ガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物
本発明は、式（Ｉ）：Ｃａ(10.5-1.5x)Ｇａx（ＰＯ4）7［式中、０＜ｘ＜１である］で表される、ガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物及びその塩、それらの水和物、並びにそれらの混合物に関する。本発明はさらに、かかる化合物の製造のための固体状態での製造方法及び溶液中での製造方法に関し、並びに、生体材料の製造、特に自己凝結性リン酸カルシウムセメント（ＣＰＣ）の製造のためのそれらの使用に関する。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規のガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物（phosphocalcic compound）及びその製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
発明の背景
骨は、バイオポリマー、特にコラーゲン、及び、（Ｃａ，Ｍｇ，Ｎａ，Ｍ）10（ＰＯ4，ＣＯ3，ＨＰＯ4）6（ＯＨ，Ｃｌ）2と見積もられる、炭酸ヒドロキシアパタイトとして同定された無機成分を含む混合物である。
【０００３】
個体の骨活性の脱制御は、多くの骨病変、例えば骨粗しょう症、パジェット病、又は骨破壊性腫瘍の原因である。特に、ヒトの平均余命の上昇を考慮すると、骨粗しょう症は公衆における健康問題となり、多くの研究がそれを治療するためになされている。検討されている骨病変は、破骨細胞活性による、骨再形成における不安定性によって引き起こされるため、想定される治療方法の一つは、破骨細胞活性を低減させ、骨材料の分解速度を低下させることにある。
【０００４】
ガリウムは、骨格組織、特に骨沈着及び再構成領域に凝縮されることが以前から知られてきた（例えば、Dudley and Maddox, 1949; Nelson et al., 1972）。しかし、骨細胞によるガリウムの取り込みの機構についてほとんど情報が存在せず、骨におけるガリウム蓄積の機構がほとんど知られていないままであった。ガリウムは、インビトロで合成ヒドロキシアパタイトに吸着し、結果的にヒドロキシアパタイトの結晶化及び恐らくは分解が減少することが知られている（Donnelly and Boskey, 1989; Blumenthal and Cosma, 1989）。近年の研究において、Korbas et al., 2004は、骨組織が、インビトロにおいて、ガリウムをブルシャイト（brushite）に類似した局所構造と一緒にする実験を報告した。開示されている、ガリウムがドープされた（gallium doped）モデル化合物は、Ｃａ／Ｐモル比が１（ＡＣＰ及びブルシャイト）及び１．６６（ＡＨＰ）であった。
【０００５】
多くの試験は、その吸収抑制活性を通じて、ガリウムが骨吸収を阻害し、及び血漿中のカルシウムを低減させることを示してきた（例えば、Warrell et al., 1984, 1985; Warrell and Bockman, 1989; Bernstein, LR. 1998）。例えば、US 4,529,593は、ガリウム化合物、例えば硝酸ガリウムを用いて、骨からのカルシウムの過剰な消失に対して効果的な方法を開示している。カルシウムの過剰な消失は、低カルシウム血症、骨粗しょう症又は副甲状腺機能こう進症につながり得る。ガリウム化合物は、静脈内投与、皮下投与又は筋肉内投与される。
【０００６】
その吸収抑制活性に基づいて、ガリウムはまた、悪性の低カルシウム血症の臨床治療に（Warrell and Bockman, 1989）、及び骨のパジェット病の臨床治療に（Bockman and Bosco, 1994; Bockman et al., 1989, 1995）使用されている。ガリウムはまた、骨溶解並びに多発性骨髄腫及び骨転移に関連する骨痛の抑制において臨床効率を示し（Warrell et al., 1987, 1993）、骨粗しょう症の治療法として提案されている（Warrell, 1995）。抗菌剤としてのインビトロでの効率も報告されている（Valappil, 2008）。
【０００７】
硝酸ガリウムは現在、ガナイト（Ｇａｎｉｔｅ）（商標）として市販されており、十分な水分補給に応答しない、明らかに症候性の癌関連性低カルシウム血症の治療のために、当該製品は静脈内注射で投与される。ＦＤＡで承認されている、ガナイト（商標）のラベル表示に従って、硝酸ガリウムは、骨からのカルシウム吸収を阻害することによって、或いは骨代謝回転の増大を減少させることによって、低カルシウム血症性作用を発揮する。実際、ガリウムは、骨細胞に対する細胞毒性作用を生じることなく、骨吸収に関与する破骨細胞に対して阻害作用を有し、骨成長に関与する骨芽細胞に対して増大作用を有し得る（Donnelly, R., et al., 1993）。
【０００８】
式Ｃａ9Ｇａ（ＰＯ4）7で表される化合物は、Golubev et al., 1990によって報告されており、Ｘ線回折及びＩＲスペクトルを通じて研究された。
【０００９】
技術的課題
それに存在する全身投与経路の結果として、ガリウムは、骨材料に対する低レベルの吸収を示し、副作用の潜在性が高い。
【００１０】
したがって、特に骨疾患、例えば骨粗しょう症、パジェット病、又は骨破壊性腫瘍の治療のために、１又は２以上の上記欠点を克服する、ガリウムの代替投与経路を提供する必要性が存在する。治療必要性に従った、用量及び持続時間の観点から、ガリウム放出の正確なチューニングを可能とする経路の提供について特に関心が存在する。
【発明の概要】
【００１１】
発明の概要
本発明は、新規のガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物を提供する。本発明者らは、驚くべきことに、Ｇａ（ＩＩＩ）イオンをリン酸カルシウム化合物中に包含させることが可能であることを示す。さらに、かかるガリウム修飾されたリン酸カルシウム化合物がインサイチュ（in situ）においてガリウムを放出可能であることを示す。
【００１２】
最終的に、Ｃａ／Ｐ比が１．２８〜１．３であるガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物の使用は、最適なガリウム放出特性を可能とする。実際、水溶性の高いリン酸カルシウム化合物、例えばガリウムがドープされたブルシャイト（Ｃａ／Ｐ＝１）は、速やかなガリウム放出を示し、したがって過剰投与量の危険性がある、短い活性スパンを示すことが予想される。一方で、わずかに水溶性であるリン酸カルシウム化合物、例えばガリウムがドープされたヒドロキシアパタイト（ＨＡＰ）（Ｃａ／Ｐ＝１．６６）は、任意の治療効果のためには不十分であり得るガリウム放出を示すことが予想される。
【００１３】
したがって、ガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物は、生体材料、例えば自己凝結性（self setting）リン酸カルシウムセメント（calcium phosphate cement）（ＣＰＣ）に含まれ得る。かかる生体材料は、骨細胞による分解時において、それらがインサイチュでガリウムを局所的に放出することができる場所であって、それらを必要とする部位の近傍へ、注射により生体内へ直接的に導入され得る。この点において、長期間にわたる緩やかなガリウム放出を得ることができた。
【００１４】
したがって、本発明のガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物は、骨疾患の治療のために有用な生体材料の製造のために特に好適である。
【００１５】
第二の態様において、本発明はさらに、新規のガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物の製造方法を提案する。
【００１６】
本発明のガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物の製造のための第１の製造方法は、固体状態での製造方法であって、リン酸カルシウムを炭酸カルシウム及びガリウム化合物の存在下で焼結する前記製造方法である。
【００１７】
本発明のガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物の製造のための第２の製造方法は、溶液中での製造方法あって、ガリウム化合物を含む水溶液からリン酸カルシウムを析出させる前記製造方法である。
【図面の簡単な説明】
【００１８】
【図１】図１は、実施例１に従って製造された、ガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物（上部）対Ｇａの無いＴＣＰ（下部）のＸ線マイクロラジオグラフィーであり、本発明の化合物のより高い放射線不透性を示す。
【図２】図２は、４ｍｍのプローブヘッド及びＺｒＯ2のローターを用いて、７．０Ｔで記録された、異なる値のｘにおける、Ｃａ10.5-1.5xＧａx（ＰＯ4）7の粉末試料の31Ｐ ＭＡＳ ＮＭＲスペクトルである。
【図３】図３は、１７．６Ｔで記録された、０．１７＜ｘ＜０．７１における、Ｃａ10.5-1.5xＧａx（ＰＯ4）7の粉末試料の71Ｇａエコー ＭＡＳ ＮＭＲスペクトルである。
【図４】図４は、初期Ｇａ／Ｐ比０．０７において単離された、ガリウムがドープされたＣＤＡの粉末試料の、７．０Ｔで記録された、31Ｐ ＭＡＳ ＮＭＲスペクトルである。１０００℃にて焼成した後、Ｃａ9.75Ｇａ0.5（ＰＯ4）7を得た。
【発明を実施するための形態】
【００１９】
