クロライドチャンネルオープナーとしてのプロスタグランジンアナログ
【課題】クロライドチャンネルオープナーとしての新規なプロスタグランジン化合物の提供。
【解決手段】１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−１６，１６−ジフルオロ−ＰＧＥ１Ｎ−エチルアミド、１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−１６，１６−ジフルオロ−ＰＧＦ１αＮ−エチルアミド、１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−１７−フェニル−１８，１９，２０−トリノールＰＧＦ２αＮ−エチルアミド、１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−２０−エチル−ＰＧＦ２αＮ−エチルアミドなどのプロスタグランジン化合物。
【解決手段】１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−１６，１６−ジフルオロ−ＰＧＥ１Ｎ−エチルアミド、１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−１６，１６−ジフルオロ−ＰＧＦ１αＮ−エチルアミド、１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−１７−フェニル−１８，１９，２０−トリノールＰＧＦ２αＮ−エチルアミド、１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−２０−エチル−ＰＧＦ２αＮ−エチルアミドなどのプロスタグランジン化合物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、クロライドチャンネルをオープンするための方法に関する。より具体的には、本発明はクロライドイオンの輸送を調節することができる化合物に関する。
【背景技術】
【０００２】
クロライドイオン（Ｃｌ−）は、水／電解質輸送、分泌、細胞容積の調節などを司るのみならず、細胞応答を左右する因子として重要な役割を演じることが知られている。
【０００３】
例えば、クロライドイオンの細胞内外への移動は、同時に水や電解質の輸送を伴うため、細胞容積の調節に働く。このため、細胞の急激な容積変化を伴う成長・分裂、プログラム細胞死においてクロライドイオンは重要な役割を演じることが示唆されている。
【０００４】
脳においては、神経細胞内のクロライドイオンレベルを低く保つことで中枢神経系に抑制性の制御が働くことが知られており、クロライドイオンが不安や痙攣の抑制、睡眠、記憶、概日リズムの調節などに重要な役割を演じることも知られている。
【０００５】
腸管においては、クロライドイオンが下痢や便秘等の病態と深く関わっており、モルヒネなどのオピオイドの投与によってクロライドイオンなどの電解質分泌や液分泌に異常が起こると、難治性の便秘が引き起こされることも知られている。クロライドイオンのバランスの異常による疾患としては、この他に、筋緊張性萎縮症、腎結石など高カルシウム尿症を呈する疾患、不安、不眠症、嚢胞性繊維症、てんかん、無感覚症、喘息、気管支炎、神経障害などが知られている。
【０００６】
クロライドチャンネルは、クロライドイオンを輸送するイオントランスポート膜タンパク質である。様々な種類のクロライドチャンネルが神経、筋、上皮などの細胞膜に存在し、様々な生理機能や細胞防御機構に関与していることが報告されている。
【０００７】
例えば、ＣＦＴＲ（cystic fibrosis transmembrane conductance regulator）と名付けられたクロライドチャンネルは、嚢胞性線維症（cystic fibrosis）の原因究明の過程で発見された。嚢胞性線維症は、白色人種において最もよく知られた常染色体性劣性の遺伝性疾患で、原因となる遺伝子の変異は、ＣＦＴＲ遺伝子に起こり、気道、膵臓、腸管、汗腺、消化管などの上皮細胞にあるＣＦＴＲの機能の欠失により、クロライドイオンの透過性が低下するために起こることが知られている。
【０００８】
また、シビレエイの発電器官によりクローニングされてＣｌＣ−０と名付けられたクロライドチャンネルはその後、大きなファミリー(ＣｌＣファミリー)を形成することが明らかになった。ＣｌＣファミリーの例としては、哺乳類の骨格筋に存在するＣｌＣ-１、様々な臓器の上皮に存在するＣｌＣ-２、海馬、小脳などに分布するＣｌＣ-３、ＣｌＣ-４、肺、腎臓などにあるＣｌＣ-５、脳、精巣、骨格筋、腎臓などにあるＣｌＣ-６、ＣｌＣ-７、また腎臓だけに特異的にみられるＣｌＣＫ-１、ＣｌＣＫ-２などがあり、ＣｌＣ-１の異常によって先天性筋強直症が、ＣｌＣ-５の異常によって遺伝性腎結石症などの疾患が起こることが知られている。
【０００９】
したがって、クロライドチャンネルをオープンし、クロライドイオンの輸送を促進することができる化合物は、様々な細胞の機能や防御機構に重要な役割を演じると考えられ、何らかの原因でクロライドイオンの透過性が低下し、細胞内外のクロライドイオンのバランスに異常をきたした結果生じる病態の処置に有用であると考えられる。
【００１０】
プロスタグランジン類（以後プロスタグランジンはＰＧとして示す）はヒトおよび他の哺乳類の組織または器官に含有され、広範囲の生理学的活性を示す有機カルボン酸の１群である。天然に存在するＰＧ類（天然ＰＧ類）は一般的に、式（Ａ）に示すプロスタン酸骨格を有する。
【化１】
【００１１】
一方天然ＰＧ類の幾つかの合成アナログは修飾された骨格を持っている。天然ＰＧ類は５員環部分の構造特性によって、ＰＧＡ類、ＰＧＢ類、ＰＧＣ類、ＰＧＤ類、ＰＧＥ類、ＰＧＦ類、ＰＧＧ類、ＰＧＨ類、ＰＧＩ類およびＰＧＪ類に分類され、さらに炭素鎖部分の不飽和の数と位置によって以下の３タイプに分類される。
（下付１）．．．１３，１４−不飽和−１５−ＯＨ
（下付２）．．．５，６−および１３，１４−ジ不飽和−１５−ＯＨ
（下付３）．．．５，６−、１３，１４−および１７，１８−トリ不飽和−１５−ＯＨ。
【００１２】
さらに、ＰＧＦ類は９位の水酸基の配置によってα（水酸基がアルファー配置である）およびβ（水酸基がベータ配置である）に分類される。
【００１３】
ＰＧＥ１、ＰＧＥ２およびＰＧＥ３は血管拡張、血圧降下、胃液分泌減少、腸管運動亢進、子宮収縮、利尿、気管支拡張および抗潰瘍活性をもつことが知られている。また、ＰＧＦ１α、ＰＧＦ２αおよびＰＧＦ３αは血圧上昇、血管収縮、腸管運動亢進性、子宮収縮、黄体退行および気管収縮特性を有することが知られている。
【００１４】
ＰＧＥ１及びＰＧＦ２αが家兎回腸においてクロライドイオンの分泌を刺激することや（Nature vol.238, 26-27, 1972、この参考文献は引用によりその内容が本出願に含まれる）、ＰＧＥ２がヒト空腸のクロライドイオンの分泌を誘発することが報告されている（Gastroenterology vol.78, 32-42, 1980、この参考文献は引用によりその内容が本出願に含まれる）。また、ＰＧＥ２が子宮内膜上皮細胞のクロライドイオンの輸送を調節することが報告されている（Journal of Physiology vol.508, 31-47, 1998、この参考文献は引用によりその内容が本出願に含まれる）。一方で、嚢胞性繊維症の患者において血小板のクロライドの輸送がＰＧＥ１に応答しなかったことや（European Journal of Clinical Chemistry and Clinical Biochemistry vol.33, No.6, 329-335, 1995、この参考文献は引用によりその内容が本出願に含まれる）、プロスタグランジンアナログ（ミソプロストール（misoprostol））が、嚢胞性繊維症の患者においてクロライドの分泌を促進しなかったことも報告されている（American Journal of Human Genetics Vol.67, No.6, 1422-1427, 2000、この参考文献は引用によりその内容が本出願に含まれる）。
【００１５】
さらに、ＰＧＥ２がウサギのハウスキーピングの基底外膜のクロライドチャンネルをオープンすることが報告されている（Journal of Biological Chemistry, 270(32) 1995、この参考文献は引用によりその内容が本出願に含まれる）。また、ＰＧＥ２とＰＧＦ２αがＣＦＴＲを介してマウスの子宮内膜上皮細胞におけるクロライドコンダクタンスを活性化することが報告されている（Biology of Reproduction, 60(2) 1999）。
【００１６】
しかしながら、プロスタグランジン化合物がクロライドチャンネル、特にＣｌＣチャンネルに対してどのような作用を示すかについては知られていない。
【発明の概要】
【００１７】
（発明の開示）
本発明者は、鋭意研究の結果、プロスタグランジン化合物がクロライドチャンネル、特にＣｌＣチャンネルをオープンすることを見出し、本発明を完成するに至った。
【００１８】
すなわち、本発明は、プロスタグランジン化合物の有効量を対象に投与することを含む、哺乳類対象におけるＣｌＣチャンネルをオープンするための方法に関する。特に本発明は、クロライドイオンの透過性の低下に関連する症状の処置を必要とする対象に対して、プロスタグランジン化合物の有効量を投与することによって、ＣｌＣチャンネルをオープンすることを含む前記症状を処置するための方法に関する。
【００１９】
また、本発明は有効量のプロスタグランジン化合物を含む、ＣｌＣチャンネルをオープンするための医薬組成物に関する。特に、本発明は、有効量のプロスタグランジン化合物を含む、哺乳類対象におけるクロライドイオンの透過性の低下に関連する症状の処置のための医薬組成物に関する。
【００２０】
さらに本発明は、哺乳類対象におけるＣｌＣチャンネルをオープンするための医薬組成物の製造のためのプロスタグランジン化合物の使用に関する。特に本発明は、クロライドイオンの透過性の低下に関連する症状の処置のための医薬組成物の製造のためのプロスタグランジン化合物の使用に関する。
【００２１】
例えば、本発明は以下に記載する方法、組成物、使用、化合物に関する。
（１）プロスタグランジン化合物の有効量を対象に投与することを含む、哺乳類対象におけるＣｌＣチャンネルをオープンするための方法。
（２）クロライドイオン透過性の低下に関連する症状を処置する方法であって、かかる処置を必要とする対象にプロスタグランジン化合物の有効量を投与することによってＣｌＣチャンネルをオープンすることを含む方法。
（３）該クロライドイオン透過性の低下に関連する症状が嚢胞性線維症である、（２）に記載の方法。
（４）プロスタグランジン化合物が下記一般式（Ｉ）で表される化合物である、（１）から（３）のいずれかに記載の方法。
【化２】
［式中、Ｌ、ＭおよびＮは、水素原子、ヒドロキシ、ハロゲン原子、低級アルキル、ヒドロキシ（低級）アルキルまたはオキソ（ここでＬおよびＭの少なくとも１つは水素以外の基であり、五員環は１または複数の二重結合を有していてもよい）；
Ａは、−ＣＨ２ＯＨ、−ＣＯＣＨ２ＯＨ、−ＣＯＯＨまたはその官能性誘導体；
Ｂは、−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨ−または−Ｃ≡Ｃ−；
Ｚは
【化３】
（ここでＲ４およびＲ５は、水素、ヒドロキシ、ハロゲン、低級アルキル、低級アルコキシまたはヒドロキシ（低級）アルキルであり、ただし、Ｒ４およびＲ５が同時にヒドロキシおよび低級アルコキシであることはない）；
Ｒ１は、非置換またはハロゲン、アルキル、ヒドロキシ、オキソ、アリールまたは複素環基で置換された飽和または不飽和二価低〜中級脂肪族炭化水素残基であり、脂肪族炭化水素における少なくとも１の炭素原子は任意に酸素、窒素または硫黄によって置換されていてもよい；そして、
Ｒａは、非置換またはハロゲン、オキソ、ヒドロキシ、低級アルコキシ、低級アルカノイルオキシ、シクロ（低級）アルキル、シクロ（低級）アルキルオキシ、アリール、アリールオキシ、複素環基または複素環オキシ基で置換された飽和または不飽和の低〜中級脂肪族炭化水素残基；シクロ（低級）アルキル；シクロ（低級）アルキルオキシ；アリール；アリールオキシ；複素環基；複素環オキシ基］。
（５）プロスタグランジン化合物が１３，１４−ジヒドロ−１６−モノまたはジハロゲン−プロスタグランジン化合物である、（１）から（３）のいずれかに記載の方法。
（６）プロスタグランジン化合物が１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−１６モノまたはジハロゲン−プロスタグランジン化合物である、（１）から（３）のいずれかに記載の方法。
（７）プロスタグランジン化合物が１３，１４−ジヒドロ−１６−モノまたはジフルオロ−プロスタグランジン化合物である、（１）から（３）のいずれかに記載の方法。
（８）プロスタグランジン化合物が１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−１６モノまたはジフルオロ−プロスタグランジン化合物である、（１）から（３）のいずれかに記載の方法。
（９）プロスタグランジン化合物が１３，１４−ジヒドロ−１６モノまたはジハロゲン−プロスタグランジンＥ化合物である、（１）から（３）のいずれかに記載の方法。
（１０）プロスタグランジン化合物が１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−１６モノまたはジハロゲン−プロスタグランジンＥ化合物である、（１）から（３）のいずれかに記載の方法。
（１１）プロスタグランジン化合物が１３，１４−ジヒドロ−１６，１６−ジフルオロ−プロスタグランジンＥ１化合物である、（１）から（３）のいずれかに記載の方法。
（１２）プロスタグランジン化合物が１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−１６，１６−ジフルオロ−プロスタグランジンＥ１化合物または１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−１６，１６−ジフルオロ−１８−メチル−プロスタグランジンＥ１化合物である（１）から（３）のいずれかに記載の方法。
（１３）Ａが式（Ｖ）で表される−ＣＯＯＨの官能性誘導体である（４）に記載の方法：
−ＣＯＮＲ’Ｒ''（Ｖ）
[式中、Ｒ’およびＲ''は、水素、低級アルキル、アリール、アルキル−またはアリール−スルホニル、低級アルケニルまたは低級アルキニル]。
（１４）プロスタグランジン化合物が１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−１６，１６−ジフルオロ−ＰＧＥ１Ｎ−エチルアミドである、（１３）に記載の方法。
（１５）プロスタグランジン化合物が１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−１６，１６−ジフルオロ−ＰＧＦ１αＮ−エチルアミドである、（１３）に記載の方法。
（１６）有効量のプロスタグランジン化合物を含む、哺乳類対照におけるＣｌＣチャンネルをオープンするための組成物。
（１７）有効量のプロスタグランジン化合物を含む、哺乳類対象におけるクロライドイオン透過性の低下に関連する症状の処置用組成物。
（１８）該クロライドイオン透過性の低下に関連する症状が嚢胞性線維症である、（１７）に記載の組成物。
（１９）プロスタグランジン化合物が下記一般式（Ｉ）で表される化合物である、（１６）から（１８）のいずれかに記載の組成物：
【化４】
［式中、Ｌ、ＭおよびＮは、水素原子、ヒドロキシ、ハロゲン原子、低級アルキル、ヒドロキシ（低級）アルキルまたはオキソ（ここでＬおよびＭの少なくとも１つは水素以外の基であり、五員環は少なくとも１つの二重結合を有していてもよい）；
Ａは、−ＣＨ２ＯＨ、−ＣＯＣＨ２ＯＨ、−ＣＯＯＨまたはその官能性誘導体；
Ｂは、−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨ−または−Ｃ≡Ｃ−；
Ｚは
【化５】
（ここでＲ４およびＲ５は、水素、ヒドロキシ、ハロゲン、低級アルキル、低級アルコキシまたはヒドロキシ（低級）アルキルであり、ただし、Ｒ４およびＲ５が同時にヒドロキシおよび低級アルコキシであることはない）；
Ｒ１は、非置換またはハロゲン、アルキル、ヒドロキシ、オキソ、アリールまたは複素環基で置換された飽和または不飽和二価低〜中級脂肪族炭化水素残基であり、脂肪族炭化水素における少なくとも１の炭素原子は任意に酸素、窒素または硫黄によって置換されていてもよい；そして、
Ｒａは、非置換またはハロゲン、オキソ、ヒドロキシ、低級アルコキシ、低級アルカノイルオキシ、シクロ（低級）アルキル、シクロ（低級）アルキルオキシ、アリール、アリールオキシ、複素環基または複素環オキシ基で置換された飽和または不飽和の低〜中級脂肪族炭化水素残基；シクロ（低級）アルキル；シクロ（低級）アルキルオキシ；アリール；アリールオキシ；複素環基；複素環オキシ基］。
（２０）プロスタグランジン化合物が１３，１４−ジヒドロ−１６−モノまたはジハロゲン−プロスタグランジン化合物である、（１６）から（１８）のいずれかに記載の組成物。
（２１）プロスタグランジン化合物が１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−１６モノまたはジハロゲン−プロスタグランジン化合物である、（１６）から（１８）のいずれかに記載の組成物。
（２２）プロスタグランジン化合物が１３，１４−ジヒドロ−１６−モノまたはジフルオロ−プロスタグランジン化合物である、（１６）から（１８）のいずれかに記載の組成物。
（２３）プロスタグランジン化合物が１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−１６モノまたはジフルオロ−プロスタグランジン化合物である、（１６）から（１８）のいずれかに記載の組成物。
（２４）プロスタグランジン化合物が１３，１４−ジヒドロ−１６モノまたはジハロゲン−プロスタグランジンＥ化合物である、（１６）から（１８）のいずれかに記載の組成物。
（２５）プロスタグランジン化合物が１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−１６モノまたはジハロゲン−プロスタグランジンＥ化合物である、（１６）から（１８）のいずれかに記載の組成物。
（２６）プロスタグランジン化合物が１３，１４−ジヒドロ−１６，１６−ジフルオロ−プロスタグランジンＥ１化合物である、（１６）から（１８）のいずれかに記載の組成物。
（２７）プロスタグランジン化合物が１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−１６，１６−ジフルオロ−プロスタグランジンＥ１化合物または１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−１６，１６−ジフルオロ−１８−メチル−プロスタグランジンＥ１化合物である、（１６）から（１８）のいずれかに記載の組成物。
（２８）Ａが式（Ｖ）で表される−ＣＯＯＨの官能性誘導体である（１９）に記載の組成物：
−ＣＯＮＲ’Ｒ''（Ｖ）
[式中、Ｒ’およびＲ''は、水素、低級アルキル、アリール、アルキル−またはアリール−スルホニル、低級アルケニルまたは低級アルキニル]。
（２９）プロスタグランジン化合物が１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−１６，１６−ジフルオロ−ＰＧＥ１Ｎ−エチルアミドである、（２８）に記載の組成物。
（３０）プロスタグランジン化合物が１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−１６，１６−ジフルオロ−ＰＧＦ１αＮ−エチルアミドである、（２８）に記載の組成物。
（３１）哺乳類対象におけるＣｌＣチャンネルをオープンするための医薬組成物の製造のためのプロスタグランジン化合物の使用。
（３２）哺乳類対象におけるクロライドイオン透過性の低下に関連する症状を処置するための医薬組成物の製造のためのプロスタグランジン化合物の使用。
（３３）該クロライドイオン透過性の低下に関連する症状が嚢胞性線維症である、（３２）に記載の使用。
（３４）プロスタグランジン化合物が下記一般式（Ｉ）で表される化合物である、（３１）から（３３）のいずれかに記載の使用：
【化６】
［式中、Ｌ、ＭおよびＮは、水素原子、ヒドロキシ、ハロゲン原子、低級アルキル、ヒドロキシ（低級）アルキルまたはオキソ（ここでＬおよびＭの少なくとも１つは水素以外の基であり、五員環は少なくとも１つの二重結合を有していてもよい）；
Ａは、−ＣＨ２ＯＨ、−ＣＯＣＨ２ＯＨ、−ＣＯＯＨまたはその官能性誘導体；
Ｂは、−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨ−または−Ｃ≡Ｃ−；
Ｚは
【化７】
（ここでＲ４およびＲ５は、水素、ヒドロキシ、ハロゲン、低級アルキル、低級アルコキシまたはヒドロキシ（低級）アルキルであり、ただし、Ｒ４およびＲ５が同時にヒドロキシおよび低級アルコキシであることはない）；
Ｒ１は、非置換またはハロゲン、アルキル、ヒドロキシ、オキソ、アリールまたは複素環基で置換された飽和または不飽和二価低〜中級脂肪族炭化水素残基であり、脂肪族炭化水素における少なくとも１の炭素原子は任意に酸素、窒素または硫黄によって置換されていてもよい；そして、
Ｒａは、非置換またはハロゲン、オキソ、ヒドロキシ、低級アルコキシ、低級アルカノイルオキシ、シクロ（低級）アルキル、シクロ（低級）アルキルオキシ、アリール、アリールオキシ、複素環基または複素環オキシ基で置換された飽和または不飽和の低〜中級脂肪族炭化水素残基；シクロ（低級）アルキル；シクロ（低級）アルキルオキシ；アリール；アリールオキシ；複素環基；複素環オキシ基］。
