抗癌剤として有用な新規４−β−１’’−（２’’−（置換ベンゾイル）アニリノ）ポドフィロトキシンアナログ
【課題】優れた収率で、ポドフィロトキシンおよび４’−Ｏ−デメチルエピポドフィロトキシンの新しくかつ立体選択的な化合物を提供すること。抗癌剤として有用な新しい４β−［２’’−ベンゾイル置換］アリールアミノポドフィロトキシンアナログを提供すること。
【解決手段】本発明は、抗癌活性を示す新しいクラスの化合物４β−１’’−［｛２’’−ベンゾイル置換｝アニリノ］ポドフィロトキシン、およびこれを調製するためのプロセスを提供する。本発明は、特に、有用な抗癌剤の、ポドフィロトキシンの新しいクラスの４β−Ｏ−ベンゾイルアニリノ同属種の合成に関する。
【解決手段】本発明は、抗癌活性を示す新しいクラスの化合物４β−１’’−［｛２’’−ベンゾイル置換｝アニリノ］ポドフィロトキシン、およびこれを調製するためのプロセスを提供する。本発明は、特に、有用な抗癌剤の、ポドフィロトキシンの新しいクラスの４β−Ｏ−ベンゾイルアニリノ同属種の合成に関する。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（技術分野）
本発明は、有用な抗癌剤である新しい４β−１’’−［２’’−（置換ベンゾイル）アニリノ］ポドフィロトキシンアナログの合成のためのプロセスに関する。
【０００２】
本発明は、特に、有用な抗癌剤の、ポドフィロトキシンの新しいクラスの４β−Ｏ−ベンゾイルアニリノ同属種の合成に関する。
【背景技術】
【０００３】
（背景技術）
小肺癌、精巣癌、リンパ腫、カポージ肉腫の処置において現在使用されるエトポシドおよびテニポシドの２つの合成ポドフィロトキシン誘導体は、重要な薬物である。エトポシドの臨床的効力および興味深い機構は、この化合物のＣ−４置換の改変に関し、そしてより優れた抗腫瘍活性についてのさらなる研究における関心を非常に刺激している（非特許文献１；Ｌｅｖｙ，Ｒ．Ｋ．；Ｈａｌｌ，Ｉ．Ｈ．；Ｌｅｅ，Ｋ．Ｈ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．１９８３，７２，１１５８．；Ｉｓｓｅｌｌ，Ｂ．Ｆ．；Ｍｕｇｇｉａ，Ｆ．Ｍ．；Ｃａｒｔｅｒ，Ｓ．Ｋ．Ｅｔｏｐｏｓｉｄｅ［ＶＰ−１６］Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｓｔａｔｕｓ ａｎｄ Ｎｅｗ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｓ；Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１９８４．；Ｓｔｉｏ，Ｈ．；Ｙｏｓｈｉｋａｗａ，Ｈ．；Ｎｉｓｈｉｍｕｒａ，Ｙ．；Ｋｏｎｄｏ，Ｓ．；Ｔａｋｅｕｃｈｉ，Ｔ．；Ｕｍｅｚａｗａ，Ｈ．Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．１９８６，３４，３７３３．Ｓａｔｉｏ，Ｈ．；Ｎｉｓｈｉｍｕｒａ，Ｙ．；Ｋｏｎｄｏ，Ｓ．；Ｋｏｍｕｒｏ，Ｋ．；Ｔａｋｅｕｃｈｉ，Ｔ．；Ｂｕｌｌ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｊｐｎ．１９８８，６１，２４９３）。エトポシドについての作用の主な機構は、ＤＮＡトポイソメラーゼＩＩの触媒活性の阻害、および致死的なＤＮＡ鎖の破壊の同時の酵素媒介生成によることが十分に確立されている。ポドフィロトキシン由来の化合物についての構造活性関連研究により、トランスＣ／Ｄ環接合が抗腫瘍活性に必須であることが示された。４−アルキルアミノ置換基または４−アリールアミノ置換基によるグリコシド部分の構造的改変に関する多数の研究が、実施され、これらの改変は、ヒトＤＮＡトポイソメラーゼＩＩに対する阻害活性ならびに細胞性タンパク質長ＤＮＡ破損を引き起こすより強力な活性を改善した（Ｌｅｅ．Ｋ．Ｈ．；Ｉｍａｋｕｒａ，Ｙ．；Ｈａｒｕｎａ，Ｍ．；Ｂｅｅｒｓ，Ｓ．Ａ．；Ｔｈｕｒｓｔｏｎ，Ｌ．Ｓ．；Ｄａｉ，Ｈ．Ｊ．；Ｃｈｅｎ，Ｃ．Ｈ．；Ｌｉｕ，Ｓ．Ｙ．；Ｃｈｅｎｇ，Ｙ．Ｃ．Ｊ．Ｎａｔ．Ｐｒｏｄ．１９８９，５２，６０６．Ｌｉｕ，Ｓ．Ｙ．；Ｈａｗａｎｇ，Ｂ．Ｄ．；Ｈａｒｕｎａ，Ｍ．；Ｉｍａｋｕｒａ，Ｙ．；Ｌｅｅ，Ｋ．Ｈ．；Ｃｈｅｎｇ，Ｙ．Ｃ．Ｍｏｌ．Ｐｈａｒｍｃｏｌ．１９８９，３６，７８．Ｌｅｅ，Ｋ，Ｈ．；Ｂｅｅｒｓ，Ｓ．Ａ．；Ｍｏｒｉ，Ｍ．；Ｗａｎｇ，Ｚ．Ｑ．；Ｋｕｏ，Ｙ．Ｈ．；Ｌｉ，Ｌ．；Ｌｉｕ，Ｓ．Ｙ．；Ｃｈｅｎｇ，Ｙ．Ｃ．；Ｊ．．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１９９０，３３，１３６４）。この文脈において、４’−Ｏ−デメチルエピポドフィロトキシンベースの化合物の多数の４β−アリールアミノ誘導体が合成され、そして抗腫瘍活性について調査されている。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００４】
【非特許文献１】Ｊａｄｉｎｅ，Ｉ．Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ Ａｇｅｎｔｓ Ｂａｓｅｄ ｏｎ Ｎａｔｕｒａｌ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ Ｍｏｄｅｌｓ；Ｃａｓｓａｄｙ，Ｊ．Ｍ．，Ｄｏｕｒｓ，Ｊ．編；Ａｃａｄｅｍｉｃ ｐｒｅｓｓ：Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１９８０，３１９頁
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
（発明の目的）
本発明の主な目的は、抗癌剤として有用な新しい４β−［２’’−ベンゾイル置換］アリールアミノポドフィロトキシンアナログを提供することである。
【０００６】
本発明の別の目的は、有用な抗癌剤（これは、上記のような欠点を除去する）としての、新しい４β−１’’−［｛２’’−ベンゾイル置換｝アニリノ］ポドフィロトキシン誘導体の合成のためのプロセスを提供することである。
【０００７】
本発明の別の目的は、優れた収率で、ポドフィロトキシンおよび４’−Ｏ−デメチルエピポドフィロトキシンの新しくかつ立体選択的な化合物を提供することである。
【０００８】
本発明のなお別の目的は、Ｃ−４β−ブロモ中間体の直接求核置換によるこれらのアナログの合成のための、重要な工程を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
（発明の要旨）
本発明の上記の目的および他の目的は、ポドフィロトキシンおよび４’−Ｏ−デメチルエピポドフィロトキシンの新しいクラスのＣ４−β−アリール置換誘導体およびＮ連鎖誘導体（これらは、抗癌剤として合成される）を提供することによって、達成される。
【００１０】
従って、本発明は、構造式（２）を有する新しいクラスの４β−１’’−［｛２’’−ベンゾイル置換｝アニリノ］ポドフィロトキシンアナログを提供する。
【００１１】
本発明はまた、有用な抗癌剤の新しい４β−１’’−［２’’−（置換ベンゾイル）アニリノ］ポドフィロトキシンアナログの調製のためのプロセスを提供する。より詳細には、ポドフィロトキシンの４β−１’’−［２’’−（置換ベンゾイル）アニリノ］誘導体の調製のためのプロセスを提供する。
