植物または植物の一部内でインフルエンザウイルス様の粒子（ＶＬＰ）を合成する方法が提供される。方法は、植物中でのＡ型／カリフォルニア／０４／０９のインフルエンザＨＡの発現およびサイズ排除クロマトグラフィーによる精製を含む。本発明は、Ａ型／カリフォルニア／０４／０９のインフルエンザＨＡタンパク質および植物脂質を含むＶＬＰも指向する。本発明は、Ａ型／カリフォルニア／０４／０９のインフルエンザＨＡをコードする核酸に加えてベクターも指向する。ＶＬＰは、インフルエンザワクチンを製剤化するために使用することができるか、または既存のワクチンを濃縮するために使用することができる。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
植物中で活性のある調節領域に作動可能に連結されたＡ型／カリフォルニア／０４／０９のインフルエンザ赤血球凝集素（ＨＡ）をコードするヌクレオチド配列を含む核酸。
【請求項２】
前記ＨＡが、天然のシグナルペプチドまたは非天然のシグナルペプチドを含む、請求項１に記載の核酸。
【請求項３】
前記非天然のシグナルペプチドが、タンパク質ジスルフィドイソメラーゼシグナルペプチドである、請求項２に記載の核酸。
【請求項４】
植物においてインフルエンザウイルス様粒子（ＶＬＰ）を産生する方法であって、
ａ）請求項１に記載の核酸を前記植物または前記植物の一部に導入する工程と、
ｂ）核酸の発現を可能にする条件下で、前記植物または前記植物の一部をインキュベーションして、それによってＶＬＰを産生する工程と
を含む方法。
【請求項５】
前記導入工程（工程ａ）において、前記核酸が一過性様式で植物中に導入される、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
前記導入工程（工程ａ）において、前記核酸が安定的であるように植物中に導入される、請求項４に記載の方法。
【請求項７】
ｃ）宿主を採取しＶＬＰを精製する工程
をさらに含む、請求項４に記載の方法。
【請求項８】
前記導入工程（工程ａ）において、１つまたは複数のシャペロンタンパク質をコードするヌクレオチド配列を含む第２の核酸が植物に導入される、請求項４に記載の方法。
【請求項９】
前記１つまたは複数のシャペロンタンパク質が、Ｈｓｐ４０およびＨｓｐ７０からなる群から選択される、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
植物においてインフルエンザウイルス様粒子（ＶＬＰ）を産生する方法であって、
ａ）請求項１に記載の核酸を含む植物または植物の一部を提供する工程と、
ｂ）核酸の発現を可能にする条件下で、前記植物または前記植物の一部をインキュベーションして、それによってＶＬＰを産生する工程と
を含む方法。
【請求項１１】
請求項１に記載の核酸を含む植物。
【請求項１２】
植物中で活性のある調節領域に作動可能に連結された１つまたは複数のシャペロンタンパク質をコードするヌクレオチド配列を含む核酸をさらに含む、請求項１１に記載の植物。
１５、前記１つまたは複数のシャペロンタンパク質が、Ｈｓｐ４０およびＨｓｐ７０からなる群から選択される、請求項１４に記載の植物。
【請求項１３】
Ａ型／カリフォルニア／０４／０９のインフルエンザウイルス赤血球凝集素（ＨＡ）タンパク質と、植物に由来する１つまたは複数の脂質とを含むウイルス様粒子（ＶＬＰ）。
【請求項１４】
効果的な用量の請求項１３に記載のＶＬＰと、薬学的に許容される担体とを含む組成物。
【請求項１５】
請求項１３に記載のウイルス様粒子を投与することを含む、インフルエンザウイルス感染に対する免疫を被験体において誘導する方法。
【請求項１６】
前記ウイルス様粒子が、経口的に、皮内に、鼻内に、筋肉内に、腹腔内に、静脈内に又は皮下に被験体に投与される、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
植物特異的Ｎ−グリカンまたは修飾されたＮ−グリカンを持つＡ型／カリフォルニア／０４／０９のインフルエンザウイルスＨＡを含むウイルス様粒子（ＶＬＰ）。
【請求項１８】
効果的な用量の請求項１７に記載のＶＬＰと、薬学的に許容される担体とを含む組成物。
【請求項１９】
請求項１８に記載の組成物を投与することを含む、インフルエンザウイルス感染に対する免疫を被験体において誘導する方法。
【請求項２０】
前記組成物が、経口的に、皮内に、鼻内に、筋肉内に、腹腔内に、静脈内に又は皮下に被験体に投与される、請求項１９に記載の方法。

