本発明は、ＦＧＦ２１変異体ポリペプチドをコードする核酸分子、ＦＧＦ２１変異体ポリペプチド、ＦＧＦ２１変異体ポリペプチドを含む医薬品組成物、およびこのような核酸、ポリペプチド、または医薬品組成物を使った代謝障害の治療方法を提供する。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
配列番号４または８を含む単離ポリペプチドであって、
（ａ）
（ｉ）位置９８のロイシン残基；
（ｉｉ）位置１７１のプロリン残基；
（ｉｉｉ）位置１８０のアラニン残基；
のうちの１つ以上について任意のアミノ酸の置換、さらに
（ｂ）表２〜１０の変異から選択される１つまたは複数の置換をさらに含む単離ポリペプチド。
【請求項２】
（ｂ）の１つまたは複数の置換が、
（ａ） 表２のシステイン変異；
（ｂ） 表３の操作されたジスルフィド結合；
（ｃ） 表４の安定性強化変異；
（ｄ） 表５のタンパク質分解耐性変異；
（ｅ） 表６の凝集変異；
（ｆ） 表７のＣ末端分解変異；
（ｇ） 表８のグリコシル化変異；
（ｈ） 表９から選択されたＯ−グリコシル化耐性変異；
（ｉ） 表１０から選択された変異；および
（ｊ） （ａ）〜（ｉ）の組み合わせ；
からなる群より選択される１つまたは複数の変異を含む請求項１記載の単離ポリペプチド。
【請求項３】
（ａ）のシステイン変異が、１８〜３１、３３、３５〜５０、５４、５６〜６２、６４〜７３、７５〜１０４、１０６〜１３５、１３７〜１４０、１５２〜１５４、１６３および１６７、からなる群より選択される位置のシステインを含む請求項２記載の単離ポリペプチド。
【請求項４】
操作されたジスルフィド結合が、１９〜１３８、２０〜１３９、２１〜３３、２２〜１３７、２２〜１３９、２３〜２５、２３〜２８、２４〜１３５、２５〜１２２、２６〜１２２、２７〜１２３、２８〜４３、２８〜１２４、３１〜４３、３３〜２１、３５〜８４、４１〜８２、４２〜１２４、４２〜１２６、４３〜１２４、５０〜６９、５４〜６６、５８〜６２、６７〜７２、６７〜１３５、７２〜８４、７３〜９３、７５〜８５、７５〜９２、７６〜１０９、７７〜７９、７７〜８１、８０〜１２９、８２〜１１９、９４〜１１０、９５〜１０７、１００〜１０２、１０２〜１０４、１１５〜１１７、１１７〜１２９、１１７〜１３０、１１８〜１３２、１１８〜１３４、１２１〜１２７、１２３〜１２５、１２７〜１３２、および１５２〜１６３、からなる群より選択される１つまたは複数の位置に一対のシステイン残基を含む請求項２記載の単離ポリペプチド。
【請求項５】
安定性強化変異が、４２、５４、７７、８１、８６、８８、１２２、１２５、１２６、１３０、１３１、１３９、１４５、１４６、１５２、１５４、１５６、１６１、１６３、１７０、および１７２、からなる群より選択される１つまたは複数の位置にＤ、Ｅ、Ｒ、Ｋ、Ｈ、Ｓ、Ｔ、ＮまたはＱを含む請求項２記載の単離タンパク質。
【請求項６】
蛋白質分解耐性変異が、
（ａ） 位置１９のＱ、ＩまたはＫ；
（ｂ） 位置２０のＨ、ＬまたはＦ；
（ｃ） 位置２１のＩ、Ｆ、ＹまたはＶ；
（ｄ） 位置２２のＩ、ＦまたはＶ、
（ｅ） 位置１５０のＡまたはＲ；
（ｆ） 位置１５１のＡまたはＶ；
（ｇ） 位置１５２のＨ、Ｌ、ＦまたはＶ；
（ｈ） 位置１７０のＡ、Ｄ、Ｎ、Ｃ、Ｑ、Ｅ、Ｐ、またはＳ；
（ｉ） 位置１７１のＡ、Ｒ、Ｎ、Ｄ、Ｃ、Ｅ、Ｑ、Ｇ、Ｈ、Ｋ、Ｓ、Ｔ、ＷまたはＹ；
（ｊ） 位置１７２のＬまたはＴ；および
（ｋ） 位置１７３のＲまたはＥ、
からなる群より選択される請求項２記載の単離タンパク質。
【請求項７】
凝集低減変異が、
（ａ） 位置２６のＥ、ＫまたはＲ；
（ｂ） 位置４５のＥＫ、Ｒ、Ｑ、またはＴ；
（ｃ） 位置５２のＴ；
（ｄ） 位置５８のＣ、ＥまたはＳ；
（ｅ） 位置６０のＡ、Ｅ、ＫまたはＲ；
（ｆ） 位置７８のＡ、Ｃ、ＨまたはＲ；
（ｇ） 位置８６のＣまたはＴ；
（ｈ） 位置８８のＡ、Ｅ、Ｋ、ＲまたはＳ；
（ｉ） 位置９８のＣ、Ｅ、Ｋ、Ｑ、またはＲ；
（ｊ） 位置９９のＣ、Ｄ、Ｅ、またはＲ；
（ｋ） 位置１１１のＫまたはＴ；
（ｌ） 位置１２９のＤ、Ｅ、Ｈ、Ｋ、Ｎ、ＲまたはＱ；および
（ｍ） 位置１３４のＥ、Ｈ、ＫまたはＹ、からなる群より選択される請求項２記載の単離タンパク質。
【請求項８】
Ｃ末端分解変異が、
（ａ） 位置１８０のＧ、Ｅ、ＰまたはＳ；
（ｂ） 位置１８１のＧ、Ｐ、Ｋ、Ｔ、Ａ、ＬまたはＰ；および
（ｃ） 位置１７９のＡＰ、Ｇ、ＳまたはＡ
からなる群より選択される請求項２記載の単離ポリペプチド。
【請求項９】
Ｏ−グリコシル化耐性変異がＳ１６７Ａ、Ｓ１６７Ｅ、Ｓ１６７Ｄ、Ｓ１６７Ｎ、Ｓ１６７Ｑ、Ｓ１６７Ｇ、Ｓ１６７Ｖ、Ｓ１６７Ｈ、Ｓ１６７ＫおよびＳ１６７Ｙからなる群より選択される請求項２記載の単離ポリペプチド。