【００１２】
本発明は、さらに以下を提供する。
（項目１） 図２の４β−１’’−［｛２’’−ベンゾイル置換｝アニリノ］ポドフィロトキシンの新しいアナログであって、
【化１】
該アナログは、抗癌活性を有し、ここで、Ｒ、Ｒ１およびＲ２は、独立してかまたは組み合わせて、
Ｒ＝ＨまたはＣＨ３
Ｒ１＝Ｈまたはハロゲン
Ｒ２＝Ｈ、ＮＯ２またはハロゲン
を表す、アナログ。
（項目２） 項目１に記載の４β−１’’−［｛２’’−ベンゾイル置換｝アニリノ］ポドフィロトキシンのアナログであって、ここで、好ましい化合物およびこれらの細胞傷害性の値が以下の通りである、アナログ：
【表１】
。
（項目３） 項目２に記載の４β−１’’−［｛２’’−ベンゾイル置換｝アニリノ］ポドフィロトキシンの少数のアナログであって、該アナログは、標準的な抗癌薬物エトポシドと比較してインビトロでより優れた抗癌活性を有する、少数のアナログ。
（項目４） 図２の４β−１’’−［｛２’’−ベンゾイル置換｝アニリノ］ポドフィロトキシンアナログの調製のためのプロセスであって、
【化２】
ここで、Ｒ、Ｒ１およびＲ２は、独立してかまたは組み合わせて、
Ｒ＝ＨまたはＣＨ３
Ｒ１＝Ｈまたはハロゲン
Ｒ２＝Ｈ、ＮＯ２またはハロゲン
を表し、該プロセスは、以下の工程：
ａ）無水有機溶媒培体中で相間移動触媒塩基の存在下で、−１０℃と４０℃との間の範囲の温度で、４β−ブロモ−４−ジオキシポドフィロトキシンを、置換または非置換の２−アミノベンゾフェノンと４〜１６時間反応させる工程；
ｂ）減圧下で工程（ａ）の反応混合物から該有機溶媒を除去して残渣を得る工程；および
ｃ）工程（ｂ）の残渣をシリカゲルカラムで精製し、クロロホルム−メタノールの混合物で溶出して、必要な４β−１’’−［｛２’’−ベンゾイル置換｝アニリノ］ポドフィロトキシンアナログを得る工程、
を包含する、プロセス。
（項目５） 項目３に記載のプロセスであって、工程（ａ）において、使用される相間移動触媒が、テトラブチルアンモニウムクロライド、テトラブチルアンモニウムブロミド、テトラブチルアンモニウムイオダイドまたはａｌｉｑｕａｔ ３３６からなる群より選択され、そして好ましくは、テトラブチルアンモニウムイオダイドである、プロセス。
（項目６） 項目３に記載のプロセスであって、ここで、工程（ａ）において、置換２−アミノベンゾフェノンが、２−アミノ−２’，５’−ジクロロベンゾフェノン、２−アミノ−５−ニトロベンゾフェノン、２−アミノ−５−クロロベンゾフェノン、２−アミノ−５−クロロベンゾフェノン、２−アミノ−５−クロロ−２’−フルオロベンゾフェノン、２−アミノ−４’ブロモベンゾフェノン、または４−アミノ−３−ニトロベンゾフェノンからなる群より選択される、プロセス。
（項目７） 項目３に記載のプロセスであって、ここで、工程（ａ）において、使用される有機溶媒が、ジクロロメタン、クロロホルム、テトラヒドロフランまたはジオキサンからなる群より選択され、そして好ましくは、テトラヒドロフランである、プロセス。
（項目８） 項目３に記載のプロセスであって、ここで、工程（ａ）において、使用される塩基が、トリメチルアミン、トリエチルアミン、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸セシウムまたは炭酸バリウムからなる群より選択され、そして好ましくは、トリエチルアミンである、プロセス。
（項目９） 前記反応が、好ましくは室温で実施される、項目３に記載のプロセス。
（項目１０） 項目３に記載のプロセスであって、ここで、工程（ａ）において、使用される置換または非置換のベンゾフェノンおよび臭素化合物のモル比が、１：１〜２：１の範囲であり、そして好ましくは、１：１．１７である、プロセス。
（項目１１） 項目３に記載のプロセスであって、ここで、工程（ａ）において、臭素化合物対相間移動触媒のモル当量比が、１：０．２〜１：０．５の範囲である、プロセス。
（項目１２） 被験体における癌を処置するための、項目１および２に記載の一般式（２）の４β−１’’−［｛２’’−ベンゾイル置換｝アニリノ］ポドフィロトキシンアナログの使用であって、該使用は、必要に応じて添加剤を含む、薬学的に有効な投薬量の該アナログを、それを必要とする該被験体に投与する工程を含む、使用。
（項目１３） ４β−１’’−［｛２’’−ベンゾイル置換｝アニリノ］ポドフィロトキシンアナログが、単独でかまたは薬学的に受容可能なキャリアと組み合わせて使用される、項目１２に記載の使用。
（項目１４） 一般式（２）のアナログが全身的または経口的に投与される、項目１２に記載の使用。
（項目１５） 前記被験体が哺乳動物から選択される、項目１２に記載の使用。
（項目１６） 前記被験体がヒトを除く、項目１５に記載の使用。
（項目１７） 一般式（２）の化合物が、薬学的に受容可能な添加剤、キャリア、希釈剤、溶媒、濾材、潤滑剤、賦形剤、結合剤または安定剤と組み合わせて、前記被験体に投与される、項目１２に記載の使用。
（項目１８） 好ましいアナログのインビトロ抗癌活性のＧＩ５０値が、０．００１〜３８２μＭの範囲内である、項目１２に記載の使用。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
【図１】図１は、ポドフィロトキシン、エトポシドおよびテニポシドの構造を示す。
【図２】図２は、クラス４β−１’’−［｛２’’−ベンゾイル置換｝アニリノ］ポドフィロトキシンアナログの化合物の一般式を表す。
【図３】図３は、抗癌剤として新しいポドフィロトキシンアナログの合成のためのプロセスを開示し、このプロセスは、優れた収率で、ポドヒロトキシンの新規かつ立体選択的な誘導体を生成する。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
（詳細な説明）
抗癌剤としての新しいポドフィロトキシンアナログの合成のためのプロセスは、優れた収率でポドフィロトキシンの新規かつ立体選択的な誘導体を生成し、ここで、これらのアナログの合成のための重要な工程は、Ｃ−４β−ブロモ中間体、４β−ブロモ−ポドフィロトキシンおよび４’−Ｏ−デメチルエピポドフィロトキシンの直接的求核置換であり、これらは、立体選択的様式で、置換または非置換の２−アミノベンゾフェノンと反応され、４β−１’’−［｛２’’−ベンゾイル置換｝アニリノ］ポドフィロトキシン誘導体を生じる。
【００１５】
これらの４−ブロモポドフィロトキシン中間体は、文献に記載されるように、関連したポドフィロトキシン化合物の臭素化によって調製されている（Ｋｕｈｎ，Ｍ．；Ｋｅｌｌｅｒ−Ｊｕｓｌｅｎ，Ｃ．；Ｖａｎ Ｗａｒｔｂｕｒｇ，Ｈｅｌｖ．Ｃｈｅｍｉｃａ．Ａｃｔａ，１９６９，５２，９４４）。
【００１６】
本発明の１つの実施形態において、天然に存在するポドフィロトキシンリグナンは、Ｐｏｄｏｐｈｙｌｌｕｍ ｐｅｌｔａｔｕｍ ｌｉｎｎａｅｕｓから単離された。
【００１７】
本発明の別の実施形態において、４β−中間体の合成は、ポドフィロトキシンおよび４’−Ｏ−デメチルエピポドフィロトキシンの臭素化から実施されている。
【００１８】
本発明のなお別の実施形態において、１〜２当量の異なる置換および非置換のベンゾフェノン化合物が使用されている。
【００１９】
本発明のなお別の実施形態において、種々の溶媒（例えば、ジクロロメタン、クロロホルムおよびテトラヒドロフラン）が、求核置換工程に使用された。
