利尿ポリペプチドおよびナトリウム利尿ポリペプチド
本書は、利尿ポリペプチドおよびナトリウム利尿ポリペプチドを提供する。例えば、本書は、利尿作用および／またはナトリウム利尿作用を有するポリペプチドを提供する。いくつかの場合において、本明細書において提供されるポリペプチドは、血圧を低下させる能力を欠くが、利尿作用およびナトリウム利尿作用を有することができる。本書はまた、哺乳動物における利尿作用および／またはナトリウム利尿作用を誘起するための方法および材料をも提供する。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、２００７年６月１３日に出願された、米国特許仮出願第６０／９３４，５８４号および２００６年８月８日に出願された米国特許仮出願第６０／８３６，５８１号に対して優先権を主張する。
【０００２】
１．技術分野
本書は、利尿ポリペプチドおよびナトリウム利尿ポリペプチド等の方法ならびに材料に関する。例えば、本書は、血圧を低下させる能力を有さない一方で、利尿作用およびナトリウム利尿作用を有することができるポリペプチドに関する。
【背景技術】
【０００３】
２．背景情報
ナトリウム利尿ポリペプチド群のメンバーは、体液のホメオスタシスを制御するホルモンである。心房性ナトリウム利尿ペプチド（ＡＮＰ）は、増加する血管内容量に対応して、心房性細胞から分泌される。一旦ＡＮＰが循環血液中に入ると、主に腎臓、血管組織、および副腎に影響が及び、その作用は腎臓によるナトリウムおよび水の排出と、血管内容量および血圧の低下をもたらす。ＢＮＰもまた心筋細胞に由来し、ＡＮＰ同様、ヒト血漿内で循環する。ＢＮＰは、ナトリウム利尿性、レンニン阻害性、血管拡張性、および拡張機能性を有する。ＢＮＰの主な循環型および貯蔵型は、リング構造を有する３２アミノ酸ポリペプチドである。ＢＮＰの生理作用は、グアニル酸シクラーゼ結合の受容体である、ナトリウム利尿ペプチド受容体Ａ（ＮＰＲ−Ａ）によって媒介される。ＢＮＰのクリアランスは、ＢＰＮを循環から取り除くＮＰＲ−Ｃ受容体によって促進される。ＢＮＰはまた、中性エンドペプチダーゼによる酵素的切断によって分解される。Ｃ型ナトリウム利尿ペプチド（ＣＮＰ）は、内皮細胞由来であり、血管拡張および増殖阻害ポリペプチドとして機能する。Ｄｅｎｄｒｏａｓｐｉｓ ナトリウム利尿ペプチド（ＤＮＰ）は、ＡＮＰ、ＢＮＰ、およびＣＮＰと類似の構造であり、デンドアスピス・アンガスチセプ（Ｄｅｎｄｏａｓｐｉｓ ａｎｇｕｓｔｉｃｅｐ）、すなわちグリーンマンバ蛇の毒液から単離される。
【発明の概要】
【０００４】
概要
本書は、利尿ポリペプチドおよびナトリウム利尿ポリペプチドに関する。例えば、本書は、利尿作用およびナトリウム利尿作用を有するポリペプチドを提供する。利尿作用を有するポリペプチドは、高血圧、腎臓病、肝硬変、うっ血性心不全、またはあらゆる体液過剰状態の治療のため、医療的に使用することができる。ナトリウム利尿作用を有するポリペプチドは、体内からのナトリウムの除去を増加させることができ、高血圧、腎臓病、肝硬変、うっ血性心不全、またはあらゆるナトリウム過剰状態の治療のため、医療的に使用することができる。
【０００５】
いくつかの場合において、本願において提供されるポリペプチドは、血圧を低下させる能力を有さない一方で、利尿作用およびナトリウム利尿作用を有することができる。いくつかの場合において、本願において提供されるポリペプチドは、検出可能なナトリウム利尿効果を誘起することなく、検出可能な利尿効果を誘起するという条件の下で、また、糸球体ろ過量に影響を及ぼす一方で、うっ血性心不全を有する哺乳動物に投与することができる。
【０００６】
概して、本書の一側面は、実質的に純粋な、３７〜４７アミノ酸残基の長さであるポリペブチドを特徴とし、該ポリペプチドは、（ａ）配列番号：１に記載の、または（ｂ）５つ以下のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列する（ａｌｉｇｎ）アミノ酸配列を含むか、または本質的にこれから成る。ポリペプチドの長さは、３８〜４６アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、３９〜４５アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、４０〜４４アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、４１〜４３アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、４２アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、３７アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、４７アミノ酸残基であることができる。アミノ酸配列は、配列番号：１に記載のアミノ酸配列であることができる。アミノ酸配列は、４つ以下のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。アミノ酸配列は、３つ以下のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。アミノ酸配列は、２つ以下のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。アミノ酸配列は、１つ以下のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。アミノ酸配列は、５つ以下のアミノ酸の付加を伴って、配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。アミノ酸配列は、５つ以下のアミノ酸の欠失を伴って、配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。アミノ酸配列は、５つ以下のアミノ酸の置換を伴って、配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。ポリペプチドの長さは、４２アミノ酸残基であることができ、アミノ酸配列は、配列番号：１に記載のアミノ酸配列である。ポリペプチドは、利尿作用およびナトリウム利尿作用を有することができる。ポリペプチドは、哺乳動物において、血圧を下げる能力に欠け得る。哺乳動物とは、ヒトまたはイヌであることができる。
【０００７】
別の側面において、本書は、実質的に純粋な、４５〜６５アミノ酸残基の長さであるポリペプチドを特徴とし、該ポリペプチドは、（ａ）配列番号：１に記載の、または（ｂ）５つ以下のアミノ酸の欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列する第１アミノ酸配列を含むか、または本質的にこれから成り、該ポリペプチドは、（ａ）配列番号：２に記載の、または（ｂ）（ｉ）５つ以下のアミノ酸の付加、置換、またはそれらの組み合わせであって、ただし付加または置換は、システイン残基の存在という結果を生じないもの、または（ｉｉ）１５以下のアミノ酸の欠失を伴って配列番号：２に記載の配列に整列する第２アミノ酸配列を含む。ポリペプチドの長さは、５８〜６３アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、６０アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、４５アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドは、６５アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの配列は、配列番号：３に記載の配列であることができる。ポリペプチドは、利尿作用およびナトリウム利尿作用を有することができる。
【０００８】
別の側面において、本書は、３７〜４７アミノ酸残基の長さであるポリペブチドをコードする単離核酸を特徴とし、該ポリペプチドは、（ａ）配列番号：１に記載の、または（ｂ）５つ以下のアミノ酸の欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列するアミノ酸配列を含むか、または本質的にこれから成る。ポリペプチドの長さは、３８〜４６アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、３９〜４５アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、４０〜４４アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、４１〜４３アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、４２アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、３７アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、４７アミノ酸残基であることができる。アミノ酸配列は、配列番号：１に記載のアミノ酸配列であることができる。アミノ酸配列は、４つ以下のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。アミノ酸配列は、３つ以下のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。アミノ酸配列は、２つ以下のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。アミノ酸配列は、１つ以下のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。アミノ酸配列は、５つ以下のアミノ酸の付加を伴って、配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。アミノ酸配列は、５つ以下のアミノ酸の欠失を伴って、配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。アミノ酸配列は、５つ以下のアミノ酸の置換を伴って、配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。ポリペプチドの長さは、４２アミノ酸残基であることができ、アミノ酸配列は、配列番号：１に記載のアミノ酸配列である。ポリペプチドは、利尿作用およびナトリウム利尿作用を有することができる。ポリペプチドは、哺乳動物において、血圧を下げる能力に欠け得る。哺乳動物とは、ヒトまたはイヌであることができる。
【０００９】
別の側面において、本書は、４５〜６５アミノ酸残基の長さであるポリペプチドをコードする単離核酸を特徴とし、該ポリペプチドは、（ａ）配列番号：１に記載の、または（ｂ）５つ以下のアミノ酸の欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列する第１アミノ酸配列を含むか、または本質的にこれから成り、該ポリペプチドは、（ａ）配列番号：２に記載の、または（ｂ）（ｉ）５つ以下のアミノ酸の付加、置換、またはそれらの組み合わせであって、ただし、付加または置換は、システイン残基の存在という結果を生じないもの、または（ｉｉ）１５以下のアミノ酸の欠失を伴って配列番号：２に記載の配列に整列する第２アミノ酸配列を含む。ポリペプチドの長さは、５８〜６３アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、６０アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、４５アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドは、６５アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの配列は、配列番号：３に記載の配列であることができる。ポリペプチドは、利尿作用およびナトリウム利尿作用を有することができる。
【００１０】
別の側面において、本書は、３７〜４７アミノ酸残基の長さであるポリペブチドをコードする核酸を含むベクターを特徴とし、該ポリペプチドは、（ａ）配列番号：１に記載の、または（ｂ）５つ以下のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列するアミノ酸配列を含むか、または本質的にこれから成る。ポリペプチドの長さは、３８〜４６アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、３９〜４５アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、４０〜４４アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、４１〜４３アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、４２アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、３７アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、４７アミノ酸残基であることができる。アミノ酸配列は、配列番号：１に記載のアミノ酸配列であることができる。アミノ酸配列は、４つ以下のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。アミノ酸配列は、３つ以下のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。アミノ酸配列は、２つ以下のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。アミノ酸配列は、１つ以下のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。アミノ酸配列は、５つ以下のアミノ酸の付加を伴って、配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。アミノ酸配列は、５つ以下のアミノ酸の欠失を伴って、配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。アミノ酸配列は、５つ以下のアミノ酸の置換を伴って、配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。ポリペプチドの長さは、４２アミノ酸残基であることができ、アミノ酸配列は、配列番号：１に記載のアミノ酸配列である。ポリペプチドは、利尿作用およびナトリウム利尿作用を有することができる。ポリペプチドは、哺乳動物において、血圧を下げる能力に欠け得る。哺乳動物とは、ヒトまたはイヌであることができる。
【００１１】
別の側面において、本書は、４５〜６５アミノ酸残基の長さであるポリペプチドをコードする核酸を含むベクターを特徴とし、該ポリペプチドは、（ａ）配列番号：１に記載の、または（ｂ）５つ以下のアミノ酸の欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列する第１アミノ酸配列を含むか、または本質的にこれから成り、該ポリペプチドは、（ａ）配列番号：２に記載の、または（ｂ）（ｉ）５つ以下のアミノ酸の付加、置換、またはそれらの組み合わせであって、ただし、付加または置換は、システイン残基の存在という結果を生じないもの、または（ｉｉ）１５以下のアミノ酸の欠失を伴って配列番号：２に記載の配列に整列する第２アミノ酸配列を含む。ポリペプチドの長さは、５８〜６３アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、６０アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、４５アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドは、６５アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの配列は、配列番号：３に記載の配列であることができる。ポリペプチドは、利尿作用およびナトリウム利尿作用を有することができる。
【００１２】
別の側面において、本書は、３７〜４７アミノ酸残基の長さであるポリペブチドをコードする核酸を含む宿主細胞を特徴とし、該ポリペプチドは、（ａ）配列番号：１に記載の、または（ｂ）５つ以下のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列するアミノ酸配列を含むか、または本質的にこれから成る。ポリペプチドの長さは、３８〜４６アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、３９〜４５アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、４０〜４４アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、４１〜４３アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、４２アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、３７アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、４７アミノ酸残基であることができる。アミノ酸配列は、配列番号：１に記載のアミノ酸配列であることができる。アミノ酸配列は、４つ以下のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。アミノ酸配列は、３つ以下のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。アミノ酸配列は、２つ以下のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。アミノ酸配列は、１つ以下のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。アミノ酸配列は、５つ以下のアミノ酸の付加を伴って、配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。アミノ酸配列は、５つ以下のアミノ酸の欠失を伴って、配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。アミノ酸配列は、５つ以下のアミノ酸の置換を伴って、配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。ポリペプチドの長さは、４２アミノ酸残基であることができ、アミノ酸配列は、配列番号：１に記載のアミノ酸配列である。ポリペプチドは、利尿作用およびナトリウム利尿作用を有することができる。ポリペプチドは、哺乳動物において、血圧を下げる能力を欠き得る。哺乳動物とは、ヒトまたはイヌであることができる。宿主細胞は、真核生物宿主細胞であることができる。
【００１３】
別の側面において、本書は、４５〜６５アミノ酸残基の長さであるポリペプチドをコードする核酸を含む宿主細胞を特徴とし、該ポリペプチドは、（ａ）配列番号：１に記載の、または（ｂ）５つ以下のアミノ酸の欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列する第１アミノ酸配列を含むか、または本質的にこれから成り、該ポリペプチドは、配列番号：２に記載の、または（ｂ）（ｉ）５つ以下のアミノ酸の付加、置換、またはそれらの組み合わせであって、ただし、付加または置換は、システイン残基の存在という結果を生じないもの、または（ｉｉ）１５以下のアミノ酸の欠失を伴って配列番号：２に記載の配列に整列する第２アミノ酸配列を含む。ポリペプチドの長さは、５８〜６３アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、６０アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、４５アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドは、６５アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの配列は、配列番号：３に記載の配列であることができる。ポリペプチドは、利尿作用およびナトリウム利尿作用を有することができる。宿主細胞は、真核生物宿主細胞であることができる。
【００１４】
別の側面において、本書は、薬学的に許容される担体および３７〜４７アミノ酸残基の長さであるポリペブチドを含む薬学的組成を特徴とし、該ポリペプチドは、（ａ）配列番号：１に記載の、または（ｂ）５つ以下のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列するアミノ酸配列を含むか、または本質的にこれから成る。ポリペプチドの長さは、３８〜４６アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、３９〜４５アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、４０〜４４アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、４１〜４３アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、４２アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、３７アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、４７アミノ酸残基であることができる。アミノ酸配列は、配列番号：１に記載のアミノ酸配列であることができる。アミノ酸配列は、４つ以下のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。アミノ酸配列は、３つ以下のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。アミノ酸配列は、２つ以下のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。アミノ酸配列は、１つ以下のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。アミノ酸配列は、５つ以下のアミノ酸の付加を伴って、配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。アミノ酸配列は、５つ以下のアミノ酸の欠失を伴って、配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。アミノ酸配列は、５つ以下のアミノ酸の置換を伴って、配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。ポリペプチドの長さは、４２アミノ酸残基であることができ、アミノ酸配列は、配列番号：１に記載のアミノ酸配列である。ポリペプチドは、利尿作用およびナトリウム利尿作用を有することができる。ポリペプチドは、哺乳動物において、血圧を下げる能力を欠き得る。哺乳動物とは、ヒトまたはイヌであることができる。
【００１５】
別の側面において、本書は、薬学的に許容される担体および４５〜６５アミノ酸残基の長さであるポリペプチドを含む薬学的組成を特徴とし、該ポリペプチドは、（ａ）配列番号：１に記載の、または（ｂ）５つ以下のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列する第１アミノ酸配列を含むか、または本質的にこれから成り、該ポリペプチドは、（ａ）配列番号：２に記載の、または（ｂ）（ｉ）５つ以下のアミノ酸の付加、置換、またはそれらの組み合わせであって、ただし、付加または置換は、システイン残基の存在という結果を生じないもの、または（ｉｉ）１５以下のアミノ酸の欠失を伴って配列番号：２に記載の配列に整列する第２アミノ酸配列を含む。ポリペプチドの長さは、５８〜６３アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、６０アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、４５アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドは、６５アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの配列は、配列番号：３に記載の配列であることができる。ポリペプチドは、利尿作用およびナトリウム利尿作用を有することができる。
【００１６】
別の側面において、本書は、哺乳動物において、血圧を低下させることなく利尿作用およびナトリウム利尿作用を増大させるための方法を特徴する。該方法は、哺乳動物にポリペプチドを投与するステップを含むか、または本質的にこれから成り、該ポリペプチドは、３７〜４７アミノ酸残基の長さであり、該ポリペプチドは、（ａ）配列番号：１に記載の、または（ｂ）５つ以下のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列するアミノ酸配列を含むか、または本質的にこれから成る。ポリペプチドの長さは、３８〜４６アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、３９〜４５アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、４０〜４４アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、４１〜４３アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、４２アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、３７アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、４７アミノ酸残基であることができる。アミノ酸配列は、配列番号：１に記載のアミノ酸配列であることができる。アミノ酸配列は、４つ以下のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。アミノ酸配列は、３つ以下のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。アミノ酸配列は、２つ以下のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。アミノ酸配列は、１つ以下のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。アミノ酸配列は、５つ以下のアミノ酸の付加を伴って、配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。アミノ酸配列は、５つ以下のアミノ酸の欠失を伴って、配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。アミノ酸配列は、５つ以下のアミノ酸の置換を伴って、配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。ポリペプチドの長さは、４２アミノ酸残基であることができ、アミノ酸配列は、配列番号：１に記載のアミノ酸配列である。ポリペプチドは、利尿作用およびナトリウム利尿作用を有することができる。ポリペプチドは、哺乳動物において、血圧を下げる能力を欠き得る。哺乳動物とは、ヒトまたはイヌであることができる。
【００１７】
別の側面において、本書は、哺乳動物において、血圧を低下させることなく利尿作用およびナトリウム利尿作用を増大させるための方法を特徴とする。該方法は、哺乳動物にポリペプチドを投与するステップを含むか、または本質的にこれから成り、該ポリペプチドは、４５〜６５アミノ酸残基の長さであり、該ポリペプチドは、（ａ）配列番号：１に記載の、または（ｂ）５つ以下のアミノ酸の欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列する第１アミノ酸配列を含むか、または本質的にこれから成り、該ポリペプチドは、（ａ）配列番号：２に記載の、または（ｂ）（ｉ）５つ以下のアミノ酸の付加、置換、またはそれらの組み合わせであって、ただし、付加または置換は、システイン残基の存在という結果を生じないもの、または（ｉｉ）１５以下のアミノ酸の欠失を伴って配列番号：２に記載の配列に整列する第２アミノ酸配列を含む。ポリペプチドの長さは、５８〜６３アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、６０アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、４５アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドは、６５アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの配列は、配列番号：３に記載の配列であることができる。ポリペプチドは、利尿作用およびナトリウム利尿作用を有することができる。
【００１８】
別の側面において、本書は、腎機能障害を有する哺乳動物を治療するための方法を特徴とする。該方法は、腎機能障害の症状の重症度の軽減を条件として、哺乳動物にポリペプチドを投与するステップを含むか、または本質的にこれから成る。哺乳動物とは、ヒトであることができる。腎機能障害は、腎不全を含むことができる。腎機能障害は、うっ血性心不全を伴う腎不全を含むことができる。ポリペプチドは、静脈内、経口的、または鼻腔内に投与されることができる。ポリペプチドは、徐放製剤として投与されることができる。ポリペプチドは、３７〜４７アミノ酸残基の長さであることができ、配列番号：１に記載のアミノ酸配列を含むことができる。ポリペプチドは、３７〜４７アミノ酸残基の長さであることができ、５つ以下のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列するアミノ酸配列を含むことができる。ポリペプチドは、４５〜６５アミノ酸残基の長さであることができ、（ｉ）配列番号：１に記載の第１アミノ酸配列と、（ｉｉ）配列番号：２に記載の第２アミノ酸配列を含むことができる。ポリペプチドは、４５〜６５アミノ酸残基の長さであることができ、５つ以下のアミノ酸の欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列する、第１アミノ酸配列と、配列番号：２に記載の第２アミノ酸配列を含むことができる。ポリペプチドは、４５〜６５アミノ酸残基の長さであって、ポリペプチドの配列は、配列番号：１に記載の第１アミノ酸配列を含むことができ、（ｉ）５つ以下のアミノ酸の付加、置換、またはそれらの組み合わせであって、ただし、付加または置換は、システイン残基の存在という結果を生じないもの、または（ｉｉ）１５以下のアミノ酸の欠失を伴って配列番号：２に記載の配列に整列する第２アミノ酸配列を含むことができる。ポリペプチドは、４５〜６５アミノ酸残基の長さであって、５つ以下のアミノ酸の欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列する、第１アミノ酸配列を含み、（ｉ）５つ以下のアミノ酸の付加、置換、またはそれらの組み合わせであって、ただし、付加または置換は、システイン残基の存在という結果を生じないもの、または（ｉｉ）１５以下のアミノ酸の欠失を伴って配列番号：２に記載の配列に整列する第２アミノ酸配列を含む。症状とは、血清クレアチニン値異常、尿流量異常、レニン値異常、糸球体ろ過量異常、尿ｃＧＭＰ排泄率異常、尿ＡＮＰ排泄率異常、尿ＢＮＰ排泄率異常、心拍出量異常、体血管抵抗異常、またはアルドステロン値異常を含むことができる。症状は、尿流量の減少を含むことができ、哺乳動物の尿流量は、投与ステップ後、少なくとも５０％増加する。症状は、レニン値の低下を含むことができ、哺乳動物のレニン値は、投与ステップ後、少なくとも５０％増加する。症状は、糸球体ろ過量の減少を含むことができ、哺乳動物の糸球体ろ過量は、投与ステップ後、少なくとも５０％増加する。症状は、尿ｃＧＭＰ排泄率の低下を含むことができ、哺乳動物の尿ｃＧＭＰ排泄率は、投与ステップ後、少なくとも２５％増加する。症状は、尿ＡＮＰ排泄率の低下を含むことができ、哺乳動物の尿ＡＮＰ排泄率は、投与ステップ後、少なくとも２５％増加する。症状は、尿ＢＮＰ排泄率の低下を含むことができ、哺乳動物の尿ＢＮＰ排泄率は、投与ステップ後、少なくとも２５％増加する。症状は、心拍出量の増加を含むことができ、哺乳動物の心拍出量は、投与ステップ後、少なくとも２％減少する。症状は、体血管抵抗の低下を含むことができ、哺乳動物の体血管抵抗は、投与ステップ後、少なくとも１０％増加する。症状は、アルドステロン値の低下を含むことができ、哺乳動物のアルドステロン値は、投与ステップ後、少なくとも１０％増加する。
