本出願は、低下した免疫原性及び血管内皮又は血管内皮細胞に対する低下した結合を示し、それによって血管漏出症候群の発病を抑制する修飾毒素の組成物に関する。また、修飾が少なくとも１個のＴ細胞エピトープの少なくとも１個のアミノ酸内にある修飾ジフテリア毒素由来のポリペプチド担毒体も提供される。別の態様は、修飾が少なくとも１個のＴ細胞エピトープの少なくとも１個のアミノ酸残基及び非修飾未変性ジフテリア毒素の少なくとも１個のＶＬＳモチーフの少なくとも１個のアミノ酸残基にある、修飾ジフテリア毒素由来のポリペプチド担毒体に関する。別の態様は、修飾ジフテリア毒素と、細胞結合部分である非ジフテリア毒素断片とからなる融合タンパク質に関する。別の態様は、悪性疾患又は非悪性疾患を治療するための修飾ジフテリア毒素の使用に関する。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
少なくとも１個のＴ細胞エピトープに少なくとも１個のアミノ酸残基修飾を有する毒素からなる修飾毒素であって、前記修飾毒素が未修飾毒素と比べて低下した免疫原性を示すことを特徴とする修飾毒素。
【請求項２】
前記毒素がジフテリア毒素又はその断片である、請求項１に記載の修飾毒素。
【請求項３】
ジフテリア毒素の少なくとも１個のＴ細胞エピトープに少なくとも１個のアミノ酸残基修飾を含有する修飾ジフテリア毒素であって、前記少なくとも１個のＴ細胞エピトープが配列番号：１８１、１８４、１８７、１９０、１９３、１９６及び１９９から選択され並びに前記修飾ジフテリア毒素が未修飾ジフテリア毒素と比べて低下した免疫原性を示すことを特徴とする修飾ジフテリア毒素。
【請求項４】
前記少なくとも１個のアミノ酸残基修飾が、前記少なくとも１個のＴ細胞エピトープのエピトープコア、Ｎ末端、Ｃ末端、Ｎ末端及びＣ末端、又はこれらの任意の組み合わせにおいて行われる、請求項３に記載の修飾ジフテリア毒素。
【請求項５】
前記毒素がジフテリア融合毒素である、請求項１〜４のいずれか１項に記載の修飾毒素。
【請求項６】
前記ジフテリア融合毒素が、ジフテリア毒素と、非ジフテリア毒素ポリペプチド由来の少なくとも１個の細胞結合ドメインとを含有してなる、請求項５に記載の修飾毒素。
【請求項７】
非ジフテリア毒素ポリペプチドが細胞結合リガンドである、請求項６に記載の修飾毒素。
【請求項８】
細胞結合リガンドが、抗体もしくはその抗原結合断片、サイトカイン、ポリペプチド、ホルモン、増殖因子又はインスリンである、請求項７に記載の修飾毒素。
【請求項９】
サイトカインがＩＬ−２又はＩＬ−３である、請求項８に記載の修飾毒素。
【請求項１０】
抗体が、モノクロナール抗体、ポリクロナール抗体、ヒト化抗体、遺伝子組換え抗体、又は移植抗体である、請求項８に記載の修飾毒素。
【請求項１１】
抗原結合断片が、Ｆａｂ、Ｆａｂ_２、Ｆ（ａｂ’）_２、ＳｃＦｖ、（ＳｃＦｖ）２、一本鎖結合ポリペプチド、Ｖ_Ｈ又はＶ_Ｌである、請求項８に記載の修飾毒素。
【請求項１２】
前記修飾ジフテリア毒素が、Ｖ７Ｓ、Ｖ７Ｔ、Ｖ７Ｎ、Ｖ７Ｄ、Ｄ８Ｅ、Ｓ９Ａ、Ｓ９Ｔ、Ｖ２９Ｓ、Ｖ２９Ｔ、Ｖ２９Ｎ、Ｖ２９Ｄ、Ｄ３０Ｅ、Ｓ３１Ｎ、Ｉ２９０Ｔ、Ｄ２９１Ｅ、Ｓ２９２Ａ、Ｓ２９２Ｔ、Ｖ９７Ａ、Ｖ９７Ｔ、Ｖ９７Ｄ、Ｌ１０７Ｎ、Ｍ１１６Ａ、Ｍ１１６Ｑ、Ｍ１１６Ｎ、Ｆ１２４Ｈ、Ｖ１４８Ａ、Ｖ１４８Ｔ、Ｌ２９８Ａ及びＬ２９８Ｎの中から選択される１個又はそれ以上の修飾を含有する、請求項２に記載の修飾ジフテリア毒素。
【請求項１３】
前記修飾ジフテリア毒素が、Ｖ７Ｎ、Ｖ７Ｔ、Ｖ２９Ｎ、Ｖ２９Ｔ及びＶ２９Ｄの中から選択される２個の修飾を含有する、請求項２に記載の修飾ジフテリア毒素。
【請求項１４】
前記修飾ジフテリア毒素が、Ｖ７Ｄ、Ｖ７Ｎ、Ｖ７Ｔ、Ｌ１０７Ａ、Ｌ１０７Ｎ及びＦ１２４Ｈの中から選択される３個の修飾を含有する、請求項２に記載の修飾ジフテリア毒素。
【請求項１５】
さらに（ｘ）Ｄ／Ｅ（ｙ）モチーフ中に１個又はそれ以上のアミノ酸修飾を含有する修飾毒素であって、前記修飾毒素が未修飾毒素に匹敵する細胞毒性を有し且つ未修飾毒素と比べて低下した免疫原性及び内皮細胞に対する結合の減少を示す、請求項１に記載の修飾毒素。