【００２０】
本発明のなお別の実施形態において、触媒作用量のＢｕ４Ｎ＋Ｉ−（０．２〜０．５当量）を使用して、−１０℃と室温との間で、２〜１０時間、反応混合物を撹拌した。
【００２１】
本発明のなお別の実施形態において、Ｋ２ＣＯ３、Ｅｔ３Ｎのような塩基もまた使用した。
【００２２】
本発明のなお別の実施形態において、これらのアナログの精製を、クロロホルム／メタノールを溶出剤として使用するカラムクロマトグラフィーによって行なった。
【００２３】
従って、本発明は、新しいクラスのポドフィロトキシンアナログを提供し、これらは、立体選択的様式で合成された。
【００２４】
強化された抗腫瘍活性および／またはエトポシド耐性腫瘍細胞株に対する活性を有する、新しい４β−アリールアミノ置換ポドフィロトキシン同属種の設計および合成のためのプログラムを研究室において開始した。これらの努力で、新しい４β−１’’−［｛２’’−ベンゾイル置換｝アニリノ］ポドフィロトキシン誘導体を合成し、そしてこれらの細胞傷害性および抗癌効力について評価した。興味深いことに、これらの化合物のいくつかは、エトポシドと比較して、より大きいインビトロ細胞傷害性の値を示した。これらの化合物の合成を、樹脂から得たポドフィロトキシンを使用するスキーム中に記載されるように実施する。４ａ〜４ｐの細胞傷害性の値は、表１に示される。
【００２５】
【化３】
（表１ いくつかの代表的な化合物についての（インビトロ）細胞傷害性データ）
【００２６】
【表２】
本発明の化合物のいくつかを以下に示す：
ａ）４β−１’’−［２’’−（ベンゾイル）アニリノ］−４−デスオキシポドフィロトキシン
ｂ）４’−Ｏ−デメチル−４β−１’’−［２’’−（ベンゾイル）アニリノ］−４−デスオキシポドフィロトキシン
ｃ）４β−１’’−［２’’−（２−クロロベンゾイル）−４’’−クロロアニリノ］−４−デスオキシポドフィロトキシン
ｄ）４’−Ｏ−１’’−［２’’−（２−クロロベンゾイル）−４’’−クロロアニリノ］−４−デスオキシポドフィロトキシン
ｅ）４β−１’’−［２’’−（ベンゾイル）−４’’−ニトロアニリノ］−４−デスオキシポドフィロトキシン
ｆ）４’−Ｏ−デメチル−４β−１’’−［２’’−（ベンゾイル）］−４’’−ニトロアニリノ］−４−デスオキシポドフィロトキシン
ｇ）４β−１’’−［２’’−（ベンゾイル）−４’’−クロロアニリノ］−４−デスオキシポドフィロトキシン
ｈ）４’−Ｏ−デメチル−４β−１’’−［２’’−（ベンゾイル）］−４’’−クロロアニリノ］−４−デスオキシポドフィロトキシン
ｉ）４β−１’’−［２’’−（２−フルオロベンゾイル）−４’’−クロロアニリノ］−４−デスオキシポドフィロトキシン
ｊ）４’−Ｏ−デメチル−４β−１’’−［２’’−（２−フルオロベンゾイル）−４’’−クロロアニリノ］−４−デスオキシポドフィロトキシン
ｋ）４β−１’’−［３’’−（ベンゾイル）アニリノ］−４−デスオキシポドフィロトキシン
ｌ）４’−Ｏ−デメチル−４β−１’’−［３’’−（ベンゾイル）アニリノ］−４−デスオキシポドフィロトキシン
ｍ）４β−１’’−［２’’−（ベンゾイル）−２’’−ニトロアニリノ］−４−デスオキシポドフィロトキシン
ｎ）４’−Ｏ−デメチル−４β−１’’−［４’’−（ベンゾイル）］−２’’−ニトロアニリノ］−４−デスオキシポドフィロトキシン
以下の実施例は、例示の目的で与えられ、本発明の範囲を制限するとして解釈されるべきではない。
【実施例】
【００２７】
（実験）
（実施例１）
４β−１’’−［２’’−（ベンゾイル）アニリノ］−４−デスオキシポドフィロトキシン（４ａ）：４β−ブロモ−４−デスオキシポドフィロトキシン（０．１ｇ、０．２１ｍｍｏｌ）を、室温で４時間にわたり、無水テトラヒドロフラン中のＥｔ３Ｎ（０．０３２ｇ、０．３２ｍｍｏｌ）およびＢｕ４Ｎ＋Ｉ−（０．０１５ｇ、０．０４２ｍｍｏｌ）の存在下で、２−アミノベンゾフェノン（０．０４５ｇ、０．２３ｍｍｏｌ）と反応させた。反応の完了後、溶媒を減圧下で除去した。残渣を、溶出剤としてクロロホルム−メタノール（９．８：０．２）を使用する、シリカゲルカラムクロマトグラフィーに供した。
【００２８】
【化４】
（実施例２）
４’−Ｏ−デメチル−４β−１’’−［２’’−（ベンゾイル）アニリノ］−４−デスオキシポドフィロトキシン（４ｂ）：４β−ブロモ−４’−Ｏ−デメチル−４−デスオキシポドフィロトキシン（０．１ｇ、０．２１ｍｍｏｌ）を、室温で４時間にわたり、無水テトラヒドロフラン中のＥｔ３Ｎ（０．０３２ｇ、０．３２ｍｍｏｌ）およびＢｕ４Ｎ＋Ｉ−（０．０１５ｇ、０．０４２ｍｍｏｌ）の存在下で、２−アミノベンゾフェノン（０．０４５ｇ、０．２３ｍｍｏｌ）と反応させた。反応の完了後、溶媒を減圧下で除去した。残渣を、溶出剤としてクロロホルム−メタノール（９．８：０．２）を使用する、シリカゲルカラムクロマトグラフィーに供した。
【００２９】
【化５】
（実施例３）
４β−１’’−［２’’−（２−クロロベンゾイル）−４’’−クロロアニリノ］−４−デスオキシポドフィロトキシン（４ｃ）：４β−ブロモ−４−デスオキシポドフィロトキシン（０．１０ｇ、０．２１ｍｍｏｌ）を、室温で５時間にわたり、無水テトラヒドロフラン中のＥｔ３Ｎ（０．０３２ｇ、０．３２ｍｍｏｌ）およびＢｕ４Ｎ＋Ｉ−（０．０１５ｇ、０．０４２ｍｍｏｌ）の存在下で、２−アミノ−２’，５’−ジクロロベンゾフェノン（０．０６ｇ、０．２３ｍｍｏｌ）と反応させた。反応の完了後、溶媒を減圧下で除去した。残渣を、溶出剤としてクロロホルム−メタノール（９．７：０．３）を使用する、シリカゲルカラムクロマトグラフィーに供した。
【００３０】
【化６】
（実施例４）
４’−Ｏ−デメチル−４β−１’’−［２’’−（２−クロロベンゾイル）−４’’−クロロアニリノ］−４−デスオキシポドフィロトキシン（４ｄ）：４β−ブロモ−４’−Ｏ−デメチル−４−デスオキシポドフィロトキシン（０．１０ｇ、０．２１ｍｍｏｌ）を、室温で５時間にわたり、テトラヒドロフラン中のＥｔ３Ｎ（０．０３２ｇ、０．３２ｍｍｏｌ）およびＢｕ４Ｎ＋Ｉ−（０．０１５ｇ、０．０４２ｍｍｏｌ）の存在下で、２−アミノ−２’，５’−ジクロロベンゾフェノン（０．０６ｇ、０．２３ｍｍｏｌ）と反応させた。反応の完了後、溶媒を減圧下で除去した。残渣を、溶出剤としてクロロホルム−メタノール（９．７：０．３）を使用する、シリカゲルカラムクロマトグラフィーに供した。
【００３１】
【化７】
（実施例５）
４β−１’’−［２’’−（ベンゾイル）−４’’−ニトロアニリノ］−４−デスオキシポドフィロトキシン（４ｅ）：４β−ブロモ−４−デスオキシポドフィロトキシン（０．１ｇ、０．２１ｍｍｏｌ）を、室温で８時間にわたり、無水テトラヒドロフラン中のＥｔ３Ｎ（０．０３２ｇ、０．３２ｍｍｏｌ）およびＢｕ４Ｎ＋Ｉ−（０．０１５ｇ、０．０４２ｍｍｏｌ）の存在下で、２−アミノ−５−ニトロ−ベンゾフェノン（０．０５６ｇ、０．２３ｍｍｏｌ）と反応させた。反応の完了後、溶媒を減圧下で除去した。残渣を、溶出剤としてクロロホルム−メタノール（９．５：０．５）を使用する、シリカゲルカラムクロマトグラフィーに供した。
【００３２】
【化８】
（実施例６）