（３５）プロスタグランジン化合物が１３，１４−ジヒドロ−１６−モノまたはジハロゲン−プロスタグランジン化合物である、（３１）から（３３）のいずれかに記載の使用。
（３６）プロスタグランジン化合物が１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−１６−モノまたはジハロゲン−プロスタグランジン化合物である、（３１）から（３３）のいずれかに記載の使用。
（３７）プロスタグランジン化合物が１３，１４−ジヒドロ−１６−モノまたはジフルオロ−プロスタグランジン化合物である、（３１）から（３３）のいずれかに記載の使用。
（３８）プロスタグランジン化合物が１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−１６−モノまたはジフルオロ−プロスタグランジン化合物である、（３１）から（３３）のいずれかに記載の使用。
（３９）プロスタグランジン化合物が１３，１４−ジヒドロ−１６−モノまたはジハロゲン−プロスタグランジンＥ化合物である、（３１）から（３３）のいずれかに記載の使用。
（４０）プロスタグランジン化合物が１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−１６−モノまたはジハロゲン−プロスタグランジンＥ化合物である、（３１）から（３３）のいずれかに記載の使用。
（４１）プロスタグランジン化合物が１３，１４−ジヒドロ−１６，１６−ジフルオロ−プロスタグランジンＥ１化合物である、（３１）から（３３）のいずれかに記載の使用。
（４２）プロスタグランジン化合物が１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−１６，１６−ジフルオロ−プロスタグランジンＥ１化合物または１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−１６，１６−ジフルオロ−１８−メチル−プロスタグランジンＥ１化合物である、（３１）から（３３）のいずれかに記載の使用。
（４３）Ａが式（Ｖ）で表される−ＣＯＯＨの官能性誘導体である（３４）に記載の使用：
−ＣＯＮＲ’Ｒ''（Ｖ）
[式中、Ｒ’およびＲ''は、水素、低級アルキル、アリール、アルキル−またはアリール−スルホニル、低級アルケニルまたは低級アルキニル]。
（４４）プロスタグランジン化合物が１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−１６，１６−ジフルオロ−ＰＧＥ１Ｎ−エチルアミドである、（４３）に記載の使用。
（４５）プロスタグランジン化合物が１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−１６，１６−ジフルオロ−ＰＧＦ１αＮ−エチルアミドである、（４３）に記載の使用。
（４６）式(IV)で表される新規化合物：
【化８】
[式中、Ｌ、ＭおよびＮは、水素、ヒドロキシ、ハロゲン、低級アルキル、ヒドロキシ（低級）アルキルまたはオキソ（ここでＬおよびＭの少なくとも１つは水素以外の基であり、五員環は１または複数の二重結合を有していてもよい）；
Ｒ’およびＲ''は、水素、低級アルキル、アリール、アルキル−またはアリール−スルホニル、低級アルケニルまたは低級アルキニル；
Ｂは、−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨ−または−Ｃ≡Ｃ−；
Ｒ１は、非置換またはハロゲン、アルキル、ヒドロキシ、オキソ、アリールまたは複素環基で置換された飽和または不飽和二価低〜中級脂肪族炭化水素残基であり、脂肪族炭化水素における少なくとも１の炭素原子は任意に酸素、窒素または硫黄によって置換されていてもよい；そして、
Ｒａは、非置換またはハロゲン、オキソ、ヒドロキシ、低級アルコキシ、低級アルカノイルオキシ、シクロ（低級）アルキル、シクロ（低級）アルキルオキシ、アリール、アリールオキシ、複素環基または複素環オキシ基で置換された飽和または不飽和の低〜中級脂肪族炭化水素残基；シクロ（低級）アルキル；シクロ（低級）アルキルオキシ；アリール；アリールオキシ；複素環基；複素環オキシ基]。
（４７）化合物が１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−１６，１６−ジフルオロ−ＰＧＥ１Ｎ−エチルアミドである、（４６）に記載の化合物。
（４８）化合物が１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−１６，１６−ジフルオロ−ＰＧＦ１αＮ−エチルアミドである、（４６）に記載の化合物。
（４９）化合物が１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−１７−フェニル−１８，１９，２０−トリノールＰＧＦ２αＮ−エチルアミドである、（４６）に記載の化合物。
（５０）化合物が１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−２０−エチル−ＰＧＦ２αＮ−エチルアミドである、（４６）に記載の化合物。
【００２２】
（発明の詳細な記載）
本発明のＰＧ化合物の命名に際しては、前記式（Ａ）に示したプロスタン酸の番号を用いる。
【００２３】
前記式（Ａ）はＣ−２０の基本骨格のものであるが、本発明では炭素数がこれによって限定されるものではない。即ち、式（Ａ）においてＰＧ化合物の基本骨格を構成する炭素の番号はカルボン酸を１とし５員環に向かって順に２〜７までをα鎖上の炭素に、８〜１２までを５員環の炭素に、１３〜２０までをω鎖上に付しているが、炭素数がα鎖上で減少する場合、２位から順次番号を抹消して命名する。炭素数がα鎖上で増加する場合、カルボキシル基（Ｃ−１）の代わりに２位において対応する置換基を有する置換化合物として命名する。同様に炭素数がω鎖上で減少する場合、２０位から順次番号を抹消して命名する。また、炭素数がω鎖上で増加する場合、２１番目以後の炭素原子は置換基として命名する。また、立体配置に関しては、特に断りのない限り、上記基本骨格（Ａ）の有する立体配置に従うものとする。
【００２４】
また、例えばＰＧＤ、ＰＧＥ、ＰＧＦは、９位および／または１１位に水酸基を有するＰＧ化合物をいうが、本発明では、９位および／または１１位の水酸基に代えて他の基を有するものも包含する。これらの化合物を命名する場合、９−デヒドロキシ−９−置換−ＰＧ化合物あるいは１１−デヒドロキシ−１１−置換−ＰＧ化合物の形で命名する。なお、水酸基の代わりに水素を有するＰＧ化合物は、単に９−あるいは１１−デヒドロキシ−ＰＧ化合物と称する。
【００２５】
前述のように、ＰＧ化合物の命名はプロスタン酸骨格に基づいて行うが、上記化合物がプロスタグランジンと類似の部分構造を有する場合には、簡略化のため「ＰＧ」の略名を利用することがある。この場合、α鎖の骨格炭素数が２個延長されたＰＧ化合物、すなわちα鎖の骨格炭素数が９であるＰＧ化合物は、２−デカルボキシ−２−（２−カルボキシエチル）−ＰＧ化合物と命名する。同様に、α鎖の骨格炭素数が１１であるＰＧ化合物は、２−デカルボキシ−２−（４−カルボキシブチル）−ＰＧ化合物と命名する。また、ω鎖の骨格炭素数が２個延長されたＰＧ化合物、すなわちω鎖の骨格炭素数が１０であるＰＧ化合物は、２０−エチル−ＰＧ化合物と命名する。なお、命名はこれをＩＵＰＡＣ命名法に基づいて行うことも可能である。
【００２６】
アナログ（置換体を含む）または誘導体の例は、上記ＰＧ類のα鎖末端のカルボキシル基がエステル化された化合物、α鎖が延長された化合物、それらの生理学的に許容し得る塩、２−３位の炭素結合が２重結合あるいは５−６位の炭素結合が３重結合を有する化合物、３位、５位、６位、１６位、１７位、１８位、１９位および／または２０位の炭素に置換基を有する化合物、９位および／または１１位の水酸基の代りに低級アルキル基またはヒドロキシ（低級）アルキル基を有する化合物等である。
【００２７】
本発明において３位、１７位、１８位および／または１９位の好適な置換基としては、例えば炭素数１〜４のアルキル基があげられ、特にメチル基、エチル基があげられる。１６位の好適な置換基としては、メチル、エチル等の低級アルキル、ヒドロキシ、塩素、フッ素等のハロゲン原子、およびトリフルオロメチルフェノキシ等のアルコキシが挙げられる。１７位の好適な置換基としては、メチル、エチル等の低級アルキル、ヒドロキシ、塩素、フッ素等のハロゲン原子、およびトリフルオロメチルフェノキシ等のアルコキシが挙げられる。２０位の好適な置換基としては、Ｃ１−４アルキルのような飽和または不飽和の低級アルキル基、Ｃ１−４アルコキシのような低級アルコキシ基、Ｃ１−４アルコキシ−Ｃ１−４アルキルのような低級アルコキシアルキルを含む。５位の好適な置換基としては、塩素、フッ素などのハロゲン原子を含む。６位の好適な置換基としては、カルボニル基を形成するオキソ基を含む。９位および／または１１位にヒドロキシ基、低級アルキルまたは低級（ヒドロキシ）アルキル置換基を有する場合のＰＧ類の立体配置はα，βまたはそれらの混合物であってもかまわない。
【００２８】
さらに、上記アナログまたは誘導体は、ω鎖が天然のＰＧ類より短い化合物のω鎖末端にアルコキシ基、シクロアルキル基、シクロアルキルオキシ基、フェノキシ基、フェニル基等の置換基を有する化合物であってもよい。
【００２９】
本発明において用いられる好適な化合物は下記式（Ｉ）で表される：
【化９】
［式中、Ｌ、ＭおよびＮは、水素、ヒドロキシ、ハロゲン、低級アルキル、ヒドロキシ（低級）アルキルまたはオキソ（ここでＬおよびＭの少なくとも１つは水素以外の基であり、五員環は少なくとも１つの二重結合を有していてもよい）；
Ａは、−ＣＨ２ＯＨ、−ＣＯＣＨ２ＯＨ、−ＣＯＯＨまたはその官能性誘導体；
Ｂは、−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨ−または−Ｃ≡Ｃ−；
Ｚは
【化１０】
（ここでＲ４およびＲ５は、水素、ヒドロキシ、ハロゲン、低級アルキル、低級アルコキシまたはヒドロキシ（低級）アルキルであり、ただし、Ｒ４およびＲ５が同時にヒドロキシおよび低級アルコキシであることはない）；
Ｒ１は、非置換またはハロゲン、アルキル、ヒドロキシ、オキソ、アリールまたは複素環基で置換された飽和または不飽和二価低〜中級脂肪族炭化水素残基であり、脂肪族炭化水素における少なくとも１の炭素原子は任意に酸素、窒素または硫黄によって置換されていてもよい；そして、
Ｒａは、非置換またはハロゲン、オキソ、ヒドロキシ、低級アルコキシ、低級アルカノイルオキシ、シクロ（低級）アルキル、シクロ（低級）アルキルオキシ、アリール、アリールオキシ、複素環基または複素環オキシ基で置換された飽和または不飽和の低〜中級脂肪族炭化水素残基；シクロ（低級）アルキル；シクロ（低級）アルキルオキシ；アリール；アリールオキシ；複素環基；複素環オキシ基］。
【００３０】
本発明において用いられる特に好ましい化合物は、式（II）で表される：
【化１１】
[式中、ＬおよびＭは、水素、ヒドロキシ、ハロゲン、低級アルキル、ヒドロキシ（低級）アルキルまたはオキソ（ただし、ＬおよびＭの基のうちの少なくとも１つは、水素以外の基であり、５員環は少なくとも１つの二重結合を有していてもよい）；
Ａは、−ＣＨ２ＯＨ、−ＣＯＣＨ２ＯＨ、−ＣＯＯＨまたはそれらの官能性誘導体；
Ｂは、−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨ−または−Ｃ≡Ｃ−；
Ｚは、
【化１２】
（ここでＲ４およびＲ５は、水素、ヒドロキシ、ハロゲン、低級アルキル、低級アルコキシまたはヒドロキシ（低級）アルキルであり、ただし、Ｒ４およびＲ５が同時にヒドロキシおよび低級アルコキシであることはない）
Ｘ１およびＸ２は、水素、低級アルキルまたはハロゲン；
Ｒ１は、非置換またはハロゲン、アルキル、ヒドロキシ、オキソ、アリールまたは複素環で置換された、二価の飽和または不飽和の低〜中級の脂肪族炭化水素残基であり、脂肪族炭化水素における少なくとも１の炭素原子は任意に酸素、窒素または硫黄によって置換されていてもよい；
Ｒ２は、単結合または低級アルキレン；そして、
Ｒ３は、低級アルキル、低級アルコキシ、シクロ（低級）アルキル、シクロ（低級）アルキルオキシ、アリール、アリールオキシ、複素環または複素環オキシ］。
【００３１】
上記式中、Ｒ１およびＲａの定義における「不飽和」の語は、主鎖および／または側鎖の炭素原子間の結合として、１つまたはそれ以上の二重結合および／または三重結合を孤立、分離または連続して含むことを意味する。通常の命名法に従って、連続する２つの位置間の不飽和結合は若い方の位置番号を表示することにより示し、連続しない２つの位置間の不飽和結合は両方の位置番号を表示して示す。
【００３２】
「低〜中級脂肪族炭化水素」の語は、炭素原子数１〜１４の直鎖または分枝鎖（ただし、側鎖は炭素原子数１〜３のものが好ましい）を有する炭化水素基を意味し、好ましくは炭素原子数１〜１０、特に１〜８の炭化水素基である。
【００３３】
「ハロゲン原子」の語は、フッ素、塩素、臭素およびヨウ素を包含する。
【００３４】
「低級」の語は、特にことわりのない限り炭素原子数１〜６を有する基を包含するものである。
【００３５】
「低級アルキル」の語は、炭素原子数１〜６の直鎖または分枝状の飽和炭化水素基を意味し、例えばメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔ−ブチル、ペンチルおよびヘキシルを含む。
【００３６】
「低級アルキレン」の語は、炭素原子数１〜６の直鎖または分枝状の二価飽和炭化水素基を意味し、例えばメチレン、エチレン、プロピレン、イソプロピレン、ブチレン、イソブチレン、ｔ−ブチレン、ペンチレンおよびヘキシレンを含む。
【００３７】
「低級アルコキシ」の語は、低級アルキルが上述と同意義である低級アルキル−Ｏ−基を意味する。
【００３８】
「ヒドロキシ（低級）アルキル」の語は、少なくとも１つのヒドロキシ基で置換された上記のような低級アルキルを意味し、例えばヒドロキシメチル、１−ヒドロキシエチル、２−ヒドロキシエチルおよび１−メチル−１−ヒドロキシエチルが挙げられる。
【００３９】
「低級アルカノイルオキシ」の語は、式ＲＣＯ−Ｏ−（ここで、ＲＣＯ−は上記のような低級アルキル基が酸化されて生じるアシル基、例えばアセチル）で示される基を意味する。
【００４０】
「シクロ（低級）アルキル」の語は、炭素原子３個以上を含む上記のような低級アルキル基が閉環して生ずる環状基を意味し、例えばシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシルを含む。
【００４１】
「シクロ（低級）アルキルオキシ」の語は、シクロ（低級）アルキルが上述と同意義であるシクロ（低級）アルキル−Ｏ−基を意味する。
【００４２】
「アリール」の語は、非置換または置換の芳香族炭化水素環基を包含し、（好ましくは単環式基の）、例えばフェニル、トリル、キシリルが例示される。置換基としては、ハロゲン原子、ハロ（低級）アルキル（ここで、ハロゲン原子および低級アルキルは前記の意味）が含まれる。
【００４３】
「アリールオキシ」の語は、式ＡｒＯ−（ここで、Ａｒは上記のようなアリール）で示される基を意味する。
【００４４】
「複素環基」の語としては、置換されていてもよい炭素原子および、窒素原子、酸素原子および硫黄原子から選ばれる１種または２種のヘテロ原子を１〜４個、好ましくは１〜３個含む、５〜１４員環、好ましくは５〜１０員環の、単環式〜３環式、好ましくは単環式の複素環基が含まれる。複素環基としては、フリル基、チエニル基、ピロリル基、オキサゾリル基、イソキサゾリル基、チアゾリル基、イソチアゾリル基、イミダゾリル基、ピラゾリル基、フラザニル基、ピラニル基、ピリジル基、ピリダジニル基、ピリミジル基、ピラジニル基、２−ピロリニル基、ピロリジニル基、２−イミダゾリニル基、イミダゾリジニル基、２−ピラゾリニル基、ピラゾリジニル基、ピペリジノ基、ピペラジニル基、モルホリノ基、インドリル基、ベンゾチエニル基、キノリル基、イソキノリル基、プリニル基、キナゾリニル基、カルバゾリル基、アクリジニル基、フェナントリジニル基、ベンズイミダゾリル基、ベンズイミダゾリニル基、ベンゾチアゾリル基、フェノチアジニル基などが例示される。置換基としてはハロゲン、ハロゲン置換低級アルキル基（ここで、ハロゲンおよび低級アルキル基は前記の意味）が例示される。
【００４５】
「複素環オキシ基」の語は、式ＨｃＯ−（ここでＨｃは上記のような複素環基）で示される基を意味する。
【００４６】
Ａの「官能性誘導体」の語は、塩（好ましくは、医薬上許容し得る塩）、エーテル、エステルおよびアミド類を含む。
【００４７】
適当な「医薬上許容し得る塩」としては、慣用される非毒性塩を含み、無機塩基との塩、例えばアルカリ金属塩（ナトリウム塩、カリウム塩等）、アルカリ土類金属塩（カルシウム塩、マグネシウム塩等）、アンモニウム塩；または有機塩基との塩、例えばアミン塩（例えばメチルアミン塩、ジメチルアミン塩、シクロヘキシルアミン塩、ベンジルアミン塩、ピペリジン塩、エチレンジアミン塩、エタノールアミン塩、ジエタノールアミン塩、トリエタノールアミン塩、トリス（ヒドロキシメチルアミノ）エタン塩、モノメチル−モノエタノールアミン塩、プロカイン塩、カフェイン塩等）、塩基性アミノ酸塩（例えばアルギニン塩、リジン塩等）、テトラアルキルアンモニウム塩等が挙げられる。これらの塩類は、例えば対応する酸および塩基から常套の反応によってまたは塩交換によって製造し得る。
【００４８】
エーテルの例としてはアルキルエーテル、例えば、メチルエーテル、エチルエーテル、プロピルエーテル、イソプロピルエーテル、ブチルエーテル、イソブチルエーテル、ｔ−ブチルエーテル、ペンチルエーテル、１−シクロプロピルエチルエーテル等の低級アルキルエーテル；オクチルエーテル、ジエチルヘキシルエーテル、ラウリルエーテル、セチルエーテル等の中級または高級アルキルエーテル；オレイルエーテル、リノレニルエーテル等の不飽和エーテル；ビニルエーテル、アリルエーテル等の低級アルケニルエーテル；エチニルエーテル、プロピニルエーテル等の低級アルキニルエーテル；ヒドロキシエチルエーテル、ヒドロキシイソプロピルエーテル等のヒドロキシ（低級）アルキルエーテル；メトキシメチルエーテル、１−メトキシエチルエーテル等の低級アルコキシ（低級）アルキルエーテル；例えばフェニルエーテル、トシルエーテル、ｔ−ブチルフェニルエーテル、サリチルエーテル、３,４−ジメトキシフェニルエーテル、ベンズアミドフェニルエーテル等の所望により置換されたアリールエーテル；およびベンジルエーテル、トリチルエーテル、ベンズヒドリルエーテル等のアリール(低級)アルキルエーテルが挙げられる。
【００４９】
エステルとしては、メチルエステル、エチルエステル、プロピルエステル、イソプロピルエステル、ブチルエステル、イソブチルエステル、ｔ−ブチルエステル、ペンチルエステル、１−シクロプロピルエチルエステル等の低級アルキルエステル；ビニルエステル、アリルエステル等の低級アルケニルエステル；エチニルエステル、プロピニルエステル等の低級アルキニルエステル；ヒドロキシエチルエステル等のヒドロキシ（低級）アルキルエステル；メトキシメチルエステル、１−メトキシエチルエステル等の低級アルコキシ（低級）アルキルエステルのような脂肪族エステル；および例えばフェニルエステル、トリルエステル、ｔ−ブチルフェニルエステル、サリチルエステル、３,４−ジメトキシフェニルエステル、ベンズアミドフェニルエステル等の所望により置換されたアリールエステル；ベンジルエステル、トリチルエステル、ベンズヒドリルエステル等のアリール（低級）アルキルエステルが挙げられる。
【００５０】
Ａのアミドは、式−ＣＯＮＲ’Ｒ''（式中、Ｒ’およびＲ''はそれぞれ水素、低級アルキル、アリール、アルキル−またはアリール−スルホニル、低級アルケニルおよび低級アルキニル）で示される基を意味し、例えばメチルアミド、エチルアミド、ジメチルアミド、ジエチルアミド等の低級アルキルアミド；アニリド、トルイジド等のアリールアミド；メチルスルホニルアミド、エチルスルホニルアミド、トリルスルホニルアミド等のアルキルもしくはアリールスルホニルアミド等が挙げられる。
【００５１】
好ましいＬおよびＭの例は、ヒドロキシ、オキソを含み、特にＭがヒドロキシでＬがオキソであるいわゆるＰＧＥタイプと称される５員環構造を有するものを含む。
【００５２】
好ましいＡは、−ＣＯＯＨ、その医薬上許容し得る塩、エステルまたはアミドである。
【００５３】
好ましいＸ１およびＸ２の例は、フッ素であり、いわゆる１６，１６−ジフルオロタイプと称されるものを含む。
【００５４】
好ましいＲ１は、炭素原子数１〜１０であり、特に好ましくは炭素原子数６〜１０の炭化水素残基である。脂肪族炭化水素における少なくとも１の炭素原子は酸素、窒素または硫黄で置換されていてもよい。
【００５５】
Ｒ１の具体例としては、例えば、次のものが挙げられる。
−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、
−ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、
−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ−、
−ＣＨ２−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、
−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−、
−ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−、
−ＣＨ２−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−、
