ホスホジエステルバックボーンを有する免疫刺激性一本鎖リボ核酸
ホスホジエステルバックボーンを有する免疫刺激性一本鎖オリゴリボヌクレオチド（ｓｓＯＲＮ）は、ＴＬＲ７非依存性かつＭｙＤ８８依存性の免疫活性化を誘発する。これらの免疫刺激性ｓｓＯＲＮは、対象におけるＴｈ１様免疫応答を誘発するのに、対象における抗原特異的免疫応答を誘発するのに、および癌、感染症、アレルギー状態、または喘息を有する対象を治療するのに有用である。
【図１】
【図１】
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
リボ核酸（ＲＮＡ）は、治療用物質としてのその新たに認識された可能性のために、最近、強く関心のある的であった。たとえば、通常約２１〜２３のヌクレオチド長のある種の配列特異的二本鎖ＲＮＡは、選択的な様式で、ＲＮＡ干渉（ＲＮＡｉ）または転写後遺伝子サイレンシングと呼ばれるプロセスで、遺伝子発現を発現停止させるために使用することができることが最近報告された。この種類のＲＮＡ干渉に使用される二本鎖ＲＮＡは、特にいわゆる低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）を含む。Ｈａｎｎｏｎ ＧＪ（２００２）Ｎａｔｕｒｅ ４１８：２４４−５１。対照的に、配列非特異的二本鎖ＲＮＡは、Ｔｏｌｌ様受容体３（ＴＬＲ３）を介して作用して、免疫刺激効果を誘発することができることも最近報告された。Ａｌｅｘｏｐｏｕｌｏｕ Ｌら（２００１）Ｎａｔｕｒｅ ４１３：７３２−８。さらに、通常グアノシン（Ｇ）およびウリジン（Ｕ）を含みかつある種の配列モチーフを特に含むある種の一本鎖ＲＮＡもまた免疫刺激性であることも最近報告された。Ｌｉｐｆｏｒｄら ＵＳ２００３／０２３２０７４Ａ１。免疫刺激性一本鎖ＲＮＡは、Ｔｏｌｌ様受容体７（ＴＬＲ７）およびＴｏｌｌ様受容体８（ＴＬＲ８）を介して作用することが報告された。
【０００２】
ＴＬＲ３、ＴＬＲ７、およびＴＬＲ８とのＲＮＡの相互作用を介して起こる免疫刺激作用の他に、ある種のシトシン−グアニンジヌクレオチド（ＣｐＧ）含有核酸分子、特にＣｐＧ含有デオキシリボ核酸（ＤＮＡ）は、Ｔｏｌｌ様受容体９（ＴＬＲ９）との相互作用を介してそれらの免疫刺激効果を発揮することが報告された。Ｈｅｍｍｉ Ｈら（２０００）Ｎａｔｕｒｅ ４０８：７４０−５。ＴＬＲ７、ＴＬＲ８、およびＴＬＲ９はすべてＭｙＤ８８依存性の様式でシグナルを送る。
【背景技術】
【０００３】
それらの糖リン酸バックボーン中に天然発生のホスホジエステルヌクレオチド間連結を有するデオキシリボ核酸分子およびましてリボ核酸分子はヌクレアーゼ媒介性の分解に感受性である。臨床的な使用のために、免疫刺激性核酸が合成オリゴヌクレオチドとして調製されることがよくあるということから、これらの免疫刺激性合成オリゴヌクレオチドは、それらの糖リン酸バックボーン中に１つまたは複数の安定したヌクレオチド間連結を含むことがよくある。一般に使用される安定したヌクレオチド間連結はホスホロチオエートである。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
驚いたことに、ホスホロチオエートバックボーンではなくホスホジエステルバックボーンを有する一本鎖ＲＮＡが、ＴＬＲ７またはＴＬＲ８以外のＭｙＤ８８依存性Ｔｏｌｌ様受容体を介して少なくとも部分的に免疫活性化を刺激することが本発明によって今や発見された。この免疫応答を担うＭｙＤ８８依存性Ｔｏｌｌ様受容体は、推定上ＴＬＲ９とされる。
【０００５】
ＣｐＧ媒介性免疫活性化は、ＴＬＲ９を介して作用して、先天性免疫の活性化を伴い、Ｔｈ１免疫応答またはＴｈ１様免疫応答への免疫応答の傾斜をもたらす。したがって、ＣｐＧオリゴヌクレオチドは、Ｔｈ１免疫応答の刺激作用が所望される、たとえば癌、感染、アレルギー、および喘息といった疾患の治療での使用のためのアジュバントとしておよび活性剤として有用であることが報告された。
【０００６】
それに応じて、驚いたことに、ホスホジエステルバックボーンを有し、前に記載される免疫刺激性一本鎖ＲＮＡのＣｐＧも配列特異的特徴もどちらも有していない一本鎖ＲＮＡが、ＴＬＲ９媒介性免疫系活性化を必要とする任意の用途において使用することができることが本発明によって今や発見された。上記用途は、限定を伴うことなく、癌、感染、アレルギー、または喘息を有する対象の治療を含む。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
一態様では、本発明は、対象におけるＴｈ１様免疫応答を誘発する方法である。本発明のこの態様による方法は、有効量の５〜１００のヌクレオチド長の免疫刺激性一本鎖オリゴリボヌクレオチド（ｓｓＯＲＮ）を対象に投与するステップを含み、免疫刺激性ｓｓＯＲＮは、ホスホジエステルバックボーンを有し、かつ
（１）グアノシン（Ｇ）がない、または
（２）少なくとも１つのＧを備えるヌクレオチド配列を備え、ただし、ヌクレオチド配列が少なくとも１つのＧを備える場合、ヌクレオチド配列は、
（ａ）ウリジン（Ｕ）がなく、
（ｂ）ＣｐＧモチーフＸ１Ｘ２ＣＧＸ３Ｘ４がなく、式中、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、およびＸ４はヌクレオチドであり、ＣＧはシトシン（Ｃ）−グアニン（Ｇ）ジヌクレオチドであり、ＣＧジヌクレオチドのＣはメチル化されておらず、
ただし、免疫刺激性ｓｓＯＲＮは、二本鎖リボ核酸（ＲＮＡ）分子の一部分として存在しない。
【０００８】
一態様では、本発明は、対象における抗原特異的応答を誘発する方法である。本発明のこの態様による方法は、対象に抗原を投与するステップおよび有効量の５〜１００のヌクレオチド長の免疫刺激性一本鎖オリゴリボヌクレオチド（ｓｓＯＲＮ）を対象に投与するステップを含み、免疫刺激性ｓｓＯＲＮは、ホスホジエステルバックボーンを有し、かつ
（１）グアノシン（Ｇ）がない、または
（２）少なくとも１つのＧを備えるヌクレオチド配列を備え、ただし、ヌクレオチド配列が少なくとも１つのＧを備える場合、ヌクレオチド配列は、
（ａ）ウリジン（Ｕ）がなく、
（ｂ）ＣｐＧモチーフＸ１Ｘ２ＣＧＸ３Ｘ４がなく、式中、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、およびＸ４はヌクレオチドであり、ＣＧはシトシン（Ｃ）−グアニン（Ｇ）ジヌクレオチドであり、ＣＧジヌクレオチドのＣはメチル化されておらず、
ただし、免疫刺激性ｓｓＯＲＮは、二本鎖リボ核酸（ＲＮＡ）分子の一部分として存在しない。
【０００９】
一態様では、本発明は、癌を有する対象を治療する方法である。本発明のこの態様による方法は、有効量の５〜１００のヌクレオチド長の免疫刺激性一本鎖オリゴリボヌクレオチド（ｓｓＯＲＮ）を対象に投与するステップを含み、免疫刺激性ｓｓＯＲＮは、ホスホジエステルバックボーンを有し、かつ
（１）グアノシン（Ｇ）がない、または
（２）少なくとも１つのＧを備えるヌクレオチド配列を備え、ただし、ヌクレオチド配列が少なくとも１つのＧを備える場合、ヌクレオチド配列は、
（ａ）ウリジン（Ｕ）がなく、
（ｂ）ＣｐＧモチーフＸ１Ｘ２ＣＧＸ３Ｘ４がなく、式中、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、およびＸ４はヌクレオチドであり、ＣＧはシトシン（Ｃ）−グアニン（Ｇ）ジヌクレオチドであり、ＣＧジヌクレオチドのＣはメチル化されておらず、
ただし、免疫刺激性ｓｓＯＲＮは、二本鎖リボ核酸（ＲＮＡ）分子の一部分として存在しない。
【００１０】
一態様では、本発明は、感染症を有する対象を治療する方法である。本発明のこの態様による方法は、有効量の５〜１００のヌクレオチド長の免疫刺激性一本鎖オリゴリボヌクレオチド（ｓｓＯＲＮ）を対象に投与するステップを含み、免疫刺激性ｓｓＯＲＮは、ホスホジエステルバックボーンを有し、かつ
（１）グアノシン（Ｇ）がない、または
（２）少なくとも１つのＧを備えるヌクレオチド配列を、備え、ただしヌクレオチド配列が少なくとも１つのＧを備える場合、ヌクレオチド配列は、
（ａ）ウリジン（Ｕ）がなく、
（ｂ）ＣｐＧモチーフＸ１Ｘ２ＣＧＸ３Ｘ４がなく、式中、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、およびＸ４はヌクレオチドであり、ＣＧはシトシン（Ｃ）−グアニン（Ｇ）ジヌクレオチドであり、ＣＧジヌクレオチドのＣはメチル化されておらず、
ただし、免疫刺激性ｓｓＯＲＮは、二本鎖リボ核酸（ＲＮＡ）分子の一部分として存在しない。
【００１１】
一態様では、本発明は、アレルギー状態を有する対象を治療する方法である。本発明のこの態様による方法は、有効量の５〜１００のヌクレオチド長の免疫刺激性一本鎖オリゴリボヌクレオチド（ｓｓＯＲＮ）を対象に投与するステップを含み、免疫刺激性ｓｓＯＲＮは、ホスホジエステルバックボーンを有し、かつ
（１）グアノシン（Ｇ）がない、または
（２）少なくとも１つのＧを備えるヌクレオチド配列を備え、ただし、ヌクレオチド配列が少なくとも１つのＧを備える場合、ヌクレオチド配列は、
（ａ）ウリジン（Ｕ）がなく、
（ｂ）ＣｐＧモチーフＸ１Ｘ２ＣＧＸ３Ｘ４がなく、式中、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、およびＸ４はヌクレオチドであり、ＣＧはシトシン（Ｃ）−グアニン（Ｇ）ジヌクレオチドであり、ＣＧジヌクレオチドのＣはメチル化されておらず、
ただし、免疫刺激性ｓｓＯＲＮは、二本鎖リボ核酸（ＲＮＡ）分子の一部分として存在しない。
【００１２】
一態様では、本発明は、喘息を有する対象を治療する方法である。本発明のこの態様による方法は、有効量の５〜１００のヌクレオチド長の免疫刺激性一本鎖オリゴリボヌクレオチド（ｓｓＯＲＮ）を対象に投与するステップを含み、免疫刺激性ｓｓＯＲＮは、ホスホジエステルバックボーンを有し、かつ
（１）グアノシン（Ｇ）がない、または
（２）少なくとも１つのＧを備えるヌクレオチド配列を備え、ただし、ヌクレオチド配列が少なくとも１つのＧを備える場合、ヌクレオチド配列は、
（ａ）ウリジン（Ｕ）がなく、
（ｂ）ＣｐＧモチーフＸ１Ｘ２ＣＧＸ３Ｘ４がなく、式中、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、およびＸ４はヌクレオチドであり、ＣＧはシトシン（Ｃ）−グアニン（Ｇ）ジヌクレオチドであり、ＣＧジヌクレオチドのＣはメチル化されておらず、
ただし、免疫刺激性ｓｓＯＲＮは、二本鎖リボ核酸（ＲＮＡ）分子の一部分として存在しない。
【００１３】
一実施形態では、免疫刺激性ｓｓＯＲＮは５〜４０のヌクレオチド長である。
【００１４】
一実施形態では、免疫刺激性ｓｓＯＲＮは５〜２０のヌクレオチド長である。
【００１５】
一実施形態では、免疫刺激性ｓｓＯＲＮは５〜１２のヌクレオチド長である。
【００１６】
一実施形態では、免疫刺激性ｓｓＯＲＮは合成ｓｓＯＲＮである。
【００１７】
一実施形態では、免疫刺激性ｓｓＯＲＮは、ポリＵ、ポリＧ、ポリＡ、またはポリＣからなる群から選択されるポリヌクレオチドではない。
【００１８】
一実施形態では、有効量の免疫刺激性ｓｓＯＲＮの対象への投与は、有効量の免疫刺激性ｓｓＯＲＮの対象への全身的投与である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１９】
免疫応答は、先天性免疫および適応免疫に概念的に分類される。先天性免疫は、感染性微生物により発現された分子または外来性巨大分子のある種のクラスにより共通して共有される病原体関連分子パターン（ＰＡＭＰ）の認識を伴うと考えられる。ＰＡＭＰは、ある種の免疫細胞上のパターン認識受容体（ＰＲＲ）により認識されると考えられる。
【００２０】
Ｔｏｌｌ様受容体（ＴＬＲ）は、哺乳動物における先天性免疫に決定的な役割を果たす高度に保存されたポリペプチドのファミリーである。現在、ＴＬＲ１〜ＴＬＲ１０と命名された１０個のファミリーメンバーが同定されている。様々なＴＬＲの細胞質ドメインは、Ｔｏｌｌインターロイキン１（ＩＬ−１）受容体（ＴＩＲ）ドメインにより特徴づけられる。Ｍｅｄｚｈｉｔｏｖ Ｒら（１９９８）Ｍｏｌ Ｃｅｌｌ ２：２５３−８。ＴＬＲによる微生物侵襲の認識は、ショウジョウバエおよび哺乳動物において進化的に保存されているシグナリングカスケードの活性化のきっかけとなる。ＴＩＲドメイン含有アダプタタンパク質ＭｙＤ８８は、多くのＴＬＲと会合し、ＩＬ−１受容体関連キナーゼ（ＩＲＡＫ）および腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）受容体関連因子６（ＴＲＡＦ６）をＴＬＲに動員することが報告された。ＭｙＤ８８依存性シグナリング経路は、免疫活性化の決定的なステップである、ＮＦ−ＫＢ転写因子およびｃ−Ｊｕｎ ＮＨ２末端キナーゼ（Ｊｎｋ）マイトジェン活性化タンパク質キナーゼ（ＭＡＰＫ）の活性化、ならびに炎症性サイトカインの生産をもたらすと考えられる。概説については、Ａｄｅｒｅｍ Ａら（２０００）Ｎａｔｕｒｅ ４０６：７８２−８７を参照されたい。
【００２１】
多くの特異的なＴＬＲリガンドが報告されている一方、同定すべき、いくつかのＴＬＲに対するリガンドが残っている。ＴＬＲ２に対するリガンドは、ペプチドグリカンおよびリポペプチドを含む。Ｙｏｓｈｉｍｕｒａ Ａら（１９９９）Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ １６３；１−５；Ａｌｉｐｒａｎｔｉｓ ＡＯら（１９９９）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２８５：７３６−９。ウイルス由来二本鎖ＲＮＡ（ｄｓＲＮＡ）およびｄｓＲＮＡの合成類似体であるポリＩ：Ｃは、ＴＬＲ３のリガンドであることが報告された。Ａｌｅｘｏｐｏｕｌｏｕ Ｌら（２００１）Ｎａｔｕｒｅ ４１３：７３２−８。リポ多糖（ＬＰＳ）はＴＬＲ４に対するリガンドである。Ｐｏｌｔｏｒａｋ Ａら（１９９８）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２８２：２０８５−８；Ｈｏｓｈｉｎｏ Ｋら（１９９９）Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ １６２：３７４９−５２。細菌フラジェリンはＴＬＲ５に対するリガンドである。Ｈａｙａｓｈｉ Ｆら（２００１）Ｎａｔｕｒｅ ４１０：１０９９−１１０３。ペプチドグリカンは、ＴＬＲ２だけではなくＴＬＲ６に対するリガンドであることが報告された。Ｏｚｉｎｓｋｙ Ａら（２０００）Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ ９７：１３７６６−７１；Ｔａｋｅｕｃｈｉ Ｏら（２００１）Ｉｎｔ Ｉｍｍｕｎｏｌ １３：９３３−４０。グアノシンおよびウリジンを含有する一本鎖ＲＮＡはＴＬＲ７およびＴＬＲ８に対するリガンドであることが報告された。米国特許出願公開第２００３／０２３２０７４Ａ１号。ある種の低分子量合成化合物イミダゾキノロン類のイミキモッド（Ｒ−８３７）およびレシキモッド（Ｒ−８４８）もまたＴＬＲ７およびＴＬＲ８のリガンドであることが報告された。Ｊｕｒｋ Ｍら（２００２）Ｎａｔ Ｉｍｍｕｎｏｌ ３：４９９；Ｈｅｍｍｉ Ｈら（２００２）Ｎａｔ Ｉｍｍｕｎｏｌ ３：１９６−２００。細菌ＤＮＡ（ＣｐＧ ＤＮＡ）はＴＬＲ９リガンドであることが報告された。Ｈｅｍｍｉ Ｈら（２０００）Ｎａｔｕｒｅ ４０８：７４０−５；Ｂａｕｅｒ Ｓら（２００１）Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ ９８，９２３７−４２。ＴＬＲ１およびＴＬＲ１０に対する天然リガンドは知られていない。
【００２２】
ＴＬＲ７、ＴＬＲ８、およびＴＬＲ９はすべて、適切な核酸リガンドに応じて、アダプタタンパク質ＭｙＤ８８が参加してシグナルを送る。ネズミＴＬＲ８は、ヒトＴＬＲ８とは違って、非機能的であると思われる。したがって、マウスでは、ＴＬＲ７およびＴＬＲ９は、機能的であり、適切な核酸リガンドに応じて、ＭｙＤ８８が参加してシグナルを送る。したがって、機能的ＴＬＲ７を欠くマウスは、適切な核酸リガンドに応じてＭｙＤ８８依存性経路を介してシグナルを送ることができることで知られている機能的ＴＬＲとしてＴＬＲ９のみを有する（図１を参照されたい）。
【００２３】
驚いたことに、ホスホロチオエートバックボーンではなくホスホジエステルバックボーンを有するある種の一本鎖オリゴリボヌクレオチドが、機能的なＴＬＲ７またはＴＬＲ８を欠くマウスにおいてＭｙＤ８８依存性の様式で免疫細胞を刺激することができることが発見された。
【００２４】
本発明による有用な免疫刺激性一本鎖オリゴリボヌクレオチド（ｓｓＯＲＮ）は、５〜１００のヌクレオチド長であり、ホスホジエステルバックボーンならびに
（１）グアノシン（Ｇ）がない、または
（２）少なくとも１つのＧを含むヌクレオチド配列を有し、ただし、ヌクレオチド配列が少なくとも１つのＧを備える場合、ヌクレオチド配列は、
（ａ）ウリジン（Ｕ）がなく、
（ｂ）ＣｐＧモチーフＸ１Ｘ２ＣＧＸ３Ｘ４がなく、式中、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、およびＸ４はヌクレオチドであり、ＣＧはシトシン（Ｃ）−グアニン（Ｇ）ジヌクレオチドであり、ＣＧジヌクレオチドのＣはメチル化されておらず、
ただし、免疫刺激性ｓｓＯＲＮは、二本鎖リボ核酸（ＲＮＡ）分子の一部分として存在しない。
【００２５】
一実施形態における本発明による有用な免疫刺激性一本鎖オリゴリボヌクレオチド（ｓｓＯＲＮ）は、ＲＮＡの天然源に由来し、そこから単離することができる。あるいは、より典型的に、一実施形態における本発明による有用な免疫刺激性一本鎖オリゴリボヌクレオチド（ｓｓＯＲＮ）は、当技術分野でよく知られている合成方法により得ることができる。
【００２６】
本発明の免疫刺激性ｓｓＯＲＮは天然または非天然起源とすることができる。天然に存在するＲＮＡは、ある種のリボヌクレオシド単位の線状ポリマーを通常指す、一種の核酸であり、各リボヌクレオシド単位は、プリン塩基またはピリミジン塩基およびリボース糖から構成され、ヌクレオシド間ホスホジエステル結合により連結されている。これに関しては、「線状」は、ＲＮＡの一次構造について記載することが意味される。ＲＮＡは、通常、一本鎖または二本鎖であり、部分的な二本鎖を含むことができる。
【００２７】
本明細書中で使用されるように、「ヌクレオシド」は、交換可能な有機塩基に連結された単一の糖部分（たとえばリボースまたはデオキシリボース）を指し、有機塩基は、置換ピリミジン（たとえばシトシン、チミン、もしくはウラシル）または置換プリン（たとえばアデニンまたはグアニン）のいずれかである。対応するヌクレオチドは、シチジン、チミジン、ウリジン、アデノシン、およびグアノシンであり、慣習的に、Ｃ、Ｔ、Ｕ、Ａ、およびＧとしてそれぞれ示される。本明細書中に記載されるように、ヌクレオシドは、天然発生のヌクレオシド、修飾ヌクレオシド、または合成（人工）ヌクレオシドであってもよい。
【００２８】
用語「核酸」および「オリゴヌクレオチド」は、複数のヌクレオチドを意味するよう区別なく使用される。（つまり、上記に記載される、リン酸基にかつ交換可能な有機塩基に連結された糖（たとえばリボースまたはデオキシリボース）を備える分子。本明細書中に使用されるように、これらの用語は、オリゴリボヌクレオチド（ＯＲＮ）およびオリゴデオキシリボヌクレオチド（ＯＤＮ）を指す。これらの用語はまた、ポリヌクレオシド（つまりリン酸を引いたポリヌクレオチド）および任意の他の有機塩基含有ポリマーも含むものとする。核酸分子は、既存の核酸源（たとえばゲノムまたはｃＤＮＡ）から得ることができるが、好ましくは合成である（たとえば核酸合成により生産される）。
【００２９】
核酸およびオリゴヌクレオチドという用語はまた、塩基および／または糖において等で置換または修飾を有する核酸またはオリゴヌクレオチドも包含する。たとえば、それらは、３’位置の水酸基以外かつ５’位置のリン酸基以外で、低分子量有機基に共有結合的に付加されたバックボーン糖を有する核酸を含む。したがって、修飾核酸は、２’−Ｏ−アルキル化リボース基を含んでいてもよい。さらに、修飾核酸は、リボースの代わりにアラビノース等の糖を含んでいてもよい。したがって、核酸は、バックボーン組成物中で不均一であり、それによって、ペプチド核酸（核酸の塩基を有するアミノ酸バックボーンを有する）等の、共に連結されたポリマー単位の任意の可能性として考えられる組合せを含有していてもよい。いくつかの実施形態では、核酸は、バックボーン組成物中において均一である。核酸はまた、Ｃ−５プロピン修飾塩基等の置換プリンおよび置換ピリミジンも含む。Ｗａｇｎｅｒ ＲＷら（１９９６）Ｎａｔ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ １４：８４０−４。プリンおよびピリミジンは、アデニン、シトシン、グアニン、チミジン、５−メチルシトシン、２−アミノプリン、２−アミノ−６−クロロプリン、２，６−ジアミノプリン、ヒポキサンチン、および他の天然発生および非天然発生の核酸塩基といった置換および非置換の芳香族部分を含むが、これらに限定されない。他の上記の修飾は当業者によく知られている。
【００３０】
天然ヌクレオシド塩基は修飾ヌクレオシド塩基と交換することができ、修飾ヌクレオシド塩基は、ヒポキサンチン、ジヒドロウラシル、シュードウラシル、２−チオウラシル、４−チオウラシル、５−アミノウラシル、５−（Ｃ１−Ｃ６）−アルキルウラシル、５−（Ｃ２−Ｃ６）−アルケニルウラシル、５−（Ｃ２−Ｃ６）−アルキニルウラシル、５−（ヒドロキシメチル）ウラシル、５−クロロウラシル、５−フルオロウラシル、５−ブロモウラシル、５−ヒドロキシシトシン、５−（Ｃ１−Ｃ６）−アルキルシトシン、５−（Ｃ２−Ｃ６）−アルキレンシトシン、５−（Ｃ２−Ｃ６）−アルケニルシトシン、５−クロロシトシン、５−フルオロシトシン、５−ブロモシトシン、Ｎ２−ジメチルグアニン、２，４−ジアミノ−プリン、８−アザプリン（特に８−アザグアニンを含む）、７−デアザ−７−置換および／もしくは７−デアザ−８−置換プリンを含む置換７−デアザプリン（特に７−デアザグアニンを含む）、または天然ヌクレオシド塩基の他の修飾体からたとえば選択される。このリストは、例示的なものであることが意味され、限定的なものと解釈されるものではない。
【００３１】
特に、免疫刺激性ｓｓＯＲＮ中に存在する少なくとも１つのグアノシンがある場合、免疫刺激性ｓｓＯＲＮの少なくとも１つのグアニン塩基は、７−デアザグアニン、８−アザグアニン、７−デアザ−７−置換グアニン（７−デアザ−７−（Ｃ２−Ｃ６）アルキニルグアニン等）、７−デアザ−８−置換グアニン、ヒポキサンチン、２，６−ジアミノプリン、２−アミノプリン、プリン、８−ヒドロキシグアニン等の８−置換グアニン、および６−チオグアニン等の置換または修飾グアニンとすることができる。このリストは、例示的なものであることが意味され、限定的なものと解釈されるものではない。
【００３２】
さらに特に、免疫刺激性ｓｓＯＲＮ中に存在する少なくとも１つのウリジンがある場合、免疫刺激性ｓｓＯＲＮの少なくとも１つのウラシル塩基は、シュードウラシルおよび５−メチルウラシル等の置換または修飾ウラシルとすることができる。
【００３３】
本発明で使用するために、本発明の核酸は、当技術分野でよく知られている任意の多くの手順を使用してｄｅ ｎｏｖｏ合成することができる。たとえば、β−シアノエチルホスホラミダイト法（Ｂｅａｕｃａｇｅ ＳＬら（１９８１）Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔ ２２：１８５９）、ヌクレオシドＨ−ホスホネート法（Ｇａｒｅｇｇら（１９８６）Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔ ２７：４０５１−４；Ｆｒｏｅｈｌｅｒら（１９８６）Ｎｕｃｌ Ａｃｉｄ Ｒｅｓ １４：５３９９−４０７；Ｇａｒｅｇｇら（１９８６）Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔ ２７：４０５５−８；Ｇａｆｆｎｅｙら（１９８８）Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔ ２９：２６１９−２２）。これらの化学反応は、市販の様々な自動核酸合成機により実行することができる。これらの核酸は合成核酸と称される。核酸は、制限酵素、エキソヌクレアーゼ、またはエンドヌクレアーゼを利用する技術等の知られている技術を使用して、既存の核酸配列（たとえばリボソームＲＮＡ、メッセンジャーＲＮＡ、または転移ＲＮＡ）から調製することができる。この様式で調製された核酸は単離核酸と称される。単離核酸は、核酸が天然で常態で関連している成分から分離された核酸を通常指す。例として、単離核酸は、細胞から、核から、ミトコンドリアから、またはクロマチンから分離された核酸であってもよい。用語「核酸」は、合成核酸および単離核酸の両方を包含する。
【００３４】
本発明による有用なｓｓＯＲＮは免疫刺激性である。本明細書中に使用されるように、免疫刺激性ｓｓＯＲＮは、免疫応答を誘発することができる、たとえば、活性化して増殖させるために、分化させるために、移動させるために、細胞溶解活性を増加させるために、免疫細胞活性化と関連する分泌産物の発現を増加させるために、免疫細胞活性化と関連する細胞表面マーカーもしくは共刺激分子の発現を増加させるために、またはそれらの任意の組合せのために免疫系の細胞を刺激することができるｓｓＯＲＮを指す。免疫細胞活性化と関連する分泌産物は当技術分野でよく知られており、限定を伴うことなく、サイトカイン、ケモカイン、および抗体を含むことができる。
【００３５】
本発明の免疫刺激性ｓｓＯＲＮは、ｉｎ ｖｉｔｒｏおよびｉｎ ｖｉｖｏの両方で、Ｔｈ１様免疫応答を誘発するために使用することができる。本明細書中に使用されるように、Ｔｈ１様免疫応答は、ある種のサイトカイン、ケモカイン、および免疫グロブリンのサブクラスを含むＴｈ１様分泌産物を発現するための免疫細胞の活性化ならびにある種の免疫細胞の活性化を指す。Ｔｈ１様分泌産物は、限定を伴うことなく、サイトカインＩＦＮ−γ、ＩＬ−２、ＩＬ−１２、ＩＬ−１８、ＴＮＦ−α、およびケモカインＩＰ−１０（ＣＸＣＬ１０）を含む。マウスでは、Ｔｈ１免疫活性化はＩｇＧ２ａの分泌を刺激する。ヒトでは、Ｔｈ１免疫活性化はＩｇＧ１の分泌を刺激する。したがって、マウスにおけるＴｈ１様免疫応答はＩｇＧ２ａの分泌の増加を含み得る、そしてヒトにおけるＴｈ１様免疫応答はＩｇＧ１の分泌の増加を含み得る。Ｔｈ１およびＴｈ１様免疫活性化はまた、ＮＫ細胞および樹状細胞、つまり細胞性免疫に関与する細胞の活性化も含んでいてもよい。Ｔｈ１およびＴｈ１様免疫活性化はＴｈ２免疫活性化を逆調節すると考えられる。
【００３６】
本発明の免疫刺激性ｓｓＯＲＮは、ｉｎ ｖｉｔｒｏおよびｉｎ ｖｉｖｏの両方で、抗原特異的免疫応答を誘発するために使用することができる。本明細書中に使用されるように、抗原特異的免疫応答は、免疫系の細胞および抗原の間での接触から起こる適応免疫応答である。
【００３７】
用語「抗原」は、免疫応答を引き起こすことができる分子を指す。抗原という用語は、外来性であるとして宿主系により認識される任意の種類の分子を広く含む。抗原は、微生物抗原、癌抗原、およびアレルゲンを含むが、これらに限定されない。抗原は、細胞、細胞抽出物、タンパク質、ポリペプチド、ペプチド、多糖類、多糖抱合体、多糖類およびその他の分子のペプチドミミックおよび非ペプチドミミック、低分子、脂質、糖脂質、ならびに炭水化物を含むが、これらに限定されない。タンパク質およびポリペプチドは炭水化物または脂肪よりも通常抗原性であるので、多くの抗原は事実上タンパク質またはポリペプチドである。
【００３８】
抗原は、核酸ベクターによりコードされる抗原とすることができ、または抗原はそれ自体で抗原となり得る。前者の場合では、核酸ベクターが対象に投与され、ｉｎ ｖｉｖｏで抗原が発現する。後者の場合では、抗原は対象に直接投与されてもよい。本明細書中で使用される核酸ベクター中にコードされていない抗原は、核酸ではない任意の種類の抗原を指す。たとえば、本発明のいくつかの態様では、核酸ベクター中にコードされていない抗原はペプチドまたはポリペプチドである。ペプチド抗原またはポリペプチド抗原の本来のアミノ酸配列のわずかな修飾により、無修飾対応物であるポリペプチドと比較して実質的に等価な抗原性活性を有するポリペプチドをもたらしてもよい。上記修飾は、部位特異的変異誘発によるような意図的なものであってもよくまたは自然発生的なものであってもよい。これらの修飾により生産されたポリペプチドはすべて、抗原性がなお存在する限り、本明細書中に含まれる。たとえば、ペプチドまたはポリペプチドはウイルス性由来であってもよい。本発明において有用な抗原は、完全長タンパク質またはポリペプチドの小ペプチド断片から完全長形態までの範囲の任意の長さであってもよい。たとえば、抗原は、抗原が特異的免疫応答を刺激するという条件で、アミノ酸残基の長さが５未満、８未満、１０未満、１５未満、２０未満、３０未満、５０未満、７０未満、１００未満、またはそれ以上であってもよい。
【００３９】
ある種の実施形態では、抗原は癌抗原である。本明細書中に使用される「癌抗原」は、腫瘍細胞表面または癌細胞表面と関連するペプチドまたはタンパク質等の化合物であり、癌抗原は、ＭＨＣ分子を背景に抗原提示細胞の表面上に発現した場合、免疫応答を引き起こすことができる。癌抗原は、たとえばＣｏｈｅｎ ＰＡら（１９９４）Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ５４：１０５５−８に記載されるように癌細胞の粗抽出物を調製することにより、抗原を部分的に精製することにより、組換え技術により、または知られている抗原のｄｅ ｎｏｖｏ合成により癌細胞から調製することができる。癌抗原は、組換えで発現した抗原、腫瘍もしくは癌の免疫原性の一部、または腫瘍もしくは癌の全体を含むが、これらに限定されない。上記抗原は、組換えでまたは当技術分野で知られている任意の他の手段により単離または調製することができる。
【００４０】
用語「癌抗原」および「腫瘍抗原」は、区別なく使用され、癌細胞により識別的に発現され、それによって癌細胞を標的にするために活用することができる抗原を指す。癌抗原は、明らかに腫瘍特異的な免疫反応を潜在的に刺激することができる抗原である。これらの抗原のいくつかは、必ずしも発現されないが、正常細胞によってコードされている。これらの抗原は、正常細胞では常態でサイレントである（つまり発現されない）抗原、分化のある種の段階でのみ発現される抗原、および胚性抗原および胎児性抗原等の一時的に発現する抗原として特徴づけることができる。他の癌抗原は、内部欠失または染色体転座に起因する融合タンパク質であり、癌遺伝子（たとえば活性化されたｒａｓ癌遺伝子）、抑制遺伝子（たとえば突然変異ｐ５３）等の突然変異細胞性遺伝子によりコードされる。さらに他の癌抗原は、ＲＮＡ腫瘍ウイルスおよびＤＮＡ腫瘍ウイルス上に保有されるウイルス遺伝子等のウイルス遺伝子によりコードされ得る。腫瘍抗原の例は、ＭＡＧＥ、ＭＡＲＴ−１／メラン−Ａ、ｇｐ１００、ジペプチジルペプチダーゼＩＶ（ＤＰＰＩＶ）、アデノシンデアミナーゼ結合タンパク質（ＡＤＡｂｐ）、サイクロフィリンｂ、結腸直腸関連抗原（ＣＲＣ）−−Ｃ０１７−１Ａ／ＧＡ７３３、癌胎児性抗原（ＣＥＡ）およびその免疫原性エピトープＣＡＰ−１およびＣＡＰ−２、ｅｔｖ６、ａｍｌ１、前立腺特異抗原（ＰＳＡ）およびその免疫原性エピトープＰＳＡ−１、ＰＳＡ−２、およびＰＳＡ−３、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）、Ｔ細胞受容体／ＣＤ３ゼータ鎖、腫瘍抗原のＭＡＧＥファミリー（たとえばＭＡＧＥ−Ａ１、ＭＡＧＥ−Ａ２、ＭＡＧＥ−Ａ３、ＭＡＧＥ−Ａ４、ＭＡＧＥ−Ａ５、ＭＡＧＥ−Ａ６、ＭＡＧＥ−Ａ７、ＭＡＧＥ−Ａ８、ＭＡＧＥ−Ａ９、ＭＡＧＥ−Ａ１０、ＭＡＧＥ−Ａ１１、ＭＡＧＥ−Ａ１２、ＭＡＧＥ−Ｘｐ２（ＭＡＧＥ−Ｂ２）、ＭＡＧＥ−Ｘｐ３（ＭＡＧＥ−Ｂ３）、ＭＡＧＥ−Ｘｐ４（ＭＡＧＥ−Ｂ４）、ＭＡＧＥ−Ｃ１、ＭＡＧＥ−Ｃ２、ＭＡＧＥ−Ｃ３、ＭＡＧＥ−Ｃ４、ＭＡＧＥ−Ｃ５）、腫瘍抗原のＧＡＧＥファミリー（たとえばＧＡＧＥ−１、ＧＡＧＥ−２、ＧＡＧＥ−３、ＧＡＧＥ−４、ＧＡＧＥ−５、ＧＡＧＥ−６、ＧＡＧＥ−７、ＧＡＧＥ−８、ＧＡＧＥ−９）、ＢＡＧＥ、ＲＡＧＥ、ＬＡＧＥ−１、ＮＡＧ、ＧｎＴ−Ｖ、ＭＵＭ−１、ＣＤＫ４、チロシナーゼ、ｐ５３、ＭＵＣファミリー、ＨＥＲ２／ｎｅｕ、ｐ２１ｒａｓ、ＲＣＡＳ１、α−フェトプロテイン、Ｅ−カドヘリン、α−カテニン、β−カテニン、およびγ−カテニン、ｐ１２０ｃｔｎ、ｇｐ１００Ｐｍｅ１１１７、ＰＲＡＭＥ、ＮＹ−ＥＳＯ−１、ｃｄｃ２７、大腸腺腫様ポリポーシスタンパク質（ＡＰＣ）、ホドリン、コネキシン３７、Ｉｇ−イディオタイプ、ｐ１５、ｇｐ７５、ＧＭ２ガングリオシドおよびＧＤ２ガングリオシド、ヒト乳頭腫ウイルスタンパク質等のウイルス産物、腫瘍抗原のＳｍａｄファミリー、ｌｍｐ−１、Ｐ１Ａ、ＥＢＶコード核抗原（ＥＢＮＡ）−１、脳グリコーゲンホスホリラーゼ、ＳＳＸ−１、ＳＳＸ−２（ＨＯＭ−ＭＥＬ−４０）、ＳＳＸ−４、ＳＳＸ−５、ＳＣＰ−１、およびＣＴ−７、ならびにｃ−ｅｒｂＢ−２を含む。
【００４１】
癌または腫瘍および上記腫瘍と関連する腫瘍抗原は、（排他的ではないが）急性リンパ芽球性白血病（ｅｔｖ６、ａｍｌ１、サイクロフィリンｂ）、Ｂ細胞リンパ腫（Ｉｇ−イディオタイプ）、神経膠腫（Ｅ−カドヘリン、α−カテニン、β−カテニン、γ−カテニン、ｐ１２０ｃｔｎ）、膀胱癌（ｐ２１ｒａｓ）、胆管癌（ｐ２１ｒａｓ）、乳癌（ＭＵＣファミリー、ＨＥＲ２／ｎｅｕ、ｃ−ｅｒｂＢ−２）、頚癌（ｐ５３、ｐ２１ｒａｓ）、結腸癌（ｐ２１ｒａｓ、ＨＥＲ２／ｎｅｕ、ｃ−ｅｒｂＢ−２、ＭＵＣファミリー）、結腸直腸癌（結腸直腸関連抗原（ＣＲＣ）−−Ｃ０１７−１Ａ／ＧＡ７３３、ＡＰＣ）、絨毛癌（ＣＥＡ）、上皮細胞癌（サイクロフィリンｂ）、胃癌（ＨＥＲ２／ｎｅｕ、ｃ−ｅｒｂＢ−２、ｇａ７３３糖タンパク質）、肝細胞癌（α−フェトプロテイン）、ホジキンリンパ腫（ｌｍｐ−１、ＥＢＮＡ−１）、肺癌（ＣＥＡ、ＭＡＧＥ−３、ＮＹ−ＥＳＯ−１）、リンパ球様細胞由来白血病（サイクロフィリンｂ）、黒色腫（ｐ１５タンパク質、ｇｐ７５、腫瘍胎児抗原、ＧＭ２ガングリオシド、およびＧＤ２ガングリオシド）、骨髄腫（ＭＵＣファミリー、ｐ２１ｒａｓ）、非小細胞肺癌（ＨＥＲ２／ｎｅｕ、ｃ−ｅｒｂＢ−２）、上咽頭癌（ｌｍｐ−１、ＥＢＮＡ−１）、卵巣癌（ＭＵＣファミリー、ＨＥＲ２／ｎｅｕ、ｃ−ｅｒｂＢ−２）、前立腺癌（前立腺特異抗原（ＰＳＡ）ならびにその免疫原性エピトープＰＳＡ−１、ＰＳＡ−２、およびＰＳＡ−３、ＰＳＭＡ、ＨＥＲ２／ｎｅｕ、ｃ−ｅｒｂＢ−２）、膵癌（ｐ２１ｒａｓ、ＭＵＣファミリー、ＨＥＲ２／ｎｅｕ、ｃ−ｅｒｂＢ−２、ｇａ７３３糖タンパク質）、腎癌（ＨＥＲ２／ｎｅｕ、ｃ−ｅｒｂＢ−２）、頚および食道の扁平上皮癌（ヒト乳頭腫ウイルスタンパク質等のウイルス産物）、精巣癌（ＮＹ−ＥＳＯ−１）、Ｔ細胞白血病（ＨＴＬＶ−１エピトープ）、ならびに黒色腫（メラン−Ａ／ＭＡＲＴ−１、ｃｄｃ２７、ＭＡＧＥ−３、ｐ２１ｒａｓ、ｇｐ１００Ｐｍｅ１１１７）を含む。
【００４２】
本発明の免疫刺激性ｓｓＯＲＮは、通常少なくとも５かつ１００以下のヌクレオチド長である。様々なある種の実施形態では、本発明の免疫刺激性ｓｓＯＲＮは、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、または４０のヌクレオチド長を具体的に含む４０以下のヌクレオチド長である。
【００４３】
ある種の実施形態では、本発明の免疫刺激性ｓｓＯＲＮは、少なくとも４つの連続したＧヌクレオチドを含むポリＧ配列を含むことができ、ただし、ｓｓＯＲＮは、ポリＧから完全に構成されるわけではない。一実施形態では、ポリＧ配列は、存在する場合、ｓｓＯＲＮの３’末端を占める。
【００４４】
一実施形態では、本発明の免疫刺激性ｓｓＯＲＮはポリＵから完全に構成されるわけではない。一実施形態では、本発明の免疫刺激性ｓｓＯＲＮはポリＡから完全に構成されるわけではない。一実施形態では、本発明の免疫刺激性ｓｓＯＲＮはポリＣから完全に構成されるわけではない。
【００４５】
本発明のｓｓＯＲＮは、癌を有する対象、感染症を有する対象、自己免疫疾患を有する対象、アレルギーを有する対象、および喘息を有する対象の治療に特に使用されてもよいが、そのように限定されない。
