抗ＣＴＬＡ−４に基盤を置く病気の免疫療法の代用治療終末点
【課題】本発明は、ヒトＣＴＬＡ−４に対するヒト配列抗体を使用する治療方法、特に、癌治療方法を提供する。
【解決手段】本発明は、現状打開事態を引き起こす十分な用量の抗ＣＴＬＡ−４抗体を患者に投与し、患者の現状打開事態を検知することによって、患者における新規の癌治療方法を提供する。
【解決手段】本発明は、現状打開事態を引き起こす十分な用量の抗ＣＴＬＡ−４抗体を患者に投与し、患者の現状打開事態を検知することによって、患者における新規の癌治療方法を提供する。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
＜関連出願についてのクロス・リファレンス＞
本出願は、米国仮出願番号第６０／４７５０６７号（２００３年５月３０日出願）の優先権を主張し、その内容は、全体において本願明細書に含まれる。
【０００２】
本発明は、一般に分子免疫学とヒトの病気の治療に関する。特に、ヒトＣＴＬＡ−４に対する抗体を使用する洗練された治療方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
脊椎動物の免疫系は、最適の免疫活性化を達成するために多重信号を必要とする（例えば、Ｊａｎｅｗａｙ、「Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｓｙｍｐ．Ｑｕａｎｔ．Ｂｉｏｌ．１９８９」、５４：１−１４、および、Ｐａｕｌ Ｗｉｌｌｉａｍ Ｅ．編、Ｒａｖｅｎ Ｐｒｅｓｓ、Ｎ．Ｙ．、「Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ」、第４版（１９９８）、特に第１２章および第１３章、４１１ページから４７８ページを参照のこと）。Ｔリンパ球（Ｔ細胞）と抗原提示細胞（ＡＰＣ）の間の相互作用は、免疫反応に必須である。Ｔ細胞とＡＰＣ上で見られる多くの粘着性分子のレベルは、免疫反応の間、増加する（Ｓｐｒｉｎｇｅｒ他、「Ａ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１９８７」、５：２２３−２５２、ＳｈａｗおよびＳｈｉｍｕｚｕ、「Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｏｐｉｎｉｏｎ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ」、１９８８編、ＫｉｎｄｔおよびＬｏｎｇ編、１：９２−９７、Ｈｅｍｌｅｒ、「Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ Ｔｏｄａｙ １９８８」、９：１０９−１１３）。これらの分子の増加レベルは、活性化したＡＰＣが抗原特異性のＴ細胞増殖反応を刺激する点において、非活性のＡＰＣより効果的である理由の説明に役立つ（Ｋａｉｕｃｈｉ他、「Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１９８３」、１３１：１０９−１１４、Ｋｒｅｉｇｅｒ他、「Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１９８５」、１３５：２９３７−２９４５、ＭｃＫｅｎｚｉｅ、「Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ．」、１９８８、１４１：２９０７−２９１１、および、ＨａｗｒｙｌｏｗｉｃｚおよびＵｎａｎｕｅ、「Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１９８８」、１４１：４０８３−４０８８）。
【０００４】
Ｔ細胞免疫反応は、特に、ＡＰＣのようなＴ細胞と補助細胞の間の細胞間相互作用（Ｓｐｒｉｎｇｅｒ他、「Ａ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１９８７」、５：２２３−２５２）と、可溶性の免疫媒体（サイトカインまたはリンフォカイン）の生成（Ｄｉｎａｒｅｌｌｏ、「Ｎｅｗ Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．１９８７」、３１７：９４０−９４５、および、Ｓａｌｌｕｓｔｏ、「Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１９９７」、１７９：１１０９−１１１８）とを含む複合過程である。この反応は、Ｔ細胞受容体複合体（Ｗｅｉｓｓ、「Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１９８６」、４：５９３−６１９）と他の「補助的な」表面分子（Ａｌｌｉｓｏｎ、「Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１９９４」、６：４１４−４１９、Ｓｐｒｉｎｇｅｒ、１９８７、前述）を含むいくつかのＴ細胞表面受容体によって制御される。これらの補助分子の多くは、細胞の表面の単クローン抗体の反応によって定義される自然発生の細胞表面分化（ＣＤ）の抗原である。（ＭｃＭｉｃｈａｅｌ編、「Ｌｅｕｋｏｃｙｔｅ ＴｙｐｉｎｇＩＩＩ」、Ｏｘｆｏｒｄ Ｕｎｉｖ．Ｐｒｅｓｓ、Ｏｘｆｏｒｄ、Ｎ．Ｙ．、１９８７）
【０００５】
ＣＤ２８抗原は、免疫グロブリン超族の一つであるホモダイマ・グリコプロテイン（ＡｒｕｆｆｏおよびＳｅｅｄ、「Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．１９８７」、８４：８５７３−８５７７）であって、大部分の成熟ヒトＴ細胞（Ｄａｍｌｅ他、「Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１９８３」、１３１：２２９６−２３００）に見られる補助分子である。現時点における証拠は、この分子が、Ｔ細胞受容体複合体によって開始される経路とは異なった別個のＴ細胞活性化経路において機能していることを示唆している（Ｊｕｎｅ他、「Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．１９８７」、７：４４７２−４４８１）。ＣＤ２８抗原と反応性のある単クローン抗体（ＭＡｂｓ）は、さまざまなポリクローン性の刺激（前述のＪｕｎｅ他によって概説される）によって開始されるＴ細胞反応を増強することができる。これらの刺激性の効果は、増加したｍＲＮＡ安定化（Ｌｉｎｄｓｔｅｎ他、１９８９、上述ｓｕｐｒａ）の結果として、ＭＡｂ誘導のサイトカイン生成（Ｔｈｏｍｐｓｏｎ他、「Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ １９８９」、８６：１３３３−１３３７、および、Ｌｉｎｄｓｔｅｎ他、「Ｓｃｉｅｎｃｅ １９８９」、２４４：３３９−３４３）から生じる可能性がある。
【０００６】
ＣＴＬＡ−４は、ＣＤ２８活性に対抗し、Ｔ細胞活性化を抑制するものと見なされている（Ｋｒｕｍｍｅｌ他、「Ｉｎｔ’ｌ Ｉｍｍｕｎｏｌ．１９９６」、８：５１９−５２３、および、Ｃｈａｍｂｅｒｓ他、「Ｉｍｍｕｎｉｔｙ．１９９７」、８８５−８９５）。ＣＴＬＡ−４欠損マウスは、大量のリンパ球増殖を被る（前述のＣｈａｍｂｅｒｓ他による）。ＣＴＬＡ−４の遮断は、試験管内（Ｗａｌｕｎａｓ他、「Ｉｍｍｕｎｉｔｙ．１９９４」、１：４０５−４１３）および生体内（Ｋｅａｒｎｅｙ、「Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１９９５」、１５５：１０３２−１０３６）のＴ細胞反応を増強して、抗腫瘍免疫を悪化させ（Ｌｅａｃｈ、「Ｓｃｉｅｎｃｅ １９９６」、２７１：１７３４−１７３６）、誘導された自己免疫性疾患を増進する（Ｌｕｈｄｅｒ、「Ｊ Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１９９８」、１８７：４２７−４３２）と報告されている。ＣＴＬＡ−４は、Ｔ細胞免疫反応の最初の特性に対して代替的または付加的な影響を与えることも、以下の文献において報告されている。
Ｃｈａｍｂｅｒｓ、「Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１９９７」、９：３９６−４０４
Ｂｌｕｅｓｔｏｎｅ、「Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１９９７」、１５８：１９８９−１９９３
Ｔｈｏｍｐｓｏｎ、「Ｉｍｍｕｎｉｔｙ １９９７」、７：４４５−４５０
このことは、何人かの自己免疫患者が、ＣＴＬＡ−４に対する自己抗体を有するという知見に矛盾してはいない。ＣＴＬＡ−４を遮断する自己抗体が、これらの患者において病原性の役割を演じることが考えられる。（Ｍａｔｓｕｉ、「Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１９９９」、１６２：４３２８−４３３５）
【０００７】
非ヒトＣＴＬＡ−４抗体は、上述のさまざまな研究において使用されている。さらにまた、ヒトＣＴＬＡ−４に対するヒト抗体は、多くの病気条件（例えば、ウイルス感染および細菌感染の治療または予防、および、癌の治療）における免疫促進モジュレータとして記述されている（例えば、国際公開第０１／１４４２４号明細書および国際公開第００／３７５０４号明細書）。米国特許第５８５５８８７号明細書は、Ｔ細胞をＣＴＬＡ−４の遮断剤と併用することによって抗原性の刺激に対する哺乳類のＴ細胞の反応を増大させる方法を開示している。米国特許第５８１１０９７号明細書は、ＣＴＬＡ−４の遮断剤を投与することによって非Ｔ細胞腫瘍の増殖を減少させる方法を開示している。米国特許出願公開第０９／６４４６６８号明細書および米国特許出願公開第０９／９４８９３９号明細書は、ヒトＣＴＬＡ−４抗体を開示している。これらの各特許と用途は本願明細書に引用して組み込まれているものとする。
【０００８】
本願明細書の本節または他の節におけるいかなる参考文献の引用または記述は、本発明の説明を明らかにするだけのためであり、いずれの内容も、本願明細書において記述される、いかなる発明に対する「先行技術」であると容認されるものではない。
【発明の開示】
【０００９】
本発明は、現状打開事態を引き起こす十分な用量の抗ＣＴＬＡ−４抗体を患者に投与し、患者の現状打開事態を検知することによって、患者における新規の癌治療方法を提供するものである。一実施形態において、現状打開事態は、非癌化細胞に存在する抗原に対する自己免疫反応である。別の実施形態において、現状打開事態は、グレード３または４である。本発明の方法によれば、現状打開事態は、抗ＣＴＬＡ−４抗体の用量を増大することによって引き起こされる。さらなる実施形態において、現状打開事態は、投与間隔を短縮して抗ＣＴＬＡ−４抗体を投与することによって引き起こされる。別の実施形態において、現状打開事態は、非腫瘍関連自己免疫の発現である。本発明は、癌の治療に効果的な用量の抗ＣＴＬＡ−４抗体の投与方法を提供する。また、本発明は、また、このような用量の決定方法を提供する。
【００１０】
本願明細書において引用される、全ての出版物、図面、ＧｅｎＢａｎｋ Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ基準受入参照番号（配列）、ＡＴＣＣ Ｄｅｐｏｓｉｔｓ寄託番号、特許、および、特許出願は、個々に示される同じ範囲の全ての意味を参照することにより本願明細書に含まれる。
【００１１】
本発明は、より効果的で、予測可能なＣＴＬＡ−４抗体を基盤とする癌治療法を提供する。本発明の方法は、患者への抗ＣＴＬＡ−４抗体用量が過少量とならないようにするので、抗ＣＴＬＡ−４抗体による癌の治療に有意な成果を示す。有害事象の出現と治療に対する反応の間の統計学的に有意の相互関係が、抗ＣＴＬＡ−４抗体で治療された癌患者において、予想外に存在していた。深刻な「有害事象」の回避が重症癌患者の治療の目的であったのに対して、本発明の方法の目的は、これらの事象（本願明細書において、「現状打開事態」（ＢＥ）と呼ばれる）を引き起こし、検出することである。抗ＣＴＬＡ−４抗体の充分な用量による治療は患者の癌症状を改善し、または、余命を伸ばす可能性があるので、有意な、しかし、可逆的な現状打開事態の誘起は、これらの患者においては医学的に適切なものとなる。
【００１２】
ＢＥ（の誘起）は、急性であり、用量に関連し、容易に探知され、ある範囲までは予測可能である。ＢＥ、投薬中止によって、および／または、特異的療法、通常はコルチコステロイド治療を伴う又は伴はない支持看護によって無効となる。抗ＣＴＬＡ−４抗体の用量を投与してＢＥを誘起して検出することは、抗ＣＴＬＡ−４抗体治療への反応とＢＥの発現との間の有意な相互関係から、癌治療の効果的な方法である。
【００１３】
特定の実施形態において、本発明の抗ＣＴＬＡ−４抗体は、国際公開第０１／１４４２４号明細書に開示されている、ヒト単クローン抗体１０Ｄ１である。
【００１４】
本発明は、後述されるように、癌の免疫療法におけるヒト配列の抗ＣＴＬＡ−４抗体の臨床試験中に行なわれた観察に部分的に基づくものである。臨床試験は、ＢＥを引き起こすのに十分な抗ＣＴＬＡ−４抗体の用量が送達される場合の、癌患者の治療における抗ＣＴＬＡ抗体の有効性を証明している。本発明によれば、抗ＣＴＬＡ−４抗体はＢＥを引き起こすのに十分な用量で投与されて、ＢＥが患者において検出される。
【００１５】
さまざまな研究の結果、ＢＥと抗腫瘍の有効性の間の相互関係が認識されるに至った。例えば、コホート１の研究において、ステージＩＶの黒色腫患者１４人が、２つのｇｐ１００ペプチドのワクチン接種と併用で、３ｍｇ／ｋｇの抗ＣＴＬＡ−４抗体１０Ｄ１（ＭＤＸ−０１０）を３週ごとに８週間投与された。全ての患者は、それらの原発腫瘍のための先行手術を受けていた。６人の患者は、先行の化学療法が行なわれた。１１人の患者は、先行の免疫療法を行なわれた。臨床反応は、コンピュータ断層写真（ＣＴ）と磁気共鳴（ＭＲ）画像で測定された。患者１１（先行の化学療法が行なわれた）においては、５回の治療サイクルの後、肺腫瘍、脳腫瘍、および、皮下腫瘍の完全な分解が認められた。患者１３（先行の化学療法と先行の免疫療法が行なわれた）においては、副腎腫瘍と肺腫瘍の完全な分解が認められた。患者１（先行の化学療法と先行の免疫療法が行なわれた）は、部分的な応答者であった。３人の各応答者は、グレード３のＢＥを体験した。患者１（部分的な応答者）には、グレード３の全腸炎と皮膚炎があった。患者１はＩＶメチルプレドニゾロンで自己免疫全腸炎の治療が行なわれ、２４時間以内で著しい改善をもたらした。患者１１（完全な応答者）には、グレード３の脳下垂体炎と汎下垂体機能低下症があった。患者１１には、チロキシン、テストステロンとハイドロコーチゾンの代替投薬を行なった。患者１３（完全な応答者）には、ヒドロキシジンによる治療自に分解したグレード３の皮膚炎があった。予想以上に、この研究においては、３人の全応答者がグレード３の有害事象を体験したことを示した。
【００１６】
コホート２の研究において、非切除の転移性黒色腫を有する２４人の患者に、抗ＣＴＬＡ−４抗体１０Ｄ１を３ｍｇ／ｋｇ、そして、３週ごとに１ｍｇ／ｋｇをｇｐ１００ペプチドワクチンと一緒に投与した。現在までに、２４人の患者のうち３人（１３％）には、他覚的な腫瘍反応があった。３人の応答者のうちの１人には、グレード３の有害事象（下痢）があった。
【００１７】
統計学的に有意な相互関係を、カイ二乗検定（ｐ＝０．０１４６）とフィッシャーの正確確率検定（ｐ＝０．０１１６）を使用し、応答者と深刻な有害事象を発症させる患者の間におけるコホート１およびコホート２の研究において発見した。「Ｂｉｏｓｔａｔｉｓｔｉｃｓ：Ａ ｍｅｔｈｏｄｏｌｏｇｙ ｆｏｒ ｔｈｅ Ｈｅａｌｔｈ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（ＦｉｓｈｅｒおよびＶａｎ Ｂｅｌｌｅ、１９９３、Ｊ．Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ）」 を参照のこと。
【００１８】
別の研究において、１７人のステージＩＩＩまたはＩＶの悪性黒色腫患者に、抗ＣＴＬＡ−４抗体１０Ｄ１を１回投与した。２人の患者は、部分的な応答者であった。深刻な有害事象（グレード３または４）はなかった。
【００１９】
１３人の悪性黒色腫患者は、ＭＥＬＡＣＩＮＥ（登録商標）（シクロホスファミドを含む）の認可療法と組み合わせて、抗ＣＴＬＡ−４抗体１０Ｄ１（８週間隔で３ｍｇ／ｋｇを２回）投与した。他覚的な反応と深刻な有害事象は、観察されなかった。有効性に欠けると考えられる理由は、以下に挙げられる。
（１）シクロホスファミドの阻害作用
（２）長い投薬間隔
（３）ワクチンとしてのＭＥＬＡＣＩＮＥ（登録商標）の弱い力価
【００２０】
統計学的に有意の相互関係を、カイ二乗検定（ｐ＝０．００２８）とフィッシャーの正確確率検定（ｐ＝０．００４９）を使用して、応答者と深刻な有害事象を発現させる患者の間において発見した。
【００２１】
１９人のステージＩＩＩまたはＩＶの黒色腫を完全に切除した患者の研究において、患者を、３つのコホートに分けられ、ｇｐ１００、チロシナーゼ、および、ＭＡＲＴ−１ワクチンと組み合わせて、抗ＣＴＬＡ−４抗体１０Ｄ１を異なる用量（毎月０．１ｍｇ／ｋｇ、１．０ｍｇ／ｋｇ、および、３．０ｍｇ／ｋｇを６ヵ月間、その後、３ヵ月ごとに２回）で治療した。この研究は、主に皮膚や腸において、器官特異的な自己免疫的な有害事象の用量依存の誘起を示した。自己免疫的な有害事象は、対処可能であり、可逆性であった。
【００２２】
転移性黒色腫のある、化学療法未処置の患者の治療研究において、患者を、抗ＣＴＬＡ−４抗体１０Ｄ１単独で、または、細胞毒性を有する化学療法（ダカルバジン）と組み合わせて治療した。２４人の患者が登録された。単一療法を受けている１２人の患者のうちの４人、および、組合せ治療を受けている１２人の患者のうちの３人は、病気進行を体験していた。グレード３の発疹とそう痒症の１つの深刻な有害事象が観察された。
【００２３】
抗ＣＴＬＡ−４抗体の投与は、自己免疫反応を示唆する深刻な有害事象に関連していた。深刻な有害事象の発症は、抗ＣＴＬＡ−４抗体３ｍｇ／ｋｇのみを投与された後はほとんど発症しなかった。抗ＣＴＬＡ−４抗体が複数回投与、および、黒色腫ペプチドワクチンと組み合わせて投与されると、有害事象はより頻繁に発生する。ペプチドワクチンと一緒に抗ＣＴＬＡ−４抗体の投与を含む研究において、コホート２の抗ＣＴＬＡ−４抗体の投与量を減少することによって、ＳＡＥ（有害事象）の発症率を減らした。個々の患者の抗ＣＴＬＡ−４抗体の血漿中濃度とＳＡＥの発症の間の識別可能な相互関係は見られなかった。臨床試験データの統計分析は、ＢＥと治療効力の間において、予想以上の非常に有意な相互関係を確立した。この実験的観察は、ＢＥ（用量または／および頻度）を引き起こすまで抗ＣＴＬＡ−４抗体を投与することが、治療的に最大の効果的な服用量の達成を示すという発見の根拠になっている。
【００２４】
注釈を除き、用語「患者」または「被検者」が同義的に使用され、哺乳類（ヒト患者および非ヒト霊長類、同じくウサギ、ネズミ、および、マウスのような実験動物、および、他の動物など）に関連する。動物は、全ての脊椎動物（哺乳類および非哺乳類（ヒツジ、イヌ、ウシ、鶏、両生類、および、爬虫類など）を含む。
【００２５】
本願明細書において使用される「有害事象」（ＡＥ）は、好ましくなく、一般的には意図されず、さらに望ましくない、内科的治療または内科的処置の使用に関連する徴候（異常検査所見を含む）、症状、または、疾患のことである。ほとんどのＡＥは、内科的治療における投薬の停止または減少時、またはＡＥの治療によって一時的となり、そして、無効する。
【００２６】
Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅは、「有害事象」（ＡＥ）を、内科的治療または内科的処置（Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒａｐｙ Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ Ｐｒｏｇｒａｍ、Ｃｏｍｍｏｎ Ｔｅｒｍｉｎｏｌｏｇｙ Ｃｒｉｔｅｒｉａ ｆｏｒ Ａｄｖｅｒｓｅ Ｅｖｅｎｔｓ（Ｖｅｒｓｉｏｎ ３．０）、ＤＣＴＤ、ＮＣＩ、ＮＩＨ、ＤＨＨＳ、２００３年３月３１日 （ｈｔｔｐ：／／ｃｔｅｐ．ｃａｎｃｅｒ．ｇｏｖ）、２００３年４月１６日公開（２００３年５月２７日にサイトアクセス）に関連するとみなされる、または、みなされない、内科的治療または内科的処置の使用に関連する、好ましくない、一般的には意図されない、さらには、望ましくない徴候（異常検査所見を含む）、症状または疾患として定義している。「有害事象」は、治療の意図しない結果である。有害事象の誘起が、抗ＣＴＬＡ−４抗体の充分な用量が癌の治療のために患者に投与されたことを示すマーカーとなるということは驚くべき発見である。本発明の内容において、「有害」事象は意図されないものであるが、癌の抗ＣＴＬＡ−４ベースの免疫療法の代用治療終末点として役立つため、むしろ故意に得ようとされる。抗ＣＴＬＡ−４治療に一時的に関連する徴候、症状、異常検査所見、および、疾患は、本発明の方法による治療の意図される結果である。このような事象は、本願明細書において「現状打開事態（ＢＥ）と称される。
【００２７】