【００１９】
別の側面において、本書は、炎症状態を有する哺乳動物を治療するための方法を特徴とする。該方法は、炎症状態の症状の重症度の軽減を条件として、哺乳動物にポリペプチドを投与するステップを含むか、または本質的にこれから成る。哺乳動物とは、ヒトであることができる。ポリペプチドは、静脈内、経口的、または鼻腔内に投与されることができる。ポリペプチドは、徐放製剤として投与されることができる。ポリペプチドは、３７〜４７アミノ酸残基の長さであることができ、配列番号：１に記載のアミノ酸配列を含むことができる。ポリペプチドは、３７〜４７アミノ酸残基の長さであることができ、５つ以下のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列するアミノ酸配列を含む。ポリペプチドは、４５〜６５アミノ酸残基の長さであることができ、（ｉ）配列番号：１に記載の第１アミノ酸配列と、（ｉｉ）配列番号：２に記載の第２アミノ酸配列を含むことができる。ポリペプチドは、４５〜６５アミノ酸残基の長さであることができ、５つ以下のアミノ酸欠損、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列する第１アミノ酸配列と、配列番号：２に記載の第２アミノ酸配列を含む。ポリペプチドは、４５〜６５アミノ酸残基の長さであることができ、配列番号：１に記載の第１アミノ酸配列と、（ｉ）５つ以下のアミノ酸の付加、置換、またはそれらの組み合わせであって、ただし、付加または置換は、システイン残基の存在という結果を生じないもの、または（ｉｉ）１５以下のアミノ酸の欠失を伴って配列番号：２に記載の配列に整列する第２アミノ酸配列とを含むことができる。ポリペプチドは、４５〜６５アミノ酸残基の長さであって、５つ以下のアミノ酸の欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列する第１アミノ酸配列を含み、（ｉ）５つ以下のアミノ酸の付加、置換、またはそれらの組み合わせであって、ただし、付加または置換は、システイン残基の存在という結果を生じないもの、または（ｉｉ）１５以下のアミノ酸の欠失を伴って配列番号：２に記載の配列に整列する第２アミノ酸配列とを含む。
【００２０】
別の側面において、本書は、心機能障害を有する哺乳動物を治療するための方法を特徴とし、該方法は、心機能障害の重症度の軽減を条件として、哺乳動物にポリペプチドを投与するステップを含むか、または本質的にこれから成る。哺乳動物とは、ヒトであることができる。心機能障害は、心不全を含むことができる。心機能障害は、腎不全を伴う、うっ血性心不全を含むことができる。ポリペプチドは、静脈内、経口的、または鼻腔内に投与されることができる。ポリペプチドは、徐放製剤として投与されることができる。ポリペプチドは、３７〜４７アミノ酸残基の長さであることができ、配列番号：１に記載のアミノ酸配列を含むことができる。ポリペプチドは、３７〜４７アミノ酸残基の長さであることができ、５つ以下のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列するアミノ酸配列を含むことができる。ポリペプチドは、４５〜６５アミノ酸残基の長さであることができ、（ｉ）配列番号：１に記載の第１アミノ酸配列と、（ｉｉ）配列番号：２に記載の第２アミノ酸配列を含むことができる。ポリペプチドは、４５〜６５アミノ酸残基の長さであって、５つ以下のアミノ酸の欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列する第１アミノ酸配列と、配列番号：２に記載の第２アミノ酸配列を含むことができる。ポリペプチドは、４５〜６５アミノ酸残基の長さであって、配列番号：１に記載の第１アミノ酸配列と、（ｉ）５つ以下のアミノ酸の付加、置換、またはそれらの組み合わせであって、ただし、付加または置換は、システイン残基の存在という結果を生じないもの、または（ｉｉ）１５以下のアミノ酸の欠失を伴って配列番号：２に記載の配列に整列する第２アミノ酸配列とを含む。ポリペプチドは、４５〜６５アミノ酸残基の長さであって、５以下のアミノ酸の欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列する第１アミノ酸配列を含み、（ｉ）５つ以下のアミノ酸の付加、置換、またはそれらの組み合わせであって、ただし、付加または置換は、システイン残基の存在という結果を生じないもの、または（ｉｉ）１５以下のアミノ酸の欠失を伴って配列番号：２に記載の配列に整列する第２アミノ酸配列を含む。
【００２１】
別様に定義されない限り、本願において使用される全ての技術用語および科学用語は、本発明が関係する当業者によって広く理解されているものと同一の意味を有する。本発明の実施において、本願に記載の方法および材料に類似のまたは同等のものが使用されることができるが、適切な方法および材料が下記に記載される。本願において言及される、全ての、出版物、特許出願、特許、および他の参考文献は、参照によって全体として本願に組み込まれる。不一致が生じた場合、定義を含む本願明細書が優先する。また、材料、方法、および実施例は説明のみを目的とし、制限を意図するものではない。
【００２２】
本発明の一以上の実施形態の詳細は、添付の図面および下記の説明に記載される。本発明の他の特徴、目的、および長所は、該説明および図面、ならびに請求項により明白である。
【図面の簡単な説明】
【００２３】
【図１】６０アミノ酸残基の長さであるＡＳＢＮＰポリペプチド（配列番号：４）、４２アミノ酸残基の長さであるＡＳＢＮＰ．１ポリペプチド（配列番号：１）、６０アミノ酸残基の長さである、アラニンが４３の位置にあるＡＳＢＮＰ．２ポリペプチド（配列番号：３）の概略図である。４３の位置にあるアラニンから６０の位置にあるロイシンまでのＡＳＢＮＰ．２の配列は、１８アミノ酸残基の長さ（配列番号：２）である。ＡＳＢＮＰ（ＢＮＰ２ともいう）は、選択的スプライシングによって発生したＢＮＰの異型である。
【図２】図に示すようにＡＳＢＮＰ．１で治療されたイヌの尿流量を示す棒グラフである。ベースラインは投与前、低は２ｐｍｏｌ、高は１０ｐｍｏｌ、超高は１００ｐｍｏｌ、回復１は第１の回復期、回復２は第２の回復期である。
【図３】図に示すようにＡＳＢＮＰ．１で治療されたイヌの尿ナトリウム排出量を示す棒グラフである。ベースラインは投与前、低は２ｐｍｏｌ、高は１０ｐｍｏｌ、超高は１００ｐｍｏｌ、回復１は第１の回復期、回復２は第２の回復期である。
【図４】図に示すようにＡＳＢＮＰ．１で治療されたイヌの遠位分別管ナトリウム再吸収率を示す棒グラフである。ベースラインは投与前、低は２ｐｍｏｌ、高は１０ｐｍｏｌ、超高は１００ｐｍｏｌ、回復１は第１の回復期、回復２は第２の回復期である。
【図５】図に示すようにＡＳＢＮＰ．１で治療されたイヌの近位分別管ナトリウム再吸収率を示す棒グラフである。ベースラインは投与前、低は２ｐｍｏｌ、高は１０ｐｍｏｌ、超高は１００ｐｍｏｌ、回復１は第１の回復期である。
【図６】図に示すようにＡＳＢＮＰ．１で治療されたイヌの血漿ｃＧＭＰ値を示す棒グラフである。ベースラインは投与前、低は２ｐｍｏｌ、高は１０ｐｍｏｌ、超高は１００ｐｍｏｌ、回復１は第１の回復期、回復２は第２の回復期である。
【図７】図に示すようにＡＳＢＮＰ．１で治療されたイヌの血漿レニン活性を示す棒グラフである。ベースラインは投与前、低は２ｐｍｏｌ、高は１０ｐｍｏｌ、超高は１００ｐｍｏｌ、回復１は第１の回復期、回復２は第２の回復期である。
【図８】図に示すようにＡＳＢＮＰ．１で治療されたイヌの糸球体ろ過量を示す棒グラフである。ベースラインは投与前、低は２ｐｍｏｌ、高は１０ｐｍｏｌ、超高は１００ｐｍｏｌ、回復１は第１の回復期、回復２は第２の回復期である。
【図９】図に示すようにＡＳＢＮＰ．１で治療されたイヌの腎血流量を示す棒グラフである。ベースラインは投与前、低は２ｐｍｏｌ、高は１０ｐｍｏｌ、超高は１００ｐｍｏｌ、回復１は第１の回復期、回復２は第２の回復期である。
【図１０】図に示すようにＡＳＢＮＰ．１で治療されたイヌの平均動脈圧値を示す棒グラフである。ベースラインは投与前、低は２ｐｍｏｌ、高は１０ｐｍｏｌ、超高は１００ｐｍｏｌ、回復１は第１の回復期、回復２は第２の回復期である。
【図１１】図に示す濃度のＢＮＰ、ＡＳＢＮＰ、またはＡＳＢＮＰ．１で治療したＨＵＶＥＣＳにおける、ｃＧＭＰ値を示す棒グラフである。ＯＸは酸化、非ＯＸは非酸化を示す。
【図１２】図に示す濃度のＢＮＰ、ＡＳＢＮＰ、またはＡＳＢＮＰ．１で治療したＨＡＳＭＣＳにおける、ｃＧＭＰ値を示す棒グラフである。ＯＸは酸化、非ＯＸは非酸化を示す。
【図１３】図に示す濃度のＢＮＰ、ＡＳＢＮＰ、またはＡＳＢＮＰ．１で治療されたウサギの血管輪から取得された、血管活性測定値を示す線グラフである。
【図１４】ＡＳＢＮＰ．１ポリペプチドをコードすることができる核酸配列（配列番号：５）と、ＡＳＢＮＰ．２ポリペプチドをコードすることができる核酸配列（配列番号：６）を含む。
【図１５】図に示すようにＡＳＢＮＰ．１で治療された、心臓ペース制御されたイヌの尿流量を示す棒グラフである。ベースラインは投与前、低は２ｐｍｏｌ、高は１０ｐｍｏｌ、超高は１００ｐｍｏｌ、回復１は第１の回復期、回復２は第２の回復期である。
【図１６】図に示すようにＡＳＢＮＰ．１で治療された、心臓ペース制御されたイヌの尿ナトリウム排出量を示す棒グラフである。ベースラインは投与前、低は２ｐｍｏｌ、高は１０ｐｍｏｌ、超高は１００ｐｍｏｌ、回復１は第１の回復期、回復２は第２の回復期である。
【図１７】図に示すようにＡＳＢＮＰ．１で治療された、心臓ペース制御されたイヌの遠位分別管ナトリウム再吸収率を示す棒グラフである。ベースラインは投与前、低は２ｐｍｏｌ、高は１０ｐｍｏｌ、超高は１００ｐｍｏｌ、回復１は第１の回復期、回復２は第２の回復期である。
【図１８】図に示すようにＡＳＢＮＰ．１で治療された、心臓ペース制御されたイヌの近位分別管ナトリウム再吸収率を示す棒グラフである。ベースラインは投与前、低は２ｐｍｏｌ、高は１０ｐｍｏｌ、超高は１００ｐｍｏｌ、回復１は第１の回復期、回復２は第２の回復期である。
【図１９】図に示すようにＡＳＢＮＰ．１で治療された、心臓ペース制御されたイヌの血漿ｃＧＭＰ値を示す棒グラフである。ベースラインは投与前、低は２ｐｍｏｌ、高は１０ｐｍｏｌ、超高は１００ｐｍｏｌ、回復１は第１の回復期、回復２は第２の回復期である。
【図２０】図に示すようにＡＳＢＮＰ．１で治療された、心臓ペース制御されたイヌの血漿レニン活性（ｎｇ／ｍＬ／時間）を示す棒グラフである。ベースラインは投与前、低は２ｐｍｏｌ、高は１０ｐｍｏｌ、超高は１００ｐｍｏｌ、回復１は第１の回復期、回復２は第２の回復期である。
【図２１】図に示すようにＡＳＢＮＰ．１で治療された、心臓ペース制御されたイヌの糸球体ろ過量を示す棒グラフである。ベースラインは投与前、低は２ｐｍｏｌ、高は１０ｐｍｏｌ、超高は１００ｐｍｏｌ、回復１は第１の回復期、回復２は第２の回復期である。
【図２２】図に示すようにＡＳＢＮＰ．１で治療された、心臓ペース制御されたイヌの腎血流量を示す棒グラフである。ベースラインは投与前、低は２ｐｍｏｌ、高は１０ｐｍｏｌ、超高は１００ｐｍｏｌ、回復１は第１の回復期、回復２は第２の回復期である。
【図２３】図に示すようにＡＳＢＮＰ．１で治療された、心臓ペース制御されたイヌの平均動脈圧値を示す棒グラフである。ベースラインは投与前、低は２ｐｍｏｌ、高は１０ｐｍｏｌ、超高は１００ｐｍｏｌ、回復１は第１の回復期、回復２は第２の回復期である。
【図２４】図に示すようにＡＳＢＮＰ．１で治療された、心臓ペース制御されたイヌの尿ｃＧＭＰ排泄量を示す棒グラフである。ベースラインは投与前、低は２ｐｍｏｌ、高は１０ｐｍｏｌ、超高は１００ｐｍｏｌ、回復１は第１の回復期、回復２は第２の回復期である。
【図２５】図に示すようにＡＳＢＮＰ．１で治療された、心臓ペース制御されたイヌの尿ＡＮＰ排泄量を示す棒グラフである。ベースラインは投与前、低は２ｐｍｏｌ、高は１０ｐｍｏｌ、超高は１００ｐｍｏｌ、回復１は第１の回復期、回復２は第２の回復期である。
【図２６】図に示すようにＡＳＢＮＰ．１で治療された、心臓ペース制御されたイヌの尿ＢＮＰ排泄量を示す棒グラフである。ベースラインは投与前、低は２ｐｍｏｌ、高は１０ｐｍｏｌ、超高は１００ｐｍｏｌ、回復１は第１の回復期、回復２は第２の回復期である。
【図２７】図に示すようにＡＳＢＮＰ．１で治療された、心臓ペース制御されたイヌの血漿ＢＮＰ値を示す棒グラフである。ベースラインは投与前、低は２ｐｍｏｌ、高は１０ｐｍｏｌ、超高は１００ｐｍｏｌ、回復１は第１の回復期、回復２は第２の回復期である。
【図２８】図に示すようにＡＳＢＮＰ．１で治療された、心臓ペース制御されたイヌの血漿ＡＮＰ値を示す棒グラフである。ベースラインは投与前、低は２ｐｍｏｌ、高は１０ｐｍｏｌ、超高は１００ｐｍｏｌ、回復１は第１の回復期、回復２は第２の回復期である。
【図２９】図に示すようにＡＳＢＮＰ．１で治療された、心臓ペース制御されたイヌの肺毛細血管楔入圧を示す棒グラフである。ベースラインは投与前、低は２ｐｍｏｌ、高は１０ｐｍｏｌ、超高は１００ｐｍｏｌ、回復１は第１の回復期、回復２は第２の回復期である。
【図３０】図に示すようにＡＳＢＮＰ．１で治療された、心臓ペース制御されたイヌの心拍出量を示す棒グラフである。ベースラインは投与前、低は２ｐｍｏｌ、高は１０ｐｍｏｌ、超高は１００ｐｍｏｌ、回復１は第１の回復期、回復２は第２の回復期である。
【図３１】図に示すようにＡＳＢＮＰ．１で治療された、心臓ペース制御されたイヌの体血管抵抗を示す棒グラフである。ベースラインは投与前、低は２ｐｍｏｌ、高は１０ｐｍｏｌ、超高は１００ｐｍｏｌ、回復１は第１の回復期、回復２は第２の回復期である。
【図３２】図に示すようにＡＳＢＮＰ．１で治療された、心臓ペース制御されたイヌのアンジオテンシンＩＩ濃度を示す棒グラフである。ベースラインは投与前、低は２ｐｍｏｌ、高は１０ｐｍｏｌ、超高は１００ｐｍｏｌ、回復１は第１の回復期、回復２は第２の回復期である。
【図３３】図に示すようにＡＳＢＮＰ．１で治療された、心臓ペース制御されたイヌのアルドステロン濃度を示す棒グラフである。ベースラインは投与前、低は２ｐｍｏｌ、高は１０ｐｍｏｌ、超高は１００ｐｍｏｌ、回復１は第１の回復期、回復２は第２の回復期である。
【図３４】９０分間のＡＳＢＮＰ．１ポリペプチド（１００ｐｍｏｌ／ｋｇ／分）の投与開始後、図に示す時間における、心臓ペース制御されたイヌの尿ナトリウム排出（μＥｑ／分）を示すグラフである。ＢＬ＝ベースライン、３０分＝３０分間のＡＳＢＮＰ．１ポリペプチド投与、６０分＝６０分間のＡＳＢＮＰ．１ポリペプチド投与、９０分＝９０分間のＡＳＢＮＰ．１ポリペプチド投与、ウォッシュアウト＝注入停止時、ウォッシュアウト期間後、回復１＝注入停止３０分後、回復２＝注入停止６０分後である。
【図３５】９０分間のＡＳＢＮＰ．１ポリペプチド（１００ｐｍｏｌ／ｋｇ／分）の投与開始後、図に示す時間における、心臓ペース制御されたイヌの尿流量（ｍＬ／分）を示すグラフである。ＢＬ＝ベースライン、３０分＝３０分間びＡＳＢＮＰ．１ポリペプチド投与、６０分＝６０分間のＡＳＢＮＰ．１ポリペプチド投与、９０分＝９０分間のＡＳＢＮＰ．１ポリペプチド投与、ウォッシュアウト＝注入停止時、ウォッシュアウト期間後、回復１＝３０分注入停止後、回復２＝６０分注入停止後である。
【図３６】９０分間のＡＳＢＮＰ．１ポリペプチド（１００ｐｍｏｌ／ｋｇ／分）の投与開始後、図に示す時間における、心臓ペース制御されたイヌの平均動脈圧（ｍｍＨｇ）を示すグラフである。ＢＬ＝ベースライン、３０分＝３０分間のＡＳＢＮＰ．１ポリペプチド投与、６０分＝６０分間のＡＳＢＮＰ．１ポリペプチド投与、９０分＝９０分間のＡＳＢＮＰ．１ポリペプチド投与、ウォッシュアウト＝注入停止時、ウォッシュアウト期間後、回復１＝注入停止３０分後、回復２＝注入停止６０分後である。
【図３７】９０分間のＡＳＢＮＰ．１ポリペプチド（１００ｐｍｏｌ／ｋｇ／分）の投与開始後、図に示す時間における、心臓ペース制御されたイヌの腎血流量を示すグラフである。ＢＬ＝ベースライン、３０分＝３０分間のＡＳＢＮＰ．１ポリペプチド投与、６０分＝６０分間のＡＳＢＮＰ．１ポリペプチド投与、９０分＝９０分間のＡＳＢＮＰ．１ポリペプチド投与、ウォッシュアウト＝注入停止時、ウォッシュアウト期間後、回復１＝３０分注入停止後、回復２＝６０分注入停止後である。
【図３８】９０分間のＡＳＢＮＰ．１ポリペプチド（１００ｐｍｏｌ／ｋｇ／分）の投与開始後、図に示す時間における、心臓ペース制御されたイヌの肺毛細血管楔入圧を示すグラフである。ＢＬ＝ベースライン、３０分＝３０分間のＡＳＢＮＰ．１ポリペプチド投与、６０分＝６０分間のＡＳＢＮＰ．１ポリペプチド投与、９０分＝９０分間のＡＳＢＮＰ．１ポリペプチド投与、ウォッシュアウト＝注入停止時、ウォッシュアウト期間後、回復１＝３０分注入停止後、回復２＝６０分注入停止後である。
【図３９】９０分間のＡＳＢＮＰ．１ポリペプチド（１００ｐｍｏｌ／ｋｇ／分）の投与開始後、図に示す時間における、心臓ペース制御されたイヌの心拍出量（ｌ／分）を示すグラフである。ＢＬ＝ベースライン、３０分＝３０分間のＡＳＢＮＰ．１ポリペプチド投与、６０分＝６０分間のＡＳＢＮＰ．１ポリペプチド投与、９０分＝９０分間のＡＳＢＮＰ．１ポリペプチド投与、ウォッシュアウト＝注入停止時、ウォッシュアウト期間後、回復１＝３０分注入停止後、回復２＝６０分注入停止後である。
【発明を実施するための形態】
【００２４】
詳細な説明
本書は、利尿ポリペプチドおよびナトリウム利尿ポリペプチドに関する。例えば、本書は、利尿および／またはナトリウム利尿作用を有するポリペプチドを提供する。いくつかの場合において、本願において提供されるポリペプチドは、血圧を低下させる能力を欠く一方で、利尿および／またはナトリウム利尿作用を有することができる。本書はまた、哺乳動物において利尿および／またはナトリウム利尿作用を誘起する方法および材料を提供する。
【００２５】
本願において提供されるポリペプチドは、あらゆる配列を有することができ、あらゆる長さを有することができる。例えば、本願において提供されるポリペプチドは、配列番号：１、配列番号：２、または配列番号：３に記載される配列を含むことができる。いくつかの場合において、本願において提供されるポリペプチドは、１０以下の（例えば、９つ以下の、８つ以下の、７つ以下の、６つ以下の、５つ以下の、４つ以下の、３つ以下の、２つ以下の、１、または０）アミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１、配列番号：２、または配列番号：３に記載の配列に整列する、アミノ酸配列を含むことができる。例えば、本願において提供されるポリペプチドは、配列番号：１の第１セリン残基または最終バリン残基が、欠失、または異なるアミノ酸残基によって置換されるという例外を除き、配列番号：１に記載の配列を含むことができる。
【００２６】
いくつかの場合において、本願において提供されるポリペプチドは、（ａ）配列番号：１に記載の、または１０以下（例えば、９つ以下、８つ以下、７つ以下、６つ以下、５つ以下、４つ以下、３つ以下、２つ以下、１、または０）のアミノ酸の欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列する第１アミノ酸配列、および（ｂ）配列番号：２に記載の、または（ｉ）１０以下（例えば、９つ以下、８つ以下、７つ以下、６つ以下、５つ以下、４つ以下、３つ以下、２つ以下、１、または０）のアミノ酸の付加、置換、またはそれらの組み合わせであって、ただし、付加または置換は、システイン残基の存在という結果を生じないもの、または（ｉｉ）１５以下（例えば、１４以下、１３以下、１２以下、１１以下、１０以下、９つ以下、８つ以下、７つ以下、６つ以下、５つ以下、４つ以下、３つ以下、２つ以下、１、または０）のアミノ酸の欠失を伴って配列番号：２に記載の配列に整列する第２アミノ酸配列を含むことができる。例えば、本願において提供されるポリペプチドは、配列番号：３の４３の位置にあるシステイン残基が、システイン以外のアミノ酸（例えば、アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、グルタミン、グルタミン酸、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リジン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、トレオニン、トリプトファン、チロシン、またはバリン）であるという例外を除き、配列番号：３に記載の配列を含むか、それから成ることができる。
【００２７】
配列番号：１、配列番号：２または配列番号：３に記載のポリペプチド配列に対して、１つ以上のアミノ酸の置換を有するポリペプチドは、本願に記載のとおりに調製および変更されることができる。アミノ酸の置換は、同類アミノ酸の置換であることも、非同類アミノ酸の置換であることもできる。同類アミノ酸の置換には、例えば、酸性アミノ酸残基（例えば、アスパラギン酸またはグルタミン酸）と、別の酸性アミノ酸残基との置換、塩基性アミノ酸残基（例えば、リジン、アルギニンまたはヒスチジン）と、別の塩基性アミノ酸残基との置換、疎水性アミノ酸残基と、別の疎水性アミノ酸残基との置換（例えば、ロイシンのイソロイシンとの置換、メチオニンのバリンとの置換、またはアラニンのバリンとの置換）、および親水性アミノ酸残基（例えば、セリン、グリシンまたはトレオニン）と、別の親水性アミノ酸残基との置換を含む。
【００２８】
同類アミノ酸の置換はまた、特定の型の側鎖を有するアミノ酸残基の、類似の型の側鎖を有する別のアミノ酸残基との置換を含む。例えば、同類アミノ酸の置換は、脂肪族側鎖（例えば、グリシン、アラニン、バリン、ロイシン、またはイソロイシン）を有するアミノ酸残基の、脂肪族側鎖を有する別のアミノ酸残基との置換、脂肪族ヒドロキシル側鎖（例えば、セリンまたはトレオニン）を有するアミノ酸残基の、脂肪族ヒドロキシル側鎖を有する別のアミノ酸残基との置換、アミド含有の側鎖（例えば、アスパラギンまたはグルタミン）を有するアミノ酸残基の、アミド含有の側鎖を有する別のアミノ酸残基との置換、芳香族側鎖（例えば、フェニルアラニン、チロシン、またはトリプトファン）を有するアミノ酸残基の、芳香族側鎖を有する別のアミノ酸残基との置換、塩基性側鎖（例えば、リジン、アルギニン、またはヒスチジン）を有するアミノ酸残基の、塩基性側鎖を有する別のアミノ酸残基との置換、および含硫の側鎖（例えば、システインまたはメチオニン）を有するアミノ酸残基の、含硫の側鎖を有する別のアミノ酸残基との置換を含む。
【００２９】
本願において提供されるポリペプチドは、どのような長さであってもよい。例えば、本願において提供されるポリペプチドは、２５〜７５（例えば、３０〜７０、３２〜６０、３２〜５７、３２〜５０、３２〜４５、３５〜４３、または３８〜４３）アミノ酸残基の長さであってもよい。２５または７５アミノ酸残基の長さのポリペプチドは、２５〜７５アミノ酸残基の長さのポリペプチドであると理解されるものとする。
【００３０】
いくつかの場合において、本願において提供されるポリペプチドは、３７〜４７アミノ酸残基の長さであってもよく、（ａ）配列番号：１に記載の、または（ｂ）５つ以下のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列するアミノ酸配列を含むことができる。かかるポリペプチドの例として、ＡＳＢＮＰ．１ポリペプチドを含むがこれに限定されない。いくつかの場合において、本願において提供されるポリペプチドは、４５〜６５アミノ酸残基の長さであってもよく、（ａ）配列番号：１に記載の、または、５つ以下のアミノ酸の欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列する第１アミノ酸配列と、（ｂ）配列番号：２に記載の、または（ｉ）５つ以下のアミノ酸の付加、置換、またはそれらの組み合わせであって、ただし、付加または置換は、システイン残基の存在という結果を生じないもの、または（ｉｉ）１５以下のアミノ酸の欠失を伴って、配列番号：２に記載の配列に整列する第２アミノ酸配列を含むことができる。かかるポリペプチドの例として、ＡＳＢＮＰ．２ポリペプチドを含むがこれに限定されない。
【００３１】
いくつかの場合において、本願において提供されるポリペプチドは、実質的に純粋なポリペプチドであってもよい。本願においてポリペプチドに関して使用される「実質的に純粋」という用語は、ポリペプチドは、それに自然においては伴う他のポリペプチド、脂質、炭水化物、および核酸を実質的に有しないことを意味する。それゆえ、実質的に純粋なポリペプチドとは、その自然環境から離された、少なくとも６０％純粋な、あらゆるポリペプチドであるか、またはあらゆる化学的に合成したポリペプチドである。実質的に純粋なポリペプチドは、少なくとも約６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、または９９％純粋であり得る。通常、実質的に純粋なポリペプチドは、非還元性ポリアクリルアミドゲル上に単一の主要バンドを呈する。
【００３２】
いくつかの実施形態において、本願において提供されるポリペプチドは、ヒト臍血管内皮細胞（ＨＵＶＥＣ）におけるｃＧＭＰの産生を促進する能力を欠き得る。細胞内のｃＧＭＰの産生は、例えば、ＢＩＯＴＲＡＣＫ ｃＧＭＰ酵素免疫測定キット（Ａｍｅｒｓｈａｍ Ｐｈａｒｍａｃｉａ Ｂｉｏｔｅｃｈ）を使用して分析することができる。他の実施形態において、本願において提供されるポリペプチドは、血管作用を欠き得る。血管作用は、血管（例えば、臓器チャンバ内の頸動脈）のポリペプチドに対する応答速度を測定することによって分析することができる。
【００３３】
本願において提供されるポリペプチドは、ポリペプチドをコードする組み換え核酸の発現によって、または化学合成によって取得することができる。例えば、本願において提供されるポリペプチドをコードする発現ベクターを使用する、標準的な組み換え技術を使用することができる。得られたポリペプチドは、次に、例えば、親和性クロマトグラフ法およびＨＰＬＣを使用して精製することができる。精製の程度は、カラムクロマトグラフィ、ポリアクリルアミドゲル電気泳動法、または高速液体クロマトグラフィを含むがこれに限定されない、あらゆる適切な方法によって測定され得る。本願において提供されるポリペプチドは、ポリペプチドが精製されることを可能とする（例えば、親和性マトリクス上に捕捉される）タグ配列を含むように設計することができる。例えば、ｃ−ｍｙｃ、血球凝集素、ポリヒスチジン、またはＦｌａｇ（商標）タグ（Ｋｏｄａｋ）等のタグは、ポリペプチドの精製を補助するために使用され得る。かかるタグは、カルボキシル末端またはアミノ末端のいずれかを含む、ポリペプチド内のあらゆる場所に挿入することができる。使用することのできる他の融合には、ポリペプチドの検出を補助する、アルカリ性ホスファターゼ等の酵素を含む。
【００３４】
本願において提供されるポリペプチドは、成熟したナトリウム利尿ポリペプチド（例えば、ＢＮＰ、ＤＮＰ、ＡＮＰ、またはＣＮＰ）のＮ末端およびリング構造を含む第１領域、およびＡＳＢＮＰのＣ末端部分の突然変異型または切断型を含む第２領域の２つの領域を含むように産生することができる。ＢＮＰ、ＤＮＰ、ＡＮＰ、およびＣＮＰのＮ末端およびリング構造は、別の文献に記載される。例えば、米国特許出願第１０／５６１，０１４号を参照されたい。
【００３５】
本願において提供されるポリペプチドは、薬学的に許容される毒性のない賦形剤または担体と混合することによって、薬学的組成物として製剤することができる。かかる組成物は、例えば、心臓、肝臓、腎臓、または他のナトリウム貯留状態を治療するために効果的な量を、これを必要とする被験者に投与されることができる。例えば、かかる組成物は、腎機能障害を有する対象に投与されることができる。腎機能障害は、急性腎不全、糸球体腎炎、慢性腎不全、高窒素血症、尿毒症、免疫腎臓病；急性腎炎症候群、急速進行性腎炎症候群、ネフローゼ症候群、バーガー病（Ｂｅｒｇｅｒ’ｓ Ｄｉｓｅａｓｅ）、慢性腎炎／タンパク尿症候群、尿細管間質性疾患、腎毒性障害、腎梗塞、アテローム塞栓性腎疾患、腎皮質壊死、悪性腎硬化症、腎静脈血栓症、尿細管性アシドーシス、腎性糖尿、腎性尿崩症、バーター症候群、リドル症候群、多嚢性腎疾患、間質性腎炎、急性溶血性尿毒症症候群、髄質嚢胞腎、海綿腎、遺伝性腎炎、および爪・膝蓋骨症候群を含むことができるが、これに限定されない。
【００３６】
本願において提供される組成物はまた、心機能障害を有する対象に投与することができる。心機能障害は、慢性心不全（ｃｈｒｉｎｉｃ ｈｅａｒｔ ｆａｉｌｕｒｅ，ＣＨＦ）、拡張したうっ血性心筋症、肥大型性心筋症、拘束型心筋症、僧帽弁疾患、大動脈弁疾患、三尖弁膜症、狭心症、心筋梗塞、心不整脈、肺高血圧症、動脈性高血圧、腎血管性高血圧、動脈硬化症、アテローム性動脈硬化症、および心臓腫瘍を含むことができるが、これに限定されない。
【００３７】
本願において提供される組成物はまた、炎症状態を有する対象に投与することができる。炎症状態は、心筋炎、ぜんそく、慢性炎症、自己免疫性糖尿病、腫瘍の血管新生、関節リウマチ、リウマチ様脊椎炎、変形性関節症、痛風性関節炎および他の関節炎状態、敗血症、敗血性ショック、内毒素性ショック、グラム陰性菌敗血症、毒素性ショック症候群、ぜんそく、成人呼吸窮迫症候群、卒中、再かん流傷害、神経外傷および虚血等の中枢神経系障害、乾癬性再狭窄、脳マラリア、慢性肺炎症性疾患、珪肺症、肺類肉腫症（ｐｕｌｍｏｎａｒｙ ｓａｒｃｏｓｉｓ）、骨粗しょう症などの骨吸収疾患、対宿主性移植片反応、クローン病、炎症性大腸炎（ＩＢＤ）を含む潰瘍性大腸炎、および発熱症（ｐｙｒｅｓｉｓ）を含むことができるが、これに限定されない。
【００３８】
医薬組成物は、非経口的投与のためには、特に溶液または生理的緩衝水溶液中の懸濁状に、経口投与のためには、特にタブレットまたはカプセル状に、または鼻腔内投与のためには、特に粉末、点鼻薬、またはエアロゾル状に調製することができる。他の投与経路のための組成物は、標準的な方法を使用して、要望に応じて調製することができる。
【００３９】
非経口的投与のための製剤は、一般的な賦形剤として、滅菌水または生理食塩水、ポリエチレングリコール等のポリアルキレングリコール、植物由来の油脂、水素化ナフタレン等を含むことができる。具体的には、生体適合性のある、生分解性ラクチドポリマー、ラクチド／グリコリドコポリマー、またはポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレンコポリマーが、生体内でのポリペプチドの放出を制御するための賦形剤の例である。他の適切な非経口的送達システムには、エチレン−ビニルアセチレンコポリマー粒子、浸透圧ポンプ、埋め込み式注入システム、およびリポソームを含む。吸入投与のための製剤には、要求に応じて乳糖等の賦形剤を含むことができる。吸入製剤は、ポリオキシエチレン−９−ラウリルエーテル、グリココール酸塩およびデオキシコール酸塩を含む水溶液であってもよく、または、吸入製剤は、例えば、点鼻薬形態での投与のために油性溶液であってもよい。所望される場合、組成物は鼻腔内に塗布されるゲルとして調製することができる。また、非経口的投与のための製剤には、口腔投与のためのグリココール酸を含むことができる。