−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、
−ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、
−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ−、
−ＣＨ２−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、
−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ（ＣＨ３）−ＣＨ２−、
−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ（ＣＨ３）−ＣＨ２−、
−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、
−ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、
−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ−、
−ＣＨ２−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、
−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ（ＣＨ３）−ＣＨ２−。
【００５６】
好ましいＲａは、１−１０炭素原子、より好ましくは１−８炭素原子を有する炭化水素である。Ｒａは１の炭素原子を有する１または２の側鎖を有していてもよい。
【００５７】
上記式（Ｉ）および（ＩＩ）における環、および、α−および／またはω−鎖の配置は、天然ＰＧ類の配置と同じであっても異なっていてもよい。しかしながら、本発明は、天然タイプの配置を有する化合物と非天然タイプの配置を有する化合物の混合物も包含する。
【００５８】
本発明において、１３と１４位が飽和し、１５位がケト（＝Ｏ）であるＰＧ化合物は、１１位のヒドロキシと１５位のケト間のへミアセタール形成により、ケト−ヘミアセタール平衡を生ずる場合がある。
【００５９】
例えば、Ｘ１およびＸ２の両方がハロゲン原子、特にフッ素原子の場合、化合物は互変異性体、二環式化合物を含むことが確認されている。
【００６０】
このような互変異性体が存在する場合、両異性体の存在比率は他の部分の構造または置換基の種類により変動し、場合によっては一方の異性体が圧倒的に存在することもあるが、本発明においてはこれら両者を含むものとする。
【００６１】
さらに、本発明に用いられる１５−ケト−ＰＧ化合物には、二環式化合物およびそのアナログまたは誘導体が含まれる。
【００６２】
二環式化合物は下記式(III)で表される：
【化１３】
[式中、Ａは、−ＣＨ２ＯＨ、−ＣＯＣＨ２ＯＨ、−ＣＯＯＨまたはそれらの官能性誘導体；
Ｘ１’およびＸ２’は、水素、低級アルキルまたはハロゲン；
Ｙは、
【化１４】
（ここでＲ４’およびＲ５’は、水素、ヒドロキシ、ハロゲン、低級アルキル、低級アルコキシまたはヒドロキシ（低級）アルキルであり、ただし、Ｒ４’およびＲ５’が同時にヒドロキシおよび低級アルコキシであることはない）；
Ｒ１は、非置換またはハロゲン、アルキル、ヒドロキシ、オキソ、アリールまたは複素環で置換された、二価の飽和または不飽和の低〜中級の脂肪族炭化水素残基；そして、
Ｒ２’は、非置換またはハロゲン、オキソ、ヒドロキシ、低級アルコキシ、低級アルカノイルオキシ、シクロ（低級）アルキル、シクロ（低級）アルキルオキシ、アリール、アリールオキシ、複素環基または複素環オキシ基で置換された飽和または不飽和の低〜中級の脂肪族炭化水素残基；シクロ（低級）アルキル；シクロ（低級）アルキルオキシ；アリール；アリールオキシ；複素環基；複素環オキシ基；
Ｒ３’は、水素、低級アルキル、シクロ（低級）アルキル、アリールまたは複素環基］。
【００６３】
本発明に用いられる化合物は、異性体の存在の有無にかかわりなくケト型の構造式または命名法によって化合物を表わすことがあるが、これは便宜上のものであってヘミアセタール型の化合物を排除しようとするものではない。
【００６４】
本発明においては、個々の互変異性体、その混合物、または光学異性体、その混合物、ラセミ混合物、その他の立体異性体等の異性体も、同じ目的に使用することが可能である。
【００６５】
本発明において用いられる化合物の一部は米国特許第５０７３５６９号、５１６６１７４号、５２２１７６３号、５２１２３２４号、５７３９１６１号、および６２４２４８５号（これらの引用文献は引用により本出願にその内容が含まれる）に開示された方法によって製造し得る。
【００６６】
さらに、本発明者らは、式(IV)で表される新規化合物がクロライドチャンネルをオープンするのに有効であることを見出した：
【化１５】
[式中、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｂ、Ｒ１およびＲａは式（Ｉ）において定義したものと同じである；そして、
Ｒ’およびＲ''は、水素、低級アルキル、アリール、アルキル−またはアリール−スルホニル、低級アルケニルまたは低級アルキニル。]
したがって、本発明は上記の新規化合物も包含する。
【００６７】
本発明によると、本発明に用いる化合物を投与することによって、哺乳類対象を処置することができる。対象はヒトを含むいかなる哺乳類であってもよい。化合物は全身的に投与しても局所的に投与してもよい。通常、化合物は、経口投与、静脈注射（点滴を含む）、皮下投与、直腸内投与、膣内投与、経皮投与、点眼投与などの方法で投与される。投与量は動物の種類、年令、体重、処置されるべき症状、所望の治療効果、投与経路、処置期間等により変化するが、１日１〜４分割用量または持続形態で全身投与する場合、１日当たり０．０００１〜１００ｍｇ／ｋｇの投与量で満足な効果が得られる。
【００６８】
化合物は、常套手段における投与に好適な医薬組成物として製剤するのが好ましい。組成物は、経口投与薬、注射薬、点滴薬、外用薬、点眼剤、座薬および膣座薬等として好適なものとすればよい。
【００６９】
本発明の組成物は生理学的に許容される添加剤と併用しても良い。添加剤は１５−ケト−ＰＧ化合物と併用される成分を含み、例えば、賦形剤、希釈剤、増量剤、溶剤、滑沢剤、補助剤、結合剤、崩壊剤、被覆剤、カプセル化剤、軟膏基材、座薬用基材、エアゾール剤、乳化剤、分散剤、懸濁剤、増粘剤、等張化剤、緩衝剤、無痛化剤、保存剤、抗酸化剤、矯味剤、芳香剤、着色剤、機能性素材（例えばシクロデキストリン、生体内分解高分子など）、安定剤が挙げられる。これらの添加剤は当該技術分野で周知であり、製剤学に関する一般書籍に記載されているものから適宜選択すればよい。
【００７０】
本発明の組成物中の上記化合物の量は薬剤の形態にもよるが、通常０．００００１〜１０．０重量％、より好ましくは０．０００１〜１．０重量％である。
【００７１】
経口投与のための固体組成物としては、錠剤、トローチ、舌下錠、カプセル、丸剤、散剤、顆粒剤等が含まれる。このような固体組成物においては１つまたはそれ以上の活性成分が、少なくとも１つの不活性な希釈剤と混合することにより調製される。組成物は、例えば滑沢剤、崩壊剤、安定剤などの不活性な希釈剤以外の添加剤をさらに含んでいても良い。錠剤および丸剤は所望により腸溶性または胃溶性のフィルムで被覆しても良い。また、２以上の層で被覆してもよい。更に、徐放性物質に吸着させてもよく、マイクロカプセル剤としてもよい。さらにゼラチンのような容易に崩壊され得る物質のカプセル剤としてもよい。さらに脂肪酸またはそのモノ、ジ、トリグリセリドなどの適当な溶媒に溶解させてソフトカプセルとしても良い。速効性を必要とするときは、舌下錠としてもよい。
【００７２】
経口投与のための液体組成物としては、乳剤、液剤、懸濁剤、シロップ剤、エリキシル剤等が例示される。この組成物は一般的に用いられる不活性な希釈剤、例えば精製水、エタノール等を含んでいてもよい。不活性な希釈剤以外に湿潤剤、懸濁化剤のような補助剤、甘味剤、風味剤、芳香剤、防腐剤などの添加剤を含有していてもよい。
【００７３】
本発明の組成物としては、スプレー剤の形態としてもよく、これは１またはそれ以上の活性成分を含み、それ自体公知の方法により処方される。
【００７４】
本発明による非経口投与のための注射剤としては無菌の水性または非水性の液剤、懸濁剤、乳剤を包含する。水性の液剤、懸濁剤用媒体としては、例えば注射用蒸留水、生理食塩水およびリンゲル液が含まれる。
【００７５】
非水性の液剤、懸濁剤用媒体としては、例えばプロピレングリコール、ポリエチレングリコール、オリーブ油のような植物油、エタノールのようなアルコール類、ポリソルベート等が挙げられる。このような組成物は、さらに防腐剤、湿潤剤、乳化剤、分散剤のような添加剤を含んでいてもよい。これらは例えばバクテリア保留フィルターを通す濾過、殺菌剤の配合、ガス滅菌または放射線滅菌によって無菌化される。これら注射用組成物はまた無菌の粉末組成物として提供し、使用前に無菌の注射用溶媒に溶解させることもできる。
【００７６】
組成物は点眼液または眼軟膏等の点眼剤としてもよい。点眼液は、活性成分を無菌の水溶液、例えば生理食塩水、緩衝液等に溶解させるかまたは用時溶解用の粉末組成物として提供するために粉末成分を組合せて作られる。眼軟膏は、常套の軟膏基剤に活性成分を混合して作られる。
【００７７】
本発明による外用薬としては、軟膏剤、クリーム、ローション、スプレーなど皮膚、耳鼻咽喉科の分野などで用いられる全ての外用製剤を含む。
【００７８】
別の形態は坐薬または膣坐薬である。これらの坐薬はカカオ脂等の体温で軟化する常套の基剤に活性成分を混合して作ることができ、適当な軟化温度を有する非イオン界面活性剤を用いて吸収性を向上させてもよい。
【００７９】
本発明において、「処置」の語は、予防、治療、症状の軽減、症状の減退、進行停止等、あらゆる管理が含まれる。
【００８０】
本発明の化合物は、クロライドチャンネル、特にＣｌＣチャンネルをオープンするため、様々な細胞の機能や防御機構の調節が可能となる。特に、クロライドイオンの透過性の低下に関連する症状の処置に適用することができる。
【００８１】
本明細書において用いられる「ＣｌＣチャンネルをオープンする」という語は、Ｃｌ−電流、Ｃｌ−分泌、Ｃｌ−輸送をＣｌＣチャンネルをオープンすることにより活性化、促進または調節することを含む。
【００８２】
クロライドの透過性の低下に関連する症状としては、例えば、筋緊張性萎縮症、腎結石など高カルシウム尿症を呈する疾患、便秘、不安、不眠症、嚢胞性繊維症、てんかん、無感覚症、喘息、気管支炎、神経障害などが挙げられるが、本発明はこれらに限定されるものではない。
【００８３】
本発明の化合物は、特にＣｌＣ-２チャンネルをオープンするため、ＣｌＣ-２チャンネル以外のクロライドチャンネルの機能が低下することにより起こる疾患（例えば嚢胞性繊維症、先天性筋強直症、遺伝性腎結石症など）の処置に有用である。
【００８４】
更に、本発明の医薬組成物においては、本発明の目的に反しない限り、他の薬理活性成分を適宜含有させることもできる。
【００８５】
以下、本発明を実施例によりさらに詳細に説明するが、これは本発明を限定するものではない。
【実施例】
【００８６】
（合成例１）
１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−１７−フェニル−１８，１９，２０−トリノール−ＰＧＦ２αＮ−エチルアミド（５）の調製
【化１６】
【００８７】
（１）→（２）
３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン（０．７０ｍｌ，７．６７ｍｍｏｌ）を、無水ジクロロメタン（１０ｍｌ）中の化合物（１）（０．３５０ｇ，０．７３７ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。この溶液に、カンファースルホン酸（７ｍｇ，０．０３ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で３０分間攪拌した。反応混合物を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液に注ぎ、ジクロロメタンで２回抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、蒸発させた。蒸発後の残渣をシリカゲルカラムのクロマトグラフィー（ＢＷ−３００ １５０ｇ、酢酸エチル：ヘキサン＝１：３）にかけ、化合物（２）（０．４６３ｇ、０．７２０ｍｍｏｌ、９７．７％収率）を無色油として得た。
【００８８】
（２）→（３）
エタノール（１４ｍｌ）中の化合物（２）（０．８８９ｇ、１．３８ｍｍｏｌ）の溶液に、１Ｎ−水酸化ナトリウム水溶液（６．９ｍｌ、６．９ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で１６時間攪拌した。混合物を氷浴中で冷却し、次いで酢酸エチルと水を混合物に添加した。１Ｎ−塩酸（７ｍｌ、７ｍｍｏｌ）を混合物のｐＨが４となるまで添加した。混合物を酢酸エチルで３回抽出した。混合有機層を飽和塩化ナトリウム水溶液で２回洗浄し、次いで無水硫酸マグネシウムで乾燥させた。有機層の蒸発により粗化合物（３）（０．８７８ｇ）を無色油として得た。粗化合物（３）を精製せずに以後の反応に用いた。
【００８９】
（３）→（４）
カルボニルジイミダゾール（０．４４８ｇ、２．７７ｍｍｏｌ）を無水ＴＨＦ（９．０ｍｌ）中の粗化合物（３）（０．８７８ｇ、１．３８ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。混合物を室温で２時間攪拌した。ＴＨＦ溶液中の２Ｍ−エチルアミン（２．７７ｍｌ、５．５４ｍｍｏｌ）を反応混合物に添加した。混合物を室温で１時間攪拌し、１Ｎ−塩酸に注ぎ、次いで酢酸エチルで３回抽出した。混合有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液と飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、蒸発させた。残渣のシリカゲルカラムでのクロマトグラフィー（ＦＬ−６０Ｄ １５０ｇ、酢酸エチル：ヘキサン＝３：１）により化合物（４）（０．８１７ｇ、１．３０ｍｍｏｌ、化合物（２）に基づく収率９４．１％）を得た。
【００９０】
（４）→（５）
酢酸（９．８ｍｌ）と水（４．９ｍｌ）をＴＨＦ（４．９ｍｌ）中の化合物（４）（０．８１５ｇ、１．３０ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。混合物を５０℃で３時間攪拌し、次いで０℃まで冷却した。２Ｎ−水酸化ナトリウム水溶液を混合物に、混合物のｐＨが９となるまで添加した。混合物を酢酸エチルで３回抽出した。混合有機層を水と飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、蒸発させた。残渣のシリカゲルカラムでのクロマトグラフィー（ＦＬ−６０Ｄ １００ｇ、２−プロパノール：酢酸エチル＝５：１００）により無色油（０．４８５ｇ、１．１７ｍｍｏｌ、８９．９％収率）を得た。さらなる分取ＨＰＬＣ（ＹＭＣ−Ｐａｋ ＲＩ−０５３−１５、Φ５０＊２５０ｍｍ−ＳＩＬ１２０Ａ、２−プロパノール：ｎ−ヘキサン＝１８：８２、溶媒流速＝１００ｍｌ／分）による精製により化合物（５）（０．４１７ｇ、１．１２ｍｍｏｌ、８６．３％収率）を得た。
【００９１】
化合物（５）の１Ｈ−ＮＮＲスペクトル（２００ＭＨｚ／ＣＤＣｌ３）
δ（ＴＭＳ＝０ｐｐｍ）
７．３３−７．１３（５Ｈ、ｍ）、５．８４（１Ｈ、ｂｒ）、５．２８−５．５０（２Ｈ、ｍ）、４．１８−４．０７（１Ｈ、ｍ）、３．９０−３．８０（１Ｈ、ｍ）、３．２６（２Ｈ、ｄｑ、Ｊ＝５．６、７．３Ｈｚ）、３．２０（２Ｈ、ｂｒ）、２．９４−２．８６（２Ｈ、ｍ）、２．８０−２．７１（２Ｈ、ｍ）、２．６０−２．５２（２Ｈ、ｍ）、２．５０−１．９０（４Ｈ、ｍ）、２．１７（２Ｈ、ｔ、Ｊ＝７．０Ｈｚ）１．９０−１．５６（６Ｈ、ｍ）、１．４７−１．２５（２Ｈ、ｍ）、１．１３（３Ｈ、ｔ、Ｊ＝７．３Ｈｚ）
【００９２】
（合成例２）
Ｎ１−エチル−７−［（２，４ａＲ，５Ｒ，７ａＲ）−２−（１，１−ジフルオロペンチル）−２−ヒドロキシ−６−オキソぺルヒドロシクロペンタ［ｂ］ピラン−５−イル］ヘプタンアミド（７）の調製
【化１７】
【００９３】
サブ・ロット−１
カルボニルジイミダゾール（７９．５ｍｇ、０．４９０ｍｍｏｌ）を無水ＴＨＦ（５ｍｌ）中の化合物（６）（１７４．０ｍｇ、０．４４６ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。混合物を室温で３時間攪拌し、次いでＴＨＦ溶液中の２Ｍ−エチルアミン（０．８７ｍｌ、１．７４ｍｍｏｌ）を混合物に添加した。混合物を室温で１２時間攪拌した。飽和塩化アンモニウム水溶液（１０ｍｌ）と酢酸エチル（１０ｍｌ）を反応混合物に攪拌しながら添加した。水層を有機層から分離し、酢酸エチルで３回抽出した。混合有機層を硫酸マグネシウムで乾燥させ、次いで蒸発させた。残渣のシリカゲルカラムでのクロマトグラフィー（ＦＬ−６０Ｄ １０ｇ、ヘキサン：酢酸エチル＝１：２）により無色油（１１７．５ｍｇ、０．２８１ｍｍｏｌ、６３．０％収率）を得た。
【００９４】
サブ・ロット２
カルボニルジイミダゾール（１０５．９ｍｇ、０．６５３ｍｍｏｌ）を無水ＴＨＦ（３ｍｌ）中の化合物（６）（２２９．２ｍｇ、０．５８７ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。混合物を室温で２時間攪拌し、次いでＴＨＦ溶液中の２Ｍ−エチルアミン（１．２ｍｌ、２．４ｍｍｏｌ）を混合物に添加した。混合物を室温で１時間攪拌した。飽和塩化アンモニウム水溶液（１０ｍｌ）と酢酸エチル（１０ｍｌ）を反応混合物に攪拌しながら添加した。水層を有機層から分離し、酢酸エチルで２回抽出した。混合有機層を硫酸マグネシウムで乾燥させ、次いで蒸発させた。残渣のシリカゲルカラムでのクロマトグラフィー（ＦＬ−６０Ｄ １０ｇ、ヘキサン：酢酸エチル＝２：３）により無色油（１９５．７ｍｇ、０．４６９ｍｍｏｌ、７９．８％収率）を得た。
【００９５】
これら２つの上記サブ・ロットを合同させた。合同させた生成物（３０１．４ｍｇ）をさらに分取ＨＰＬＣ（Merck Lichrosorb ＤIＯＬ−７μｍ、Φ２５＊２５０ｍｍ、２−プロパノール：ｎ−ヘキサン＝１０：１００、溶媒流速＝４０ｍｌ／分）で精製して化合物（７）（２０９．６ｍｇ、６９．５％回収率）を得た。
【００９６】
化合物（７）の１Ｈ−ＮＮＲスペクトル（２００ＭＨｚ／ＣＤＣｌ３）
δ（ＴＭＳ＝０ｐｐｍ）
５．４２（１Ｈ、ｂｒ）、４．２６−４．１０（１Ｈ、ｍ）、３．２９（２Ｈ、ｄｑ、Ｊ＝５．６、７．２Ｈｚ）、２．８３（１Ｈ、ｂｒ）、２．５８（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝１７．６、７．３Ｈｚ）、２．２１（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝１７．６、１１．５Ｈｚ）、２．１４（２Ｈ、ｔ、Ｊ＝７．５Ｈｚ）、２．１０−１．７３（５Ｈ、ｍ）、１．７３−１．２１（１７Ｈ、ｍ）、１．１４（３Ｈ、ｔ、Ｊ＝７．２Ｈｚ）、０．９４（３Ｈ、ｔ、Ｊ＝７．１Ｈｚ）
【００９７】
（合成例３）
Ｎ１−エチル−７−［（２，４ａＲ，５Ｒ，６Ｓ，７ａＲ）−２−（１，１−ジフルオロペンチル）−２，６−ジヒドロキシぺルヒドロシクロペンタ［ｂ］ピラン−５−イル］ヘプタンアミド（１５）の調製
【化１８】
【００９８】
（８）→（９）
３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン（４．２２ｍｌ、４６．１１ｍｍｏｌ）とカンファースルホン酸（４２．１６ｍｇ、０．１８１ｍｍｏｌ）を０℃の無水ジクロロメタン（９０ｍｌ）中の化合物（８）（２．８７ｇ、４．２１６ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。反応混合物を０℃で５０分間攪拌した。飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を反応混合物に添加した。混合物を室温に昇温し、ジクロロメタン（５０ｍｌ）で３回抽出した。混合有機層を水（１８０ｍｌ）と飽和塩化ナトリウム水溶液（１８０ｍｌ）で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、そして蒸発させた。残渣のシリカゲルカラムでのクロマトグラフィー（ＢＷ−３００ １５４ｇ、ヘキサン：酢酸エチル＝８：１）により化合物（９）（３．４２ｇ、４．４７６ｍｍｏｌ、定量的収率）を得た。
【００９９】
（９）→（１０）
ＴＨＦ溶液中の１Ｍ−テトラブチルアンモニウムフルオライド（５．３７１ｍｌ、５．３７１ｍｍｏｌ）を０℃の無水ＴＨＦ（１０．７ｍｌ）中の化合物（９）（３．４２ｇ、４．４７６ｍｍｏｌ）の溶液に滴下した。混合物を室温で４時間攪拌した。酢酸アンモニウム水溶液（２００ｍｇ／ｍｌ、１０．３ｍｌ）を反応混合物に添加した。混合物を１０分間攪拌し、ジイソプロピルエーテルで３回抽出した。混合有機層を炭酸水素ナトリウム水溶液と飽和塩化ナトリウム水溶液（５０ｍｌ）で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、そして蒸発させた。残渣のシリカゲルカラムでのクロマトグラフィー（ＢＷ−３００ １７０ｇ、ヘキサン：酢酸エチル＝３：１）により化合物（１０）（２．７３ｇ、４．２００ｍｍｏｌ、９３．８％収率）を得た。
【０１００】
（１０）→（１１）
