ＡＤＣＣ活性を増強させた抗体及びその製造方法
【課題】ADCC活性が増強された抗体及びその製造方法を提供することを課題とする。
【解決手段】本発明者らは、Genentech Incらの研究者らが行ったFc部分のアミノ酸変異をさらに発展させて、コンピューター検索からは導き出せない大幅な構造変化を伴う可能性のあるアミノ酸であるシステイン(Cys)へ変異させることでADCC活性の増強ができないか、検討を行った。本発明は、H鎖定常領域において、286又は298位のアミノ酸残をCysへ変更したヒト抗体を提供するものである。
【解決手段】本発明者らは、Genentech Incらの研究者らが行ったFc部分のアミノ酸変異をさらに発展させて、コンピューター検索からは導き出せない大幅な構造変化を伴う可能性のあるアミノ酸であるシステイン(Cys)へ変異させることでADCC活性の増強ができないか、検討を行った。本発明は、H鎖定常領域において、286又は298位のアミノ酸残をCysへ変更したヒト抗体を提供するものである。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
H鎖定常領域において、286又は298位の位置のアミノ酸残基がシステインに置換された抗体。
【請求項２】
H鎖定常領域がヒトCγ1、Cγ2、Cγ3、及びCγ4からなる群より選択されるいずれかの定常領域である、請求項１に記載の抗体。
【請求項３】
置換前と比較しADCC活性が上昇している、請求項１又は２のいずれかに記載の抗体。
【請求項４】
改善された安定性、溶解性またはFc受容体への結合親和性を有する、請求項１〜３のいずれかに記載の抗体。
【請求項５】
糖鎖が付与されている、請求項１〜４のいずれかに記載の抗体。
【請求項６】
エフェクター機能を改善するものである、請求項５に記載の抗体。
【請求項７】
FcγRI、FcγRII、FcγRIII、又はFcRnと結合する、請求項１〜６のいずれかに記載の抗体。
【請求項８】
ＡＬＣＡＭ、ＩＣＡＭ１、及びＥＧＦＲからなる群より選択される標的抗原に特異性を有する、請求項１〜７のいずれかに記載の抗体。
【請求項９】
下記（１）から（４）のいずれかに記載の抗体；
（１）ＣＤＲ１として配列番号：１２に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ２として配列番号：１３に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ３として配列番号：１４に記載のアミノ酸配列、およびＣＨとして配列番号：９１に記載のアミノ酸配列を有するＨ鎖を含む抗体、
（２）配列番号：９５に記載のアミノ酸配列を有するH鎖を含む抗体、
（３）ＣＤＲ１として配列番号：１２に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ２として配列番号：１３に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ３として配列番号：１４に記載のアミノ酸配列、およびＦｃ領域として配列番号：９７に記載のアミノ酸配列を有するＨ鎖を含む抗体、
（４）上記（１）、（２）または（３）のいずれかに記載のH鎖、および、下記（ｉ）または（ｉｉ）に記載のL鎖の対を有する抗体、
（ｉ）ＣＤＲ１として配列番号：４に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ２として配列番号：５に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ３として配列番号：６に記載のアミノ酸配列、およびＣＬとして配列番号：８に記載のアミノ酸配列を有するL鎖、
（ｉｉ）配列番号：９９に記載のアミノ酸配列を有するL鎖。
【請求項１０】
下記（１）から（４）のいずれかに記載の抗体；
（１）ＣＤＲ１として配列番号：１２に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ２として配列番号：１３に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ３として配列番号：１４に記載のアミノ酸配列、およびＣＨとして配列番号：９３に記載のアミノ酸配列を有するＨ鎖を含む抗体、
（２）配列番号：１０１に記載のアミノ酸配列を有するH鎖を含む抗体、
（３）ＣＤＲ１として配列番号：１２に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ２として配列番号：１３に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ３として配列番号：１４に記載のアミノ酸配列、およびＦｃ領域として配列番号：１０３に記載のアミノ酸配列を有するＨ鎖を含む抗体、
（４）上記（１）、（２）または（３）のいずれかに記載のH鎖、および、下記（ｉ）または（ｉｉ）に記載のL鎖の対を有する抗体、
（ｉ）ＣＤＲ１として配列番号：４に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ２として配列番号：５に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ３として配列番号：６に記載のアミノ酸配列、およびＣＬとして配列番号：８に記載のアミノ酸配列を有するL鎖、
（ｉｉ）配列番号：９９に記載のアミノ酸配列を有するL鎖。
