モロヘイヤ抽出物を含有する抗疲労剤又は体力向上剤
【課題】新たな抗疲労剤又は体力向上剤の提供。
【解決手段】酵素処理したモロヘイヤ抽出物を含有する抗疲労剤又は体力向上剤、及び前記抗疲労剤又は体力向上剤を含有する医薬品又は食品。酵素処理したモロヘイヤ抽出物としては、モロヘイヤエキス溶液を酵素処理後のモロヘイヤ酵素処理エキス溶液であってもよく、モロヘイヤ酵素処理エキス溶液を希釈した溶液であってもよく、モロヘイヤ酵素処理エキス溶液を乾燥させて得られる固形物であってもよい。また、酵素としては、プロテアーゼが挙げられる。
【解決手段】酵素処理したモロヘイヤ抽出物を含有する抗疲労剤又は体力向上剤、及び前記抗疲労剤又は体力向上剤を含有する医薬品又は食品。酵素処理したモロヘイヤ抽出物としては、モロヘイヤエキス溶液を酵素処理後のモロヘイヤ酵素処理エキス溶液であってもよく、モロヘイヤ酵素処理エキス溶液を希釈した溶液であってもよく、モロヘイヤ酵素処理エキス溶液を乾燥させて得られる固形物であってもよい。また、酵素としては、プロテアーゼが挙げられる。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、モロヘイヤ抽出物を含有する抗疲労剤又は体力向上剤に関する。具体的には、本発明は、モロヘイヤ抽出物を含有する医薬品及び食品用の抗疲労剤又は体力向上剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
昨今、薬物療法と一般療法の中間に位置するともいえる治療又は予防方法に食品が用いられるようになってきている。このような食品は、健康食品、機能性食品、健康補助食品、特定保健用食品と呼ばれている。
これらの食品として、日常的に摂取する食品中に、血圧低下作用や脂肪吸収抑制作用を有する物質を添加したもの等があり、健康食品、飲料等として販売されている。
治療効果又は予防効果を有する食品に対するニーズは高まってきており、さらに効き目のある商品、安心して長期に渡って服用できる商品、経済的負担がより少ない商品が、常に求められている。
【０００３】
疲労回復等に効果を有する食品成分として、アスタキサンチン、卵白、大豆タンパク、カゼイン等の天然由来ペプチド、食肉タンパク質由来のペプチドとして、特許文献１及び２に開示されているようなペプチドが知られている。また、滋養強壮等を目的として、生薬や漢方を配合した栄養ドリンクなどの飲料も販売されている。
【０００４】
モロヘイヤは、エジプトを中心とした地中海地方を原産地とする黄麻の一種であり、その栄養価の高さから、近年特に注目されてきた食品素材のひとつである。モロヘイヤは、細かく刻んだり茹でたりすると、オクラやヤマイモの様に独特のヌメリを生じ、このヌメリは植物ゴム（Ｐｌａｎｔ ｇｕｍ）及び粘質多糖（ムコ多糖）を含んでいる。また栄養学的にはビタミン類やミネラル類が豊富で、特に総カロチン及びカルシウム含量が多い等の特徴を有する。カロチンはブロッコリーの約１２倍、ビタミンＢ１はトマトの約３倍、ビタミンＢ２はピーマンの約１４倍、カルシウムは牛乳の約２．４倍、食物繊維はレタスの約２０倍と言われている。そのため、最近、我が国でも栽培され、生葉と共にその乾燥粉末が食品素材として注目を集めつつある。
現在までに、モロヘイヤに関してはモロヘイヤ抽出物やそれを乾燥粉末化したモロヘイヤ粉末、所謂モロヘイヤエキス、それらを含有する食品や組成物が多数提案されている。
【０００５】
例えば、特許文献３には、モロヘイヤ葉又はその乾燥粉末からの水溶性画分のエタノール析出物を有効成分として含有する脂質代謝改善組成物が開示されている。
特許文献４には、胃粘膜保護作用を有するモロヘイヤの水性エキスを必須成分として含有することからなる組成物が開示されている。
また、特許文献５には、ＮＯ産生抑制活性剤として使用されるモロヘイヤの脂肪酸抽出物が開示されている。
さらに、特許文献６には、モロヘイヤ由来の処理物を有効成分として含有するインスリン量またはインスリン応答の変調を伴う疾患の治療剤又は予防剤が開示されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】特許第３５６３８９２号公報
【特許文献２】特開２００７−２２８８７５号公報
【特許文献３】特開平７−６９９１０公報
【特許文献４】特開２０００−２６３０５号公報
【特許文献５】特開平１１−３２２６６７号公報
【特許文献６】国際公開第２００４／１００９６９号パンフレット
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
しかしながら、効き目のある商品、安心して長期に渡って服用できる商品、経済的負担がより少ない商品を提供するという観点から、従来より知られている上述したようなペプチドなどに代わる、さらに優れる食品が望まれている。また、上述したような栄養ドリンクは生薬を配合していることから、薬臭く飲用し難いため、臭いのより少ない成分の開発が望まれている。
さらに、モロヘイヤは、栄養価の高い食品素材として知られているものの、疲労回復効果等を有することについては、知られていない。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者らは、上記課題を解決するために、鋭意検討を重ねた結果、モロヘイヤ抽出物が抗疲労作用及び体力向上作用を有することを見出し、本発明を完成した。
【０００９】
本発明は、以下のとおりである。
［１］
酵素処理して得られるモロヘイヤ抽出物を含有する抗疲労剤又は体力向上剤。
［２］
前記モロヘイヤ抽出物が、モロヘイヤ合成樹脂吸着画分を含む、［１］に記載の抗疲労剤又は体力向上剤。
［３］
前記酵素が、プロテアーゼである、［１］又は［２］に記載の抗疲労剤又は体力向上剤。
［４］
［１］〜［３］のいずれか１項に記載の抗疲労剤又は体力向上剤を含有する、抗疲労用又は体力向上用組成物。
［５］
［１］〜［３］のいずれか１項に記載の抗疲労剤又は体力向上剤を含有する、抗疲労用又は体力向上用飲食品。
【発明の効果】
【００１０】
本発明によれば、新たな抗疲労剤及び体力向上剤を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１１】
【図１】モロヘイヤ抽出物の摂取前及び摂取後における、限界走行時間の測定結果を示す。
【図２】モロヘイヤ抽出物の摂取前及び摂取後における、限界走行時間の延長時間の結果を示す。
【図３】モロヘイヤ抽出物の摂取前及び摂取後における、限界走行時間の測定結果を示す。
【図４】モロヘイヤ抽出物の摂取前及び摂取後における、限界走行時間の延長時間の結果を示す。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
以下、本発明を実施するための形態について詳細に説明する。なお、本発明は以下の実施の形態に限定されるものではなく、その要旨の範囲内で種々変形して実施することができる。
【００１３】
本発明の抗疲労剤又は体力向上剤は、酵素処理して得られるモロヘイヤ抽出物を含有するものである（以下、酵素処理して得られるモロヘイヤ抽出物を単に「モロヘイヤ抽出物」と略記する場合がある。）。
本発明において、モロヘイヤとは、シナノキ科の一年生の草本であり、学名がＣｏｒｃｈｏｒｕｓ ｏｌｉｔｏｒｉｕｓ Ｌ．である。
モロヘイヤは、エジプトを中心とした地中海地方を原産地とする黄麻の一種である。
【００１４】
本発明における酵素処理して得られるモロヘイヤ抽出物は、モロヘイヤエキス溶液を酵素処理して得られるものである。
モロヘイヤ抽出物としては、モロヘイヤエキス溶液を酵素処理後のモロヘイヤ酵素処理エキス溶液であってもよく、モロヘイヤ酵素処理エキス溶液を希釈した溶液であってもよく、モロヘイヤ酵素処理エキス溶液を乾燥させて得られる固形物であってもよい。
酵素としては、プロテアーゼが挙げられる。
プロテアーゼは、ペプチド結合の加水分解反応に対して触媒作用をするタンパク質分解酵素である。プロテアーゼとしては、特に限定されないが、例えば、エンドペプチダーゼ又はエンドペプチダーゼを主体とする複合酵素が挙げられる。