４’−Ｏ−デメチル−４β−１’’−［２’’−（ベンゾイル）］−４’’−ニトロアニリノ］−４−デスオキシポドフィロトキシン（４ｆ）：４β−ブロモ−４’−Ｏ−デメチル−４−デスオキシポドフィロトキシン（０．１ｇ、０．２１ｍｍｏｌ）を、室温で８時間にわたり、無水テトラヒドロフラン中のＥｔ３Ｎ（０．０３２ｇ、０．３２ｍｍｏｌ）およびＢｕ４Ｎ＋Ｉ−（０．０１５ｇ、０．０４２ｍｍｏｌ）の存在下で、２−アミノ−５−ニトロ−ベンゾフェノン（０．０５６ｇ、０．２３ｍｍｏｌ）と反応させた。反応の完了後、溶媒を減圧下で除去した。残渣を、溶出剤としてクロロホルム−メタノール（９．５：０．５）を使用する、シリカゲルカラムクロマトグラフィーに供した。
【００３３】
【化９】
（実施例７）
４β−１’’−［２’’−（ベンゾイル）−４’’−クロロアニリノ］−４−デスオキシポドフィロトキシン（４ｇ）：４β−ブロモ−４−デスオキシポドフィロトキシン（０．１０ｇ、０．２１ｍｍｏｌ）を、室温で６時間にわたり、無水テトラヒドロフラン中のＥｔ３Ｎ（０．０３２ｇ、０．３２ｍｍｏｌ）およびＢｕ４Ｎ＋Ｉ−（０．０１５ｇ、０．０４２ｍｍｏｌ）の存在下で、２−アミノ−５−クロロベンゾフェノン（０．０５３ｇ、０．２３ｍｍｏｌ）と反応させた。反応の完了後、溶媒を減圧下で除去した。残渣を、溶出剤としてクロロホルム−メタノール（９．７：０．３）を使用する、シリカゲルカラムクロマトグラフィーに供した。
【００３４】
【化１０】
（実施例８）
４’−Ｏ−デメチル−４β−１’’−［２’’−（ベンゾイル）］−４’’−クロロアニリノ］−４−デスオキシポドフィロトキシン（４ｈ）：４β−ブロモ−４’−Ｏ−デメチル−４−デスオキシポドフィロトキシン（０．１ｇ、０．２１ｍｍｏｌ）を、室温で６時間にわたり、無水テトラヒドロフラン中のＥｔ３Ｎ（０．０３２ｇ、０．３２ｍｍｏｌ）およびＢｕ４Ｎ＋Ｉ−（０．０１５ｇ、０．０４２ｍｍｏｌ）の存在下で、２−アミノ−５−クロロベンゾフェノン（０．０５３ｇ、０．２３ｍｍｏｌ）と反応させた。反応の完了後、溶媒を減圧下で除去した。残渣を、溶出剤としてクロロホルム−メタノール（９．７：０．３）を使用する、シリカゲルカラムクロマトグラフィーに供した。
【００３５】
【化１１】
（実施例９）
４β−１’’−［２’’−（２−フルオロベンゾイル）−４’’−クロロアニリノ］−４−デスオキシポドフィロトキシン（４ｉ）：４β−ブロモ−４−デスオキシポドフィロトキシン（０．１０ｇ、０．２１ｍｍｏｌ）を、室温で５時間にわたり、無水テトラヒドロフラン中のＥｔ３Ｎ（０．０３２ｇ、０．３２ｍｍｏｌ）およびＢｕ４Ｎ＋Ｉ−（０．０１５ｇ、０．０４２ｍｍｏｌ）の存在下で、２−アミノ−５−クロロ−２’−フルオロベンゾフェノン（０．０５７ｇ、０．２３ｍｍｏｌ）と反応させた。反応の完了後、溶媒を減圧下で除去した。残渣を、溶出剤としてクロロホルム−メタノール（９．７：０．３）を使用する、シリカゲルカラムクロマトグラフィーに供した。
【００３６】
【化１２】
（実施例１０）
４’−Ｏ−デメチル−４β−１’’−［２’’−（２−フルオロベンゾイル）］−４’’−クロロアニリノ］−４−デスオキシポドフィロトキシン（４ｊ）：４β−ブロモ−４’−Ｏ−デメチル−４−デスオキシポドフィロトキシン（０．１０ｇ、０．２１ｍｍｏｌ）を、室温で５時間にわたり、無水テトラヒドロフラン中のＥｔ３Ｎ（０．０３２ｇ、０．３２ｍｍｏｌ）およびＢｕ４Ｎ＋Ｉ−（０．０１５ｇ、０．０４２ｍｍｏｌ）の存在下で、２−アミノ−５−クロロ−２−フルオロベンゾフェノン（０．０５７ｇ、０．２３ｍｍｏｌ）と反応させた。反応の完了後、溶媒を減圧下で除去した。残渣を、溶出剤としてクロロホルム−メタノール（９．７：０．３）を使用する、シリカゲルカラムクロマトグラフィーに供した。
【００３７】
【化１３】
（実施例１１）
４β−１’’−［３’’−（ベンゾイル）アニリノ］−４−デスオキシポドフィロトキシン（４ｋ）：４β−ブロモ−４−デスオキシポドフィロトキシン（０．１ｇ、０．２１ｍｍｏｌ）を、室温で３時間にわたり、無水テトラヒドロフラン中のＥｔ３Ｎ（０．０３２ｇ、０．３２ｍｍｏｌ）およびＢｕ４Ｎ＋Ｉ−（０．０１５ｇ、０．０４２ｍｍｏｌ）の存在下で、２−アミノ−４−ブロモベンゾ−フェノン（０．０６４ｇ、０．２３ｍｍｏｌ）と反応させた。反応の完了後、溶媒を減圧下で除去した。残渣を、溶出剤としてクロロホルム−メタノール（９．８：０．２）を使用する、シリカゲルカラムクロマトグラフィーに供した。
【００３８】
【化１４】
（実施例１２）
４’−Ｏ−デメチル−４β−１’’−［３’’−（ベンゾイル）アニリノ］−４−デスオキシポドフィロトキシン（４ｌ）：４β−ブロモ−４’−Ｏ−デメチル−４−デスオキシポドフィロトキシン（０．１ｇ、０．２１ｍｍｏｌ）を、室温で３時間にわたり、無水テトラヒドロフラン中のＥｔ３Ｎ（０．０３２ｇ、０．３２ｍｍｏｌ）およびＢｕ４Ｎ＋Ｉ−（０．０１５ｇ、０．０４２ｍｍｏｌ）の存在下で、３−アミノベンゾフェノン（０．０４５ｇ、０．２３ｍｍｏｌ）と反応させた。反応の完了後、溶媒を減圧下で除去した。残渣を、溶出剤としてクロロホルム−メタノール（９．８：０．２）を使用する、シリカゲルカラムクロマトグラフィーに供した。
【００３９】
【化１５】
（実施例１３）
４β−１’’−［２’’−（ベンゾイル）−２’’−ニトロアニリノ］−４−デスオキシポドフィロトキシン（４ｍ）：４β−ブロモ−４−デスオキシポドフィロトキシン（０．１ｇ、０．２１ｍｍｏｌ）を、室温で８時間にわたり、無水テトラヒドロフラン中のＥｔ３Ｎ（０．０３２ｇ、０．３２ｍｍｏｌ）およびＢｕ４Ｎ＋Ｉ−（０．０１５ｇ、０．０４２ｍｍｏｌ）の存在下で、４−アミノ−３−ニトロベンゾフェノン（０．０５６ｇ、０．２３ｍｍｏｌ）と反応させた。反応の完了後、溶媒を減圧下で除去した。残渣を、溶出剤としてクロロホルム−メタノール（９．４：０．６）を使用する、シリカゲルカラムクロマトグラフィーに供した。
【００４０】
【化１６】
（実施例１４）
４’−Ｏ−デメチル−４β−１’’−［４’’−（ベンゾイル）−２’’−ニトロアニリノ］−４−デスオキシポドフィロトキシン（４ｎ）：４β−ブロモ−４’−Ｏ−デメチル−４−デスオキシポドフィロトキシン（０．１ｇ、０．２１ｍｍｏｌ）を、室温で８時間にわたり、無水テトラヒドロフラン中のＥｔ３Ｎ（０．０３２ｇ、０．３２ｍｍｏｌ）およびＢｕ４Ｎ＋Ｉ−（０．０１５ｇ、０．０４２ｍｍｏｌ）の存在下で、４−アミノ−３−ニトロベンゾフェノン（０．０５６ｇ、０．２３ｍｍｏｌ）と反応させた。反応の完了後、溶媒を減圧下で除去した。残渣を、溶出剤としてクロロホルム−メタノール（９．６：０．４）を使用する、シリカゲルカラムクロマトグラフィーに供した。
【００４１】
【化１７】
結果として、本発明の主な利点は、これらの新規４β−１’’−［２’’−（置換ベンゾイル）アニリノ］ポドフィロトキシンアナログが、インビトロの細胞傷害性活性および抗癌剤としての増強された可能性の裏付けを示したことである。さらに、これらの化合物は、室温にてＥｔ３ＮおよびＢｕ４Ｎ＋Ｉ−の存在下で、対応する２−アミノベンゾフェノンとの反応に際に、４β−ブロモポドフィロトキシンを調製して、非常に良好な収率かつほぼ立体選択的な様式で、４β−１’’−［２’’−（置換ベンゾイル）アニリノ］ポドフィロトキシンアナログを提供した。
【技術分野】
【０００１】
（技術分野）
本発明は、有用な抗癌剤である新しい４β−１’’−［２’’−（置換ベンゾイル）アニリノ］ポドフィロトキシンアナログの合成のためのプロセスに関する。
