥した後に、プラークを計数しそしてウイルス株の力価を計算した。
実施例２ 致死攻撃モデル
Ｂａｌｂ／ｃＡＢｏｍ雌マウス（体重１９ｇ、年齢７週間）を購入し（Ｍ＆Ｂ Ａ／Ｓ、デンマーク）、そして１週間後に接種した。氷冷ＰＢＳ（〜５×１０４ｐｆｕ）中の５０μｌの希釈されたウイルス懸濁液を軽くエーテル麻酔がかけられたマウスの外鼻腔に適用すると、７−１０日間後に９０−１００％の死亡率を生じた。感染させた動物を毎日疾病の兆候（脳炎、麻痺、呼吸症状）に関して点検しそして死にかけた動物は安楽死させた。
実施例３ 眼ヘルペスモデル
Ｂａｌｂ／ｃＡＢｏｍ雌マウス（体重１９ｇ、年齢７週間）を購入し（Ｍ＆Ｂ Ａ／Ｓ、デンマーク）、そして１週間後に接種した。マウスをエーテルにより麻酔をかけそして右角膜を、垂直に３回そして水平に３回、殺菌３０−ゲージ針を用いて剥離した。５μｌのウイルス懸濁液（５×１０６ｐｆｕ ＨＳＶ−１ Ｗａｌｋｉ）を乱切りされた角膜に適用した。マウスを毎日ヘルペス感染症の兆候（眼瞼炎、角膜炎、脳炎）に関して点検した。死にかけた動物は安楽死させた。
実施例４ 免疫グロブリン画分
ヒト免疫グロブリン画分である、ＩｇＧ、単量体状ＩｇＡ（ｍＩｇＡ）、および二量体状ＩｇＡ（ｄＩｇＡ）を下記の通りにして製造した。
【００３９】
実施例で使用されたＩｇＧは、出発物質としてコーン（Ｃｏｈｎ）画分ＩＩ＋ＩＩＩを用いてプールされたヒト血漿から精製された商業等級ＩｇＧ（５％のＧＡＭＩＭＭＵＮＥ
Ｎ、バイエル・コープ（Ｂａｙｅｒ Ｃｏｒｐ．）、ピッツバーグ、ペンシルバニア州）であった。ヒト血漿からの単量体状ＩｇＡおよびｄＩｇＡを２つの連続的なサイズ排除クロマトグラフィー段階によりスーパーデックス（ＳＵＰＥＲＤＥＸ）２００上でバイオロジック（ＢＩＯＬＯＧＩＣ）クロマトグラフィー台（バイオ・ラド（Ｂｉｏ Ｒａｄ）、リッチモンド、カリフォルニア州）を用いて精製した。ＩＧＩＶ−Ｃ方法（引用することにより全てが本発明の内容となる米国特許第６，３０７，０２８号明細書参照）の廃棄流であるＱ−セファロース（Ｑ−ＳＥＰＨＡＲＯＳＥ）クロマトグラフィー段階の高−塩片が出発物質として使用されそして１３ｍｇ／ｍｌのＩｇＡを４５％の純度で含有していた。
【００４０】
簡単に述べると、２０ｍｌの出発物質を２−リットルの２００ＸＫ ５０／１ ００ スーパーデックス２００カラム（５ｃｍ×９３ｃｍ、ファーマシア（Ｐｈａｒｍａｃｉａ）、アップサラ、スウェーデン）に適用しそしてトリス緩衝食塩水緩衝液（シグマ（Ｓｉｇｍａ）、セントルイス、ミズーリ州）の中で１０ｍｌ／分で実験した。画分を比濁法であるＳＤＳ−ＰＡＧＥおよびサイズ排除−ＦＰＬＣにより分析した。単量体状ＩｇＡに関して陽性である画分をプールし、アミコン（ＡＭＩＣＯＮ）濃縮室（ＹＭ １０ 膜、室温）を用いて１０ｍｌの最終容量に濃縮し、そしてスーパーデックス２００カラムに最初の実験と同じ実験条件を用いて再適用した。最終生成物をｐＨ４．２５の０．２Ｍグリシン中で調合しそして０．２μｍ膜を用いて殺菌濾過した。第一クロマトグラフィーの溶離曲線（２８０ｎｍ）は５個の蛋白質ピークを有し、それらは免疫比濁法によりＩｇＭ、ｄＩｇＡ、ｍＩｇＡ、ＩｇＧおよびアルブミンとして同定された（図１Ａ参照）。スーパーデックス２００上のｍＩｇＡおよびｄＩｇＡピークの再クロマトグラフィーは１個の主要蛋白質ピークおよび２個の小さい肩を生じ、それらはｍＩｇ、ｄＩｇＡ、およびＩｇＧをそれぞれ含有していた（図１Ｂ参照）。ｍＩｇＡまたはｄＩｇＡを含有する画分がプールされた。ＩｇＡの同一性はＳＤＳ−ＰＡＧＥおよびウェスタンブロットによりさらに確認された（図２、３Ａ、３Ｂ、４Ａ、および４Ｂ参照）。アリコートを−７０℃において貯蔵した。
実施例５ 眼ＨＳＶ−疾病の予防／処置用のヒトＩｇＧ
眼ヘルペスモデル用に、免疫グロブリン懸濁液をＰＢＳ中で感染動物の処置前に２５ｍ
