美白剤
【課題】新規な美白剤を提供する。
【解決手段】米紅麹を含有する美白剤は、チロシナーゼ活性阻害作用およびメラニン生成抑制作用を有する。よって、この美白剤を化粧品や食品に含有することで、優れた美白効果を発揮する化粧品、食品を得ることができる。この美白剤は、米紅麹をそのまま、または種々の成分を加えて、化粧品、食品などとして利用することができる。
【解決手段】米紅麹を含有する美白剤は、チロシナーゼ活性阻害作用およびメラニン生成抑制作用を有する。よって、この美白剤を化粧品や食品に含有することで、優れた美白効果を発揮する化粧品、食品を得ることができる。この美白剤は、米紅麹をそのまま、または種々の成分を加えて、化粧品、食品などとして利用することができる。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、米紅麹を含有する美白剤に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
皮膚の色は、メラニンに代表される着色成分の表皮および真皮内における種類や量によって決まるが、様々な外的・内的因子によって制御されている。これらの因子によってメラニンの過剰な生成が行われると、局所的な色素沈着、シミ、ソバカス等を引き起こし、美容上の大きな問題となる。このメラニンの生成はメラノサイトによるものと考えられている。すなわち、メラニンの生成は、紫外線やホルモン分泌、周囲の角化細胞から放出される刺激因子によって、メラノサイトが活性化されて促されることとなる。
【０００３】
また、紫外線や睡眠不足、疲労などによってチロシナーゼが活性化されると、このチロシナーゼによって、必須アミノ酸であるチロシンがドーパキノンとなり、ドーパキノンの酵素的または非酵素的酸化作用によりメラニンの生成を促されることとなる。
【０００４】
そのため、シミやソバカス等の美容上の問題を解決する美白剤では、「メラニンの生成を抑制すること」および「チロシナーゼ活性を阻害すること」が重要である。このような中、美白剤としての新素材が種々開発されている。（例えば特許文献１〜５）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特開２００８−５０２９２号公報
【特許文献２】特開２００５−２８９８８０号公報
【特許文献３】特開２００５−１２００５１号公報
【特許文献４】特許第３７４７０５３号公報
【特許文献５】特開２００２−２５５７８４号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
ここで、美白剤の多様化が進む背景においては、すでに美白剤として知られている素材以外にも「メラニンの生成抑制」および「チロシナーゼ活性阻害」を実現する、新たな素材を含有した美白剤の提供が望まれていた。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
この期待に答え、本発明は、「メラニンの生成抑制」および「チロシナーゼ活性阻害」を実現する新たな素材を含有した美白剤を提供するものである。すなわち、本発明は、米紅麹を含有することを特徴とする美白剤である。また、本発明は好ましくは前記米紅麹が、メラニン生成抑制作用およびチロシナーゼ活性阻害作用を有することを特徴とする美白剤である。さらには、前記美白剤を含有することを特徴とする美白用化粧品である。
【発明の効果】
【０００８】
本発明によれば、メラニン生成抑制作用およびチロシナーゼ活性阻害作用を有する新たな素材を含有した美白剤、すなわち、米紅麹を含有した美白剤を得ることができる。なお、本発明の形態に関しては特に限定されるものではなく、米紅麹をそのまま、または種々の成分を加えて、化粧品、食品などとして用いることができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００９】
以下、本発明の実施形態について説明する。なお、本発明は、下述の実施形態に限定して解釈されるものではなく、特許請求の範囲における記載の範囲内で種々の変更が可能である。
【００１０】
本発明で用いられる米紅麹は、米紅麹に加え、米紅麹の破砕物、米紅麹の乾燥物、または米紅麹粉末から抽出処理を行って得られる抽出物が含まれる。米紅麹抽出物の形状は問わず、液状、ペースト状、および粉状のいずれであってもよい。本発明で用いられる米紅麹は、γ−アミノ酪酸などを含有し、好ましくは、γ−アミノ酪酸を２５ｍｇ／１００ｇ以上含有し得る。例えば、グンゼ株式会社製の紅麹エキスパウダー１Ｅ−Ｄを用いることができる。
【００１１】
本発明の美白剤はそのまま、または通常用いられる種々の成分を加えて、化粧品、食品などとして用いることができる。必要に応じて、当業者が通常用いる原料および添加剤などを添加することができる。
【００１２】
化粧品類として本発明で使用する美白剤は、ローション剤、乳剤、ゲル剤、クリーム剤、軟膏剤などの種々の形態に加工され得る。また、化粧品、医薬品、医薬部外品などとして利用される。具体的には、化粧水、化粧クリーム、乳液、クリーム、パック、ヘアトニック、ヘアクリーム、シャンプー、ヘアリンス、トリートメント、ボディシャンプー、洗顔剤、石鹸、ファンデーション、育毛剤、水性軟膏、スプレーなどとして利用できる。