本発明との関連において、用語「リン酸カルシウムの（phosphocalcic）」又は「リン酸カルシウム（calcium phosphate）」は、カルシウムイオン（Ｃａ2+）を、オルトホスフェート（ＰＯ43-）、メタホスフェート又はピロホスフェート（Ｐ2Ｏ74-）と共に含み、及び場合により他のイオン、例えば水酸化物イオン又は水素イオンを含む無機物のことである。
【００２０】
具体的なリン酸カルシウム化合物は、リン酸三カルシウム（ＴＣＰ）（Ｃａ3（ＰＯ4）2）、アパタイト（Ｃａ5（ＰＯ4）3Ｘ、ここでＸはＦ、Ｃｌ、ＯＨである）及び余分なイオンが主に水酸化物イオンであるヒドロキシアパタイト（ＨＡ）である。
【００２１】
他のリン酸カルシウム化合物は、アモルファスのリン酸カルシウム（ＡＣＰ）（Ｃａx（ＰＯ4）y・Ｈ2Ｏ）、リン酸一カルシウム一水和物（monocalcium phosphate monohydrate）（ＭＣＰＭ）（ＣａＨ4（ＰＯ4）2・Ｈ2Ｏ）、リン酸二カルシウム二水和物（dicalcium phosphate dihydrate）（ＤＣＰＤ）（ＣａＨＰＯ4・２Ｈ2Ｏ）、別名ブルシャイト（brushite）、無水リン酸二カルシウム（dicalcium phosphate anhydrous）（ＤＣＰＡ）（ＣａＨＰＯ4）、別名モネタイト（monetite）、析出した又はカルシウムを欠損したアパタイト（calcium-deficient apatite）（ＣＤＡ）（Ｃａ，Ｎａ）10（ＰＯ4，ＨＰＯ4）6（ＯＨ）2、及びリン酸四カルシウム（tetracalcium phosphate）（ＴＴＣＰ）（Ｃａ4Ｐ2Ｏ9）、別名ヒルゲンストカイト（hilgenstockite）である。
【００２２】
本明細書において使用される用語「生体適合性（biocompatible）」は、宿主に対して実質的に有害な応答を引き起こさない材料を意味する。
【００２３】
用語「生体吸収性（bioresorbable）」は、インビボにおいて吸収される（resorbed）ための、材料の能力のことである。本発明との関連において、「完全な(full)」吸収（resorption）は、有意な細胞外フラグメントが残存しないことを意味する。吸収工程は、体液、酵素又は細胞の作用を通じた、元のインプラント材料の排除を含む。
【００２４】
吸収されたリン酸カルシウムは、例えば、骨芽細胞の作用を通じて、又は生体内で再利用されることによって新規の骨無機質として再堆積（redeposit）され得るか、或いは排泄される。「強力な生体吸収性」は、大部分のリン酸カルシウムインプラントが１〜５年間吸収されることを意味する。この遅延は、当該リン酸カルシウムインプラントの固有の特徴に依存するのみならず、インプラントされた部位、患者の年齢、インプラントの初期安定性などにも依存する。
【００２５】
本発明との関連において、「リン酸カルシウムセメント」（ＣＰＣ）は、水又は水溶液の存在下で凝結及び硬化する追加のカルシウム塩と最終的に一緒になった、１又は２以上のリン酸カルシウムを含むか又はから成る固体複合材料である。当該用語は、固体材料と水又は水溶液との混合により生じるペースト、及び凝結後に得られる硬化材料のことである。当該セメントの特性、例えば凝結時間、粘度を調節するために、粘着力（cohesion）又は膨潤時間を減少させるために、及び／又は大孔げき（macroporosity）を誘導するために、及び最終的に硬化された製造物に弾性を付与するために、他の添加剤が少量含まれ得る。
【００２６】
本発明との関連において、セメントの「凝結（setting）」は、周囲温度における、すなわち環境、室温又は体温による、セメントのハンドオフ（hand-off）自己硬化を意味する。
【００２７】
本発明との関連において、「注射可能セメント」又は「注射に好適な形態のセメント」は、直径数ミリ、好ましくは１〜５ｍｍの、より好ましくは１〜３ｍｍの、最も好ましくは２〜３ｍｍの針を通じて押し出され得るセメントペーストのことである。注射可能セメントにおける特に重要なパラメーターは、大きな粒子が存在しないこと、好適な粘度、及びインビボにおける好適な凝結時間（３７℃）を含む。
【００２８】
ガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物
第一の態様において、本発明は、式（Ｉ）：
【００２９】
【化１】
【００３０】
［式中、０＜ｘ＜１である］
で表される、ガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物及びその塩、それらの水和物、並びにそれらの混合物に関する。
【００３１】
当該塩は特に、カルシウムが部分的に他の原子、例えばＺｎ、Ｃｕ、Ｍｇ、Ｎａ、Ｋによって置換される、式（Ｉ）の化合物であり得る。
【００３２】
好ましくは、式（Ｉ）におけるｘの値は０＜ｘ≦０．８５であり、より好ましくは０＜ｘ≦０．８２である。
【００３３】
本発明の具体的な実施形態において、本発明のガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物は、Ｃａ10.125Ｇａ0.25（ＰＯ4）7、Ｃａ9.75Ｇａ0.5（ＰＯ4）7、Ｃａ9.375Ｇａ0.75（ＰＯ4）7及びＣａ9.27Ｇａ0.82（ＰＯ4）7から成る群から選択される。
【００３４】
ガリウムドーピング及びリン酸カルシウム支持体の存在は、粉末Ｘ線回折、並びに31Ｐ及び71Ｇａ固体ＮＭＲによって証明され、後者の２つの方法は両方を示す。実際、ガリウムによるカルシウムの交換により、ガリウムと結合したリン酸基に関連する31Ｐ ＮＭＲラインの高磁場シフトが生じ、一方でガリウムの配位構造は71Ｇａのケミカルシフト値から得ることができる。
【００３５】
任意の理論と結び付けられることを望まないが、結晶格子中のＧａ（ＩＩＩ）イオンによるＣａ（ＩＩ）イオンの交換によって、及び陽イオン電荷における差異を補うための空格子点（vacancy）の生成によって、ガリウムイオンが少なくとも部分的にリン酸カルシウム化合物中に組み込まれると本発明者は考える。Ｇａ（ＩＩＩ）イオンのイオン半径がＣａ（ＩＩ）イオンのものよりも小さいために、交換反応は単位格子の縮小をもたらすと予想される。したがってガリウムがドープされた当該化合物は、変形した構造で存在し得る。
【００３６】
好ましいガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物は、β−ＴＣＰ構造又はＣＤＡ構造に基づく。
【００３７】
ガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物は、完全に又は部分的にアモルファスであり得るが、好ましくは部分的に結晶質である。特に、リン酸カルシウム化合物は、１又は２以上の結晶相を含み得る。
【００３８】
ガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物の結晶相は特に、ベータ型リン酸三カルシウム（β−ＴＣＰ）に関し得る（Dickens, B. et al., 1974; Yashima, M. et al., 2003）。
【００３９】
リン酸三カルシウム（ＴＣＰ）は、式Ｃａ3（ＰＯ4）2であり、オルトリン酸カルシウム（orthophosphate）第三リン酸カルシウム（tertiary calcium phosphate）、三塩基性リン酸カルシウム（tribasic calcium phosphate）、又は骨灰としても知られている。β−ＴＣＰ型は、空間群Ｒ３ｃで結晶化し、以下の格子パラメーターを有する：ａ＝１０．４３５Å、ｃ＝３７．４０３Å、α＝９０°；β＝９０°及びγ＝１２０°。
【００４０】
ガリウムは、好ましくはリン酸カルシウム化合物の結晶格子中に含まれる。この場合、ガリウムイオンがカルシウム部位を占有することが特に好ましい。
【００４１】
しかし、低温で得られたガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物は、表面に吸着されたガリウム種を含み得る。一般的に、かかる化合物の加熱により、ガリウムは結晶構造へと拡散される。
【００４２】
ガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物の製造
第二の態様において、本発明は、上記のガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物の製造方法に関する。
【００４３】
実際、２つの異なる製造方法、固体状態での製造方法及び溶液中での製造方法が開発され、後述される。
【００４４】
したがって、本発明の更なる目的は、式（Ｉ）のガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物の製造のための固体状態での製造方法であって、以下のステップ：
（ａ）適量のガリウム化合物の存在下で、リン酸カルシウムを炭酸カルシウムと接触させ；
（ｂ）当該混合物を焼結してガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物を形成し；そして
（ｃ）前記ガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物を回収すること
を含む、前記方法に関する。
【００４５】
前記製造方法は、好ましくは水の非存在下で行われる。したがって、無水リン酸カルシウム、例えばＤＣＰＡ若しくはＤＣＰＤ、又はそれらの混合物の使用が好ましい。同一の理由のため、反応剤は好ましくは無水化合物である。
【００４６】
炭酸カルシウムは、分解して二酸化炭素を生成し、したがって試料中への所望ではないアニオンの混入を制限する。
【００４７】