中でも、Ｂａｃｉｌｌｕｓ属の産生するプロテアーゼが好ましく、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ又はＢａｃｉｌｌｕｓ ｔｈｅｒｍｏｐｒｏｔｅｏｌｙｔｉｃｕｓの産生するプロテアーゼがより好ましい。プロテアーゼとしては、１種のプロテアーゼを使用してもよく、複数のプロテアーゼを組み合わせて使用してもよい。
【００１５】
モロヘイヤエキス溶液を酵素処理する方法は、従来公知の方法に従って行うことができ、特に限定されるものではない。
酵素処理する方法としては、例えば、以下の方法が挙げられる。
モロヘイヤエキス溶液を９５℃以上の温度で加熱殺菌処理を施した後、適当な温度まで冷却する。ウォーターバス中で液温を保ったまま、少量の水に溶解した適量のプロテアーゼを適量添加する。
プロテアーゼ添加から、例えば、１０分おきに撹拌を行いながら、酵素処理を行う。その後、加熱により酵素を失活させ、ろ過等任意の方法で固液分離を行い、抽出液を回収して、モロヘイヤ抽出物としてモロヘイヤ酵素処理エキス溶液を得ることができる。
【００１６】
プロテアーゼ処理の際の処理温度、処理時間、酵素濃度、ｐＨ等の処理条件は、使用するプロテアーゼが最適に作用するように調整すればよく、特に限定されない。
プロテアーゼ処理の際の処理温度は、好ましくは４０℃〜７０℃、より好ましくは５０℃〜６５℃である。
プロテアーゼ処理の際の処理時間は、好適な温度において、好ましくは１５分〜２時間、より好ましくは４５分〜９０分である。
プロテアーゼ処理の際の酵素濃度は、モロヘイヤの乾燥重量に対して、好ましくは０．０１〜３重量％、より好ましくは０．０５〜２重量％、さらに好ましくは０．１〜１．５重量％である。
プロテアーゼ処理の際のｐＨは、好ましくはｐＨ５．０〜８．５、より好ましくはｐＨ５．５〜７．０である。
【００１７】
例えば、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓの産生するプロテアーゼを使用する場合には、処理温度５５℃〜６０℃、処理時間１時間〜２時間、処理濃度はモロヘイヤの乾燥重量に対して０．１〜１．０重量％、ｐＨ６．０〜７．０、で酵素処理することが好ましい。
Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｈｅｒｍｏｐｒｏｔｅｏｌｙｔｉｃｕｓの産生するプロテアーゼを使用する場合には、処理温度６０℃〜７０℃、処理時間１時間〜２時間、処理濃度はモロヘイヤの乾燥重量に対して０．１〜１．０重量％、ｐＨ６．０〜７．０で酵素処理することが好ましい。
【００１８】
酵素の失活方法は、特に限定されないが、例えば、９５℃〜沸騰状態で、５分から１０分間保持することによりプロテアーゼを失活させる方法が挙げられる。
固液分離の方法は、特に限定されないが、目開き１００μｍ〜１ｍｍのふるいでろ過後、ろ紙を用いて吸引ろ過する方法が挙げられ、例えば、目開き８５０μｍのふるいでろ過後、例えば、Ｎｏ．２のろ紙を用いて吸引ろ過する方法等が挙げられる。
【００１９】
モロヘイヤエキス溶液としては、モロヘイヤ抽出成分を含有する溶液であればよく、特に限定されるものではない。
モロヘイヤ抽出成分は、モロヘイヤの種子を除く地上部部分の葉、茎、花、及び皮等の植物体から抽出したものである。モロヘイヤ抽出成分としては、硬い茎の部分を除去した葉の部分を用いたモロヘイヤ葉抽出成分であることが好ましい。
モロヘイヤ抽出成分としては、生の植物体から直接抽出した抽出成分であってもよく、一度乾燥させた植物体から抽出された抽出成分であってもよい。また、ピューレ状物をモロヘイヤ抽出成分として用いることもできる。
【００２０】
モロヘイヤエキス溶液を得る方法としては、特に限定されず、公知の抽出方法によりモロヘイヤエキス溶液を得ることができる。
モロヘイヤエキス溶液としては、例えば、モロヘイヤから水又は温水抽出することにより得られるモロヘイヤ抽出液、モロヘイヤ粉末を水又は温水に溶解又は混合させたモロヘイヤ粉末溶液、及びモロヘイヤピューレ溶液等が挙げられる。
【００２１】
モロヘイヤエキス溶液としては、モロヘイヤ葉等の固形分を含んでいてもよく、モロヘイヤ葉等の固形分をろ過により除去した溶液であってもよい。モロヘイヤエキス溶液としては、ろ過後固液分離して、モロヘイヤ葉等を除去した溶液を用いることが好ましい。
【００２２】
モロヘイヤ抽出液は、例えば、モロヘイヤの葉を水又は温水に加えて浸漬させて抽出することにより得ることができる。
具体的には、硬い茎の部分を除去したモロヘイヤ葉を水又は温水を加水した後、スチーム加熱し、これを破砕処理し、次いで、破砕処理したモロヘイヤ葉を熱風乾燥することによって得られたモロヘイヤ乾燥葉に１０〜４０倍重量、好ましくは２０〜３０倍重量程度の熱水を加水して抽出することによって得ることができる。
また、モロヘイヤ抽出液は、モロヘイヤピューレに水又は温水を加え、抽出することによっても得ることができる。
【００２３】
モロヘイヤ粉末としては、市販のモロヘイヤエキス粉末であってもよく、モロヘイヤ乾燥葉を粉末化したものであってもよい。
【００２４】
本発明において、酵素処理して得られるモロヘイヤ抽出物は、さらに合成樹脂吸着処理を行って得られるモロヘイヤ合成樹脂吸着画分を含むことが好ましい。
モロヘイヤ合成樹脂吸着画分を含むモロヘイヤ合成樹脂吸着画分組成物は、モロヘイヤエキス溶液を酵素処理した後、合成樹脂吸着剤で吸着処理し、その吸着画分を溶出溶媒により溶出処理することによって得ることができる。
本発明のモロヘイヤ合成樹脂吸着画分組成物は、モロヘイヤエキス溶液を合成樹脂吸着剤で吸着処理してから、酵素処理を行ったものであってもよい。
【００２５】
合成樹脂吸着処理を行う方法は、従来公知の方法に従って行うことができ、特に限定されるものではない。
合成樹脂吸着処理する方法としては、例えば、以下の方法が挙げられる。
モロヘイヤ酵素処理エキス溶液を合成樹脂吸着剤で吸着処理し、合成樹脂吸着剤へ水を通液して水押し後、例えば６０％エタノールを通液して回収することによりモロヘイヤ合成樹脂吸着画分として回収することによって、目的とするモロヘイヤ合成樹脂吸着画分組成物を得ることができる。
本発明において、酵素処理に先だって、合成樹脂吸着処理を行う場合には、まず、モロヘイヤエキス抽出液に上記方法と同様に、合成樹脂吸着処理を行う。次いで、モロヘイヤエキス抽出液に対して行うのと同様の方法により酵素処理を行うことにより、モロヘイヤ合成樹脂吸着画分組成物を得ることができる。
【００２６】
合成樹脂吸着剤による処理は、バッチ法、カラム法の何れで行ってもよいが、比較的少量の合成樹脂吸着剤により効率よく処理できるカラム法が好ましい。
合成樹脂吸着剤による処理は、少なくとも一回行えばよい。
【００２７】
合成樹脂吸着剤としては、水溶性低分子物質を吸着するのに適した多孔性の吸着剤であることが好ましい。
合成樹脂吸着剤の比表面積は、好ましくは１００ｍ2／ｇ〜１２００ｍ2／ｇ、より好ましくは２５０ｍ2／ｇ〜９００ｍ2／ｇ程度である。
合成樹脂吸着剤の細孔容積、粒度分布、最頻度半径は、それぞれ０．９ｍＬ／ｇ〜１．６ｍＬ／ｇであり、２５０μｍ以上が９０％以上、３０Å〜２６０Åであることが好ましい。
【００２８】
合成樹脂吸着剤としては、例えば、親水性合成樹脂吸着剤、疎水性合成樹脂吸着剤が挙げられ、疎水性合成樹脂吸着剤が好ましい。
親水性合成樹脂吸着剤の樹脂母体として、例えば、スチレン系マクロポーラス、シリカ、メタクリル酸エステル重合体等が挙げられる。
親水性合成樹脂吸着剤としては、具体的には、ダイヤイオン（登録商標；三菱化学株式会社）、Ｍｕｒｏｍａｃ（登録商標；ムロマチテクノス株式会社）等が挙げられる。
疎水性合成樹脂吸着剤の樹脂母体として、例えば、スチレン重合体、スチレン−ジビニルベンゼン共重合体、スチレン−アクリル酸アミドの共重合体、フェノール樹脂等が挙げられる。
疎水性合成樹脂吸着剤としては、例えば、スチレン等の芳香族系の樹脂母体に臭素等の極性基を化学的に修飾結合させてなる多孔性修飾ポリスチレン系合成吸着剤が好適である。