【請求項１１】
下記（１）から（４）のいずれかに記載の抗体；
（１）ＣＤＲ１として配列番号：４２に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ２として配列番号：４３に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ３として配列番号：４４に記載のアミノ酸配列、およびＣＨとして配列番号：９１に記載のアミノ酸配列を有するＨ鎖を含む抗体、
（２）配列番号：１０５に記載のアミノ酸配列を有するH鎖を含む抗体、
（３）ＣＤＲ１として配列番号：４２に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ２として配列番号：４３に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ３として配列番号：４４に記載のアミノ酸配列、およびＦｃ領域として配列番号：１０７に記載のアミノ酸配列を有するＨ鎖を含む抗体、
（４）上記（１）、（２）または（３）のいずれかに記載のH鎖、および、下記（ｉ）または（ｉｉ）に記載のL鎖の対を有する抗体、
（ｉ）ＣＤＲ１として配列番号：３４に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ２として配列番号：３５に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ３として配列番号：３６に記載のアミノ酸配列、およびＣＬとして配列番号：３８に記載のアミノ酸配列を有するL鎖、
（ｉｉ）配列番号：１０９に記載のアミノ酸配列を有するL鎖。
【請求項１２】
下記（１）から（４）のいずれかに記載の抗体；
（１）ＣＤＲ１として配列番号：４２に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ２として配列番号：４３に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ３として配列番号：４４に記載のアミノ酸配列、およびＣＨとして配列番号：９３に記載のアミノ酸配列を有するＨ鎖を含む抗体、
（２）配列番号：１１１に記載のアミノ酸配列を有するH鎖を含む抗体、
（３）ＣＤＲ１として配列番号：４２に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ２として配列番号：４３に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ３として配列番号：４４に記載のアミノ酸配列、およびＦｃ領域として配列番号：１１３に記載のアミノ酸配列を有するＨ鎖を含む抗体、
（４）上記（１）、（２）または（３）のいずれかに記載のH鎖、および、下記（ｉ）または（ｉｉ）に記載のL鎖の対を有する抗体、
（ｉ）ＣＤＲ１として配列番号：３４に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ２として配列番号：３５に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ３として配列番号：３６に記載のアミノ酸配列、およびＣＬとして配列番号：３８に記載のアミノ酸配列を有するL鎖、
（ｉｉ）配列番号：１０９に記載のアミノ酸配列を有するL鎖。
【請求項１３】
下記（１）から（４）のいずれかに記載の抗体；
（１）ＣＤＲ１として配列番号：５７に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ２として配列番号：５８に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ３として配列番号：５９に記載のアミノ酸配列、およびＣＨとして配列番号：９１に記載のアミノ酸配列を有するＨ鎖を含む抗体、
（２）配列番号：１１５に記載のアミノ酸配列を有するH鎖を含む抗体、
（３）ＣＤＲ１として配列番号：５７に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ２として配列番号：５８に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ３として配列番号：５９に記載のアミノ酸配列、およびＦｃ領域として配列番号：１１７に記載のアミノ酸配列を有するＨ鎖を含む抗体、
（４）上記（１）、（２）または（３）のいずれかに記載のH鎖、および、下記（ｉ）または（ｉｉ）に記載のL鎖の対を有する抗体、
（ｉ）ＣＤＲ１として配列番号：４９に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ２として配列番号：５０に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ３として配列番号：５１に記載のアミノ酸配列、およびＣＬとして配列番号：５３に記載のアミノ酸配列を有するL鎖、
（ｉｉ）配列番号：１１９に記載のアミノ酸配列を有するL鎖。
【請求項１４】
下記（１）から（４）のいずれかに記載の抗体；
（１）ＣＤＲ１として配列番号：５７に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ２として配列番号：５８に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ３として配列番号：５９に記載のアミノ酸配列、およびＣＨとして配列番号：９３に記載のアミノ酸配列を有するＨ鎖を含む抗体、