【００４０】
経口投与のために、結合剤（例えば、あらかじめゼラチン化したトウモロコシでんぷん、ポリビニルピロリドンまたはヒドロキシプロピルメチルセルロース）、賦形剤（例えば、乳糖、微結晶性セルロースまたはリン酸水素カルシウム）、滑剤（例えば、ステアリン酸マグネシウム、タルクまたはシリカ）、崩壊剤（例えば、ジャガイモでんぷんまたはナトリウムスターチグリコール酸塩）、または湿潤剤（例えば、ラウリル硫酸ナトリウム）等の薬学的に許容される賦形剤とともに、従来の手段によって、タブレットまたはカプセルを調製することができる。タブレットは、当該技術分野で既知の方法によってコーティングすることができる。また、口腔投与のための調製は、組成物の制御放出を可能にするように製剤設計することができる。
【００４１】
点鼻剤は、液状または乾燥製品として提示することができる。噴霧される水性懸濁液または溶液は、ｐＨおよび／または弾力性を調節するために、担体または賦形剤を含むことができる。
【００４２】
本願に記載のポリペプチドはまた、局所送達のための製剤であり得る。本願において提供されるポリペプチドの局所使用および／または送達は、例えば、イオントフォレーゼやリポゲルなどの既知の方法を使用することによって達成することができる。
【００４３】
本願に記載の組成物（例えば、本願において提供されるポリペプチドを含む）は、他の有効成分を追加的に含むことができる。
【００４４】
種々の臨床的指標は、対象（例えば、腎機能または心機能障害、または炎症状態を有する被験者）への、本願に記載のポリペプチド（例えば、医薬組成物としての製剤）の投与の前、途中、および／または後に、観測することができる。例えば、バイタルサイン、電気分解、血清中クレアチニン、シスタチン、尿ＢＮＰ値、血漿ＢＮＰ値、尿排出量、投与されるポリペプチドの血漿値、投与されるポリペプチドの尿値、またはそれらのあらゆる組み合わせを観測することができる。いくつかの場合において、血漿レニン活性、糸球体ろ過量、尿ｃＧＭＰ排泄量、血漿ｃＧＭＰ値、尿ＡＮＰ排泄量、尿ＢＮＰ排泄量、心拍出量、体血管抵抗、アルドステロン値、またはそれらのあらゆる組み合わせを観測することができる。臨床的指標を観測するためには、本願に記載の方法を含むがこれに限定されないあらゆる適切な方法を使用することができる。
【００４５】
臨床的指標の観測は、例えば、心機能障害や腎機能障害、または炎症状態の症状の重篤性が軽減されたかどうか等、投与されるポリペプチドが効果的であるかどうかを、臨床医学者が決定することを可能にすることができる。また、本願において提供されるポリペプチドの投与前、途中、および／または後の臨床的指標の観測は、ポリペプチドの投与量が増加または減少されるべきであるか、ポリペプチドの投与が継続または中断されるべきか、またはポリペプチドが再投与されるべきかを示すことができる。また、臨床的指標の観測は、被験者の状態の重篤性を示し、次いで、本願において提供されるポリペプチドがいつ、どのくらいの量投与されるべきかについての指針を提供することができる。
【００４６】
ポリペプチドをコードする核酸
本書はまた、本願において提供されるポリペプチドの１つ以上をコードする単離核酸を提供する。核酸に関して本願で使用される「単離」という用語は、これが由来する有機体からの自然発生のゲノムにおいて直接隣接（５’末端のものと、３’末端のもの）する、双方の配列と直接隣接しない自然発生の核酸を指す。例えば、単離核酸は、自然発生のゲノムにおいて通常組み換えＤＮＡ分子と直接隣接して見られる核酸配列のうちの１つが、除去されたか欠如する、あらゆる長さの組み換えＤＮＡ分子であることができるがこれに限定されない。それゆえ、単離核酸は、他の配列から独立した別個の分子として存在する組み換えＤＮＡ（例えば、ＰＣＲまたは制限エンドヌクレアーゼ処理によって産生されたｃＤＮＡまたはゲノムＤＮＡ断片）、ならびに、ベクター、自己複製プラスミド、ウイルス（例えば、レトロウイルス、アデノウイルス、またはヘルペスウイルス）に組み込まれた、または原核生物または真核生物のゲノムＤＮＡに組み込まれた組み換えＤＮＡを含むがこれに限定されない。また、単離核酸は、ハイブリッドまたは融合核酸配列の一部である組み換えＤＮＡ分子を含むことができる。
【００４７】
また、核酸に関して本願で使用される「単離」という用語は、非自然発生の核酸配列は自然界では見られず、自然発生のゲノムに直接隣接する配列を有しないため、あらゆる非自然発生の核酸を含む。例えば、人工的に作られた核酸等の非自然発生の核酸は、単離核酸と見なされる。人工的に作られた核酸（例えば、配列番号：１に記載のアミノ酸配列を含むかそれから成るポリペプチドをコードする核酸）は、一般的な分子クローン技術や化学核酸合成技術を使用して作成することができる。単離非自然発生の核酸は、他の配列から独立しているか、またはベクター、自己複製プラスミド、ウイルス（例えば、レトロウイルス、アデノウイルス、またはヘルペスウイルス）、または原核生物または真核生物のゲノムＤＮＡに組み込まれ得る。また、非自然発生の核酸は、ハイブリッドまたは融合核酸配列の一部である核酸分子を含むことができる。例えば、ｃＤＮＡライブラリやゲノムライブラリ、またはゲノムＤＮＡ限定ダイジェストを含むゲルスライス内の他の数百〜数百万の核酸に存在する核酸は、単離核酸とは見なされない。
【００４８】
本願において使用される「核酸」という用語は、ｍＲＮＡ、ｃＤＮＡ、ゲノムＤＮＡ、合成（例えば、化学的に合成した）ＤＮＡ、および核酸類似体を含むＲＮＡとＤＮＡの双方を指す。核酸は、二本鎖または一本鎖であることができ、一本鎖の場合、センス鎖またはアンチセンス鎖であることができる。また、核酸は、円形または線形であることができる。核酸類似体は、例えば、核酸の安定性、ハイブリダイゼーション、または溶解性を改善するために、塩基部分、糖部分、またはリン酸骨格の箇所において改変することができる。塩基部分における改変は、デオキシチミジンのデオキシウリジンへの、および５−メチル−２’−デオキシシチジンおよび５−ブロモ−２’−デオキシシチジンのデオキシシチジンへの改変を含む。糖部分における改変は、リボース糖の２’ヒドロキシルから、２’−Ｏ−メチルまたは２’−Ｏ−アリル糖の形成を含むことができる。デオキシリボースリン酸骨格は、モルホリノ核酸を産するように改変されることができ、各塩基部分はそこで六員環のモルホリノ環、またはペプチド核酸に結合し、そこでデオキシリン酸骨格は擬ペプチド骨格によって置換され、４つの塩基は保持される。例えば、ＳｕｍｍｅｒｔｏｎおよびＷｅｌｌｅｒ、Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄ Ｄｒｕｇ Ｄｅｖ．、７：１８７−１９５（１９９７）、およびＨｙｒｕｐら、Ｂｉｏｏｒｇａｎ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ．、４：５−２３（１９９６）を参照されたい。また、デオキシリン酸骨格は、例えば、ホスホロチオエートまたはホスホロジチオエート骨格、ホスホロアミダイド、またはアルキルホスホトリエステル骨格と置換することができる。
【００４９】
本願において提供される核酸は、配列番号：５または６に記載の配列を含むか、それから成ることができる。
【００５０】
通常、本願において提供される単離核酸は、少なくとも１０ヌクレオチドの長さ（例えば、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、５０、７５、１００、２００、３００、３５０、４００、またはそれ以上のヌクレオチドの長さ）である。フルレングス以下の核酸分子は、例えば、診断目的に、プライマまたはプローブとして有用である。単離核酸分子は、一般的な分子クローン技術や化学核酸合成技術を含むがこれに限定されない標準的な技術によって産生することができる。例えば、ポリメラーゼ連鎖反応法（ＰＣＲ）を使用することができる。ＰＣＲとは、標的核酸が酵素的に増幅される手技または技術を指す。関心領域末端または超過からの配列情報は、通常、増幅されるテンプレートの逆鎖の配列と同一のオリゴヌクレオチドプライマを設計するために採用される。ＰＣＲは、総ゲノムＤＮＡまたは総細胞ＲＮＡからの配列を含む、ＤＮＡ、ならびにＲＮＡからの特異的な配列を増幅するために使用することができる。プライマは通常、１５〜５０ヌクレオチドの長さであるが、１０ヌクレオチド〜１００ヌクレオチドの長さの範囲であることができる。例えば、プライマは、１２、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３５、４０、または４５ヌクレオチドの長さであることができる。プライマは、制限ダイジェストから、従来の方法によって精製するか、または化学的に合成することができる。プライマは、通常、増幅における効率を最大とするために一本鎖であるが、プライマは、二本鎖であることができる。二本鎖プライマは、増幅で使用される前に、鎖を分離するためにまず変性される（例えば、熱で処理される）。概略的なＰＣＲ法については、例えばＰＣＲ Ｐｒｉｍｅｒ： Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ、ＤｉｅｆｆｅｎｂａｃｈおよびＤｖｅｋｓｌｅｒ編、Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ、１９９５に記載される。ＲＮＡをテンプレートの供給源として使用する場合、相補的ＤＮＡ（ｃＤＮＡ）鎖を合成するために逆転写酵素を使用することができる。別の文献に記載されるように、単離核酸を取得するために、リガーゼ連鎖反応法、鎖置換増幅法（ＳＤＡ法）、自立配列複製法、または核酸配列に基づく増幅法もまた使用することができる（Ｌｅｗｉｓ， Ｇｅｎｅｔｉｃ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ Ｎｅｗｓ， １２（９）：１ （１９９２）、Ｇｕａｔｅｌｌｉ ら、Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ． ＵＳＡ， ８７：１８７４−１８７８ （１９９０）、およびＷｅｉｓｓ、Ｓｃｉｅｎｃｅ、２５４：１２９２（１９９１））。
【００５１】
単離核酸はまた、単一の核酸分子（例えば、ホスホルアミダイト）技術を使用した３’〜５’方向の自動ＤＮＡ合成を使用して）として、または一連のオリゴヌクレオチドとして、化学的に合成することができる。例えば、長いオリゴヌクレオチド（例えば、＞１００ヌクレオチド）の１つ以上の対は、オリゴヌクレオチド対がアニールされた時に二本鎖が形成されるように、各対が補完の短いセグメント（例えば、約１５ヌクレオチド）を有する所望の配列を含むように合成することができる。オリゴヌクレオチドを伸長するために、ＤＮＡポリメラーゼが使用され、結果としてオリゴヌクレオチド対毎に単鎖、二本鎖の核酸分子を生じ、これらは次にベクターに結紮される。
【００５２】
単離核酸はまた、突然変異生成によって取得することができる。例えば、配列番号：１、２、または３に記載の配列を有する、ポリペプチドをコードする核酸配列は、例えば、オリゴヌクレオチド指定突然変異生成および／またはＰＣＲによる部位特異的変位導入等の標準的な方法を使用して突然変異させることができる。Ｓｈｏｒｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ、第８章、Ｇｒｅｅｎ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ａｓｓｏｃｉａｔｅｓ ａｎｄ Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓ、Ａｕｓｕｂｅｌら編、１９９２を参照されたい。かかる突然変異には、付加、欠失、置換、およびそれらの組み合わせを含む。
【００５３】
ベクターおよび宿主細胞
本書はまた、本願において提供される核酸を含むベクターを提供する。本願において使用される場合、「ベクター」は、プラスミド、ファージ、またはコスミド等のレプリコンであり、挿入されたセグメントの複製をもたらすために、そこに別のＤＮＡセグメントを挿入することができる。ベクターは、発現ベクターであることができる。「発現ベクター」とは、１つ以上の発現制御配列を含むベクターであり、また「発現制御配列」とは、別のＤＮＡ配列の転写および／または翻訳を制御および規制するＤＮＡ配列である。
【００５４】
本願において提供される発現ベクターにおいて、核酸は、１つ以上の発現制御配列に操作可能に結合され得る。本願において使用される「操作可能に結合される」とは、発現制御配列が関心のコード配列の発現を効果的に制御することができるように、遺伝的構造に組み込まれることを意味する。発現制御配列の例として、プロモータ、エンハンサ、転写終結領域が挙げられる。プロモータとは、転写が開始する箇所（概してＲＮＡポリメラーゼＩＩの開始部位の近傍）の通常１００ヌクレオチド上流内におけるＤＮＡ分子の領域で構成される、発現制御配列である。コード配列をプロモータの制御下に置くため、ポリペプチドの翻訳の読み枠の翻訳開始部位を、プロモータの１〜約５０ヌクレオチド下流に位置づけることが必要である場合がある。エンハンサは、時間、場所、およびレベルに関する発現特異性を提供する。プロモータと異なり、エンハンサは、転写部位から種々の距離にあっても機能する。エンハンサはまた、転写開始部位から下流に位置することができる。コード配列は、ＲＮＡポリメラーゼがコード配列をｍＲＮＡに転写することができ、これが次にコード配列によってコードされるポリペプチドに翻訳され得る時、細胞内の発現制御配列に「操作可能に結合され」、その「制御下に」あるとされる。
【００５５】
適切な発現ベクターには、プラスミド、および例えば、バクテリオファージ、バキュロウイルス、タバコモザイクウイルス、ヘルペスウイルス、サイトメガロウイルス、レトロウイルス、ポックスウイルス、アデノウイルス、およびアデノ随伴ウイルス由来のウイルスベクターを含むがこれに限定されない。多数のベクターおよび発現システムは、Ｎｏｖａｇｅｎ（ウィスコンシン州、Ｍａｄｉｓｏｎ）、Ｃｌｏｎｅｔｅｃｈ（カリフォルニア州、Ｐａｌｏ Ａｌｔｏ）、Ｓｔｒａｔａｇｅｎｅ（カリフォルニア州、Ｌａ Ｊｏｌｌａ）、およびＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎ／Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ（カリフォルニア州、Ｃａｒｌｓｂａｄ）などの企業から市販されている。
【００５６】
発現ベクターは、発現核酸配列のその後の操作（例えば、精製または局在化）を容易にするため、設計されたタグ配列を含むことができる。緑色蛍光タンパク質（ＧＦＰ）、グルタチオンＳ−トランスフェラーゼ（ＧＳＴ）、ポリヒスチジン、ｃ−ｍｙｃ、血球凝集素、またはＦｌａｇ（商標）タグ（Ｋｏｄａｋ、Ｎｅｗ Ｈａｖｅｎ、ＣＴ）配列等のタグ配列は、通常、コードされたポリペプチドとの融合として発現する。このようなタグは、カルボキシル末端またはアミノ末端のいずれかを含む、ポリペプチド内のあらゆる場所に挿入されることができる。
【００５７】
本書はまた、本願において提供される核酸分子および／または核酸ベクターを含む宿主細胞を提供する。「宿主細胞」という用語は、核酸分子またはベクターがその中に導入され得る原核細胞および真核細胞を含むことを意図する。核酸を細胞に導入するために、あらゆる方法を使用することができる。例えば、リン酸カルシウム沈殿、エレクトロポレーション、熱ショック、リポフェクション、マイクロインジェクション、およびウイルス媒介の核酸転写を、核酸を細胞に導入するために使用することができる。また、裸のＤＮＡを、別に記載されるように、細胞に生体内に直接送達することができる（米国特許第５，５８０，８５９号および５，５８９，４６６号）。
【００５８】
ポリペプチドの検出
本書は、本願において提供されるポリペプチドを検出するための方法および材料を提供する。かかる方法および材料は、ポリペプチドを治療として受けている哺乳動物の体内のポリペプチドの値を観測するために使用することができる。本願において提供されるポリペプチド（例えば、ＡＳＢＮＰ．１およびＡＳＢＮＰ．２）は、例えば、１つ以上の抗体を使用して、免疫学的に検出さすことができる。本願において使用される「抗体」という用語は、本願において提供されるポリペプチドのエピトープ決定基に結合することができる、無傷分子ならびに、その断片を含む。「エピトープ」という用語は、抗原上の抗原決定基を指し、そこに抗体のパラトープが結合する。エピトープ決定基は、ふつうアミノ酸または糖側鎖等の分子の化学的に活性の表面分類から成り、通常、特異的な立体構造の特性ならびに特異的な電荷特性を有する。エピトープは、概して少なくとも５つの隣接アミノ酸（連続エピトープ）を有するか、または代替的に、特定の構造（例えば、立体構造エピトープ）を画定する一組の非隣接アミノ酸であることができる。「抗体」という用語は、ポリクローナル抗体、モノクローナル抗体、ヒト化またはキメラ抗体、単鎖Ｆｖ抗体断片、Ｆａｂ断片、およびＦ（ａｂ）２断片を含む。ポリクローナル抗体とは、免疫動物の血清中に含まれる、抗体分子の異種集団である。モノクローナル抗体とは、特定のエピトープに対する抗体の同種集団である。
【００５９】
本願において提供されるポリペプチドに対して特異的な結合親和力を有する抗体断片（例えば、ＡＳＢＮＰ．１およびＡＳＢＮＰ．２）は、既知の技術によって生成することができる。例えば、Ｆ（ａｂ’）２断片は、抗体分子のペプシン消化によって産生されることができ、Ｆａｂ断片は、Ｆ（ａｂ’）２断片のジスルフィド架橋を還元することによって生成することができる。あるいは、Ｆａｂ発現ライブラリが構築され得る。例えば、Ｈｕｓｅら、Ｓｃｉｅｎｃｅ、２４６：１２７５（１９８９）を参照されたい。一旦産生されると、抗体またはその断片は、ＥＬＩＳＡ法、放射免疫測定、およびウエスタンブロット法を含む標準的な免疫測定法によって、本願において提供されるポリペプチドの認識をテストされる。Ｓｈｏｒｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ、第１１章、Ｇｒｅｅｎ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ａｓｓｏｃｉａｔｅｓ ａｎｄ Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓ、Ａｕｓｕｂｅｌ、Ｆ．Ｍら編、１９９２を参照されたい。
【００６０】
免疫アッセイにおいて、本願において提供されるポリペプチドに特異的な結合親和力を有する抗体、またはかかる抗体に結合する二次抗体を、直接、あるいは間接的に標識化することができる。適切な標識には、放射性核種（例えば、１２５Ｉ、１３１Ｉ、３５Ｓ、３Ｈ、３２Ｐ、３３Ｐ、または１４Ｃ）、蛍光部分（例えば、フルオレセイン、ＦＩＴＣ、ＰｅｒＣＰ、ローダミン、またはＰＥ）、発光部位（例えば、カリフォルニア州、Ｐａｌｏ Ａｌｔｏの、Ｑｕａｎｔｕｍ Ｄｏｔ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎによって供給されるＱｄｏｔ（商標）ナノ粒子）、限定された波長の光を吸収する化合物、または酵素（例えば、アルカリ性ホスファターゼまたはホースラディッシュペルオキシダーゼ）が挙げられるが、これに限定されない。抗体は、ビオチンとの接合によって間接的に標識化され、次に上述の分子によって標識化されたアビジンまたはストレプトアビジンを用いて検出することができる。標識を検出または定量化する方法は、標識の性質に依存し、当技術分野において周知である。検出器の例として、Ｘ線フィルム、放射能測定器、シンチレーションカウンタ、分光光度計、比色計、蛍光光度計、照度計、および濃度計が挙げられるが、これに限定されない。当業者に周知のこれらのアプローチの組み合わせ（「多層」アッセイを含む）を、アッセイの感度を強化するために使用することができる。
【００６１】
本願において提供されるポリペプチドを検出する免疫アッセイは、サンドイッチアッセイ、競合アッセイ（競合ＲＩＡ）、または架橋免疫アッセイを含む、種々の既知のフォーマットで行なうことができる。例えば、米国特許第５，２９６，３４７号、４，２３３，４０２号、４，０９８，８７６号、および４，０３４，０７４号を参照されたい。本願において提供されるポリペプチドを検出する方法は、概して生体サンプルを本願において提供されるポリペプチドに結合する抗体に接触させるステップと、ポリペプチドの抗体への結合を検知するステップを含む。例えば、本願において提供されるポリペプチドに特異的な結合親和力を有する抗体は、当技術分野で周知のあらゆる種類の方法によって、固体基板に固定化され、次に生体サンプルに曝露することができる。ポリペプチドの固体基板上の抗体への結合は、表面プラスモン共鳴現象を活用することによって検出されることができ、これは例えば、Ｂｉａｃｏｒｅ装置（Ｂｉａｃｏｒｅ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ ＡＢ、Ｒａｐｓｇａｔａｎ、スウェーデン）などの適切な機器によって、定性的または定量的に検出することができる、結合時の表面プラスモン共鳴の強度の変化をもたらす。あるいは、抗体は、上述のように標識化され、検出することができる。本願において提供されるポリペプチドの既知量の使用による標準曲線は、ポリペプチドの値の定量化を補助するために生成することができる。
【００６２】
他の実施形態において、捕捉抗体が固体基板上に固定化される「サンドイッチアッセイ」は、本願において提供されるポリペプチドの存在の有無、または値を検出するために使用される。固体基板は、サンプル中のあらゆる関心のポリペプチドが固定化抗体に結合するように、生体サンプルと接触することができる。抗体に結合したポリペプチドの存在の有無、または値は、ポリペプチドに特異的な結合親和力を有する「検出」抗体を使用することによって測定されることができる。いくつかの実施形態において、ＢＮＰ、ならびに本願において提供されるポリペプチドに結合親和力を有する捕捉抗体を使用することができる。本実施形態において、本願において提供される特定のポリペプチドに特異的な結合親和力を有する検出抗体を使用することができる。サンドイッチアッセイにおいて、捕捉抗体は、検出抗体と同一のエピトープ（または、ポリクローナル抗体の場合、エピトープの範囲）に結合してはならないということが理解される。それゆえ、モノクローナル抗体が捕捉抗体として使用される場合、検出抗体は、捕捉モノクローナル抗体が結合するエピトープと完全に物理的に別個であるか、それに部分的にのみ重複する別のモノクローナル抗体であるか、または、捕捉モノクローナル抗体が結合するもの以外か、これに加えたエピトープに結合するポリクローナル抗体であることができる。ポリクローナル抗体が捕捉抗体として使用される場合、検出抗体は、捕捉ポリクローナル抗体が結合するエピトープと完全に物理的に別個であるか、それに部分的にのみ重複するモノクローナル抗体であるか、または、捕捉モノクローナル抗体が結合するもの以外か、これに加えたエピトープに結合するモノクローナル抗体であることができる。サンドイッチアッセイは、サンドイッチＥＬＩＳＡアッセイ、サンドイッチウエスタンブロットアッセイ、サンドイッチ免疫磁性検出アッセイとして実施することができる。
【００６３】
抗体（例えば、捕捉抗体）が結合することができる適切な固体基板として、マイクロタイタープレート、試験管、ナイロンやニトロセルロース等の膜、およびビーズまたは粒子(例えば、アガロース、セルロース、ガラス、ポリスチレン、ポリアクリルアミド、電磁または磁化ビーズまたは粒子)を含むがこれに限定されない。磁性または磁化可能な粒子は、自動免疫測定システムが使用される場合に特に有用である。
【００６４】
本願において提供されるポリペプチドに特異的な結合親和力を有する抗体は、標準的な方法を通じて産生することができる。概して、ポリペプチドは、上述のとおり、組み換え技術によって産生されることができるか、生体サンプル（例えば、異種発現システム）から精製することができ、ウサギ、ニワトリ、マウス、モルモット、またはラットを含む宿主動物に免疫を与えるために使用することができる。例えば、配列番号：１または２に記載のアミノ酸配列を有するポリペプチド、または少なくとも６アミノ酸の長さであるその断片は、動物に免疫を与えるために使用することができる。免疫反応を改善するために使用されることができる種々のアジュバントは、宿主動物種に依存し、フロインドアジュバント（完全および不完全）、水酸化アルミニウム等の鉱物ゲル、リゾレシチン、プルロニックポリオール、多価陰イオン、ペプチド、油乳剤、キーホールリンペットヘモシアニンおよびジニトロフェノールなどの界面活性物質を含む。モノクローナル抗体は、本願において提供されるポリペプチドおよび標準的なハイブリドーマ技術を使用して調製することができる。具体的には、モノクローナル抗体は、Ｋｏｈｌｅｒら、Ｎａｔｕｒｅ，２５６：４９５（１９７５）において記述されるもの、ヒトＢ細胞ハイブリドーマ技法（Ｋｏｓｂｏｒら、Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ Ｔｏｄａｙ，４：７２（１９８３）、Ｃｏｌｅら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８０：２０２６（１９８３））、およびＥＢＶハイブリドーマ技法（Ｃｏｌｅら、，“Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ａｎｄ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒａｐｙ，”Ａｌａｎ Ｒ．Ｌｉｓｓ，Ｉｎｃ．、７７−９６ページ（１９８３））等の、培養下の連続継代細胞系によって抗体分子の産生を提供する、いかなる技術によっても取得することができる。こうした抗体は、ＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＥ、ＩｇＡ、ＩｇＤ、およびそのあらゆるサブクラスを含むあらゆる免疫グロブリンクラスであることができる。モノクローナル抗体を産生するハイブリドーマは、生体外および生体内で培養することができる。
【００６５】
本願において提供されるポリペプチドを検出するための代替的な技術として、エレクトロスプレーイオン化（ＥＳＩ）等のマス分光光度法、およびマトリックス支援レーザー脱離イオン化（ＭＡＬＤＩ）が挙げられる。例えば、Ｇｅｖａｅｒｔら、Ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ，２２（９）：１６４５−５１（２００１）、Ｃｈａｕｒａｎｄら、Ｊ．Ａｍ．Ｓｏｃ．Ｍａｓｓ Ｓｐｅｃｔｒｏｍ．，１０（２）：９１−１０３（１９９９）を参照されたい。かかる用途に有用な質量分析計は、Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ（カリフォルニア州、Ｆｏｓｔｅｒ Ｃｉｔｙ）、Ｂｒｕｋｅｒ Ｄａｌｔｒｏｎｉｃｓ（マサチューセッツ州、Ｂｉｌｌｅｒｉｃａ）、およびＡｍｅｒｓｈａｍ Ｐｈａｒｍａｃｉａ（カリフォルニア州、Ｓｕｎｎｙｖａｌｅ）から入手が可能である。
【００６６】
本発明は、下記の実施例においてより詳細に説明されるが、これは請求項に記載される本発明の範囲を限定するものではない。
【００６７】
実施例
実施例１―ＡＳＢＮＰ．１ポリペプチドの生物学的作用
システインに先立って終結し、１３アミノ酸Ｃ末端後部を含むＡＳＢＮＰの切断型が設計され合成された。このポリペプチドは、ＡＳＢＮＰ．１ポリペプチド（図１）とよばれる。静脈内ＡＢＮＰ．１注入の生物学的作用が、健常なイヌにおいてテストされた。概要としては、６頭の健常なイヌに、２、１０、および１００ｐｍｏｌのＡＳＢＮＰ．１ポリペプチド製剤調合液が注入された。すなわち、各イヌは、２、１０、および１００ｐｍｏｌのＡＳＢＮＰ．１ポリペプチド調合液の連続注入を受けた。尿流量、尿ナトリウム排泄量、遠位部分的管状ナトリウム再吸収率、近位管状部分的ナトリウム再吸収率、平均動脈圧、血漿ｃＧＭＰ値、糸球体ろ過量、腎血流量、および血漿レニン値が、別の文献に記載のとおりに測定された（Ｃｈｅｎら、Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｒｅｇｕｌ．Ｉｎｔｅｇｒ．Ｃｏｍｐ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．，２８８：Ｒ１０９３−Ｒ１０９７（２００５）、およびＨａｂｅｒら、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．Ｍｅｔａｂ．，２９：１３４９−１３５５（２００５））。ＡＳＢＮＰ．１ポリペプチドの全身投与により、利尿およびナトリウム利尿作用（図２および図３）が生じた。ＡＳＢＮＰ．１ポリペプチドの作用は、遠位尿細管（図４および図５）を標的とした。血漿ｃＧＭＰは、超高用量において上昇した。２つの高用量（図６および図７）において、レニンの減少傾向が見られた。ＡＳＢＮＰ．１ポリペプチドの全身投与は、糸球体ろ過量、腎血流量、または平均動脈圧（図８〜図１０）に対する作用を有しなかった。
【００６８】
これらの結果は、ＡＳＢＮＰ．１ポリペプチドが腎臓に対する明確な作用を有し、全身の血圧に作用する能力を欠くことを実証している。
【００６９】
以下の実験は、ＢＮＰ、ＡＳＢＮＰ、およびＡＳＢＮＰ．１ポリペプチドの作用を比較するために実施された。概要としては、合成された形状のＢＮＰ、ＡＳＢＮＰ、およびＡＳＢＮＰ．１が、ＨＵＶＥＣおよびＨＡＳＭＣに投与され、ｃＧＭＰ値が測定された。ＡＳＢＮＰ．１がｃＧＭＰに対する作用を有しない一方、ＡＳＢＮＰはこれらの細胞において最小作用を有した。これらの結果は、ウサギの前収縮させた動脈に投与された場合（図１３）、ＢＮＰと比較して、ＡＳＢＮＰおよびＡＳＢＮＰ．１は、作用を有しないということを実証している。
【００７０】
実施例２―ＣＨＦを有する哺乳動物におけるＡＳＢＮＰ．１ポリペプチドの生物学的作用
うっ血性心不全（ＣＨＦ）の心臓ペース制御されたイヌのモデルにおいて、静脈内ＡＢＮＰ．１注入の生物学的作用がテストされた。概要としては、１０頭のイヌが、プラグラム可能な心臓ペースメーカー（Ｍｅｄｔｒｏｎｉｃ、Ｍｉｎｎｅａｐｏｌｉｓ、ＭＮ）の外科的移植を受けた。術後の回復後、動物は１１日間の高頻度心室ペーシング（２４０拍／分）を受け、これは別の文献に記載されるように明らかなうっ血性心不全ＣＨＦを誘起することができる（Ｃｈｅｎら、Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ，１００：２４４３−２４４８（１９９９））。イヌに、２、１０、および１００ｐｍｏｌのＡＳＢＮＰ．１ポリペプチド調合液が静脈内注入された。すなわち、各イヌは、２、１０、および１００ｐｍｏｌのＡＳＢＮＰ．１ポリペプチド調合液の連続注入を受けた。
【００７１】
注入時に、急性の血行動態の検討が実施され、ベースライン時、および各注入時における群およびイヌ間の比較が行われた。尿流量、尿ナトリウム排泄量、遠位部分的管状ナトリウム再吸収率、近位管状部分的ナトリウム再吸収率、血漿ｃＧＭＰ値、レンニン値、糸球体ろ過量、腎血流量、平均動脈圧、尿ｃＧＭＰ排泄量、尿ＡＮＰ排泄量、尿ＢＮＰ排泄量、血漿ＢＮＰ値、血漿ＡＮＰ値、肺毛細血管楔入圧、心拍出量、体血管抵抗、アンジオテンシンＩＩ濃度、およびアルドステロン濃度が、別の文献に記載のとおりに測定された（Ｃｈｅｎら、Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｒｅｇｕｌ．Ｉｎｔｅｇｒ．Ｃｏｍｐ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．，２８８：Ｒ１０９３−Ｒ１０９７（２００５）、およびＨａｂｅｒら、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．Ｍｅｔａｂ．，２９：１３４９−１３５５（２００５））。ＡＳＢＮＰ．１ポリペプチドの、心臓ペース制御されたイヌに対する全身投与は、利尿作用を生じたが、ナトリウム利尿作用は生じなかった（図１５および図１６）。レニン値は、ウォッシュアウト期間を通して上昇した（図２０）。ＡＳＢＮＰ．１ポリペプチドの全身投与は、高レベルにおいて糸球体ろ過量を増加させた（図２１）。ＡＳＢＮＰ．１ポリペプチドの全身投与は、高レベルおよび超高レベルにおいて、尿ｃＧＭＰ排泄量（図２４）を増加させた。高レベルでは、尿ＡＮＰ排泄量（図２５）も増加した。超高レベルでは、尿ＢＮＰ排泄量も増加した（図２６）。心拍出量は、高レベルのポリペプチドの投与から減少し、実験の残りの間中減少を続けた（図３０）。全身血管抵抗は、高、超高、ウォッシュアウト、および回復１フェーズ（図３１）の間、上昇した。アルドステロンは、低レベルのポリペプチドの投与から増加し、実験の残りの間中増加を続けた（図３３）。遠位尿細管部分的ナトリウム再吸収率、近位管状部分的ナトリウム再吸収率、腎血流量、血漿ｃＧＭＰ、平均動脈圧、血漿ＢＮＰ、血漿ＡＮＰ、肺毛細血管楔入圧、またはアンジオテンシンＩＩ濃度（図１７、１８、１９、２２、２３、２８、２９、ａｎｄ ３２）に対しては作用を有しなかった。
