特異的結合タンパク質およびこれらの使用
本発明は、増幅された上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）におよび該ＥＧＦＲのｄｅ２−７ ＥＧＦＲトランケーションに結合する特異的結合メンバー、特に抗体およびこれらの断片に関する。詳細には、前記特異的結合メンバー、特に抗体およびこれらの断片によって認識されるエピトープは、異常な翻訳後修飾に基づいて強化されるまたははっきりわかる。これらの特異的結合メンバーは、癌の診断および治療に有用である。本発明の結合メンバーは、治療の際に化学療法薬もしくは抗癌剤とおよび／または他の抗体もしくはこれらの断片と併用することもできる。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＥＧＦＲ遺伝子の増幅を有する腫瘍（該腫瘍の細胞は、ＥＧＦＲ遺伝子の多数のコピーを含有する。）におけるおよびトランケートされたバージョンのＥＧＦＲ受容体ｄｅ２−７を発現する腫瘍におけるＥＧＦＲに結合することができる単離された抗体であって、配列番号：１３のアミノ酸配列から成るｄｅ２−７接合点ペプチドに結合しないものであり；ヒト野生型ＥＧＦＲの残基２８７−３０２の配列（配列番号：１４）内のエピトープに結合するものであり；ならびに配列番号：２に示すアミノ酸配列を有する重鎖可変領域配列を含まず、および配列番号：４に示すアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域配列を含まないものである抗体。
【請求項２】
重鎖および軽鎖を含み、該重鎖が配列番号：４２に示すアミノ酸配列を有し、および該軽鎖が配列番号：４７に示すアミノ酸配列を有する、請求項１に記載の単離された抗体。
【請求項３】
重鎖および軽鎖を含み、該重鎖が配列番号：１２９に示すアミノ酸配列を有し、および該軽鎖が配列番号：１３４に示すアミノ酸配列を有する、請求項１に記載の単離された抗体。
【請求項４】
重鎖および軽鎖を含み、該重鎖が配列番号：２２に示すアミノ酸配列を有し、および該軽鎖が配列番号：２７に示すアミノ酸配列を有する、請求項１に記載の単離された抗体。
【請求項５】
重鎖および軽鎖を含み、該重鎖が配列番号：３２に示すアミノ酸配列を有し、および該軽鎖が配列番号：３７に示すアミノ酸配列を有する、請求項１に記載の単離された抗体。
【請求項６】
重鎖および軽鎖を含み、該重鎖の可変領域が、配列番号：４４、４５および４６に示すアミノ酸配列に高相同性のアミノ酸配列を有するポリペプチド結合ドメイン領域を含む、請求項１に記載の単離された抗体。
【請求項７】
重鎖および軽鎖を含み、該軽鎖の可変領域が、配列番号：４９、５０および５１に示すアミノ酸配列に高相同性のアミノ酸配列を有するポリペプチド結合ドメイン領域を含む、請求項１に記載の単離された抗体。
【請求項８】
重鎖および軽鎖を含み、該重鎖の可変領域が、配列番号：１３０、１３１および１３２に示すアミノ酸配列に高相同性のアミノ酸配列を有するポリペプチド結合ドメイン領域を含む、請求項１に記載の単離された抗体。
【請求項９】
重鎖および軽鎖を含み、該軽鎖の可変領域が、配列番号：１３５、１３６および１３７に示すアミノ酸配列に高相同性のアミノ酸配列を有するポリペプチド結合ドメイン領域を含む、請求項１に記載の単離された抗体。
【請求項１０】
重鎖および軽鎖を含み、該重鎖の可変領域が、配列番号：２３、２４および２５に示すアミノ酸配列に高相同性のアミノ酸配列を有するポリペプチド結合ドメイン領域を含む、請求項１に記載の単離された抗体。
【請求項１１】
重鎖および軽鎖を含み、該軽鎖の可変領域が、配列番号：２８、２９および３０に示すアミノ酸配列に高相同性のアミノ酸配列を有するポリペプチド結合ドメイン領域を含む、請求項１に記載の単離された抗体。
【請求項１２】
重鎖および軽鎖を含み、該重鎖の可変領域が、配列番号：３３、３４および３５に示すアミノ酸配列に高相同性のアミノ酸配列を有するポリペプチド結合ドメイン領域を含む、請求項１に記載の単離された抗体。
【請求項１３】
重鎖および軽鎖を含み、該軽鎖の可変領域が、配列番号：３８、３９および４０に示すアミノ酸配列に高相同性のアミノ酸配列を有するポリペプチド結合ドメイン領域を含む、請求項１に記載の単離された抗体。
【請求項１４】
抗体Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖ断片、ダイアボディー、トリアボディーまたはテトラボディーの形態である、請求項１に記載の単離された抗体。
【請求項１５】
検出可能または機能性標識をさらに含む、請求項１に記載の単離された抗体。
【請求項１６】
前記検出可能または機能性標識が、共有結合で付けられる薬物である、請求項１５に記載の単離された抗体。
【請求項１７】
前記標識が、放射標識である、請求項１５に記載の単離された抗体。
【請求項１８】
ＰＥＧ化されている、請求項１に記載の単離された抗体。
【請求項１９】
請求項１に記載の単離された抗体をコードする配列を含む単離された核酸。
【請求項２０】
請求項１に記載の単離された抗体を調製する方法であって、該抗体の発現を引き起こす条件下で核酸を発現させること、および該抗体を回収することを含むものである方法。
【請求項２１】
ヒト患者における腫瘍の治療方法であって、請求項１に記載の単離された抗体の有効量を該患者に投与することを含むものである方法。
【請求項２２】
請求項１の単離された抗体を含む、ＥＧＦＲが異常発現されるまたはＥＧＦＲがトランケートされたタンパク質形態で発現される腫瘍の診断のためのキット。
【請求項２３】
試薬および／または使用のための説示をさらに含む、請求項２２に記載の、ＥＧＦＲが異常発現されるまたはＥＧＦＲがトランケートされたタンパク質形態で発現される主要の診断のためのキット。
【請求項２４】
請求項１に記載の単離された抗体を含む医薬組成物。
【請求項２５】
医薬的に許容されるビヒクル、担体または希釈剤をさらに含む、請求項２４に記載の医薬組成物。
【請求項２６】
化学療法薬、抗ＥＧＦＲ抗体、放射免疫療法薬およびこれらの組み合わせから成る群より選択される抗癌剤をさらに含む、請求項２４に記載の医薬組成物。
【請求項２７】
前記化学療法薬が、チロシンキナーゼ阻害剤、リン酸化カスケード阻害剤、翻訳後調節物質、細胞成長または分裂阻害剤（例えば、抗有糸分裂剤）、シグナル伝達阻害剤およびこれらの組み合わせから成る群より選択される、請求項２６に記載の医薬組成物。
【請求項２８】
前記チロシンキナーゼ阻害剤が、ＡＧ１４７８、ＺＤ１８３９、ＳＴＩ５７１、ＯＳＩ−７７４、ＳＵ−６６６８およびこれらの組み合わせから成る群より選択される、請求項２７に記載の医薬組成物。
【請求項２９】
前記抗ＥＧＦＲ抗体が、抗ＥＧＦＲ抗体５２８、２２５、ＳＣ−０３、ＤＲ８．３、Ｌ８Ａ４、Ｙ１０、ＩＣＲ６２、ＡＢＸ−ＥＧＦおよびこれらの組み合わせから成る群より選択される、請求項２６に記載の医薬組成物。
【請求項３０】
請求項２４に記載の医薬組成物の治療有効量を哺乳動物に投与することを含む、哺乳動物における癌を予防および／または治療する方法。
【請求項３１】
請求項２４に記載の医薬組成物の治療有効量を哺乳動物に投与することを含む、哺乳動物において異常発現ＥＧＦＲを生産する脳内在性の癌の治療のための方法。
【請求項３２】