エタノール（２ｍｌ）中の化合物（１０）（１３０．４ｍｇ、０．２００ｍｍｏｌ）の溶液を０℃に冷却した。１Ｎ−水酸化ナトリウム水溶液（０．８ｍｌ、０．８０ｍｍｏｌ）を該溶液に１５℃より低温で滴下した。混合物を室温で３．６時間攪拌し、次いで蒸発させた。残渣に、水（１ｍｌ）を添加し混合物のｐＨを希塩酸の添加により３−４に調整した。混合物を酢酸エチル（２０ｍｌ）で３回抽出した。混合有機層を水（３０ｍｌ、２回）と飽和塩化ナトリウム水溶液（３０ｍｌ）で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、次いで蒸発させた。残渣のシリカゲルカラムでのクロマトグラフィー（１５％−水含有ＦＬ−６０Ｄ １０ｇ、ヘキサン：酢酸エチル＝３：２）により化合物（１１）（１０６．２ｍｇ、０．１８９４ｍｍｏｌ、９４．７％収率）を得た。
【０１０１】
（１１）→（１２）
デス−マーティン・ぺリオディナン(Dess-Martin periodinane)（１．６８ｇ、３．９７０ｍｍｏｌ）を０℃の無水ジクロロメタン（６３ｍｌ）中の化合物（１１）（１．２１ｇ、１．９８５ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。反応混合物を室温で１時間攪拌した。チオ硫酸ナトリウム水溶液（３９．８ｍｌ）を反応混合物に添加した。次いで反応混合物を酢酸エチル（５０ｍｌ）で３回抽出した。混合有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液と飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、次いで蒸発させた。残渣のシリカゲルカラムでのクロマトグラフィー（１５％−水含有ＦＬ−６０Ｄ ５５ｇ、ヘキサン：酢酸エチル＝３：１）により化合物（１２）（１．０６ｇ、１．８９０ｍｍｏｌ、９５．２％収率）を得た。
【０１０２】
（１２）→（１３）
木炭上の１０％−パラジウム（６９．１ｍｇ）を酢酸エチル（３４．６ｍｌ）中の化合物（１２）（３４５．７ｍｇ、０．６１９ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。混合物を水素雰囲気中で３時間攪拌した。反応混合物をセライト（登録商標）パッドでろ過し、触媒を除去した。上記の一連の操作を５回繰り返し、水素化反応を完了させた。ろ液の濃縮により化合物（１３）（３３０．４ｍｇ、０．５８９ｍｍｏｌ、９５．２％収率）を得た。
【０１０３】
（１３）→（１４）
カルボニルジイミダゾール（１４３．４ｍｇ、０．８８４ｍｍｏｌ）を無水ＴＨＦ（６．７ｍｌ）中の化合物（１３）（３３０．４ｍｇ、０．５８９ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。混合物を室温で３時間攪拌した。反応混合物に、ＴＨＦ中の２Ｍ−エチルアミン溶液（０．５８９ｍｌ、１．１７９ｍｍｏｌ）を添加し室温で１時間攪拌した。反応混合物に、飽和塩化アンモニウム水溶液を添加した。混合物を酢酸エチル（２０ｍｌ）で３回抽出した。混合有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（５０ｍｌ）と飽和塩化ナトリウム水溶液（５０ｍｌ）で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、次いで蒸発させた。残渣のシリカゲルカラムでのクロマトグラフィー（１５％−水含有ＦＬ−６０Ｄ １６．５ｇ、ヘキサン：酢酸エチル＝２：１）により化合物（１４）（３１１．６ｍｇ、０．５３０ｍｍｏｌ、９０．０％収率）を得た。
【０１０４】
（１４）→（１５）
酢酸（４．２ｍｌ）と水（２．１ｍｌ）をＴＨＦ（２．１ｍｌ）中の化合物（１４）（３４４．０ｍｇ、０．５８５ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。混合物を５０℃で３時間攪拌し、次いで０℃に冷却した。２Ｎ−水酸化ナトリウム水溶液を反応混合物に添加した。混合物を酢酸エチル（５０ｍｌ）で３回抽出した。混合有機層を水（３５ｍｌ）と飽和塩化ナトリウム水溶液（３５ｍｌ）で２回洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、次いで蒸発させた。残渣のシリカゲルカラムでのクロマトグラフィー（１５％−水含有ＦＬ−６０Ｄ １４ｇ、ヘキサン：酢酸エチル＝１：１その後酢酸エチルに変更）により化合物（１５）（２２７．９ｍｇ、０．５４３ｍｍｏｌ、９２．８％収率）を得た。さらに分取ＨＰＬＣ（Merck Lichrosorb ＤＩＯＬ−７μｍ、Φ２５＊２５０ｍｍ、２−プロパノール：ｎ−ヘキサン＝１２：８８、溶媒流速＝３５ ｍｌ／分）での精製により化合物（１５）（１５１．０ｍｇ、０．３５９９ｍｍｏｌ、６１．５％収率）を得た。
【０１０５】
化合物（１５）の１Ｈ−ＮＮＲスペクトル（２００ＭＨｚ／ＣＤＣｌ３）
δ５．４３（１Ｈ、ｂｒ）、４．３２−４．１５（１Ｈ、ｍ）、３．９６−３．８４（０．２８Ｈ、ｍ）、３．７９−３．６１（０．７２Ｈ、ｍ）、３．２９（２Ｈ、ｄｑ、Ｊ＝５．６、７．３Ｈｚ）、２．８６−２．８０（０．５５Ｈ、ｍ）、２．７０−２．６４（０．５５Ｈ、ｍ）、２．５４（０．７２Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝１５．８、７．０Ｈｚ）、２．４３（０．７２Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝１５．８、５．２Ｈｚ）、２．１５（２Ｈ、ｔ、Ｊ＝７．１Ｈｚ）、２．２５−１．０９（２３．４５Ｈ、ｍ）、１．１４（３Ｈ、ｔ、Ｊ＝７．２Ｈｚ）、０．９２（３Ｈ、ｔ、Ｊ＝７．１Ｈｚ）
【０１０６】
（合成例４）
１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−２０−エチル−ＰＧＦ２αＮ−エチルアミド（２０）の調製
【化１９】
【０１０７】
（１６）→（１７）
３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン（２ｍｌ、２１．９ｍｍｏｌ）とカンファースルホン酸（２０ｍｇ、０．０９ｍｍｏｌ）を無水ジクロロメタン（３０ｍｌ）中の化合物（１６）（１．００ｇ、２．３６ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。混合物を２時間攪拌した。反応混合物に、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（２０ｍｌ）を添加し、激しく攪拌した。水層を有機層から分離し、ジクロロメタンで２回抽出した。混合有機層を水と飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、次いで蒸発させた。残渣のシリカゲルカラムでのクロマトグラフィー（ＢＷ−３００ ７０ｇ、ヘキサン：酢酸エチル＝３：７）により化合物（１７）（１．４５ｇ、２．４５ｍｍｏｌ、定量的収率）を得た。
【０１０８】
（１７）→（１８）
１Ｎ−水酸化ナトリウム水溶液（１１．８ｍｌ、１１．８ｍｍｏｌ）を０℃のエタノール（２０ｍｌ）中の化合物（１７）（１．４５ｇ、２．３６ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。混合物を室温に昇温し、５．５時間攪拌した。混合物を０℃で１Ｎ−塩酸（１２．４ｍｌ、１２．４ｍｍｏｌ）で酸性にした。混合物を酢酸エチルで３回抽出した。混合有機層を水と飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、次いで蒸発させた。残渣のシリカゲルカラムでのクロマトグラフィー（１５％−水含有ＦＬ−６０Ｄ １４ｇ、ヘキサン：酢酸エチル＝１０：０→９：１→８：２→７：３→６：４→５：５→４：６→３：７）により化合物（１８）（１．１９ｇ、２．１６ｍｍｏｌ、９２．０％収率）を得た。
【０１０９】
（１８）→（１９）
カルボニルジイミダゾール（２６５ｍｇ、１．６４ｍｍｏｌ）を無水ＴＨＦ（１０ｍｌ）中の化合物（１８）（６００．３ｍｇ、１．０９ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。混合物を室温で１．５時間攪拌した。混合物に、２Ｍ−エチルアミンＴＨＦ溶液（３．０ｍｌ、６．０ｍｍｏｌ）を添加し、１時間攪拌した。反応混合物を０℃に冷却し、冷１Ｎ−塩酸の添加により酸性（ｐＨ＝３）にした。混合物を酢酸エチルで３回抽出した。混合有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液と飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、次いで蒸発させた。残渣のシリカゲルカラムでのクロマトグラフィー（ＦＬ−６０Ｄ ２５ｇ、ヘキサン：酢酸エチル＝１：１）により化合物（１９）（４９７．０ｍｇ、０．８６ｍｍｏｌ、７８．９％収率）を得た。同時に、化合物（１８）（１１７．４ｍｇ、１９．６％回収率）を回収した。
【０１１０】
カルボニルジイミダゾール（６９．０ｍｇ、０．４３ｍｍｏｌ）を、無水ＴＨＦ（２ｍｌ）中の回収した化合物（１８）（１１７．４ｍｇ）の溶液に添加した。混合物を室温で２時間攪拌した。混合物に、２Ｍ−エチルアミンＴＨＦ溶液（３．０ｍｌ、６．０ｍｍｏｌ）を添加し、１時間攪拌した。反応混合物を０℃に冷却し、次いで冷１Ｎ−塩酸の添加により酸性（ｐＨ＝３）にした。混合物を酢酸エチルで３回抽出した。混合有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液と飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、次いで蒸発させた。残渣のシリカゲルカラムでのクロマトグラフィー（ＦＬ−６０Ｄ ５ｇ、ヘキサン：酢酸エチル＝１：１）により化合物（１９）（１１３．２ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ、９２．０％収率）を得た。上記の２つのバッチを合同させて、６１０ｍｇの化合物（１９）を得た。
【０１１１】
（１９）→（２０）
酢酸（６ｍｌ）と水（２ｍｌ）をＴＨＦ（２ｍｌ）中の化合物（１９）（６０３．０ｍｇ、１．０７ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。混合物を４５℃で２．５時間攪拌し、次いで室温に冷却した。反応混合物に、８Ｎ−水酸化ナトリウム水溶液（１３ｍｌ）、酢酸エチル（２０ｍｌ）および水（２０ｍｌ）を添加した。混合物を激しく攪拌した。水層を有機層から分離し、次いで酢酸エチルで３回抽出した。混合有機層を水と飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、次いで蒸発させた。２回のシリカゲルカラムでのクロマトグラフィー（第一精製：ＦＬ−６０Ｄ ２５ｇ、ヘキサン：２−プロパノール＝１００：１０／第二精製：ＦＬ−６０Ｄ １８ｇ、ヘキサン：２−プロパノール＝１００：５）により化合物（２０）（３３６．４ｍｇ、０．９１８ｍｍｏｌ、８５．８％収率）を得た。
【０１１２】
化合物（２０）の１Ｈ−ＮＮＲスペクトル（２００ＭＨｚ／ＣＤＣｌ３）
δ５．７４（１Ｈ、ｂｒ）、５．４５−５．３６（２Ｈ、ｍ）、４．１９−４．１１（１Ｈ、ｍ）、３．９６−３．８４（１Ｈ、ｍ）、３．２８（２Ｈ、ｄｑ、Ｊ＝５．７、７．３Ｈｚ）、３．０５（１Ｈ、ｂｒ）、２．７０−１．９５（９Ｈ、ｍ）、２．４２（２Ｈ、ｔ、Ｊ＝７．４Ｈｚ）、１．９５−１．２０（１８Ｈ、ｍ）、１．１４（３Ｈ、ｔ、７．２Ｈｚ）、０．８８（３Ｈ、ｔ、Ｊ＝７．３Ｈｚ）
【０１１３】
（試験例１）
（方法）
全細胞パッチクランプ法を用いて化合物１（１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−１６，１６−ジフルオロ−ＰＧＥ１）と化合物２（１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−１６，１６−ジフルオロ−１８（Ｓ）−メチル−ＰＧＥ１）の組換えｈＣｌＣ−２クロライドチャンネルに対する効果を評価した。この試験例においては、それぞれの化合物の、ヒトＣｌＣ−２（ｈＣｌＣ−２）を形質移入されたヒト上皮腎臓（ＨＥＫ）細胞に対する効果を調べ、その結果を非−形質移入ＨＥＫ細胞と比較した。
【０１１４】
ＣｌＣ−２形質移入ヒト上皮腎臓（ＨＥＫ）細胞を調製し、使用した。American Type Culture Collection (ATCC; Manassas、VA)から得たＨＥＫ−２９３細胞を、リポフェクタミン(GIBCO/Invitrogen)を用いて哺乳類発現ベクターｐｃＤＮＡ３．１(GIBCO/Invitrogen)中のＨｉｓ−およびＴ７−タグ付加したヒトＣｌＣ−２ｃＤＮＡで、３７℃で５時間、無血清培地中で形質移入した。細胞を血清含有培地に再懸濁し、３００μｇ／ｍｌのＧ−４１８（GIBCO/Invitrogen）の存在下で培養した。生存細胞を拡張させ、Ｃｌ−電流とＣｌＣ−２ｍＲＮＡの発現を確認するため試験し、ＣｌＣ−２ｍＲＮＡを発現する細胞を凍結保存した。研究時に、凍結した細胞を解凍し、３７℃で５％／９５％ＣＯ２／Ｏ２にて、５％不活性化ウマ血清、０．１ｍＭ非必須アミノ酸、２ｍＭ Ｌ−グルタミン、１ｍＭピルビン酸ナトリウム、１００ユニット／ｍｌペニシリン、および１００μｇ／ｍｌストレプトマイシン硫酸塩を追加したＭＥＭ（GIBCO/Invitrogen）中に維持した。
【０１１５】
全細胞パッチクランプ測定において、電流は＋４０ｍＶから−１４０ｍＶの間の、最初の保持電位−３０ｍＶから開始して２０ｍＶずつ増加する電圧固定パルス（１５００ｍ秒持続）によって誘発した。電流をパルスの開始から５０−１００ｍ秒後に測定した。外部溶液は１３５ｍＭ ＮａＣｌ、１．８ｍＭ ＣａＣｌ２、１ｍＭ ＭｇＣｌ２、５．４ｍＭ ＫＣｌ、１０ｍＭグルコース、および１０ｍＭ ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．３５）を含有する標準Tyrode溶液とした。ピペット溶液は、１３０ｍＭ ＣｓＣｌ、１ｍＭ ＭｇＣｌ２、５ｍＭ ＥＧＴＡ、および１０ｍＭ ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．３５）とした；ピペット内には１ｍＭ ＡＴＰ−Ｍｇ２＋（ｐＨ７．４）も含めた。
【０１１６】
ピペットはホウケイ酸ガラスから調製し、２段ナラシゲ（Narashige）プラーにより引っ張り、１−１．５ＭΩの抵抗を得た。データはDigidata 1200 デジタイザーおよびAxopatch 1D 増幅器を備えたAxopatch CV-4 headstageにより得た。データをpClamp 6.04 (Axon Instruments、Foster City、CA)、ロータス（Lotus)123 (IBM)および Origin (Microcal)ソフトウェアを用いて分析した。
【０１１７】
化合物１と化合物２は１％ＤＭＳＯ中最終濃度１μＭで用いた。
【０１１８】
（結果）
表１に示すように、１％ＤＭＳＯは対照電流に対して影響を及ぼさなかった。ｈＣｌＣ−２（対照）を形質移入されたＨＥＫ細胞におけるＣｌ電流は、１μＭの化合物１および１μＭの化合物２によって活性化された。化合物１も化合物２も非−形質移入細胞におけるＣｌ電流を増加させなかった。
【０１１９】
これらの研究により、化合物１と化合物２がＣｌＣ−２チャンネルオープナーであることが示された。
【０１２０】
【表１】
【０１２１】
Ｎ．Ｓ．：有意差無し
化合物１：１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−１６，１６−ジフルオロ−ＰＧＥ１（（−）−７−［（２Ｒ，４ａＲ，５Ｒ，７ａＲ）−２−（１，１−ジフルオロペンチル）−２−ヒドロキシ−６−オキソぺルヒドロシクロペンタ［ｂ］ピラン−５−イル］ヘプタン酸）
化合物２：１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−１６，１６−ジフルオロ−１８（Ｓ）−メチル−ＰＧＥ１（（−）−７−｛（４ａＲ，５Ｒ，７ａＲ）−２−［（３Ｓ）−１，１−ジフルオロ−３−エチルペンチル］−２−ヒドロキシ−６−オキソぺルヒドロシクロペンタ［ｂ］ピラン−５−イル｝ヘプタン酸）
【０１２２】
（試験例２）
（方法）
健康な個体由来のヒト気道細胞系であり、ＣｌＣ−２および嚢胞性線維症膜貫通レギュレーター（Cystic Fibrosis Transmembrane Regulator）である、Ｃｌチャンネル（ＣＦＴＲ）を含む１６ＨＢＥ１４ｏ−細胞；および嚢胞性線維症患者由来のヒト気道細胞系であり、機能的形態のＣｌＣ−２および欠陥形態のＣＦＴＲ（△Ｆ５０８ＣＦＴＲ）を含むＣＦＢＥ４１ｏ−細胞を用いた。両方の細胞を１０％ＦＢＳ（Hyclone）、２０ｍＭ Ｌ−グルタミンおよびペニシリン／ストレプトマイシンを追加したＭＥＭで、フィブロネクチン／コラーゲン／ＢＳＡでコーティングしたフラスコ中で培養した。所望の場合、細胞を０．３ｃｍ２コラーゲン−コーティングした透過性のフィルター（Biocoat）に播種した。２４時間後、頂端側の培地を除去し、細胞を空気−水の界面で培養した。空気−水の界面で培養している間、細胞の基底外側に培地が与えられ、培地を一日おきに交換した。細胞を集密するまで増殖させた。
【０１２３】
短絡回路電流測定を用いて空気−水の界面で増殖させた細胞の分極した集密培養物におけるＣｌ輸送を評価した。０．３ｃｍ２の透過性の支持フィルターにおいて増殖させた集密細胞単層における短絡回路電流測定のためにプレキシグラス（plexiglass）チャンバー（World Precision instruments、Sarasota、FL）を用いた。電気計測は７４０２Ｃ電圧固定装置（Bioengineering Department、Iowa University）を用いて行った。温度を熱水をチャンバーのウォーター・ジャケットに循環させることにより３７℃に保持した。増幅器の出力をアナログ・チャート・レコーダーにプロットした。被験化合物の添加後の短絡回路電流における変化（△Ｉｓｃ）をフィルター面積（０．３ｃｍ２）に対して標準化し△Iｓｃ／ｃｍ２として報告した。
【０１２４】
１６ＨＢＥ１４ｏ−およびＣＦＢＥ４１ｏ−細胞における短絡回路電流測定はLofling et al. (Am J Physiol、277(4 Pt 1):L700-8、1999、この参考文献は引用により本出願に含まれる）に記載のように行った。側底膜溶液は、１１６ｍＭ ＮａＣｌ、２４ｍＭ ＨＣＯ３、３ｍＭ ＫＣｌ、２ｍＭ ＭｇＣｌ２、０．５ｍＭ ＣａＣｌ２、３．６ｍＭ ＨＥＰＥＳナトリウム、４．４ｍＭ ＨＥＰＥＳ水素（ｐＨ７．４）および１０ｍＭグルコースを含むものとした；頂端膜浴溶液は側底膜溶液と以下の点を除いては同じとした；Ｃｌ−濃度をＮａＣｌをグルコン酸ナトリウムに置換することにより低下させ、グルコン酸によるＣａ２＋のキレート化を補うためにＣａＣｌ２を０．５ｍＭから２ｍＭに上昇させた。両溶液にＣＯ２／Ｏ２（５％／９５％）を通気し、これによって溶液の混合が促された。すべての場合において、側底膜は２００μｇ／ｍｌナイスタチンによって透過性にした。
【０１２５】
化合物１および化合物２を最終濃度１μＭにて用いた。ＤＭＳＯの最終濃度は１％とした。
【０１２６】
（結果）
表２に示すように、１μＭの化合物１は１６ＨＢＥ１４ｏ−細胞における短絡回路電流を増加させた。化合物１による活性化の程度は、９．５６±０．０９５μＡ／ｃｍ２であった。化合物２も１６ＨＥＢ１４ｏ−細胞において短絡回路電流を１１．６±１．３μＡ／ｃｍ２増加させた。１％ＤＭＳＯによる負の効果は大きく、およそ−１０．５±２．０μＡ／ｃｍ２であった。ＤＭＳＯにより短絡回路電流が大幅に減少したにもかかわらず、化合物１と化合物２の正味の効果はこれら細胞で正であった。
【０１２７】
表２に示すように、１μＭの化合物１はＣＦＢＥ４１ｏ−細胞における短絡回路電流を５．０±０．０４μＡ／ｃｍ２増加させた。１％ＤＭＳＯは短絡回路電流を−５．７±１．８μＡ／ｃｍ２減少させた。ＤＭＳＯによる大きな負の効果にかかわらず、化合物１はＣＦＢＥ細胞におけるＣｌ電流において正味の正の増加をもたらした。
【０１２８】
これらの結果は化合物１と化合物２はともに１６ＨＢＥ１４ｏ−細胞におけるＣｌチャンネルのオープナーであり、化合物１はＣＦＢＥ４１ｏ−細胞におけるｈＣｌＣ−２のオープナーであることを示す。
【０１２９】
【表２】
【０１３０】
（試験例３）
（方法）
ＡＳ−ＨＢＥは、ＣＦＴＲの最初の１３１ヌクレオチドをアンチセンス方向に発現するヒト気管支上皮（ＨＢＥ）細胞系（アンチセンスＣＦＴＲ１６ＨＢＥ１４ｏ−細胞、ＨＢＥ−ＡＳ；ＡＳ−ＨＢＥとも称される）である。その結果、ＡＳ−ＨＢＥ細胞はＣＦＴＲ転写産物を欠き、機能性のＣＦＴＲを欠く。しかしながら、ＡＳ−ＨＢＥ細胞はその起源である親細胞系、１６ＨＢＥ１４ｏ−細胞と同様に機能性のＣｌＣ−２を発現する。ＡＳ−ＨＢＥ細胞を３７℃で５％／９５％ＣＯ２／Ｏ２にてアール塩（Earl's salt)、Ｌ−グルタミン（GIBCO/Invitrogen）、１０％熱不活性化胎仔ウシ血清、１００ユニット／ｍｌペニシリン、１００μｇ／ｍｌストレプトマイシン硫酸塩および４００μｇ／ｍｌ Ｇ−４１８（GIBCO/Invitrogen）を追加した最小必須培地（MEM; GIBCO/Invitrogen、Carlsbad、CA）に維持した。細胞を空気−液体界面でヒト血漿フィブロネクチン（GIBCO/Invitrogen）およびビトロゲン(vitrogen)(Cohesion Technologies、Palo Alto、CA)でコーティングしたバイオコート・インサート（Biocoat inserts）(Fisher Scientific、Chicago、IL)上で増殖させた。
【０１３１】