前記製造方法のステップ（ａ）において使用される好ましいガリウム化合物は、非揮発性であって、周囲条件で安定であり、特に酸化ガリウム及び焼結中に酸化物へと変換されるもの、例えば水酸化ガリウム、を含むものから選択される。
【００４８】
ガリウムがその酸化物の形態で含まれる場合、反応は以下の等式で示され得る：
【００４９】
【化２】
【００５０】
［式中、０＜ｘ＜１である］。
【００５１】
前記製造方法は、好ましくは化学量論量の反応剤を用いて行われる。
【００５２】
ステップ（ｂ）における温度は、好ましくは反応剤の融解温度近傍で又はそれを超える温度で選択される。一般的に、７５０℃〜１５７０℃、好ましくは８００℃〜１５５０℃、特に９００℃〜１３６０℃、特に１０００℃が好適である。
【００５３】
好ましくは、ステップ（ｂ）は、完全に焼結するまで、通常は１２時間超、より好ましくは２４時間以上で行われる。
【００５４】
本発明のさらなる目的は、本発明の固体状態での製造方法に従って得られうる化合物に関する。
【００５５】
前記製造方法は、前記製造方法条件下で形成される結晶形態の、修飾されたリン酸カルシウム化合物を生成し得る。より具体的には、上記製造方法は、β−ＴＣＰに類似した構造を有する、ガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物を生成し得る。かかる構造は、Ｒ３ｃ空間群を示し、Ｇａ含量に応じて以下の範囲で変化する格子パラメーターを有する：ａ＝１０．３１〜１０．４４Å、ｃ＝３７．１５〜３７．５Å、α＝９０°；β＝９０°及びγ＝１２０°。
【００５６】
本発明の更なる目的は、ガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物の製造のための溶液中での製造方法に関する。
【００５７】
したがって、本発明はまた、好ましくはｐＨを低下させることにより、ガリウム、カルシウム及びリン酸イオンを含む水溶液から析出させることによって、上記のガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物を提供するための製造方法に関する。
【００５８】
より具体的には、本発明のガリウムがドープされた化合物の製造方法は、以下の：
（ａ）カルシウム化合物及び好適量のガリウム化合物を含有する水溶液を調製するステップ；
（ｂ）ステップ（ａ）で得られた溶液のｐＨを、必要であれば、８．５〜１２、好ましくは９〜１１、より好ましくは９〜９．５に調節するステップ；
（ｃ）前記溶液に好適量のリン酸化合物を添加するステップ；
（ｄ）前記溶液のｐＨを７．０〜１２、好ましくは７．５〜９、より好ましくは７．５〜８に調整することによってガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物を析出させるステップ；そして
（ｅ）前記析出したガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物を溶液から分離するステップ
から成るステップを含む。
【００５９】
ステップ（ａ）の溶液を調製するために使用される前記カルシウム化合物及びガリウム化合物は、種々の水溶性化合物、例えば塩又は錯体（complex）から選択され得る。
【００６０】
好ましくは、ステップ（ａ）における前記ガリウム化合物は、酢酸ガリウム、炭酸ガリウム、クエン酸ガリウム、塩化ガリウム、臭化ガリウム、ヨウ化ガリウム、フッ化ガリウム、ギ酸ガリウム、硝酸ガリウム、シュウ酸ガリウム、硫酸ガリウム、酸化ガリウム又は水酸化ガリウム、及びそれらの水和物から成る群から選択される。硝酸ガリウムが、その高い溶解性の観点から特に好ましい。
【００６１】
好ましくは、前記カルシウム化合物は、硝酸カルシウム、酢酸カルシウム、塩化カルシウム及びフッ化カルシウム、並びにそれらの水和物から成る群から選択される。ガリウム化合物に関して、硝酸カルシウム、特に硝酸カルシウム四水和物が、その高い溶解性のために特に好ましい。
【００６２】
製造された化合物純度を向上させるために、前記製造方法において使用される溶液を調製するために、超純水を使用することが好ましい。「超純水」は、少なくとも１８ＭΩ ｃｍ抵抗率を有する水を意味する。
【００６３】
ステップ（ｂ）は、ｐＨ調節剤、例えば塩基又は酸を添加することによって都合よく行われる。更なるイオンを導入しない、強塩基及び酸が好ましい。好適なｐＨ調節剤はアンモニア溶液である。ステップ（ｃ）において使用されるリン酸化合物は、想定されるガリウムがドープされた化合物のリン酸アニオンを含有する任意の溶解性塩又は錯体であり得る。
【００６４】
かかる塩は、好都合にはリン酸水素塩である。他のカチオンとのカルシウムの交換による、化合物の任意の混入を避け、したがって化合物を高い純度を確保するために、最も好ましくは、カチオンは揮発性であり、例えばアンモニウムである。したがってリン酸水素アンモニウムは、本発明の製造方法におけるリン酸化合物として特に好ましい。有利なことには、当該塩は水中であらかじめ溶解される。
【００６５】
ステップ（ｃ）において、ガリウムがドープされたリン酸カルシウムの析出開始時に、溶液は白色となる。
【００６６】
均一な反応剤濃度を確保するために、反応混合物はステップ（ｃ）及び（ｄ）の間、好ましくは撹拌される。
【００６７】
反応剤のモル比は、好ましくは化学量論量であり、したがって主に、必要とされる（Ｃａ＋Ｇａ）／Ｐ比に依存する。
【００６８】
反応を加速させるために、ステップ（ｄ）における析出は、好ましくは２０〜１００℃に、好ましくは３７〜８０℃に、最も好ましくは５０℃に昇温させて行われる。
【００６９】
ステップ（ｄ）において使用されるｐＨ調節剤はまた、好ましくは、更なるイオンを反応混合物に追加しない化合物である。アンモニア溶液が特に好ましい。
【００７０】
反応は数分以内に、又は数時間以内に順調に進行する。好ましくは、ステップ（ｄ）は、１５分〜７２時間で、より好ましくは３０分〜６時間で、さらにより好ましくは３０分〜２時間で、最も好ましくは３０分で行われる。
【００７１】
反応完了後、析出物はステップ（ｅ）において常法で、例えばろ過で反応混合物から分離される。
【００７２】
その後、得られたガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物はさらに精製され及び／又は変換され得る。特に、ステップ（ｅ）で得られた化合物は精製され、特に洗浄され及び乾燥される。原料は、特に超純水を用いて洗浄され、その後適切な温度で、例えば８０℃で乾燥される。
【００７３】
したがって、得られたリン酸カルシウム化合物は、一般的にカルシウム欠損アパタイト（calcium deficient apatite）（ＣＤＡ）構造に類似した構造を有し、１．４４〜１．６７の範囲のＣａ／Ｐ比、31Ｐ ＮＭＲにおける２．９ｐｐｍのブロードの共鳴、特徴的な粉末Ｘ線回折におけるブロードの線（２θ＝約２６°（中等度）、及び約３２°（強））並びにＩＲ吸収［ＯＨ（約３５７０ｃｍ-1）及びＰＯ4（約１０４０及び１１００ｃｍ-1）］によって証拠付けられる。ガリウムは、結晶内に含まれ得るか、又は物理学的に吸着されたガリウム種として、化学的に吸着されたガリウム種として、又は析出したガリウム種としてのいずれかでその表面上に存在し得る。
【００７４】
本発明の更なる目的は、上記の方法によって得られうる、ガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物に関する。
【００７５】
本発明の更なる目的は、上記の製造方法によって得られうるガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物であって、（Ｃａ＋Ｇａ）／Ｐモル比が１．３〜１．６７であり、ガリウム含量が４．５重量％以下である前記化合物に関する。
【００７６】
得られるガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物はその後、例えば８００〜１５００℃で、より好ましくは９００〜１３００℃で、最も好ましくは１１００℃で、好ましくは数時間、特に３〜５時間、通常４時間それを加熱することによってか焼され、β−ＴＣＰ様の構造を有するガリウムがドープされた化合物を得る。実際、この製造方法を用いて、化学量論量のガリウム化合物は、例えばｘ≦０．７５の式（Ｉ）の化合物となる。
【００７７】
したがって、得られうるガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物は、骨の修復、増強、再構築、再生、及び骨粗しょう症の治療に関連する、歯科的及び医学的応用に特に有用である。
【００７８】
より具体的には、本発明の化合物は、生体材料、例えば代用骨、インプラント被覆、圧縮又は成形されたリン酸カルシウムインプラント、混合リン酸カルシウム−ポリマーセメント（composite phosphocalcic-polymer cement）、及びリン酸カルシウムセメント（alcium-phosphate cement）の製造のために使用され得る。
【００７９】
本発明は、以下の図及び実施例においてさらに説明され得る。
【実施例】
【００８０】
実施例
実施例１：固体状態反応による、ガリウムがドープされたリン酸カルシウムの製造
乳鉢中で、以下の等式を使用して、（Ｃａ＋Ｇａ）／Ｐモル比が所望のｘ値に相当するように計算された量の炭酸カルシウム及び酸化ガリウムを、無水リン酸カルシウム（０．１７４ｍｏｌ）と共にしっかりと混合した。
【００８１】
るつぼ中での混合物の焼成を、典型的には５グラム製造スケールで、１０００℃にて２４時間行った（加熱速度：５℃／分、冷却速度：５℃／分）。
【００８２】
【化３】
【００８３】