【請求項１６】
さらにその中に１個又はそれ以上のアミノ酸修飾を含有し、少なくとも１個のアミノ酸修飾が（ｘ）Ｄ／Ｅ（ｙ）モチーフ内部で行われ、前記修飾ジフテリア毒素が、未修飾ジフテリア毒素に匹敵する細胞毒性を有し且つ未修飾毒ジフテリア素と比べて低下した免疫原性及び内皮細胞に対する結合の減少を示す、請求項２〜７のいずれか１項に記載の修飾ジフテリア毒素。
【請求項１７】
少なくとも１個のアミノ酸修飾が（ｘ）Ｄ／Ｅ（ｙ）モチーフ内で行われ；及び位置（ｘ）での修飾が、Ａ、Ｓ、Ｅ、Ｆ、Ｃ、Ｍ、Ｔ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、Ｈ、Ｑ、Ｄ、Ｎ、Ｋ、Ｒ、Ｇ、Ｌ及び明細書の表１の修飾又は異常アミノ酸の中から選択されるアミノ酸残基によるＶ又はＩの置換であるか；位置Ｄ／Ｅでの修飾が、Ａ、Ｓ、Ｅ、Ｉ、Ｖ、Ｌ、Ｆ、Ｃ、Ｍ、Ｇ、Ｔ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、Ｈ、Ｑ、Ｎ、Ｋ、Ｒ及び明細書の表１の修飾又は異常アミノ酸の中から選択されるアミノ酸残基によるＤ又はＥの置換であるか；位置（ｙ）での修飾が、Ｉ、Ｆ、Ｃ、Ｍ、Ａ、Ｇ、Ｔ、Ｗ、Ｙ、Ｐ、Ｈ、Ｅ、Ｑ、Ｄ、Ｎ、Ｋ、Ｒ、Ｓ、Ｌ、Ｖ及び明細書の表１の修飾又は異常アミノ酸の中から選択されるアミノ酸残基による置換であるか；又はこれらの組み合わせである、請求項１５又は１６に記載の修飾毒素。
【請求項１８】
前記修飾ジフテリア毒素が、Ｖ７Ｔ、Ｖ７Ｎ、Ｖ７Ｄ、Ｄ８Ｎ、Ｓ９Ａ、Ｓ９Ｔ、Ｓ９Ｇ、Ｖ２９Ｎ、Ｖ２９Ｄ、Ｖ２９Ｔ、Ｄ３０Ｎ、Ｓ３１Ｇ、Ｓ３１Ｎ、Ｉ２９０Ｔ、Ｄ２９１Ｅ、Ｓ２９２Ａ、Ｓ２９２Ｇ及びＳ２９２Ｔから選択される１個又はそれ以上の修飾を含有する、請求項１６に記載の組成物。
【請求項１９】
前記修飾ジフテリア毒素が、Ｖ７Ｎ Ｖ２９Ｎ、Ｖ７Ｎ Ｖ２９Ｔ、Ｖ７Ｎ Ｖ２９Ｄ、Ｖ７Ｔ Ｖ２９Ｎ、Ｖ７Ｔ Ｖ２９Ｔ又はＶ７Ｔ Ｖ２９Ｄから選択される２個の修飾を含有する、請求項１６に記載の組成物。
【請求項２０】
前記修飾ジフテリア毒素が、Ｖ７Ｎ Ｖ２９Ｎ Ｉ２９０Ｎ、Ｖ７Ｎ Ｖ２９Ｎ Ｉ２９０Ｔ、Ｖ７Ｎ Ｖ２９Ｎ Ｓ２９２Ａ、Ｖ７Ｎ Ｖ２９Ｎ Ｓ２９２Ｔ、Ｖ７Ｎ Ｖ２９Ｔ Ｉ２９０Ｎ、Ｖ７Ｎ Ｖ２９Ｔ Ｉ２９０Ｔ、Ｖ７Ｎ Ｖ２９Ｔ Ｓ２９２Ａ、Ｖ７Ｎ Ｖ２９Ｔ Ｓ２９２Ｔ及びＶ７Ｔ Ｖ２９Ｔ Ｉ２９０Ｔの中から選択される３個の修飾を含有する、請求項１６に記載の組成物。
【請求項２１】
請求項１〜２０のいずれか１項に記載の前記修飾毒素と製薬学的に許容し得る担体とを含有してなる組成物。
【請求項２２】
被検体の悪性疾患を治療する方法であって、有効量の請求項２１に記載の医薬組成物を前記被検体に投与することからなり、前記悪性疾患が血液癌、固形腫瘍又は転移であることを特徴とする方法。
【請求項２３】
被検体の悪性疾患の治療薬を製剤するための請求項２１に記載の医薬組成物の使用であって、前記悪性疾患が血液癌、固形腫瘍又は転移であることを特徴とする使用。
【請求項２４】
被検体の非悪性疾患を治療する方法であって、治療有効量の請求項２１に記載の医薬組成物を前記被検体に投与することからなり、前記非悪性疾患が移植片対宿主病又は乾癬であることを特徴とする方法。
【請求項２５】
非悪性疾患の治療薬を製剤するための請求項２１に記載の医薬組成物の使用であって、前記非悪性疾患が移植片対宿主病又は乾癬であることを特徴とする使用。
【請求項２６】
抗癌剤と請求項１〜２１のいずれか１項に記載の組成物とを被検体に投与することからなる抗癌剤の活性を高める方法。
【請求項２７】
被検体の悪性疾患を治療する方法であって、有効量の請求項１〜２１のいずれか１項に記載の組成物と抗癌剤とを前記被検体に投与することからなり、前記悪性疾患が血液癌、固形腫瘍又は転移であることを特徴とする方法。
【請求項２８】
被検体の悪性疾患の治療薬を製剤するための請求項２１に記載の医薬組成物と抗癌剤の使用であって、前記悪性疾患が血液癌、固形腫瘍又は転移であることを特徴とする使用。

