【課題】新規な修飾抗体の提供。
【解決手段】本発明は、アミノ酸残基250、314及び428から成るグループの中から選択された重鎖定常領域由来の少なくとも1つのアミノ酸が未修飾抗体の中に存在するものと異なるもう1つのアミノ酸で置換され、かくして未修飾抗体に比べてFcRnに対する結合親和力及び/又は血清半減期を改変している、IgGクラスの修飾された抗体を提供している。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
アミノ酸残基250、314及び428から成るグループの中から選択された重鎖定常領域由来の少なくとも1つのアミノ酸残基が未修飾IgGクラス抗体の中に存在するものと異なっており、未修飾抗体のものとの関係において改変されたFcRn結合親和力及び/又は血清半減期を有する、IgGクラスの修飾された抗体。
【請求項２】
前記未修飾IgGクラス抗体がヒトIgG1、IgG2、IgG2M3、IgG3又はIgG4分子の重鎖定常領域を含んで成る、請求項1に記載の修飾された抗体。
【請求項３】
前記未修飾IgGクラス抗体がヒトIgG1又はIgG2M3分子の重鎖定常領域を含んで成る、請求項1に記載の修飾された抗体。
【請求項４】
前記未修飾IgGクラス抗体がキメラ抗体、霊長類型化抗体又はヒト型化抗体である、請求項1に記載の修飾された抗体。
【請求項５】
前記未修飾IgGクラス抗体がヒト抗体である、請求項1に記載の修飾された抗体。
【請求項６】
未修飾抗体がOST577-IgG2M3又はOST577-IgG1である、請求項1に記載の修飾された抗体。
【請求項７】
未修飾抗体がHu1D10-IgG2M3又はHu1D10-IgG1である、請求項1に記載の修飾された抗体。
【請求項８】
（a） 重鎖定常領域由来の前記アミノ酸残基250がグルタミン酸又はグルタミンである； 又は
（b） 重鎖定常領域由来の前記アミノ酸残基428がフェニルアラニン又はロイシンである；
請求項1に記載の修飾された抗体。
【請求項９】
重鎖定常領域由来のアミノ酸残基250がグルタミンである、請求項1に記載の修飾された抗体。
【請求項１０】
重鎖定常領域由来のアミノ酸残基428がロイシンである、請求項1に記載の修飾された抗体。
【請求項１１】
（a） 重鎖定常領域由来の前記アミノ酸残基250がグルタミン酸であり、重鎖定常領域由来のアミノ酸残基428がフェニルアラニンである；
（b） 重鎖定常領域由来の前記アミノ酸残基250がグルタミンであり、重鎖定常領域由来のアミノ酸残基428がフェニルアラニンである；又は
（c） 重鎖定常領域由来の前記アミノ酸残基250がグルタミンであり、重鎖定常領域由来のアミノ酸残基428がロイシンである、
請求項1に記載の修飾された抗体。
【請求項１２】
重鎖定常領域由来の前記アミノ酸残基250がグルタミンであり、重鎖定常領域由来の前記アミノ酸残基428がロイシンである、請求項1に記載の修飾された抗体。
【請求項１３】
前記アミノ酸残基314が、アラニン、アルギニン、アスパラギン酸、アスパラギン、システイン、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、リジン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、トレオニン、トリプトファン、チロシン又はバリンである、請求項1に記載の修飾された抗体。
【請求項１４】
重鎖定常領域由来の前記アミノ酸残基314がアルギニンである、請求項1に記載の修飾された抗体。
【請求項１５】
（a）重鎖定常領域由来の前記アミノ酸残基250が、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、リジン、フェルニアラニン、プロリン、トリプトファン又はチロシンから成るグループの中から選択されている；又は
（b）重鎖定常領域由来の前記アミノ酸残基428が、アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、リジン、プロリン、セリン、トレオニン、チロシン、又はバリンから成るグループの中から選択されている、
請求項1に記載の修飾された抗体。
【請求項１６】
重鎖定常領域由来の前記アミノ酸残基250がアスパラギン酸である、請求項1に記載の修飾された抗体。
【請求項１７】
重鎖定常領域由来の前記アミノ酸残基428がグリシンである、請求項1に記載の修飾された抗体。
【請求項１８】
修飾された抗体が、pH7.4の場合よりもpH6.0で、FcRnに対するより高い結合親和力を有する、請求項1に記載の修飾された抗体。
【請求項１９】
残基250、314及び428から成るグループの中から選択された重鎖定常領域由来の少なくとも1つのアミノ酸残基が天然に発生するIgGクラス抗体の中に存在するものと異なっており、天然に発生する抗体との関係において改変されたFcRn結合親和力及び/又は血清半減期を有する、天然に発生するIgGクラス抗体のものと実質的に同一の定常領域をもつ抗体。
【請求項２０】
前記天然に発生するIgGクラス抗体がヒトIgG1、IgG2、IgG2M3、IgG3又はIgG4分子の重鎖定常領域を含んで成る、請求項19に記載の抗体。
【請求項２１】
前記天然に発生するIgGクラス抗体がヒトIgG1又はIgG2M3分子の重鎖定常領域を含んで成る、請求項19に記載の抗体。
【請求項２２】
前記天然に発生するIgGクラス抗体がキメラ抗体、霊長類型化抗体又はヒト型化抗体である、請求項19に記載の修飾された抗体。
【請求項２３】
前記天然に発生するIgGクラス抗体がヒト抗体である、請求項19に記載の抗体。
【請求項２４】
（a） 重鎖定常領域由来の前記アミノ酸残基250がグルタミン酸又はグルタミンである；又は
（b） 重鎖定常領域由来の前記アミノ酸残基428がフェニルアラニン又はロイシンである；
請求項19に記載の抗体。
【請求項２５】
重鎖定常領域由来のアミノ酸残基250がグルタミンである、請求項19に記載の抗体。
【請求項２６】
重鎖定常領域由来のアミノ酸残基428がロイシンである、請求項19に記載の抗体。