本願明細書において使用される「現状打開事態（ＢＥ）」は、腫瘍部位において治療効果を与えるだけではない、抗ＣＴＬＡ−４治療に一時的に関連する意図されない徴候（異常検査所見を含む）、症状、または、疾患である。例えば、治療下の黒色腫から間隙をおいて離れた位置において皮膚炎を引き起こす自己免疫反応は、ＢＥである。ＢＥは通常、自己免疫の事象であるが、臨床診療における本発明の使用法に対しては、自己免疫の病因学の病理学的確認は必要でない。例えば、いかなる病因学の臨床的に診断される大腸炎は、定義が特に満たされる場合、現状打開事態である。ＢＥは、有害事象のＮＣＩグレードシステムに従ってグレード化される。
【００２８】
「自己免疫現状打開事態（ＡＢＥ）」は、自己免疫の事象である現状打開事態である。現状打開事態が好ましい本発明を実施する場合は、自己免疫現状打開事態である。したがって、用語「自己免疫現状打開事態」は、本発明の治療法を記載するために頻繁に使用される。しかしながら、このような方法に有用である現状打開事態は、自己免疫の事象を必ずしも必要としないと理解される。自己免疫現状打開事態は、好ましい現状打開事態である。
【００２９】
Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ（ＮＣＩ）によって定義される、「深刻な有害事象」（ＳＡＥ）は、グレード３または４の有害事象である。グレード３のＡＥは「重症」、グレード４のＡＥは、「致命的または障害」として通常定義される。また、ＮＣＩも、特にグレード３と４の有害事象を明白に定義する。例えば、グレード３の大腸炎は、腹痛、熱、腸閉塞による排便習慣の変化、または、腹膜徴候を含む（Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒａｐｙ Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ Ｐｒｏｇｒａｍ、Ｃｏｍｍｏｎ Ｔｅｒｍｉｎｏｌｏｇｙ Ｃｒｉｔｅｒｉａ ｆｏｒ Ａｄｖｅｒｓｅ Ｅｖｅｎｔｓ（Ｖｅｒｓｉｏｎ ３．０）、ＤＣＴＤ、ＮＣＩ、ＮＩＨ、ＤＨＨＳ、２００３年３月３１日 （ｈｔｔｐ：／／ｃｔｅｐ．ｃａｎｃｅｒ．ｇｏｖ）、２００３年４月１６日公開）。本出版物は、本願明細書において引用され、付録１として添付される。
【００３０】
「自己免疫関連の非腫瘍の発現」は、非癌化細胞上の抗原の免疫ターゲッティングから生じる、または、生じるように見えるいかなる臨床事象である。ＢＥなどは、腫瘍免疫を含む全体の免疫の活性強化に関するので、癌細胞において免疫学的に媒介される治療効果を特に示す。
【００３１】
用語「治療」は、症状の緩和、または、疾患、状態、または、障害（例えば、自己免疫性疾患）の更なる発現を停止または抑制して、疾患の症状、複雑化、または、生化学徴候の発症を予防、または、遅延させる本発明の化合物、または、薬剤の投与を含む。治療は、予防的（疾患の発症予防または遅延を行なう、または、臨床的症状または準臨床的症状の発症の予防を行なう）に行なうか、疾患の発症後の症状を治療的に抑制または緩和する。
【００３２】
用語「進行癌」は、原発腫瘍部位に集中しない癌、または、Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｊｏｉｎｔ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ ｏｎ Ｃａｎｃｅｒ （ＡＪＣＣ）よるステージＩＩＩまたはＩＶの癌を意味する。
【００３３】
用語「治療効果的な投薬」は、癌の進行を縮めるか、遅くするか、または、止めるのに十分な抗ＣＴＬＡ−４抗体の投薬を意味する。あるいは、「治療効果的な投薬」は、癌患者において部分的、または、完全な反応を引き起こすのに十分な抗ＣＴＬＡ−４抗体の投薬を意味する。
【００３４】
本願明細書において使用される用語「リンパ球」は、従来技術における一般的な意味を有し、さらに、単核の、非食細胞の白血球（血液、リンパとリンパ系組織（つまり、Ｂリンパ球およびＴリンパ球）において見られる）のいずれにも言及する。
【００３５】
用語「細胞障害性リンパ球関連の抗原−４」（「ＣＴＬＡ−４」）、「ＣＴＬＡ４」、「ＣＴＬＡ−４抗原」と「ＣＤ１５２」（例えば、「Ｍｕｒａｔａ （１９９９）Ａｍ．Ｊ．Ｐａｔｈｏｌ．１５５：４５３−４６０」参照）は、同義的に使用され、ヒトＣＴＬＡ−４の変異体、イソ体、種相同体、および、ＣＴＬＡ−４を持つ少なくとも１つの共通抗原エピトープを有する類似体を含む（例えば、「Ｂａｌｚａｎｏ（１９９２）ｈｉｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ Ｓｕｐｐｌ．７：２８−３２」参照）。ＣＴＬＡ−４の完全な配列は、ＧｅｎＢａｎｋ Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ Ｎｏ．Ｌ１５００６において見られる。
【００３６】
用語「エピトープ」は、抗体に特異結合することができるタンパク質決定因子を意味する。エピトープは、アミノ酸または砂糖側鎖のような分子の化学的な活性表面のグループから通常構成され、特異的な三次元構造特性（同じく特異的な電荷特性）を通常有する。配座エピトープと非配座エピトープは、変性溶液がある場合に、後者でなく前者への結合が失われるという点において区別される。
【００３７】
無傷の「抗体」は、ジスルフィド結合によって相互接続する少なくとも２つの重（Ｈ）鎖と２つの軽（Ｌ）鎖を含む。各重鎖は、重鎖可変領域（本願明細書ではＨＣＶＲまたはＶＨと省略）と重鎖定常領域から構成される。重鎖定常領域は、３つのドメイン（ＣＨ１、ＣＨ２、および、ＣＨ３）から構成される。各軽鎖は、軽鎖可変領域（ＬＣＶＲまたはＶＬとして本願明細書において略記される）と軽鎖定常領域から構成される。軽鎖定常領域は、１つのドメイン（ＣＬ）から構成される。ＶＨおよびＶＬ領域は、相補性決定領域（ＣＤＲ）と呼ばれる超可変性の領域に更に再分割され、フレームワーク領域（ＦＲ）と呼ばれる、比較的定常的な領域が散りばめられる。各ＶＨとＶＬは３つのＣＤＲと４つのＦＲから構成され、以下の順序でアミノ末端からカルボキシル末端まで配置される：
ＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、ＦＲ４。
重鎖および軽鎖の可変領域は、抗原と相互に作用する結合ドメインを含む。抗体の定常領域は、免疫系（例えば、エフェクター細胞）のさまざまな細胞と典型的な補体系の第１の成分（Ｃｌｑ）を含む、宿主組織または要素への免疫グロブリンの結合を媒介する。用語「抗体」は、ＣＴＬＡ−４を結合する能力を保持する無傷の抗体の抗原結合性部分を含む。以下に結合する例を挙げる。
（ｉ）ＶＬドメイン、ＶＨドメイン、ＣＬドメイン、および、ＣＨ１ドメインから構成されるＦａｂフラグメント（１価のフラグメント）
（ｉｉ）ヒンジ領域におけるジスルフィド架橋によってリンクされる２つのＦａｂフラグメントを含む、Ｆ（ａｂ’）２フラグメント（２価のフラグメント）
（ｉｉｉ）ＶＨドメインとＣＨ１ドメインから構成されるＦｄフラグメント
（ｉｖ）抗体の単一のアームのＶＬドメインおよびＶＨドメインからなるＦｖフラグメント
（ｖ）ＶＨドメインから構成されるｄＡｂフラグメント（Ｗａｒｄ他、（１９８９）「Ｎａｔｕｒｅ」、３４１：５４４−５４６）
（ｖｉ）分離した相補性決定領域（ＣＤＲ）
さらに、ＦｖフラグメントのＶＬドメインとＶＨドメインは、遺伝子を分離することによって符号化されるにもかかわらず、単一タンパク質鎖（単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）として公知の１価の分子を形成するＶＬ領域およびＶＨ領域の一対）として作ることができる合成リンカによって、その２つのドメインを組換え方法を使用して結合することができる。（例えば、Ｂｉｒｄ他、「Ｓｃｉｅｎｃｅ １９９８」、２４２：４２３−４２６、および、Ｈｕｓｔｏｎ他、「Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ １９８８」、８５：５８７９−５８８３参照のこと）。このような単鎖抗体は、用語「抗体」を参照することによって含まれる。フラグメントは、組換え技術または無傷の抗体の酵素切断または化学切断によって調製される。
【００３８】
ＣＴＬＡ−４抗体は、ヒトＢ７抗受容体による相互作用からＣＴＬＡ−４を抑制するために、ヒトＣＴＬＡ−４上のエピトープと結合することができる。ヒトＢ７とのヒトＣＴＬＡ−４の相互作用がヒトＣＴＬＡ−４受容体を支えるＴ細胞の不活性化に導く信号を変換するので、免疫反応を延ばすか、または、増やすかによって、相互作用の拮抗性が効果的に引き起こされ、また、ヒトＣＴＬＡ−４受容体を支えるＴ細胞の活性化を増加または延ばす。抗ＣＴＬＡ−４抗体は、米国特許第５８１１０９７号明細書、米国特許第５８５５８８７号明細書、米国特許第６０５１２２７号明細書、ＰＣＴ公開第０１／１４４２４号明細書、ＰＣＴ公開第００／３７５０４号明細書、および、米国特許出願公開第２００２／００３９５８１号明細書において記述される。これらの参考文献それぞれは、抗ＣＴＬＡ−４抗体の説明のために、特に本願明細書に引用される。好ましい臨床的な抗ＣＴＬＡ−４抗体は、国際公開第０１／１４４２４号明細書にて開示される通り、ヒト単クローン抗体１０Ｄ１（ＭＤＸ０１０）である。
【００３９】
用語「免疫細胞反応」は、免疫細胞移動、標的細胞の死滅、食細胞活動、抗体作成、免疫反応の他の可溶性因子などに生じる免疫細胞における生化学的な変化を生じる外部刺激または内部刺激に対する免疫系細胞（例えば、抗原、サイトカイン、ケモカイン、及び、他の細胞）の反応に言及する。
【００４０】
用語「Ｔリンパ球反応」および「Ｔリンパ球活性」は、Ｔリンパ球に依存する免疫反応の要素（つまり、ヘルパーＴリンパ球、細胞毒性のキラーＴリンパ球、または、サプレッサＴリンパ球へのＴリンパ球の増殖および／または分化と、ヘルパーＴリンパ球によるＢリンパ球（抗体産生を引き起こす、または、防ぐ）への信号の提供と、細胞障害性Ｔリンパ球による特異的な標的細胞の死滅と、そして、他の免疫細胞の機能を調節するサイトカインのような可溶性の要素の放出）に言及するために、同義的に本願明細書において使用される。
【００４１】
用語「免疫反応」は、リバー（抗体、サイトカイン、および、補体を含む）によって生じるリンパ球、抗原提示細胞、食細胞、顆粒球と可溶性巨大分子の協調作用に言及し、リバーは、人体への選択的な障害や、人体の破壊や、人体の侵入する病原体、および、病原体、癌細胞によって感染された、または、自己免疫炎症または病理学的炎症の場合の細胞または組織からの除去をもたらす。
【００４２】
本願明細書において使用されるように、用語「細胞表面受容体」は、信号を受信し、細胞の特性膜全体に信号の伝達ができる分子の分子と複合体を含む。本発明の「細胞表面受容体」の例は、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）またはＣＴＬＡ−４のＢ７リガンドである。
【００４３】
用語「非特異性のＴ細胞活性」は、抗原特異性から依存するＴ細胞の刺激に言及する。
【００４４】
「標的細胞」は、組成物（例えば、本発明のヒト配列抗体またはヒト単クローン抗体、本発明の特異性分子または多重特異性分子）によって標的とされる被検者（例えば、人間または動物）のいかなる望ましくない細胞をも意味する。標的細胞は、ヒトＣＴＬＡ−４を発現または過剰発現する細胞となりうる。ヒトＣＴＬＡ−４を発現する細胞は、腫瘍細胞（リンパ腫）を含むことができる。
【００４５】
また、本発明においては変性した抗体を含む。用語「変性した抗体」は、例えば、抗体の部分を削除するか、追加するか、または、置換することによって変性した、単クローン抗体、キメラ抗体およびヒト化抗体などの抗体を含む。例えば、抗体を、定常領域の削除や半減期（例えば、血清半減期）、抗体の安定性または親和性を増加する定常領域と交換することによって変性させることができる。
【００４６】
本発明の抗体複合体は、（例えば、エフェクター細胞を補充するため、）得られる生物反応を変えるか、または、生物反応を生成するために使用される。薬用成分は、典型的な化学治療薬に制限されるとしては解釈されない。例えば、薬用成分は、所望の生物活性を所有しているタンパク質またはポリペチドである。このようなタンパク質は、酵素的に活性な毒素またはフラグメントのタンパク質（例えば、アブリン、リシンＡ、プソイドモナス・エキソトキシン、または、ジフテリアトキシン）と、腫瘍壊死因子またはインターフェロンαなどのタンパク質、または、生体応答調節剤（例えば、リンフォカイン、インターロイキン１（ＩＬ−１）、インターロイキン２（ＩＬ−２）、インターロイキン６（ＩＬ−６）、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）、顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ−ＣＳＦ）または他の増殖因子）と、を含む。
【００４７】
＜現状打開事態の誘因＞
本方法の目的は、過量投与を防ぐとともに、最も短い時間量においてＢＥを達成することである。これは、ＢＥを引き起こすために薬物の用量を滴定することによって達成される。所望の効果を達する薬物用量を滴定方法は、例えば、降圧剤の投薬がある高血圧症治療が血圧における所期の効果を達成するために滴定されるように、医術において周知である。このような方法は、例えば、固定された投与間隔において同じ量の薬物の投薬を繰り返すが、用量を増加させるか、投与間隔を減少させるか、または、用量と投与間隔の組み合わせを変化させることがより好ましい。
【００４８】
抗ＣＴＬＡ−４抗体の初回投薬は、一般的に、３週間から８週間ごとに投与される抗体の３１０ｍｇ／ｋｇから１０ｍｇ／ｋｇを含む。抗ＣＴＬＡ−４抗体の初回投薬後、ＢＥを検出するために、患者は、一般的に投与間隔クール、または、１週間から４週間の十分な期間において臨床医によって探知される（検出方法については以下を参照）。ＢＥは、自己反応性Ｔ細胞の拡大を必要とするので、いかなる治療効果的な投薬後に明らかとなるのは、１週間から４週間かかることが予想される。探知期間のＢＥの非発症は、抗ＣＴＬＡ−４抗体の更なる投与が必要であることを臨床医に知らせる。抗ＣＴＬＡ−４抗体の投与後、ＢＥに関して患者を探知すると、少なくとも、ＢＥが引き起こされてと検出されるまで、付加的な用量が投与される。患者の免疫状態（先行の免疫療法、疾病状態、年齢、その他に作用される）を含む要素が、ＢＥを引き起こすのに必要な投薬に影響を与えることができるということが、当業者によって認められよう。熟練した臨床医は、ＢＥを引き起こす以降の投与量同様に初回量を測定するとき、このような要素を考慮に入れることが可能であろう。これらの要素は、ＢＥを引き起こすために、以降の用量も同様に初回量を測定する際に考慮されなければならない。
【００４９】
本発明の方法が、患者において服用量過多を引き起こさず、最も短い期間のＢＥを引き起こすようにするため、ＢＥについての患者の探知期間を１週間から４週間に短くすることは好都合であり、２週間から３週間にすることがより好ましい。付加的な投薬がＢＥの達成に必要である場合、用量は、前回の用量の１０％以上１００％以下によって増加される。例えば、患者に３ｍｇ／ｋｇの投与を初回に行い、３週後に２回目の投与を行なうように計画されるものの、３週期間の後にＢＥを達成しない場合、患者への用量は６ｍｇ／ｋｇ（つまり、１００％の増加）に増加することができる。別の例において、患者に１０ｍｇ／ｋｇの投与を初回に行い、８週後に２回目の投与を行なうように計画されるものの、探知４週間後にＢＥを達成しない場合、患者への投与間隔は、８週から４週まで減らし、その一方で、１０ｍｇ／ｋｇの投薬を維持することができる。当業者によって、ＢＥを引き起こす本発明の方法の実施において、さまざまな用量と間隔を変化させることができるということが認められよう。
【００５０】
＜現状打開事態の検出＞
ＢＥは、症状、徴候または検査異常所見として明らかにすることができる。したがって、このような事象の検出は、病歴（自覚徴候に関する）、検診および／または画像診断検査（他覚徴候に関する）、および、検査（異常検査所見に関する）を必要とする。最初の所見に従い、臨床医は、付加的な検査（例えば内視法または生検法）の指示を選択する。
【００５１】
臨床医は、皮膚（皮膚炎、発疹、そう痒症）、胃腸管（腹痛、圧痛、下痢）、内分泌系（ホルモン濃度の抑制）と肝臓（肝炎、肝臓機能検査で見られる隆起）に挙げられる、より一般的なＢＥの検出に関して特に注意を払う。しかしながら、臨床医は、いかなるＢＥを検出するようにする必要がある。「Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒａｐｙ Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ Ｐｒｏｇｒａｍ、Ｃｏｍｍｏｎ Ｔｅｒｍｉｎｏｌｏｇｙ Ｃｒｉｔｅｒｉａ ｆｏｒ Ａｄｖｅｒｓｅ Ｅｖｅｎｔｓ」は、ＢＥ（有害事象）をリスト化し、これらの事象関するグレードシステムを提供する。また、本出版物は、患者の探知、および、ＢＥの検出において臨床医を支援するガイドとして役に立つ。
【００５２】
患者の探知は、自覚徴候と総合的な検診に関する周期的で総合的な病歴を含む。ＢＥの影響を受けやすい各器官系が検査される。例えば、皮膚科系に関連する病歴は、痒み、剥れ、痛み、および、皮膚色の変化に関する疑いを含む。皮膚の検診は、例えば、全ての可視性の真皮の細密検査を含む。更に、検査は、臨床医の判断に基づいて、例えば、皮膚生検法を含むことができる。
【００５３】
検診を早急に行なう必要がない、無症状の器官系のＢＥの検出は、検査と画像診断検査によって確実性を付け加えるために必要となる。例えば、肝炎は、検診によって、肝臓機能検査とＣＴスキャンを使用して、より早い段階で発見される。
【００５４】
ＢＥの検出は、抗ＣＴＬＡ−４抗体の投与に続く患者を臨床的に探知することに依存する。広範囲の診断法は、ＢＥを検出するために、臨床医によって使用される。
【００５５】
＜癌治療法＞
本発明および代用治療終末点のＣＴＬＡ−４抗体は、患者（以前癌ワクチンを投与されたか、または、自然の感染防御免疫が腫瘍対して何らかのレベルを示す）の悪性腫瘍の治療において使用される。抗体は、化学療法、放射線療法、サイトカイン、ケモカインおよび他の生物の信号分子、腫瘍特異性のワクチン、自己幹細胞救済と同種幹細胞救済（例えば、増強移植対腫瘍効果に対する）、他の治療用抗体、治療標的分子、抗血管形成治療、治療目的を有する感染因子（例えば、腫瘍に集まるバクテリア）、および、遺伝子療法などの、単剤、１つ以上の他の治療薬の組み合わせ、または、腫瘍に対する免疫療法ワクチンとの連動として使用される。抗体は、単一投与または多回投与される。単一または上述した治療法に関連して、抗体は、アジュバント療法またはネオアジュバント療法で使用される。
【００５６】
また、ＢＥを治療することを意図される治療薬（例えば、ステロイド）が、本発明の方法において使用される。したがって、ＢＥを治療する治療薬は、ＢＥの診断に続いて患者に投与される。
【００５７】
本発明は腫瘍（特に、免疫学的に高感度な腫瘍）の治療を目的し、その腫瘍は、それは免疫療法に反応する癌または免疫不全状態である患者において発症する癌である。一実施形態において、腫瘍は、充実性腫瘍である。本発明に従って治療される腫瘍の例は、以下の肉腫と癌腫を含むが、これらに制限されない。繊維肉腫、粘液肉腫、脂肪肉腫、軟骨肉腫、骨原性肉腫、脊索腫、血管肉腫、内皮肉腫、リンパ管肉腫、リンパ管内皮肉腫、滑膜腫、中皮腫、リンパ腫、黒色腫、カポシ肉腫、骨髄原発性肉腫、平滑筋肉腫、横紋筋肉腫、結腸直腸癌、胃癌、膵臓癌、乳癌、卵嚢癌、前立腺癌、扁平上皮癌、基底細胞癌、腺癌、汗腺癌、皮脂腺癌、乳頭状癌、乳頭状腺癌、嚢胞腺癌、髄様癌、気管支癌、腎細胞癌、肝癌、胆道癌、絨毛膜癌、精上皮腫、胎児性癌、ウィルムス腫瘍、子宮頸癌、睾丸腫瘍、肺癌、小細胞肺癌、膀胱癌、上皮癌、膠腫、神経膠星状細胞腫、髄芽細胞腫、頭蓋咽頭腫、脳室上衣細胞腫、松果体腫、血管芽細胞腫、聴神経腫、乏突起神経膠腫、髄膜腫、黒色腫、神経芽細胞腫、および、網膜芽細胞腫。
【００５８】
別の実施形態において、増殖性異常の変化（例えば、異形成（ｍｅｔａｐｌａｓｉａｓ）と異形成（ｄｙｓｐｌａｓｉａｓ））は、子宮頸管、食道、および、肺の上皮組織などにおいて治療または予防される。したがって、本発明は、過形成、異形成（ｍｅｔａｐｌａｓｉａｓ）、または、特に、異形成（ｄｙｓｐｌａｓｉａｓ）からなる非腫瘍性細胞発育は発生した場合、新生物または癌への進行に先行すると分かる状態、または、疑わしい状態における治療を提供する。（このような異常増殖条件の概要は、「ＲｏｂｂｉｎｓおよびＡｎｇｅｌｌ、１９７６、「Ｂａｓｉｃ Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ（第２編）」、Ｗ．Ｂ．Ｓａｕｎｄｅｒｓ社、Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ、６８ページから７９ページ」参照のこと。）過形成は、構造または機能の有意な変化なしで、組織または器官における細胞数の増加を含む制御細胞の増殖の形である。１つの例外として、子宮内膜増殖症はしばしば子宮内膜癌に先行する。異形成（ｍｅｔａｐｌａｓｉａｓ）は、成人の分化細胞、または、完全な分化細胞の１つのタイプが成体細胞の別のタイプの代わりとなる、制御細胞の発育の形である。異形成（ｍｅｔａｐｌａｓｉａｓ）は、上皮細胞組織または結合組織細胞において発生する。異型の異形成（ｍｅｔａｐｌａｓｉａｓ）は、やや無秩序な異形成上皮を含む。異形成（ｄｙｓｐｌａｓｉａｓ）は、よく癌の前兆となり、上皮において主に見られ、非腫瘍性細胞の発育で最も無秩序な形であり、個々の細胞の均一性の細胞の構造配列の損失を含む。異形成（ｄｙｓｐｌａｓｉａｓ）の細胞は、しばしば異常に大きな濃染核を有し、多形態性を呈する。異形成（ｄｙｓｐｌａｓｉａｓ）は、慢性刺激または炎症が存在するところにおいて、特徴的に発生し、子宮頸管、気道、口腔、および、胆嚢においてしばしば見られる。このような障害の概要に関しては、「Ｆｉｓｈｍａｎ他、１９８５、「Ｍｅｄｉｃｉｎｅ（第２編）」、Ｊ．Ｂ．Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ社、Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ」を参照のこと。