【図１】

【図２】

【図３】

【図４】

【図５】

【図６】

【図７】

【図８】

【図９】

【図１０−１】

【図１０−２】

【図１１】

【図１２−１】

【図１２−２】

【図１２−３】

【図１２−４】

【図１２−５】

【図１２−６】

【図１２−７】

【図１２−８】

【図１２−９】

【図１２−１０】

【図１２−１１】

【図１２−１２】

【図１２−１３】

【図１２−１４】

【図１２−１５】

【図１３−１】

【図１３−２】

【図１３−３】

【図１３−４】

【図１３−５】

【図１３−６】

【図１３−７】

【図１３−８】

【図１３−９】

【図１３−１０】

【図１３−１１】

【図１３−１２】

【図１３−１３】

【図１３−１４】

【図１３−１５】

【図１４】

【図１５】

【図１６】

【図１７】

【図１８】

【図１９】

【図２０】

【図２１】

【図２２】

【図２３】

【図２４】

【図２５】

【図２６】

【図２７】

【図２８】

【図２９】

【図３０】

【図３１−１】

【図３１−２】

【図３１−３】

【図３１−４】

【図３１−５】

【図３１−６】

【図３１−７】

【図３１−８】

【図３１−９】

【図３１−１０】

【図３１−１１】

【図３１−１２】

【図３１−１３】

【図３１−１４】

【図３１−１５】

【図３１−１６】

【図３１−１７】

【図３１−１８】

【図３１−１９】

【図３１−２０】

【図３１−２１】

【図３１−２２】

【公表番号】特表２０１０−５３０８９５（Ｐ２０１０−５３０８９５Ａ）
【公表日】平成２２年９月１６日（２０１０．９．１６）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１０−５１３４４９（Ｐ２０１０−５１３４４９）
【出願日】平成２０年６月２０日（２００８．６．２０）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００８／０６７６８２
【国際公開番号】ＷＯ２００９／０１４８３５
【国際公開日】平成２１年１月２９日（２００９．１．２９）
【出願人】（５０９３５０７２３）アンジェリカ　セラピューティックス，インク． (1)
【Ｆターム（参考）】