請求項３０に記載の哺乳動物における異常発現ＥＧＦＲを生産する脳内在性の癌を治療するための方法であって、該脳内在性の癌が、膠芽腫、髄芽腫、髄膜腫、新生物性星状細胞種および新生物性動静脈奇形から成る群より選択されるものである方法。
【請求項３３】
請求項１の単離された抗体をコードする組換えＤＮＡ分子で形質転換された単細胞宿主。
【請求項３４】
Ｅ．コリ（Ｅ．ｃｏｌｉ）、シュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）、バチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）、ストレプトマイセス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ）、酵母、ＣＨＯ、ＹＢ／２０、ＮＳＯ、ＳＰ２／０、Ｒ１．１、Ｂ−Ｗ、Ｌ−Ｍ、ＣＯＳ １、ＣＯＳ ７、ＢＳＣ１、ＢＳＣ４０およびＢＭＴ１０細胞、植物細胞、昆虫細胞ならびにヒト細胞（組織培養でのもの）から成る群より選択される、請求項１の単離された抗体をコードする組換えＤＮＡ分子で形質転換された単細胞宿主。
【請求項３５】
増幅されたＥＧＦＲ、ｄｅ２−７ＥＧＦＲ、または高マンノースグリコシル化を有するＥＧＦＲの存在を検出するための方法であって、前記ＥＧＦＲが、（ａ）増幅されたＥＧＦＲ、ｄｅ２−７ＥＧＦＲ、または高マンノースグリコシル化を有するＥＧＦＲの存在が疑われる哺乳動物からの生体サンプルと請求項１の単離された抗体とを、該ＥＧＦＲの該単離された抗体への結合を可能ならしめる条件下で接触させること；および（ｂ）前記サンプルからの前記ＥＧＦＲと前記単離された抗体との間で結合が発生したかどうかを検出することによって測定され、結合の検出が、前記サンプル中の前記ＥＧＦＲの存在または活性を示すものである方法。
【請求項３６】
哺乳動物における癌を検出するための方法であって、請求項３５の方法に従ってＥＧＦＲの存在または検出することを含み、ＥＧＦＲの存在の検出が、該哺乳動物における腫瘍または癌の存在を示すものである方法。
【請求項３７】
ＥＧＦＲ遺伝子の増幅を有する腫瘍（該腫瘍の細胞は、ＥＧＦＲ遺伝子の多数のコピーを含有する。）におけるおよびトランケートされたバージョンのＥＧＦＲ受容体ｄｅ２−７を発現する腫瘍におけるＥＧＦＲに結合することができる単離された抗体であって、重鎖および軽鎖を含み、前記重鎖が配列番号：４２に示すアミノ酸配列に実質的に相同性であるアミノ酸配列を有する、および前記軽鎖が配列番号：４７に示すアミノ酸配列に実質的に相同性であるアミノ酸配列を有するものである抗体。
【請求項３８】
請求項３７に記載の単離された抗体であって、前記抗体の前記重鎖が、配列番号：４２に示すアミノ酸配列を含み、および前記抗体の前記軽鎖が配列番号：４７に示すアミノ酸配列を含む、抗体。
【請求項３９】
ＥＧＦＲ遺伝子の増幅を有する腫瘍（該腫瘍の細胞は、ＥＧＦＲ遺伝子の多数のコピーを含有する。）におけるおよびトランケートされたバージョンのＥＧＦＲ受容体ｄｅ２−７を発現する腫瘍におけるＥＧＦＲに結合することができる単離された抗体であって、重鎖および軽鎖を含み、該重鎖の可変領域が、配列番号：４４、４５および４６に示すアミノ酸配列に高相同性のアミノ酸配列を有するポリペプチド結合ドメイン領域を含み、ならびに該軽鎖の可変領域が、配列番号：４９、５０および５１に示すアミノ酸配列に高相同性のアミノ酸配列を有するポリペプチド結合ドメインを含むものである抗体。
【請求項４０】
ＥＧＦＲ遺伝子の増幅を有する腫瘍（該腫瘍の細胞は、ＥＧＦＲ遺伝子の多数のコピーを含有する。）におけるおよびトランケートされたバージョンのＥＧＦＲ受容体ｄｅ２−７を発現する腫瘍におけるＥＧＦＲに結合することができる単離された抗体であって、重鎖および軽鎖を含み、該重鎖が配列番号：１２９に示すアミノ酸配列に実質的に相同性であるアミノ酸配列を有し、および該軽鎖が、配列番号：１３４に示すアミノ酸配列に実質的に相同性であるアミノ酸配列を有するものである抗体。
【請求項４１】
請求項４０に記載の単離された抗体であって、前記抗体の前記重鎖が、配列番号：１２９に示すアミノ酸配列を含み、および前記抗体の前記軽鎖が、配列番号：１３４に示すアミノ酸配列を含む、抗体。
【請求項４２】
ＥＧＦＲ遺伝子の増幅を有する腫瘍（該腫瘍の細胞は、ＥＧＦＲ遺伝子の多数のコピーを含有する。）におけるおよびトランケートされたバージョンのＥＧＦＲ受容体ｄｅ２−７を発現する腫瘍におけるＥＧＦＲに結合することができる単離された抗体であって、重鎖および軽鎖を含み、該重鎖の可変領域が、配列番号：１３０、１３１および１３２に示すアミノ酸配列に高相同性のアミノ酸配列を有するポリペプチド結合ドメイン領域を含み、ならびに該軽鎖の可変領域が、配列番号：１３５、１３６および１３８に示すアミノ酸配列に高相同性のアミノ酸配列を有するポリペプチド結合ドメインを含むものである抗体。
【請求項４３】
ＥＧＦＲ遺伝子の増幅を有する腫瘍（該腫瘍の細胞は、ＥＧＦＲ遺伝子の多数のコピーを含有する。）におけるおよびトランケートされたバージョンのＥＧＦＲ受容体ｄｅ２−７を発現する腫瘍におけるＥＧＦＲに結合することができる単離された抗体であって、重鎖および軽鎖を含み、該重鎖が、配列番号：２２に示すアミノ酸配列に実質的に相同性であるアミノ酸配列を有し、および該軽鎖が、配列番号：２７に示すアミノ酸配列に実質的に相同性であるアミノ酸配列を有するものである抗体。
【請求項４４】
請求項４３に記載の単離された抗体であって、前記抗体の前記重鎖が、配列番号：２２に示すアミノ酸配列を含み、および前記抗体の前記軽鎖が、配列番号：２７に示すアミノ酸配列を含む、抗体。
【請求項４５】
ＥＧＦＲ遺伝子の増幅を有する腫瘍（該腫瘍の細胞は、ＥＧＦＲ遺伝子の多数のコピーを含有する。）におけるおよびトランケートされたバージョンのＥＧＦＲ受容体ｄｅ２−７を発現する腫瘍におけるＥＧＦＲに結合することができる単離された抗体であって、重鎖および軽鎖を含み、該重鎖の可変領域が、配列番号：２３、２４および２５に示すアミノ酸配列に高相同性のアミノ酸配列を有するポリペプチド結合ドメイン領域を含み、ならびに該軽鎖の可変領域が、配列番号：２８、２９および３０に示すアミノ酸配列に高相同性のアミノ酸配列を有するポリペプチド結合ドメインを含むものである抗体。
【請求項４６】
ＥＧＦＲ遺伝子の増幅を有する腫瘍（該腫瘍の細胞は、ＥＧＦＲ遺伝子の多数のコピーを含有する。）におけるおよびトランケートされたバージョンのＥＧＦＲ受容体ｄｅ２−７を発現する腫瘍におけるＥＧＦＲに結合することができる単離された抗体であって、重鎖および軽鎖を含み、該重鎖が、配列番号：３２に示すアミノ酸配列に実質的に相同性であるアミノ酸配列を有し、および該軽鎖が、配列番号：３７に示すアミノ酸配列に実質的に相同性であるアミノ酸配列を有するものである抗体。
【請求項４７】
請求項４６に記載の単離された抗体であって、前記抗体の前記重鎖が、配列番号：３２に示すアミノ酸配列を含み、および前記抗体の前記軽鎖が、配列番号：３７に示すアミノ酸配列を含む、抗体。
【請求項４８】
ＥＧＦＲ遺伝子の増幅を有する腫瘍（該腫瘍の細胞は、ＥＧＦＲ遺伝子の多数のコピーを含有する。）におけるおよびトランケートされたバージョンのＥＧＦＲ受容体ｄｅ２−７を発現する腫瘍におけるＥＧＦＲに結合することができる単離された抗体であって、重鎖および軽鎖を含み、該重鎖の可変領域が、配列番号：３３、３４および３５に示すアミノ酸配列に高相同性のアミノ酸配列を有するポリペプチド結合ドメイン領域を含み、ならびに該軽鎖の可変領域が、配列番号：３８、３９および４０に示すアミノ酸配列に高相同性のアミノ酸配列を有するポリペプチド結合ドメインを含むものである抗体。