【００１３】
本発明の美白剤は、種々の成分（例えば賦形剤、増量剤、結合剤、増粘剤、乳化剤、着色料、香料、食品添加物、調味料）と混合して食品として利用できる。そしてこれらは、必要に応じて、ハードカプセル、ソフトカプセルのようなカプセル剤、錠剤、もしくは丸剤、または粉末状、顆粒状、飴状などの形状に成形され得る。また、これらは、その形状または好みに応じて、そのまま食されても良いし、水、湯、牛乳、豆乳、茶、ジュースなどに溶いて飲んでも良い。
【００１４】
本発明の美白剤に含有される米紅麹の配合量としては、美白効果を有する限り、用いる剤型、使用対象等の様々の条件に応じて、広範囲でその配合量を適宜設定できる。好ましくは、外用剤中に米紅麹が乾燥質量換算で０．００００１質量％〜２０質量％、より好ましくは０．００１質量％〜１０質量％の割合で含有される。
【００１５】
本発明の米紅麹を含有する美白剤は、例えば米糠に比べて美白効果が優れている。
【００１６】
本発明の美白剤を美白用化粧品として用いた場合は、米紅麹の有する美白作用を増強する目的あるいは化粧品の使用目的に応じて、種々の薬効成分、保湿剤、界面活性剤などの助剤を含有してもよい。これらの助剤は、単独で用いても、２種以上を組み合わせて用いてもよい。
【００１７】
上述の助剤の１種である薬効成分としては、例えば、ビタミン類、ポリフェノール類、細胞賦活剤およびリン脂質などが挙げられる。ビタミン類としては、レチノール、レチナール、レチノイン酸、３−デヒドロレチノール、３−デヒドロレチナール、３−デヒドロレチノイン酸などのビタミンＡ類；α−カロテン、β−カロテン、γ−カロテン、クリプトキサンチンなどのプロビタミンＡ類、チアミン（ビタミンＢ１）、リボフラビン（ビタミンＢ２）、ピリドキシン、ピリドキサール、ピリドキサミン（以上ビタミンＢ６）、コバラミン（ビタミンＢ１２）、ニコチン酸、ニコチンアミド、パントテン酸、ビオチン（ビタミンＨ）、葉酸（ビタミンＭ）などのビタミンＢ群類、アスコルビン酸（ビタミンＣ）；エルゴカルシフェロール（ビタミンＤ２）、コレカルシフェロール（ビタミンＤ３）などのビタミンＤ類、７−デヒドロコレステロール、エルゴステロールなどのプロビタミンＤ類、α−トコフェロール、β−トコフェロール、γ−トコフェロール、δ−トコフェロール、α−トコトリエノール、β−トコトリエノール、γ−トコトリエノール、δ−トコトリエノールなどのビタミンＥ類、フィロキノン（ビタミンＫ１）、メナキノン（ビタミンＫ２）、メナジオン（ビタミンＫ３）などのビタミンＫ類などが挙げられる。また、上述のビタミン類は、動植物、藻類、微生物などの天然物由来のもの、および化学反応または酵素反応を利用した合成物のいずれも用いることができる。さらに、これらを含有する天然物の抽出物をそのまま用いてもよい。
【００１８】
上述のポリフェノール類としては、カテコール、カテキン、エピカテキン、ガロカテキン、エピガロカテキン、ガロカテキンガラート、エピガロカテキンガラート、タンニン酸、ハマメリタンニン（１，５−ジガロイルハマメロース）、プロアントシアニジン、カフェー酸誘導体、没食子酸、ピロガロールタンニン、カテコールタンニンなどが挙げられる。これらのポリフェノールを含有する茶抽出物、ブドウ種子抽出物、松樹皮抽出物、甘藷茎葉抽出物なども、ポリフェノールとして用いることができる。
【００１９】
上述の細胞賦活剤としては、酵母抽出物、アスパラガス（Ａｓｐａｒａｇｕｓ）属植物、アボカド（Ｐｅｒｓｅａ ａｍｅｒｉｃａｎａ Ｍｉｌｌ．）、アロエ（Ａｌｏｅ）属植物、アンズ（Ｐｒｕｎｕｓ ａｒｍｅｎｉａｃａ Ｌ．ｖａｒ．ａｎｓｕ Ｍａｘｉｍ．）、イチョウ（Ｇｉｎｋｇｏ ｂｉｌｏｂａ Ｌ．）、イヌブナ（Ｆａｇｕｓ ｊａｐｏｎｉｃａ Ｍａｘｉｍ．）、オオニンニク（Ａｌｌｉｕｍ ｓａｔｉｖｕｍ Ｌ．ｆ．ｐｅｋｉｎｅｎｓｅ Ｍａｋｉｎｏ）、オタネニンジン（Ｐａｎａｘ ｇｉｎｓｅｎｇ Ｃ．Ａ．Ｍｅｙｅｒ）、カミツレ（Ｍａｔｒｉｃａｒｉａ ｃｈａｍｏｍｉｌｌａ Ｌ．）、キハダ（Ｐｈｅｌｌｏｄｅｎｄｒｏｎ ａｍｕｒｅｎｓｅ Ｒｕｐｒ．）およびＰｈｅｌｌｏｄｅｎｄｒｏｎ属植物、キュウリ（Ｃｕｃｕｍｉｓ ｓａｔｉｖｕｓ Ｌ．）、キンセンカ（Ｃａｌｅｎｄｕｌａ ａｒｖｅｎｓｉｓ Ｌ．）、シイタケ（Ｌｅｎｔｉｎｕｓ ｅｄｏｄｅｓ Ｓｉｎｇ．）、シナサルナシ（キウイ）（Ａｃｔｉｎｉｄｉａ ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ Ｐｌａｎｃｈ．）、スギナ（Ｅｑｕｉｓｅｔｕｍ ａｒｖｅｎｓｅ Ｌ．）、セイヨウトチノキ（Ａｅｓｃｕｌｕｓ ｈｉｐｐｏｃａｓｔａｎｕｍ Ｌ．）、セイヨウニンニク（Ａｌｌｉｕｍ ｓａｔｉｖｕｍ Ｌ．）、センブリ（Ｓｗｅｒｔｉａ ｊａｐｏｎｉｃａ Ｍａｋｉｎｏ）、タマサキツヅラフジ（Ｓｔｅｐｈａｎｉａ ｃｅｐｈａｒａｎｔｈａ Ｈａｙａｔａ）、チシャ（レタス）（Ｌａｃｔｕｃａ ｓａｔｉｖａ Ｌ．）、トウガラシ（Ｃａｐｓｉｃｕｍ ａｎｎｕｕｍ Ｌ．）