【００７２】
これらの結果は、ＡＳＢＮＰ．１ポリペプチドが腎臓に対する作用（強化ＧＦＲを含む）を有し、ＣＨＦ動物における全身の血圧に作用する能力を欠くということを実証している。
【００７３】
別の実験において、ＡＳＢＮＰ．１ポリペプチド調合液がイヌに投与された（１００ｐｍｏｌ／ｋｇ／分、９０分間）。尿中のナトリウム排泄量、尿流量、平均動脈圧、腎血流量、肺毛細血管楔入圧、および心拍出量が、３０分、６０分、および９０分のＡＳＢＮＰ．１ポリペプチド投与時に測定された。ＡＳＢＮＰ．１ポリペプチド投与に続いて、３０分のウォッシュアウト期間がもうけられた。ウォッシュアウトは、通常の生理食塩水を投与することによって実施された。尿中のナトリウム排泄量、尿流量、平均動脈圧、腎血流量、肺毛細血管楔入圧、および心拍出量は、ウォッシュアウト期間後、およびＡＳＢＮＰ．１ポリペプチドの投与後の、２回の回復期間、６０分（回復１）および９０分（回復２）の各回後に、再度測定された。結果を図３４−３９に示す。ＡＳＢＮＰ．１ポリペプチドの、投与量１００ｐｍｏｌ／ｋｇ／分における９０分間の投与は、尿ナトリウム排出および尿流量を増加させることが観察された（図３４および３５）。平均動脈圧、腎血流量、または心拍出量には、有意な効果は観察されなかった（図３６、３７、および３９）。肺毛細血管楔入圧の低下が、ＡＳＢＮＰ．１ポリペプチド投与の６０分後、ＰＡＰ（肺動脈圧）またはＲＡＰ（右動脈圧）の変化を伴わずに観察された（図３８）。
【００７４】
実施例３―動物モデルを使用したＡＳＢＮＰ．１ポリペプチドの生物学的作用
ＡＳＢＮＰ．１注入の作用が、ＴＩＶＣＣモデル（肝硬変およびネフローゼに類似した症状を呈するナトリウム貯留のイヌのモデル）においてさらに評価される。別の文献に記載されるように、併用なしのナトリウム貯留および腹水の、心充満圧上昇を伴わないＴＩＶＣＣモデルである（Ｗｅｉら、Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．，２７３：Ｒ８３８−８４４（１９９７））。ＡＳＢＮＰ．１ポリペプチドは、ＴＩＶＣＣモデルにおいて、１００ｐｍｏｌ．ｋｇ／分を上限とする漸増用量を使用してテストされた。
【００７５】
実施例４―高頻度心室ペーシングによって産生される心不全を有するイヌにおける、放射線造影剤による腎症の誘起
ペントバルビタール麻酔下（３０ｍｇ／ｋｇ）で、左開胸ならびに心膜切除術により、心臓が露出され、ねじ込み式心外膜ペースメーカーのリードが、右心室に埋設される。ペースメーカーのリードは、胸部皮下に埋設されたペースメーカーと接続される。また、ペースメーカー埋設時、腎臓の血管から少なくとも６ｃｍ上部の大動脈内に、大腿動脈を経由してポリエチレンカテーテル（ＰＥ ２４０、Ｃｌａｙ Ａｄａｍｓ、米国、ニュージャージー州、Ｐａｒｓｉｐｐａｎｙ）が設置される。イヌは、３日間の期間回復させられ、この期間内に、イヌはクリンダマイシンおよびＣｏｍｂａｔｅｒによる抗生予防的治療を受ける。手術からの回復に続いて、ペースメーカーが毎分２５０拍にプログラムされ、ペーシングはこの速度で１０日間継続され、心不全が産生される。
【００７６】
ペーシング開始から１１日後の急性実験の日、放射線造影剤（Ｖａｓｃｏｒａｙ（登録商標）、Ｍａｌｌｉｎｋｒｏｄｔ、Ｉｎｃ．、米国、ミズーリー州、Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ）が、７ｍＬ／ｋｇの用量で、１０分間にわたり静脈内注入される。イヌは、別の文献に記載の造影剤による腎症の観測のため、６回にわたる一連の２４時間尿採取のために、代謝ケージに戻される（Ｍａｒｇｕｌｉｅｓら、Ｋｉｄｎｅｙ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，３８（６）：１１０１−８（１９９０））。
【００７７】
いくつかの実験において、放射線造影剤の投与前に、ＡＳＢＮＰ．１ポリペプチドが心臓ペース制御されたイヌに投与される。各イヌには、２、１０、および１００ｐｍｏｌのＡＳＢＮＰ．１ポリペプチドの連続注入、または１００ｐｍｏｌのＡＳＢＮＰ．１ポリペプチドの、１回の９０分間の注入が投与される。尿中のナトリウム排泄量、尿流量、平均動脈圧、腎血流量、肺毛細血管楔入圧、および心拍出量が、ウォッシュアウト期間後、ＡＳＢＮＰ．１ポリペプチドの投与の３０分後、６０分後、および９０分後、およびウォッシュアウト期間に続く２回の回復期間の各期間中に、に測定された。臨床的指標の測定は、放射線造影剤の投与前にＡＳＢＮＰ．１を投与されていない、対照のイヌから得られた測定値と比較される。
【００７８】
実施例５―ＣＨＦを有する患者を含む、高い危険を有する患者における造影剤による腎不全の予防
画像化（例えば、血管造影法またはＣＴ）のために造影を必要とする、造影剤に起因する腎症（ｃｏｎｔｒａｓｔ−ｉｎｄｕｃｅｄ ｎｅｐｈｒｏｐｈａｔｈｙ，ＣＩＮ）の高い危険がある患者（例えば、高齢の患者および慢性腎不全、糖尿病、および心不全の危険性がある患者）が、造影剤の投与前のＡＳＢＮＰポリペプチドまたはＡＳＢＮＰ．１ポリペプチドの静脈注入によって、予防的に治療される。注入前に、バイタルサインが測定され、電気分解、血清中クレアチニン、シスタチン、およびＢＮＰポリペプチド値を測定するために臨床検査が実施される。ＡＳＢＮＰポリペプチドを検出するＢｉｏｓｉｔｅ ＢＮＰアッセイを使用して、および／またはＡＳＢＮＰポリペプチドに特異的なアッセイを使用して、ＢＮＰポリペプチド値を取得する。ベースライン尿排出量が測定され、尿電気分解が評価される。造影剤投与前に、ＡＳＢＮＰポリペプチド、ＡＳＢＮＰ．１ポリペプチド、または誘導体の静脈内注入が開始される。バイタルサインおよび尿排出量が、注入中２時間毎に評価される。開始から所定の時間後に、患者は造影剤投与を受ける。この時間は、ポリペプチドの特異的なアッセイによって測定されるポリペプチド値の一定の濃度の達成と同時であり得る。造影剤投与に続き、注入は８時間〜２４時間、または血清中クレアチニンおよび／またはシスタチンがベースラインから変化しないと認められるまで継続される。
【００７９】
実施例６―心腎臓症候群の治療
急性非代償性心不全環境において、利尿耐性を伴う腎機能の悪化を発現している患者が、ＡＳＢＮＰポリペプチドまたはＡＳＢＮＰ．１ポリペプチドの静脈注入によって、予防的に治療される。注入前に、バイタルサインが測定され、電気分解、血清中クレアチニン、シスタチン、およびＢＮＰポリペプチド値を測定するために臨床検査が実施される。ベースライン尿排出量が測定され、尿電気分解が評価される。ＡＳＢＮＰポリペプチド、ＡＳＢＮＰ．１ポリペプチド、またはそれらの誘導体の静脈内注入が開始される。バイタルサインおよび尿排出量は、注入中２時間毎、１２時間〜７２時間の期間にわたって評価される。薬物濃度、ＢＮＰポリペプチド値、血清中クレアチニン、シスタチン、および血漿および尿電気分解は、注入中にわたり、毎日評価される。
【００８０】
他の実施形態
本発明は、その詳細な記述とあわせて記載されたが、上記の記述は、説明を意図するものであり、本発明の範囲を限定するものではないと理解されたい。本発明の範囲は、添付の請求項の範囲によって定義される。他の側面、長所、および変更は、下記の請求項の範囲内にあるものとする。
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、２００７年６月１３日に出願された、米国特許仮出願第６０／９３４，５８４号および２００６年８月８日に出願された米国特許仮出願第６０／８３６，５８１号に対して優先権を主張する。
【０００２】
１．技術分野
本書は、利尿ポリペプチドおよびナトリウム利尿ポリペプチド等の方法ならびに材料に関する。例えば、本書は、血圧を低下させる能力を有さない一方で、利尿作用およびナトリウム利尿作用を有することができるポリペプチドに関する。
【背景技術】
【０００３】
２．背景情報
ナトリウム利尿ポリペプチド群のメンバーは、体液のホメオスタシスを制御するホルモンである。心房性ナトリウム利尿ペプチド（ＡＮＰ）は、増加する血管内容量に対応して、心房性細胞から分泌される。一旦ＡＮＰが循環血液中に入ると、主に腎臓、血管組織、および副腎に影響が及び、その作用は腎臓によるナトリウムおよび水の排出と、血管内容量および血圧の低下をもたらす。ＢＮＰもまた心筋細胞に由来し、ＡＮＰ同様、ヒト血漿内で循環する。ＢＮＰは、ナトリウム利尿性、レンニン阻害性、血管拡張性、および拡張機能性を有する。ＢＮＰの主な循環型および貯蔵型は、リング構造を有する３２アミノ酸ポリペプチドである。ＢＮＰの生理作用は、グアニル酸シクラーゼ結合の受容体である、ナトリウム利尿ペプチド受容体Ａ（ＮＰＲ−Ａ）によって媒介される。ＢＮＰのクリアランスは、ＢＰＮを循環から取り除くＮＰＲ−Ｃ受容体によって促進される。ＢＮＰはまた、中性エンドペプチダーゼによる酵素的切断によって分解される。Ｃ型ナトリウム利尿ペプチド（ＣＮＰ）は、内皮細胞由来であり、血管拡張および増殖阻害ポリペプチドとして機能する。Ｄｅｎｄｒｏａｓｐｉｓ ナトリウム利尿ペプチド（ＤＮＰ）は、ＡＮＰ、ＢＮＰ、およびＣＮＰと類似の構造であり、デンドアスピス・アンガスチセプ（Ｄｅｎｄｏａｓｐｉｓ ａｎｇｕｓｔｉｃｅｐ）、すなわちグリーンマンバ蛇の毒液から単離される。
【発明の概要】
【０００４】
概要
本書は、利尿ポリペプチドおよびナトリウム利尿ポリペプチドに関する。例えば、本書は、利尿作用およびナトリウム利尿作用を有するポリペプチドを提供する。利尿作用を有するポリペプチドは、高血圧、腎臓病、肝硬変、うっ血性心不全、またはあらゆる体液過剰状態の治療のため、医療的に使用することができる。ナトリウム利尿作用を有するポリペプチドは、体内からのナトリウムの除去を増加させることができ、高血圧、腎臓病、肝硬変、うっ血性心不全、またはあらゆるナトリウム過剰状態の治療のため、医療的に使用することができる。
【０００５】
いくつかの場合において、本願において提供されるポリペプチドは、血圧を低下させる能力を有さない一方で、利尿作用およびナトリウム利尿作用を有することができる。いくつかの場合において、本願において提供されるポリペプチドは、検出可能なナトリウム利尿効果を誘起することなく、検出可能な利尿効果を誘起するという条件の下で、また、糸球体ろ過量に影響を及ぼす一方で、うっ血性心不全を有する哺乳動物に投与することができる。
【０００６】
概して、本書の一側面は、実質的に純粋な、３７〜４７アミノ酸残基の長さであるポリペブチドを特徴とし、該ポリペプチドは、（ａ）配列番号：１に記載の、または（ｂ）５つ以下のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列する（ａｌｉｇｎ）アミノ酸配列を含むか、または本質的にこれから成る。ポリペプチドの長さは、３８〜４６アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、３９〜４５アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、４０〜４４アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、４１〜４３アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、４２アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、３７アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、４７アミノ酸残基であることができる。アミノ酸配列は、配列番号：１に記載のアミノ酸配列であることができる。アミノ酸配列は、４つ以下のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。アミノ酸配列は、３つ以下のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。アミノ酸配列は、２つ以下のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。アミノ酸配列は、１つ以下のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。アミノ酸配列は、５つ以下のアミノ酸の付加を伴って、配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。アミノ酸配列は、５つ以下のアミノ酸の欠失を伴って、配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。アミノ酸配列は、５つ以下のアミノ酸の置換を伴って、配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。ポリペプチドの長さは、４２アミノ酸残基であることができ、アミノ酸配列は、配列番号：１に記載のアミノ酸配列である。ポリペプチドは、利尿作用およびナトリウム利尿作用を有することができる。ポリペプチドは、哺乳動物において、血圧を下げる能力に欠け得る。哺乳動物とは、ヒトまたはイヌであることができる。
【０００７】
別の側面において、本書は、実質的に純粋な、４５〜６５アミノ酸残基の長さであるポリペプチドを特徴とし、該ポリペプチドは、（ａ）配列番号：１に記載の、または（ｂ）５つ以下のアミノ酸の欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列する第１アミノ酸配列を含むか、または本質的にこれから成り、該ポリペプチドは、（ａ）配列番号：２に記載の、または（ｂ）（ｉ）５つ以下のアミノ酸の付加、置換、またはそれらの組み合わせであって、ただし付加または置換は、システイン残基の存在という結果を生じないもの、または（ｉｉ）１５以下のアミノ酸の欠失を伴って配列番号：２に記載の配列に整列する第２アミノ酸配列を含む。ポリペプチドの長さは、５８〜６３アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、６０アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、４５アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドは、６５アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの配列は、配列番号：３に記載の配列であることができる。ポリペプチドは、利尿作用およびナトリウム利尿作用を有することができる。
【０００８】
別の側面において、本書は、３７〜４７アミノ酸残基の長さであるポリペブチドをコードする単離核酸を特徴とし、該ポリペプチドは、（ａ）配列番号：１に記載の、または（ｂ）５つ以下のアミノ酸の欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列するアミノ酸配列を含むか、または本質的にこれから成る。ポリペプチドの長さは、３８〜４６アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、３９〜４５アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、４０〜４４アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、４１〜４３アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、４２アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、３７アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、４７アミノ酸残基であることができる。アミノ酸配列は、配列番号：１に記載のアミノ酸配列であることができる。アミノ酸配列は、４つ以下のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。アミノ酸配列は、３つ以下のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。アミノ酸配列は、２つ以下のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。アミノ酸配列は、１つ以下のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。アミノ酸配列は、５つ以下のアミノ酸の付加を伴って、配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。アミノ酸配列は、５つ以下のアミノ酸の欠失を伴って、配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。アミノ酸配列は、５つ以下のアミノ酸の置換を伴って、配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。ポリペプチドの長さは、４２アミノ酸残基であることができ、アミノ酸配列は、配列番号：１に記載のアミノ酸配列である。ポリペプチドは、利尿作用およびナトリウム利尿作用を有することができる。ポリペプチドは、哺乳動物において、血圧を下げる能力に欠け得る。哺乳動物とは、ヒトまたはイヌであることができる。
【０００９】
別の側面において、本書は、４５〜６５アミノ酸残基の長さであるポリペプチドをコードする単離核酸を特徴とし、該ポリペプチドは、（ａ）配列番号：１に記載の、または（ｂ）５つ以下のアミノ酸の欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列する第１アミノ酸配列を含むか、または本質的にこれから成り、該ポリペプチドは、（ａ）配列番号：２に記載の、または（ｂ）（ｉ）５つ以下のアミノ酸の付加、置換、またはそれらの組み合わせであって、ただし、付加または置換は、システイン残基の存在という結果を生じないもの、または（ｉｉ）１５以下のアミノ酸の欠失を伴って配列番号：２に記載の配列に整列する第２アミノ酸配列を含む。ポリペプチドの長さは、５８〜６３アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、６０アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、４５アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドは、６５アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの配列は、配列番号：３に記載の配列であることができる。ポリペプチドは、利尿作用およびナトリウム利尿作用を有することができる。
【００１０】
別の側面において、本書は、３７〜４７アミノ酸残基の長さであるポリペブチドをコードする核酸を含むベクターを特徴とし、該ポリペプチドは、（ａ）配列番号：１に記載の、または（ｂ）５つ以下のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列するアミノ酸配列を含むか、または本質的にこれから成る。ポリペプチドの長さは、３８〜４６アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、３９〜４５アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、４０〜４４アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、４１〜４３アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、４２アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、３７アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、４７アミノ酸残基であることができる。アミノ酸配列は、配列番号：１に記載のアミノ酸配列であることができる。アミノ酸配列は、４つ以下のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。アミノ酸配列は、３つ以下のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。アミノ酸配列は、２つ以下のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。アミノ酸配列は、１つ以下のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。アミノ酸配列は、５つ以下のアミノ酸の付加を伴って、配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。アミノ酸配列は、５つ以下のアミノ酸の欠失を伴って、配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。アミノ酸配列は、５つ以下のアミノ酸の置換を伴って、配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。ポリペプチドの長さは、４２アミノ酸残基であることができ、アミノ酸配列は、配列番号：１に記載のアミノ酸配列である。ポリペプチドは、利尿作用およびナトリウム利尿作用を有することができる。ポリペプチドは、哺乳動物において、血圧を下げる能力に欠け得る。哺乳動物とは、ヒトまたはイヌであることができる。
【００１１】
別の側面において、本書は、４５〜６５アミノ酸残基の長さであるポリペプチドをコードする核酸を含むベクターを特徴とし、該ポリペプチドは、（ａ）配列番号：１に記載の、または（ｂ）５つ以下のアミノ酸の欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列する第１アミノ酸配列を含むか、または本質的にこれから成り、該ポリペプチドは、（ａ）配列番号：２に記載の、または（ｂ）（ｉ）５つ以下のアミノ酸の付加、置換、またはそれらの組み合わせであって、ただし、付加または置換は、システイン残基の存在という結果を生じないもの、または（ｉｉ）１５以下のアミノ酸の欠失を伴って配列番号：２に記載の配列に整列する第２アミノ酸配列を含む。ポリペプチドの長さは、５８〜６３アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、６０アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、４５アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドは、６５アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの配列は、配列番号：３に記載の配列であることができる。ポリペプチドは、利尿作用およびナトリウム利尿作用を有することができる。
【００１２】
別の側面において、本書は、３７〜４７アミノ酸残基の長さであるポリペブチドをコードする核酸を含む宿主細胞を特徴とし、該ポリペプチドは、（ａ）配列番号：１に記載の、または（ｂ）５つ以下のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列するアミノ酸配列を含むか、または本質的にこれから成る。ポリペプチドの長さは、３８〜４６アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、３９〜４５アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、４０〜４４アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、４１〜４３アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、４２アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、３７アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、４７アミノ酸残基であることができる。アミノ酸配列は、配列番号：１に記載のアミノ酸配列であることができる。アミノ酸配列は、４つ以下のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。アミノ酸配列は、３つ以下のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。アミノ酸配列は、２つ以下のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。アミノ酸配列は、１つ以下のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。アミノ酸配列は、５つ以下のアミノ酸の付加を伴って、配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。アミノ酸配列は、５つ以下のアミノ酸の欠失を伴って、配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。アミノ酸配列は、５つ以下のアミノ酸の置換を伴って、配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。ポリペプチドの長さは、４２アミノ酸残基であることができ、アミノ酸配列は、配列番号：１に記載のアミノ酸配列である。ポリペプチドは、利尿作用およびナトリウム利尿作用を有することができる。ポリペプチドは、哺乳動物において、血圧を下げる能力を欠き得る。哺乳動物とは、ヒトまたはイヌであることができる。宿主細胞は、真核生物宿主細胞であることができる。
【００１３】
別の側面において、本書は、４５〜６５アミノ酸残基の長さであるポリペプチドをコードする核酸を含む宿主細胞を特徴とし、該ポリペプチドは、（ａ）配列番号：１に記載の、または（ｂ）５つ以下のアミノ酸の欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列する第１アミノ酸配列を含むか、または本質的にこれから成り、該ポリペプチドは、配列番号：２に記載の、または（ｂ）（ｉ）５つ以下のアミノ酸の付加、置換、またはそれらの組み合わせであって、ただし、付加または置換は、システイン残基の存在という結果を生じないもの、または（ｉｉ）１５以下のアミノ酸の欠失を伴って配列番号：２に記載の配列に整列する第２アミノ酸配列を含む。ポリペプチドの長さは、５８〜６３アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、６０アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、４５アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドは、６５アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの配列は、配列番号：３に記載の配列であることができる。ポリペプチドは、利尿作用およびナトリウム利尿作用を有することができる。宿主細胞は、真核生物宿主細胞であることができる。
【００１４】
別の側面において、本書は、薬学的に許容される担体および３７〜４７アミノ酸残基の長さであるポリペブチドを含む薬学的組成を特徴とし、該ポリペプチドは、（ａ）配列番号：１に記載の、または（ｂ）５つ以下のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列するアミノ酸配列を含むか、または本質的にこれから成る。ポリペプチドの長さは、３８〜４６アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、３９〜４５アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、４０〜４４アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、４１〜４３アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、４２アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、３７アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、４７アミノ酸残基であることができる。アミノ酸配列は、配列番号：１に記載のアミノ酸配列であることができる。アミノ酸配列は、４つ以下のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。アミノ酸配列は、３つ以下のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。アミノ酸配列は、２つ以下のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。アミノ酸配列は、１つ以下のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。アミノ酸配列は、５つ以下のアミノ酸の付加を伴って、配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。アミノ酸配列は、５つ以下のアミノ酸の欠失を伴って、配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。アミノ酸配列は、５つ以下のアミノ酸の置換を伴って、配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。ポリペプチドの長さは、４２アミノ酸残基であることができ、アミノ酸配列は、配列番号：１に記載のアミノ酸配列である。ポリペプチドは、利尿作用およびナトリウム利尿作用を有することができる。ポリペプチドは、哺乳動物において、血圧を下げる能力を欠き得る。哺乳動物とは、ヒトまたはイヌであることができる。
【００１５】
別の側面において、本書は、薬学的に許容される担体および４５〜６５アミノ酸残基の長さであるポリペプチドを含む薬学的組成を特徴とし、該ポリペプチドは、（ａ）配列番号：１に記載の、または（ｂ）５つ以下のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列する第１アミノ酸配列を含むか、または本質的にこれから成り、該ポリペプチドは、（ａ）配列番号：２に記載の、または（ｂ）（ｉ）５つ以下のアミノ酸の付加、置換、またはそれらの組み合わせであって、ただし、付加または置換は、システイン残基の存在という結果を生じないもの、または（ｉｉ）１５以下のアミノ酸の欠失を伴って配列番号：２に記載の配列に整列する第２アミノ酸配列を含む。ポリペプチドの長さは、５８〜６３アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、６０アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、４５アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドは、６５アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの配列は、配列番号：３に記載の配列であることができる。ポリペプチドは、利尿作用およびナトリウム利尿作用を有することができる。
