マグロ属魚類用人工配合飼料
【課題】稚魚期の生残率を向上させ、成長率および肥満度においても十分満足でき、しかも、すじこ油に比べ安価な脂質源を配合したマグロ属魚類用人工配合飼料を提供することを目的とする。
【解決手段】魚頭部を主原料として採油された魚原油から調製された魚由来リン脂質画分を脂質源として配合した人工配合飼料。
【解決手段】魚頭部を主原料として採油された魚原油から調製された魚由来リン脂質画分を脂質源として配合した人工配合飼料。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は魚由来リン脂質を配合したマグロ属魚類用人工配合飼料に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年世界中でマグロ消費量が高まる一方で、世界的なマグロ資源の減少が危惧され、漁獲規制が年々強まっている。日本は世界で最大のマグロ消費国であり、国外からの輸入量も多い。しかし規制強化により、今後日本への供給量の減少とマグロ価格の上昇が懸念されている。
【０００３】
そこで、親マグロより採卵し、人工ふ化させた稚魚を成魚まで育て、再び産卵させるサイクルを繰り返す完全養殖技術に対してマグロ資源の回復と、安定供給の期待が集まっている。
【０００４】
マグロ魚類の種苗生産における給餌は、ふ化３日後からワムシを与え、１０日後からマダイやイシダイの卵やふ化稚魚を与え、稚魚に変態した３週間後からは徐々に細断したマイワシ、イカナゴ、マアジなどの生餌に切り替える方法が採られている。生餌の給餌では、飼育海水の汚染、疾病の経口感染など様々な問題を生じ、また供給・品質が不安定であるため、常に一定の栄養価を与えることが難しく栄養の過不足を生じる。また、飼料の保存・細断にも多大な手間とコストを要するといった問題がある。
【０００５】
よって、常に安定した品質の飼料を与えることが可能な人工配合飼料での稚魚の飼育が進められている。人工飼料の脂質源としては通常魚油が用いられているが、マグロ類に関してはトリアシルグリセロールを主成分とする魚油等の中性油だけでは十分な飼育ができなかった。次に植物性のリン脂質である大豆リン脂質が試みられたが、生残率向上効果や成長性が不十分であった。現時点ではマグロ稚魚期の人工配合飼料に魚由来リン脂質が必要と考えられ、すじこ油が使用されている（特許文献１）。
【０００６】
しかしながら、その原料となるサケ科魚類の卵巣はいわゆるイクラとして食用にされることが多く、常に食用との競合が起こり供給に不安があること、すじこ油を飼料用として利用するにはあまりにも高価であることなどから、完全養殖の継続性及び拡大化の障壁になることが予想される。また、マグロ類稚魚の生残率は改善されたとはいえ、他魚種の養殖に比べ依然として致死率は高いものであり、成長性や生残率の点で完全養殖技術における稚魚期の人工配合飼料はまだ十分に満足のいくものではない。
【０００７】
また、特許文献２では植物性極性脂質の使用が提案されているが、生残率向上効果や成長性はすじこ油に近づいたもののいまだ劣るものであり、現時点ではすじこ油が現実的なリン脂質源となっている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】特開２００８−１４８６５２号公報
【特許文献２】特開２００８−２２０１８０号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
本発明の課題は、稚魚期の生残率を向上させ、成長率および肥満度においても十分満足でき、しかも、すじこ油に比べ安価な脂質源を配合したマグロ属魚類用人工配合飼料を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本発明者らは、鋭意研究を行なった結果、魚頭部を主原料として採油された魚原油から調製された魚由来リン脂質画分を脂質源として配合した人工配合飼料をマグロ属魚類稚魚に給餌すると稚魚期の生残率を向上させ、成長率および肥満度も良好であることを見出して本発明を完成させるに至った。
【００１１】
すなわち、本発明は、
（１）魚頭部を主原料として採油された魚原油から調製された魚由来リン脂質画分を配合してなるマグロ属魚類稚魚用人工配合飼料、
（２）魚由来リン脂質画分がグリセロリン脂質及びスフィンゴミエリンを含有し、リン脂質の構成脂肪酸として炭素数２０以上の多価不飽和脂肪酸を含有する（１）の人工配合飼料、
（３）グリセロリン脂質が実質的にホスファチジルコリンとリゾホスファチジルコリンである、（２）の人工配合飼料、
（４）魚由来リン脂質画分を１〜５０質量％配合して、飼料中のリン脂質を３質量％以上とした（１）〜（３）いずれかの人工配合飼料、
（５）脂質成分が魚由来の油のみからなる、（１）〜（４）いずれかの人工配合飼料、
（６）魚由来リン脂質画分が、カツオ及び／又はマグロの頭部を主原料とした魚原油に水を添加して撹拌し、分離した中間層を回収することを含む工程により調製される、（１）〜（５）いずれかの人工配合飼料、
を提供するものである。
【発明の効果】
【００１２】
本発明の魚由来リン脂質画分を配合したマグロ属魚類用人工配合飼料は、稚魚期の生残率を高め、十分な成長率および肥満度の稚魚の飼育を可能にする。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
本発明のマグロ属魚類用人工配合飼料は、脂質源として魚由来リン脂質画分が配合されたものである。本発明における魚由来リン脂質画分は、魚頭部を主原料として採油された魚原油から調製されたものである。魚原油は、カツオやマグロの頭部を主原料として採油された魚原油が好ましい。なお、採油する頭部に他の部位、例えば尾部等が少量混入していてもかまわない。例えばカツオの場合、鰹節等の製造工程において、可食部以外の頭部を主原料とする残滓から大規模な採油が行われている。マグロ頭部についても同様に採油されている。カツオ・マグロなどの魚原油にはイワシ油やサンマ油など全魚体から採油する魚原油に比べ、リン脂質が主体の極性脂質が多く含まれているので望ましい。
【００１４】
このような魚原油は通常は不純物を除くため、アルカリ脱酸及び活性白土による脱色と呼ばれる油脂の精製が施され、養殖魚用人工配合飼料の脂質源として用いられる。この精製の過程において、魚原油に含まれるリン脂質は油脂から除去されてしまうため、このような精製油を本発明における脂質源として用いるのは適当ではない。また、その精製で発生する残渣からリン脂質を再び回収することは非常に手間がかかる上、収率が低く、コストも高くなるので好ましくない。