垂直ＰＷ１０５０（θ／２θ）ゴニオメーター（vertical PW 1050 (θ/2θ) goniometer）、及びＰＷ１７１１ Ｘｅ検出器を備えたＰｈｉｌｉｐｓ ＰＷ１８３０ジェネレーターを用いて記録された、粉末Ｘ線回折パターンからのリートベルト法（Rietveld refinement）によって、化合物の構造を得た。Ｎｉでフィルターされた銅Ｋα放射線を用いて、ステップ・バイ・ステップモードで：２θ初期（initial）：１０°、２θ最終（final）：１００°、ステップ（step）２θ＝０．０３°、ステップあたりの時間：２．３秒でデータを得た。
【００８４】
得られたＣａ9.27Ｇａ0.82（ＰＯ4）7に関する原子座標を表１に示す。得られたデータから、５つのカルシウム部位の１つが次第にガリウムによって交換され、一方で第二のカルシウム部位は電荷の競合のために空であり、当該化合物がβ−ＴＣＰ型構造を有することは明らかである。空間群はＲ３ｃであり、ａ＝１０．３２２Å、ｃ＝３７．１７９Å、α＝９０°；β＝９０°及びγ＝１２０である。
【００８５】
４ｍｍのプローブヘッド及びＺｒＯ2のローターを用いて、７．０Ｔで記録された、31Ｐ ＭＡＳ ＮＭＲスペクトルを当該化合物から得た（図２）。ガリウムに結合したリン酸部位の数が増大するために、当該スペクトルは、ＮＭＲピークの高磁場シフトを示す。
【００８６】
Ｃａ10.5-1.5xＧａx（ＰＯ4）7の71Ｇａ エコー ＭＡＳ ＮＭＲスペクトルを１７．６Ｔで記録した（図３）。当該スペクトルは、ＧａＯ6環境の等方性のケミカルシフト特性を有し［−３８〜４６ｐｐｍ］、Ｘ線構造決定と一致して、当該化合物中のガリウムイオンの存在を示す。
【００８７】
【表１】
【００８８】
実施例２：共沈による、ガリウムがドープされたリン酸カルシウムの製造
（Ｃａ＋Ｇａ）／Ｐモル比が１．５である製造物のために、０．４４４ｇの硝酸ガリウム（Ａｌｄｒｉｃｈ，ＭＷ＝３９０）及び２．６８５ｇの硝酸カルシウム四水和物（ＭＷ＝２３６）の混合物を、１２５ｍｌの超純水を含有するビーカー中で溶解した。
【００８９】
アンモニアの濃縮溶液を用いて、溶液のｐＨを９〜９．５の範囲で調節した。反応混合物をその後、油浴中の滴下漏斗を備えた三頸丸底フラスコに導入した。滴下漏斗に１．０８９ｇのリン酸水素二アンモニウム（ＭＷ＝１３２）を１２５ｍｌの超純水に溶解したものを導入した。反応混合物の温度を５０℃に昇温し、リン酸水素二アンモニウムの溶液を５〜１０分かけて滴下した。混合物は白色となった。アンモニアの濃縮溶液を用いて、ｐＨを７．５〜８の範囲内で調節した（反応の初期時間）。３０分後、ヒーターを停止し、懸濁液（ｐＨは中性）を遠心分離した。上清の大部分を除去し、固体残渣を２５０ｍｌの超純水で洗浄し、再度遠心分離して上清の大部分から分離した。この手順を４回繰り返した後、最終的な固体をろ取した。白色のろう状の産物をオーブンで８０℃にて２４時間乾燥させた。
【００９０】
化合物をＩＲ分光法［ＯＨ（約３５７０ｃｍ-1）及びＰＯ4（約１０４０及び１１００ｃｍ-1）］、粉末Ｘ線回折［２θ＝約２６°（中等度）、及び約３２°（強）におけるブロードの線］、及び１０００℃での焼成前における31Ｐ ＭＡＳ ＮＭＲ分光法［２．９ｐｐｍのブロードの共鳴］（図４）で特徴付けした。対応するデータは、カルシウム欠損アパタイトの特徴を示した。
【００９１】
これはまた、元素分析によって確認された。元素分析は、（Ｃａ＋Ｇａ）／Ｐモル比が１．３〜１．５の範囲内であり、ガリウム含量が４．５重量％以下であることを示した。
【００９２】
１０００℃での焼成後、得られた化合物は実施例１で得られたものと一致し（ｘ＝０〜０．７５）、粉末Ｘ線回折及び固体状態31Ｐ及び71Ｇａ ＮＭＲで、β−ＴＣＰに類似した構造を示すことを確認した。大量の硝酸ガリウム（初期Ｇａ／Ｐ比＞約０．１５）のために、ガリウムがドープされたＴＣＰ相と混合した副生成物の存在（主に酸化ガリウム）が、焼成した化合物中で観察された。
【００９３】
【表２】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規のガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物（phosphocalcic compound）及びその製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
発明の背景
骨は、バイオポリマー、特にコラーゲン、及び、（Ｃａ，Ｍｇ，Ｎａ，Ｍ）10（ＰＯ4，ＣＯ3，ＨＰＯ4）6（ＯＨ，Ｃｌ）2と見積もられる、炭酸ヒドロキシアパタイトとして同定された無機成分を含む混合物である。
【０００３】
個体の骨活性の脱制御は、多くの骨病変、例えば骨粗しょう症、パジェット病、又は骨破壊性腫瘍の原因である。特に、ヒトの平均余命の上昇を考慮すると、骨粗しょう症は公衆における健康問題となり、多くの研究がそれを治療するためになされている。検討されている骨病変は、破骨細胞活性による、骨再形成における不安定性によって引き起こされるため、想定される治療方法の一つは、破骨細胞活性を低減させ、骨材料の分解速度を低下させることにある。
【０００４】
ガリウムは、骨格組織、特に骨沈着及び再構成領域に凝縮されることが以前から知られてきた（例えば、Dudley and Maddox, 1949; Nelson et al., 1972）。しかし、骨細胞によるガリウムの取り込みの機構についてほとんど情報が存在せず、骨におけるガリウム蓄積の機構がほとんど知られていないままであった。ガリウムは、インビトロで合成ヒドロキシアパタイトに吸着し、結果的にヒドロキシアパタイトの結晶化及び恐らくは分解が減少することが知られている（Donnelly and Boskey, 1989; Blumenthal and Cosma, 1989）。近年の研究において、Korbas et al., 2004は、骨組織が、インビトロにおいて、ガリウムをブルシャイト（brushite）に類似した局所構造と一緒にする実験を報告した。開示されている、ガリウムがドープされた（gallium doped）モデル化合物は、Ｃａ／Ｐモル比が１（ＡＣＰ及びブルシャイト）及び１．６６（ＡＨＰ）であった。
【０００５】
多くの試験は、その吸収抑制活性を通じて、ガリウムが骨吸収を阻害し、及び血漿中のカルシウムを低減させることを示してきた（例えば、Warrell et al., 1984, 1985; Warrell and Bockman, 1989; Bernstein, LR. 1998）。例えば、US 4,529,593は、ガリウム化合物、例えば硝酸ガリウムを用いて、骨からのカルシウムの過剰な消失に対して効果的な方法を開示している。カルシウムの過剰な消失は、低カルシウム血症、骨粗しょう症又は副甲状腺機能こう進症につながり得る。ガリウム化合物は、静脈内投与、皮下投与又は筋肉内投与される。
【０００６】
その吸収抑制活性に基づいて、ガリウムはまた、悪性の低カルシウム血症の臨床治療に（Warrell and Bockman, 1989）、及び骨のパジェット病の臨床治療に（Bockman and Bosco, 1994; Bockman et al., 1989, 1995）使用されている。ガリウムはまた、骨溶解並びに多発性骨髄腫及び骨転移に関連する骨痛の抑制において臨床効率を示し（Warrell et al., 1987, 1993）、骨粗しょう症の治療法として提案されている（Warrell, 1995）。抗菌剤としてのインビトロでの効率も報告されている（Valappil, 2008）。
【０００７】
硝酸ガリウムは現在、ガナイト（Ｇａｎｉｔｅ）（商標）として市販されており、十分な水分補給に応答しない、明らかに症候性の癌関連性低カルシウム血症の治療のために、当該製品は静脈内注射で投与される。ＦＤＡで承認されている、ガナイト（商標）のラベル表示に従って、硝酸ガリウムは、骨からのカルシウム吸収を阻害することによって、或いは骨代謝回転の増大を減少させることによって、低カルシウム血症性作用を発揮する。実際、ガリウムは、骨細胞に対する細胞毒性作用を生じることなく、骨吸収に関与する破骨細胞に対して阻害作用を有し、骨成長に関与する骨芽細胞に対して増大作用を有し得る（Donnelly, R., et al., 1993）。
【０００８】
式Ｃａ9Ｇａ（ＰＯ4）7で表される化合物は、Golubev et al., 1990によって報告されており、Ｘ線回折及びＩＲスペクトルを通じて研究された。
【０００９】
技術的課題
それに存在する全身投与経路の結果として、ガリウムは、骨材料に対する低レベルの吸収を示し、副作用の潜在性が高い。
【００１０】
したがって、特に骨疾患、例えば骨粗しょう症、パジェット病、又は骨破壊性腫瘍の治療のために、１又は２以上の上記欠点を克服する、ガリウムの代替投与経路を提供する必要性が存在する。治療必要性に従った、用量及び持続時間の観点から、ガリウム放出の正確なチューニングを可能とする経路の提供について特に関心が存在する。
【発明の概要】
【００１１】
発明の概要
本発明は、新規のガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物を提供する。本発明者らは、驚くべきことに、Ｇａ（ＩＩＩ）イオンをリン酸カルシウム化合物中に包含させることが可能であることを示す。さらに、かかるガリウム修飾されたリン酸カルシウム化合物がインサイチュ（in situ）においてガリウムを放出可能であることを示す。
【００１２】