【００１６】
別の側面において、本書は、哺乳動物において、血圧を低下させることなく利尿作用およびナトリウム利尿作用を増大させるための方法を特徴する。該方法は、哺乳動物にポリペプチドを投与するステップを含むか、または本質的にこれから成り、該ポリペプチドは、３７〜４７アミノ酸残基の長さであり、該ポリペプチドは、（ａ）配列番号：１に記載の、または（ｂ）５つ以下のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列するアミノ酸配列を含むか、または本質的にこれから成る。ポリペプチドの長さは、３８〜４６アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、３９〜４５アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、４０〜４４アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、４１〜４３アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、４２アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、３７アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、４７アミノ酸残基であることができる。アミノ酸配列は、配列番号：１に記載のアミノ酸配列であることができる。アミノ酸配列は、４つ以下のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。アミノ酸配列は、３つ以下のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。アミノ酸配列は、２つ以下のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。アミノ酸配列は、１つ以下のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。アミノ酸配列は、５つ以下のアミノ酸の付加を伴って、配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。アミノ酸配列は、５つ以下のアミノ酸の欠失を伴って、配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。アミノ酸配列は、５つ以下のアミノ酸の置換を伴って、配列番号：１に記載のアミノ酸配列に整列することができる。ポリペプチドの長さは、４２アミノ酸残基であることができ、アミノ酸配列は、配列番号：１に記載のアミノ酸配列である。ポリペプチドは、利尿作用およびナトリウム利尿作用を有することができる。ポリペプチドは、哺乳動物において、血圧を下げる能力を欠き得る。哺乳動物とは、ヒトまたはイヌであることができる。
【００１７】
別の側面において、本書は、哺乳動物において、血圧を低下させることなく利尿作用およびナトリウム利尿作用を増大させるための方法を特徴とする。該方法は、哺乳動物にポリペプチドを投与するステップを含むか、または本質的にこれから成り、該ポリペプチドは、４５〜６５アミノ酸残基の長さであり、該ポリペプチドは、（ａ）配列番号：１に記載の、または（ｂ）５つ以下のアミノ酸の欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列する第１アミノ酸配列を含むか、または本質的にこれから成り、該ポリペプチドは、（ａ）配列番号：２に記載の、または（ｂ）（ｉ）５つ以下のアミノ酸の付加、置換、またはそれらの組み合わせであって、ただし、付加または置換は、システイン残基の存在という結果を生じないもの、または（ｉｉ）１５以下のアミノ酸の欠失を伴って配列番号：２に記載の配列に整列する第２アミノ酸配列を含む。ポリペプチドの長さは、５８〜６３アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、６０アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの長さは、４５アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドは、６５アミノ酸残基であることができる。ポリペプチドの配列は、配列番号：３に記載の配列であることができる。ポリペプチドは、利尿作用およびナトリウム利尿作用を有することができる。
【００１８】
別の側面において、本書は、腎機能障害を有する哺乳動物を治療するための方法を特徴とする。該方法は、腎機能障害の症状の重症度の軽減を条件として、哺乳動物にポリペプチドを投与するステップを含むか、または本質的にこれから成る。哺乳動物とは、ヒトであることができる。腎機能障害は、腎不全を含むことができる。腎機能障害は、うっ血性心不全を伴う腎不全を含むことができる。ポリペプチドは、静脈内、経口的、または鼻腔内に投与されることができる。ポリペプチドは、徐放製剤として投与されることができる。ポリペプチドは、３７〜４７アミノ酸残基の長さであることができ、配列番号：１に記載のアミノ酸配列を含むことができる。ポリペプチドは、３７〜４７アミノ酸残基の長さであることができ、５つ以下のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列するアミノ酸配列を含むことができる。ポリペプチドは、４５〜６５アミノ酸残基の長さであることができ、（ｉ）配列番号：１に記載の第１アミノ酸配列と、（ｉｉ）配列番号：２に記載の第２アミノ酸配列を含むことができる。ポリペプチドは、４５〜６５アミノ酸残基の長さであることができ、５つ以下のアミノ酸の欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列する、第１アミノ酸配列と、配列番号：２に記載の第２アミノ酸配列を含むことができる。ポリペプチドは、４５〜６５アミノ酸残基の長さであって、ポリペプチドの配列は、配列番号：１に記載の第１アミノ酸配列を含むことができ、（ｉ）５つ以下のアミノ酸の付加、置換、またはそれらの組み合わせであって、ただし、付加または置換は、システイン残基の存在という結果を生じないもの、または（ｉｉ）１５以下のアミノ酸の欠失を伴って配列番号：２に記載の配列に整列する第２アミノ酸配列を含むことができる。ポリペプチドは、４５〜６５アミノ酸残基の長さであって、５つ以下のアミノ酸の欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列する、第１アミノ酸配列を含み、（ｉ）５つ以下のアミノ酸の付加、置換、またはそれらの組み合わせであって、ただし、付加または置換は、システイン残基の存在という結果を生じないもの、または（ｉｉ）１５以下のアミノ酸の欠失を伴って配列番号：２に記載の配列に整列する第２アミノ酸配列を含む。症状とは、血清クレアチニン値異常、尿流量異常、レニン値異常、糸球体ろ過量異常、尿ｃＧＭＰ排泄率異常、尿ＡＮＰ排泄率異常、尿ＢＮＰ排泄率異常、心拍出量異常、体血管抵抗異常、またはアルドステロン値異常を含むことができる。症状は、尿流量の減少を含むことができ、哺乳動物の尿流量は、投与ステップ後、少なくとも５０％増加する。症状は、レニン値の低下を含むことができ、哺乳動物のレニン値は、投与ステップ後、少なくとも５０％増加する。症状は、糸球体ろ過量の減少を含むことができ、哺乳動物の糸球体ろ過量は、投与ステップ後、少なくとも５０％増加する。症状は、尿ｃＧＭＰ排泄率の低下を含むことができ、哺乳動物の尿ｃＧＭＰ排泄率は、投与ステップ後、少なくとも２５％増加する。症状は、尿ＡＮＰ排泄率の低下を含むことができ、哺乳動物の尿ＡＮＰ排泄率は、投与ステップ後、少なくとも２５％増加する。症状は、尿ＢＮＰ排泄率の低下を含むことができ、哺乳動物の尿ＢＮＰ排泄率は、投与ステップ後、少なくとも２５％増加する。症状は、心拍出量の増加を含むことができ、哺乳動物の心拍出量は、投与ステップ後、少なくとも２％減少する。症状は、体血管抵抗の低下を含むことができ、哺乳動物の体血管抵抗は、投与ステップ後、少なくとも１０％増加する。症状は、アルドステロン値の低下を含むことができ、哺乳動物のアルドステロン値は、投与ステップ後、少なくとも１０％増加する。
【００１９】
別の側面において、本書は、炎症状態を有する哺乳動物を治療するための方法を特徴とする。該方法は、炎症状態の症状の重症度の軽減を条件として、哺乳動物にポリペプチドを投与するステップを含むか、または本質的にこれから成る。哺乳動物とは、ヒトであることができる。ポリペプチドは、静脈内、経口的、または鼻腔内に投与されることができる。ポリペプチドは、徐放製剤として投与されることができる。ポリペプチドは、３７〜４７アミノ酸残基の長さであることができ、配列番号：１に記載のアミノ酸配列を含むことができる。ポリペプチドは、３７〜４７アミノ酸残基の長さであることができ、５つ以下のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列するアミノ酸配列を含む。ポリペプチドは、４５〜６５アミノ酸残基の長さであることができ、（ｉ）配列番号：１に記載の第１アミノ酸配列と、（ｉｉ）配列番号：２に記載の第２アミノ酸配列を含むことができる。ポリペプチドは、４５〜６５アミノ酸残基の長さであることができ、５つ以下のアミノ酸欠損、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列する第１アミノ酸配列と、配列番号：２に記載の第２アミノ酸配列を含む。ポリペプチドは、４５〜６５アミノ酸残基の長さであることができ、配列番号：１に記載の第１アミノ酸配列と、（ｉ）５つ以下のアミノ酸の付加、置換、またはそれらの組み合わせであって、ただし、付加または置換は、システイン残基の存在という結果を生じないもの、または（ｉｉ）１５以下のアミノ酸の欠失を伴って配列番号：２に記載の配列に整列する第２アミノ酸配列とを含むことができる。ポリペプチドは、４５〜６５アミノ酸残基の長さであって、５つ以下のアミノ酸の欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列する第１アミノ酸配列を含み、（ｉ）５つ以下のアミノ酸の付加、置換、またはそれらの組み合わせであって、ただし、付加または置換は、システイン残基の存在という結果を生じないもの、または（ｉｉ）１５以下のアミノ酸の欠失を伴って配列番号：２に記載の配列に整列する第２アミノ酸配列とを含む。
【００２０】
別の側面において、本書は、心機能障害を有する哺乳動物を治療するための方法を特徴とし、該方法は、心機能障害の重症度の軽減を条件として、哺乳動物にポリペプチドを投与するステップを含むか、または本質的にこれから成る。哺乳動物とは、ヒトであることができる。心機能障害は、心不全を含むことができる。心機能障害は、腎不全を伴う、うっ血性心不全を含むことができる。ポリペプチドは、静脈内、経口的、または鼻腔内に投与されることができる。ポリペプチドは、徐放製剤として投与されることができる。ポリペプチドは、３７〜４７アミノ酸残基の長さであることができ、配列番号：１に記載のアミノ酸配列を含むことができる。ポリペプチドは、３７〜４７アミノ酸残基の長さであることができ、５つ以下のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列するアミノ酸配列を含むことができる。ポリペプチドは、４５〜６５アミノ酸残基の長さであることができ、（ｉ）配列番号：１に記載の第１アミノ酸配列と、（ｉｉ）配列番号：２に記載の第２アミノ酸配列を含むことができる。ポリペプチドは、４５〜６５アミノ酸残基の長さであって、５つ以下のアミノ酸の欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列する第１アミノ酸配列と、配列番号：２に記載の第２アミノ酸配列を含むことができる。ポリペプチドは、４５〜６５アミノ酸残基の長さであって、配列番号：１に記載の第１アミノ酸配列と、（ｉ）５つ以下のアミノ酸の付加、置換、またはそれらの組み合わせであって、ただし、付加または置換は、システイン残基の存在という結果を生じないもの、または（ｉｉ）１５以下のアミノ酸の欠失を伴って配列番号：２に記載の配列に整列する第２アミノ酸配列とを含む。ポリペプチドは、４５〜６５アミノ酸残基の長さであって、５以下のアミノ酸の欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列する第１アミノ酸配列を含み、（ｉ）５つ以下のアミノ酸の付加、置換、またはそれらの組み合わせであって、ただし、付加または置換は、システイン残基の存在という結果を生じないもの、または（ｉｉ）１５以下のアミノ酸の欠失を伴って配列番号：２に記載の配列に整列する第２アミノ酸配列を含む。
【００２１】
別様に定義されない限り、本願において使用される全ての技術用語および科学用語は、本発明が関係する当業者によって広く理解されているものと同一の意味を有する。本発明の実施において、本願に記載の方法および材料に類似のまたは同等のものが使用されることができるが、適切な方法および材料が下記に記載される。本願において言及される、全ての、出版物、特許出願、特許、および他の参考文献は、参照によって全体として本願に組み込まれる。不一致が生じた場合、定義を含む本願明細書が優先する。また、材料、方法、および実施例は説明のみを目的とし、制限を意図するものではない。
【００２２】
本発明の一以上の実施形態の詳細は、添付の図面および下記の説明に記載される。本発明の他の特徴、目的、および長所は、該説明および図面、ならびに請求項により明白である。
【図面の簡単な説明】
【００２３】
【図１】６０アミノ酸残基の長さであるＡＳＢＮＰポリペプチド（配列番号：４）、４２アミノ酸残基の長さであるＡＳＢＮＰ．１ポリペプチド（配列番号：１）、６０アミノ酸残基の長さである、アラニンが４３の位置にあるＡＳＢＮＰ．２ポリペプチド（配列番号：３）の概略図である。４３の位置にあるアラニンから６０の位置にあるロイシンまでのＡＳＢＮＰ．２の配列は、１８アミノ酸残基の長さ（配列番号：２）である。ＡＳＢＮＰ（ＢＮＰ２ともいう）は、選択的スプライシングによって発生したＢＮＰの異型である。
【図２】図に示すようにＡＳＢＮＰ．１で治療されたイヌの尿流量を示す棒グラフである。ベースラインは投与前、低は２ｐｍｏｌ、高は１０ｐｍｏｌ、超高は１００ｐｍｏｌ、回復１は第１の回復期、回復２は第２の回復期である。
【図３】図に示すようにＡＳＢＮＰ．１で治療されたイヌの尿ナトリウム排出量を示す棒グラフである。ベースラインは投与前、低は２ｐｍｏｌ、高は１０ｐｍｏｌ、超高は１００ｐｍｏｌ、回復１は第１の回復期、回復２は第２の回復期である。
【図４】図に示すようにＡＳＢＮＰ．１で治療されたイヌの遠位分別管ナトリウム再吸収率を示す棒グラフである。ベースラインは投与前、低は２ｐｍｏｌ、高は１０ｐｍｏｌ、超高は１００ｐｍｏｌ、回復１は第１の回復期、回復２は第２の回復期である。
【図５】図に示すようにＡＳＢＮＰ．１で治療されたイヌの近位分別管ナトリウム再吸収率を示す棒グラフである。ベースラインは投与前、低は２ｐｍｏｌ、高は１０ｐｍｏｌ、超高は１００ｐｍｏｌ、回復１は第１の回復期である。
【図６】図に示すようにＡＳＢＮＰ．１で治療されたイヌの血漿ｃＧＭＰ値を示す棒グラフである。ベースラインは投与前、低は２ｐｍｏｌ、高は１０ｐｍｏｌ、超高は１００ｐｍｏｌ、回復１は第１の回復期、回復２は第２の回復期である。
【図７】図に示すようにＡＳＢＮＰ．１で治療されたイヌの血漿レニン活性を示す棒グラフである。ベースラインは投与前、低は２ｐｍｏｌ、高は１０ｐｍｏｌ、超高は１００ｐｍｏｌ、回復１は第１の回復期、回復２は第２の回復期である。
【図８】図に示すようにＡＳＢＮＰ．１で治療されたイヌの糸球体ろ過量を示す棒グラフである。ベースラインは投与前、低は２ｐｍｏｌ、高は１０ｐｍｏｌ、超高は１００ｐｍｏｌ、回復１は第１の回復期、回復２は第２の回復期である。
【図９】図に示すようにＡＳＢＮＰ．１で治療されたイヌの腎血流量を示す棒グラフである。ベースラインは投与前、低は２ｐｍｏｌ、高は１０ｐｍｏｌ、超高は１００ｐｍｏｌ、回復１は第１の回復期、回復２は第２の回復期である。
【図１０】図に示すようにＡＳＢＮＰ．１で治療されたイヌの平均動脈圧値を示す棒グラフである。ベースラインは投与前、低は２ｐｍｏｌ、高は１０ｐｍｏｌ、超高は１００ｐｍｏｌ、回復１は第１の回復期、回復２は第２の回復期である。
【図１１】図に示す濃度のＢＮＰ、ＡＳＢＮＰ、またはＡＳＢＮＰ．１で治療したＨＵＶＥＣＳにおける、ｃＧＭＰ値を示す棒グラフである。ＯＸは酸化、非ＯＸは非酸化を示す。
【図１２】図に示す濃度のＢＮＰ、ＡＳＢＮＰ、またはＡＳＢＮＰ．１で治療したＨＡＳＭＣＳにおける、ｃＧＭＰ値を示す棒グラフである。ＯＸは酸化、非ＯＸは非酸化を示す。
【図１３】図に示す濃度のＢＮＰ、ＡＳＢＮＰ、またはＡＳＢＮＰ．１で治療されたウサギの血管輪から取得された、血管活性測定値を示す線グラフである。
【図１４】ＡＳＢＮＰ．１ポリペプチドをコードすることができる核酸配列（配列番号：５）と、ＡＳＢＮＰ．２ポリペプチドをコードすることができる核酸配列（配列番号：６）を含む。
【図１５】図に示すようにＡＳＢＮＰ．１で治療された、心臓ペース制御されたイヌの尿流量を示す棒グラフである。ベースラインは投与前、低は２ｐｍｏｌ、高は１０ｐｍｏｌ、超高は１００ｐｍｏｌ、回復１は第１の回復期、回復２は第２の回復期である。
【図１６】図に示すようにＡＳＢＮＰ．１で治療された、心臓ペース制御されたイヌの尿ナトリウム排出量を示す棒グラフである。ベースラインは投与前、低は２ｐｍｏｌ、高は１０ｐｍｏｌ、超高は１００ｐｍｏｌ、回復１は第１の回復期、回復２は第２の回復期である。
【図１７】図に示すようにＡＳＢＮＰ．１で治療された、心臓ペース制御されたイヌの遠位分別管ナトリウム再吸収率を示す棒グラフである。ベースラインは投与前、低は２ｐｍｏｌ、高は１０ｐｍｏｌ、超高は１００ｐｍｏｌ、回復１は第１の回復期、回復２は第２の回復期である。
【図１８】図に示すようにＡＳＢＮＰ．１で治療された、心臓ペース制御されたイヌの近位分別管ナトリウム再吸収率を示す棒グラフである。ベースラインは投与前、低は２ｐｍｏｌ、高は１０ｐｍｏｌ、超高は１００ｐｍｏｌ、回復１は第１の回復期、回復２は第２の回復期である。
【図１９】図に示すようにＡＳＢＮＰ．１で治療された、心臓ペース制御されたイヌの血漿ｃＧＭＰ値を示す棒グラフである。ベースラインは投与前、低は２ｐｍｏｌ、高は１０ｐｍｏｌ、超高は１００ｐｍｏｌ、回復１は第１の回復期、回復２は第２の回復期である。
【図２０】図に示すようにＡＳＢＮＰ．１で治療された、心臓ペース制御されたイヌの血漿レニン活性（ｎｇ／ｍＬ／時間）を示す棒グラフである。ベースラインは投与前、低は２ｐｍｏｌ、高は１０ｐｍｏｌ、超高は１００ｐｍｏｌ、回復１は第１の回復期、回復２は第２の回復期である。
【図２１】図に示すようにＡＳＢＮＰ．１で治療された、心臓ペース制御されたイヌの糸球体ろ過量を示す棒グラフである。ベースラインは投与前、低は２ｐｍｏｌ、高は１０ｐｍｏｌ、超高は１００ｐｍｏｌ、回復１は第１の回復期、回復２は第２の回復期である。
【図２２】図に示すようにＡＳＢＮＰ．１で治療された、心臓ペース制御されたイヌの腎血流量を示す棒グラフである。ベースラインは投与前、低は２ｐｍｏｌ、高は１０ｐｍｏｌ、超高は１００ｐｍｏｌ、回復１は第１の回復期、回復２は第２の回復期である。
【図２３】図に示すようにＡＳＢＮＰ．１で治療された、心臓ペース制御されたイヌの平均動脈圧値を示す棒グラフである。ベースラインは投与前、低は２ｐｍｏｌ、高は１０ｐｍｏｌ、超高は１００ｐｍｏｌ、回復１は第１の回復期、回復２は第２の回復期である。
【図２４】図に示すようにＡＳＢＮＰ．１で治療された、心臓ペース制御されたイヌの尿ｃＧＭＰ排泄量を示す棒グラフである。ベースラインは投与前、低は２ｐｍｏｌ、高は１０ｐｍｏｌ、超高は１００ｐｍｏｌ、回復１は第１の回復期、回復２は第２の回復期である。
【図２５】図に示すようにＡＳＢＮＰ．１で治療された、心臓ペース制御されたイヌの尿ＡＮＰ排泄量を示す棒グラフである。ベースラインは投与前、低は２ｐｍｏｌ、高は１０ｐｍｏｌ、超高は１００ｐｍｏｌ、回復１は第１の回復期、回復２は第２の回復期である。
【図２６】図に示すようにＡＳＢＮＰ．１で治療された、心臓ペース制御されたイヌの尿ＢＮＰ排泄量を示す棒グラフである。ベースラインは投与前、低は２ｐｍｏｌ、高は１０ｐｍｏｌ、超高は１００ｐｍｏｌ、回復１は第１の回復期、回復２は第２の回復期である。
【図２７】図に示すようにＡＳＢＮＰ．１で治療された、心臓ペース制御されたイヌの血漿ＢＮＰ値を示す棒グラフである。ベースラインは投与前、低は２ｐｍｏｌ、高は１０ｐｍｏｌ、超高は１００ｐｍｏｌ、回復１は第１の回復期、回復２は第２の回復期である。
【図２８】図に示すようにＡＳＢＮＰ．１で治療された、心臓ペース制御されたイヌの血漿ＡＮＰ値を示す棒グラフである。ベースラインは投与前、低は２ｐｍｏｌ、高は１０ｐｍｏｌ、超高は１００ｐｍｏｌ、回復１は第１の回復期、回復２は第２の回復期である。
【図２９】図に示すようにＡＳＢＮＰ．１で治療された、心臓ペース制御されたイヌの肺毛細血管楔入圧を示す棒グラフである。ベースラインは投与前、低は２ｐｍｏｌ、高は１０ｐｍｏｌ、超高は１００ｐｍｏｌ、回復１は第１の回復期、回復２は第２の回復期である。
【図３０】図に示すようにＡＳＢＮＰ．１で治療された、心臓ペース制御されたイヌの心拍出量を示す棒グラフである。ベースラインは投与前、低は２ｐｍｏｌ、高は１０ｐｍｏｌ、超高は１００ｐｍｏｌ、回復１は第１の回復期、回復２は第２の回復期である。
【図３１】図に示すようにＡＳＢＮＰ．１で治療された、心臓ペース制御されたイヌの体血管抵抗を示す棒グラフである。ベースラインは投与前、低は２ｐｍｏｌ、高は１０ｐｍｏｌ、超高は１００ｐｍｏｌ、回復１は第１の回復期、回復２は第２の回復期である。
【図３２】図に示すようにＡＳＢＮＰ．１で治療された、心臓ペース制御されたイヌのアンジオテンシンＩＩ濃度を示す棒グラフである。ベースラインは投与前、低は２ｐｍｏｌ、高は１０ｐｍｏｌ、超高は１００ｐｍｏｌ、回復１は第１の回復期、回復２は第２の回復期である。
【図３３】図に示すようにＡＳＢＮＰ．１で治療された、心臓ペース制御されたイヌのアルドステロン濃度を示す棒グラフである。ベースラインは投与前、低は２ｐｍｏｌ、高は１０ｐｍｏｌ、超高は１００ｐｍｏｌ、回復１は第１の回復期、回復２は第２の回復期である。
【図３４】９０分間のＡＳＢＮＰ．１ポリペプチド（１００ｐｍｏｌ／ｋｇ／分）の投与開始後、図に示す時間における、心臓ペース制御されたイヌの尿ナトリウム排出（μＥｑ／分）を示すグラフである。ＢＬ＝ベースライン、３０分＝３０分間のＡＳＢＮＰ．１ポリペプチド投与、６０分＝６０分間のＡＳＢＮＰ．１ポリペプチド投与、９０分＝９０分間のＡＳＢＮＰ．１ポリペプチド投与、ウォッシュアウト＝注入停止時、ウォッシュアウト期間後、回復１＝注入停止３０分後、回復２＝注入停止６０分後である。
【図３５】９０分間のＡＳＢＮＰ．１ポリペプチド（１００ｐｍｏｌ／ｋｇ／分）の投与開始後、図に示す時間における、心臓ペース制御されたイヌの尿流量（ｍＬ／分）を示すグラフである。ＢＬ＝ベースライン、３０分＝３０分間びＡＳＢＮＰ．１ポリペプチド投与、６０分＝６０分間のＡＳＢＮＰ．１ポリペプチド投与、９０分＝９０分間のＡＳＢＮＰ．１ポリペプチド投与、ウォッシュアウト＝注入停止時、ウォッシュアウト期間後、回復１＝３０分注入停止後、回復２＝６０分注入停止後である。
【図３６】９０分間のＡＳＢＮＰ．１ポリペプチド（１００ｐｍｏｌ／ｋｇ／分）の投与開始後、図に示す時間における、心臓ペース制御されたイヌの平均動脈圧（ｍｍＨｇ）を示すグラフである。ＢＬ＝ベースライン、３０分＝３０分間のＡＳＢＮＰ．１ポリペプチド投与、６０分＝６０分間のＡＳＢＮＰ．１ポリペプチド投与、９０分＝９０分間のＡＳＢＮＰ．１ポリペプチド投与、ウォッシュアウト＝注入停止時、ウォッシュアウト期間後、回復１＝注入停止３０分後、回復２＝注入停止６０分後である。
【図３７】９０分間のＡＳＢＮＰ．１ポリペプチド（１００ｐｍｏｌ／ｋｇ／分）の投与開始後、図に示す時間における、心臓ペース制御されたイヌの腎血流量を示すグラフである。ＢＬ＝ベースライン、３０分＝３０分間のＡＳＢＮＰ．１ポリペプチド投与、６０分＝６０分間のＡＳＢＮＰ．１ポリペプチド投与、９０分＝９０分間のＡＳＢＮＰ．１ポリペプチド投与、ウォッシュアウト＝注入停止時、ウォッシュアウト期間後、回復１＝３０分注入停止後、回復２＝６０分注入停止後である。
【図３８】９０分間のＡＳＢＮＰ．１ポリペプチド（１００ｐｍｏｌ／ｋｇ／分）の投与開始後、図に示す時間における、心臓ペース制御されたイヌの肺毛細血管楔入圧を示すグラフである。ＢＬ＝ベースライン、３０分＝３０分間のＡＳＢＮＰ．１ポリペプチド投与、６０分＝６０分間のＡＳＢＮＰ．１ポリペプチド投与、９０分＝９０分間のＡＳＢＮＰ．１ポリペプチド投与、ウォッシュアウト＝注入停止時、ウォッシュアウト期間後、回復１＝３０分注入停止後、回復２＝６０分注入停止後である。
【図３９】９０分間のＡＳＢＮＰ．１ポリペプチド（１００ｐｍｏｌ／ｋｇ／分）の投与開始後、図に示す時間における、心臓ペース制御されたイヌの心拍出量（ｌ／分）を示すグラフである。ＢＬ＝ベースライン、３０分＝３０分間のＡＳＢＮＰ．１ポリペプチド投与、６０分＝６０分間のＡＳＢＮＰ．１ポリペプチド投与、９０分＝９０分間のＡＳＢＮＰ．１ポリペプチド投与、ウォッシュアウト＝注入停止時、ウォッシュアウト期間後、回復１＝３０分注入停止後、回復２＝６０分注入停止後である。
【発明を実施するための形態】
【００２４】
詳細な説明
本書は、利尿ポリペプチドおよびナトリウム利尿ポリペプチドに関する。例えば、本書は、利尿および／またはナトリウム利尿作用を有するポリペプチドを提供する。いくつかの場合において、本願において提供されるポリペプチドは、血圧を低下させる能力を欠く一方で、利尿および／またはナトリウム利尿作用を有することができる。本書はまた、哺乳動物において利尿および／またはナトリウム利尿作用を誘起する方法および材料を提供する。
【００２５】
本願において提供されるポリペプチドは、あらゆる配列を有することができ、あらゆる長さを有することができる。例えば、本願において提供されるポリペプチドは、配列番号：１、配列番号：２、または配列番号：３に記載される配列を含むことができる。いくつかの場合において、本願において提供されるポリペプチドは、１０以下の（例えば、９つ以下の、８つ以下の、７つ以下の、６つ以下の、５つ以下の、４つ以下の、３つ以下の、２つ以下の、１、または０）アミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１、配列番号：２、または配列番号：３に記載の配列に整列する、アミノ酸配列を含むことができる。例えば、本願において提供されるポリペプチドは、配列番号：１の第１セリン残基または最終バリン残基が、欠失、または異なるアミノ酸残基によって置換されるという例外を除き、配列番号：１に記載の配列を含むことができる。
【００２６】
いくつかの場合において、本願において提供されるポリペプチドは、（ａ）配列番号：１に記載の、または１０以下（例えば、９つ以下、８つ以下、７つ以下、６つ以下、５つ以下、４つ以下、３つ以下、２つ以下、１、または０）のアミノ酸の欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列する第１アミノ酸配列、および（ｂ）配列番号：２に記載の、または（ｉ）１０以下（例えば、９つ以下、８つ以下、７つ以下、６つ以下、５つ以下、４つ以下、３つ以下、２つ以下、１、または０）のアミノ酸の付加、置換、またはそれらの組み合わせであって、ただし、付加または置換は、システイン残基の存在という結果を生じないもの、または（ｉｉ）１５以下（例えば、１４以下、１３以下、１２以下、１１以下、１０以下、９つ以下、８つ以下、７つ以下、６つ以下、５つ以下、４つ以下、３つ以下、２つ以下、１、または０）のアミノ酸の欠失を伴って配列番号：２に記載の配列に整列する第２アミノ酸配列を含むことができる。例えば、本願において提供されるポリペプチドは、配列番号：３の４３の位置にあるシステイン残基が、システイン以外のアミノ酸（例えば、アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、グルタミン、グルタミン酸、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リジン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、トレオニン、トリプトファン、チロシン、またはバリン）であるという例外を除き、配列番号：３に記載の配列を含むか、それから成ることができる。
【００２７】
配列番号：１、配列番号：２または配列番号：３に記載のポリペプチド配列に対して、１つ以上のアミノ酸の置換を有するポリペプチドは、本願に記載のとおりに調製および変更されることができる。アミノ酸の置換は、同類アミノ酸の置換であることも、非同類アミノ酸の置換であることもできる。同類アミノ酸の置換には、例えば、酸性アミノ酸残基（例えば、アスパラギン酸またはグルタミン酸）と、別の酸性アミノ酸残基との置換、塩基性アミノ酸残基（例えば、リジン、アルギニンまたはヒスチジン）と、別の塩基性アミノ酸残基との置換、疎水性アミノ酸残基と、別の疎水性アミノ酸残基との置換（例えば、ロイシンのイソロイシンとの置換、メチオニンのバリンとの置換、またはアラニンのバリンとの置換）、および親水性アミノ酸残基（例えば、セリン、グリシンまたはトレオニン）と、別の親水性アミノ酸残基との置換を含む。
【００２８】
同類アミノ酸の置換はまた、特定の型の側鎖を有するアミノ酸残基の、類似の型の側鎖を有する別のアミノ酸残基との置換を含む。例えば、同類アミノ酸の置換は、脂肪族側鎖（例えば、グリシン、アラニン、バリン、ロイシン、またはイソロイシン）を有するアミノ酸残基の、脂肪族側鎖を有する別のアミノ酸残基との置換、脂肪族ヒドロキシル側鎖（例えば、セリンまたはトレオニン）を有するアミノ酸残基の、脂肪族ヒドロキシル側鎖を有する別のアミノ酸残基との置換、アミド含有の側鎖（例えば、アスパラギンまたはグルタミン）を有するアミノ酸残基の、アミド含有の側鎖を有する別のアミノ酸残基との置換、芳香族側鎖（例えば、フェニルアラニン、チロシン、またはトリプトファン）を有するアミノ酸残基の、芳香族側鎖を有する別のアミノ酸残基との置換、塩基性側鎖（例えば、リジン、アルギニン、またはヒスチジン）を有するアミノ酸残基の、塩基性側鎖を有する別のアミノ酸残基との置換、および含硫の側鎖（例えば、システインまたはメチオニン）を有するアミノ酸残基の、含硫の側鎖を有する別のアミノ酸残基との置換を含む。
【００２９】
本願において提供されるポリペプチドは、どのような長さであってもよい。例えば、本願において提供されるポリペプチドは、２５〜７５（例えば、３０〜７０、３２〜６０、３２〜５７、３２〜５０、３２〜４５、３５〜４３、または３８〜４３）アミノ酸残基の長さであってもよい。２５または７５アミノ酸残基の長さのポリペプチドは、２５〜７５アミノ酸残基の長さのポリペプチドであると理解されるものとする。
【００３０】
いくつかの場合において、本願において提供されるポリペプチドは、３７〜４７アミノ酸残基の長さであってもよく、（ａ）配列番号：１に記載の、または（ｂ）５つ以下のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列するアミノ酸配列を含むことができる。かかるポリペプチドの例として、ＡＳＢＮＰ．１ポリペプチドを含むがこれに限定されない。いくつかの場合において、本願において提供されるポリペプチドは、４５〜６５アミノ酸残基の長さであってもよく、（ａ）配列番号：１に記載の、または、５つ以下のアミノ酸の欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列する第１アミノ酸配列と、（ｂ）配列番号：２に記載の、または（ｉ）５つ以下のアミノ酸の付加、置換、またはそれらの組み合わせであって、ただし、付加または置換は、システイン残基の存在という結果を生じないもの、または（ｉｉ）１５以下のアミノ酸の欠失を伴って、配列番号：２に記載の配列に整列する第２アミノ酸配列を含むことができる。かかるポリペプチドの例として、ＡＳＢＮＰ．２ポリペプチドを含むがこれに限定されない。