、トウキンセンカ（Ｃａｌｅｎｄｕｌａ ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ Ｌ．）、トチノキ（Ａｅｓｃｕｌｕｓ ｔｕｒｂｉｎａｔａ Ｂｌｕｍｅ）、ニンジン（Ｄａｕｃｕｓ ｃａｒｏｔａ Ｌ．）、ブクリョウ（マツホド）（Ｐｏｒｉａ ｃｏｃｏｓ Ｗｏｌｆ）、ブドウ（Ｖｉｔｉｓ ｖｉｎｉｆｅｒａ Ｌ．）、ブナ（Ｆａｇｕｓ ｃｒｅｎａｔａ Ｂｌｕｍｅ）、ヘチマ（Ｌｕｆｆａ ｃｙｌｉｎｄｒｉｃａ Ｍ．Ｒｏｅｍｅｎ）、ベニバナ（Ｃａｒｔｈａｍｕｓ ｔｉｎｃｔｏｒｉｕｓ Ｌ．）、マンネンロウ（Ｒｏｓｍａｒｉｎｕｓ ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ Ｌ．）、ミカン（Ｃｉｔｒｕｓ）属植物、ムクロジ（Ｓａｐｉｎｄｕｓ ｍｕｋｕｒｏｓｓｉ Ｇａｅｒｔｎ．）、ムラサキ（Ｌｉｔｈｏｓｐｅｒｍｕｍ ｏｆｆｉｃｉｎａｌｅ Ｌ．ｖａｒ．ｅｒｙｔｈｒｏｒｈｉｚｏｎ Ｍａｘｉｍ．）、ユーカリノキ（Ｅｕｃａｌｙｐｔｕｓ）属植物、ユリ（Ｌｉｌｉｕｍ）属植物の各抽出物などが挙げられる。
【００２０】
上述のリン脂質としては、ホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルセリン、ホスファチジルイノシトール、ホスファチジルグリセロール、ジホスファチジルグリセロール（カルジオリピン）、ホスファチジン酸などのグリセロリン脂質、リゾホスファチジルコリン（リゾレシチン）、リゾホスファチジルエタノールアミン、リゾホスファチジルセリン、リゾホスファチジルイノシトール、リゾホスファチジルグリセロール、リゾホスファチジン酸などのリゾグリセロリン脂質、スフィンゴミエリンなどのスフィンゴリン脂質；およびこれらの水素添加物などが挙げられる。これらのリン脂質は、大豆、卵黄などの動植物由来のものでもよく、化学的もしくは酵素的方法により合成されたものでもよい。
【００２１】
上述の助剤の１種である保湿剤としては、例えば、コラーゲンまたはその分解物、大豆ペプチド、アミノ酸、ヒアルロン酸などのムコ多糖類、コンドロイチンなどのアミノ糖、トレハロースなどの糖類、および海藻類、アルギン酸、グルコマンナン、ペクチンなどの水溶性食物繊維が挙げられる。また、上述の助剤の１種である界面活性剤としては、例えば、レシチン、脂肪酸エステル、およびアミノ酸誘導体が挙げられる。
【００２２】
本発明の美白剤を用いた美白用化粧品は、例えば米糠を含有する美白用化粧品に比べて美白効果が優れていることが期待できる。
【実施例】
【００２３】
以下に本発明の実施例を説明するが、この実施例により本発明が限定解釈されないことは言うまでもない。
【００２４】
（実施例１）
実施例１では、本発明の美白剤に含有する米紅麹のメラニン生成抑制効果について説明する。実施例１ではメラニン生成阻害率の測定により、米紅麹がメラニン生成を抑制することを確認する。なお、比較対照としては、米糠エキスを用いた。以下、測定の具体的方法について説明する。
【００２５】
テオフィリン（シグマ製）を１３３．４ｍＭとなるようにＤＭＳＯ（和光純薬工業株式会社製）で溶解した。さらに、これを通常培地（１０％ウシ胎児血清含有Ｄ−ＭＥＭ：シグマ製）で２００倍に希釈し試験培地とした。
【００２６】
米紅麹は、０．５％ＤＭＳＯ含有通常培地で濃度調整し、０．２μｍのフィルターで濾過滅菌したものを用いた。陽性コントロールは、コウジ酸を蒸留水で溶解後、０．５％ＤＭＳＯ含有通常培地にて濃度調製後、０．２μｍのフィルターで濾過滅菌したものを用いた。陰性コントロールは、試験培地のみを０．２μｍのフィルターで濾過滅菌したものを用いた。
【００２７】
メラニン生成抑制作用の評価に用いたＢ１６メラノーマ細胞の調製は、以下のように行った。マウス由来の凍結Ｂ１６メラノーマ細胞（ＲＣＢ１２８３：独立行政法人理化学研究所）を通常培地を用いて融解し、６ウェルプレートに播種後、炭酸ガスインキュベーター内で培養した。さらに６ウェルプレートから７５ｃｍ２フラスコへ継代して、炭酸ガスインキュベーターで培養を継続した。その後、７５ｃｍ２フラスコから細胞を回収して６ウェルプレートに播種し、炭酸ガスインキュベーター内で２４時間培養を行った。上述のプレートより培地を除去後、被験物質を含んだ培地を１．５ｍｌ／ｗｅｌｌで添加し、更に試験培地を１．５ｍｌ／ｗｅｌｌで添加し３日間培養を行った。
【００２８】
培養後、各ウェルから細胞培養上清を除去し、２ｍｌのリン酸緩衝食塩水（以下ＰＢＳ（−））で細胞を１回洗浄後、ＰＢＳ（−）にて希釈したＴｒｙｐｓｉｎ−ＥＤＴＡ（シグマ製）を５００μｌ／ｗｅｌｌ添加した。室温で４〜５分間処理後、１０％ウシ胎児血清含有ＰＢＳ（−）を５００μｌ／ｗｅｌｌ添加してトリプシンの中和を行った。その後、ピペッティングにて細胞の剥離を行い、細胞を回収した。２，０００ｒｐｍで５分間遠心分離を行い、上清を除去した後、１ｍｌのＰＢＳ（−）を添加し懸濁後に、懸濁液６０μｌをサンプリングし、細胞数を計測した。残りの細胞は遠心分離を行い、上清を完全に除去した。細胞に１％ＴｒｉｔｏｎＸ−１００／１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液を２５０μｌ添加し、６５℃〜７５℃の恒温槽で６０分間加温後、振盪し完全に溶解した。