（２）配列番号：１２１に記載のアミノ酸配列を有するH鎖を含む抗体、
（３）ＣＤＲ１として配列番号：５７に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ２として配列番号：５８に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ３として配列番号：５９に記載のアミノ酸配列、およびＦｃ領域として配列番号：１２３に記載のアミノ酸配列を有するＨ鎖を含む抗体、
（４）上記（１）、（２）または（３）のいずれかに記載のH鎖、および、下記（ｉ）または（ｉｉ）に記載のL鎖の対を有する抗体、
（ｉ）ＣＤＲ１として配列番号：４９に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ２として配列番号：５０に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ３として配列番号：５１に記載のアミノ酸配列、およびＣＬとして配列番号：５３に記載のアミノ酸配列を有するL鎖、
（ｉｉ）配列番号：１１９に記載のアミノ酸配列を有するL鎖。
【請求項１５】
下記（１）から（４）のいずれかに記載の抗体；
（１）ＣＤＲ１として配列番号：７１に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ２として配列番号：７２に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ３として配列番号：７３に記載のアミノ酸配列、およびＣＨとして配列番号：９１に記載のアミノ酸配列を有するＨ鎖を含む抗体、
（２）配列番号：１２５に記載のアミノ酸配列を有するH鎖を含む抗体、
（３）ＣＤＲ１として配列番号：７１に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ２として配列番号：７２に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ３として配列番号：７３に記載のアミノ酸配列、およびＦｃ領域として配列番号：１２７に記載のアミノ酸配列を有するＨ鎖を含む抗体、
（４）上記（１）、（２）または（３）のいずれかに記載のH鎖、および、下記（ｉ）または（ｉｉ）に記載のL鎖の対を有する抗体、
（ｉ）ＣＤＲ１として配列番号：６３に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ２として配列番号：６４に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ３として配列番号：６５に記載のアミノ酸配列、およびＣＬとして配列番号：６７に記載のアミノ酸配列を有するL鎖、
（ｉｉ）配列番号：１２９に記載のアミノ酸配列を有するL鎖。
【請求項１６】
下記（１）から（４）のいずれかに記載の抗体；
（１）ＣＤＲ１として配列番号：７１に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ２として配列番号：７２に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ３として配列番号：７３に記載のアミノ酸配列、およびＣＨとして配列番号：９３に記載のアミノ酸配列を有するＨ鎖を含む抗体、
（２）配列番号：１３１に記載のアミノ酸配列を有するH鎖を含む抗体、
（３）ＣＤＲ１として配列番号：７１に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ２として配列番号：７２に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ３として配列番号：７３に記載のアミノ酸配列、およびＦｃ領域として配列番号：１３３に記載のアミノ酸配列を有するＨ鎖を含む抗体、
（４）上記（１）、（２）または（３）のいずれかに記載のH鎖、および、下記（ｉ）または（ｉｉ）に記載のL鎖の対を有する抗体、
（ｉ）ＣＤＲ１として配列番号：６３に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ２として配列番号：６４に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ３として配列番号：６５に記載のアミノ酸配列、およびＣＬとして配列番号：６７に記載のアミノ酸配列を有するL鎖、
（ｉｉ）配列番号：１２９に記載のアミノ酸配列を有するL鎖。
【請求項１７】
下記（１）から（４）のいずれかに記載の抗体；
（１）ＣＤＲ１として配列番号：８６に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ２として配列番号：８７に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ３として配列番号：８８に記載のアミノ酸配列、およびＣＨとして配列番号：９１に記載のアミノ酸配列を有するＨ鎖を含む抗体、
（２）配列番号：１３５に記載のアミノ酸配列を有するH鎖を含む抗体、