【請求項２７】
（a） 重鎖定常領域由来の前記アミノ酸残基250がグルタミン酸であり、重鎖定常領域由来のアミノ酸残基428がフェニルアラニンである；
（b） 重鎖定常領域由来の前記アミノ酸残基250がグルタミンであり、重鎖定常領域由来のアミノ酸残基428がフェニルアラニンである；又は
（c） 重鎖定常領域由来の前記アミノ酸残基250がグルタミンであり、重鎖定常領域由来のアミノ酸残基428がロイシンである、
請求項19に記載の抗体。
【請求項２８】
重鎖定常領域由来の前記アミノ酸残基250がグルタミンであり、重鎖定常領域由来の前記アミノ酸残基428がロイシンである、請求項19に記載の抗体。
【請求項２９】
重鎖定常領域由来の前記アミノ酸残基314が、アラニン、アルギニン、アスパラギン酸、アスパラギン、システイン、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、リジン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、トレオニン、トリプトファン、チロシン又はバリンである、請求項19に記載の抗体。
【請求項３０】
重鎖定常領域由来の前記アミノ酸残基314がアルギニンである、請求項19に記載の抗体。
【請求項３１】
（a）重鎖定常領域由来の前記アミノ酸残基250が、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、リジン、フェルニアラニン、プロリン、トリプトファン又はチロシンから成るグループの中から選択されている、又は
（b）重鎖定常領域由来の前記アミノ酸残基428が、アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、リジン、プロリン、セリン、トレオニン、チロシン、又はバリンから成るグループの中から選択されている、
請求項19に記載の抗体。
【請求項３２】
重鎖定常領域由来の前記アミノ酸残基250がアスパラギン酸である、請求項19に記載の抗体。
【請求項３３】
重鎖定常領域由来の前記アミノ酸残基428がグリシンである、請求項19に記載の抗体。
【請求項３４】
対応する未修飾IgGクラス抗体のものよりも少なくとも約1.3倍長いin vivo除去半減期をもつIgGクラスの修飾された治療又は診断用抗体。
【請求項３５】
残基250、314及び428から成るグループの中から選択された重鎖定常領域由来の少なくとも1つのアミノ酸残基が、未修飾抗体の中に存在するものと異なっている、請求項34に記載のIgGクラスの修飾された治療又は診断用抗体。
【請求項３６】
（a） 重鎖定常領域由来の前記アミノ酸残基250がグルタミン酸であり、重鎖定常領域由来のアミノ酸残基428がフェニルアラニンである；
（b） 重鎖定常領域由来の前記アミノ酸残基250がグルタミンであり、重鎖定常領域由来のアミノ酸残基428がフェニルアラニンである；又は
（c） 重鎖定常領域由来の前記アミノ酸残基250がグルタミンであり、重鎖定常領域由来のアミノ酸残基428がロイシンである、
請求項34に記載のIgGクラスの修飾された治療又は診断用抗体。
【請求項３７】
重鎖定常領域由来の前記アミノ酸残基250がグルタミンであり、重鎖定常領域由来の前記アミノ酸残基428がロイシンである、請求項34に記載の修飾された抗体。
【請求項３８】
重鎖定常領域由来のアミノ酸残基428がロイシンである請求項34に記載の修飾された抗体。
【請求項３９】
対応する未修飾IgGクラス抗体のものよりも少なくとも約1.3倍低いin vivoクリアランス期をもつIgGクラスの修飾された治療又は診断用抗体。
【請求項４０】
残基250、314及び428から成るグループの中から選択された重鎖定常領域由来のアミノ酸残基の少なくとも1つが、未修飾IgGクラス抗体の中に存在するものと異なっている、請求項39に記載のIgGクラスの修飾された治療又は診断用抗体。
【請求項４１】
（a） 重鎖定常領域由来の前記アミノ酸残基250がグルタミン酸であり、重鎖定常領域由来のアミノ酸残基428がフェニルアラニンである；
（b） 重鎖定常領域由来の前記アミノ酸残基250がグルタミンであり、重鎖定常領域由来のアミノ酸残基428がフェニルアラニンである；又は
（c） 重鎖定常領域由来の前記アミノ酸残基250がグルタミンであり、重鎖定常領域由来のアミノ酸残基428がロイシンである、
請求項39に記載のIgGクラスの修飾された治療又は診断用抗体。
【請求項４２】
重鎖定常領域由来の前記アミノ酸残基250がグルタミンであり、重鎖定常領域由来の前記アミノ酸残基428がロイシンである、請求項39に記載の修飾された抗体。
【請求項４３】
重鎖定常領域由来のアミノ酸残基428がロイシンである、請求項39に記載の修飾された抗体。
【請求項４４】
対応する未修飾IgGクラス抗体のものよりも少なくとも約1.3倍高い濃度-時間曲線下のin vivo面積をもつIgGクラスの修飾された治療又は診断用抗体。
【請求項４５】
残基250、314及び428から成るグループの中から選択された重鎖定常領域由来の少なくとも1つのアミノ酸残基が、未修飾IgGクラス抗体の中に存在するものと異なっている、請求項44に記載のIgGクラスの修飾された治療又は診断用抗体。
【請求項４６】
（a） 重鎖定常領域由来の前記アミノ酸残基250がグルタミン酸であり、重鎖定常領域由来のアミノ酸残基428がフェニルアラニンである；
（b） 重鎖定常領域由来の前記アミノ酸残基250がグルタミンであり、重鎖定常領域由来のアミノ酸残基428がフェニルアラニンである；又は
（c） 重鎖定常領域由来の前記アミノ酸残基250がグルタミンであり、重鎖定常領域由来のアミノ酸残基428がロイシンである、
請求項44に記載のIgGクラスの修飾された治療又は診断用抗体。
【請求項４７】
重鎖定常領域由来の前記アミノ酸残基250がグルタミンであり、重鎖定常領域由来の前記アミノ酸残基428がロイシンである、請求項44に記載の修飾された抗体。
【請求項４８】
重鎖定常領域由来のアミノ酸残基428がロイシンである請求項44に記載の修飾された抗体。