【０００２】
本発明は、特に、有用な抗癌剤の、ポドフィロトキシンの新しいクラスの４β−Ｏ−ベンゾイルアニリノ同属種の合成に関する。
【背景技術】
【０００３】
（背景技術）
小肺癌、精巣癌、リンパ腫、カポージ肉腫の処置において現在使用されるエトポシドおよびテニポシドの２つの合成ポドフィロトキシン誘導体は、重要な薬物である。エトポシドの臨床的効力および興味深い機構は、この化合物のＣ−４置換の改変に関し、そしてより優れた抗腫瘍活性についてのさらなる研究における関心を非常に刺激している（非特許文献１；Ｌｅｖｙ，Ｒ．Ｋ．；Ｈａｌｌ，Ｉ．Ｈ．；Ｌｅｅ，Ｋ．Ｈ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．１９８３，７２，１１５８．；Ｉｓｓｅｌｌ，Ｂ．Ｆ．；Ｍｕｇｇｉａ，Ｆ．Ｍ．；Ｃａｒｔｅｒ，Ｓ．Ｋ．Ｅｔｏｐｏｓｉｄｅ［ＶＰ−１６］Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｓｔａｔｕｓ ａｎｄ Ｎｅｗ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｓ；Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１９８４．；Ｓｔｉｏ，Ｈ．；Ｙｏｓｈｉｋａｗａ，Ｈ．；Ｎｉｓｈｉｍｕｒａ，Ｙ．；Ｋｏｎｄｏ，Ｓ．；Ｔａｋｅｕｃｈｉ，Ｔ．；Ｕｍｅｚａｗａ，Ｈ．Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．１９８６，３４，３７３３．Ｓａｔｉｏ，Ｈ．；Ｎｉｓｈｉｍｕｒａ，Ｙ．；Ｋｏｎｄｏ，Ｓ．；Ｋｏｍｕｒｏ，Ｋ．；Ｔａｋｅｕｃｈｉ，Ｔ．；Ｂｕｌｌ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｊｐｎ．１９８８，６１，２４９３）。エトポシドについての作用の主な機構は、ＤＮＡトポイソメラーゼＩＩの触媒活性の阻害、および致死的なＤＮＡ鎖の破壊の同時の酵素媒介生成によることが十分に確立されている。ポドフィロトキシン由来の化合物についての構造活性関連研究により、トランスＣ／Ｄ環接合が抗腫瘍活性に必須であることが示された。４−アルキルアミノ置換基または４−アリールアミノ置換基によるグリコシド部分の構造的改変に関する多数の研究が、実施され、これらの改変は、ヒトＤＮＡトポイソメラーゼＩＩに対する阻害活性ならびに細胞性タンパク質長ＤＮＡ破損を引き起こすより強力な活性を改善した（Ｌｅｅ．Ｋ．Ｈ．；Ｉｍａｋｕｒａ，Ｙ．；Ｈａｒｕｎａ，Ｍ．；Ｂｅｅｒｓ，Ｓ．Ａ．；Ｔｈｕｒｓｔｏｎ，Ｌ．Ｓ．；Ｄａｉ，Ｈ．Ｊ．；Ｃｈｅｎ，Ｃ．Ｈ．；Ｌｉｕ，Ｓ．Ｙ．；Ｃｈｅｎｇ，Ｙ．Ｃ．Ｊ．Ｎａｔ．Ｐｒｏｄ．１９８９，５２，６０６．Ｌｉｕ，Ｓ．Ｙ．；Ｈａｗａｎｇ，Ｂ．Ｄ．；Ｈａｒｕｎａ，Ｍ．；Ｉｍａｋｕｒａ，Ｙ．；Ｌｅｅ，Ｋ．Ｈ．；Ｃｈｅｎｇ，Ｙ．Ｃ．Ｍｏｌ．Ｐｈａｒｍｃｏｌ．１９８９，３６，７８．Ｌｅｅ，Ｋ，Ｈ．；Ｂｅｅｒｓ，Ｓ．Ａ．；Ｍｏｒｉ，Ｍ．；Ｗａｎｇ，Ｚ．Ｑ．；Ｋｕｏ，Ｙ．Ｈ．；Ｌｉ，Ｌ．；Ｌｉｕ，Ｓ．Ｙ．；Ｃｈｅｎｇ，Ｙ．Ｃ．；Ｊ．．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１９９０，３３，１３６４）。この文脈において、４’−Ｏ−デメチルエピポドフィロトキシンベースの化合物の多数の４β−アリールアミノ誘導体が合成され、そして抗腫瘍活性について調査されている。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００４】
【非特許文献１】Ｊａｄｉｎｅ，Ｉ．Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ Ａｇｅｎｔｓ Ｂａｓｅｄ ｏｎ Ｎａｔｕｒａｌ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ Ｍｏｄｅｌｓ；Ｃａｓｓａｄｙ，Ｊ．Ｍ．，Ｄｏｕｒｓ，Ｊ．編；Ａｃａｄｅｍｉｃ ｐｒｅｓｓ：Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１９８０，３１９頁
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
（発明の目的）
本発明の主な目的は、抗癌剤として有用な新しい４β−［２’’−ベンゾイル置換］アリールアミノポドフィロトキシンアナログを提供することである。
【０００６】
本発明の別の目的は、有用な抗癌剤（これは、上記のような欠点を除去する）としての、新しい４β−１’’−［｛２’’−ベンゾイル置換｝アニリノ］ポドフィロトキシン誘導体の合成のためのプロセスを提供することである。
【０００７】
本発明の別の目的は、優れた収率で、ポドフィロトキシンおよび４’−Ｏ−デメチルエピポドフィロトキシンの新しくかつ立体選択的な化合物を提供することである。
【０００８】
本発明のなお別の目的は、Ｃ−４β−ブロモ中間体の直接求核置換によるこれらのアナログの合成のための、重要な工程を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
（発明の要旨）
本発明の上記の目的および他の目的は、ポドフィロトキシンおよび４’−Ｏ−デメチルエピポドフィロトキシンの新しいクラスのＣ４−β−アリール置換誘導体およびＮ連鎖誘導体（これらは、抗癌剤として合成される）を提供することによって、達成される。
【００１０】
従って、本発明は、構造式（２）を有する新しいクラスの４β−１’’−［｛２’’−ベンゾイル置換｝アニリノ］ポドフィロトキシンアナログを提供する。
【００１１】
本発明はまた、有用な抗癌剤の新しい４β−１’’−［２’’−（置換ベンゾイル）アニリノ］ポドフィロトキシンアナログの調製のためのプロセスを提供する。より詳細には、ポドフィロトキシンの４β−１’’−［２’’−（置換ベンゾイル）アニリノ］誘導体の調製のためのプロセスを提供する。
【００１２】
本発明は、さらに以下を提供する。
（項目１） 図２の４β−１’’−［｛２’’−ベンゾイル置換｝アニリノ］ポドフィロトキシンの新しいアナログであって、
【化１】
該アナログは、抗癌活性を有し、ここで、Ｒ、Ｒ１およびＲ２は、独立してかまたは組み合わせて、
Ｒ＝ＨまたはＣＨ３
Ｒ１＝Ｈまたはハロゲン
Ｒ２＝Ｈ、ＮＯ２またはハロゲン
を表す、アナログ。
（項目２） 項目１に記載の４β−１’’−［｛２’’−ベンゾイル置換｝アニリノ］ポドフィロトキシンのアナログであって、ここで、好ましい化合物およびこれらの細胞傷害性の値が以下の通りである、アナログ：
【表１】
。
（項目３） 項目２に記載の４β−１’’−［｛２’’−ベンゾイル置換｝アニリノ］ポドフィロトキシンの少数のアナログであって、該アナログは、標準的な抗癌薬物エトポシドと比較してインビトロでより優れた抗癌活性を有する、少数のアナログ。
（項目４） 図２の４β−１’’−［｛２’’−ベンゾイル置換｝アニリノ］ポドフィロトキシンアナログの調製のためのプロセスであって、
【化２】
ここで、Ｒ、Ｒ１およびＲ２は、独立してかまたは組み合わせて、
Ｒ＝ＨまたはＣＨ３
Ｒ１＝Ｈまたはハロゲン
Ｒ２＝Ｈ、ＮＯ２またはハロゲン
を表し、該プロセスは、以下の工程：