ｇ／ｍｌの最終濃度に希釈した。５マイクロｌの希釈された免疫グロブリン懸濁液を感染した眼の角膜上に１日３回直接適用することにより、マウスを局所処置した。感染当日には、感染前１時間、感染後（ｐ．ｉ．）１時間、および感染後５時間に処置を行った。感染後１日目から感染後４日目まで、動物を午前７時、午後２時および午後７時に１日３回処置した。
【００４１】
マウスにＨＳＶを一方の眼の角膜上に感染させそして感染当日およびその後の４日間にわたり１日３回、上記の通りにしてヒトＩｇＧ、ｍＩｇＡおよびｄＩｇＡ、またはプラシーボ（燐酸塩緩衝食塩水、ＰＢＳ＝１５０ｍＭのＮａＣｌ、２０ｍＭの燐酸塩、ｐＨ７．０−７．４）で処置した。感染後７日目に、各処置を受けている合計１０匹の感染マウスの中で、下記の数が生存した：
【００４２】
【表１】
【００４３】
感染後７日間に、プラシーボだけで処置された全ての動物は眼ＨＳＶ疾病を致死的なＨＳＶ脳炎と合併して発症したが、局所ＩｇＧで１日３回処置された１０匹の動物の中の７匹が生存しておりそして眼ＨＳＶ−疾病の兆候を示さなかった。
実施例６ 散在性ＨＳＶ疾病の予防／処置用のヒトｄＩｇＡ
致死攻撃モデルにおいて、動物を尾静脈内への免疫グロブリン懸濁液の注射により処置した。処置は感染前１時間および感染後２４時間に行った。感染当日に、２ｍｇの免疫グロブリンを適用し、感染翌日にはさらに２ｍｇを与えた。
【００４４】
マウスにＨＳＶを鼻内感染させそして感染当日および感染翌日にＩｇＧ、ｍＩｇＡ、ｄＩｇＡまたはプラシーボ（燐酸塩緩衝食塩水、ＰＢＳ）の静脈注射により処置した。感染後７日目に、合計１０匹の感染マウスの中で、下記の数が生存した：
【００４５】
【表２】
【００４６】
感染後７日間に、全てのプラシーボ−処置動物は致死的な散在性ＨＳＶ−感染症に負けたが、静脈内ｄＩｇＡで処置された１０匹の動物の中の７匹および静脈内ｍＩｇＡで処置された１０匹の動物の中の５匹が生存した。
【００４７】
本発明の前記の実施例は説明のためだけであり、そして本発明を何らかの方法で限定しようとするものではない。当業者は前記事項の種々の改変が本発明の意図する範囲内にあることを認識するであろう。
【図面の簡単な説明】
【００４８】
【図１Ａ−１Ｂ】図１Ａおよび１Ｂは、それぞれ、第一および第二のサイズ排除（ゲル濾過）クロマトグラフィーカラムからの免疫グロブリンの溶離曲線のグラフ表示を示す。
【図２】図２は１５０ｋＤａにおける小さい帯を有する１６０ｋＤａにおける主要な帯として泳動する精製されたＩｇＡ（第二のサイズ排除クロマトグラフィー精製段階後）のＳＤＳ−ＰＡＧＥを示す。
【図３Ａ−３Ｂ】図３Ａおよび３Ｂは本発明のＩｇＡ調合物（第二のサイズ排除クロマトグラフィー精製段階後）の、それぞれ、非還元ＳＤＳ−ＰＡＧＥおよびウェスタンブロットを示す。
【図４Ａ−４Ｂ】図４Ａおよび４Ｂは図３Ａおよび３Ｂに表示された通りの非還元条件下における分析に対応するそれぞれ還元されたＳＤＳ−ＰＡＧＥおよびウェスタンブロットを示す。
【図１Ａ】
【図１Ｂ】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
哺乳動物における単純ヘルペスウイルス（ＨＳＶ）感染症の処置または予防方法であって、プールされたヒト血漿から調製された免疫グロブリンＡ（ＩｇＡ）を含んでなる有効量の組成物を哺乳動物に静脈投与することを含んでなる方法。
【請求項２】
哺乳動物がヒト新生児である請求項１の方法。
【請求項３】
哺乳動物が免疫無防備状態である請求項１の方法。
【請求項４】
哺乳動物がヘルペス疾病に罹っている請求項１の方法。
【請求項５】
疾病が脳炎、肺炎、肝炎、眼ヘルペス、水痘、帯状ヘルペス、耳帯状ヘルペス、帯状ヘルペス水痘、角膜炎、指ヘルペス、顔面ヘルペス、陰部ヘルペス、剣状ヘルペス、および口腔ヘルペスよりなる群から選択される請求項４の方法。
【請求項６】