【請求項１０】
（ａ） 位置９８の変異が、Ｌ９８Ｒ、Ｌ９８Ｃ、Ｌ９８Ｅ、Ｌ９８Ｑ、Ｌ９８ＫおよびＬ９８Ｔ、からなる群より選択され；
（ｂ） 位置１７１の変異が、Ｐ１７１Ａ、Ｐ１７１Ｒ、Ｐ１７１Ｎ、Ｐ１７１Ｄ、Ｐ１７１Ｃ、Ｐ１７１Ｅ、Ｐ１７１Ｑ、Ｐ１７１Ｇ、Ｐ１７１Ｈ、Ｐ１７１Ｋ、Ｐ１７１Ｓ、Ｐ１７１Ｔ、Ｐ１７１ＷおよびＰ１７１Ｙ、からなる群より選択され；
（ｃ） 位置１８０の変異が、Ａ１８０Ｇ、Ａ１８０Ｅ、Ａ１８０ＰおよびＡ１８０Ｓ、からなる群より選択される、請求項１記載の単離ポリペプチド。
【請求項１１】
位置９８の変異がＬ９８Ｒであり、位置１７１の変異がＰ１７１Ｇであり、さらに位置１８０の変異がＡ１８０Ｅである請求項１０記載の単離ポリペプチド。
【請求項１２】
（ｉ） ８以下の残基のＮ末端切断；
（ｉｉ） １２以下の残基のＣ末端切断；
（ｉｉｉ） ８以下の残基のＮ末端切断および１２以下の残基のＣ末端切断、
をさらに含む請求項１〜１１のいずれか１項に記載の単離ポリペプチド。
【請求項１３】
哺乳類動物の血糖を下げることができる請求項１２記載の単離ポリペプチド。
【請求項１４】
ポリペプチドが配列番号４または８のアミノ酸配列と少なくとも８５パーセントは同一であるが、該ポリペプチドがＬ９８Ｒ、Ｐ１７１ＧおよびＡ１８０Ｅ変異を含む場合は、Ｌ９８Ｒ、Ｐ１７１ＧおよびＡ１８０Ｅ変異はさらなる改変をされないアミノ酸配列を含む、請求項１または１１記載の単離ポリペプチド。
【請求項１５】
ポリペプチドのＣ末端に融合した１〜１０アミノ酸残基をさらに含む請求項１または１１のいずれか１項に記載の単離ポリペプチド。
【請求項１６】
１〜１０アミノ酸残基が、グリシン、プロリンおよびこれらの組み合わせからなる群より選択される請求項１５記載の単離ポリペプチド。
【請求項１７】
ポリペプチドが１つまたは複数のポリマーと共有結合している請求項１または１１記載の単離ポリペプチド。
【請求項１８】
ポリマーがＰＥＧである請求項１７記載の単離ポリペプチド。
【請求項１９】
異種のアミノ酸配列に融合している請求項１または１１のいずれか１項に記載の単離ポリペプチドを含む融合ポリペプチド。
【請求項２０】
異種のアミノ酸配列がＩｇＧ定常ドメインまたはその断片である請求項１９記載の融合ポリペプチド。
【請求項２１】
ＩｇＧ定常ドメインが配列番号１７１または配列番号１１のアミノ酸配列を含む請求項２０記載の融合ポリペプチド。
【請求項２２】
ポリペプチドがリンカーを介して異種のアミノ酸配列に融合している請求項２０記載の融合ポリペプチド。
【請求項２３】
リンカーが、ポリアラニン、（Ｇｌｙ）_４（配列番号２９）、（Ｇｌｙ）_５（配列番号３０）、（Ｇｌｙ）_５−Ｓｅｒ−（Ｇｌｙ）_３−Ｓｅｒ−（Ｇｌｙ）_４−Ｓｅｒ（配列番号２８）、（Ｇｌｙ）_４−Ｓｅｒ−（Ｇｌｙ）_４−Ｓｅｒ−（Ｇｌｙ）_４−Ｓｅｒ（配列番号３１）、（Ｇｌｙ）_３−Ｌｙｓ−（Ｇｌｙ）_４（配列番号３２）、（Ｇｌｙ）_３−Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−（Ｇｌｙ）_２（配列番号３３）、（Ｇｌｙ）_３−Ｃｙｓ−（Ｇｌｙ）_４（配列番号３４）、Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ（配列番号３５）、Ｇｌｙ−Ｓｅｒ（Ｇｌｙ_４Ｓｅｒ）_３（配列番号１６６）、（Ｇｌｙ_４Ｓｅｒ）_４（配列番号１６７）、（Ｇｌｙ_４Ｓ）_２（配列番号１６８）、ＤＡＡＡＫＥＡＡＡＫＤＡＡＡＲＥＡＡＡＲＤＡＡＡＫ（配列番号１６９）、およびＮＶＤＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲ（配列番号１７０）、からなる群より選択される請求項２２記載の融合ポリペプチド。
【請求項２４】
２つ以上の請求項２３記載の融合ポリペプチドを含むマルチマー。
【請求項２５】
請求項１〜２４のいずれか１項に記載の単離ポリペプチドおよび薬学的に許容可能な処方剤を含む医薬品組成物。
【請求項２６】
治療を必要としているヒトの患者に請求項２５記載の医薬品組成物を投与することを含む代謝障害を治療する方法。
【請求項２７】
代謝障害が糖尿病である請求項２６記載の方法。
【請求項２８】
代謝障害が肥満症である請求項２６記載の方法。
【請求項２９】
請求項１〜２４のいずれか１項に記載のポリペプチドをコード単離核酸。
【請求項３０】
請求項２９記載の核酸分子を含むベクター。
【請求項３１】
請求項２９記載の核酸分子を含む宿主細胞。