【００４６】
本明細書中に使用される「癌」は、体の器官および系が正常に機能するのを妨害する、細胞の制御されていない成長を指す。それらの本来の位置から移動して、重要器官に種を播く癌は、冒された器官の機能的悪化を介して対象の死をついにはもたらし得る。白血病等の造血癌は、対象における正常造血コンパートメントにまさることができ、それによって、最終的に死を引き起こす造血不全（貧血、血小板減少、および好中球減少の形態で）をもたらす。
【００４７】
本明細書中に使用されるように、癌を有する対象は、検出可能な癌性細胞を有する対象を指す。
【００４８】
転移は、原発腫瘍から体の他の部分までの、癌細胞の播種に起因する、原発腫瘍の位置とは別の癌細胞の領域である。原発腫瘤の診断時に、対象は、転移の存在について監視されてもよい。転移は、特定の症状の監視の他に、磁気共鳴画像（ＭＲＩ）スキャン、コンピュータ連動断層撮影（ＣＴ）スキャン、血液および血小板数、肝機能研究、胸部Ｘ線、ならびに骨スキャンを単独でまたは組み合わせて使用することにより検出されることが最も多い。
【００４９】
癌は、基底細胞癌、胆道癌、膀胱癌、骨癌、脳およびＣＮＳ癌、乳癌、頚部癌、絨毛癌、大腸および直腸癌、結合組織癌、消化器系の癌、子宮内膜癌、食道癌、眼癌、頭頚部の癌、胃癌、上皮内新生物、腎臓癌、喉頭癌、白血病、肝臓癌、肺癌（たとえば小細胞および非小細胞）、ホジキンおよび非ホジキンリンパ腫を含むリンパ腫、黒色腫、骨髄腫、神経芽細胞腫、口腔癌（たとえば唇、舌、口、および咽頭）、卵巣癌、膵癌、前立腺癌、網膜芽細胞腫、横紋筋肉腫、直腸癌、腎癌、呼吸器系の癌、肉腫、皮膚癌、胃癌、精巣癌、甲状腺癌、子宮癌、泌尿器系の癌、ならびに他の癌および肉腫を含むが、これらに限定されない。
【００５０】
本明細書中に使用される「感染症」は、感染性微生物による外面的、局所的、または全身的な、宿主の侵襲から起こる障害を指す。感染性微生物は、細菌、ウイルス、寄生生物、および真菌を含む。
【００５１】
本明細書中に使用されるように、感染症を有する対象は、感染性生物に暴露されたことがあり、体内に急性または慢性の検出可能なレベルの生物を有する対象を指す。感染性生物への暴露は、対象の外面、たとえば皮膚または粘膜の膜で通常発生するおよび／または感染性生物による対象の外面の侵入を指す。
【００５２】
ヒトで発見されたウイルスの例は、レトロウイルス科（たとえばＨＩＶ−１（ＨＤＴＶ−ＩＩＩ、ＬＡＶＥ、もしくはＨＴＬＶ−ＩＩＩ／ＬＡＶ、またはＨＩＶ−ＩＩＩとも称される等のヒト免疫不全ウイルスおよびＨＩＶ−ＬＰ等の他の分離株）、ピコルナウイルス科（たとえばポリオウイルス、Ａ型肝炎ウイルス、エンテロウイルス、ヒトコクサッキーウイルス、ライノウイルス、エコーウイルス）、カルシウイルス科（たとえば胃腸炎の原因となる株）、ドガウイルス科（たとえばウマ脳炎ウイルス、風疹ウイルス）、フラビウイルス科（たとえばデング熱ウイルス、脳炎ウイルス、黄熱ウイルス）、コロナウイルス科（たとえばコロナウイルス）、ラブドウイルス科（たとえば水疱性口内炎ウイルス、狂犬病ウイルス）、フィロウイルス科（たとえばエボラウイルス）、パラミクソウイルス科（たとえばパラインフルエンザウイルス、ムンプスウイルス、麻疹ウイルス、呼吸器合胞体ウイルス）、オルソミクソウイルス科（たとえばインフルエンザウイルス）、ブンヤウイルス科（たとえばハンタンウイルス、ブンヤウイルス、フレボウイルス、およびナイロウイルス）、アレナウイルス科（出血熱ウイルス）、レオウイルス科（たとえばレオウイルス、オルビウイルス、およびロタウイルス）、ビルナウイルス科、ヘパドナウイルス科（Ｂ型肝炎ウイルス）、パルボウイルス科（パルボウイルス）、パポバウイルス科（乳頭腫ウイルス、ポリオーマウイルス）、アデノウイルス科（ほとんどのアデノウイルス）、ヘルペスウイルス科（単純ヘルペスウイルス（ＨＳＶ）１および２、水痘帯状疱疹ウイルス、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）、ヘルペスウイルス）、ポックスウイルス科（痘瘡ウイルス、ワクシニアウイルス、ポックスウイルス）、ならびにイリドウイルス科（たとえばアフリカ豚コレラウイルス）、ならびに未分類ウイルス（たとえばデルタ型肝炎の外的病原因子（Ｂ型肝炎ウイルスの不完全サテライトであると思われる）、非Ａ型、非Ｂ型肝炎の外的病原因子（クラス１＝内部的に伝染、クラス２＝非経口的に伝染（つまりＣ型肝炎）、ノーウォークおよび関連ウイルス、ならびにアストロウイルス）を含むが、これらに限定されない。
【００５３】
グラム陰性細菌およびグラム陽性細菌の両者は脊椎動物において抗原として作用する。上記グラム陽性細菌は、パスツレラ種、ブドウ球菌種、および連鎖球菌種を含むが、これらに限定されない。グラム陰性細菌は、大腸菌、シュードモナス種、およびサルモネラ種を含むが、これらに限定されない。感染性細菌の特定の例は、ヘリコバクターピロリ、ボレリアブルグドルフェリ、レジュネラニューモフィラ菌、マイコバクテリア種（たとえば結核菌、トリ結核菌、バテー杆菌、カンサシ菌、Ｍ．ゴルドナエ）、黄色ブドウ球菌、淋菌、髄膜炎菌、リステリア菌、化膿連鎖球菌（Ａ群連鎖球菌）、ストレプトコッカスアガラクティエ（Ｂ群連鎖球菌）、連鎖球菌（ビリダンス群）、糞便連鎖球菌、ストレプトコッカスボビス、連鎖球菌（嫌気性種）、肺炎連鎖球菌、病原性カンピロバクター種、エンテロコッカス種、インフルエンザ菌、炭疽菌、ジフテリア菌、コリネバクテリウム種、豚丹毒菌、ウェルチ菌、破傷風菌、エンテロバクターエロゲネス、肺炎桿菌、パスツレラマルトシダ、バクテロイデス種、フソバクテリウムヌクレアタム、ストレプトバシラスモニリフォルミス、梅毒トレポネーマ、フランベジアトレポネーマ、レプトスピラ、リケッチア、およびイスラエル放線菌を含むが、これらに限定されない。
【００５４】
真菌の例は、クリプトコッカスネオフォルマンス、ヒストプラスマカプスラーツム、コクシジオイデスイミチス、ブラストミセスデルマティティディス、トラコーマクラミジア、カンジダアルビカンスを含む。
【００５５】
他の感染性生物（つまり原生生物）は、熱帯熱マラリア原虫、四日熱マラリア原虫、卵形マラリア原虫、および三日熱マラリア原虫等のマラリア原虫種ならびにトキソプラズマ原虫を含む。血液媒介寄生生物および／または組織寄生生物は、マラリア原虫種、ネズミバベシア、バベシアディバージエンス、熱帯リーシュマニア、リーシュマニア種、ブラジルリーシュマニア、ドノバンリーシュマニア、ガンビアトリパノソーマおよびローデシアトリパノソーマ（アフリカ睡眠病）、クルーズトリパノソーマ（シャガス病）、ならびにトキソプラズマ原虫を含む。
【００５６】
他の医学的に関係のある微生物は、文献に広範に記載されており、たとえば、Ｃ．Ｇ．Ａ Ｔｈｏｍａｓ，Ｍｅｄｉｃａｌ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，Ｂａｉｌｌｉｅｒｅ Ｔｉｎｄａｌｌ，Ｇｒｅａｔ Ｂｒｉｔａｉｎ １９８３を参照されたく、その全内容が参照により本明細書中に組み込まれる。
【００５７】
本発明のｓｓＯＲＮはまた、自己免疫疾患を治療し、予防するのにも有用である。自己免疫疾患は、対象自体の抗体が宿主組織と反応するまたは免疫エフェクターＴ細胞が内因性自己ペプチドに自己反応性であり、組織の破壊の原因となる疾患の１つのクラスである。したがって、免疫応答は、自己抗原と称される対象自体の抗原に対して開始される。自己免疫疾患は、関節リウマチ、クローン病、多発性硬化症、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、自己免疫性脳脊髄炎、重症筋無力症（ＭＧ）、橋本甲状腺炎、グッドパスチャー症候群、天疱瘡（たとえば尋常性天疱瘡）、グレーブス病、自己免疫性溶血性貧血、自己免疫性血小板減少性紫斑病、抗コラーゲン抗体を有する強皮症、混合結合組織病、多発性筋炎、悪性貧血、特発性アジソン病、自己免疫関連性の不妊、糸球体腎炎（たとえば半月体形成性糸球体腎炎、増殖性糸球体腎炎）、水疱性類天疱瘡、シェーグレン症候群、インスリン抵抗性、および自己免疫性真性糖尿病を含むが、これらに限定されない。
【００５８】
本明細書中に使用されるように、アレルギーは、物質（アレルゲン）に対する後天性過敏症を指す。アレルギー状態は、湿疹、アレルギー性鼻炎または鼻感冒、枯草熱、アレルギー性結膜炎、気管支喘息、じんま疹（発疹）および食物アレルギー、アトピー性皮膚炎、アナフィラキシー、薬剤アレルギー、および血管性浮腫を含む他のアトピー状態を含むが、これらに限定されない。アレルギー疾患は、鼻炎（枯草熱）、喘息、じんま疹、およびアトピー性皮膚炎を含むが、これらに限定されない。
【００５９】
本明細書中に使用されるように、アレルギーを有する対象は、アレルゲンに応じるアレルギー反応を有する対象である。
【００６０】
アレルゲンは、感受性対象においてアレルギー応答または喘息応答を誘発することができる物質（抗原）を指す。アレルゲンのリストは膨大であり、花粉、昆虫毒液、動物性ふけ粉塵、真菌胞子、および薬剤（たとえばペニシリン）を含み得る。天然、動物、および植物アレルゲンの例は、以下の属に特異的なタンパク質を含むが、これらに限定されない：イヌ属（カニスファミリアリス）、表皮ダニ属（たとえばコナヒョウヒダニ）、ネコ属（フェリスドメスティクス（Ｆｅｌｉｓ ｄｏｍｅｓｔｉｃｕｓ））、ブタクサ属（ブタクサ）、ドクムギ属（たとえばホソムギまたはネズミムギ）、スギ属（スギ）、アルテルナリア属（アルテルナリアアルテルナータ）、ハンノキ、ハンノキ属（セイヨウヤマハンノキ）、カバノキ属（セイヨウシラカンバ）、カシ属（アメリカンホワイトオーク）、オリーブ属（オリーブ）、ヨモギ属（オウシュウヨモギ）、オオバコ属（たとえばヘラオオバコ）、ヒカゲミズ属（たとえばパリエタリアオフィチナリス（Ｐａｒｉｅｔａｒｉａ ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ）またはパリエタリアユダイカ（Ｐａｒｉｅｔａｒｉａ ｊｕｄａｉｃａ））、チャバネゴキブリ属（たとえばチャバネゴキブリ）、ミツバチ属（たとえばアピスムルティフロルム（Ａｐｉｓ ｍｕｌｔｉｆｌｏｒｕｍ））、イトスギ属（たとえばクプレススセムペルビレンス（Ｃｕｐｒｅｓｓｕｓ ｓｅｍｐｅｒｖｉｒｅｎｓ）、アリゾナイトスギ、およびモントレーイトスギ）、ビャクシン属（たとえばユニペルスサビオノイデス（Ｊｕｎｉｐｅｒｕｓ ｓａｂｉｎｏｉｄｅｓ）、エンピツビャクシン、セイヨウネズ、およびユニペルスアシェイ（Ｊｕｎｉｐｅｒｕｓ ａｓｈｅｉ））、クロベ属（たとえばツヤオリエンタリス（Ｔｈｕｙａ ｏｒｉｅｎｔａｌｉｓ））、ヒノキ属（たとえばヒノキ）、ワモンゴキブリ属（たとえばワモンゴキブリ）、カモジグサ属（たとえばシバムギ）、ライムギ属（たとえばライムギ）、コムギ属（たとえばコムギ）、カモガヤ属（たとえばカモガヤ）、ウシノケグサ属（たとえばヒロハウシノケグサ）、イチゴツナギ属（たとえばナガハグサまたはコイチゴツナギ）、カラスムギ属（たとえばマカラスムギ）、シラゲガヤ属（たとえばシラゲガヤ）、ハルガヤ属（たとえばハルガヤ）、オオカニツリ属（たとえばオオカニツリ）、コヌカグサ属（たとえばコヌカグサ）、アワガエリ属（たとえばオオアワガエリ）、クサヨシ属（たとえばクサヨシ）、スズメノヒエ属（たとえばアメリカスズメノヒエ）、モロコシ属（たとえばセイバンモロコシ）、およびスズメノチャヒキ属（たとえばコスズメノチャヒキ）。
【００６１】
本明細書中に使用されるように、喘息は、気道の炎症、狭窄、および吸入された外的病原因子に対する気道の反応性の増加により特徴づけられる呼吸器系の障害を指す。喘息は、排他的ではないが、しばしば、アトピー状態またはアレルギー状態と関連する。喘息の症状は、喘鳴、息切れ、および胸部絞扼感の反復性の出現ならびに咳を含み、気流閉塞に起因する。喘息と関連する気道炎症は、気道上皮の露出、基底膜直下のコラーゲン沈着、浮腫、肥満細胞活性化、好中球、イノシネオフィル（ｉｎｏｓｉｎｅｏｐｈｉｌ）、およびリンパ球を含む炎症細胞の浸潤等の多くの生理学的変化の観察によって検出することができる。気道炎症の結果として、喘息患者は、気道反応性亢進、気流制限、呼吸器症状、および疾患慢性を経験することが多い。気流制限は、気管支閉塞をもたらすことが多い特徴である急性気管支収縮、気道浮腫、粘液栓形成、および気道リモデリングを含む。喘息のいくつかの症例では、基底膜下線維化が発生し、肺機能の持続性の異常をもたらす可能性がある。
【００６２】
本明細書中に使用されるように、喘息を有する対象は、気道の炎症、狭窄、および吸入された外的病原因子に対する気道の反応性の増加により特徴づけられる呼吸器系の障害を有する対象である。喘息は、排他的ではないが、しばしば、アトピー症状またはアレルギー症状と関連する。喘息はさらに、排他的ではないが、初発因子との接触ともしばしば関連する。本明細書中に使用される「初発因子」は、喘息のきっかけとなる組成物または環境条件を指す。初発因子は、アレルゲン、寒い気温、運動、ウイルス感染、ＳＯ２を含むが、これらに限定されない。
【００６３】
本発明のｓｓＯＲＮはまた、単独でまたは他の治療薬と組み合わせて使用することもできる。一実施形態における他の治療薬は本発明の他のｓｓＯＲＮである。ｓｓＯＲＮおよび他の治療薬は、同時にまたは順次に投与されてもよい。他の治療薬が同時に投与される場合、それらは、同一の製剤または個別の製剤中において投与することができるが、同時に投与される。他の治療薬およびｓｓＯＲＮの投与が時間的に分離される場合、他の治療薬はｓｓＯＲＮとお互いに順次に投与される。これらの化合物の投与の間の分離時間は、数分間であってもよく、それより長くてもよい。他の治療薬は、抗微生物薬、抗癌薬、抗アレルギー薬等を含むが、これらに限定されない。
【００６４】
本発明のｓｓＯＲＮは、抗微生物薬と共に対象に投与されてもよい。抗微生物薬は、本明細書中で使用されるように、感染性微生物を殺すまたは阻害することができる天然発生化合物または合成化合物を指す。本発明による有用な抗微生物薬の種類は、対象が感染しているまたは感染する危険性のある微生物の種類に依存するであろう。抗微生物薬は、抗細菌薬、抗ウイルス薬、抗真菌薬、および抗寄生生物薬を含むが、これらに限定されない。「抗感染薬」、「抗細菌薬」、「抗ウイルス薬」、「抗真菌薬」、「抗寄生生物薬」、および「殺寄生生物薬」等の語句は、当業者にとって十分に確立された意味を有し、標準的な医学教科書において定義される。手短に言えば、抗細菌薬は、細菌を殺すまたは阻害し、抗生物質および類似する機能を有する他の合成化合物または天然化合物を含む。抗生物質は、微生物等の細胞により二次代謝産物として生産される低分子量分子である。通常、抗生物質は、微生物に特異的で宿主細胞中に存在しない１つまたは複数の細菌機能または構造を妨害する。抗ウイルス薬は、天然源から単離するまたは合成することができ、ウイルスを殺すまたは阻害するのに有用である。抗真菌薬はかつては表在性真菌感染症ならびに日和見性および原発性全身性真菌感染症を治療した。抗寄生生物薬は寄生生物を殺すまたは阻害する。
【００６５】
ヒト投与に有用な殺寄生生物薬とも称される抗寄生生物薬の例は、アルベンダゾール、アンホテリシンＢ、ベンズニダゾール、ビチオノール、クロロキンＨＣｌ、リン酸クロロキン、クリンダマイシン、デヒドロエメチン、ジエチルカルバマジン、ジロキサニドフロエート、エフロールニチン、フラゾリダオン（ｆｕｒａｚｏｌｉｄａｏｎｅ）、グルココルチコイド、ハロファントリン、ヨードキノール、アイバメクチン、メベンダゾール、メフロキン、メグルミンアンチモニエート、メラルソプロール、メトリホナート、メトロニダゾール、ニクロサミド、ニフルチモックス、オキサムニキン、パロモマイシン、ペンタミジンイセチオネート、ピペラジン、プラジカンテル、リン酸プリマキン、プログアニル、パモ酸ピランテル、ピリメタンミン（ｐｙｒｉｍｅｔｈａｎｍｉｎｅ）スルホンアミド類、ピリメタンミンスルファドキシン、キナクリンＨＣｌ、硫酸キニーネ、グルコン酸キニジン、スピラマイシン、スチボグルコネートナトリウム（グルコン酸アンチモンナトリウム）、スラミン、テトラサイクリン、ドキシサイクリン、チアベンダゾール、チニダゾール、トリメトプリムスルファメトキサゾール、およびトリパルサミドを含むが、これらに限定されず、これらのうちのいくつかは単独でまたは他と組み合わせて使用される。
【００６６】
抗細菌薬は細菌の成長または機能を殺すまたは阻害する。抗細菌薬の大きなクラスは抗生物質である。抗生物質は、広範囲の細菌を殺すまたは阻害するのに有効であり、広域抗生物質と称される。他の種類の抗生物質は、グラム陽性またはグラム陰性のクラスの細菌に対して主に有効である。これらの種類の抗生物質は狭域抗生物質と称される。他の抗生物質は、他の種類の細菌に対してではなく単一の生物または疾患に対して有効であり、限定抗生物質と称される。抗細菌薬は、それらの本来の作用機序に基づいて分類されることがある。通常、抗細菌薬は、細胞壁合成阻害薬、細胞膜阻害薬、タンパク質合成阻害薬、核酸合成または核酸機能阻害薬、および競合的阻害薬である。
【００６７】
抗ウイルス薬は、ウイルスによる細胞の感染または細胞内でのウイルスの複製を予防する化合物である。ウイルス複製のプロセスが宿主細胞内でのＤＮＡ複製と非常に密接に関係し、非特異的抗ウイルス薬は宿主に有毒であることが多いであろうといった理由から、抗ウイルス薬は抗細菌薬よりもずっと少ない。ウイルス感染のプロセス内には、抗ウイルス薬によりブロックするまたは阻害することができるいくつかの段階がある。これらの段階は、宿主細胞へのウイルスの付着（免疫グロブリンまたは結合ペプチド）、ウイルスの脱外被（たとえばアマンタジン）、ウイルスｍＲＮＡの合成または翻訳（たとえばインターフェロン）、ウイルスＲＮＡまたはＤＮＡの複製（たとえばヌクレオチド類似体）、新しいウイルスタンパク質の成熟（たとえばプロテアーゼ阻害薬）、およびウイルスの発芽および放出を含む。
【００６８】
ヌクレオチド類似体は、ヌクレオチドに類似するが、不完全なまたは異常なデオキシリボース基またはリボース基を有する合成化合物である。ヌクレオチド類似体が細胞中にあると、それらはリン酸化されて、ウイルスＤＮＡまたはＲＮＡ中への取込みについて正常ヌクレオチドと競合する三リン酸形態が生産される。ヌクレオチド類似体の三リン酸形態が成長している核酸鎖中に組み込まれると、三リン酸形態は、ウイルスポリメラーゼとの不可逆的会合、そしてそれによる連鎖停止の原因となる。ヌクレオチド類似体は、アシクロビル（単純ヘルペスウイルスおよび水痘帯状疱疹ウイルスの治療に使用される）、ガンシクロビル（サイトメガロウイルスの治療に有用）、イドクスウリジン、リバビリン（呼吸器合胞体ウイルスの治療に有用）、ジデオキシイノシン、ジデオキシシチジン、ジドブジン（アジドチミジン）、イミキモッド、ならびにレシキモッドを含むが、これらに限定されない。
【００６９】
インターフェロンは、ウイルス感染細胞および免疫細胞により分泌されるサイトカインである。インターフェロンは、感染細胞に隣接する細胞上の特異的な受容体に結合することにより機能し、その細胞をウイルスによる感染から保護する細胞における変化を引き起こす。αおよびβ−インターフェロンはまた、感染細胞の表面上におけるクラスＩおよびクラスＩＩＭＨＣ分子の発現を誘発し、宿主免疫細胞認識のための抗原提示の増加をももたらす。αおよびβ−インターフェロンは、組換え形態として入手可能であり、慢性Ｂ型肝炎感染および慢性Ｃ型肝炎感染の治療に使用されている。抗ウイルス療法に有効な投与量では、インターフェロンは、発熱、倦怠感、および体重減少等の重篤な副作用を有する。
【００７０】
本発明における有用な抗ウイルス薬は、免疫グロブリン、アマンタジン、インターフェロン、ヌクレオチド類似体、およびプロテアーゼ阻害薬を含むが、これらに限定されない。抗ウイルス薬の特定の例は、アセマンナン、アシクロビル、アシクロビルナトリウム、アデホビル、アロブジン、アルビルセプトスドトックス（Ａｌｖｉｒｃｅｐｔ Ｓｕｄｏｔｏｘ）、塩酸アマンタジン、アラノチン、アリルドン、メシル酸アテビルジン（Ａｔｅｖｉｒｄｉｎｅ Ｍｅｓｙｌａｔｅ）、アブリジン、シドホビル、シパムフィリン、塩酸シタラビン、メシル酸デラビルジン、デスシクロビル、ジダノシン、ジソキサリル、エドクスジン、エンビラデン、エンビロキシム、ファムシクロビル、塩酸ファモチン、フィアシタビン、フィアルリジン、ホサリラート、ホスカルネトナトリウム、ホスホネトナトリウム、ガンシクロビル、ガンシクロビルナトリウム、イドクスウリジン、ケトキサール、ラミブジン、ロブカビル、塩酸メモチン、メチサゾン、ネビラピン、ペンシクロビル、ピロダビル、リバビリン、塩酸リマンタジン、メシル酸サキナビル、塩酸ソマンタジン（Ｓｏｍａｎｔａｄｉｎｅ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、ソリブジン、スタトロン、スタブジン、塩酸チロロン、トリフルリジン、塩酸バラシクロビル、ビダラビン、リン酸ビダラビン（Ｖｉｄａｒａｂｉｎｅ Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ）、ビダラビンリン酸ナトリウム（Ｖｉｄａｒａｂｉｎｅ Ｓｏｄｉｕｍ Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ）、ビロキシム、ザルシタビン、ジドブジン、およびジンビロキシムを含むが、これらに限定されない。
【００７１】
抗真菌薬は、伝染性真菌の治療および予防に有用である。抗真菌薬は、それらの作用メカニズムにより分類されることがある。いくつかの抗真菌薬は、グルコース合成酵素を阻害することにより細胞壁阻害薬として機能する。これらは、バシウンギン（ｂａｓｉｕｎｇｉｎ）／ＥＣＢを含むが、これに限定されない。他の抗真菌薬は、膜の完全性を不安定化することにより機能する。これらは、クロトリマゾール、セルタコンゾール（ｓｅｒｔａｃｏｎｚｏｌｅ）、フルコナゾール、イトラコナゾール、ケトコナゾール、ミコナゾール、およびボリコナコール（ｖｏｒｉｃｏｎａｃｏｌｅ）等のイミダゾールならびにＦＫ４６３、アンホテリシンＢ、ＢＡＹ３８−９５０２、ＭＫ９９１、プラディマイシン、ＵＫ２９２、ブテナフィン、およびテルビナフィンを含むが、これらに限定されない。他の抗真菌薬は、キチンの分解（たとえばキチナーゼ）または免疫抑制（５０１クリーム）により機能する。
【００７２】
本発明のｓｓＯＲＮはまた抗癌療法と共に投与されてもよい。抗癌療法は、癌薬物、放射線、および外科的処置を含む。本明細書中に使用されるように、「癌薬物」は、癌を治療する目的で対象に投与される作用物質を指す。本明細書中に使用されるように、「癌を治療すること」は、癌の発症を予防すること、癌の症状を緩和すること、および／または確立された癌の成長を阻害することを含む。他の態様では、癌薬物は、癌を発症する危険性を緩和する目的で、癌を発症する危険性を有する対象に投与される。癌の治療のための様々な種類の薬物が本明細書中に記載される。本明細書のために、癌薬物は、化学療法薬、免疫療法薬、癌ワクチン、ホルモン療法、および生物学的応答調節剤として分類される。
【００７３】
化学療法薬は、メトトレキサート、ビンクリスチン、アドリアマイシン、シスプラチン、非糖含有クロロエチルニトロソ尿素類（ｎｏｎ−ｓｕｇａｒ ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ ｃｈｌｏｒｏｅｔｈｙｌｎｉｔｒｏｓｏｕｒｅａｓ）、５−フルオロウラシル、マイトマイシンＣ、ブレオマイシン、ドキソルビシン、ダカルバジン、タキソール、フラギリン（ｆｒａｇｙｌｉｎｅ）、メグラミンＧＬＡ（Ｍｅｇｌａｍｉｎｅ ＧＬＡ）、バルルビシン、カルムスタイン（ｃａｒｍｕｓｔａｉｎｅ）およびポリフェルポサン（ｐｏｌｉｆｅｒｐｏｓａｎ）、ＭＭ１２７０、ＢＡＹ１２−９５６６、ＲＡＳファルネシル転移酵素阻害薬、ファルネシル転移酵素阻害薬、ＭＭＰ、ＭＴＡ／ＬＹ２３１５１４、ＬＹ２６４６１８／ロメテキソール（Ｌｏｍｅｔｅｘｏｌ）、グラモレク（Ｇｌａｍｏｌｅｃ）、ＣＩ−９９４、ＴＮＰ−４７０、ハイカムチン／トポテカン、ＰＫＣ４１２、バルスポダール／ＰＳＣ８３３、ノバントロン／ミトロキサントロン（Ｍｉｔｒｏｘａｎｔｒｏｎｅ）、メタレット（Ｍｅｔａｒｅｔ）／スラミン、バチマスタット、Ｅ７０７０、ＢＣＨ−４５５６、ＣＳ−６８２、９−ＡＣ、ＡＧ３３４０、ＡＧ３４３３、インセル（Ｉｎｃｅｌ）／ＶＸ−７１０、ＶＸ−８５３、ＺＤ０１０１、ＩＳＩ６４１、ＯＤＮ６９８、ＴＡ２５１６／マルミスタット（Ｍａｒｍｉｓｔａｔ）、ＢＢ２５１６／マルミスタット、ＣＤＰ８４５、Ｄ２１６３、ＰＤ１８３８０５、ＤＸ８９５１ｆ、レモナールＤＰ２２０２、ＦＫ３１７、ピシバニール／ＯＫ−４３２、ＡＤ３２／バルルビシン、メタストロン／ストロンチウム誘導体、テモダール／テモゾロマイド、エバセット（Ｅｖａｃｅｔ）／リポソームドキソルビシン、ユータキサン（Ｙｅｗｔａｘａｎ）／パクリタキセル、タキソール／パクリタキセル、ゼローダ／カペシタビン、フルツロン／ドキシフルリジン、シクロパックス（Ｃｙｃｌｏｐａｘ）／経口パクリタキセル、経口タキソイド、ＳＰＵ−０７７／シスプラチン、ＨＭＲ１２７５／フラボピリドール、ＣＰ−３５８（７７４）／ＥＧＦＲ、ＣＰ−６０９（７５４）／ＲＡＳ癌遺伝子阻害薬、ＢＭＳ−１８２７５１／経口プラチナ、ＵＦＴ（テガフール／ウラシル）、エルガミゾール／レバミゾール、エニルウラシル／７７６Ｃ８５／５ＦＵエンハンサー、カンプト／レバミゾール、カンプトサー／イリノテカン、ツモデックス（Ｔｕｍｏｄｅｘ）／ラルチトレキセド、ロイスタチン／クラドリビン、パキセックス（Ｐａｘｅｘ）／パクリタキセル、ドキシル／リポソームドキソルビシン、カエリックス（Ｃａｅｌｙｘ）／リポソームドキソルビシン、フルダラ／フルダラビン、ファルマルビシン（Ｐｈａｒｍａｒｕｂｉｃｉｎ）／エピルビシン、ＤｅｐｏＣｙｔ、ＺＤ１８３９、ＬＵ７９５５３／ビス−ナフタリミド（Ｎａｐｈｔａｌｉｍｉｄｅ）、ＬＵ１０３７９３／ドラスタチン、カエチックス（Ｃａｅｔｙｘ）／リポソームドキソルビシン、ジェムザール／ゲムシタビン、ＺＤ０４７３／アノルメッド（Ａｎｏｒｍｅｄ）、ＹＭ１１６、ヨウ素シード、ＣＤＫ４およびＣＤＫ２阻害薬、ＰＡＲＰ阻害薬、Ｄ４８０９／デキシフォサミド（Ｄｅｘｉｆｏｓａｍｉｄｅ）、イフェス（Ｉｆｅｓ）／メスネックス／イフォスアミド、ブモン（Ｖｕｍｏｎ）／テニポシド、パラプラチン／カルボプラチン、プランチノール（Ｐｌａｎｔｉｎｏｌ）／シスプラチン、ベプシド／エトポシド、ＺＤ９３３１、タキソテール／ドセタキセル、グアニンアラビノシドのプロドラッグ、タキサン類似体、ニトロソ尿素類、メルフェランおよびシクロホスファミド等のアルキル化薬、アミノグルテチミド、アスパラギナーゼ、ブスルファン、カルボプラチン、クロラムブシル、シタラビンＨＣＩ、ダクチノマイシン、ダウノルビシンＨＣｌ、リン酸エストラムスチンナトリウム、エトポシド（ＶＰ１６−２１３）、フロクスウリジン、フルオロウラシル（５−ＦＵ）、フルタミド、ヒドロキシ尿素（ヒドロキシカルバミド）、イホスファミド、インターフェロンアルファ−２ａ、アルファ−２ｂ、酢酸ロイプロリド（ＬＨＲＨ放出因子類似体）、ロムスチン（ＣＣＮＵ）、メクロレタミンＨＣｌ（ナイトロジェンマスタード）、メルカプトプリン、メスナ、ミトタン（ｏ．ｐ’−ＤＤＤ）、ミトキサントロンＨＣｌ、オクトレオチド、プリカマイシン、プロカルバジンＨＣｌ、ストレプトゾシン、クエン酸タモキシフェン、チオグアニン、チオテパ、硫酸ビンブラスチン、アムサクリン（ｍ−ＡＭＳＡ）、アザシチジン、エリスロポエチン、ヘキサメチルメラミン（ＨＭＭ）、インターロイキン２、ミトグアゾン（メチル−ＧＡＧ；メチルグリオキサールビス−グアニルヒドラゾン；ＭＧＢＧ）、ペントスタチン（２’デオキシコホルマイシン）、セムスチン（メチル−ＣＣＮＵ）、テニポシド（ＶＭ−２６）、ならびに硫酸ビンデシンからなる群から選択されてもよいが、そのように限定されない。
【００７４】
免疫療法薬は、リブタキシン（Ｒｉｂｕｔａｘｉｎ）、ハーセプチン、クアドラメット、パノレックス（Ｐａｎｏｒｅｘ）、ＩＤＥＣ−Ｙ２Ｂ８、ＢＥＣ２、Ｃ２２５、オンコリム（Ｏｎｃｏｌｙｍ）、ＳＭＡＲＴ Ｍ１９５、ＡＴＲＡＧＥＮ、オバレックス、ベキサール、ＬＤＰ−０３、ｉｏｒ ｔ６、ＭＤＸ−２１０、ＭＤＸ−１１、ＭＤＸ−２２、ＯＶ１０３、３６２２Ｗ９４、抗ＶＥＧＦ、ゼナパックス、ＭＤＸ−２２０、ＭＤＸ−４４７、ＭＥＬＩＭＭＵＮＥ−２、ＭＥＬＩＭＭＵＮＥ−１、ＣＥＡＣＩＤＥ、プレターゲット（Ｐｒｅｔａｒｇｅｔ）、ＮｏｖｏＭＡｂ−Ｇ２、ＴＮＴ、グリオマブ（Ｇｌｉｏｍａｂ）−Ｈ、ＧＮＩ−２５０、ＥＭＤ−７２０００、ＬｙｍｐｈｏＣｉｄｅ、ＣＭＡ６７６、モノファーム（Ｍｏｎｏｐｈａｒｍ）−Ｃ、４Ｂ５、ｉｏｒ ｅｇｆ．ｒ３、ｉｏｒ ｃ５、ＢＡＢＳ、抗ＦＬＫ−２、ＭＤＸ−２６０、ＡＮＡ Ａｂ、ＳＭＡＲＴ １Ｄ１０ Ａｂ、ＳＭＡＲＴ ＡＢＬ ３６４ Ａｂ、およびＩｍｍｕＲＡＩＴ−ＣＥＡからなる群から選択されてもよいが、そのように限定されない。
【００７５】
癌ワクチンは、ＥＧＦ、抗イディオタイプ癌ワクチン、Ｇｐ７５抗原、ＧＭＫ黒色腫ワクチン、ＭＧＶガングリオシド抱合ワクチン、Ｈｅｒ２／ｎｅｕ、オバレックス、Ｍ−Ｖａｘ、Ｏ−Ｖａｘ、Ｌ−Ｖａｘ、ＳＴｎ−ＫＨＬテラトープ、ＢＬＰ２５（ＭＵＣ−１）、リポソームイディオタイプワクチン、メラシン、ペプチド抗原ワクチン、毒素／抗原ワクチン、ＭＶＡベースワクチン、ＰＡＣＩＳ、ＢＣＧワクチン、ＴＡ−ＨＰＶ、ＴＡ−ＣＩＮ、ＤＩＳＣウイルス、ならびにＩｍｍｕＣｙｓｔ／ＴｈｅｒａＣｙｓからなる群から選択されてもよいが、そのように限定されない。
【００７６】
本発明のｓｓＯＲＮは、喘息／アレルギー薬物と共に対象に投与されてもよい。本明細書中に使用される「喘息／アレルギー薬物」は、喘息またはアレルギー反応の症状を緩和する、発症を予防する、または阻害するものの組成物である。喘息およびアレルギーの治療のための様々な種類の薬物は、ｔｈｅ Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ Ｆｏｒ Ｔｈｅ Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ａｎｄ Ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ ｏｆ Ａｓｔｈｍａ，Ｅｘｐｅｒｔ Ｐａｎｅｌ Ｒｅｐｏｒｔ ２，ＮＩＨ Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ Ｎｏ．９７／４０５１，Ｊｕｌｙ １９，１９９７中に記載され、その全内容が参照により本明細書中に組み込まれる。ＮＩＨ ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎに記載される薬物の概要を以下に示す。ほとんどの実施形態では、喘息／アレルギー薬物は、喘息およびアレルギーの両方に対してある程度まで有用である。
【００７７】
喘息の治療のための薬品は、急速軽減薬品および長期制御薬品の２つのカテゴリーに通常分けられる。喘息患者は、持続性喘息の制御を達成し、維持するために、長期制御薬品を毎日服用する。長期制御薬品は、コルチコステロイド類、クロモリンナトリウム、およびネドクロミル等の抗炎症薬、長時間作用性β２−作用薬およびメチルキサンチン類等の長時間作用性気管支拡張薬、ならびにロイコトリエン調節剤を含む。急速軽減薬品は、短時間作用性β２作用薬、抗コリン作動薬、および全身性コルチコステロイド類を含む。これらの薬剤のそれぞれと関連する多くの副作用があり、薬剤のうちのどれも、単独でもまたは組み合わせても、喘息を予防するまたは完全に治療することができない。
【００７８】
喘息薬物は、ＰＤＥ−４阻害薬、気管支拡張薬／ベータ−２作用薬、Ｋ＋チャネル開口薬、ＶＬＡ−４拮抗薬、ニューロキン拮抗薬、トロンボキサンＡ２（ＴＸＡ２）合成阻害薬、キサンチン、アラキドン酸拮抗薬、５リポキシゲナーゼ阻害薬、ＴＸＡ２受容体拮抗薬、ＴＸＡ２拮抗薬、５−リポックス（５−ｌｉｐｏｘ）活性化タンパク質の阻害薬、およびプロテアーゼ阻害薬を含むが、これらに限定されない。
【００７９】
気管支拡張薬／β２作用薬は、気管支拡張または平滑筋弛緩を引き起こす化合物の１つのクラスである。気管支拡張薬／β２作用薬は、サルメテロール、サルブタモール、アルブテロール、テルブタリン、Ｄ２５２２／ホルモテロール、フェノテロール、ビトルテロール、ピルブエロール（ｐｉｒｂｕｅｒｏｌ）メチルキサンチン、およびオルシプレナリンを含むが、これらに限定されない。長時間作用性β２作用薬および気管支拡張薬は、抗炎症療法に加えて症状の長期予防に使用される化合物である。長時間作用性β２作用薬は、サルメテロールおよびアルブテロールを含むが、これらに限定されない。これらの化合物は、コルチコステロイド類と組み合わせて普通使用され、炎症療法が何らなければ通常使用されない。それら化合物は、頻脈、骨格筋振戦、低カリウム血症、および過量投与でのＱＴｃ間隔の延長等の副作用と関連している。
【００８０】
たとえばテオフィリンを含むメチルキサンチン類は、症状の長期制御および予防に使用されてきた。これらの化合物は、ホスホジエステラーゼ阻害およびおそらくアデノシン拮抗作用に起因する気管支拡張の原因となる。用量関連の急性毒性がこれらの種類の化合物の特有の問題である。結果として、代謝クリアランスにおける個人差から起こる毒性および狭い治療域を明らかにするために、日常の血清濃度を監視しなければならない。副作用は、頻脈、頻脈性不整脈、吐き気および嘔吐、中枢神経系刺激、頭痛、発作、吐血、高血糖症、ならびに低カリウム血症を含む。短時間作用性β２作用薬は、アルブテロール、ビトルテロール、ピルブテロール、およびテルブタリンを含むが、これらに限定されない。短時間作用性β２作用薬の投与と関連するいくつかの有害作用は、頻脈、骨格筋振戦、低カリウム血症、乳酸の増加、頭痛、および高血糖症を含む。
【００８１】
アレルギーを治療するまたは予防するための従来の方法は、抗ヒスタミン薬または脱感作療法の使用を伴った。アレルギー反応の化学伝達物質の影響をブロックする抗ヒスタミン薬および他の薬剤は、アレルギー症状の重症度を調節するのに役立つが、アレルギー反応を予防せず、続くアレルギー応答に対する効果を有していない。脱感作療法は、アレルゲンに対するＩｇＧ型応答を誘発するために、少用量のアレルゲンを、普通皮下注射により与えることにより実行される。ＩｇＧ抗体の存在は、ＩｇＥ抗体の誘発に起因する伝達物質の生産を中和するのに役立つと考えられる。最初、対象は、重篤な反応を誘発するのを回避するために、非常に低用量のアレルゲンで治療され、用量を徐々に増加させる。この種類の療法は、対象が、アレルギー応答を引き起こす化合物を実際に投与され、重篤なアレルギー反応が結果として生じ得るので、危険である。
【００８２】
アレルギー薬物は、抗ヒスタミン薬、ステロイド類、およびプロスタグランジン誘発剤を含むが、これらに限定されない。抗ヒスタミン薬は、肥満細胞または好塩基球により放出されるヒスタミンに反作用する化合物である。これらの化合物は、当技術分野でよく知られており、アレルギーの治療に一般に使用される。抗ヒスタミン薬は、アステミゾール、アゼラスチン、ベータタスチン（ｂｅｔａｔａｓｔｉｎｅ）、ブクリジン、セチリジン、セチリジン類似体、ＣＳ５６０、デスロラタジン、エバスチン、エピナスチン、フェキソフェナジン、ＨＳＲ６０９、レボカバスチン、ロラチジン、ミゾラスチン、ノルアステミゾール、テルフェナジン、およびトラニラストを含むが、これらに限定されない。
【００８３】
プロスタグランジン誘発剤は、プロスタグランジン活性を誘発する化合物である。プロスタグランジンは、平滑筋弛緩を調節することにより機能する。プロスタグランジン誘発剤は、Ｓ−５７５１を含むが、これに限定されない。
【００８４】
喘息／アレルギー薬物はまた、ステロイド類および免疫調節薬も含む。ステロイド類は、ベクロメタゾン、フルチカゾン、トリアムシノロン、ブデソニド、コルチコステロイド類、およびブデソニドを含むが、これらに限定されない。
【００８５】
コルチコステロイド類は、ジプロピオン酸ベクロメサゾン（ｂｅｃｌｏｍｅｔｈａｓｏｍｅ ｄｉｐｒｏｐｉｏｎａｔｅ）、ブデソニド、フルニソリド、プロピオン酸フルチカゾン、およびトリアムシノロンアセトニドを含むが、これらに限定されない。デキサメタゾンは、抗炎症作用を有するコルチコステロイドであるが、デキサメタゾンは高度に吸収され、有効用量で長期抑制性の副作用を有するので、喘息／アレルギーの治療のために吸入形態で普通は使用されない。しかしながら、デキサメタゾンは、本発明の核酸と組み合わせて投与される場合、副作用を緩和するよう低用量で投与することができるので、喘息／アレルギーの治療のために本発明に従って使用することができる。コルチコステロイドと関連するいくつかの副作用は、咳、発声障害、鵞口瘡（カンジダ症）、ならびにより高用量では、副腎抑制、骨粗鬆症、成長抑制、皮膚菲薄化、および容易に紫斑を生じる等の全身作用を含む。Ｂａｒｎｅｓ＆Ｐｅｔｅｒｓｏｎ（１９９３）Ａｍ Ｒｅｖ Ｒｅｓｐｉｒ Ｄｉｓ １４８：Ｓ１−Ｓ２６およびＫａｍａｄａ ＡＫら（１９９６）Ａｍ Ｊ Ｒｅｓｐｉｒ Ｃｒｉｔ Ｃａｒｅ Ｍｅｄ １５３：１７３９−４８。