【００５９】
また、本発明は、不適正な増殖を被る組織に対して、本発明の治療上有効量のベクターを投与することにより、脈管形成によって増大した不適正な細胞増殖または組織増殖を含む非悪性腫瘍と他の障害の治療を目的とする。例えば、本発明が、特に頭蓋内の部位における動静脈（ＡＶ）形成異常の治療のために有用であることが考察される。本発明は、また、乾せん症（炎症および血管増殖によって特徴づけられる皮膚科的状態）、前立腺肥大症（炎症および血管増殖に関連する状態）を治療するために使用される。他の過剰増殖の障害の治療もまた、考察される。
【００６０】
抗ＣＴＬＡ−４抗体による治療は、癌ワクチンで治療される患者の既存の記憶反応を活性化するために使用される。したがって、ワクチン治療を受ける患者は、免疫反応を引き起こすか、または、強化するために、抗ＣＴＬＡ−４抗体によるさらなる治療に選択される。
【００６１】
一実施形態において、患者は、以前抗制癌ワクチンによる治療を受けていた。癌抗原は、例えば、メラノーマ抗原または前立腺癌抗原であり得る。一実施形態において、患者は人間である。好ましい実施形態において、抗ＣＴＬＡ−４抗体は、ヒト抗ＣＴＬＡ−４抗体である。本発明の好ましいヒト抗ＣＴＬＡ−４抗体は１０Ｄ１であるが、本発明の方法は、いかなるヒトＣＴＬＡ−４抗体によって使用される。他の実施形態において、抗ＣＴＬＡ−４抗体は、組換え抗体（例えばキメラ型、または、ヒト化（例えば、ＣＤＲ融合化）の抗ＣＴＬＡ−４抗体である。
【００６２】
抗体によるＣＴＬＡ−４の遮断は、患者の癌細胞に対して、記憶免疫応答または二次免疫応答を強化することができる。ＣＴＬＡ−４に対する抗体は、免疫を刺激するため、免疫原性因子（例えば、癌細胞、精製された腫瘍抗原（組換えタンパク質、ペプチド、および、炭水化物分子を含む）、細胞、および、免疫刺激サイトカインとＢ７のような細胞表面抗原を符号化する遺伝子でトランスフェクションした細胞（Ｈｕｒｗｉｔｚ、Ａ．他、（１９９８）、「Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ Ｕ．Ｓ．Ａ．１９９８」、９５：１００６７−１００７１参照）、または、単独で使用される細胞と組み合わせられる。
【００６３】
ワクチン接種に続く、ＣＴＬＡ−４遮断は効果的である。腫瘍に対するワクチン接種の多くの実験的な方式が考案された。以下を参照のこと。
Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ，Ｓ．、２０００、「Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ Ｃａｎｃｅｒ Ｖａｃｃｉｎｅｓ」、ＡＳＣＯ Ｅｄｕｃａｔｉｏｎａｌ Ｂｏｏｋ Ｓｐｒｉｎｇ、６０−６２
Ｌｏｇｏｔｈｅｔｉｓ，Ｃ．、２０００、ＡＳＣＯ Ｅｄｕｃａｔｉｏｎａｌ Ｂｏｏｋ Ｓｐｒｉｎｇ：３００−３０２
Ｋｈａｙａｔ，Ｄ．、２０００、ＡＳＣＯ Ｅｄｕｃａｔｉｏｎａｌ Ｂｏｏｋ Ｓｐｒｉｎｇ：４１４−４２８
Ｆｏｏｎ，Ｋ．２０００、ＡＳＣＯ Ｅｄｕｃａｔｉｏｎａｌ Ｂｏｏｋ Ｓｐｒｉｎｇ：７３０−７３８
Ｒｅｓｔｉｆｏ，Ｎ．およびＳｚｎｏｌ，Ｍ．、「Ｃａｎｃｅｒ Ｖａｃｃｉｎｅｓ」、Ｃｈ．６１、ＤｅＶｉｔａ，Ｖ．他（編）におけるｐｐ．３０２３−３０４３、１９９７、「Ｃａｎｃｅｒ：Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ」、第５編
これらの方式のうちの１つにおいて、ワクチンは、自己腫瘍細胞または同種腫瘍細胞を使用して調製される。これらの細胞ワクチンは、腫瘍細胞がＧＭ−ＣＳＦを発現するために特性導入されるとき、最も効果的であることが示されている。ＧＭ−ＣＳＦは、腫瘍のワクチン接種のための抗原提示の効力のある活性化因子であることが示されている（Ｄｒａｎｏｆｆｅｔ他、「Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ Ｕ．Ｓ．Ａ．１９９３」、９０：３５３９−４３）。
【００６４】
ＧＭＣＳＦを修正した腫瘍細胞ワクチンを促進する抗ＣＴＬＡ−４遮断薬は、多くの実験腫瘍モデル（例えば乳癌（Ｈｕｒｗｉｔｚ他、１９９８、前述）、原発性前立腺癌（Ｈｕｒｗｉｔｚ他、「Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ２０００」、６０：２４４４〜８）と黒色腫（ｖａｎ Ｅｌｓａｓ他、「Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１９９９」、１９０：３５５−６６）においてワクチンの有効性を改良する。これらの例において、非免疫原性腫瘍（例えば、Ｂ１６黒色腫）は、免疫系による破壊に対して作用を受けやすくなっている。また、腫瘍細胞ワクチンは、他の免疫賦剤（例えば、ＩＬ２）、および、特に共刺激性分子を発現するように修正される。
【００６５】
さまざまな腫瘍の遺伝子特性発現と大規模な遺伝子特性発現パターンの研究は、いわゆる「腫瘍特異性抗原」の定義に導いた（Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ、「Ｉｍｍｕｎｉｔｙ １９９９」、１０：２８１−７）。多くの場合、これらの腫瘍特異性抗原は、腫瘍において、および、腫瘍の発生元の細胞（例えば、メラノサイトの細胞抗原（ｇｐ１００）、ＭＡＧＥ抗原、Ｔｒｐ−２）において発現する分化抗原である。さらに重要なことに、これらの抗原の多くは、宿主において見られる腫瘍特異性Ｔ細胞の標的であることが示される。ＣＴＬＡ−４遮断薬は、組み換え型のタンパク質に対する二次免疫反応または記憶免疫反応を強化するため、腫瘍において発現が見られる組み換え型のタンパク質および／またはペプチドベースのワクチンとともに刺激剤として使用される。組み換え型のタンパク質は、免疫系において自己抗原として通常みなされるため、これらのタンパク質に対して耐性である。また、腫瘍抗原は、タンパク質テロメラーゼを含み、染色体のテロメアの合成に必要とされ、８５％より多くのヒト癌において、および、限定された数の体細胞組織だけにおいて発現される（Ｋｉｍ他、「Ｓｃｉｅｎｃｅ １９９４」、２６６：２０１１−２０１３）。これらの体細胞組織は、さまざまな手段によって免疫攻撃から保護される。また、腫瘍抗原は、タンパク質配列を変えるか、または、２つの無関係な配列（つまり、フィラデルフィア染色体におけるｂｃｒ−ａｂｌ）間の融合タンパク質を生成する体細胞突然変異、または、Ｂ細胞腫瘍からイディオタイプによって癌細胞において発現する「新生抗原」である。他の腫瘍ワクチンは、ヒト癌に関係するウイルス（ヒト乳頭腫ウイルス（ＨＰＶ）、肝炎ウイルス（ＨＢＶおよびＨＣＶ）、および、カポジ肉腫ヘルペスウイルス（ＫＨＳＶ）など）からのタンパク質を含む。ＣＴＬＡ−４遮断薬とともに使用される腫瘍特異性抗原の別の形態は、腫瘍組織自体から分離される精製された熱ショックタンパク質（ＨＳＰ）である。これらの熱ショックタンパク質は、腫瘍細胞からタンパク質のフラグメントを含み、腫瘍免疫を引き出す抗原提示細胞に対し輸送時において、非常に効果的となる（ＳｕｏｔおよびＳｒｉｖａｓｔａｖａ、「Ｓｃｉｅｎｃｅ １９９５」、２６９：１５８５−１５８８、および、Ｔａｍｕｒａ他、「Ｓｃｉｅｎｃｅ １９９７」、２７８：１１７−１２０）。
【００６６】
樹状細胞（ＤＣ）は、主な抗原特異性反応に使用される効力のある抗原提示細胞である。ＤＣは、生体外で生じ、腫瘍細胞抽出物と同様にさまざまなタンパク質抗原とペプチド抗原で満たされる（Ｎｅｓｔｌｅ他、「Ｎａｔｕｒｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ １９９８」４：３２８−３３２）。また、ＤＣは、これらの腫瘍抗原も同様に発現する遺伝子的手段によって特性導入される。さらに、ＤＣは、免疫化）のために、腫瘍細胞に直接溶解する（Ｋｕｇｌｅｒ他、「Ｎａｔｕｒｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ２０００」、６：３３２−３３６）。ワクチン接種法としてのＤＣ免疫化は、より効力のある抗腫瘍反応を活性化するためにＣＴＬＡ−４遮断薬によって効果的に促進される。
【００６７】
免疫アジュバント（例えばＭＥＬＡＣＩＮＥ（登録商標）ワクチン、ＤＥＴＯＸTM免疫アジュバントを加えた２つのヒトのメラノーム細胞株からのライセート混合薬）と共に、ＣＴＬＡ−４遮断薬と組み合わせられる、別のタイプの黒色腫ワクチンは、メラノーム細胞株ライセートから調製されるワクチンである。ワクチン治療は、付加的な化学療法の治療の有無にかかわらず、抗ＣＴＬＡ４によって促進される。
【００６８】
＜感染症＞
本発明の他の方法は、特定の毒素または病原体に曝された患者を治療するために使用される。上記のように腫瘍に対する用途同様、ＣＴＬＡ−４遮断薬を媒体とする抗体、および、代用治療終末点は、ワクチンと結合して、病原体、毒素、および、自己抗原への二次免疫反応または記憶免疫反応を刺激するために、単独で、または、アジュバントとして使用される。ＣＴＬＡ−４遮断薬は、ブラジル鉤虫（ＭｃＣｏｙ，Ｋ．他、（１９９７）１８６（２）、１８３−１８７）およびドノバンリーシュマニア（Ｍｕｒｐｈｙ、Ｍ．他（１９９８）、「Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．」、１６１：４１５３−４１６０）の感染の急性相に効果的であることが示されている。本治療手段が特に有用である病原体の例は、効果的ワクチンが現在存在しないか、あるいは、従来のワクチンが決して完全に効果的なものではない病原体を含む。これらの病原体には、ＨＩＶ、（Ａ型、Ｂ型、および、Ｃ型）肝炎、インフルエンザ、ヘルペス、ジアルジア、マラリア、リーシュマニア、黄色ブドウ状球菌と緑膿菌を含むが、これに限定されない。ＣＴＬＡ−４遮断薬は、作用因子（感染の流れにおいて改変した抗原を示すＨＩＶなど）によって確立した感染に対して免疫を促進する際に有用である。これらの新しいエピトープは、抗ヒトＣＴＬＡ−４投与時に異種として認識される。したがって、ＣＴＬＡ−４による負の信号によって緩衝されない強力なＴ細胞反応を引き起こす。
【００６９】
本発明の方法によって治療可能な感染を引き起こす病原ウイルスのいくつかの例は、（Ａ型、Ｂ型、または、Ｃ型）肝炎ウイルス、ヘルペスウイルス（例えば、ＶＺＶ、ＨＳＶ−１、ＨＡＶ−６、ＨＳＶ−ＩＩ、ＣＭＶ、および、エプスタインバーウイルス）、アデノウイルス、インフルエンザウイルス、フラビウイルス、エコーウイルス、ライノウイルス、コクサッキーウイルス、コロナウイルス、ＲＳウイルス、ムンプスウイルス、ロタウイルス、はしかウイルス、風疹ウイルス、パルボウイルス、ワクチニアウイルス、ＨＴＬＶウイルス、デング熱ウイルス、乳頭腫ウイルス、軟属腫ウイルス、ポリオウイルス、狂犬病ウイルス、ＪＣウイルスとアルボウイルス脳炎ウイルスを含む。
【００７０】
本発明の方法によって治療可能な感染を引き起こす病原細菌のいくつかの例は、クラミジア、リケッチア菌、放線菌、ブドウ球菌、連鎖球菌、肺球菌、髄膜炎菌、淋菌、クレブシェラ菌、プロテウス菌、セラチア菌、シュードモナス菌、レジオネラ菌、ジフテリア、サルモネラ菌、バチルス菌、コレラ菌、破傷風菌、ボツリヌス菌、炭疽病、ペスト菌、レプトスピラ菌とライム菌を含む。
【００７１】
本発明の方法によって治療可能な感染を引き起こす病原菌類のいくつかの例は、カンジダ属（Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ、Ｃ．ｋｒｕｓｅｉ、Ｃ．ｇｌａｂｒａｔａ、Ｃ．ｔｒｏｐｉｃａｌｉｓなど）、クリプトコッカス・ネオフォルマンス、アスペルギルス（フミガタス、ニガー、その他）、ケカビ属（ケカビ、アブシディア、クモノスカビ）、スポロトリクス属シェンキィ、ブラストミセス・デルマティティディス、ブラジルパラコクシジオイデス、コクシジオイデス・イミティスとヒストプラズマ・カプスラーツムを含む。
【００７２】
本発明の方法によって治療可能な感染を引き起す病原性寄生体のいくつかの例は、赤痢アメーバ、大腸バランチジウム、ネグレリア・フォーレリ、アカントアメーバ種、ランブル鞭毛虫、クリプトスポリジウム種、ニューモシスチス・カリニ、三日熱マラリア、ネズミバベシア、ブルーストリパノソーマ、クルーズトリパノソーマ、ドノバンリーシュマニア、トキソプラズマ・ゴンディ、ブラジル鉤虫を含む。
【００７３】
＜有益な自己免疫反応の促進＞
【００７４】
自己免疫反応を引き起こしてと増幅する抗ＣＴＬＡ−４抗体と代用治療終末点の能力は、多くの実験系（ＥＡＥ−実験的自己免疫脳脊髄炎、ＭＳ（Ｐｅｒｒｉｎ他、「Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ １９９６」、１５７：１３３３−１３３６）、および、糖尿病（Ｌｕｈｄｅｒ他、１９９８、前述）用マウスのモデル）において実証されている。実際、腫瘍細胞とペプチドワクチンを使用する抗腫瘍反応の誘起は、多くの抗腫瘍反応が抗自己反応を含むことを以下において明らかにする。
前述のｖａｎ Ｅｌｓａｓ他における抗ＣＴＬＡ−４＋ＧＭ−ＣＳＦを修正したＢ１６黒色腫において観察される色素消失
Ｔｒｐ−２のワクチン接種したマウスの色素消失（Ｏｖｅｒｗｉｊｋ他、「Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．１９９９」、９６：２９８２−２９８７）
ＴＲＡＭＰ腫瘍細胞ワクチンによって引き起こされる自己免疫前立腺炎（Ｈｕｒｗｉｔｚ ２０００、前述）
ヒト臨床試験における黒色腫ペプチド抗原のワクチン接種および白斑の観察
【００７５】
従って、疾患治療のためのこれらの自己タンパク質に対して免疫反応を効果的に生成するワクチン接種手順を考案するため、さまざまな自己タンパク質と連動して刺激する抗ＣＴＬＡ−４の使用することを考えることが可能である。例えば、アルツハイマー病は脳内のアミロイド蓄積におけるＡβペプチドの不適当な蓄積を含み、アミロイドに対する抗体反応によって、これらのアミロイド蓄積を取り除くことができる（Ｓｃｈｅｎｋ他、Ｎａｔｕｒｅ １９９９、４００：１７３−１７７）。
【００７６】
また、他の自己タンパク質は、標的（アレルギーおよび喘息の治療用のＩｇＥ、および、慢性関節リウマチの治療用のＴＮＦ）として使用される。最終的には、さまざまなホルモン類への抗体反応は、抗ＣＴＬＡ−４抗体の使用によって引き起こされる。生殖ホルモンに対する中和抗体応答は、避妊のために使用される。また、ホルモン類に対する中和抗体応答および特定の腫瘍の増殖のために必要とされる他の可溶性の要素は、考えられるワクチン接種の標的としてみなされる。
【００７７】
抗ＣＴＬＡ−４抗体および代用治療終末点の使用に関する上記に類似の方法は、他の自己抗原（アミロイド蓄積、アルツハイマー病に含まれるＡβ、ＴＮＦαおよびＩｇＥなどのサイトカイン）の不適切な蓄積を有する患者を治療する、自己免疫反応の誘起のために使用される。
【実施例】
【００７８】
また、本発明は、以下の実施例によって記述される。しかしながら、本願明細書のいかなる記述においては、これらの実施例、または、他の実施例の使用が例証されるのみであり、本発明、または、例示されるいかなる用語の範囲および意味を決して制限するものではない。同様に、本発明は、本願明細書において記述されるいかなる特定の好ましい実施形態にも制限されない。実際、本発明の多くの修正および変更は、本願明細書を読む際、当業者にとって明白であり、そして、その趣旨および範囲から逸脱することなく行われる。従って、本発明は、本願請求項が権利を与えられる範囲と同等である包括的な範囲に沿った添付の請求の範囲の用語によってのみ制限されよう。
【００７９】
実施例１
＜切除したステージＩＩＩ／ＩＶ黒色腫のための黒色腫ペプチド／ＩＦＡを有する抗ＣＴＬＡ−４抗体の臨床試験結果＞
ステージＩＩＩ（２人の患者）、または、ステージＩＶ（１７人の患者）の黒色腫を摘出した１９人の患者に、不完全フロイントアジュバント（ＩＦＡ）を有するｇｐ１００／チロシナーゼ／ＭＡＲＴ−１のペプチドワクチンの各注射とともにＣＴＬＡ−４抗体１０Ｄ１の用量（０．３ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、および、３ｍｇ／ｋｇ）を投与した。患者は、ＨＬＡ−Ａ２+であっておよびＩＦＮ−αによる先行治療を受けていなかった。腫瘍は、ｇｐ１００、チロシナーゼおよび／またはＭＡＲＴ−１に対してＩＨＣ陽性であった。除外基準には、ＭＤＸ−０１０またはＭＡＲＴ−１（ｇｐ１００およびチロシナーゼペプチド）による自己免疫性疾患および先行治療を含めた。チロシナーゼ３６８−３７６（３７０Ｄ）、ＭＡＲＴ−１ ２６−３５（２７Ｌ）およびｇｐ１００２０９−２１７（２１０Ｍ）ペプチドは、それぞれ、ＨＬＡ結合を増加する１つのアミノ酸変性により、正常型とは異なっていた。
【００８０】
抗ＣＴＬＡ−４抗体およびペプチドワクチンを、４週間おきに６週間、そして、３ヵ月ごとに×２（２回）（合計投与回数８）投与した。ペプチドワクチンを、ＩＦＡにおいて乳化状態にし、１回の投与においてそれぞれ１ｍｇを皮下に投与した。３つのコホートに対して、０．３ｍｇ／ｋｇＩＶ、１．０ｍｇ／ｋｇＩＶ、または、３．０ｍｇ／ｋｇＩＶの抗ＣＴＬＡ−４抗体を投与した。
【００８１】
【表１】
【００８２】
【表２】
【００８３】
以下のＳＡＥを含む。
１）４０歳男性は、３ｍｇ／ｋｇの抗ＣＴＬＡ−４抗体の第１回目注入後、グレード２の下痢（２日）、および、グレード３の腹痛（１０日）を発症した。腹部および骨盤のＣＴスキャンにより、肥厚および回腸終末部および盲腸壁の炎症が示された。４日後の繰り返しＣＴスキャンにより、異常所見の解像が示された。患者に対して、その症状の治療を行い、発症から１６日後に回復した。
２）４２歳の女性は、３ｍｇ／ｋｇの抗ＣＴＬＡ−４抗体の第１回目注入６日後に、グレード３の下痢を発症した。患者に対して、ＩＶ水和剤および抗生物質による治療を行なった。
３）５４歳の男性は、３ｍｇ／ｋｇの抗ＣＴＬＡ−４抗体の第３回目注入後、グレード３の下痢を発症した。患者のスツール検査において、白血球（ＷＢＣ）に関して陽性だった。下痢は、抗生物質で治療され、発症から８日後に回復した。
４）５６歳の男性は、１ｍｇ／ｋｇの抗ＣＴＬＡ−４抗体の第２回目注入後、グレード３の血性下痢および両側ブドウ膜炎を発症した。患者のスツール検査においては白血球が陽性であり、Ｓ状結腸鏡検査法で炎症を起こした腸壁がみられ、そして、ＣＴスキャンは厚くなった盲腸壁を示した。患者は、経口ステロイドおよび局所ステロイドによる治療に対して、ほぼ即時の反応を示した。全ての症状は、３ヵ月後に回復した。
【００８４】
＜結論＞
最も多い投与のコホートにおいて、再発はなかった。抗ＣＴＬＡ−４抗体用量に依存的で、臓器特異的の自己免疫的な有害事象が観察された。これらの有害事象は、治療可能で、そして、可逆性であった。
【００８５】
実施例２
＜外科的に切除不能なステージＩＩＩまたはＩＶの黒色腫患者における抗ＣＴＬＡ−４抗体の単一投与の臨床試験の結果＞
フェーズＩ非盲検多施設臨床試験は、切除不能な進行性悪性黒色腫患者１７人のＭＡｂ １０Ｄ１の安全性および薬物動態学を評価するために実施された。年齢の正中値は、５９歳（範囲２９歳から７９歳）であった。９人の患者は、先行の免疫療法を受け、６人の患者は先行の放射線療法を受け、５人は先行の化学療法を受けていた。全ての患者に、９０分にわたって静脈内に３ｍｇ／ｋｇの１０Ｄ１を１回投与し、それから毒性、薬物動態、循環Ｔ細胞活性化および臨床的な結果を追跡した。全ての注入において、ほんの軽度の有害事象が発症した。７人の患者は、軽度の、可逆性の発疹またはそう痒症を発症した。抗体の血漿レベルは、１ヶ月から４ヶ月まで持続した。活性化された末梢Ｔ細胞における有意な増加、および、軽度の発疹以上の臨床的な自己免疫の所見はなかった。２人の患者は、３つの軟組織塊の分解と、肺質量の５０％を超える減少を含む部分寛解を体験した。さらにまた、肺質量における５０％を超える減少を体験した患者は、以前に黒色腫ワクチンによって治療された患者であり、抗ＣＴＬＡ−４抗体治療が腫瘍への既存の記憶反応を活性化することが可能であることを示唆した。本研究の結果は、抗ＣＴＬＡ−４治療が、免疫性で明白な所見によって十分に耐容性があり、そして、抗腫瘍活性であることを示す。
【００８６】
【表３】
【００８７】
実施例３
＜ｇｐ１００ペプチドワクチンと組み合わせた抗ＣＴＬＡ−４抗体の臨床試験結果＞
Ａ．コホート１
ステージＩＶの進行性黒色腫患者１４人に、２つのＨＬＡ−Ａ*０２０１制限ｇｐ１００ペプチドを有するワクチンとともに、抗ＣＴＬＡ−４抗体１０Ｄ１を投与された。患者特性は、表３にまとめられる。
【００８８】
【表４】
【００８９】