疎水性合成樹脂吸着剤としては、具体的には、セパビーズ（登録商標；三菱化学株式会社）等が挙げられ、中でも、好ましくはセパビーズＳＰ７０、ＳＰ７００、ＳＰ８５０、ＳＰ２０７、より好ましくはＳＰ２０７（比表面積５９０ｍ2／ｇ、細孔容積１．１ｍＬ／ｇ、粒度分布２５０μｍ以上が９０％以上、最頻度半径１２０Å）が挙げられる。
【００２９】
合成樹脂吸着剤は、吸着処理に先立って予め前処理しておいてもよい。
前処理としては、例えば、合成樹脂吸着剤をメタノール又はエタノールなどの溶媒で洗浄して不純物を除去した後、さらに水で洗浄してメタノール又はエタノールなどの溶媒を除去することにより行うことができる。
合成樹脂吸着剤の洗浄は、エタノールを用いることが好ましい。
【００３０】
合成樹脂吸着剤とモロヘイヤ酵素処理エキス溶液等の抽出液との割合は、使用する吸着剤の種類などに応じて選択できる。
【００３１】
溶出処理に用いる溶媒は、使用する合成樹脂吸着剤に適した溶出溶媒を適宜選定することができる。
例えば、芳香族系の合成樹脂吸着剤を用いた場合には、溶出溶媒として、多量の水や温水を用いてもよく、溶出効率を上げるために、好ましくは５０〜７０％濃度、より好ましくは５５〜６５％濃度に水で希釈したエタノールを用いてもよい。
【００３２】
より具体的には、モロヘイヤエキス溶液又はモロヘイヤ酵素処理エキス溶液を、合成樹脂吸着剤充填カラムに通液後、カラム排出液がＢｒｉｘ測定値でＢｒｉｘ１％以下、好ましくはＢｒｉｘ０．５％以下になるように純水等にて洗浄し、適当な濃度のエタノール等の溶出バッファーにて溶出して吸着画分を回収すればよい。
吸着画分の回収は、例えば６０％エタノール溶液であれば、樹脂容量の１〜１０倍量、より好ましくは１〜５倍量、さらに好ましくは１〜２．５倍量を通液することにより効率よく吸着物を回収できる。また水を用いる場合は純水により樹脂中に残存するモロヘイヤエキスを洗浄後、樹脂容量の３倍量以上を通液することにより吸着物を回収することができる。
【００３３】
合成樹脂吸着処理においては、必要に応じて、ろ過操作を行ってもよく、例えば、例えば、目開き８５０μｍのふるいでろ過後、例えば、Ｎｏ.２のろ紙を用いて吸引ろ過を行うことができる。
合成樹脂吸着処理により得られたモロヘイヤ合成樹脂吸着画分組成物をより精製してもよく、例えば、陽イオン交換カラムクロマトグラフィー、ゲルろ過クロマトグラフィーによりさらに精製を行ってもよい。
合成樹脂吸着処理により回収された合成樹脂吸着画分は、適当な濃度まで減圧濃縮してもよく、又は凍結乾燥し粉末とすることもできる。
【００３４】
本発明において、酵素処理して得られるモロヘイヤ抽出物は、溶液状物として得られた場合には、そのまま飲料として、又は他の果汁、野菜ジュース及びミックスジュースに配合して利用することができる。
モロヘイヤ抽出物は、適当な濃度まで減圧濃縮することによって濃厚な液状組成物とすることも可能である。
酵素処理して得られるモロヘイヤ抽出物は、溶液状物を乾燥したものであってもよく、乾燥物とすることにより保存安定性に優れる。乾燥物は、そのまま飲食品として、又は他の果汁、野菜ジュース及びミックスジュースに配合して利用することができる。
【００３５】
本発明のモロヘイヤ抽出物は、抗疲労用組成物又は体力向上用組成物として、医薬品又は飲食品として用いることができる。
【００３６】
本発明のモロヘイヤ抽出物は、飲食品として、特定保険用食品、栄養機能性食品、健康食品、機能性食品、健康補助食品等として利用できる他、清涼飲料水や食品の配合剤として利用することができる。
飲食品は、抗疲労又は体力向上作用を有する旨の表示を付した飲食品であってもよい。
飲食品として好ましい形態は、飴、ゼリー、錠菓、飲料、スープ、麺、煎餅、和菓子、冷菓、焼き菓子等の食品や飲料であり、好ましくは、果汁飲料、野菜ジュース、果物野菜ジュース、茶飲料、コーヒー飲料、スポーツドリンク等の容器詰飲料である。
【００３７】
モロヘイヤ抽出物は、味・臭いに特異な厭味が少ないことから液状又は固形形態で経口投与により摂取することが可能であり、それ自体または適宜製剤上の都合で賦形剤などと混合して粉末、顆粒、錠剤、カプセル剤などの形態で投与することができる。
【００３８】
モロヘイヤ抽出物を飲料に含有させる場合は、５００ｍＬ当り、乾燥物換算で、好ましくは５０ｍｇ〜２５００ｍｇ、より好ましくは１００ｍｇ〜８００ｍｇである。また、下記摂取量又は投与量を達成できるように、食品として又は医薬品として、他の添加物と適宜混合した製剤とすることができる。
【００３９】
モロヘイヤ抽出物の摂取量は、用途に応じて適宜調整することができるが、乾燥物換算で、好ましくは１回１０ｍｇ〜２０００ｍｇであり、より好ましくは１回５０ｍｇ〜１０００ｍｇ、さらに好ましくは１回１００ｍｇ〜５００ｍｇである。
摂取回数は、特に限定されないが、好ましくは１日１〜３回であり、必要に応じて摂取回数を増減してもよい。
【００４０】
本発明のモロヘイヤ抽出物は、医薬品として、薬学的に許容可能な賦形剤を添加して、医薬製剤として用いることができる。
医薬製剤としては、粉末、顆粒、錠剤等の公知の剤型に製剤化して用いることができ、液体、ペースト等の液剤として用いることもできる。
【００４１】
医薬製剤としては、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、細粒剤、散剤、液剤、シロップ剤、チュアブル、トローチ等の経口剤、軟膏剤、ゲル剤、クリーム剤、貼付剤等の外用剤、注射剤、舌下剤、吸入剤、点眼剤、坐剤等の剤形として用いることができる。医薬製剤の剤形として、好ましくは、錠剤、カプセル剤、散剤、顆粒剤、注射剤である。
【００４２】
医薬製剤は、動物、中でも哺乳類において、抗疲労作用及び体力向上作用に有用であり、動物、中でも哺乳類に投与することができる。
哺乳類としては、ヒト、イヌ、ネコ、ウシ、ウマなどが挙げられ、ヒトであることが好ましい。
モロヘイヤ抽出物の投与量は、個々の薬剤の活性、患者の症状、年齢、体重等の種々の条件により適宜調整することができるが、例えば、乾燥物換算で、好ましくは１回１０ｍｇ〜２０００ｍｇであり、より好ましくは１回５０ｍｇ〜１０００ｍｇ、さらに好ましくは１回１００ｍｇ〜５００ｍｇである。
投与回数は、特に限定されないが、好ましくは１日１〜３回であり、必要に応じて投与回数を増減してもよい。
【００４３】
本発明のモロヘイヤ抽出物を含有する医薬品及び飲食品は、抗疲労作用及び体力向上作用を有するため、疲労回復、体力増強、滋養強壮、持久力向上用の組成物として用いることができる。
本発明において、抗疲労作用及び体力向上作用は、限界走行時間確認試験により、限界走行時間が延長されることにより確認することができる。
マウスを用いた限界走行時間試験により限界走行時間が延長される場合には、抗疲労作用及び体力向上作用を有すると評価することができることは、当業者に公知の事項である。
【００４４】
本発明において、「疲労」とは、生体がある機能を発揮した結果、その機能が低下する現象をいう。
疲労としては、例えば、「水泳をした後の肉体疲労」「長時間にわたり、知的労働をした後の精神疲労」「毎日の通常生活においても蓄積する肉体的及び精神的な複合疲労」等が挙げられる。
「抗疲労作用」とは、疲労状態を軽減させる作用及び疲労状態よりの回復を促進する作用、あるいは疲労を予防し、疲れにくくする作用等をいう。
本発明において、「体力」とは、ある一定の運動状態を継続して行うことができる能力をいう。
「体力向上作用」とは、運動状態を継続してできる能力が向上する作用等をいう。
本発明においては、モロヘイヤ抽出物が抗疲労作用及び体力向上作用を有することにより、動物に投与又は摂取した場合に、抗疲労作用、体力向上作用、疲労回復作用、体力増強作用、持久力向上作用、滋養強壮作用を発揮させることができる。
【実施例】
【００４５】
以下、本発明を実施例及び比較例により具体的に説明するが、本発明は、これらの実施例に何ら限定されるものではない。
【００４６】