（３）ＣＤＲ１として配列番号：８６に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ２として配列番号：８７に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ３として配列番号：８８に記載のアミノ酸配列、およびＦｃ領域として配列番号：１３７に記載のアミノ酸配列を有するＨ鎖を含む抗体、
（４）上記（１）、（２）または（３）のいずれかに記載のH鎖、および、下記（ｉ）または（ｉｉ）に記載のL鎖の対を有する抗体、
（ｉ）ＣＤＲ１として配列番号：７８に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ２として配列番号：７９に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ３として配列番号：８０に記載のアミノ酸配列、およびＣＬとして配列番号：８２に記載のアミノ酸配列を有するL鎖、
（ｉｉ）配列番号：１３９に記載のアミノ酸配列を有するL鎖。
【請求項１８】
下記（１）から（４）のいずれかに記載の抗体；
（１）ＣＤＲ１として配列番号：８６に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ２として配列番号：８７に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ３として配列番号：８８に記載のアミノ酸配列、およびＣＨとして配列番号：９３に記載のアミノ酸配列を有するＨ鎖を含む抗体、
（２）配列番号：１４１に記載のアミノ酸配列を有するH鎖を含む抗体、
（３）ＣＤＲ１として配列番号：８６に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ２として配列番号：８７に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ３として配列番号：８８に記載のアミノ酸配列、およびＦｃ領域として配列番号：１４３に記載のアミノ酸配列を有するＨ鎖を含む抗体、
（４）上記（１）、（２）または（３）のいずれかに記載のH鎖、および、下記（ｉ）または（ｉｉ）に記載のL鎖の対を有する抗体、
（ｉ）ＣＤＲ１として配列番号：７８に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ２として配列番号：７９に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ３として配列番号：８０に記載のアミノ酸配列、およびＣＬとして配列番号：８２に記載のアミノ酸配列を有するL鎖、
（ｉｉ）配列番号：１３９に記載のアミノ酸配列を有するL鎖。
【請求項１９】
H鎖定常領域において、286又は298位の位置のアミノ酸残基をシステインに置換する工程を含む、ADCC活性又は抗腫瘍活性が増強された抗体の製造方法。
【請求項２０】
以下の（ａ）及び（ｂ）の工程を含む、ADCC活性又は抗腫瘍活性が増強された抗体の製造方法；
（ａ）H鎖定常領域において、286又は298位の位置のアミノ酸残基がシステインに置換されたH鎖をコードするDNA、及びL鎖をコードするDNAを発現させる工程、
（ｂ）工程（ａ）の発現産物を回収する工程。
【請求項２１】
H鎖定常領域がヒトCγ1、Cγ2、Cγ3、及びCγ4からなる群より選択されるいずれかの定常領域である、請求項１９または２０に記載の方法。
【請求項２２】
請求項１〜１８のいずれかに記載の抗体および医薬的に許容し得る担体を含む、医薬組成物。
【請求項２３】
請求項１〜１８のいずれかの抗体を対象に投与する工程を含む、非ヒト哺乳動物の治療方法。
【請求項２４】
請求項１〜１８のいずれかの抗体をコードする核酸。
【請求項２５】
請求項２４に記載の核酸を含むベクター。
【請求項２６】
請求項２５に記載のベクターを有する宿主細胞。
【請求項２７】
請求項２５に記載のベクターを有する宿主生物。
【請求項２８】
H鎖定常領域において、286又は298位の位置のアミノ酸残基をシステインに置換する工程を含む、抗体のADCC活性又は抗腫瘍活性を増強する方法。
【請求項２９】
H鎖定常領域がヒトCγ1、Cγ2、Cγ3、及びCγ4からなる群より選択されるいずれかの定常領域である、請求項２６に記載の方法。
【請求項３０】
工程（ａ）の抗体のADCC活性又は抗腫瘍活性が増強されたか否かを判定する方法であって、工程（ｂ）で測定されたADCC活性又は抗腫瘍活性が、置換前の抗体のADCC活性又は抗腫瘍活性より高い場合に、工程（ａ）の抗体のADCC活性又は抗腫瘍活性が増強されたと判定される方法；
（ａ）ADCC活性又は抗腫瘍活性を有する抗体の変異体であって、H鎖定常領域における286又は298位の位置のアミノ酸残基がシステインに置換された抗体を提供する工程、および、
（ｂ）工程（ａ）の抗体のADCC活性又は抗腫瘍活性を測定する工程。
【請求項３１】
以下の（ａ）から（ｄ）の工程を含む、ADCC活性又は抗腫瘍活性が増強された抗体のスクリーニング方法；
（ａ）ADCC活性又は抗腫瘍活性を有する抗体を提供する工程、
（ｂ）工程（ａ）の抗体のH鎖定常領域における286又は298位の位置のアミノ酸残基をシステインに置換する工程、
（ｃ）工程（ｂ）で得られた抗体のADCC活性又は抗腫瘍活性が増強されたか否かを、請求項３０に記載の方法で判定する工程、
（ｄ）工程（ｃ）で、ADCC活性又は抗腫瘍活性が増強されたと判定された抗体を選択する工程。
【請求項１】