ａ）無水有機溶媒培体中で相間移動触媒塩基の存在下で、−１０℃と４０℃との間の範囲の温度で、４β−ブロモ−４−ジオキシポドフィロトキシンを、置換または非置換の２−アミノベンゾフェノンと４〜１６時間反応させる工程；
ｂ）減圧下で工程（ａ）の反応混合物から該有機溶媒を除去して残渣を得る工程；および
ｃ）工程（ｂ）の残渣をシリカゲルカラムで精製し、クロロホルム−メタノールの混合物で溶出して、必要な４β−１’’−［｛２’’−ベンゾイル置換｝アニリノ］ポドフィロトキシンアナログを得る工程、
を包含する、プロセス。
（項目５） 項目３に記載のプロセスであって、工程（ａ）において、使用される相間移動触媒が、テトラブチルアンモニウムクロライド、テトラブチルアンモニウムブロミド、テトラブチルアンモニウムイオダイドまたはａｌｉｑｕａｔ ３３６からなる群より選択され、そして好ましくは、テトラブチルアンモニウムイオダイドである、プロセス。
（項目６） 項目３に記載のプロセスであって、ここで、工程（ａ）において、置換２−アミノベンゾフェノンが、２−アミノ−２’，５’−ジクロロベンゾフェノン、２−アミノ−５−ニトロベンゾフェノン、２−アミノ−５−クロロベンゾフェノン、２−アミノ−５−クロロベンゾフェノン、２−アミノ−５−クロロ−２’−フルオロベンゾフェノン、２−アミノ−４’ブロモベンゾフェノン、または４−アミノ−３−ニトロベンゾフェノンからなる群より選択される、プロセス。
（項目７） 項目３に記載のプロセスであって、ここで、工程（ａ）において、使用される有機溶媒が、ジクロロメタン、クロロホルム、テトラヒドロフランまたはジオキサンからなる群より選択され、そして好ましくは、テトラヒドロフランである、プロセス。
（項目８） 項目３に記載のプロセスであって、ここで、工程（ａ）において、使用される塩基が、トリメチルアミン、トリエチルアミン、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸セシウムまたは炭酸バリウムからなる群より選択され、そして好ましくは、トリエチルアミンである、プロセス。
（項目９） 前記反応が、好ましくは室温で実施される、項目３に記載のプロセス。
（項目１０） 項目３に記載のプロセスであって、ここで、工程（ａ）において、使用される置換または非置換のベンゾフェノンおよび臭素化合物のモル比が、１：１〜２：１の範囲であり、そして好ましくは、１：１．１７である、プロセス。
（項目１１） 項目３に記載のプロセスであって、ここで、工程（ａ）において、臭素化合物対相間移動触媒のモル当量比が、１：０．２〜１：０．５の範囲である、プロセス。
（項目１２） 被験体における癌を処置するための、項目１および２に記載の一般式（２）の４β−１’’−［｛２’’−ベンゾイル置換｝アニリノ］ポドフィロトキシンアナログの使用であって、該使用は、必要に応じて添加剤を含む、薬学的に有効な投薬量の該アナログを、それを必要とする該被験体に投与する工程を含む、使用。
（項目１３） ４β−１’’−［｛２’’−ベンゾイル置換｝アニリノ］ポドフィロトキシンアナログが、単独でかまたは薬学的に受容可能なキャリアと組み合わせて使用される、項目１２に記載の使用。
（項目１４） 一般式（２）のアナログが全身的または経口的に投与される、項目１２に記載の使用。
（項目１５） 前記被験体が哺乳動物から選択される、項目１２に記載の使用。
（項目１６） 前記被験体がヒトを除く、項目１５に記載の使用。
（項目１７） 一般式（２）の化合物が、薬学的に受容可能な添加剤、キャリア、希釈剤、溶媒、濾材、潤滑剤、賦形剤、結合剤または安定剤と組み合わせて、前記被験体に投与される、項目１２に記載の使用。
（項目１８） 好ましいアナログのインビトロ抗癌活性のＧＩ５０値が、０．００１〜３８２μＭの範囲内である、項目１２に記載の使用。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
【図１】図１は、ポドフィロトキシン、エトポシドおよびテニポシドの構造を示す。
【図２】図２は、クラス４β−１’’−［｛２’’−ベンゾイル置換｝アニリノ］ポドフィロトキシンアナログの化合物の一般式を表す。
【図３】図３は、抗癌剤として新しいポドフィロトキシンアナログの合成のためのプロセスを開示し、このプロセスは、優れた収率で、ポドヒロトキシンの新規かつ立体選択的な誘導体を生成する。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
（詳細な説明）
抗癌剤としての新しいポドフィロトキシンアナログの合成のためのプロセスは、優れた収率でポドフィロトキシンの新規かつ立体選択的な誘導体を生成し、ここで、これらのアナログの合成のための重要な工程は、Ｃ−４β−ブロモ中間体、４β−ブロモ−ポドフィロトキシンおよび４’−Ｏ−デメチルエピポドフィロトキシンの直接的求核置換であり、これらは、立体選択的様式で、置換または非置換の２−アミノベンゾフェノンと反応され、４β−１’’−［｛２’’−ベンゾイル置換｝アニリノ］ポドフィロトキシン誘導体を生じる。
【００１５】
これらの４−ブロモポドフィロトキシン中間体は、文献に記載されるように、関連したポドフィロトキシン化合物の臭素化によって調製されている（Ｋｕｈｎ，Ｍ．；Ｋｅｌｌｅｒ−Ｊｕｓｌｅｎ，Ｃ．；Ｖａｎ Ｗａｒｔｂｕｒｇ，Ｈｅｌｖ．Ｃｈｅｍｉｃａ．Ａｃｔａ，１９６９，５２，９４４）。
【００１６】
本発明の１つの実施形態において、天然に存在するポドフィロトキシンリグナンは、Ｐｏｄｏｐｈｙｌｌｕｍ ｐｅｌｔａｔｕｍ ｌｉｎｎａｅｕｓから単離された。
【００１７】
本発明の別の実施形態において、４β−中間体の合成は、ポドフィロトキシンおよび４’−Ｏ−デメチルエピポドフィロトキシンの臭素化から実施されている。
【００１８】
本発明のなお別の実施形態において、１〜２当量の異なる置換および非置換のベンゾフェノン化合物が使用されている。
【００１９】
本発明のなお別の実施形態において、種々の溶媒（例えば、ジクロロメタン、クロロホルムおよびテトラヒドロフラン）が、求核置換工程に使用された。
【００２０】
本発明のなお別の実施形態において、触媒作用量のＢｕ４Ｎ＋Ｉ−（０．２〜０．５当量）を使用して、−１０℃と室温との間で、２〜１０時間、反応混合物を撹拌した。
【００２１】
本発明のなお別の実施形態において、Ｋ２ＣＯ３、Ｅｔ３Ｎのような塩基もまた使用した。
【００２２】
本発明のなお別の実施形態において、これらのアナログの精製を、クロロホルム／メタノールを溶出剤として使用するカラムクロマトグラフィーによって行なった。
【００２３】
従って、本発明は、新しいクラスのポドフィロトキシンアナログを提供し、これらは、立体選択的様式で合成された。
【００２４】
強化された抗腫瘍活性および／またはエトポシド耐性腫瘍細胞株に対する活性を有する、新しい４β−アリールアミノ置換ポドフィロトキシン同属種の設計および合成のためのプログラムを研究室において開始した。これらの努力で、新しい４β−１’’−［｛２’’−ベンゾイル置換｝アニリノ］ポドフィロトキシン誘導体を合成し、そしてこれらの細胞傷害性および抗癌効力について評価した。興味深いことに、これらの化合物のいくつかは、エトポシドと比較して、より大きいインビトロ細胞傷害性の値を示した。これらの化合物の合成を、樹脂から得たポドフィロトキシンを使用するスキーム中に記載されるように実施する。４ａ〜４ｐの細胞傷害性の値は、表１に示される。