【請求項４９】
重鎖定常領域由来の残基250が、アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リジン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、トリプトファン、チロシン又はバリンである、IgGクラスの未修飾抗体から誘導されたIgGクラスの修飾された抗体。
【請求項５０】
重鎖定常領域由来の残基314が、アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、リジン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、トレオニン、トリプトファン、チロシン又はバリンである、IgGクラスの未修飾抗体から誘導されたIgGクラスの修飾された抗体。
【請求項５１】
重鎖定常領域由来の残基428が、アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リジン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、トレオニン、トリプトファン、チロシン又はバリンである、IgGクラスの未修飾抗体から誘導されたIgGクラスの修飾された抗体。
【請求項５２】
請求項1に記載の修飾された抗体の定常領域又は重鎖Fc領域。
【請求項５３】
請求項19に記載の天然に発生するIgGクラス抗体のものと実質的に同一の定常領域を有する抗体の重鎖定常領域又は重鎖Fc領域。
【請求項５４】
配列番号10〜76のいずれか1つのアミノ酸配列を含むポリペプチド。
【請求項５５】
請求項54に記載のポリペプチドをコードするポリヌクレオチド分子。
【請求項５６】
請求項54に記載のポリニクレオチド分子を含むベクターを含んで成る宿主細胞。
【請求項５７】
残基250、314及び428から成るグループの中から、重鎖定常領域由来の少なくとも1つのアミノ酸残基を選択する段階及び選択された残基（単複）を未修飾抗体の中に存在するものとは異なるアミノ酸で置換し、かくして抗体のFcRn結合親和力及び/又は血清半減期を改変させる段階を含んで成る、IgGクラスの抗体のFcRn結合親和力及び/又は血清半減期を改変する方法。
【請求項５８】
（a） アミノ酸残基250、314及び428から成るグループの中から選択された、重鎖定常領域由来の少なくとも1つのアミノ酸残基が、未修飾抗体の中に存在するものとは異なる残基で置換されている、免疫グロブリン重鎖の定常領域を少なくともコードするDNAに操作可能な形でリンクされた適切なプロモータを含んで成る発現ベクターを調製する段階；
（b） 宿主細胞を前記ベクターで形質転換する段階；及び
（c） 前記修飾された抗体を産生するべく前記形質転換済み宿主細胞を培養する段階、
を含んで成る、未修飾抗体と比べた場合に改変されたFcRnに対する結合親和力及び/又は改変された血清半減期を有するIgGクラスの修飾された抗体を生産する方法。
【請求項５９】
相補的免疫グロブリン軽鎖をコードするDNAに対し操作可能な形でリンクされたプロモータを含む第2の発現ベクターを調製する段階及びさらに前記第2の発現ベクターで前記宿主細胞を形質転換させる段階、をさらに含んで成る、請求項58に記載の方法。
【請求項６０】
（a） 重鎖定常領域由来の前記アミノ酸残基250がグルタミン酸又はグルタミンで置換される；又は
（b） 重鎖定常領域由来の前記アミノ酸残基428がフェニルアラニン又はロイシンで置換される；
請求項58に記載の方法。
【請求項６１】
重鎖定常領域由来の前記アミノ酸残基250がグルタミンで置換される、請求項58に記載の方法。
【請求項６２】
重鎖定常領域由来のアミノ酸残基428がロイシンで置換される、請求項58に記載の方法。
【請求項６３】
（a） 重鎖定常領域由来の前記アミノ酸残基250がグルタミン酸で置換され、重鎖定常領域由来のアミノ酸残基428がフェニルアラニンで置換される；
（b） 重鎖定常領域由来の前記アミノ酸残基250がグルタミンで置換され、重鎖定常領域由来のアミノ酸残基428がフェニルアラニンで置換される；又は
（c） 重鎖定常領域由来の前記アミノ酸残基250がグルタミンで置換され、重鎖定常領域由来のアミノ酸残基428がロイシンで置換される、
請求項58に記載の方法。
【請求項６４】
重鎖定常領域由来の前記アミノ酸残基250がグルタミンで置換され、重鎖定常領域由来の前記アミノ酸残基428がロイシンで置換される、請求項58に記載の方法。
【請求項６５】
重鎖定常領域由来の前記アミノ酸残基314が、アラニン、アルギニン、アスパラギン酸、アスパラギン、システイン、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、リジン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、トレオニン、トリプトファン、チロシン又はバリンから成るグループの中から選択された残基で置換される、請求項58に記載の方法。
【請求項６６】
重鎖定常領域由来の前記アミノ酸残基314がアルギニンで置換される、請求項58に記載の方法。
【請求項６７】
（a）重鎖定常領域由来のアミノ酸残基250が、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、リジン、フェルニアラニン、プロリン、トリプトファン又はチロシンから成るグループの中から選択された残基で置換される、又は
（b）アミノ酸残基428が、アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、リジン、プロリン、セリン、トレオニン、チロシン、又はバリンから成るグループの中から選択された残基で置換される、
請求項58に記載の方法。
【請求項６８】
重鎖定常領域由来の前記アミノ酸残基250がアスパラギン酸で置換される、請求項58に記載の方法。
【請求項６９】
重鎖定常領域由来の前記アミノ酸残基428がグリシンで置換される、請求項58に記載の方法。