【００８６】
全身性コルチコステロイド類は、メチルプレドニソロン、プレドニゾロン、およびプレドニゾンを含むが、これらに限定されない。コルチコステロイド類は、グルコース代謝、食欲亢進、体液貯留、体重増加、気分変動、高血圧症、消化性潰瘍、および無腐性骨壊死における可逆的な異常と関連する。これらの化合物は、不適当に制御された持続性喘息における炎症反応の短期（３〜１０日）予防に有用である。これらの化合物はまた、重篤な持続性喘息における症状の長期予防において、炎症を抑制し、制御し、実際に後退させるためにも機能する。より長期の使用と関連するいくつかの副作用は、副腎軸の抑制、成長抑制、真皮の菲薄化、高血圧症、糖尿病、クッシング症候群、白内障、筋力低下、およびまれな例では免疫機能障害を含む。これらの種類の化合物はそれらの最低の有効用量で使用されることが勧められる（ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ａｎｄ ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ ｏｆ ａｓｔｈｍａ；ｅｘｐｅｒｔ ｐａｎｅｌ ｒｅｐｏｒｔ ｔｏ；ＮＩＨ Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ Ｎｏ．９７−４０５１；Ｊｕｌｙ １９９７）。
【００８７】
免疫調節薬は、抗炎症薬、ロイコトリエン拮抗薬、ＩＬ−４ムテイン、可溶性ＩＬ−４受容体、免疫抑制薬（寛容化するペプチドワクチン等）、抗ＩＬ−４抗体、ＩＬ−４拮抗薬、抗ＩＬ−５抗体、可溶性ＩＬ−１３受容体−Ｆｃ融合タンパク質、抗ＩＬ−９抗体、ＣＣＲ３拮抗薬、ＣＣＲ５拮抗薬、ＶＬＡ−４阻害薬、およびＩｇＥのダウンレギュレーターからなる群を含むが、これらに限定されない。
【００８８】
ロイコトリエン調節剤は、軽度の持続性喘息における症状の長期制御および予防のために使用されることが多い。ロイコトリエン調節剤は、ＬＴＤ−４受容体およびＬＴＥ−４受容体と選択的に競合することにより、ロイコトリエン受容体拮抗薬として機能する。これらの化合物は、ザフィルルーカスト錠剤およびジロートン錠剤を含むが、これらに限定されない。ジロートン錠剤は、５−リポキシゲナーゼ阻害薬として機能する。これらの薬剤は、肝酵素の上昇ならびに可逆的な肝炎および高ビリルビン血症のいくつかの症例と関連する。ロイコトリエンは、肥満細胞、イノシネオフィル、および好塩基球から放出され、喘息を有する患者の気道において気道平滑筋の収縮を引き起こし、血管透過性、粘液分泌を増加させ、炎症細胞を活性化する生化学的伝達物質である。
【００８９】
他の免疫調節薬は、免疫調節特性を有することが示された神経ペプチドを含む。機能的研究は、Ｐ物質が、たとえば、特異的受容体媒介性メカニズムによるリンパ球機能に影響を及ぼし得ることを示した。Ｐ物質はまた、粘膜の肥満細胞からのアラキドン酸誘導性伝達物質の産生を刺激することにより、別の即時型過敏症応答を調整することも示された。ＭｃＧｉｌｌｉｅｓ Ｊら（１９８７）Ｆｅｄ Ｐｒｏｃ ４６：１９６−９（１９８７）。Ｐ物質は、１９３１年に初めて同定された神経ペプチドである。Ｖｏｎ ＥｕｌｅｒおよびＧａｄｄｕｍ Ｊ Ｐｈｙｓｉｏｌ（Ｌｏｎｄｏｎ）７２：７４−８７（１９３１）。そのアミノ酸配列は、１９７１年にＣｈａｎｇらにより報告された。Ｃｈａｎｇ ＭＭら（１９７１）Ｎａｔｕｒｅ Ｎｅｗ Ｂｉｏｌ ２３２：８６−８７。Ｐ物質の断片の免疫調節活性は、Ｓｉｅｍｉｏｎ ＩＺら（１９９０）Ｍｏｌｅｃ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２７：８８７−８９０（１９９０）により研究された。
【００９０】
他のクラスの化合物は、ＩｇＥのダウンレギュレーターである。これらの化合物は、ＩｇＥ受容体に結合する能力を有するペプチドまたは他の分子を含み、それによって抗原特異的ＩｇＥの結合を予防する。ＩｇＥの他の種類のダウンレギュレーターは、ヒトＩｇＥ分子のＩｇＥ受容体結合領域に対して指向性のモノクローナル抗体である。したがって、ＩｇＥのある種類のダウンレギュレーターは、抗ＩｇＥ抗体または抗体断片である。抗ＩｇＥはＧｅｎｅｎｔｅｃｈ社により開発されている。当業者は、同一の機能を有する結合ペプチドの機能的に活性な抗体断片を調製することができる。他の種類のＩｇＥダウンレギュレーターは、細胞表面上のＦｃ受容体に対するＩｇＥ抗体の結合をブロックするおよびＩｇＥが既に結合している結合部位からＩｇＥを退去させることができるポリペプチドである。
【００９１】
ＩｇＥのダウンレギュレーターと関連する１つの問題は、多くの分子が、自然のままのＩｇＥ分子およびその受容体の間の非常に強い相互作用に相当する、受容体に対する結合強度を有していないということである。この強度を有する分子は受容体に不可逆的に結合する傾向がある。しかしながら、上記物質は、体内の他の構造的に類似する分子に共有結合して、ブロックすることができるので、比較的有毒である。この背景において興味があるのは、ＩｇＥ受容体のα鎖が、たとえば数個の異なるＩｇＧ Ｆｃ受容体が含有される、より大きな遺伝子ファミリーに属するということである。これらの受容体は、たとえば細菌感染に対する体の防御にとって絶対的に不可欠である。共有結合のために活性化された分子は、さらに、比較的不安定であることが多く、したがって、それら分子は、肥満細胞および好塩基白血球上のＩｇＥ受容体の継続的に再生されるプールを完全にブロックすることを可能にするために、１日に数回、そのうえ比較的高濃度でたいてい投与されなければならない。
【００９２】
クロモリンナトリウムおよびネドクロミルは、運動から起こる喘息症状をまたはアレルゲンから起こるアレルギー症状を主に予防するために長期制御薬品として使用される。これらの化合物は、クロライドチャネル機能を妨害することによりアレルゲンに対する早期反応および遅延反応をブロックすると考えられる。それら化合物はまた、肥満細胞膜を安定化し、イノシネオフィルおよび上皮細胞からの伝達物質の活性化および放出を阻害する。４〜６週間の投与の期間が最大の利益を達成するために通常必要とされる。
【００９３】
抗コリン薬は、急性気管支痙攣の軽減に通常使用される。これらの化合物は、ムスカリン性コリン受容体の競合的阻害により機能すると考えられる。抗コリン薬は、臭化イプラトロピウムを含むが、これに限定されない。これらの化合物は、コリン媒介性の気管支痙攣のみを後退させ、抗原に対するいかなる反応をも修飾しない。副作用は、口および呼吸器の分泌物の乾燥、何人かの個人における喘鳴の増加、ならびに眼中に噴霧された場合のかすみ目を含む。
【００９４】
ｉｎ ｖｉｔｒｏおよびｉｎ ｖｉｖｏでのそれら化合物の使用のために、本発明のｓｓＯＲＮは有効量で通常使用される。本明細書中に使用されるように、有効量は、所望の生物学的効果を達成するのに十分である任意の量を通常指す。一実施形態では、有効量は臨床的に有効な量であり、臨床的に有効な量は、疾患を有する対象を治療するのに十分である任意の量である。本明細書中に使用されるように、治療および治療することは、疾患を有するまたは有する危険性のある対象における疾患の少なくとも１つの徴候または症状を緩和する、除去する、または予防することを指す。本明細書中に使用されるように、対象は、ヒトまたは他の哺乳動物を指す。
【００９５】
本明細書中に提供される教示と組み合わせて、様々な活性化合物の中から選択し、効力、相対的生物学的利用能、患者体重、有害副作用の重症度、および投与の好ましいモード等の因子を考察することにより、実質的な毒性を引き起こさず、さらに、特定の対象を治療するのに有効である、有効な予防的または治療的な治療レジメンを計画することができる。任意の特定用途に対する有効量は、治療されている疾患もしくは状態、投与されている特定のｓｓＯＲＮ、対象の大きさ、または疾患もしくは状態の重症度のような因子に依存して変動し得る。当業者は、必要以上の実験法を要することなく、特定のｓｓＯＲＮおよび／または他の治療薬の有効量を経験的に決定することができる。最大用量、すなわちいくつかの医学的判断に従った最も高度な安全用量が使用されることが通常好ましい。１日当たり複数回の用量が、化合物の適切な全身レベルを達成するために企図されてもよい。適切な全身レベルは、たとえば患者の薬剤の最高または持続血漿レベルの測定により決定することができる。「用量」および「投与量」は、本明細書中において区別なく使用される。
【００９６】
通常、活性化合物の日々の経口用量は、１日当たり約０．０１ミリグラム／ｋｇから１日当たり１０００ミリグラム／ｋｇまでであろう。０．５〜５０ミリグラム／ｋｇの範囲での経口用量は、１日当たり１回または数回の投与で所望の結果をもたらすであろうということが期待される。投与量は、局所性または全身性の所望の薬剤レベルを達成するために、投与のモードに依存して適切に調整されてもよい。たとえば、静脈内投与は、１日当たり一桁から数桁低い用量であろうということが期待される。対象における応答が上記用量で不十分な場合、さらに高度な用量（またはより局所的な異なる送達経路による有効なより高度な用量）が患者の耐性が許す程度まで利用されてもよい。１日当たり複数回の用量が、化合物の適切な全身レベルを達成するために企図される。
【００９７】
本明細書中に記載される任意の化合物については、治療的有効量は、動物モデルから最初に決定することができる。治療的有効用量はまた、ヒトにおいて試験されたｓｓＯＲＮについてのおよび他の関係する活性剤等の類似する薬理活性を示すことで知られている化合物についてのヒトデータから決定することもできる。より高度な用量は、非経口投与のために必要とされてもよい。適用用量は、投与された化合物の相対的生物学的利用能および効力に基づいて調整することができる。上記に記載される方法および当技術分野でよく知られている他の方法に基づき最大の効能を達成するために用量を調整することは、当業者の能力の範囲内に十分にある。
【００９８】
細胞中へのｓｓＯＲＮの送達を促進するために、ｓｓＯＲＮは、任意選択により、カチオン脂質と共に提供する、製剤する、またはその他の場合では組み合わせることができる。一実施形態では、上記カチオン脂質はＤＯＴＡＰである。
【００９９】
療法における使用のために、有効量のｓｓＯＲＮは、所望の表面にｓｓＯＲＮを送達する任意の形態により対象に投与することができる。本発明の医薬組成物の投与は、当業者に知られている任意の手段により成し遂げられてもよい。投与の好ましい経路は、経口、非経口、筋肉内、鼻腔内、舌下、気管内、吸入、眼、膣、および直腸を含むが、これらに限定されない。
【０１００】
本発明のｓｓＯＲＮは、ベクターの支援を伴って、特定の組織、細胞型にもしくは免疫系にまたは両方に送達されてもよい。その最も広い意味では、「ベクター」は、標的細胞への組成物の移行を容易にすることができる任意の媒体である。ベクターは、ベクターの非存在において結果として生じるであろう分解の程度に比べて分解が緩和された状態で、ｓｓＯＲＮ、抗体、抗原、および／または障害特異的薬物を標的細胞に通常輸送する。
【０１０１】
通常、本発明において有用なベクターは、２つのクラス、生物学的ベクターおよび化学的／物理的ベクターに分類される。生物学的ベクターおよび化学的／物理的ベクターは、本発明の治療薬の送達および／または取込みに有用である。
【０１０２】
本明細書中に使用されるように、「化学的／物理的ベクター」は、細菌学的な源またはウイルス源に由来するもの以外の、ｓｓＯＲＮおよび／または他の薬物を送達することができる天然分子または合成分子を指す。
【０１０３】
本発明の好ましい化学的／物理的ベクターはコロイド分散系である。コロイド分散系は、水中油型乳剤、ミセル、混合ミセル、およびリポソームを含む脂質ベースの系を含む。本発明の好ましいコロイド系はリポソームである。リポソームは、ｉｎ ｖｉｖｏまたはｉｎ ｖｉｔｒｏでの送達ベクターとして有用である人工膜器である。大型単層小胞（ＬＵＶ）は、大きさが０．２〜４．０μｍに及び、大きな巨大分子をカプセル化することができることが示されている。ＲＮＡ、ＤＮＡ、および完全ウイルス粒子は水性内部内にカプセル化され、生物学的に活性な形態で細胞に送達することができる。Ｆｒａｌｅｙら（１９８１）Ｔｒｅｎｄｓ Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｓｃｉ ６：７７。
【０１０４】
リポソームは、モノクローナル抗体、糖、糖脂質、またはタンパク質等の特異的リガンドにリポソームをつなぐことにより、特定の組織を標的として送り込まれてよい。リポソームを免疫細胞を標的として送り込むのに有用である可能性のあるリガンドは、次のものを含むが、これらに限定されない：免疫細胞特異的受容体と相互作用する分子の完全体または断片および免疫細胞の細胞表面マーカーと相互作用する、抗体等の分子。上記リガンドは、当業者によく知られている結合アッセイにより容易に同定することができる。さらに他の実施形態では、リポソームは、前に説明した免疫療法の抗体のうちの１つにリポソームをつなぐことにより、癌を標的に送り込まれてもよい。さらに、ベクターは、核標的ペプチドにつながれてもよく、宿主細胞の核にベクターを向けるであろう。
【０１０５】
移入のための脂質製剤は、たとえば、ＥＦＦＥＣＴＥＮＥ（商標）（特有のＤＮＡ凝縮エンハンサーを有する非リポソーム脂質）およびＳＵＰＥＲＦＥＣＴ（商標）（新規な活性型デンドリマー技術）としてＱＩＡＧＥＮ社から市販で入手可能である。
【０１０６】
リポソームは、たとえばＬＩＰＯＦＥＣＴＩＮ（商標）およびＬＩＰＯＦＥＣＴＡＣＥ（商標）として、Ｇｉｂｃｏ ＢＲＬ社から市販で入手可能であり、これらは、Ｎ−［１−（２，３ジオレイルオキシ）−プロピル］−Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチル塩化アンモニウム（ＤＯＴＭＡ）および臭化ジメチルジオクタデシルアンモニウム（ＤＤＡＢ）等のカチオン脂質から形成される。リポソームを作製するための方法は、当技術分野でよく知られており、多くの刊行物中に記載されている。リポソームはまた、Ｇｒｅｇｏｒｉａｄｉｓ Ｇ（１９８５）Ｔｒｅｎｄｓ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ ３：２３５−２４１によっても概説されている。
【０１０７】
一実施形態では、媒体は、哺乳動物レシピエントへの移植または投与に適した生体適合性の微小粒子または移植片である。この方法で用いるのに有用である例示的な生浸食性移植片は、「Ｐｏｌｙｍｅｒｉｃ Ｇｅｎｅ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｓｙｓｔｅｍ」と題する公開国際出願ＷＯ９５／２４９２９に記載されている。ＷＯ９５／２４９２９は、適切なプロモーターの制御下の外来性遺伝子を含有するための生体適合性で、好ましくは生分解性のポリマーマトリックスを記載している。ポリマーマトリックスは、対象における治療薬の持続放出を達成するために使用することができる。
【０１０８】
ポリマーマトリックスは、好ましくは、微粒子等の微小粒子（核酸および／または他の治療薬は固体ポリマーマトリックスの全体にわたって分散される）またはマイクロカプセル（核酸および／または他の治療薬はポリマーシェルのコア中に貯蔵される）の形態をしている。治療薬を含有するためのポリマーマトリックスの他の形態は、フィルム、コーティング、ゲル、移植片、およびステントを含む。ポリマーマトリックス装置の大きさおよび組成は、マトリックスが導入される組織における好都合な放出動態をもたらすよう選択される。ポリマーマトリックスの大きさは、使用されることになる送達の方法、典型的には組織への注射またはエアロゾルによる鼻のおよび／もしくは肺のエリアへの懸濁剤の投与に従ってさらに選択される。好ましくは、エアロゾル経路が使用される場合、ポリマーマトリックスならびに核酸および／または他の治療薬は界面活性剤の媒体中に包含される。ポリマーマトリックス組成は、好都合な分解速度を有するのみならず、生体接着性である材料からさらに形成され、マトリックスが、傷害を負った鼻のおよび／または肺の表面に投与される場合に、移行の有効性をさらに増加させるように選択することができる。マトリックス組成はまた、分解するのではなく、長期間にわたり拡散により放出するよう選択することもできる。いくつかの好ましい実施形態では、核酸は、移植片を介して対象に投与され、一方、他の治療薬は急性的に投与される。経口送達または粘膜送達等の送達に適している生体適合性微粒子は、Ｃｈｉｃｋｅｒｉｎｇら（１９９６）Ｂｉｏｔｅｃｈ Ｂｉｏｅｎｇ ５２：９６−１０１およびＭａｔｈｉｏｗｉｔｚ Ｅら（１９９７）Ｎａｔｕｒｅ ３８６：４１０−４１４およびＰＣＴ特許出願ＷＯ９７／０３７０２中に開示されている。
【０１０９】
非生分解性および生分解性ポリマーマトリックスは、核酸および／または他の治療薬を対象に送達するために使用することができる。生分解性マトリックスが好ましい。上記ポリマーは、天然または合成ポリマーであってもよい。ポリマーは、通常数時間から１年、またはそれよりも長い、放出が所望される時間に基づいて選択される。典型的に、数時間および３〜１２か月の間の範囲の期間にわたる放出が、特に核酸薬については最も望ましい。ポリマーは任意選択により、水中でその重量の約９０％まで吸収することができ、かつ多原子価イオンまたは他のポリマーとさらに任意選択により架橋しているヒドロゲルの形態をしている。
【０１１０】
特に興味のある生体接着性ポリマーは、Ｈ．Ｓ．Ｓａｗｈｎｅｙ、Ｃ．Ｐ．Ｐａｔｈａｋ、およびＪ．Ａ．ＨｕｂｅｌｌによりＭａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ、（１９９３）２６：５８１−５８７中に記載されている生浸食性ヒドロゲルを含み、その教示は本明細書中に組み込まれている。これらは、ポリヒアルロン酸、カゼイン、ゼラチン、グルチン、ポリアンヒドリド、ポリアクリル酸、アルギン酸、キトサン、ポリ（メタクリル酸メチル）、ポリ（メタクリル酸エチル）、ポリ（メタクリル酸ブチル）、ポリ（メタクリル酸イソブチル）、ポリ（メタクリル酸ヘキシル）、ポリ（メタクリル酸イソデシル）、ポリ（メタクリル酸ラウリル）、ポリ（メタクリル酸フェニル）、ポリ（アクリル酸メチル）、ポリ（アクリル酸イソプロピル）、ポリ（アクリル酸イソブチル）、およびポリ（アクリル酸オクタデシル）を含む。
【０１１１】
コンパクション剤の使用もまた望ましい可能性がある。コンパクション剤はまた、単独でまたは生物学的もしくは化学的／物理的ベクターと組み合わせて使用することもできる。「コンパクション剤」は、本明細書中に使用されるように、ヒストン等の作用物質を指し、核酸上の負電荷を中和し、それによって、細粒中への核酸のコンパクションを可能にする。核酸のコンパクションは標的細胞による核酸の取込みを容易にする。コンパクション剤は、単独で、つまり細胞によりより効率的に取込まれる形態で核酸を送達するために使用することができ、または、より好ましくは、１つまたは複数の上記ベクターと組み合わせて使用することができる。
【０１１２】
核酸の取込みを容易にするために使用することができる他の例示的な組成物は、リン酸カルシウムおよび細胞内輸送の他の化学伝達物質、微量注射組成物、電気穿孔法および相同組換えの組成物（たとえば標的細胞染色体内の予め選択された位置に核酸を組み込むための）を含む。
【０１１３】
化合物は、単独で（たとえば食塩水もしくは緩衝液中で）または当技術分野で知られている任意の送達ベクターを使用して投与されてもよい。たとえば、以下の送達媒体が記載されている：蝸牛状物（ｃｏｃｈｌｅａｔｅ）（Ｇｏｕｌｄ−Ｆｏｇｅｒｉｔｅら，１９９４，１９９６）；エマルソーム（Ｅｍｕｌｓｏｍｅ）（Ｖａｎｃｏｔｔら，１９９８，Ｌｏｗｅｌｌら，１９９７）；ＩＳＣＯＭ（Ｍｏｗａｔら，１９９３，Ｃａｒｌｓｓｏｎら，１９９１，Ｈｕら，１９９８，Ｍｏｒｅｉｎら，１９９９）；リポソーム（Ｃｈｉｌｄｅｒｓら，１９９９，Ｍｉｃｈａｌｅｋら，１９８９，１９９２，ｄｅ Ｈａａｎ １９９５ａ，１９９５ｂ）；生細菌ベクター（たとえばサルモネラ菌、大腸菌、カルメットゲラン桿菌、赤痢菌、乳酸桿菌）（Ｈｏｎｅら，１９９６，Ｐｏｕｗｅｌｓら，１９９８，Ｃｈａｔｆｉｅｌｄら，１９９３，Ｓｔｏｖｅｒら，１９９１，Ｎｕｇｅｎｔら，１９９８）；生ウイルスベクター（たとえばワクシニア、アデノウイルス、単純ヘルペス）（Ｇａｌｌｉｃｈａｎら，１９９３，１９９５，Ｍｏｓｓら，１９９６，Ｎｕｇｅｎｔら，１９９８，Ｆｌｅｘｎｅｒら，１９８８，Ｍｏｒｒｏｗら，１９９９）；微粒子（Ｇｕｐｔａら，１９９８，Ｊｏｎｅｓら，１９９６，Ｍａｌｏｙら，１９９４，Ｍｏｏｒｅら，１９９５，Ｏ’Ｈａｇａｎら，１９９４，Ｅｌｄｒｉｄｇｅら，１９８９）；核酸ワクチン（Ｆｙｎａｎら，１９９３，Ｋｕｋｌｉｎら，１９９７，Ｓａｓａｋｉら，１９９８，Ｏｋａｄａら，１９９７，Ｉｓｈｉｉら，１９９７）；ポリマー（たとえばカルボキシメチルセルロース、キトサン）（Ｈａｍａｊｉｍａら，１９９８，Ｊａｂｂａｌ−Ｇｉｌｌら，１９９８）；ポリマー環（Ｗｙａｔｔら，１９９８）；プロテオソーム（Ｖａｎｃｏｔｔら，１９９８，Ｌｏｗｅｌｌら，１９８８，１９９６，１９９７）；フッ化ナトリウム（Ｈａｓｈｉら，１９９８）；トランスジェニック植物（Ｔａｃｋｅｔら，１９９８，Ｍａｓｏｎら，１９９８，Ｈａｑら，１９９５）；ビロソーム（Ｇｌｕｃｋら，１９９２，Ｍｅｎｇｉａｒｄｉら，１９９５，Ｃｒｙｚら，１９９８）；およびウイルス様粒子（Ｊｉａｎｇら，１９９９，Ｌｅｉｂｌら，１９９８）。
【０１１４】
本発明の製剤は、薬学的に許容できる溶液中において投与され、この溶液は、薬学的に許容できる濃度の塩、緩衝薬、防腐薬、適合性のある担体、アジュバント、および任意選択により他の治療的要素を慣例的に含有していてもよい。
【０１１５】
薬学的に許容できる担体という用語は、ヒトまたは他の脊椎動物の投与に適している１つまたは複数の適合性のある固体もしくは液体の増量剤、希釈剤、またはカプセル化物質を意味する。担体という用語は、活性要素が適用を容易にするよう組み合わせられる天然または合成の有機または無機の要素を示す。医薬組成物の成分はまた、所望の医薬品効率を実質的に損なうであろう相互作用がないような様式で、本発明の化合物とおよび互いに混ぜ合わせることもできる。
【０１１６】
経口投与については、化合物（つまりｓｓＯＲＮおよび任意選択により他の治療薬）は、当技術分野でよく知られている薬学的に許容できる担体と活性化合物（複数可）を組み合わせることにより容易に製剤することができる。上記担体は、治療されることになる対象による経口摂取のために、錠剤、丸剤、糖剤、カプセル剤、液剤、ゲル、シロップ剤、スラリー、および懸濁剤等として本発明の化合物を製剤することを可能にする。経口使用のための医薬調製物は、固体賦形剤として得ることができ、任意選択により結果としての混合物を粉砕し、適した佐剤を追加した後に顆粒の混合物を加工して、所望の場合に、錠剤または糖剤コアを得ることができる。適した賦形剤は、特に、ラクトース、スクロース、マンニトール、またはソルビトールを含む糖；たとえば、トウモロコシデンプン、コムギデンプン、コメデンプン、バレイショデンプン、ゼラチン、トラガカントゴム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチル−セルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、および／またはポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）等のセルロース調製物等の増量剤である。所望の場合、架橋ポリビニルピロリドン、寒天、またはアルギン酸もしくはアルギン酸ナトリウム等のその塩等の崩壊剤が追加されてもよい。任意選択により、経口製剤はまた、内部酸性状態の中和のために、食塩水または緩衝液、たとえばＥＤＴＡ中に製剤されてもよく、またはいかなる担体もなしで投与されてもよい。
【０１１７】
上記の成分（複数可）の経口剤形もまた特に企図される。成分（複数可）は、誘導体の経口送達が効果的となるように、化学的に修飾されてもよい。通常、企図される化学修飾は、成分分子自体への少なくとも１つの部分の付着であり、上述の部分は、（ａ）タンパク質分解の阻害および（ｂ）胃または腸からの血流中への取込みを可能にする。成分（複数可）の全体的な安定性の増加および体内の循環時間の増加もまた所望される。上記部分の例は、次のものを含む：ポリエチレングリコール、エチレングリコールおよびプロピレングリコールのコポリマー、カルボキシメチルセルロース、デキストラン、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、ならびにポリプロリン。Ｅｎｚｙｍｅｓ ａｓ Ｄｒｕｇｓ，ＨｏｃｅｎｂｅｒｇおよびＲｏｂｅｒｔｓ編，Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ＮＹ，ｐｐ．３６７−３８３中のＡｂｕｃｈｏｗｓｋｉおよびＤａｖｉｓ，１９８１，「Ｓｏｌｕｂｌｅ Ｐｏｌｙｍｅｒ−Ｅｎｚｙｍｅ Ａｄｄｕｃｔｓ」；Ｎｅｗｍａｒｋら，１９８２，Ｊ．Ａｐｐｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．４：１８５−１８９。使用することができる他のポリマーは、ポリ−１，３−ジオキソランおよびポリ−１，３，６−チオキソカン（ｔｉｏｘｏｃａｎｅ）である。ポリエチレングリコール部分は、上記に示されるように、医薬品の用法にとって好ましい。
【０１１８】
成分（または誘導体）については、放出の位置は、胃、小腸（十二指腸、空腸、もしくは回腸）、または大腸であってもよい。当業者は、胃で溶解しないであろうが、十二指腸または腸における他のところで材料を放出するであろう入手可能な製剤を有している。好ましくは、放出は、ｓｓＯＲＮ（もしくは誘導体）の保護によりまたは腸において等の胃環境を越えたところへの生物学的活性材料の放出により胃環境の有害性の作用を回避するであろう。
【０１１９】
完全な胃抵抗性を確実にするために、少なくともｐＨ５．０に対して不浸透性のコーティングは不可欠である。腸溶コーティングとして使用されるより共通した不活性要素の例は、セルロースアセテートトリメリテート（ＣＡＴ）、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート（ＨＰＭＣＰ）、ＨＰＭＣＰ５０、ＨＰＭＣＰ５５、ポリビニルアセテートフタレート（ＰＶＡＰ）、オイドラギット（Ｅｕｄｒａｇｉｔ）Ｌ３０Ｄ、アクアテリック（Ａｑｕａｔｅｒｉｃ）、セルロースアセテートフタレート（ＣＡＰ）、オイドラギットＬ、オイドラギットＳ、およびシェラックである。これらのコーティングは混合フィルムとして使用されてもよい。
【０１２０】
コーティングまたはコーティングの混合物はまた、錠剤にも使用することができ、胃からの保護を意図されない。これは、錠剤を飲み込むのを容易にする糖コーティングまたはコーティングを含むことができる。カプセル剤は、乾燥した治療用物質、つまり散剤の送達のための硬シェル（ゼラチン等）からなってもよい；液剤形態については、軟ゼラチンシェルが使用されてもよい。カシェ剤のシェル材料は、厚いデンプンまたは他の食用紙とすることができる。丸剤、ロゼンジ、湿製錠剤、または擦り込み錠剤については、湿塊技術（ｍｏｉｓｔ ｍａｓｓｉｎｇ ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ）を使用することができる。
【０１２１】
治療用物質は、約１ｍｍの粒径の顆粒またはペレットの形態で細い多微粒子として製剤中に含むことができる。カプセル剤投与のための材料の製剤はまた、散剤、軽く圧縮したプラグ、または錠剤とすることもできる。治療用物質は、圧縮により調製することができる。
【０１２２】
着色剤および香料はすべて含まれていてもよい。たとえば、ｓｓＯＲＮ（または誘導体）は、製剤され（リポソームカプセル化または微粒子カプセル化により等）、次いで、着色剤および香料を含有する冷蔵飲料等の食用産物内にさらに含有されてもよい。
【０１２３】
治療用物質の容量を不活性材料で希釈するまたは増加させてもよい。これらの希釈剤は、炭水化物、特にマンニトール、α−ラクトース、無水ラクトース、セルロース、スクロース、修飾デキストラン、およびデンプンを含むことができる。ある種の無機塩類もまた、カルシウム三リン酸、炭酸マグネシウム、および塩化ナトリウムを含む増量剤として使用されてもよい。いくつかの市販で入手可能な希釈剤は、Ｆａｓｔ−Ｆｌｏ、エムデックス（Ｅｍｄｅｘ）、ＳＴＡ−Ｒｘ１５００、エンコンプレス（Ｅｍｃｏｍｐｒｅｓｓ）、およびアビセル（Ａｖｉｃｅｌｌ）である。
【０１２４】
崩壊剤は、固体剤形への治療用物質の製剤中に含まれてもよい。崩壊するように使用される材料は、デンプンをベースとした市販の崩壊剤であるエキスプロタブを含むデンプンを含むが、これに限定されない。グリコール酸デンプンナトリウム、アンバーライト、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ウルトラミロペクチン（ｕｌｔｒａｍｙｌｏｐｅｃｔｉｎ）、アルギン酸ナトリウム、ゼラチン、オレンジピール、酸性カルボキシメチルセルロース、天然海綿、およびベントナイトはすべて使用されてもよい。崩壊剤の他の形態は不溶性カチオン交換樹脂である。粉末ガムは、崩壊剤としておよび結合剤として使用されてもよく、これらは、寒天、カラヤ、またはトラガカント等の粉末ガムを含むことができる。アルギン酸およびそのナトリウム塩もまた崩壊剤として有用である。
【０１２５】
結合剤は、硬錠剤を形成するよう治療薬を共に保持するよう使用されてもよく、アカシア、トラガカント、デンプン、およびゼラチン等の天然産物からの材料を含んでいてもよい。他のものは、メチルセルロース（ＭＣ）、エチルセルロース（ＥＣ）、およびカルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）を含む。ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）およびヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）は、治療用物質を顆粒化するためにアルコール溶液中に共に使用することができる。
【０１２６】
抗摩擦剤は、製剤プロセス中の固着を予防するために、治療用物質の製剤中に含まれていてもよい。潤滑剤は、治療用物質および型壁の間の層として使用されてもよく、これらは、次のものを含むことができるが、これらに限定されない；そのマグネシウム塩およびカルシウム塩を含むステアリン酸、ポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）、流動パラフィン、植物油、およびワックス。ラウリル硫酸ナトリウム、ラウリル硫酸マグネシウム、様々な分子量のポリエチレングリコール、カーボワックス４０００および６０００等の可溶性潤滑剤もまた使用されてもよい。
【０１２７】
製剤中の薬剤の流動特性を改善する可能性のあるおよび圧縮中の再配列を支援するための滑剤を追加してもよい。滑剤は、デンプン、タルク、発熱性シリカ、およびアルミノケイ酸水和物を含んでいてもよい。
【０１２８】
水性環境中への治療用物質の溶解を支援するために、界面活性剤を湿潤剤として追加してもよい。界面活性剤は、ラウリル硫酸ナトリウム、ジオクチルサクシネートスルホン酸ナトリウム、およびジオクチルスルホン酸ナトリウム等のアニオン洗浄剤を含んでいてもよい。カチオン洗浄剤は使用されてもよく、塩化ベンザルコニウムまたは塩化ベンゼトニウムを含むことができる。界面活性剤として製剤に含むことができると考えられる非イオン洗浄剤のリストは、ラウロマクロゴール４００、ポリオキシル４０ステアレート、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油１０、５０、および６０、グリセロールモノステアレート、ポリソルベート４０、６０、６５、および８０、スクロース脂肪酸エステル、メチルセルロース、ならびにカルボキシメチルセルロースである。これらの界面活性剤は、ｓｓＯＲＮまたは誘導体の製剤中に単独でまたは異なる比率で混合物として存在することができる。
【０１２９】
経口的に使用することができる医薬調製物は、ゼラチンから作製されたプッシュフィットカプセル剤ならびにゼラチンおよびグリセロールまたはソルビトール等の可塑剤から作製された軟密閉カプセル剤を含む。プッシュフィットカプセル剤は、ラクトース等の増量剤、デンプン等の結合剤、および／またはタルクまたはマグネシウムステアレート等の潤滑剤、ならびに任意選択により安定剤と混合して、活性要素を含有することができる。軟カプセル剤では、活性化合物は、脂肪油、流動パラフィン、または液体ポリエチレングリコール等の適した液体中に溶解または懸濁されてもよい。さらに、安定剤を追加してもよい。経口投与のために製剤された微粒子もまた使用されてもよい。上記微粒子は、当技術分野で十分に定義されている。経口投与のためのすべての製剤は上記投与に適している投与量とするべきである。
【０１３０】
口内投与については、組成物は、従来の様式で製剤された錠剤またはロゼンジの形態を取ってもよい。
【０１３１】
吸入による投与については、本発明による使用のための化合物は、適した噴射剤、たとえばジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタン、二酸化炭素、または他の適したガスの使用と共に、加圧パックまたは噴霧器からのエアロゾル噴霧で与えられる形態で好都合に送達されてもよい。加圧エアロゾルの場合には投与量単位は、計量した量を送達するためのバルブを提供することにより決定されてもよい。たとえば、吸入器または注入器中での使用のためのゼラチンのカプセルおよびカートリッジは、製剤されて、化合物の粉末配合物およびラクトースまたはデンプン等の適した粉末ベースを含有していてもよい。
【０１３２】
ｓｓＯＲＮ（またはその誘導体）の肺送達もまた本明細書中において企図される。ｓｓＯＲＮ（または誘導体）は、吸入されながら哺乳動物の肺に送達され、肺上皮内層を横切って血流へ横断する。吸入分子についての他の報告は、Ａｄｊｅｉら，１９９０，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，７：５６５−５６９；Ａｄｊｅｉら，１９９０，Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ，６３：１３５−１４４（酢酸ロイプロリド）；Ｂｒａｑｕｅｔら，１９８９，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，１３（ｓｕｐｐｌ．５）：１４３−１４６（エンドセリン−１）；Ｈｕｂｂａｒｄら，１９８９，Ａｎｎａｌｓ ｏｆ Ｉｎｔｅｒｎａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，１１１：２０６−２１２（アルファ１−アンチトリプシン）；Ｓｍｉｔｈら，１９８９，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．８４：１１４５−１１４６（ａ−１−プロテイナーゼ）；Ｏｓｗｅｉｎら，１９９０，「Ａｅｒｏｓｏｌｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ」，Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ ｏｆ Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ ｏｎ Ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ ＩＩ，Ｋｅｙｓｔｏｎｅ，Ｃｏｌｏｒａｄｏ，Ｍａｒｃｈ，（組換えヒト成長ホルモン）；Ｄｅｂｓら，１９８８，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４０：３４８２−３４８８（インターフェロン−ガンマおよび腫瘍壊死因子アルファ）およびＰｌａｔｚら，米国特許第５，２８４，６５６号（顆粒球コロニー刺激因子）を含む。全身作用のための薬剤の肺送達のための方法および組成物は、１９９５年９月１９日にＷｏｎｇらに発行された米国特許第５，４５１，５６９号中に記載されている。