【００１５】
本発明における魚由来リン脂質を得るためには、魚原油を精製する前に処理を行い、リン脂質を多く含む画分を分離し、回収することが望ましい。具体的な方法の例を下記に示すが、必ずしもこの方法に限定されるものではない。
【００１６】
まず遠心分離またはろ過等の処理により、魚原油に含まれる重合物や微量の蛋白等の夾雑物を除くことが望ましい。次に魚原油を油脂結晶が析出しない程度の低い温度に保ち、水を添加する。この温度として３０〜６０℃が望ましく、さらに望ましくは３０〜４０℃である。水の添加量は予想されるリン脂質の含有量により調整でき、魚原油に対して１〜５％、望ましくは２〜４％が好ましい。添加水の温度は油温と同じか、近い温度が好ましい。この際、水の替わりにクエン酸・リン酸などを添加した水溶液を用いることも可能である。水添加後、激しく攪拌することでリン脂質の油からの遊離と凝集を促進する。さらに、添加する水粒子をできるだけ小さくして油中に供給すると、さらに遊離と凝集が促進され好ましい。撹拌の後、静置すると上部に油層、中間部にリン脂質層、下部に水層となる３層に分離するので中間層を回収する。この時に遠心分離機を使用することができる。
【００１７】
回収した中間部のリン脂質層（含水魚由来リン脂質画分）には、リン脂質以外に中性脂質と水分がまだ多く混入しているが、飼料製造過程で水分乾燥を行う場合には、含水物をそのまま利用することも出来る。保存性の向上のためにクエン酸やリン酸などの酸を添加してもよい。その際はｐＨを４．２以下に調整することが望ましい。また、公知の方法で水分を除去してもよい。
【００１８】
また、リン脂質含量を高めるために公知の方法で残存する水分と中性油を除去することができる。具体的な例として、更なる遠心分離やアセトン分配等により除去する方法がある。さらにヘキサンやエタノールなどの有機溶剤を併用することもできる。
【００１９】
このようにして得られた魚由来リン脂質画分は、５％以上のリン脂質が含まれていることが望ましく、さらに望ましくは１０％以上である。アセトンなどの溶剤処理により中性油と水を除去した場合には、リン脂質含量を２０〜８０％とすることができる。好ましいリン脂質含量の例は、１０〜８０％、２０〜７０％、３０〜６０％、３０〜５０％、３５〜４５％等である。魚由来リン脂質画分の組成は、５０〜８０％、好ましくは６０〜８０％がグリセロリン脂質、２０〜５０％、好ましくは２０〜４０％がスフィンゴミエリンである。グリセロリン脂質は実質的にホスファチジルコリンおよびリゾホスファチジルコリンである。また、グリセロリン脂質の構成脂肪酸にはＤＨＡを代表とする炭素数２０以上の多価不飽和脂肪酸を含有するという特徴を有する。
【００２０】
「実質的に」とは、それ以外の成分が含まれないか、含まれていてもわずかか痕跡程度である状態をいう。具体的には、対象となる成分が９０％以上、より好ましくは９５％以上、さらに好ましくは９８％以上である状態をいう。より具体的に説明すると、ホスファチジルコリン及びリゾホスファチジルコリン以外の、ホスファチジルエタノールアミン等が含まれないか、含まれていてもわずかか痕跡程度であり、グリセロリン脂質中のホスファチジルコリン及びリゾホスファチジルコリンの合計が９０％以上、より好ましくは９５％以上、さらに好ましくは９８％以上である状態をいう。
【００２１】
魚由来リン脂質画分は、その含有するリン脂質量に応じて、適宜配合することができるが、他の栄養成分を考慮すると１〜５０質量％配合することが好ましい。魚由来リン脂質画分に含まれている水分は飼料を調製する際に乾燥させることにより除くことが可能であるので、残存するリン脂質を考慮すればよい。魚粉など他の原料に含まれる脂質と合わせて、飼料中の脂質含量は５〜３０質量％が好ましく、望ましくは１５〜２５質量％である。飼料中のリン脂質として３質量％以上となるように魚由来リン脂質画分を配合することが好ましい。また、ＤＨＡを代表とする炭素数２０以上の多価不飽和脂肪酸を飼料中に０．３質量％以上とすることもできる。また、魚由来リン脂質画分に含まれる中性油をそのまま利用してもよいし、中性油としての魚油をさらに配合してもよい。
【００２２】
本発明の人工配合飼料には、魚由来リン脂質画分の他に、飼料に通常配合される他の成分を配合してもよい。具体的には魚粉、カゼイン、糖類、タンパク質、グルテン類、デンプン類、ガム類、ミネラル混合物、ビタミン混合物、セルロース等が挙げられ、魚粉としては蛋白質の消化性を向上させた酵素処理魚粉を配合することが望ましい。また摂餌促進物質として、アラニン、リジン、グルタミン酸、ヒスチジンのうち１種以上のアミノ酸と、イノシン酸を配合することも望ましい。これらのアミノ酸およびイノシン酸は、アルカリ金属塩や塩酸塩でも使用できる。
【００２３】
本発明の人工配合飼料の形態については特に限定されるものではなく、魚類に給餌可能であれば、いかなる形態であってもよい。具体的にはモイストペレットやドライペレットが例示できる。
【００２４】
なお、本明細書において、「マグロ属魚類」とは、分類学的に、サバ科魚類のなかのマグロ属（Ｔｈｕｎｎｕｓ）に含まれる魚類を意味する。上記マグロ属魚類の例として、太平洋クロマグロ（Ｔｈｕｎｎｕｓ ｏｒｉｅｎｔａｌｉｓ）、大西洋クロマグロ（Ｔｈｕｎｎｕｓ ｔｈｙｎｎｕｓ）、キハダマグロ（Ｔｈｕｎｎｕｓ ａｌｂａｃａｒｅｓ）、メバチマグロ（Ｔｈｕｎｎｕｓ ｏｂｅｓｕｓ）、ビンナガマグロ（Ｔｈｕｎｎｕｓ ａｌａｌｕｎｇａ）、ミナミマグロ（Ｔｈｕｎｎｕｓ ｍａｃｃｏｙｉｉ）、コシナガマグロ（Ｔｈｕｎｎｕｓ ｔｏｎｇｇｏｌ）、およびタイセイヨウマグロ（Ｔｈｕｎｎｕｓ ａｔｌａｎｔｉｃｕｓ）等を挙げることができる。なお、本明細書では「太平洋クロマグロ」および「大西洋クロマグロ」を総称して単に「クロマグロ」と称する。上記マグロ属魚類の中でも、本発明にかかる人工配合飼料は、クロマグロの飼育に好適に用いることができる。
【実施例】
【００２５】
以下、実施例を挙げて本発明を具体的に説明するが、これらの実施例は本発明の範囲を限定するものではない。本発明の実施例における分析方法は下記の通りである。
【００２６】
脂質含量およびリン脂質含量の測定