【請求項４９】
ＥＧＦＲ遺伝子の増幅を有する腫瘍（該腫瘍の細胞は、ＥＧＦＲ遺伝子の多数のコピーを含有する。）におけるおよびトランケートされたバージョンのＥＧＦＲ受容体ｄｅ２−７を発現する腫瘍におけるＥＧＦＲに結合することができる単離された抗体であって、
配列番号：１３のアミノ酸配列から成るｄｅ２−７接合点ペプチドに結合しないものであり；
ヒト野生型ＥＧＦＲの残基２８７−３０２の配列（配列番号：１４）内のエピトープに結合するものであり；
軽鎖および重鎖を含み、該軽鎖の可変領域が、
式Ｉに示すアミノ酸配列：
ＨＳＳＱＤＩＸａａ１ＳＮＩＧ （Ｉ）
（式中、Ｘａａ１は、非荷電極性Ｒ基を有するアミノ酸残基である。）
に対応するアミノ酸配列を有する第一のポリペプチド結合ドメイン領域、
式ＩＩに示すアミノ酸配列：
ＨＧＴＮＬＸａａ２Ｄ （ＩＩ）
（式中、Ｘａａ２は、荷電極性Ｒ基を有するアミノ酸残基である。）
に対応するアミノ酸配列を有する第二のポリペプチド結合ドメイン領域、および
式ＩＩＩに示すアミノ酸配列：
ＶＱＹＸａａ３ＱＦＰＷＴ （ＩＩＩ）
（式中、Ｘａａ３は、Ａ、Ｇ、およびＡまたはＧが保存的に置換されているアミノ酸残基から成る群より選択される。）
に対応するアミノ酸配列を有する第三のポリペプチド結合ドメイン領域を含み、ならびに該重鎖の可変領域が、
式ＶＩに示すアミノ酸配列：
ＳＤＸａａ４ＡＷＮ （ＩＶ）
（式中、Ｘａａ４は、Ｆ、Ｙ、およびＦまたはＹが保存的に置換されているアミノ酸残基から成る群より選択される。）
に対応するアミノ酸配列を有する第一のポリペプチド結合ドメイン領域、
式Ｖ、式ＶＩまたは式ＶＩＩに示すアミノ酸配列：
ＹＩＳＹＳＧＮＴＲＹＸａａ５ＰＳＬＫＳ （Ｖ）
（式中、Ｘａａ５は、非荷電極性Ｒ基を有するアミノ酸残基である。）、
ＹＩＳＹＳＸａａ６ＮＴＲＹＮＰＳＬＫＳ （ＶＩ）
（式中、Ｘａａ６は、Ｇ、Ａ、およびＧまたはＡが保存的に置換されているアミノ酸残基から成る群より選択される。）
ＹＩＳＹＳＧＮＴＲＹＮＰＳＬＸａａ７Ｓ （ＶＩＩ）
（式中、Ｘａａ７は、塩基性アミノ酸残基である。）
に対応するアミノ酸配列を有する第二のポリペプチド結合領域、および
式ＶＩＩＩに示すアミノ酸配列：
Ｘａａ８ＴＡＧＲＧＦＰＹ （ＶＩＩＩ）
（式中、Ｘａａ８は、Ｖ、Ａ、およびＶまたはＡが保存的に置換されているアミノ酸残基から成る群より選択される。）
に対応するアミノ酸配列を有する第三のポリペプチド結合ドメイン領域
を含むものであり；
ならびに配列番号：２に示すアミノ酸配列を有する重鎖可変領域配列を含まず、および配列番号：４に示すアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域配列を含まないものである抗体。
【請求項５０】
Ｘａａ１が、Ｎであり；Ｘａａ２が、Ｄであり；Ｘａａ３が、Ａであり；Ｘａａ４が、Ｆであり；Ｘａａ５が、非荷電極性Ｒ基を有するアミノ酸残基であり；Ｘａａ６が、Ｇであり；Ｘａａ７が、Ｋであり；およびＸａａ８が、Ｖである、請求項４９に記載の単離された抗体。
【請求項５１】
Ｘａａ５が、ＮまたはＱである、請求項５０に記載の単離された抗体。
【請求項５２】
Ｘａａ１が、ＮまたはＳである、請求項４９に記載の抗体。
【請求項５３】
Ｘａａ２が、ＤまたはＥである、請求項４９に記載の抗体。
【請求項５４】
Ｘａａ３が、ＡまたはＧである、請求項４９に記載の抗体。
【請求項５５】
Ｘａａ４が、ＦまたはＹである、請求項４９に記載の抗体。
【請求項５６】
Ｘａａ５が、ＮまたはＱである、請求項４９に記載の抗体。
【請求項５７】
Ｘａａ６が、ＧまたはＡであり、およびＸａａ７が、独立してＫまたはＲである、請求項４９に記載の抗体。
【請求項５８】
Ｘａａ８が、ＶまたはＡである、請求項４９に記載の抗体。
【請求項５９】
抗体Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖ断片、ダイアボディー、トリアボディーまたはテトラボディーの形態である、請求項４９に記載の単離された抗体。
【請求項６０】
検出可能または機能性標識をさらに含む、請求項４９に記載の単離された抗体。
【請求項６１】
前記検出可能または機能性標識が、共有結合で付けられる薬物である、請求項６０に記載の単離された抗体。
【請求項６２】
前記標識が、放射標識である、請求項６０に記載の単離された抗体。
【請求項６３】
ＰＥＧ化されている、請求項４９に記載の単離された抗体。
【請求項６４】
請求項４９の単離された抗体をコードする配列を含む単離された核酸。
【請求項６５】
請求項４９に記載の単離された抗体を調製する方法であって、該抗体の発現を引き起こす条件下で核酸を発現させること、および該抗体を回収することを含むものである方法。
【請求項６６】
ヒト患者における腫瘍の治療方法であって、請求項４９に記載の単離された抗体の有効量を該患者に投与することを含むものである方法。
【請求項６７】
請求項４９の単離された抗体を含む、ＥＧＦＲが異常発現されるまたはＥＧＦＲがトランケートされたタンパク質形態で発現される腫瘍の診断のためのキット。
【請求項６８】
試薬および／または使用のための説明書をさらに含む、請求項６７に記載の、ＥＧＦＲが異常発現されるまたはＥＧＦＲがトランケートされたタンパク質形態で発現される腫瘍の診断のためのキット。
【請求項６９】
請求項４９に記載の単離された抗体を含む医薬組成物。
【請求項７０】
医薬的に許容されるビヒクル、担体または希釈剤をさらに含む、請求項６９に記載の医薬組成物。
【請求項７１】
化学療法薬、抗ＥＧＦＲ抗体、放射免疫療法薬およびこれらの組み合わせから成る群より選択される抗癌剤をさらに含む、請求項６９に記載の医薬組成物。
【請求項７２】
前記化学療法薬が、チロシンキナーゼ阻害剤、リン酸化カスケード阻害剤、翻訳後調節物質、細胞成長または分裂阻害剤（例えば、抗有糸分裂剤）、シグナル伝達阻害剤およびこれらの組み合わせから成る群より選択される、請求項７１に記載の医薬組成物。
【請求項７３】
前記チロシンキナーゼ阻害剤が、ＡＧ１４７８、ＺＤ１８３９、ＳＴＩ５７１、ＯＳＩ−７７４、ＳＵ−６６６８およびこれらの組み合わせから成る群より選択される、請求項７２に記載の医薬組成物。
【請求項７４】
前記抗ＥＧＦＲ抗体が、抗ＥＧＦＲ抗体５２８、２２５、ＳＣ−０３、ＤＲ８．３、Ｌ８Ａ４、Ｙ１０、ＩＣＲ６２、ＡＢＸ−ＥＧＦおよびこれらの組み合わせから成る群より選択される、請求項７１に記載の医薬組成物。
【請求項７５】
請求項６９に記載の医薬組成物の治療有効量を哺乳動物に投与することを含む、哺乳動物における癌を予防および／または治療する方法。
【請求項７６】
請求項６９に記載の医薬組成物の治療有効量を哺乳動物に投与することを含む、哺乳動物における異常発現ＥＧＦＲを生産する脳内在性の癌の治療のための方法。
【請求項７７】
請求項７６に記載の哺乳動物における異常発現ＥＧＦＲを生産する脳内在性の癌を治療するための方法であって、該脳内在性の癌が、膠芽腫、髄芽腫、髄膜腫、新生物性星状細胞種および新生物性動静脈奇形から成る群より選択されるものである方法。
【請求項７８】
請求項４９の単離された抗体をコードする組換えＤＮＡ分子で形質転換された単細胞宿主。
【請求項７９】