試験例２に記載したのと同様にして、ＡＳ−ＨＢＥ細胞における短絡回路電流測定を行った。短絡回路電流における変化（△Ｉｓｃ）をフィルター面積（０．３ｃｍ２）に対して標準化し、△Ｉｓｃ／ｃｍ２として報告した。
【０１３２】
被験化合物は最終濃度２５０ｎＭで用いた。
【０１３３】
（結果）
表３はＡＳ−ＨＢＥ細胞における短絡回路電流に対する被験化合物の効果を示す。結果は本発明の化合物が有効なＣｌＣ−２チャンネルオープナーであることを示す。
【０１３４】
【表３】
【０１３５】
化合物１および２：試験例１を参照されたい。
化合物３：１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−１６，１６−ジフルオロ−ＰＧＥ１Ｎ−エチルアミド（Ｎ１−エチル−７−［（２，４ａＲ，５Ｒ，７ａＲ）−２−（１，１−ジフルオロペンチル）−２−ヒドロキシ−６−オキソぺルヒドロシクロペンタ［ｂ］ピラン−５−イル］ヘプタンアミド）
化合物４：１５−ケト−１６，１６−ジフルオロ−ＰＧＥ１
化合物５：２−デカルボキシ−２−（２−カルボキシエチル）−１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−１６、１６−ジフルオロ−２０−エチル−ＰＧＥ１イソプロピルエステル（イソプロピル（−）−９−［（４ａＲ，５Ｒ，７ａＲ）−２−（１，１−ジフルオロヘプチル）−２−ヒドロキシ−６−オキソぺルヒドロシクロペンタ［ｂ］ピラン−５−イル］ノナノエート）
化合物６：ＰＧＦ２α
化合物７：ＰＧＩ２−Ｎａ
【０１３６】
（試験例４）
（方法）
試験例１に記載の方法に従って、全細胞パッチクランプ測定を行った。
【０１３７】
被験化合物によって誘導される電流の増加は被験化合物の添加後の対照からのｐＡ／ｐＦの変化（△ｐＡ／ｐＦ）として報告した。
【０１３８】
被験化合物は最終濃度１００ｎＭにて用いた。
【０１３９】
（結果）
表４は被験化合物のＣｌＣ−２を形質移入されたＨＥＫ細胞におけるＣｌＣ−２活性化に対する効果を示す。結果は本発明の化合物が有効なＣｌＣ−２チャンネルオープナーであることを示す。
【０１４０】
【表４】
【０１４１】
化合物１および２：試験例１を参照されたい。
化合物８：１３，１４−ジヒドロ−１６，１６−ジフルオロ−ＰＧＥ１
化合物９：１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−１６，１６−ジフルオロ−ＰＧＦ１αＮ−エチルアミド（Ｎ１−エチル−７−［（２，４ａＲ，５Ｒ，６Ｓ，７ａＲ）−２−（１，１−ジフルオロペンチル）−２，６−ジヒドロキシぺルヒドロシクロペンタ［ｂ］ピラン−５−イル］ヘプタンアミド）
【０１４２】
（試験例５）
（方法）
密着結合している集密単層由来のヒト腸細胞系である、Ｔ８４細胞を用いた。該細胞系は短絡回路電流（Ｉｓｃ）を用いたＣｌ−輸送の研究に広く用いられている。これら細胞はＣＦＴＲとＣｌＣ−２との両方を含む。
【０１４３】
Ｔ８４ヒト腸上皮細胞をｐＨ７．４で１６２−ｃｍ２のフラスコ（Corning Costar、MA）でダルベッコ改変イーグル培地と６％胎仔ウシ血清（ＦＢＳ）、１５ｍＭ ＨＥＰＥＳ、１４．３ｍＭ ＮａＨＣＯ３、および抗生物質／抗真菌剤を追加したＨａｍ’ｓＦ−１２栄養分混合物の１：１混合物中で集密まで増殖させた。フラスコを毎週継代し、３日ごとに栄養を与えた。実験用の細胞単層をコラーゲン−コーティングした透過性の支持体(Biocoat）上で集密するまで増殖させた。単層に３日ごとに栄養を与え、安定な経上皮耐性が達成された後、およそ播種の７-１４日後に用いた。
【０１４４】
試験例２の記載と同様にして、Ｔ８４細胞における短絡回路電流測定を行った。短絡回路電流における変化（△Ｉｓｃ）をフィルター面積（０．３ｃｍ２）に対して標準化し、△Ｉｓｃ／ｃｍ２として報告した。
【０１４５】
化合物１を最終濃度５０ｎＭにて用いた。
【０１４６】
（結果）
表５はＴ８４細胞における短絡回路電流に対する化合物１の効果を示す。結果は、化合物１がヒト腸細胞系、Ｔ８４においてＣｌ−輸送を活性化したことを示す。
【０１４７】
【表５】
【０１４８】
化合物１：試験例１を参照されたい。
【０１４９】
（試験例６）
（方法）
少なくとも１６時間絶食させたＷｉｓｔａｒ系雄性ラット（６週齢、体重１８０〜２１０ｇ）に、化合物１（１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−１６，１６−ジフルオロ−プロスタグランジンＥ１）の１、１０あるいは１００μｇ／ｋｇを５ｍＬ／ｋｇの容量で経口投与した。対照群には、媒体（０．５％エタノール・０．０１％ポリソルベート８０含有蒸留水）を同容量経口投与した。投与３０分後に動物をエーテル麻酔下で開腹した。十二指腸起始部と回腸末端部をそれぞれ糸で結紮後、腸管を摘出した。各動物の腸内液をそれぞれ集めた後、１０，０００×ｇ、５分間遠心した。上清を分取後、腸液上清中のクロライドイオン濃度をクロライドカウンター（ＣＬ−７、平沼産業）を用い測定した。対照群と化合物１各用量投与群間の比較にＤｕｎｎｅｔｔ検定法を用いた。ｐ値０．０５未満を統計的有意差ありと判定した。
【０１５０】
（結果）
各群の腸液内クロライドイオン濃度を表６に示す。化合物１の１、１０及び１００μｇ／ｋｇの投与により、腸管内クロライドイオン濃度は、用量依存的に増加した。化合物１の１μｇ／ｋｇ投与群から対照群と比較し有意な腸液内クロライドイオン濃度の増加が認められた。
【０１５１】
以上の結果は、腸管において化合物１がクロライドチャンネルをオープンすることにより、クロライドイオンの輸送を積極的に促進することを示している。
【０１５２】
【表６】
【０１５３】
Ｄｕｎｎｅｔｔ検定：対照群と比較し、＊＊ Ｐ＜０．０１
【０１５４】
（試験例７）
（方法）
雄性ウイスターラット（６週齢、体重：１８０〜２１０ｇ）に、化合物２（１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−１６，１６−ジフルオロ−１８（Ｓ）−メチル−プロスタグランジンＥ１）の１００μｇ／ｋｇを１日３回７日間経口投与した。対照群（ｎ＝７）には、同容量の媒体（０．０１％ポリソルベート８０、０．５％エタノール含有蒸留水）を投与した。投与最終日の翌朝（最終投与の約１７時間後）、エーテル麻酔下でラットの総胆管内にポリエチレンカテーテル（PE10、Becton Dickinson and Company）を挿入した。ラットをボールマンケージに収容後１時間放置し麻酔から覚醒させた。カテーテル挿入１〜２時間後の１時間に排出された胆汁を採取後、胆汁中クロライドイオン濃度をクロライドカウンター（ＣＬ−７、平沼産業（株））を用い測定した。対照群と化合物２投与群間の比較にＳｔｕｄｅｎｔのｔ検定法を用いた。ｐ値０．０５未満を統計的有意差ありと判定した。
【０１５５】
（結果）
各投与群の胆汁内クロライドイオン濃度を表７に示す。化合物２投与群の胆汁中クロライドイオン濃度は、対照群と比較し有意に増加した。
【０１５６】
以上の結果は、肝臓において化合物２がクロライドチャンネルをオープンすることにより、クロライドイオンの輸送を積極的に促進することを示している。
【０１５７】
【表７】
【０１５８】
Ｓｔｕｄｅｎｔのｔ検定：対照群と比較し、＊ ｐ＜０．０５
【０１５９】
（試験例８）
（方法）
雄性白色家兎に、生理食塩液、点眼液媒体、化合物１の０．０００１％点眼液あるいは０．００１％点眼液を、３０μＬ／眼の容量で点眼した。点眼前(０時間）および点眼２、４、６、および８時間後に、キャピラリーピペットを用い、下眼瞼の結膜嚢内から涙液５μＬを採取した。採取した涙液を蒸留水で５倍に希釈した後、クロライドカウンター（ＣＬ−７、平沼産業（株））を用い、クロライドイオン濃度を測定した。対照群と化合物１各用量投与群間の比較にＳｔｕｄｅｎｔのｔ検定法およびＷｉｌｃｏｘｏｎ検定法を用いた。ｐ値０．０５未満を統計的有意差ありと判定した。
【０１６０】
（結果）
各投与群の涙液中のクロライドイオン濃度を表８に示す。涙液中のクロライドイオン濃度は、対照群と比べ、化合物１の投与により濃度依存的に増加した。対照群と比較し、０．０００１％化合物１点眼液群では点眼後４および８時間後に、０．００１％化合物１点眼液群では点眼後２、４および８時間後に、それぞれ有意な涙液中クロライドイオン濃度の増加が認められた。
【０１６１】
以上の結果は、点眼により眼において化合物１がクロライドチャンネルをオープンすることにより、クロライドイオンの輸送を積極的に促進することを示している。
【０１６２】
【表８】
【０１６３】
Ｓｔｕｄｅｎｔのｔ検定：対照群と比較し、＃ｐ＜０．０５、＃＃ｐ＜０．０１
Ｗｉｌｃｏｘｏｎ検定：対照群と比較し、［＃］ｐ＜０．０５、［＃＃］ｐ＜０．０１
【技術分野】
【０００１】
本発明は、クロライドチャンネルをオープンするための方法に関する。より具体的には、本発明はクロライドイオンの輸送を調節することができる化合物に関する。
【背景技術】
【０００２】
クロライドイオン（Ｃｌ−）は、水／電解質輸送、分泌、細胞容積の調節などを司るのみならず、細胞応答を左右する因子として重要な役割を演じることが知られている。
【０００３】
例えば、クロライドイオンの細胞内外への移動は、同時に水や電解質の輸送を伴うため、細胞容積の調節に働く。このため、細胞の急激な容積変化を伴う成長・分裂、プログラム細胞死においてクロライドイオンは重要な役割を演じることが示唆されている。
【０００４】
脳においては、神経細胞内のクロライドイオンレベルを低く保つことで中枢神経系に抑制性の制御が働くことが知られており、クロライドイオンが不安や痙攣の抑制、睡眠、記憶、概日リズムの調節などに重要な役割を演じることも知られている。
【０００５】
腸管においては、クロライドイオンが下痢や便秘等の病態と深く関わっており、モルヒネなどのオピオイドの投与によってクロライドイオンなどの電解質分泌や液分泌に異常が起こると、難治性の便秘が引き起こされることも知られている。クロライドイオンのバランスの異常による疾患としては、この他に、筋緊張性萎縮症、腎結石など高カルシウム尿症を呈する疾患、不安、不眠症、嚢胞性繊維症、てんかん、無感覚症、喘息、気管支炎、神経障害などが知られている。
【０００６】
クロライドチャンネルは、クロライドイオンを輸送するイオントランスポート膜タンパク質である。様々な種類のクロライドチャンネルが神経、筋、上皮などの細胞膜に存在し、様々な生理機能や細胞防御機構に関与していることが報告されている。
【０００７】
例えば、ＣＦＴＲ（cystic fibrosis transmembrane conductance regulator）と名付けられたクロライドチャンネルは、嚢胞性線維症（cystic fibrosis）の原因究明の過程で発見された。嚢胞性線維症は、白色人種において最もよく知られた常染色体性劣性の遺伝性疾患で、原因となる遺伝子の変異は、ＣＦＴＲ遺伝子に起こり、気道、膵臓、腸管、汗腺、消化管などの上皮細胞にあるＣＦＴＲの機能の欠失により、クロライドイオンの透過性が低下するために起こることが知られている。
【０００８】
また、シビレエイの発電器官によりクローニングされてＣｌＣ−０と名付けられたクロライドチャンネルはその後、大きなファミリー(ＣｌＣファミリー)を形成することが明らかになった。ＣｌＣファミリーの例としては、哺乳類の骨格筋に存在するＣｌＣ-１、様々な臓器の上皮に存在するＣｌＣ-２、海馬、小脳などに分布するＣｌＣ-３、ＣｌＣ-４、肺、腎臓などにあるＣｌＣ-５、脳、精巣、骨格筋、腎臓などにあるＣｌＣ-６、ＣｌＣ-７、また腎臓だけに特異的にみられるＣｌＣＫ-１、ＣｌＣＫ-２などがあり、ＣｌＣ-１の異常によって先天性筋強直症が、ＣｌＣ-５の異常によって遺伝性腎結石症などの疾患が起こることが知られている。
【０００９】
したがって、クロライドチャンネルをオープンし、クロライドイオンの輸送を促進することができる化合物は、様々な細胞の機能や防御機構に重要な役割を演じると考えられ、何らかの原因でクロライドイオンの透過性が低下し、細胞内外のクロライドイオンのバランスに異常をきたした結果生じる病態の処置に有用であると考えられる。
【００１０】
プロスタグランジン類（以後プロスタグランジンはＰＧとして示す）はヒトおよび他の哺乳類の組織または器官に含有され、広範囲の生理学的活性を示す有機カルボン酸の１群である。天然に存在するＰＧ類（天然ＰＧ類）は一般的に、式（Ａ）に示すプロスタン酸骨格を有する。
【化１】
【００１１】
一方天然ＰＧ類の幾つかの合成アナログは修飾された骨格を持っている。天然ＰＧ類は５員環部分の構造特性によって、ＰＧＡ類、ＰＧＢ類、ＰＧＣ類、ＰＧＤ類、ＰＧＥ類、ＰＧＦ類、ＰＧＧ類、ＰＧＨ類、ＰＧＩ類およびＰＧＪ類に分類され、さらに炭素鎖部分の不飽和の数と位置によって以下の３タイプに分類される。
（下付１）．．．１３，１４−不飽和−１５−ＯＨ
（下付２）．．．５，６−および１３，１４−ジ不飽和−１５−ＯＨ
（下付３）．．．５，６−、１３，１４−および１７，１８−トリ不飽和−１５−ＯＨ。
【００１２】
さらに、ＰＧＦ類は９位の水酸基の配置によってα（水酸基がアルファー配置である）およびβ（水酸基がベータ配置である）に分類される。
【００１３】
ＰＧＥ１、ＰＧＥ２およびＰＧＥ３は血管拡張、血圧降下、胃液分泌減少、腸管運動亢進、子宮収縮、利尿、気管支拡張および抗潰瘍活性をもつことが知られている。また、ＰＧＦ１α、ＰＧＦ２αおよびＰＧＦ３αは血圧上昇、血管収縮、腸管運動亢進性、子宮収縮、黄体退行および気管収縮特性を有することが知られている。
【００１４】
ＰＧＥ１及びＰＧＦ２αが家兎回腸においてクロライドイオンの分泌を刺激することや（Nature vol.238, 26-27, 1972、この参考文献は引用によりその内容が本出願に含まれる）、ＰＧＥ２がヒト空腸のクロライドイオンの分泌を誘発することが報告されている（Gastroenterology vol.78, 32-42, 1980、この参考文献は引用によりその内容が本出願に含まれる）。また、ＰＧＥ２が子宮内膜上皮細胞のクロライドイオンの輸送を調節することが報告されている（Journal of Physiology vol.508, 31-47, 1998、この参考文献は引用によりその内容が本出願に含まれる）。一方で、嚢胞性繊維症の患者において血小板のクロライドの輸送がＰＧＥ１に応答しなかったことや（European Journal of Clinical Chemistry and Clinical Biochemistry vol.33, No.6, 329-335, 1995、この参考文献は引用によりその内容が本出願に含まれる）、プロスタグランジンアナログ（ミソプロストール（misoprostol））が、嚢胞性繊維症の患者においてクロライドの分泌を促進しなかったことも報告されている（American Journal of Human Genetics Vol.67, No.6, 1422-1427, 2000、この参考文献は引用によりその内容が本出願に含まれる）。
【００１５】
さらに、ＰＧＥ２がウサギのハウスキーピングの基底外膜のクロライドチャンネルをオープンすることが報告されている（Journal of Biological Chemistry, 270(32) 1995、この参考文献は引用によりその内容が本出願に含まれる）。また、ＰＧＥ２とＰＧＦ２αがＣＦＴＲを介してマウスの子宮内膜上皮細胞におけるクロライドコンダクタンスを活性化することが報告されている（Biology of Reproduction, 60(2) 1999）。
【００１６】
しかしながら、プロスタグランジン化合物がクロライドチャンネル、特にＣｌＣチャンネルに対してどのような作用を示すかについては知られていない。
【発明の概要】
【００１７】
（発明の開示）
本発明者は、鋭意研究の結果、プロスタグランジン化合物がクロライドチャンネル、特にＣｌＣチャンネルをオープンすることを見出し、本発明を完成するに至った。
【００１８】
すなわち、本発明は、プロスタグランジン化合物の有効量を対象に投与することを含む、哺乳類対象におけるＣｌＣチャンネルをオープンするための方法に関する。特に本発明は、クロライドイオンの透過性の低下に関連する症状の処置を必要とする対象に対して、プロスタグランジン化合物の有効量を投与することによって、ＣｌＣチャンネルをオープンすることを含む前記症状を処置するための方法に関する。
【００１９】
また、本発明は有効量のプロスタグランジン化合物を含む、ＣｌＣチャンネルをオープンするための医薬組成物に関する。特に、本発明は、有効量のプロスタグランジン化合物を含む、哺乳類対象におけるクロライドイオンの透過性の低下に関連する症状の処置のための医薬組成物に関する。
【００２０】
さらに本発明は、哺乳類対象におけるＣｌＣチャンネルをオープンするための医薬組成物の製造のためのプロスタグランジン化合物の使用に関する。特に本発明は、クロライドイオンの透過性の低下に関連する症状の処置のための医薬組成物の製造のためのプロスタグランジン化合物の使用に関する。
【００２１】
例えば、本発明は以下に記載する方法、組成物、使用、化合物に関する。
（１）プロスタグランジン化合物の有効量を対象に投与することを含む、哺乳類対象におけるＣｌＣチャンネルをオープンするための方法。
（２）クロライドイオン透過性の低下に関連する症状を処置する方法であって、かかる処置を必要とする対象にプロスタグランジン化合物の有効量を投与することによってＣｌＣチャンネルをオープンすることを含む方法。
（３）該クロライドイオン透過性の低下に関連する症状が嚢胞性線維症である、（２）に記載の方法。
（４）プロスタグランジン化合物が下記一般式（Ｉ）で表される化合物である、（１）から（３）のいずれかに記載の方法。
【化２】
［式中、Ｌ、ＭおよびＮは、水素原子、ヒドロキシ、ハロゲン原子、低級アルキル、ヒドロキシ（低級）アルキルまたはオキソ（ここでＬおよびＭの少なくとも１つは水素以外の基であり、五員環は１または複数の二重結合を有していてもよい）；
Ａは、−ＣＨ２ＯＨ、−ＣＯＣＨ２ＯＨ、−ＣＯＯＨまたはその官能性誘導体；
Ｂは、−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨ−または−Ｃ≡Ｃ−；
Ｚは
【化３】
（ここでＲ４およびＲ５は、水素、ヒドロキシ、ハロゲン、低級アルキル、低級アルコキシまたはヒドロキシ（低級）アルキルであり、ただし、Ｒ４およびＲ５が同時にヒドロキシおよび低級アルコキシであることはない）；
Ｒ１は、非置換またはハロゲン、アルキル、ヒドロキシ、オキソ、アリールまたは複素環基で置換された飽和または不飽和二価低〜中級脂肪族炭化水素残基であり、脂肪族炭化水素における少なくとも１の炭素原子は任意に酸素、窒素または硫黄によって置換されていてもよい；そして、
Ｒａは、非置換またはハロゲン、オキソ、ヒドロキシ、低級アルコキシ、低級アルカノイルオキシ、シクロ（低級）アルキル、シクロ（低級）アルキルオキシ、アリール、アリールオキシ、複素環基または複素環オキシ基で置換された飽和または不飽和の低〜中級脂肪族炭化水素残基；シクロ（低級）アルキル；シクロ（低級）アルキルオキシ；アリール；アリールオキシ；複素環基；複素環オキシ基］。
（５）プロスタグランジン化合物が１３，１４−ジヒドロ−１６−モノまたはジハロゲン−プロスタグランジン化合物である、（１）から（３）のいずれかに記載の方法。
（６）プロスタグランジン化合物が１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−１６モノまたはジハロゲン−プロスタグランジン化合物である、（１）から（３）のいずれかに記載の方法。
（７）プロスタグランジン化合物が１３，１４−ジヒドロ−１６−モノまたはジフルオロ−プロスタグランジン化合物である、（１）から（３）のいずれかに記載の方法。
（８）プロスタグランジン化合物が１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−１６モノまたはジフルオロ−プロスタグランジン化合物である、（１）から（３）のいずれかに記載の方法。
（９）プロスタグランジン化合物が１３，１４−ジヒドロ−１６モノまたはジハロゲン−プロスタグランジンＥ化合物である、（１）から（３）のいずれかに記載の方法。
（１０）プロスタグランジン化合物が１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−１６モノまたはジハロゲン−プロスタグランジンＥ化合物である、（１）から（３）のいずれかに記載の方法。
（１１）プロスタグランジン化合物が１３，１４−ジヒドロ−１６，１６−ジフルオロ−プロスタグランジンＥ１化合物である、（１）から（３）のいずれかに記載の方法。
（１２）プロスタグランジン化合物が１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−１６，１６−ジフルオロ−プロスタグランジンＥ１化合物または１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−１６，１６−ジフルオロ−１８−メチル−プロスタグランジンＥ１化合物である（１）から（３）のいずれかに記載の方法。
（１３）Ａが式（Ｖ）で表される−ＣＯＯＨの官能性誘導体である（４）に記載の方法：
−ＣＯＮＲ’Ｒ''（Ｖ）
[式中、Ｒ’およびＲ''は、水素、低級アルキル、アリール、アルキル−またはアリール−スルホニル、低級アルケニルまたは低級アルキニル]。
（１４）プロスタグランジン化合物が１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−１６，１６−ジフルオロ−ＰＧＥ１Ｎ−エチルアミドである、（１３）に記載の方法。
（１５）プロスタグランジン化合物が１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−１６，１６−ジフルオロ−ＰＧＦ１αＮ−エチルアミドである、（１３）に記載の方法。