最終的に、Ｃａ／Ｐ比が１．２８〜１．３であるガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物の使用は、最適なガリウム放出特性を可能とする。実際、水溶性の高いリン酸カルシウム化合物、例えばガリウムがドープされたブルシャイト（Ｃａ／Ｐ＝１）は、速やかなガリウム放出を示し、したがって過剰投与量の危険性がある、短い活性スパンを示すことが予想される。一方で、わずかに水溶性であるリン酸カルシウム化合物、例えばガリウムがドープされたヒドロキシアパタイト（ＨＡＰ）（Ｃａ／Ｐ＝１．６６）は、任意の治療効果のためには不十分であり得るガリウム放出を示すことが予想される。
【００１３】
したがって、ガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物は、生体材料、例えば自己凝結性（self setting）リン酸カルシウムセメント（calcium phosphate cement）（ＣＰＣ）に含まれ得る。かかる生体材料は、骨細胞による分解時において、それらがインサイチュでガリウムを局所的に放出することができる場所であって、それらを必要とする部位の近傍へ、注射により生体内へ直接的に導入され得る。この点において、長期間にわたる緩やかなガリウム放出を得ることができた。
【００１４】
したがって、本発明のガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物は、骨疾患の治療のために有用な生体材料の製造のために特に好適である。
【００１５】
第二の態様において、本発明はさらに、新規のガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物の製造方法を提案する。
【００１６】
本発明のガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物の製造のための第１の製造方法は、固体状態での製造方法であって、リン酸カルシウムを炭酸カルシウム及びガリウム化合物の存在下で焼結する前記製造方法である。
【００１７】
本発明のガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物の製造のための第２の製造方法は、溶液中での製造方法あって、ガリウム化合物を含む水溶液からリン酸カルシウムを析出させる前記製造方法である。
【図面の簡単な説明】
【００１８】
【図１】図１は、実施例１に従って製造された、ガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物（上部）対Ｇａの無いＴＣＰ（下部）のＸ線マイクロラジオグラフィーであり、本発明の化合物のより高い放射線不透性を示す。
【図２】図２は、４ｍｍのプローブヘッド及びＺｒＯ2のローターを用いて、７．０Ｔで記録された、異なる値のｘにおける、Ｃａ10.5-1.5xＧａx（ＰＯ4）7の粉末試料の31Ｐ ＭＡＳ ＮＭＲスペクトルである。
【図３】図３は、１７．６Ｔで記録された、０．１７＜ｘ＜０．７１における、Ｃａ10.5-1.5xＧａx（ＰＯ4）7の粉末試料の71Ｇａエコー ＭＡＳ ＮＭＲスペクトルである。
【図４】図４は、初期Ｇａ／Ｐ比０．０７において単離された、ガリウムがドープされたＣＤＡの粉末試料の、７．０Ｔで記録された、31Ｐ ＭＡＳ ＮＭＲスペクトルである。１０００℃にて焼成した後、Ｃａ9.75Ｇａ0.5（ＰＯ4）7を得た。
【発明を実施するための形態】
【００１９】
本発明との関連において、用語「リン酸カルシウムの（phosphocalcic）」又は「リン酸カルシウム（calcium phosphate）」は、カルシウムイオン（Ｃａ2+）を、オルトホスフェート（ＰＯ43-）、メタホスフェート又はピロホスフェート（Ｐ2Ｏ74-）と共に含み、及び場合により他のイオン、例えば水酸化物イオン又は水素イオンを含む無機物のことである。
【００２０】
具体的なリン酸カルシウム化合物は、リン酸三カルシウム（ＴＣＰ）（Ｃａ3（ＰＯ4）2）、アパタイト（Ｃａ5（ＰＯ4）3Ｘ、ここでＸはＦ、Ｃｌ、ＯＨである）及び余分なイオンが主に水酸化物イオンであるヒドロキシアパタイト（ＨＡ）である。
【００２１】
他のリン酸カルシウム化合物は、アモルファスのリン酸カルシウム（ＡＣＰ）（Ｃａx（ＰＯ4）y・Ｈ2Ｏ）、リン酸一カルシウム一水和物（monocalcium phosphate monohydrate）（ＭＣＰＭ）（ＣａＨ4（ＰＯ4）2・Ｈ2Ｏ）、リン酸二カルシウム二水和物（dicalcium phosphate dihydrate）（ＤＣＰＤ）（ＣａＨＰＯ4・２Ｈ2Ｏ）、別名ブルシャイト（brushite）、無水リン酸二カルシウム（dicalcium phosphate anhydrous）（ＤＣＰＡ）（ＣａＨＰＯ4）、別名モネタイト（monetite）、析出した又はカルシウムを欠損したアパタイト（calcium-deficient apatite）（ＣＤＡ）（Ｃａ，Ｎａ）10（ＰＯ4，ＨＰＯ4）6（ＯＨ）2、及びリン酸四カルシウム（tetracalcium phosphate）（ＴＴＣＰ）（Ｃａ4Ｐ2Ｏ9）、別名ヒルゲンストカイト（hilgenstockite）である。
【００２２】
本明細書において使用される用語「生体適合性（biocompatible）」は、宿主に対して実質的に有害な応答を引き起こさない材料を意味する。
【００２３】
用語「生体吸収性（bioresorbable）」は、インビボにおいて吸収される（resorbed）ための、材料の能力のことである。本発明との関連において、「完全な(full)」吸収（resorption）は、有意な細胞外フラグメントが残存しないことを意味する。吸収工程は、体液、酵素又は細胞の作用を通じた、元のインプラント材料の排除を含む。
【００２４】
吸収されたリン酸カルシウムは、例えば、骨芽細胞の作用を通じて、又は生体内で再利用されることによって新規の骨無機質として再堆積（redeposit）され得るか、或いは排泄される。「強力な生体吸収性」は、大部分のリン酸カルシウムインプラントが１〜５年間吸収されることを意味する。この遅延は、当該リン酸カルシウムインプラントの固有の特徴に依存するのみならず、インプラントされた部位、患者の年齢、インプラントの初期安定性などにも依存する。
【００２５】
本発明との関連において、「リン酸カルシウムセメント」（ＣＰＣ）は、水又は水溶液の存在下で凝結及び硬化する追加のカルシウム塩と最終的に一緒になった、１又は２以上のリン酸カルシウムを含むか又はから成る固体複合材料である。当該用語は、固体材料と水又は水溶液との混合により生じるペースト、及び凝結後に得られる硬化材料のことである。当該セメントの特性、例えば凝結時間、粘度を調節するために、粘着力（cohesion）又は膨潤時間を減少させるために、及び／又は大孔げき（macroporosity）を誘導するために、及び最終的に硬化された製造物に弾性を付与するために、他の添加剤が少量含まれ得る。
【００２６】
本発明との関連において、セメントの「凝結（setting）」は、周囲温度における、すなわち環境、室温又は体温による、セメントのハンドオフ（hand-off）自己硬化を意味する。
【００２７】
本発明との関連において、「注射可能セメント」又は「注射に好適な形態のセメント」は、直径数ミリ、好ましくは１〜５ｍｍの、より好ましくは１〜３ｍｍの、最も好ましくは２〜３ｍｍの針を通じて押し出され得るセメントペーストのことである。注射可能セメントにおける特に重要なパラメーターは、大きな粒子が存在しないこと、好適な粘度、及びインビボにおける好適な凝結時間（３７℃）を含む。
【００２８】
ガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物
第一の態様において、本発明は、式（Ｉ）：
【００２９】
【化１】
【００３０】
［式中、０＜ｘ＜１である］
で表される、ガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物及びその塩、それらの水和物、並びにそれらの混合物に関する。
【００３１】
当該塩は特に、カルシウムが部分的に他の原子、例えばＺｎ、Ｃｕ、Ｍｇ、Ｎａ、Ｋによって置換される、式（Ｉ）の化合物であり得る。
【００３２】
好ましくは、式（Ｉ）におけるｘの値は０＜ｘ≦０．８５であり、より好ましくは０＜ｘ≦０．８２である。
【００３３】
本発明の具体的な実施形態において、本発明のガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物は、Ｃａ10.125Ｇａ0.25（ＰＯ4）7、Ｃａ9.75Ｇａ0.5（ＰＯ4）7、Ｃａ9.375Ｇａ0.75（ＰＯ4）7及びＣａ9.27Ｇａ0.82（ＰＯ4）7から成る群から選択される。
【００３４】
ガリウムドーピング及びリン酸カルシウム支持体の存在は、粉末Ｘ線回折、並びに31Ｐ及び71Ｇａ固体ＮＭＲによって証明され、後者の２つの方法は両方を示す。実際、ガリウムによるカルシウムの交換により、ガリウムと結合したリン酸基に関連する31Ｐ ＮＭＲラインの高磁場シフトが生じ、一方でガリウムの配位構造は71Ｇａのケミカルシフト値から得ることができる。
【００３５】
任意の理論と結び付けられることを望まないが、結晶格子中のＧａ（ＩＩＩ）イオンによるＣａ（ＩＩ）イオンの交換によって、及び陽イオン電荷における差異を補うための空格子点（vacancy）の生成によって、ガリウムイオンが少なくとも部分的にリン酸カルシウム化合物中に組み込まれると本発明者は考える。Ｇａ（ＩＩＩ）イオンのイオン半径がＣａ（ＩＩ）イオンのものよりも小さいために、交換反応は単位格子の縮小をもたらすと予想される。したがってガリウムがドープされた当該化合物は、変形した構造で存在し得る。
【００３６】
好ましいガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物は、β−ＴＣＰ構造又はＣＤＡ構造に基づく。