［製造例１］
（モロヘイヤ抽出物：酵素処理なし）
純水に湿潤状態の合成吸着剤ＳＰ２０７（三菱化学社製）８０ｃｃをガラスカラムへ充填し、十分な純水を通液してＳＰ２０７充填カラムとした。
硬い茎を除去したモロヘイヤ葉をスチーム加熱後、破砕し熱風乾燥を行い、モロヘイヤ乾燥葉を得た。このモロヘイヤ乾燥葉５０ｇに２０倍重量の６０℃前後の蒸留水熱水を加水し、９５℃以上に加熱して殺菌処理を施した後６０℃まで冷却し、ウォーターバス中で液温６０℃に保ったまま１０分おきに撹拌を行った。１時間後に、９５℃達温で５分間保持し、目開き８５０μｍのふるいでろ過後、次いでＮｏ．２のろ紙を使用し吸引ろ過を行い、モロヘイヤエキス溶液を得た。
得られたモロヘイヤエキス溶液３００ｍＬ（Ｂｒｉｘ０．９、ｐＨ６．０）を前記ガラスカラムへＳＶ＝４の速度で通液後、１０ｂｅｄ容量の純水にて十分にモロヘイヤエキス溶液を洗い出した。モロヘイヤエキス溶液通液開始直後からカラム排出液を回収し、素通り画分とした。次いで、６０％濃度に調整したエタノールを５ｂｅｄ容量通液し、通液開始から１／２ｂｅｄ容量のカラム排出液を廃棄した後、カラム排出液の回収を開始しエタノール通液終了まで回収した。これを吸着画分とした。素通り画分、吸着画分をそれぞれ減圧濃縮した後、凍結乾燥して、粉末状の素通り画分エキス（Ａｅ１）１．９ｇおよび吸着画分エキス（Ａｅ２）０．２９ｇを得た。なお、「ｂｅｄ」とは、吸着剤の充填容積（＝かさ）を示す。
【００４７】
［製造例２］
（モロヘイヤ抽出物：酵素処理あり）
純水に湿潤状態の合成吸着剤ＳＰ２０７（三菱化学社製）８０ｃｃをガラスカラムへ充填し、十分な純水を通液してＳＰ２０７充填カラムとした。
硬い茎を除去したモロヘイヤ葉をスチーム加熱後、破砕し熱風乾燥を行い、モロヘイヤ乾燥葉を得た。このモロヘイヤ乾燥葉５０ｇに２０倍重量の６０℃前後の蒸留水熱水を加水し、９５℃以上に加熱して殺菌処理を施した後６０℃まで冷却し、ウォーターバス中で液温６０℃に保ち、原料のモロヘイヤ乾燥葉に対して０．７重量％のプロテアーゼＮアマノＧ（株式会社天野エンザイム社製）を少量の水に溶解して添加した。その後、液温６０℃に保ったまま１０分おきに撹拌を行った。酵素添加から１時間経過後、９６℃達温で５分間保持し、目開き８５０μｍのふるいでろ過後、次いでＮｏ．２のろ紙を使用し吸引ろ過を行い、モロヘイヤ酵素処理エキス溶液を得た。
得られたモロヘイヤ酵素処理エキス溶液３００ｍＬ（Ｂｒｉｘ１．２，ｐＨ６．０）を前記ガラスカラムへＳＶ＝４の速度で通液後、１０ｂｅｄ容量の純水にて十分にモロヘイヤエキスを洗い出した。モロヘイヤ酵素処理エキス溶液通液開始直後からカラム排出液を回収し、素通り画分とした。次いで、６０％濃度に調整したエタノールを５ｂｅｄ容量通液し、通液開始から１／２ｂｅｄ容量のカラム排出液を廃棄した後、カラム排出液の回収を開始しエタノール通液終了まで回収した。これを吸着画分とした。素通り画分、吸着画分をそれぞれ減圧濃縮した後、凍結乾燥して、粉末状の素通り画分エキス（Ｂｅ１）２．１ｇおよび吸着画分エキス（Ｂｅ２）０．８ｇを得た。なお、「ｂｅｄ」とは、吸着剤の充填容積（＝かさ）を示す。
【００４８】
以下のトレッドミルによる限界走行時間の測定には、マウス（ＣＤＦ１、雄、６週齢；日本エスエルシー株式会社）を１週間予備飼育した後に用いた。
実験期間中、マウスには、水及び飼料（ＣＥ−２；日本クレア株式会社）を自由に摂取させた。
【００４９】
［実施例１］
（トレッドミルによる限界走行時間の測定）
製造例２の方法により得られたＢｅ２を投与した群を、モロヘイヤエキスＭＰ群とし、蒸留水を投与した群を対照群として、以下の実験を行った。
下記表１に示す走行速度のタイムプログラムでマウスを１日３０分間、強制走行させて５日間トレーニングを行った。
トレッドミル（室町機械製ＭＫ−６８０）を用い、５日目のみ勾配を５度としたが、１〜４日目は、勾配を０度として強制走行させた。
【００５０】
【表１】
【００５１】
トレーニング後に、トレッドミル（室町機械製ＭＫ−６８０）を用い、勾配を５度、走行時間を３時間として、下記表２に記載の走行速度のタイムプログラムで限界走行時間を測定した。各群間の限界走行時間の平均値がほぼ同様になるように群分けした。１群のｎ数を６とした。
【００５２】
【表２】
【００５３】
試験開始後、７日目より、１日１回ゾンデによりＢｅ２を２５０ｍｇ／マウスの体重（ｋｇ）で経口投与した。Ｂｅ２は、５ｍＬ／マウスの体重（ｋｇ）の蒸留水に溶解したものを用いた。
投与期間中、トレーニングは１〜２日おきに、上記表１の２日目の走行速度のタイムプログラムに従って、３０分間行った。
【００５４】
３週目１６日後（１７日目）にゾンデによりＢｅ２の経口投与を行った後に、トレッドミル（室町機械製ＭＫ−６８０）を用い、勾配を５度、走行時間を３時間として、上記表２に記載の走行速度のタイムプログラムで限界走行時間（秒）を測定した。測定結果として、各群の平均値を表３および図１に示す。また、限界走行時間の延長時間（秒）を表４および図２に示す。
【００５５】
蒸留水のみを５ｍＬ／マウスの体重（ｋｇ）でゾンデにより経口投与したものを対照群として、限界走行時間（秒）及び限界走行時間の延長時間（秒）を測定した。
【００５６】
【表３】
【００５７】
【表４】
【００５８】
図１及び図２の結果から、製造例２のモロヘイヤ抽出物を投与した群では、限界走行時間の延長効果が観察された。
【００５９】
［実施例２］
（トレッドミルによる限界走行時間の測定）
製造例１の方法により得られたＡｅ２を投与した群を、モロヘイヤエキスＡＭＰ群とし、製造例２の方法により得られたＢｅ２を投与した群を、モロヘイヤエキスＭＰ群とし、蒸留水を投与した群を対照群として、以下の実験を行った。
実施例１と同様にして、トレーニング後に、限界走行時間を測定し、各群間の限界走行時間の平均値がほぼ同様になるように群分けした。対照群とＭＰ群については、１群のｎ数を７とし、ＡＭＰ群については、ｎ数を８とした。
【００６０】
試験開始後、７日目より、１日１回ゾンデによりＡｅ２及びＢｅ２を２５０ｍｇ／マウスの体重（ｋｇ）でそれぞれ経口投与した。
Ａｅ２及びＢｅ２は、５ｍＬ／マウスの体重（ｋｇ）の蒸留水に溶解したものを用いた。
投与期間中、トレーニングは１〜２日おきに、上記表１の２日目の走行速度のタイムプログラムに従って、３０分間行った。
【００６１】
３週目１６日後（１７日目）にゾンデにより、それぞれＡｅ２及びＢｅ２の経口投与を行った後に、上記表２に記載の走行速度のタイムプログラムで限界走行時間（秒）を測定した。測定結果として、各群の平均値を表５及び図３に示す。また、限界走行時間の延長時間(秒)を表６及び図４に示す。
【００６２】
蒸留水のみを５ｍＬ／マウスの体重（ｋｇ）でゾンデにより経口投与したものを対照群として、限界走行時間（秒）及び限界走行時間の延長時間（秒）を測定した。
【００６３】
【表５】
【００６４】
【表６】
【００６５】
図３及び図４の結果から、製造例２のモロヘイヤ抽出物を投与した群では、限界走行時間の延長効果が観察されたが、製造例１の酵素処理を行っていないモロヘイヤ抽出物においては、限界走行時間の延長効果は観察されなかった。
【産業上の利用可能性】
【００６６】
本発明のモロヘイヤ抽出物は、抗疲労作用および体力向上作用を有する。本発明のモロヘイヤ抽出物は、医薬品及び食品用の抗疲労剤及び体力向上剤として産業上の利用可能性を有する。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、モロヘイヤ抽出物を含有する抗疲労剤又は体力向上剤に関する。具体的には、本発明は、モロヘイヤ抽出物を含有する医薬品及び食品用の抗疲労剤又は体力向上剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
昨今、薬物療法と一般療法の中間に位置するともいえる治療又は予防方法に食品が用いられるようになってきている。このような食品は、健康食品、機能性食品、健康補助食品、特定保健用食品と呼ばれている。