Ｅ．コリ（Ｅ．ｃｏｌｉ）、シュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）、バチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）、ストレプトマイセス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ）、酵母、ＣＨＯ、ＹＢ／２０、ＮＳＯ、ＳＰ２／０、Ｒ１．１、Ｂ−Ｗ、Ｌ−Ｍ、ＣＯＳ １、ＣＯＳ ７、ＢＳＣ１、ＢＳＣ４０およびＢＭＴ１０細胞、植物細胞、昆虫細胞ならびにヒト細胞（組織培養でのもの）から成る群より選択される、請求項４９の単離された抗体をコードする組換えＤＮＡ分子で形質転換された単細胞宿主。
【請求項８０】
増幅されたＥＧＦＲ、ｄｅ２−７ＥＧＦＲ、または高マンノースグリコシル化を有するＥＧＦＲの存在を検出するための方法であって、前記ＥＧＦＲが、（ａ）増幅されたＥＧＦＲ、ｄｅ２−７ＥＧＦＲ、または高マンノースグリコシル化を有するＥＧＦＲの存在が疑われる哺乳動物からの生体サンプルと請求項４９に記載の単離された抗体とを、該ＥＧＦＲの該単離された抗体への結合を可能ならしめる条件下で接触させること；および（ｂ）前記サンプルからの前記ＥＧＦＲと前記単離された抗体との間で結合が発生したかどうかを検出することによって測定され、結合の検出が、前記サンプル中の前記ＥＧＦＲの存在または活性を示すものである方法。
【請求項８１】
哺乳動物における癌を検出するための方法であって、請求項８０の方法に従ってＥＧＦＲの存在または検出することを含み、ＥＧＦＲの存在または検出が、該哺乳動物における腫瘍または癌の存在を示すものである方法。
【請求項８２】
ＥＧＦＲ遺伝子の増幅を有する腫瘍（該腫瘍の細胞は、ＥＧＦＲ遺伝子の多数のコピーを含有する。）におけるおよびトランケートされたバージョンのＥＧＦＲ受容体ｄｅ２−７を発現する腫瘍におけるＥＧＦＲに結合することができる単離された抗体であって、配列番号：１３のアミノ酸配列から成るｄｅ２−７接合点ペプチドに結合しないものであり；ヒト野生型ＥＧＦＲの残基２７３−５０１の配列内のエピトープに結合するものであり；軽鎖および重鎖を含み、該軽鎖の可変領域が、アミノ酸配列ＨＳＳＱＤＩＮＳＮＩＧ（配列番号：１８）を有する第一のポリペプチド結合ドメイン領域、アミノ酸配列ＨＧＴＮＬＤＤ（配列番号：１９）を有する第二のポリペプチド結合ドメイン領域、およびアミノ酸配列ＶＱＹＡＱＦＰＷＴ（配列番号：２０）を有する第三のポリペプチド結合ドメイン領域を含み、および該重鎖の可変領域が、アミノ酸配列ＳＤＦＡＷＮ（配列番号：１５）を有する第一のポリペプチド結合ドメイン領域、式ＩＸに示すアミノ酸配列：
ＹＩＳＹＳＧＮＴＲＹＸａａ９ＰＳＬＫＳ （ＩＸ）
（式中、Ｘａａ９は、非荷電極性Ｒ基を有するアミノ酸残基である。）、
に対応するアミノ酸配列を有する第二のポリペプチド結合領域、およびアミノ酸配列ＶＴＡＧＲＧＦＰＹ（配列番号：１７）を有する第三のポリペプチド結合ドメイン領域を含むものである抗体。
【請求項８３】
ヒト野生型ＥＧＦＲの残基２８７−３０２の配列（配列番号：１４）内のエピトープに結合する、請求項８２に記載の単離された抗体。
【請求項８４】
Ｘａａ９が、ＮまたはＱである、請求項８２に記載の単離された抗体。
【請求項８５】
前記結合ドメイン領域が、ヒト抗体フレームワークによって保持される、請求項８２に記載の単離された抗体。
【請求項８６】
前記ヒト抗体フレームワークが、ヒトＩｇＧ１抗体フレームワークである、請求項８５に記載の単離された抗体。
【請求項１】
ＥＧＦＲ遺伝子の増幅を有する腫瘍（該腫瘍の細胞は、ＥＧＦＲ遺伝子の多数のコピーを含有する。）におけるおよびトランケートされたバージョンのＥＧＦＲ受容体ｄｅ２−７を発現する腫瘍におけるＥＧＦＲに結合することができる単離された抗体であって、配列番号：１３のアミノ酸配列から成るｄｅ２−７接合点ペプチドに結合しないものであり；ヒト野生型ＥＧＦＲの残基２８７−３０２の配列（配列番号：１４）内のエピトープに結合するものであり；ならびに配列番号：２に示すアミノ酸配列を有する重鎖可変領域配列を含まず、および配列番号：４に示すアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域配列を含まないものである抗体。
【請求項２】
重鎖および軽鎖を含み、該重鎖が配列番号：４２に示すアミノ酸配列を有し、および該軽鎖が配列番号：４７に示すアミノ酸配列を有する、請求項１に記載の単離された抗体。
【請求項３】
重鎖および軽鎖を含み、該重鎖が配列番号：１２９に示すアミノ酸配列を有し、および該軽鎖が配列番号：１３４に示すアミノ酸配列を有する、請求項１に記載の単離された抗体。
【請求項４】
重鎖および軽鎖を含み、該重鎖が配列番号：２２に示すアミノ酸配列を有し、および該軽鎖が配列番号：２７に示すアミノ酸配列を有する、請求項１に記載の単離された抗体。
【請求項５】
重鎖および軽鎖を含み、該重鎖が配列番号：３２に示すアミノ酸配列を有し、および該軽鎖が配列番号：３７に示すアミノ酸配列を有する、請求項１に記載の単離された抗体。
【請求項６】
重鎖および軽鎖を含み、該重鎖の可変領域が、配列番号：４４、４５および４６に示すアミノ酸配列に高相同性のアミノ酸配列を有するポリペプチド結合ドメイン領域を含む、請求項１に記載の単離された抗体。
【請求項７】
重鎖および軽鎖を含み、該軽鎖の可変領域が、配列番号：４９、５０および５１に示すアミノ酸配列に高相同性のアミノ酸配列を有するポリペプチド結合ドメイン領域を含む、請求項１に記載の単離された抗体。
【請求項８】
重鎖および軽鎖を含み、該重鎖の可変領域が、配列番号：１３０、１３１および１３２に示すアミノ酸配列に高相同性のアミノ酸配列を有するポリペプチド結合ドメイン領域を含む、請求項１に記載の単離された抗体。
【請求項９】
重鎖および軽鎖を含み、該軽鎖の可変領域が、配列番号：１３５、１３６および１３７に示すアミノ酸配列に高相同性のアミノ酸配列を有するポリペプチド結合ドメイン領域を含む、請求項１に記載の単離された抗体。
【請求項１０】
重鎖および軽鎖を含み、該重鎖の可変領域が、配列番号：２３、２４および２５に示すアミノ酸配列に高相同性のアミノ酸配列を有するポリペプチド結合ドメイン領域を含む、請求項１に記載の単離された抗体。
【請求項１１】
重鎖および軽鎖を含み、該軽鎖の可変領域が、配列番号：２８、２９および３０に示すアミノ酸配列に高相同性のアミノ酸配列を有するポリペプチド結合ドメイン領域を含む、請求項１に記載の単離された抗体。
【請求項１２】
重鎖および軽鎖を含み、該重鎖の可変領域が、配列番号：３３、３４および３５に示すアミノ酸配列に高相同性のアミノ酸配列を有するポリペプチド結合ドメイン領域を含む、請求項１に記載の単離された抗体。
【請求項１３】
重鎖および軽鎖を含み、該軽鎖の可変領域が、配列番号：３８、３９および４０に示すアミノ酸配列に高相同性のアミノ酸配列を有するポリペプチド結合ドメイン領域を含む、請求項１に記載の単離された抗体。
【請求項１４】
抗体Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖ断片、ダイアボディー、トリアボディーまたはテトラボディーの形態である、請求項１に記載の単離された抗体。
【請求項１５】
検出可能または機能性標識をさらに含む、請求項１に記載の単離された抗体。