H鎖定常領域において、286又は298位の位置のアミノ酸残基がシステインに置換された抗体。
【請求項２】
H鎖定常領域がヒトCγ1、Cγ2、Cγ3、及びCγ4からなる群より選択されるいずれかの定常領域である、請求項１に記載の抗体。
【請求項３】
置換前と比較しADCC活性が上昇している、請求項１又は２のいずれかに記載の抗体。
【請求項４】
改善された安定性、溶解性またはFc受容体への結合親和性を有する、請求項１〜３のいずれかに記載の抗体。
【請求項５】
糖鎖が付与されている、請求項１〜４のいずれかに記載の抗体。
【請求項６】
エフェクター機能を改善するものである、請求項５に記載の抗体。
【請求項７】
FcγRI、FcγRII、FcγRIII、又はFcRnと結合する、請求項１〜６のいずれかに記載の抗体。
【請求項８】
ＡＬＣＡＭ、ＩＣＡＭ１、及びＥＧＦＲからなる群より選択される標的抗原に特異性を有する、請求項１〜７のいずれかに記載の抗体。
【請求項９】
下記（１）から（４）のいずれかに記載の抗体；
（１）ＣＤＲ１として配列番号：１２に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ２として配列番号：１３に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ３として配列番号：１４に記載のアミノ酸配列、およびＣＨとして配列番号：９１に記載のアミノ酸配列を有するＨ鎖を含む抗体、
（２）配列番号：９５に記載のアミノ酸配列を有するH鎖を含む抗体、
（３）ＣＤＲ１として配列番号：１２に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ２として配列番号：１３に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ３として配列番号：１４に記載のアミノ酸配列、およびＦｃ領域として配列番号：９７に記載のアミノ酸配列を有するＨ鎖を含む抗体、
（４）上記（１）、（２）または（３）のいずれかに記載のH鎖、および、下記（ｉ）または（ｉｉ）に記載のL鎖の対を有する抗体、
（ｉ）ＣＤＲ１として配列番号：４に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ２として配列番号：５に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ３として配列番号：６に記載のアミノ酸配列、およびＣＬとして配列番号：８に記載のアミノ酸配列を有するL鎖、
（ｉｉ）配列番号：９９に記載のアミノ酸配列を有するL鎖。
【請求項１０】
下記（１）から（４）のいずれかに記載の抗体；
（１）ＣＤＲ１として配列番号：１２に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ２として配列番号：１３に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ３として配列番号：１４に記載のアミノ酸配列、およびＣＨとして配列番号：９３に記載のアミノ酸配列を有するＨ鎖を含む抗体、
（２）配列番号：１０１に記載のアミノ酸配列を有するH鎖を含む抗体、
（３）ＣＤＲ１として配列番号：１２に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ２として配列番号：１３に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ３として配列番号：１４に記載のアミノ酸配列、およびＦｃ領域として配列番号：１０３に記載のアミノ酸配列を有するＨ鎖を含む抗体、
（４）上記（１）、（２）または（３）のいずれかに記載のH鎖、および、下記（ｉ）または（ｉｉ）に記載のL鎖の対を有する抗体、
（ｉ）ＣＤＲ１として配列番号：４に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ２として配列番号：５に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ３として配列番号：６に記載のアミノ酸配列、およびＣＬとして配列番号：８に記載のアミノ酸配列を有するL鎖、
（ｉｉ）配列番号：９９に記載のアミノ酸配列を有するL鎖。
【請求項１１】
下記（１）から（４）のいずれかに記載の抗体；
（１）ＣＤＲ１として配列番号：４２に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ２として配列番号：４３に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ３として配列番号：４４に記載のアミノ酸配列、およびＣＨとして配列番号：９１に記載のアミノ酸配列を有するＨ鎖を含む抗体、
（２）配列番号：１０５に記載のアミノ酸配列を有するH鎖を含む抗体、
（３）ＣＤＲ１として配列番号：４２に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ２として配列番号：４３に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ３として配列番号：４４に記載のアミノ酸配列、およびＦｃ領域として配列番号：１０７に記載のアミノ酸配列を有するＨ鎖を含む抗体、
（４）上記（１）、（２）または（３）のいずれかに記載のH鎖、および、下記（ｉ）または（ｉｉ）に記載のL鎖の対を有する抗体、
