本発明は、がんにおいてＪＡＲＩＤ１Ｂ遺伝子が果たす役割に関連し、ＪＡＲＩＤ１Ｂ遺伝子に対する二本鎖分子またはそれをコードするベクターを含む組成物を投与することによってがんを治療するための方法を特徴とする。本発明はまた、ＪＡＲＩＤ１Ｂの発現を検出することによってがんを診断するための方法も特徴とする。そのために、ＪＡＲＩＤ１Ｂはがんに対する血清学的バイオマーカーとして役立つ。また、がん細胞におけるＪＡＲＩＤ１Ｂの発現またはＪＡＲＩＤ１Ｂの発現に起因する細胞増殖を指針として用いて、がんを治療もしくは予防するため、またはがん細胞増殖を阻害するための候補剤を同定する方法も開示する。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
がんを検出または診断するための方法であって、
（ａ）対象由来の生物試料における、ｊｕｍｏｎｊｉ， ＡＴ ｒｉｃｈ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｖｅ ｄｏｍａｉｎ １Ｂ（ＪＡＲＩＤ１Ｂ）遺伝子の発現レベルを、
（ｉ）ＪＡＲＩＤ１Ｂ遺伝子のｍＲＮＡを検出すること；
（ｉｉ）ＪＡＲＩＤ１Ｂタンパク質を検出すること；および
（ｉｉｉ）ＪＡＲＩＤ１Ｂタンパク質の生物活性を検出すること
からなる群より選択される方法のいずれか１つによって決定する段階；ならびに
（ｂ）該遺伝子の正常対照レベルと比較した、段階（ａ）で測定された発現レベルの増大を、がんの存在と関連付ける段階
を含む、方法。
【請求項２】
前記がんが、急性骨髄性白血病、膀胱癌、慢性骨髄性白血病、子宮頸癌、肺癌および腎細胞癌からなる群より選択される、請求項１記載の方法。
【請求項３】
前記対象由来の生物試料が、生検試料、喀痰、血液、胸水または尿を含む、請求項１記載の方法。
【請求項４】
（ａ）ＪＡＲＩＤ１Ｂ遺伝子のｍＲＮＡを検出するための試薬；
（ｂ）ＪＡＲＩＤ１Ｂタンパク質を検出するための試薬；および
（ｃ）ＪＡＲＩＤ１Ｂタンパク質の生物活性を検出するための試薬
からなる群より選択される試薬を含む、がんを診断するためのキット。
【請求項５】
前記がんが、急性骨髄性白血病、膀胱癌、慢性骨髄性白血病、子宮頸癌、肺癌または腎細胞癌からなる群より選択される、請求項４記載のキット。
【請求項６】
単離された二本鎖分子であって、該分子がＪＡＲＩＤ１Ｂ遺伝子を発現している細胞に導入された場合に該遺伝子の発現を阻害し、該分子がセンス鎖およびそれに相補的なアンチセンス鎖を含み、該鎖が互いにハイブリダイズして二本鎖分子を形成し、該センス鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２１または３０に対応する核酸配列を含み、該分子が約１９〜約２５ヌクレオチド長を有する、分子。
【請求項７】
センス鎖および／またはアンチセンス鎖の３'末端のいずれかまたは両方に、２〜１０ヌクレオチドからなる１つまたは２つの３'オーバーハングを有する、請求項６記載の二本鎖分子。
【請求項８】
介在性の一本鎖核酸配列によって連結されたセンス鎖およびアンチセンス鎖の両方を含む単一のポリヌクレオチドからなる、請求項６記載の二本鎖分子。
【請求項９】
一般式
５'−［Ａ］−［Ｂ］−［Ａ'］−３'
を有し、［Ａ］がセンス鎖であり、［Ｂ］が３〜２３ヌクレオチドからなる介在一本鎖核酸配列であり、かつ［Ａ'］が［Ａ］に対する相補的配列を含むアンチセンス鎖である、請求項８記載の二本鎖分子。
【請求項１０】