【００２９】
メラニン生成抑制作用は、以下のように評価した。得られたＢ１６メラノーマ細胞溶解液を９６ウェルプレートへ２００μｌ／ｗｅｌｌで移し、各物質の合成メラニン量を４９０ｎｍの波長で測定し、次の式から求められる阻害率で表した。
阻害率（％）＝１００−(被験物質の吸光度／陰性コントロールの吸光度)×１００
【００３０】
結果を表１に示す
【表１】
【００３１】
表１の結果から、米紅麹エキスは米糠エキスと比較して優れたメラニン生成抑制効果を有することがわかる。したがって、本発明に用いられる米紅麹は優れた美白効果を発揮し、美白剤として有用である。
【００３２】
（実施例２）
実施例２では、本発明の美白剤に含有する米紅麹のチロシナーゼ活性阻害について説明する。実施例２ではチロシナーゼ活性阻害の測定により、米紅麹がチロシナーゼ活性阻害を有することを確認する。なお、比較対照としては、米糠エキスを用いた。以下、測定の具体的方法について説明する。
【００３３】
まず、ｐＨ７．２の１／１５Ｍリン酸緩衝液（以下ＰＢ）を用いて米紅麹の濃度を調製し、サンプル溶液とした。また、同様にコウジ酸の濃度を調製し、陽性コントロールとした。
【００３４】
酵素溶液の調製は以下のように行った。チロシナーゼ（マッシュルーム由来、ＣＡＬＺＹＭＥ製）をＰＢを用いて５５０ｕｎｉｔｓ／ｍｌとなるように調製し、酵素溶液とした。
【００３５】
基質溶液の調製は以下のように行った。Ｌ−ＤＯＰＡ溶液（和光純薬工業株式会社製）をＰＢを用いて０．３ｍｇ／ｍｌとなるように調製し、基質溶液とした。
【００３６】
被験溶液の調製は以下のように行った。９６ウェルプレートにサンプル溶液を１００μｌ／ｗｅｌｌで添加した後、酵素溶液を１００μｌ／ｗｅｌｌで添加し、３７℃で１０分間インキュベートを行った。さらに、基質溶液を１００μｌ／ｗｅｌｌで添加し、３７℃で５分間インキュベートを行った後、４７５ｎｍにおける吸光度を測定した。
【００３７】
被験溶液ｂｌａｎｋの調製は以下のように行った。９６ウェルプレートにサンプル溶液を１００μｌ／ｗｅｌｌで添加した後、酵素溶液を１００μｌ／ｗｅｌｌで添加し、３７℃で１０分間インキュベートを行った。さらに、基質溶液に変えてＰＢを１００μｌ／ｗｅｌｌで添加し、３７℃で５分間インキュベートを行った後、４７５ｎｍにおける吸光度を測定した。
【００３８】
対照溶液の調製は以下のように行った。９６ウェルプレートにＰＢを１００μｌ／ｗｅｌｌで添加した後、酵素溶液を１００μｌ／ｗｅｌｌで添加し、３７℃で１０分間インキュベートを行った。さらに、基質溶液を１００μｌ／ｗｅｌｌで添加し、３７℃で５分間インキュベートを行った後、４７５ｎｍにおける吸光度を測定した。
【００３９】
対照溶液ｂｌａｎｋの調製は以下のように行った。９６ウェルプレートにＰＢを１００μｌ／ｗｅｌｌで添加した後、酵素溶液を１００μｌ／ｗｅｌｌで添加し、３７℃で１０分間インキュベートを行った。さらに、ＰＢを１００μｌ／ｗｅｌｌで添加し、３７℃で５分間インキュベートを行った後、４７５ｎｍにおける吸光度を測定した。
【００４０】
なお、チロシナーゼ活性阻害は次の式から求められる阻害率で表した。
阻害率（％）＝[１００−[（Ａ−Ｂ）／（Ｃ−Ｄ）]×１００]
Ａ：被験溶液の４７５ｎｍにおける吸光度。
Ｂ：被験溶液ｂｌａｎｋの４７５ｎｍにおける吸光度。
Ｃ：対照溶液の４７５ｎｍにおける吸光度。
Ｄ：対照溶液ｂｌａｎｋの４７５ｎｍにおける吸光度。
【００４１】
結果を表２に示す。
【表２】
【００４２】
表２の結果から、米紅麹エキスは米糠エキスと比較して優れたチロシナーゼ活性阻害効果を有することがわかる。したがって、本発明に用いられる米紅麹は優れた美白効果を発揮し、美白剤として有用である。
【００４３】
以上の通り、本発明の美白剤、すなわち米紅麹を含有する美白剤は、チロシナーゼ活性阻害作用およびメラニン生成抑制作用を有する。よって、この美白剤を化粧品や食品に含有することで、優れた美白効果を発揮する化粧品、食品を得ることができる。本発明の美白剤は、米紅麹をそのまま、または種々の成分を加えて、化粧品、食品などとして用いることができる。
【産業上の利用可能性】
【００４４】
米紅麹を含有する美白剤は、チロシナーゼ活性阻害作用およびメラニン生成抑制作用を有する。よって、この美白剤を化粧品や食品に含有することで、優れた美白効果を発揮する化粧品、食品を得ることができる。この美白剤は、米紅麹をそのまま、または種々の成分を加えて、化粧品、食品などとして利用することができる。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、米紅麹を含有する美白剤に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