【０１３３】
治療産物の肺送達のために設計された広範囲の機械的装置は本発明の実施における使用のために企図され、噴霧器、計量用量吸入器、および粉末吸入器を含むが、これらに限定されず、これらのすべてに当業者は精通している。
【０１３４】
本発明の実施に適している市販で入手可能な装置のいくつかの特定の例は、Ｍａｌｌｉｎｃｋｒｏｄｔ，Ｉｎｃ．、Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ、Ｍｉｓｓｏｕｒｉにより製造されたＵｌｔｒａｖｅｎｔ噴霧器；Ｍａｒｑｕｅｓｔ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ、Ｅｎｇｌｅｗｏｏｄ、Ｃｏｌｏｒａｄｏにより製造されたＡｃｏｒｎＩＩ噴霧器；Ｇｌａｘｏ Ｉｎｃ．、Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｔｒｉａｎｇｌｅ Ｐａｒｋ、Ｎｏｒｔｈ Ｃａｒｏｌｉｎａにより製造されたＶｅｎｔｏｌｉｎ計量用量吸入器；およびＦｉｓｏｎｓ Ｃｏｒｐ．、Ｂｅｄｆｏｒｄ、Ｍａｓｓａｃｈｕｓｅｔｔｓにより製造されたＳｐｉｎｈａｌｅｒ粉末吸入器である。
【０１３５】
上記装置はすべて、ｓｓＯＲＮ（または誘導体）の分注に適した製剤の使用を必要とする。典型的に、各製剤は、利用される装置の種類に特異的であり、療法に有用な普通の希釈剤、アジュバント、および／または担体の他に、適切な噴射剤材料の使用を伴ってもよい。さらに、リポソーム、マイクロカプセルもしくは微粒子、包接複合体、または他の種類の担体の使用が企図される。化学的修飾ｓｓＯＲＮもまた、化学修飾の種類または利用される装置の種類に依存して異なる製剤中に調製されてもよい。
【０１３６】
噴射または超音波のいずれかの噴霧器での使用に適した製剤は、溶液１ｍＬ当たり約０．１〜２５ｍｇの生物学的活性ｓｓＯＲＮの濃度で水中に溶解したｓｓＯＲＮ（または誘導体）を典型的に備えるであろう。製剤はまた、緩衝液および単糖（たとえばｓｓＯＲＮ安定化および浸透圧の調節のための）も含んでいてもよい。噴霧器製剤はまた、エアロゾルの形成における溶液の噴霧化により引き起こされるｓｓＯＲＮの表面誘発性の凝集を緩和するまたは予防するために界面活性剤も含有していてもよい。
【０１３７】
計量用量吸入器装置での使用のための製剤は、界面活性剤の支援により噴射剤中に懸濁されたｓｓＯＲＮ（または誘導体）を含有する細かく分割された粉末を通常備えるであろう。噴射剤は、クロロフルオロカーボン、ハイドロクロロフルオロカーボン、ハイドロフルオロカーボン、または炭化水素等のこの目的のために利用される任意の従来の材料であってもよく、トリクロロフルオロメタン、ジクロロジフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタノール、および１，１，１，２−テトラフルオロエタン、またはそれらの組合せを含む。適した界面活性剤は、ソルビタントリオレエートおよびソーヤレシチンを含む。オレイン酸もまた界面活性剤として有用である可能性がある。
【０１３８】
粉末吸入器装置から分注するための製剤は、ｓｓＯＲＮ（または誘導体）を含有する細かく分割された乾燥粉末を備えるであろう、そして、製剤はまた、装置からの粉末の散布を容易にする量、たとえば製剤の重量の５０〜９０％で、ラクトース、ソルビトール、スクロース、またはマンニトール等の充填剤も含んでいてもよい。ｓｓＯＲＮ（または誘導体）は、遠位の肺への最も有効な送達のために、１０μｍ（ミクロン）未満、最も好ましくは０．５〜５μｍの平均粒径を有する微粒子の形態で最も有利に調製されるべきである。
【０１３９】
本発明の医薬組成物の鼻送達もまた企図される。鼻送達は、肺における産物の蓄積の必要性がなければ、治療産物を鼻へ投与した後、本発明の医薬組成物の血流への直接的な通過を可能にする。鼻送達のための製剤は、デキストランまたはシクロデキストランを有する製剤を含む。
【０１４０】
鼻投与については、有用な装置は、計量用量噴霧器が付加されている小さな硬いボトルである。一実施形態では、計量用量は、確定された容量のチャンバー中に本発明の溶液の医薬組成物を引き込むことにより送達され、チャンバーは、エアロゾル化するための寸法の口径およびチャンバー中の液体が圧縮された場合の噴霧の形成によるエアロゾル製剤を有する。チャンバーは、本発明の医薬組成物を投与するために圧縮される。特定の実施形態では、チャンバーはピストン機構である。上記装置は市販で入手可能である。
【０１４１】
あるいは、絞り出された場合に噴霧を形成することによりエアロゾル製剤をエアロゾル化するための寸法の口径または開口部を有するプラスチック絞り出しボトルが使用される。開口部は、ボトルの先端に普通提供され、先端は、エアロゾル製剤の効率的な投与のために鼻通路に部分的にフィットするために通常先細になっている。好ましくは、鼻吸入器は、正確に測った用量の薬剤の投与のために、計量された量のエアロゾル製剤を提供するであろう。
【０１４２】
化合物は、全身に送達することが望ましい場合、注射による、たとえば大量注射または継続注入による非経口投与のために製剤されてもよい。注射のための製剤は、単位剤形で、たとえばアンプル中または複数用量容器中に、追加された防腐薬と共に与えられてもよい。組成物は、油性または水性媒体中で、懸濁剤、水剤、または乳剤のような形態を取ってもよく、懸濁化剤、安定化剤、および／または分散剤等の調合剤を含有していてもよい。
【０１４３】
非経口投与のための医薬製剤は、水溶性形態での活性化合物の水性水剤を含む。さらに、活性化合物の懸濁剤は、適切な油性注射懸濁剤として調製されてもよい。適した親油性の溶媒または媒体は、ゴマ油等の脂肪油またはオレイン酸エチルもしくはトリグリセリド等の合成脂肪酸エステルまたはリポソームを含む。水性注射懸濁剤は、カルボキシルメチルセルロースナトリウム、ソルビトール、またはデキストラン等の、懸濁剤の粘度を増加させる物質を含有していてもよい。懸濁剤はまた、高度に濃縮された溶液の調製を考慮に入れるために化合物の溶解性を増加させる適した安定剤または作用物質を任意選択により含有していてもよい。
【０１４４】
あるいは、活性化合物は、使用前に、適した媒体、たとえば発熱性物質なしの滅菌水との構成のための粉末形態であってもよい。
【０１４５】
化合物はまた、たとえばカカオバターまたは他のグリセリド等の従来の坐剤基剤を含有する坐剤または保持浣腸剤等の直腸組成物または膣組成物中に製剤されてもよい。
【０１４６】
前に記載した製剤の他に、化合物はまた、デポ調製物として製剤されてもよい。上記長期作用性製剤は、適したポリマーのもしくは疎水性の材料（たとえば許容できる油中の乳剤として）もしくはイオン交換樹脂と、またはわずかに可溶性の誘導体として、たとえばわずかに可溶性の塩として製剤されてもよい。
【０１４７】
医薬組成物はまた、適した固体相もしくはゲル相の担体または賦形剤を備えていてもよい。上記担体または賦形剤の例は、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム、様々な糖、デンプン、セルロース誘導体、ゼラチン、およびポリエチレングリコール等のポリマーを含むが、これらに限定されない。
【０１４８】
適した液体または固体の医薬調製物形態は、たとえば、吸入のための水性または塩性の水剤、マイクロカプセル化、蝸牛状物化（ｅｎｃｏｃｈｌｅａｔｅｄ）、微視的金粒子上へのコーティング、リポソーム中への含有、霧状、エアロゾル、皮膚中への移植のためのペレット、または、皮膚中に引っ掻き入れるための鋭い物体上への乾燥である。医薬組成物はまた、顆粒、散剤、錠剤、コーティング錠、（マイクロ）カプセル剤、坐剤、シロップ剤、乳剤、懸濁剤、クリーム剤、滴剤、または遅延性放出の活性化合物を有する調製物も含み、これらの調製物では、崩壊剤、結合剤、コーティング剤、膨潤剤、潤滑剤、矯味剤、甘味料、または可溶化剤等の賦形剤および添加剤および／または佐剤は上記に記載されるように慣習的に使用される。医薬組成物は、様々な薬剤送達システムでの使用に適している。薬剤送達のための方法の簡単な概説については、本明細書中に参照により組み込まれるＬａｎｇｅｒ，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４９：１５２７−１５３３，１９９０を参照されたい。
【０１４９】
ｓｓＯＲＮおよび任意選択により他の治療用物質は、それ自体で（純粋）または薬学的に許容できる塩の形態で投与されてもよい。医薬で使用される場合、塩は、薬学的に許容できるものとするべきであるが、非薬学的に許容できる塩は、それらの薬学的に許容できる塩を調製するために好都合に使用されてもよい。上記塩は、以下の酸から調製されたものを含むが、これらに限定されない：塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸、マレイン酸、酢酸、サリチル酸、ｐ−トルエンスルホン酸、酒石酸、クエン酸、メタンスルホン酸、蟻酸、マロン酸、コハク酸、ナフタリン−２−スルホン酸、およびベンゼンスルホン酸。さらに、上記塩は、カルボン酸群のナトリウム塩、カリウム塩、またはカルシウム塩等のアルカリ金属塩またはアルカリ土類塩として調製することができる。
【０１５０】
適した緩衝薬は次のものを含む：酢酸および塩（１〜２重量／容量％）、クエン酸および塩（１〜３重量／容量％）、ホウ酸および塩（０．５〜２．５重量／容量％）、ならびにリン酸および塩（０．８〜２重量／容量％）。適した防腐薬は、塩化ベンザルコニウム（０．００３〜０．０３重量／容量％）、クロロブタノール（０．３〜０．９重量／容量％）、パラベン（０．０１〜０．２５重量／容量％）、およびチメロサール（０．００４〜０．０２重量／容量％）を含む。
【０１５１】
本発明の医薬組成物は、薬学的に許容できる担体中に含まれる有効量のｓｓＯＲＮおよび任意選択により１つまたは複数の追加の治療薬を含有する。
【０１５２】
ｓｓＯＲＮを特に含むが、これに限定されない治療薬（複数可）は、粒子中に提供されてもよい。本明細書中に使用される粒子は、本明細書中に記載されるｓｓＯＲＮまたは他の治療薬（複数可）から全体的にまたは部分的になり得るナノ粒子または微小粒子（またはいくつかの例ではより大きい）を意味する。粒子は、腸溶コーティングを含むが、これに限定されないコーティングに包囲されたコア中に治療薬（複数可）を含有していてもよい。治療薬（複数可）はまた、粒子の全体にわたって分散していてもよい。治療薬（複数可）はまた、粒子中に吸着されていてもよい。粒子は、ゼロ次放出、１次放出、２次放出、遅延放出、持続放出、即時放出、およびそれらの任意の組合せ等を含む任意の順序の放出動態であってもよい。粒子は、治療薬（複数可）の他に、薬学および医学の当技術分野で慣例的に使用される任意のそれらの材料を含んでいてもよく、浸食性、非浸食性、生分解性、もしくは非生分解性の材料またはそれらの組合せを含むが、これらに限定されない。粒子は、溶液または半固体状態中にｓｓＯＲＮを含有するマイクロカプセルであってもよい。粒子は、事実上任意の形状であってもよい。
【０１５３】
非生分解性および生分解性のポリマー材料の両方は、治療薬（複数可）の送達のための粒子の製造に使用することができる。上記ポリマーは、天然または合成ポリマーであってもよい。ポリマーは、放出が所望される時間に基づいて選択される。特に興味のある生体接着性ポリマーは、Ｈ．Ｓ．Ｓａｗｈｎｅｙ、Ｃ．Ｐ．Ｐａｔｈａｋ、およびＪ．Ａ．ＨｕｂｅｌｌによりＭａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ、（１９９３）２６：５８１−５８７中に記載される生浸食性ヒドロゲルを含み、その教示は本明細書中に組み込まれる。これらは、ポリヒアルロン酸、カゼイン、ゼラチン、グルチン、ポリアンヒドリド、ポリアクリル酸、アルギン酸、キトサン、ポリ（メタクリル酸メチル）、ポリ（メタクリル酸エチル）、ポリ（メタクリル酸ブチル）、ポリ（メタクリル酸イソブチル）、ポリ（メタクリル酸ヘキシル）、ポリ（メタクリル酸イソデシル）、ポリ（メタクリル酸ラウリル）、ポリ（メタクリル酸フェニル）、ポリ（アクリル酸メチル）、ポリ（アクリル酸イソプロピル）、ポリ（アクリル酸イソブチル）、およびポリ（アクリル酸オクタデシル）を含む。
【０１５４】
治療薬（複数可）は制御放出系中に含有されていてもよい。用語「制御放出」は、製剤からの薬剤放出の様式およびプロファイルが制御される任意の薬剤含有製剤を指すことを意図する。これは、持続放出製剤および遅延放出製剤を含むが、これらに限定されない非即時放出製剤と共に、即時放出製剤および非即時放出製剤を指す。用語「持続放出」（「長期放出」とも称される）は、長期間にわたる薬剤の緩やかな放出を提供し、好ましくは、必ずではないが、長期間にわたり薬剤の実質的に一定の血中レベルをもたらす薬剤製剤を指すよう、その従来の意味で使用される。「遅延放出」という用語は、製剤の投与およびそれからの薬剤の放出の間に時間遅延がある薬剤製剤を指すようその従来の意味で使用される。「遅延放出」は、長期間にわたる薬剤の緩やかな放出を伴っていても、伴っていなくてもよく、したがって、「持続放出」であっても、なくてもよい。
【０１５５】
長期持続放出移植片の使用は慢性状態の治療に特に適している可能性がある。「長期」放出は、本明細書中に使用されるように、移植片が、少なくとも７日間、好ましくは３０〜６０日間、治療レベルの活性要素を送達するよう構築され、配置されることを意味する。長期持続放出移植片は、当業者によく知られており、上記に記載されるいくつかの放出系を含む。
【０１５６】
本発明は、以下の実施例によりさらに例示され、実施例は、さらに限定するものとして解釈されるべきでは決してない。本出願の全体にわたって引用されたすべての引用文の全内容（文献引用文、発行された特許、公開された特許出願、および同時係属中の特許出願を含む）は参照により本明細書中に明確に組み込まれる。
【実施例】
【０１５７】
（実施例１）
一本鎖ホスホジエステルＲＮＡのＴＬＲ７非依存性の認識
末梢血単核球を野性型マウスおよびＴＬＲ７−／−マウスから単離し、適した増殖培地中に移し、次いで、マルチウェル培養皿の個々のウェル中に別々に等分した。以下の作用物質を細胞の個々のウェルに追加した：ＲＮＡ６３ ＰＤ、５’−ＣＡＧＧＵＣＵＧＵＧＡＵ−３’（配列番号１）として提供されるヌクレオチド配列を有する一本鎖ＯＲＮ、すべてヌクレオチド間連結は、ＯＲＮの３’末端におけるＡおよびＵの間のホスホロチオエート連結を除いてホスホジエステルである；ＲＮＡ６３ ＰＴＯ、配列番号１と同一のヌクレオチド配列を有する一本鎖ＯＲＮ、どのヌクレオチド間連結もホスホロチオエートである；ＣｐＧ−ＯＤＮ １６６８、５’−ＴＣＣＡＴＧＡＣＧＴＴＣＣＴＧＡＴＧＣＴ−３’（配列番号２）として提供されるヌクレオチド配列を有するオリゴデオキシヌクレオチド；ＤＯＴＡＰのみ；Ｒ−８４８；ＲＮＡ６３ ＰＴＯプラスＤＯＴＡＰ；ＲＮＡ６３ ＰＤプラスＤＯＴＡＰ；および培地のみ。細胞を培養で２４時間維持し、次いで、個々のウェルからの上清を収集し、ＩＬ−１２ｐ４０に対して特異的な酵素連結免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）を使用して分析した。結果を図２に示す。データを平均±ＳＥＭとして示す。
【０１５８】
図２に示されるように、ＲＮＡ６３ ＰＤおよびＲＮＡ６３ ＰＴＯの両方は、ＤＯＴＡＰと共に追加された場合、野性型細胞においてＩＬ−１２ｐ４０を誘発した。しかしながら、対照的に、ＲＮＡ６３ ＰＴＯではなくＲＮＡ６３ ＰＤは、ＤＯＴＡＰと共に追加された場合、ＴＬＲ７−／−細胞においてＩＬ−１２ｐ４０を誘発した。この後者の結果は、ホスホロチオエートバックボーンではなくホスホジエステルバックボーンを有する一本鎖ＯＲＮはＴＬＲ７非依存性の様式で免疫活性化を誘発するという見解を支持する。
【０１５９】
（実施例２）
ＲＮＡ６３ ＰＤは、ＴＬＲ７−／−マウスからのＦＬＴ３−Ｌ誘発性樹状細胞において、用量依存的な様式でＩＬ−１２ｐ４０を誘発し、ＩＬ−６およびＩＦＮ−αもまた誘発する
ＦＬＴ３−Ｌ誘発性樹状細胞を野性型マウスおよびＴＬＲ７−／−マウスから調製し、種々の量のＲＮＡ６３ ＰＤまたはＲＮＡ６３ ＰＴＯの存在下で、それぞれＤＯＴＡＰと共に培養する。２４時間の培養の後、上清を収集し、ＩＬ−１２ｐ４０、ＩＬ−６、およびＩＦＮ−αについてＥＬＩＳＡにより分析した。ＬＰＳ、Ｒ−８４８、ＣｐＧ−ＯＤＮ １６６８、ＣｐＧ−ＯＤＮ ２２１６（５’−ＧＧＧＧＧＡＣＧＡＴＣＧＴＣＧＧＧＧＧ−３’、配列番号３）、ＤＯＴＡＰのみ、および培地のみを対照として実施した。結果を図３に示す。データを平均±ＳＥＭとして示す。
【０１６０】
図中に示されるように、ＲＮＡ６３ ＰＤおよびＲＮＡ６３ ＰＴＯの両方は、それぞれＤＯＴＡＰの存在下で、著しい量のＩＬ−１２ｐ４０（図３Ａ）、ＩＬ−６（図３Ｂ）、およびＩＦＮ−α（図３Ｃ）を野性型樹状細胞において誘発した。しかしながら、対照的に、ＲＮＡ６３ ＰＴＯではなくＲＮＡ６３ ＰＤは、ＤＯＴＡＰと共に追加された場合、ＴＬＲ７−／−樹状細胞において、ＩＬ−１２ｐ４０を誘発し、それほど強くはなかったがＩＬ−６およびＩＦＮ−αの両方を誘発した。ＴＬＲ７−／−樹状細胞におけるＲＮＡ６３ ＰＤにより誘発されたＩＬ−１２ｐ４０の量は、ＲＮＡ６３ ＰＤの濃度に比例して変動した。
【０１６１】
（実施例３）
ＲＮＡ６３ ＰＴＯではなくＲＮＡ６３ ＰＤは、ＴＬＲ７−／−マウスからのＦＬＴ３−Ｌ誘発性樹状細胞上にＣＤ６９を誘発する
ＦＬＴ３−Ｌ誘発性樹状細胞を野性型マウスおよびＴＬＲ７−／−マウスから調製し、２４時間、ＲＮＡ６３ ＰＤまたはＲＮＡ６３ ＰＴＯの存在下で、それぞれＤＯＴＡＰと共に、実施例２におけるように培養した。２４時間の培養の後、細胞を収集し、ＦＡＣＳによりＣＤ６９について分析した。結果を図４に示す。
【０１６２】
図４に示されるように、ＲＮＡ６３ ＰＤおよびＲＮＡ６３ ＰＴＯの両方は、それぞれＤＯＴＡＰの存在下で、著しい量のＣＤ６９を野性型樹状細胞において誘発した（左２つのパネル）。しかしながら、対照的に、ＲＮＡ６３ ＰＴＯではなくＲＮＡ６３ ＰＤは、ＤＯＴＡＰと共に追加された場合、ＴＬＲ７−／−樹状細胞上でＣＤ６９を誘発した（右２つのパネル）。
【０１６３】
（実施例４）
ＲＮＡ６３ ＰＴＯではなくＲＮＡ６３ ＰＤは、ＴＬＲ７−／−マウスからのＭ−ＣＳＦ誘導性マクロファージおよびＧＭ−ＣＳＦ誘導性樹状細胞においてＩＬ−１２ｐ４０を誘発する
Ｍ−ＣＳＦ誘導性マクロファージおよびＧＭ−ＣＳＦ誘導性樹状細胞を野性型マウスおよびＴＬＲ７−／−マウスから調製し、２４時間、ＲＮＡ６３ ＰＤプラスＤＯＴＡＰ、ＲＮＡ６３ ＰＴＯプラスＤＯＴＡＰの存在下で培養した。ＬＰＳ、Ｒ−８４８、ＣｐＧ−ＯＤＮ １６６８、ＣｐＧ−ＯＤＮ ２２１６、ＤＯＴＡＰのみ、または培地のみ。次いで、培養上清を収集し、ＥＬＩＳＡを使用してＩＬ−１２ｐ４０について分析した。結果を図５に示す。データを平均±ＳＥＭとして示す。
【０１６４】
図５に示されるように、ＲＮＡ６３ ＰＤおよびＲＮＡ６３ ＰＴＯの両方は、それぞれＤＯＴＡＰの存在下で、野性型マウスからのＭ−ＣＳＦ誘導性マクロファージおよびＧＭ−ＣＳＦ誘導性樹状細胞の両方において著しい量のＩＬ−１２ｐ４０を誘発する。しかしながら、対照的に、ＲＮＡ６３ ＰＴＯではなくＲＮＡ６３ ＰＤは、ＤＯＴＡＰと共に追加された場合、ＴＬＲ７−／−Ｍ−ＣＳＦ誘導性マクロファージおよびＴＬＲ７−／−ＧＭ−ＣＳＦ誘導性樹状細胞において著しい量のＩＬ−１２ｐ４０を誘発した。
【０１６５】
（実施例５）
一本鎖ホスホジエステルＲＮＡのＴＬＲ７非依存性の認識はＭｙＤ８８依存性である
ＦＬＴ３−Ｌ誘発性樹状細胞を、野性型マウス、ＴＬＲ７−／−マウス、およびＭｙＤ８８−／−マウスから別々に調製し、２４時間、ＲＮＡ６３ ＰＤまたはＲＮＡ６３ ＰＴＯの存在下で、それぞれＤＯＴＡＰと共に、実施例２におけるように培養した。２４時間の培養の後、細胞を収集し、ＩＬ−１２ｐ４０についてはＥＬＩＳＡによりおよびＣＤ６９についてはＦＡＣＳにより分析した。結果を図６に示す。
【０１６６】
図６に示されるように、ＩＬ−１２ｐ４０およびＣＤ６９の誘発は、ＭｙＤ８８−／−樹状細胞において、ＲＮＡ６３ ＰＤについておよびＲＮＡ６３ ＰＴＯについて同様に非存在であった。
【０１６７】
（実施例６）
ｓｓＲＮＡ駆動性ＴＬＲ７非依存性免疫刺激作用は、ＴＬＲ９およびＴＬＲ８に依存性である
ｓｓＲＮＡ駆動性ＴＬＲ７非依存性免疫刺激作用はＭｙＤ８８およびエンドソーム成熟に依存性であるので、他の細胞内ＴＬＲが関与することが仮定された。ＴＬＲ３は、ＭｙＤ８８ではなくアダプタ分子ＴＲＩＦに主に頼るので、ｓｓＲＮＡの認識についての候補になりそうにないように思われる（Ｈｏｅｂｅ，Ｄｕら ２００３）。しかしながら、ｓｓＲＮＡに対する受容体としてＴＬＲ３を除外するために、ＴＬＲ３欠損マウスおよびＴＬＲ７欠損マウスを交雑し、ＴＬＲ３／ＴＬＲ７二重欠損マウスを得、これらのマウスからの免疫細胞をｓｓＲＮＡ刺激作用について試験した。これらの実験の結果は、ＴＬＲ３／ＴＬＲ７二重欠損ＦＬＴ３−Ｌ誘発性ＤＣにおけるＲＮＡ６３駆動性のＩＬ−１２ｐ４０生産およびＣＤ６９アップレギュレーションはなお機能的であることを示し、ＴＬＲ７非依存性の様式でのｓｓＲＮＡの認識におけるＴＬＲ３の関与の欠如を示唆した。ＴＬＲ７／ＴＬＲ９二重欠損マウスもまた、ＲＮＡ６３認識におけるＴＬＲ９の関与を調査するために産生した。興味深いことには、ＴＬＲ７／ＴＬＲ９二重欠損ＧＭ−ＣＳＦ誘導性ＤＣおよび選別されたｍＤＣは、ＩＬ−１２ｐ４０を生産せずかつＣＤ６９をアップレギュレートせず、ＴＬＲ７非依存性様式でのｓｓＲＮＡの認識におけるＴＬＲ９の関与を示唆した。全体として、これらのデータは、ＴＬＲ９が、ｓｓＲＮＡに交差反応性であり、ｓｓＲＮＡの免疫刺激作用を媒介するということを示唆する。
【０１６８】
（実施例７）
ホスホジエステルｓｓＲＮＡの認識におけるＴＬＲ９の役割
ＰＤ ｓｓＲＮＡの認識におけるＴＬＲ９の役割をさらに調査するために、ＰＴＯバックボーンと共に合成した場合にネズミ細胞において活性でいないとして以前に記載された（Ｈｅｉｌ，Ｈｅｍｍｉら ２００４）ＲＮＡ４１（５’−ＧＣＣＣＧＡＣＡＧＡＡＧＡＧＡＧＡＣＡＣ−３；配列番号４）およびＲＮＡ４２（５’−ＡＣＣＣＡＵＣＵＡＵＵＡＵＡＵＡＡＣＵＣ−３；配列番号５）等の様々なＲＮＡ配列を合成した。ＰＴＯバックボーンまたはＰＤバックボーンを有するＯＲＮの刺激性の性能を比較すると、ＲＮＡ４１ ＰＤおよびＲＮＡ４２ ＰＤは、ネズミ細胞において、ＩＬ−１２ｐ４０、ＩＬ−６、およびＩＦＮ−αをＴＬＲ７非依存的に刺激し、ヒトＰＢＭＣにおいてＴＮＦ−αを刺激する（ＩＦＮ−αは刺激しない）のに対して、対応するＰＴＯ修飾ＯＲＮは不活性であることが観察された。興味深いことには、野性型ｍＤＣ、ＴＬＲ７欠損ｍＤＣ、またはＴＬＲ９欠損ｍＤＣがＲＮＡ４１ ＰＤおよびＲＮＡ４２ ＰＤで刺激された場合、ＴＬＲ９欠損細胞は、ＩＬ−１２ｐ４０を生産せず、ＴＬＲ７ではなくＴＬＲ９が、非Ｇ／ＵリッチｓｓＲＮＡ分子の認識において関与することを示唆した。対照的に、ＧＵリッチＲＮＡ４０（５’−ＧＣＣＣＧＵＣＵＧＵＵＧＵＧＵＧＡＣＵＣ−３；配列番号６）は、ＴＬＲ７単一欠損細胞およびＴＬＲ９単一欠損細胞においていくらかのＩＬ−１２ｐ４０を誘発し、ＴＬＲ７またはＴＬＲ９がｓｓＲＮＡ受容体として機能することができることを示唆した。ｐＤＣは、ＧＵリッチＲＮＡをＴＬＲ７依存的に認識したが、驚いたことに、ＴＬＲ７単一欠損細胞またはＴＬＲ９単一欠損細胞は反応しなかったけれども、非ＧＵリッチＯＲＮ ＲＮＡ４１およびＲＮＡ４２もまた野性型細胞により認識され、ＴＬＲ７／ＴＬＲ９複合体が非ＧＵリッチＲＮＡの認識において関与することを示唆した。
【０１６９】
（実施例８）
ホスホジエステルｓｓＲＮＡの認識におけるＴＬＲ８の役割
ｍＴＬＲ８特異的ｓｉＲＮＡを使用して、ＴＬＲ８がｓｓＲＮＡの認識において関与していることを実証した。野性型ＦＬＴ３−Ｌ誘発性ＤＣを、ＴＬＲ８特異的ｓｉＲＮＡまたはｅＧＦＰに対する対照ｓｉＲＮＡと共に処理し、ＣｐＧ−ＯＤＮ、ＲＮＡ４０ ＰＤ、ＲＮＡ４１ ＰＤ、およびＲＮＡ４２ ＰＤで刺激した。ｍＴＬＲ８特異的ｓｉＲＮＡ処理細胞は、ＲＮＡ４１およびＲＮＡ４２の刺激作用の際のＩＬ−１２分泌において７５％または５０％の低下をそれぞれ示した。ＲＮＡ４０駆動性免疫刺激作用はｍＴＬＲ７に極めて依存性であるので、ＲＮＡ４０刺激作用はｍＴＬＲ８特異的ｓｉＲＮＡにより影響を及ぼされなかった。対照ｅＧＦＰ特異的ｓｉＲＮＡはＩＬ−１２生産に阻害効果を有さず、ＩＬ−１２値は、非ｓｉＲＮＡ移入細胞の刺激作用と一致した。ＴＬＲ７非依存性ｓｓＲＮＡ駆動性免疫刺激作用へのＴＬＲ８の関与をさらに評価するために、ＴＬＲ７欠損ＦＬＴ３−Ｌ誘発性ＤＣにｍＴＬＲ８特異的ｓｉＲＮＡまたはｅＧＦＰ特異的ｓｉＲＮＡを移入し、ＲＮＡ６３誘発性ＩＬ−１２ｐ４０生産を定量した。ｍＴＬＲ８特異的ｓｉＲＮＡで処理したＤＣは、ＩＬ−１２ｐ４０生産における強い低下およびＣＤ４０等の活性化マーカーのダウンレギュレーションを示したのに対して、ｅＧＦＰ特異的ｓｉＲＮＡは効果を有していなかった。ＲＮＡ６３駆動性免疫活性化の低下は、ｍＴＬＲ８ ＲＮＡのｓｉＲＮＡ駆動性ダウンレギュレーションと相互に関連した。まとめると、これらのデータは、ＴＬＲ８がｓｓＲＮＡの認識において関与することを実証する。
【０１７０】
（実施例９）
ＴＬＲ８／ＴＬＲ９ヘテロ二量体はｓｓＲＮＡ認識を媒介する
ＴＬＲ８およびＴＬＲ９はｓｓＲＮＡの認識において関与するので、両方の受容体が協力し、ｓｓＲＮＡ認識を媒介するために複合体を形成するかどうかを調査した。タグ付きＴＬＲのＨＥＫ２９３細胞中への移入、続く免疫沈降およびウエスタンブロットにより、ＴＬＲ８フラグはｍＴＬＲ９−ＨＡと関連することが示され、その逆も成立したのに対して、細胞内ＴＬＲ３およびＴＬＲ９は相互作用しなかった。
【０１７１】
均等物
前述の明細書は、当業者が本発明を実施することを可能にするのに十分であると考えられる。実施例は、本発明の一態様のただ１つの例証として意図され、他の機能的に等価な実施形態は本発明の範囲内にあるので、本発明は提供された実施例による範囲中に限定されるものではない。本明細書中に記載され、示されたものの他に、本発明の様々な修飾は、前述の記載から当業者に明らかになり、添付された請求項の範囲内に入るであろう。本発明の利点および目的は、本発明の各実施形態により必ずしも包含されるものではない。
【図面の簡単な説明】
【０１７２】
【技術分野】
【０００１】
リボ核酸（ＲＮＡ）は、治療用物質としてのその新たに認識された可能性のために、最近、強く関心のある的であった。たとえば、通常約２１〜２３のヌクレオチド長のある種の配列特異的二本鎖ＲＮＡは、選択的な様式で、ＲＮＡ干渉（ＲＮＡｉ）または転写後遺伝子サイレンシングと呼ばれるプロセスで、遺伝子発現を発現停止させるために使用することができることが最近報告された。この種類のＲＮＡ干渉に使用される二本鎖ＲＮＡは、特にいわゆる低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）を含む。Ｈａｎｎｏｎ ＧＪ（２００２）Ｎａｔｕｒｅ ４１８：２４４−５１。対照的に、配列非特異的二本鎖ＲＮＡは、Ｔｏｌｌ様受容体３（ＴＬＲ３）を介して作用して、免疫刺激効果を誘発することができることも最近報告された。Ａｌｅｘｏｐｏｕｌｏｕ Ｌら（２００１）Ｎａｔｕｒｅ ４１３：７３２−８。さらに、通常グアノシン（Ｇ）およびウリジン（Ｕ）を含みかつある種の配列モチーフを特に含むある種の一本鎖ＲＮＡもまた免疫刺激性であることも最近報告された。Ｌｉｐｆｏｒｄら ＵＳ２００３／０２３２０７４Ａ１。免疫刺激性一本鎖ＲＮＡは、Ｔｏｌｌ様受容体７（ＴＬＲ７）およびＴｏｌｌ様受容体８（ＴＬＲ８）を介して作用することが報告された。
【０００２】
ＴＬＲ３、ＴＬＲ７、およびＴＬＲ８とのＲＮＡの相互作用を介して起こる免疫刺激作用の他に、ある種のシトシン−グアニンジヌクレオチド（ＣｐＧ）含有核酸分子、特にＣｐＧ含有デオキシリボ核酸（ＤＮＡ）は、Ｔｏｌｌ様受容体９（ＴＬＲ９）との相互作用を介してそれらの免疫刺激効果を発揮することが報告された。Ｈｅｍｍｉ Ｈら（２０００）Ｎａｔｕｒｅ ４０８：７４０−５。ＴＬＲ７、ＴＬＲ８、およびＴＬＲ９はすべてＭｙＤ８８依存性の様式でシグナルを送る。
【背景技術】
【０００３】
それらの糖リン酸バックボーン中に天然発生のホスホジエステルヌクレオチド間連結を有するデオキシリボ核酸分子およびましてリボ核酸分子はヌクレアーゼ媒介性の分解に感受性である。臨床的な使用のために、免疫刺激性核酸が合成オリゴヌクレオチドとして調製されることがよくあるということから、これらの免疫刺激性合成オリゴヌクレオチドは、それらの糖リン酸バックボーン中に１つまたは複数の安定したヌクレオチド間連結を含むことがよくある。一般に使用される安定したヌクレオチド間連結はホスホロチオエートである。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
驚いたことに、ホスホロチオエートバックボーンではなくホスホジエステルバックボーンを有する一本鎖ＲＮＡが、ＴＬＲ７またはＴＬＲ８以外のＭｙＤ８８依存性Ｔｏｌｌ様受容体を介して少なくとも部分的に免疫活性化を刺激することが本発明によって今や発見された。この免疫応答を担うＭｙＤ８８依存性Ｔｏｌｌ様受容体は、推定上ＴＬＲ９とされる。
【０００５】
ＣｐＧ媒介性免疫活性化は、ＴＬＲ９を介して作用して、先天性免疫の活性化を伴い、Ｔｈ１免疫応答またはＴｈ１様免疫応答への免疫応答の傾斜をもたらす。したがって、ＣｐＧオリゴヌクレオチドは、Ｔｈ１免疫応答の刺激作用が所望される、たとえば癌、感染、アレルギー、および喘息といった疾患の治療での使用のためのアジュバントとしておよび活性剤として有用であることが報告された。
【０００６】
それに応じて、驚いたことに、ホスホジエステルバックボーンを有し、前に記載される免疫刺激性一本鎖ＲＮＡのＣｐＧも配列特異的特徴もどちらも有していない一本鎖ＲＮＡが、ＴＬＲ９媒介性免疫系活性化を必要とする任意の用途において使用することができることが本発明によって今や発見された。上記用途は、限定を伴うことなく、癌、感染、アレルギー、または喘息を有する対象の治療を含む。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
一態様では、本発明は、対象におけるＴｈ１様免疫応答を誘発する方法である。本発明のこの態様による方法は、有効量の５〜１００のヌクレオチド長の免疫刺激性一本鎖オリゴリボヌクレオチド（ｓｓＯＲＮ）を対象に投与するステップを含み、免疫刺激性ｓｓＯＲＮは、ホスホジエステルバックボーンを有し、かつ
（１）グアノシン（Ｇ）がない、または
（２）少なくとも１つのＧを備えるヌクレオチド配列を備え、ただし、ヌクレオチド配列が少なくとも１つのＧを備える場合、ヌクレオチド配列は、
（ａ）ウリジン（Ｕ）がなく、
（ｂ）ＣｐＧモチーフＸ１Ｘ２ＣＧＸ３Ｘ４がなく、式中、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、およびＸ４はヌクレオチドであり、ＣＧはシトシン（Ｃ）−グアニン（Ｇ）ジヌクレオチドであり、ＣＧジヌクレオチドのＣはメチル化されておらず、
ただし、免疫刺激性ｓｓＯＲＮは、二本鎖リボ核酸（ＲＮＡ）分子の一部分として存在しない。
【０００８】
一態様では、本発明は、対象における抗原特異的応答を誘発する方法である。本発明のこの態様による方法は、対象に抗原を投与するステップおよび有効量の５〜１００のヌクレオチド長の免疫刺激性一本鎖オリゴリボヌクレオチド（ｓｓＯＲＮ）を対象に投与するステップを含み、免疫刺激性ｓｓＯＲＮは、ホスホジエステルバックボーンを有し、かつ
（１）グアノシン（Ｇ）がない、または
（２）少なくとも１つのＧを備えるヌクレオチド配列を備え、ただし、ヌクレオチド配列が少なくとも１つのＧを備える場合、ヌクレオチド配列は、
（ａ）ウリジン（Ｕ）がなく、
（ｂ）ＣｐＧモチーフＸ１Ｘ２ＣＧＸ３Ｘ４がなく、式中、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、およびＸ４はヌクレオチドであり、ＣＧはシトシン（Ｃ）−グアニン（Ｇ）ジヌクレオチドであり、ＣＧジヌクレオチドのＣはメチル化されておらず、
ただし、免疫刺激性ｓｓＯＲＮは、二本鎖リボ核酸（ＲＮＡ）分子の一部分として存在しない。
【０００９】
一態様では、本発明は、癌を有する対象を治療する方法である。本発明のこの態様による方法は、有効量の５〜１００のヌクレオチド長の免疫刺激性一本鎖オリゴリボヌクレオチド（ｓｓＯＲＮ）を対象に投与するステップを含み、免疫刺激性ｓｓＯＲＮは、ホスホジエステルバックボーンを有し、かつ
（１）グアノシン（Ｇ）がない、または
（２）少なくとも１つのＧを備えるヌクレオチド配列を備え、ただし、ヌクレオチド配列が少なくとも１つのＧを備える場合、ヌクレオチド配列は、
（ａ）ウリジン（Ｕ）がなく、
（ｂ）ＣｐＧモチーフＸ１Ｘ２ＣＧＸ３Ｘ４がなく、式中、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、およびＸ４はヌクレオチドであり、ＣＧはシトシン（Ｃ）−グアニン（Ｇ）ジヌクレオチドであり、ＣＧジヌクレオチドのＣはメチル化されておらず、
ただし、免疫刺激性ｓｓＯＲＮは、二本鎖リボ核酸（ＲＮＡ）分子の一部分として存在しない。
【００１０】
一態様では、本発明は、感染症を有する対象を治療する方法である。本発明のこの態様による方法は、有効量の５〜１００のヌクレオチド長の免疫刺激性一本鎖オリゴリボヌクレオチド（ｓｓＯＲＮ）を対象に投与するステップを含み、免疫刺激性ｓｓＯＲＮは、ホスホジエステルバックボーンを有し、かつ
（１）グアノシン（Ｇ）がない、または
（２）少なくとも１つのＧを備えるヌクレオチド配列を、備え、ただしヌクレオチド配列が少なくとも１つのＧを備える場合、ヌクレオチド配列は、
（ａ）ウリジン（Ｕ）がなく、
（ｂ）ＣｐＧモチーフＸ１Ｘ２ＣＧＸ３Ｘ４がなく、式中、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、およびＸ４はヌクレオチドであり、ＣＧはシトシン（Ｃ）−グアニン（Ｇ）ジヌクレオチドであり、ＣＧジヌクレオチドのＣはメチル化されておらず、
ただし、免疫刺激性ｓｓＯＲＮは、二本鎖リボ核酸（ＲＮＡ）分子の一部分として存在しない。
【００１１】
一態様では、本発明は、アレルギー状態を有する対象を治療する方法である。本発明のこの態様による方法は、有効量の５〜１００のヌクレオチド長の免疫刺激性一本鎖オリゴリボヌクレオチド（ｓｓＯＲＮ）を対象に投与するステップを含み、免疫刺激性ｓｓＯＲＮは、ホスホジエステルバックボーンを有し、かつ
（１）グアノシン（Ｇ）がない、または
（２）少なくとも１つのＧを備えるヌクレオチド配列を備え、ただし、ヌクレオチド配列が少なくとも１つのＧを備える場合、ヌクレオチド配列は、
（ａ）ウリジン（Ｕ）がなく、
（ｂ）ＣｐＧモチーフＸ１Ｘ２ＣＧＸ３Ｘ４がなく、式中、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、およびＸ４はヌクレオチドであり、ＣＧはシトシン（Ｃ）−グアニン（Ｇ）ジヌクレオチドであり、ＣＧジヌクレオチドのＣはメチル化されておらず、
ただし、免疫刺激性ｓｓＯＲＮは、二本鎖リボ核酸（ＲＮＡ）分子の一部分として存在しない。
【００１２】
一態様では、本発明は、喘息を有する対象を治療する方法である。本発明のこの態様による方法は、有効量の５〜１００のヌクレオチド長の免疫刺激性一本鎖オリゴリボヌクレオチド（ｓｓＯＲＮ）を対象に投与するステップを含み、免疫刺激性ｓｓＯＲＮは、ホスホジエステルバックボーンを有し、かつ
（１）グアノシン（Ｇ）がない、または
（２）少なくとも１つのＧを備えるヌクレオチド配列を備え、ただし、ヌクレオチド配列が少なくとも１つのＧを備える場合、ヌクレオチド配列は、
（ａ）ウリジン（Ｕ）がなく、
（ｂ）ＣｐＧモチーフＸ１Ｘ２ＣＧＸ３Ｘ４がなく、式中、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、およびＸ４はヌクレオチドであり、ＣＧはシトシン（Ｃ）−グアニン（Ｇ）ジヌクレオチドであり、ＣＧジヌクレオチドのＣはメチル化されておらず、