請求項６〜９のいずれか一項記載の二本鎖分子をコードする、ベクター。
【請求項１１】
センス鎖核酸およびアンチセンス鎖核酸を含むポリヌクレオチドの組み合わせのそれぞれを含むベクターであって、該センス鎖核酸がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２１または３０のヌクレオチド配列を含み、該アンチセンス鎖核酸が該センス鎖に相補的な配列からなり、該センス鎖および該アンチセンス鎖の転写物が互いにハイブリダイズして二本鎖分子を形成し、該ベクターが、ＪＡＲＩＤ１Ｂ遺伝子を発現している細胞に導入された場合に細胞増殖を阻害する、ベクター。
【請求項１２】
単離された二本鎖分子または該二本鎖分子をコードするベクターを対象に投与する段階を含む、がんを治療または予防するための方法であって、該分子がＪＡＲＩＤ１Ｂ遺伝子を発現している細胞に導入された場合に該遺伝子の発現を阻害し、該分子がセンス鎖およびそれに相補的なアンチセンス鎖を含み、該鎖が互いにハイブリダイズして二本鎖分子を形成し、該センス鎖がＪＡＲＩＤ１Ｂ遺伝子の核酸配列またはその断片に対応する核酸配列を含み、該分子が約１９〜約２５ヌクレオチド長を有する、方法。
【請求項１３】
前記二本鎖分子が、請求項６〜９のいずれか一項記載の二本鎖分子である、請求項１２記載の方法。
【請求項１４】
前記がんが、急性骨髄性白血病、膀胱癌、乳癌、慢性骨髄性白血病、子宮頸癌、肺癌、前立腺癌および腎細胞癌からなる群より選択される、請求項１２または１３記載の方法。
【請求項１５】
単離された二本鎖分子または該二本鎖分子をコードするベクターを含む、がんを治療または予防するための組成物であって、該分子がＪＡＲＩＤ１Ｂ遺伝子を発現している細胞に導入された場合に該遺伝子の発現を阻害し、該分子がセンス鎖およびそれに相補的なアンチセンス鎖を含み、該鎖が互いにハイブリダイズして二本鎖分子を形成し、該センス鎖がＪＡＲＩＤ１Ｂ遺伝子の核酸配列またはその断片に対応する核酸配列を含み、該分子が約１９〜約２５ヌクレオチド長を有する、組成物。
【請求項１６】
前記二本鎖分子が請求項６〜９のいずれか一項記載の二本鎖分子である、請求項１５記載の組成物。
【請求項１７】
前記がんが、急性骨髄性白血病、膀胱癌、乳癌、慢性骨髄性白血病、子宮頸癌、肺癌、前立腺癌または腎細胞癌からなる群より選択される、請求項１５または１６記載の組成物。
【請求項１８】
がんを治療もしくは予防するためまたはがん細胞増殖を阻害するための候補剤をスクリーニングする方法であって、
（ａ）試験剤をＪＡＲＩＤ１Ｂポリペプチドと接触させる段階；
（ｂ）該ポリペプチドと試験剤との間の結合活性を検出する段階；および
（ｃ）該ポリペプチドと結合する試験剤を候補剤として選択する段階
を含む、方法。
【請求項１９】
がんを治療または予防するためまたはがん細胞増殖を阻害するための候補剤をスクリーニングする方法であって、
（ａ）試験剤をＪＡＲＩＤ１Ｂポリペプチドと接触させる段階；
（ｂ）該ポリペプチドの生物活性を検出する段階；および
（ｃ）試験剤の非存在下で検出される生物活性と比較して、該ポリペプチドの生物活性を抑制する該試験剤を、候補剤として選択する段階
を含む、方法。
【請求項２０】
前記生物活性が、細胞増殖活性、抗アポトーシス活性、Ｅ２Ｆ１遺伝子またはＥ２Ｆ２遺伝子の発現の促進活性、および脱メチル化活性からなる群より選択される、請求項１９記載の方法。
【請求項２１】
がんを治療または予防するためまたはがん細胞増殖を阻害するための候補剤をスクリーニングする方法であって、
