【課題】架橋または固定化を必要とすることなく、インビボおよびインビトロの両方で、細胞表面レセプターに結合し得るだけでなく種々の型の異常な細胞（腫瘍細胞を含む）のアポトーシスを強力に誘導する、特異的な、ＴＲＡＩＬレセプターＤＲ５に対して選択的な抗体を提供する。また、この抗体を有効成分とする医薬組成物および抗腫瘍剤を提供する。
【解決手段】ＴＲＡＩＬレセプターＤＲ５を特異的に結合する精製抗体であって、ここで、該抗体は、その可溶性形態で、低濃度で、インビボおよびインビトロにおいて、ＤＲ５を発現する標的細胞において細胞死誘導活性を有し、かつ該抗体は、ＴＲＡＩＬレセプターＤＲ４、ＤｃＲ１又はＤｃＲ２と結合しない、精製抗体。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＴＲＡＩＬレセプターＤＲ５と特異的に結合し、ＴＲＡＩＬレセプターＤＲ４、ＤｃＲ１およびＤｃＲ２のいずれとも結合しない精製抗体であって、
この抗体の重鎖免疫グロブリンが、重鎖ＣＤＲ１、重鎖ＣＤＲ２および重鎖ＣＤＲ３を有する可変領域を含み、前記重鎖ＣＤＲ１は配列番号２５のアミノ酸残基１〜５からなり、前記重鎖ＣＤＲ２は配列番号２６のアミノ酸残基１〜１７からなり、前記重鎖ＣＤＲ３は配列番号２７のアミノ酸残基１〜１０からなること；および
この抗体の軽鎖免疫グロブリンが、軽鎖ＣＤＲ１、軽鎖ＣＤＲ２および軽鎖ＣＤＲ３を有する可変領域を含み、前記軽鎖ＣＤＲ１は配列番号２８のアミノ酸残基１〜１１からなり、前記軽鎖ＣＤＲ２は配列番号２９のアミノ酸残基１〜７からなり、前記軽鎖ＣＤＲ３は配列番号３０のアミノ酸残基１〜８からなること
を特徴とする抗体。
【請求項２】
前記抗体が、
（ａ） インビトロにおいて、その可溶性形態で、ＤＲ５発現標的細胞に、２．５μg/mlの抗体濃度で７０％以下の細胞生存率を示す細胞死誘導活性を有し、
（ｂ） インビボにおいて、ＤＲ５を発現する腫瘍細胞に対して殺腫瘍活性を有する、請求項１記載の抗体。
【請求項３】
正常肝細胞において有意な細胞死を誘導しない、請求項１又は２記載の抗体。
【請求項４】
ＤＲ５が、ヒトＤＲ５である、請求項１〜３のいずれか１項記載の抗体。
【請求項５】
ヒト化されている、請求項１〜４のいずれか１項記載の抗体。
【請求項６】
前記重鎖がヒト免疫グロブリンＧ１重鎖の定常領域を含み、前記軽鎖がヒト免疫グロブリンκ軽鎖の定常領域を含む、請求項１〜５のいずれか１項記載の記載の抗体。
【請求項７】
ＤＲ５発現標的細胞が、炎症滑膜細胞、癌細胞および活性化された免疫細胞のいずれかである、請求項２〜６のいずれか１項記載の抗体。
【請求項８】
細胞を有効量の抗体と接触させる工程を含む、細胞中のＮＦκＢレベルを上昇させる方法において使用するための、請求項１〜７のいずれか１項記載の抗体。
【請求項９】
標的細胞を治療量の抗体と接触させる工程を含む、ＤＲ５を発現する標的細胞の選択的な細胞死を誘導する方法において使用するための、請求項１〜７のいずれか１項記載の抗体。
【請求項１０】
標的細胞を治療量の抗体と接触させる工程を含む、ＤＲ５を発現する標的細胞の増殖を阻害する方法において使用するための、請求項１〜７のいずれか１項記載の抗体。
【請求項１１】
請求項１〜７のいずれか１項記載の抗体を有効成分とする医薬組成物。
【請求項１２】
請求項１〜７のいずれか１項記載の抗体を有効成分とする抗腫瘍剤。
【請求項１３】
容器内に請求項１〜７のいずれか１項記載の抗体を含む、アポトーシスを誘導するための商業的キット。
【請求項１４】
標的細胞において細胞死を選択的に誘導する方法であって、以下の工程：
（ａ）該標的細胞を、発現可能なＴＲＡＩＬレセプターＤＲ５をコードする核酸を含むベクターでトランスフェクトする工程；
（ｂ）ＴＲＡＩＬレセプターＤＲ５を該細胞上で発現させる工程；および
（ｃ）該細胞を、請求項１〜７のいずれか１項記載の抗体と接触させる工程
を包含する、方法。
【請求項１５】
請求項１〜７のいずれか１項記載の抗体を産生する方法であって、以下の工程：
（ａ）前記抗体の軽鎖免疫グロブリン、前記抗体の重鎖免疫グロブリンまたはその両方をコードする第一ベクターで宿主細胞を形質転換する工程；
（ｂ）必要に応じて、いずれかが該第一ベクターに存在しない場合、工程（ａ）の前記軽鎖または前記重鎖をコードする第二ベクターで前記宿主細胞を形質転換する工程；
（ｃ）前記形質転換された宿主細胞を、前記軽鎖免疫グロブリンおよび重鎖免疫グロブリンの発現を許容する条件下でインキュベートする工程；および
（ｄ）前記宿主細胞または前記宿主細胞の培地から前記抗体を単離する工程
を包含する、方法。
【請求項１６】
請求項１〜７のいずれか１項記載の抗体をコードする単離された核酸。
【請求項１７】
請求項１〜７のいずれか１項記載の抗体を製造するための、
重鎖ＣＤＲ１、重鎖ＣＤＲ２および重鎖ＣＤＲ３を有する可変領域を含み、前記重鎖ＣＤＲ１は配列番号２５のアミノ酸残基１〜５からなり、前記重鎖ＣＤＲ２は配列番号２６のアミノ酸残基１〜１７からなり、前記重鎖ＣＤＲ３は配列番号２７のアミノ酸残基１〜１０からなる重鎖免疫グロブリン；および／または
軽鎖ＣＤＲ１、軽鎖ＣＤＲ２および軽鎖ＣＤＲ３を有する可変領域を含み、前記軽鎖ＣＤＲ１は配列番号２８のアミノ酸残基１〜１１からなり、前記軽鎖ＣＤＲ２は配列番号２９のアミノ酸残基１〜７からなり、前記軽鎖ＣＤＲ３は配列番号３０のアミノ酸残基１〜８からなる軽鎖免疫グロブリン
をコードする単離された核酸。
【請求項１８】
請求項１６又は１７記載の核酸および前記核酸に作動可能に連結された調節エレメントを含む、ベクター。
【請求項１９】
請求項１８記載のベクターを含む、培養細胞。