全ての患者は、６０％以上のＫａｍｏｆｓｋｙ ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ ｓｔａｔｕｓを有するＨＬＡ*０２０１+であった。６人の患者には、内臓転移があった。患者は、自己免疫疾患または免疫不全疾患の所見がなかった。全ての患者は、それらの一次病巣の先行手術を受けていた。６人の患者は、先行の化学療法を受けていた。１１人の患者は、インターフェロン−α（患者２、５から８、１０、１２および１３）、低用量ＩＬ−２（患者２、５および１３）、高用量ＩＬ−２静脈内投与（患者４、７および８）、黒色腫のホールセルワクチン（患者１、２および６）、ＮＹ−ＥＳＯ−１ペプチドワクチン（患者４および５）およびＧＭ−ＣＳＦ（患者９）を含む先行の免疫療法を有した。患者は、先行のｇｐ１００の免疫療法を受けておらず、そして、治療前に３週間は全身性治療も受けていなかった。
【００９０】
治療サイクルは３週間ごとに、不完全フロイントアジュバント（ＩＦＡ）に乳化された１ｍｇのｇｐ１００：２０９−２１７（２１０Ｍ）ペプチド（ＩＭＤＱＶＰＦＳＶ）１を第１の肢に皮下注射し、そして、ＩＦＡに乳化した１ｍｇのｇｐ１００：２８０−２８８（２８８Ｖ）ペプチド（ＹＬＥＰＧＰＶＴＶ）（Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ Ｃａｎｃｅｒ ＴｈｅｒａｐｙＥｖａｌｕａｔｉｏｎ Ｐｒｏｇｒａｍによって提供される合成ペプチド）を第２の肢に皮下注射した後、９０分にわたり３ｍｇ／ｋｇの抗ＣＴＬＡ−４抗体１０Ｄ１を静脈内投与するものであった。患者は先行の除去療法を行い、２回の治療サイクルを３週間ごとに行った。末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）は、次に使用するまで、フィコール・ハイパック分離によって分離され、１０％のジメチルスルホキシドとともに熱不活性ヒトＡＢ血清において低温保存され、そして、−１８０℃で保存された。
【００９１】
臨床反応は、胸部、腹部および骨盤のコンピュータ断層写真（ＣＴ）、および、脳の磁気共鳴画像（磁気共鳴映像法）を使用して評価された。これらの画像診断検査は治療開始４週以内、および、２回の治療サイクルごとに実行された。付加的な放射線学的検査は、疾患部位を評価するために必要なときに使用された。各患者における最も長い腫瘍の直径の合計（世界保健機構ＲＥＣＩＳＴ基準）は、治療の前後に計算された。部分寛解は、少なくとも１ヵ月続く全ての評価可能な転移腫瘍のうち最も大きな直径の合計において、３０％より多く１００％未満の減少、および、新たな腫瘍または拡大した腫瘍はないものとして定義された。完全寛解は、少なくとも１ヵ月続く全ての評価可能な転移腫瘍のうち最も大きな直径の合計において、１００％の減少、および、新たな腫瘍または拡大した腫瘍はないものとして定義された
【００９２】
患者を、自己免疫反応に対して評価した。患者は、治療前および初期治療３ヵ月後に眼科検査を受けた。全ての患者は、サイログロブリンＡｂ、リウマチ因子および抗核抗体の検査開始前の血清血液検査結果は陰性であった。ヒト抗ヒト（抗イディオタイプ）Ａｂ、赤血球沈降速度、抗核Ａｂ、甲状腺刺激ホルモンおよび遊離Ｔ４レベルは、検査の間３週ごとに測定された。
【００９３】
ＭＤＸ−０１０の血漿中濃度は、ＣＴＬＡ−４−Ｉｇ（Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ、Ｍｉｎｎｅａｐｏｌｉｓ、Ｍｉｎｎｅｓｏｔａ）で覆われるマイクロタイタのウェルによって標準のＥＬＩＳＡを使用して測定された。プラズマ試料の希釈剤は、プレートで培養された。結合された抗ＣＴＬＡ−４ Ａｂは、アルカリホスファターゼ標識のヤギ抗ヒトＩｇＧＦ（ａｂ）−特異プローブ（ｐ−ＮＰＰ基質により発現）によって検出された。
【００９４】
１２日間の生体外における増感分析（ＥＬＩＳＰＯＴ分析またはテトラマ分析より高感度）は、試験可能なＰＢＭＣを用いて全１１人の患者の免疫反応性を評価するために使用された（Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ，Ｓ．Ａ．他、「Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃ ａｎｄ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ ａ ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ ｐｅｐｔｉｄｅ ｖａｃｃｉｎｅ ｆｏｒ ｔｈｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｍｅｔａｓｔａｔｉｃ ｍｅｌａｎｏｍａ．Ｎａｔ．Ｍｅｄ．４」、３２１−３２７ （１９９８））。低温保存されたＰＢＭＣは、１μＭの未変性ｇｐ１００：２０９−２１７またはｇｐ１００：２８０−２８８のペプチド、および、３００ＩＵ／ｍｌのＩＬ−２を有する１０％の熱不活性ヒトＡＢ血清によって完全なイスコーブをベースにした培地において解凍され、培養した。細胞を、培養の開始の１１〜１３日後に収集し、そして、腫瘍細胞またはペプチドパルスしたＴ２細胞によって、一晩、共培養した。上澄み液におけるインターフェロン−γ（ＩＦＮ−γ）放出は、商業的なＥＬＩＳＡ分析（Ｐｉｅｒｃｅ−Ｅｎｄｏｇｅｎ、Ｒｏｃｋｆｏｒｄ、Ｉｌｌｉｎｏｉｓ）を使用して測定された。全１１人の患者は、１回から４回の治療サイクル後、未変性ｇｐ１００：２０９−２１７ペプチドに対して良好な免疫を呈した。６人の患者は、未変性ｇｐ１００：２８０−２８８のペプチドに対して良好な免疫を呈した。
【００９５】
フローサイトメトリ解析を、抗体（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ、Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ）またはテトラマ（Ｂｅｃｋｍａｎ Ｃｏｕｌｔｅｒ Ｉｍｍｕｎｏｍｉｃｓ、Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ、Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ）を用い、Ｆｃ受容体ブロッキング、そして、染色後に実行した。９人の患者のＰＢＭＣ上の表面マーカーの発現を、２回の治療サイクルの前後に比較した。ＨＬＡ−ＤＲ（活性化マーカー）発現は、治療後のＣＤ３+ＣＤ４+細胞（Ｐ＝０．０００４、ペアードＴ検定）、そして、ＣＤ３+ＣＤ４+（おそらくＣＤ８+）細胞（Ｐ＝０．０４）において、かなり増加した。ＣＤ３+ＣＤ４+細胞もまた治療後、ＣＤ４５ＲＯ（記憶細胞マーカー）（Ｐ＝０．０４）の発現のかなりの増加を示した。ＣＤ６９、ＣＤ２５、および、ＣＴＬＡ−４を発現する細胞群のパーセントは変化なかった。
【００９６】
患者１、１１、および、１３は、応答者であった（表１５）。患者１においては、２回の治療サイクル後、孤立性肺病変が収縮した。患者１３においては、孤立性肺病変、および、副腎病変が完全に分解した。患者１１においては、３１か所の肺病変、２か所の皮下病変、および、１か所の脳病変があった。脳病変は、２回の治療サイクル後、０．５ｃｍからほぼ１．０ｃｍに大きくなった。患者１１においては、３回の治療サイクル後、脳病変を含む全ての病変が完全に分解した。
【００９７】
グレード１／２の有害事象には、下痢（患者３、５、および、１４）、皮膚発疹（患者１４）、肺浸潤、および、軽度の腹膜性胸痛（患者４）、および、白斑（患者２、および、６）を含んだ。
【００９８】
６人の患者においては、皮膚炎（患者１、２、および、１３）、大腸炎／腸大腸炎（患者１、および、９）、脳下垂体炎（脳下垂体の炎症）（患者１１）、および、肝炎（患者１２）を含む７つのグレード３の有害事象が発症した。全ての患者においては、治療を中止し、そして、支持看護および／またはステロイド療法の投与後に回復した。再発または二次的な自己免疫事象はなかった。
【００９９】
自己免疫スクリーニング用の血液検査は、抗核抗体（ＡＮＡ）を発現した患者５、および、１２を除いて正常だった。
【０１００】
１回目の投与後のＭＤＸ−０１０の平均ピークは、７２±３３μｇ／ｍＬあり、２回目の投与前のトラフは、１２±７μｇ／ｍＬであった。血漿中濃度または抗体距離と、腫瘍退縮または毒性の間の明白な相互関係は、観察されなかった。
【０１０１】
患者１（部分的な応答者）においては、第２の治療サイクルの１週後に、重症のそう痒症と関連する全身性紅斑性の斑丘疹状発疹を発症した。皮膚生検によって、アレルギー性薬疹に一致した血管周囲のリンパ球性浸潤、および、好酸性浸潤、乳頭状の皮膚水腫、および、表皮の海綿症が示された。２日後に、患者１は重症下痢を発病したため、彼にＩＶ水和剤を与えた。胃腸内視鏡検査、および、生検において、著しい十二指腸、および、結腸のリンパ球増多症、プラズマ細胞増加症、および、好酸球増加症を有する炎症、および、複数領域における粘膜潰瘍を示した。免疫組織化学的検査において、炎症性浸潤におけるＣＤ３+細胞（ＣＤ８+＞ＣＤ４+細胞）優位、プラズマ細胞のポリクローン性、および、脈管系、および、上皮系の増加したＭＨＣ−１およびＨＬＡ−ＤＲ発現性を示した。自己免疫性の全腸炎が診断され、そして、患者はＩＶメチルプレドニゾロンで治療された。患者は、２４時間以内で著しく臨床的に改善され、および、ステロイドは５日にかけて序々に減少していった。患者の症状は、再発しなかった。
【０１０２】
患者２においては、１回目の治療サイクルの１週間後に軽度の全身性そう痒症を発症し、２週間後、ワクチン注射（右腕、および、左脚）を受けた肢において重症で、円形の、紅斑性発疹および黄斑性発疹へと進行した。皮膚生検において、表皮の海綿症、重大な乳頭状の皮膚水腫、および、膠原質の自己免疫に見られるような血管を含む顕著なリンパ球性浸潤、および、好酸性浸潤を示した。患者２には、ヒドロキシジンおよびジフェンヒドラミンによって臨床的に治療を行なった。発疹は、数週間後に消滅した。患者は、３週間後、両上肢において白斑を発症した。
【０１０３】
患者９は、２回目の治療サイクル１１日後に下痢を発症した。内視鏡検査は、全大腸炎を示した。結腸生検において、著しい細胞浸潤、および、陰窩膿瘍を有する重症炎症を示した。免疫組織化学的検査において、大部分のリンパ球浸潤は、ＣＤ３+（ＣＤ４+細胞優位を有する）であり、プラズマ細胞がポリクローン性であり、そして、上皮性のＭＨＣ−１、および、ＨＬＡ−ＤＲの発現が増加したことを例証した。患者の下痢は、ＩＶメチルプレドニゾロン治療によって改善し、そして、デキサメサゾン経口を徐々に減らすことによって抑制された。
【０１０４】
患者１１（完全な応答者）においては、４回目の治療サイクルのあと、人格変化および記憶障害を発症した。脳のＭＲＩにおいて、左側頭転移、および、他のいかなる異常の消失を示した。更なる評価は、汎下垂体機能低下症が示唆される、甲状腺刺激ホルモン、遊離Ｔ４、副腎皮質ホルモン、成長ホルモン、泌乳刺激ホルモン、および、テストステロンにおいて検知不能レベルを示した。繰り返し、集中的なＭＲＩにおいて、標準寸法の最大値となった脳下垂体を示した。患者は、完全な臨床反応を表したので、高用量ステロイドを使用しなかった。患者は、チロキシン、テストステロン、および、ハイドロコーチゾンの代替投与を受けた。患者の人格、および、記憶異常は、回復した。追跡ＭＲＩにおいて、６週後に、脳下垂体の大きさがわずかに減少を示した。
【０１０５】
患者１２は、３回目の治療サイクルの３週後に行なわれる定期的な血液検査において異常な肝酵素、および、抗核抗体を発現した。肝生検においては、主にリンパ球から成る多くの病巣の小葉性の炎症を有する急性肝炎を示した。免疫組織化学的検査は、主に門脈周囲領域のＣＤ４+細胞、および、主に肝小葉のＣＤ８+細胞とともに主にＣＤ３+細胞浸潤を明らかにした。次の２週間、患者のアラニンアミノトランスフェラーゼレベルは、２８６０Ｕ／Ｌ（正常値は６から４１）に達し、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼレベルは、１１９３Ｕ／Ｌ（正常値は９から３４）に達した。低用量のプレドニソン経口治療を開始し、全ての値は４ヵ月後に標準値に減少した。
【０１０６】
患者１３（部分的な応答者）は、４回目の治療サイクル１週間後、重症全身性エリトマトーデスとそう痒性の発疹を発症した。皮膚生検は、表面的な真皮内に大量の好酸球性を有する血管周囲のリンパ球性の浸潤を示した。免疫組織化学的検査において、主にＣＤ３+細胞（ＣＤ４+細胞＞ＣＤ８+細胞）がみられた。発疹の生検から培養されるリンパ球は、全てのＣＤ８+であり、そのうち９７％は、ｇｐ１００：２０９−２１７：ＨＬＡ−Ａ*０２０１テトラマと反応した。発疹は、ヒドロキシジン治療によってゆっくり回復した。
【０１０７】
Ｂ．コホート２
コホート２の手順は、３ｍｇ／ｋｇの抗ＣＴＬＡ−４抗体の初回服用の後に、コホート２の患者に、１ｍｇ／ｋｇの抗ＣＴＬＡ−４抗体をペプチドワクチンとともに３週ごと投与したこと以外はコホート１と同じ手順である。コホート２の検査は、進行中である。現在までのところ、患者２４人のうち３人（１３％）は、他覚的な腫瘍反応を示し、患者２４人のうち２人（８％）はＳＡＥを発症した。
【０１０８】
【表５】
【０１０９】
＜結論＞
本検査は、黒色腫ペプチドワクチンと組み合わせた抗ＣＴＬＡ−４抗体に対する臨床反応が、自己免疫的な有害副作用の発生に強く関連することを例証した。自己免疫的な深刻な副作用を発症した８人の患者のうちの４人（５０％）において、臨床反応を示した。２８人の患者のうちの２人（７％）のみは、いかなる深刻な自己免疫的な副作用がない反応があった。
【０１１０】
実施例４
＜ＭＥＬＡＣＩＮＥ（登録商標）の認可療法と組み合わせた抗ＣＴＬＡ−４抗体の臨床試験の結果＞
【０１１１】
１３人の悪性黒色腫患者に、ＭＥＬＡＣＩＮＥ（登録商標）（シクロホスファミドを含む）の認可療法と組み合わせて抗ＣＴＬＡ−４抗体１０Ｄ１（８週間隔で３ｍｇ／ｋｇ×２用量）を投与した。他覚的な反応、および、深刻な有害事象は、観察されなかった。
【０１１２】
実施例５
＜実施例３（ｇｐ１００ペプチドワクチンと組み合わせた抗ＣＴＬＡ−４抗体の臨床試験）の統計分析＞
３８人の患者のうちの６人において、他覚的な腫瘍反応があった。これら６人の応答者のうち４人（６６．７％）において、自己免疫の深刻な有害事象があった。反応のなかった３２人の患者のうちの４人（１２．５％）だけは、自己免疫の深刻な有害事象を発症しなかった。
【０１１３】
【表６】
【０１１４】
連続補正したカイ二乗検定、および、フィッシャーの正確確率検定によって、応答者、および、不応答者の間で自己免疫発現率が異なることを検定した。統計学的に有意の相互関係が、カイ二乗検定（ｐ＝０．０１４６）、および、フィッシャーの正確確率検定（ｐ＝０．０１１６）を使用することによって、応答者、および、自己免疫の深刻な有害事象を発症する患者の間にあることが分かった。
【０１１５】
実施例６
＜実施例２、３、および、４の結果の統計分析＞
６８人の患者のうちの８人においては、他覚的な腫瘍反応があった。８人の応答者（５０％）のうちの４人においては、自己免疫の深刻な有害事象があった。６０人の患者のうちの４人の不応答者（６．７％）のみ、自己免疫の深刻な有害事象があった。
【０１１６】
【表７】
【０１１７】
連続補正したカイ二乗検定、および、フィッシャーの正確確率検定によって、応答者、および、不応答者の間で自己免疫発現率が異なることを検定した。統計学的に有意の相互関係が、カイ二乗検定（ｐ＝０．００２８）、および、フィッシャーの正確確率検定（ｐ＝０．００４９）を使用することによって、応答者、および、自己免疫の深刻な有害事象を発症する患者の間にあることが分かった。
【０１１８】
＜引例＞
特許、特許出願、および、様々な出版物を含む多数の参考文献が、本発明の記述において引用、および、記述される。このような参考文献の引用および／または説明は、単に本発明の記述を明らかにするためにのみに提供され、そのいかなる内容は、本願明細書において記述される、本発明の「先行技術」であるとは容認されない。本願明細書において記述され、説明される全ての参考文献は、その全体、かつ、引用によって含まれる個々の内容と同じ範囲において、本願明細書に含まれるものとする。
【技術分野】
【０００１】
＜関連出願についてのクロス・リファレンス＞
本出願は、米国仮出願番号第６０／４７５０６７号（２００３年５月３０日出願）の優先権を主張し、その内容は、全体において本願明細書に含まれる。
【０００２】
本発明は、一般に分子免疫学とヒトの病気の治療に関する。特に、ヒトＣＴＬＡ−４に対する抗体を使用する洗練された治療方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
脊椎動物の免疫系は、最適の免疫活性化を達成するために多重信号を必要とする（例えば、Ｊａｎｅｗａｙ、「Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｓｙｍｐ．Ｑｕａｎｔ．Ｂｉｏｌ．１９８９」、５４：１−１４、および、Ｐａｕｌ Ｗｉｌｌｉａｍ Ｅ．編、Ｒａｖｅｎ Ｐｒｅｓｓ、Ｎ．Ｙ．、「Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ」、第４版（１９９８）、特に第１２章および第１３章、４１１ページから４７８ページを参照のこと）。Ｔリンパ球（Ｔ細胞）と抗原提示細胞（ＡＰＣ）の間の相互作用は、免疫反応に必須である。Ｔ細胞とＡＰＣ上で見られる多くの粘着性分子のレベルは、免疫反応の間、増加する（Ｓｐｒｉｎｇｅｒ他、「Ａ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１９８７」、５：２２３−２５２、ＳｈａｗおよびＳｈｉｍｕｚｕ、「Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｏｐｉｎｉｏｎ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ」、１９８８編、ＫｉｎｄｔおよびＬｏｎｇ編、１：９２−９７、Ｈｅｍｌｅｒ、「Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ Ｔｏｄａｙ １９８８」、９：１０９−１１３）。これらの分子の増加レベルは、活性化したＡＰＣが抗原特異性のＴ細胞増殖反応を刺激する点において、非活性のＡＰＣより効果的である理由の説明に役立つ（Ｋａｉｕｃｈｉ他、「Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１９８３」、１３１：１０９−１１４、Ｋｒｅｉｇｅｒ他、「Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１９８５」、１３５：２９３７−２９４５、ＭｃＫｅｎｚｉｅ、「Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ．」、１９８８、１４１：２９０７−２９１１、および、ＨａｗｒｙｌｏｗｉｃｚおよびＵｎａｎｕｅ、「Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１９８８」、１４１：４０８３−４０８８）。
【０００４】
Ｔ細胞免疫反応は、特に、ＡＰＣのようなＴ細胞と補助細胞の間の細胞間相互作用（Ｓｐｒｉｎｇｅｒ他、「Ａ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１９８７」、５：２２３−２５２）と、可溶性の免疫媒体（サイトカインまたはリンフォカイン）の生成（Ｄｉｎａｒｅｌｌｏ、「Ｎｅｗ Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．１９８７」、３１７：９４０−９４５、および、Ｓａｌｌｕｓｔｏ、「Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１９９７」、１７９：１１０９−１１１８）とを含む複合過程である。この反応は、Ｔ細胞受容体複合体（Ｗｅｉｓｓ、「Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１９８６」、４：５９３−６１９）と他の「補助的な」表面分子（Ａｌｌｉｓｏｎ、「Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１９９４」、６：４１４−４１９、Ｓｐｒｉｎｇｅｒ、１９８７、前述）を含むいくつかのＴ細胞表面受容体によって制御される。これらの補助分子の多くは、細胞の表面の単クローン抗体の反応によって定義される自然発生の細胞表面分化（ＣＤ）の抗原である。（ＭｃＭｉｃｈａｅｌ編、「Ｌｅｕｋｏｃｙｔｅ ＴｙｐｉｎｇＩＩＩ」、Ｏｘｆｏｒｄ Ｕｎｉｖ．Ｐｒｅｓｓ、Ｏｘｆｏｒｄ、Ｎ．Ｙ．、１９８７）
【０００５】
ＣＤ２８抗原は、免疫グロブリン超族の一つであるホモダイマ・グリコプロテイン（ＡｒｕｆｆｏおよびＳｅｅｄ、「Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．１９８７」、８４：８５７３−８５７７）であって、大部分の成熟ヒトＴ細胞（Ｄａｍｌｅ他、「Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１９８３」、１３１：２２９６−２３００）に見られる補助分子である。現時点における証拠は、この分子が、Ｔ細胞受容体複合体によって開始される経路とは異なった別個のＴ細胞活性化経路において機能していることを示唆している（Ｊｕｎｅ他、「Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．１９８７」、７：４４７２−４４８１）。ＣＤ２８抗原と反応性のある単クローン抗体（ＭＡｂｓ）は、さまざまなポリクローン性の刺激（前述のＪｕｎｅ他によって概説される）によって開始されるＴ細胞反応を増強することができる。これらの刺激性の効果は、増加したｍＲＮＡ安定化（Ｌｉｎｄｓｔｅｎ他、１９８９、上述ｓｕｐｒａ）の結果として、ＭＡｂ誘導のサイトカイン生成（Ｔｈｏｍｐｓｏｎ他、「Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ １９８９」、８６：１３３３−１３３７、および、Ｌｉｎｄｓｔｅｎ他、「Ｓｃｉｅｎｃｅ １９８９」、２４４：３３９−３４３）から生じる可能性がある。