これらの食品として、日常的に摂取する食品中に、血圧低下作用や脂肪吸収抑制作用を有する物質を添加したもの等があり、健康食品、飲料等として販売されている。
治療効果又は予防効果を有する食品に対するニーズは高まってきており、さらに効き目のある商品、安心して長期に渡って服用できる商品、経済的負担がより少ない商品が、常に求められている。
【０００３】
疲労回復等に効果を有する食品成分として、アスタキサンチン、卵白、大豆タンパク、カゼイン等の天然由来ペプチド、食肉タンパク質由来のペプチドとして、特許文献１及び２に開示されているようなペプチドが知られている。また、滋養強壮等を目的として、生薬や漢方を配合した栄養ドリンクなどの飲料も販売されている。
【０００４】
モロヘイヤは、エジプトを中心とした地中海地方を原産地とする黄麻の一種であり、その栄養価の高さから、近年特に注目されてきた食品素材のひとつである。モロヘイヤは、細かく刻んだり茹でたりすると、オクラやヤマイモの様に独特のヌメリを生じ、このヌメリは植物ゴム（Ｐｌａｎｔ ｇｕｍ）及び粘質多糖（ムコ多糖）を含んでいる。また栄養学的にはビタミン類やミネラル類が豊富で、特に総カロチン及びカルシウム含量が多い等の特徴を有する。カロチンはブロッコリーの約１２倍、ビタミンＢ１はトマトの約３倍、ビタミンＢ２はピーマンの約１４倍、カルシウムは牛乳の約２．４倍、食物繊維はレタスの約２０倍と言われている。そのため、最近、我が国でも栽培され、生葉と共にその乾燥粉末が食品素材として注目を集めつつある。
現在までに、モロヘイヤに関してはモロヘイヤ抽出物やそれを乾燥粉末化したモロヘイヤ粉末、所謂モロヘイヤエキス、それらを含有する食品や組成物が多数提案されている。
【０００５】
例えば、特許文献３には、モロヘイヤ葉又はその乾燥粉末からの水溶性画分のエタノール析出物を有効成分として含有する脂質代謝改善組成物が開示されている。
特許文献４には、胃粘膜保護作用を有するモロヘイヤの水性エキスを必須成分として含有することからなる組成物が開示されている。
また、特許文献５には、ＮＯ産生抑制活性剤として使用されるモロヘイヤの脂肪酸抽出物が開示されている。
さらに、特許文献６には、モロヘイヤ由来の処理物を有効成分として含有するインスリン量またはインスリン応答の変調を伴う疾患の治療剤又は予防剤が開示されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】特許第３５６３８９２号公報
【特許文献２】特開２００７−２２８８７５号公報
【特許文献３】特開平７−６９９１０公報
【特許文献４】特開２０００−２６３０５号公報
【特許文献５】特開平１１−３２２６６７号公報
【特許文献６】国際公開第２００４／１００９６９号パンフレット
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
しかしながら、効き目のある商品、安心して長期に渡って服用できる商品、経済的負担がより少ない商品を提供するという観点から、従来より知られている上述したようなペプチドなどに代わる、さらに優れる食品が望まれている。また、上述したような栄養ドリンクは生薬を配合していることから、薬臭く飲用し難いため、臭いのより少ない成分の開発が望まれている。
さらに、モロヘイヤは、栄養価の高い食品素材として知られているものの、疲労回復効果等を有することについては、知られていない。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者らは、上記課題を解決するために、鋭意検討を重ねた結果、モロヘイヤ抽出物が抗疲労作用及び体力向上作用を有することを見出し、本発明を完成した。
【０００９】
本発明は、以下のとおりである。
［１］
酵素処理して得られるモロヘイヤ抽出物を含有する抗疲労剤又は体力向上剤。
［２］
前記モロヘイヤ抽出物が、モロヘイヤ合成樹脂吸着画分を含む、［１］に記載の抗疲労剤又は体力向上剤。
［３］
前記酵素が、プロテアーゼである、［１］又は［２］に記載の抗疲労剤又は体力向上剤。
［４］
［１］〜［３］のいずれか１項に記載の抗疲労剤又は体力向上剤を含有する、抗疲労用又は体力向上用組成物。
［５］
［１］〜［３］のいずれか１項に記載の抗疲労剤又は体力向上剤を含有する、抗疲労用又は体力向上用飲食品。
【発明の効果】
【００１０】
本発明によれば、新たな抗疲労剤及び体力向上剤を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１１】
【図１】モロヘイヤ抽出物の摂取前及び摂取後における、限界走行時間の測定結果を示す。
【図２】モロヘイヤ抽出物の摂取前及び摂取後における、限界走行時間の延長時間の結果を示す。
【図３】モロヘイヤ抽出物の摂取前及び摂取後における、限界走行時間の測定結果を示す。
【図４】モロヘイヤ抽出物の摂取前及び摂取後における、限界走行時間の延長時間の結果を示す。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
以下、本発明を実施するための形態について詳細に説明する。なお、本発明は以下の実施の形態に限定されるものではなく、その要旨の範囲内で種々変形して実施することができる。
【００１３】
本発明の抗疲労剤又は体力向上剤は、酵素処理して得られるモロヘイヤ抽出物を含有するものである（以下、酵素処理して得られるモロヘイヤ抽出物を単に「モロヘイヤ抽出物」と略記する場合がある。）。
本発明において、モロヘイヤとは、シナノキ科の一年生の草本であり、学名がＣｏｒｃｈｏｒｕｓ ｏｌｉｔｏｒｉｕｓ Ｌ．である。
モロヘイヤは、エジプトを中心とした地中海地方を原産地とする黄麻の一種である。
【００１４】
本発明における酵素処理して得られるモロヘイヤ抽出物は、モロヘイヤエキス溶液を酵素処理して得られるものである。
モロヘイヤ抽出物としては、モロヘイヤエキス溶液を酵素処理後のモロヘイヤ酵素処理エキス溶液であってもよく、モロヘイヤ酵素処理エキス溶液を希釈した溶液であってもよく、モロヘイヤ酵素処理エキス溶液を乾燥させて得られる固形物であってもよい。
酵素としては、プロテアーゼが挙げられる。
プロテアーゼは、ペプチド結合の加水分解反応に対して触媒作用をするタンパク質分解酵素である。プロテアーゼとしては、特に限定されないが、例えば、エンドペプチダーゼ又はエンドペプチダーゼを主体とする複合酵素が挙げられる。
中でも、Ｂａｃｉｌｌｕｓ属の産生するプロテアーゼが好ましく、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ又はＢａｃｉｌｌｕｓ ｔｈｅｒｍｏｐｒｏｔｅｏｌｙｔｉｃｕｓの産生するプロテアーゼがより好ましい。プロテアーゼとしては、１種のプロテアーゼを使用してもよく、複数のプロテアーゼを組み合わせて使用してもよい。
【００１５】
モロヘイヤエキス溶液を酵素処理する方法は、従来公知の方法に従って行うことができ、特に限定されるものではない。
酵素処理する方法としては、例えば、以下の方法が挙げられる。
モロヘイヤエキス溶液を９５℃以上の温度で加熱殺菌処理を施した後、適当な温度まで冷却する。ウォーターバス中で液温を保ったまま、少量の水に溶解した適量のプロテアーゼを適量添加する。
プロテアーゼ添加から、例えば、１０分おきに撹拌を行いながら、酵素処理を行う。その後、加熱により酵素を失活させ、ろ過等任意の方法で固液分離を行い、抽出液を回収して、モロヘイヤ抽出物としてモロヘイヤ酵素処理エキス溶液を得ることができる。
【００１６】
プロテアーゼ処理の際の処理温度、処理時間、酵素濃度、ｐＨ等の処理条件は、使用するプロテアーゼが最適に作用するように調整すればよく、特に限定されない。
プロテアーゼ処理の際の処理温度は、好ましくは４０℃〜７０℃、より好ましくは５０℃〜６５℃である。
プロテアーゼ処理の際の処理時間は、好適な温度において、好ましくは１５分〜２時間、より好ましくは４５分〜９０分である。
プロテアーゼ処理の際の酵素濃度は、モロヘイヤの乾燥重量に対して、好ましくは０．０１〜３重量％、より好ましくは０．０５〜２重量％、さらに好ましくは０．１〜１．５重量％である。