【００３７】
ガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物は、完全に又は部分的にアモルファスであり得るが、好ましくは部分的に結晶質である。特に、リン酸カルシウム化合物は、１又は２以上の結晶相を含み得る。
【００３８】
ガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物の結晶相は特に、ベータ型リン酸三カルシウム（β−ＴＣＰ）に関し得る（Dickens, B. et al., 1974; Yashima, M. et al., 2003）。
【００３９】
リン酸三カルシウム（ＴＣＰ）は、式Ｃａ3（ＰＯ4）2であり、オルトリン酸カルシウム（orthophosphate）第三リン酸カルシウム（tertiary calcium phosphate）、三塩基性リン酸カルシウム（tribasic calcium phosphate）、又は骨灰としても知られている。β−ＴＣＰ型は、空間群Ｒ３ｃで結晶化し、以下の格子パラメーターを有する：ａ＝１０．４３５Å、ｃ＝３７．４０３Å、α＝９０°；β＝９０°及びγ＝１２０°。
【００４０】
ガリウムは、好ましくはリン酸カルシウム化合物の結晶格子中に含まれる。この場合、ガリウムイオンがカルシウム部位を占有することが特に好ましい。
【００４１】
しかし、低温で得られたガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物は、表面に吸着されたガリウム種を含み得る。一般的に、かかる化合物の加熱により、ガリウムは結晶構造へと拡散される。
【００４２】
ガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物の製造
第二の態様において、本発明は、上記のガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物の製造方法に関する。
【００４３】
実際、２つの異なる製造方法、固体状態での製造方法及び溶液中での製造方法が開発され、後述される。
【００４４】
したがって、本発明の更なる目的は、式（Ｉ）のガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物の製造のための固体状態での製造方法であって、以下のステップ：
（ａ）適量のガリウム化合物の存在下で、リン酸カルシウムを炭酸カルシウムと接触させ；
（ｂ）当該混合物を焼結してガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物を形成し；そして
（ｃ）前記ガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物を回収すること
を含む、前記方法に関する。
【００４５】
前記製造方法は、好ましくは水の非存在下で行われる。したがって、無水リン酸カルシウム、例えばＤＣＰＡ若しくはＤＣＰＤ、又はそれらの混合物の使用が好ましい。同一の理由のため、反応剤は好ましくは無水化合物である。
【００４６】
炭酸カルシウムは、分解して二酸化炭素を生成し、したがって試料中への所望ではないアニオンの混入を制限する。
【００４７】
前記製造方法のステップ（ａ）において使用される好ましいガリウム化合物は、非揮発性であって、周囲条件で安定であり、特に酸化ガリウム及び焼結中に酸化物へと変換されるもの、例えば水酸化ガリウム、を含むものから選択される。
【００４８】
ガリウムがその酸化物の形態で含まれる場合、反応は以下の等式で示され得る：
【００４９】
【化２】
【００５０】
［式中、０＜ｘ＜１である］。
【００５１】
前記製造方法は、好ましくは化学量論量の反応剤を用いて行われる。
【００５２】
ステップ（ｂ）における温度は、好ましくは反応剤の融解温度近傍で又はそれを超える温度で選択される。一般的に、７５０℃〜１５７０℃、好ましくは８００℃〜１５５０℃、特に９００℃〜１３６０℃、特に１０００℃が好適である。
【００５３】
好ましくは、ステップ（ｂ）は、完全に焼結するまで、通常は１２時間超、より好ましくは２４時間以上で行われる。
【００５４】
本発明のさらなる目的は、本発明の固体状態での製造方法に従って得られうる化合物に関する。
【００５５】
前記製造方法は、前記製造方法条件下で形成される結晶形態の、修飾されたリン酸カルシウム化合物を生成し得る。より具体的には、上記製造方法は、β−ＴＣＰに類似した構造を有する、ガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物を生成し得る。かかる構造は、Ｒ３ｃ空間群を示し、Ｇａ含量に応じて以下の範囲で変化する格子パラメーターを有する：ａ＝１０．３１〜１０．４４Å、ｃ＝３７．１５〜３７．５Å、α＝９０°；β＝９０°及びγ＝１２０°。
【００５６】
本発明の更なる目的は、ガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物の製造のための溶液中での製造方法に関する。
【００５７】
したがって、本発明はまた、好ましくはｐＨを低下させることにより、ガリウム、カルシウム及びリン酸イオンを含む水溶液から析出させることによって、上記のガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物を提供するための製造方法に関する。
【００５８】
より具体的には、本発明のガリウムがドープされた化合物の製造方法は、以下の：
（ａ）カルシウム化合物及び好適量のガリウム化合物を含有する水溶液を調製するステップ；
（ｂ）ステップ（ａ）で得られた溶液のｐＨを、必要であれば、８．５〜１２、好ましくは９〜１１、より好ましくは９〜９．５に調節するステップ；
（ｃ）前記溶液に好適量のリン酸化合物を添加するステップ；
（ｄ）前記溶液のｐＨを７．０〜１２、好ましくは７．５〜９、より好ましくは７．５〜８に調整することによってガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物を析出させるステップ；そして
（ｅ）前記析出したガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物を溶液から分離するステップ
から成るステップを含む。
【００５９】
ステップ（ａ）の溶液を調製するために使用される前記カルシウム化合物及びガリウム化合物は、種々の水溶性化合物、例えば塩又は錯体（complex）から選択され得る。
【００６０】
好ましくは、ステップ（ａ）における前記ガリウム化合物は、酢酸ガリウム、炭酸ガリウム、クエン酸ガリウム、塩化ガリウム、臭化ガリウム、ヨウ化ガリウム、フッ化ガリウム、ギ酸ガリウム、硝酸ガリウム、シュウ酸ガリウム、硫酸ガリウム、酸化ガリウム又は水酸化ガリウム、及びそれらの水和物から成る群から選択される。硝酸ガリウムが、その高い溶解性の観点から特に好ましい。
【００６１】
好ましくは、前記カルシウム化合物は、硝酸カルシウム、酢酸カルシウム、塩化カルシウム及びフッ化カルシウム、並びにそれらの水和物から成る群から選択される。ガリウム化合物に関して、硝酸カルシウム、特に硝酸カルシウム四水和物が、その高い溶解性のために特に好ましい。
【００６２】
製造された化合物純度を向上させるために、前記製造方法において使用される溶液を調製するために、超純水を使用することが好ましい。「超純水」は、少なくとも１８ＭΩ ｃｍ抵抗率を有する水を意味する。
【００６３】
ステップ（ｂ）は、ｐＨ調節剤、例えば塩基又は酸を添加することによって都合よく行われる。更なるイオンを導入しない、強塩基及び酸が好ましい。好適なｐＨ調節剤はアンモニア溶液である。ステップ（ｃ）において使用されるリン酸化合物は、想定されるガリウムがドープされた化合物のリン酸アニオンを含有する任意の溶解性塩又は錯体であり得る。
【００６４】
かかる塩は、好都合にはリン酸水素塩である。他のカチオンとのカルシウムの交換による、化合物の任意の混入を避け、したがって化合物を高い純度を確保するために、最も好ましくは、カチオンは揮発性であり、例えばアンモニウムである。したがってリン酸水素アンモニウムは、本発明の製造方法におけるリン酸化合物として特に好ましい。有利なことには、当該塩は水中であらかじめ溶解される。
【００６５】
ステップ（ｃ）において、ガリウムがドープされたリン酸カルシウムの析出開始時に、溶液は白色となる。
【００６６】
均一な反応剤濃度を確保するために、反応混合物はステップ（ｃ）及び（ｄ）の間、好ましくは撹拌される。
【００６７】
反応剤のモル比は、好ましくは化学量論量であり、したがって主に、必要とされる（Ｃａ＋Ｇａ）／Ｐ比に依存する。
【００６８】
反応を加速させるために、ステップ（ｄ）における析出は、好ましくは２０〜１００℃に、好ましくは３７〜８０℃に、最も好ましくは５０℃に昇温させて行われる。
【００６９】
ステップ（ｄ）において使用されるｐＨ調節剤はまた、好ましくは、更なるイオンを反応混合物に追加しない化合物である。アンモニア溶液が特に好ましい。
【００７０】
反応は数分以内に、又は数時間以内に順調に進行する。好ましくは、ステップ（ｄ）は、１５分〜７２時間で、より好ましくは３０分〜６時間で、さらにより好ましくは３０分〜２時間で、最も好ましくは３０分で行われる。
【００７１】
反応完了後、析出物はステップ（ｅ）において常法で、例えばろ過で反応混合物から分離される。
【００７２】
その後、得られたガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物はさらに精製され及び／又は変換され得る。特に、ステップ（ｅ）で得られた化合物は精製され、特に洗浄され及び乾燥される。原料は、特に超純水を用いて洗浄され、その後適切な温度で、例えば８０℃で乾燥される。