（１６）有効量のプロスタグランジン化合物を含む、哺乳類対照におけるＣｌＣチャンネルをオープンするための組成物。
（１７）有効量のプロスタグランジン化合物を含む、哺乳類対象におけるクロライドイオン透過性の低下に関連する症状の処置用組成物。
（１８）該クロライドイオン透過性の低下に関連する症状が嚢胞性線維症である、（１７）に記載の組成物。
（１９）プロスタグランジン化合物が下記一般式（Ｉ）で表される化合物である、（１６）から（１８）のいずれかに記載の組成物：
【化４】
［式中、Ｌ、ＭおよびＮは、水素原子、ヒドロキシ、ハロゲン原子、低級アルキル、ヒドロキシ（低級）アルキルまたはオキソ（ここでＬおよびＭの少なくとも１つは水素以外の基であり、五員環は少なくとも１つの二重結合を有していてもよい）；
Ａは、−ＣＨ２ＯＨ、−ＣＯＣＨ２ＯＨ、−ＣＯＯＨまたはその官能性誘導体；
Ｂは、−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨ−または−Ｃ≡Ｃ−；
Ｚは
【化５】
（ここでＲ４およびＲ５は、水素、ヒドロキシ、ハロゲン、低級アルキル、低級アルコキシまたはヒドロキシ（低級）アルキルであり、ただし、Ｒ４およびＲ５が同時にヒドロキシおよび低級アルコキシであることはない）；
Ｒ１は、非置換またはハロゲン、アルキル、ヒドロキシ、オキソ、アリールまたは複素環基で置換された飽和または不飽和二価低〜中級脂肪族炭化水素残基であり、脂肪族炭化水素における少なくとも１の炭素原子は任意に酸素、窒素または硫黄によって置換されていてもよい；そして、
Ｒａは、非置換またはハロゲン、オキソ、ヒドロキシ、低級アルコキシ、低級アルカノイルオキシ、シクロ（低級）アルキル、シクロ（低級）アルキルオキシ、アリール、アリールオキシ、複素環基または複素環オキシ基で置換された飽和または不飽和の低〜中級脂肪族炭化水素残基；シクロ（低級）アルキル；シクロ（低級）アルキルオキシ；アリール；アリールオキシ；複素環基；複素環オキシ基］。
（２０）プロスタグランジン化合物が１３，１４−ジヒドロ−１６−モノまたはジハロゲン−プロスタグランジン化合物である、（１６）から（１８）のいずれかに記載の組成物。
（２１）プロスタグランジン化合物が１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−１６モノまたはジハロゲン−プロスタグランジン化合物である、（１６）から（１８）のいずれかに記載の組成物。
（２２）プロスタグランジン化合物が１３，１４−ジヒドロ−１６−モノまたはジフルオロ−プロスタグランジン化合物である、（１６）から（１８）のいずれかに記載の組成物。
（２３）プロスタグランジン化合物が１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−１６モノまたはジフルオロ−プロスタグランジン化合物である、（１６）から（１８）のいずれかに記載の組成物。
（２４）プロスタグランジン化合物が１３，１４−ジヒドロ−１６モノまたはジハロゲン−プロスタグランジンＥ化合物である、（１６）から（１８）のいずれかに記載の組成物。
（２５）プロスタグランジン化合物が１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−１６モノまたはジハロゲン−プロスタグランジンＥ化合物である、（１６）から（１８）のいずれかに記載の組成物。
（２６）プロスタグランジン化合物が１３，１４−ジヒドロ−１６，１６−ジフルオロ−プロスタグランジンＥ１化合物である、（１６）から（１８）のいずれかに記載の組成物。
（２７）プロスタグランジン化合物が１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−１６，１６−ジフルオロ−プロスタグランジンＥ１化合物または１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−１６，１６−ジフルオロ−１８−メチル−プロスタグランジンＥ１化合物である、（１６）から（１８）のいずれかに記載の組成物。
（２８）Ａが式（Ｖ）で表される−ＣＯＯＨの官能性誘導体である（１９）に記載の組成物：
−ＣＯＮＲ’Ｒ''（Ｖ）
[式中、Ｒ’およびＲ''は、水素、低級アルキル、アリール、アルキル−またはアリール−スルホニル、低級アルケニルまたは低級アルキニル]。
（２９）プロスタグランジン化合物が１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−１６，１６−ジフルオロ−ＰＧＥ１Ｎ−エチルアミドである、（２８）に記載の組成物。
（３０）プロスタグランジン化合物が１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−１６，１６−ジフルオロ−ＰＧＦ１αＮ−エチルアミドである、（２８）に記載の組成物。
（３１）哺乳類対象におけるＣｌＣチャンネルをオープンするための医薬組成物の製造のためのプロスタグランジン化合物の使用。
（３２）哺乳類対象におけるクロライドイオン透過性の低下に関連する症状を処置するための医薬組成物の製造のためのプロスタグランジン化合物の使用。
（３３）該クロライドイオン透過性の低下に関連する症状が嚢胞性線維症である、（３２）に記載の使用。
（３４）プロスタグランジン化合物が下記一般式（Ｉ）で表される化合物である、（３１）から（３３）のいずれかに記載の使用：
【化６】
［式中、Ｌ、ＭおよびＮは、水素原子、ヒドロキシ、ハロゲン原子、低級アルキル、ヒドロキシ（低級）アルキルまたはオキソ（ここでＬおよびＭの少なくとも１つは水素以外の基であり、五員環は少なくとも１つの二重結合を有していてもよい）；
Ａは、−ＣＨ２ＯＨ、−ＣＯＣＨ２ＯＨ、−ＣＯＯＨまたはその官能性誘導体；
Ｂは、−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨ−または−Ｃ≡Ｃ−；
Ｚは
【化７】
（ここでＲ４およびＲ５は、水素、ヒドロキシ、ハロゲン、低級アルキル、低級アルコキシまたはヒドロキシ（低級）アルキルであり、ただし、Ｒ４およびＲ５が同時にヒドロキシおよび低級アルコキシであることはない）；
Ｒ１は、非置換またはハロゲン、アルキル、ヒドロキシ、オキソ、アリールまたは複素環基で置換された飽和または不飽和二価低〜中級脂肪族炭化水素残基であり、脂肪族炭化水素における少なくとも１の炭素原子は任意に酸素、窒素または硫黄によって置換されていてもよい；そして、
Ｒａは、非置換またはハロゲン、オキソ、ヒドロキシ、低級アルコキシ、低級アルカノイルオキシ、シクロ（低級）アルキル、シクロ（低級）アルキルオキシ、アリール、アリールオキシ、複素環基または複素環オキシ基で置換された飽和または不飽和の低〜中級脂肪族炭化水素残基；シクロ（低級）アルキル；シクロ（低級）アルキルオキシ；アリール；アリールオキシ；複素環基；複素環オキシ基］。
（３５）プロスタグランジン化合物が１３，１４−ジヒドロ−１６−モノまたはジハロゲン−プロスタグランジン化合物である、（３１）から（３３）のいずれかに記載の使用。
（３６）プロスタグランジン化合物が１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−１６−モノまたはジハロゲン−プロスタグランジン化合物である、（３１）から（３３）のいずれかに記載の使用。
（３７）プロスタグランジン化合物が１３，１４−ジヒドロ−１６−モノまたはジフルオロ−プロスタグランジン化合物である、（３１）から（３３）のいずれかに記載の使用。
（３８）プロスタグランジン化合物が１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−１６−モノまたはジフルオロ−プロスタグランジン化合物である、（３１）から（３３）のいずれかに記載の使用。
（３９）プロスタグランジン化合物が１３，１４−ジヒドロ−１６−モノまたはジハロゲン−プロスタグランジンＥ化合物である、（３１）から（３３）のいずれかに記載の使用。
（４０）プロスタグランジン化合物が１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−１６−モノまたはジハロゲン−プロスタグランジンＥ化合物である、（３１）から（３３）のいずれかに記載の使用。
（４１）プロスタグランジン化合物が１３，１４−ジヒドロ−１６，１６−ジフルオロ−プロスタグランジンＥ１化合物である、（３１）から（３３）のいずれかに記載の使用。
（４２）プロスタグランジン化合物が１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−１６，１６−ジフルオロ−プロスタグランジンＥ１化合物または１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−１６，１６−ジフルオロ−１８−メチル−プロスタグランジンＥ１化合物である、（３１）から（３３）のいずれかに記載の使用。
（４３）Ａが式（Ｖ）で表される−ＣＯＯＨの官能性誘導体である（３４）に記載の使用：
−ＣＯＮＲ’Ｒ''（Ｖ）
[式中、Ｒ’およびＲ''は、水素、低級アルキル、アリール、アルキル−またはアリール−スルホニル、低級アルケニルまたは低級アルキニル]。
（４４）プロスタグランジン化合物が１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−１６，１６−ジフルオロ−ＰＧＥ１Ｎ−エチルアミドである、（４３）に記載の使用。
（４５）プロスタグランジン化合物が１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−１６，１６−ジフルオロ−ＰＧＦ１αＮ−エチルアミドである、（４３）に記載の使用。
（４６）式(IV)で表される新規化合物：
【化８】
[式中、Ｌ、ＭおよびＮは、水素、ヒドロキシ、ハロゲン、低級アルキル、ヒドロキシ（低級）アルキルまたはオキソ（ここでＬおよびＭの少なくとも１つは水素以外の基であり、五員環は１または複数の二重結合を有していてもよい）；
Ｒ’およびＲ''は、水素、低級アルキル、アリール、アルキル−またはアリール−スルホニル、低級アルケニルまたは低級アルキニル；
Ｂは、−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨ−または−Ｃ≡Ｃ−；
Ｒ１は、非置換またはハロゲン、アルキル、ヒドロキシ、オキソ、アリールまたは複素環基で置換された飽和または不飽和二価低〜中級脂肪族炭化水素残基であり、脂肪族炭化水素における少なくとも１の炭素原子は任意に酸素、窒素または硫黄によって置換されていてもよい；そして、
Ｒａは、非置換またはハロゲン、オキソ、ヒドロキシ、低級アルコキシ、低級アルカノイルオキシ、シクロ（低級）アルキル、シクロ（低級）アルキルオキシ、アリール、アリールオキシ、複素環基または複素環オキシ基で置換された飽和または不飽和の低〜中級脂肪族炭化水素残基；シクロ（低級）アルキル；シクロ（低級）アルキルオキシ；アリール；アリールオキシ；複素環基；複素環オキシ基]。
（４７）化合物が１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−１６，１６−ジフルオロ−ＰＧＥ１Ｎ−エチルアミドである、（４６）に記載の化合物。
（４８）化合物が１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−１６，１６−ジフルオロ−ＰＧＦ１αＮ−エチルアミドである、（４６）に記載の化合物。
（４９）化合物が１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−１７−フェニル−１８，１９，２０−トリノールＰＧＦ２αＮ−エチルアミドである、（４６）に記載の化合物。
（５０）化合物が１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−２０−エチル−ＰＧＦ２αＮ−エチルアミドである、（４６）に記載の化合物。
【００２２】
（発明の詳細な記載）
本発明のＰＧ化合物の命名に際しては、前記式（Ａ）に示したプロスタン酸の番号を用いる。
【００２３】
前記式（Ａ）はＣ−２０の基本骨格のものであるが、本発明では炭素数がこれによって限定されるものではない。即ち、式（Ａ）においてＰＧ化合物の基本骨格を構成する炭素の番号はカルボン酸を１とし５員環に向かって順に２〜７までをα鎖上の炭素に、８〜１２までを５員環の炭素に、１３〜２０までをω鎖上に付しているが、炭素数がα鎖上で減少する場合、２位から順次番号を抹消して命名する。炭素数がα鎖上で増加する場合、カルボキシル基（Ｃ−１）の代わりに２位において対応する置換基を有する置換化合物として命名する。同様に炭素数がω鎖上で減少する場合、２０位から順次番号を抹消して命名する。また、炭素数がω鎖上で増加する場合、２１番目以後の炭素原子は置換基として命名する。また、立体配置に関しては、特に断りのない限り、上記基本骨格（Ａ）の有する立体配置に従うものとする。
【００２４】
また、例えばＰＧＤ、ＰＧＥ、ＰＧＦは、９位および／または１１位に水酸基を有するＰＧ化合物をいうが、本発明では、９位および／または１１位の水酸基に代えて他の基を有するものも包含する。これらの化合物を命名する場合、９−デヒドロキシ−９−置換−ＰＧ化合物あるいは１１−デヒドロキシ−１１−置換−ＰＧ化合物の形で命名する。なお、水酸基の代わりに水素を有するＰＧ化合物は、単に９−あるいは１１−デヒドロキシ−ＰＧ化合物と称する。
【００２５】
前述のように、ＰＧ化合物の命名はプロスタン酸骨格に基づいて行うが、上記化合物がプロスタグランジンと類似の部分構造を有する場合には、簡略化のため「ＰＧ」の略名を利用することがある。この場合、α鎖の骨格炭素数が２個延長されたＰＧ化合物、すなわちα鎖の骨格炭素数が９であるＰＧ化合物は、２−デカルボキシ−２−（２−カルボキシエチル）−ＰＧ化合物と命名する。同様に、α鎖の骨格炭素数が１１であるＰＧ化合物は、２−デカルボキシ−２−（４−カルボキシブチル）−ＰＧ化合物と命名する。また、ω鎖の骨格炭素数が２個延長されたＰＧ化合物、すなわちω鎖の骨格炭素数が１０であるＰＧ化合物は、２０−エチル−ＰＧ化合物と命名する。なお、命名はこれをＩＵＰＡＣ命名法に基づいて行うことも可能である。
【００２６】
アナログ（置換体を含む）または誘導体の例は、上記ＰＧ類のα鎖末端のカルボキシル基がエステル化された化合物、α鎖が延長された化合物、それらの生理学的に許容し得る塩、２−３位の炭素結合が２重結合あるいは５−６位の炭素結合が３重結合を有する化合物、３位、５位、６位、１６位、１７位、１８位、１９位および／または２０位の炭素に置換基を有する化合物、９位および／または１１位の水酸基の代りに低級アルキル基またはヒドロキシ（低級）アルキル基を有する化合物等である。
【００２７】
本発明において３位、１７位、１８位および／または１９位の好適な置換基としては、例えば炭素数１〜４のアルキル基があげられ、特にメチル基、エチル基があげられる。１６位の好適な置換基としては、メチル、エチル等の低級アルキル、ヒドロキシ、塩素、フッ素等のハロゲン原子、およびトリフルオロメチルフェノキシ等のアルコキシが挙げられる。１７位の好適な置換基としては、メチル、エチル等の低級アルキル、ヒドロキシ、塩素、フッ素等のハロゲン原子、およびトリフルオロメチルフェノキシ等のアルコキシが挙げられる。２０位の好適な置換基としては、Ｃ１−４アルキルのような飽和または不飽和の低級アルキル基、Ｃ１−４アルコキシのような低級アルコキシ基、Ｃ１−４アルコキシ−Ｃ１−４アルキルのような低級アルコキシアルキルを含む。５位の好適な置換基としては、塩素、フッ素などのハロゲン原子を含む。６位の好適な置換基としては、カルボニル基を形成するオキソ基を含む。９位および／または１１位にヒドロキシ基、低級アルキルまたは低級（ヒドロキシ）アルキル置換基を有する場合のＰＧ類の立体配置はα，βまたはそれらの混合物であってもかまわない。
【００２８】
さらに、上記アナログまたは誘導体は、ω鎖が天然のＰＧ類より短い化合物のω鎖末端にアルコキシ基、シクロアルキル基、シクロアルキルオキシ基、フェノキシ基、フェニル基等の置換基を有する化合物であってもよい。
【００２９】
本発明において用いられる好適な化合物は下記式（Ｉ）で表される：
【化９】
［式中、Ｌ、ＭおよびＮは、水素、ヒドロキシ、ハロゲン、低級アルキル、ヒドロキシ（低級）アルキルまたはオキソ（ここでＬおよびＭの少なくとも１つは水素以外の基であり、五員環は少なくとも１つの二重結合を有していてもよい）；
Ａは、−ＣＨ２ＯＨ、−ＣＯＣＨ２ＯＨ、−ＣＯＯＨまたはその官能性誘導体；
Ｂは、−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨ−または−Ｃ≡Ｃ−；
Ｚは
【化１０】
（ここでＲ４およびＲ５は、水素、ヒドロキシ、ハロゲン、低級アルキル、低級アルコキシまたはヒドロキシ（低級）アルキルであり、ただし、Ｒ４およびＲ５が同時にヒドロキシおよび低級アルコキシであることはない）；
Ｒ１は、非置換またはハロゲン、アルキル、ヒドロキシ、オキソ、アリールまたは複素環基で置換された飽和または不飽和二価低〜中級脂肪族炭化水素残基であり、脂肪族炭化水素における少なくとも１の炭素原子は任意に酸素、窒素または硫黄によって置換されていてもよい；そして、
Ｒａは、非置換またはハロゲン、オキソ、ヒドロキシ、低級アルコキシ、低級アルカノイルオキシ、シクロ（低級）アルキル、シクロ（低級）アルキルオキシ、アリール、アリールオキシ、複素環基または複素環オキシ基で置換された飽和または不飽和の低〜中級脂肪族炭化水素残基；シクロ（低級）アルキル；シクロ（低級）アルキルオキシ；アリール；アリールオキシ；複素環基；複素環オキシ基］。
【００３０】
本発明において用いられる特に好ましい化合物は、式（II）で表される：
【化１１】
[式中、ＬおよびＭは、水素、ヒドロキシ、ハロゲン、低級アルキル、ヒドロキシ（低級）アルキルまたはオキソ（ただし、ＬおよびＭの基のうちの少なくとも１つは、水素以外の基であり、５員環は少なくとも１つの二重結合を有していてもよい）；
Ａは、−ＣＨ２ＯＨ、−ＣＯＣＨ２ＯＨ、−ＣＯＯＨまたはそれらの官能性誘導体；
Ｂは、−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨ−または−Ｃ≡Ｃ−；
Ｚは、
【化１２】
（ここでＲ４およびＲ５は、水素、ヒドロキシ、ハロゲン、低級アルキル、低級アルコキシまたはヒドロキシ（低級）アルキルであり、ただし、Ｒ４およびＲ５が同時にヒドロキシおよび低級アルコキシであることはない）
Ｘ１およびＸ２は、水素、低級アルキルまたはハロゲン；
Ｒ１は、非置換またはハロゲン、アルキル、ヒドロキシ、オキソ、アリールまたは複素環で置換された、二価の飽和または不飽和の低〜中級の脂肪族炭化水素残基であり、脂肪族炭化水素における少なくとも１の炭素原子は任意に酸素、窒素または硫黄によって置換されていてもよい；
Ｒ２は、単結合または低級アルキレン；そして、
Ｒ３は、低級アルキル、低級アルコキシ、シクロ（低級）アルキル、シクロ（低級）アルキルオキシ、アリール、アリールオキシ、複素環または複素環オキシ］。
【００３１】
上記式中、Ｒ１およびＲａの定義における「不飽和」の語は、主鎖および／または側鎖の炭素原子間の結合として、１つまたはそれ以上の二重結合および／または三重結合を孤立、分離または連続して含むことを意味する。通常の命名法に従って、連続する２つの位置間の不飽和結合は若い方の位置番号を表示することにより示し、連続しない２つの位置間の不飽和結合は両方の位置番号を表示して示す。
【００３２】
「低〜中級脂肪族炭化水素」の語は、炭素原子数１〜１４の直鎖または分枝鎖（ただし、側鎖は炭素原子数１〜３のものが好ましい）を有する炭化水素基を意味し、好ましくは炭素原子数１〜１０、特に１〜８の炭化水素基である。
【００３３】
「ハロゲン原子」の語は、フッ素、塩素、臭素およびヨウ素を包含する。
【００３４】
「低級」の語は、特にことわりのない限り炭素原子数１〜６を有する基を包含するものである。
【００３５】
「低級アルキル」の語は、炭素原子数１〜６の直鎖または分枝状の飽和炭化水素基を意味し、例えばメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔ−ブチル、ペンチルおよびヘキシルを含む。
【００３６】
「低級アルキレン」の語は、炭素原子数１〜６の直鎖または分枝状の二価飽和炭化水素基を意味し、例えばメチレン、エチレン、プロピレン、イソプロピレン、ブチレン、イソブチレン、ｔ−ブチレン、ペンチレンおよびヘキシレンを含む。
【００３７】
「低級アルコキシ」の語は、低級アルキルが上述と同意義である低級アルキル−Ｏ−基を意味する。
【００３８】
「ヒドロキシ（低級）アルキル」の語は、少なくとも１つのヒドロキシ基で置換された上記のような低級アルキルを意味し、例えばヒドロキシメチル、１−ヒドロキシエチル、２−ヒドロキシエチルおよび１−メチル−１−ヒドロキシエチルが挙げられる。
【００３９】
「低級アルカノイルオキシ」の語は、式ＲＣＯ−Ｏ−（ここで、ＲＣＯ−は上記のような低級アルキル基が酸化されて生じるアシル基、例えばアセチル）で示される基を意味する。
【００４０】
「シクロ（低級）アルキル」の語は、炭素原子３個以上を含む上記のような低級アルキル基が閉環して生ずる環状基を意味し、例えばシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシルを含む。
【００４１】
「シクロ（低級）アルキルオキシ」の語は、シクロ（低級）アルキルが上述と同意義であるシクロ（低級）アルキル−Ｏ−基を意味する。
【００４２】
「アリール」の語は、非置換または置換の芳香族炭化水素環基を包含し、（好ましくは単環式基の）、例えばフェニル、トリル、キシリルが例示される。置換基としては、ハロゲン原子、ハロ（低級）アルキル（ここで、ハロゲン原子および低級アルキルは前記の意味）が含まれる。