（ｉ）ＣＤＲ１として配列番号：３４に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ２として配列番号：３５に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ３として配列番号：３６に記載のアミノ酸配列、およびＣＬとして配列番号：３８に記載のアミノ酸配列を有するL鎖、
（ｉｉ）配列番号：１０９に記載のアミノ酸配列を有するL鎖。
【請求項１２】
下記（１）から（４）のいずれかに記載の抗体；
（１）ＣＤＲ１として配列番号：４２に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ２として配列番号：４３に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ３として配列番号：４４に記載のアミノ酸配列、およびＣＨとして配列番号：９３に記載のアミノ酸配列を有するＨ鎖を含む抗体、
（２）配列番号：１１１に記載のアミノ酸配列を有するH鎖を含む抗体、
（３）ＣＤＲ１として配列番号：４２に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ２として配列番号：４３に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ３として配列番号：４４に記載のアミノ酸配列、およびＦｃ領域として配列番号：１１３に記載のアミノ酸配列を有するＨ鎖を含む抗体、
（４）上記（１）、（２）または（３）のいずれかに記載のH鎖、および、下記（ｉ）または（ｉｉ）に記載のL鎖の対を有する抗体、
（ｉ）ＣＤＲ１として配列番号：３４に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ２として配列番号：３５に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ３として配列番号：３６に記載のアミノ酸配列、およびＣＬとして配列番号：３８に記載のアミノ酸配列を有するL鎖、
（ｉｉ）配列番号：１０９に記載のアミノ酸配列を有するL鎖。
【請求項１３】
下記（１）から（４）のいずれかに記載の抗体；
（１）ＣＤＲ１として配列番号：５７に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ２として配列番号：５８に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ３として配列番号：５９に記載のアミノ酸配列、およびＣＨとして配列番号：９１に記載のアミノ酸配列を有するＨ鎖を含む抗体、
（２）配列番号：１１５に記載のアミノ酸配列を有するH鎖を含む抗体、
（３）ＣＤＲ１として配列番号：５７に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ２として配列番号：５８に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ３として配列番号：５９に記載のアミノ酸配列、およびＦｃ領域として配列番号：１１７に記載のアミノ酸配列を有するＨ鎖を含む抗体、
（４）上記（１）、（２）または（３）のいずれかに記載のH鎖、および、下記（ｉ）または（ｉｉ）に記載のL鎖の対を有する抗体、
（ｉ）ＣＤＲ１として配列番号：４９に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ２として配列番号：５０に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ３として配列番号：５１に記載のアミノ酸配列、およびＣＬとして配列番号：５３に記載のアミノ酸配列を有するL鎖、
（ｉｉ）配列番号：１１９に記載のアミノ酸配列を有するL鎖。
【請求項１４】
下記（１）から（４）のいずれかに記載の抗体；
（１）ＣＤＲ１として配列番号：５７に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ２として配列番号：５８に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ３として配列番号：５９に記載のアミノ酸配列、およびＣＨとして配列番号：９３に記載のアミノ酸配列を有するＨ鎖を含む抗体、
（２）配列番号：１２１に記載のアミノ酸配列を有するH鎖を含む抗体、
（３）ＣＤＲ１として配列番号：５７に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ２として配列番号：５８に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ３として配列番号：５９に記載のアミノ酸配列、およびＦｃ領域として配列番号：１２３に記載のアミノ酸配列を有するＨ鎖を含む抗体、
（４）上記（１）、（２）または（３）のいずれかに記載のH鎖、および、下記（ｉ）または（ｉｉ）に記載のL鎖の対を有する抗体、
（ｉ）ＣＤＲ１として配列番号：４９に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ２として配列番号：５０に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ３として配列番号：５１に記載のアミノ酸配列、およびＣＬとして配列番号：５３に記載のアミノ酸配列を有するL鎖、