各飼料原料からの脂質の抽出はＦｏｌｃｈ法により行い、抽出した脂質は、Ｂａｒｔｌｅｔｔの方法（Ｂａｒｔｌｅｔｔ，Ｇ．Ｒ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２３４，４６６（１９５９））によりリン量を定量し、リン脂質量に換算した。
【００２７】
脂質含有飼料原料をクロロホルム／メタノール混合液（１／１）に溶解し、試料を１０ｍｇ／ｍｌの濃度に調整した。調製した試料を１００μｌ試験管に取り溶媒を留去した後、１０Ｎの硫酸を１ｍｌ加え、２３０℃で３時間加熱処理を行った。次いで３０％過酸化水素水を２滴加え、１５０℃で１．５時間加熱処理を行った。このものを放冷した後０．２２％モリブデン酸アンモニウム溶液９．２ｍｌとＦｉｓｋｅ Ｓｕｂｂａｒｏｗ試薬０．４ｍｌを加え、沸騰水中で７分間加熱した。次にろ紙濾過を行い蒸留水で２５ｍｌにメスアップしたのち、Ｕ−２０００ダブルビーム分光光度計（日立製作所製）で波長８３０ｎｍの吸光度を測定した。得られた吸光度からリン含量を算出し、さらにステアロイル−オレイル−ホスファチジルコリン（分子量７９０）に相当するものとして、リン脂質含量に換算して総リン脂質含量とした。なお、リン濃度と吸光度の関係、吸光度からのリン脂質含量の算出式は下記に示した。
【００２８】
リン濃度と吸光度の関係
１０μｇ／ｍｌ濃度のＫＨ２ＰＯ４標準液を調製し、０、０．５、１．０、２．０、３．０ｍｌずつ試験管に取り上記と同様の分析を行い、リン濃度と吸光度の検量線を作成した。リン濃度と吸光度の関係は下記の通りであった。
検量線 ｙ＝２６．９ｘ＋０．０１５８
ｙ：［リン濃度（μｇ／ｍｌ）］
ｘ：［吸光度］
【００２９】
総リン脂質含量の算出
リン脂質としてリン含量からリン脂質への質量換算は定法に従い係数２５を用いた。また、純度既知の大豆リン脂質で同様の分析操作を行い、回収率の補正を加えた。
［リン脂質含量］=（２６．９×［吸光度］＋０．０１５８）×２５／［回収率］／１０００×１００
【００３０】
グリセロリン脂質の各組成含量及びスフィンゴミエリン含量の測定方法
薄層クロマトグラフィーで各リン脂質成分を分離させた後、ＦＩＤ検出器による定量をイアトロスキャンＭｋ−６（三菱化学ヤトロン社）を用いて行なった。分離された各リン脂質成分のホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミンの総計をリゾ体も含めてグリセロリン脂質とした。
【００３１】
具体的にはリン脂質画分をクロロホルム／メタノール混合液（１／１）に溶解し、試料を１０ｍｇ／ｍｌの濃度に調整した。続いて試料を５μｌクロマロッド（登録商標）にスポットし、クロロホルム／メタノール／水／アンモニア水（４７／２０／２．５／０．２５）の混合溶媒で１５分間展開した後、クロマロッドを乾燥させ、その後同様の混合溶媒で５０分間の展開を行った。リン脂質各スポットは、市販品の各リン脂質標準品を同様に分離展開し、そのＲｆ値から判別した。前記の総リン脂質含量にイアトロスキャンで得られた各リン脂質成分の組成百分率を掛けてグリセロリン脂質の各組成含量及びスフィンゴミエリン含量とした。
【００３２】
なお、リン脂質各スポットのＲｆ値の判別に使用した標準品は以下の通りである。
ホスファチジルコリン（大豆由来・フナコシ社製）、リゾホスファチジルコリン（卵黄由来・和光純薬工業社製）、スフィンゴミエリン（牛脳由来・シグマアルドリッチ社製）、ホスファチジルエタノールアミン（卵由来・和光純薬工業社製）、リゾホスファチジルエタノールアミン（卵由来・フナコシ社製）、ホスファチジン酸（卵由来・フナコシ社製）、ホスファチジルセリン（牛脳由来・フナコシ社製）、ホスファチジルイノシトール（ブタ肝臓由来・フナコシ社製）。
【００３３】
リン脂質中のＤＨＡ含量の測定方法
リン脂質画分のアセトン可溶成分、即ち中性脂質や脂肪酸をアセトン洗浄により除去し、得られたアセトン処理リン脂質について、内部標準物質（トリコサン酸）を加えた後、三フッ化ホウ素−メタール法により脂肪酸のメチルエステルを調製した。得られた脂肪酸のメチルエステルを常法のガスクロマトグラフィー法により分析した。用いた装置はＧＣ−１７Ａ（島津製作所社製）、カラムはＢＰＸ−７０（ＳＧＥ社製）、昇温条件は、１４０℃で２分保持後、２４０℃まで５℃／分で昇温し、２４０℃で２０分保持とした。
【００３４】
スフィンゴミエリンの確認
リン脂質画分のアセトン可溶成分をアセトン洗浄により除去し、得られたアセトン処理リン脂質画分からスフィンゴミエリンを単離した。アセトン処理して得られたリン脂質画分を０．４Ｎ ＫＯＨ−メタノール溶液で処理しグリセロリン脂質の加水分解を行った後、シリカゲルカラム精製によりスフィンゴミエリン画分を回収した。
【００３５】
得られたスフィンゴミエリン画分についてスフィンゴミエリンであることを確認するため、ＬＣ／ＭＳ Ｆｉｎｎｉｇａｎ ＬＣＱＤＥＣＡ（Ｔｈｅｒｍｏ Ｑｕｅｓｔ社製）により構造確認を行った。上記精製スフィンゴミエリンをクロロホルム／メタノール（１／１）混合液に溶解し、ＬＣ／ＭＳ分析サンプルとした。カラムは５ＳＬ−II（４．０ｍｍ×１５０ｍｍ）（ナカライテスク社製）を用い、ポジティブモードで分析を行った（ｍ／ｚの値はＮａ付加体：分子量＋２３）。スフィンゴミエリンの構成脂肪酸としてパルミチン酸（Ｃ１６：０、分子量２３９．４）が結合したｍ／ｚ＝７２５．６のピークが確認できた。同様にベヘン酸（Ｃ２２：０、分子量３４０．６）、リグノセリン酸（Ｃ２４：０、分子量３６８．６）、ネルボン酸（Ｃ２４：１、分子量３６６．６）が結合したスフィンゴミエリンに相当するｍ／ｚ＝８０９．６、ｍ／ｚ＝８３７．６、ｍ／ｚ＝８３５．６のピークをそれぞれ確認した。また上記精製スフィンゴミエリン酸分解物にて、下記（Ｉ）のＲ＝Ｈである化合物に相当するｍ／ｚ＝４８７．２のピークを確認した。これらのことから、シリカゲル精製により得られたリン脂質が、下記に示す構造のスフィンゴミエリンを含むことが確認できた。
【化１】
【００３６】
実施例１：カツオリン脂質画分の調製
カツオ原油（カツオ頭部を主体とする鰹節製造時の残渣から採油された魚原油、酸価９．０）1００ｋｇを４０℃に加温し、水温３５℃の水３ｋｇを少しずつ加えながら３０分間攪拌した。１８時間の静置により上層・中間層・下層の３層に分離させた後、中間層（リン脂質層）２ｋｇを回収した。この中間層に５℃に冷やしたアセトン６０００ｍｌを混合し、−２０℃で一晩静置し、沈澱したアセトン不溶性画分を回収した。アセトンを真空下で留去し、魚由来リン脂質画分３４０ｇを得た。