ただし、免疫刺激性ｓｓＯＲＮは、二本鎖リボ核酸（ＲＮＡ）分子の一部分として存在しない。
【００１３】
一実施形態では、免疫刺激性ｓｓＯＲＮは５〜４０のヌクレオチド長である。
【００１４】
一実施形態では、免疫刺激性ｓｓＯＲＮは５〜２０のヌクレオチド長である。
【００１５】
一実施形態では、免疫刺激性ｓｓＯＲＮは５〜１２のヌクレオチド長である。
【００１６】
一実施形態では、免疫刺激性ｓｓＯＲＮは合成ｓｓＯＲＮである。
【００１７】
一実施形態では、免疫刺激性ｓｓＯＲＮは、ポリＵ、ポリＧ、ポリＡ、またはポリＣからなる群から選択されるポリヌクレオチドではない。
【００１８】
一実施形態では、有効量の免疫刺激性ｓｓＯＲＮの対象への投与は、有効量の免疫刺激性ｓｓＯＲＮの対象への全身的投与である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１９】
免疫応答は、先天性免疫および適応免疫に概念的に分類される。先天性免疫は、感染性微生物により発現された分子または外来性巨大分子のある種のクラスにより共通して共有される病原体関連分子パターン（ＰＡＭＰ）の認識を伴うと考えられる。ＰＡＭＰは、ある種の免疫細胞上のパターン認識受容体（ＰＲＲ）により認識されると考えられる。
【００２０】
Ｔｏｌｌ様受容体（ＴＬＲ）は、哺乳動物における先天性免疫に決定的な役割を果たす高度に保存されたポリペプチドのファミリーである。現在、ＴＬＲ１〜ＴＬＲ１０と命名された１０個のファミリーメンバーが同定されている。様々なＴＬＲの細胞質ドメインは、Ｔｏｌｌインターロイキン１（ＩＬ−１）受容体（ＴＩＲ）ドメインにより特徴づけられる。Ｍｅｄｚｈｉｔｏｖ Ｒら（１９９８）Ｍｏｌ Ｃｅｌｌ ２：２５３−８。ＴＬＲによる微生物侵襲の認識は、ショウジョウバエおよび哺乳動物において進化的に保存されているシグナリングカスケードの活性化のきっかけとなる。ＴＩＲドメイン含有アダプタタンパク質ＭｙＤ８８は、多くのＴＬＲと会合し、ＩＬ−１受容体関連キナーゼ（ＩＲＡＫ）および腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）受容体関連因子６（ＴＲＡＦ６）をＴＬＲに動員することが報告された。ＭｙＤ８８依存性シグナリング経路は、免疫活性化の決定的なステップである、ＮＦ−ＫＢ転写因子およびｃ−Ｊｕｎ ＮＨ２末端キナーゼ（Ｊｎｋ）マイトジェン活性化タンパク質キナーゼ（ＭＡＰＫ）の活性化、ならびに炎症性サイトカインの生産をもたらすと考えられる。概説については、Ａｄｅｒｅｍ Ａら（２０００）Ｎａｔｕｒｅ ４０６：７８２−８７を参照されたい。
【００２１】
多くの特異的なＴＬＲリガンドが報告されている一方、同定すべき、いくつかのＴＬＲに対するリガンドが残っている。ＴＬＲ２に対するリガンドは、ペプチドグリカンおよびリポペプチドを含む。Ｙｏｓｈｉｍｕｒａ Ａら（１９９９）Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ １６３；１−５；Ａｌｉｐｒａｎｔｉｓ ＡＯら（１９９９）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２８５：７３６−９。ウイルス由来二本鎖ＲＮＡ（ｄｓＲＮＡ）およびｄｓＲＮＡの合成類似体であるポリＩ：Ｃは、ＴＬＲ３のリガンドであることが報告された。Ａｌｅｘｏｐｏｕｌｏｕ Ｌら（２００１）Ｎａｔｕｒｅ ４１３：７３２−８。リポ多糖（ＬＰＳ）はＴＬＲ４に対するリガンドである。Ｐｏｌｔｏｒａｋ Ａら（１９９８）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２８２：２０８５−８；Ｈｏｓｈｉｎｏ Ｋら（１９９９）Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ １６２：３７４９−５２。細菌フラジェリンはＴＬＲ５に対するリガンドである。Ｈａｙａｓｈｉ Ｆら（２００１）Ｎａｔｕｒｅ ４１０：１０９９−１１０３。ペプチドグリカンは、ＴＬＲ２だけではなくＴＬＲ６に対するリガンドであることが報告された。Ｏｚｉｎｓｋｙ Ａら（２０００）Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ ９７：１３７６６−７１；Ｔａｋｅｕｃｈｉ Ｏら（２００１）Ｉｎｔ Ｉｍｍｕｎｏｌ １３：９３３−４０。グアノシンおよびウリジンを含有する一本鎖ＲＮＡはＴＬＲ７およびＴＬＲ８に対するリガンドであることが報告された。米国特許出願公開第２００３／０２３２０７４Ａ１号。ある種の低分子量合成化合物イミダゾキノロン類のイミキモッド（Ｒ−８３７）およびレシキモッド（Ｒ−８４８）もまたＴＬＲ７およびＴＬＲ８のリガンドであることが報告された。Ｊｕｒｋ Ｍら（２００２）Ｎａｔ Ｉｍｍｕｎｏｌ ３：４９９；Ｈｅｍｍｉ Ｈら（２００２）Ｎａｔ Ｉｍｍｕｎｏｌ ３：１９６−２００。細菌ＤＮＡ（ＣｐＧ ＤＮＡ）はＴＬＲ９リガンドであることが報告された。Ｈｅｍｍｉ Ｈら（２０００）Ｎａｔｕｒｅ ４０８：７４０−５；Ｂａｕｅｒ Ｓら（２００１）Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ ９８，９２３７−４２。ＴＬＲ１およびＴＬＲ１０に対する天然リガンドは知られていない。
【００２２】
ＴＬＲ７、ＴＬＲ８、およびＴＬＲ９はすべて、適切な核酸リガンドに応じて、アダプタタンパク質ＭｙＤ８８が参加してシグナルを送る。ネズミＴＬＲ８は、ヒトＴＬＲ８とは違って、非機能的であると思われる。したがって、マウスでは、ＴＬＲ７およびＴＬＲ９は、機能的であり、適切な核酸リガンドに応じて、ＭｙＤ８８が参加してシグナルを送る。したがって、機能的ＴＬＲ７を欠くマウスは、適切な核酸リガンドに応じてＭｙＤ８８依存性経路を介してシグナルを送ることができることで知られている機能的ＴＬＲとしてＴＬＲ９のみを有する（図１を参照されたい）。
【００２３】
驚いたことに、ホスホロチオエートバックボーンではなくホスホジエステルバックボーンを有するある種の一本鎖オリゴリボヌクレオチドが、機能的なＴＬＲ７またはＴＬＲ８を欠くマウスにおいてＭｙＤ８８依存性の様式で免疫細胞を刺激することができることが発見された。
【００２４】
本発明による有用な免疫刺激性一本鎖オリゴリボヌクレオチド（ｓｓＯＲＮ）は、５〜１００のヌクレオチド長であり、ホスホジエステルバックボーンならびに
（１）グアノシン（Ｇ）がない、または
（２）少なくとも１つのＧを含むヌクレオチド配列を有し、ただし、ヌクレオチド配列が少なくとも１つのＧを備える場合、ヌクレオチド配列は、
（ａ）ウリジン（Ｕ）がなく、
（ｂ）ＣｐＧモチーフＸ１Ｘ２ＣＧＸ３Ｘ４がなく、式中、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、およびＸ４はヌクレオチドであり、ＣＧはシトシン（Ｃ）−グアニン（Ｇ）ジヌクレオチドであり、ＣＧジヌクレオチドのＣはメチル化されておらず、
ただし、免疫刺激性ｓｓＯＲＮは、二本鎖リボ核酸（ＲＮＡ）分子の一部分として存在しない。
【００２５】
一実施形態における本発明による有用な免疫刺激性一本鎖オリゴリボヌクレオチド（ｓｓＯＲＮ）は、ＲＮＡの天然源に由来し、そこから単離することができる。あるいは、より典型的に、一実施形態における本発明による有用な免疫刺激性一本鎖オリゴリボヌクレオチド（ｓｓＯＲＮ）は、当技術分野でよく知られている合成方法により得ることができる。
【００２６】
本発明の免疫刺激性ｓｓＯＲＮは天然または非天然起源とすることができる。天然に存在するＲＮＡは、ある種のリボヌクレオシド単位の線状ポリマーを通常指す、一種の核酸であり、各リボヌクレオシド単位は、プリン塩基またはピリミジン塩基およびリボース糖から構成され、ヌクレオシド間ホスホジエステル結合により連結されている。これに関しては、「線状」は、ＲＮＡの一次構造について記載することが意味される。ＲＮＡは、通常、一本鎖または二本鎖であり、部分的な二本鎖を含むことができる。
【００２７】
本明細書中で使用されるように、「ヌクレオシド」は、交換可能な有機塩基に連結された単一の糖部分（たとえばリボースまたはデオキシリボース）を指し、有機塩基は、置換ピリミジン（たとえばシトシン、チミン、もしくはウラシル）または置換プリン（たとえばアデニンまたはグアニン）のいずれかである。対応するヌクレオチドは、シチジン、チミジン、ウリジン、アデノシン、およびグアノシンであり、慣習的に、Ｃ、Ｔ、Ｕ、Ａ、およびＧとしてそれぞれ示される。本明細書中に記載されるように、ヌクレオシドは、天然発生のヌクレオシド、修飾ヌクレオシド、または合成（人工）ヌクレオシドであってもよい。
【００２８】
用語「核酸」および「オリゴヌクレオチド」は、複数のヌクレオチドを意味するよう区別なく使用される。（つまり、上記に記載される、リン酸基にかつ交換可能な有機塩基に連結された糖（たとえばリボースまたはデオキシリボース）を備える分子。本明細書中に使用されるように、これらの用語は、オリゴリボヌクレオチド（ＯＲＮ）およびオリゴデオキシリボヌクレオチド（ＯＤＮ）を指す。これらの用語はまた、ポリヌクレオシド（つまりリン酸を引いたポリヌクレオチド）および任意の他の有機塩基含有ポリマーも含むものとする。核酸分子は、既存の核酸源（たとえばゲノムまたはｃＤＮＡ）から得ることができるが、好ましくは合成である（たとえば核酸合成により生産される）。
【００２９】
核酸およびオリゴヌクレオチドという用語はまた、塩基および／または糖において等で置換または修飾を有する核酸またはオリゴヌクレオチドも包含する。たとえば、それらは、３’位置の水酸基以外かつ５’位置のリン酸基以外で、低分子量有機基に共有結合的に付加されたバックボーン糖を有する核酸を含む。したがって、修飾核酸は、２’−Ｏ−アルキル化リボース基を含んでいてもよい。さらに、修飾核酸は、リボースの代わりにアラビノース等の糖を含んでいてもよい。したがって、核酸は、バックボーン組成物中で不均一であり、それによって、ペプチド核酸（核酸の塩基を有するアミノ酸バックボーンを有する）等の、共に連結されたポリマー単位の任意の可能性として考えられる組合せを含有していてもよい。いくつかの実施形態では、核酸は、バックボーン組成物中において均一である。核酸はまた、Ｃ−５プロピン修飾塩基等の置換プリンおよび置換ピリミジンも含む。Ｗａｇｎｅｒ ＲＷら（１９９６）Ｎａｔ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ １４：８４０−４。プリンおよびピリミジンは、アデニン、シトシン、グアニン、チミジン、５−メチルシトシン、２−アミノプリン、２−アミノ−６−クロロプリン、２，６−ジアミノプリン、ヒポキサンチン、および他の天然発生および非天然発生の核酸塩基といった置換および非置換の芳香族部分を含むが、これらに限定されない。他の上記の修飾は当業者によく知られている。
【００３０】
天然ヌクレオシド塩基は修飾ヌクレオシド塩基と交換することができ、修飾ヌクレオシド塩基は、ヒポキサンチン、ジヒドロウラシル、シュードウラシル、２−チオウラシル、４−チオウラシル、５−アミノウラシル、５−（Ｃ１−Ｃ６）−アルキルウラシル、５−（Ｃ２−Ｃ６）−アルケニルウラシル、５−（Ｃ２−Ｃ６）−アルキニルウラシル、５−（ヒドロキシメチル）ウラシル、５−クロロウラシル、５−フルオロウラシル、５−ブロモウラシル、５−ヒドロキシシトシン、５−（Ｃ１−Ｃ６）−アルキルシトシン、５−（Ｃ２−Ｃ６）−アルキレンシトシン、５−（Ｃ２−Ｃ６）−アルケニルシトシン、５−クロロシトシン、５−フルオロシトシン、５−ブロモシトシン、Ｎ２−ジメチルグアニン、２，４−ジアミノ−プリン、８−アザプリン（特に８−アザグアニンを含む）、７−デアザ−７−置換および／もしくは７−デアザ−８−置換プリンを含む置換７−デアザプリン（特に７−デアザグアニンを含む）、または天然ヌクレオシド塩基の他の修飾体からたとえば選択される。このリストは、例示的なものであることが意味され、限定的なものと解釈されるものではない。
【００３１】
特に、免疫刺激性ｓｓＯＲＮ中に存在する少なくとも１つのグアノシンがある場合、免疫刺激性ｓｓＯＲＮの少なくとも１つのグアニン塩基は、７−デアザグアニン、８−アザグアニン、７−デアザ−７−置換グアニン（７−デアザ−７−（Ｃ２−Ｃ６）アルキニルグアニン等）、７−デアザ−８−置換グアニン、ヒポキサンチン、２，６−ジアミノプリン、２−アミノプリン、プリン、８−ヒドロキシグアニン等の８−置換グアニン、および６−チオグアニン等の置換または修飾グアニンとすることができる。このリストは、例示的なものであることが意味され、限定的なものと解釈されるものではない。
【００３２】
さらに特に、免疫刺激性ｓｓＯＲＮ中に存在する少なくとも１つのウリジンがある場合、免疫刺激性ｓｓＯＲＮの少なくとも１つのウラシル塩基は、シュードウラシルおよび５−メチルウラシル等の置換または修飾ウラシルとすることができる。
【００３３】
本発明で使用するために、本発明の核酸は、当技術分野でよく知られている任意の多くの手順を使用してｄｅ ｎｏｖｏ合成することができる。たとえば、β−シアノエチルホスホラミダイト法（Ｂｅａｕｃａｇｅ ＳＬら（１９８１）Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔ ２２：１８５９）、ヌクレオシドＨ−ホスホネート法（Ｇａｒｅｇｇら（１９８６）Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔ ２７：４０５１−４；Ｆｒｏｅｈｌｅｒら（１９８６）Ｎｕｃｌ Ａｃｉｄ Ｒｅｓ １４：５３９９−４０７；Ｇａｒｅｇｇら（１９８６）Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔ ２７：４０５５−８；Ｇａｆｆｎｅｙら（１９８８）Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔ ２９：２６１９−２２）。これらの化学反応は、市販の様々な自動核酸合成機により実行することができる。これらの核酸は合成核酸と称される。核酸は、制限酵素、エキソヌクレアーゼ、またはエンドヌクレアーゼを利用する技術等の知られている技術を使用して、既存の核酸配列（たとえばリボソームＲＮＡ、メッセンジャーＲＮＡ、または転移ＲＮＡ）から調製することができる。この様式で調製された核酸は単離核酸と称される。単離核酸は、核酸が天然で常態で関連している成分から分離された核酸を通常指す。例として、単離核酸は、細胞から、核から、ミトコンドリアから、またはクロマチンから分離された核酸であってもよい。用語「核酸」は、合成核酸および単離核酸の両方を包含する。
【００３４】
本発明による有用なｓｓＯＲＮは免疫刺激性である。本明細書中に使用されるように、免疫刺激性ｓｓＯＲＮは、免疫応答を誘発することができる、たとえば、活性化して増殖させるために、分化させるために、移動させるために、細胞溶解活性を増加させるために、免疫細胞活性化と関連する分泌産物の発現を増加させるために、免疫細胞活性化と関連する細胞表面マーカーもしくは共刺激分子の発現を増加させるために、またはそれらの任意の組合せのために免疫系の細胞を刺激することができるｓｓＯＲＮを指す。免疫細胞活性化と関連する分泌産物は当技術分野でよく知られており、限定を伴うことなく、サイトカイン、ケモカイン、および抗体を含むことができる。
【００３５】
本発明の免疫刺激性ｓｓＯＲＮは、ｉｎ ｖｉｔｒｏおよびｉｎ ｖｉｖｏの両方で、Ｔｈ１様免疫応答を誘発するために使用することができる。本明細書中に使用されるように、Ｔｈ１様免疫応答は、ある種のサイトカイン、ケモカイン、および免疫グロブリンのサブクラスを含むＴｈ１様分泌産物を発現するための免疫細胞の活性化ならびにある種の免疫細胞の活性化を指す。Ｔｈ１様分泌産物は、限定を伴うことなく、サイトカインＩＦＮ−γ、ＩＬ−２、ＩＬ−１２、ＩＬ−１８、ＴＮＦ−α、およびケモカインＩＰ−１０（ＣＸＣＬ１０）を含む。マウスでは、Ｔｈ１免疫活性化はＩｇＧ２ａの分泌を刺激する。ヒトでは、Ｔｈ１免疫活性化はＩｇＧ１の分泌を刺激する。したがって、マウスにおけるＴｈ１様免疫応答はＩｇＧ２ａの分泌の増加を含み得る、そしてヒトにおけるＴｈ１様免疫応答はＩｇＧ１の分泌の増加を含み得る。Ｔｈ１およびＴｈ１様免疫活性化はまた、ＮＫ細胞および樹状細胞、つまり細胞性免疫に関与する細胞の活性化も含んでいてもよい。Ｔｈ１およびＴｈ１様免疫活性化はＴｈ２免疫活性化を逆調節すると考えられる。
【００３６】
本発明の免疫刺激性ｓｓＯＲＮは、ｉｎ ｖｉｔｒｏおよびｉｎ ｖｉｖｏの両方で、抗原特異的免疫応答を誘発するために使用することができる。本明細書中に使用されるように、抗原特異的免疫応答は、免疫系の細胞および抗原の間での接触から起こる適応免疫応答である。
【００３７】
用語「抗原」は、免疫応答を引き起こすことができる分子を指す。抗原という用語は、外来性であるとして宿主系により認識される任意の種類の分子を広く含む。抗原は、微生物抗原、癌抗原、およびアレルゲンを含むが、これらに限定されない。抗原は、細胞、細胞抽出物、タンパク質、ポリペプチド、ペプチド、多糖類、多糖抱合体、多糖類およびその他の分子のペプチドミミックおよび非ペプチドミミック、低分子、脂質、糖脂質、ならびに炭水化物を含むが、これらに限定されない。タンパク質およびポリペプチドは炭水化物または脂肪よりも通常抗原性であるので、多くの抗原は事実上タンパク質またはポリペプチドである。
【００３８】
抗原は、核酸ベクターによりコードされる抗原とすることができ、または抗原はそれ自体で抗原となり得る。前者の場合では、核酸ベクターが対象に投与され、ｉｎ ｖｉｖｏで抗原が発現する。後者の場合では、抗原は対象に直接投与されてもよい。本明細書中で使用される核酸ベクター中にコードされていない抗原は、核酸ではない任意の種類の抗原を指す。たとえば、本発明のいくつかの態様では、核酸ベクター中にコードされていない抗原はペプチドまたはポリペプチドである。ペプチド抗原またはポリペプチド抗原の本来のアミノ酸配列のわずかな修飾により、無修飾対応物であるポリペプチドと比較して実質的に等価な抗原性活性を有するポリペプチドをもたらしてもよい。上記修飾は、部位特異的変異誘発によるような意図的なものであってもよくまたは自然発生的なものであってもよい。これらの修飾により生産されたポリペプチドはすべて、抗原性がなお存在する限り、本明細書中に含まれる。たとえば、ペプチドまたはポリペプチドはウイルス性由来であってもよい。本発明において有用な抗原は、完全長タンパク質またはポリペプチドの小ペプチド断片から完全長形態までの範囲の任意の長さであってもよい。たとえば、抗原は、抗原が特異的免疫応答を刺激するという条件で、アミノ酸残基の長さが５未満、８未満、１０未満、１５未満、２０未満、３０未満、５０未満、７０未満、１００未満、またはそれ以上であってもよい。
【００３９】
ある種の実施形態では、抗原は癌抗原である。本明細書中に使用される「癌抗原」は、腫瘍細胞表面または癌細胞表面と関連するペプチドまたはタンパク質等の化合物であり、癌抗原は、ＭＨＣ分子を背景に抗原提示細胞の表面上に発現した場合、免疫応答を引き起こすことができる。癌抗原は、たとえばＣｏｈｅｎ ＰＡら（１９９４）Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ５４：１０５５−８に記載されるように癌細胞の粗抽出物を調製することにより、抗原を部分的に精製することにより、組換え技術により、または知られている抗原のｄｅ ｎｏｖｏ合成により癌細胞から調製することができる。癌抗原は、組換えで発現した抗原、腫瘍もしくは癌の免疫原性の一部、または腫瘍もしくは癌の全体を含むが、これらに限定されない。上記抗原は、組換えでまたは当技術分野で知られている任意の他の手段により単離または調製することができる。
【００４０】
用語「癌抗原」および「腫瘍抗原」は、区別なく使用され、癌細胞により識別的に発現され、それによって癌細胞を標的にするために活用することができる抗原を指す。癌抗原は、明らかに腫瘍特異的な免疫反応を潜在的に刺激することができる抗原である。これらの抗原のいくつかは、必ずしも発現されないが、正常細胞によってコードされている。これらの抗原は、正常細胞では常態でサイレントである（つまり発現されない）抗原、分化のある種の段階でのみ発現される抗原、および胚性抗原および胎児性抗原等の一時的に発現する抗原として特徴づけることができる。他の癌抗原は、内部欠失または染色体転座に起因する融合タンパク質であり、癌遺伝子（たとえば活性化されたｒａｓ癌遺伝子）、抑制遺伝子（たとえば突然変異ｐ５３）等の突然変異細胞性遺伝子によりコードされる。さらに他の癌抗原は、ＲＮＡ腫瘍ウイルスおよびＤＮＡ腫瘍ウイルス上に保有されるウイルス遺伝子等のウイルス遺伝子によりコードされ得る。腫瘍抗原の例は、ＭＡＧＥ、ＭＡＲＴ−１／メラン−Ａ、ｇｐ１００、ジペプチジルペプチダーゼＩＶ（ＤＰＰＩＶ）、アデノシンデアミナーゼ結合タンパク質（ＡＤＡｂｐ）、サイクロフィリンｂ、結腸直腸関連抗原（ＣＲＣ）−−Ｃ０１７−１Ａ／ＧＡ７３３、癌胎児性抗原（ＣＥＡ）およびその免疫原性エピトープＣＡＰ−１およびＣＡＰ−２、ｅｔｖ６、ａｍｌ１、前立腺特異抗原（ＰＳＡ）およびその免疫原性エピトープＰＳＡ−１、ＰＳＡ−２、およびＰＳＡ−３、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）、Ｔ細胞受容体／ＣＤ３ゼータ鎖、腫瘍抗原のＭＡＧＥファミリー（たとえばＭＡＧＥ−Ａ１、ＭＡＧＥ−Ａ２、ＭＡＧＥ−Ａ３、ＭＡＧＥ−Ａ４、ＭＡＧＥ−Ａ５、ＭＡＧＥ−Ａ６、ＭＡＧＥ−Ａ７、ＭＡＧＥ−Ａ８、ＭＡＧＥ−Ａ９、ＭＡＧＥ−Ａ１０、ＭＡＧＥ−Ａ１１、ＭＡＧＥ−Ａ１２、ＭＡＧＥ−Ｘｐ２（ＭＡＧＥ−Ｂ２）、ＭＡＧＥ−Ｘｐ３（ＭＡＧＥ−Ｂ３）、ＭＡＧＥ−Ｘｐ４（ＭＡＧＥ−Ｂ４）、ＭＡＧＥ−Ｃ１、ＭＡＧＥ−Ｃ２、ＭＡＧＥ−Ｃ３、ＭＡＧＥ−Ｃ４、ＭＡＧＥ−Ｃ５）、腫瘍抗原のＧＡＧＥファミリー（たとえばＧＡＧＥ−１、ＧＡＧＥ−２、ＧＡＧＥ−３、ＧＡＧＥ−４、ＧＡＧＥ−５、ＧＡＧＥ−６、ＧＡＧＥ−７、ＧＡＧＥ−８、ＧＡＧＥ−９）、ＢＡＧＥ、ＲＡＧＥ、ＬＡＧＥ−１、ＮＡＧ、ＧｎＴ−Ｖ、ＭＵＭ−１、ＣＤＫ４、チロシナーゼ、ｐ５３、ＭＵＣファミリー、ＨＥＲ２／ｎｅｕ、ｐ２１ｒａｓ、ＲＣＡＳ１、α−フェトプロテイン、Ｅ−カドヘリン、α−カテニン、β−カテニン、およびγ−カテニン、ｐ１２０ｃｔｎ、ｇｐ１００Ｐｍｅ１１１７、ＰＲＡＭＥ、ＮＹ−ＥＳＯ−１、ｃｄｃ２７、大腸腺腫様ポリポーシスタンパク質（ＡＰＣ）、ホドリン、コネキシン３７、Ｉｇ−イディオタイプ、ｐ１５、ｇｐ７５、ＧＭ２ガングリオシドおよびＧＤ２ガングリオシド、ヒト乳頭腫ウイルスタンパク質等のウイルス産物、腫瘍抗原のＳｍａｄファミリー、ｌｍｐ−１、Ｐ１Ａ、ＥＢＶコード核抗原（ＥＢＮＡ）−１、脳グリコーゲンホスホリラーゼ、ＳＳＸ−１、ＳＳＸ−２（ＨＯＭ−ＭＥＬ−４０）、ＳＳＸ−４、ＳＳＸ−５、ＳＣＰ−１、およびＣＴ−７、ならびにｃ−ｅｒｂＢ−２を含む。
【００４１】
癌または腫瘍および上記腫瘍と関連する腫瘍抗原は、（排他的ではないが）急性リンパ芽球性白血病（ｅｔｖ６、ａｍｌ１、サイクロフィリンｂ）、Ｂ細胞リンパ腫（Ｉｇ−イディオタイプ）、神経膠腫（Ｅ−カドヘリン、α−カテニン、β−カテニン、γ−カテニン、ｐ１２０ｃｔｎ）、膀胱癌（ｐ２１ｒａｓ）、胆管癌（ｐ２１ｒａｓ）、乳癌（ＭＵＣファミリー、ＨＥＲ２／ｎｅｕ、ｃ−ｅｒｂＢ−２）、頚癌（ｐ５３、ｐ２１ｒａｓ）、結腸癌（ｐ２１ｒａｓ、ＨＥＲ２／ｎｅｕ、ｃ−ｅｒｂＢ−２、ＭＵＣファミリー）、結腸直腸癌（結腸直腸関連抗原（ＣＲＣ）−−Ｃ０１７−１Ａ／ＧＡ７３３、ＡＰＣ）、絨毛癌（ＣＥＡ）、上皮細胞癌（サイクロフィリンｂ）、胃癌（ＨＥＲ２／ｎｅｕ、ｃ−ｅｒｂＢ−２、ｇａ７３３糖タンパク質）、肝細胞癌（α−フェトプロテイン）、ホジキンリンパ腫（ｌｍｐ−１、ＥＢＮＡ−１）、肺癌（ＣＥＡ、ＭＡＧＥ−３、ＮＹ−ＥＳＯ−１）、リンパ球様細胞由来白血病（サイクロフィリンｂ）、黒色腫（ｐ１５タンパク質、ｇｐ７５、腫瘍胎児抗原、ＧＭ２ガングリオシド、およびＧＤ２ガングリオシド）、骨髄腫（ＭＵＣファミリー、ｐ２１ｒａｓ）、非小細胞肺癌（ＨＥＲ２／ｎｅｕ、ｃ−ｅｒｂＢ−２）、上咽頭癌（ｌｍｐ−１、ＥＢＮＡ−１）、卵巣癌（ＭＵＣファミリー、ＨＥＲ２／ｎｅｕ、ｃ−ｅｒｂＢ−２）、前立腺癌（前立腺特異抗原（ＰＳＡ）ならびにその免疫原性エピトープＰＳＡ−１、ＰＳＡ−２、およびＰＳＡ−３、ＰＳＭＡ、ＨＥＲ２／ｎｅｕ、ｃ−ｅｒｂＢ−２）、膵癌（ｐ２１ｒａｓ、ＭＵＣファミリー、ＨＥＲ２／ｎｅｕ、ｃ−ｅｒｂＢ−２、ｇａ７３３糖タンパク質）、腎癌（ＨＥＲ２／ｎｅｕ、ｃ−ｅｒｂＢ−２）、頚および食道の扁平上皮癌（ヒト乳頭腫ウイルスタンパク質等のウイルス産物）、精巣癌（ＮＹ−ＥＳＯ−１）、Ｔ細胞白血病（ＨＴＬＶ−１エピトープ）、ならびに黒色腫（メラン−Ａ／ＭＡＲＴ−１、ｃｄｃ２７、ＭＡＧＥ−３、ｐ２１ｒａｓ、ｇｐ１００Ｐｍｅ１１１７）を含む。
【００４２】
本発明の免疫刺激性ｓｓＯＲＮは、通常少なくとも５かつ１００以下のヌクレオチド長である。様々なある種の実施形態では、本発明の免疫刺激性ｓｓＯＲＮは、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、または４０のヌクレオチド長を具体的に含む４０以下のヌクレオチド長である。
【００４３】
ある種の実施形態では、本発明の免疫刺激性ｓｓＯＲＮは、少なくとも４つの連続したＧヌクレオチドを含むポリＧ配列を含むことができ、ただし、ｓｓＯＲＮは、ポリＧから完全に構成されるわけではない。一実施形態では、ポリＧ配列は、存在する場合、ｓｓＯＲＮの３’末端を占める。
【００４４】
一実施形態では、本発明の免疫刺激性ｓｓＯＲＮはポリＵから完全に構成されるわけではない。一実施形態では、本発明の免疫刺激性ｓｓＯＲＮはポリＡから完全に構成されるわけではない。一実施形態では、本発明の免疫刺激性ｓｓＯＲＮはポリＣから完全に構成されるわけではない。
【００４５】
本発明のｓｓＯＲＮは、癌を有する対象、感染症を有する対象、自己免疫疾患を有する対象、アレルギーを有する対象、および喘息を有する対象の治療に特に使用されてもよいが、そのように限定されない。
【００４６】
本明細書中に使用される「癌」は、体の器官および系が正常に機能するのを妨害する、細胞の制御されていない成長を指す。それらの本来の位置から移動して、重要器官に種を播く癌は、冒された器官の機能的悪化を介して対象の死をついにはもたらし得る。白血病等の造血癌は、対象における正常造血コンパートメントにまさることができ、それによって、最終的に死を引き起こす造血不全（貧血、血小板減少、および好中球減少の形態で）をもたらす。
【００４７】
本明細書中に使用されるように、癌を有する対象は、検出可能な癌性細胞を有する対象を指す。
【００４８】
転移は、原発腫瘍から体の他の部分までの、癌細胞の播種に起因する、原発腫瘍の位置とは別の癌細胞の領域である。原発腫瘤の診断時に、対象は、転移の存在について監視されてもよい。転移は、特定の症状の監視の他に、磁気共鳴画像（ＭＲＩ）スキャン、コンピュータ連動断層撮影（ＣＴ）スキャン、血液および血小板数、肝機能研究、胸部Ｘ線、ならびに骨スキャンを単独でまたは組み合わせて使用することにより検出されることが最も多い。
【００４９】
癌は、基底細胞癌、胆道癌、膀胱癌、骨癌、脳およびＣＮＳ癌、乳癌、頚部癌、絨毛癌、大腸および直腸癌、結合組織癌、消化器系の癌、子宮内膜癌、食道癌、眼癌、頭頚部の癌、胃癌、上皮内新生物、腎臓癌、喉頭癌、白血病、肝臓癌、肺癌（たとえば小細胞および非小細胞）、ホジキンおよび非ホジキンリンパ腫を含むリンパ腫、黒色腫、骨髄腫、神経芽細胞腫、口腔癌（たとえば唇、舌、口、および咽頭）、卵巣癌、膵癌、前立腺癌、網膜芽細胞腫、横紋筋肉腫、直腸癌、腎癌、呼吸器系の癌、肉腫、皮膚癌、胃癌、精巣癌、甲状腺癌、子宮癌、泌尿器系の癌、ならびに他の癌および肉腫を含むが、これらに限定されない。
【００５０】
本明細書中に使用される「感染症」は、感染性微生物による外面的、局所的、または全身的な、宿主の侵襲から起こる障害を指す。感染性微生物は、細菌、ウイルス、寄生生物、および真菌を含む。
【００５１】
本明細書中に使用されるように、感染症を有する対象は、感染性生物に暴露されたことがあり、体内に急性または慢性の検出可能なレベルの生物を有する対象を指す。感染性生物への暴露は、対象の外面、たとえば皮膚または粘膜の膜で通常発生するおよび／または感染性生物による対象の外面の侵入を指す。
【００５２】
ヒトで発見されたウイルスの例は、レトロウイルス科（たとえばＨＩＶ−１（ＨＤＴＶ−ＩＩＩ、ＬＡＶＥ、もしくはＨＴＬＶ−ＩＩＩ／ＬＡＶ、またはＨＩＶ−ＩＩＩとも称される等のヒト免疫不全ウイルスおよびＨＩＶ−ＬＰ等の他の分離株）、ピコルナウイルス科（たとえばポリオウイルス、Ａ型肝炎ウイルス、エンテロウイルス、ヒトコクサッキーウイルス、ライノウイルス、エコーウイルス）、カルシウイルス科（たとえば胃腸炎の原因となる株）、ドガウイルス科（たとえばウマ脳炎ウイルス、風疹ウイルス）、フラビウイルス科（たとえばデング熱ウイルス、脳炎ウイルス、黄熱ウイルス）、コロナウイルス科（たとえばコロナウイルス）、ラブドウイルス科（たとえば水疱性口内炎ウイルス、狂犬病ウイルス）、フィロウイルス科（たとえばエボラウイルス）、パラミクソウイルス科（たとえばパラインフルエンザウイルス、ムンプスウイルス、麻疹ウイルス、呼吸器合胞体ウイルス）、オルソミクソウイルス科（たとえばインフルエンザウイルス）、ブンヤウイルス科（たとえばハンタンウイルス、ブンヤウイルス、フレボウイルス、およびナイロウイルス）、アレナウイルス科（出血熱ウイルス）、レオウイルス科（たとえばレオウイルス、オルビウイルス、およびロタウイルス）、ビルナウイルス科、ヘパドナウイルス科（Ｂ型肝炎ウイルス）、パルボウイルス科（パルボウイルス）、パポバウイルス科（乳頭腫ウイルス、ポリオーマウイルス）、アデノウイルス科（ほとんどのアデノウイルス）、ヘルペスウイルス科（単純ヘルペスウイルス（ＨＳＶ）１および２、水痘帯状疱疹ウイルス、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）、ヘルペスウイルス）、ポックスウイルス科（痘瘡ウイルス、ワクシニアウイルス、ポックスウイルス）、ならびにイリドウイルス科（たとえばアフリカ豚コレラウイルス）、ならびに未分類ウイルス（たとえばデルタ型肝炎の外的病原因子（Ｂ型肝炎ウイルスの不完全サテライトであると思われる）、非Ａ型、非Ｂ型肝炎の外的病原因子（クラス１＝内部的に伝染、クラス２＝非経口的に伝染（つまりＣ型肝炎）、ノーウォークおよび関連ウイルス、ならびにアストロウイルス）を含むが、これらに限定されない。
【００５３】
グラム陰性細菌およびグラム陽性細菌の両者は脊椎動物において抗原として作用する。上記グラム陽性細菌は、パスツレラ種、ブドウ球菌種、および連鎖球菌種を含むが、これらに限定されない。グラム陰性細菌は、大腸菌、シュードモナス種、およびサルモネラ種を含むが、これらに限定されない。感染性細菌の特定の例は、ヘリコバクターピロリ、ボレリアブルグドルフェリ、レジュネラニューモフィラ菌、マイコバクテリア種（たとえば結核菌、トリ結核菌、バテー杆菌、カンサシ菌、Ｍ．ゴルドナエ）、黄色ブドウ球菌、淋菌、髄膜炎菌、リステリア菌、化膿連鎖球菌（Ａ群連鎖球菌）、ストレプトコッカスアガラクティエ（Ｂ群連鎖球菌）、連鎖球菌（ビリダンス群）、糞便連鎖球菌、ストレプトコッカスボビス、連鎖球菌（嫌気性種）、肺炎連鎖球菌、病原性カンピロバクター種、エンテロコッカス種、インフルエンザ菌、炭疽菌、ジフテリア菌、コリネバクテリウム種、豚丹毒菌、ウェルチ菌、破傷風菌、エンテロバクターエロゲネス、肺炎桿菌、パスツレラマルトシダ、バクテロイデス種、フソバクテリウムヌクレアタム、ストレプトバシラスモニリフォルミス、梅毒トレポネーマ、フランベジアトレポネーマ、レプトスピラ、リケッチア、およびイスラエル放線菌を含むが、これらに限定されない。
【００５４】
真菌の例は、クリプトコッカスネオフォルマンス、ヒストプラスマカプスラーツム、コクシジオイデスイミチス、ブラストミセスデルマティティディス、トラコーマクラミジア、カンジダアルビカンスを含む。
【００５５】
他の感染性生物（つまり原生生物）は、熱帯熱マラリア原虫、四日熱マラリア原虫、卵形マラリア原虫、および三日熱マラリア原虫等のマラリア原虫種ならびにトキソプラズマ原虫を含む。血液媒介寄生生物および／または組織寄生生物は、マラリア原虫種、ネズミバベシア、バベシアディバージエンス、熱帯リーシュマニア、リーシュマニア種、ブラジルリーシュマニア、ドノバンリーシュマニア、ガンビアトリパノソーマおよびローデシアトリパノソーマ（アフリカ睡眠病）、クルーズトリパノソーマ（シャガス病）、ならびにトキソプラズマ原虫を含む。
【００５６】
他の医学的に関係のある微生物は、文献に広範に記載されており、たとえば、Ｃ．Ｇ．Ａ Ｔｈｏｍａｓ，Ｍｅｄｉｃａｌ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，Ｂａｉｌｌｉｅｒｅ Ｔｉｎｄａｌｌ，Ｇｒｅａｔ Ｂｒｉｔａｉｎ １９８３を参照されたく、その全内容が参照により本明細書中に組み込まれる。
【００５７】
本発明のｓｓＯＲＮはまた、自己免疫疾患を治療し、予防するのにも有用である。自己免疫疾患は、対象自体の抗体が宿主組織と反応するまたは免疫エフェクターＴ細胞が内因性自己ペプチドに自己反応性であり、組織の破壊の原因となる疾患の１つのクラスである。したがって、免疫応答は、自己抗原と称される対象自体の抗原に対して開始される。自己免疫疾患は、関節リウマチ、クローン病、多発性硬化症、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、自己免疫性脳脊髄炎、重症筋無力症（ＭＧ）、橋本甲状腺炎、グッドパスチャー症候群、天疱瘡（たとえば尋常性天疱瘡）、グレーブス病、自己免疫性溶血性貧血、自己免疫性血小板減少性紫斑病、抗コラーゲン抗体を有する強皮症、混合結合組織病、多発性筋炎、悪性貧血、特発性アジソン病、自己免疫関連性の不妊、糸球体腎炎（たとえば半月体形成性糸球体腎炎、増殖性糸球体腎炎）、水疱性類天疱瘡、シェーグレン症候群、インスリン抵抗性、および自己免疫性真性糖尿病を含むが、これらに限定されない。
【００５８】
本明細書中に使用されるように、アレルギーは、物質（アレルゲン）に対する後天性過敏症を指す。アレルギー状態は、湿疹、アレルギー性鼻炎または鼻感冒、枯草熱、アレルギー性結膜炎、気管支喘息、じんま疹（発疹）および食物アレルギー、アトピー性皮膚炎、アナフィラキシー、薬剤アレルギー、および血管性浮腫を含む他のアトピー状態を含むが、これらに限定されない。アレルギー疾患は、鼻炎（枯草熱）、喘息、じんま疹、およびアトピー性皮膚炎を含むが、これらに限定されない。
【００５９】
本明細書中に使用されるように、アレルギーを有する対象は、アレルゲンに応じるアレルギー反応を有する対象である。
【００６０】
アレルゲンは、感受性対象においてアレルギー応答または喘息応答を誘発することができる物質（抗原）を指す。アレルゲンのリストは膨大であり、花粉、昆虫毒液、動物性ふけ粉塵、真菌胞子、および薬剤（たとえばペニシリン）を含み得る。天然、動物、および植物アレルゲンの例は、以下の属に特異的なタンパク質を含むが、これらに限定されない：イヌ属（カニスファミリアリス）、表皮ダニ属（たとえばコナヒョウヒダニ）、ネコ属（フェリスドメスティクス（Ｆｅｌｉｓ ｄｏｍｅｓｔｉｃｕｓ））、ブタクサ属（ブタクサ）、ドクムギ属（たとえばホソムギまたはネズミムギ）、スギ属（スギ）、アルテルナリア属（アルテルナリアアルテルナータ）、ハンノキ、ハンノキ属（セイヨウヤマハンノキ）、カバノキ属（セイヨウシラカンバ）、カシ属（アメリカンホワイトオーク）、オリーブ属（オリーブ）、ヨモギ属（オウシュウヨモギ）、オオバコ属（たとえばヘラオオバコ）、ヒカゲミズ属（たとえばパリエタリアオフィチナリス（Ｐａｒｉｅｔａｒｉａ ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ）またはパリエタリアユダイカ（Ｐａｒｉｅｔａｒｉａ ｊｕｄａｉｃａ））、チャバネゴキブリ属（たとえばチャバネゴキブリ）、ミツバチ属（たとえばアピスムルティフロルム（Ａｐｉｓ ｍｕｌｔｉｆｌｏｒｕｍ））、イトスギ属（たとえばクプレススセムペルビレンス（Ｃｕｐｒｅｓｓｕｓ ｓｅｍｐｅｒｖｉｒｅｎｓ）、アリゾナイトスギ、およびモントレーイトスギ）、ビャクシン属（たとえばユニペルスサビオノイデス（Ｊｕｎｉｐｅｒｕｓ ｓａｂｉｎｏｉｄｅｓ）、エンピツビャクシン、セイヨウネズ、およびユニペルスアシェイ（Ｊｕｎｉｐｅｒｕｓ ａｓｈｅｉ））、クロベ属（たとえばツヤオリエンタリス（Ｔｈｕｙａ ｏｒｉｅｎｔａｌｉｓ））、ヒノキ属（たとえばヒノキ）、ワモンゴキブリ属（たとえばワモンゴキブリ）、カモジグサ属（たとえばシバムギ）、ライムギ属（たとえばライムギ）、コムギ属（たとえばコムギ）、カモガヤ属（たとえばカモガヤ）、ウシノケグサ属（たとえばヒロハウシノケグサ）、イチゴツナギ属（たとえばナガハグサまたはコイチゴツナギ）、カラスムギ属（たとえばマカラスムギ）、シラゲガヤ属（たとえばシラゲガヤ）、ハルガヤ属（たとえばハルガヤ）、オオカニツリ属（たとえばオオカニツリ）、コヌカグサ属（たとえばコヌカグサ）、アワガエリ属（たとえばオオアワガエリ）、クサヨシ属（たとえばクサヨシ）、スズメノヒエ属（たとえばアメリカスズメノヒエ）、モロコシ属（たとえばセイバンモロコシ）、およびスズメノチャヒキ属（たとえばコスズメノチャヒキ）。