（ｉｉ）配列番号：１１９に記載のアミノ酸配列を有するL鎖。
【請求項１５】
下記（１）から（４）のいずれかに記載の抗体；
（１）ＣＤＲ１として配列番号：７１に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ２として配列番号：７２に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ３として配列番号：７３に記載のアミノ酸配列、およびＣＨとして配列番号：９１に記載のアミノ酸配列を有するＨ鎖を含む抗体、
（２）配列番号：１２５に記載のアミノ酸配列を有するH鎖を含む抗体、
（３）ＣＤＲ１として配列番号：７１に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ２として配列番号：７２に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ３として配列番号：７３に記載のアミノ酸配列、およびＦｃ領域として配列番号：１２７に記載のアミノ酸配列を有するＨ鎖を含む抗体、
（４）上記（１）、（２）または（３）のいずれかに記載のH鎖、および、下記（ｉ）または（ｉｉ）に記載のL鎖の対を有する抗体、
（ｉ）ＣＤＲ１として配列番号：６３に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ２として配列番号：６４に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ３として配列番号：６５に記載のアミノ酸配列、およびＣＬとして配列番号：６７に記載のアミノ酸配列を有するL鎖、
（ｉｉ）配列番号：１２９に記載のアミノ酸配列を有するL鎖。
【請求項１６】
下記（１）から（４）のいずれかに記載の抗体；
（１）ＣＤＲ１として配列番号：７１に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ２として配列番号：７２に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ３として配列番号：７３に記載のアミノ酸配列、およびＣＨとして配列番号：９３に記載のアミノ酸配列を有するＨ鎖を含む抗体、
（２）配列番号：１３１に記載のアミノ酸配列を有するH鎖を含む抗体、
（３）ＣＤＲ１として配列番号：７１に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ２として配列番号：７２に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ３として配列番号：７３に記載のアミノ酸配列、およびＦｃ領域として配列番号：１３３に記載のアミノ酸配列を有するＨ鎖を含む抗体、
（４）上記（１）、（２）または（３）のいずれかに記載のH鎖、および、下記（ｉ）または（ｉｉ）に記載のL鎖の対を有する抗体、
（ｉ）ＣＤＲ１として配列番号：６３に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ２として配列番号：６４に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ３として配列番号：６５に記載のアミノ酸配列、およびＣＬとして配列番号：６７に記載のアミノ酸配列を有するL鎖、
（ｉｉ）配列番号：１２９に記載のアミノ酸配列を有するL鎖。
【請求項１７】
下記（１）から（４）のいずれかに記載の抗体；
（１）ＣＤＲ１として配列番号：８６に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ２として配列番号：８７に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ３として配列番号：８８に記載のアミノ酸配列、およびＣＨとして配列番号：９１に記載のアミノ酸配列を有するＨ鎖を含む抗体、
（２）配列番号：１３５に記載のアミノ酸配列を有するH鎖を含む抗体、
（３）ＣＤＲ１として配列番号：８６に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ２として配列番号：８７に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ３として配列番号：８８に記載のアミノ酸配列、およびＦｃ領域として配列番号：１３７に記載のアミノ酸配列を有するＨ鎖を含む抗体、
（４）上記（１）、（２）または（３）のいずれかに記載のH鎖、および、下記（ｉ）または（ｉｉ）に記載のL鎖の対を有する抗体、
（ｉ）ＣＤＲ１として配列番号：７８に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ２として配列番号：７９に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ３として配列番号：８０に記載のアミノ酸配列、およびＣＬとして配列番号：８２に記載のアミノ酸配列を有するL鎖、
（ｉｉ）配列番号：１３９に記載のアミノ酸配列を有するL鎖。
【請求項１８】
下記（１）から（４）のいずれかに記載の抗体；