プロテアーゼ処理の際のｐＨは、好ましくはｐＨ５．０〜８．５、より好ましくはｐＨ５．５〜７．０である。
【００１７】
例えば、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓの産生するプロテアーゼを使用する場合には、処理温度５５℃〜６０℃、処理時間１時間〜２時間、処理濃度はモロヘイヤの乾燥重量に対して０．１〜１．０重量％、ｐＨ６．０〜７．０、で酵素処理することが好ましい。
Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｈｅｒｍｏｐｒｏｔｅｏｌｙｔｉｃｕｓの産生するプロテアーゼを使用する場合には、処理温度６０℃〜７０℃、処理時間１時間〜２時間、処理濃度はモロヘイヤの乾燥重量に対して０．１〜１．０重量％、ｐＨ６．０〜７．０で酵素処理することが好ましい。
【００１８】
酵素の失活方法は、特に限定されないが、例えば、９５℃〜沸騰状態で、５分から１０分間保持することによりプロテアーゼを失活させる方法が挙げられる。
固液分離の方法は、特に限定されないが、目開き１００μｍ〜１ｍｍのふるいでろ過後、ろ紙を用いて吸引ろ過する方法が挙げられ、例えば、目開き８５０μｍのふるいでろ過後、例えば、Ｎｏ．２のろ紙を用いて吸引ろ過する方法等が挙げられる。
【００１９】
モロヘイヤエキス溶液としては、モロヘイヤ抽出成分を含有する溶液であればよく、特に限定されるものではない。
モロヘイヤ抽出成分は、モロヘイヤの種子を除く地上部部分の葉、茎、花、及び皮等の植物体から抽出したものである。モロヘイヤ抽出成分としては、硬い茎の部分を除去した葉の部分を用いたモロヘイヤ葉抽出成分であることが好ましい。
モロヘイヤ抽出成分としては、生の植物体から直接抽出した抽出成分であってもよく、一度乾燥させた植物体から抽出された抽出成分であってもよい。また、ピューレ状物をモロヘイヤ抽出成分として用いることもできる。
【００２０】
モロヘイヤエキス溶液を得る方法としては、特に限定されず、公知の抽出方法によりモロヘイヤエキス溶液を得ることができる。
モロヘイヤエキス溶液としては、例えば、モロヘイヤから水又は温水抽出することにより得られるモロヘイヤ抽出液、モロヘイヤ粉末を水又は温水に溶解又は混合させたモロヘイヤ粉末溶液、及びモロヘイヤピューレ溶液等が挙げられる。
【００２１】
モロヘイヤエキス溶液としては、モロヘイヤ葉等の固形分を含んでいてもよく、モロヘイヤ葉等の固形分をろ過により除去した溶液であってもよい。モロヘイヤエキス溶液としては、ろ過後固液分離して、モロヘイヤ葉等を除去した溶液を用いることが好ましい。
【００２２】
モロヘイヤ抽出液は、例えば、モロヘイヤの葉を水又は温水に加えて浸漬させて抽出することにより得ることができる。
具体的には、硬い茎の部分を除去したモロヘイヤ葉を水又は温水を加水した後、スチーム加熱し、これを破砕処理し、次いで、破砕処理したモロヘイヤ葉を熱風乾燥することによって得られたモロヘイヤ乾燥葉に１０〜４０倍重量、好ましくは２０〜３０倍重量程度の熱水を加水して抽出することによって得ることができる。
また、モロヘイヤ抽出液は、モロヘイヤピューレに水又は温水を加え、抽出することによっても得ることができる。
【００２３】
モロヘイヤ粉末としては、市販のモロヘイヤエキス粉末であってもよく、モロヘイヤ乾燥葉を粉末化したものであってもよい。
【００２４】
本発明において、酵素処理して得られるモロヘイヤ抽出物は、さらに合成樹脂吸着処理を行って得られるモロヘイヤ合成樹脂吸着画分を含むことが好ましい。
モロヘイヤ合成樹脂吸着画分を含むモロヘイヤ合成樹脂吸着画分組成物は、モロヘイヤエキス溶液を酵素処理した後、合成樹脂吸着剤で吸着処理し、その吸着画分を溶出溶媒により溶出処理することによって得ることができる。
本発明のモロヘイヤ合成樹脂吸着画分組成物は、モロヘイヤエキス溶液を合成樹脂吸着剤で吸着処理してから、酵素処理を行ったものであってもよい。
【００２５】
合成樹脂吸着処理を行う方法は、従来公知の方法に従って行うことができ、特に限定されるものではない。
合成樹脂吸着処理する方法としては、例えば、以下の方法が挙げられる。
モロヘイヤ酵素処理エキス溶液を合成樹脂吸着剤で吸着処理し、合成樹脂吸着剤へ水を通液して水押し後、例えば６０％エタノールを通液して回収することによりモロヘイヤ合成樹脂吸着画分として回収することによって、目的とするモロヘイヤ合成樹脂吸着画分組成物を得ることができる。
本発明において、酵素処理に先だって、合成樹脂吸着処理を行う場合には、まず、モロヘイヤエキス抽出液に上記方法と同様に、合成樹脂吸着処理を行う。次いで、モロヘイヤエキス抽出液に対して行うのと同様の方法により酵素処理を行うことにより、モロヘイヤ合成樹脂吸着画分組成物を得ることができる。
【００２６】
合成樹脂吸着剤による処理は、バッチ法、カラム法の何れで行ってもよいが、比較的少量の合成樹脂吸着剤により効率よく処理できるカラム法が好ましい。
合成樹脂吸着剤による処理は、少なくとも一回行えばよい。
【００２７】
合成樹脂吸着剤としては、水溶性低分子物質を吸着するのに適した多孔性の吸着剤であることが好ましい。
合成樹脂吸着剤の比表面積は、好ましくは１００ｍ2／ｇ〜１２００ｍ2／ｇ、より好ましくは２５０ｍ2／ｇ〜９００ｍ2／ｇ程度である。
合成樹脂吸着剤の細孔容積、粒度分布、最頻度半径は、それぞれ０．９ｍＬ／ｇ〜１．６ｍＬ／ｇであり、２５０μｍ以上が９０％以上、３０Å〜２６０Åであることが好ましい。
【００２８】
合成樹脂吸着剤としては、例えば、親水性合成樹脂吸着剤、疎水性合成樹脂吸着剤が挙げられ、疎水性合成樹脂吸着剤が好ましい。
親水性合成樹脂吸着剤の樹脂母体として、例えば、スチレン系マクロポーラス、シリカ、メタクリル酸エステル重合体等が挙げられる。
親水性合成樹脂吸着剤としては、具体的には、ダイヤイオン（登録商標；三菱化学株式会社）、Ｍｕｒｏｍａｃ（登録商標；ムロマチテクノス株式会社）等が挙げられる。
疎水性合成樹脂吸着剤の樹脂母体として、例えば、スチレン重合体、スチレン−ジビニルベンゼン共重合体、スチレン−アクリル酸アミドの共重合体、フェノール樹脂等が挙げられる。
疎水性合成樹脂吸着剤としては、例えば、スチレン等の芳香族系の樹脂母体に臭素等の極性基を化学的に修飾結合させてなる多孔性修飾ポリスチレン系合成吸着剤が好適である。
疎水性合成樹脂吸着剤としては、具体的には、セパビーズ（登録商標；三菱化学株式会社）等が挙げられ、中でも、好ましくはセパビーズＳＰ７０、ＳＰ７００、ＳＰ８５０、ＳＰ２０７、より好ましくはＳＰ２０７（比表面積５９０ｍ2／ｇ、細孔容積１．１ｍＬ／ｇ、粒度分布２５０μｍ以上が９０％以上、最頻度半径１２０Å）が挙げられる。
【００２９】
合成樹脂吸着剤は、吸着処理に先立って予め前処理しておいてもよい。
前処理としては、例えば、合成樹脂吸着剤をメタノール又はエタノールなどの溶媒で洗浄して不純物を除去した後、さらに水で洗浄してメタノール又はエタノールなどの溶媒を除去することにより行うことができる。
合成樹脂吸着剤の洗浄は、エタノールを用いることが好ましい。
【００３０】
合成樹脂吸着剤とモロヘイヤ酵素処理エキス溶液等の抽出液との割合は、使用する吸着剤の種類などに応じて選択できる。
【００３１】
溶出処理に用いる溶媒は、使用する合成樹脂吸着剤に適した溶出溶媒を適宜選定することができる。
例えば、芳香族系の合成樹脂吸着剤を用いた場合には、溶出溶媒として、多量の水や温水を用いてもよく、溶出効率を上げるために、好ましくは５０〜７０％濃度、より好ましくは５５〜６５％濃度に水で希釈したエタノールを用いてもよい。
【００３２】
より具体的には、モロヘイヤエキス溶液又はモロヘイヤ酵素処理エキス溶液を、合成樹脂吸着剤充填カラムに通液後、カラム排出液がＢｒｉｘ測定値でＢｒｉｘ１％以下、好ましくはＢｒｉｘ０．５％以下になるように純水等にて洗浄し、適当な濃度のエタノール等の溶出バッファーにて溶出して吸着画分を回収すればよい。