【００４３】
「アリールオキシ」の語は、式ＡｒＯ−（ここで、Ａｒは上記のようなアリール）で示される基を意味する。
【００４４】
「複素環基」の語としては、置換されていてもよい炭素原子および、窒素原子、酸素原子および硫黄原子から選ばれる１種または２種のヘテロ原子を１〜４個、好ましくは１〜３個含む、５〜１４員環、好ましくは５〜１０員環の、単環式〜３環式、好ましくは単環式の複素環基が含まれる。複素環基としては、フリル基、チエニル基、ピロリル基、オキサゾリル基、イソキサゾリル基、チアゾリル基、イソチアゾリル基、イミダゾリル基、ピラゾリル基、フラザニル基、ピラニル基、ピリジル基、ピリダジニル基、ピリミジル基、ピラジニル基、２−ピロリニル基、ピロリジニル基、２−イミダゾリニル基、イミダゾリジニル基、２−ピラゾリニル基、ピラゾリジニル基、ピペリジノ基、ピペラジニル基、モルホリノ基、インドリル基、ベンゾチエニル基、キノリル基、イソキノリル基、プリニル基、キナゾリニル基、カルバゾリル基、アクリジニル基、フェナントリジニル基、ベンズイミダゾリル基、ベンズイミダゾリニル基、ベンゾチアゾリル基、フェノチアジニル基などが例示される。置換基としてはハロゲン、ハロゲン置換低級アルキル基（ここで、ハロゲンおよび低級アルキル基は前記の意味）が例示される。
【００４５】
「複素環オキシ基」の語は、式ＨｃＯ−（ここでＨｃは上記のような複素環基）で示される基を意味する。
【００４６】
Ａの「官能性誘導体」の語は、塩（好ましくは、医薬上許容し得る塩）、エーテル、エステルおよびアミド類を含む。
【００４７】
適当な「医薬上許容し得る塩」としては、慣用される非毒性塩を含み、無機塩基との塩、例えばアルカリ金属塩（ナトリウム塩、カリウム塩等）、アルカリ土類金属塩（カルシウム塩、マグネシウム塩等）、アンモニウム塩；または有機塩基との塩、例えばアミン塩（例えばメチルアミン塩、ジメチルアミン塩、シクロヘキシルアミン塩、ベンジルアミン塩、ピペリジン塩、エチレンジアミン塩、エタノールアミン塩、ジエタノールアミン塩、トリエタノールアミン塩、トリス（ヒドロキシメチルアミノ）エタン塩、モノメチル−モノエタノールアミン塩、プロカイン塩、カフェイン塩等）、塩基性アミノ酸塩（例えばアルギニン塩、リジン塩等）、テトラアルキルアンモニウム塩等が挙げられる。これらの塩類は、例えば対応する酸および塩基から常套の反応によってまたは塩交換によって製造し得る。
【００４８】
エーテルの例としてはアルキルエーテル、例えば、メチルエーテル、エチルエーテル、プロピルエーテル、イソプロピルエーテル、ブチルエーテル、イソブチルエーテル、ｔ−ブチルエーテル、ペンチルエーテル、１−シクロプロピルエチルエーテル等の低級アルキルエーテル；オクチルエーテル、ジエチルヘキシルエーテル、ラウリルエーテル、セチルエーテル等の中級または高級アルキルエーテル；オレイルエーテル、リノレニルエーテル等の不飽和エーテル；ビニルエーテル、アリルエーテル等の低級アルケニルエーテル；エチニルエーテル、プロピニルエーテル等の低級アルキニルエーテル；ヒドロキシエチルエーテル、ヒドロキシイソプロピルエーテル等のヒドロキシ（低級）アルキルエーテル；メトキシメチルエーテル、１−メトキシエチルエーテル等の低級アルコキシ（低級）アルキルエーテル；例えばフェニルエーテル、トシルエーテル、ｔ−ブチルフェニルエーテル、サリチルエーテル、３,４−ジメトキシフェニルエーテル、ベンズアミドフェニルエーテル等の所望により置換されたアリールエーテル；およびベンジルエーテル、トリチルエーテル、ベンズヒドリルエーテル等のアリール(低級)アルキルエーテルが挙げられる。
【００４９】
エステルとしては、メチルエステル、エチルエステル、プロピルエステル、イソプロピルエステル、ブチルエステル、イソブチルエステル、ｔ−ブチルエステル、ペンチルエステル、１−シクロプロピルエチルエステル等の低級アルキルエステル；ビニルエステル、アリルエステル等の低級アルケニルエステル；エチニルエステル、プロピニルエステル等の低級アルキニルエステル；ヒドロキシエチルエステル等のヒドロキシ（低級）アルキルエステル；メトキシメチルエステル、１−メトキシエチルエステル等の低級アルコキシ（低級）アルキルエステルのような脂肪族エステル；および例えばフェニルエステル、トリルエステル、ｔ−ブチルフェニルエステル、サリチルエステル、３,４−ジメトキシフェニルエステル、ベンズアミドフェニルエステル等の所望により置換されたアリールエステル；ベンジルエステル、トリチルエステル、ベンズヒドリルエステル等のアリール（低級）アルキルエステルが挙げられる。
【００５０】
Ａのアミドは、式−ＣＯＮＲ’Ｒ''（式中、Ｒ’およびＲ''はそれぞれ水素、低級アルキル、アリール、アルキル−またはアリール−スルホニル、低級アルケニルおよび低級アルキニル）で示される基を意味し、例えばメチルアミド、エチルアミド、ジメチルアミド、ジエチルアミド等の低級アルキルアミド；アニリド、トルイジド等のアリールアミド；メチルスルホニルアミド、エチルスルホニルアミド、トリルスルホニルアミド等のアルキルもしくはアリールスルホニルアミド等が挙げられる。
【００５１】
好ましいＬおよびＭの例は、ヒドロキシ、オキソを含み、特にＭがヒドロキシでＬがオキソであるいわゆるＰＧＥタイプと称される５員環構造を有するものを含む。
【００５２】
好ましいＡは、−ＣＯＯＨ、その医薬上許容し得る塩、エステルまたはアミドである。
【００５３】
好ましいＸ１およびＸ２の例は、フッ素であり、いわゆる１６，１６−ジフルオロタイプと称されるものを含む。
【００５４】
好ましいＲ１は、炭素原子数１〜１０であり、特に好ましくは炭素原子数６〜１０の炭化水素残基である。脂肪族炭化水素における少なくとも１の炭素原子は酸素、窒素または硫黄で置換されていてもよい。
【００５５】
Ｒ１の具体例としては、例えば、次のものが挙げられる。
−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、
−ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、
−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ−、
−ＣＨ２−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、
−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−、
−ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−、
−ＣＨ２−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−、
−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、
−ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、
−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ−、
−ＣＨ２−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、
−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ（ＣＨ３）−ＣＨ２−、
−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ（ＣＨ３）−ＣＨ２−、
−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、
−ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、
−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ＝ＣＨ−、
−ＣＨ２−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、
−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ（ＣＨ３）−ＣＨ２−。
【００５６】
好ましいＲａは、１−１０炭素原子、より好ましくは１−８炭素原子を有する炭化水素である。Ｒａは１の炭素原子を有する１または２の側鎖を有していてもよい。
【００５７】
上記式（Ｉ）および（ＩＩ）における環、および、α−および／またはω−鎖の配置は、天然ＰＧ類の配置と同じであっても異なっていてもよい。しかしながら、本発明は、天然タイプの配置を有する化合物と非天然タイプの配置を有する化合物の混合物も包含する。
【００５８】
本発明において、１３と１４位が飽和し、１５位がケト（＝Ｏ）であるＰＧ化合物は、１１位のヒドロキシと１５位のケト間のへミアセタール形成により、ケト−ヘミアセタール平衡を生ずる場合がある。
【００５９】
例えば、Ｘ１およびＸ２の両方がハロゲン原子、特にフッ素原子の場合、化合物は互変異性体、二環式化合物を含むことが確認されている。
【００６０】
このような互変異性体が存在する場合、両異性体の存在比率は他の部分の構造または置換基の種類により変動し、場合によっては一方の異性体が圧倒的に存在することもあるが、本発明においてはこれら両者を含むものとする。
【００６１】
さらに、本発明に用いられる１５−ケト−ＰＧ化合物には、二環式化合物およびそのアナログまたは誘導体が含まれる。
【００６２】
二環式化合物は下記式(III)で表される：
【化１３】
[式中、Ａは、−ＣＨ２ＯＨ、−ＣＯＣＨ２ＯＨ、−ＣＯＯＨまたはそれらの官能性誘導体；
Ｘ１’およびＸ２’は、水素、低級アルキルまたはハロゲン；
Ｙは、
【化１４】
（ここでＲ４’およびＲ５’は、水素、ヒドロキシ、ハロゲン、低級アルキル、低級アルコキシまたはヒドロキシ（低級）アルキルであり、ただし、Ｒ４’およびＲ５’が同時にヒドロキシおよび低級アルコキシであることはない）；
Ｒ１は、非置換またはハロゲン、アルキル、ヒドロキシ、オキソ、アリールまたは複素環で置換された、二価の飽和または不飽和の低〜中級の脂肪族炭化水素残基；そして、
Ｒ２’は、非置換またはハロゲン、オキソ、ヒドロキシ、低級アルコキシ、低級アルカノイルオキシ、シクロ（低級）アルキル、シクロ（低級）アルキルオキシ、アリール、アリールオキシ、複素環基または複素環オキシ基で置換された飽和または不飽和の低〜中級の脂肪族炭化水素残基；シクロ（低級）アルキル；シクロ（低級）アルキルオキシ；アリール；アリールオキシ；複素環基；複素環オキシ基；
Ｒ３’は、水素、低級アルキル、シクロ（低級）アルキル、アリールまたは複素環基］。
【００６３】
本発明に用いられる化合物は、異性体の存在の有無にかかわりなくケト型の構造式または命名法によって化合物を表わすことがあるが、これは便宜上のものであってヘミアセタール型の化合物を排除しようとするものではない。
【００６４】
本発明においては、個々の互変異性体、その混合物、または光学異性体、その混合物、ラセミ混合物、その他の立体異性体等の異性体も、同じ目的に使用することが可能である。
【００６５】
本発明において用いられる化合物の一部は米国特許第５０７３５６９号、５１６６１７４号、５２２１７６３号、５２１２３２４号、５７３９１６１号、および６２４２４８５号（これらの引用文献は引用により本出願にその内容が含まれる）に開示された方法によって製造し得る。
【００６６】
さらに、本発明者らは、式(IV)で表される新規化合物がクロライドチャンネルをオープンするのに有効であることを見出した：
【化１５】
[式中、Ｌ、Ｍ、Ｎ、Ｂ、Ｒ１およびＲａは式（Ｉ）において定義したものと同じである；そして、
Ｒ’およびＲ''は、水素、低級アルキル、アリール、アルキル−またはアリール−スルホニル、低級アルケニルまたは低級アルキニル。]
したがって、本発明は上記の新規化合物も包含する。
【００６７】
本発明によると、本発明に用いる化合物を投与することによって、哺乳類対象を処置することができる。対象はヒトを含むいかなる哺乳類であってもよい。化合物は全身的に投与しても局所的に投与してもよい。通常、化合物は、経口投与、静脈注射（点滴を含む）、皮下投与、直腸内投与、膣内投与、経皮投与、点眼投与などの方法で投与される。投与量は動物の種類、年令、体重、処置されるべき症状、所望の治療効果、投与経路、処置期間等により変化するが、１日１〜４分割用量または持続形態で全身投与する場合、１日当たり０．０００１〜１００ｍｇ／ｋｇの投与量で満足な効果が得られる。
【００６８】
化合物は、常套手段における投与に好適な医薬組成物として製剤するのが好ましい。組成物は、経口投与薬、注射薬、点滴薬、外用薬、点眼剤、座薬および膣座薬等として好適なものとすればよい。
【００６９】
本発明の組成物は生理学的に許容される添加剤と併用しても良い。添加剤は１５−ケト−ＰＧ化合物と併用される成分を含み、例えば、賦形剤、希釈剤、増量剤、溶剤、滑沢剤、補助剤、結合剤、崩壊剤、被覆剤、カプセル化剤、軟膏基材、座薬用基材、エアゾール剤、乳化剤、分散剤、懸濁剤、増粘剤、等張化剤、緩衝剤、無痛化剤、保存剤、抗酸化剤、矯味剤、芳香剤、着色剤、機能性素材（例えばシクロデキストリン、生体内分解高分子など）、安定剤が挙げられる。これらの添加剤は当該技術分野で周知であり、製剤学に関する一般書籍に記載されているものから適宜選択すればよい。
【００７０】
本発明の組成物中の上記化合物の量は薬剤の形態にもよるが、通常０．００００１〜１０．０重量％、より好ましくは０．０００１〜１．０重量％である。
【００７１】
経口投与のための固体組成物としては、錠剤、トローチ、舌下錠、カプセル、丸剤、散剤、顆粒剤等が含まれる。このような固体組成物においては１つまたはそれ以上の活性成分が、少なくとも１つの不活性な希釈剤と混合することにより調製される。組成物は、例えば滑沢剤、崩壊剤、安定剤などの不活性な希釈剤以外の添加剤をさらに含んでいても良い。錠剤および丸剤は所望により腸溶性または胃溶性のフィルムで被覆しても良い。また、２以上の層で被覆してもよい。更に、徐放性物質に吸着させてもよく、マイクロカプセル剤としてもよい。さらにゼラチンのような容易に崩壊され得る物質のカプセル剤としてもよい。さらに脂肪酸またはそのモノ、ジ、トリグリセリドなどの適当な溶媒に溶解させてソフトカプセルとしても良い。速効性を必要とするときは、舌下錠としてもよい。
【００７２】
経口投与のための液体組成物としては、乳剤、液剤、懸濁剤、シロップ剤、エリキシル剤等が例示される。この組成物は一般的に用いられる不活性な希釈剤、例えば精製水、エタノール等を含んでいてもよい。不活性な希釈剤以外に湿潤剤、懸濁化剤のような補助剤、甘味剤、風味剤、芳香剤、防腐剤などの添加剤を含有していてもよい。
【００７３】
本発明の組成物としては、スプレー剤の形態としてもよく、これは１またはそれ以上の活性成分を含み、それ自体公知の方法により処方される。
【００７４】
本発明による非経口投与のための注射剤としては無菌の水性または非水性の液剤、懸濁剤、乳剤を包含する。水性の液剤、懸濁剤用媒体としては、例えば注射用蒸留水、生理食塩水およびリンゲル液が含まれる。
【００７５】
非水性の液剤、懸濁剤用媒体としては、例えばプロピレングリコール、ポリエチレングリコール、オリーブ油のような植物油、エタノールのようなアルコール類、ポリソルベート等が挙げられる。このような組成物は、さらに防腐剤、湿潤剤、乳化剤、分散剤のような添加剤を含んでいてもよい。これらは例えばバクテリア保留フィルターを通す濾過、殺菌剤の配合、ガス滅菌または放射線滅菌によって無菌化される。これら注射用組成物はまた無菌の粉末組成物として提供し、使用前に無菌の注射用溶媒に溶解させることもできる。
【００７６】
組成物は点眼液または眼軟膏等の点眼剤としてもよい。点眼液は、活性成分を無菌の水溶液、例えば生理食塩水、緩衝液等に溶解させるかまたは用時溶解用の粉末組成物として提供するために粉末成分を組合せて作られる。眼軟膏は、常套の軟膏基剤に活性成分を混合して作られる。
【００７７】
本発明による外用薬としては、軟膏剤、クリーム、ローション、スプレーなど皮膚、耳鼻咽喉科の分野などで用いられる全ての外用製剤を含む。
【００７８】
別の形態は坐薬または膣坐薬である。これらの坐薬はカカオ脂等の体温で軟化する常套の基剤に活性成分を混合して作ることができ、適当な軟化温度を有する非イオン界面活性剤を用いて吸収性を向上させてもよい。
【００７９】
本発明において、「処置」の語は、予防、治療、症状の軽減、症状の減退、進行停止等、あらゆる管理が含まれる。
【００８０】
本発明の化合物は、クロライドチャンネル、特にＣｌＣチャンネルをオープンするため、様々な細胞の機能や防御機構の調節が可能となる。特に、クロライドイオンの透過性の低下に関連する症状の処置に適用することができる。
【００８１】
本明細書において用いられる「ＣｌＣチャンネルをオープンする」という語は、Ｃｌ−電流、Ｃｌ−分泌、Ｃｌ−輸送をＣｌＣチャンネルをオープンすることにより活性化、促進または調節することを含む。
【００８２】
クロライドの透過性の低下に関連する症状としては、例えば、筋緊張性萎縮症、腎結石など高カルシウム尿症を呈する疾患、便秘、不安、不眠症、嚢胞性繊維症、てんかん、無感覚症、喘息、気管支炎、神経障害などが挙げられるが、本発明はこれらに限定されるものではない。
【００８３】
本発明の化合物は、特にＣｌＣ-２チャンネルをオープンするため、ＣｌＣ-２チャンネル以外のクロライドチャンネルの機能が低下することにより起こる疾患（例えば嚢胞性繊維症、先天性筋強直症、遺伝性腎結石症など）の処置に有用である。
【００８４】
更に、本発明の医薬組成物においては、本発明の目的に反しない限り、他の薬理活性成分を適宜含有させることもできる。
【００８５】
以下、本発明を実施例によりさらに詳細に説明するが、これは本発明を限定するものではない。
【実施例】
【００８６】
（合成例１）
１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−１７−フェニル−１８，１９，２０−トリノール−ＰＧＦ２αＮ−エチルアミド（５）の調製
【化１６】
【００８７】
（１）→（２）
３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン（０．７０ｍｌ，７．６７ｍｍｏｌ）を、無水ジクロロメタン（１０ｍｌ）中の化合物（１）（０．３５０ｇ，０．７３７ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。この溶液に、カンファースルホン酸（７ｍｇ，０．０３ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で３０分間攪拌した。反応混合物を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液に注ぎ、ジクロロメタンで２回抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、蒸発させた。蒸発後の残渣をシリカゲルカラムのクロマトグラフィー（ＢＷ−３００ １５０ｇ、酢酸エチル：ヘキサン＝１：３）にかけ、化合物（２）（０．４６３ｇ、０．７２０ｍｍｏｌ、９７．７％収率）を無色油として得た。
【００８８】
（２）→（３）
エタノール（１４ｍｌ）中の化合物（２）（０．８８９ｇ、１．３８ｍｍｏｌ）の溶液に、１Ｎ−水酸化ナトリウム水溶液（６．９ｍｌ、６．９ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で１６時間攪拌した。混合物を氷浴中で冷却し、次いで酢酸エチルと水を混合物に添加した。１Ｎ−塩酸（７ｍｌ、７ｍｍｏｌ）を混合物のｐＨが４となるまで添加した。混合物を酢酸エチルで３回抽出した。混合有機層を飽和塩化ナトリウム水溶液で２回洗浄し、次いで無水硫酸マグネシウムで乾燥させた。有機層の蒸発により粗化合物（３）（０．８７８ｇ）を無色油として得た。粗化合物（３）を精製せずに以後の反応に用いた。
【００８９】
（３）→（４）
カルボニルジイミダゾール（０．４４８ｇ、２．７７ｍｍｏｌ）を無水ＴＨＦ（９．０ｍｌ）中の粗化合物（３）（０．８７８ｇ、１．３８ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。混合物を室温で２時間攪拌した。ＴＨＦ溶液中の２Ｍ−エチルアミン（２．７７ｍｌ、５．５４ｍｍｏｌ）を反応混合物に添加した。混合物を室温で１時間攪拌し、１Ｎ−塩酸に注ぎ、次いで酢酸エチルで３回抽出した。混合有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液と飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、蒸発させた。残渣のシリカゲルカラムでのクロマトグラフィー（ＦＬ−６０Ｄ １５０ｇ、酢酸エチル：ヘキサン＝３：１）により化合物（４）（０．８１７ｇ、１．３０ｍｍｏｌ、化合物（２）に基づく収率９４．１％）を得た。
【００９０】
（４）→（５）
酢酸（９．８ｍｌ）と水（４．９ｍｌ）をＴＨＦ（４．９ｍｌ）中の化合物（４）（０．８１５ｇ、１．３０ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。混合物を５０℃で３時間攪拌し、次いで０℃まで冷却した。２Ｎ−水酸化ナトリウム水溶液を混合物に、混合物のｐＨが９となるまで添加した。混合物を酢酸エチルで３回抽出した。混合有機層を水と飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、蒸発させた。残渣のシリカゲルカラムでのクロマトグラフィー（ＦＬ−６０Ｄ １００ｇ、２−プロパノール：酢酸エチル＝５：１００）により無色油（０．４８５ｇ、１．１７ｍｍｏｌ、８９．９％収率）を得た。さらなる分取ＨＰＬＣ（ＹＭＣ−Ｐａｋ ＲＩ−０５３−１５、Φ５０＊２５０ｍｍ−ＳＩＬ１２０Ａ、２−プロパノール：ｎ−ヘキサン＝１８：８２、溶媒流速＝１００ｍｌ／分）による精製により化合物（５）（０．４１７ｇ、１．１２ｍｍｏｌ、８６．３％収率）を得た。