【請求項１６】
前記検出可能または機能性標識が、共有結合で付けられる薬物である、請求項１５に記載の単離された抗体。
【請求項１７】
前記標識が、放射標識である、請求項１５に記載の単離された抗体。
【請求項１８】
ＰＥＧ化されている、請求項１に記載の単離された抗体。
【請求項１９】
請求項１に記載の単離された抗体をコードする配列を含む単離された核酸。
【請求項２０】
請求項１に記載の単離された抗体を調製する方法であって、該抗体の発現を引き起こす条件下で核酸を発現させること、および該抗体を回収することを含むものである方法。
【請求項２１】
ヒト患者における腫瘍の治療方法であって、請求項１に記載の単離された抗体の有効量を該患者に投与することを含むものである方法。
【請求項２２】
請求項１の単離された抗体を含む、ＥＧＦＲが異常発現されるまたはＥＧＦＲがトランケートされたタンパク質形態で発現される腫瘍の診断のためのキット。
【請求項２３】
試薬および／または使用のための説示をさらに含む、請求項２２に記載の、ＥＧＦＲが異常発現されるまたはＥＧＦＲがトランケートされたタンパク質形態で発現される主要の診断のためのキット。
【請求項２４】
請求項１に記載の単離された抗体を含む医薬組成物。
【請求項２５】
医薬的に許容されるビヒクル、担体または希釈剤をさらに含む、請求項２４に記載の医薬組成物。
【請求項２６】
化学療法薬、抗ＥＧＦＲ抗体、放射免疫療法薬およびこれらの組み合わせから成る群より選択される抗癌剤をさらに含む、請求項２４に記載の医薬組成物。
【請求項２７】
前記化学療法薬が、チロシンキナーゼ阻害剤、リン酸化カスケード阻害剤、翻訳後調節物質、細胞成長または分裂阻害剤（例えば、抗有糸分裂剤）、シグナル伝達阻害剤およびこれらの組み合わせから成る群より選択される、請求項２６に記載の医薬組成物。
【請求項２８】
前記チロシンキナーゼ阻害剤が、ＡＧ１４７８、ＺＤ１８３９、ＳＴＩ５７１、ＯＳＩ−７７４、ＳＵ−６６６８およびこれらの組み合わせから成る群より選択される、請求項２７に記載の医薬組成物。
【請求項２９】
前記抗ＥＧＦＲ抗体が、抗ＥＧＦＲ抗体５２８、２２５、ＳＣ−０３、ＤＲ８．３、Ｌ８Ａ４、Ｙ１０、ＩＣＲ６２、ＡＢＸ−ＥＧＦおよびこれらの組み合わせから成る群より選択される、請求項２６に記載の医薬組成物。
【請求項３０】
請求項２４に記載の医薬組成物の治療有効量を哺乳動物に投与することを含む、哺乳動物における癌を予防および／または治療する方法。
【請求項３１】
請求項２４に記載の医薬組成物の治療有効量を哺乳動物に投与することを含む、哺乳動物において異常発現ＥＧＦＲを生産する脳内在性の癌の治療のための方法。
【請求項３２】
請求項３０に記載の哺乳動物における異常発現ＥＧＦＲを生産する脳内在性の癌を治療するための方法であって、該脳内在性の癌が、膠芽腫、髄芽腫、髄膜腫、新生物性星状細胞種および新生物性動静脈奇形から成る群より選択されるものである方法。
【請求項３３】
請求項１の単離された抗体をコードする組換えＤＮＡ分子で形質転換された単細胞宿主。
【請求項３４】
Ｅ．コリ（Ｅ．ｃｏｌｉ）、シュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）、バチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）、ストレプトマイセス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ）、酵母、ＣＨＯ、ＹＢ／２０、ＮＳＯ、ＳＰ２／０、Ｒ１．１、Ｂ−Ｗ、Ｌ−Ｍ、ＣＯＳ １、ＣＯＳ ７、ＢＳＣ１、ＢＳＣ４０およびＢＭＴ１０細胞、植物細胞、昆虫細胞ならびにヒト細胞（組織培養でのもの）から成る群より選択される、請求項１の単離された抗体をコードする組換えＤＮＡ分子で形質転換された単細胞宿主。
【請求項３５】
増幅されたＥＧＦＲ、ｄｅ２−７ＥＧＦＲ、または高マンノースグリコシル化を有するＥＧＦＲの存在を検出するための方法であって、前記ＥＧＦＲが、（ａ）増幅されたＥＧＦＲ、ｄｅ２−７ＥＧＦＲ、または高マンノースグリコシル化を有するＥＧＦＲの存在が疑われる哺乳動物からの生体サンプルと請求項１の単離された抗体とを、該ＥＧＦＲの該単離された抗体への結合を可能ならしめる条件下で接触させること；および（ｂ）前記サンプルからの前記ＥＧＦＲと前記単離された抗体との間で結合が発生したかどうかを検出することによって測定され、結合の検出が、前記サンプル中の前記ＥＧＦＲの存在または活性を示すものである方法。
【請求項３６】
哺乳動物における癌を検出するための方法であって、請求項３５の方法に従ってＥＧＦＲの存在または検出することを含み、ＥＧＦＲの存在の検出が、該哺乳動物における腫瘍または癌の存在を示すものである方法。
【請求項３７】
ＥＧＦＲ遺伝子の増幅を有する腫瘍（該腫瘍の細胞は、ＥＧＦＲ遺伝子の多数のコピーを含有する。）におけるおよびトランケートされたバージョンのＥＧＦＲ受容体ｄｅ２−７を発現する腫瘍におけるＥＧＦＲに結合することができる単離された抗体であって、重鎖および軽鎖を含み、前記重鎖が配列番号：４２に示すアミノ酸配列に実質的に相同性であるアミノ酸配列を有する、および前記軽鎖が配列番号：４７に示すアミノ酸配列に実質的に相同性であるアミノ酸配列を有するものである抗体。
【請求項３８】
請求項３７に記載の単離された抗体であって、前記抗体の前記重鎖が、配列番号：４２に示すアミノ酸配列を含み、および前記抗体の前記軽鎖が配列番号：４７に示すアミノ酸配列を含む、抗体。
【請求項３９】
ＥＧＦＲ遺伝子の増幅を有する腫瘍（該腫瘍の細胞は、ＥＧＦＲ遺伝子の多数のコピーを含有する。）におけるおよびトランケートされたバージョンのＥＧＦＲ受容体ｄｅ２−７を発現する腫瘍におけるＥＧＦＲに結合することができる単離された抗体であって、重鎖および軽鎖を含み、該重鎖の可変領域が、配列番号：４４、４５および４６に示すアミノ酸配列に高相同性のアミノ酸配列を有するポリペプチド結合ドメイン領域を含み、ならびに該軽鎖の可変領域が、配列番号：４９、５０および５１に示すアミノ酸配列に高相同性のアミノ酸配列を有するポリペプチド結合ドメインを含むものである抗体。
【請求項４０】
ＥＧＦＲ遺伝子の増幅を有する腫瘍（該腫瘍の細胞は、ＥＧＦＲ遺伝子の多数のコピーを含有する。）におけるおよびトランケートされたバージョンのＥＧＦＲ受容体ｄｅ２−７を発現する腫瘍におけるＥＧＦＲに結合することができる単離された抗体であって、重鎖および軽鎖を含み、該重鎖が配列番号：１２９に示すアミノ酸配列に実質的に相同性であるアミノ酸配列を有し、および該軽鎖が、配列番号：１３４に示すアミノ酸配列に実質的に相同性であるアミノ酸配列を有するものである抗体。
【請求項４１】
請求項４０に記載の単離された抗体であって、前記抗体の前記重鎖が、配列番号：１２９に示すアミノ酸配列を含み、および前記抗体の前記軽鎖が、配列番号：１３４に示すアミノ酸配列を含む、抗体。
【請求項４２】
ＥＧＦＲ遺伝子の増幅を有する腫瘍（該腫瘍の細胞は、ＥＧＦＲ遺伝子の多数のコピーを含有する。）におけるおよびトランケートされたバージョンのＥＧＦＲ受容体ｄｅ２−７を発現する腫瘍におけるＥＧＦＲに結合することができる単離された抗体であって、重鎖および軽鎖を含み、該重鎖の可変領域が、配列番号：１３０、１３１および１３２に示すアミノ酸配列に高相同性のアミノ酸配列を有するポリペプチド結合ドメイン領域を含み、ならびに該軽鎖の可変領域が、配列番号：１３５、１３６および１３８に示すアミノ酸配列に高相同性のアミノ酸配列を有するポリペプチド結合ドメインを含むものである抗体。