【００３１】
いくつかの場合において、本願において提供されるポリペプチドは、実質的に純粋なポリペプチドであってもよい。本願においてポリペプチドに関して使用される「実質的に純粋」という用語は、ポリペプチドは、それに自然においては伴う他のポリペプチド、脂質、炭水化物、および核酸を実質的に有しないことを意味する。それゆえ、実質的に純粋なポリペプチドとは、その自然環境から離された、少なくとも６０％純粋な、あらゆるポリペプチドであるか、またはあらゆる化学的に合成したポリペプチドである。実質的に純粋なポリペプチドは、少なくとも約６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、または９９％純粋であり得る。通常、実質的に純粋なポリペプチドは、非還元性ポリアクリルアミドゲル上に単一の主要バンドを呈する。
【００３２】
いくつかの実施形態において、本願において提供されるポリペプチドは、ヒト臍血管内皮細胞（ＨＵＶＥＣ）におけるｃＧＭＰの産生を促進する能力を欠き得る。細胞内のｃＧＭＰの産生は、例えば、ＢＩＯＴＲＡＣＫ ｃＧＭＰ酵素免疫測定キット（Ａｍｅｒｓｈａｍ Ｐｈａｒｍａｃｉａ Ｂｉｏｔｅｃｈ）を使用して分析することができる。他の実施形態において、本願において提供されるポリペプチドは、血管作用を欠き得る。血管作用は、血管（例えば、臓器チャンバ内の頸動脈）のポリペプチドに対する応答速度を測定することによって分析することができる。
【００３３】
本願において提供されるポリペプチドは、ポリペプチドをコードする組み換え核酸の発現によって、または化学合成によって取得することができる。例えば、本願において提供されるポリペプチドをコードする発現ベクターを使用する、標準的な組み換え技術を使用することができる。得られたポリペプチドは、次に、例えば、親和性クロマトグラフ法およびＨＰＬＣを使用して精製することができる。精製の程度は、カラムクロマトグラフィ、ポリアクリルアミドゲル電気泳動法、または高速液体クロマトグラフィを含むがこれに限定されない、あらゆる適切な方法によって測定され得る。本願において提供されるポリペプチドは、ポリペプチドが精製されることを可能とする（例えば、親和性マトリクス上に捕捉される）タグ配列を含むように設計することができる。例えば、ｃ−ｍｙｃ、血球凝集素、ポリヒスチジン、またはＦｌａｇ（商標）タグ（Ｋｏｄａｋ）等のタグは、ポリペプチドの精製を補助するために使用され得る。かかるタグは、カルボキシル末端またはアミノ末端のいずれかを含む、ポリペプチド内のあらゆる場所に挿入することができる。使用することのできる他の融合には、ポリペプチドの検出を補助する、アルカリ性ホスファターゼ等の酵素を含む。
【００３４】
本願において提供されるポリペプチドは、成熟したナトリウム利尿ポリペプチド（例えば、ＢＮＰ、ＤＮＰ、ＡＮＰ、またはＣＮＰ）のＮ末端およびリング構造を含む第１領域、およびＡＳＢＮＰのＣ末端部分の突然変異型または切断型を含む第２領域の２つの領域を含むように産生することができる。ＢＮＰ、ＤＮＰ、ＡＮＰ、およびＣＮＰのＮ末端およびリング構造は、別の文献に記載される。例えば、米国特許出願第１０／５６１，０１４号を参照されたい。
【００３５】
本願において提供されるポリペプチドは、薬学的に許容される毒性のない賦形剤または担体と混合することによって、薬学的組成物として製剤することができる。かかる組成物は、例えば、心臓、肝臓、腎臓、または他のナトリウム貯留状態を治療するために効果的な量を、これを必要とする被験者に投与されることができる。例えば、かかる組成物は、腎機能障害を有する対象に投与されることができる。腎機能障害は、急性腎不全、糸球体腎炎、慢性腎不全、高窒素血症、尿毒症、免疫腎臓病；急性腎炎症候群、急速進行性腎炎症候群、ネフローゼ症候群、バーガー病（Ｂｅｒｇｅｒ’ｓ Ｄｉｓｅａｓｅ）、慢性腎炎／タンパク尿症候群、尿細管間質性疾患、腎毒性障害、腎梗塞、アテローム塞栓性腎疾患、腎皮質壊死、悪性腎硬化症、腎静脈血栓症、尿細管性アシドーシス、腎性糖尿、腎性尿崩症、バーター症候群、リドル症候群、多嚢性腎疾患、間質性腎炎、急性溶血性尿毒症症候群、髄質嚢胞腎、海綿腎、遺伝性腎炎、および爪・膝蓋骨症候群を含むことができるが、これに限定されない。
【００３６】
本願において提供される組成物はまた、心機能障害を有する対象に投与することができる。心機能障害は、慢性心不全（ｃｈｒｉｎｉｃ ｈｅａｒｔ ｆａｉｌｕｒｅ，ＣＨＦ）、拡張したうっ血性心筋症、肥大型性心筋症、拘束型心筋症、僧帽弁疾患、大動脈弁疾患、三尖弁膜症、狭心症、心筋梗塞、心不整脈、肺高血圧症、動脈性高血圧、腎血管性高血圧、動脈硬化症、アテローム性動脈硬化症、および心臓腫瘍を含むことができるが、これに限定されない。
【００３７】
本願において提供される組成物はまた、炎症状態を有する対象に投与することができる。炎症状態は、心筋炎、ぜんそく、慢性炎症、自己免疫性糖尿病、腫瘍の血管新生、関節リウマチ、リウマチ様脊椎炎、変形性関節症、痛風性関節炎および他の関節炎状態、敗血症、敗血性ショック、内毒素性ショック、グラム陰性菌敗血症、毒素性ショック症候群、ぜんそく、成人呼吸窮迫症候群、卒中、再かん流傷害、神経外傷および虚血等の中枢神経系障害、乾癬性再狭窄、脳マラリア、慢性肺炎症性疾患、珪肺症、肺類肉腫症（ｐｕｌｍｏｎａｒｙ ｓａｒｃｏｓｉｓ）、骨粗しょう症などの骨吸収疾患、対宿主性移植片反応、クローン病、炎症性大腸炎（ＩＢＤ）を含む潰瘍性大腸炎、および発熱症（ｐｙｒｅｓｉｓ）を含むことができるが、これに限定されない。
【００３８】
医薬組成物は、非経口的投与のためには、特に溶液または生理的緩衝水溶液中の懸濁状に、経口投与のためには、特にタブレットまたはカプセル状に、または鼻腔内投与のためには、特に粉末、点鼻薬、またはエアロゾル状に調製することができる。他の投与経路のための組成物は、標準的な方法を使用して、要望に応じて調製することができる。
【００３９】
非経口的投与のための製剤は、一般的な賦形剤として、滅菌水または生理食塩水、ポリエチレングリコール等のポリアルキレングリコール、植物由来の油脂、水素化ナフタレン等を含むことができる。具体的には、生体適合性のある、生分解性ラクチドポリマー、ラクチド／グリコリドコポリマー、またはポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレンコポリマーが、生体内でのポリペプチドの放出を制御するための賦形剤の例である。他の適切な非経口的送達システムには、エチレン−ビニルアセチレンコポリマー粒子、浸透圧ポンプ、埋め込み式注入システム、およびリポソームを含む。吸入投与のための製剤には、要求に応じて乳糖等の賦形剤を含むことができる。吸入製剤は、ポリオキシエチレン−９−ラウリルエーテル、グリココール酸塩およびデオキシコール酸塩を含む水溶液であってもよく、または、吸入製剤は、例えば、点鼻薬形態での投与のために油性溶液であってもよい。所望される場合、組成物は鼻腔内に塗布されるゲルとして調製することができる。また、非経口的投与のための製剤には、口腔投与のためのグリココール酸を含むことができる。
【００４０】
経口投与のために、結合剤（例えば、あらかじめゼラチン化したトウモロコシでんぷん、ポリビニルピロリドンまたはヒドロキシプロピルメチルセルロース）、賦形剤（例えば、乳糖、微結晶性セルロースまたはリン酸水素カルシウム）、滑剤（例えば、ステアリン酸マグネシウム、タルクまたはシリカ）、崩壊剤（例えば、ジャガイモでんぷんまたはナトリウムスターチグリコール酸塩）、または湿潤剤（例えば、ラウリル硫酸ナトリウム）等の薬学的に許容される賦形剤とともに、従来の手段によって、タブレットまたはカプセルを調製することができる。タブレットは、当該技術分野で既知の方法によってコーティングすることができる。また、口腔投与のための調製は、組成物の制御放出を可能にするように製剤設計することができる。
【００４１】
点鼻剤は、液状または乾燥製品として提示することができる。噴霧される水性懸濁液または溶液は、ｐＨおよび／または弾力性を調節するために、担体または賦形剤を含むことができる。
【００４２】
本願に記載のポリペプチドはまた、局所送達のための製剤であり得る。本願において提供されるポリペプチドの局所使用および／または送達は、例えば、イオントフォレーゼやリポゲルなどの既知の方法を使用することによって達成することができる。
【００４３】
本願に記載の組成物（例えば、本願において提供されるポリペプチドを含む）は、他の有効成分を追加的に含むことができる。
【００４４】
種々の臨床的指標は、対象（例えば、腎機能または心機能障害、または炎症状態を有する被験者）への、本願に記載のポリペプチド（例えば、医薬組成物としての製剤）の投与の前、途中、および／または後に、観測することができる。例えば、バイタルサイン、電気分解、血清中クレアチニン、シスタチン、尿ＢＮＰ値、血漿ＢＮＰ値、尿排出量、投与されるポリペプチドの血漿値、投与されるポリペプチドの尿値、またはそれらのあらゆる組み合わせを観測することができる。いくつかの場合において、血漿レニン活性、糸球体ろ過量、尿ｃＧＭＰ排泄量、血漿ｃＧＭＰ値、尿ＡＮＰ排泄量、尿ＢＮＰ排泄量、心拍出量、体血管抵抗、アルドステロン値、またはそれらのあらゆる組み合わせを観測することができる。臨床的指標を観測するためには、本願に記載の方法を含むがこれに限定されないあらゆる適切な方法を使用することができる。
【００４５】
臨床的指標の観測は、例えば、心機能障害や腎機能障害、または炎症状態の症状の重篤性が軽減されたかどうか等、投与されるポリペプチドが効果的であるかどうかを、臨床医学者が決定することを可能にすることができる。また、本願において提供されるポリペプチドの投与前、途中、および／または後の臨床的指標の観測は、ポリペプチドの投与量が増加または減少されるべきであるか、ポリペプチドの投与が継続または中断されるべきか、またはポリペプチドが再投与されるべきかを示すことができる。また、臨床的指標の観測は、被験者の状態の重篤性を示し、次いで、本願において提供されるポリペプチドがいつ、どのくらいの量投与されるべきかについての指針を提供することができる。
【００４６】
ポリペプチドをコードする核酸
本書はまた、本願において提供されるポリペプチドの１つ以上をコードする単離核酸を提供する。核酸に関して本願で使用される「単離」という用語は、これが由来する有機体からの自然発生のゲノムにおいて直接隣接（５’末端のものと、３’末端のもの）する、双方の配列と直接隣接しない自然発生の核酸を指す。例えば、単離核酸は、自然発生のゲノムにおいて通常組み換えＤＮＡ分子と直接隣接して見られる核酸配列のうちの１つが、除去されたか欠如する、あらゆる長さの組み換えＤＮＡ分子であることができるがこれに限定されない。それゆえ、単離核酸は、他の配列から独立した別個の分子として存在する組み換えＤＮＡ（例えば、ＰＣＲまたは制限エンドヌクレアーゼ処理によって産生されたｃＤＮＡまたはゲノムＤＮＡ断片）、ならびに、ベクター、自己複製プラスミド、ウイルス（例えば、レトロウイルス、アデノウイルス、またはヘルペスウイルス）に組み込まれた、または原核生物または真核生物のゲノムＤＮＡに組み込まれた組み換えＤＮＡを含むがこれに限定されない。また、単離核酸は、ハイブリッドまたは融合核酸配列の一部である組み換えＤＮＡ分子を含むことができる。
【００４７】
また、核酸に関して本願で使用される「単離」という用語は、非自然発生の核酸配列は自然界では見られず、自然発生のゲノムに直接隣接する配列を有しないため、あらゆる非自然発生の核酸を含む。例えば、人工的に作られた核酸等の非自然発生の核酸は、単離核酸と見なされる。人工的に作られた核酸（例えば、配列番号：１に記載のアミノ酸配列を含むかそれから成るポリペプチドをコードする核酸）は、一般的な分子クローン技術や化学核酸合成技術を使用して作成することができる。単離非自然発生の核酸は、他の配列から独立しているか、またはベクター、自己複製プラスミド、ウイルス（例えば、レトロウイルス、アデノウイルス、またはヘルペスウイルス）、または原核生物または真核生物のゲノムＤＮＡに組み込まれ得る。また、非自然発生の核酸は、ハイブリッドまたは融合核酸配列の一部である核酸分子を含むことができる。例えば、ｃＤＮＡライブラリやゲノムライブラリ、またはゲノムＤＮＡ限定ダイジェストを含むゲルスライス内の他の数百〜数百万の核酸に存在する核酸は、単離核酸とは見なされない。
【００４８】
本願において使用される「核酸」という用語は、ｍＲＮＡ、ｃＤＮＡ、ゲノムＤＮＡ、合成（例えば、化学的に合成した）ＤＮＡ、および核酸類似体を含むＲＮＡとＤＮＡの双方を指す。核酸は、二本鎖または一本鎖であることができ、一本鎖の場合、センス鎖またはアンチセンス鎖であることができる。また、核酸は、円形または線形であることができる。核酸類似体は、例えば、核酸の安定性、ハイブリダイゼーション、または溶解性を改善するために、塩基部分、糖部分、またはリン酸骨格の箇所において改変することができる。塩基部分における改変は、デオキシチミジンのデオキシウリジンへの、および５−メチル−２’−デオキシシチジンおよび５−ブロモ−２’−デオキシシチジンのデオキシシチジンへの改変を含む。糖部分における改変は、リボース糖の２’ヒドロキシルから、２’−Ｏ−メチルまたは２’−Ｏ−アリル糖の形成を含むことができる。デオキシリボースリン酸骨格は、モルホリノ核酸を産するように改変されることができ、各塩基部分はそこで六員環のモルホリノ環、またはペプチド核酸に結合し、そこでデオキシリン酸骨格は擬ペプチド骨格によって置換され、４つの塩基は保持される。例えば、ＳｕｍｍｅｒｔｏｎおよびＷｅｌｌｅｒ、Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄ Ｄｒｕｇ Ｄｅｖ．、７：１８７−１９５（１９９７）、およびＨｙｒｕｐら、Ｂｉｏｏｒｇａｎ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ．、４：５−２３（１９９６）を参照されたい。また、デオキシリン酸骨格は、例えば、ホスホロチオエートまたはホスホロジチオエート骨格、ホスホロアミダイド、またはアルキルホスホトリエステル骨格と置換することができる。
【００４９】
本願において提供される核酸は、配列番号：５または６に記載の配列を含むか、それから成ることができる。
【００５０】
通常、本願において提供される単離核酸は、少なくとも１０ヌクレオチドの長さ（例えば、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、５０、７５、１００、２００、３００、３５０、４００、またはそれ以上のヌクレオチドの長さ）である。フルレングス以下の核酸分子は、例えば、診断目的に、プライマまたはプローブとして有用である。単離核酸分子は、一般的な分子クローン技術や化学核酸合成技術を含むがこれに限定されない標準的な技術によって産生することができる。例えば、ポリメラーゼ連鎖反応法（ＰＣＲ）を使用することができる。ＰＣＲとは、標的核酸が酵素的に増幅される手技または技術を指す。関心領域末端または超過からの配列情報は、通常、増幅されるテンプレートの逆鎖の配列と同一のオリゴヌクレオチドプライマを設計するために採用される。ＰＣＲは、総ゲノムＤＮＡまたは総細胞ＲＮＡからの配列を含む、ＤＮＡ、ならびにＲＮＡからの特異的な配列を増幅するために使用することができる。プライマは通常、１５〜５０ヌクレオチドの長さであるが、１０ヌクレオチド〜１００ヌクレオチドの長さの範囲であることができる。例えば、プライマは、１２、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３５、４０、または４５ヌクレオチドの長さであることができる。プライマは、制限ダイジェストから、従来の方法によって精製するか、または化学的に合成することができる。プライマは、通常、増幅における効率を最大とするために一本鎖であるが、プライマは、二本鎖であることができる。二本鎖プライマは、増幅で使用される前に、鎖を分離するためにまず変性される（例えば、熱で処理される）。概略的なＰＣＲ法については、例えばＰＣＲ Ｐｒｉｍｅｒ： Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ、ＤｉｅｆｆｅｎｂａｃｈおよびＤｖｅｋｓｌｅｒ編、Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ、１９９５に記載される。ＲＮＡをテンプレートの供給源として使用する場合、相補的ＤＮＡ（ｃＤＮＡ）鎖を合成するために逆転写酵素を使用することができる。別の文献に記載されるように、単離核酸を取得するために、リガーゼ連鎖反応法、鎖置換増幅法（ＳＤＡ法）、自立配列複製法、または核酸配列に基づく増幅法もまた使用することができる（Ｌｅｗｉｓ， Ｇｅｎｅｔｉｃ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ Ｎｅｗｓ， １２（９）：１ （１９９２）、Ｇｕａｔｅｌｌｉ ら、Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ． ＵＳＡ， ８７：１８７４−１８７８ （１９９０）、およびＷｅｉｓｓ、Ｓｃｉｅｎｃｅ、２５４：１２９２（１９９１））。
【００５１】
単離核酸はまた、単一の核酸分子（例えば、ホスホルアミダイト）技術を使用した３’〜５’方向の自動ＤＮＡ合成を使用して）として、または一連のオリゴヌクレオチドとして、化学的に合成することができる。例えば、長いオリゴヌクレオチド（例えば、＞１００ヌクレオチド）の１つ以上の対は、オリゴヌクレオチド対がアニールされた時に二本鎖が形成されるように、各対が補完の短いセグメント（例えば、約１５ヌクレオチド）を有する所望の配列を含むように合成することができる。オリゴヌクレオチドを伸長するために、ＤＮＡポリメラーゼが使用され、結果としてオリゴヌクレオチド対毎に単鎖、二本鎖の核酸分子を生じ、これらは次にベクターに結紮される。
【００５２】
単離核酸はまた、突然変異生成によって取得することができる。例えば、配列番号：１、２、または３に記載の配列を有する、ポリペプチドをコードする核酸配列は、例えば、オリゴヌクレオチド指定突然変異生成および／またはＰＣＲによる部位特異的変位導入等の標準的な方法を使用して突然変異させることができる。Ｓｈｏｒｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ、第８章、Ｇｒｅｅｎ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ａｓｓｏｃｉａｔｅｓ ａｎｄ Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓ、Ａｕｓｕｂｅｌら編、１９９２を参照されたい。かかる突然変異には、付加、欠失、置換、およびそれらの組み合わせを含む。
【００５３】
ベクターおよび宿主細胞
本書はまた、本願において提供される核酸を含むベクターを提供する。本願において使用される場合、「ベクター」は、プラスミド、ファージ、またはコスミド等のレプリコンであり、挿入されたセグメントの複製をもたらすために、そこに別のＤＮＡセグメントを挿入することができる。ベクターは、発現ベクターであることができる。「発現ベクター」とは、１つ以上の発現制御配列を含むベクターであり、また「発現制御配列」とは、別のＤＮＡ配列の転写および／または翻訳を制御および規制するＤＮＡ配列である。
【００５４】
本願において提供される発現ベクターにおいて、核酸は、１つ以上の発現制御配列に操作可能に結合され得る。本願において使用される「操作可能に結合される」とは、発現制御配列が関心のコード配列の発現を効果的に制御することができるように、遺伝的構造に組み込まれることを意味する。発現制御配列の例として、プロモータ、エンハンサ、転写終結領域が挙げられる。プロモータとは、転写が開始する箇所（概してＲＮＡポリメラーゼＩＩの開始部位の近傍）の通常１００ヌクレオチド上流内におけるＤＮＡ分子の領域で構成される、発現制御配列である。コード配列をプロモータの制御下に置くため、ポリペプチドの翻訳の読み枠の翻訳開始部位を、プロモータの１〜約５０ヌクレオチド下流に位置づけることが必要である場合がある。エンハンサは、時間、場所、およびレベルに関する発現特異性を提供する。プロモータと異なり、エンハンサは、転写部位から種々の距離にあっても機能する。エンハンサはまた、転写開始部位から下流に位置することができる。コード配列は、ＲＮＡポリメラーゼがコード配列をｍＲＮＡに転写することができ、これが次にコード配列によってコードされるポリペプチドに翻訳され得る時、細胞内の発現制御配列に「操作可能に結合され」、その「制御下に」あるとされる。
【００５５】
適切な発現ベクターには、プラスミド、および例えば、バクテリオファージ、バキュロウイルス、タバコモザイクウイルス、ヘルペスウイルス、サイトメガロウイルス、レトロウイルス、ポックスウイルス、アデノウイルス、およびアデノ随伴ウイルス由来のウイルスベクターを含むがこれに限定されない。多数のベクターおよび発現システムは、Ｎｏｖａｇｅｎ（ウィスコンシン州、Ｍａｄｉｓｏｎ）、Ｃｌｏｎｅｔｅｃｈ（カリフォルニア州、Ｐａｌｏ Ａｌｔｏ）、Ｓｔｒａｔａｇｅｎｅ（カリフォルニア州、Ｌａ Ｊｏｌｌａ）、およびＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎ／Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ（カリフォルニア州、Ｃａｒｌｓｂａｄ）などの企業から市販されている。
【００５６】
発現ベクターは、発現核酸配列のその後の操作（例えば、精製または局在化）を容易にするため、設計されたタグ配列を含むことができる。緑色蛍光タンパク質（ＧＦＰ）、グルタチオンＳ−トランスフェラーゼ（ＧＳＴ）、ポリヒスチジン、ｃ−ｍｙｃ、血球凝集素、またはＦｌａｇ（商標）タグ（Ｋｏｄａｋ、Ｎｅｗ Ｈａｖｅｎ、ＣＴ）配列等のタグ配列は、通常、コードされたポリペプチドとの融合として発現する。このようなタグは、カルボキシル末端またはアミノ末端のいずれかを含む、ポリペプチド内のあらゆる場所に挿入されることができる。
【００５７】
本書はまた、本願において提供される核酸分子および／または核酸ベクターを含む宿主細胞を提供する。「宿主細胞」という用語は、核酸分子またはベクターがその中に導入され得る原核細胞および真核細胞を含むことを意図する。核酸を細胞に導入するために、あらゆる方法を使用することができる。例えば、リン酸カルシウム沈殿、エレクトロポレーション、熱ショック、リポフェクション、マイクロインジェクション、およびウイルス媒介の核酸転写を、核酸を細胞に導入するために使用することができる。また、裸のＤＮＡを、別に記載されるように、細胞に生体内に直接送達することができる（米国特許第５，５８０，８５９号および５，５８９，４６６号）。
【００５８】
ポリペプチドの検出
本書は、本願において提供されるポリペプチドを検出するための方法および材料を提供する。かかる方法および材料は、ポリペプチドを治療として受けている哺乳動物の体内のポリペプチドの値を観測するために使用することができる。本願において提供されるポリペプチド（例えば、ＡＳＢＮＰ．１およびＡＳＢＮＰ．２）は、例えば、１つ以上の抗体を使用して、免疫学的に検出さすことができる。本願において使用される「抗体」という用語は、本願において提供されるポリペプチドのエピトープ決定基に結合することができる、無傷分子ならびに、その断片を含む。「エピトープ」という用語は、抗原上の抗原決定基を指し、そこに抗体のパラトープが結合する。エピトープ決定基は、ふつうアミノ酸または糖側鎖等の分子の化学的に活性の表面分類から成り、通常、特異的な立体構造の特性ならびに特異的な電荷特性を有する。エピトープは、概して少なくとも５つの隣接アミノ酸（連続エピトープ）を有するか、または代替的に、特定の構造（例えば、立体構造エピトープ）を画定する一組の非隣接アミノ酸であることができる。「抗体」という用語は、ポリクローナル抗体、モノクローナル抗体、ヒト化またはキメラ抗体、単鎖Ｆｖ抗体断片、Ｆａｂ断片、およびＦ（ａｂ）２断片を含む。ポリクローナル抗体とは、免疫動物の血清中に含まれる、抗体分子の異種集団である。モノクローナル抗体とは、特定のエピトープに対する抗体の同種集団である。
【００５９】
本願において提供されるポリペプチドに対して特異的な結合親和力を有する抗体断片（例えば、ＡＳＢＮＰ．１およびＡＳＢＮＰ．２）は、既知の技術によって生成することができる。例えば、Ｆ（ａｂ’）２断片は、抗体分子のペプシン消化によって産生されることができ、Ｆａｂ断片は、Ｆ（ａｂ’）２断片のジスルフィド架橋を還元することによって生成することができる。あるいは、Ｆａｂ発現ライブラリが構築され得る。例えば、Ｈｕｓｅら、Ｓｃｉｅｎｃｅ、２４６：１２７５（１９８９）を参照されたい。一旦産生されると、抗体またはその断片は、ＥＬＩＳＡ法、放射免疫測定、およびウエスタンブロット法を含む標準的な免疫測定法によって、本願において提供されるポリペプチドの認識をテストされる。Ｓｈｏｒｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ、第１１章、Ｇｒｅｅｎ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ａｓｓｏｃｉａｔｅｓ ａｎｄ Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓ、Ａｕｓｕｂｅｌ、Ｆ．Ｍら編、１９９２を参照されたい。
【００６０】
免疫アッセイにおいて、本願において提供されるポリペプチドに特異的な結合親和力を有する抗体、またはかかる抗体に結合する二次抗体を、直接、あるいは間接的に標識化することができる。適切な標識には、放射性核種（例えば、１２５Ｉ、１３１Ｉ、３５Ｓ、３Ｈ、３２Ｐ、３３Ｐ、または１４Ｃ）、蛍光部分（例えば、フルオレセイン、ＦＩＴＣ、ＰｅｒＣＰ、ローダミン、またはＰＥ）、発光部位（例えば、カリフォルニア州、Ｐａｌｏ Ａｌｔｏの、Ｑｕａｎｔｕｍ Ｄｏｔ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎによって供給されるＱｄｏｔ（商標）ナノ粒子）、限定された波長の光を吸収する化合物、または酵素（例えば、アルカリ性ホスファターゼまたはホースラディッシュペルオキシダーゼ）が挙げられるが、これに限定されない。抗体は、ビオチンとの接合によって間接的に標識化され、次に上述の分子によって標識化されたアビジンまたはストレプトアビジンを用いて検出することができる。標識を検出または定量化する方法は、標識の性質に依存し、当技術分野において周知である。検出器の例として、Ｘ線フィルム、放射能測定器、シンチレーションカウンタ、分光光度計、比色計、蛍光光度計、照度計、および濃度計が挙げられるが、これに限定されない。当業者に周知のこれらのアプローチの組み合わせ（「多層」アッセイを含む）を、アッセイの感度を強化するために使用することができる。
【００６１】
本願において提供されるポリペプチドを検出する免疫アッセイは、サンドイッチアッセイ、競合アッセイ（競合ＲＩＡ）、または架橋免疫アッセイを含む、種々の既知のフォーマットで行なうことができる。例えば、米国特許第５，２９６，３４７号、４，２３３，４０２号、４，０９８，８７６号、および４，０３４，０７４号を参照されたい。本願において提供されるポリペプチドを検出する方法は、概して生体サンプルを本願において提供されるポリペプチドに結合する抗体に接触させるステップと、ポリペプチドの抗体への結合を検知するステップを含む。例えば、本願において提供されるポリペプチドに特異的な結合親和力を有する抗体は、当技術分野で周知のあらゆる種類の方法によって、固体基板に固定化され、次に生体サンプルに曝露することができる。ポリペプチドの固体基板上の抗体への結合は、表面プラスモン共鳴現象を活用することによって検出されることができ、これは例えば、Ｂｉａｃｏｒｅ装置（Ｂｉａｃｏｒｅ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ ＡＢ、Ｒａｐｓｇａｔａｎ、スウェーデン）などの適切な機器によって、定性的または定量的に検出することができる、結合時の表面プラスモン共鳴の強度の変化をもたらす。あるいは、抗体は、上述のように標識化され、検出することができる。本願において提供されるポリペプチドの既知量の使用による標準曲線は、ポリペプチドの値の定量化を補助するために生成することができる。
【００６２】
他の実施形態において、捕捉抗体が固体基板上に固定化される「サンドイッチアッセイ」は、本願において提供されるポリペプチドの存在の有無、または値を検出するために使用される。固体基板は、サンプル中のあらゆる関心のポリペプチドが固定化抗体に結合するように、生体サンプルと接触することができる。抗体に結合したポリペプチドの存在の有無、または値は、ポリペプチドに特異的な結合親和力を有する「検出」抗体を使用することによって測定されることができる。いくつかの実施形態において、ＢＮＰ、ならびに本願において提供されるポリペプチドに結合親和力を有する捕捉抗体を使用することができる。本実施形態において、本願において提供される特定のポリペプチドに特異的な結合親和力を有する検出抗体を使用することができる。サンドイッチアッセイにおいて、捕捉抗体は、検出抗体と同一のエピトープ（または、ポリクローナル抗体の場合、エピトープの範囲）に結合してはならないということが理解される。それゆえ、モノクローナル抗体が捕捉抗体として使用される場合、検出抗体は、捕捉モノクローナル抗体が結合するエピトープと完全に物理的に別個であるか、それに部分的にのみ重複する別のモノクローナル抗体であるか、または、捕捉モノクローナル抗体が結合するもの以外か、これに加えたエピトープに結合するポリクローナル抗体であることができる。ポリクローナル抗体が捕捉抗体として使用される場合、検出抗体は、捕捉ポリクローナル抗体が結合するエピトープと完全に物理的に別個であるか、それに部分的にのみ重複するモノクローナル抗体であるか、または、捕捉モノクローナル抗体が結合するもの以外か、これに加えたエピトープに結合するモノクローナル抗体であることができる。サンドイッチアッセイは、サンドイッチＥＬＩＳＡアッセイ、サンドイッチウエスタンブロットアッセイ、サンドイッチ免疫磁性検出アッセイとして実施することができる。
【００６３】
抗体（例えば、捕捉抗体）が結合することができる適切な固体基板として、マイクロタイタープレート、試験管、ナイロンやニトロセルロース等の膜、およびビーズまたは粒子(例えば、アガロース、セルロース、ガラス、ポリスチレン、ポリアクリルアミド、電磁または磁化ビーズまたは粒子)を含むがこれに限定されない。磁性または磁化可能な粒子は、自動免疫測定システムが使用される場合に特に有用である。
【００６４】