【００６１】
本明細書中に使用されるように、喘息は、気道の炎症、狭窄、および吸入された外的病原因子に対する気道の反応性の増加により特徴づけられる呼吸器系の障害を指す。喘息は、排他的ではないが、しばしば、アトピー状態またはアレルギー状態と関連する。喘息の症状は、喘鳴、息切れ、および胸部絞扼感の反復性の出現ならびに咳を含み、気流閉塞に起因する。喘息と関連する気道炎症は、気道上皮の露出、基底膜直下のコラーゲン沈着、浮腫、肥満細胞活性化、好中球、イノシネオフィル（ｉｎｏｓｉｎｅｏｐｈｉｌ）、およびリンパ球を含む炎症細胞の浸潤等の多くの生理学的変化の観察によって検出することができる。気道炎症の結果として、喘息患者は、気道反応性亢進、気流制限、呼吸器症状、および疾患慢性を経験することが多い。気流制限は、気管支閉塞をもたらすことが多い特徴である急性気管支収縮、気道浮腫、粘液栓形成、および気道リモデリングを含む。喘息のいくつかの症例では、基底膜下線維化が発生し、肺機能の持続性の異常をもたらす可能性がある。
【００６２】
本明細書中に使用されるように、喘息を有する対象は、気道の炎症、狭窄、および吸入された外的病原因子に対する気道の反応性の増加により特徴づけられる呼吸器系の障害を有する対象である。喘息は、排他的ではないが、しばしば、アトピー症状またはアレルギー症状と関連する。喘息はさらに、排他的ではないが、初発因子との接触ともしばしば関連する。本明細書中に使用される「初発因子」は、喘息のきっかけとなる組成物または環境条件を指す。初発因子は、アレルゲン、寒い気温、運動、ウイルス感染、ＳＯ２を含むが、これらに限定されない。
【００６３】
本発明のｓｓＯＲＮはまた、単独でまたは他の治療薬と組み合わせて使用することもできる。一実施形態における他の治療薬は本発明の他のｓｓＯＲＮである。ｓｓＯＲＮおよび他の治療薬は、同時にまたは順次に投与されてもよい。他の治療薬が同時に投与される場合、それらは、同一の製剤または個別の製剤中において投与することができるが、同時に投与される。他の治療薬およびｓｓＯＲＮの投与が時間的に分離される場合、他の治療薬はｓｓＯＲＮとお互いに順次に投与される。これらの化合物の投与の間の分離時間は、数分間であってもよく、それより長くてもよい。他の治療薬は、抗微生物薬、抗癌薬、抗アレルギー薬等を含むが、これらに限定されない。
【００６４】
本発明のｓｓＯＲＮは、抗微生物薬と共に対象に投与されてもよい。抗微生物薬は、本明細書中で使用されるように、感染性微生物を殺すまたは阻害することができる天然発生化合物または合成化合物を指す。本発明による有用な抗微生物薬の種類は、対象が感染しているまたは感染する危険性のある微生物の種類に依存するであろう。抗微生物薬は、抗細菌薬、抗ウイルス薬、抗真菌薬、および抗寄生生物薬を含むが、これらに限定されない。「抗感染薬」、「抗細菌薬」、「抗ウイルス薬」、「抗真菌薬」、「抗寄生生物薬」、および「殺寄生生物薬」等の語句は、当業者にとって十分に確立された意味を有し、標準的な医学教科書において定義される。手短に言えば、抗細菌薬は、細菌を殺すまたは阻害し、抗生物質および類似する機能を有する他の合成化合物または天然化合物を含む。抗生物質は、微生物等の細胞により二次代謝産物として生産される低分子量分子である。通常、抗生物質は、微生物に特異的で宿主細胞中に存在しない１つまたは複数の細菌機能または構造を妨害する。抗ウイルス薬は、天然源から単離するまたは合成することができ、ウイルスを殺すまたは阻害するのに有用である。抗真菌薬はかつては表在性真菌感染症ならびに日和見性および原発性全身性真菌感染症を治療した。抗寄生生物薬は寄生生物を殺すまたは阻害する。
【００６５】
ヒト投与に有用な殺寄生生物薬とも称される抗寄生生物薬の例は、アルベンダゾール、アンホテリシンＢ、ベンズニダゾール、ビチオノール、クロロキンＨＣｌ、リン酸クロロキン、クリンダマイシン、デヒドロエメチン、ジエチルカルバマジン、ジロキサニドフロエート、エフロールニチン、フラゾリダオン（ｆｕｒａｚｏｌｉｄａｏｎｅ）、グルココルチコイド、ハロファントリン、ヨードキノール、アイバメクチン、メベンダゾール、メフロキン、メグルミンアンチモニエート、メラルソプロール、メトリホナート、メトロニダゾール、ニクロサミド、ニフルチモックス、オキサムニキン、パロモマイシン、ペンタミジンイセチオネート、ピペラジン、プラジカンテル、リン酸プリマキン、プログアニル、パモ酸ピランテル、ピリメタンミン（ｐｙｒｉｍｅｔｈａｎｍｉｎｅ）スルホンアミド類、ピリメタンミンスルファドキシン、キナクリンＨＣｌ、硫酸キニーネ、グルコン酸キニジン、スピラマイシン、スチボグルコネートナトリウム（グルコン酸アンチモンナトリウム）、スラミン、テトラサイクリン、ドキシサイクリン、チアベンダゾール、チニダゾール、トリメトプリムスルファメトキサゾール、およびトリパルサミドを含むが、これらに限定されず、これらのうちのいくつかは単独でまたは他と組み合わせて使用される。
【００６６】
抗細菌薬は細菌の成長または機能を殺すまたは阻害する。抗細菌薬の大きなクラスは抗生物質である。抗生物質は、広範囲の細菌を殺すまたは阻害するのに有効であり、広域抗生物質と称される。他の種類の抗生物質は、グラム陽性またはグラム陰性のクラスの細菌に対して主に有効である。これらの種類の抗生物質は狭域抗生物質と称される。他の抗生物質は、他の種類の細菌に対してではなく単一の生物または疾患に対して有効であり、限定抗生物質と称される。抗細菌薬は、それらの本来の作用機序に基づいて分類されることがある。通常、抗細菌薬は、細胞壁合成阻害薬、細胞膜阻害薬、タンパク質合成阻害薬、核酸合成または核酸機能阻害薬、および競合的阻害薬である。
【００６７】
抗ウイルス薬は、ウイルスによる細胞の感染または細胞内でのウイルスの複製を予防する化合物である。ウイルス複製のプロセスが宿主細胞内でのＤＮＡ複製と非常に密接に関係し、非特異的抗ウイルス薬は宿主に有毒であることが多いであろうといった理由から、抗ウイルス薬は抗細菌薬よりもずっと少ない。ウイルス感染のプロセス内には、抗ウイルス薬によりブロックするまたは阻害することができるいくつかの段階がある。これらの段階は、宿主細胞へのウイルスの付着（免疫グロブリンまたは結合ペプチド）、ウイルスの脱外被（たとえばアマンタジン）、ウイルスｍＲＮＡの合成または翻訳（たとえばインターフェロン）、ウイルスＲＮＡまたはＤＮＡの複製（たとえばヌクレオチド類似体）、新しいウイルスタンパク質の成熟（たとえばプロテアーゼ阻害薬）、およびウイルスの発芽および放出を含む。
【００６８】
ヌクレオチド類似体は、ヌクレオチドに類似するが、不完全なまたは異常なデオキシリボース基またはリボース基を有する合成化合物である。ヌクレオチド類似体が細胞中にあると、それらはリン酸化されて、ウイルスＤＮＡまたはＲＮＡ中への取込みについて正常ヌクレオチドと競合する三リン酸形態が生産される。ヌクレオチド類似体の三リン酸形態が成長している核酸鎖中に組み込まれると、三リン酸形態は、ウイルスポリメラーゼとの不可逆的会合、そしてそれによる連鎖停止の原因となる。ヌクレオチド類似体は、アシクロビル（単純ヘルペスウイルスおよび水痘帯状疱疹ウイルスの治療に使用される）、ガンシクロビル（サイトメガロウイルスの治療に有用）、イドクスウリジン、リバビリン（呼吸器合胞体ウイルスの治療に有用）、ジデオキシイノシン、ジデオキシシチジン、ジドブジン（アジドチミジン）、イミキモッド、ならびにレシキモッドを含むが、これらに限定されない。
【００６９】
インターフェロンは、ウイルス感染細胞および免疫細胞により分泌されるサイトカインである。インターフェロンは、感染細胞に隣接する細胞上の特異的な受容体に結合することにより機能し、その細胞をウイルスによる感染から保護する細胞における変化を引き起こす。αおよびβ−インターフェロンはまた、感染細胞の表面上におけるクラスＩおよびクラスＩＩＭＨＣ分子の発現を誘発し、宿主免疫細胞認識のための抗原提示の増加をももたらす。αおよびβ−インターフェロンは、組換え形態として入手可能であり、慢性Ｂ型肝炎感染および慢性Ｃ型肝炎感染の治療に使用されている。抗ウイルス療法に有効な投与量では、インターフェロンは、発熱、倦怠感、および体重減少等の重篤な副作用を有する。
【００７０】
本発明における有用な抗ウイルス薬は、免疫グロブリン、アマンタジン、インターフェロン、ヌクレオチド類似体、およびプロテアーゼ阻害薬を含むが、これらに限定されない。抗ウイルス薬の特定の例は、アセマンナン、アシクロビル、アシクロビルナトリウム、アデホビル、アロブジン、アルビルセプトスドトックス（Ａｌｖｉｒｃｅｐｔ Ｓｕｄｏｔｏｘ）、塩酸アマンタジン、アラノチン、アリルドン、メシル酸アテビルジン（Ａｔｅｖｉｒｄｉｎｅ Ｍｅｓｙｌａｔｅ）、アブリジン、シドホビル、シパムフィリン、塩酸シタラビン、メシル酸デラビルジン、デスシクロビル、ジダノシン、ジソキサリル、エドクスジン、エンビラデン、エンビロキシム、ファムシクロビル、塩酸ファモチン、フィアシタビン、フィアルリジン、ホサリラート、ホスカルネトナトリウム、ホスホネトナトリウム、ガンシクロビル、ガンシクロビルナトリウム、イドクスウリジン、ケトキサール、ラミブジン、ロブカビル、塩酸メモチン、メチサゾン、ネビラピン、ペンシクロビル、ピロダビル、リバビリン、塩酸リマンタジン、メシル酸サキナビル、塩酸ソマンタジン（Ｓｏｍａｎｔａｄｉｎｅ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、ソリブジン、スタトロン、スタブジン、塩酸チロロン、トリフルリジン、塩酸バラシクロビル、ビダラビン、リン酸ビダラビン（Ｖｉｄａｒａｂｉｎｅ Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ）、ビダラビンリン酸ナトリウム（Ｖｉｄａｒａｂｉｎｅ Ｓｏｄｉｕｍ Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ）、ビロキシム、ザルシタビン、ジドブジン、およびジンビロキシムを含むが、これらに限定されない。
【００７１】
抗真菌薬は、伝染性真菌の治療および予防に有用である。抗真菌薬は、それらの作用メカニズムにより分類されることがある。いくつかの抗真菌薬は、グルコース合成酵素を阻害することにより細胞壁阻害薬として機能する。これらは、バシウンギン（ｂａｓｉｕｎｇｉｎ）／ＥＣＢを含むが、これに限定されない。他の抗真菌薬は、膜の完全性を不安定化することにより機能する。これらは、クロトリマゾール、セルタコンゾール（ｓｅｒｔａｃｏｎｚｏｌｅ）、フルコナゾール、イトラコナゾール、ケトコナゾール、ミコナゾール、およびボリコナコール（ｖｏｒｉｃｏｎａｃｏｌｅ）等のイミダゾールならびにＦＫ４６３、アンホテリシンＢ、ＢＡＹ３８−９５０２、ＭＫ９９１、プラディマイシン、ＵＫ２９２、ブテナフィン、およびテルビナフィンを含むが、これらに限定されない。他の抗真菌薬は、キチンの分解（たとえばキチナーゼ）または免疫抑制（５０１クリーム）により機能する。
【００７２】
本発明のｓｓＯＲＮはまた抗癌療法と共に投与されてもよい。抗癌療法は、癌薬物、放射線、および外科的処置を含む。本明細書中に使用されるように、「癌薬物」は、癌を治療する目的で対象に投与される作用物質を指す。本明細書中に使用されるように、「癌を治療すること」は、癌の発症を予防すること、癌の症状を緩和すること、および／または確立された癌の成長を阻害することを含む。他の態様では、癌薬物は、癌を発症する危険性を緩和する目的で、癌を発症する危険性を有する対象に投与される。癌の治療のための様々な種類の薬物が本明細書中に記載される。本明細書のために、癌薬物は、化学療法薬、免疫療法薬、癌ワクチン、ホルモン療法、および生物学的応答調節剤として分類される。
【００７３】
化学療法薬は、メトトレキサート、ビンクリスチン、アドリアマイシン、シスプラチン、非糖含有クロロエチルニトロソ尿素類（ｎｏｎ−ｓｕｇａｒ ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ ｃｈｌｏｒｏｅｔｈｙｌｎｉｔｒｏｓｏｕｒｅａｓ）、５−フルオロウラシル、マイトマイシンＣ、ブレオマイシン、ドキソルビシン、ダカルバジン、タキソール、フラギリン（ｆｒａｇｙｌｉｎｅ）、メグラミンＧＬＡ（Ｍｅｇｌａｍｉｎｅ ＧＬＡ）、バルルビシン、カルムスタイン（ｃａｒｍｕｓｔａｉｎｅ）およびポリフェルポサン（ｐｏｌｉｆｅｒｐｏｓａｎ）、ＭＭ１２７０、ＢＡＹ１２−９５６６、ＲＡＳファルネシル転移酵素阻害薬、ファルネシル転移酵素阻害薬、ＭＭＰ、ＭＴＡ／ＬＹ２３１５１４、ＬＹ２６４６１８／ロメテキソール（Ｌｏｍｅｔｅｘｏｌ）、グラモレク（Ｇｌａｍｏｌｅｃ）、ＣＩ−９９４、ＴＮＰ−４７０、ハイカムチン／トポテカン、ＰＫＣ４１２、バルスポダール／ＰＳＣ８３３、ノバントロン／ミトロキサントロン（Ｍｉｔｒｏｘａｎｔｒｏｎｅ）、メタレット（Ｍｅｔａｒｅｔ）／スラミン、バチマスタット、Ｅ７０７０、ＢＣＨ−４５５６、ＣＳ−６８２、９−ＡＣ、ＡＧ３３４０、ＡＧ３４３３、インセル（Ｉｎｃｅｌ）／ＶＸ−７１０、ＶＸ−８５３、ＺＤ０１０１、ＩＳＩ６４１、ＯＤＮ６９８、ＴＡ２５１６／マルミスタット（Ｍａｒｍｉｓｔａｔ）、ＢＢ２５１６／マルミスタット、ＣＤＰ８４５、Ｄ２１６３、ＰＤ１８３８０５、ＤＸ８９５１ｆ、レモナールＤＰ２２０２、ＦＫ３１７、ピシバニール／ＯＫ−４３２、ＡＤ３２／バルルビシン、メタストロン／ストロンチウム誘導体、テモダール／テモゾロマイド、エバセット（Ｅｖａｃｅｔ）／リポソームドキソルビシン、ユータキサン（Ｙｅｗｔａｘａｎ）／パクリタキセル、タキソール／パクリタキセル、ゼローダ／カペシタビン、フルツロン／ドキシフルリジン、シクロパックス（Ｃｙｃｌｏｐａｘ）／経口パクリタキセル、経口タキソイド、ＳＰＵ−０７７／シスプラチン、ＨＭＲ１２７５／フラボピリドール、ＣＰ−３５８（７７４）／ＥＧＦＲ、ＣＰ−６０９（７５４）／ＲＡＳ癌遺伝子阻害薬、ＢＭＳ−１８２７５１／経口プラチナ、ＵＦＴ（テガフール／ウラシル）、エルガミゾール／レバミゾール、エニルウラシル／７７６Ｃ８５／５ＦＵエンハンサー、カンプト／レバミゾール、カンプトサー／イリノテカン、ツモデックス（Ｔｕｍｏｄｅｘ）／ラルチトレキセド、ロイスタチン／クラドリビン、パキセックス（Ｐａｘｅｘ）／パクリタキセル、ドキシル／リポソームドキソルビシン、カエリックス（Ｃａｅｌｙｘ）／リポソームドキソルビシン、フルダラ／フルダラビン、ファルマルビシン（Ｐｈａｒｍａｒｕｂｉｃｉｎ）／エピルビシン、ＤｅｐｏＣｙｔ、ＺＤ１８３９、ＬＵ７９５５３／ビス−ナフタリミド（Ｎａｐｈｔａｌｉｍｉｄｅ）、ＬＵ１０３７９３／ドラスタチン、カエチックス（Ｃａｅｔｙｘ）／リポソームドキソルビシン、ジェムザール／ゲムシタビン、ＺＤ０４７３／アノルメッド（Ａｎｏｒｍｅｄ）、ＹＭ１１６、ヨウ素シード、ＣＤＫ４およびＣＤＫ２阻害薬、ＰＡＲＰ阻害薬、Ｄ４８０９／デキシフォサミド（Ｄｅｘｉｆｏｓａｍｉｄｅ）、イフェス（Ｉｆｅｓ）／メスネックス／イフォスアミド、ブモン（Ｖｕｍｏｎ）／テニポシド、パラプラチン／カルボプラチン、プランチノール（Ｐｌａｎｔｉｎｏｌ）／シスプラチン、ベプシド／エトポシド、ＺＤ９３３１、タキソテール／ドセタキセル、グアニンアラビノシドのプロドラッグ、タキサン類似体、ニトロソ尿素類、メルフェランおよびシクロホスファミド等のアルキル化薬、アミノグルテチミド、アスパラギナーゼ、ブスルファン、カルボプラチン、クロラムブシル、シタラビンＨＣＩ、ダクチノマイシン、ダウノルビシンＨＣｌ、リン酸エストラムスチンナトリウム、エトポシド（ＶＰ１６−２１３）、フロクスウリジン、フルオロウラシル（５−ＦＵ）、フルタミド、ヒドロキシ尿素（ヒドロキシカルバミド）、イホスファミド、インターフェロンアルファ−２ａ、アルファ−２ｂ、酢酸ロイプロリド（ＬＨＲＨ放出因子類似体）、ロムスチン（ＣＣＮＵ）、メクロレタミンＨＣｌ（ナイトロジェンマスタード）、メルカプトプリン、メスナ、ミトタン（ｏ．ｐ’−ＤＤＤ）、ミトキサントロンＨＣｌ、オクトレオチド、プリカマイシン、プロカルバジンＨＣｌ、ストレプトゾシン、クエン酸タモキシフェン、チオグアニン、チオテパ、硫酸ビンブラスチン、アムサクリン（ｍ−ＡＭＳＡ）、アザシチジン、エリスロポエチン、ヘキサメチルメラミン（ＨＭＭ）、インターロイキン２、ミトグアゾン（メチル−ＧＡＧ；メチルグリオキサールビス−グアニルヒドラゾン；ＭＧＢＧ）、ペントスタチン（２’デオキシコホルマイシン）、セムスチン（メチル−ＣＣＮＵ）、テニポシド（ＶＭ−２６）、ならびに硫酸ビンデシンからなる群から選択されてもよいが、そのように限定されない。
【００７４】
免疫療法薬は、リブタキシン（Ｒｉｂｕｔａｘｉｎ）、ハーセプチン、クアドラメット、パノレックス（Ｐａｎｏｒｅｘ）、ＩＤＥＣ−Ｙ２Ｂ８、ＢＥＣ２、Ｃ２２５、オンコリム（Ｏｎｃｏｌｙｍ）、ＳＭＡＲＴ Ｍ１９５、ＡＴＲＡＧＥＮ、オバレックス、ベキサール、ＬＤＰ−０３、ｉｏｒ ｔ６、ＭＤＸ−２１０、ＭＤＸ−１１、ＭＤＸ−２２、ＯＶ１０３、３６２２Ｗ９４、抗ＶＥＧＦ、ゼナパックス、ＭＤＸ−２２０、ＭＤＸ−４４７、ＭＥＬＩＭＭＵＮＥ−２、ＭＥＬＩＭＭＵＮＥ−１、ＣＥＡＣＩＤＥ、プレターゲット（Ｐｒｅｔａｒｇｅｔ）、ＮｏｖｏＭＡｂ−Ｇ２、ＴＮＴ、グリオマブ（Ｇｌｉｏｍａｂ）−Ｈ、ＧＮＩ−２５０、ＥＭＤ−７２０００、ＬｙｍｐｈｏＣｉｄｅ、ＣＭＡ６７６、モノファーム（Ｍｏｎｏｐｈａｒｍ）−Ｃ、４Ｂ５、ｉｏｒ ｅｇｆ．ｒ３、ｉｏｒ ｃ５、ＢＡＢＳ、抗ＦＬＫ−２、ＭＤＸ−２６０、ＡＮＡ Ａｂ、ＳＭＡＲＴ １Ｄ１０ Ａｂ、ＳＭＡＲＴ ＡＢＬ ３６４ Ａｂ、およびＩｍｍｕＲＡＩＴ−ＣＥＡからなる群から選択されてもよいが、そのように限定されない。
【００７５】
癌ワクチンは、ＥＧＦ、抗イディオタイプ癌ワクチン、Ｇｐ７５抗原、ＧＭＫ黒色腫ワクチン、ＭＧＶガングリオシド抱合ワクチン、Ｈｅｒ２／ｎｅｕ、オバレックス、Ｍ−Ｖａｘ、Ｏ−Ｖａｘ、Ｌ−Ｖａｘ、ＳＴｎ−ＫＨＬテラトープ、ＢＬＰ２５（ＭＵＣ−１）、リポソームイディオタイプワクチン、メラシン、ペプチド抗原ワクチン、毒素／抗原ワクチン、ＭＶＡベースワクチン、ＰＡＣＩＳ、ＢＣＧワクチン、ＴＡ−ＨＰＶ、ＴＡ−ＣＩＮ、ＤＩＳＣウイルス、ならびにＩｍｍｕＣｙｓｔ／ＴｈｅｒａＣｙｓからなる群から選択されてもよいが、そのように限定されない。
【００７６】
本発明のｓｓＯＲＮは、喘息／アレルギー薬物と共に対象に投与されてもよい。本明細書中に使用される「喘息／アレルギー薬物」は、喘息またはアレルギー反応の症状を緩和する、発症を予防する、または阻害するものの組成物である。喘息およびアレルギーの治療のための様々な種類の薬物は、ｔｈｅ Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ Ｆｏｒ Ｔｈｅ Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ａｎｄ Ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ ｏｆ Ａｓｔｈｍａ，Ｅｘｐｅｒｔ Ｐａｎｅｌ Ｒｅｐｏｒｔ ２，ＮＩＨ Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ Ｎｏ．９７／４０５１，Ｊｕｌｙ １９，１９９７中に記載され、その全内容が参照により本明細書中に組み込まれる。ＮＩＨ ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎに記載される薬物の概要を以下に示す。ほとんどの実施形態では、喘息／アレルギー薬物は、喘息およびアレルギーの両方に対してある程度まで有用である。
【００７７】
喘息の治療のための薬品は、急速軽減薬品および長期制御薬品の２つのカテゴリーに通常分けられる。喘息患者は、持続性喘息の制御を達成し、維持するために、長期制御薬品を毎日服用する。長期制御薬品は、コルチコステロイド類、クロモリンナトリウム、およびネドクロミル等の抗炎症薬、長時間作用性β２−作用薬およびメチルキサンチン類等の長時間作用性気管支拡張薬、ならびにロイコトリエン調節剤を含む。急速軽減薬品は、短時間作用性β２作用薬、抗コリン作動薬、および全身性コルチコステロイド類を含む。これらの薬剤のそれぞれと関連する多くの副作用があり、薬剤のうちのどれも、単独でもまたは組み合わせても、喘息を予防するまたは完全に治療することができない。
【００７８】
喘息薬物は、ＰＤＥ−４阻害薬、気管支拡張薬／ベータ−２作用薬、Ｋ＋チャネル開口薬、ＶＬＡ−４拮抗薬、ニューロキン拮抗薬、トロンボキサンＡ２（ＴＸＡ２）合成阻害薬、キサンチン、アラキドン酸拮抗薬、５リポキシゲナーゼ阻害薬、ＴＸＡ２受容体拮抗薬、ＴＸＡ２拮抗薬、５−リポックス（５−ｌｉｐｏｘ）活性化タンパク質の阻害薬、およびプロテアーゼ阻害薬を含むが、これらに限定されない。
【００７９】
気管支拡張薬／β２作用薬は、気管支拡張または平滑筋弛緩を引き起こす化合物の１つのクラスである。気管支拡張薬／β２作用薬は、サルメテロール、サルブタモール、アルブテロール、テルブタリン、Ｄ２５２２／ホルモテロール、フェノテロール、ビトルテロール、ピルブエロール（ｐｉｒｂｕｅｒｏｌ）メチルキサンチン、およびオルシプレナリンを含むが、これらに限定されない。長時間作用性β２作用薬および気管支拡張薬は、抗炎症療法に加えて症状の長期予防に使用される化合物である。長時間作用性β２作用薬は、サルメテロールおよびアルブテロールを含むが、これらに限定されない。これらの化合物は、コルチコステロイド類と組み合わせて普通使用され、炎症療法が何らなければ通常使用されない。それら化合物は、頻脈、骨格筋振戦、低カリウム血症、および過量投与でのＱＴｃ間隔の延長等の副作用と関連している。
【００８０】
たとえばテオフィリンを含むメチルキサンチン類は、症状の長期制御および予防に使用されてきた。これらの化合物は、ホスホジエステラーゼ阻害およびおそらくアデノシン拮抗作用に起因する気管支拡張の原因となる。用量関連の急性毒性がこれらの種類の化合物の特有の問題である。結果として、代謝クリアランスにおける個人差から起こる毒性および狭い治療域を明らかにするために、日常の血清濃度を監視しなければならない。副作用は、頻脈、頻脈性不整脈、吐き気および嘔吐、中枢神経系刺激、頭痛、発作、吐血、高血糖症、ならびに低カリウム血症を含む。短時間作用性β２作用薬は、アルブテロール、ビトルテロール、ピルブテロール、およびテルブタリンを含むが、これらに限定されない。短時間作用性β２作用薬の投与と関連するいくつかの有害作用は、頻脈、骨格筋振戦、低カリウム血症、乳酸の増加、頭痛、および高血糖症を含む。
【００８１】
アレルギーを治療するまたは予防するための従来の方法は、抗ヒスタミン薬または脱感作療法の使用を伴った。アレルギー反応の化学伝達物質の影響をブロックする抗ヒスタミン薬および他の薬剤は、アレルギー症状の重症度を調節するのに役立つが、アレルギー反応を予防せず、続くアレルギー応答に対する効果を有していない。脱感作療法は、アレルゲンに対するＩｇＧ型応答を誘発するために、少用量のアレルゲンを、普通皮下注射により与えることにより実行される。ＩｇＧ抗体の存在は、ＩｇＥ抗体の誘発に起因する伝達物質の生産を中和するのに役立つと考えられる。最初、対象は、重篤な反応を誘発するのを回避するために、非常に低用量のアレルゲンで治療され、用量を徐々に増加させる。この種類の療法は、対象が、アレルギー応答を引き起こす化合物を実際に投与され、重篤なアレルギー反応が結果として生じ得るので、危険である。
【００８２】
アレルギー薬物は、抗ヒスタミン薬、ステロイド類、およびプロスタグランジン誘発剤を含むが、これらに限定されない。抗ヒスタミン薬は、肥満細胞または好塩基球により放出されるヒスタミンに反作用する化合物である。これらの化合物は、当技術分野でよく知られており、アレルギーの治療に一般に使用される。抗ヒスタミン薬は、アステミゾール、アゼラスチン、ベータタスチン（ｂｅｔａｔａｓｔｉｎｅ）、ブクリジン、セチリジン、セチリジン類似体、ＣＳ５６０、デスロラタジン、エバスチン、エピナスチン、フェキソフェナジン、ＨＳＲ６０９、レボカバスチン、ロラチジン、ミゾラスチン、ノルアステミゾール、テルフェナジン、およびトラニラストを含むが、これらに限定されない。
【００８３】
プロスタグランジン誘発剤は、プロスタグランジン活性を誘発する化合物である。プロスタグランジンは、平滑筋弛緩を調節することにより機能する。プロスタグランジン誘発剤は、Ｓ−５７５１を含むが、これに限定されない。
【００８４】
喘息／アレルギー薬物はまた、ステロイド類および免疫調節薬も含む。ステロイド類は、ベクロメタゾン、フルチカゾン、トリアムシノロン、ブデソニド、コルチコステロイド類、およびブデソニドを含むが、これらに限定されない。
【００８５】
コルチコステロイド類は、ジプロピオン酸ベクロメサゾン（ｂｅｃｌｏｍｅｔｈａｓｏｍｅ ｄｉｐｒｏｐｉｏｎａｔｅ）、ブデソニド、フルニソリド、プロピオン酸フルチカゾン、およびトリアムシノロンアセトニドを含むが、これらに限定されない。デキサメタゾンは、抗炎症作用を有するコルチコステロイドであるが、デキサメタゾンは高度に吸収され、有効用量で長期抑制性の副作用を有するので、喘息／アレルギーの治療のために吸入形態で普通は使用されない。しかしながら、デキサメタゾンは、本発明の核酸と組み合わせて投与される場合、副作用を緩和するよう低用量で投与することができるので、喘息／アレルギーの治療のために本発明に従って使用することができる。コルチコステロイドと関連するいくつかの副作用は、咳、発声障害、鵞口瘡（カンジダ症）、ならびにより高用量では、副腎抑制、骨粗鬆症、成長抑制、皮膚菲薄化、および容易に紫斑を生じる等の全身作用を含む。Ｂａｒｎｅｓ＆Ｐｅｔｅｒｓｏｎ（１９９３）Ａｍ Ｒｅｖ Ｒｅｓｐｉｒ Ｄｉｓ １４８：Ｓ１−Ｓ２６およびＫａｍａｄａ ＡＫら（１９９６）Ａｍ Ｊ Ｒｅｓｐｉｒ Ｃｒｉｔ Ｃａｒｅ Ｍｅｄ １５３：１７３９−４８。
【００８６】
全身性コルチコステロイド類は、メチルプレドニソロン、プレドニゾロン、およびプレドニゾンを含むが、これらに限定されない。コルチコステロイド類は、グルコース代謝、食欲亢進、体液貯留、体重増加、気分変動、高血圧症、消化性潰瘍、および無腐性骨壊死における可逆的な異常と関連する。これらの化合物は、不適当に制御された持続性喘息における炎症反応の短期（３〜１０日）予防に有用である。これらの化合物はまた、重篤な持続性喘息における症状の長期予防において、炎症を抑制し、制御し、実際に後退させるためにも機能する。より長期の使用と関連するいくつかの副作用は、副腎軸の抑制、成長抑制、真皮の菲薄化、高血圧症、糖尿病、クッシング症候群、白内障、筋力低下、およびまれな例では免疫機能障害を含む。これらの種類の化合物はそれらの最低の有効用量で使用されることが勧められる（ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ａｎｄ ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ ｏｆ ａｓｔｈｍａ；ｅｘｐｅｒｔ ｐａｎｅｌ ｒｅｐｏｒｔ ｔｏ；ＮＩＨ Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ Ｎｏ．９７−４０５１；Ｊｕｌｙ １９９７）。
【００８７】
免疫調節薬は、抗炎症薬、ロイコトリエン拮抗薬、ＩＬ−４ムテイン、可溶性ＩＬ−４受容体、免疫抑制薬（寛容化するペプチドワクチン等）、抗ＩＬ−４抗体、ＩＬ−４拮抗薬、抗ＩＬ−５抗体、可溶性ＩＬ−１３受容体−Ｆｃ融合タンパク質、抗ＩＬ−９抗体、ＣＣＲ３拮抗薬、ＣＣＲ５拮抗薬、ＶＬＡ−４阻害薬、およびＩｇＥのダウンレギュレーターからなる群を含むが、これらに限定されない。
【００８８】
ロイコトリエン調節剤は、軽度の持続性喘息における症状の長期制御および予防のために使用されることが多い。ロイコトリエン調節剤は、ＬＴＤ−４受容体およびＬＴＥ−４受容体と選択的に競合することにより、ロイコトリエン受容体拮抗薬として機能する。これらの化合物は、ザフィルルーカスト錠剤およびジロートン錠剤を含むが、これらに限定されない。ジロートン錠剤は、５−リポキシゲナーゼ阻害薬として機能する。これらの薬剤は、肝酵素の上昇ならびに可逆的な肝炎および高ビリルビン血症のいくつかの症例と関連する。ロイコトリエンは、肥満細胞、イノシネオフィル、および好塩基球から放出され、喘息を有する患者の気道において気道平滑筋の収縮を引き起こし、血管透過性、粘液分泌を増加させ、炎症細胞を活性化する生化学的伝達物質である。
【００８９】
他の免疫調節薬は、免疫調節特性を有することが示された神経ペプチドを含む。機能的研究は、Ｐ物質が、たとえば、特異的受容体媒介性メカニズムによるリンパ球機能に影響を及ぼし得ることを示した。Ｐ物質はまた、粘膜の肥満細胞からのアラキドン酸誘導性伝達物質の産生を刺激することにより、別の即時型過敏症応答を調整することも示された。ＭｃＧｉｌｌｉｅｓ Ｊら（１９８７）Ｆｅｄ Ｐｒｏｃ ４６：１９６−９（１９８７）。Ｐ物質は、１９３１年に初めて同定された神経ペプチドである。Ｖｏｎ ＥｕｌｅｒおよびＧａｄｄｕｍ Ｊ Ｐｈｙｓｉｏｌ（Ｌｏｎｄｏｎ）７２：７４−８７（１９３１）。そのアミノ酸配列は、１９７１年にＣｈａｎｇらにより報告された。Ｃｈａｎｇ ＭＭら（１９７１）Ｎａｔｕｒｅ Ｎｅｗ Ｂｉｏｌ ２３２：８６−８７。Ｐ物質の断片の免疫調節活性は、Ｓｉｅｍｉｏｎ ＩＺら（１９９０）Ｍｏｌｅｃ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２７：８８７−８９０（１９９０）により研究された。
【００９０】
他のクラスの化合物は、ＩｇＥのダウンレギュレーターである。これらの化合物は、ＩｇＥ受容体に結合する能力を有するペプチドまたは他の分子を含み、それによって抗原特異的ＩｇＥの結合を予防する。ＩｇＥの他の種類のダウンレギュレーターは、ヒトＩｇＥ分子のＩｇＥ受容体結合領域に対して指向性のモノクローナル抗体である。したがって、ＩｇＥのある種類のダウンレギュレーターは、抗ＩｇＥ抗体または抗体断片である。抗ＩｇＥはＧｅｎｅｎｔｅｃｈ社により開発されている。当業者は、同一の機能を有する結合ペプチドの機能的に活性な抗体断片を調製することができる。他の種類のＩｇＥダウンレギュレーターは、細胞表面上のＦｃ受容体に対するＩｇＥ抗体の結合をブロックするおよびＩｇＥが既に結合している結合部位からＩｇＥを退去させることができるポリペプチドである。
【００９１】
ＩｇＥのダウンレギュレーターと関連する１つの問題は、多くの分子が、自然のままのＩｇＥ分子およびその受容体の間の非常に強い相互作用に相当する、受容体に対する結合強度を有していないということである。この強度を有する分子は受容体に不可逆的に結合する傾向がある。しかしながら、上記物質は、体内の他の構造的に類似する分子に共有結合して、ブロックすることができるので、比較的有毒である。この背景において興味があるのは、ＩｇＥ受容体のα鎖が、たとえば数個の異なるＩｇＧ Ｆｃ受容体が含有される、より大きな遺伝子ファミリーに属するということである。これらの受容体は、たとえば細菌感染に対する体の防御にとって絶対的に不可欠である。共有結合のために活性化された分子は、さらに、比較的不安定であることが多く、したがって、それら分子は、肥満細胞および好塩基白血球上のＩｇＥ受容体の継続的に再生されるプールを完全にブロックすることを可能にするために、１日に数回、そのうえ比較的高濃度でたいてい投与されなければならない。
【００９２】
クロモリンナトリウムおよびネドクロミルは、運動から起こる喘息症状をまたはアレルゲンから起こるアレルギー症状を主に予防するために長期制御薬品として使用される。これらの化合物は、クロライドチャネル機能を妨害することによりアレルゲンに対する早期反応および遅延反応をブロックすると考えられる。それら化合物はまた、肥満細胞膜を安定化し、イノシネオフィルおよび上皮細胞からの伝達物質の活性化および放出を阻害する。４〜６週間の投与の期間が最大の利益を達成するために通常必要とされる。
【００９３】
抗コリン薬は、急性気管支痙攣の軽減に通常使用される。これらの化合物は、ムスカリン性コリン受容体の競合的阻害により機能すると考えられる。抗コリン薬は、臭化イプラトロピウムを含むが、これに限定されない。これらの化合物は、コリン媒介性の気管支痙攣のみを後退させ、抗原に対するいかなる反応をも修飾しない。副作用は、口および呼吸器の分泌物の乾燥、何人かの個人における喘鳴の増加、ならびに眼中に噴霧された場合のかすみ目を含む。
【００９４】
ｉｎ ｖｉｔｒｏおよびｉｎ ｖｉｖｏでのそれら化合物の使用のために、本発明のｓｓＯＲＮは有効量で通常使用される。本明細書中に使用されるように、有効量は、所望の生物学的効果を達成するのに十分である任意の量を通常指す。一実施形態では、有効量は臨床的に有効な量であり、臨床的に有効な量は、疾患を有する対象を治療するのに十分である任意の量である。本明細書中に使用されるように、治療および治療することは、疾患を有するまたは有する危険性のある対象における疾患の少なくとも１つの徴候または症状を緩和する、除去する、または予防することを指す。本明細書中に使用されるように、対象は、ヒトまたは他の哺乳動物を指す。
【００９５】
本明細書中に提供される教示と組み合わせて、様々な活性化合物の中から選択し、効力、相対的生物学的利用能、患者体重、有害副作用の重症度、および投与の好ましいモード等の因子を考察することにより、実質的な毒性を引き起こさず、さらに、特定の対象を治療するのに有効である、有効な予防的または治療的な治療レジメンを計画することができる。任意の特定用途に対する有効量は、治療されている疾患もしくは状態、投与されている特定のｓｓＯＲＮ、対象の大きさ、または疾患もしくは状態の重症度のような因子に依存して変動し得る。当業者は、必要以上の実験法を要することなく、特定のｓｓＯＲＮおよび／または他の治療薬の有効量を経験的に決定することができる。最大用量、すなわちいくつかの医学的判断に従った最も高度な安全用量が使用されることが通常好ましい。１日当たり複数回の用量が、化合物の適切な全身レベルを達成するために企図されてもよい。適切な全身レベルは、たとえば患者の薬剤の最高または持続血漿レベルの測定により決定することができる。「用量」および「投与量」は、本明細書中において区別なく使用される。
【００９６】
通常、活性化合物の日々の経口用量は、１日当たり約０．０１ミリグラム／ｋｇから１日当たり１０００ミリグラム／ｋｇまでであろう。０．５〜５０ミリグラム／ｋｇの範囲での経口用量は、１日当たり１回または数回の投与で所望の結果をもたらすであろうということが期待される。投与量は、局所性または全身性の所望の薬剤レベルを達成するために、投与のモードに依存して適切に調整されてもよい。たとえば、静脈内投与は、１日当たり一桁から数桁低い用量であろうということが期待される。対象における応答が上記用量で不十分な場合、さらに高度な用量（またはより局所的な異なる送達経路による有効なより高度な用量）が患者の耐性が許す程度まで利用されてもよい。１日当たり複数回の用量が、化合物の適切な全身レベルを達成するために企図される。
【００９７】
本明細書中に記載される任意の化合物については、治療的有効量は、動物モデルから最初に決定することができる。治療的有効用量はまた、ヒトにおいて試験されたｓｓＯＲＮについてのおよび他の関係する活性剤等の類似する薬理活性を示すことで知られている化合物についてのヒトデータから決定することもできる。より高度な用量は、非経口投与のために必要とされてもよい。適用用量は、投与された化合物の相対的生物学的利用能および効力に基づいて調整することができる。上記に記載される方法および当技術分野でよく知られている他の方法に基づき最大の効能を達成するために用量を調整することは、当業者の能力の範囲内に十分にある。