【図１Ａ】

【図１Ｂ】

【図２】

【図３】

【図４】

【図５】

【図６Ａ】

【図６Ｂ】

【図６Ｃ】

【図６Ｄ】

【図７Ａ】

【図７Ｂ】

【図７Ｃ】

【図７Ｄ】

【図８Ａ】

【図８Ｂ】

【図８Ｃ】

【図８Ｄ】

【図９Ａ】

【図９Ｂ】

【図９Ｃ】

【図９Ｄ】

【図１０Ａ】

【図１０Ｂ】

【図１１】

【図１２】

【図１３】

【図１４】

【図１５】

【図１６】

【図１７】

【図１８】

【図１９Ａ】

【図１９Ｂ】

【図１９Ｃ】

【図１９Ｄ】

【図２０Ａ】

【図２０Ｂ】

【図２０Ｃ】

【図２０Ｄ】

【図２１Ａ】

【図２１Ｂ】

【図２１Ｃ】

【図２１Ｄ】

【図２２Ａ】

【図２２Ｂ】

【図２２Ｃ】

【図２２Ｄ】

【図２３Ａ】

【図２３Ｂ】

【図２３Ｃ】

【図２３Ｄ】

【図２４Ａ】

【図２４Ｂ】

【図２４Ｃ】

【図２５Ａ】

【図２５Ｂ】

【図２５Ｃ】

【図２５Ｄ】

【図２６Ａ】

【図２６Ｂ】

【図２７】

【図２８Ａ】

【図２８Ｂ】

【図２９】

【図３０】

【図３１Ａ】

【図３１Ｂ】

【図３２】

【図３３】

【図３４】

【図３５】

【図３６】

【図３７】

【図３８Ａ】

【図３８Ｂ】

【図３８Ｃ】

【図３８Ｄ】

【図３９】

【図４０】

【図４１】

【図４２】

【図４３】

【図４４】

【図４５】

【図４６】

【図４７】

【図４８】

【図４９】

【図５０】

【図５１】

【図５２】

【図５３Ａ】

【図５３Ｂ】

【図５４】

【図５５】

【図５６】

【図５７】

【図５８】

【図５９】

【図６０】

【図６１】

【図６２】

【図６３】

【図６４】

【図６５】

【図６６】

【図６７】

【図６８】

【図６９】

【図７０】

【図７１】

【図７２】

【図７３】

【図７４】

【図７５】

【図７６】

【図７７】

【図７８】

【図７９】

【図８０】

【公表番号】特表２０１２−５２５８４７（Ｐ２０１２−５２５８４７Ａ）
【公表日】平成２４年１０月２５日（２０１２．１０．２５）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１２−５０９９１８（Ｐ２０１２−５０９９１８）
【出願日】平成２２年５月４日（２０１０．５．４）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２０１０／０３３６１４
【国際公開番号】ＷＯ２０１０／１２９６００
【国際公開日】平成２２年１１月１１日（２０１０．１１．１１）
【出願人】（５０００４９７１６）アムジエン・インコーポレーテツド (242)
【Ｆターム（参考）】