【課題】新規ポリケチド(plyketide)類及びそれらを組換え合成により調製するための方法及び手段の提供。
【解決手段】タイプIIポリケチドシンターゼプロモーター、たとえばＳ．コエリカラーのactIの制御下にある、スターターモジュール及び多くの異種延長モジュールを典型的には含むハイブリッドタイプIポリケチドシンターゼ遺伝子、および、該遺伝子を用いた新規のポリケチドの合成のため使用、および、調製されたポリケチド。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
ハイブリッドポリケチドシンターゼ（“PKS”）遺伝子であって、第１のタイプI PKSの少なくとも１つのドメインをコードする第１の核酸部分又は複数の部分、及び前記第１のPKS に対して非相同である少なくとも１つのタイプI PKSドメインをコードする第２の核酸部分又は複数の部分を含んで成るハイブリッドPKS 遺伝子。
【請求項２】
前記第１の核酸部分が少なくとも負荷モジュールをコードし、そして前記第２の核酸部分が少なくとも１つの延長モジュールをコードする請求の範囲第１項記載のハイブリッドPKS 遺伝子。
【請求項３】
前記負荷モジュールが、アシルトランスフェラーゼ及びアシルキャリヤータンパク質を含んで成る請求の範囲第２項記載のハイブリッドPKS 遺伝子。
【請求項４】
前記第１の核酸部分が、相同延長モジュールのケトシンターゼ（“KS”）ドメイン（のみ）と共に負荷モジュールをコードする請求の範囲第２又は３項記載のハイブリッドPKS 遺伝子。
【請求項５】
前記負荷モジュールが、前記延長モジュールと通常関係しているスターター単位とは異なるスターター単位を生成するために基質を負荷することができる請求の範囲第２，３又は４のいづれか１項記載のハイブリッドPKS 遺伝子。
【請求項６】
前記負荷モジュールが、異なったスターター単位の多様性のいづれかを負荷することができる請求の範囲第２〜５のいづれか１項記載のハイブリッドPKS 遺伝子。
【請求項７】
前記負荷モジュールが、avr 負荷モジュールである請求の範囲第６項記載のハイブリッドPKS 遺伝子。
【請求項８】
前記核酸部分が、２種の天然のモジュールの対応するドメイン間で個々に延長する組合せモジュールをコードする請求の範囲第１〜７のいづれか１項記載のハイブリッドPKS 遺伝子。
【請求項９】
チオエステラーゼ以外の連鎖停止酵素をコードする核酸を包含する請求の範囲第１〜８のいづれか１項記載のハイブリッドPKS遺伝子。
【請求項１０】
前記第２の核酸部分又は複数の部分が、酸化状態及び／又は立体化学及び／又は置換パターンにおいて天然の単位とは異なるケチド単位を導びく延長モジュールをコードする部分を含んで成る請求の範囲第１〜９のいづれか１項記載のハイブリッドPKS 遺伝子。
【請求項１１】
PKS タイプIIプロモーターに操作可能的に結合される請求の範囲第１〜10のいづれか１項記載の遺伝子をコードする核酸。
【請求項１２】
前記プロモーターが、その天然の活性化因子遺伝子により付随される請求の範囲第11項記載の核酸。
【請求項１３】
前記プロモーターが、Ｓ．コエリカラーの actIである請求の範囲第11又は12項記載の核酸。
【請求項１４】
請求の範囲第１〜10のいづれか１項記載の遺伝子によりコードされるようなハイブリッドポリケチドシンターゼ。
【請求項１５】
請求の範囲第１〜13のいづれか１項記載の遺伝子又は核酸を含むベクター。
【請求項１６】
請求の範囲第１〜13のいづれか１項記載の遺伝子又は核酸を含み、そしてそれによりコードされるポリケチドシンターゼを発現することができる形質転換された生物。
【請求項１７】
請求の範囲第16項記載の生物を生成するための方法であって、“ドナー”DNA を含むプラスミドを宿主細胞に、異種染色体PKSDNA との相同組換えが存在するような条件下で導入する段階を含んで成る方法。
【請求項１８】
請求の範囲第16項記載の生物を培養することによってポリケチドを製造するための方法。
【請求項１９】
請求の範囲第18項記載の方法により調製されるようなポリケチド。
【請求項２０】
異種遺伝子を制御するためへのタイプII PKSプロモーターの使用。
【請求項２１】
異種遺伝子に対して操作可能的に結合されるタイプII PKSプロモーターを含んで成る核酸。
【請求項２２】
前記プロモーターがその天然の活性化因子遺伝子により付随される請求の範囲第20又は21項記載の使用又は核酸。
【請求項２３】
前記プロモーターがＳ．コエリカラーの actIである請求の範囲第20, 21又は22のいづれか１項記載の使用又は核酸。

【図１】

【図２ａ】

【図２ｂ】

【図３】

【図４】

【図５】

【図６】

【図７】

【図８】

【図９】

【図１０ａ】

【図１０ｂ】

【図１１】

【図１２】

【図１３】

【図１４】

【図１５】

【図１６】

【図１７ａ】

【図１７ｂ】

【図１８】

【図１９】

【図２０】

【図２１】

【図２２】

【図２３】

【図２４】

【図２５】

【図２６】

【図２７】

【図２８】

【図２９ａ】

【図２９ｂ】

【図２９ｃ】

【図２９ｄ】

【図２９ｅ】

【図２９ｆ】

【図３０】

【図３１】

【図３２】

【公開番号】特開２００９−２１９４９３（Ｐ２００９−２１９４９３Ａ）
【公開日】平成２１年１０月１日（２００９．１０．１）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００９−１１１６７２（Ｐ２００９−１１１６７２）
【出願日】平成２１年５月１日（２００９．５．１）
【分割の表示】特願平１０−５０４９３３の分割
【原出願日】平成９年７月４日（１９９７．７．４）
【出願人】（５０１００８６３５）バイオティカ　テクノロジー　リミティド (2)
【Ｆターム（参考）】