皮膚の色は、メラニンに代表される着色成分の表皮および真皮内における種類や量によって決まるが、様々な外的・内的因子によって制御されている。これらの因子によってメラニンの過剰な生成が行われると、局所的な色素沈着、シミ、ソバカス等を引き起こし、美容上の大きな問題となる。このメラニンの生成はメラノサイトによるものと考えられている。すなわち、メラニンの生成は、紫外線やホルモン分泌、周囲の角化細胞から放出される刺激因子によって、メラノサイトが活性化されて促されることとなる。
【０００３】
また、紫外線や睡眠不足、疲労などによってチロシナーゼが活性化されると、このチロシナーゼによって、必須アミノ酸であるチロシンがドーパキノンとなり、ドーパキノンの酵素的または非酵素的酸化作用によりメラニンの生成を促されることとなる。
【０００４】
そのため、シミやソバカス等の美容上の問題を解決する美白剤では、「メラニンの生成を抑制すること」および「チロシナーゼ活性を阻害すること」が重要である。このような中、美白剤としての新素材が種々開発されている。（例えば特許文献１〜５）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特開２００８−５０２９２号公報
【特許文献２】特開２００５−２８９８８０号公報
【特許文献３】特開２００５−１２００５１号公報
【特許文献４】特許第３７４７０５３号公報
【特許文献５】特開２００２−２５５７８４号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
ここで、美白剤の多様化が進む背景においては、すでに美白剤として知られている素材以外にも「メラニンの生成抑制」および「チロシナーゼ活性阻害」を実現する、新たな素材を含有した美白剤の提供が望まれていた。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
この期待に答え、本発明は、「メラニンの生成抑制」および「チロシナーゼ活性阻害」を実現する新たな素材を含有した美白剤を提供するものである。すなわち、本発明は、米紅麹を含有することを特徴とする美白剤である。また、本発明は好ましくは前記米紅麹が、メラニン生成抑制作用およびチロシナーゼ活性阻害作用を有することを特徴とする美白剤である。さらには、前記美白剤を含有することを特徴とする美白用化粧品である。
【発明の効果】
【０００８】
本発明によれば、メラニン生成抑制作用およびチロシナーゼ活性阻害作用を有する新たな素材を含有した美白剤、すなわち、米紅麹を含有した美白剤を得ることができる。なお、本発明の形態に関しては特に限定されるものではなく、米紅麹をそのまま、または種々の成分を加えて、化粧品、食品などとして用いることができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００９】
以下、本発明の実施形態について説明する。なお、本発明は、下述の実施形態に限定して解釈されるものではなく、特許請求の範囲における記載の範囲内で種々の変更が可能である。
【００１０】
本発明で用いられる米紅麹は、米紅麹に加え、米紅麹の破砕物、米紅麹の乾燥物、または米紅麹粉末から抽出処理を行って得られる抽出物が含まれる。米紅麹抽出物の形状は問わず、液状、ペースト状、および粉状のいずれであってもよい。本発明で用いられる米紅麹は、γ−アミノ酪酸などを含有し、好ましくは、γ−アミノ酪酸を２５ｍｇ／１００ｇ以上含有し得る。例えば、グンゼ株式会社製の紅麹エキスパウダー１Ｅ−Ｄを用いることができる。
【００１１】
本発明の美白剤はそのまま、または通常用いられる種々の成分を加えて、化粧品、食品などとして用いることができる。必要に応じて、当業者が通常用いる原料および添加剤などを添加することができる。
【００１２】
化粧品類として本発明で使用する美白剤は、ローション剤、乳剤、ゲル剤、クリーム剤、軟膏剤などの種々の形態に加工され得る。また、化粧品、医薬品、医薬部外品などとして利用される。具体的には、化粧水、化粧クリーム、乳液、クリーム、パック、ヘアトニック、ヘアクリーム、シャンプー、ヘアリンス、トリートメント、ボディシャンプー、洗顔剤、石鹸、ファンデーション、育毛剤、水性軟膏、スプレーなどとして利用できる。
【００１３】
本発明の美白剤は、種々の成分（例えば賦形剤、増量剤、結合剤、増粘剤、乳化剤、着色料、香料、食品添加物、調味料）と混合して食品として利用できる。そしてこれらは、必要に応じて、ハードカプセル、ソフトカプセルのようなカプセル剤、錠剤、もしくは丸剤、または粉末状、顆粒状、飴状などの形状に成形され得る。また、これらは、その形状または好みに応じて、そのまま食されても良いし、水、湯、牛乳、豆乳、茶、ジュースなどに溶いて飲んでも良い。
【００１４】
本発明の美白剤に含有される米紅麹の配合量としては、美白効果を有する限り、用いる剤型、使用対象等の様々の条件に応じて、広範囲でその配合量を適宜設定できる。好ましくは、外用剤中に米紅麹が乾燥質量換算で０．００００１質量％〜２０質量％、より好ましくは０．００１質量％〜１０質量％の割合で含有される。
【００１５】
本発明の米紅麹を含有する美白剤は、例えば米糠に比べて美白効果が優れている。
【００１６】
本発明の美白剤を美白用化粧品として用いた場合は、米紅麹の有する美白作用を増強する目的あるいは化粧品の使用目的に応じて、種々の薬効成分、保湿剤、界面活性剤などの助剤を含有してもよい。これらの助剤は、単独で用いても、２種以上を組み合わせて用いてもよい。