得られたリン脂質画分の、総リン脂質含量は４０％であった。このリン脂質の構成脂肪酸のうち、炭素数２０以上の多価不飽和脂肪酸は脂肪酸組成中１７．４％であり、飼料重量に対して０．３質量％であった。ＤＨＡは脂肪酸組成中９．５％であった。リン脂質画分の構成脂肪酸組成（％）を表１に示した。
【００３７】
またグリセロリン脂質が２７．４％、スフィンゴミエリンが１２．６％であった。また、グリセロリン脂質の組成はホスファチジルコリンが１９．８％、リゾホスファチジルコリンが７．２％、ホスファチジルエタノールアミンが０．４％であり、その他のグリセロリン脂質は検出されなかった。
【００３８】
【表１】
【００３９】
実施例２：カツオリン脂質画分配合飼料の調製
実施例１で得られたカツオリン脂質画分を配合したマグロ稚魚用人工配合飼料を調製した。原料と配合量は表２に示した。酵素処理魚粉はＰｒｏｆｉｓｈ Ｓ．Ａ．社製を用いた。まず実施例１で得られたリン脂質画分１２５ｇを細かく切断し、３００ｍｌの水を加え撹拌した。このリン脂質溶液に酵素処理魚粉４５０ｇ、カゼイン２００ｇ、コーングルテン１００ｇ、ハルバー処方ビタミン混合物７０ｇ、ハルバー処方ミネラル混合物５０ｇ、タウリン５ｇ、摂餌促進物質６．７８ｇを加え、固まりが出来ないようによく混合した。この混合物を手でよく捏ね合わせた後、−８０℃冷凍庫で凍結させた。凍結乾燥機により凍結した飼料の水分を取り除いた後、ステンレスのふるいにかけ直径１ｍｍ程度の粒型に造粒したものを試験用飼料とした。
この飼料に含まれるリン脂質含量を表３に示した。原料に用いた酵素処理魚粉にもリン脂質が含まれていることを考慮し、リン脂質含量は、カツオリン脂質画分由来リン脂質と酵素処理魚粉由来リン脂質の合算値とした。
【００４０】
比較例１：すじこ油配合飼料の調製
実施例２においてカツオリン脂質画分の代りにすじこ乳化油（日清マリンテック社製）を配合した以外は同様にしてマグロ稚魚用人工配合飼料を調製した。すじこ油の総リン脂質含量は３７．１％であった。この飼料に含まれるリン脂質含量を表３に示した。これらの値は、実施例２と同様にすじこ油由来リン脂質と魚粉由来リン脂質の合算値として示した。
【００４１】
比較例２：カツオ中性油配合飼料の調製
実施例２においてカツオリン脂質画分の代りにカツオ中性油（植田製油製）を配合した以外は同様にしてマグロ稚魚用人工配合飼料を調製した。カツオ中性油にはリン脂質が含まれていなかった。そのため、カツオ中性油飼料に含まれるリン脂質は、全て酵素処理魚粉由来のリン脂質である。このカツオ中性油飼料中のリン脂質含量を表３に示した。
【００４２】
【表２】
（＊グルタミン酸０．１３ｇ、ヒスチジン塩酸塩３．５７ｇ、イノシン５’−リン酸２ナトリウム塩３．０８ｇ）
【００４３】
【表３】
【００４４】
実施例３および比較例３、４
実施例３として、実施例２で調製したカツオリン脂質画分配合飼料によるマグロ稚魚の飼育テストを下記の要領で実施し、生残率と成長性を評価した。比較例３、４として比較例１および２で調製した飼料をそれぞれ給与した。結果は表４および表５に示した。
【００４５】
＜供試魚および飼育方法＞
近畿大学水産研究所大島試験場にて人工種苗生産した２６日齢のクロマグロ稚魚を、５００Ｌ容透明円形水槽に１５０尾ずつ収容して各試験区を設けた。試験区は各試験飼料につき三反復区を設けた。給餌には自動給餌機を用い、６：３０〜１８：００の間、適宜飽食給与を行い１４日間飼育した。試験期間中の水温は２５．０〜２７．４℃、溶存酸素飽和度は１０６〜１２８％であった。
【００４６】
＜生残率＞
１４日間の飼育試験終了時の生残率を表４に示した。１４日間の飼育は水槽でのクロマグロ稚魚の飼育期間としては長く、衝突などによる死亡数が増え、全ての試験区において生残率が低くなった。しかしその中でもカツオ由来リン脂質の試験区の生残率は３２．６％であり、他の試験区に比べて有意に高い生残率であった。すじこ油、カツオ中性油の生残率は、それぞれ２１．７％、２１．４％となった。
【００４７】
＜成長＞
また体重および全長の増加量を表５に示した。カツオ由来リン脂質画分試験区では、体重・全長共に最も大きく成長し、すじこ油試験区よりも良好な結果が得られた。脂質源にリン脂質を含まない中性油試験区では、体重・全長共に成長が劣る結果となった。このことから本発明のリン脂質画分を含む人工配合飼料は生残率の向上に効果を発揮し、また成長促進においても優れた効果が得られることが明らかとなった。
【００４８】
【表４】
【００４９】
【表５】
【産業上の利用可能性】
【００５０】
本発明の飼料により、マグロ属魚類の養殖において、従来使用されていた高価なすじこ油を使用せずに、すじこ油よりも優れた成長率および肥満度を得ることが可能となる。
【技術分野】
【０００１】
本発明は魚由来リン脂質を配合したマグロ属魚類用人工配合飼料に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年世界中でマグロ消費量が高まる一方で、世界的なマグロ資源の減少が危惧され、漁獲規制が年々強まっている。日本は世界で最大のマグロ消費国であり、国外からの輸入量も多い。しかし規制強化により、今後日本への供給量の減少とマグロ価格の上昇が懸念されている。
【０００３】
そこで、親マグロより採卵し、人工ふ化させた稚魚を成魚まで育て、再び産卵させるサイクルを繰り返す完全養殖技術に対してマグロ資源の回復と、安定供給の期待が集まっている。
【０００４】
マグロ魚類の種苗生産における給餌は、ふ化３日後からワムシを与え、１０日後からマダイやイシダイの卵やふ化稚魚を与え、稚魚に変態した３週間後からは徐々に細断したマイワシ、イカナゴ、マアジなどの生餌に切り替える方法が採られている。生餌の給餌では、飼育海水の汚染、疾病の経口感染など様々な問題を生じ、また供給・品質が不安定であるため、常に一定の栄養価を与えることが難しく栄養の過不足を生じる。また、飼料の保存・細断にも多大な手間とコストを要するといった問題がある。
【０００５】
