【課題】変化したエフェクター機能を有する、変異体Ｆｃ領域を含むポリペプチドの提供。
【解決手段】Ｆｃ領域を含む親ポリペプチドの変異体であって、当該変異体が、ヒトエフェクター細胞の存在下において、より効果的には抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）を媒介し、もしくはＦｃガンマ受容体（ＦｃγＲ）に対して親ポリペプチドより良好な親和性で結合し、かつＦｃ領域に少なくとも一のアミノ酸修飾を含む変異体。抗体を構成する、変異体。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
Ｆｃ領域を含む親ポリペプチドの変異体であって、当該変異体が、ヒトエフェクター細胞の存在下において、より効果的には抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）を媒介し、もしくはＦｃガンマ受容体（ＦｃγＲ）に対して親ポリペプチドより良好な親和性で結合し、かつＦｃ領域に少なくとも一のアミノ酸修飾を含む変異体。
【請求項２】
抗体を構成する請求項１に記載の変異体。
【請求項３】
親ポリペプチドのＦｃ領域がヒトＩｇＧのＦｃ領域を含む請求項１に記載の変異体。
【請求項４】
ヒトＩｇＧのＦｃ領域が、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、およびＩｇＧ４のＦｃ領域を含む請求項３に記載の変異体。
【請求項５】
親ポリペプチドに比較して1.5倍から100倍効果的にＡＤＣＣを媒介する請求項１に記載の変異体。
【請求項６】
親ポリペプチドより良好な親和性でＦｃγＲＩＩＩと結合する請求項１に記載の変異体。
【請求項７】
親ポリペプチドより悪い親和性でＦｃＲＩＩにさらに結合する請求項６に記載の変異体。
【請求項８】
Ｆｃ領域中に少なくとも一のアミノ酸置換を含む請求項１に記載の変異体。
【請求項９】
Ｆｃ領域のＣＨ２ドメイン中に少なくとも一のアミノ酸修飾を含む請求項１に記載の変異体。
【請求項１０】
その低ヒンジ領域以外のＦｃ領域中に、少なくとも一のアミノ酸修飾を含む請求項１に記載の変異体。
【請求項１１】
Ｆｃ領域のアミノ酸位置２５６、２９０、２９８、３１２、３２６、３３０、３３３、３３４、３６０、３７８、もしくは４３０における一またはそれ以上のアミノ酸置換を含み、Ｆｃ領域における番号付けがＫａｂａｔにおけるのと同じＥＵインデックスのものである請求項１に記載の変異体。
【請求項１２】
そこに挙げられた２又はそれ以上のアミノ酸置換を含む請求項１１に記載の変異体。
【請求項１３】
そこに挙げられた３又はそれ以上のアミノ酸置換を含む請求項１１に記載の変異体。
【請求項１４】
変化したＦｃガンマ受容体（ＦｃγＲ）結合親和性を有する変異体Ｆｃ領域を含むポリペプチドであって、そのＦｃ領域のアミノ酸位置２３８、２３９、２４８、２４９、２５２、２５４、２５５、２５６、２５８、２６５、２６７、２６８、２６９、２７０、２７２、２７６、２７８、２８０、２８３、２８５、２８６、２８９、２９０、２９２、２９３、２９４、２９５、２９６、２９８、３０１、３０３、３０５、３０７、３０９、３１２、３１５、３２０、３２２、３２４、３２６、３２７、３２９、３３０、３３１、３３３、３３４、３３５、３３７、３３８、３４０、３６０、３７３、３７６、３７８、３８２、３８８、３８９、３９８、４１４、４１６、４１９、４３０、４３４、４３５、４３７、４３８、もしくは４３９における一またはそれ以上のアミノ酸修飾を含み、Ｆｃ領域における番号付けがＫａｂａｔにおけるのと同じＥＵインデックスのものであるポリペプチド。
【請求項１５】
その変異体Ｆｃ領域がヒトＩｇＧのＦｃ領域の変異体を含む請求項１４に記載のポリペプチド。
【請求項１６】
ＦｃγＲに対する結合能の減少を示し、そのＦｃ領域のアミノ酸位置２３８、２３９、２４８、２４９、２５２、２５４、２６５、２６８、２６９、２７０、２７２、２７８、２８９、２９２、２９３、２９４、２９５、２９６、２９８、３０１、３０３、３２２、３２４、３２７、３２９、３３３、３３５、３３８、３４０、３７３、３７６、３８２、３８８、３８９、４１４、４１６、４１９、４３４、４３５、４３７、４３８、もしくは４３９における一またはそれ以上のアミノ酸修飾を含み、Ｆｃ領域における番号付けがＫａｂａｔにおけるのと同じＥＵインデックスのものである請求項１４に記載のポリペプチド。
【請求項１７】