【００１７】
上述の助剤の１種である薬効成分としては、例えば、ビタミン類、ポリフェノール類、細胞賦活剤およびリン脂質などが挙げられる。ビタミン類としては、レチノール、レチナール、レチノイン酸、３−デヒドロレチノール、３−デヒドロレチナール、３−デヒドロレチノイン酸などのビタミンＡ類；α−カロテン、β−カロテン、γ−カロテン、クリプトキサンチンなどのプロビタミンＡ類、チアミン（ビタミンＢ１）、リボフラビン（ビタミンＢ２）、ピリドキシン、ピリドキサール、ピリドキサミン（以上ビタミンＢ６）、コバラミン（ビタミンＢ１２）、ニコチン酸、ニコチンアミド、パントテン酸、ビオチン（ビタミンＨ）、葉酸（ビタミンＭ）などのビタミンＢ群類、アスコルビン酸（ビタミンＣ）；エルゴカルシフェロール（ビタミンＤ２）、コレカルシフェロール（ビタミンＤ３）などのビタミンＤ類、７−デヒドロコレステロール、エルゴステロールなどのプロビタミンＤ類、α−トコフェロール、β−トコフェロール、γ−トコフェロール、δ−トコフェロール、α−トコトリエノール、β−トコトリエノール、γ−トコトリエノール、δ−トコトリエノールなどのビタミンＥ類、フィロキノン（ビタミンＫ１）、メナキノン（ビタミンＫ２）、メナジオン（ビタミンＫ３）などのビタミンＫ類などが挙げられる。また、上述のビタミン類は、動植物、藻類、微生物などの天然物由来のもの、および化学反応または酵素反応を利用した合成物のいずれも用いることができる。さらに、これらを含有する天然物の抽出物をそのまま用いてもよい。
【００１８】
上述のポリフェノール類としては、カテコール、カテキン、エピカテキン、ガロカテキン、エピガロカテキン、ガロカテキンガラート、エピガロカテキンガラート、タンニン酸、ハマメリタンニン（１，５−ジガロイルハマメロース）、プロアントシアニジン、カフェー酸誘導体、没食子酸、ピロガロールタンニン、カテコールタンニンなどが挙げられる。これらのポリフェノールを含有する茶抽出物、ブドウ種子抽出物、松樹皮抽出物、甘藷茎葉抽出物なども、ポリフェノールとして用いることができる。
【００１９】
上述の細胞賦活剤としては、酵母抽出物、アスパラガス（Ａｓｐａｒａｇｕｓ）属植物、アボカド（Ｐｅｒｓｅａ ａｍｅｒｉｃａｎａ Ｍｉｌｌ．）、アロエ（Ａｌｏｅ）属植物、アンズ（Ｐｒｕｎｕｓ ａｒｍｅｎｉａｃａ Ｌ．ｖａｒ．ａｎｓｕ Ｍａｘｉｍ．）、イチョウ（Ｇｉｎｋｇｏ ｂｉｌｏｂａ Ｌ．）、イヌブナ（Ｆａｇｕｓ ｊａｐｏｎｉｃａ Ｍａｘｉｍ．）、オオニンニク（Ａｌｌｉｕｍ ｓａｔｉｖｕｍ Ｌ．ｆ．ｐｅｋｉｎｅｎｓｅ Ｍａｋｉｎｏ）、オタネニンジン（Ｐａｎａｘ ｇｉｎｓｅｎｇ Ｃ．Ａ．Ｍｅｙｅｒ）、カミツレ（Ｍａｔｒｉｃａｒｉａ ｃｈａｍｏｍｉｌｌａ Ｌ．）、キハダ（Ｐｈｅｌｌｏｄｅｎｄｒｏｎ ａｍｕｒｅｎｓｅ Ｒｕｐｒ．）およびＰｈｅｌｌｏｄｅｎｄｒｏｎ属植物、キュウリ（Ｃｕｃｕｍｉｓ ｓａｔｉｖｕｓ Ｌ．）、キンセンカ（Ｃａｌｅｎｄｕｌａ ａｒｖｅｎｓｉｓ Ｌ．）、シイタケ（Ｌｅｎｔｉｎｕｓ ｅｄｏｄｅｓ Ｓｉｎｇ．）、シナサルナシ（キウイ）（Ａｃｔｉｎｉｄｉａ ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ Ｐｌａｎｃｈ．）、スギナ（Ｅｑｕｉｓｅｔｕｍ ａｒｖｅｎｓｅ Ｌ．）、セイヨウトチノキ（Ａｅｓｃｕｌｕｓ ｈｉｐｐｏｃａｓｔａｎｕｍ Ｌ．）、セイヨウニンニク（Ａｌｌｉｕｍ ｓａｔｉｖｕｍ Ｌ．）、センブリ（Ｓｗｅｒｔｉａ ｊａｐｏｎｉｃａ Ｍａｋｉｎｏ）、タマサキツヅラフジ（Ｓｔｅｐｈａｎｉａ ｃｅｐｈａｒａｎｔｈａ Ｈａｙａｔａ）、チシャ（レタス）（Ｌａｃｔｕｃａ ｓａｔｉｖａ Ｌ．）、トウガラシ（Ｃａｐｓｉｃｕｍ ａｎｎｕｕｍ Ｌ．）、トウキンセンカ（Ｃａｌｅｎｄｕｌａ ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ Ｌ．）、トチノキ（Ａｅｓｃｕｌｕｓ ｔｕｒｂｉｎａｔａ Ｂｌｕｍｅ）、ニンジン（Ｄａｕｃｕｓ ｃａｒｏｔａ Ｌ．）、ブクリョウ（マツホド）（Ｐｏｒｉａ ｃｏｃｏｓ Ｗｏｌｆ）、ブドウ（Ｖｉｔｉｓ ｖｉｎｉｆｅｒａ Ｌ．）、ブナ（Ｆａｇｕｓ ｃｒｅｎａｔａ Ｂｌｕｍｅ）、ヘチマ（Ｌｕｆｆａ ｃｙｌｉｎｄｒｉｃａ Ｍ．Ｒｏｅｍｅｎ）、ベニバナ（Ｃａｒｔｈａｍｕｓ ｔｉｎｃｔｏｒｉｕｓ Ｌ．）、マンネンロウ（Ｒｏｓｍａｒｉｎｕｓ ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ Ｌ．）、ミカン（Ｃｉｔｒｕｓ）属植物、ムクロジ（Ｓａｐｉｎｄｕｓ ｍｕｋｕｒｏｓｓｉ Ｇａｅｒｔｎ．）、ムラサキ（Ｌｉｔｈｏｓｐｅｒｍｕｍ ｏｆｆｉｃｉｎａｌｅ Ｌ．ｖａｒ．ｅｒｙｔｈｒｏｒｈｉｚｏｎ Ｍａｘｉｍ．）、ユーカリノキ（Ｅｕｃａｌｙｐｔｕｓ）属植物、ユリ（Ｌｉｌｉｕｍ）属植物の各抽出物などが挙げられる。
【００２０】