【０００６】
ＣＴＬＡ−４は、ＣＤ２８活性に対抗し、Ｔ細胞活性化を抑制するものと見なされている（Ｋｒｕｍｍｅｌ他、「Ｉｎｔ’ｌ Ｉｍｍｕｎｏｌ．１９９６」、８：５１９−５２３、および、Ｃｈａｍｂｅｒｓ他、「Ｉｍｍｕｎｉｔｙ．１９９７」、８８５−８９５）。ＣＴＬＡ−４欠損マウスは、大量のリンパ球増殖を被る（前述のＣｈａｍｂｅｒｓ他による）。ＣＴＬＡ−４の遮断は、試験管内（Ｗａｌｕｎａｓ他、「Ｉｍｍｕｎｉｔｙ．１９９４」、１：４０５−４１３）および生体内（Ｋｅａｒｎｅｙ、「Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１９９５」、１５５：１０３２−１０３６）のＴ細胞反応を増強して、抗腫瘍免疫を悪化させ（Ｌｅａｃｈ、「Ｓｃｉｅｎｃｅ １９９６」、２７１：１７３４−１７３６）、誘導された自己免疫性疾患を増進する（Ｌｕｈｄｅｒ、「Ｊ Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１９９８」、１８７：４２７−４３２）と報告されている。ＣＴＬＡ−４は、Ｔ細胞免疫反応の最初の特性に対して代替的または付加的な影響を与えることも、以下の文献において報告されている。
Ｃｈａｍｂｅｒｓ、「Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１９９７」、９：３９６−４０４
Ｂｌｕｅｓｔｏｎｅ、「Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１９９７」、１５８：１９８９−１９９３
Ｔｈｏｍｐｓｏｎ、「Ｉｍｍｕｎｉｔｙ １９９７」、７：４４５−４５０
このことは、何人かの自己免疫患者が、ＣＴＬＡ−４に対する自己抗体を有するという知見に矛盾してはいない。ＣＴＬＡ−４を遮断する自己抗体が、これらの患者において病原性の役割を演じることが考えられる。（Ｍａｔｓｕｉ、「Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１９９９」、１６２：４３２８−４３３５）
【０００７】
非ヒトＣＴＬＡ−４抗体は、上述のさまざまな研究において使用されている。さらにまた、ヒトＣＴＬＡ−４に対するヒト抗体は、多くの病気条件（例えば、ウイルス感染および細菌感染の治療または予防、および、癌の治療）における免疫促進モジュレータとして記述されている（例えば、国際公開第０１／１４４２４号明細書および国際公開第００／３７５０４号明細書）。米国特許第５８５５８８７号明細書は、Ｔ細胞をＣＴＬＡ−４の遮断剤と併用することによって抗原性の刺激に対する哺乳類のＴ細胞の反応を増大させる方法を開示している。米国特許第５８１１０９７号明細書は、ＣＴＬＡ−４の遮断剤を投与することによって非Ｔ細胞腫瘍の増殖を減少させる方法を開示している。米国特許出願公開第０９／６４４６６８号明細書および米国特許出願公開第０９／９４８９３９号明細書は、ヒトＣＴＬＡ−４抗体を開示している。これらの各特許と用途は本願明細書に引用して組み込まれているものとする。
【０００８】
本願明細書の本節または他の節におけるいかなる参考文献の引用または記述は、本発明の説明を明らかにするだけのためであり、いずれの内容も、本願明細書において記述される、いかなる発明に対する「先行技術」であると容認されるものではない。
【発明の開示】
【０００９】
本発明は、現状打開事態を引き起こす十分な用量の抗ＣＴＬＡ−４抗体を患者に投与し、患者の現状打開事態を検知することによって、患者における新規の癌治療方法を提供するものである。一実施形態において、現状打開事態は、非癌化細胞に存在する抗原に対する自己免疫反応である。別の実施形態において、現状打開事態は、グレード３または４である。本発明の方法によれば、現状打開事態は、抗ＣＴＬＡ−４抗体の用量を増大することによって引き起こされる。さらなる実施形態において、現状打開事態は、投与間隔を短縮して抗ＣＴＬＡ−４抗体を投与することによって引き起こされる。別の実施形態において、現状打開事態は、非腫瘍関連自己免疫の発現である。本発明は、癌の治療に効果的な用量の抗ＣＴＬＡ−４抗体の投与方法を提供する。また、本発明は、また、このような用量の決定方法を提供する。
【００１０】
本願明細書において引用される、全ての出版物、図面、ＧｅｎＢａｎｋ Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ基準受入参照番号（配列）、ＡＴＣＣ Ｄｅｐｏｓｉｔｓ寄託番号、特許、および、特許出願は、個々に示される同じ範囲の全ての意味を参照することにより本願明細書に含まれる。
【００１１】
本発明は、より効果的で、予測可能なＣＴＬＡ−４抗体を基盤とする癌治療法を提供する。本発明の方法は、患者への抗ＣＴＬＡ−４抗体用量が過少量とならないようにするので、抗ＣＴＬＡ−４抗体による癌の治療に有意な成果を示す。有害事象の出現と治療に対する反応の間の統計学的に有意の相互関係が、抗ＣＴＬＡ−４抗体で治療された癌患者において、予想外に存在していた。深刻な「有害事象」の回避が重症癌患者の治療の目的であったのに対して、本発明の方法の目的は、これらの事象（本願明細書において、「現状打開事態」（ＢＥ）と呼ばれる）を引き起こし、検出することである。抗ＣＴＬＡ−４抗体の充分な用量による治療は患者の癌症状を改善し、または、余命を伸ばす可能性があるので、有意な、しかし、可逆的な現状打開事態の誘起は、これらの患者においては医学的に適切なものとなる。
【００１２】
ＢＥ（の誘起）は、急性であり、用量に関連し、容易に探知され、ある範囲までは予測可能である。ＢＥ、投薬中止によって、および／または、特異的療法、通常はコルチコステロイド治療を伴う又は伴はない支持看護によって無効となる。抗ＣＴＬＡ−４抗体の用量を投与してＢＥを誘起して検出することは、抗ＣＴＬＡ−４抗体治療への反応とＢＥの発現との間の有意な相互関係から、癌治療の効果的な方法である。
【００１３】
特定の実施形態において、本発明の抗ＣＴＬＡ−４抗体は、国際公開第０１／１４４２４号明細書に開示されている、ヒト単クローン抗体１０Ｄ１である。
【００１４】
本発明は、後述されるように、癌の免疫療法におけるヒト配列の抗ＣＴＬＡ−４抗体の臨床試験中に行なわれた観察に部分的に基づくものである。臨床試験は、ＢＥを引き起こすのに十分な抗ＣＴＬＡ−４抗体の用量が送達される場合の、癌患者の治療における抗ＣＴＬＡ抗体の有効性を証明している。本発明によれば、抗ＣＴＬＡ−４抗体はＢＥを引き起こすのに十分な用量で投与されて、ＢＥが患者において検出される。
【００１５】
さまざまな研究の結果、ＢＥと抗腫瘍の有効性の間の相互関係が認識されるに至った。例えば、コホート１の研究において、ステージＩＶの黒色腫患者１４人が、２つのｇｐ１００ペプチドのワクチン接種と併用で、３ｍｇ／ｋｇの抗ＣＴＬＡ−４抗体１０Ｄ１（ＭＤＸ−０１０）を３週ごとに８週間投与された。全ての患者は、それらの原発腫瘍のための先行手術を受けていた。６人の患者は、先行の化学療法が行なわれた。１１人の患者は、先行の免疫療法を行なわれた。臨床反応は、コンピュータ断層写真（ＣＴ）と磁気共鳴（ＭＲ）画像で測定された。患者１１（先行の化学療法が行なわれた）においては、５回の治療サイクルの後、肺腫瘍、脳腫瘍、および、皮下腫瘍の完全な分解が認められた。患者１３（先行の化学療法と先行の免疫療法が行なわれた）においては、副腎腫瘍と肺腫瘍の完全な分解が認められた。患者１（先行の化学療法と先行の免疫療法が行なわれた）は、部分的な応答者であった。３人の各応答者は、グレード３のＢＥを体験した。患者１（部分的な応答者）には、グレード３の全腸炎と皮膚炎があった。患者１はＩＶメチルプレドニゾロンで自己免疫全腸炎の治療が行なわれ、２４時間以内で著しい改善をもたらした。患者１１（完全な応答者）には、グレード３の脳下垂体炎と汎下垂体機能低下症があった。患者１１には、チロキシン、テストステロンとハイドロコーチゾンの代替投薬を行なった。患者１３（完全な応答者）には、ヒドロキシジンによる治療自に分解したグレード３の皮膚炎があった。予想以上に、この研究においては、３人の全応答者がグレード３の有害事象を体験したことを示した。
【００１６】
コホート２の研究において、非切除の転移性黒色腫を有する２４人の患者に、抗ＣＴＬＡ−４抗体１０Ｄ１を３ｍｇ／ｋｇ、そして、３週ごとに１ｍｇ／ｋｇをｇｐ１００ペプチドワクチンと一緒に投与した。現在までに、２４人の患者のうち３人（１３％）には、他覚的な腫瘍反応があった。３人の応答者のうちの１人には、グレード３の有害事象（下痢）があった。
【００１７】
統計学的に有意な相互関係を、カイ二乗検定（ｐ＝０．０１４６）とフィッシャーの正確確率検定（ｐ＝０．０１１６）を使用し、応答者と深刻な有害事象を発症させる患者の間におけるコホート１およびコホート２の研究において発見した。「Ｂｉｏｓｔａｔｉｓｔｉｃｓ：Ａ ｍｅｔｈｏｄｏｌｏｇｙ ｆｏｒ ｔｈｅ Ｈｅａｌｔｈ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（ＦｉｓｈｅｒおよびＶａｎ Ｂｅｌｌｅ、１９９３、Ｊ．Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ）」 を参照のこと。
【００１８】
別の研究において、１７人のステージＩＩＩまたはＩＶの悪性黒色腫患者に、抗ＣＴＬＡ−４抗体１０Ｄ１を１回投与した。２人の患者は、部分的な応答者であった。深刻な有害事象（グレード３または４）はなかった。
【００１９】
１３人の悪性黒色腫患者は、ＭＥＬＡＣＩＮＥ（登録商標）（シクロホスファミドを含む）の認可療法と組み合わせて、抗ＣＴＬＡ−４抗体１０Ｄ１（８週間隔で３ｍｇ／ｋｇを２回）投与した。他覚的な反応と深刻な有害事象は、観察されなかった。有効性に欠けると考えられる理由は、以下に挙げられる。
（１）シクロホスファミドの阻害作用
（２）長い投薬間隔
（３）ワクチンとしてのＭＥＬＡＣＩＮＥ（登録商標）の弱い力価
【００２０】
統計学的に有意の相互関係を、カイ二乗検定（ｐ＝０．００２８）とフィッシャーの正確確率検定（ｐ＝０．００４９）を使用して、応答者と深刻な有害事象を発現させる患者の間において発見した。
【００２１】
１９人のステージＩＩＩまたはＩＶの黒色腫を完全に切除した患者の研究において、患者を、３つのコホートに分けられ、ｇｐ１００、チロシナーゼ、および、ＭＡＲＴ−１ワクチンと組み合わせて、抗ＣＴＬＡ−４抗体１０Ｄ１を異なる用量（毎月０．１ｍｇ／ｋｇ、１．０ｍｇ／ｋｇ、および、３．０ｍｇ／ｋｇを６ヵ月間、その後、３ヵ月ごとに２回）で治療した。この研究は、主に皮膚や腸において、器官特異的な自己免疫的な有害事象の用量依存の誘起を示した。自己免疫的な有害事象は、対処可能であり、可逆性であった。
【００２２】
転移性黒色腫のある、化学療法未処置の患者の治療研究において、患者を、抗ＣＴＬＡ−４抗体１０Ｄ１単独で、または、細胞毒性を有する化学療法（ダカルバジン）と組み合わせて治療した。２４人の患者が登録された。単一療法を受けている１２人の患者のうちの４人、および、組合せ治療を受けている１２人の患者のうちの３人は、病気進行を体験していた。グレード３の発疹とそう痒症の１つの深刻な有害事象が観察された。
【００２３】
抗ＣＴＬＡ−４抗体の投与は、自己免疫反応を示唆する深刻な有害事象に関連していた。深刻な有害事象の発症は、抗ＣＴＬＡ−４抗体３ｍｇ／ｋｇのみを投与された後はほとんど発症しなかった。抗ＣＴＬＡ−４抗体が複数回投与、および、黒色腫ペプチドワクチンと組み合わせて投与されると、有害事象はより頻繁に発生する。ペプチドワクチンと一緒に抗ＣＴＬＡ−４抗体の投与を含む研究において、コホート２の抗ＣＴＬＡ−４抗体の投与量を減少することによって、ＳＡＥ（有害事象）の発症率を減らした。個々の患者の抗ＣＴＬＡ−４抗体の血漿中濃度とＳＡＥの発症の間の識別可能な相互関係は見られなかった。臨床試験データの統計分析は、ＢＥと治療効力の間において、予想以上の非常に有意な相互関係を確立した。この実験的観察は、ＢＥ（用量または／および頻度）を引き起こすまで抗ＣＴＬＡ−４抗体を投与することが、治療的に最大の効果的な服用量の達成を示すという発見の根拠になっている。
【００２４】
注釈を除き、用語「患者」または「被検者」が同義的に使用され、哺乳類（ヒト患者および非ヒト霊長類、同じくウサギ、ネズミ、および、マウスのような実験動物、および、他の動物など）に関連する。動物は、全ての脊椎動物（哺乳類および非哺乳類（ヒツジ、イヌ、ウシ、鶏、両生類、および、爬虫類など）を含む。
【００２５】
本願明細書において使用される「有害事象」（ＡＥ）は、好ましくなく、一般的には意図されず、さらに望ましくない、内科的治療または内科的処置の使用に関連する徴候（異常検査所見を含む）、症状、または、疾患のことである。ほとんどのＡＥは、内科的治療における投薬の停止または減少時、またはＡＥの治療によって一時的となり、そして、無効する。
【００２６】
Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅは、「有害事象」（ＡＥ）を、内科的治療または内科的処置（Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒａｐｙ Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ Ｐｒｏｇｒａｍ、Ｃｏｍｍｏｎ Ｔｅｒｍｉｎｏｌｏｇｙ Ｃｒｉｔｅｒｉａ ｆｏｒ Ａｄｖｅｒｓｅ Ｅｖｅｎｔｓ（Ｖｅｒｓｉｏｎ ３．０）、ＤＣＴＤ、ＮＣＩ、ＮＩＨ、ＤＨＨＳ、２００３年３月３１日 （ｈｔｔｐ：／／ｃｔｅｐ．ｃａｎｃｅｒ．ｇｏｖ）、２００３年４月１６日公開（２００３年５月２７日にサイトアクセス）に関連するとみなされる、または、みなされない、内科的治療または内科的処置の使用に関連する、好ましくない、一般的には意図されない、さらには、望ましくない徴候（異常検査所見を含む）、症状または疾患として定義している。「有害事象」は、治療の意図しない結果である。有害事象の誘起が、抗ＣＴＬＡ−４抗体の充分な用量が癌の治療のために患者に投与されたことを示すマーカーとなるということは驚くべき発見である。本発明の内容において、「有害」事象は意図されないものであるが、癌の抗ＣＴＬＡ−４ベースの免疫療法の代用治療終末点として役立つため、むしろ故意に得ようとされる。抗ＣＴＬＡ−４治療に一時的に関連する徴候、症状、異常検査所見、および、疾患は、本発明の方法による治療の意図される結果である。このような事象は、本願明細書において「現状打開事態（ＢＥ）と称される。
【００２７】
本願明細書において使用される「現状打開事態（ＢＥ）」は、腫瘍部位において治療効果を与えるだけではない、抗ＣＴＬＡ−４治療に一時的に関連する意図されない徴候（異常検査所見を含む）、症状、または、疾患である。例えば、治療下の黒色腫から間隙をおいて離れた位置において皮膚炎を引き起こす自己免疫反応は、ＢＥである。ＢＥは通常、自己免疫の事象であるが、臨床診療における本発明の使用法に対しては、自己免疫の病因学の病理学的確認は必要でない。例えば、いかなる病因学の臨床的に診断される大腸炎は、定義が特に満たされる場合、現状打開事態である。ＢＥは、有害事象のＮＣＩグレードシステムに従ってグレード化される。
【００２８】
「自己免疫現状打開事態（ＡＢＥ）」は、自己免疫の事象である現状打開事態である。現状打開事態が好ましい本発明を実施する場合は、自己免疫現状打開事態である。したがって、用語「自己免疫現状打開事態」は、本発明の治療法を記載するために頻繁に使用される。しかしながら、このような方法に有用である現状打開事態は、自己免疫の事象を必ずしも必要としないと理解される。自己免疫現状打開事態は、好ましい現状打開事態である。
【００２９】
Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ（ＮＣＩ）によって定義される、「深刻な有害事象」（ＳＡＥ）は、グレード３または４の有害事象である。グレード３のＡＥは「重症」、グレード４のＡＥは、「致命的または障害」として通常定義される。また、ＮＣＩも、特にグレード３と４の有害事象を明白に定義する。例えば、グレード３の大腸炎は、腹痛、熱、腸閉塞による排便習慣の変化、または、腹膜徴候を含む（Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒａｐｙ Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ Ｐｒｏｇｒａｍ、Ｃｏｍｍｏｎ Ｔｅｒｍｉｎｏｌｏｇｙ Ｃｒｉｔｅｒｉａ ｆｏｒ Ａｄｖｅｒｓｅ Ｅｖｅｎｔｓ（Ｖｅｒｓｉｏｎ ３．０）、ＤＣＴＤ、ＮＣＩ、ＮＩＨ、ＤＨＨＳ、２００３年３月３１日 （ｈｔｔｐ：／／ｃｔｅｐ．ｃａｎｃｅｒ．ｇｏｖ）、２００３年４月１６日公開）。本出版物は、本願明細書において引用され、付録１として添付される。
【００３０】
「自己免疫関連の非腫瘍の発現」は、非癌化細胞上の抗原の免疫ターゲッティングから生じる、または、生じるように見えるいかなる臨床事象である。ＢＥなどは、腫瘍免疫を含む全体の免疫の活性強化に関するので、癌細胞において免疫学的に媒介される治療効果を特に示す。
【００３１】
用語「治療」は、症状の緩和、または、疾患、状態、または、障害（例えば、自己免疫性疾患）の更なる発現を停止または抑制して、疾患の症状、複雑化、または、生化学徴候の発症を予防、または、遅延させる本発明の化合物、または、薬剤の投与を含む。治療は、予防的（疾患の発症予防または遅延を行なう、または、臨床的症状または準臨床的症状の発症の予防を行なう）に行なうか、疾患の発症後の症状を治療的に抑制または緩和する。
【００３２】
用語「進行癌」は、原発腫瘍部位に集中しない癌、または、Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｊｏｉｎｔ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ ｏｎ Ｃａｎｃｅｒ （ＡＪＣＣ）よるステージＩＩＩまたはＩＶの癌を意味する。
【００３３】
用語「治療効果的な投薬」は、癌の進行を縮めるか、遅くするか、または、止めるのに十分な抗ＣＴＬＡ−４抗体の投薬を意味する。あるいは、「治療効果的な投薬」は、癌患者において部分的、または、完全な反応を引き起こすのに十分な抗ＣＴＬＡ−４抗体の投薬を意味する。
【００３４】
本願明細書において使用される用語「リンパ球」は、従来技術における一般的な意味を有し、さらに、単核の、非食細胞の白血球（血液、リンパとリンパ系組織（つまり、Ｂリンパ球およびＴリンパ球）において見られる）のいずれにも言及する。
【００３５】
用語「細胞障害性リンパ球関連の抗原−４」（「ＣＴＬＡ−４」）、「ＣＴＬＡ４」、「ＣＴＬＡ−４抗原」と「ＣＤ１５２」（例えば、「Ｍｕｒａｔａ （１９９９）Ａｍ．Ｊ．Ｐａｔｈｏｌ．１５５：４５３−４６０」参照）は、同義的に使用され、ヒトＣＴＬＡ−４の変異体、イソ体、種相同体、および、ＣＴＬＡ−４を持つ少なくとも１つの共通抗原エピトープを有する類似体を含む（例えば、「Ｂａｌｚａｎｏ（１９９２）ｈｉｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ Ｓｕｐｐｌ．７：２８−３２」参照）。ＣＴＬＡ−４の完全な配列は、ＧｅｎＢａｎｋ Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ Ｎｏ．Ｌ１５００６において見られる。
【００３６】
用語「エピトープ」は、抗体に特異結合することができるタンパク質決定因子を意味する。エピトープは、アミノ酸または砂糖側鎖のような分子の化学的な活性表面のグループから通常構成され、特異的な三次元構造特性（同じく特異的な電荷特性）を通常有する。配座エピトープと非配座エピトープは、変性溶液がある場合に、後者でなく前者への結合が失われるという点において区別される。
【００３７】
無傷の「抗体」は、ジスルフィド結合によって相互接続する少なくとも２つの重（Ｈ）鎖と２つの軽（Ｌ）鎖を含む。各重鎖は、重鎖可変領域（本願明細書ではＨＣＶＲまたはＶＨと省略）と重鎖定常領域から構成される。重鎖定常領域は、３つのドメイン（ＣＨ１、ＣＨ２、および、ＣＨ３）から構成される。各軽鎖は、軽鎖可変領域（ＬＣＶＲまたはＶＬとして本願明細書において略記される）と軽鎖定常領域から構成される。軽鎖定常領域は、１つのドメイン（ＣＬ）から構成される。ＶＨおよびＶＬ領域は、相補性決定領域（ＣＤＲ）と呼ばれる超可変性の領域に更に再分割され、フレームワーク領域（ＦＲ）と呼ばれる、比較的定常的な領域が散りばめられる。各ＶＨとＶＬは３つのＣＤＲと４つのＦＲから構成され、以下の順序でアミノ末端からカルボキシル末端まで配置される：
ＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、ＦＲ４。