【００７３】
したがって、得られたリン酸カルシウム化合物は、一般的にカルシウム欠損アパタイト（calcium deficient apatite）（ＣＤＡ）構造に類似した構造を有し、１．４４〜１．６７の範囲のＣａ／Ｐ比、31Ｐ ＮＭＲにおける２．９ｐｐｍのブロードの共鳴、特徴的な粉末Ｘ線回折におけるブロードの線（２θ＝約２６°（中等度）、及び約３２°（強））並びにＩＲ吸収［ＯＨ（約３５７０ｃｍ-1）及びＰＯ4（約１０４０及び１１００ｃｍ-1）］によって証拠付けられる。ガリウムは、結晶内に含まれ得るか、又は物理学的に吸着されたガリウム種として、化学的に吸着されたガリウム種として、又は析出したガリウム種としてのいずれかでその表面上に存在し得る。
【００７４】
本発明の更なる目的は、上記の方法によって得られうる、ガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物に関する。
【００７５】
本発明の更なる目的は、上記の製造方法によって得られうるガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物であって、（Ｃａ＋Ｇａ）／Ｐモル比が１．３〜１．６７であり、ガリウム含量が４．５重量％以下である前記化合物に関する。
【００７６】
得られるガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物はその後、例えば８００〜１５００℃で、より好ましくは９００〜１３００℃で、最も好ましくは１１００℃で、好ましくは数時間、特に３〜５時間、通常４時間それを加熱することによってか焼され、β−ＴＣＰ様の構造を有するガリウムがドープされた化合物を得る。実際、この製造方法を用いて、化学量論量のガリウム化合物は、例えばｘ≦０．７５の式（Ｉ）の化合物となる。
【００７７】
したがって、得られうるガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物は、骨の修復、増強、再構築、再生、及び骨粗しょう症の治療に関連する、歯科的及び医学的応用に特に有用である。
【００７８】
より具体的には、本発明の化合物は、生体材料、例えば代用骨、インプラント被覆、圧縮又は成形されたリン酸カルシウムインプラント、混合リン酸カルシウム−ポリマーセメント（composite phosphocalcic-polymer cement）、及びリン酸カルシウムセメント（alcium-phosphate cement）の製造のために使用され得る。
【００７９】
本発明は、以下の図及び実施例においてさらに説明され得る。
【実施例】
【００８０】
実施例
実施例１：固体状態反応による、ガリウムがドープされたリン酸カルシウムの製造
乳鉢中で、以下の等式を使用して、（Ｃａ＋Ｇａ）／Ｐモル比が所望のｘ値に相当するように計算された量の炭酸カルシウム及び酸化ガリウムを、無水リン酸カルシウム（０．１７４ｍｏｌ）と共にしっかりと混合した。
【００８１】
るつぼ中での混合物の焼成を、典型的には５グラム製造スケールで、１０００℃にて２４時間行った（加熱速度：５℃／分、冷却速度：５℃／分）。
【００８２】
【化３】
【００８３】
垂直ＰＷ１０５０（θ／２θ）ゴニオメーター（vertical PW 1050 (θ/2θ) goniometer）、及びＰＷ１７１１ Ｘｅ検出器を備えたＰｈｉｌｉｐｓ ＰＷ１８３０ジェネレーターを用いて記録された、粉末Ｘ線回折パターンからのリートベルト法（Rietveld refinement）によって、化合物の構造を得た。Ｎｉでフィルターされた銅Ｋα放射線を用いて、ステップ・バイ・ステップモードで：２θ初期（initial）：１０°、２θ最終（final）：１００°、ステップ（step）２θ＝０．０３°、ステップあたりの時間：２．３秒でデータを得た。
【００８４】
得られたＣａ9.27Ｇａ0.82（ＰＯ4）7に関する原子座標を表１に示す。得られたデータから、５つのカルシウム部位の１つが次第にガリウムによって交換され、一方で第二のカルシウム部位は電荷の競合のために空であり、当該化合物がβ−ＴＣＰ型構造を有することは明らかである。空間群はＲ３ｃであり、ａ＝１０．３２２Å、ｃ＝３７．１７９Å、α＝９０°；β＝９０°及びγ＝１２０である。
【００８５】
４ｍｍのプローブヘッド及びＺｒＯ2のローターを用いて、７．０Ｔで記録された、31Ｐ ＭＡＳ ＮＭＲスペクトルを当該化合物から得た（図２）。ガリウムに結合したリン酸部位の数が増大するために、当該スペクトルは、ＮＭＲピークの高磁場シフトを示す。
【００８６】
Ｃａ10.5-1.5xＧａx（ＰＯ4）7の71Ｇａ エコー ＭＡＳ ＮＭＲスペクトルを１７．６Ｔで記録した（図３）。当該スペクトルは、ＧａＯ6環境の等方性のケミカルシフト特性を有し［−３８〜４６ｐｐｍ］、Ｘ線構造決定と一致して、当該化合物中のガリウムイオンの存在を示す。
【００８７】
【表１】
【００８８】
実施例２：共沈による、ガリウムがドープされたリン酸カルシウムの製造
（Ｃａ＋Ｇａ）／Ｐモル比が１．５である製造物のために、０．４４４ｇの硝酸ガリウム（Ａｌｄｒｉｃｈ，ＭＷ＝３９０）及び２．６８５ｇの硝酸カルシウム四水和物（ＭＷ＝２３６）の混合物を、１２５ｍｌの超純水を含有するビーカー中で溶解した。
【００８９】
アンモニアの濃縮溶液を用いて、溶液のｐＨを９〜９．５の範囲で調節した。反応混合物をその後、油浴中の滴下漏斗を備えた三頸丸底フラスコに導入した。滴下漏斗に１．０８９ｇのリン酸水素二アンモニウム（ＭＷ＝１３２）を１２５ｍｌの超純水に溶解したものを導入した。反応混合物の温度を５０℃に昇温し、リン酸水素二アンモニウムの溶液を５〜１０分かけて滴下した。混合物は白色となった。アンモニアの濃縮溶液を用いて、ｐＨを７．５〜８の範囲内で調節した（反応の初期時間）。３０分後、ヒーターを停止し、懸濁液（ｐＨは中性）を遠心分離した。上清の大部分を除去し、固体残渣を２５０ｍｌの超純水で洗浄し、再度遠心分離して上清の大部分から分離した。この手順を４回繰り返した後、最終的な固体をろ取した。白色のろう状の産物をオーブンで８０℃にて２４時間乾燥させた。
【００９０】
化合物をＩＲ分光法［ＯＨ（約３５７０ｃｍ-1）及びＰＯ4（約１０４０及び１１００ｃｍ-1）］、粉末Ｘ線回折［２θ＝約２６°（中等度）、及び約３２°（強）におけるブロードの線］、及び１０００℃での焼成前における31Ｐ ＭＡＳ ＮＭＲ分光法［２．９ｐｐｍのブロードの共鳴］（図４）で特徴付けした。対応するデータは、カルシウム欠損アパタイトの特徴を示した。
【００９１】
これはまた、元素分析によって確認された。元素分析は、（Ｃａ＋Ｇａ）／Ｐモル比が１．３〜１．５の範囲内であり、ガリウム含量が４．５重量％以下であることを示した。
【００９２】
１０００℃での焼成後、得られた化合物は実施例１で得られたものと一致し（ｘ＝０〜０．７５）、粉末Ｘ線回折及び固体状態31Ｐ及び71Ｇａ ＮＭＲで、β−ＴＣＰに類似した構造を示すことを確認した。大量の硝酸ガリウム（初期Ｇａ／Ｐ比＞約０．１５）のために、ガリウムがドープされたＴＣＰ相と混合した副生成物の存在（主に酸化ガリウム）が、焼成した化合物中で観察された。
【００９３】
【表２】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
【化１】
［式中、０＜ｘ＜１である］
で表される、ガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物及びその塩、それらの水和物、並びにそれらの混合物。
【請求項２】
式（Ｉ）の化合物において、０＜ｘ≦０．８５である、請求項１に記載のガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物。
【請求項３】
式（Ｉ）の化合物が、Ｃａ10.125Ｇａ0.25（ＰＯ4）7；Ｃａ9.75Ｇａ0.5（ＰＯ4）7；Ｃａ9.375Ｇａ0.75（ＰＯ4）7；及びＣａ9.27Ｇａ0.82（ＰＯ4）7から成る群から選択される、請求項１又は２に記載のガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物。
【請求項４】
式（Ｉ）の化合物が、Ｇａ含量に応じて以下の範囲：ａ＝１０．３１〜１０．４４Å、ｃ＝３７．１５〜３７．５Å、α＝９０°；β＝９０°及びγ＝１２０°で変化する格子パラメーターを有するＲ３ｃ空間群で少なくとも部分的に結晶化される、請求項１又は２に記載のガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物。
【請求項５】
式（Ｉ）のガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物の製造のための固体状態での製造方法であって、以下のステップ：
（ａ）適量のガリウム化合物の存在下で、リン酸カルシウムを炭酸カルシウムと接触させ；
（ｂ）当該混合物を焼結してガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物を形成し；そして
（ｃ）前記ガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物を回収すること
を含む、前記方法。
【請求項６】
ステップ（ａ）において使用される前記リン酸カルシウムが、ＤＣＰＡ、ＤＣＰＤ、又はそれらの混合物である、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
ステップ（ａ）において使用される前記ガリウム化合物が酸化ガリウムである、請求項５又は６に記載の方法。
【請求項８】
ガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物の製造のための溶液中での製造方法であって、以下のステップ：
（ａ）カルシウム化合物及び好適量のガリウム化合物を含有する水溶液を調製し；
（ｂ）ステップ（ａ）で得られた溶液のｐＨを、必要であれば８．５〜１２に調節し；
（ｃ）前記溶液に好適量のリン酸化合物を添加し；
（ｄ）得られた溶液のｐＨを７．０〜１２に調整することによって、ガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物を析出させ；そして
（ｅ）析出したガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物を溶液から分離すること
を含む、前記方法。
【請求項９】
ステップ（ａ）における前記ガリウム塩が、酢酸ガリウム、炭酸ガリウム、クエン酸ガリウム、塩化ガリウム、フッ化ガリウム、ギ酸ガリウム、硝酸ガリウム、シュウ酸ガリウム、硫酸ガリウム、水酸化ガリウム、酸化ガリウムヒドロキシドから成る群から選択される、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
ステップ（ａ）における前記カルシウム固体前駆体が、硝酸カルシウム四水和物、酢酸カルシウム、塩化カルシウム及びフッ化カルシウムから成る群から選択される、請求項８又は９に記載の方法。
【請求項１１】
前記リン酸化合物がリン酸水素アンモニウムである、請求項８〜１０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１２】
ステップ（ｄ）が３７〜８０℃で行われる、請求項８〜１１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１３】
得られたガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物のその後の焼成をさらに含む、請求項８〜１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１４】
（Ｃａ＋Ｇａ）／Ｐモル比が１．３〜１．６７であり、ガリウム含量が４．５重量％以下である、請求項８〜１２のいずれか１項に記載の方法によって得られうる、ガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物。
【請求項１５】
生体材料、特に自己凝結性リン酸カルシウムセメント（ＣＰＣ）の製造のための、請求項１〜４及び１４のいずれか１項に記載のガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物の使用。
【請求項１】
式（Ｉ）：
【化１】
［式中、０＜ｘ＜１である］
で表される、ガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物及びその塩、それらの水和物、並びにそれらの混合物。
【請求項２】
式（Ｉ）の化合物において、０＜ｘ≦０．８５である、請求項１に記載のガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物。
【請求項３】
式（Ｉ）の化合物が、Ｃａ10.125Ｇａ0.25（ＰＯ4）7；Ｃａ9.75Ｇａ0.5（ＰＯ4）7；Ｃａ9.375Ｇａ0.75（ＰＯ4）7；及びＣａ9.27Ｇａ0.82（ＰＯ4）7から成る群から選択される、請求項１又は２に記載のガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物。
【請求項４】
式（Ｉ）の化合物が、Ｇａ含量に応じて以下の範囲：ａ＝１０．３１〜１０．４４Å、ｃ＝３７．１５〜３７．５Å、α＝９０°；β＝９０°及びγ＝１２０°で変化する格子パラメーターを有するＲ３ｃ空間群で少なくとも部分的に結晶化される、請求項１又は２に記載のガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物。
【請求項５】
式（Ｉ）のガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物の製造のための固体状態での製造方法であって、以下のステップ：
（ａ）適量のガリウム化合物の存在下で、リン酸カルシウムを炭酸カルシウムと接触させ；
（ｂ）当該混合物を焼結してガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物を形成し；そして
（ｃ）前記ガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物を回収すること
を含む、前記方法。
【請求項６】
ステップ（ａ）において使用される前記リン酸カルシウムが、ＤＣＰＡ、ＤＣＰＤ、又はそれらの混合物である、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
ステップ（ａ）において使用される前記ガリウム化合物が酸化ガリウムである、請求項５又は６に記載の方法。
【請求項８】
ガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物の製造のための溶液中での製造方法であって、以下のステップ：
（ａ）カルシウム化合物及び好適量のガリウム化合物を含有する水溶液を調製し；
（ｂ）ステップ（ａ）で得られた溶液のｐＨを、必要であれば８．５〜１２に調節し；
（ｃ）前記溶液に好適量のリン酸化合物を添加し；
（ｄ）得られた溶液のｐＨを７．０〜１２に調整することによって、ガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物を析出させ；そして
（ｅ）析出したガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物を溶液から分離すること
を含む、前記方法。
【請求項９】
ステップ（ａ）における前記ガリウム塩が、酢酸ガリウム、炭酸ガリウム、クエン酸ガリウム、塩化ガリウム、フッ化ガリウム、ギ酸ガリウム、硝酸ガリウム、シュウ酸ガリウム、硫酸ガリウム、水酸化ガリウム、酸化ガリウムヒドロキシドから成る群から選択される、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
ステップ（ａ）における前記カルシウム固体前駆体が、硝酸カルシウム四水和物、酢酸カルシウム、塩化カルシウム及びフッ化カルシウムから成る群から選択される、請求項８又は９に記載の方法。
【請求項１１】
前記リン酸化合物がリン酸水素アンモニウムである、請求項８〜１０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１２】
ステップ（ｄ）が３７〜８０℃で行われる、請求項８〜１１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１３】
得られたガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物のその後の焼成をさらに含む、請求項８〜１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１４】
（Ｃａ＋Ｇａ）／Ｐモル比が１．３〜１．６７であり、ガリウム含量が４．５重量％以下である、請求項８〜１２のいずれか１項に記載の方法によって得られうる、ガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物。
【請求項１５】
生体材料、特に自己凝結性リン酸カルシウムセメント（ＣＰＣ）の製造のための、請求項１〜４及び１４のいずれか１項に記載のガリウムがドープされたリン酸カルシウム化合物の使用。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図２】
【図３】
【図４】
【公表番号】特表２０１２−５１９６４１（Ｐ２０１２−５１９６４１Ａ）
【公表日】平成２４年８月３０日（２０１２．８．３０）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１１−５５２４４０（Ｐ２０１１−５５２４４０）
【出願日】平成２２年３月３日（２０１０．３．３）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＥＰ２０１０／０５２７２１
【国際公開番号】ＷＯ２０１０／１００２０９
【国際公開日】平成２２年９月１０日（２０１０．９．１０）
【出願人】（５０９０５３６３９）
【出願人】（５０６１５２８８５）ユニベルシテ ドゥ ナント (3)
【出願人】（５０１０８９８６３）サントル ナシオナル ドゥ ラ ルシェルシェサイアンティフィク（セエヌエールエス） (173)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２４年８月３０日（２０１２．８．３０）
【国際特許分類】
【出願日】平成２２年３月３日（２０１０．３．３）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＥＰ２０１０／０５２７２１
【国際公開番号】ＷＯ２０１０／１００２０９
【国際公開日】平成２２年９月１０日（２０１０．９．１０）
【出願人】（５０９０５３６３９）
【出願人】（５０６１５２８８５）ユニベルシテ ドゥ ナント (3)
【出願人】（５０１０８９８６３）サントル ナシオナル ドゥ ラ ルシェルシェサイアンティフィク（セエヌエールエス） (173)
【Ｆターム（参考）】
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