吸着画分の回収は、例えば６０％エタノール溶液であれば、樹脂容量の１〜１０倍量、より好ましくは１〜５倍量、さらに好ましくは１〜２．５倍量を通液することにより効率よく吸着物を回収できる。また水を用いる場合は純水により樹脂中に残存するモロヘイヤエキスを洗浄後、樹脂容量の３倍量以上を通液することにより吸着物を回収することができる。
【００３３】
合成樹脂吸着処理においては、必要に応じて、ろ過操作を行ってもよく、例えば、例えば、目開き８５０μｍのふるいでろ過後、例えば、Ｎｏ.２のろ紙を用いて吸引ろ過を行うことができる。
合成樹脂吸着処理により得られたモロヘイヤ合成樹脂吸着画分組成物をより精製してもよく、例えば、陽イオン交換カラムクロマトグラフィー、ゲルろ過クロマトグラフィーによりさらに精製を行ってもよい。
合成樹脂吸着処理により回収された合成樹脂吸着画分は、適当な濃度まで減圧濃縮してもよく、又は凍結乾燥し粉末とすることもできる。
【００３４】
本発明において、酵素処理して得られるモロヘイヤ抽出物は、溶液状物として得られた場合には、そのまま飲料として、又は他の果汁、野菜ジュース及びミックスジュースに配合して利用することができる。
モロヘイヤ抽出物は、適当な濃度まで減圧濃縮することによって濃厚な液状組成物とすることも可能である。
酵素処理して得られるモロヘイヤ抽出物は、溶液状物を乾燥したものであってもよく、乾燥物とすることにより保存安定性に優れる。乾燥物は、そのまま飲食品として、又は他の果汁、野菜ジュース及びミックスジュースに配合して利用することができる。
【００３５】
本発明のモロヘイヤ抽出物は、抗疲労用組成物又は体力向上用組成物として、医薬品又は飲食品として用いることができる。
【００３６】
本発明のモロヘイヤ抽出物は、飲食品として、特定保険用食品、栄養機能性食品、健康食品、機能性食品、健康補助食品等として利用できる他、清涼飲料水や食品の配合剤として利用することができる。
飲食品は、抗疲労又は体力向上作用を有する旨の表示を付した飲食品であってもよい。
飲食品として好ましい形態は、飴、ゼリー、錠菓、飲料、スープ、麺、煎餅、和菓子、冷菓、焼き菓子等の食品や飲料であり、好ましくは、果汁飲料、野菜ジュース、果物野菜ジュース、茶飲料、コーヒー飲料、スポーツドリンク等の容器詰飲料である。
【００３７】
モロヘイヤ抽出物は、味・臭いに特異な厭味が少ないことから液状又は固形形態で経口投与により摂取することが可能であり、それ自体または適宜製剤上の都合で賦形剤などと混合して粉末、顆粒、錠剤、カプセル剤などの形態で投与することができる。
【００３８】
モロヘイヤ抽出物を飲料に含有させる場合は、５００ｍＬ当り、乾燥物換算で、好ましくは５０ｍｇ〜２５００ｍｇ、より好ましくは１００ｍｇ〜８００ｍｇである。また、下記摂取量又は投与量を達成できるように、食品として又は医薬品として、他の添加物と適宜混合した製剤とすることができる。
【００３９】
モロヘイヤ抽出物の摂取量は、用途に応じて適宜調整することができるが、乾燥物換算で、好ましくは１回１０ｍｇ〜２０００ｍｇであり、より好ましくは１回５０ｍｇ〜１０００ｍｇ、さらに好ましくは１回１００ｍｇ〜５００ｍｇである。
摂取回数は、特に限定されないが、好ましくは１日１〜３回であり、必要に応じて摂取回数を増減してもよい。
【００４０】
本発明のモロヘイヤ抽出物は、医薬品として、薬学的に許容可能な賦形剤を添加して、医薬製剤として用いることができる。
医薬製剤としては、粉末、顆粒、錠剤等の公知の剤型に製剤化して用いることができ、液体、ペースト等の液剤として用いることもできる。
【００４１】
医薬製剤としては、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、細粒剤、散剤、液剤、シロップ剤、チュアブル、トローチ等の経口剤、軟膏剤、ゲル剤、クリーム剤、貼付剤等の外用剤、注射剤、舌下剤、吸入剤、点眼剤、坐剤等の剤形として用いることができる。医薬製剤の剤形として、好ましくは、錠剤、カプセル剤、散剤、顆粒剤、注射剤である。
【００４２】
医薬製剤は、動物、中でも哺乳類において、抗疲労作用及び体力向上作用に有用であり、動物、中でも哺乳類に投与することができる。
哺乳類としては、ヒト、イヌ、ネコ、ウシ、ウマなどが挙げられ、ヒトであることが好ましい。
モロヘイヤ抽出物の投与量は、個々の薬剤の活性、患者の症状、年齢、体重等の種々の条件により適宜調整することができるが、例えば、乾燥物換算で、好ましくは１回１０ｍｇ〜２０００ｍｇであり、より好ましくは１回５０ｍｇ〜１０００ｍｇ、さらに好ましくは１回１００ｍｇ〜５００ｍｇである。
投与回数は、特に限定されないが、好ましくは１日１〜３回であり、必要に応じて投与回数を増減してもよい。
【００４３】
本発明のモロヘイヤ抽出物を含有する医薬品及び飲食品は、抗疲労作用及び体力向上作用を有するため、疲労回復、体力増強、滋養強壮、持久力向上用の組成物として用いることができる。
本発明において、抗疲労作用及び体力向上作用は、限界走行時間確認試験により、限界走行時間が延長されることにより確認することができる。
マウスを用いた限界走行時間試験により限界走行時間が延長される場合には、抗疲労作用及び体力向上作用を有すると評価することができることは、当業者に公知の事項である。
【００４４】
本発明において、「疲労」とは、生体がある機能を発揮した結果、その機能が低下する現象をいう。
疲労としては、例えば、「水泳をした後の肉体疲労」「長時間にわたり、知的労働をした後の精神疲労」「毎日の通常生活においても蓄積する肉体的及び精神的な複合疲労」等が挙げられる。
「抗疲労作用」とは、疲労状態を軽減させる作用及び疲労状態よりの回復を促進する作用、あるいは疲労を予防し、疲れにくくする作用等をいう。
本発明において、「体力」とは、ある一定の運動状態を継続して行うことができる能力をいう。
「体力向上作用」とは、運動状態を継続してできる能力が向上する作用等をいう。
本発明においては、モロヘイヤ抽出物が抗疲労作用及び体力向上作用を有することにより、動物に投与又は摂取した場合に、抗疲労作用、体力向上作用、疲労回復作用、体力増強作用、持久力向上作用、滋養強壮作用を発揮させることができる。
【実施例】
【００４５】
以下、本発明を実施例及び比較例により具体的に説明するが、本発明は、これらの実施例に何ら限定されるものではない。
【００４６】
［製造例１］
（モロヘイヤ抽出物：酵素処理なし）
純水に湿潤状態の合成吸着剤ＳＰ２０７（三菱化学社製）８０ｃｃをガラスカラムへ充填し、十分な純水を通液してＳＰ２０７充填カラムとした。
硬い茎を除去したモロヘイヤ葉をスチーム加熱後、破砕し熱風乾燥を行い、モロヘイヤ乾燥葉を得た。このモロヘイヤ乾燥葉５０ｇに２０倍重量の６０℃前後の蒸留水熱水を加水し、９５℃以上に加熱して殺菌処理を施した後６０℃まで冷却し、ウォーターバス中で液温６０℃に保ったまま１０分おきに撹拌を行った。１時間後に、９５℃達温で５分間保持し、目開き８５０μｍのふるいでろ過後、次いでＮｏ．２のろ紙を使用し吸引ろ過を行い、モロヘイヤエキス溶液を得た。
得られたモロヘイヤエキス溶液３００ｍＬ（Ｂｒｉｘ０．９、ｐＨ６．０）を前記ガラスカラムへＳＶ＝４の速度で通液後、１０ｂｅｄ容量の純水にて十分にモロヘイヤエキス溶液を洗い出した。モロヘイヤエキス溶液通液開始直後からカラム排出液を回収し、素通り画分とした。次いで、６０％濃度に調整したエタノールを５ｂｅｄ容量通液し、通液開始から１／２ｂｅｄ容量のカラム排出液を廃棄した後、カラム排出液の回収を開始しエタノール通液終了まで回収した。これを吸着画分とした。素通り画分、吸着画分をそれぞれ減圧濃縮した後、凍結乾燥して、粉末状の素通り画分エキス（Ａｅ１）１．９ｇおよび吸着画分エキス（Ａｅ２）０．２９ｇを得た。なお、「ｂｅｄ」とは、吸着剤の充填容積（＝かさ）を示す。
【００４７】
［製造例２］
（モロヘイヤ抽出物：酵素処理あり）
純水に湿潤状態の合成吸着剤ＳＰ２０７（三菱化学社製）８０ｃｃをガラスカラムへ充填し、十分な純水を通液してＳＰ２０７充填カラムとした。