【請求項４３】
ＥＧＦＲ遺伝子の増幅を有する腫瘍（該腫瘍の細胞は、ＥＧＦＲ遺伝子の多数のコピーを含有する。）におけるおよびトランケートされたバージョンのＥＧＦＲ受容体ｄｅ２−７を発現する腫瘍におけるＥＧＦＲに結合することができる単離された抗体であって、重鎖および軽鎖を含み、該重鎖が、配列番号：２２に示すアミノ酸配列に実質的に相同性であるアミノ酸配列を有し、および該軽鎖が、配列番号：２７に示すアミノ酸配列に実質的に相同性であるアミノ酸配列を有するものである抗体。
【請求項４４】
請求項４３に記載の単離された抗体であって、前記抗体の前記重鎖が、配列番号：２２に示すアミノ酸配列を含み、および前記抗体の前記軽鎖が、配列番号：２７に示すアミノ酸配列を含む、抗体。
【請求項４５】
ＥＧＦＲ遺伝子の増幅を有する腫瘍（該腫瘍の細胞は、ＥＧＦＲ遺伝子の多数のコピーを含有する。）におけるおよびトランケートされたバージョンのＥＧＦＲ受容体ｄｅ２−７を発現する腫瘍におけるＥＧＦＲに結合することができる単離された抗体であって、重鎖および軽鎖を含み、該重鎖の可変領域が、配列番号：２３、２４および２５に示すアミノ酸配列に高相同性のアミノ酸配列を有するポリペプチド結合ドメイン領域を含み、ならびに該軽鎖の可変領域が、配列番号：２８、２９および３０に示すアミノ酸配列に高相同性のアミノ酸配列を有するポリペプチド結合ドメインを含むものである抗体。
【請求項４６】
ＥＧＦＲ遺伝子の増幅を有する腫瘍（該腫瘍の細胞は、ＥＧＦＲ遺伝子の多数のコピーを含有する。）におけるおよびトランケートされたバージョンのＥＧＦＲ受容体ｄｅ２−７を発現する腫瘍におけるＥＧＦＲに結合することができる単離された抗体であって、重鎖および軽鎖を含み、該重鎖が、配列番号：３２に示すアミノ酸配列に実質的に相同性であるアミノ酸配列を有し、および該軽鎖が、配列番号：３７に示すアミノ酸配列に実質的に相同性であるアミノ酸配列を有するものである抗体。
【請求項４７】
請求項４６に記載の単離された抗体であって、前記抗体の前記重鎖が、配列番号：３２に示すアミノ酸配列を含み、および前記抗体の前記軽鎖が、配列番号：３７に示すアミノ酸配列を含む、抗体。
【請求項４８】
ＥＧＦＲ遺伝子の増幅を有する腫瘍（該腫瘍の細胞は、ＥＧＦＲ遺伝子の多数のコピーを含有する。）におけるおよびトランケートされたバージョンのＥＧＦＲ受容体ｄｅ２−７を発現する腫瘍におけるＥＧＦＲに結合することができる単離された抗体であって、重鎖および軽鎖を含み、該重鎖の可変領域が、配列番号：３３、３４および３５に示すアミノ酸配列に高相同性のアミノ酸配列を有するポリペプチド結合ドメイン領域を含み、ならびに該軽鎖の可変領域が、配列番号：３８、３９および４０に示すアミノ酸配列に高相同性のアミノ酸配列を有するポリペプチド結合ドメインを含むものである抗体。
【請求項４９】
ＥＧＦＲ遺伝子の増幅を有する腫瘍（該腫瘍の細胞は、ＥＧＦＲ遺伝子の多数のコピーを含有する。）におけるおよびトランケートされたバージョンのＥＧＦＲ受容体ｄｅ２−７を発現する腫瘍におけるＥＧＦＲに結合することができる単離された抗体であって、
配列番号：１３のアミノ酸配列から成るｄｅ２−７接合点ペプチドに結合しないものであり；
ヒト野生型ＥＧＦＲの残基２８７−３０２の配列（配列番号：１４）内のエピトープに結合するものであり；
軽鎖および重鎖を含み、該軽鎖の可変領域が、
式Ｉに示すアミノ酸配列：
ＨＳＳＱＤＩＸａａ１ＳＮＩＧ （Ｉ）
（式中、Ｘａａ１は、非荷電極性Ｒ基を有するアミノ酸残基である。）
に対応するアミノ酸配列を有する第一のポリペプチド結合ドメイン領域、
式ＩＩに示すアミノ酸配列：
ＨＧＴＮＬＸａａ２Ｄ （ＩＩ）
（式中、Ｘａａ２は、荷電極性Ｒ基を有するアミノ酸残基である。）
に対応するアミノ酸配列を有する第二のポリペプチド結合ドメイン領域、および
式ＩＩＩに示すアミノ酸配列：
ＶＱＹＸａａ３ＱＦＰＷＴ （ＩＩＩ）
（式中、Ｘａａ３は、Ａ、Ｇ、およびＡまたはＧが保存的に置換されているアミノ酸残基から成る群より選択される。）
に対応するアミノ酸配列を有する第三のポリペプチド結合ドメイン領域を含み、ならびに該重鎖の可変領域が、
式ＶＩに示すアミノ酸配列：
ＳＤＸａａ４ＡＷＮ （ＩＶ）
（式中、Ｘａａ４は、Ｆ、Ｙ、およびＦまたはＹが保存的に置換されているアミノ酸残基から成る群より選択される。）
に対応するアミノ酸配列を有する第一のポリペプチド結合ドメイン領域、
式Ｖ、式ＶＩまたは式ＶＩＩに示すアミノ酸配列：
ＹＩＳＹＳＧＮＴＲＹＸａａ５ＰＳＬＫＳ （Ｖ）
（式中、Ｘａａ５は、非荷電極性Ｒ基を有するアミノ酸残基である。）、
ＹＩＳＹＳＸａａ６ＮＴＲＹＮＰＳＬＫＳ （ＶＩ）
（式中、Ｘａａ６は、Ｇ、Ａ、およびＧまたはＡが保存的に置換されているアミノ酸残基から成る群より選択される。）
ＹＩＳＹＳＧＮＴＲＹＮＰＳＬＸａａ７Ｓ （ＶＩＩ）
（式中、Ｘａａ７は、塩基性アミノ酸残基である。）
に対応するアミノ酸配列を有する第二のポリペプチド結合領域、および
式ＶＩＩＩに示すアミノ酸配列：
Ｘａａ８ＴＡＧＲＧＦＰＹ （ＶＩＩＩ）
（式中、Ｘａａ８は、Ｖ、Ａ、およびＶまたはＡが保存的に置換されているアミノ酸残基から成る群より選択される。）
に対応するアミノ酸配列を有する第三のポリペプチド結合ドメイン領域
を含むものであり；
ならびに配列番号：２に示すアミノ酸配列を有する重鎖可変領域配列を含まず、および配列番号：４に示すアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域配列を含まないものである抗体。
【請求項５０】
Ｘａａ１が、Ｎであり；Ｘａａ２が、Ｄであり；Ｘａａ３が、Ａであり；Ｘａａ４が、Ｆであり；Ｘａａ５が、非荷電極性Ｒ基を有するアミノ酸残基であり；Ｘａａ６が、Ｇであり；Ｘａａ７が、Ｋであり；およびＸａａ８が、Ｖである、請求項４９に記載の単離された抗体。
【請求項５１】
Ｘａａ５が、ＮまたはＱである、請求項５０に記載の単離された抗体。
【請求項５２】
Ｘａａ１が、ＮまたはＳである、請求項４９に記載の抗体。
【請求項５３】
Ｘａａ２が、ＤまたはＥである、請求項４９に記載の抗体。
【請求項５４】
Ｘａａ３が、ＡまたはＧである、請求項４９に記載の抗体。
【請求項５５】
Ｘａａ４が、ＦまたはＹである、請求項４９に記載の抗体。
【請求項５６】
Ｘａａ５が、ＮまたはＱである、請求項４９に記載の抗体。
【請求項５７】
Ｘａａ６が、ＧまたはＡであり、およびＸａａ７が、独立してＫまたはＲである、請求項４９に記載の抗体。
【請求項５８】
Ｘａａ８が、ＶまたはＡである、請求項４９に記載の抗体。
【請求項５９】
抗体Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖ断片、ダイアボディー、トリアボディーまたはテトラボディーの形態である、請求項４９に記載の単離された抗体。
【請求項６０】
検出可能または機能性標識をさらに含む、請求項４９に記載の単離された抗体。
【請求項６１】
前記検出可能または機能性標識が、共有結合で付けられる薬物である、請求項６０に記載の単離された抗体。
【請求項６２】
前記標識が、放射標識である、請求項６０に記載の単離された抗体。
【請求項６３】
ＰＥＧ化されている、請求項４９に記載の単離された抗体。