疾病が脳炎、肺炎、肝炎、水痘、耳帯状ヘルペス、および帯状ヘルペス水痘よりなる群から選択される請求項４の方法。
【請求項７】
疾病が脳炎である請求項４の方法。
【請求項８】
ＩｇＡが組成物中に存在するいずれの免疫グロブリンの少なくとも約３５％〜約５５％を含んでなる請求項１の方法。
【請求項９】
ＩｇＡが組成物中に存在するいずれの免疫グロブリンの少なくとも約６０％〜約８０％を含んでなる請求項１の方法。
【請求項１０】
哺乳動物における単純ヘルペスウイルス（ＨＳＶ）感染症の処置または予防方法であって、プールされたヒト血漿から調製された単量体状ＩｇＡ、二量体状ＩｇＡ、およびＩｇＧを含んでなる有効量の組成物を哺乳動物に静脈投与することを含んでなり、単量体状および二量体状ＩｇＡが組成物中に存在する合計免疫グロブリンの少なくとも約３５％〜約５５％を含んでなる方法。
【請求項１１】
単量体状および二量体状ＩｇＡが組成物中に存在する合計免疫グロブリンの少なくとも約６０％〜約８０％を含んでなる請求項１０の方法。
【請求項１２】
単量体状および二量体状ＩｇＡが組成物中に存在する合計免疫グロブリンの少なくとも約７０％〜約９５％を含んでなる請求項１０の方法。
【請求項１３】
単量体状および二量体状ＩｇＡが組成物中に存在する合計免疫グロブリンの少なくとも約６０％を含んでなる請求項１０の方法。
【請求項１４】
単量体状および二量体状ＩｇＡが組成物中に存在する合計免疫グロブリンの少なくとも約８０％を含んでなる請求項１０の方法。
【請求項１５】
単量体状および二量体状ＩｇＡが組成物中に存在する合計免疫グロブリンの少なくとも約９０％を含んでなる請求項１０の方法。
【請求項１６】
哺乳動物におけるヘルペス疾病の処置または予防方法であって、プールされたヒト血漿から調製された免疫グロブリンＧ（ＩｇＧ）を含んでなる有効量の組成物を哺乳動物に局
所投与することを含んでなる方法。
【請求項１７】
ヘルペス疾病が水痘、帯状ヘルペス、耳帯状ヘルペス、帯状ヘルペス水痘、角膜炎、指ヘルペス、顔面ヘルペス、陰部ヘルペス、剣状ヘルペス、および口腔ヘルペスよりなる群から選択される請求項１６の方法。
【請求項１８】
哺乳動物における眼ヘルペス疾病の処置または予防方法であって、プールされたヒト血漿から調製された免疫グロブリンＧ（ＩｇＧ）を含んでなる有効量の組成物を哺乳動物に局所投与することを含んでなる方法。
【請求項１９】
ヘルペス疾病が角膜炎である請求項１８の方法。
【請求項２０】
哺乳動物における眼ヘルペス疾病の処置または予防方法であって、プールされたヒト血漿から調製された有効量の免疫グロブリンＧ（ＩｇＧ）を含んでなる懸濁剤を哺乳動物の感染した眼に直接投与することを含んでなる方法。
【請求項１】
哺乳動物における単純ヘルペスウイルス（ＨＳＶ）感染症の処置または予防方法であって、プールされたヒト血漿から調製された免疫グロブリンＡ（ＩｇＡ）を含んでなる有効量の組成物を哺乳動物に静脈投与することを含んでなる方法。
【請求項２】
哺乳動物がヒト新生児である請求項１の方法。
【請求項３】
哺乳動物が免疫無防備状態である請求項１の方法。
【請求項４】
哺乳動物がヘルペス疾病に罹っている請求項１の方法。
【請求項５】
疾病が脳炎、肺炎、肝炎、眼ヘルペス、水痘、帯状ヘルペス、耳帯状ヘルペス、帯状ヘルペス水痘、角膜炎、指ヘルペス、顔面ヘルペス、陰部ヘルペス、剣状ヘルペス、および口腔ヘルペスよりなる群から選択される請求項４の方法。
【請求項６】
疾病が脳炎、肺炎、肝炎、水痘、耳帯状ヘルペス、および帯状ヘルペス水痘よりなる群から選択される請求項４の方法。
【請求項７】
疾病が脳炎である請求項４の方法。
【請求項８】
ＩｇＡが組成物中に存在するいずれの免疫グロブリンの少なくとも約３５％〜約５５％を含んでなる請求項１の方法。
【請求項９】
ＩｇＡが組成物中に存在するいずれの免疫グロブリンの少なくとも約６０％〜約８０％を含んでなる請求項１の方法。