上述のリン脂質としては、ホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルセリン、ホスファチジルイノシトール、ホスファチジルグリセロール、ジホスファチジルグリセロール（カルジオリピン）、ホスファチジン酸などのグリセロリン脂質、リゾホスファチジルコリン（リゾレシチン）、リゾホスファチジルエタノールアミン、リゾホスファチジルセリン、リゾホスファチジルイノシトール、リゾホスファチジルグリセロール、リゾホスファチジン酸などのリゾグリセロリン脂質、スフィンゴミエリンなどのスフィンゴリン脂質；およびこれらの水素添加物などが挙げられる。これらのリン脂質は、大豆、卵黄などの動植物由来のものでもよく、化学的もしくは酵素的方法により合成されたものでもよい。
【００２１】
上述の助剤の１種である保湿剤としては、例えば、コラーゲンまたはその分解物、大豆ペプチド、アミノ酸、ヒアルロン酸などのムコ多糖類、コンドロイチンなどのアミノ糖、トレハロースなどの糖類、および海藻類、アルギン酸、グルコマンナン、ペクチンなどの水溶性食物繊維が挙げられる。また、上述の助剤の１種である界面活性剤としては、例えば、レシチン、脂肪酸エステル、およびアミノ酸誘導体が挙げられる。
【００２２】
本発明の美白剤を用いた美白用化粧品は、例えば米糠を含有する美白用化粧品に比べて美白効果が優れていることが期待できる。
【実施例】
【００２３】
以下に本発明の実施例を説明するが、この実施例により本発明が限定解釈されないことは言うまでもない。
【００２４】
（実施例１）
実施例１では、本発明の美白剤に含有する米紅麹のメラニン生成抑制効果について説明する。実施例１ではメラニン生成阻害率の測定により、米紅麹がメラニン生成を抑制することを確認する。なお、比較対照としては、米糠エキスを用いた。以下、測定の具体的方法について説明する。
【００２５】
テオフィリン（シグマ製）を１３３．４ｍＭとなるようにＤＭＳＯ（和光純薬工業株式会社製）で溶解した。さらに、これを通常培地（１０％ウシ胎児血清含有Ｄ−ＭＥＭ：シグマ製）で２００倍に希釈し試験培地とした。
【００２６】
米紅麹は、０．５％ＤＭＳＯ含有通常培地で濃度調整し、０．２μｍのフィルターで濾過滅菌したものを用いた。陽性コントロールは、コウジ酸を蒸留水で溶解後、０．５％ＤＭＳＯ含有通常培地にて濃度調製後、０．２μｍのフィルターで濾過滅菌したものを用いた。陰性コントロールは、試験培地のみを０．２μｍのフィルターで濾過滅菌したものを用いた。
【００２７】
メラニン生成抑制作用の評価に用いたＢ１６メラノーマ細胞の調製は、以下のように行った。マウス由来の凍結Ｂ１６メラノーマ細胞（ＲＣＢ１２８３：独立行政法人理化学研究所）を通常培地を用いて融解し、６ウェルプレートに播種後、炭酸ガスインキュベーター内で培養した。さらに６ウェルプレートから７５ｃｍ２フラスコへ継代して、炭酸ガスインキュベーターで培養を継続した。その後、７５ｃｍ２フラスコから細胞を回収して６ウェルプレートに播種し、炭酸ガスインキュベーター内で２４時間培養を行った。上述のプレートより培地を除去後、被験物質を含んだ培地を１．５ｍｌ／ｗｅｌｌで添加し、更に試験培地を１．５ｍｌ／ｗｅｌｌで添加し３日間培養を行った。
【００２８】
培養後、各ウェルから細胞培養上清を除去し、２ｍｌのリン酸緩衝食塩水（以下ＰＢＳ（−））で細胞を１回洗浄後、ＰＢＳ（−）にて希釈したＴｒｙｐｓｉｎ−ＥＤＴＡ（シグマ製）を５００μｌ／ｗｅｌｌ添加した。室温で４〜５分間処理後、１０％ウシ胎児血清含有ＰＢＳ（−）を５００μｌ／ｗｅｌｌ添加してトリプシンの中和を行った。その後、ピペッティングにて細胞の剥離を行い、細胞を回収した。２，０００ｒｐｍで５分間遠心分離を行い、上清を除去した後、１ｍｌのＰＢＳ（−）を添加し懸濁後に、懸濁液６０μｌをサンプリングし、細胞数を計測した。残りの細胞は遠心分離を行い、上清を完全に除去した。細胞に１％ＴｒｉｔｏｎＸ−１００／１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液を２５０μｌ添加し、６５℃〜７５℃の恒温槽で６０分間加温後、振盪し完全に溶解した。
【００２９】
メラニン生成抑制作用は、以下のように評価した。得られたＢ１６メラノーマ細胞溶解液を９６ウェルプレートへ２００μｌ／ｗｅｌｌで移し、各物質の合成メラニン量を４９０ｎｍの波長で測定し、次の式から求められる阻害率で表した。
阻害率（％）＝１００−(被験物質の吸光度／陰性コントロールの吸光度)×１００
【００３０】
結果を表１に示す
【表１】
【００３１】
表１の結果から、米紅麹エキスは米糠エキスと比較して優れたメラニン生成抑制効果を有することがわかる。したがって、本発明に用いられる米紅麹は優れた美白効果を発揮し、美白剤として有用である。
【００３２】
（実施例２）
実施例２では、本発明の美白剤に含有する米紅麹のチロシナーゼ活性阻害について説明する。実施例２ではチロシナーゼ活性阻害の測定により、米紅麹がチロシナーゼ活性阻害を有することを確認する。なお、比較対照としては、米糠エキスを用いた。以下、測定の具体的方法について説明する。
【００３３】
まず、ｐＨ７．２の１／１５Ｍリン酸緩衝液（以下ＰＢ）を用いて米紅麹の濃度を調製し、サンプル溶液とした。また、同様にコウジ酸の濃度を調製し、陽性コントロールとした。