重鎖および軽鎖の可変領域は、抗原と相互に作用する結合ドメインを含む。抗体の定常領域は、免疫系（例えば、エフェクター細胞）のさまざまな細胞と典型的な補体系の第１の成分（Ｃｌｑ）を含む、宿主組織または要素への免疫グロブリンの結合を媒介する。用語「抗体」は、ＣＴＬＡ−４を結合する能力を保持する無傷の抗体の抗原結合性部分を含む。以下に結合する例を挙げる。
（ｉ）ＶＬドメイン、ＶＨドメイン、ＣＬドメイン、および、ＣＨ１ドメインから構成されるＦａｂフラグメント（１価のフラグメント）
（ｉｉ）ヒンジ領域におけるジスルフィド架橋によってリンクされる２つのＦａｂフラグメントを含む、Ｆ（ａｂ’）２フラグメント（２価のフラグメント）
（ｉｉｉ）ＶＨドメインとＣＨ１ドメインから構成されるＦｄフラグメント
（ｉｖ）抗体の単一のアームのＶＬドメインおよびＶＨドメインからなるＦｖフラグメント
（ｖ）ＶＨドメインから構成されるｄＡｂフラグメント（Ｗａｒｄ他、（１９８９）「Ｎａｔｕｒｅ」、３４１：５４４−５４６）
（ｖｉ）分離した相補性決定領域（ＣＤＲ）
さらに、ＦｖフラグメントのＶＬドメインとＶＨドメインは、遺伝子を分離することによって符号化されるにもかかわらず、単一タンパク質鎖（単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）として公知の１価の分子を形成するＶＬ領域およびＶＨ領域の一対）として作ることができる合成リンカによって、その２つのドメインを組換え方法を使用して結合することができる。（例えば、Ｂｉｒｄ他、「Ｓｃｉｅｎｃｅ １９９８」、２４２：４２３−４２６、および、Ｈｕｓｔｏｎ他、「Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ １９８８」、８５：５８７９−５８８３参照のこと）。このような単鎖抗体は、用語「抗体」を参照することによって含まれる。フラグメントは、組換え技術または無傷の抗体の酵素切断または化学切断によって調製される。
【００３８】
ＣＴＬＡ−４抗体は、ヒトＢ７抗受容体による相互作用からＣＴＬＡ−４を抑制するために、ヒトＣＴＬＡ−４上のエピトープと結合することができる。ヒトＢ７とのヒトＣＴＬＡ−４の相互作用がヒトＣＴＬＡ−４受容体を支えるＴ細胞の不活性化に導く信号を変換するので、免疫反応を延ばすか、または、増やすかによって、相互作用の拮抗性が効果的に引き起こされ、また、ヒトＣＴＬＡ−４受容体を支えるＴ細胞の活性化を増加または延ばす。抗ＣＴＬＡ−４抗体は、米国特許第５８１１０９７号明細書、米国特許第５８５５８８７号明細書、米国特許第６０５１２２７号明細書、ＰＣＴ公開第０１／１４４２４号明細書、ＰＣＴ公開第００／３７５０４号明細書、および、米国特許出願公開第２００２／００３９５８１号明細書において記述される。これらの参考文献それぞれは、抗ＣＴＬＡ−４抗体の説明のために、特に本願明細書に引用される。好ましい臨床的な抗ＣＴＬＡ−４抗体は、国際公開第０１／１４４２４号明細書にて開示される通り、ヒト単クローン抗体１０Ｄ１（ＭＤＸ０１０）である。
【００３９】
用語「免疫細胞反応」は、免疫細胞移動、標的細胞の死滅、食細胞活動、抗体作成、免疫反応の他の可溶性因子などに生じる免疫細胞における生化学的な変化を生じる外部刺激または内部刺激に対する免疫系細胞（例えば、抗原、サイトカイン、ケモカイン、及び、他の細胞）の反応に言及する。
【００４０】
用語「Ｔリンパ球反応」および「Ｔリンパ球活性」は、Ｔリンパ球に依存する免疫反応の要素（つまり、ヘルパーＴリンパ球、細胞毒性のキラーＴリンパ球、または、サプレッサＴリンパ球へのＴリンパ球の増殖および／または分化と、ヘルパーＴリンパ球によるＢリンパ球（抗体産生を引き起こす、または、防ぐ）への信号の提供と、細胞障害性Ｔリンパ球による特異的な標的細胞の死滅と、そして、他の免疫細胞の機能を調節するサイトカインのような可溶性の要素の放出）に言及するために、同義的に本願明細書において使用される。
【００４１】
用語「免疫反応」は、リバー（抗体、サイトカイン、および、補体を含む）によって生じるリンパ球、抗原提示細胞、食細胞、顆粒球と可溶性巨大分子の協調作用に言及し、リバーは、人体への選択的な障害や、人体の破壊や、人体の侵入する病原体、および、病原体、癌細胞によって感染された、または、自己免疫炎症または病理学的炎症の場合の細胞または組織からの除去をもたらす。
【００４２】
本願明細書において使用されるように、用語「細胞表面受容体」は、信号を受信し、細胞の特性膜全体に信号の伝達ができる分子の分子と複合体を含む。本発明の「細胞表面受容体」の例は、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）またはＣＴＬＡ−４のＢ７リガンドである。
【００４３】
用語「非特異性のＴ細胞活性」は、抗原特異性から依存するＴ細胞の刺激に言及する。
【００４４】
「標的細胞」は、組成物（例えば、本発明のヒト配列抗体またはヒト単クローン抗体、本発明の特異性分子または多重特異性分子）によって標的とされる被検者（例えば、人間または動物）のいかなる望ましくない細胞をも意味する。標的細胞は、ヒトＣＴＬＡ−４を発現または過剰発現する細胞となりうる。ヒトＣＴＬＡ−４を発現する細胞は、腫瘍細胞（リンパ腫）を含むことができる。
【００４５】
また、本発明においては変性した抗体を含む。用語「変性した抗体」は、例えば、抗体の部分を削除するか、追加するか、または、置換することによって変性した、単クローン抗体、キメラ抗体およびヒト化抗体などの抗体を含む。例えば、抗体を、定常領域の削除や半減期（例えば、血清半減期）、抗体の安定性または親和性を増加する定常領域と交換することによって変性させることができる。
【００４６】
本発明の抗体複合体は、（例えば、エフェクター細胞を補充するため、）得られる生物反応を変えるか、または、生物反応を生成するために使用される。薬用成分は、典型的な化学治療薬に制限されるとしては解釈されない。例えば、薬用成分は、所望の生物活性を所有しているタンパク質またはポリペチドである。このようなタンパク質は、酵素的に活性な毒素またはフラグメントのタンパク質（例えば、アブリン、リシンＡ、プソイドモナス・エキソトキシン、または、ジフテリアトキシン）と、腫瘍壊死因子またはインターフェロンαなどのタンパク質、または、生体応答調節剤（例えば、リンフォカイン、インターロイキン１（ＩＬ−１）、インターロイキン２（ＩＬ−２）、インターロイキン６（ＩＬ−６）、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）、顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ−ＣＳＦ）または他の増殖因子）と、を含む。
【００４７】
＜現状打開事態の誘因＞
本方法の目的は、過量投与を防ぐとともに、最も短い時間量においてＢＥを達成することである。これは、ＢＥを引き起こすために薬物の用量を滴定することによって達成される。所望の効果を達する薬物用量を滴定方法は、例えば、降圧剤の投薬がある高血圧症治療が血圧における所期の効果を達成するために滴定されるように、医術において周知である。このような方法は、例えば、固定された投与間隔において同じ量の薬物の投薬を繰り返すが、用量を増加させるか、投与間隔を減少させるか、または、用量と投与間隔の組み合わせを変化させることがより好ましい。
【００４８】
抗ＣＴＬＡ−４抗体の初回投薬は、一般的に、３週間から８週間ごとに投与される抗体の３１０ｍｇ／ｋｇから１０ｍｇ／ｋｇを含む。抗ＣＴＬＡ−４抗体の初回投薬後、ＢＥを検出するために、患者は、一般的に投与間隔クール、または、１週間から４週間の十分な期間において臨床医によって探知される（検出方法については以下を参照）。ＢＥは、自己反応性Ｔ細胞の拡大を必要とするので、いかなる治療効果的な投薬後に明らかとなるのは、１週間から４週間かかることが予想される。探知期間のＢＥの非発症は、抗ＣＴＬＡ−４抗体の更なる投与が必要であることを臨床医に知らせる。抗ＣＴＬＡ−４抗体の投与後、ＢＥに関して患者を探知すると、少なくとも、ＢＥが引き起こされてと検出されるまで、付加的な用量が投与される。患者の免疫状態（先行の免疫療法、疾病状態、年齢、その他に作用される）を含む要素が、ＢＥを引き起こすのに必要な投薬に影響を与えることができるということが、当業者によって認められよう。熟練した臨床医は、ＢＥを引き起こす以降の投与量同様に初回量を測定するとき、このような要素を考慮に入れることが可能であろう。これらの要素は、ＢＥを引き起こすために、以降の用量も同様に初回量を測定する際に考慮されなければならない。
【００４９】
本発明の方法が、患者において服用量過多を引き起こさず、最も短い期間のＢＥを引き起こすようにするため、ＢＥについての患者の探知期間を１週間から４週間に短くすることは好都合であり、２週間から３週間にすることがより好ましい。付加的な投薬がＢＥの達成に必要である場合、用量は、前回の用量の１０％以上１００％以下によって増加される。例えば、患者に３ｍｇ／ｋｇの投与を初回に行い、３週後に２回目の投与を行なうように計画されるものの、３週期間の後にＢＥを達成しない場合、患者への用量は６ｍｇ／ｋｇ（つまり、１００％の増加）に増加することができる。別の例において、患者に１０ｍｇ／ｋｇの投与を初回に行い、８週後に２回目の投与を行なうように計画されるものの、探知４週間後にＢＥを達成しない場合、患者への投与間隔は、８週から４週まで減らし、その一方で、１０ｍｇ／ｋｇの投薬を維持することができる。当業者によって、ＢＥを引き起こす本発明の方法の実施において、さまざまな用量と間隔を変化させることができるということが認められよう。
【００５０】
＜現状打開事態の検出＞
ＢＥは、症状、徴候または検査異常所見として明らかにすることができる。したがって、このような事象の検出は、病歴（自覚徴候に関する）、検診および／または画像診断検査（他覚徴候に関する）、および、検査（異常検査所見に関する）を必要とする。最初の所見に従い、臨床医は、付加的な検査（例えば内視法または生検法）の指示を選択する。
【００５１】
臨床医は、皮膚（皮膚炎、発疹、そう痒症）、胃腸管（腹痛、圧痛、下痢）、内分泌系（ホルモン濃度の抑制）と肝臓（肝炎、肝臓機能検査で見られる隆起）に挙げられる、より一般的なＢＥの検出に関して特に注意を払う。しかしながら、臨床医は、いかなるＢＥを検出するようにする必要がある。「Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒａｐｙ Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ Ｐｒｏｇｒａｍ、Ｃｏｍｍｏｎ Ｔｅｒｍｉｎｏｌｏｇｙ Ｃｒｉｔｅｒｉａ ｆｏｒ Ａｄｖｅｒｓｅ Ｅｖｅｎｔｓ」は、ＢＥ（有害事象）をリスト化し、これらの事象関するグレードシステムを提供する。また、本出版物は、患者の探知、および、ＢＥの検出において臨床医を支援するガイドとして役に立つ。
【００５２】
患者の探知は、自覚徴候と総合的な検診に関する周期的で総合的な病歴を含む。ＢＥの影響を受けやすい各器官系が検査される。例えば、皮膚科系に関連する病歴は、痒み、剥れ、痛み、および、皮膚色の変化に関する疑いを含む。皮膚の検診は、例えば、全ての可視性の真皮の細密検査を含む。更に、検査は、臨床医の判断に基づいて、例えば、皮膚生検法を含むことができる。
【００５３】
検診を早急に行なう必要がない、無症状の器官系のＢＥの検出は、検査と画像診断検査によって確実性を付け加えるために必要となる。例えば、肝炎は、検診によって、肝臓機能検査とＣＴスキャンを使用して、より早い段階で発見される。
【００５４】
ＢＥの検出は、抗ＣＴＬＡ−４抗体の投与に続く患者を臨床的に探知することに依存する。広範囲の診断法は、ＢＥを検出するために、臨床医によって使用される。
【００５５】
＜癌治療法＞
本発明および代用治療終末点のＣＴＬＡ−４抗体は、患者（以前癌ワクチンを投与されたか、または、自然の感染防御免疫が腫瘍対して何らかのレベルを示す）の悪性腫瘍の治療において使用される。抗体は、化学療法、放射線療法、サイトカイン、ケモカインおよび他の生物の信号分子、腫瘍特異性のワクチン、自己幹細胞救済と同種幹細胞救済（例えば、増強移植対腫瘍効果に対する）、他の治療用抗体、治療標的分子、抗血管形成治療、治療目的を有する感染因子（例えば、腫瘍に集まるバクテリア）、および、遺伝子療法などの、単剤、１つ以上の他の治療薬の組み合わせ、または、腫瘍に対する免疫療法ワクチンとの連動として使用される。抗体は、単一投与または多回投与される。単一または上述した治療法に関連して、抗体は、アジュバント療法またはネオアジュバント療法で使用される。
【００５６】
また、ＢＥを治療することを意図される治療薬（例えば、ステロイド）が、本発明の方法において使用される。したがって、ＢＥを治療する治療薬は、ＢＥの診断に続いて患者に投与される。
【００５７】
本発明は腫瘍（特に、免疫学的に高感度な腫瘍）の治療を目的し、その腫瘍は、それは免疫療法に反応する癌または免疫不全状態である患者において発症する癌である。一実施形態において、腫瘍は、充実性腫瘍である。本発明に従って治療される腫瘍の例は、以下の肉腫と癌腫を含むが、これらに制限されない。繊維肉腫、粘液肉腫、脂肪肉腫、軟骨肉腫、骨原性肉腫、脊索腫、血管肉腫、内皮肉腫、リンパ管肉腫、リンパ管内皮肉腫、滑膜腫、中皮腫、リンパ腫、黒色腫、カポシ肉腫、骨髄原発性肉腫、平滑筋肉腫、横紋筋肉腫、結腸直腸癌、胃癌、膵臓癌、乳癌、卵嚢癌、前立腺癌、扁平上皮癌、基底細胞癌、腺癌、汗腺癌、皮脂腺癌、乳頭状癌、乳頭状腺癌、嚢胞腺癌、髄様癌、気管支癌、腎細胞癌、肝癌、胆道癌、絨毛膜癌、精上皮腫、胎児性癌、ウィルムス腫瘍、子宮頸癌、睾丸腫瘍、肺癌、小細胞肺癌、膀胱癌、上皮癌、膠腫、神経膠星状細胞腫、髄芽細胞腫、頭蓋咽頭腫、脳室上衣細胞腫、松果体腫、血管芽細胞腫、聴神経腫、乏突起神経膠腫、髄膜腫、黒色腫、神経芽細胞腫、および、網膜芽細胞腫。
【００５８】
別の実施形態において、増殖性異常の変化（例えば、異形成（ｍｅｔａｐｌａｓｉａｓ）と異形成（ｄｙｓｐｌａｓｉａｓ））は、子宮頸管、食道、および、肺の上皮組織などにおいて治療または予防される。したがって、本発明は、過形成、異形成（ｍｅｔａｐｌａｓｉａｓ）、または、特に、異形成（ｄｙｓｐｌａｓｉａｓ）からなる非腫瘍性細胞発育は発生した場合、新生物または癌への進行に先行すると分かる状態、または、疑わしい状態における治療を提供する。（このような異常増殖条件の概要は、「ＲｏｂｂｉｎｓおよびＡｎｇｅｌｌ、１９７６、「Ｂａｓｉｃ Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ（第２編）」、Ｗ．Ｂ．Ｓａｕｎｄｅｒｓ社、Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ、６８ページから７９ページ」参照のこと。）過形成は、構造または機能の有意な変化なしで、組織または器官における細胞数の増加を含む制御細胞の増殖の形である。１つの例外として、子宮内膜増殖症はしばしば子宮内膜癌に先行する。異形成（ｍｅｔａｐｌａｓｉａｓ）は、成人の分化細胞、または、完全な分化細胞の１つのタイプが成体細胞の別のタイプの代わりとなる、制御細胞の発育の形である。異形成（ｍｅｔａｐｌａｓｉａｓ）は、上皮細胞組織または結合組織細胞において発生する。異型の異形成（ｍｅｔａｐｌａｓｉａｓ）は、やや無秩序な異形成上皮を含む。異形成（ｄｙｓｐｌａｓｉａｓ）は、よく癌の前兆となり、上皮において主に見られ、非腫瘍性細胞の発育で最も無秩序な形であり、個々の細胞の均一性の細胞の構造配列の損失を含む。異形成（ｄｙｓｐｌａｓｉａｓ）の細胞は、しばしば異常に大きな濃染核を有し、多形態性を呈する。異形成（ｄｙｓｐｌａｓｉａｓ）は、慢性刺激または炎症が存在するところにおいて、特徴的に発生し、子宮頸管、気道、口腔、および、胆嚢においてしばしば見られる。このような障害の概要に関しては、「Ｆｉｓｈｍａｎ他、１９８５、「Ｍｅｄｉｃｉｎｅ（第２編）」、Ｊ．Ｂ．Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ社、Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ」を参照のこと。
【００５９】
また、本発明は、不適正な増殖を被る組織に対して、本発明の治療上有効量のベクターを投与することにより、脈管形成によって増大した不適正な細胞増殖または組織増殖を含む非悪性腫瘍と他の障害の治療を目的とする。例えば、本発明が、特に頭蓋内の部位における動静脈（ＡＶ）形成異常の治療のために有用であることが考察される。本発明は、また、乾せん症（炎症および血管増殖によって特徴づけられる皮膚科的状態）、前立腺肥大症（炎症および血管増殖に関連する状態）を治療するために使用される。他の過剰増殖の障害の治療もまた、考察される。
【００６０】
抗ＣＴＬＡ−４抗体による治療は、癌ワクチンで治療される患者の既存の記憶反応を活性化するために使用される。したがって、ワクチン治療を受ける患者は、免疫反応を引き起こすか、または、強化するために、抗ＣＴＬＡ−４抗体によるさらなる治療に選択される。
【００６１】
一実施形態において、患者は、以前抗制癌ワクチンによる治療を受けていた。癌抗原は、例えば、メラノーマ抗原または前立腺癌抗原であり得る。一実施形態において、患者は人間である。好ましい実施形態において、抗ＣＴＬＡ−４抗体は、ヒト抗ＣＴＬＡ−４抗体である。本発明の好ましいヒト抗ＣＴＬＡ−４抗体は１０Ｄ１であるが、本発明の方法は、いかなるヒトＣＴＬＡ−４抗体によって使用される。他の実施形態において、抗ＣＴＬＡ−４抗体は、組換え抗体（例えばキメラ型、または、ヒト化（例えば、ＣＤＲ融合化）の抗ＣＴＬＡ−４抗体である。
【００６２】
抗体によるＣＴＬＡ−４の遮断は、患者の癌細胞に対して、記憶免疫応答または二次免疫応答を強化することができる。ＣＴＬＡ−４に対する抗体は、免疫を刺激するため、免疫原性因子（例えば、癌細胞、精製された腫瘍抗原（組換えタンパク質、ペプチド、および、炭水化物分子を含む）、細胞、および、免疫刺激サイトカインとＢ７のような細胞表面抗原を符号化する遺伝子でトランスフェクションした細胞（Ｈｕｒｗｉｔｚ、Ａ．他、（１９９８）、「Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ Ｕ．Ｓ．Ａ．１９９８」、９５：１００６７−１００７１参照）、または、単独で使用される細胞と組み合わせられる。
【００６３】
ワクチン接種に続く、ＣＴＬＡ−４遮断は効果的である。腫瘍に対するワクチン接種の多くの実験的な方式が考案された。以下を参照のこと。
Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ，Ｓ．、２０００、「Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ Ｃａｎｃｅｒ Ｖａｃｃｉｎｅｓ」、ＡＳＣＯ Ｅｄｕｃａｔｉｏｎａｌ Ｂｏｏｋ Ｓｐｒｉｎｇ、６０−６２
Ｌｏｇｏｔｈｅｔｉｓ，Ｃ．、２０００、ＡＳＣＯ Ｅｄｕｃａｔｉｏｎａｌ Ｂｏｏｋ Ｓｐｒｉｎｇ：３００−３０２
Ｋｈａｙａｔ，Ｄ．、２０００、ＡＳＣＯ Ｅｄｕｃａｔｉｏｎａｌ Ｂｏｏｋ Ｓｐｒｉｎｇ：４１４−４２８
Ｆｏｏｎ，Ｋ．２０００、ＡＳＣＯ Ｅｄｕｃａｔｉｏｎａｌ Ｂｏｏｋ Ｓｐｒｉｎｇ：７３０−７３８
Ｒｅｓｔｉｆｏ，Ｎ．およびＳｚｎｏｌ，Ｍ．、「Ｃａｎｃｅｒ Ｖａｃｃｉｎｅｓ」、Ｃｈ．６１、ＤｅＶｉｔａ，Ｖ．他（編）におけるｐｐ．３０２３−３０４３、１９９７、「Ｃａｎｃｅｒ：Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ」、第５編
これらの方式のうちの１つにおいて、ワクチンは、自己腫瘍細胞または同種腫瘍細胞を使用して調製される。これらの細胞ワクチンは、腫瘍細胞がＧＭ−ＣＳＦを発現するために特性導入されるとき、最も効果的であることが示されている。ＧＭ−ＣＳＦは、腫瘍のワクチン接種のための抗原提示の効力のある活性化因子であることが示されている（Ｄｒａｎｏｆｆｅｔ他、「Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ Ｕ．Ｓ．Ａ．１９９３」、９０：３５３９−４３）。
【００６４】
ＧＭＣＳＦを修正した腫瘍細胞ワクチンを促進する抗ＣＴＬＡ−４遮断薬は、多くの実験腫瘍モデル（例えば乳癌（Ｈｕｒｗｉｔｚ他、１９９８、前述）、原発性前立腺癌（Ｈｕｒｗｉｔｚ他、「Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ２０００」、６０：２４４４〜８）と黒色腫（ｖａｎ Ｅｌｓａｓ他、「Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１９９９」、１９０：３５５−６６）においてワクチンの有効性を改良する。これらの例において、非免疫原性腫瘍（例えば、Ｂ１６黒色腫）は、免疫系による破壊に対して作用を受けやすくなっている。また、腫瘍細胞ワクチンは、他の免疫賦剤（例えば、ＩＬ２）、および、特に共刺激性分子を発現するように修正される。
【００６５】