【請求項１０】
哺乳動物における単純ヘルペスウイルス（ＨＳＶ）感染症の処置または予防方法であって、プールされたヒト血漿から調製された単量体状ＩｇＡ、二量体状ＩｇＡ、およびＩｇＧを含んでなる有効量の組成物を哺乳動物に静脈投与することを含んでなり、単量体状および二量体状ＩｇＡが組成物中に存在する合計免疫グロブリンの少なくとも約３５％〜約５５％を含んでなる方法。
【請求項１１】
単量体状および二量体状ＩｇＡが組成物中に存在する合計免疫グロブリンの少なくとも約６０％〜約８０％を含んでなる請求項１０の方法。
【請求項１２】
単量体状および二量体状ＩｇＡが組成物中に存在する合計免疫グロブリンの少なくとも約７０％〜約９５％を含んでなる請求項１０の方法。
【請求項１３】
単量体状および二量体状ＩｇＡが組成物中に存在する合計免疫グロブリンの少なくとも約６０％を含んでなる請求項１０の方法。
【請求項１４】
単量体状および二量体状ＩｇＡが組成物中に存在する合計免疫グロブリンの少なくとも約８０％を含んでなる請求項１０の方法。
【請求項１５】
単量体状および二量体状ＩｇＡが組成物中に存在する合計免疫グロブリンの少なくとも約９０％を含んでなる請求項１０の方法。
【請求項１６】
哺乳動物におけるヘルペス疾病の処置または予防方法であって、プールされたヒト血漿から調製された免疫グロブリンＧ（ＩｇＧ）を含んでなる有効量の組成物を哺乳動物に局
所投与することを含んでなる方法。
【請求項１７】
ヘルペス疾病が水痘、帯状ヘルペス、耳帯状ヘルペス、帯状ヘルペス水痘、角膜炎、指ヘルペス、顔面ヘルペス、陰部ヘルペス、剣状ヘルペス、および口腔ヘルペスよりなる群から選択される請求項１６の方法。
【請求項１８】
哺乳動物における眼ヘルペス疾病の処置または予防方法であって、プールされたヒト血漿から調製された免疫グロブリンＧ（ＩｇＧ）を含んでなる有効量の組成物を哺乳動物に局所投与することを含んでなる方法。
【請求項１９】
ヘルペス疾病が角膜炎である請求項１８の方法。
【請求項２０】
哺乳動物における眼ヘルペス疾病の処置または予防方法であって、プールされたヒト血漿から調製された有効量の免疫グロブリンＧ（ＩｇＧ）を含んでなる懸濁剤を哺乳動物の感染した眼に直接投与することを含んでなる方法。
【図２】
【図３Ａ】
【図３Ｂ】
【図４Ａ】
【図４Ｂ】
【図３Ａ】
【図３Ｂ】
【図４Ａ】
【図４Ｂ】
【公表番号】特表２００７−５０４２６８（Ｐ２００７−５０４２６８Ａ）
【公表日】平成１９年３月１日（２００７．３．１）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００６−５２６１７６（Ｐ２００６−５２６１７６）
【出願日】平成１６年９月２日（２００４．９．２）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０２８５５９
【国際公開番号】ＷＯ２００５／０２５６１７
【国際公開日】平成１７年３月２４日（２００５．３．２４）
【出願人】（５０６０７４４８４）タレクリス・バイオセラピユーテイクス・インコーポレーテツド (10)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成１９年３月１日（２００７．３．１）
【国際特許分類】
【出願日】平成１６年９月２日（２００４．９．２）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０２８５５９
【国際公開番号】ＷＯ２００５／０２５６１７
【国際公開日】平成１７年３月２４日（２００５．３．２４）
【出願人】（５０６０７４４８４）タレクリス・バイオセラピユーテイクス・インコーポレーテツド (10)
【Ｆターム（参考）】
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