【００９８】
細胞中へのｓｓＯＲＮの送達を促進するために、ｓｓＯＲＮは、任意選択により、カチオン脂質と共に提供する、製剤する、またはその他の場合では組み合わせることができる。一実施形態では、上記カチオン脂質はＤＯＴＡＰである。
【００９９】
療法における使用のために、有効量のｓｓＯＲＮは、所望の表面にｓｓＯＲＮを送達する任意の形態により対象に投与することができる。本発明の医薬組成物の投与は、当業者に知られている任意の手段により成し遂げられてもよい。投与の好ましい経路は、経口、非経口、筋肉内、鼻腔内、舌下、気管内、吸入、眼、膣、および直腸を含むが、これらに限定されない。
【０１００】
本発明のｓｓＯＲＮは、ベクターの支援を伴って、特定の組織、細胞型にもしくは免疫系にまたは両方に送達されてもよい。その最も広い意味では、「ベクター」は、標的細胞への組成物の移行を容易にすることができる任意の媒体である。ベクターは、ベクターの非存在において結果として生じるであろう分解の程度に比べて分解が緩和された状態で、ｓｓＯＲＮ、抗体、抗原、および／または障害特異的薬物を標的細胞に通常輸送する。
【０１０１】
通常、本発明において有用なベクターは、２つのクラス、生物学的ベクターおよび化学的／物理的ベクターに分類される。生物学的ベクターおよび化学的／物理的ベクターは、本発明の治療薬の送達および／または取込みに有用である。
【０１０２】
本明細書中に使用されるように、「化学的／物理的ベクター」は、細菌学的な源またはウイルス源に由来するもの以外の、ｓｓＯＲＮおよび／または他の薬物を送達することができる天然分子または合成分子を指す。
【０１０３】
本発明の好ましい化学的／物理的ベクターはコロイド分散系である。コロイド分散系は、水中油型乳剤、ミセル、混合ミセル、およびリポソームを含む脂質ベースの系を含む。本発明の好ましいコロイド系はリポソームである。リポソームは、ｉｎ ｖｉｖｏまたはｉｎ ｖｉｔｒｏでの送達ベクターとして有用である人工膜器である。大型単層小胞（ＬＵＶ）は、大きさが０．２〜４．０μｍに及び、大きな巨大分子をカプセル化することができることが示されている。ＲＮＡ、ＤＮＡ、および完全ウイルス粒子は水性内部内にカプセル化され、生物学的に活性な形態で細胞に送達することができる。Ｆｒａｌｅｙら（１９８１）Ｔｒｅｎｄｓ Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｓｃｉ ６：７７。
【０１０４】
リポソームは、モノクローナル抗体、糖、糖脂質、またはタンパク質等の特異的リガンドにリポソームをつなぐことにより、特定の組織を標的として送り込まれてよい。リポソームを免疫細胞を標的として送り込むのに有用である可能性のあるリガンドは、次のものを含むが、これらに限定されない：免疫細胞特異的受容体と相互作用する分子の完全体または断片および免疫細胞の細胞表面マーカーと相互作用する、抗体等の分子。上記リガンドは、当業者によく知られている結合アッセイにより容易に同定することができる。さらに他の実施形態では、リポソームは、前に説明した免疫療法の抗体のうちの１つにリポソームをつなぐことにより、癌を標的に送り込まれてもよい。さらに、ベクターは、核標的ペプチドにつながれてもよく、宿主細胞の核にベクターを向けるであろう。
【０１０５】
移入のための脂質製剤は、たとえば、ＥＦＦＥＣＴＥＮＥ（商標）（特有のＤＮＡ凝縮エンハンサーを有する非リポソーム脂質）およびＳＵＰＥＲＦＥＣＴ（商標）（新規な活性型デンドリマー技術）としてＱＩＡＧＥＮ社から市販で入手可能である。
【０１０６】
リポソームは、たとえばＬＩＰＯＦＥＣＴＩＮ（商標）およびＬＩＰＯＦＥＣＴＡＣＥ（商標）として、Ｇｉｂｃｏ ＢＲＬ社から市販で入手可能であり、これらは、Ｎ−［１−（２，３ジオレイルオキシ）−プロピル］−Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチル塩化アンモニウム（ＤＯＴＭＡ）および臭化ジメチルジオクタデシルアンモニウム（ＤＤＡＢ）等のカチオン脂質から形成される。リポソームを作製するための方法は、当技術分野でよく知られており、多くの刊行物中に記載されている。リポソームはまた、Ｇｒｅｇｏｒｉａｄｉｓ Ｇ（１９８５）Ｔｒｅｎｄｓ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ ３：２３５−２４１によっても概説されている。
【０１０７】
一実施形態では、媒体は、哺乳動物レシピエントへの移植または投与に適した生体適合性の微小粒子または移植片である。この方法で用いるのに有用である例示的な生浸食性移植片は、「Ｐｏｌｙｍｅｒｉｃ Ｇｅｎｅ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｓｙｓｔｅｍ」と題する公開国際出願ＷＯ９５／２４９２９に記載されている。ＷＯ９５／２４９２９は、適切なプロモーターの制御下の外来性遺伝子を含有するための生体適合性で、好ましくは生分解性のポリマーマトリックスを記載している。ポリマーマトリックスは、対象における治療薬の持続放出を達成するために使用することができる。
【０１０８】
ポリマーマトリックスは、好ましくは、微粒子等の微小粒子（核酸および／または他の治療薬は固体ポリマーマトリックスの全体にわたって分散される）またはマイクロカプセル（核酸および／または他の治療薬はポリマーシェルのコア中に貯蔵される）の形態をしている。治療薬を含有するためのポリマーマトリックスの他の形態は、フィルム、コーティング、ゲル、移植片、およびステントを含む。ポリマーマトリックス装置の大きさおよび組成は、マトリックスが導入される組織における好都合な放出動態をもたらすよう選択される。ポリマーマトリックスの大きさは、使用されることになる送達の方法、典型的には組織への注射またはエアロゾルによる鼻のおよび／もしくは肺のエリアへの懸濁剤の投与に従ってさらに選択される。好ましくは、エアロゾル経路が使用される場合、ポリマーマトリックスならびに核酸および／または他の治療薬は界面活性剤の媒体中に包含される。ポリマーマトリックス組成は、好都合な分解速度を有するのみならず、生体接着性である材料からさらに形成され、マトリックスが、傷害を負った鼻のおよび／または肺の表面に投与される場合に、移行の有効性をさらに増加させるように選択することができる。マトリックス組成はまた、分解するのではなく、長期間にわたり拡散により放出するよう選択することもできる。いくつかの好ましい実施形態では、核酸は、移植片を介して対象に投与され、一方、他の治療薬は急性的に投与される。経口送達または粘膜送達等の送達に適している生体適合性微粒子は、Ｃｈｉｃｋｅｒｉｎｇら（１９９６）Ｂｉｏｔｅｃｈ Ｂｉｏｅｎｇ ５２：９６−１０１およびＭａｔｈｉｏｗｉｔｚ Ｅら（１９９７）Ｎａｔｕｒｅ ３８６：４１０−４１４およびＰＣＴ特許出願ＷＯ９７／０３７０２中に開示されている。
【０１０９】
非生分解性および生分解性ポリマーマトリックスは、核酸および／または他の治療薬を対象に送達するために使用することができる。生分解性マトリックスが好ましい。上記ポリマーは、天然または合成ポリマーであってもよい。ポリマーは、通常数時間から１年、またはそれよりも長い、放出が所望される時間に基づいて選択される。典型的に、数時間および３〜１２か月の間の範囲の期間にわたる放出が、特に核酸薬については最も望ましい。ポリマーは任意選択により、水中でその重量の約９０％まで吸収することができ、かつ多原子価イオンまたは他のポリマーとさらに任意選択により架橋しているヒドロゲルの形態をしている。
【０１１０】
特に興味のある生体接着性ポリマーは、Ｈ．Ｓ．Ｓａｗｈｎｅｙ、Ｃ．Ｐ．Ｐａｔｈａｋ、およびＪ．Ａ．ＨｕｂｅｌｌによりＭａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ、（１９９３）２６：５８１−５８７中に記載されている生浸食性ヒドロゲルを含み、その教示は本明細書中に組み込まれている。これらは、ポリヒアルロン酸、カゼイン、ゼラチン、グルチン、ポリアンヒドリド、ポリアクリル酸、アルギン酸、キトサン、ポリ（メタクリル酸メチル）、ポリ（メタクリル酸エチル）、ポリ（メタクリル酸ブチル）、ポリ（メタクリル酸イソブチル）、ポリ（メタクリル酸ヘキシル）、ポリ（メタクリル酸イソデシル）、ポリ（メタクリル酸ラウリル）、ポリ（メタクリル酸フェニル）、ポリ（アクリル酸メチル）、ポリ（アクリル酸イソプロピル）、ポリ（アクリル酸イソブチル）、およびポリ（アクリル酸オクタデシル）を含む。
【０１１１】
コンパクション剤の使用もまた望ましい可能性がある。コンパクション剤はまた、単独でまたは生物学的もしくは化学的／物理的ベクターと組み合わせて使用することもできる。「コンパクション剤」は、本明細書中に使用されるように、ヒストン等の作用物質を指し、核酸上の負電荷を中和し、それによって、細粒中への核酸のコンパクションを可能にする。核酸のコンパクションは標的細胞による核酸の取込みを容易にする。コンパクション剤は、単独で、つまり細胞によりより効率的に取込まれる形態で核酸を送達するために使用することができ、または、より好ましくは、１つまたは複数の上記ベクターと組み合わせて使用することができる。
【０１１２】
核酸の取込みを容易にするために使用することができる他の例示的な組成物は、リン酸カルシウムおよび細胞内輸送の他の化学伝達物質、微量注射組成物、電気穿孔法および相同組換えの組成物（たとえば標的細胞染色体内の予め選択された位置に核酸を組み込むための）を含む。
【０１１３】
化合物は、単独で（たとえば食塩水もしくは緩衝液中で）または当技術分野で知られている任意の送達ベクターを使用して投与されてもよい。たとえば、以下の送達媒体が記載されている：蝸牛状物（ｃｏｃｈｌｅａｔｅ）（Ｇｏｕｌｄ−Ｆｏｇｅｒｉｔｅら，１９９４，１９９６）；エマルソーム（Ｅｍｕｌｓｏｍｅ）（Ｖａｎｃｏｔｔら，１９９８，Ｌｏｗｅｌｌら，１９９７）；ＩＳＣＯＭ（Ｍｏｗａｔら，１９９３，Ｃａｒｌｓｓｏｎら，１９９１，Ｈｕら，１９９８，Ｍｏｒｅｉｎら，１９９９）；リポソーム（Ｃｈｉｌｄｅｒｓら，１９９９，Ｍｉｃｈａｌｅｋら，１９８９，１９９２，ｄｅ Ｈａａｎ １９９５ａ，１９９５ｂ）；生細菌ベクター（たとえばサルモネラ菌、大腸菌、カルメットゲラン桿菌、赤痢菌、乳酸桿菌）（Ｈｏｎｅら，１９９６，Ｐｏｕｗｅｌｓら，１９９８，Ｃｈａｔｆｉｅｌｄら，１９９３，Ｓｔｏｖｅｒら，１９９１，Ｎｕｇｅｎｔら，１９９８）；生ウイルスベクター（たとえばワクシニア、アデノウイルス、単純ヘルペス）（Ｇａｌｌｉｃｈａｎら，１９９３，１９９５，Ｍｏｓｓら，１９９６，Ｎｕｇｅｎｔら，１９９８，Ｆｌｅｘｎｅｒら，１９８８，Ｍｏｒｒｏｗら，１９９９）；微粒子（Ｇｕｐｔａら，１９９８，Ｊｏｎｅｓら，１９９６，Ｍａｌｏｙら，１９９４，Ｍｏｏｒｅら，１９９５，Ｏ’Ｈａｇａｎら，１９９４，Ｅｌｄｒｉｄｇｅら，１９８９）；核酸ワクチン（Ｆｙｎａｎら，１９９３，Ｋｕｋｌｉｎら，１９９７，Ｓａｓａｋｉら，１９９８，Ｏｋａｄａら，１９９７，Ｉｓｈｉｉら，１９９７）；ポリマー（たとえばカルボキシメチルセルロース、キトサン）（Ｈａｍａｊｉｍａら，１９９８，Ｊａｂｂａｌ−Ｇｉｌｌら，１９９８）；ポリマー環（Ｗｙａｔｔら，１９９８）；プロテオソーム（Ｖａｎｃｏｔｔら，１９９８，Ｌｏｗｅｌｌら，１９８８，１９９６，１９９７）；フッ化ナトリウム（Ｈａｓｈｉら，１９９８）；トランスジェニック植物（Ｔａｃｋｅｔら，１９９８，Ｍａｓｏｎら，１９９８，Ｈａｑら，１９９５）；ビロソーム（Ｇｌｕｃｋら，１９９２，Ｍｅｎｇｉａｒｄｉら，１９９５，Ｃｒｙｚら，１９９８）；およびウイルス様粒子（Ｊｉａｎｇら，１９９９，Ｌｅｉｂｌら，１９９８）。
【０１１４】
本発明の製剤は、薬学的に許容できる溶液中において投与され、この溶液は、薬学的に許容できる濃度の塩、緩衝薬、防腐薬、適合性のある担体、アジュバント、および任意選択により他の治療的要素を慣例的に含有していてもよい。
【０１１５】
薬学的に許容できる担体という用語は、ヒトまたは他の脊椎動物の投与に適している１つまたは複数の適合性のある固体もしくは液体の増量剤、希釈剤、またはカプセル化物質を意味する。担体という用語は、活性要素が適用を容易にするよう組み合わせられる天然または合成の有機または無機の要素を示す。医薬組成物の成分はまた、所望の医薬品効率を実質的に損なうであろう相互作用がないような様式で、本発明の化合物とおよび互いに混ぜ合わせることもできる。
【０１１６】
経口投与については、化合物（つまりｓｓＯＲＮおよび任意選択により他の治療薬）は、当技術分野でよく知られている薬学的に許容できる担体と活性化合物（複数可）を組み合わせることにより容易に製剤することができる。上記担体は、治療されることになる対象による経口摂取のために、錠剤、丸剤、糖剤、カプセル剤、液剤、ゲル、シロップ剤、スラリー、および懸濁剤等として本発明の化合物を製剤することを可能にする。経口使用のための医薬調製物は、固体賦形剤として得ることができ、任意選択により結果としての混合物を粉砕し、適した佐剤を追加した後に顆粒の混合物を加工して、所望の場合に、錠剤または糖剤コアを得ることができる。適した賦形剤は、特に、ラクトース、スクロース、マンニトール、またはソルビトールを含む糖；たとえば、トウモロコシデンプン、コムギデンプン、コメデンプン、バレイショデンプン、ゼラチン、トラガカントゴム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチル−セルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、および／またはポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）等のセルロース調製物等の増量剤である。所望の場合、架橋ポリビニルピロリドン、寒天、またはアルギン酸もしくはアルギン酸ナトリウム等のその塩等の崩壊剤が追加されてもよい。任意選択により、経口製剤はまた、内部酸性状態の中和のために、食塩水または緩衝液、たとえばＥＤＴＡ中に製剤されてもよく、またはいかなる担体もなしで投与されてもよい。
【０１１７】
上記の成分（複数可）の経口剤形もまた特に企図される。成分（複数可）は、誘導体の経口送達が効果的となるように、化学的に修飾されてもよい。通常、企図される化学修飾は、成分分子自体への少なくとも１つの部分の付着であり、上述の部分は、（ａ）タンパク質分解の阻害および（ｂ）胃または腸からの血流中への取込みを可能にする。成分（複数可）の全体的な安定性の増加および体内の循環時間の増加もまた所望される。上記部分の例は、次のものを含む：ポリエチレングリコール、エチレングリコールおよびプロピレングリコールのコポリマー、カルボキシメチルセルロース、デキストラン、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、ならびにポリプロリン。Ｅｎｚｙｍｅｓ ａｓ Ｄｒｕｇｓ，ＨｏｃｅｎｂｅｒｇおよびＲｏｂｅｒｔｓ編，Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ＮＹ，ｐｐ．３６７−３８３中のＡｂｕｃｈｏｗｓｋｉおよびＤａｖｉｓ，１９８１，「Ｓｏｌｕｂｌｅ Ｐｏｌｙｍｅｒ−Ｅｎｚｙｍｅ Ａｄｄｕｃｔｓ」；Ｎｅｗｍａｒｋら，１９８２，Ｊ．Ａｐｐｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．４：１８５−１８９。使用することができる他のポリマーは、ポリ−１，３−ジオキソランおよびポリ−１，３，６−チオキソカン（ｔｉｏｘｏｃａｎｅ）である。ポリエチレングリコール部分は、上記に示されるように、医薬品の用法にとって好ましい。
【０１１８】
成分（または誘導体）については、放出の位置は、胃、小腸（十二指腸、空腸、もしくは回腸）、または大腸であってもよい。当業者は、胃で溶解しないであろうが、十二指腸または腸における他のところで材料を放出するであろう入手可能な製剤を有している。好ましくは、放出は、ｓｓＯＲＮ（もしくは誘導体）の保護によりまたは腸において等の胃環境を越えたところへの生物学的活性材料の放出により胃環境の有害性の作用を回避するであろう。
【０１１９】
完全な胃抵抗性を確実にするために、少なくともｐＨ５．０に対して不浸透性のコーティングは不可欠である。腸溶コーティングとして使用されるより共通した不活性要素の例は、セルロースアセテートトリメリテート（ＣＡＴ）、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート（ＨＰＭＣＰ）、ＨＰＭＣＰ５０、ＨＰＭＣＰ５５、ポリビニルアセテートフタレート（ＰＶＡＰ）、オイドラギット（Ｅｕｄｒａｇｉｔ）Ｌ３０Ｄ、アクアテリック（Ａｑｕａｔｅｒｉｃ）、セルロースアセテートフタレート（ＣＡＰ）、オイドラギットＬ、オイドラギットＳ、およびシェラックである。これらのコーティングは混合フィルムとして使用されてもよい。
【０１２０】
コーティングまたはコーティングの混合物はまた、錠剤にも使用することができ、胃からの保護を意図されない。これは、錠剤を飲み込むのを容易にする糖コーティングまたはコーティングを含むことができる。カプセル剤は、乾燥した治療用物質、つまり散剤の送達のための硬シェル（ゼラチン等）からなってもよい；液剤形態については、軟ゼラチンシェルが使用されてもよい。カシェ剤のシェル材料は、厚いデンプンまたは他の食用紙とすることができる。丸剤、ロゼンジ、湿製錠剤、または擦り込み錠剤については、湿塊技術（ｍｏｉｓｔ ｍａｓｓｉｎｇ ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ）を使用することができる。
【０１２１】
治療用物質は、約１ｍｍの粒径の顆粒またはペレットの形態で細い多微粒子として製剤中に含むことができる。カプセル剤投与のための材料の製剤はまた、散剤、軽く圧縮したプラグ、または錠剤とすることもできる。治療用物質は、圧縮により調製することができる。
【０１２２】
着色剤および香料はすべて含まれていてもよい。たとえば、ｓｓＯＲＮ（または誘導体）は、製剤され（リポソームカプセル化または微粒子カプセル化により等）、次いで、着色剤および香料を含有する冷蔵飲料等の食用産物内にさらに含有されてもよい。
【０１２３】
治療用物質の容量を不活性材料で希釈するまたは増加させてもよい。これらの希釈剤は、炭水化物、特にマンニトール、α−ラクトース、無水ラクトース、セルロース、スクロース、修飾デキストラン、およびデンプンを含むことができる。ある種の無機塩類もまた、カルシウム三リン酸、炭酸マグネシウム、および塩化ナトリウムを含む増量剤として使用されてもよい。いくつかの市販で入手可能な希釈剤は、Ｆａｓｔ−Ｆｌｏ、エムデックス（Ｅｍｄｅｘ）、ＳＴＡ−Ｒｘ１５００、エンコンプレス（Ｅｍｃｏｍｐｒｅｓｓ）、およびアビセル（Ａｖｉｃｅｌｌ）である。
【０１２４】
崩壊剤は、固体剤形への治療用物質の製剤中に含まれてもよい。崩壊するように使用される材料は、デンプンをベースとした市販の崩壊剤であるエキスプロタブを含むデンプンを含むが、これに限定されない。グリコール酸デンプンナトリウム、アンバーライト、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ウルトラミロペクチン（ｕｌｔｒａｍｙｌｏｐｅｃｔｉｎ）、アルギン酸ナトリウム、ゼラチン、オレンジピール、酸性カルボキシメチルセルロース、天然海綿、およびベントナイトはすべて使用されてもよい。崩壊剤の他の形態は不溶性カチオン交換樹脂である。粉末ガムは、崩壊剤としておよび結合剤として使用されてもよく、これらは、寒天、カラヤ、またはトラガカント等の粉末ガムを含むことができる。アルギン酸およびそのナトリウム塩もまた崩壊剤として有用である。
【０１２５】
結合剤は、硬錠剤を形成するよう治療薬を共に保持するよう使用されてもよく、アカシア、トラガカント、デンプン、およびゼラチン等の天然産物からの材料を含んでいてもよい。他のものは、メチルセルロース（ＭＣ）、エチルセルロース（ＥＣ）、およびカルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）を含む。ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）およびヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）は、治療用物質を顆粒化するためにアルコール溶液中に共に使用することができる。
【０１２６】
抗摩擦剤は、製剤プロセス中の固着を予防するために、治療用物質の製剤中に含まれていてもよい。潤滑剤は、治療用物質および型壁の間の層として使用されてもよく、これらは、次のものを含むことができるが、これらに限定されない；そのマグネシウム塩およびカルシウム塩を含むステアリン酸、ポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）、流動パラフィン、植物油、およびワックス。ラウリル硫酸ナトリウム、ラウリル硫酸マグネシウム、様々な分子量のポリエチレングリコール、カーボワックス４０００および６０００等の可溶性潤滑剤もまた使用されてもよい。
【０１２７】
製剤中の薬剤の流動特性を改善する可能性のあるおよび圧縮中の再配列を支援するための滑剤を追加してもよい。滑剤は、デンプン、タルク、発熱性シリカ、およびアルミノケイ酸水和物を含んでいてもよい。
【０１２８】
水性環境中への治療用物質の溶解を支援するために、界面活性剤を湿潤剤として追加してもよい。界面活性剤は、ラウリル硫酸ナトリウム、ジオクチルサクシネートスルホン酸ナトリウム、およびジオクチルスルホン酸ナトリウム等のアニオン洗浄剤を含んでいてもよい。カチオン洗浄剤は使用されてもよく、塩化ベンザルコニウムまたは塩化ベンゼトニウムを含むことができる。界面活性剤として製剤に含むことができると考えられる非イオン洗浄剤のリストは、ラウロマクロゴール４００、ポリオキシル４０ステアレート、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油１０、５０、および６０、グリセロールモノステアレート、ポリソルベート４０、６０、６５、および８０、スクロース脂肪酸エステル、メチルセルロース、ならびにカルボキシメチルセルロースである。これらの界面活性剤は、ｓｓＯＲＮまたは誘導体の製剤中に単独でまたは異なる比率で混合物として存在することができる。
【０１２９】
経口的に使用することができる医薬調製物は、ゼラチンから作製されたプッシュフィットカプセル剤ならびにゼラチンおよびグリセロールまたはソルビトール等の可塑剤から作製された軟密閉カプセル剤を含む。プッシュフィットカプセル剤は、ラクトース等の増量剤、デンプン等の結合剤、および／またはタルクまたはマグネシウムステアレート等の潤滑剤、ならびに任意選択により安定剤と混合して、活性要素を含有することができる。軟カプセル剤では、活性化合物は、脂肪油、流動パラフィン、または液体ポリエチレングリコール等の適した液体中に溶解または懸濁されてもよい。さらに、安定剤を追加してもよい。経口投与のために製剤された微粒子もまた使用されてもよい。上記微粒子は、当技術分野で十分に定義されている。経口投与のためのすべての製剤は上記投与に適している投与量とするべきである。
【０１３０】
口内投与については、組成物は、従来の様式で製剤された錠剤またはロゼンジの形態を取ってもよい。
【０１３１】
吸入による投与については、本発明による使用のための化合物は、適した噴射剤、たとえばジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタン、二酸化炭素、または他の適したガスの使用と共に、加圧パックまたは噴霧器からのエアロゾル噴霧で与えられる形態で好都合に送達されてもよい。加圧エアロゾルの場合には投与量単位は、計量した量を送達するためのバルブを提供することにより決定されてもよい。たとえば、吸入器または注入器中での使用のためのゼラチンのカプセルおよびカートリッジは、製剤されて、化合物の粉末配合物およびラクトースまたはデンプン等の適した粉末ベースを含有していてもよい。
【０１３２】
ｓｓＯＲＮ（またはその誘導体）の肺送達もまた本明細書中において企図される。ｓｓＯＲＮ（または誘導体）は、吸入されながら哺乳動物の肺に送達され、肺上皮内層を横切って血流へ横断する。吸入分子についての他の報告は、Ａｄｊｅｉら，１９９０，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，７：５６５−５６９；Ａｄｊｅｉら，１９９０，Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ，６３：１３５−１４４（酢酸ロイプロリド）；Ｂｒａｑｕｅｔら，１９８９，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，１３（ｓｕｐｐｌ．５）：１４３−１４６（エンドセリン−１）；Ｈｕｂｂａｒｄら，１９８９，Ａｎｎａｌｓ ｏｆ Ｉｎｔｅｒｎａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，１１１：２０６−２１２（アルファ１−アンチトリプシン）；Ｓｍｉｔｈら，１９８９，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．８４：１１４５−１１４６（ａ−１−プロテイナーゼ）；Ｏｓｗｅｉｎら，１９９０，「Ａｅｒｏｓｏｌｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ」，Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ ｏｆ Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ ｏｎ Ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ ＩＩ，Ｋｅｙｓｔｏｎｅ，Ｃｏｌｏｒａｄｏ，Ｍａｒｃｈ，（組換えヒト成長ホルモン）；Ｄｅｂｓら，１９８８，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４０：３４８２−３４８８（インターフェロン−ガンマおよび腫瘍壊死因子アルファ）およびＰｌａｔｚら，米国特許第５，２８４，６５６号（顆粒球コロニー刺激因子）を含む。全身作用のための薬剤の肺送達のための方法および組成物は、１９９５年９月１９日にＷｏｎｇらに発行された米国特許第５，４５１，５６９号中に記載されている。
【０１３３】
治療産物の肺送達のために設計された広範囲の機械的装置は本発明の実施における使用のために企図され、噴霧器、計量用量吸入器、および粉末吸入器を含むが、これらに限定されず、これらのすべてに当業者は精通している。
【０１３４】
本発明の実施に適している市販で入手可能な装置のいくつかの特定の例は、Ｍａｌｌｉｎｃｋｒｏｄｔ，Ｉｎｃ．、Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ、Ｍｉｓｓｏｕｒｉにより製造されたＵｌｔｒａｖｅｎｔ噴霧器；Ｍａｒｑｕｅｓｔ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ、Ｅｎｇｌｅｗｏｏｄ、Ｃｏｌｏｒａｄｏにより製造されたＡｃｏｒｎＩＩ噴霧器；Ｇｌａｘｏ Ｉｎｃ．、Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｔｒｉａｎｇｌｅ Ｐａｒｋ、Ｎｏｒｔｈ Ｃａｒｏｌｉｎａにより製造されたＶｅｎｔｏｌｉｎ計量用量吸入器；およびＦｉｓｏｎｓ Ｃｏｒｐ．、Ｂｅｄｆｏｒｄ、Ｍａｓｓａｃｈｕｓｅｔｔｓにより製造されたＳｐｉｎｈａｌｅｒ粉末吸入器である。
【０１３５】
上記装置はすべて、ｓｓＯＲＮ（または誘導体）の分注に適した製剤の使用を必要とする。典型的に、各製剤は、利用される装置の種類に特異的であり、療法に有用な普通の希釈剤、アジュバント、および／または担体の他に、適切な噴射剤材料の使用を伴ってもよい。さらに、リポソーム、マイクロカプセルもしくは微粒子、包接複合体、または他の種類の担体の使用が企図される。化学的修飾ｓｓＯＲＮもまた、化学修飾の種類または利用される装置の種類に依存して異なる製剤中に調製されてもよい。
【０１３６】
噴射または超音波のいずれかの噴霧器での使用に適した製剤は、溶液１ｍＬ当たり約０．１〜２５ｍｇの生物学的活性ｓｓＯＲＮの濃度で水中に溶解したｓｓＯＲＮ（または誘導体）を典型的に備えるであろう。製剤はまた、緩衝液および単糖（たとえばｓｓＯＲＮ安定化および浸透圧の調節のための）も含んでいてもよい。噴霧器製剤はまた、エアロゾルの形成における溶液の噴霧化により引き起こされるｓｓＯＲＮの表面誘発性の凝集を緩和するまたは予防するために界面活性剤も含有していてもよい。
【０１３７】
計量用量吸入器装置での使用のための製剤は、界面活性剤の支援により噴射剤中に懸濁されたｓｓＯＲＮ（または誘導体）を含有する細かく分割された粉末を通常備えるであろう。噴射剤は、クロロフルオロカーボン、ハイドロクロロフルオロカーボン、ハイドロフルオロカーボン、または炭化水素等のこの目的のために利用される任意の従来の材料であってもよく、トリクロロフルオロメタン、ジクロロジフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタノール、および１，１，１，２−テトラフルオロエタン、またはそれらの組合せを含む。適した界面活性剤は、ソルビタントリオレエートおよびソーヤレシチンを含む。オレイン酸もまた界面活性剤として有用である可能性がある。
【０１３８】
粉末吸入器装置から分注するための製剤は、ｓｓＯＲＮ（または誘導体）を含有する細かく分割された乾燥粉末を備えるであろう、そして、製剤はまた、装置からの粉末の散布を容易にする量、たとえば製剤の重量の５０〜９０％で、ラクトース、ソルビトール、スクロース、またはマンニトール等の充填剤も含んでいてもよい。ｓｓＯＲＮ（または誘導体）は、遠位の肺への最も有効な送達のために、１０μｍ（ミクロン）未満、最も好ましくは０．５〜５μｍの平均粒径を有する微粒子の形態で最も有利に調製されるべきである。
【０１３９】
本発明の医薬組成物の鼻送達もまた企図される。鼻送達は、肺における産物の蓄積の必要性がなければ、治療産物を鼻へ投与した後、本発明の医薬組成物の血流への直接的な通過を可能にする。鼻送達のための製剤は、デキストランまたはシクロデキストランを有する製剤を含む。
【０１４０】
鼻投与については、有用な装置は、計量用量噴霧器が付加されている小さな硬いボトルである。一実施形態では、計量用量は、確定された容量のチャンバー中に本発明の溶液の医薬組成物を引き込むことにより送達され、チャンバーは、エアロゾル化するための寸法の口径およびチャンバー中の液体が圧縮された場合の噴霧の形成によるエアロゾル製剤を有する。チャンバーは、本発明の医薬組成物を投与するために圧縮される。特定の実施形態では、チャンバーはピストン機構である。上記装置は市販で入手可能である。
【０１４１】
あるいは、絞り出された場合に噴霧を形成することによりエアロゾル製剤をエアロゾル化するための寸法の口径または開口部を有するプラスチック絞り出しボトルが使用される。開口部は、ボトルの先端に普通提供され、先端は、エアロゾル製剤の効率的な投与のために鼻通路に部分的にフィットするために通常先細になっている。好ましくは、鼻吸入器は、正確に測った用量の薬剤の投与のために、計量された量のエアロゾル製剤を提供するであろう。
【０１４２】
化合物は、全身に送達することが望ましい場合、注射による、たとえば大量注射または継続注入による非経口投与のために製剤されてもよい。注射のための製剤は、単位剤形で、たとえばアンプル中または複数用量容器中に、追加された防腐薬と共に与えられてもよい。組成物は、油性または水性媒体中で、懸濁剤、水剤、または乳剤のような形態を取ってもよく、懸濁化剤、安定化剤、および／または分散剤等の調合剤を含有していてもよい。
【０１４３】
非経口投与のための医薬製剤は、水溶性形態での活性化合物の水性水剤を含む。さらに、活性化合物の懸濁剤は、適切な油性注射懸濁剤として調製されてもよい。適した親油性の溶媒または媒体は、ゴマ油等の脂肪油またはオレイン酸エチルもしくはトリグリセリド等の合成脂肪酸エステルまたはリポソームを含む。水性注射懸濁剤は、カルボキシルメチルセルロースナトリウム、ソルビトール、またはデキストラン等の、懸濁剤の粘度を増加させる物質を含有していてもよい。懸濁剤はまた、高度に濃縮された溶液の調製を考慮に入れるために化合物の溶解性を増加させる適した安定剤または作用物質を任意選択により含有していてもよい。
【０１４４】
あるいは、活性化合物は、使用前に、適した媒体、たとえば発熱性物質なしの滅菌水との構成のための粉末形態であってもよい。
【０１４５】
化合物はまた、たとえばカカオバターまたは他のグリセリド等の従来の坐剤基剤を含有する坐剤または保持浣腸剤等の直腸組成物または膣組成物中に製剤されてもよい。
【０１４６】
前に記載した製剤の他に、化合物はまた、デポ調製物として製剤されてもよい。上記長期作用性製剤は、適したポリマーのもしくは疎水性の材料（たとえば許容できる油中の乳剤として）もしくはイオン交換樹脂と、またはわずかに可溶性の誘導体として、たとえばわずかに可溶性の塩として製剤されてもよい。
【０１４７】
医薬組成物はまた、適した固体相もしくはゲル相の担体または賦形剤を備えていてもよい。上記担体または賦形剤の例は、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム、様々な糖、デンプン、セルロース誘導体、ゼラチン、およびポリエチレングリコール等のポリマーを含むが、これらに限定されない。
【０１４８】
適した液体または固体の医薬調製物形態は、たとえば、吸入のための水性または塩性の水剤、マイクロカプセル化、蝸牛状物化（ｅｎｃｏｃｈｌｅａｔｅｄ）、微視的金粒子上へのコーティング、リポソーム中への含有、霧状、エアロゾル、皮膚中への移植のためのペレット、または、皮膚中に引っ掻き入れるための鋭い物体上への乾燥である。医薬組成物はまた、顆粒、散剤、錠剤、コーティング錠、（マイクロ）カプセル剤、坐剤、シロップ剤、乳剤、懸濁剤、クリーム剤、滴剤、または遅延性放出の活性化合物を有する調製物も含み、これらの調製物では、崩壊剤、結合剤、コーティング剤、膨潤剤、潤滑剤、矯味剤、甘味料、または可溶化剤等の賦形剤および添加剤および／または佐剤は上記に記載されるように慣習的に使用される。医薬組成物は、様々な薬剤送達システムでの使用に適している。薬剤送達のための方法の簡単な概説については、本明細書中に参照により組み込まれるＬａｎｇｅｒ，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４９：１５２７−１５３３，１９９０を参照されたい。
【０１４９】
ｓｓＯＲＮおよび任意選択により他の治療用物質は、それ自体で（純粋）または薬学的に許容できる塩の形態で投与されてもよい。医薬で使用される場合、塩は、薬学的に許容できるものとするべきであるが、非薬学的に許容できる塩は、それらの薬学的に許容できる塩を調製するために好都合に使用されてもよい。上記塩は、以下の酸から調製されたものを含むが、これらに限定されない：塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸、マレイン酸、酢酸、サリチル酸、ｐ−トルエンスルホン酸、酒石酸、クエン酸、メタンスルホン酸、蟻酸、マロン酸、コハク酸、ナフタリン−２−スルホン酸、およびベンゼンスルホン酸。さらに、上記塩は、カルボン酸群のナトリウム塩、カリウム塩、またはカルシウム塩等のアルカリ金属塩またはアルカリ土類塩として調製することができる。
【０１５０】
適した緩衝薬は次のものを含む：酢酸および塩（１〜２重量／容量％）、クエン酸および塩（１〜３重量／容量％）、ホウ酸および塩（０．５〜２．５重量／容量％）、ならびにリン酸および塩（０．８〜２重量／容量％）。適した防腐薬は、塩化ベンザルコニウム（０．００３〜０．０３重量／容量％）、クロロブタノール（０．３〜０．９重量／容量％）、パラベン（０．０１〜０．２５重量／容量％）、およびチメロサール（０．００４〜０．０２重量／容量％）を含む。
【０１５１】
本発明の医薬組成物は、薬学的に許容できる担体中に含まれる有効量のｓｓＯＲＮおよび任意選択により１つまたは複数の追加の治療薬を含有する。
【０１５２】