よって、常に安定した品質の飼料を与えることが可能な人工配合飼料での稚魚の飼育が進められている。人工飼料の脂質源としては通常魚油が用いられているが、マグロ類に関してはトリアシルグリセロールを主成分とする魚油等の中性油だけでは十分な飼育ができなかった。次に植物性のリン脂質である大豆リン脂質が試みられたが、生残率向上効果や成長性が不十分であった。現時点ではマグロ稚魚期の人工配合飼料に魚由来リン脂質が必要と考えられ、すじこ油が使用されている（特許文献１）。
【０００６】
しかしながら、その原料となるサケ科魚類の卵巣はいわゆるイクラとして食用にされることが多く、常に食用との競合が起こり供給に不安があること、すじこ油を飼料用として利用するにはあまりにも高価であることなどから、完全養殖の継続性及び拡大化の障壁になることが予想される。また、マグロ類稚魚の生残率は改善されたとはいえ、他魚種の養殖に比べ依然として致死率は高いものであり、成長性や生残率の点で完全養殖技術における稚魚期の人工配合飼料はまだ十分に満足のいくものではない。
【０００７】
また、特許文献２では植物性極性脂質の使用が提案されているが、生残率向上効果や成長性はすじこ油に近づいたもののいまだ劣るものであり、現時点ではすじこ油が現実的なリン脂質源となっている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】特開２００８−１４８６５２号公報
【特許文献２】特開２００８−２２０１８０号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
本発明の課題は、稚魚期の生残率を向上させ、成長率および肥満度においても十分満足でき、しかも、すじこ油に比べ安価な脂質源を配合したマグロ属魚類用人工配合飼料を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本発明者らは、鋭意研究を行なった結果、魚頭部を主原料として採油された魚原油から調製された魚由来リン脂質画分を脂質源として配合した人工配合飼料をマグロ属魚類稚魚に給餌すると稚魚期の生残率を向上させ、成長率および肥満度も良好であることを見出して本発明を完成させるに至った。
【００１１】
すなわち、本発明は、
（１）魚頭部を主原料として採油された魚原油から調製された魚由来リン脂質画分を配合してなるマグロ属魚類稚魚用人工配合飼料、
（２）魚由来リン脂質画分がグリセロリン脂質及びスフィンゴミエリンを含有し、リン脂質の構成脂肪酸として炭素数２０以上の多価不飽和脂肪酸を含有する（１）の人工配合飼料、
（３）グリセロリン脂質が実質的にホスファチジルコリンとリゾホスファチジルコリンである、（２）の人工配合飼料、
（４）魚由来リン脂質画分を１〜５０質量％配合して、飼料中のリン脂質を３質量％以上とした（１）〜（３）いずれかの人工配合飼料、
（５）脂質成分が魚由来の油のみからなる、（１）〜（４）いずれかの人工配合飼料、
（６）魚由来リン脂質画分が、カツオ及び／又はマグロの頭部を主原料とした魚原油に水を添加して撹拌し、分離した中間層を回収することを含む工程により調製される、（１）〜（５）いずれかの人工配合飼料、
を提供するものである。
【発明の効果】
【００１２】
本発明の魚由来リン脂質画分を配合したマグロ属魚類用人工配合飼料は、稚魚期の生残率を高め、十分な成長率および肥満度の稚魚の飼育を可能にする。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
本発明のマグロ属魚類用人工配合飼料は、脂質源として魚由来リン脂質画分が配合されたものである。本発明における魚由来リン脂質画分は、魚頭部を主原料として採油された魚原油から調製されたものである。魚原油は、カツオやマグロの頭部を主原料として採油された魚原油が好ましい。なお、採油する頭部に他の部位、例えば尾部等が少量混入していてもかまわない。例えばカツオの場合、鰹節等の製造工程において、可食部以外の頭部を主原料とする残滓から大規模な採油が行われている。マグロ頭部についても同様に採油されている。カツオ・マグロなどの魚原油にはイワシ油やサンマ油など全魚体から採油する魚原油に比べ、リン脂質が主体の極性脂質が多く含まれているので望ましい。
【００１４】
このような魚原油は通常は不純物を除くため、アルカリ脱酸及び活性白土による脱色と呼ばれる油脂の精製が施され、養殖魚用人工配合飼料の脂質源として用いられる。この精製の過程において、魚原油に含まれるリン脂質は油脂から除去されてしまうため、このような精製油を本発明における脂質源として用いるのは適当ではない。また、その精製で発生する残渣からリン脂質を再び回収することは非常に手間がかかる上、収率が低く、コストも高くなるので好ましくない。
【００１５】
本発明における魚由来リン脂質を得るためには、魚原油を精製する前に処理を行い、リン脂質を多く含む画分を分離し、回収することが望ましい。具体的な方法の例を下記に示すが、必ずしもこの方法に限定されるものではない。
【００１６】
まず遠心分離またはろ過等の処理により、魚原油に含まれる重合物や微量の蛋白等の夾雑物を除くことが望ましい。次に魚原油を油脂結晶が析出しない程度の低い温度に保ち、水を添加する。この温度として３０〜６０℃が望ましく、さらに望ましくは３０〜４０℃である。水の添加量は予想されるリン脂質の含有量により調整でき、魚原油に対して１〜５％、望ましくは２〜４％が好ましい。添加水の温度は油温と同じか、近い温度が好ましい。この際、水の替わりにクエン酸・リン酸などを添加した水溶液を用いることも可能である。水添加後、激しく攪拌することでリン脂質の油からの遊離と凝集を促進する。さらに、添加する水粒子をできるだけ小さくして油中に供給すると、さらに遊離と凝集が促進され好ましい。撹拌の後、静置すると上部に油層、中間部にリン脂質層、下部に水層となる３層に分離するので中間層を回収する。この時に遠心分離機を使用することができる。
【００１７】
回収した中間部のリン脂質層（含水魚由来リン脂質画分）には、リン脂質以外に中性脂質と水分がまだ多く混入しているが、飼料製造過程で水分乾燥を行う場合には、含水物をそのまま利用することも出来る。保存性の向上のためにクエン酸やリン酸などの酸を添加してもよい。その際はｐＨを４．２以下に調整することが望ましい。また、公知の方法で水分を除去してもよい。
【００１８】
また、リン脂質含量を高めるために公知の方法で残存する水分と中性油を除去することができる。具体的な例として、更なる遠心分離やアセトン分配等により除去する方法がある。さらにヘキサンやエタノールなどの有機溶剤を併用することもできる。