【図１Ａ】

【図１Ｂ】

【図１Ｃ】

【図１Ｄ】

【図１Ｅ】

【図１Ｆ】

【図１Ｇ】

【図２Ａ】

【図２Ｂ】

【図２ＢＢ】

【図２Ｃ】

【図２Ｄ】

【図３ＡＡ】

【図３Ｂ】

【図３Ｃ】

【図４】

【図５】

【図６】

【図７Ａ】

【図７Ｂ】

【図８Ａ】

【図８Ｂ】

【図９】

【図１０Ａ】

【図１０Ｂ】

【図１０Ｃ】

【図１１Ａ】

【図１１Ｂ】

【図１２Ａ】

【図１２Ｂ】

【図１２Ｃ】

【図１２Ｄ】

【図１３Ａ】

【図１３Ｂ】

【図１３Ｃ】

【図１３Ｄ】

【図１３Ｅ】

【図１４】

【図１５】

【図１６】

【図１７】

【図１８】

【公開番号】特開２００９−５７０７（Ｐ２００９−５７０７Ａ）
【公開日】平成２１年１月１５日（２００９．１．１５）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００８−１９４９４８（Ｐ２００８−１９４９４８）
【出願日】平成２０年７月２９日（２００８．７．２９）
【分割の表示】特願２００６−３１５０９３（Ｐ２００６−３１５０９３）の分割
【原出願日】平成１３年５月２日（２００１．５．２）
【出願人】（５０４１６８２６０）ザ　ユーエービー　リサーチ　ファウンデーション (12)
【Ｆターム（参考）】