ｓｓＯＲＮを特に含むが、これに限定されない治療薬（複数可）は、粒子中に提供されてもよい。本明細書中に使用される粒子は、本明細書中に記載されるｓｓＯＲＮまたは他の治療薬（複数可）から全体的にまたは部分的になり得るナノ粒子または微小粒子（またはいくつかの例ではより大きい）を意味する。粒子は、腸溶コーティングを含むが、これに限定されないコーティングに包囲されたコア中に治療薬（複数可）を含有していてもよい。治療薬（複数可）はまた、粒子の全体にわたって分散していてもよい。治療薬（複数可）はまた、粒子中に吸着されていてもよい。粒子は、ゼロ次放出、１次放出、２次放出、遅延放出、持続放出、即時放出、およびそれらの任意の組合せ等を含む任意の順序の放出動態であってもよい。粒子は、治療薬（複数可）の他に、薬学および医学の当技術分野で慣例的に使用される任意のそれらの材料を含んでいてもよく、浸食性、非浸食性、生分解性、もしくは非生分解性の材料またはそれらの組合せを含むが、これらに限定されない。粒子は、溶液または半固体状態中にｓｓＯＲＮを含有するマイクロカプセルであってもよい。粒子は、事実上任意の形状であってもよい。
【０１５３】
非生分解性および生分解性のポリマー材料の両方は、治療薬（複数可）の送達のための粒子の製造に使用することができる。上記ポリマーは、天然または合成ポリマーであってもよい。ポリマーは、放出が所望される時間に基づいて選択される。特に興味のある生体接着性ポリマーは、Ｈ．Ｓ．Ｓａｗｈｎｅｙ、Ｃ．Ｐ．Ｐａｔｈａｋ、およびＪ．Ａ．ＨｕｂｅｌｌによりＭａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ、（１９９３）２６：５８１−５８７中に記載される生浸食性ヒドロゲルを含み、その教示は本明細書中に組み込まれる。これらは、ポリヒアルロン酸、カゼイン、ゼラチン、グルチン、ポリアンヒドリド、ポリアクリル酸、アルギン酸、キトサン、ポリ（メタクリル酸メチル）、ポリ（メタクリル酸エチル）、ポリ（メタクリル酸ブチル）、ポリ（メタクリル酸イソブチル）、ポリ（メタクリル酸ヘキシル）、ポリ（メタクリル酸イソデシル）、ポリ（メタクリル酸ラウリル）、ポリ（メタクリル酸フェニル）、ポリ（アクリル酸メチル）、ポリ（アクリル酸イソプロピル）、ポリ（アクリル酸イソブチル）、およびポリ（アクリル酸オクタデシル）を含む。
【０１５４】
治療薬（複数可）は制御放出系中に含有されていてもよい。用語「制御放出」は、製剤からの薬剤放出の様式およびプロファイルが制御される任意の薬剤含有製剤を指すことを意図する。これは、持続放出製剤および遅延放出製剤を含むが、これらに限定されない非即時放出製剤と共に、即時放出製剤および非即時放出製剤を指す。用語「持続放出」（「長期放出」とも称される）は、長期間にわたる薬剤の緩やかな放出を提供し、好ましくは、必ずではないが、長期間にわたり薬剤の実質的に一定の血中レベルをもたらす薬剤製剤を指すよう、その従来の意味で使用される。「遅延放出」という用語は、製剤の投与およびそれからの薬剤の放出の間に時間遅延がある薬剤製剤を指すようその従来の意味で使用される。「遅延放出」は、長期間にわたる薬剤の緩やかな放出を伴っていても、伴っていなくてもよく、したがって、「持続放出」であっても、なくてもよい。
【０１５５】
長期持続放出移植片の使用は慢性状態の治療に特に適している可能性がある。「長期」放出は、本明細書中に使用されるように、移植片が、少なくとも７日間、好ましくは３０〜６０日間、治療レベルの活性要素を送達するよう構築され、配置されることを意味する。長期持続放出移植片は、当業者によく知られており、上記に記載されるいくつかの放出系を含む。
【０１５６】
本発明は、以下の実施例によりさらに例示され、実施例は、さらに限定するものとして解釈されるべきでは決してない。本出願の全体にわたって引用されたすべての引用文の全内容（文献引用文、発行された特許、公開された特許出願、および同時係属中の特許出願を含む）は参照により本明細書中に明確に組み込まれる。
【実施例】
【０１５７】
（実施例１）
一本鎖ホスホジエステルＲＮＡのＴＬＲ７非依存性の認識
末梢血単核球を野性型マウスおよびＴＬＲ７−／−マウスから単離し、適した増殖培地中に移し、次いで、マルチウェル培養皿の個々のウェル中に別々に等分した。以下の作用物質を細胞の個々のウェルに追加した：ＲＮＡ６３ ＰＤ、５’−ＣＡＧＧＵＣＵＧＵＧＡＵ−３’（配列番号１）として提供されるヌクレオチド配列を有する一本鎖ＯＲＮ、すべてヌクレオチド間連結は、ＯＲＮの３’末端におけるＡおよびＵの間のホスホロチオエート連結を除いてホスホジエステルである；ＲＮＡ６３ ＰＴＯ、配列番号１と同一のヌクレオチド配列を有する一本鎖ＯＲＮ、どのヌクレオチド間連結もホスホロチオエートである；ＣｐＧ−ＯＤＮ １６６８、５’−ＴＣＣＡＴＧＡＣＧＴＴＣＣＴＧＡＴＧＣＴ−３’（配列番号２）として提供されるヌクレオチド配列を有するオリゴデオキシヌクレオチド；ＤＯＴＡＰのみ；Ｒ−８４８；ＲＮＡ６３ ＰＴＯプラスＤＯＴＡＰ；ＲＮＡ６３ ＰＤプラスＤＯＴＡＰ；および培地のみ。細胞を培養で２４時間維持し、次いで、個々のウェルからの上清を収集し、ＩＬ−１２ｐ４０に対して特異的な酵素連結免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）を使用して分析した。結果を図２に示す。データを平均±ＳＥＭとして示す。
【０１５８】
図２に示されるように、ＲＮＡ６３ ＰＤおよびＲＮＡ６３ ＰＴＯの両方は、ＤＯＴＡＰと共に追加された場合、野性型細胞においてＩＬ−１２ｐ４０を誘発した。しかしながら、対照的に、ＲＮＡ６３ ＰＴＯではなくＲＮＡ６３ ＰＤは、ＤＯＴＡＰと共に追加された場合、ＴＬＲ７−／−細胞においてＩＬ−１２ｐ４０を誘発した。この後者の結果は、ホスホロチオエートバックボーンではなくホスホジエステルバックボーンを有する一本鎖ＯＲＮはＴＬＲ７非依存性の様式で免疫活性化を誘発するという見解を支持する。
【０１５９】
（実施例２）
ＲＮＡ６３ ＰＤは、ＴＬＲ７−／−マウスからのＦＬＴ３−Ｌ誘発性樹状細胞において、用量依存的な様式でＩＬ−１２ｐ４０を誘発し、ＩＬ−６およびＩＦＮ−αもまた誘発する
ＦＬＴ３−Ｌ誘発性樹状細胞を野性型マウスおよびＴＬＲ７−／−マウスから調製し、種々の量のＲＮＡ６３ ＰＤまたはＲＮＡ６３ ＰＴＯの存在下で、それぞれＤＯＴＡＰと共に培養する。２４時間の培養の後、上清を収集し、ＩＬ−１２ｐ４０、ＩＬ−６、およびＩＦＮ−αについてＥＬＩＳＡにより分析した。ＬＰＳ、Ｒ−８４８、ＣｐＧ−ＯＤＮ １６６８、ＣｐＧ−ＯＤＮ ２２１６（５’−ＧＧＧＧＧＡＣＧＡＴＣＧＴＣＧＧＧＧＧ−３’、配列番号３）、ＤＯＴＡＰのみ、および培地のみを対照として実施した。結果を図３に示す。データを平均±ＳＥＭとして示す。
【０１６０】
図中に示されるように、ＲＮＡ６３ ＰＤおよびＲＮＡ６３ ＰＴＯの両方は、それぞれＤＯＴＡＰの存在下で、著しい量のＩＬ−１２ｐ４０（図３Ａ）、ＩＬ−６（図３Ｂ）、およびＩＦＮ−α（図３Ｃ）を野性型樹状細胞において誘発した。しかしながら、対照的に、ＲＮＡ６３ ＰＴＯではなくＲＮＡ６３ ＰＤは、ＤＯＴＡＰと共に追加された場合、ＴＬＲ７−／−樹状細胞において、ＩＬ−１２ｐ４０を誘発し、それほど強くはなかったがＩＬ−６およびＩＦＮ−αの両方を誘発した。ＴＬＲ７−／−樹状細胞におけるＲＮＡ６３ ＰＤにより誘発されたＩＬ−１２ｐ４０の量は、ＲＮＡ６３ ＰＤの濃度に比例して変動した。
【０１６１】
（実施例３）
ＲＮＡ６３ ＰＴＯではなくＲＮＡ６３ ＰＤは、ＴＬＲ７−／−マウスからのＦＬＴ３−Ｌ誘発性樹状細胞上にＣＤ６９を誘発する
ＦＬＴ３−Ｌ誘発性樹状細胞を野性型マウスおよびＴＬＲ７−／−マウスから調製し、２４時間、ＲＮＡ６３ ＰＤまたはＲＮＡ６３ ＰＴＯの存在下で、それぞれＤＯＴＡＰと共に、実施例２におけるように培養した。２４時間の培養の後、細胞を収集し、ＦＡＣＳによりＣＤ６９について分析した。結果を図４に示す。
【０１６２】
図４に示されるように、ＲＮＡ６３ ＰＤおよびＲＮＡ６３ ＰＴＯの両方は、それぞれＤＯＴＡＰの存在下で、著しい量のＣＤ６９を野性型樹状細胞において誘発した（左２つのパネル）。しかしながら、対照的に、ＲＮＡ６３ ＰＴＯではなくＲＮＡ６３ ＰＤは、ＤＯＴＡＰと共に追加された場合、ＴＬＲ７−／−樹状細胞上でＣＤ６９を誘発した（右２つのパネル）。
【０１６３】
（実施例４）
ＲＮＡ６３ ＰＴＯではなくＲＮＡ６３ ＰＤは、ＴＬＲ７−／−マウスからのＭ−ＣＳＦ誘導性マクロファージおよびＧＭ−ＣＳＦ誘導性樹状細胞においてＩＬ−１２ｐ４０を誘発する
Ｍ−ＣＳＦ誘導性マクロファージおよびＧＭ−ＣＳＦ誘導性樹状細胞を野性型マウスおよびＴＬＲ７−／−マウスから調製し、２４時間、ＲＮＡ６３ ＰＤプラスＤＯＴＡＰ、ＲＮＡ６３ ＰＴＯプラスＤＯＴＡＰの存在下で培養した。ＬＰＳ、Ｒ−８４８、ＣｐＧ−ＯＤＮ １６６８、ＣｐＧ−ＯＤＮ ２２１６、ＤＯＴＡＰのみ、または培地のみ。次いで、培養上清を収集し、ＥＬＩＳＡを使用してＩＬ−１２ｐ４０について分析した。結果を図５に示す。データを平均±ＳＥＭとして示す。
【０１６４】
図５に示されるように、ＲＮＡ６３ ＰＤおよびＲＮＡ６３ ＰＴＯの両方は、それぞれＤＯＴＡＰの存在下で、野性型マウスからのＭ−ＣＳＦ誘導性マクロファージおよびＧＭ−ＣＳＦ誘導性樹状細胞の両方において著しい量のＩＬ−１２ｐ４０を誘発する。しかしながら、対照的に、ＲＮＡ６３ ＰＴＯではなくＲＮＡ６３ ＰＤは、ＤＯＴＡＰと共に追加された場合、ＴＬＲ７−／−Ｍ−ＣＳＦ誘導性マクロファージおよびＴＬＲ７−／−ＧＭ−ＣＳＦ誘導性樹状細胞において著しい量のＩＬ−１２ｐ４０を誘発した。
【０１６５】
（実施例５）
一本鎖ホスホジエステルＲＮＡのＴＬＲ７非依存性の認識はＭｙＤ８８依存性である
ＦＬＴ３−Ｌ誘発性樹状細胞を、野性型マウス、ＴＬＲ７−／−マウス、およびＭｙＤ８８−／−マウスから別々に調製し、２４時間、ＲＮＡ６３ ＰＤまたはＲＮＡ６３ ＰＴＯの存在下で、それぞれＤＯＴＡＰと共に、実施例２におけるように培養した。２４時間の培養の後、細胞を収集し、ＩＬ−１２ｐ４０についてはＥＬＩＳＡによりおよびＣＤ６９についてはＦＡＣＳにより分析した。結果を図６に示す。
【０１６６】
図６に示されるように、ＩＬ−１２ｐ４０およびＣＤ６９の誘発は、ＭｙＤ８８−／−樹状細胞において、ＲＮＡ６３ ＰＤについておよびＲＮＡ６３ ＰＴＯについて同様に非存在であった。
【０１６７】
（実施例６）
ｓｓＲＮＡ駆動性ＴＬＲ７非依存性免疫刺激作用は、ＴＬＲ９およびＴＬＲ８に依存性である
ｓｓＲＮＡ駆動性ＴＬＲ７非依存性免疫刺激作用はＭｙＤ８８およびエンドソーム成熟に依存性であるので、他の細胞内ＴＬＲが関与することが仮定された。ＴＬＲ３は、ＭｙＤ８８ではなくアダプタ分子ＴＲＩＦに主に頼るので、ｓｓＲＮＡの認識についての候補になりそうにないように思われる（Ｈｏｅｂｅ，Ｄｕら ２００３）。しかしながら、ｓｓＲＮＡに対する受容体としてＴＬＲ３を除外するために、ＴＬＲ３欠損マウスおよびＴＬＲ７欠損マウスを交雑し、ＴＬＲ３／ＴＬＲ７二重欠損マウスを得、これらのマウスからの免疫細胞をｓｓＲＮＡ刺激作用について試験した。これらの実験の結果は、ＴＬＲ３／ＴＬＲ７二重欠損ＦＬＴ３−Ｌ誘発性ＤＣにおけるＲＮＡ６３駆動性のＩＬ−１２ｐ４０生産およびＣＤ６９アップレギュレーションはなお機能的であることを示し、ＴＬＲ７非依存性の様式でのｓｓＲＮＡの認識におけるＴＬＲ３の関与の欠如を示唆した。ＴＬＲ７／ＴＬＲ９二重欠損マウスもまた、ＲＮＡ６３認識におけるＴＬＲ９の関与を調査するために産生した。興味深いことには、ＴＬＲ７／ＴＬＲ９二重欠損ＧＭ−ＣＳＦ誘導性ＤＣおよび選別されたｍＤＣは、ＩＬ−１２ｐ４０を生産せずかつＣＤ６９をアップレギュレートせず、ＴＬＲ７非依存性様式でのｓｓＲＮＡの認識におけるＴＬＲ９の関与を示唆した。全体として、これらのデータは、ＴＬＲ９が、ｓｓＲＮＡに交差反応性であり、ｓｓＲＮＡの免疫刺激作用を媒介するということを示唆する。
【０１６８】
（実施例７）
ホスホジエステルｓｓＲＮＡの認識におけるＴＬＲ９の役割
ＰＤ ｓｓＲＮＡの認識におけるＴＬＲ９の役割をさらに調査するために、ＰＴＯバックボーンと共に合成した場合にネズミ細胞において活性でいないとして以前に記載された（Ｈｅｉｌ，Ｈｅｍｍｉら ２００４）ＲＮＡ４１（５’−ＧＣＣＣＧＡＣＡＧＡＡＧＡＧＡＧＡＣＡＣ−３；配列番号４）およびＲＮＡ４２（５’−ＡＣＣＣＡＵＣＵＡＵＵＡＵＡＵＡＡＣＵＣ−３；配列番号５）等の様々なＲＮＡ配列を合成した。ＰＴＯバックボーンまたはＰＤバックボーンを有するＯＲＮの刺激性の性能を比較すると、ＲＮＡ４１ ＰＤおよびＲＮＡ４２ ＰＤは、ネズミ細胞において、ＩＬ−１２ｐ４０、ＩＬ−６、およびＩＦＮ−αをＴＬＲ７非依存的に刺激し、ヒトＰＢＭＣにおいてＴＮＦ−αを刺激する（ＩＦＮ−αは刺激しない）のに対して、対応するＰＴＯ修飾ＯＲＮは不活性であることが観察された。興味深いことには、野性型ｍＤＣ、ＴＬＲ７欠損ｍＤＣ、またはＴＬＲ９欠損ｍＤＣがＲＮＡ４１ ＰＤおよびＲＮＡ４２ ＰＤで刺激された場合、ＴＬＲ９欠損細胞は、ＩＬ−１２ｐ４０を生産せず、ＴＬＲ７ではなくＴＬＲ９が、非Ｇ／ＵリッチｓｓＲＮＡ分子の認識において関与することを示唆した。対照的に、ＧＵリッチＲＮＡ４０（５’−ＧＣＣＣＧＵＣＵＧＵＵＧＵＧＵＧＡＣＵＣ−３；配列番号６）は、ＴＬＲ７単一欠損細胞およびＴＬＲ９単一欠損細胞においていくらかのＩＬ−１２ｐ４０を誘発し、ＴＬＲ７またはＴＬＲ９がｓｓＲＮＡ受容体として機能することができることを示唆した。ｐＤＣは、ＧＵリッチＲＮＡをＴＬＲ７依存的に認識したが、驚いたことに、ＴＬＲ７単一欠損細胞またはＴＬＲ９単一欠損細胞は反応しなかったけれども、非ＧＵリッチＯＲＮ ＲＮＡ４１およびＲＮＡ４２もまた野性型細胞により認識され、ＴＬＲ７／ＴＬＲ９複合体が非ＧＵリッチＲＮＡの認識において関与することを示唆した。
【０１６９】
（実施例８）
ホスホジエステルｓｓＲＮＡの認識におけるＴＬＲ８の役割
ｍＴＬＲ８特異的ｓｉＲＮＡを使用して、ＴＬＲ８がｓｓＲＮＡの認識において関与していることを実証した。野性型ＦＬＴ３−Ｌ誘発性ＤＣを、ＴＬＲ８特異的ｓｉＲＮＡまたはｅＧＦＰに対する対照ｓｉＲＮＡと共に処理し、ＣｐＧ−ＯＤＮ、ＲＮＡ４０ ＰＤ、ＲＮＡ４１ ＰＤ、およびＲＮＡ４２ ＰＤで刺激した。ｍＴＬＲ８特異的ｓｉＲＮＡ処理細胞は、ＲＮＡ４１およびＲＮＡ４２の刺激作用の際のＩＬ−１２分泌において７５％または５０％の低下をそれぞれ示した。ＲＮＡ４０駆動性免疫刺激作用はｍＴＬＲ７に極めて依存性であるので、ＲＮＡ４０刺激作用はｍＴＬＲ８特異的ｓｉＲＮＡにより影響を及ぼされなかった。対照ｅＧＦＰ特異的ｓｉＲＮＡはＩＬ−１２生産に阻害効果を有さず、ＩＬ−１２値は、非ｓｉＲＮＡ移入細胞の刺激作用と一致した。ＴＬＲ７非依存性ｓｓＲＮＡ駆動性免疫刺激作用へのＴＬＲ８の関与をさらに評価するために、ＴＬＲ７欠損ＦＬＴ３−Ｌ誘発性ＤＣにｍＴＬＲ８特異的ｓｉＲＮＡまたはｅＧＦＰ特異的ｓｉＲＮＡを移入し、ＲＮＡ６３誘発性ＩＬ−１２ｐ４０生産を定量した。ｍＴＬＲ８特異的ｓｉＲＮＡで処理したＤＣは、ＩＬ−１２ｐ４０生産における強い低下およびＣＤ４０等の活性化マーカーのダウンレギュレーションを示したのに対して、ｅＧＦＰ特異的ｓｉＲＮＡは効果を有していなかった。ＲＮＡ６３駆動性免疫活性化の低下は、ｍＴＬＲ８ ＲＮＡのｓｉＲＮＡ駆動性ダウンレギュレーションと相互に関連した。まとめると、これらのデータは、ＴＬＲ８がｓｓＲＮＡの認識において関与することを実証する。
【０１７０】
（実施例９）
ＴＬＲ８／ＴＬＲ９ヘテロ二量体はｓｓＲＮＡ認識を媒介する
ＴＬＲ８およびＴＬＲ９はｓｓＲＮＡの認識において関与するので、両方の受容体が協力し、ｓｓＲＮＡ認識を媒介するために複合体を形成するかどうかを調査した。タグ付きＴＬＲのＨＥＫ２９３細胞中への移入、続く免疫沈降およびウエスタンブロットにより、ＴＬＲ８フラグはｍＴＬＲ９−ＨＡと関連することが示され、その逆も成立したのに対して、細胞内ＴＬＲ３およびＴＬＲ９は相互作用しなかった。
【０１７１】
均等物
前述の明細書は、当業者が本発明を実施することを可能にするのに十分であると考えられる。実施例は、本発明の一態様のただ１つの例証として意図され、他の機能的に等価な実施形態は本発明の範囲内にあるので、本発明は提供された実施例による範囲中に限定されるものではない。本明細書中に記載され、示されたものの他に、本発明の様々な修飾は、前述の記載から当業者に明らかになり、添付された請求項の範囲内に入るであろう。本発明の利点および目的は、本発明の各実施形態により必ずしも包含されるものではない。
【図面の簡単な説明】
【０１７２】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
対象におけるＴｈ１様免疫応答を誘発する方法であって、方法は、
有効量の５〜１００のヌクレオチド長の免疫刺激性一本鎖オリゴリボヌクレオチド（ｓｓＯＲＮ）を対象に投与するステップを備え、免疫刺激性ｓｓＯＲＮは、ホスホジエステルバックボーンを有し、かつ
（１）グアノシン（Ｇ）がない、または
（２）少なくとも１つのＧを備えるヌクレオチド配列を備え、ただし、ヌクレオチド配列が少なくとも１つのＧを備える場合、ヌクレオチド配列は、
（ａ）ウリジン（Ｕ）がなく、
（ｂ）ＣｐＧモチーフＸ１Ｘ２ＣＧＸ３Ｘ４がなく、式中、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、およびＸ４はヌクレオチドであり、ＣＧはシトシン（Ｃ）−グアニン（Ｇ）ジヌクレオチドであり、ＣＧジヌクレオチドのＣはメチル化されておらず、
ただし、免疫刺激性ｓｓＯＲＮは、二本鎖リボ核酸（ＲＮＡ）分子の一部分として存在しない方法。
【請求項２】
対象における抗原特異的応答を誘発する方法であって、方法は、
対象に抗原を投与するステップおよび
有効量の５〜１００のヌクレオチド長の免疫刺激性一本鎖オリゴリボヌクレオチド（ｓｓＯＲＮ）を対象に投与するステップを備え、免疫刺激性ｓｓＯＲＮは、ホスホジエステルバックボーンを有し、かつ
（１）グアノシン（Ｇ）がない、または
（２）少なくとも１つのＧを備えるヌクレオチド配列を備え、ただし、ヌクレオチド配列が少なくとも１つのＧを備える場合、ヌクレオチド配列は、
（ａ）ウリジン（Ｕ）がなく、
（ｂ）ＣｐＧモチーフＸ１Ｘ２ＣＧＸ３Ｘ４がなく、式中、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、およびＸ４はヌクレオチドであり、ＣＧはシトシン（Ｃ）−グアニン（Ｇ）ジヌクレオチドであり、ＣＧジヌクレオチドのＣはメチル化されておらず、
ただし、免疫刺激性ｓｓＯＲＮは、二本鎖リボ核酸（ＲＮＡ）分子の一部分として存在しない方法。
【請求項３】
癌を有する対象を治療する方法であって、方法は、
有効量の５〜１００のヌクレオチド長の免疫刺激性一本鎖オリゴリボヌクレオチド（ｓｓＯＲＮ）を対象に投与するステップを備え、免疫刺激性ｓｓＯＲＮは、ホスホジエステルバックボーンを有し、かつ
（１）グアノシン（Ｇ）がない、または
（２）少なくとも１つのＧを備えるヌクレオチド配列を備え、ただし、ヌクレオチド配列が少なくとも１つのＧを備える場合、ヌクレオチド配列は、
（ａ）ウリジン（Ｕ）がなく、
（ｂ）ＣｐＧモチーフＸ１Ｘ２ＣＧＸ３Ｘ４がなく、式中、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、およびＸ４はヌクレオチドであり、ＣＧはシトシン（Ｃ）−グアニン（Ｇ）ジヌクレオチドであり、ＣＧジヌクレオチドのＣはメチル化されておらず、
ただし、免疫刺激性ｓｓＯＲＮは、二本鎖リボ核酸（ＲＮＡ）分子の一部分として存在しない方法。
【請求項４】
感染症を有する対象を治療する方法であって、方法は、
有効量の５〜１００のヌクレオチド長の免疫刺激性一本鎖オリゴリボヌクレオチド（ｓｓＯＲＮ）を対象に投与するステップを備え、免疫刺激性ｓｓＯＲＮは、ホスホジエステルバックボーンを有し、かつ
（１）グアノシン（Ｇ）がない、または
（２）少なくとも１つのＧを備えるヌクレオチド配列を備え、ただし、ヌクレオチド配列が少なくとも１つのＧを備える場合、ヌクレオチド配列は、
（ａ）ウリジン（Ｕ）がなく、
（ｂ）ＣｐＧモチーフＸ１Ｘ２ＣＧＸ３Ｘ４がなく、式中、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、およびＸ４はヌクレオチドであり、ＣＧはシトシン（Ｃ）−グアニン（Ｇ）ジヌクレオチドであり、ＣＧジヌクレオチドのＣはメチル化されておらず、
ただし、免疫刺激性ｓｓＯＲＮは、二本鎖リボ核酸（ＲＮＡ）分子の一部分として存在しない方法。
【請求項５】
アレルギー状態を有する対象を治療する方法であって、方法は、
有効量の５〜１００のヌクレオチド長の免疫刺激性一本鎖オリゴリボヌクレオチド（ｓｓＯＲＮ）を対象に投与するステップを備え、免疫刺激性ｓｓＯＲＮは、ホスホジエステルバックボーンを有し、かつ
（１）グアノシン（Ｇ）がない、または
（２）少なくとも１つのＧを備えるヌクレオチド配列を備え、ただし、ヌクレオチド配列が少なくとも１つのＧを備える場合、ヌクレオチド配列は、
（ａ）ウリジン（Ｕ）がなく、
（ｂ）ＣｐＧモチーフＸ１Ｘ２ＣＧＸ３Ｘ４がなく、式中、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、およびＸ４はヌクレオチドであり、ＣＧはシトシン（Ｃ）−グアニン（Ｇ）ジヌクレオチドであり、ＣＧジヌクレオチドのＣはメチル化されておらず、
ただし、免疫刺激性ｓｓＯＲＮは、二本鎖リボ核酸（ＲＮＡ）分子の一部分として存在しない方法。
【請求項６】
喘息を有する対象を治療する方法であって、方法は、
有効量の５〜１００のヌクレオチド長の免疫刺激性一本鎖オリゴリボヌクレオチド（ｓｓＯＲＮ）を対象に投与するステップを備え、免疫刺激性ｓｓＯＲＮは、ホスホジエステルバックボーンを有し、かつ
（１）グアノシン（Ｇ）がない、または
（２）少なくとも１つのＧを備えるヌクレオチド配列を備え、ただし、ヌクレオチド配列が少なくとも１つのＧを備える場合、ヌクレオチド配列は、
（ａ）ウリジン（Ｕ）がなく、
（ｂ）ＣｐＧモチーフＸ１Ｘ２ＣＧＸ３Ｘ４がなく、式中、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、およびＸ４はヌクレオチドであり、ＣＧはシトシン（Ｃ）−グアニン（Ｇ）ジヌクレオチドであり、ＣＧジヌクレオチドのＣはメチル化されておらず、
ただし、免疫刺激性ｓｓＯＲＮは、二本鎖リボ核酸（ＲＮＡ）分子の一部分として存在しない方法。
【請求項７】
免疫刺激性ｓｓＯＲＮは５〜４０のヌクレオチド長である請求項１から６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８】
免疫刺激性ｓｓＯＲＮは５〜２０のヌクレオチド長である請求項１から６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
免疫刺激性ｓｓＯＲＮは５〜１２のヌクレオチド長である請求項１から６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
免疫刺激性ｓｓＯＲＮは合成ｓｓＯＲＮである請求項１から６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
免疫刺激性ｓｓＯＲＮは、ポリＵ、ポリＧ、ポリＡ、またはポリＣからなる群から選択されるポリヌクレオチドではない請求項１から６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】
有効量の免疫刺激性ｓｓＯＲＮの対象への投与は、有効量の免疫刺激性ｓｓＯＲＮの対象への全身的投与である請求項１から６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１】
対象におけるＴｈ１様免疫応答を誘発する方法であって、方法は、
有効量の５〜１００のヌクレオチド長の免疫刺激性一本鎖オリゴリボヌクレオチド（ｓｓＯＲＮ）を対象に投与するステップを備え、免疫刺激性ｓｓＯＲＮは、ホスホジエステルバックボーンを有し、かつ
（１）グアノシン（Ｇ）がない、または
（２）少なくとも１つのＧを備えるヌクレオチド配列を備え、ただし、ヌクレオチド配列が少なくとも１つのＧを備える場合、ヌクレオチド配列は、
（ａ）ウリジン（Ｕ）がなく、
（ｂ）ＣｐＧモチーフＸ１Ｘ２ＣＧＸ３Ｘ４がなく、式中、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、およびＸ４はヌクレオチドであり、ＣＧはシトシン（Ｃ）−グアニン（Ｇ）ジヌクレオチドであり、ＣＧジヌクレオチドのＣはメチル化されておらず、
ただし、免疫刺激性ｓｓＯＲＮは、二本鎖リボ核酸（ＲＮＡ）分子の一部分として存在しない方法。
【請求項２】
対象における抗原特異的応答を誘発する方法であって、方法は、
対象に抗原を投与するステップおよび
有効量の５〜１００のヌクレオチド長の免疫刺激性一本鎖オリゴリボヌクレオチド（ｓｓＯＲＮ）を対象に投与するステップを備え、免疫刺激性ｓｓＯＲＮは、ホスホジエステルバックボーンを有し、かつ
（１）グアノシン（Ｇ）がない、または
（２）少なくとも１つのＧを備えるヌクレオチド配列を備え、ただし、ヌクレオチド配列が少なくとも１つのＧを備える場合、ヌクレオチド配列は、
（ａ）ウリジン（Ｕ）がなく、
（ｂ）ＣｐＧモチーフＸ１Ｘ２ＣＧＸ３Ｘ４がなく、式中、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、およびＸ４はヌクレオチドであり、ＣＧはシトシン（Ｃ）−グアニン（Ｇ）ジヌクレオチドであり、ＣＧジヌクレオチドのＣはメチル化されておらず、
ただし、免疫刺激性ｓｓＯＲＮは、二本鎖リボ核酸（ＲＮＡ）分子の一部分として存在しない方法。
【請求項３】
癌を有する対象を治療する方法であって、方法は、
有効量の５〜１００のヌクレオチド長の免疫刺激性一本鎖オリゴリボヌクレオチド（ｓｓＯＲＮ）を対象に投与するステップを備え、免疫刺激性ｓｓＯＲＮは、ホスホジエステルバックボーンを有し、かつ
（１）グアノシン（Ｇ）がない、または
（２）少なくとも１つのＧを備えるヌクレオチド配列を備え、ただし、ヌクレオチド配列が少なくとも１つのＧを備える場合、ヌクレオチド配列は、
（ａ）ウリジン（Ｕ）がなく、
（ｂ）ＣｐＧモチーフＸ１Ｘ２ＣＧＸ３Ｘ４がなく、式中、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、およびＸ４はヌクレオチドであり、ＣＧはシトシン（Ｃ）−グアニン（Ｇ）ジヌクレオチドであり、ＣＧジヌクレオチドのＣはメチル化されておらず、
ただし、免疫刺激性ｓｓＯＲＮは、二本鎖リボ核酸（ＲＮＡ）分子の一部分として存在しない方法。
【請求項４】
感染症を有する対象を治療する方法であって、方法は、
有効量の５〜１００のヌクレオチド長の免疫刺激性一本鎖オリゴリボヌクレオチド（ｓｓＯＲＮ）を対象に投与するステップを備え、免疫刺激性ｓｓＯＲＮは、ホスホジエステルバックボーンを有し、かつ
（１）グアノシン（Ｇ）がない、または
（２）少なくとも１つのＧを備えるヌクレオチド配列を備え、ただし、ヌクレオチド配列が少なくとも１つのＧを備える場合、ヌクレオチド配列は、
（ａ）ウリジン（Ｕ）がなく、
（ｂ）ＣｐＧモチーフＸ１Ｘ２ＣＧＸ３Ｘ４がなく、式中、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、およびＸ４はヌクレオチドであり、ＣＧはシトシン（Ｃ）−グアニン（Ｇ）ジヌクレオチドであり、ＣＧジヌクレオチドのＣはメチル化されておらず、
ただし、免疫刺激性ｓｓＯＲＮは、二本鎖リボ核酸（ＲＮＡ）分子の一部分として存在しない方法。
【請求項５】
アレルギー状態を有する対象を治療する方法であって、方法は、
有効量の５〜１００のヌクレオチド長の免疫刺激性一本鎖オリゴリボヌクレオチド（ｓｓＯＲＮ）を対象に投与するステップを備え、免疫刺激性ｓｓＯＲＮは、ホスホジエステルバックボーンを有し、かつ
（１）グアノシン（Ｇ）がない、または
（２）少なくとも１つのＧを備えるヌクレオチド配列を備え、ただし、ヌクレオチド配列が少なくとも１つのＧを備える場合、ヌクレオチド配列は、
（ａ）ウリジン（Ｕ）がなく、
（ｂ）ＣｐＧモチーフＸ１Ｘ２ＣＧＸ３Ｘ４がなく、式中、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、およびＸ４はヌクレオチドであり、ＣＧはシトシン（Ｃ）−グアニン（Ｇ）ジヌクレオチドであり、ＣＧジヌクレオチドのＣはメチル化されておらず、
ただし、免疫刺激性ｓｓＯＲＮは、二本鎖リボ核酸（ＲＮＡ）分子の一部分として存在しない方法。
【請求項６】
喘息を有する対象を治療する方法であって、方法は、
有効量の５〜１００のヌクレオチド長の免疫刺激性一本鎖オリゴリボヌクレオチド（ｓｓＯＲＮ）を対象に投与するステップを備え、免疫刺激性ｓｓＯＲＮは、ホスホジエステルバックボーンを有し、かつ
（１）グアノシン（Ｇ）がない、または
（２）少なくとも１つのＧを備えるヌクレオチド配列を備え、ただし、ヌクレオチド配列が少なくとも１つのＧを備える場合、ヌクレオチド配列は、
（ａ）ウリジン（Ｕ）がなく、
（ｂ）ＣｐＧモチーフＸ１Ｘ２ＣＧＸ３Ｘ４がなく、式中、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、およびＸ４はヌクレオチドであり、ＣＧはシトシン（Ｃ）−グアニン（Ｇ）ジヌクレオチドであり、ＣＧジヌクレオチドのＣはメチル化されておらず、
ただし、免疫刺激性ｓｓＯＲＮは、二本鎖リボ核酸（ＲＮＡ）分子の一部分として存在しない方法。
【請求項７】
免疫刺激性ｓｓＯＲＮは５〜４０のヌクレオチド長である請求項１から６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８】
免疫刺激性ｓｓＯＲＮは５〜２０のヌクレオチド長である請求項１から６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
免疫刺激性ｓｓＯＲＮは５〜１２のヌクレオチド長である請求項１から６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
免疫刺激性ｓｓＯＲＮは合成ｓｓＯＲＮである請求項１から６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
免疫刺激性ｓｓＯＲＮは、ポリＵ、ポリＧ、ポリＡ、またはポリＣからなる群から選択されるポリヌクレオチドではない請求項１から６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】
有効量の免疫刺激性ｓｓＯＲＮの対象への投与は、有効量の免疫刺激性ｓｓＯＲＮの対象への全身的投与である請求項１から６のいずれか一項に記載の方法。
【図１】前で理解されたように、ある種のＴｏｌｌ様受容体、それらのリガンド、およびそれらの細胞内シグナル伝達経路の特徴を表す略図である。ＭｙＤ８８は、核酸反応性Ｔｏｌｌ様受容体ＴＬＲ７、ＴＬＲ８、およびＴＬＲ９ならびに非核酸反応性Ｔｏｌｌ様受容体ＴＬＲ２、ＴＬＲ４、およびＴＬＲ５のためのアダプタタンパク質として表される。
【図２】一本鎖ホスホジエステルＲＮＡのＴＬＲ７非依存性の認識を表すグラフである。ＰＤはホスホジエステルバックボーンであり、ＰＴＯはホスホロチオエートバックボーンであり、ＷＴは野性型である。ＲＮＡ６３は、５’−ＣＡＧＧＵＣＵＧＵＧＡＵ−３’（配列番号１）として提供されるヌクレオチド配列を有するオリゴリボヌクレオチドである。ＣｐＧ−ＯＤＮ １６６８は、５’−ＴＣＣＡＴＧＡＣＧＴＴＣＣＴＧＡＴＧＣＴ−３’（配列番号２）として提供されるヌクレオチド配列を有するオリゴデオキシヌクレオチドである。
【図３】様々な刺激に応じたＦＬＴ３−Ｌ誘発性樹状細胞（ＤＣ）による様々な示されたサイトカインの分泌を表す３つのグラフの群である。ＬＰＳはリポ多糖である。ＣｐＧ−ＯＤＮ ２２１６は、５’−ＧＧＧＧＧＡＣＧＡＴＣＧＴＣＧＧＧＧＧ−３’（配列番号３）として提供されるヌクレオチド配列を有するオリゴデオキシヌクレオチドである。
【図４】示されたｓｓＯＲＮに応じたＦＬＴ３−Ｌ誘発性樹状細胞上のＣＤ６９発現についてのＦＡＣＳ分析を表す一連の４つのグラフである。
【図５】示された刺激に応じたＭ−ＣＳＦ誘導性マクロファージによるおよびＧＭ−ＣＳＦ誘導性樹状細胞によるＩＬ−１２ｐ４０分泌を表す一対のグラフである。
【図６Ａ】示された刺激に応じた、野性型（ＷＴ）マウス、ＴＬＲ７ノックアウト（ＴＬＲ７−／−）マウス、およびＭｙＤ８８ノックアウト（ＭｙＤ８８−／−）マウスからのＦＬＴ３−Ｌ誘発性樹状細胞のＩＬ−１２ｐ４０分泌を表すグラフである。ｐＩ：Ｃはポリイノシン：シチジンである。
【図６Ｂ】示された刺激に応じた、野性型（ＷＴ）マウス、ＴＬＲ７ノックアウト（ＴＬＲ７−／−）マウス、およびＭｙＤ８８ノックアウト（ＭｙＤ８８−／−）マウスからのＦＬＴ３−Ｌ誘発性樹状細胞によるＣＤ６９発現についてのＦＡＣＳ分析を表す一連の３つのグラフである。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図２】一本鎖ホスホジエステルＲＮＡのＴＬＲ７非依存性の認識を表すグラフである。ＰＤはホスホジエステルバックボーンであり、ＰＴＯはホスホロチオエートバックボーンであり、ＷＴは野性型である。ＲＮＡ６３は、５’−ＣＡＧＧＵＣＵＧＵＧＡＵ−３’（配列番号１）として提供されるヌクレオチド配列を有するオリゴリボヌクレオチドである。ＣｐＧ−ＯＤＮ １６６８は、５’−ＴＣＣＡＴＧＡＣＧＴＴＣＣＴＧＡＴＧＣＴ−３’（配列番号２）として提供されるヌクレオチド配列を有するオリゴデオキシヌクレオチドである。
【図３】様々な刺激に応じたＦＬＴ３−Ｌ誘発性樹状細胞（ＤＣ）による様々な示されたサイトカインの分泌を表す３つのグラフの群である。ＬＰＳはリポ多糖である。ＣｐＧ−ＯＤＮ ２２１６は、５’−ＧＧＧＧＧＡＣＧＡＴＣＧＴＣＧＧＧＧＧ−３’（配列番号３）として提供されるヌクレオチド配列を有するオリゴデオキシヌクレオチドである。
【図４】示されたｓｓＯＲＮに応じたＦＬＴ３−Ｌ誘発性樹状細胞上のＣＤ６９発現についてのＦＡＣＳ分析を表す一連の４つのグラフである。
【図５】示された刺激に応じたＭ−ＣＳＦ誘導性マクロファージによるおよびＧＭ−ＣＳＦ誘導性樹状細胞によるＩＬ−１２ｐ４０分泌を表す一対のグラフである。
【図６Ａ】示された刺激に応じた、野性型（ＷＴ）マウス、ＴＬＲ７ノックアウト（ＴＬＲ７−／−）マウス、およびＭｙＤ８８ノックアウト（ＭｙＤ８８−／−）マウスからのＦＬＴ３−Ｌ誘発性樹状細胞のＩＬ−１２ｐ４０分泌を表すグラフである。ｐＩ：Ｃはポリイノシン：シチジンである。
【図６Ｂ】示された刺激に応じた、野性型（ＷＴ）マウス、ＴＬＲ７ノックアウト（ＴＬＲ７−／−）マウス、およびＭｙＤ８８ノックアウト（ＭｙＤ８８−／−）マウスからのＦＬＴ３−Ｌ誘発性樹状細胞によるＣＤ６９発現についてのＦＡＣＳ分析を表す一連の３つのグラフである。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【公表番号】特表２０１０−５０３６０８（Ｐ２０１０−５０３６０８Ａ）
【公表日】平成２２年２月４日（２０１０．２．４）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００８−５３０６６５（Ｐ２００８−５３０６６５）
【出願日】平成１８年９月１５日（２００６．９．１５）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＩＢ２００６／００４１６９
【国際公開番号】ＷＯ２００７／０８８４２３
【国際公開日】平成１９年８月９日（２００７．８．９）
【出願人】（５０８０９２９１２）コーリー ファーマシューティカル ゲーエムベーハー (10)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２２年２月４日（２０１０．２．４）
【国際特許分類】
【出願日】平成１８年９月１５日（２００６．９．１５）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＩＢ２００６／００４１６９
【国際公開番号】ＷＯ２００７／０８８４２３
【国際公開日】平成１９年８月９日（２００７．８．９）
【出願人】（５０８０９２９１２）コーリー ファーマシューティカル ゲーエムベーハー (10)
【Ｆターム（参考）】
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