【図１Ａ】

【図１Ｂ】

【図２Ａ】

【図２Ｂ】

【図３Ａ】

【図３Ｂ】

【図３Ｃ】

【図３Ｄ】

【図４Ａ】

【図４Ｂ】

【図５】

【図６】

【図７Ａ】

【図７Ｂ】

【図７Ｃ】

【図７Ｄ】

【図８Ａ】

【図８Ｂ】

【図９】

【図１０Ａ】

【図１０Ｂ】

【図１０Ｃ】

【図１０Ｄ】

【図１０Ｅ】

【図１０Ｆ】

【図１０Ｇ】

【図１０Ｈ】

【図１０Ｉ】

【図１０Ｊ】

【図１０Ｋ】

【図１０Ｌ】

【図１０Ｍ】

【図１０Ｎ】

【図１０Ｏ】

【図１０Ｐ】

【図１０Ｑ】

【図１０Ｒ】

【図１０Ｓ】

【図１０Ｔ】

【図１１】

【図１２】

【図１３】

【図１４Ａ】

【図１４Ｂ】

【図１５Ａ】

【図１５Ｂ】

【図１５Ｃ】

【図１５Ｄ】

【図１６】

【図１７】

【図１８】

【図１９】

【図２０Ａ】

【図２０Ｂ】

【図２１Ａ】

【図２１Ｂ】

【図２２Ａ】

【図２２Ｂ】

【図２３Ａ】

【図２３Ｂ】

【図２４】

【図２５Ａ】

【図２５Ｂ】

【図２６Ａ】

【図２６Ｂ】

【図２７Ａ】

【図２７Ｂ】

【図２７Ｃ】

【図２８】

【図２９】

【図３０】

【図３１】

【図３２】

【図３３】

【図３４】

【図３５】

【図３６】

【図３７】

【図３８】

【図３９】

【図４０Ａ】

【図４０Ｂ】

【図４１Ａ】

【図４１Ｂ】

【図４２Ａ】

【図４２Ｂ】

【図４３Ａ】

【図４３Ｂ】

【図４４Ａ】

【図４４Ｂ】

【図４５Ａ】

【図４５Ｂ】

【図４６】

【図４７】

【図４８ａ】

【図４８ｂ】

【図４９】

【図５０Ａ】

【図５０Ｂ】

【図５１】

【図５２】

【図５３】

【図５４】

【図５５】

【図５６】

【図５７】

【図５８】

【図５９】

【図６０】

【図６１】

【図６２】

【図６３】

【図６４】

【図６５】

【図６６】

【図６７】

【図６８】

【図６９】

【図７０】

【図７１】

【図７２】

【図７３】

【図７４】

【図７５】

【図７６】

【図７７】

【図７８】

【図７９】

【図８０】

【図８１】

【図８２】

【図８３】

【図８４】

【図８５Ａ】

【図８５Ｂ】

【図８６】

【図８７】

【図８８】

【図８９】

【図９０】

【図９１】

【図９２Ａ】

【図９２Ｂ】

【図９３】

【図９４】

【図９５】

【図９６】

【図９７】

【図９８】

【公表番号】特表２０１１−５２７１８０（Ｐ２０１１−５２７１８０Ａ）
【公表日】平成２３年１０月２７日（２０１１．１０．２７）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１１−５１６９３４（Ｐ２０１１−５１６９３４）
【出願日】平成２１年７月２日（２００９．７．２）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＣＡ２００９／０００９２６
【国際公開番号】ＷＯ２０１０／００３２２５
【国際公開日】平成２２年１月１４日（２０１０．１．１４）
【出願人】（５０２１２１３９５）メディカゴ　インコーポレイテッド (13)
【Ｆターム（参考）】