ＦｃγＲＩに対し減少した結合能を示す請求項１４に記載のポリペプチド。
【請求項１８】
ＦｃγＲＩに対し減少した結合能を示し、そのＦｃ領域のアミノ酸位置２３８、２６５、２６９、２７０、３２７、もしくは３２９における一またはそれ以上のアミノ酸修飾を含み、Ｆｃ領域における番号付けがＫａｂａｔにおけるのと同じＥＵインデックスのものである請求項１７に記載のポリペプチド。
【請求項１９】
ＦｃγＲＩＩに対し減少した結合能を示す請求項１４に記載のポリペプチド。
【請求項２０】
ＦｃγＲＩＩに対し減少した結合能を示し、そのＦｃ領域のアミノ酸位置２３８、２６５、２６９、２７０、２９２、２９４、２９５、２９８、３０３、３２４、３２７、３２９、３３３、３３５、３３８、３７３、３７６、３８２、４１４、４１６、４１９、４３５、４３８、もしくは４３９における一またはそれ以上のアミノ酸修飾を含み、Ｆｃ領域における番号付けがＫａｂａｔにおけるのと同じＥＵインデックスのものである請求項１９に記載のポリペプチド。
【請求項２１】
ＦｃγＲＩＩＩに対し減少した結合能を示す請求項１４に記載のポリペプチド。
【請求項２２】
ＦｃγＲＩＩＩに対し減少した結合能を示し、そのＦｃ領域のアミノ酸位置２３８、２３９、２４８、２４９、２５２、２５４、２６５、２６８、２６９、２７０、２７２、２７８、２８９、２９３、２９４、２９５、２９６、３０１、３０３、３２２、３２７、３２９、３３８、３４０、３７３、３７６、３８２、３８８、３８９、４１６、４３４、４３５、もしくは４３７における一またはそれ以上のアミノ酸修飾を含み、Ｆｃ領域における番号付けがＫａｂａｔにおけるのと同じＥＵインデックスのものである、請求項２１に記載のポリペプチド。
【請求項２３】
ＦｃγＲに対し増強した結合能を示し、そのＦｃ領域のアミノ酸位置２５５、２５６、２５８、２６７、２６８、２７２、２７６、２８０、２８３、２８５、２８６、２９０、２９８、３０１、３０５、３０７、３０９、３１２、３１５、３２０、３２２、３２６、３３０、３３１、３３３、３３４、３３７、３４０、３６０、３７８、３９８、もしくは４３０における一またはそれ以上のアミノ酸修飾を含み、Ｆｃ領域における番号付けがＫａｂａｔにおけるのと同じＥＵインデックスのものである請求項１４に記載のポリペプチド。
【請求項２４】
ＦｃγＲＩＩＩに対し増強した結合能を示す請求項２３に記載のポリペプチド。
【請求項２５】
さらに、ＦｃγＲＩＩに対し増強した結合能を示す請求項２４に記載のポリペプチド。
【請求項２６】
ＦｃγＲＩＩＩに対し増強した結合能を示し、さらにＦｃγＲＩＩに対し減少した結合能を示すポリペプチドで、そのＦｃ領域のアミノ酸位置２９８、および/または３３３、に修飾を含み、Ｆｃ領域における番号付けがＫａｂａｔにおけるのと同じＥＵインデックスのものである請求項２５に記載のポリペプチド。
【請求項２７】
ＦｃγＲＩＩに対し増強した結合能を示す請求項２３に記載のポリペプチド。
【請求項２８】
ＦｃγＲＩＩに対し増強した結合能を示し、そのＦｃ領域のアミノ酸位置２５５、２５６、２５８、２６７、２６８、２７２、２７６、２８０、２８３、２８５、２８６、２９０、３０１、３０５、３０７、３０９、３１２、３１５、３２０、３２２、３２６、３３０、３３１、３３７、３４０、３７８、３９８、もしくは４３０における一またはそれ以上のアミノ酸修飾を含み、Ｆｃ領域における番号付けがＫａｂａｔにおけるのと同じＥＵインデックスのものである請求項２７に記載のポリペプチド。
【請求項２９】
さらに、ＦｃγＲＩＩＩに対し減少した結合能を示す請求項２７に記載のポリペプチド。
【請求項３０】
ＦｃγＲＩＩに対し増強した結合能を示し、さらにＦｃγＲＩＩＩに対し減少した結合能を示すポリペプチドで、そのＦｃ領域のアミノ酸位置２６８、２７２、２９８、３０１、３２２、もしくは３４０における一またはそれ以上のアミノ酸修飾を含み、Ｆｃ領域における番号付けがＫａｂａｔにおけるのと同じＥＵインデックスのものである請求項２９に記載のポリペプチド。。
【請求項３１】
変更された新生児性のＦｃ受容体（ＦｃγＲｎ）に対する結合親和性を変化させるようなＦｃ領域の変異体を含み、そのＦｃ領域のアミノ酸位置２３８、２５２、２５３、２５４、２５５、２５６、２６５、２７２、２８６、２８８、３０３、３０５、３０７、３０９、３１１、３１２、３１７、３４０、３５６、３６０、３６２、３７６、３７８、３８０、３８２、３８６、３８８、４００、４１３、４１５、４２４、４３３、４３４、４３５、４３６、４３９、３８９、もしくは４４７における一またはそれ以上のアミノ酸修飾を含み、Ｆｃ領域における番号付けがＫａｂａｔにおけるのと同じＥＵインデックスのものであるポリペプチド。