【００１９】
このようにして得られた魚由来リン脂質画分は、５％以上のリン脂質が含まれていることが望ましく、さらに望ましくは１０％以上である。アセトンなどの溶剤処理により中性油と水を除去した場合には、リン脂質含量を２０〜８０％とすることができる。好ましいリン脂質含量の例は、１０〜８０％、２０〜７０％、３０〜６０％、３０〜５０％、３５〜４５％等である。魚由来リン脂質画分の組成は、５０〜８０％、好ましくは６０〜８０％がグリセロリン脂質、２０〜５０％、好ましくは２０〜４０％がスフィンゴミエリンである。グリセロリン脂質は実質的にホスファチジルコリンおよびリゾホスファチジルコリンである。また、グリセロリン脂質の構成脂肪酸にはＤＨＡを代表とする炭素数２０以上の多価不飽和脂肪酸を含有するという特徴を有する。
【００２０】
「実質的に」とは、それ以外の成分が含まれないか、含まれていてもわずかか痕跡程度である状態をいう。具体的には、対象となる成分が９０％以上、より好ましくは９５％以上、さらに好ましくは９８％以上である状態をいう。より具体的に説明すると、ホスファチジルコリン及びリゾホスファチジルコリン以外の、ホスファチジルエタノールアミン等が含まれないか、含まれていてもわずかか痕跡程度であり、グリセロリン脂質中のホスファチジルコリン及びリゾホスファチジルコリンの合計が９０％以上、より好ましくは９５％以上、さらに好ましくは９８％以上である状態をいう。
【００２１】
魚由来リン脂質画分は、その含有するリン脂質量に応じて、適宜配合することができるが、他の栄養成分を考慮すると１〜５０質量％配合することが好ましい。魚由来リン脂質画分に含まれている水分は飼料を調製する際に乾燥させることにより除くことが可能であるので、残存するリン脂質を考慮すればよい。魚粉など他の原料に含まれる脂質と合わせて、飼料中の脂質含量は５〜３０質量％が好ましく、望ましくは１５〜２５質量％である。飼料中のリン脂質として３質量％以上となるように魚由来リン脂質画分を配合することが好ましい。また、ＤＨＡを代表とする炭素数２０以上の多価不飽和脂肪酸を飼料中に０．３質量％以上とすることもできる。また、魚由来リン脂質画分に含まれる中性油をそのまま利用してもよいし、中性油としての魚油をさらに配合してもよい。
【００２２】
本発明の人工配合飼料には、魚由来リン脂質画分の他に、飼料に通常配合される他の成分を配合してもよい。具体的には魚粉、カゼイン、糖類、タンパク質、グルテン類、デンプン類、ガム類、ミネラル混合物、ビタミン混合物、セルロース等が挙げられ、魚粉としては蛋白質の消化性を向上させた酵素処理魚粉を配合することが望ましい。また摂餌促進物質として、アラニン、リジン、グルタミン酸、ヒスチジンのうち１種以上のアミノ酸と、イノシン酸を配合することも望ましい。これらのアミノ酸およびイノシン酸は、アルカリ金属塩や塩酸塩でも使用できる。
【００２３】
本発明の人工配合飼料の形態については特に限定されるものではなく、魚類に給餌可能であれば、いかなる形態であってもよい。具体的にはモイストペレットやドライペレットが例示できる。
【００２４】
なお、本明細書において、「マグロ属魚類」とは、分類学的に、サバ科魚類のなかのマグロ属（Ｔｈｕｎｎｕｓ）に含まれる魚類を意味する。上記マグロ属魚類の例として、太平洋クロマグロ（Ｔｈｕｎｎｕｓ ｏｒｉｅｎｔａｌｉｓ）、大西洋クロマグロ（Ｔｈｕｎｎｕｓ ｔｈｙｎｎｕｓ）、キハダマグロ（Ｔｈｕｎｎｕｓ ａｌｂａｃａｒｅｓ）、メバチマグロ（Ｔｈｕｎｎｕｓ ｏｂｅｓｕｓ）、ビンナガマグロ（Ｔｈｕｎｎｕｓ ａｌａｌｕｎｇａ）、ミナミマグロ（Ｔｈｕｎｎｕｓ ｍａｃｃｏｙｉｉ）、コシナガマグロ（Ｔｈｕｎｎｕｓ ｔｏｎｇｇｏｌ）、およびタイセイヨウマグロ（Ｔｈｕｎｎｕｓ ａｔｌａｎｔｉｃｕｓ）等を挙げることができる。なお、本明細書では「太平洋クロマグロ」および「大西洋クロマグロ」を総称して単に「クロマグロ」と称する。上記マグロ属魚類の中でも、本発明にかかる人工配合飼料は、クロマグロの飼育に好適に用いることができる。
【実施例】
【００２５】
以下、実施例を挙げて本発明を具体的に説明するが、これらの実施例は本発明の範囲を限定するものではない。本発明の実施例における分析方法は下記の通りである。
【００２６】
脂質含量およびリン脂質含量の測定
各飼料原料からの脂質の抽出はＦｏｌｃｈ法により行い、抽出した脂質は、Ｂａｒｔｌｅｔｔの方法（Ｂａｒｔｌｅｔｔ，Ｇ．Ｒ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２３４，４６６（１９５９））によりリン量を定量し、リン脂質量に換算した。
【００２７】
脂質含有飼料原料をクロロホルム／メタノール混合液（１／１）に溶解し、試料を１０ｍｇ／ｍｌの濃度に調整した。調製した試料を１００μｌ試験管に取り溶媒を留去した後、１０Ｎの硫酸を１ｍｌ加え、２３０℃で３時間加熱処理を行った。次いで３０％過酸化水素水を２滴加え、１５０℃で１．５時間加熱処理を行った。このものを放冷した後０．２２％モリブデン酸アンモニウム溶液９．２ｍｌとＦｉｓｋｅ Ｓｕｂｂａｒｏｗ試薬０．４ｍｌを加え、沸騰水中で７分間加熱した。次にろ紙濾過を行い蒸留水で２５ｍｌにメスアップしたのち、Ｕ−２０００ダブルビーム分光光度計（日立製作所製）で波長８３０ｎｍの吸光度を測定した。得られた吸光度からリン含量を算出し、さらにステアロイル−オレイル−ホスファチジルコリン（分子量７９０）に相当するものとして、リン脂質含量に換算して総リン脂質含量とした。なお、リン濃度と吸光度の関係、吸光度からのリン脂質含量の算出式は下記に示した。
【００２８】
リン濃度と吸光度の関係
１０μｇ／ｍｌ濃度のＫＨ２ＰＯ４標準液を調製し、０、０．５、１．０、２．０、３．０ｍｌずつ試験管に取り上記と同様の分析を行い、リン濃度と吸光度の検量線を作成した。リン濃度と吸光度の関係は下記の通りであった。
検量線 ｙ＝２６．９ｘ＋０．０１５８
ｙ：［リン濃度（μｇ／ｍｌ）］
ｘ：［吸光度］
【００２９】
総リン脂質含量の算出
リン脂質としてリン含量からリン脂質への質量換算は定法に従い係数２５を用いた。また、純度既知の大豆リン脂質で同様の分析操作を行い、回収率の補正を加えた。
［リン脂質含量］=（２６．９×［吸光度］＋０．０１５８）×２５／［回収率］／１０００×１００
【００３０】