【００２５】
【化３】
（表１ いくつかの代表的な化合物についての（インビトロ）細胞傷害性データ）
【００２６】
【表２】
本発明の化合物のいくつかを以下に示す：
ａ）４β−１’’−［２’’−（ベンゾイル）アニリノ］−４−デスオキシポドフィロトキシン
ｂ）４’−Ｏ−デメチル−４β−１’’−［２’’−（ベンゾイル）アニリノ］−４−デスオキシポドフィロトキシン
ｃ）４β−１’’−［２’’−（２−クロロベンゾイル）−４’’−クロロアニリノ］−４−デスオキシポドフィロトキシン
ｄ）４’−Ｏ−１’’−［２’’−（２−クロロベンゾイル）−４’’−クロロアニリノ］−４−デスオキシポドフィロトキシン
ｅ）４β−１’’−［２’’−（ベンゾイル）−４’’−ニトロアニリノ］−４−デスオキシポドフィロトキシン
ｆ）４’−Ｏ−デメチル−４β−１’’−［２’’−（ベンゾイル）］−４’’−ニトロアニリノ］−４−デスオキシポドフィロトキシン
ｇ）４β−１’’−［２’’−（ベンゾイル）−４’’−クロロアニリノ］−４−デスオキシポドフィロトキシン
ｈ）４’−Ｏ−デメチル−４β−１’’−［２’’−（ベンゾイル）］−４’’−クロロアニリノ］−４−デスオキシポドフィロトキシン
ｉ）４β−１’’−［２’’−（２−フルオロベンゾイル）−４’’−クロロアニリノ］−４−デスオキシポドフィロトキシン
ｊ）４’−Ｏ−デメチル−４β−１’’−［２’’−（２−フルオロベンゾイル）−４’’−クロロアニリノ］−４−デスオキシポドフィロトキシン
ｋ）４β−１’’−［３’’−（ベンゾイル）アニリノ］−４−デスオキシポドフィロトキシン
ｌ）４’−Ｏ−デメチル−４β−１’’−［３’’−（ベンゾイル）アニリノ］−４−デスオキシポドフィロトキシン
ｍ）４β−１’’−［２’’−（ベンゾイル）−２’’−ニトロアニリノ］−４−デスオキシポドフィロトキシン
ｎ）４’−Ｏ−デメチル−４β−１’’−［４’’−（ベンゾイル）］−２’’−ニトロアニリノ］−４−デスオキシポドフィロトキシン
以下の実施例は、例示の目的で与えられ、本発明の範囲を制限するとして解釈されるべきではない。
【実施例】
【００２７】
（実験）
（実施例１）
４β−１’’−［２’’−（ベンゾイル）アニリノ］−４−デスオキシポドフィロトキシン（４ａ）：４β−ブロモ−４−デスオキシポドフィロトキシン（０．１ｇ、０．２１ｍｍｏｌ）を、室温で４時間にわたり、無水テトラヒドロフラン中のＥｔ３Ｎ（０．０３２ｇ、０．３２ｍｍｏｌ）およびＢｕ４Ｎ＋Ｉ−（０．０１５ｇ、０．０４２ｍｍｏｌ）の存在下で、２−アミノベンゾフェノン（０．０４５ｇ、０．２３ｍｍｏｌ）と反応させた。反応の完了後、溶媒を減圧下で除去した。残渣を、溶出剤としてクロロホルム−メタノール（９．８：０．２）を使用する、シリカゲルカラムクロマトグラフィーに供した。
【００２８】
【化４】
（実施例２）
４’−Ｏ−デメチル−４β−１’’−［２’’−（ベンゾイル）アニリノ］−４−デスオキシポドフィロトキシン（４ｂ）：４β−ブロモ−４’−Ｏ−デメチル−４−デスオキシポドフィロトキシン（０．１ｇ、０．２１ｍｍｏｌ）を、室温で４時間にわたり、無水テトラヒドロフラン中のＥｔ３Ｎ（０．０３２ｇ、０．３２ｍｍｏｌ）およびＢｕ４Ｎ＋Ｉ−（０．０１５ｇ、０．０４２ｍｍｏｌ）の存在下で、２−アミノベンゾフェノン（０．０４５ｇ、０．２３ｍｍｏｌ）と反応させた。反応の完了後、溶媒を減圧下で除去した。残渣を、溶出剤としてクロロホルム−メタノール（９．８：０．２）を使用する、シリカゲルカラムクロマトグラフィーに供した。
【００２９】
【化５】
（実施例３）
４β−１’’−［２’’−（２−クロロベンゾイル）−４’’−クロロアニリノ］−４−デスオキシポドフィロトキシン（４ｃ）：４β−ブロモ−４−デスオキシポドフィロトキシン（０．１０ｇ、０．２１ｍｍｏｌ）を、室温で５時間にわたり、無水テトラヒドロフラン中のＥｔ３Ｎ（０．０３２ｇ、０．３２ｍｍｏｌ）およびＢｕ４Ｎ＋Ｉ−（０．０１５ｇ、０．０４２ｍｍｏｌ）の存在下で、２−アミノ−２’，５’−ジクロロベンゾフェノン（０．０６ｇ、０．２３ｍｍｏｌ）と反応させた。反応の完了後、溶媒を減圧下で除去した。残渣を、溶出剤としてクロロホルム−メタノール（９．７：０．３）を使用する、シリカゲルカラムクロマトグラフィーに供した。
【００３０】
【化６】
（実施例４）
４’−Ｏ−デメチル−４β−１’’−［２’’−（２−クロロベンゾイル）−４’’−クロロアニリノ］−４−デスオキシポドフィロトキシン（４ｄ）：４β−ブロモ−４’−Ｏ−デメチル−４−デスオキシポドフィロトキシン（０．１０ｇ、０．２１ｍｍｏｌ）を、室温で５時間にわたり、テトラヒドロフラン中のＥｔ３Ｎ（０．０３２ｇ、０．３２ｍｍｏｌ）およびＢｕ４Ｎ＋Ｉ−（０．０１５ｇ、０．０４２ｍｍｏｌ）の存在下で、２−アミノ−２’，５’−ジクロロベンゾフェノン（０．０６ｇ、０．２３ｍｍｏｌ）と反応させた。反応の完了後、溶媒を減圧下で除去した。残渣を、溶出剤としてクロロホルム−メタノール（９．７：０．３）を使用する、シリカゲルカラムクロマトグラフィーに供した。
【００３１】
【化７】
（実施例５）
４β−１’’−［２’’−（ベンゾイル）−４’’−ニトロアニリノ］−４−デスオキシポドフィロトキシン（４ｅ）：４β−ブロモ−４−デスオキシポドフィロトキシン（０．１ｇ、０．２１ｍｍｏｌ）を、室温で８時間にわたり、無水テトラヒドロフラン中のＥｔ３Ｎ（０．０３２ｇ、０．３２ｍｍｏｌ）およびＢｕ４Ｎ＋Ｉ−（０．０１５ｇ、０．０４２ｍｍｏｌ）の存在下で、２−アミノ−５−ニトロ−ベンゾフェノン（０．０５６ｇ、０．２３ｍｍｏｌ）と反応させた。反応の完了後、溶媒を減圧下で除去した。残渣を、溶出剤としてクロロホルム−メタノール（９．５：０．５）を使用する、シリカゲルカラムクロマトグラフィーに供した。
【００３２】
【化８】
（実施例６）
４’−Ｏ−デメチル−４β−１’’−［２’’−（ベンゾイル）］−４’’−ニトロアニリノ］−４−デスオキシポドフィロトキシン（４ｆ）：４β−ブロモ−４’−Ｏ−デメチル−４−デスオキシポドフィロトキシン（０．１ｇ、０．２１ｍｍｏｌ）を、室温で８時間にわたり、無水テトラヒドロフラン中のＥｔ３Ｎ（０．０３２ｇ、０．３２ｍｍｏｌ）およびＢｕ４Ｎ＋Ｉ−（０．０１５ｇ、０．０４２ｍｍｏｌ）の存在下で、２−アミノ−５−ニトロ−ベンゾフェノン（０．０５６ｇ、０．２３ｍｍｏｌ）と反応させた。反応の完了後、溶媒を減圧下で除去した。残渣を、溶出剤としてクロロホルム−メタノール（９．５：０．５）を使用する、シリカゲルカラムクロマトグラフィーに供した。
【００３３】
【化９】
（実施例７）
４β−１’’−［２’’−（ベンゾイル）−４’’−クロロアニリノ］−４−デスオキシポドフィロトキシン（４ｇ）：４β−ブロモ−４−デスオキシポドフィロトキシン（０．１０ｇ、０．２１ｍｍｏｌ）を、室温で６時間にわたり、無水テトラヒドロフラン中のＥｔ３Ｎ（０．０３２ｇ、０．３２ｍｍｏｌ）およびＢｕ４Ｎ＋Ｉ−（０．０１５ｇ、０．０４２ｍｍｏｌ）の存在下で、２−アミノ−５−クロロベンゾフェノン（０．０５３ｇ、０．２３ｍｍｏｌ）と反応させた。反応の完了後、溶媒を減圧下で除去した。残渣を、溶出剤としてクロロホルム−メタノール（９．７：０．３）を使用する、シリカゲルカラムクロマトグラフィーに供した。
【００３４】
【化１０】
（実施例８）