【請求項６４】
請求項４９の単離された抗体をコードする配列を含む単離された核酸。
【請求項６５】
請求項４９に記載の単離された抗体を調製する方法であって、該抗体の発現を引き起こす条件下で核酸を発現させること、および該抗体を回収することを含むものである方法。
【請求項６６】
ヒト患者における腫瘍の治療方法であって、請求項４９に記載の単離された抗体の有効量を該患者に投与することを含むものである方法。
【請求項６７】
請求項４９の単離された抗体を含む、ＥＧＦＲが異常発現されるまたはＥＧＦＲがトランケートされたタンパク質形態で発現される腫瘍の診断のためのキット。
【請求項６８】
試薬および／または使用のための説明書をさらに含む、請求項６７に記載の、ＥＧＦＲが異常発現されるまたはＥＧＦＲがトランケートされたタンパク質形態で発現される腫瘍の診断のためのキット。
【請求項６９】
請求項４９に記載の単離された抗体を含む医薬組成物。
【請求項７０】
医薬的に許容されるビヒクル、担体または希釈剤をさらに含む、請求項６９に記載の医薬組成物。
【請求項７１】
化学療法薬、抗ＥＧＦＲ抗体、放射免疫療法薬およびこれらの組み合わせから成る群より選択される抗癌剤をさらに含む、請求項６９に記載の医薬組成物。
【請求項７２】
前記化学療法薬が、チロシンキナーゼ阻害剤、リン酸化カスケード阻害剤、翻訳後調節物質、細胞成長または分裂阻害剤（例えば、抗有糸分裂剤）、シグナル伝達阻害剤およびこれらの組み合わせから成る群より選択される、請求項７１に記載の医薬組成物。
【請求項７３】
前記チロシンキナーゼ阻害剤が、ＡＧ１４７８、ＺＤ１８３９、ＳＴＩ５７１、ＯＳＩ−７７４、ＳＵ−６６６８およびこれらの組み合わせから成る群より選択される、請求項７２に記載の医薬組成物。
【請求項７４】
前記抗ＥＧＦＲ抗体が、抗ＥＧＦＲ抗体５２８、２２５、ＳＣ−０３、ＤＲ８．３、Ｌ８Ａ４、Ｙ１０、ＩＣＲ６２、ＡＢＸ−ＥＧＦおよびこれらの組み合わせから成る群より選択される、請求項７１に記載の医薬組成物。
【請求項７５】
請求項６９に記載の医薬組成物の治療有効量を哺乳動物に投与することを含む、哺乳動物における癌を予防および／または治療する方法。
【請求項７６】
請求項６９に記載の医薬組成物の治療有効量を哺乳動物に投与することを含む、哺乳動物における異常発現ＥＧＦＲを生産する脳内在性の癌の治療のための方法。
【請求項７７】
請求項７６に記載の哺乳動物における異常発現ＥＧＦＲを生産する脳内在性の癌を治療するための方法であって、該脳内在性の癌が、膠芽腫、髄芽腫、髄膜腫、新生物性星状細胞種および新生物性動静脈奇形から成る群より選択されるものである方法。
【請求項７８】
請求項４９の単離された抗体をコードする組換えＤＮＡ分子で形質転換された単細胞宿主。
【請求項７９】
Ｅ．コリ（Ｅ．ｃｏｌｉ）、シュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）、バチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）、ストレプトマイセス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ）、酵母、ＣＨＯ、ＹＢ／２０、ＮＳＯ、ＳＰ２／０、Ｒ１．１、Ｂ−Ｗ、Ｌ−Ｍ、ＣＯＳ １、ＣＯＳ ７、ＢＳＣ１、ＢＳＣ４０およびＢＭＴ１０細胞、植物細胞、昆虫細胞ならびにヒト細胞（組織培養でのもの）から成る群より選択される、請求項４９の単離された抗体をコードする組換えＤＮＡ分子で形質転換された単細胞宿主。
【請求項８０】
増幅されたＥＧＦＲ、ｄｅ２−７ＥＧＦＲ、または高マンノースグリコシル化を有するＥＧＦＲの存在を検出するための方法であって、前記ＥＧＦＲが、（ａ）増幅されたＥＧＦＲ、ｄｅ２−７ＥＧＦＲ、または高マンノースグリコシル化を有するＥＧＦＲの存在が疑われる哺乳動物からの生体サンプルと請求項４９に記載の単離された抗体とを、該ＥＧＦＲの該単離された抗体への結合を可能ならしめる条件下で接触させること；および（ｂ）前記サンプルからの前記ＥＧＦＲと前記単離された抗体との間で結合が発生したかどうかを検出することによって測定され、結合の検出が、前記サンプル中の前記ＥＧＦＲの存在または活性を示すものである方法。
【請求項８１】
哺乳動物における癌を検出するための方法であって、請求項８０の方法に従ってＥＧＦＲの存在または検出することを含み、ＥＧＦＲの存在または検出が、該哺乳動物における腫瘍または癌の存在を示すものである方法。
【請求項８２】
ＥＧＦＲ遺伝子の増幅を有する腫瘍（該腫瘍の細胞は、ＥＧＦＲ遺伝子の多数のコピーを含有する。）におけるおよびトランケートされたバージョンのＥＧＦＲ受容体ｄｅ２−７を発現する腫瘍におけるＥＧＦＲに結合することができる単離された抗体であって、配列番号：１３のアミノ酸配列から成るｄｅ２−７接合点ペプチドに結合しないものであり；ヒト野生型ＥＧＦＲの残基２７３−５０１の配列内のエピトープに結合するものであり；軽鎖および重鎖を含み、該軽鎖の可変領域が、アミノ酸配列ＨＳＳＱＤＩＮＳＮＩＧ（配列番号：１８）を有する第一のポリペプチド結合ドメイン領域、アミノ酸配列ＨＧＴＮＬＤＤ（配列番号：１９）を有する第二のポリペプチド結合ドメイン領域、およびアミノ酸配列ＶＱＹＡＱＦＰＷＴ（配列番号：２０）を有する第三のポリペプチド結合ドメイン領域を含み、および該重鎖の可変領域が、アミノ酸配列ＳＤＦＡＷＮ（配列番号：１５）を有する第一のポリペプチド結合ドメイン領域、式ＩＸに示すアミノ酸配列：
ＹＩＳＹＳＧＮＴＲＹＸａａ９ＰＳＬＫＳ （ＩＸ）
（式中、Ｘａａ９は、非荷電極性Ｒ基を有するアミノ酸残基である。）、
に対応するアミノ酸配列を有する第二のポリペプチド結合領域、およびアミノ酸配列ＶＴＡＧＲＧＦＰＹ（配列番号：１７）を有する第三のポリペプチド結合ドメイン領域を含むものである抗体。
【請求項８３】
ヒト野生型ＥＧＦＲの残基２８７−３０２の配列（配列番号：１４）内のエピトープに結合する、請求項８２に記載の単離された抗体。
【請求項８４】
Ｘａａ９が、ＮまたはＱである、請求項８２に記載の単離された抗体。
【請求項８５】
前記結合ドメイン領域が、ヒト抗体フレームワークによって保持される、請求項８２に記載の単離された抗体。
【請求項８６】
前記ヒト抗体フレームワークが、ヒトＩｇＧ１抗体フレームワークである、請求項８５に記載の単離された抗体。
【図１】
【図２−１】
【図２−２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図１３】
【図１４】
【図１５】
【図１６】
【図１７】
【図１８】
【図１９】
【図２０】
【図２１】
【図２２】
【図２３】
【図２４−１】
【図２４−２】
【図２５】
【図２６】
【図２７】
【図２８】
【図２９】
【図３０】
【図３１】
【図３２】
【図３３】
【図３４】
【図３５】
【図３６】
【図３７】
【図３８】
【図３９】
【図４０】
【図４１】
【図４２−１】
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【図４３】
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【図４６】
【図４７】
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【図４９−１】
【図４９−２】