グリセロリン脂質の各組成含量及びスフィンゴミエリン含量の測定方法
薄層クロマトグラフィーで各リン脂質成分を分離させた後、ＦＩＤ検出器による定量をイアトロスキャンＭｋ−６（三菱化学ヤトロン社）を用いて行なった。分離された各リン脂質成分のホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミンの総計をリゾ体も含めてグリセロリン脂質とした。
【００３１】
具体的にはリン脂質画分をクロロホルム／メタノール混合液（１／１）に溶解し、試料を１０ｍｇ／ｍｌの濃度に調整した。続いて試料を５μｌクロマロッド（登録商標）にスポットし、クロロホルム／メタノール／水／アンモニア水（４７／２０／２．５／０．２５）の混合溶媒で１５分間展開した後、クロマロッドを乾燥させ、その後同様の混合溶媒で５０分間の展開を行った。リン脂質各スポットは、市販品の各リン脂質標準品を同様に分離展開し、そのＲｆ値から判別した。前記の総リン脂質含量にイアトロスキャンで得られた各リン脂質成分の組成百分率を掛けてグリセロリン脂質の各組成含量及びスフィンゴミエリン含量とした。
【００３２】
なお、リン脂質各スポットのＲｆ値の判別に使用した標準品は以下の通りである。
ホスファチジルコリン（大豆由来・フナコシ社製）、リゾホスファチジルコリン（卵黄由来・和光純薬工業社製）、スフィンゴミエリン（牛脳由来・シグマアルドリッチ社製）、ホスファチジルエタノールアミン（卵由来・和光純薬工業社製）、リゾホスファチジルエタノールアミン（卵由来・フナコシ社製）、ホスファチジン酸（卵由来・フナコシ社製）、ホスファチジルセリン（牛脳由来・フナコシ社製）、ホスファチジルイノシトール（ブタ肝臓由来・フナコシ社製）。
【００３３】
リン脂質中のＤＨＡ含量の測定方法
リン脂質画分のアセトン可溶成分、即ち中性脂質や脂肪酸をアセトン洗浄により除去し、得られたアセトン処理リン脂質について、内部標準物質（トリコサン酸）を加えた後、三フッ化ホウ素−メタール法により脂肪酸のメチルエステルを調製した。得られた脂肪酸のメチルエステルを常法のガスクロマトグラフィー法により分析した。用いた装置はＧＣ−１７Ａ（島津製作所社製）、カラムはＢＰＸ−７０（ＳＧＥ社製）、昇温条件は、１４０℃で２分保持後、２４０℃まで５℃／分で昇温し、２４０℃で２０分保持とした。
【００３４】
スフィンゴミエリンの確認
リン脂質画分のアセトン可溶成分をアセトン洗浄により除去し、得られたアセトン処理リン脂質画分からスフィンゴミエリンを単離した。アセトン処理して得られたリン脂質画分を０．４Ｎ ＫＯＨ−メタノール溶液で処理しグリセロリン脂質の加水分解を行った後、シリカゲルカラム精製によりスフィンゴミエリン画分を回収した。
【００３５】
得られたスフィンゴミエリン画分についてスフィンゴミエリンであることを確認するため、ＬＣ／ＭＳ Ｆｉｎｎｉｇａｎ ＬＣＱＤＥＣＡ（Ｔｈｅｒｍｏ Ｑｕｅｓｔ社製）により構造確認を行った。上記精製スフィンゴミエリンをクロロホルム／メタノール（１／１）混合液に溶解し、ＬＣ／ＭＳ分析サンプルとした。カラムは５ＳＬ−II（４．０ｍｍ×１５０ｍｍ）（ナカライテスク社製）を用い、ポジティブモードで分析を行った（ｍ／ｚの値はＮａ付加体：分子量＋２３）。スフィンゴミエリンの構成脂肪酸としてパルミチン酸（Ｃ１６：０、分子量２３９．４）が結合したｍ／ｚ＝７２５．６のピークが確認できた。同様にベヘン酸（Ｃ２２：０、分子量３４０．６）、リグノセリン酸（Ｃ２４：０、分子量３６８．６）、ネルボン酸（Ｃ２４：１、分子量３６６．６）が結合したスフィンゴミエリンに相当するｍ／ｚ＝８０９．６、ｍ／ｚ＝８３７．６、ｍ／ｚ＝８３５．６のピークをそれぞれ確認した。また上記精製スフィンゴミエリン酸分解物にて、下記（Ｉ）のＲ＝Ｈである化合物に相当するｍ／ｚ＝４８７．２のピークを確認した。これらのことから、シリカゲル精製により得られたリン脂質が、下記に示す構造のスフィンゴミエリンを含むことが確認できた。
【化１】
【００３６】
実施例１：カツオリン脂質画分の調製
カツオ原油（カツオ頭部を主体とする鰹節製造時の残渣から採油された魚原油、酸価９．０）1００ｋｇを４０℃に加温し、水温３５℃の水３ｋｇを少しずつ加えながら３０分間攪拌した。１８時間の静置により上層・中間層・下層の３層に分離させた後、中間層（リン脂質層）２ｋｇを回収した。この中間層に５℃に冷やしたアセトン６０００ｍｌを混合し、−２０℃で一晩静置し、沈澱したアセトン不溶性画分を回収した。アセトンを真空下で留去し、魚由来リン脂質画分３４０ｇを得た。
得られたリン脂質画分の、総リン脂質含量は４０％であった。このリン脂質の構成脂肪酸のうち、炭素数２０以上の多価不飽和脂肪酸は脂肪酸組成中１７．４％であり、飼料重量に対して０．３質量％であった。ＤＨＡは脂肪酸組成中９．５％であった。リン脂質画分の構成脂肪酸組成（％）を表１に示した。
【００３７】
またグリセロリン脂質が２７．４％、スフィンゴミエリンが１２．６％であった。また、グリセロリン脂質の組成はホスファチジルコリンが１９．８％、リゾホスファチジルコリンが７．２％、ホスファチジルエタノールアミンが０．４％であり、その他のグリセロリン脂質は検出されなかった。
【００３８】
【表１】
【００３９】
実施例２：カツオリン脂質画分配合飼料の調製
実施例１で得られたカツオリン脂質画分を配合したマグロ稚魚用人工配合飼料を調製した。原料と配合量は表２に示した。酵素処理魚粉はＰｒｏｆｉｓｈ Ｓ．Ａ．社製を用いた。まず実施例１で得られたリン脂質画分１２５ｇを細かく切断し、３００ｍｌの水を加え撹拌した。このリン脂質溶液に酵素処理魚粉４５０ｇ、カゼイン２００ｇ、コーングルテン１００ｇ、ハルバー処方ビタミン混合物７０ｇ、ハルバー処方ミネラル混合物５０ｇ、タウリン５ｇ、摂餌促進物質６．７８ｇを加え、固まりが出来ないようによく混合した。この混合物を手でよく捏ね合わせた後、−８０℃冷凍庫で凍結させた。凍結乾燥機により凍結した飼料の水分を取り除いた後、ステンレスのふるいにかけ直径１ｍｍ程度の粒型に造粒したものを試験用飼料とした。
この飼料に含まれるリン脂質含量を表３に示した。原料に用いた酵素処理魚粉にもリン脂質が含まれていることを考慮し、リン脂質含量は、カツオリン脂質画分由来リン脂質と酵素処理魚粉由来リン脂質の合算値とした。
【００４０】
比較例１：すじこ油配合飼料の調製