本願において提供されるポリペプチドに特異的な結合親和力を有する抗体は、標準的な方法を通じて産生することができる。概して、ポリペプチドは、上述のとおり、組み換え技術によって産生されることができるか、生体サンプル（例えば、異種発現システム）から精製することができ、ウサギ、ニワトリ、マウス、モルモット、またはラットを含む宿主動物に免疫を与えるために使用することができる。例えば、配列番号：１または２に記載のアミノ酸配列を有するポリペプチド、または少なくとも６アミノ酸の長さであるその断片は、動物に免疫を与えるために使用することができる。免疫反応を改善するために使用されることができる種々のアジュバントは、宿主動物種に依存し、フロインドアジュバント（完全および不完全）、水酸化アルミニウム等の鉱物ゲル、リゾレシチン、プルロニックポリオール、多価陰イオン、ペプチド、油乳剤、キーホールリンペットヘモシアニンおよびジニトロフェノールなどの界面活性物質を含む。モノクローナル抗体は、本願において提供されるポリペプチドおよび標準的なハイブリドーマ技術を使用して調製することができる。具体的には、モノクローナル抗体は、Ｋｏｈｌｅｒら、Ｎａｔｕｒｅ，２５６：４９５（１９７５）において記述されるもの、ヒトＢ細胞ハイブリドーマ技法（Ｋｏｓｂｏｒら、Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ Ｔｏｄａｙ，４：７２（１９８３）、Ｃｏｌｅら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８０：２０２６（１９８３））、およびＥＢＶハイブリドーマ技法（Ｃｏｌｅら、，“Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ａｎｄ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒａｐｙ，”Ａｌａｎ Ｒ．Ｌｉｓｓ，Ｉｎｃ．、７７−９６ページ（１９８３））等の、培養下の連続継代細胞系によって抗体分子の産生を提供する、いかなる技術によっても取得することができる。こうした抗体は、ＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＥ、ＩｇＡ、ＩｇＤ、およびそのあらゆるサブクラスを含むあらゆる免疫グロブリンクラスであることができる。モノクローナル抗体を産生するハイブリドーマは、生体外および生体内で培養することができる。
【００６５】
本願において提供されるポリペプチドを検出するための代替的な技術として、エレクトロスプレーイオン化（ＥＳＩ）等のマス分光光度法、およびマトリックス支援レーザー脱離イオン化（ＭＡＬＤＩ）が挙げられる。例えば、Ｇｅｖａｅｒｔら、Ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ，２２（９）：１６４５−５１（２００１）、Ｃｈａｕｒａｎｄら、Ｊ．Ａｍ．Ｓｏｃ．Ｍａｓｓ Ｓｐｅｃｔｒｏｍ．，１０（２）：９１−１０３（１９９９）を参照されたい。かかる用途に有用な質量分析計は、Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ（カリフォルニア州、Ｆｏｓｔｅｒ Ｃｉｔｙ）、Ｂｒｕｋｅｒ Ｄａｌｔｒｏｎｉｃｓ（マサチューセッツ州、Ｂｉｌｌｅｒｉｃａ）、およびＡｍｅｒｓｈａｍ Ｐｈａｒｍａｃｉａ（カリフォルニア州、Ｓｕｎｎｙｖａｌｅ）から入手が可能である。
【００６６】
本発明は、下記の実施例においてより詳細に説明されるが、これは請求項に記載される本発明の範囲を限定するものではない。
【００６７】
実施例
実施例１―ＡＳＢＮＰ．１ポリペプチドの生物学的作用
システインに先立って終結し、１３アミノ酸Ｃ末端後部を含むＡＳＢＮＰの切断型が設計され合成された。このポリペプチドは、ＡＳＢＮＰ．１ポリペプチド（図１）とよばれる。静脈内ＡＢＮＰ．１注入の生物学的作用が、健常なイヌにおいてテストされた。概要としては、６頭の健常なイヌに、２、１０、および１００ｐｍｏｌのＡＳＢＮＰ．１ポリペプチド製剤調合液が注入された。すなわち、各イヌは、２、１０、および１００ｐｍｏｌのＡＳＢＮＰ．１ポリペプチド調合液の連続注入を受けた。尿流量、尿ナトリウム排泄量、遠位部分的管状ナトリウム再吸収率、近位管状部分的ナトリウム再吸収率、平均動脈圧、血漿ｃＧＭＰ値、糸球体ろ過量、腎血流量、および血漿レニン値が、別の文献に記載のとおりに測定された（Ｃｈｅｎら、Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｒｅｇｕｌ．Ｉｎｔｅｇｒ．Ｃｏｍｐ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．，２８８：Ｒ１０９３−Ｒ１０９７（２００５）、およびＨａｂｅｒら、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．Ｍｅｔａｂ．，２９：１３４９−１３５５（２００５））。ＡＳＢＮＰ．１ポリペプチドの全身投与により、利尿およびナトリウム利尿作用（図２および図３）が生じた。ＡＳＢＮＰ．１ポリペプチドの作用は、遠位尿細管（図４および図５）を標的とした。血漿ｃＧＭＰは、超高用量において上昇した。２つの高用量（図６および図７）において、レニンの減少傾向が見られた。ＡＳＢＮＰ．１ポリペプチドの全身投与は、糸球体ろ過量、腎血流量、または平均動脈圧（図８〜図１０）に対する作用を有しなかった。
【００６８】
これらの結果は、ＡＳＢＮＰ．１ポリペプチドが腎臓に対する明確な作用を有し、全身の血圧に作用する能力を欠くことを実証している。
【００６９】
以下の実験は、ＢＮＰ、ＡＳＢＮＰ、およびＡＳＢＮＰ．１ポリペプチドの作用を比較するために実施された。概要としては、合成された形状のＢＮＰ、ＡＳＢＮＰ、およびＡＳＢＮＰ．１が、ＨＵＶＥＣおよびＨＡＳＭＣに投与され、ｃＧＭＰ値が測定された。ＡＳＢＮＰ．１がｃＧＭＰに対する作用を有しない一方、ＡＳＢＮＰはこれらの細胞において最小作用を有した。これらの結果は、ウサギの前収縮させた動脈に投与された場合（図１３）、ＢＮＰと比較して、ＡＳＢＮＰおよびＡＳＢＮＰ．１は、作用を有しないということを実証している。
【００７０】
実施例２―ＣＨＦを有する哺乳動物におけるＡＳＢＮＰ．１ポリペプチドの生物学的作用
うっ血性心不全（ＣＨＦ）の心臓ペース制御されたイヌのモデルにおいて、静脈内ＡＢＮＰ．１注入の生物学的作用がテストされた。概要としては、１０頭のイヌが、プラグラム可能な心臓ペースメーカー（Ｍｅｄｔｒｏｎｉｃ、Ｍｉｎｎｅａｐｏｌｉｓ、ＭＮ）の外科的移植を受けた。術後の回復後、動物は１１日間の高頻度心室ペーシング（２４０拍／分）を受け、これは別の文献に記載されるように明らかなうっ血性心不全ＣＨＦを誘起することができる（Ｃｈｅｎら、Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ，１００：２４４３−２４４８（１９９９））。イヌに、２、１０、および１００ｐｍｏｌのＡＳＢＮＰ．１ポリペプチド調合液が静脈内注入された。すなわち、各イヌは、２、１０、および１００ｐｍｏｌのＡＳＢＮＰ．１ポリペプチド調合液の連続注入を受けた。
【００７１】
注入時に、急性の血行動態の検討が実施され、ベースライン時、および各注入時における群およびイヌ間の比較が行われた。尿流量、尿ナトリウム排泄量、遠位部分的管状ナトリウム再吸収率、近位管状部分的ナトリウム再吸収率、血漿ｃＧＭＰ値、レンニン値、糸球体ろ過量、腎血流量、平均動脈圧、尿ｃＧＭＰ排泄量、尿ＡＮＰ排泄量、尿ＢＮＰ排泄量、血漿ＢＮＰ値、血漿ＡＮＰ値、肺毛細血管楔入圧、心拍出量、体血管抵抗、アンジオテンシンＩＩ濃度、およびアルドステロン濃度が、別の文献に記載のとおりに測定された（Ｃｈｅｎら、Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｒｅｇｕｌ．Ｉｎｔｅｇｒ．Ｃｏｍｐ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．，２８８：Ｒ１０９３−Ｒ１０９７（２００５）、およびＨａｂｅｒら、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．Ｍｅｔａｂ．，２９：１３４９−１３５５（２００５））。ＡＳＢＮＰ．１ポリペプチドの、心臓ペース制御されたイヌに対する全身投与は、利尿作用を生じたが、ナトリウム利尿作用は生じなかった（図１５および図１６）。レニン値は、ウォッシュアウト期間を通して上昇した（図２０）。ＡＳＢＮＰ．１ポリペプチドの全身投与は、高レベルにおいて糸球体ろ過量を増加させた（図２１）。ＡＳＢＮＰ．１ポリペプチドの全身投与は、高レベルおよび超高レベルにおいて、尿ｃＧＭＰ排泄量（図２４）を増加させた。高レベルでは、尿ＡＮＰ排泄量（図２５）も増加した。超高レベルでは、尿ＢＮＰ排泄量も増加した（図２６）。心拍出量は、高レベルのポリペプチドの投与から減少し、実験の残りの間中減少を続けた（図３０）。全身血管抵抗は、高、超高、ウォッシュアウト、および回復１フェーズ（図３１）の間、上昇した。アルドステロンは、低レベルのポリペプチドの投与から増加し、実験の残りの間中増加を続けた（図３３）。遠位尿細管部分的ナトリウム再吸収率、近位管状部分的ナトリウム再吸収率、腎血流量、血漿ｃＧＭＰ、平均動脈圧、血漿ＢＮＰ、血漿ＡＮＰ、肺毛細血管楔入圧、またはアンジオテンシンＩＩ濃度（図１７、１８、１９、２２、２３、２８、２９、ａｎｄ ３２）に対しては作用を有しなかった。
【００７２】
これらの結果は、ＡＳＢＮＰ．１ポリペプチドが腎臓に対する作用（強化ＧＦＲを含む）を有し、ＣＨＦ動物における全身の血圧に作用する能力を欠くということを実証している。
【００７３】
別の実験において、ＡＳＢＮＰ．１ポリペプチド調合液がイヌに投与された（１００ｐｍｏｌ／ｋｇ／分、９０分間）。尿中のナトリウム排泄量、尿流量、平均動脈圧、腎血流量、肺毛細血管楔入圧、および心拍出量が、３０分、６０分、および９０分のＡＳＢＮＰ．１ポリペプチド投与時に測定された。ＡＳＢＮＰ．１ポリペプチド投与に続いて、３０分のウォッシュアウト期間がもうけられた。ウォッシュアウトは、通常の生理食塩水を投与することによって実施された。尿中のナトリウム排泄量、尿流量、平均動脈圧、腎血流量、肺毛細血管楔入圧、および心拍出量は、ウォッシュアウト期間後、およびＡＳＢＮＰ．１ポリペプチドの投与後の、２回の回復期間、６０分（回復１）および９０分（回復２）の各回後に、再度測定された。結果を図３４−３９に示す。ＡＳＢＮＰ．１ポリペプチドの、投与量１００ｐｍｏｌ／ｋｇ／分における９０分間の投与は、尿ナトリウム排出および尿流量を増加させることが観察された（図３４および３５）。平均動脈圧、腎血流量、または心拍出量には、有意な効果は観察されなかった（図３６、３７、および３９）。肺毛細血管楔入圧の低下が、ＡＳＢＮＰ．１ポリペプチド投与の６０分後、ＰＡＰ（肺動脈圧）またはＲＡＰ（右動脈圧）の変化を伴わずに観察された（図３８）。
【００７４】
実施例３―動物モデルを使用したＡＳＢＮＰ．１ポリペプチドの生物学的作用
ＡＳＢＮＰ．１注入の作用が、ＴＩＶＣＣモデル（肝硬変およびネフローゼに類似した症状を呈するナトリウム貯留のイヌのモデル）においてさらに評価される。別の文献に記載されるように、併用なしのナトリウム貯留および腹水の、心充満圧上昇を伴わないＴＩＶＣＣモデルである（Ｗｅｉら、Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．，２７３：Ｒ８３８−８４４（１９９７））。ＡＳＢＮＰ．１ポリペプチドは、ＴＩＶＣＣモデルにおいて、１００ｐｍｏｌ．ｋｇ／分を上限とする漸増用量を使用してテストされた。
【００７５】
実施例４―高頻度心室ペーシングによって産生される心不全を有するイヌにおける、放射線造影剤による腎症の誘起
ペントバルビタール麻酔下（３０ｍｇ／ｋｇ）で、左開胸ならびに心膜切除術により、心臓が露出され、ねじ込み式心外膜ペースメーカーのリードが、右心室に埋設される。ペースメーカーのリードは、胸部皮下に埋設されたペースメーカーと接続される。また、ペースメーカー埋設時、腎臓の血管から少なくとも６ｃｍ上部の大動脈内に、大腿動脈を経由してポリエチレンカテーテル（ＰＥ ２４０、Ｃｌａｙ Ａｄａｍｓ、米国、ニュージャージー州、Ｐａｒｓｉｐｐａｎｙ）が設置される。イヌは、３日間の期間回復させられ、この期間内に、イヌはクリンダマイシンおよびＣｏｍｂａｔｅｒによる抗生予防的治療を受ける。手術からの回復に続いて、ペースメーカーが毎分２５０拍にプログラムされ、ペーシングはこの速度で１０日間継続され、心不全が産生される。
【００７６】
ペーシング開始から１１日後の急性実験の日、放射線造影剤（Ｖａｓｃｏｒａｙ（登録商標）、Ｍａｌｌｉｎｋｒｏｄｔ、Ｉｎｃ．、米国、ミズーリー州、Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ）が、７ｍＬ／ｋｇの用量で、１０分間にわたり静脈内注入される。イヌは、別の文献に記載の造影剤による腎症の観測のため、６回にわたる一連の２４時間尿採取のために、代謝ケージに戻される（Ｍａｒｇｕｌｉｅｓら、Ｋｉｄｎｅｙ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，３８（６）：１１０１−８（１９９０））。
【００７７】
いくつかの実験において、放射線造影剤の投与前に、ＡＳＢＮＰ．１ポリペプチドが心臓ペース制御されたイヌに投与される。各イヌには、２、１０、および１００ｐｍｏｌのＡＳＢＮＰ．１ポリペプチドの連続注入、または１００ｐｍｏｌのＡＳＢＮＰ．１ポリペプチドの、１回の９０分間の注入が投与される。尿中のナトリウム排泄量、尿流量、平均動脈圧、腎血流量、肺毛細血管楔入圧、および心拍出量が、ウォッシュアウト期間後、ＡＳＢＮＰ．１ポリペプチドの投与の３０分後、６０分後、および９０分後、およびウォッシュアウト期間に続く２回の回復期間の各期間中に、に測定された。臨床的指標の測定は、放射線造影剤の投与前にＡＳＢＮＰ．１を投与されていない、対照のイヌから得られた測定値と比較される。
【００７８】
実施例５―ＣＨＦを有する患者を含む、高い危険を有する患者における造影剤による腎不全の予防
画像化（例えば、血管造影法またはＣＴ）のために造影を必要とする、造影剤に起因する腎症（ｃｏｎｔｒａｓｔ−ｉｎｄｕｃｅｄ ｎｅｐｈｒｏｐｈａｔｈｙ，ＣＩＮ）の高い危険がある患者（例えば、高齢の患者および慢性腎不全、糖尿病、および心不全の危険性がある患者）が、造影剤の投与前のＡＳＢＮＰポリペプチドまたはＡＳＢＮＰ．１ポリペプチドの静脈注入によって、予防的に治療される。注入前に、バイタルサインが測定され、電気分解、血清中クレアチニン、シスタチン、およびＢＮＰポリペプチド値を測定するために臨床検査が実施される。ＡＳＢＮＰポリペプチドを検出するＢｉｏｓｉｔｅ ＢＮＰアッセイを使用して、および／またはＡＳＢＮＰポリペプチドに特異的なアッセイを使用して、ＢＮＰポリペプチド値を取得する。ベースライン尿排出量が測定され、尿電気分解が評価される。造影剤投与前に、ＡＳＢＮＰポリペプチド、ＡＳＢＮＰ．１ポリペプチド、または誘導体の静脈内注入が開始される。バイタルサインおよび尿排出量が、注入中２時間毎に評価される。開始から所定の時間後に、患者は造影剤投与を受ける。この時間は、ポリペプチドの特異的なアッセイによって測定されるポリペプチド値の一定の濃度の達成と同時であり得る。造影剤投与に続き、注入は８時間〜２４時間、または血清中クレアチニンおよび／またはシスタチンがベースラインから変化しないと認められるまで継続される。
【００７９】
実施例６―心腎臓症候群の治療
急性非代償性心不全環境において、利尿耐性を伴う腎機能の悪化を発現している患者が、ＡＳＢＮＰポリペプチドまたはＡＳＢＮＰ．１ポリペプチドの静脈注入によって、予防的に治療される。注入前に、バイタルサインが測定され、電気分解、血清中クレアチニン、シスタチン、およびＢＮＰポリペプチド値を測定するために臨床検査が実施される。ベースライン尿排出量が測定され、尿電気分解が評価される。ＡＳＢＮＰポリペプチド、ＡＳＢＮＰ．１ポリペプチド、またはそれらの誘導体の静脈内注入が開始される。バイタルサインおよび尿排出量は、注入中２時間毎、１２時間〜７２時間の期間にわたって評価される。薬物濃度、ＢＮＰポリペプチド値、血清中クレアチニン、シスタチン、および血漿および尿電気分解は、注入中にわたり、毎日評価される。
【００８０】
他の実施形態
本発明は、その詳細な記述とあわせて記載されたが、上記の記述は、説明を意図するものであり、本発明の範囲を限定するものではないと理解されたい。本発明の範囲は、添付の請求項の範囲によって定義される。他の側面、長所、および変更は、下記の請求項の範囲内にあるものとする。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
実質的に純粋な、３７〜４７アミノ酸残基の長さであるポリペブチドであって、
（ａ）配列番号：１に記載の配列、または（ｂ）５つもしくはそれ未満のアミノ酸の付加、欠失、置換、もしくはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列する（ａｌｉｇｎ）アミノ酸配列
を含む、ポリペブチド。
【請求項２】
ポリペプチドの長さが、３８〜４６アミノ酸残基である、請求項１記載のポリペブチド。
【請求項３】
ポリペプチドの長さが、３９〜４５アミノ酸残基である、請求項１記載のポリペブチド。
【請求項４】
ポリペプチドの長さが、４０〜４４アミノ酸残基である、請求項１記載のポリペブチド。
【請求項５】
ポリペプチドの長さが、４１〜４３アミノ酸残基である、請求項１記載のポリペブチド。
【請求項６】
ポリペプチドの長さが、４２アミノ酸残基である、請求項１記載のポリペブチド。
【請求項７】
ポリペプチドの長さが、３７アミノ酸残基である、請求項１記載のポリペブチド。
【請求項８】
ポリペプチドの長さが、４７アミノ酸残基である、請求項１記載のポリペブチド。
【請求項９】
アミノ酸配列が、配列番号：１に記載の配列である、請求項１記載のポリペブチド。
【請求項１０】
アミノ酸配列が、４つまたはそれ未満のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列する、請求項１記載のポリペブチド。
【請求項１１】
アミノ酸配列が、３つまたはそれ未満のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列する、請求項１記載のポリペブチド。
【請求項１２】
アミノ酸配列が、２つまたはそれ未満のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列する、請求項１記載のポリペブチド。
【請求項１３】
アミノ酸配列が、１つまたはそれ未満のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列する、請求項１記載のポリペブチド。
【請求項１４】
アミノ酸配列が、５つまたはそれ未満のアミノ酸の付加を伴って配列番号：１に記載の配列に整列する、請求項１記載のポリペブチド。
【請求項１５】
アミノ酸配列が、５つまたはそれ未満のアミノ酸の欠失を伴って配列番号：１に記載の配列に整列する、請求項１記載のポリペブチド。
【請求項１６】
アミノ酸配列が、５つまたはそれ未満のアミノ酸の置換を伴って配列番号：１に記載の配列に整列する、請求項１記載のポリペブチド。
【請求項１７】
ポリペプチドの長さが、４２アミノ酸残基であり、かつアミノ酸配列が、配列番号：１に記載の配列である、請求項１記載のポリペブチド。
【請求項１８】
利尿作用およびナトリウム利尿作用を有する、請求項１記載のポリペブチド。
【請求項１９】
哺乳動物において、血圧を下げる能力を欠く、請求項１記載のポリペブチド。
【請求項２０】
哺乳動物が、ヒトまたはイヌである、請求項１９記載のポリペブチド。
【請求項２１】
実質的に純粋な、４５〜６５アミノ酸残基の長さであるポリペプチドであって、
（ａ）配列番号：１に記載の配列、または
（ｂ）５つもしくはそれ未満のアミノ酸の欠失、置換、もしくはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列する
第１アミノ酸配列
を含み、かつ
（ａ）配列番号：２に記載の配列、または
（ｂ）（ｉ）付加もしくは置換がシステイン残基の存在をもたらさない、５つもしくはそれ未満のアミノ酸の付加、置換、もしくはそれらの組み合わせ、または（ｉｉ）１５個もしくはそれ未満のアミノ酸の欠失を伴って配列番号：２に記載の配列に整列する
第２アミノ酸配列
を含む、ポリペブチド。
【請求項２２】
ポリペプチドの長さが、５８〜６３アミノ酸残基である、請求項２１記載のポリペブチド。
【請求項２３】
ポリペプチドの長さが、６０アミノ酸残基である、請求項２１記載のポリペブチド。
【請求項２４】
ポリペプチドの長さが、４５アミノ酸残基である、請求項２１記載のポリペブチド。
【請求項２５】
ポリペプチドの長さが、６５アミノ酸残基である、請求項２１記載のポリペブチド。
【請求項２６】
ポリペプチドの配列が、配列番号：３に記載の配列である、請求項２１記載のポリペブチド。
【請求項２７】
利尿作用およびナトリウム利尿作用を有する、請求項２１記載のポリペブチド。
【請求項２８】
３７〜４７アミノ酸残基の長さであるポリペプチドをコードする単離核酸であって、
該ポリペプチドが、（ａ）配列番号：１に記載の配列、または（ｂ）５つもしくはそれ未満のアミノ酸の付加、欠失、置換、もしくはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列するアミノ酸配列を含む、
単離核酸。
【請求項２９】
４５〜６５アミノ酸残基の長さであるポリペプチドをコードする単離核酸であって、
該ポリペプチドが、
（ａ）配列番号：１に記載の配列、または
（ｂ）５つもしくはそれ未満のアミノ酸の欠失、置換、もしくはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列する
第１アミノ酸配列を含み、かつ
該ポリペプチドが、
（ａ）配列番号：２に記載の配列、または
（ｂ）（ｉ）付加もしくは置換がシステイン残基の存在をもたらさない、５つもしくはそれ未満のアミノ酸の付加、置換、もしくはそれらの組み合わせ、または（ｉｉ）１５個もしくはそれ未満のアミノ酸の欠失を伴って配列番号：２に記載の配列に整列する
第２アミノ酸配列を含む、
単離核酸。
【請求項３０】
３７〜４７アミノ酸残基の長さであるポリペプチドをコードする核酸を含むベクターであって、
該ポリペプチドが、（ａ）配列番号：１に記載の配列、または（ｂ）５つもしくはそれ未満のアミノ酸の付加、欠失、置換、もしくはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列するアミノ酸配列を含む、
ベクター。
【請求項３１】
４５〜６５アミノ酸残基の長さであるポリペプチドをコードする核酸を含むベクターであって、
該ポリペプチドが、
（ａ）配列番号：１に記載の配列、または
（ｂ）５つもしくはそれ未満のアミノ酸の欠失、置換、もしくはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列する
第１アミノ酸配列を含み、かつ
該ポリペプチドが、
（ａ）配列番号：２に記載の配列、または
（ｂ）（ｉ）付加もしくは置換がシステイン残基の存在をもたらさない、５つもしくはそれ未満のアミノ酸の付加、置換、もしくはそれらの組み合わせ、または（ｉｉ）１５個もしくはそれ未満のアミノ酸の欠失を伴って配列番号：２に記載の配列に整列する
第２アミノ酸配列を含む、
ベクター。
【請求項３２】
３７〜４７アミノ酸残基の長さであるポリペプチドをコードする核酸を含む宿主細胞であって、
該ポリペプチドが、（ａ）配列番号：１に記載の配列、または（ｂ）５つもしくはそれ未満のアミノ酸の付加、欠失、置換、もしくはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列するアミノ酸配列を含む、
宿主細胞。
【請求項３３】
４５〜６５アミノ酸残基の長さであるポリペプチドをコードする核酸を含む宿主細胞であって、
該ポリペプチドが、
（ａ）配列番号：１に記載の配列、または
（ｂ）５つもしくはそれ未満のアミノ酸の欠失、置換、もしくはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列する
第１アミノ酸配列を含み、かつ
該ポリペプチドが、
（ａ）配列番号：２に記載の配列、または
（ｂ）（ｉ）付加もしくは置換がシステイン残基の存在をもたらさない、５つもしくはそれ未満のアミノ酸の付加、置換、もしくはそれらの組み合わせ、または（ｉｉ）１５個もしくはそれ未満のアミノ酸の欠失を伴って配列番号：２に記載の配列に整列する
第２アミノ酸配列を含む、
宿主細胞。
【請求項３４】
真核生物宿主細胞である、請求項３２または３３記載の宿主細胞。
【請求項３５】
薬学的に許容される担体および３７〜４７アミノ酸残基の長さであるポリペプチドを含む医薬組成物であって、
該ポリペプチドが、（ａ）配列番号：１に記載の配列、または（ｂ）５つもしくはそれ未満のアミノ酸の付加、欠失、置換、もしくはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列するアミノ酸配列を含む、
医薬組成物。
【請求項３６】
薬学的に許容される担体および４５〜６５アミノ酸残基の長さであるポリペプチドを含む医薬組成物であって、
該ポリペプチドが、
（ａ）配列番号：１に記載の配列、または
（ｂ）５つもしくはそれ未満のアミノ酸の欠失、置換、もしくはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列する
第１アミノ酸配列を含み、かつ
該ポリペプチドが、
（ａ）配列番号：２に記載の配列、または
（ｂ）（ｉ）付加もしくは置換がシステイン残基の存在をもたらさない、５つもしくはそれ未満のアミノ酸の付加、置換、もしくはそれらの組み合わせ、または（ｉｉ）１５個もしくはそれ未満のアミノ酸の欠失を伴って配列番号：２に記載の配列に整列する
第２アミノ酸配列を含む、
医薬組成物。
【請求項３７】
血圧を低下させることなく、哺乳動物における利尿作用およびナトリウム利尿作用を増加させるための方法であって、該哺乳動物に３７〜４７アミノ酸残基の長さであるポリペプチドを投与する段階を含み、
ここで、該ポリペプチドが、（ａ）配列番号：１に記載の配列、または（ｂ）５つもしくはそれ未満のアミノ酸の付加、欠失、置換、もしくはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列するアミノ酸配列を含む、
方法。
【請求項３８】
血圧を低下させることなく、哺乳動物における利尿作用およびナトリウム利尿作用を増加させるための方法であって、該哺乳動物に４５〜６５アミノ酸残基の長さであるポリペプチドを投与する段階を含み、
ここで該ポリペプチドが、
（ａ）配列番号：１に記載の配列、または
（ｂ）５つもしくはそれ未満のアミノ酸の欠失、置換、もしくはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列する
第１アミノ酸配列を含み、かつ
該ポリペプチドが、
（ａ）配列番号：２に記載の配列、または
（ｂ）（ｉ）付加もしくは置換がシステイン残基の存在をもたらさない、５つもしくはそれ未満のアミノ酸の付加、置換、もしくはそれらの組み合わせ、または（ｉｉ）１５個もしくはそれ未満のアミノ酸の欠失を伴って配列番号：２に記載の配列に整列する
第２アミノ酸配列を含む、
方法。
【請求項３９】
腎機能障害を有する哺乳動物を治療するための方法であって、該哺乳動物に３７〜４７アミノ酸残基の長さであるポリペプチドを投与する段階を含み、
ここで、該ポリペプチドが、（ａ）配列番号：１に記載の配列、または（ｂ）５つもしくはそれ未満のアミノ酸の付加、欠失、置換、もしくはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列するアミノ酸配列を含み、かつ
該投与する段階が、該腎機能障害の症状の重症度の軽減を条件とする、
方法。
【請求項４０】
腎機能障害を有する哺乳動物を治療するための方法であって、該哺乳動物に４５〜６５アミノ酸残基の長さであるポリペプチドを投与する段階を含み、
ここで、該ポリペプチドが、
（ａ）配列番号：１に記載の配列、または
（ｂ）５つもしくはそれ未満のアミノ酸の欠失、置換、もしくはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列する
第１アミノ酸配列を含み、かつ
該ポリペプチドが、
（ａ）配列番号：２に記載の配列、または
（ｂ）（ｉ）付加もしくは置換がシステイン残基の存在をもたらさない、５つもしくはそれ未満のアミノ酸の付加、置換、もしくはそれらの組み合わせ、または（ｉｉ）１５個もしくはそれ未満のアミノ酸の欠失を伴って配列番号：２に記載の配列に整列する
第２アミノ酸配列を含み、かつ
該投与する段階が、該腎機能障害の症状の重症度の軽減を条件とする、
方法。
【請求項４１】
哺乳動物が、ヒトである、請求項３７〜４０のいずれか一項記載の方法。
【請求項４２】
腎機能障害が、腎不全を含む、請求項３９または請求項４０記載の方法。
【請求項４３】
腎機能障害が、うっ血性心不全を伴う腎不全を含む、請求項３９または請求項４０記載の方法。
【請求項４４】
ポリペプチドが、静脈内、経口的、または鼻腔内に投与される、請求項３９または請求項４０記載の方法。
【請求項４５】
ポリペプチドが、徐放製剤として投与される、請求項３９または請求項４０記載の方法。
【請求項４６】
ポリペプチドが、３７〜４７アミノ酸残基の長さであり、かつ配列番号：１に記載のアミノ酸配列を含む、
請求項３９記載の方法。
【請求項４７】
ポリペプチドが、３７〜４７アミノ酸残基の長さであり、かつ５つまたはそれ未満のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列するアミノ酸配列を含む、
請求項３９記載の方法。
【請求項４８】
ポリペプチドが、４５〜６５アミノ酸残基の長さであり、かつ（ｉ）配列番号：１に記載の第１アミノ酸配列と（ｉｉ）配列番号：２に記載の第２アミノ酸配列とを含む、
請求項４０記載の方法。
【請求項４９】
ポリペプチドが、４５〜６５アミノ酸残基の長さであり、５つまたはそれ未満のアミノ酸の欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列する第１アミノ酸配列を含み、かつ配列番号：２に記載の第２アミノ酸配列を含む、
請求項４０記載の方法。
【請求項５０】
ポリペプチドが、４５〜６５アミノ酸残基の長さであり、配列番号：１に記載の第１アミノ酸配列を含み、かつ（ｉ）付加もしくは置換がシステイン残基の存在をもたらさない、５つもしくはそれ未満のアミノ酸の付加、置換、もしくはそれらの組み合わせ、または（ｉｉ）１５個もしくはそれ未満のアミノ酸の欠失を伴って配列番号：２に記載の配列に整列する第２アミノ酸配列を含む、
請求項４０記載の方法。
【請求項５１】
ポリペプチドが、４５〜６５アミノ酸残基の長さであり、５つまたはそれ未満のアミノ酸の欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列する第１アミノ酸配列を含み、かつ（ｉ）付加もしくは置換がシステイン残基の存在をもたらさない、５つもしくはそれ未満のアミノ酸の付加、置換、もしくはそれらの組み合わせを伴って、または（ｉｉ）１５個もしくはそれ未満のアミノ酸の欠失を伴って配列番号：２に記載の配列に整列する第２アミノ酸配列を含む、
請求項４０記載の方法。
【請求項５２】
症状が、血清クレアチニン値異常、尿流量異常、レニン値異常、糸球体ろ過量異常、尿ｃＧＭＰ排泄率異常、尿ＡＮＰ排泄率異常、尿ＢＮＰ排泄率異常、心拍出量異常、体血管抵抗異常、またはアルドステロン値異常を含む、請求項３９または請求項４０記載の方法。
【請求項５３】
症状が、尿流量の減少を含み、かつ哺乳動物の尿流量が、投与する段階の後、少なくとも５０％増加する、請求項３９または請求項４０記載の方法。
【請求項５４】
症状が、レニン値の低下を含み、かつ哺乳動物のレニン値が、投与する段階の後、少なくとも５０％増加する、請求項３９または請求項４０記載の方法。
【請求項５５】
症状が、糸球体ろ過量の減少を含み、かつ哺乳動物の糸球体ろ過量が、投与する段階の後、少なくとも５０％増加する、請求項３９または請求項４０記載の方法。
【請求項５６】
症状が、尿ｃＧＭＰ排泄率の低下を含み、かつ哺乳動物の尿ｃＧＭＰ排泄率が、投与する段階の後、少なくとも２５％増加する、請求項３９または請求項４０記載の方法。
【請求項５７】
症状が、尿ＡＮＰ排泄率の低下を含み、かつ哺乳動物の尿ＡＮＰ排泄率が、投与する段階の後、少なくとも２５％増加する、請求項３９または請求項４０記載の方法。
【請求項５８】
症状が、尿ＢＮＰ排泄率の低下を含み、かつ哺乳動物の尿ＢＮＰ排泄率が、投与する段階の後、少なくとも２５％増加する、請求項３９または請求項４０記載の方法。
【請求項５９】
症状が、心拍出量の増加を含み、かつ哺乳動物の心拍出量が、投与する段階の後、少なくとも２％減少する、請求項３９または請求項４０記載の方法。
【請求項６０】
症状が、体血管抵抗の低下を含み、かつ哺乳動物の体血管抵抗が、投与する段階の後、少なくとも１０％増加する、請求項３９または請求項４０記載の方法。
【請求項６１】