４’−Ｏ−デメチル−４β−１’’−［２’’−（ベンゾイル）］−４’’−クロロアニリノ］−４−デスオキシポドフィロトキシン（４ｈ）：４β−ブロモ−４’−Ｏ−デメチル−４−デスオキシポドフィロトキシン（０．１ｇ、０．２１ｍｍｏｌ）を、室温で６時間にわたり、無水テトラヒドロフラン中のＥｔ３Ｎ（０．０３２ｇ、０．３２ｍｍｏｌ）およびＢｕ４Ｎ＋Ｉ−（０．０１５ｇ、０．０４２ｍｍｏｌ）の存在下で、２−アミノ−５−クロロベンゾフェノン（０．０５３ｇ、０．２３ｍｍｏｌ）と反応させた。反応の完了後、溶媒を減圧下で除去した。残渣を、溶出剤としてクロロホルム−メタノール（９．７：０．３）を使用する、シリカゲルカラムクロマトグラフィーに供した。
【００３５】
【化１１】
（実施例９）
４β−１’’−［２’’−（２−フルオロベンゾイル）−４’’−クロロアニリノ］−４−デスオキシポドフィロトキシン（４ｉ）：４β−ブロモ−４−デスオキシポドフィロトキシン（０．１０ｇ、０．２１ｍｍｏｌ）を、室温で５時間にわたり、無水テトラヒドロフラン中のＥｔ３Ｎ（０．０３２ｇ、０．３２ｍｍｏｌ）およびＢｕ４Ｎ＋Ｉ−（０．０１５ｇ、０．０４２ｍｍｏｌ）の存在下で、２−アミノ−５−クロロ−２’−フルオロベンゾフェノン（０．０５７ｇ、０．２３ｍｍｏｌ）と反応させた。反応の完了後、溶媒を減圧下で除去した。残渣を、溶出剤としてクロロホルム−メタノール（９．７：０．３）を使用する、シリカゲルカラムクロマトグラフィーに供した。
【００３６】
【化１２】
（実施例１０）
４’−Ｏ−デメチル−４β−１’’−［２’’−（２−フルオロベンゾイル）］−４’’−クロロアニリノ］−４−デスオキシポドフィロトキシン（４ｊ）：４β−ブロモ−４’−Ｏ−デメチル−４−デスオキシポドフィロトキシン（０．１０ｇ、０．２１ｍｍｏｌ）を、室温で５時間にわたり、無水テトラヒドロフラン中のＥｔ３Ｎ（０．０３２ｇ、０．３２ｍｍｏｌ）およびＢｕ４Ｎ＋Ｉ−（０．０１５ｇ、０．０４２ｍｍｏｌ）の存在下で、２−アミノ−５−クロロ−２−フルオロベンゾフェノン（０．０５７ｇ、０．２３ｍｍｏｌ）と反応させた。反応の完了後、溶媒を減圧下で除去した。残渣を、溶出剤としてクロロホルム−メタノール（９．７：０．３）を使用する、シリカゲルカラムクロマトグラフィーに供した。
【００３７】
【化１３】
（実施例１１）
４β−１’’−［３’’−（ベンゾイル）アニリノ］−４−デスオキシポドフィロトキシン（４ｋ）：４β−ブロモ−４−デスオキシポドフィロトキシン（０．１ｇ、０．２１ｍｍｏｌ）を、室温で３時間にわたり、無水テトラヒドロフラン中のＥｔ３Ｎ（０．０３２ｇ、０．３２ｍｍｏｌ）およびＢｕ４Ｎ＋Ｉ−（０．０１５ｇ、０．０４２ｍｍｏｌ）の存在下で、２−アミノ−４−ブロモベンゾ−フェノン（０．０６４ｇ、０．２３ｍｍｏｌ）と反応させた。反応の完了後、溶媒を減圧下で除去した。残渣を、溶出剤としてクロロホルム−メタノール（９．８：０．２）を使用する、シリカゲルカラムクロマトグラフィーに供した。
【００３８】
【化１４】
（実施例１２）
４’−Ｏ−デメチル−４β−１’’−［３’’−（ベンゾイル）アニリノ］−４−デスオキシポドフィロトキシン（４ｌ）：４β−ブロモ−４’−Ｏ−デメチル−４−デスオキシポドフィロトキシン（０．１ｇ、０．２１ｍｍｏｌ）を、室温で３時間にわたり、無水テトラヒドロフラン中のＥｔ３Ｎ（０．０３２ｇ、０．３２ｍｍｏｌ）およびＢｕ４Ｎ＋Ｉ−（０．０１５ｇ、０．０４２ｍｍｏｌ）の存在下で、３−アミノベンゾフェノン（０．０４５ｇ、０．２３ｍｍｏｌ）と反応させた。反応の完了後、溶媒を減圧下で除去した。残渣を、溶出剤としてクロロホルム−メタノール（９．８：０．２）を使用する、シリカゲルカラムクロマトグラフィーに供した。
【００３９】
【化１５】
（実施例１３）
４β−１’’−［２’’−（ベンゾイル）−２’’−ニトロアニリノ］−４−デスオキシポドフィロトキシン（４ｍ）：４β−ブロモ−４−デスオキシポドフィロトキシン（０．１ｇ、０．２１ｍｍｏｌ）を、室温で８時間にわたり、無水テトラヒドロフラン中のＥｔ３Ｎ（０．０３２ｇ、０．３２ｍｍｏｌ）およびＢｕ４Ｎ＋Ｉ−（０．０１５ｇ、０．０４２ｍｍｏｌ）の存在下で、４−アミノ−３−ニトロベンゾフェノン（０．０５６ｇ、０．２３ｍｍｏｌ）と反応させた。反応の完了後、溶媒を減圧下で除去した。残渣を、溶出剤としてクロロホルム−メタノール（９．４：０．６）を使用する、シリカゲルカラムクロマトグラフィーに供した。
【００４０】
【化１６】
（実施例１４）
４’−Ｏ−デメチル−４β−１’’−［４’’−（ベンゾイル）−２’’−ニトロアニリノ］−４−デスオキシポドフィロトキシン（４ｎ）：４β−ブロモ−４’−Ｏ−デメチル−４−デスオキシポドフィロトキシン（０．１ｇ、０．２１ｍｍｏｌ）を、室温で８時間にわたり、無水テトラヒドロフラン中のＥｔ３Ｎ（０．０３２ｇ、０．３２ｍｍｏｌ）およびＢｕ４Ｎ＋Ｉ−（０．０１５ｇ、０．０４２ｍｍｏｌ）の存在下で、４−アミノ−３−ニトロベンゾフェノン（０．０５６ｇ、０．２３ｍｍｏｌ）と反応させた。反応の完了後、溶媒を減圧下で除去した。残渣を、溶出剤としてクロロホルム−メタノール（９．６：０．４）を使用する、シリカゲルカラムクロマトグラフィーに供した。
【００４１】
【化１７】
結果として、本発明の主な利点は、これらの新規４β−１’’−［２’’−（置換ベンゾイル）アニリノ］ポドフィロトキシンアナログが、インビトロの細胞傷害性活性および抗癌剤としての増強された可能性の裏付けを示したことである。さらに、これらの化合物は、室温にてＥｔ３ＮおよびＢｕ４Ｎ＋Ｉ−の存在下で、対応する２−アミノベンゾフェノンとの反応に際に、４β−ブロモポドフィロトキシンを調製して、非常に良好な収率かつほぼ立体選択的な様式で、４β−１’’−［２’’−（置換ベンゾイル）アニリノ］ポドフィロトキシンアナログを提供した。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
本明細書中に記載のアナログ。
【請求項１】
本明細書中に記載のアナログ。
【図１】
【図２】
【図３】
【図２】
【図３】
【公開番号】特開２００９−１０２４２２（Ｐ２００９−１０２４２２Ａ）
【公開日】平成２１年５月１４日（２００９．５．１４）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００９−２４３１４（Ｐ２００９−２４３１４）
【出願日】平成２１年２月４日（２００９．２．４）
【分割の表示】特願２００３−５８０３４１（Ｐ２００３−５８０３４１）の分割
【原出願日】平成１４年３月２８日（２００２．３．２８）
【出願人】（５９５０２３８７３）カウンシル・オブ・サイエンティフィック・アンド・インダストリアル・リサーチ (69)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２１年５月１４日（２００９．５．１４）
【国際特許分類】
【出願日】平成２１年２月４日（２００９．２．４）
【分割の表示】特願２００３−５８０３４１（Ｐ２００３−５８０３４１）の分割
【原出願日】平成１４年３月２８日（２００２．３．２８）
【出願人】（５９５０２３８７３）カウンシル・オブ・サイエンティフィック・アンド・インダストリアル・リサーチ (69)
【Ｆターム（参考）】
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