【図４９−３】
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【図４９−５】
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【図５０−１】
【図５０−２】
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【図５０−６】
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【図５１−１】
【図５１−２】
【図５２−１】
【図５２−２】
【図５３】
【図５４−１】
【図５４−２】
【図５４−３】
【図５４−４】
【図５４−５】
【図５４−６】
【図５４−７】
【図５４−８】
【図５４−９】
【図５５】
【図５６−１】
【図５６−２】
【図５７−１】
【図５７−２】
【図５８−１】
【図５８−２】
【図５９】
【図６０】
【図６１】
【図６２】
【図６３】
【図６４−１】
【図６４−２】
【図６４−３】
【図６４−４】
【図６４−５】
【図６４−６】
【図６４−７】
【図６４−８】
【図６４−９】
【図６４−１０】
【図６４−１１】
【図６４−１２】
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【図６４−１５】
【図６４−１６】
【図６４−１７】
【図６４−１８】
【図６４−１９】
【図６４−２０】
【図６４−２１】
【図６４−２２】
【図６４−２３】
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【図６４−２９】
【図６４−３０】
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【図６５】
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【図６９】
【図７０】
【図７１】
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【図７６−１】
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【図７７−１】
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【図７８】
【図７９】
【図８０】
【図８１】
【図８２】
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【図８５】
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【図８９】
【図９０】
【図９１】
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【図９３】
【図９４】
【図９５】
【図９６】
【図９７】
【図９８】
【図２−１】
【図２−２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図１３】
【図１４】
【図１５】
【図１６】
【図１７】
【図１８】
【図１９】
【図２０】
【図２１】
【図２２】
【図２３】
【図２４−１】
【図２４−２】
【図２５】
【図２６】
【図２７】
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【図２９】
【図３０】
【図３１】
【図３２】
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【図３４】
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【図３８】
【図３９】
【図４０】
【図４１】
【図４２−１】
【図４２−２】
【図４３】
【図４４】
【図４５】
【図４６】
【図４７】
【図４８】
【図４９−１】
【図４９−２】
【図４９−３】
【図４９−４】
【図４９−５】
【図４９−６】
【図５０−１】
【図５０−２】
【図５０−３】
【図５０−４】
【図５０−５】
【図５０−６】
【図５０−７】
【図５１−１】
【図５１−２】
【図５２−１】
【図５２−２】
【図５３】
【図５４−１】
【図５４−２】
【図５４−３】
【図５４−４】
【図５４−５】
【図５４−６】
【図５４−７】
【図５４−８】
【図５４−９】
【図５５】
【図５６−１】
【図５６−２】
【図５７−１】
【図５７−２】
【図５８−１】
【図５８−２】
【図５９】
【図６０】
【図６１】
【図６２】
【図６３】
【図６４−１】
【図６４−２】
【図６４−３】
【図６４−４】
【図６４−５】
【図６４−６】
【図６４−７】
【図６４−８】
【図６４−９】
【図６４−１０】
【図６４−１１】
【図６４−１２】
【図６４−１３】
【図６４−１４】
【図６４−１５】
【図６４−１６】
【図６４−１７】
【図６４−１８】
【図６４−１９】
【図６４−２０】
【図６４−２１】
【図６４−２２】
【図６４−２３】
【図６４−２４】
【図６４−２５】
【図６４−２６】
【図６４−２７】
【図６４−２８】
【図６４−２９】
【図６４−３０】
【図６４−３１】
【図６５】
【図６６】
【図６７】
【図６８】
【図６９】
【図７０】
【図７１】
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【図７４】
【図７５】
【図７６−１】
【図７６−２】
【図７７−１】
【図７７−２】
【図７８】
【図７９】
【図８０】
【図８１】
【図８２】
【図８３】
【図８４】
【図８５】
【図８６】
【図８７】
【図８８】
【図８９】
【図９０】
【図９１】
【図９２】
【図９３】
【図９４】
【図９５】
【図９６】
【図９７】
【図９８】
【公表番号】特表２０１２−５１８０３９（Ｐ２０１２−５１８０３９Ａ）
【公表日】平成２４年８月９日（２０１２．８．９）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１１−５５１１７８（Ｐ２０１１−５５１１７８）
【出願日】平成２２年２月１７日（２０１０．２．１７）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２０１０／０２４４０７
【国際公開番号】ＷＯ２０１０／０９６４３４
【国際公開日】平成２２年８月２６日（２０１０．８．２６）
【出願人】（５１１２００８１２）ルードヴィッヒ インスティテュート フォー キャンサー リサーチ・リミテツド (1)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２４年８月９日（２０１２．８．９）
【国際特許分類】
【出願日】平成２２年２月１７日（２０１０．２．１７）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２０１０／０２４４０７
【国際公開番号】ＷＯ２０１０／０９６４３４
【国際公開日】平成２２年８月２６日（２０１０．８．２６）
【出願人】（５１１２００８１２）ルードヴィッヒ インスティテュート フォー キャンサー リサーチ・リミテツド (1)
【Ｆターム（参考）】
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