【００３４】
酵素溶液の調製は以下のように行った。チロシナーゼ（マッシュルーム由来、ＣＡＬＺＹＭＥ製）をＰＢを用いて５５０ｕｎｉｔｓ／ｍｌとなるように調製し、酵素溶液とした。
【００３５】
基質溶液の調製は以下のように行った。Ｌ−ＤＯＰＡ溶液（和光純薬工業株式会社製）をＰＢを用いて０．３ｍｇ／ｍｌとなるように調製し、基質溶液とした。
【００３６】
被験溶液の調製は以下のように行った。９６ウェルプレートにサンプル溶液を１００μｌ／ｗｅｌｌで添加した後、酵素溶液を１００μｌ／ｗｅｌｌで添加し、３７℃で１０分間インキュベートを行った。さらに、基質溶液を１００μｌ／ｗｅｌｌで添加し、３７℃で５分間インキュベートを行った後、４７５ｎｍにおける吸光度を測定した。
【００３７】
被験溶液ｂｌａｎｋの調製は以下のように行った。９６ウェルプレートにサンプル溶液を１００μｌ／ｗｅｌｌで添加した後、酵素溶液を１００μｌ／ｗｅｌｌで添加し、３７℃で１０分間インキュベートを行った。さらに、基質溶液に変えてＰＢを１００μｌ／ｗｅｌｌで添加し、３７℃で５分間インキュベートを行った後、４７５ｎｍにおける吸光度を測定した。
【００３８】
対照溶液の調製は以下のように行った。９６ウェルプレートにＰＢを１００μｌ／ｗｅｌｌで添加した後、酵素溶液を１００μｌ／ｗｅｌｌで添加し、３７℃で１０分間インキュベートを行った。さらに、基質溶液を１００μｌ／ｗｅｌｌで添加し、３７℃で５分間インキュベートを行った後、４７５ｎｍにおける吸光度を測定した。
【００３９】
対照溶液ｂｌａｎｋの調製は以下のように行った。９６ウェルプレートにＰＢを１００μｌ／ｗｅｌｌで添加した後、酵素溶液を１００μｌ／ｗｅｌｌで添加し、３７℃で１０分間インキュベートを行った。さらに、ＰＢを１００μｌ／ｗｅｌｌで添加し、３７℃で５分間インキュベートを行った後、４７５ｎｍにおける吸光度を測定した。
【００４０】
なお、チロシナーゼ活性阻害は次の式から求められる阻害率で表した。
阻害率（％）＝[１００−[（Ａ−Ｂ）／（Ｃ−Ｄ）]×１００]
Ａ：被験溶液の４７５ｎｍにおける吸光度。
Ｂ：被験溶液ｂｌａｎｋの４７５ｎｍにおける吸光度。
Ｃ：対照溶液の４７５ｎｍにおける吸光度。
Ｄ：対照溶液ｂｌａｎｋの４７５ｎｍにおける吸光度。
【００４１】
結果を表２に示す。
【表２】
【００４２】
表２の結果から、米紅麹エキスは米糠エキスと比較して優れたチロシナーゼ活性阻害効果を有することがわかる。したがって、本発明に用いられる米紅麹は優れた美白効果を発揮し、美白剤として有用である。
【００４３】
以上の通り、本発明の美白剤、すなわち米紅麹を含有する美白剤は、チロシナーゼ活性阻害作用およびメラニン生成抑制作用を有する。よって、この美白剤を化粧品や食品に含有することで、優れた美白効果を発揮する化粧品、食品を得ることができる。本発明の美白剤は、米紅麹をそのまま、または種々の成分を加えて、化粧品、食品などとして用いることができる。
【産業上の利用可能性】
【００４４】
米紅麹を含有する美白剤は、チロシナーゼ活性阻害作用およびメラニン生成抑制作用を有する。よって、この美白剤を化粧品や食品に含有することで、優れた美白効果を発揮する化粧品、食品を得ることができる。この美白剤は、米紅麹をそのまま、または種々の成分を加えて、化粧品、食品などとして利用することができる。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
米紅麹を含有することを特徴とする、美白剤。
【請求項２】
前記米紅麹が、メラニン生成抑制作用を有することを特徴とする、請求項１記載の美白剤。
【請求項３】
前記米紅麹が、チロシナーゼ活性阻害作用を有することを特徴とする、請求項１記載の美白剤。
【請求項４】
請求項１から３に記載の美白剤を含有することを特徴とする美白用化粧品。
【請求項１】
米紅麹を含有することを特徴とする、美白剤。
【請求項２】
前記米紅麹が、メラニン生成抑制作用を有することを特徴とする、請求項１記載の美白剤。
【請求項３】
前記米紅麹が、チロシナーゼ活性阻害作用を有することを特徴とする、請求項１記載の美白剤。
【請求項４】
請求項１から３に記載の美白剤を含有することを特徴とする美白用化粧品。
【公開番号】特開２０１１−２４１１５９（Ｐ２０１１−２４１１５９Ａ）
【公開日】平成２３年１２月１日（２０１１．１２．１）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１０−１１３４９３（Ｐ２０１０−１１３４９３）
【出願日】平成２２年５月１７日（２０１０．５．１７）
【出願人】（３９８０２８５０３）株式会社東洋新薬 (182)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２３年１２月１日（２０１１．１２．１）
【国際特許分類】
【出願日】平成２２年５月１７日（２０１０．５．１７）
【出願人】（３９８０２８５０３）株式会社東洋新薬 (182)
【Ｆターム（参考）】
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