さまざまな腫瘍の遺伝子特性発現と大規模な遺伝子特性発現パターンの研究は、いわゆる「腫瘍特異性抗原」の定義に導いた（Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ、「Ｉｍｍｕｎｉｔｙ １９９９」、１０：２８１−７）。多くの場合、これらの腫瘍特異性抗原は、腫瘍において、および、腫瘍の発生元の細胞（例えば、メラノサイトの細胞抗原（ｇｐ１００）、ＭＡＧＥ抗原、Ｔｒｐ−２）において発現する分化抗原である。さらに重要なことに、これらの抗原の多くは、宿主において見られる腫瘍特異性Ｔ細胞の標的であることが示される。ＣＴＬＡ−４遮断薬は、組み換え型のタンパク質に対する二次免疫反応または記憶免疫反応を強化するため、腫瘍において発現が見られる組み換え型のタンパク質および／またはペプチドベースのワクチンとともに刺激剤として使用される。組み換え型のタンパク質は、免疫系において自己抗原として通常みなされるため、これらのタンパク質に対して耐性である。また、腫瘍抗原は、タンパク質テロメラーゼを含み、染色体のテロメアの合成に必要とされ、８５％より多くのヒト癌において、および、限定された数の体細胞組織だけにおいて発現される（Ｋｉｍ他、「Ｓｃｉｅｎｃｅ １９９４」、２６６：２０１１−２０１３）。これらの体細胞組織は、さまざまな手段によって免疫攻撃から保護される。また、腫瘍抗原は、タンパク質配列を変えるか、または、２つの無関係な配列（つまり、フィラデルフィア染色体におけるｂｃｒ−ａｂｌ）間の融合タンパク質を生成する体細胞突然変異、または、Ｂ細胞腫瘍からイディオタイプによって癌細胞において発現する「新生抗原」である。他の腫瘍ワクチンは、ヒト癌に関係するウイルス（ヒト乳頭腫ウイルス（ＨＰＶ）、肝炎ウイルス（ＨＢＶおよびＨＣＶ）、および、カポジ肉腫ヘルペスウイルス（ＫＨＳＶ）など）からのタンパク質を含む。ＣＴＬＡ−４遮断薬とともに使用される腫瘍特異性抗原の別の形態は、腫瘍組織自体から分離される精製された熱ショックタンパク質（ＨＳＰ）である。これらの熱ショックタンパク質は、腫瘍細胞からタンパク質のフラグメントを含み、腫瘍免疫を引き出す抗原提示細胞に対し輸送時において、非常に効果的となる（ＳｕｏｔおよびＳｒｉｖａｓｔａｖａ、「Ｓｃｉｅｎｃｅ １９９５」、２６９：１５８５−１５８８、および、Ｔａｍｕｒａ他、「Ｓｃｉｅｎｃｅ １９９７」、２７８：１１７−１２０）。
【００６６】
樹状細胞（ＤＣ）は、主な抗原特異性反応に使用される効力のある抗原提示細胞である。ＤＣは、生体外で生じ、腫瘍細胞抽出物と同様にさまざまなタンパク質抗原とペプチド抗原で満たされる（Ｎｅｓｔｌｅ他、「Ｎａｔｕｒｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ １９９８」４：３２８−３３２）。また、ＤＣは、これらの腫瘍抗原も同様に発現する遺伝子的手段によって特性導入される。さらに、ＤＣは、免疫化）のために、腫瘍細胞に直接溶解する（Ｋｕｇｌｅｒ他、「Ｎａｔｕｒｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ２０００」、６：３３２−３３６）。ワクチン接種法としてのＤＣ免疫化は、より効力のある抗腫瘍反応を活性化するためにＣＴＬＡ−４遮断薬によって効果的に促進される。
【００６７】
免疫アジュバント（例えばＭＥＬＡＣＩＮＥ（登録商標）ワクチン、ＤＥＴＯＸTM免疫アジュバントを加えた２つのヒトのメラノーム細胞株からのライセート混合薬）と共に、ＣＴＬＡ−４遮断薬と組み合わせられる、別のタイプの黒色腫ワクチンは、メラノーム細胞株ライセートから調製されるワクチンである。ワクチン治療は、付加的な化学療法の治療の有無にかかわらず、抗ＣＴＬＡ４によって促進される。
【００６８】
＜感染症＞
本発明の他の方法は、特定の毒素または病原体に曝された患者を治療するために使用される。上記のように腫瘍に対する用途同様、ＣＴＬＡ−４遮断薬を媒体とする抗体、および、代用治療終末点は、ワクチンと結合して、病原体、毒素、および、自己抗原への二次免疫反応または記憶免疫反応を刺激するために、単独で、または、アジュバントとして使用される。ＣＴＬＡ−４遮断薬は、ブラジル鉤虫（ＭｃＣｏｙ，Ｋ．他、（１９９７）１８６（２）、１８３−１８７）およびドノバンリーシュマニア（Ｍｕｒｐｈｙ、Ｍ．他（１９９８）、「Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．」、１６１：４１５３−４１６０）の感染の急性相に効果的であることが示されている。本治療手段が特に有用である病原体の例は、効果的ワクチンが現在存在しないか、あるいは、従来のワクチンが決して完全に効果的なものではない病原体を含む。これらの病原体には、ＨＩＶ、（Ａ型、Ｂ型、および、Ｃ型）肝炎、インフルエンザ、ヘルペス、ジアルジア、マラリア、リーシュマニア、黄色ブドウ状球菌と緑膿菌を含むが、これに限定されない。ＣＴＬＡ−４遮断薬は、作用因子（感染の流れにおいて改変した抗原を示すＨＩＶなど）によって確立した感染に対して免疫を促進する際に有用である。これらの新しいエピトープは、抗ヒトＣＴＬＡ−４投与時に異種として認識される。したがって、ＣＴＬＡ−４による負の信号によって緩衝されない強力なＴ細胞反応を引き起こす。
【００６９】
本発明の方法によって治療可能な感染を引き起こす病原ウイルスのいくつかの例は、（Ａ型、Ｂ型、または、Ｃ型）肝炎ウイルス、ヘルペスウイルス（例えば、ＶＺＶ、ＨＳＶ−１、ＨＡＶ−６、ＨＳＶ−ＩＩ、ＣＭＶ、および、エプスタインバーウイルス）、アデノウイルス、インフルエンザウイルス、フラビウイルス、エコーウイルス、ライノウイルス、コクサッキーウイルス、コロナウイルス、ＲＳウイルス、ムンプスウイルス、ロタウイルス、はしかウイルス、風疹ウイルス、パルボウイルス、ワクチニアウイルス、ＨＴＬＶウイルス、デング熱ウイルス、乳頭腫ウイルス、軟属腫ウイルス、ポリオウイルス、狂犬病ウイルス、ＪＣウイルスとアルボウイルス脳炎ウイルスを含む。
【００７０】
本発明の方法によって治療可能な感染を引き起こす病原細菌のいくつかの例は、クラミジア、リケッチア菌、放線菌、ブドウ球菌、連鎖球菌、肺球菌、髄膜炎菌、淋菌、クレブシェラ菌、プロテウス菌、セラチア菌、シュードモナス菌、レジオネラ菌、ジフテリア、サルモネラ菌、バチルス菌、コレラ菌、破傷風菌、ボツリヌス菌、炭疽病、ペスト菌、レプトスピラ菌とライム菌を含む。
【００７１】
本発明の方法によって治療可能な感染を引き起こす病原菌類のいくつかの例は、カンジダ属（Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ、Ｃ．ｋｒｕｓｅｉ、Ｃ．ｇｌａｂｒａｔａ、Ｃ．ｔｒｏｐｉｃａｌｉｓなど）、クリプトコッカス・ネオフォルマンス、アスペルギルス（フミガタス、ニガー、その他）、ケカビ属（ケカビ、アブシディア、クモノスカビ）、スポロトリクス属シェンキィ、ブラストミセス・デルマティティディス、ブラジルパラコクシジオイデス、コクシジオイデス・イミティスとヒストプラズマ・カプスラーツムを含む。
【００７２】
本発明の方法によって治療可能な感染を引き起す病原性寄生体のいくつかの例は、赤痢アメーバ、大腸バランチジウム、ネグレリア・フォーレリ、アカントアメーバ種、ランブル鞭毛虫、クリプトスポリジウム種、ニューモシスチス・カリニ、三日熱マラリア、ネズミバベシア、ブルーストリパノソーマ、クルーズトリパノソーマ、ドノバンリーシュマニア、トキソプラズマ・ゴンディ、ブラジル鉤虫を含む。
【００７３】
＜有益な自己免疫反応の促進＞
【００７４】
自己免疫反応を引き起こしてと増幅する抗ＣＴＬＡ−４抗体と代用治療終末点の能力は、多くの実験系（ＥＡＥ−実験的自己免疫脳脊髄炎、ＭＳ（Ｐｅｒｒｉｎ他、「Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ １９９６」、１５７：１３３３−１３３６）、および、糖尿病（Ｌｕｈｄｅｒ他、１９９８、前述）用マウスのモデル）において実証されている。実際、腫瘍細胞とペプチドワクチンを使用する抗腫瘍反応の誘起は、多くの抗腫瘍反応が抗自己反応を含むことを以下において明らかにする。
前述のｖａｎ Ｅｌｓａｓ他における抗ＣＴＬＡ−４＋ＧＭ−ＣＳＦを修正したＢ１６黒色腫において観察される色素消失
Ｔｒｐ−２のワクチン接種したマウスの色素消失（Ｏｖｅｒｗｉｊｋ他、「Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．１９９９」、９６：２９８２−２９８７）
ＴＲＡＭＰ腫瘍細胞ワクチンによって引き起こされる自己免疫前立腺炎（Ｈｕｒｗｉｔｚ ２０００、前述）
ヒト臨床試験における黒色腫ペプチド抗原のワクチン接種および白斑の観察
【００７５】
従って、疾患治療のためのこれらの自己タンパク質に対して免疫反応を効果的に生成するワクチン接種手順を考案するため、さまざまな自己タンパク質と連動して刺激する抗ＣＴＬＡ−４の使用することを考えることが可能である。例えば、アルツハイマー病は脳内のアミロイド蓄積におけるＡβペプチドの不適当な蓄積を含み、アミロイドに対する抗体反応によって、これらのアミロイド蓄積を取り除くことができる（Ｓｃｈｅｎｋ他、Ｎａｔｕｒｅ １９９９、４００：１７３−１７７）。
【００７６】
また、他の自己タンパク質は、標的（アレルギーおよび喘息の治療用のＩｇＥ、および、慢性関節リウマチの治療用のＴＮＦ）として使用される。最終的には、さまざまなホルモン類への抗体反応は、抗ＣＴＬＡ−４抗体の使用によって引き起こされる。生殖ホルモンに対する中和抗体応答は、避妊のために使用される。また、ホルモン類に対する中和抗体応答および特定の腫瘍の増殖のために必要とされる他の可溶性の要素は、考えられるワクチン接種の標的としてみなされる。
【００７７】
抗ＣＴＬＡ−４抗体および代用治療終末点の使用に関する上記に類似の方法は、他の自己抗原（アミロイド蓄積、アルツハイマー病に含まれるＡβ、ＴＮＦαおよびＩｇＥなどのサイトカイン）の不適切な蓄積を有する患者を治療する、自己免疫反応の誘起のために使用される。
【実施例】
【００７８】
また、本発明は、以下の実施例によって記述される。しかしながら、本願明細書のいかなる記述においては、これらの実施例、または、他の実施例の使用が例証されるのみであり、本発明、または、例示されるいかなる用語の範囲および意味を決して制限するものではない。同様に、本発明は、本願明細書において記述されるいかなる特定の好ましい実施形態にも制限されない。実際、本発明の多くの修正および変更は、本願明細書を読む際、当業者にとって明白であり、そして、その趣旨および範囲から逸脱することなく行われる。従って、本発明は、本願請求項が権利を与えられる範囲と同等である包括的な範囲に沿った添付の請求の範囲の用語によってのみ制限されよう。
【００７９】
実施例１
＜切除したステージＩＩＩ／ＩＶ黒色腫のための黒色腫ペプチド／ＩＦＡを有する抗ＣＴＬＡ−４抗体の臨床試験結果＞
ステージＩＩＩ（２人の患者）、または、ステージＩＶ（１７人の患者）の黒色腫を摘出した１９人の患者に、不完全フロイントアジュバント（ＩＦＡ）を有するｇｐ１００／チロシナーゼ／ＭＡＲＴ−１のペプチドワクチンの各注射とともにＣＴＬＡ−４抗体１０Ｄ１の用量（０．３ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、および、３ｍｇ／ｋｇ）を投与した。患者は、ＨＬＡ−Ａ２+であっておよびＩＦＮ−αによる先行治療を受けていなかった。腫瘍は、ｇｐ１００、チロシナーゼおよび／またはＭＡＲＴ−１に対してＩＨＣ陽性であった。除外基準には、ＭＤＸ−０１０またはＭＡＲＴ−１（ｇｐ１００およびチロシナーゼペプチド）による自己免疫性疾患および先行治療を含めた。チロシナーゼ３６８−３７６（３７０Ｄ）、ＭＡＲＴ−１ ２６−３５（２７Ｌ）およびｇｐ１００２０９−２１７（２１０Ｍ）ペプチドは、それぞれ、ＨＬＡ結合を増加する１つのアミノ酸変性により、正常型とは異なっていた。
【００８０】
抗ＣＴＬＡ−４抗体およびペプチドワクチンを、４週間おきに６週間、そして、３ヵ月ごとに×２（２回）（合計投与回数８）投与した。ペプチドワクチンを、ＩＦＡにおいて乳化状態にし、１回の投与においてそれぞれ１ｍｇを皮下に投与した。３つのコホートに対して、０．３ｍｇ／ｋｇＩＶ、１．０ｍｇ／ｋｇＩＶ、または、３．０ｍｇ／ｋｇＩＶの抗ＣＴＬＡ−４抗体を投与した。
【００８１】
【表１】
【００８２】
【表２】
【００８３】
以下のＳＡＥを含む。
１）４０歳男性は、３ｍｇ／ｋｇの抗ＣＴＬＡ−４抗体の第１回目注入後、グレード２の下痢（２日）、および、グレード３の腹痛（１０日）を発症した。腹部および骨盤のＣＴスキャンにより、肥厚および回腸終末部および盲腸壁の炎症が示された。４日後の繰り返しＣＴスキャンにより、異常所見の解像が示された。患者に対して、その症状の治療を行い、発症から１６日後に回復した。
２）４２歳の女性は、３ｍｇ／ｋｇの抗ＣＴＬＡ−４抗体の第１回目注入６日後に、グレード３の下痢を発症した。患者に対して、ＩＶ水和剤および抗生物質による治療を行なった。
３）５４歳の男性は、３ｍｇ／ｋｇの抗ＣＴＬＡ−４抗体の第３回目注入後、グレード３の下痢を発症した。患者のスツール検査において、白血球（ＷＢＣ）に関して陽性だった。下痢は、抗生物質で治療され、発症から８日後に回復した。
４）５６歳の男性は、１ｍｇ／ｋｇの抗ＣＴＬＡ−４抗体の第２回目注入後、グレード３の血性下痢および両側ブドウ膜炎を発症した。患者のスツール検査においては白血球が陽性であり、Ｓ状結腸鏡検査法で炎症を起こした腸壁がみられ、そして、ＣＴスキャンは厚くなった盲腸壁を示した。患者は、経口ステロイドおよび局所ステロイドによる治療に対して、ほぼ即時の反応を示した。全ての症状は、３ヵ月後に回復した。
【００８４】
＜結論＞
最も多い投与のコホートにおいて、再発はなかった。抗ＣＴＬＡ−４抗体用量に依存的で、臓器特異的の自己免疫的な有害事象が観察された。これらの有害事象は、治療可能で、そして、可逆性であった。
【００８５】
実施例２
＜外科的に切除不能なステージＩＩＩまたはＩＶの黒色腫患者における抗ＣＴＬＡ−４抗体の単一投与の臨床試験の結果＞
フェーズＩ非盲検多施設臨床試験は、切除不能な進行性悪性黒色腫患者１７人のＭＡｂ １０Ｄ１の安全性および薬物動態学を評価するために実施された。年齢の正中値は、５９歳（範囲２９歳から７９歳）であった。９人の患者は、先行の免疫療法を受け、６人の患者は先行の放射線療法を受け、５人は先行の化学療法を受けていた。全ての患者に、９０分にわたって静脈内に３ｍｇ／ｋｇの１０Ｄ１を１回投与し、それから毒性、薬物動態、循環Ｔ細胞活性化および臨床的な結果を追跡した。全ての注入において、ほんの軽度の有害事象が発症した。７人の患者は、軽度の、可逆性の発疹またはそう痒症を発症した。抗体の血漿レベルは、１ヶ月から４ヶ月まで持続した。活性化された末梢Ｔ細胞における有意な増加、および、軽度の発疹以上の臨床的な自己免疫の所見はなかった。２人の患者は、３つの軟組織塊の分解と、肺質量の５０％を超える減少を含む部分寛解を体験した。さらにまた、肺質量における５０％を超える減少を体験した患者は、以前に黒色腫ワクチンによって治療された患者であり、抗ＣＴＬＡ−４抗体治療が腫瘍への既存の記憶反応を活性化することが可能であることを示唆した。本研究の結果は、抗ＣＴＬＡ−４治療が、免疫性で明白な所見によって十分に耐容性があり、そして、抗腫瘍活性であることを示す。
【００８６】
【表３】
【００８７】
実施例３
＜ｇｐ１００ペプチドワクチンと組み合わせた抗ＣＴＬＡ−４抗体の臨床試験結果＞
Ａ．コホート１
ステージＩＶの進行性黒色腫患者１４人に、２つのＨＬＡ−Ａ*０２０１制限ｇｐ１００ペプチドを有するワクチンとともに、抗ＣＴＬＡ−４抗体１０Ｄ１を投与された。患者特性は、表３にまとめられる。
【００８８】
【表４】
【００８９】
全ての患者は、６０％以上のＫａｍｏｆｓｋｙ ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ ｓｔａｔｕｓを有するＨＬＡ*０２０１+であった。６人の患者には、内臓転移があった。患者は、自己免疫疾患または免疫不全疾患の所見がなかった。全ての患者は、それらの一次病巣の先行手術を受けていた。６人の患者は、先行の化学療法を受けていた。１１人の患者は、インターフェロン−α（患者２、５から８、１０、１２および１３）、低用量ＩＬ−２（患者２、５および１３）、高用量ＩＬ−２静脈内投与（患者４、７および８）、黒色腫のホールセルワクチン（患者１、２および６）、ＮＹ−ＥＳＯ−１ペプチドワクチン（患者４および５）およびＧＭ−ＣＳＦ（患者９）を含む先行の免疫療法を有した。患者は、先行のｇｐ１００の免疫療法を受けておらず、そして、治療前に３週間は全身性治療も受けていなかった。
【００９０】
治療サイクルは３週間ごとに、不完全フロイントアジュバント（ＩＦＡ）に乳化された１ｍｇのｇｐ１００：２０９−２１７（２１０Ｍ）ペプチド（ＩＭＤＱＶＰＦＳＶ）１を第１の肢に皮下注射し、そして、ＩＦＡに乳化した１ｍｇのｇｐ１００：２８０−２８８（２８８Ｖ）ペプチド（ＹＬＥＰＧＰＶＴＶ）（Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ Ｃａｎｃｅｒ ＴｈｅｒａｐｙＥｖａｌｕａｔｉｏｎ Ｐｒｏｇｒａｍによって提供される合成ペプチド）を第２の肢に皮下注射した後、９０分にわたり３ｍｇ／ｋｇの抗ＣＴＬＡ−４抗体１０Ｄ１を静脈内投与するものであった。患者は先行の除去療法を行い、２回の治療サイクルを３週間ごとに行った。末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）は、次に使用するまで、フィコール・ハイパック分離によって分離され、１０％のジメチルスルホキシドとともに熱不活性ヒトＡＢ血清において低温保存され、そして、−１８０℃で保存された。
【００９１】
臨床反応は、胸部、腹部および骨盤のコンピュータ断層写真（ＣＴ）、および、脳の磁気共鳴画像（磁気共鳴映像法）を使用して評価された。これらの画像診断検査は治療開始４週以内、および、２回の治療サイクルごとに実行された。付加的な放射線学的検査は、疾患部位を評価するために必要なときに使用された。各患者における最も長い腫瘍の直径の合計（世界保健機構ＲＥＣＩＳＴ基準）は、治療の前後に計算された。部分寛解は、少なくとも１ヵ月続く全ての評価可能な転移腫瘍のうち最も大きな直径の合計において、３０％より多く１００％未満の減少、および、新たな腫瘍または拡大した腫瘍はないものとして定義された。完全寛解は、少なくとも１ヵ月続く全ての評価可能な転移腫瘍のうち最も大きな直径の合計において、１００％の減少、および、新たな腫瘍または拡大した腫瘍はないものとして定義された
【００９２】
患者を、自己免疫反応に対して評価した。患者は、治療前および初期治療３ヵ月後に眼科検査を受けた。全ての患者は、サイログロブリンＡｂ、リウマチ因子および抗核抗体の検査開始前の血清血液検査結果は陰性であった。ヒト抗ヒト（抗イディオタイプ）Ａｂ、赤血球沈降速度、抗核Ａｂ、甲状腺刺激ホルモンおよび遊離Ｔ４レベルは、検査の間３週ごとに測定された。
【００９３】
ＭＤＸ−０１０の血漿中濃度は、ＣＴＬＡ−４−Ｉｇ（Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ、Ｍｉｎｎｅａｐｏｌｉｓ、Ｍｉｎｎｅｓｏｔａ）で覆われるマイクロタイタのウェルによって標準のＥＬＩＳＡを使用して測定された。プラズマ試料の希釈剤は、プレートで培養された。結合された抗ＣＴＬＡ−４ Ａｂは、アルカリホスファターゼ標識のヤギ抗ヒトＩｇＧＦ（ａｂ）−特異プローブ（ｐ−ＮＰＰ基質により発現）によって検出された。
【００９４】
１２日間の生体外における増感分析（ＥＬＩＳＰＯＴ分析またはテトラマ分析より高感度）は、試験可能なＰＢＭＣを用いて全１１人の患者の免疫反応性を評価するために使用された（Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ，Ｓ．Ａ．他、「Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃ ａｎｄ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ ａ ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ ｐｅｐｔｉｄｅ ｖａｃｃｉｎｅ ｆｏｒ ｔｈｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｍｅｔａｓｔａｔｉｃ ｍｅｌａｎｏｍａ．Ｎａｔ．Ｍｅｄ．４」、３２１−３２７ （１９９８））。低温保存されたＰＢＭＣは、１μＭの未変性ｇｐ１００：２０９−２１７またはｇｐ１００：２８０−２８８のペプチド、および、３００ＩＵ／ｍｌのＩＬ−２を有する１０％の熱不活性ヒトＡＢ血清によって完全なイスコーブをベースにした培地において解凍され、培養した。細胞を、培養の開始の１１〜１３日後に収集し、そして、腫瘍細胞またはペプチドパルスしたＴ２細胞によって、一晩、共培養した。上澄み液におけるインターフェロン−γ（ＩＦＮ−γ）放出は、商業的なＥＬＩＳＡ分析（Ｐｉｅｒｃｅ−Ｅｎｄｏｇｅｎ、Ｒｏｃｋｆｏｒｄ、Ｉｌｌｉｎｏｉｓ）を使用して測定された。全１１人の患者は、１回から４回の治療サイクル後、未変性ｇｐ１００：２０９−２１７ペプチドに対して良好な免疫を呈した。６人の患者は、未変性ｇｐ１００：２８０−２８８のペプチドに対して良好な免疫を呈した。
【００９５】
フローサイトメトリ解析を、抗体（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ、Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ）またはテトラマ（Ｂｅｃｋｍａｎ Ｃｏｕｌｔｅｒ Ｉｍｍｕｎｏｍｉｃｓ、Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ、Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ）を用い、Ｆｃ受容体ブロッキング、そして、染色後に実行した。９人の患者のＰＢＭＣ上の表面マーカーの発現を、２回の治療サイクルの前後に比較した。ＨＬＡ−ＤＲ（活性化マーカー）発現は、治療後のＣＤ３+ＣＤ４+細胞（Ｐ＝０．０００４、ペアードＴ検定）、そして、ＣＤ３+ＣＤ４+（おそらくＣＤ８+）細胞（Ｐ＝０．０４）において、かなり増加した。ＣＤ３+ＣＤ４+細胞もまた治療後、ＣＤ４５ＲＯ（記憶細胞マーカー）（Ｐ＝０．０４）の発現のかなりの増加を示した。ＣＤ６９、ＣＤ２５、および、ＣＴＬＡ−４を発現する細胞群のパーセントは変化なかった。