（１）ＣＤＲ１として配列番号：８６に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ２として配列番号：８７に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ３として配列番号：８８に記載のアミノ酸配列、およびＣＨとして配列番号：９３に記載のアミノ酸配列を有するＨ鎖を含む抗体、
（２）配列番号：１４１に記載のアミノ酸配列を有するH鎖を含む抗体、
（３）ＣＤＲ１として配列番号：８６に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ２として配列番号：８７に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ３として配列番号：８８に記載のアミノ酸配列、およびＦｃ領域として配列番号：１４３に記載のアミノ酸配列を有するＨ鎖を含む抗体、
（４）上記（１）、（２）または（３）のいずれかに記載のH鎖、および、下記（ｉ）または（ｉｉ）に記載のL鎖の対を有する抗体、
（ｉ）ＣＤＲ１として配列番号：７８に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ２として配列番号：７９に記載のアミノ酸配列、ＣＤＲ３として配列番号：８０に記載のアミノ酸配列、およびＣＬとして配列番号：８２に記載のアミノ酸配列を有するL鎖、
（ｉｉ）配列番号：１３９に記載のアミノ酸配列を有するL鎖。
【請求項１９】
H鎖定常領域において、286又は298位の位置のアミノ酸残基をシステインに置換する工程を含む、ADCC活性又は抗腫瘍活性が増強された抗体の製造方法。
【請求項２０】
以下の（ａ）及び（ｂ）の工程を含む、ADCC活性又は抗腫瘍活性が増強された抗体の製造方法；
（ａ）H鎖定常領域において、286又は298位の位置のアミノ酸残基がシステインに置換されたH鎖をコードするDNA、及びL鎖をコードするDNAを発現させる工程、
（ｂ）工程（ａ）の発現産物を回収する工程。
【請求項２１】
H鎖定常領域がヒトCγ1、Cγ2、Cγ3、及びCγ4からなる群より選択されるいずれかの定常領域である、請求項１９または２０に記載の方法。
【請求項２２】
請求項１〜１８のいずれかに記載の抗体および医薬的に許容し得る担体を含む、医薬組成物。
【請求項２３】
請求項１〜１８のいずれかの抗体を対象に投与する工程を含む、非ヒト哺乳動物の治療方法。
【請求項２４】
請求項１〜１８のいずれかの抗体をコードする核酸。
【請求項２５】
請求項２４に記載の核酸を含むベクター。
【請求項２６】
請求項２５に記載のベクターを有する宿主細胞。
【請求項２７】
請求項２５に記載のベクターを有する宿主生物。
【請求項２８】
H鎖定常領域において、286又は298位の位置のアミノ酸残基をシステインに置換する工程を含む、抗体のADCC活性又は抗腫瘍活性を増強する方法。
【請求項２９】
H鎖定常領域がヒトCγ1、Cγ2、Cγ3、及びCγ4からなる群より選択されるいずれかの定常領域である、請求項２６に記載の方法。
【請求項３０】
工程（ａ）の抗体のADCC活性又は抗腫瘍活性が増強されたか否かを判定する方法であって、工程（ｂ）で測定されたADCC活性又は抗腫瘍活性が、置換前の抗体のADCC活性又は抗腫瘍活性より高い場合に、工程（ａ）の抗体のADCC活性又は抗腫瘍活性が増強されたと判定される方法；
（ａ）ADCC活性又は抗腫瘍活性を有する抗体の変異体であって、H鎖定常領域における286又は298位の位置のアミノ酸残基がシステインに置換された抗体を提供する工程、および、
（ｂ）工程（ａ）の抗体のADCC活性又は抗腫瘍活性を測定する工程。
【請求項３１】
以下の（ａ）から（ｄ）の工程を含む、ADCC活性又は抗腫瘍活性が増強された抗体のスクリーニング方法；
（ａ）ADCC活性又は抗腫瘍活性を有する抗体を提供する工程、
（ｂ）工程（ａ）の抗体のH鎖定常領域における286又は298位の位置のアミノ酸残基をシステインに置換する工程、
（ｃ）工程（ｂ）で得られた抗体のADCC活性又は抗腫瘍活性が増強されたか否かを、請求項３０に記載の方法で判定する工程、
（ｄ）工程（ｃ）で、ADCC活性又は抗腫瘍活性が増強されたと判定された抗体を選択する工程。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図１３】
【図１４】
【図１５】
【図１６】
【図１７】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図１３】
【図１４】
【図１５】
【図１６】
【図１７】
【公開番号】特開２００９−５５８９９（Ｐ２００９−５５８９９Ａ）
【公開日】平成２１年３月１９日（２００９．３．１９）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００８−６４３２６（Ｐ２００８−６４３２６）
【出願日】平成２０年３月１３日（２００８．３．１３）
【出願人】（３９０００４０９７）株式会社医学生物学研究所 (41)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２１年３月１９日（２００９．３．１９）
【国際特許分類】
【出願日】平成２０年３月１３日（２００８．３．１３）
【出願人】（３９０００４０９７）株式会社医学生物学研究所 (41)
【Ｆターム（参考）】
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