実施例２においてカツオリン脂質画分の代りにすじこ乳化油（日清マリンテック社製）を配合した以外は同様にしてマグロ稚魚用人工配合飼料を調製した。すじこ油の総リン脂質含量は３７．１％であった。この飼料に含まれるリン脂質含量を表３に示した。これらの値は、実施例２と同様にすじこ油由来リン脂質と魚粉由来リン脂質の合算値として示した。
【００４１】
比較例２：カツオ中性油配合飼料の調製
実施例２においてカツオリン脂質画分の代りにカツオ中性油（植田製油製）を配合した以外は同様にしてマグロ稚魚用人工配合飼料を調製した。カツオ中性油にはリン脂質が含まれていなかった。そのため、カツオ中性油飼料に含まれるリン脂質は、全て酵素処理魚粉由来のリン脂質である。このカツオ中性油飼料中のリン脂質含量を表３に示した。
【００４２】
【表２】
（＊グルタミン酸０．１３ｇ、ヒスチジン塩酸塩３．５７ｇ、イノシン５’−リン酸２ナトリウム塩３．０８ｇ）
【００４３】
【表３】
【００４４】
実施例３および比較例３、４
実施例３として、実施例２で調製したカツオリン脂質画分配合飼料によるマグロ稚魚の飼育テストを下記の要領で実施し、生残率と成長性を評価した。比較例３、４として比較例１および２で調製した飼料をそれぞれ給与した。結果は表４および表５に示した。
【００４５】
＜供試魚および飼育方法＞
近畿大学水産研究所大島試験場にて人工種苗生産した２６日齢のクロマグロ稚魚を、５００Ｌ容透明円形水槽に１５０尾ずつ収容して各試験区を設けた。試験区は各試験飼料につき三反復区を設けた。給餌には自動給餌機を用い、６：３０〜１８：００の間、適宜飽食給与を行い１４日間飼育した。試験期間中の水温は２５．０〜２７．４℃、溶存酸素飽和度は１０６〜１２８％であった。
【００４６】
＜生残率＞
１４日間の飼育試験終了時の生残率を表４に示した。１４日間の飼育は水槽でのクロマグロ稚魚の飼育期間としては長く、衝突などによる死亡数が増え、全ての試験区において生残率が低くなった。しかしその中でもカツオ由来リン脂質の試験区の生残率は３２．６％であり、他の試験区に比べて有意に高い生残率であった。すじこ油、カツオ中性油の生残率は、それぞれ２１．７％、２１．４％となった。
【００４７】
＜成長＞
また体重および全長の増加量を表５に示した。カツオ由来リン脂質画分試験区では、体重・全長共に最も大きく成長し、すじこ油試験区よりも良好な結果が得られた。脂質源にリン脂質を含まない中性油試験区では、体重・全長共に成長が劣る結果となった。このことから本発明のリン脂質画分を含む人工配合飼料は生残率の向上に効果を発揮し、また成長促進においても優れた効果が得られることが明らかとなった。
【００４８】
【表４】
【００４９】
【表５】
【産業上の利用可能性】
【００５０】
本発明の飼料により、マグロ属魚類の養殖において、従来使用されていた高価なすじこ油を使用せずに、すじこ油よりも優れた成長率および肥満度を得ることが可能となる。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
魚頭部を主原料として採油された魚原油から調製された魚由来リン脂質画分を配合してなるマグロ属魚類稚魚用人工配合飼料。
【請求項２】
魚由来リン脂質画分がグリセロリン脂質及びスフィンゴミエリンを含有し、リン脂質の構成脂肪酸として炭素数２０以上の多価不飽和脂肪酸を含有する請求項１記載の人工配合飼料。
【請求項３】
グリセロリン脂質が実質的にホスファチジルコリンとリゾホスファチジルコリンである、請求項２に記載の人工配合飼料。
【請求項４】
魚由来リン脂質画分を１〜５０質量％配合して、飼料中のリン脂質を３質量％以上とした請求項１〜３いずれか１項に記載の人工配合飼料。
【請求項５】
脂質成分が魚由来の油のみからなる、請求項１〜４いずれか１項に記載の人工配合飼料。
【請求項６】
魚由来リン脂質画分が、カツオ及び／又はマグロの頭部を主原料とした魚原油に水を添加して撹拌し、分離した中間層を回収することを含む工程により調製される、請求項１〜５いずれか１項に記載の人工配合飼料。
【請求項１】
魚頭部を主原料として採油された魚原油から調製された魚由来リン脂質画分を配合してなるマグロ属魚類稚魚用人工配合飼料。
【請求項２】
魚由来リン脂質画分がグリセロリン脂質及びスフィンゴミエリンを含有し、リン脂質の構成脂肪酸として炭素数２０以上の多価不飽和脂肪酸を含有する請求項１記載の人工配合飼料。
【請求項３】
グリセロリン脂質が実質的にホスファチジルコリンとリゾホスファチジルコリンである、請求項２に記載の人工配合飼料。
【請求項４】
魚由来リン脂質画分を１〜５０質量％配合して、飼料中のリン脂質を３質量％以上とした請求項１〜３いずれか１項に記載の人工配合飼料。
【請求項５】
脂質成分が魚由来の油のみからなる、請求項１〜４いずれか１項に記載の人工配合飼料。
【請求項６】
魚由来リン脂質画分が、カツオ及び／又はマグロの頭部を主原料とした魚原油に水を添加して撹拌し、分離した中間層を回収することを含む工程により調製される、請求項１〜５いずれか１項に記載の人工配合飼料。
【公開番号】特開２０１３−５９２９３（Ｐ２０１３−５９２９３Ａ）
【公開日】平成２５年４月４日（２０１３．４．４）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１１−２００５２７（Ｐ２０１１−２００５２７）
【出願日】平成２３年９月１４日（２０１１．９．１４）
【新規性喪失の例外の表示】特許法第３０条第１項適用申請有り 平成２３年３月２７日 平成２３年度日本水産学会春季大会発行の「平成２３年度日本水産学会春季大会（日本農学大会水産部会）講演要旨集」において発表
【出願人】（０００１８９９７０）植田製油株式会社 (18)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２５年４月４日（２０１３．４．４）
【国際特許分類】
【出願日】平成２３年９月１４日（２０１１．９．１４）
【新規性喪失の例外の表示】特許法第３０条第１項適用申請有り 平成２３年３月２７日 平成２３年度日本水産学会春季大会発行の「平成２３年度日本水産学会春季大会（日本農学大会水産部会）講演要旨集」において発表
【出願人】（０００１８９９７０）植田製油株式会社 (18)
【Ｆターム（参考）】
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