硬い茎を除去したモロヘイヤ葉をスチーム加熱後、破砕し熱風乾燥を行い、モロヘイヤ乾燥葉を得た。このモロヘイヤ乾燥葉５０ｇに２０倍重量の６０℃前後の蒸留水熱水を加水し、９５℃以上に加熱して殺菌処理を施した後６０℃まで冷却し、ウォーターバス中で液温６０℃に保ち、原料のモロヘイヤ乾燥葉に対して０．７重量％のプロテアーゼＮアマノＧ（株式会社天野エンザイム社製）を少量の水に溶解して添加した。その後、液温６０℃に保ったまま１０分おきに撹拌を行った。酵素添加から１時間経過後、９６℃達温で５分間保持し、目開き８５０μｍのふるいでろ過後、次いでＮｏ．２のろ紙を使用し吸引ろ過を行い、モロヘイヤ酵素処理エキス溶液を得た。
得られたモロヘイヤ酵素処理エキス溶液３００ｍＬ（Ｂｒｉｘ１．２，ｐＨ６．０）を前記ガラスカラムへＳＶ＝４の速度で通液後、１０ｂｅｄ容量の純水にて十分にモロヘイヤエキスを洗い出した。モロヘイヤ酵素処理エキス溶液通液開始直後からカラム排出液を回収し、素通り画分とした。次いで、６０％濃度に調整したエタノールを５ｂｅｄ容量通液し、通液開始から１／２ｂｅｄ容量のカラム排出液を廃棄した後、カラム排出液の回収を開始しエタノール通液終了まで回収した。これを吸着画分とした。素通り画分、吸着画分をそれぞれ減圧濃縮した後、凍結乾燥して、粉末状の素通り画分エキス（Ｂｅ１）２．１ｇおよび吸着画分エキス（Ｂｅ２）０．８ｇを得た。なお、「ｂｅｄ」とは、吸着剤の充填容積（＝かさ）を示す。
【００４８】
以下のトレッドミルによる限界走行時間の測定には、マウス（ＣＤＦ１、雄、６週齢；日本エスエルシー株式会社）を１週間予備飼育した後に用いた。
実験期間中、マウスには、水及び飼料（ＣＥ−２；日本クレア株式会社）を自由に摂取させた。
【００４９】
［実施例１］
（トレッドミルによる限界走行時間の測定）
製造例２の方法により得られたＢｅ２を投与した群を、モロヘイヤエキスＭＰ群とし、蒸留水を投与した群を対照群として、以下の実験を行った。
下記表１に示す走行速度のタイムプログラムでマウスを１日３０分間、強制走行させて５日間トレーニングを行った。
トレッドミル（室町機械製ＭＫ−６８０）を用い、５日目のみ勾配を５度としたが、１〜４日目は、勾配を０度として強制走行させた。
【００５０】
【表１】
【００５１】
トレーニング後に、トレッドミル（室町機械製ＭＫ−６８０）を用い、勾配を５度、走行時間を３時間として、下記表２に記載の走行速度のタイムプログラムで限界走行時間を測定した。各群間の限界走行時間の平均値がほぼ同様になるように群分けした。１群のｎ数を６とした。
【００５２】
【表２】
【００５３】
試験開始後、７日目より、１日１回ゾンデによりＢｅ２を２５０ｍｇ／マウスの体重（ｋｇ）で経口投与した。Ｂｅ２は、５ｍＬ／マウスの体重（ｋｇ）の蒸留水に溶解したものを用いた。
投与期間中、トレーニングは１〜２日おきに、上記表１の２日目の走行速度のタイムプログラムに従って、３０分間行った。
【００５４】
３週目１６日後（１７日目）にゾンデによりＢｅ２の経口投与を行った後に、トレッドミル（室町機械製ＭＫ−６８０）を用い、勾配を５度、走行時間を３時間として、上記表２に記載の走行速度のタイムプログラムで限界走行時間（秒）を測定した。測定結果として、各群の平均値を表３および図１に示す。また、限界走行時間の延長時間（秒）を表４および図２に示す。
【００５５】
蒸留水のみを５ｍＬ／マウスの体重（ｋｇ）でゾンデにより経口投与したものを対照群として、限界走行時間（秒）及び限界走行時間の延長時間（秒）を測定した。
【００５６】
【表３】
【００５７】
【表４】
【００５８】
図１及び図２の結果から、製造例２のモロヘイヤ抽出物を投与した群では、限界走行時間の延長効果が観察された。
【００５９】
［実施例２］
（トレッドミルによる限界走行時間の測定）
製造例１の方法により得られたＡｅ２を投与した群を、モロヘイヤエキスＡＭＰ群とし、製造例２の方法により得られたＢｅ２を投与した群を、モロヘイヤエキスＭＰ群とし、蒸留水を投与した群を対照群として、以下の実験を行った。
実施例１と同様にして、トレーニング後に、限界走行時間を測定し、各群間の限界走行時間の平均値がほぼ同様になるように群分けした。対照群とＭＰ群については、１群のｎ数を７とし、ＡＭＰ群については、ｎ数を８とした。
【００６０】
試験開始後、７日目より、１日１回ゾンデによりＡｅ２及びＢｅ２を２５０ｍｇ／マウスの体重（ｋｇ）でそれぞれ経口投与した。
Ａｅ２及びＢｅ２は、５ｍＬ／マウスの体重（ｋｇ）の蒸留水に溶解したものを用いた。
投与期間中、トレーニングは１〜２日おきに、上記表１の２日目の走行速度のタイムプログラムに従って、３０分間行った。
【００６１】
３週目１６日後（１７日目）にゾンデにより、それぞれＡｅ２及びＢｅ２の経口投与を行った後に、上記表２に記載の走行速度のタイムプログラムで限界走行時間（秒）を測定した。測定結果として、各群の平均値を表５及び図３に示す。また、限界走行時間の延長時間(秒)を表６及び図４に示す。
【００６２】
蒸留水のみを５ｍＬ／マウスの体重（ｋｇ）でゾンデにより経口投与したものを対照群として、限界走行時間（秒）及び限界走行時間の延長時間（秒）を測定した。
【００６３】
【表５】
【００６４】
【表６】
【００６５】
図３及び図４の結果から、製造例２のモロヘイヤ抽出物を投与した群では、限界走行時間の延長効果が観察されたが、製造例１の酵素処理を行っていないモロヘイヤ抽出物においては、限界走行時間の延長効果は観察されなかった。
【産業上の利用可能性】
【００６６】
本発明のモロヘイヤ抽出物は、抗疲労作用および体力向上作用を有する。本発明のモロヘイヤ抽出物は、医薬品及び食品用の抗疲労剤及び体力向上剤として産業上の利用可能性を有する。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
酵素処理して得られるモロヘイヤ抽出物を含有する抗疲労剤又は体力向上剤。
【請求項２】
前記モロヘイヤ抽出物が、モロヘイヤ合成樹脂吸着画分を含む、請求項１に記載の抗疲労剤又は体力向上剤。
【請求項３】
前記酵素が、プロテアーゼである、請求項１又は２に記載の抗疲労剤又は体力向上剤。
【請求項４】
請求項１〜３のいずれか１項に記載の抗疲労剤又は体力向上剤を含有する、抗疲労用又は体力向上用組成物。
【請求項５】
請求項１〜３のいずれか１項に記載の抗疲労剤又は体力向上剤を含有する、抗疲労用又は体力向上用飲食品。
【請求項１】
酵素処理して得られるモロヘイヤ抽出物を含有する抗疲労剤又は体力向上剤。
【請求項２】
前記モロヘイヤ抽出物が、モロヘイヤ合成樹脂吸着画分を含む、請求項１に記載の抗疲労剤又は体力向上剤。
【請求項３】
前記酵素が、プロテアーゼである、請求項１又は２に記載の抗疲労剤又は体力向上剤。
【請求項４】
請求項１〜３のいずれか１項に記載の抗疲労剤又は体力向上剤を含有する、抗疲労用又は体力向上用組成物。
【請求項５】
請求項１〜３のいずれか１項に記載の抗疲労剤又は体力向上剤を含有する、抗疲労用又は体力向上用飲食品。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図２】
【図３】
【図４】
【公開番号】特開２０１０−２４８１４９（Ｐ２０１０−２４８１４９Ａ）
【公開日】平成２２年１１月４日（２０１０．１１．４）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００９−１０１０６６（Ｐ２００９−１０１０６６）
【出願日】平成２１年４月１７日（２００９．４．１７）
【出願人】（５９１０１４９７２）株式会社 伊藤園 (213)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２２年１１月４日（２０１０．１１．４）
【国際特許分類】
【出願日】平成２１年４月１７日（２００９．４．１７）
【出願人】（５９１０１４９７２）株式会社 伊藤園 (213)
【Ｆターム（参考）】
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