（ａ）試験剤の存在下で、ＪＡＲＩＤ１Ｂポリペプチドを、脱メチル化される基質と、該基質の脱メチル化に適した条件下で接触させる段階；
（ｂ）該基質のメチル化レベルを検出する段階；および
（ｃ）試験剤の非存在下で検出されるメチル化レベルと比較して、該基質のメチル化レベルを増大させる該試験剤を、候補剤として選択する段階
を含む、方法。
【請求項２２】
前記基質がメチル化ヒストンＨ３である、請求項２１記載の方法。
【請求項２３】
前記メチル化レベルをヒストンＨ３のリシン４で検出する、請求項２１記載の方法。
【請求項２４】
がんを治療または予防するためまたはがん細胞増殖を阻害するための候補剤をスクリーニングする方法であって、
（ａ）試験剤を、ＪＡＲＩＤ１Ｂ遺伝子を発現している細胞と接触させる段階；
（ｂ）該細胞におけるヒストンＨ３のメチル化レベルを検出する段階：および
（ｃ）試験剤の非存在下で検出されるメチル化レベルと比較して、ヒストンＨ３のメチル化レベルを増大させる該試験剤を、候補剤として選択する段階
を含む、方法。
【請求項２５】
前記メチル化レベルをヒストンＨ３のリシン４で検出する、請求項２４記載の方法。
【請求項２６】
がんを治療または予防するための候補剤をスクリーニングする方法であって、
（ａ）試験剤を、ＪＡＲＩＤ１Ｂ遺伝子を発現している細胞と接触させる段階；
（ｂ）ＪＡＲＩＤ１Ｂ遺伝子の発現レベルを検出する段階；および
（ｃ）試験剤の非存在下で検出される発現レベルと比較して、ＪＡＲＩＤ１Ｂ遺伝子の発現レベルを低下させる該試験剤を、候補剤として選択する段階
を含む、方法。
【請求項２７】
がんを治療または予防するための候補剤をスクリーニングする方法であって、
（ａ）試験剤を、ＪＡＲＩＤ１Ｂの転写調節領域および該転写調節領域の制御下で発現されるレポーター遺伝子を含むベクターが導入された細胞と接触させる段階、
（ｂ）該レポーター遺伝子の発現レベルまたは活性を測定する段階；ならびに
（ｃ）試験剤の非存在下における発現レベルまたは活性レベルと比較して、該レポーター遺伝子の発現レベルまたは活性レベルを低下させる該試験剤を、候補剤として選択する段階
を含む、方法。
【請求項２８】
前記がんが、急性骨髄性白血病、膀胱癌、乳癌、慢性骨髄性白血病、子宮頸癌、肺癌、前立腺癌または腎細胞癌からなる群より選択される、請求項１８〜２７のいずれか一項記載の方法。

【図２】

【図３Ａ】

【図３Ｂ】

【図３Ｃ】

【図３Ｄ】

【図４】

【図５】

【図６】

【図７Ａ】

【図７Ｂ】

【図７Ｃ】

【図７Ｄ】

【図７Ｅ】

【図７Ｆ】

【図７Ｇ】

【図８】

【図９】

【図１０】

【図１１】

【図１２】

【公表番号】特表２０１２−５１８３８７（Ｐ２０１２−５１８３８７Ａ）
【公表日】平成２４年８月１６日（２０１２．８．１６）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１１−５３５８１８（Ｐ２０１１−５３５８１８）
【出願日】平成２２年１月２７日（２０１０．１．２７）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＪＰ２０１０／０００４４１
【国際公開番号】ＷＯ２０１０／０９５３６４
【国際公開日】平成２２年８月２６日（２０１０．８．２６）
【公序良俗違反の表示】
（特許庁注：以下のものは登録商標）
１．ＷＩＮＤＯＷＳ
【出願人】（５０２２４０１１３）オンコセラピー・サイエンス株式会社 (142)
【Ｆターム（参考）】