症状が、アルドステロン値の低下を含み、かつ哺乳動物のアルドステロン値が、投与する段階の後、少なくとも１０％増加する、請求項３９または請求項４０記載の方法。
【請求項６２】
炎症状態を有する哺乳動物を治療するための方法であって、該哺乳動物に３７〜４７アミノ酸残基の長さであるポリペプチドを投与する段階を含み、
ここで、該ポリペプチドが、（ａ）配列番号：１に記載の配列、または（ｂ）５つもしくはそれ未満のアミノ酸の付加、欠失、置換、もしくはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列するアミノ酸配列を含み、かつ
該投与する段階が、該炎症状態の症状の重症度の軽減を条件とする、
方法。
【請求項６３】
ポリペプチドが、３７〜４７アミノ酸残基の長さであり、かつ５つまたはそれ未満のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列するアミノ酸配列を含む、
請求項６２記載の方法。
【請求項６４】
炎症状態を有する哺乳動物を治療するための方法であって、該哺乳動物に４５〜６５アミノ酸残基の長さであるポリペプチドを投与する段階を含み、
ここで、該ポリペプチドが、
（ａ）配列番号：１に記載の配列、または
（ｂ）５つもしくはそれ未満のアミノ酸の欠失、置換、もしくはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列する
第１アミノ酸配列を含み、かつ
該ポリペプチドが、
（ａ）配列番号：２に記載の配列、または
（ｂ）（ｉ）付加もしくは置換がシステイン残基の存在をもたらさない、５つもしくはそれ未満のアミノ酸の付加、置換、もしくはそれらの組み合わせ、または（ｉｉ）１５個もしくはそれ未満のアミノ酸の欠失を伴って配列番号：２に記載の配列に整列する
第２アミノ酸配列を含み、かつ
該投与する段階が、該炎症状態の症状の重症度の軽減を条件とする、
方法。
【請求項６５】
ポリペプチドが、４５〜６５アミノ酸残基の長さであり、５つまたはそれ未満のアミノ酸の欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列する第１アミノ酸配列を含み、かつ（ｉ）付加もしくは置換が付加もしくは置換がシステイン残基の存在をもたらさない、５つもしくはそれ未満のアミノ酸の付加、置換、もしくはそれらの組み合わせを伴って、または（ｉｉ）１５個もしくはそれ未満のアミノ酸の欠失を伴って配列番号：２に記載の配列に整列する第２アミノ酸配列を含む、
請求項６４記載の方法。
【請求項６６】
心機能障害を有する哺乳動物を治療するための方法であって、該哺乳動物に３７〜４７アミノ酸残基の長さであるポリペプチドを投与する段階を含み、
ここで、該ポリペプチドが、（ａ）配列番号：１に記載の配列、または（ｂ）５つもしくはそれ未満のアミノ酸の付加、欠失、置換、もしくはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列するアミノ酸配列を含み、かつ
該投与する段階が、該心機能障害の症状の重症度の軽減を条件とする、
方法。
【請求項６７】
心機能障害を有する哺乳動物を治療するための方法であって、該哺乳動物に４５〜６５アミノ酸残基の長さであるポリペプチドを投与する段階を含み、
ここで、該ポリペプチドが、
（ａ）配列番号：１に記載の配列、または
（ｂ）５つもしくはそれ未満のアミノ酸の欠失、置換、もしくはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列する
第１アミノ酸配列を含み、かつ
該ポリペプチドが、
（ａ）配列番号：２に記載の配列、または
（ｂ）（ｉ）付加もしくは置換がシステイン残基の存在をもたらさない、５つもしくはそれ未満のアミノ酸の付加、置換、もしくはそれらの組み合わせ、または（ｉｉ）１５個もしくはそれ未満のアミノ酸の欠失を伴って配列番号：２に記載の配列に整列する
第２アミノ酸配列を含み、かつ
該投与する段階が、該心機能障害の症状の重症度の軽減を条件とする、
方法。
【請求項６８】
哺乳動物が、ヒトである、請求項６６または請求項６７記載の方法。
【請求項６９】
心機能障害が、心不全を含む、請求項６６または請求項６７記載の方法。
【請求項７０】
心機能障害が、腎不全を伴ううっ血性心不全を含む、請求項６６または請求項６７記載の方法。
【請求項７１】
ポリペプチドが、静脈内、経口的、または鼻腔内に投与される、請求項６６または請求項６７記載の方法。
【請求項７２】
ポリペプチドが、徐放製剤として投与される、請求項６６または請求項６７記載の方法。
【請求項７３】
ポリペプチドが、３７〜４７アミノ酸残基の長さであり、かつ配列番号：１に記載のアミノ酸配列を含む、
請求項６６記載の方法。
【請求項７４】
ポリペプチドが、３７〜４７アミノ酸残基の長さであり、かつ５つまたはそれ未満のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列するアミノ酸配列を含む、
請求項６６記載の方法。
【請求項７５】
ポリペプチドが、４５〜６５アミノ酸残基の長さであり、かつ（ｉ）配列番号：１に記載の第１アミノ酸配列と（ｉｉ）配列番号：２に記載の第２アミノ酸配列とを含む、
請求項６７記載の方法。
【請求項７６】
ポリペプチドが、４５〜６５アミノ酸残基の長さであり、５つまたはそれ未満のアミノ酸の欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列する第１アミノ酸配列を含み、かつ配列番号：２に記載の第２アミノ酸配列を含む、
請求項６７記載の方法。
【請求項７７】
ポリペプチドが、４５〜６５アミノ酸残基の長さであり、配列番号：１に記載の第１アミノ酸配列を含み、かつ（ｉ）付加もしくは置換がシステイン残基の存在をもたらさない、５つもしくはそれ未満のアミノ酸の付加、置換、もしくはそれらの組み合わせ、または（ｉｉ）１５個もしくはそれ未満のアミノ酸の欠失を伴って配列番号：２に記載の配列に整列する第２アミノ酸配列を含む、
請求項６７記載の方法。
【請求項７８】
ポリペプチドが、４５〜６５アミノ酸残基の長さであり、５つまたはそれ未満のアミノ酸の欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列する、第１アミノ酸配列を含み、かつ（ｉ）付加もしくは置換がシステイン残基の存在をもたらさない、５つもしくはそれ未満のアミノ酸の付加、置換、もしくはそれらの組み合わせを伴って、または（ｉｉ）１５個もしくはそれ未満のアミノ酸の欠失を伴って配列番号：２に記載の配列に整列する第２アミノ酸配列を含む、
請求項６７記載の方法。
【請求項１】
実質的に純粋な、３７〜４７アミノ酸残基の長さであるポリペブチドであって、
（ａ）配列番号：１に記載の配列、または（ｂ）５つもしくはそれ未満のアミノ酸の付加、欠失、置換、もしくはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列する（ａｌｉｇｎ）アミノ酸配列
を含む、ポリペブチド。
【請求項２】
ポリペプチドの長さが、３８〜４６アミノ酸残基である、請求項１記載のポリペブチド。
【請求項３】
ポリペプチドの長さが、３９〜４５アミノ酸残基である、請求項１記載のポリペブチド。
【請求項４】
ポリペプチドの長さが、４０〜４４アミノ酸残基である、請求項１記載のポリペブチド。
【請求項５】
ポリペプチドの長さが、４１〜４３アミノ酸残基である、請求項１記載のポリペブチド。
【請求項６】
ポリペプチドの長さが、４２アミノ酸残基である、請求項１記載のポリペブチド。
【請求項７】
ポリペプチドの長さが、３７アミノ酸残基である、請求項１記載のポリペブチド。
【請求項８】
ポリペプチドの長さが、４７アミノ酸残基である、請求項１記載のポリペブチド。
【請求項９】
アミノ酸配列が、配列番号：１に記載の配列である、請求項１記載のポリペブチド。
【請求項１０】
アミノ酸配列が、４つまたはそれ未満のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列する、請求項１記載のポリペブチド。
【請求項１１】
アミノ酸配列が、３つまたはそれ未満のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列する、請求項１記載のポリペブチド。
【請求項１２】
アミノ酸配列が、２つまたはそれ未満のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列する、請求項１記載のポリペブチド。
【請求項１３】
アミノ酸配列が、１つまたはそれ未満のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列する、請求項１記載のポリペブチド。
【請求項１４】
アミノ酸配列が、５つまたはそれ未満のアミノ酸の付加を伴って配列番号：１に記載の配列に整列する、請求項１記載のポリペブチド。
【請求項１５】
アミノ酸配列が、５つまたはそれ未満のアミノ酸の欠失を伴って配列番号：１に記載の配列に整列する、請求項１記載のポリペブチド。
【請求項１６】
アミノ酸配列が、５つまたはそれ未満のアミノ酸の置換を伴って配列番号：１に記載の配列に整列する、請求項１記載のポリペブチド。
【請求項１７】
ポリペプチドの長さが、４２アミノ酸残基であり、かつアミノ酸配列が、配列番号：１に記載の配列である、請求項１記載のポリペブチド。
【請求項１８】
利尿作用およびナトリウム利尿作用を有する、請求項１記載のポリペブチド。
【請求項１９】
哺乳動物において、血圧を下げる能力を欠く、請求項１記載のポリペブチド。
【請求項２０】
哺乳動物が、ヒトまたはイヌである、請求項１９記載のポリペブチド。
【請求項２１】
実質的に純粋な、４５〜６５アミノ酸残基の長さであるポリペプチドであって、
（ａ）配列番号：１に記載の配列、または
（ｂ）５つもしくはそれ未満のアミノ酸の欠失、置換、もしくはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列する
第１アミノ酸配列
を含み、かつ
（ａ）配列番号：２に記載の配列、または
（ｂ）（ｉ）付加もしくは置換がシステイン残基の存在をもたらさない、５つもしくはそれ未満のアミノ酸の付加、置換、もしくはそれらの組み合わせ、または（ｉｉ）１５個もしくはそれ未満のアミノ酸の欠失を伴って配列番号：２に記載の配列に整列する
第２アミノ酸配列
を含む、ポリペブチド。
【請求項２２】
ポリペプチドの長さが、５８〜６３アミノ酸残基である、請求項２１記載のポリペブチド。
【請求項２３】
ポリペプチドの長さが、６０アミノ酸残基である、請求項２１記載のポリペブチド。
【請求項２４】
ポリペプチドの長さが、４５アミノ酸残基である、請求項２１記載のポリペブチド。
【請求項２５】
ポリペプチドの長さが、６５アミノ酸残基である、請求項２１記載のポリペブチド。
【請求項２６】
ポリペプチドの配列が、配列番号：３に記載の配列である、請求項２１記載のポリペブチド。
【請求項２７】
利尿作用およびナトリウム利尿作用を有する、請求項２１記載のポリペブチド。
【請求項２８】
３７〜４７アミノ酸残基の長さであるポリペプチドをコードする単離核酸であって、
該ポリペプチドが、（ａ）配列番号：１に記載の配列、または（ｂ）５つもしくはそれ未満のアミノ酸の付加、欠失、置換、もしくはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列するアミノ酸配列を含む、
単離核酸。
【請求項２９】
４５〜６５アミノ酸残基の長さであるポリペプチドをコードする単離核酸であって、
該ポリペプチドが、
（ａ）配列番号：１に記載の配列、または
（ｂ）５つもしくはそれ未満のアミノ酸の欠失、置換、もしくはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列する
第１アミノ酸配列を含み、かつ
該ポリペプチドが、
（ａ）配列番号：２に記載の配列、または
（ｂ）（ｉ）付加もしくは置換がシステイン残基の存在をもたらさない、５つもしくはそれ未満のアミノ酸の付加、置換、もしくはそれらの組み合わせ、または（ｉｉ）１５個もしくはそれ未満のアミノ酸の欠失を伴って配列番号：２に記載の配列に整列する
第２アミノ酸配列を含む、
単離核酸。
【請求項３０】
３７〜４７アミノ酸残基の長さであるポリペプチドをコードする核酸を含むベクターであって、
該ポリペプチドが、（ａ）配列番号：１に記載の配列、または（ｂ）５つもしくはそれ未満のアミノ酸の付加、欠失、置換、もしくはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列するアミノ酸配列を含む、
ベクター。
【請求項３１】
４５〜６５アミノ酸残基の長さであるポリペプチドをコードする核酸を含むベクターであって、
該ポリペプチドが、
（ａ）配列番号：１に記載の配列、または
（ｂ）５つもしくはそれ未満のアミノ酸の欠失、置換、もしくはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列する
第１アミノ酸配列を含み、かつ
該ポリペプチドが、
（ａ）配列番号：２に記載の配列、または
（ｂ）（ｉ）付加もしくは置換がシステイン残基の存在をもたらさない、５つもしくはそれ未満のアミノ酸の付加、置換、もしくはそれらの組み合わせ、または（ｉｉ）１５個もしくはそれ未満のアミノ酸の欠失を伴って配列番号：２に記載の配列に整列する
第２アミノ酸配列を含む、
ベクター。
【請求項３２】
３７〜４７アミノ酸残基の長さであるポリペプチドをコードする核酸を含む宿主細胞であって、
該ポリペプチドが、（ａ）配列番号：１に記載の配列、または（ｂ）５つもしくはそれ未満のアミノ酸の付加、欠失、置換、もしくはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列するアミノ酸配列を含む、
宿主細胞。
【請求項３３】
４５〜６５アミノ酸残基の長さであるポリペプチドをコードする核酸を含む宿主細胞であって、
該ポリペプチドが、
（ａ）配列番号：１に記載の配列、または
（ｂ）５つもしくはそれ未満のアミノ酸の欠失、置換、もしくはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列する
第１アミノ酸配列を含み、かつ
該ポリペプチドが、
（ａ）配列番号：２に記載の配列、または
（ｂ）（ｉ）付加もしくは置換がシステイン残基の存在をもたらさない、５つもしくはそれ未満のアミノ酸の付加、置換、もしくはそれらの組み合わせ、または（ｉｉ）１５個もしくはそれ未満のアミノ酸の欠失を伴って配列番号：２に記載の配列に整列する
第２アミノ酸配列を含む、
宿主細胞。
【請求項３４】
真核生物宿主細胞である、請求項３２または３３記載の宿主細胞。
【請求項３５】
薬学的に許容される担体および３７〜４７アミノ酸残基の長さであるポリペプチドを含む医薬組成物であって、
該ポリペプチドが、（ａ）配列番号：１に記載の配列、または（ｂ）５つもしくはそれ未満のアミノ酸の付加、欠失、置換、もしくはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列するアミノ酸配列を含む、
医薬組成物。
【請求項３６】
薬学的に許容される担体および４５〜６５アミノ酸残基の長さであるポリペプチドを含む医薬組成物であって、
該ポリペプチドが、
（ａ）配列番号：１に記載の配列、または
（ｂ）５つもしくはそれ未満のアミノ酸の欠失、置換、もしくはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列する
第１アミノ酸配列を含み、かつ
該ポリペプチドが、
（ａ）配列番号：２に記載の配列、または
（ｂ）（ｉ）付加もしくは置換がシステイン残基の存在をもたらさない、５つもしくはそれ未満のアミノ酸の付加、置換、もしくはそれらの組み合わせ、または（ｉｉ）１５個もしくはそれ未満のアミノ酸の欠失を伴って配列番号：２に記載の配列に整列する
第２アミノ酸配列を含む、
医薬組成物。
【請求項３７】
血圧を低下させることなく、哺乳動物における利尿作用およびナトリウム利尿作用を増加させるための方法であって、該哺乳動物に３７〜４７アミノ酸残基の長さであるポリペプチドを投与する段階を含み、
ここで、該ポリペプチドが、（ａ）配列番号：１に記載の配列、または（ｂ）５つもしくはそれ未満のアミノ酸の付加、欠失、置換、もしくはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列するアミノ酸配列を含む、
方法。
【請求項３８】
血圧を低下させることなく、哺乳動物における利尿作用およびナトリウム利尿作用を増加させるための方法であって、該哺乳動物に４５〜６５アミノ酸残基の長さであるポリペプチドを投与する段階を含み、
ここで該ポリペプチドが、
（ａ）配列番号：１に記載の配列、または
（ｂ）５つもしくはそれ未満のアミノ酸の欠失、置換、もしくはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列する
第１アミノ酸配列を含み、かつ
該ポリペプチドが、
（ａ）配列番号：２に記載の配列、または
（ｂ）（ｉ）付加もしくは置換がシステイン残基の存在をもたらさない、５つもしくはそれ未満のアミノ酸の付加、置換、もしくはそれらの組み合わせ、または（ｉｉ）１５個もしくはそれ未満のアミノ酸の欠失を伴って配列番号：２に記載の配列に整列する
第２アミノ酸配列を含む、
方法。
【請求項３９】
腎機能障害を有する哺乳動物を治療するための方法であって、該哺乳動物に３７〜４７アミノ酸残基の長さであるポリペプチドを投与する段階を含み、
ここで、該ポリペプチドが、（ａ）配列番号：１に記載の配列、または（ｂ）５つもしくはそれ未満のアミノ酸の付加、欠失、置換、もしくはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列するアミノ酸配列を含み、かつ
該投与する段階が、該腎機能障害の症状の重症度の軽減を条件とする、
方法。
【請求項４０】
腎機能障害を有する哺乳動物を治療するための方法であって、該哺乳動物に４５〜６５アミノ酸残基の長さであるポリペプチドを投与する段階を含み、
ここで、該ポリペプチドが、
（ａ）配列番号：１に記載の配列、または
（ｂ）５つもしくはそれ未満のアミノ酸の欠失、置換、もしくはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列する
第１アミノ酸配列を含み、かつ
該ポリペプチドが、
（ａ）配列番号：２に記載の配列、または
（ｂ）（ｉ）付加もしくは置換がシステイン残基の存在をもたらさない、５つもしくはそれ未満のアミノ酸の付加、置換、もしくはそれらの組み合わせ、または（ｉｉ）１５個もしくはそれ未満のアミノ酸の欠失を伴って配列番号：２に記載の配列に整列する
第２アミノ酸配列を含み、かつ
該投与する段階が、該腎機能障害の症状の重症度の軽減を条件とする、
方法。
【請求項４１】
哺乳動物が、ヒトである、請求項３７〜４０のいずれか一項記載の方法。
【請求項４２】
腎機能障害が、腎不全を含む、請求項３９または請求項４０記載の方法。
【請求項４３】
腎機能障害が、うっ血性心不全を伴う腎不全を含む、請求項３９または請求項４０記載の方法。
【請求項４４】
ポリペプチドが、静脈内、経口的、または鼻腔内に投与される、請求項３９または請求項４０記載の方法。
【請求項４５】
ポリペプチドが、徐放製剤として投与される、請求項３９または請求項４０記載の方法。
【請求項４６】
ポリペプチドが、３７〜４７アミノ酸残基の長さであり、かつ配列番号：１に記載のアミノ酸配列を含む、
請求項３９記載の方法。
【請求項４７】
ポリペプチドが、３７〜４７アミノ酸残基の長さであり、かつ５つまたはそれ未満のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列するアミノ酸配列を含む、
請求項３９記載の方法。
【請求項４８】
ポリペプチドが、４５〜６５アミノ酸残基の長さであり、かつ（ｉ）配列番号：１に記載の第１アミノ酸配列と（ｉｉ）配列番号：２に記載の第２アミノ酸配列とを含む、
請求項４０記載の方法。
【請求項４９】
ポリペプチドが、４５〜６５アミノ酸残基の長さであり、５つまたはそれ未満のアミノ酸の欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列する第１アミノ酸配列を含み、かつ配列番号：２に記載の第２アミノ酸配列を含む、
請求項４０記載の方法。
【請求項５０】
ポリペプチドが、４５〜６５アミノ酸残基の長さであり、配列番号：１に記載の第１アミノ酸配列を含み、かつ（ｉ）付加もしくは置換がシステイン残基の存在をもたらさない、５つもしくはそれ未満のアミノ酸の付加、置換、もしくはそれらの組み合わせ、または（ｉｉ）１５個もしくはそれ未満のアミノ酸の欠失を伴って配列番号：２に記載の配列に整列する第２アミノ酸配列を含む、
請求項４０記載の方法。
【請求項５１】
ポリペプチドが、４５〜６５アミノ酸残基の長さであり、５つまたはそれ未満のアミノ酸の欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列する第１アミノ酸配列を含み、かつ（ｉ）付加もしくは置換がシステイン残基の存在をもたらさない、５つもしくはそれ未満のアミノ酸の付加、置換、もしくはそれらの組み合わせを伴って、または（ｉｉ）１５個もしくはそれ未満のアミノ酸の欠失を伴って配列番号：２に記載の配列に整列する第２アミノ酸配列を含む、
請求項４０記載の方法。
【請求項５２】
症状が、血清クレアチニン値異常、尿流量異常、レニン値異常、糸球体ろ過量異常、尿ｃＧＭＰ排泄率異常、尿ＡＮＰ排泄率異常、尿ＢＮＰ排泄率異常、心拍出量異常、体血管抵抗異常、またはアルドステロン値異常を含む、請求項３９または請求項４０記載の方法。
【請求項５３】
症状が、尿流量の減少を含み、かつ哺乳動物の尿流量が、投与する段階の後、少なくとも５０％増加する、請求項３９または請求項４０記載の方法。
【請求項５４】
症状が、レニン値の低下を含み、かつ哺乳動物のレニン値が、投与する段階の後、少なくとも５０％増加する、請求項３９または請求項４０記載の方法。
【請求項５５】
症状が、糸球体ろ過量の減少を含み、かつ哺乳動物の糸球体ろ過量が、投与する段階の後、少なくとも５０％増加する、請求項３９または請求項４０記載の方法。
【請求項５６】
症状が、尿ｃＧＭＰ排泄率の低下を含み、かつ哺乳動物の尿ｃＧＭＰ排泄率が、投与する段階の後、少なくとも２５％増加する、請求項３９または請求項４０記載の方法。
【請求項５７】
症状が、尿ＡＮＰ排泄率の低下を含み、かつ哺乳動物の尿ＡＮＰ排泄率が、投与する段階の後、少なくとも２５％増加する、請求項３９または請求項４０記載の方法。
【請求項５８】
症状が、尿ＢＮＰ排泄率の低下を含み、かつ哺乳動物の尿ＢＮＰ排泄率が、投与する段階の後、少なくとも２５％増加する、請求項３９または請求項４０記載の方法。
【請求項５９】
症状が、心拍出量の増加を含み、かつ哺乳動物の心拍出量が、投与する段階の後、少なくとも２％減少する、請求項３９または請求項４０記載の方法。
【請求項６０】
症状が、体血管抵抗の低下を含み、かつ哺乳動物の体血管抵抗が、投与する段階の後、少なくとも１０％増加する、請求項３９または請求項４０記載の方法。
【請求項６１】
症状が、アルドステロン値の低下を含み、かつ哺乳動物のアルドステロン値が、投与する段階の後、少なくとも１０％増加する、請求項３９または請求項４０記載の方法。
【請求項６２】
炎症状態を有する哺乳動物を治療するための方法であって、該哺乳動物に３７〜４７アミノ酸残基の長さであるポリペプチドを投与する段階を含み、
ここで、該ポリペプチドが、（ａ）配列番号：１に記載の配列、または（ｂ）５つもしくはそれ未満のアミノ酸の付加、欠失、置換、もしくはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列するアミノ酸配列を含み、かつ
該投与する段階が、該炎症状態の症状の重症度の軽減を条件とする、
方法。
【請求項６３】
ポリペプチドが、３７〜４７アミノ酸残基の長さであり、かつ５つまたはそれ未満のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列するアミノ酸配列を含む、
請求項６２記載の方法。
【請求項６４】
炎症状態を有する哺乳動物を治療するための方法であって、該哺乳動物に４５〜６５アミノ酸残基の長さであるポリペプチドを投与する段階を含み、
ここで、該ポリペプチドが、
（ａ）配列番号：１に記載の配列、または
（ｂ）５つもしくはそれ未満のアミノ酸の欠失、置換、もしくはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列する
第１アミノ酸配列を含み、かつ
該ポリペプチドが、
（ａ）配列番号：２に記載の配列、または
（ｂ）（ｉ）付加もしくは置換がシステイン残基の存在をもたらさない、５つもしくはそれ未満のアミノ酸の付加、置換、もしくはそれらの組み合わせ、または（ｉｉ）１５個もしくはそれ未満のアミノ酸の欠失を伴って配列番号：２に記載の配列に整列する
第２アミノ酸配列を含み、かつ
該投与する段階が、該炎症状態の症状の重症度の軽減を条件とする、
方法。
【請求項６５】
ポリペプチドが、４５〜６５アミノ酸残基の長さであり、５つまたはそれ未満のアミノ酸の欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列する第１アミノ酸配列を含み、かつ（ｉ）付加もしくは置換が付加もしくは置換がシステイン残基の存在をもたらさない、５つもしくはそれ未満のアミノ酸の付加、置換、もしくはそれらの組み合わせを伴って、または（ｉｉ）１５個もしくはそれ未満のアミノ酸の欠失を伴って配列番号：２に記載の配列に整列する第２アミノ酸配列を含む、
請求項６４記載の方法。
【請求項６６】
心機能障害を有する哺乳動物を治療するための方法であって、該哺乳動物に３７〜４７アミノ酸残基の長さであるポリペプチドを投与する段階を含み、
ここで、該ポリペプチドが、（ａ）配列番号：１に記載の配列、または（ｂ）５つもしくはそれ未満のアミノ酸の付加、欠失、置換、もしくはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列するアミノ酸配列を含み、かつ
該投与する段階が、該心機能障害の症状の重症度の軽減を条件とする、
方法。
【請求項６７】
心機能障害を有する哺乳動物を治療するための方法であって、該哺乳動物に４５〜６５アミノ酸残基の長さであるポリペプチドを投与する段階を含み、
ここで、該ポリペプチドが、
（ａ）配列番号：１に記載の配列、または
（ｂ）５つもしくはそれ未満のアミノ酸の欠失、置換、もしくはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列する
第１アミノ酸配列を含み、かつ
該ポリペプチドが、
（ａ）配列番号：２に記載の配列、または
（ｂ）（ｉ）付加もしくは置換がシステイン残基の存在をもたらさない、５つもしくはそれ未満のアミノ酸の付加、置換、もしくはそれらの組み合わせ、または（ｉｉ）１５個もしくはそれ未満のアミノ酸の欠失を伴って配列番号：２に記載の配列に整列する
第２アミノ酸配列を含み、かつ
該投与する段階が、該心機能障害の症状の重症度の軽減を条件とする、
方法。
【請求項６８】
哺乳動物が、ヒトである、請求項６６または請求項６７記載の方法。
【請求項６９】
心機能障害が、心不全を含む、請求項６６または請求項６７記載の方法。
【請求項７０】
心機能障害が、腎不全を伴ううっ血性心不全を含む、請求項６６または請求項６７記載の方法。
【請求項７１】
ポリペプチドが、静脈内、経口的、または鼻腔内に投与される、請求項６６または請求項６７記載の方法。
【請求項７２】
ポリペプチドが、徐放製剤として投与される、請求項６６または請求項６７記載の方法。
【請求項７３】
ポリペプチドが、３７〜４７アミノ酸残基の長さであり、かつ配列番号：１に記載のアミノ酸配列を含む、
請求項６６記載の方法。
【請求項７４】
ポリペプチドが、３７〜４７アミノ酸残基の長さであり、かつ５つまたはそれ未満のアミノ酸の付加、欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列するアミノ酸配列を含む、
請求項６６記載の方法。
【請求項７５】
ポリペプチドが、４５〜６５アミノ酸残基の長さであり、かつ（ｉ）配列番号：１に記載の第１アミノ酸配列と（ｉｉ）配列番号：２に記載の第２アミノ酸配列とを含む、
請求項６７記載の方法。
【請求項７６】
ポリペプチドが、４５〜６５アミノ酸残基の長さであり、５つまたはそれ未満のアミノ酸の欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列する第１アミノ酸配列を含み、かつ配列番号：２に記載の第２アミノ酸配列を含む、
請求項６７記載の方法。
【請求項７７】
ポリペプチドが、４５〜６５アミノ酸残基の長さであり、配列番号：１に記載の第１アミノ酸配列を含み、かつ（ｉ）付加もしくは置換がシステイン残基の存在をもたらさない、５つもしくはそれ未満のアミノ酸の付加、置換、もしくはそれらの組み合わせ、または（ｉｉ）１５個もしくはそれ未満のアミノ酸の欠失を伴って配列番号：２に記載の配列に整列する第２アミノ酸配列を含む、
請求項６７記載の方法。
【請求項７８】
ポリペプチドが、４５〜６５アミノ酸残基の長さであり、５つまたはそれ未満のアミノ酸の欠失、置換、またはそれらの組み合わせを伴って配列番号：１に記載の配列に整列する、第１アミノ酸配列を含み、かつ（ｉ）付加もしくは置換がシステイン残基の存在をもたらさない、５つもしくはそれ未満のアミノ酸の付加、置換、もしくはそれらの組み合わせを伴って、または（ｉｉ）１５個もしくはそれ未満のアミノ酸の欠失を伴って配列番号：２に記載の配列に整列する第２アミノ酸配列を含む、
請求項６７記載の方法。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図１３】
【図１４】
【図１５】
【図１６】
【図１７】
【図１８】
【図１９】
【図２０】
【図２１】
【図２２】
【図２３】
【図２４】
【図２５】
【図２６】
【図２７】
【図２８】
【図２９】
【図３０】
【図３１】
【図３２】
【図３３】
【図３４】
【図３５】
【図３６】
【図３７】
【図３８】
【図３９】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図１３】
【図１４】
【図１５】
【図１６】
【図１７】
【図１８】
【図１９】
【図２０】
【図２１】
【図２２】
【図２３】
【図２４】
【図２５】
【図２６】
【図２７】
【図２８】
【図２９】
【図３０】
【図３１】
【図３２】
【図３３】
【図３４】
【図３５】
【図３６】
【図３７】
【図３８】
【図３９】
【公表番号】特表２０１０−５０００３２（Ｐ２０１０−５０００３２Ａ）
【公表日】平成２２年１月７日（２０１０．１．７）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００９−５２３９７８（Ｐ２００９−５２３９７８）
【出願日】平成１９年８月８日（２００７．８．８）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００７／０７５４６５
【国際公開番号】ＷＯ２００８／０２１８７２
【国際公開日】平成２０年２月２１日（２００８．２．２１）
【出願人】（５０１０８３１１５）メイヨ・ファウンデーション・フォー・メディカル・エデュケーション・アンド・リサーチ (27)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２２年１月７日（２０１０．１．７）
【国際特許分類】
【出願日】平成１９年８月８日（２００７．８．８）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００７／０７５４６５
【国際公開番号】ＷＯ２００８／０２１８７２
【国際公開日】平成２０年２月２１日（２００８．２．２１）
【出願人】（５０１０８３１１５）メイヨ・ファウンデーション・フォー・メディカル・エデュケーション・アンド・リサーチ (27)
【Ｆターム（参考）】
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