【請求項３２】
ＦｃγＲｎに対し減少した結合能を示す請求項３１に記載のポリペプチド。
【請求項３３】
ＦｃγＲｎに対し減少した結合能を示し、そのＦｃ領域のアミノ酸位置２５２、２５３、２５４、２５５、２８８、３０９、３８６、３８８、４００、４１５、４３３、４３５、４３６、４３９、もしくは４４７における一またはそれ以上のアミノ酸修飾を含み、Ｆｃ領域における番号付けがＫａｂａｔにおけるのと同じＥＵインデックスのものである請求３２に記載のポリペプチド。
【請求項３４】
ＦｃγＲｎに対し増強した結合能を示す請求項３１に記載のポリペプチド。
【請求項３５】
ＦｃγＲｎに対し増強した結合能を示し、そのＦｃ領域のアミノ酸位置２３８、２５６、２６５、２７２、２８６、３０３、３０５、３０７、３１１、３１２、３１７、３４０、３５６、３６０、３６２、３７６、３７８、３８０、３８２、４１３、４２４、もしくは４３４における一またはそれ以上のアミノ酸修飾を含み、Ｆｃ領域における番号付けがＫａｂａｔにおけるのと同じＥＵインデックスのものである請求項３４に記載のポリペプチド。
【請求項３６】
請求項１に記載の変異体及び生理学的に許容される担体を含んでなる組成物。
【請求項３７】
無菌である請求項３６に記載の組成物。
【請求項３８】
請求項１に記載の変異体をコードする単離された核酸。
【請求項３９】
請求項３８に記載の核酸を含むベクター。
【請求項４０】
請求項３９に記載のベクターを有する宿主細胞。
【請求項４１】
請求項４０に記載の宿主細胞を、核酸が発現されるように培養すること包んでなるポリペプチド変異体の製造方法。
【請求項４２】
宿主細胞培地からポリペプチド変異体を回収することを更に含む請求項４１に記載の方法。
【請求項４３】
請求項１に記載のポリペプチド変異体の治療的有効量を哺乳動物に投与することを包んでなる疾患に罹患した哺乳動物の治療方法。
【請求項４４】
改変されたＦｃ受容体（ＦｃＲ）結合性を有する、もしくは改変された抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）活性を有する、Ｆｃ領域の変異体を作製する方法において、
（ａ）変異体Ｆｃ領域を製造するために親ポリペプチドのＦｃ領域に一もしくはそれ以上のアミノ酸修飾を導入し；
（ｂ）ＦｃＲに対するＦｃ領域の変異体の結合性を測定し、もしくはＦｃ領域の変異体のＡＤＣＣ活性を測定することを含んでなる方法。
【請求項４５】
（ｂ）の過程が、インビトロでＦｃＲに対するＦｃ領域の変異体の結合性を測定することを含む請求項４４に記載の方法。
【請求項４６】
（ｂ）の過程が、改善されたＦｃＲ結合親和性を有するＦｃ領域の変異体を同定することを含む請求項４４に記載の方法。
【請求項４７】
ＦｃＲがヒトＦｃガンマ受容体ＩＩＩ（ＦｃγＲＩＩＩ）である請求項４４に記載の方法。
【請求項４８】
（ｂ）の過程において、少なくとも２つの異なるＦｃＲｓに対するＦｃ領域の変異体の結合能を測定することを含む請求項４４に記載の方法。
【請求項４９】
Ｆｃ受容体が、ヒトＦｃガンマ受容体ＩＩ（ＦｃγＲＩＩ）およびヒトＦｃガンマ受容体ＩＩＩ（ＦｃγＲＩＩＩ）を含む請求項４８に記載の方法。

【図１】

【図２】

【図３】

【図４Ａ】

【図４Ｂ】

【図５】

【図６】

【図７】

【図８】

【図９】

【図１０】

【図１１】

【図１２】

【図１３】

【図１４】

【図１５Ａ】

【図１５Ｂ】

【図１６Ａ】

【図１６Ｂ】

【図１７】

【図１８Ａ】

【図１８Ｂ】

【図１９Ａ】

【図１９Ｂ】

【図２０】

【図２１】

【図２２Ａ】

【図２２Ｂ】

【図２３】

【図２４】

【公開番号】特開２０１０−２２７１１６（Ｐ２０１０−２２７１１６Ａ）
【公開日】平成２２年１０月１４日（２０１０．１０．１４）
【国際特許分類】
【外国語出願】
【出願番号】特願２０１０−１３１０２６（Ｐ２０１０−１３１０２６）
【出願日】平成２２年６月８日（２０１０．６．８）
【分割の表示】特願２０００−５９３６３８（Ｐ２０００−５９３６３８）の分割
【原出願日】平成１２年１月１４日（２０００．１．１４）
【出願人】（５０９０１２６２５）ジェネンテック，　インコーポレイテッド (357)
【Ｆターム（参考）】