【図１】

【図２】

【図３Ａ】

【図３Ｂ−１】

【図３Ｂ−２】

【図３Ｂ−３】

【図３Ｂ−４】

【図３Ｂ−５】

【図３Ｂ−６】

【図３Ｃ】

【図３Ｄ】

【図３Ｅ】

【図３Ｆ】

【図４】

【図５Ａ】

【図５Ｂ】

【図６】

【図７Ａ】

【図７Ｂ】

【図８】

【図９Ａ】

【図９Ｂ】

【図１０Ａ】

【図１０Ｂ】

【図１１Ａ】

【図１１Ｂ】

【図１１Ｃ】

【図１２Ａ】

【図１２Ｂ】

【図１３】

【図１４】

【図１５Ａ】

【図１５Ｂ】

【図１５Ｃ】

【図１５Ｄ】

【図１５Ｅ】

【図１６Ａ】

【図１６Ｂ】

【図１７Ａ】

【図１７Ｂ】

【図１８Ａ】

【図１８Ｂ】

【図１９】

【公開番号】特開２０１１−５２０１２（Ｐ２０１１−５２０１２Ａ）
【公開日】平成２３年３月１７日（２０１１．３．１７）
【国際特許分類】
【外国語出願】
【出願番号】特願２０１０−２６０４５４（Ｐ２０１０−２６０４５４）
【出願日】平成２２年１１月２２日（２０１０．１１．２２）
【分割の表示】特願２００５−５０１４６６（Ｐ２００５−５０１４６６）の分割
【原出願日】平成１５年１０月１５日（２００３．１０．１５）
【出願人】（５０９１８９０８６）アボット　バイオセラピューティクス　コーポレイション (11)
【Ｆターム（参考）】