【００９６】
患者１、１１、および、１３は、応答者であった（表１５）。患者１においては、２回の治療サイクル後、孤立性肺病変が収縮した。患者１３においては、孤立性肺病変、および、副腎病変が完全に分解した。患者１１においては、３１か所の肺病変、２か所の皮下病変、および、１か所の脳病変があった。脳病変は、２回の治療サイクル後、０．５ｃｍからほぼ１．０ｃｍに大きくなった。患者１１においては、３回の治療サイクル後、脳病変を含む全ての病変が完全に分解した。
【００９７】
グレード１／２の有害事象には、下痢（患者３、５、および、１４）、皮膚発疹（患者１４）、肺浸潤、および、軽度の腹膜性胸痛（患者４）、および、白斑（患者２、および、６）を含んだ。
【００９８】
６人の患者においては、皮膚炎（患者１、２、および、１３）、大腸炎／腸大腸炎（患者１、および、９）、脳下垂体炎（脳下垂体の炎症）（患者１１）、および、肝炎（患者１２）を含む７つのグレード３の有害事象が発症した。全ての患者においては、治療を中止し、そして、支持看護および／またはステロイド療法の投与後に回復した。再発または二次的な自己免疫事象はなかった。
【００９９】
自己免疫スクリーニング用の血液検査は、抗核抗体（ＡＮＡ）を発現した患者５、および、１２を除いて正常だった。
【０１００】
１回目の投与後のＭＤＸ−０１０の平均ピークは、７２±３３μｇ／ｍＬあり、２回目の投与前のトラフは、１２±７μｇ／ｍＬであった。血漿中濃度または抗体距離と、腫瘍退縮または毒性の間の明白な相互関係は、観察されなかった。
【０１０１】
患者１（部分的な応答者）においては、第２の治療サイクルの１週後に、重症のそう痒症と関連する全身性紅斑性の斑丘疹状発疹を発症した。皮膚生検によって、アレルギー性薬疹に一致した血管周囲のリンパ球性浸潤、および、好酸性浸潤、乳頭状の皮膚水腫、および、表皮の海綿症が示された。２日後に、患者１は重症下痢を発病したため、彼にＩＶ水和剤を与えた。胃腸内視鏡検査、および、生検において、著しい十二指腸、および、結腸のリンパ球増多症、プラズマ細胞増加症、および、好酸球増加症を有する炎症、および、複数領域における粘膜潰瘍を示した。免疫組織化学的検査において、炎症性浸潤におけるＣＤ３+細胞（ＣＤ８+＞ＣＤ４+細胞）優位、プラズマ細胞のポリクローン性、および、脈管系、および、上皮系の増加したＭＨＣ−１およびＨＬＡ−ＤＲ発現性を示した。自己免疫性の全腸炎が診断され、そして、患者はＩＶメチルプレドニゾロンで治療された。患者は、２４時間以内で著しく臨床的に改善され、および、ステロイドは５日にかけて序々に減少していった。患者の症状は、再発しなかった。
【０１０２】
患者２においては、１回目の治療サイクルの１週間後に軽度の全身性そう痒症を発症し、２週間後、ワクチン注射（右腕、および、左脚）を受けた肢において重症で、円形の、紅斑性発疹および黄斑性発疹へと進行した。皮膚生検において、表皮の海綿症、重大な乳頭状の皮膚水腫、および、膠原質の自己免疫に見られるような血管を含む顕著なリンパ球性浸潤、および、好酸性浸潤を示した。患者２には、ヒドロキシジンおよびジフェンヒドラミンによって臨床的に治療を行なった。発疹は、数週間後に消滅した。患者は、３週間後、両上肢において白斑を発症した。
【０１０３】
患者９は、２回目の治療サイクル１１日後に下痢を発症した。内視鏡検査は、全大腸炎を示した。結腸生検において、著しい細胞浸潤、および、陰窩膿瘍を有する重症炎症を示した。免疫組織化学的検査において、大部分のリンパ球浸潤は、ＣＤ３+（ＣＤ４+細胞優位を有する）であり、プラズマ細胞がポリクローン性であり、そして、上皮性のＭＨＣ−１、および、ＨＬＡ−ＤＲの発現が増加したことを例証した。患者の下痢は、ＩＶメチルプレドニゾロン治療によって改善し、そして、デキサメサゾン経口を徐々に減らすことによって抑制された。
【０１０４】
患者１１（完全な応答者）においては、４回目の治療サイクルのあと、人格変化および記憶障害を発症した。脳のＭＲＩにおいて、左側頭転移、および、他のいかなる異常の消失を示した。更なる評価は、汎下垂体機能低下症が示唆される、甲状腺刺激ホルモン、遊離Ｔ４、副腎皮質ホルモン、成長ホルモン、泌乳刺激ホルモン、および、テストステロンにおいて検知不能レベルを示した。繰り返し、集中的なＭＲＩにおいて、標準寸法の最大値となった脳下垂体を示した。患者は、完全な臨床反応を表したので、高用量ステロイドを使用しなかった。患者は、チロキシン、テストステロン、および、ハイドロコーチゾンの代替投与を受けた。患者の人格、および、記憶異常は、回復した。追跡ＭＲＩにおいて、６週後に、脳下垂体の大きさがわずかに減少を示した。
【０１０５】
患者１２は、３回目の治療サイクルの３週後に行なわれる定期的な血液検査において異常な肝酵素、および、抗核抗体を発現した。肝生検においては、主にリンパ球から成る多くの病巣の小葉性の炎症を有する急性肝炎を示した。免疫組織化学的検査は、主に門脈周囲領域のＣＤ４+細胞、および、主に肝小葉のＣＤ８+細胞とともに主にＣＤ３+細胞浸潤を明らかにした。次の２週間、患者のアラニンアミノトランスフェラーゼレベルは、２８６０Ｕ／Ｌ（正常値は６から４１）に達し、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼレベルは、１１９３Ｕ／Ｌ（正常値は９から３４）に達した。低用量のプレドニソン経口治療を開始し、全ての値は４ヵ月後に標準値に減少した。
【０１０６】
患者１３（部分的な応答者）は、４回目の治療サイクル１週間後、重症全身性エリトマトーデスとそう痒性の発疹を発症した。皮膚生検は、表面的な真皮内に大量の好酸球性を有する血管周囲のリンパ球性の浸潤を示した。免疫組織化学的検査において、主にＣＤ３+細胞（ＣＤ４+細胞＞ＣＤ８+細胞）がみられた。発疹の生検から培養されるリンパ球は、全てのＣＤ８+であり、そのうち９７％は、ｇｐ１００：２０９−２１７：ＨＬＡ−Ａ*０２０１テトラマと反応した。発疹は、ヒドロキシジン治療によってゆっくり回復した。
【０１０７】
Ｂ．コホート２
コホート２の手順は、３ｍｇ／ｋｇの抗ＣＴＬＡ−４抗体の初回服用の後に、コホート２の患者に、１ｍｇ／ｋｇの抗ＣＴＬＡ−４抗体をペプチドワクチンとともに３週ごと投与したこと以外はコホート１と同じ手順である。コホート２の検査は、進行中である。現在までのところ、患者２４人のうち３人（１３％）は、他覚的な腫瘍反応を示し、患者２４人のうち２人（８％）はＳＡＥを発症した。
【０１０８】
【表５】
【０１０９】
＜結論＞
本検査は、黒色腫ペプチドワクチンと組み合わせた抗ＣＴＬＡ−４抗体に対する臨床反応が、自己免疫的な有害副作用の発生に強く関連することを例証した。自己免疫的な深刻な副作用を発症した８人の患者のうちの４人（５０％）において、臨床反応を示した。２８人の患者のうちの２人（７％）のみは、いかなる深刻な自己免疫的な副作用がない反応があった。
【０１１０】
実施例４
＜ＭＥＬＡＣＩＮＥ（登録商標）の認可療法と組み合わせた抗ＣＴＬＡ−４抗体の臨床試験の結果＞
【０１１１】
１３人の悪性黒色腫患者に、ＭＥＬＡＣＩＮＥ（登録商標）（シクロホスファミドを含む）の認可療法と組み合わせて抗ＣＴＬＡ−４抗体１０Ｄ１（８週間隔で３ｍｇ／ｋｇ×２用量）を投与した。他覚的な反応、および、深刻な有害事象は、観察されなかった。
【０１１２】
実施例５
＜実施例３（ｇｐ１００ペプチドワクチンと組み合わせた抗ＣＴＬＡ−４抗体の臨床試験）の統計分析＞
３８人の患者のうちの６人において、他覚的な腫瘍反応があった。これら６人の応答者のうち４人（６６．７％）において、自己免疫の深刻な有害事象があった。反応のなかった３２人の患者のうちの４人（１２．５％）だけは、自己免疫の深刻な有害事象を発症しなかった。
【０１１３】
【表６】
【０１１４】
連続補正したカイ二乗検定、および、フィッシャーの正確確率検定によって、応答者、および、不応答者の間で自己免疫発現率が異なることを検定した。統計学的に有意の相互関係が、カイ二乗検定（ｐ＝０．０１４６）、および、フィッシャーの正確確率検定（ｐ＝０．０１１６）を使用することによって、応答者、および、自己免疫の深刻な有害事象を発症する患者の間にあることが分かった。
【０１１５】
実施例６
＜実施例２、３、および、４の結果の統計分析＞
６８人の患者のうちの８人においては、他覚的な腫瘍反応があった。８人の応答者（５０％）のうちの４人においては、自己免疫の深刻な有害事象があった。６０人の患者のうちの４人の不応答者（６．７％）のみ、自己免疫の深刻な有害事象があった。
【０１１６】
【表７】
【０１１７】
連続補正したカイ二乗検定、および、フィッシャーの正確確率検定によって、応答者、および、不応答者の間で自己免疫発現率が異なることを検定した。統計学的に有意の相互関係が、カイ二乗検定（ｐ＝０．００２８）、および、フィッシャーの正確確率検定（ｐ＝０．００４９）を使用することによって、応答者、および、自己免疫の深刻な有害事象を発症する患者の間にあることが分かった。
【０１１８】
＜引例＞
特許、特許出願、および、様々な出版物を含む多数の参考文献が、本発明の記述において引用、および、記述される。このような参考文献の引用および／または説明は、単に本発明の記述を明らかにするためにのみに提供され、そのいかなる内容は、本願明細書において記述される、本発明の「先行技術」であるとは容認されない。本願明細書において記述され、説明される全ての参考文献は、その全体、かつ、引用によって含まれる個々の内容と同じ範囲において、本願明細書に含まれるものとする。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
患者における癌治療方法であって、現状打開事態を引き起こし、前記現状打開事態を検出するために十分な用量の抗ＣＴＬＡ−４抗体の投薬を含む方法。
【請求項２】
前記現状打開事態が自己免疫反応である請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記現状打開事態が、付録１に記載されるように、Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒａｐｙ Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ Ｐｒｏｇｒａｍ、Ｃｏｍｍｏｎ Ｔｅｒｍｉｎｏｌｏｇｙ Ｃｒｉｔｅｒｉａ ｆｏｒ Ａｄｖｅｒｓｅ Ｅｖｅｎｔｓ、Ｖｅｒｓｉｏｎ ３．０に従ったグレード３または４の臨床的な事象である請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記現状打開事態が、前記抗ＣＴＬＡ−４抗体の用量を増減させて投与することによって引き起こされる、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記現状打開事態が、投与間隔を減少させて前記抗ＣＴＬＡ−４を投与することによって引き起こされる、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記現状打開事態が、非腫瘍関連自己免疫の発現を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
前記癌が、免疫学的に高感度な腫瘍である請求項１に記載の方法。
【請求項８】
前記癌が、悪性黒色腫である請求項１に記載の方法。
【請求項９】
癌治療に効果的な用量の抗ＣＴＬＡ−４抗体の決定方法であって、被験者において、現状打開事態が観察されるまで抗ＣＴＬＡ−４抗体の用量および処方計画を調整し、投薬が治療効果のある用量である方法。
【請求項１０】
現状打開事態が自己免疫反応である請求項９記載の方法。
【請求項１１】
前記現状打開事態が、付録１に記載されるように、Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒａｐｙ Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ Ｐｒｏｇｒａｍ、Ｃｏｍｍｏｎ Ｔｅｒｍｉｎｏｌｏｇｙ Ｃｒｉｔｅｒｉａ ｆｏｒ Ａｄｖｅｒｓｅ Ｅｖｅｎｔｓ、Ｖｅｒｓｉｏｎ ３．０に従ったグレード３または４の臨床的な事象である請求項９に記載の方法。
【請求項１２】
前記現状打開事態が、前記抗ＣＴＬＡ−４抗体の用量を増減させて投与することによって引き起こされる、請求項９に記載の方法。
【請求項１３】
前記現状打開事態が、投与間隔を減少させて前記抗ＣＴＬＡ−４を投与することによって引き起こされる、請求項９に記載の方法。
【請求項１４】
前記現状打開事態が、非腫瘍関連自己免疫の発現を含む、請求項９に記載の方法。
【請求項１５】
前記癌が、免疫学的に高感度な腫瘍である請求項９の方法。
【請求項１６】
前記癌が、悪性黒色腫である請求項９に記載の方法。
【請求項１７】
このような治療を必要とする患者における黒色腫の治療方法であって、現状打開事態を引き起こすのに十分な用量において抗ＣＴＬＡ−４抗体１０Ｄ１を投与し、現状打開事態を検出する方法。
【請求項１８】
前記現状打開事態が自己免疫反応である請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
前記現状打開事態が、付録１に記載されるような、Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒａｐｙ Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ Ｐｒｏｇｒａｍ、Ｃｏｍｍｏｎ Ｔｅｒｍｉｎｏｌｏｇｙ Ｃｒｉｔｅｒｉａ ｆｏｒ Ａｄｖｅｒｓｅ Ｅｖｅｎｔｓ、Ｖｅｒｓｉｏｎ ３．０に従ったグレード３または４の臨床的な事象である請求項１７に記載の方法。
【請求項２０】
前記現状打開事態は、下痢、全腸炎、皮膚炎、脳下垂体炎、汎下垂体機能低下症、発疹、および、そう痒症から成るグループから選択される、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
前記現状打開事態が、抗ＣＴＬＡ−４抗体の用量を増減させて投与することによって引き起こされる、請求項１７に記載の方法。
【請求項２２】
前記現状打開事態が、投与間隔を減少させて抗ＣＴＬＡ−４を投与することによって引き起こされる、請求項１７に記載の方法。
【請求項２３】
前記現状打開事態は、皮膚炎、白斑、および、全腸炎から成るグループから選択される、請求項１７に記載の方法。
【請求項２４】
付加的な癌治療薬が投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項２５】
付加的なＢＥ治療薬が投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項１】
患者における癌治療方法であって、現状打開事態を引き起こし、前記現状打開事態を検出するために十分な用量の抗ＣＴＬＡ−４抗体の投薬を含む方法。
【請求項２】
前記現状打開事態が自己免疫反応である請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記現状打開事態が、付録１に記載されるように、Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒａｐｙ Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ Ｐｒｏｇｒａｍ、Ｃｏｍｍｏｎ Ｔｅｒｍｉｎｏｌｏｇｙ Ｃｒｉｔｅｒｉａ ｆｏｒ Ａｄｖｅｒｓｅ Ｅｖｅｎｔｓ、Ｖｅｒｓｉｏｎ ３．０に従ったグレード３または４の臨床的な事象である請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記現状打開事態が、前記抗ＣＴＬＡ−４抗体の用量を増減させて投与することによって引き起こされる、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記現状打開事態が、投与間隔を減少させて前記抗ＣＴＬＡ−４を投与することによって引き起こされる、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記現状打開事態が、非腫瘍関連自己免疫の発現を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
前記癌が、免疫学的に高感度な腫瘍である請求項１に記載の方法。
【請求項８】
前記癌が、悪性黒色腫である請求項１に記載の方法。
【請求項９】
癌治療に効果的な用量の抗ＣＴＬＡ−４抗体の決定方法であって、被験者において、現状打開事態が観察されるまで抗ＣＴＬＡ−４抗体の用量および処方計画を調整し、投薬が治療効果のある用量である方法。
【請求項１０】
現状打開事態が自己免疫反応である請求項９記載の方法。
【請求項１１】
前記現状打開事態が、付録１に記載されるように、Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒａｐｙ Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ Ｐｒｏｇｒａｍ、Ｃｏｍｍｏｎ Ｔｅｒｍｉｎｏｌｏｇｙ Ｃｒｉｔｅｒｉａ ｆｏｒ Ａｄｖｅｒｓｅ Ｅｖｅｎｔｓ、Ｖｅｒｓｉｏｎ ３．０に従ったグレード３または４の臨床的な事象である請求項９に記載の方法。
【請求項１２】
前記現状打開事態が、前記抗ＣＴＬＡ−４抗体の用量を増減させて投与することによって引き起こされる、請求項９に記載の方法。
【請求項１３】
前記現状打開事態が、投与間隔を減少させて前記抗ＣＴＬＡ−４を投与することによって引き起こされる、請求項９に記載の方法。
【請求項１４】
前記現状打開事態が、非腫瘍関連自己免疫の発現を含む、請求項９に記載の方法。
【請求項１５】
前記癌が、免疫学的に高感度な腫瘍である請求項９の方法。
【請求項１６】
前記癌が、悪性黒色腫である請求項９に記載の方法。
【請求項１７】
このような治療を必要とする患者における黒色腫の治療方法であって、現状打開事態を引き起こすのに十分な用量において抗ＣＴＬＡ−４抗体１０Ｄ１を投与し、現状打開事態を検出する方法。
【請求項１８】
前記現状打開事態が自己免疫反応である請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
前記現状打開事態が、付録１に記載されるような、Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒａｐｙ Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ Ｐｒｏｇｒａｍ、Ｃｏｍｍｏｎ Ｔｅｒｍｉｎｏｌｏｇｙ Ｃｒｉｔｅｒｉａ ｆｏｒ Ａｄｖｅｒｓｅ Ｅｖｅｎｔｓ、Ｖｅｒｓｉｏｎ ３．０に従ったグレード３または４の臨床的な事象である請求項１７に記載の方法。
【請求項２０】
前記現状打開事態は、下痢、全腸炎、皮膚炎、脳下垂体炎、汎下垂体機能低下症、発疹、および、そう痒症から成るグループから選択される、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
前記現状打開事態が、抗ＣＴＬＡ−４抗体の用量を増減させて投与することによって引き起こされる、請求項１７に記載の方法。
【請求項２２】
前記現状打開事態が、投与間隔を減少させて抗ＣＴＬＡ−４を投与することによって引き起こされる、請求項１７に記載の方法。
【請求項２３】
前記現状打開事態は、皮膚炎、白斑、および、全腸炎から成るグループから選択される、請求項１７に記載の方法。
【請求項２４】
付加的な癌治療薬が投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項２５】
付加的なＢＥ治療薬が投与される、請求項１に記載の方法。
【公表番号】特表２００７−５０２３３０（Ｐ２００７−５０２３３０Ａ）
【公表日】平成１９年２月８日（２００７．２．８）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００６−５３３５０６（Ｐ２００６−５３３５０６）
【出願日】平成１６年５月２８日（２００４．５．２８）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０１６９９５
【国際公開番号】ＷＯ２００５／００３２９８
【国際公開日】平成１７年１月１３日（２００５．１．１３）
【出願人】（５０４３７８２３８）メダレックス インコーポレイテッド (20)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成１９年２月８日（２００７．２．８）
【国際特許分類】
【出願日】平成１６年５月２８日（２００４．５．２８）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０１６９９５
【国際公開番号】ＷＯ２００５／００３２９８
【国際公開日】平成１７年１月１３日（２００５．１．１３）
【出願人】（５０４３７８２３８）メダレックス インコーポレイテッド (20)
【Ｆターム（参考）】
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