【００９１】
化合物（５）の１Ｈ−ＮＮＲスペクトル（２００ＭＨｚ／ＣＤＣｌ３）
δ（ＴＭＳ＝０ｐｐｍ）
７．３３−７．１３（５Ｈ、ｍ）、５．８４（１Ｈ、ｂｒ）、５．２８−５．５０（２Ｈ、ｍ）、４．１８−４．０７（１Ｈ、ｍ）、３．９０−３．８０（１Ｈ、ｍ）、３．２６（２Ｈ、ｄｑ、Ｊ＝５．６、７．３Ｈｚ）、３．２０（２Ｈ、ｂｒ）、２．９４−２．８６（２Ｈ、ｍ）、２．８０−２．７１（２Ｈ、ｍ）、２．６０−２．５２（２Ｈ、ｍ）、２．５０−１．９０（４Ｈ、ｍ）、２．１７（２Ｈ、ｔ、Ｊ＝７．０Ｈｚ）１．９０−１．５６（６Ｈ、ｍ）、１．４７−１．２５（２Ｈ、ｍ）、１．１３（３Ｈ、ｔ、Ｊ＝７．３Ｈｚ）
【００９２】
（合成例２）
Ｎ１−エチル−７−［（２，４ａＲ，５Ｒ，７ａＲ）−２−（１，１−ジフルオロペンチル）−２−ヒドロキシ−６−オキソぺルヒドロシクロペンタ［ｂ］ピラン−５−イル］ヘプタンアミド（７）の調製
【化１７】
【００９３】
サブ・ロット−１
カルボニルジイミダゾール（７９．５ｍｇ、０．４９０ｍｍｏｌ）を無水ＴＨＦ（５ｍｌ）中の化合物（６）（１７４．０ｍｇ、０．４４６ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。混合物を室温で３時間攪拌し、次いでＴＨＦ溶液中の２Ｍ−エチルアミン（０．８７ｍｌ、１．７４ｍｍｏｌ）を混合物に添加した。混合物を室温で１２時間攪拌した。飽和塩化アンモニウム水溶液（１０ｍｌ）と酢酸エチル（１０ｍｌ）を反応混合物に攪拌しながら添加した。水層を有機層から分離し、酢酸エチルで３回抽出した。混合有機層を硫酸マグネシウムで乾燥させ、次いで蒸発させた。残渣のシリカゲルカラムでのクロマトグラフィー（ＦＬ−６０Ｄ １０ｇ、ヘキサン：酢酸エチル＝１：２）により無色油（１１７．５ｍｇ、０．２８１ｍｍｏｌ、６３．０％収率）を得た。
【００９４】
サブ・ロット２
カルボニルジイミダゾール（１０５．９ｍｇ、０．６５３ｍｍｏｌ）を無水ＴＨＦ（３ｍｌ）中の化合物（６）（２２９．２ｍｇ、０．５８７ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。混合物を室温で２時間攪拌し、次いでＴＨＦ溶液中の２Ｍ−エチルアミン（１．２ｍｌ、２．４ｍｍｏｌ）を混合物に添加した。混合物を室温で１時間攪拌した。飽和塩化アンモニウム水溶液（１０ｍｌ）と酢酸エチル（１０ｍｌ）を反応混合物に攪拌しながら添加した。水層を有機層から分離し、酢酸エチルで２回抽出した。混合有機層を硫酸マグネシウムで乾燥させ、次いで蒸発させた。残渣のシリカゲルカラムでのクロマトグラフィー（ＦＬ−６０Ｄ １０ｇ、ヘキサン：酢酸エチル＝２：３）により無色油（１９５．７ｍｇ、０．４６９ｍｍｏｌ、７９．８％収率）を得た。
【００９５】
これら２つの上記サブ・ロットを合同させた。合同させた生成物（３０１．４ｍｇ）をさらに分取ＨＰＬＣ（Merck Lichrosorb ＤIＯＬ−７μｍ、Φ２５＊２５０ｍｍ、２−プロパノール：ｎ−ヘキサン＝１０：１００、溶媒流速＝４０ｍｌ／分）で精製して化合物（７）（２０９．６ｍｇ、６９．５％回収率）を得た。
【００９６】
化合物（７）の１Ｈ−ＮＮＲスペクトル（２００ＭＨｚ／ＣＤＣｌ３）
δ（ＴＭＳ＝０ｐｐｍ）
５．４２（１Ｈ、ｂｒ）、４．２６−４．１０（１Ｈ、ｍ）、３．２９（２Ｈ、ｄｑ、Ｊ＝５．６、７．２Ｈｚ）、２．８３（１Ｈ、ｂｒ）、２．５８（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝１７．６、７．３Ｈｚ）、２．２１（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝１７．６、１１．５Ｈｚ）、２．１４（２Ｈ、ｔ、Ｊ＝７．５Ｈｚ）、２．１０−１．７３（５Ｈ、ｍ）、１．７３−１．２１（１７Ｈ、ｍ）、１．１４（３Ｈ、ｔ、Ｊ＝７．２Ｈｚ）、０．９４（３Ｈ、ｔ、Ｊ＝７．１Ｈｚ）
【００９７】
（合成例３）
Ｎ１−エチル−７−［（２，４ａＲ，５Ｒ，６Ｓ，７ａＲ）−２−（１，１−ジフルオロペンチル）−２，６−ジヒドロキシぺルヒドロシクロペンタ［ｂ］ピラン−５−イル］ヘプタンアミド（１５）の調製
【化１８】
【００９８】
（８）→（９）
３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン（４．２２ｍｌ、４６．１１ｍｍｏｌ）とカンファースルホン酸（４２．１６ｍｇ、０．１８１ｍｍｏｌ）を０℃の無水ジクロロメタン（９０ｍｌ）中の化合物（８）（２．８７ｇ、４．２１６ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。反応混合物を０℃で５０分間攪拌した。飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を反応混合物に添加した。混合物を室温に昇温し、ジクロロメタン（５０ｍｌ）で３回抽出した。混合有機層を水（１８０ｍｌ）と飽和塩化ナトリウム水溶液（１８０ｍｌ）で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、そして蒸発させた。残渣のシリカゲルカラムでのクロマトグラフィー（ＢＷ−３００ １５４ｇ、ヘキサン：酢酸エチル＝８：１）により化合物（９）（３．４２ｇ、４．４７６ｍｍｏｌ、定量的収率）を得た。
【００９９】
（９）→（１０）
ＴＨＦ溶液中の１Ｍ−テトラブチルアンモニウムフルオライド（５．３７１ｍｌ、５．３７１ｍｍｏｌ）を０℃の無水ＴＨＦ（１０．７ｍｌ）中の化合物（９）（３．４２ｇ、４．４７６ｍｍｏｌ）の溶液に滴下した。混合物を室温で４時間攪拌した。酢酸アンモニウム水溶液（２００ｍｇ／ｍｌ、１０．３ｍｌ）を反応混合物に添加した。混合物を１０分間攪拌し、ジイソプロピルエーテルで３回抽出した。混合有機層を炭酸水素ナトリウム水溶液と飽和塩化ナトリウム水溶液（５０ｍｌ）で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、そして蒸発させた。残渣のシリカゲルカラムでのクロマトグラフィー（ＢＷ−３００ １７０ｇ、ヘキサン：酢酸エチル＝３：１）により化合物（１０）（２．７３ｇ、４．２００ｍｍｏｌ、９３．８％収率）を得た。
【０１００】
（１０）→（１１）
エタノール（２ｍｌ）中の化合物（１０）（１３０．４ｍｇ、０．２００ｍｍｏｌ）の溶液を０℃に冷却した。１Ｎ−水酸化ナトリウム水溶液（０．８ｍｌ、０．８０ｍｍｏｌ）を該溶液に１５℃より低温で滴下した。混合物を室温で３．６時間攪拌し、次いで蒸発させた。残渣に、水（１ｍｌ）を添加し混合物のｐＨを希塩酸の添加により３−４に調整した。混合物を酢酸エチル（２０ｍｌ）で３回抽出した。混合有機層を水（３０ｍｌ、２回）と飽和塩化ナトリウム水溶液（３０ｍｌ）で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、次いで蒸発させた。残渣のシリカゲルカラムでのクロマトグラフィー（１５％−水含有ＦＬ−６０Ｄ １０ｇ、ヘキサン：酢酸エチル＝３：２）により化合物（１１）（１０６．２ｍｇ、０．１８９４ｍｍｏｌ、９４．７％収率）を得た。
【０１０１】
（１１）→（１２）
デス−マーティン・ぺリオディナン(Dess-Martin periodinane)（１．６８ｇ、３．９７０ｍｍｏｌ）を０℃の無水ジクロロメタン（６３ｍｌ）中の化合物（１１）（１．２１ｇ、１．９８５ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。反応混合物を室温で１時間攪拌した。チオ硫酸ナトリウム水溶液（３９．８ｍｌ）を反応混合物に添加した。次いで反応混合物を酢酸エチル（５０ｍｌ）で３回抽出した。混合有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液と飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、次いで蒸発させた。残渣のシリカゲルカラムでのクロマトグラフィー（１５％−水含有ＦＬ−６０Ｄ ５５ｇ、ヘキサン：酢酸エチル＝３：１）により化合物（１２）（１．０６ｇ、１．８９０ｍｍｏｌ、９５．２％収率）を得た。
【０１０２】
（１２）→（１３）
木炭上の１０％−パラジウム（６９．１ｍｇ）を酢酸エチル（３４．６ｍｌ）中の化合物（１２）（３４５．７ｍｇ、０．６１９ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。混合物を水素雰囲気中で３時間攪拌した。反応混合物をセライト（登録商標）パッドでろ過し、触媒を除去した。上記の一連の操作を５回繰り返し、水素化反応を完了させた。ろ液の濃縮により化合物（１３）（３３０．４ｍｇ、０．５８９ｍｍｏｌ、９５．２％収率）を得た。
【０１０３】
（１３）→（１４）
カルボニルジイミダゾール（１４３．４ｍｇ、０．８８４ｍｍｏｌ）を無水ＴＨＦ（６．７ｍｌ）中の化合物（１３）（３３０．４ｍｇ、０．５８９ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。混合物を室温で３時間攪拌した。反応混合物に、ＴＨＦ中の２Ｍ−エチルアミン溶液（０．５８９ｍｌ、１．１７９ｍｍｏｌ）を添加し室温で１時間攪拌した。反応混合物に、飽和塩化アンモニウム水溶液を添加した。混合物を酢酸エチル（２０ｍｌ）で３回抽出した。混合有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（５０ｍｌ）と飽和塩化ナトリウム水溶液（５０ｍｌ）で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、次いで蒸発させた。残渣のシリカゲルカラムでのクロマトグラフィー（１５％−水含有ＦＬ−６０Ｄ １６．５ｇ、ヘキサン：酢酸エチル＝２：１）により化合物（１４）（３１１．６ｍｇ、０．５３０ｍｍｏｌ、９０．０％収率）を得た。
【０１０４】
（１４）→（１５）
酢酸（４．２ｍｌ）と水（２．１ｍｌ）をＴＨＦ（２．１ｍｌ）中の化合物（１４）（３４４．０ｍｇ、０．５８５ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。混合物を５０℃で３時間攪拌し、次いで０℃に冷却した。２Ｎ−水酸化ナトリウム水溶液を反応混合物に添加した。混合物を酢酸エチル（５０ｍｌ）で３回抽出した。混合有機層を水（３５ｍｌ）と飽和塩化ナトリウム水溶液（３５ｍｌ）で２回洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、次いで蒸発させた。残渣のシリカゲルカラムでのクロマトグラフィー（１５％−水含有ＦＬ−６０Ｄ １４ｇ、ヘキサン：酢酸エチル＝１：１その後酢酸エチルに変更）により化合物（１５）（２２７．９ｍｇ、０．５４３ｍｍｏｌ、９２．８％収率）を得た。さらに分取ＨＰＬＣ（Merck Lichrosorb ＤＩＯＬ−７μｍ、Φ２５＊２５０ｍｍ、２−プロパノール：ｎ−ヘキサン＝１２：８８、溶媒流速＝３５ ｍｌ／分）での精製により化合物（１５）（１５１．０ｍｇ、０．３５９９ｍｍｏｌ、６１．５％収率）を得た。
【０１０５】
化合物（１５）の１Ｈ−ＮＮＲスペクトル（２００ＭＨｚ／ＣＤＣｌ３）
δ５．４３（１Ｈ、ｂｒ）、４．３２−４．１５（１Ｈ、ｍ）、３．９６−３．８４（０．２８Ｈ、ｍ）、３．７９−３．６１（０．７２Ｈ、ｍ）、３．２９（２Ｈ、ｄｑ、Ｊ＝５．６、７．３Ｈｚ）、２．８６−２．８０（０．５５Ｈ、ｍ）、２．７０−２．６４（０．５５Ｈ、ｍ）、２．５４（０．７２Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝１５．８、７．０Ｈｚ）、２．４３（０．７２Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝１５．８、５．２Ｈｚ）、２．１５（２Ｈ、ｔ、Ｊ＝７．１Ｈｚ）、２．２５−１．０９（２３．４５Ｈ、ｍ）、１．１４（３Ｈ、ｔ、Ｊ＝７．２Ｈｚ）、０．９２（３Ｈ、ｔ、Ｊ＝７．１Ｈｚ）
【０１０６】
（合成例４）
１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−２０−エチル−ＰＧＦ２αＮ−エチルアミド（２０）の調製
【化１９】
【０１０７】
（１６）→（１７）
３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン（２ｍｌ、２１．９ｍｍｏｌ）とカンファースルホン酸（２０ｍｇ、０．０９ｍｍｏｌ）を無水ジクロロメタン（３０ｍｌ）中の化合物（１６）（１．００ｇ、２．３６ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。混合物を２時間攪拌した。反応混合物に、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（２０ｍｌ）を添加し、激しく攪拌した。水層を有機層から分離し、ジクロロメタンで２回抽出した。混合有機層を水と飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、次いで蒸発させた。残渣のシリカゲルカラムでのクロマトグラフィー（ＢＷ−３００ ７０ｇ、ヘキサン：酢酸エチル＝３：７）により化合物（１７）（１．４５ｇ、２．４５ｍｍｏｌ、定量的収率）を得た。
【０１０８】
（１７）→（１８）
１Ｎ−水酸化ナトリウム水溶液（１１．８ｍｌ、１１．８ｍｍｏｌ）を０℃のエタノール（２０ｍｌ）中の化合物（１７）（１．４５ｇ、２．３６ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。混合物を室温に昇温し、５．５時間攪拌した。混合物を０℃で１Ｎ−塩酸（１２．４ｍｌ、１２．４ｍｍｏｌ）で酸性にした。混合物を酢酸エチルで３回抽出した。混合有機層を水と飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、次いで蒸発させた。残渣のシリカゲルカラムでのクロマトグラフィー（１５％−水含有ＦＬ−６０Ｄ １４ｇ、ヘキサン：酢酸エチル＝１０：０→９：１→８：２→７：３→６：４→５：５→４：６→３：７）により化合物（１８）（１．１９ｇ、２．１６ｍｍｏｌ、９２．０％収率）を得た。
【０１０９】
（１８）→（１９）
カルボニルジイミダゾール（２６５ｍｇ、１．６４ｍｍｏｌ）を無水ＴＨＦ（１０ｍｌ）中の化合物（１８）（６００．３ｍｇ、１．０９ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。混合物を室温で１．５時間攪拌した。混合物に、２Ｍ−エチルアミンＴＨＦ溶液（３．０ｍｌ、６．０ｍｍｏｌ）を添加し、１時間攪拌した。反応混合物を０℃に冷却し、冷１Ｎ−塩酸の添加により酸性（ｐＨ＝３）にした。混合物を酢酸エチルで３回抽出した。混合有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液と飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、次いで蒸発させた。残渣のシリカゲルカラムでのクロマトグラフィー（ＦＬ−６０Ｄ ２５ｇ、ヘキサン：酢酸エチル＝１：１）により化合物（１９）（４９７．０ｍｇ、０．８６ｍｍｏｌ、７８．９％収率）を得た。同時に、化合物（１８）（１１７．４ｍｇ、１９．６％回収率）を回収した。
【０１１０】
カルボニルジイミダゾール（６９．０ｍｇ、０．４３ｍｍｏｌ）を、無水ＴＨＦ（２ｍｌ）中の回収した化合物（１８）（１１７．４ｍｇ）の溶液に添加した。混合物を室温で２時間攪拌した。混合物に、２Ｍ−エチルアミンＴＨＦ溶液（３．０ｍｌ、６．０ｍｍｏｌ）を添加し、１時間攪拌した。反応混合物を０℃に冷却し、次いで冷１Ｎ−塩酸の添加により酸性（ｐＨ＝３）にした。混合物を酢酸エチルで３回抽出した。混合有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液と飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、次いで蒸発させた。残渣のシリカゲルカラムでのクロマトグラフィー（ＦＬ−６０Ｄ ５ｇ、ヘキサン：酢酸エチル＝１：１）により化合物（１９）（１１３．２ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ、９２．０％収率）を得た。上記の２つのバッチを合同させて、６１０ｍｇの化合物（１９）を得た。
【０１１１】
（１９）→（２０）
酢酸（６ｍｌ）と水（２ｍｌ）をＴＨＦ（２ｍｌ）中の化合物（１９）（６０３．０ｍｇ、１．０７ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。混合物を４５℃で２．５時間攪拌し、次いで室温に冷却した。反応混合物に、８Ｎ−水酸化ナトリウム水溶液（１３ｍｌ）、酢酸エチル（２０ｍｌ）および水（２０ｍｌ）を添加した。混合物を激しく攪拌した。水層を有機層から分離し、次いで酢酸エチルで３回抽出した。混合有機層を水と飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、次いで蒸発させた。２回のシリカゲルカラムでのクロマトグラフィー（第一精製：ＦＬ−６０Ｄ ２５ｇ、ヘキサン：２−プロパノール＝１００：１０／第二精製：ＦＬ−６０Ｄ １８ｇ、ヘキサン：２−プロパノール＝１００：５）により化合物（２０）（３３６．４ｍｇ、０．９１８ｍｍｏｌ、８５．８％収率）を得た。
【０１１２】
化合物（２０）の１Ｈ−ＮＮＲスペクトル（２００ＭＨｚ／ＣＤＣｌ３）
δ５．７４（１Ｈ、ｂｒ）、５．４５−５．３６（２Ｈ、ｍ）、４．１９−４．１１（１Ｈ、ｍ）、３．９６−３．８４（１Ｈ、ｍ）、３．２８（２Ｈ、ｄｑ、Ｊ＝５．７、７．３Ｈｚ）、３．０５（１Ｈ、ｂｒ）、２．７０−１．９５（９Ｈ、ｍ）、２．４２（２Ｈ、ｔ、Ｊ＝７．４Ｈｚ）、１．９５−１．２０（１８Ｈ、ｍ）、１．１４（３Ｈ、ｔ、７．２Ｈｚ）、０．８８（３Ｈ、ｔ、Ｊ＝７．３Ｈｚ）
【０１１３】
（試験例１）
（方法）
全細胞パッチクランプ法を用いて化合物１（１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−１６，１６−ジフルオロ−ＰＧＥ１）と化合物２（１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−１６，１６−ジフルオロ−１８（Ｓ）−メチル−ＰＧＥ１）の組換えｈＣｌＣ−２クロライドチャンネルに対する効果を評価した。この試験例においては、それぞれの化合物の、ヒトＣｌＣ−２（ｈＣｌＣ−２）を形質移入されたヒト上皮腎臓（ＨＥＫ）細胞に対する効果を調べ、その結果を非−形質移入ＨＥＫ細胞と比較した。
【０１１４】
ＣｌＣ−２形質移入ヒト上皮腎臓（ＨＥＫ）細胞を調製し、使用した。American Type Culture Collection (ATCC; Manassas、VA)から得たＨＥＫ−２９３細胞を、リポフェクタミン(GIBCO/Invitrogen)を用いて哺乳類発現ベクターｐｃＤＮＡ３．１(GIBCO/Invitrogen)中のＨｉｓ−およびＴ７−タグ付加したヒトＣｌＣ−２ｃＤＮＡで、３７℃で５時間、無血清培地中で形質移入した。細胞を血清含有培地に再懸濁し、３００μｇ／ｍｌのＧ−４１８（GIBCO/Invitrogen）の存在下で培養した。生存細胞を拡張させ、Ｃｌ−電流とＣｌＣ−２ｍＲＮＡの発現を確認するため試験し、ＣｌＣ−２ｍＲＮＡを発現する細胞を凍結保存した。研究時に、凍結した細胞を解凍し、３７℃で５％／９５％ＣＯ２／Ｏ２にて、５％不活性化ウマ血清、０．１ｍＭ非必須アミノ酸、２ｍＭ Ｌ−グルタミン、１ｍＭピルビン酸ナトリウム、１００ユニット／ｍｌペニシリン、および１００μｇ／ｍｌストレプトマイシン硫酸塩を追加したＭＥＭ（GIBCO/Invitrogen）中に維持した。
【０１１５】
全細胞パッチクランプ測定において、電流は＋４０ｍＶから−１４０ｍＶの間の、最初の保持電位−３０ｍＶから開始して２０ｍＶずつ増加する電圧固定パルス（１５００ｍ秒持続）によって誘発した。電流をパルスの開始から５０−１００ｍ秒後に測定した。外部溶液は１３５ｍＭ ＮａＣｌ、１．８ｍＭ ＣａＣｌ２、１ｍＭ ＭｇＣｌ２、５．４ｍＭ ＫＣｌ、１０ｍＭグルコース、および１０ｍＭ ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．３５）を含有する標準Tyrode溶液とした。ピペット溶液は、１３０ｍＭ ＣｓＣｌ、１ｍＭ ＭｇＣｌ２、５ｍＭ ＥＧＴＡ、および１０ｍＭ ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．３５）とした；ピペット内には１ｍＭ ＡＴＰ−Ｍｇ２＋（ｐＨ７．４）も含めた。
【０１１６】
ピペットはホウケイ酸ガラスから調製し、２段ナラシゲ（Narashige）プラーにより引っ張り、１−１．５ＭΩの抵抗を得た。データはDigidata 1200 デジタイザーおよびAxopatch 1D 増幅器を備えたAxopatch CV-4 headstageにより得た。データをpClamp 6.04 (Axon Instruments、Foster City、CA)、ロータス（Lotus)123 (IBM)および Origin (Microcal)ソフトウェアを用いて分析した。
【０１１７】
化合物１と化合物２は１％ＤＭＳＯ中最終濃度１μＭで用いた。
【０１１８】
（結果）
表１に示すように、１％ＤＭＳＯは対照電流に対して影響を及ぼさなかった。ｈＣｌＣ−２（対照）を形質移入されたＨＥＫ細胞におけるＣｌ電流は、１μＭの化合物１および１μＭの化合物２によって活性化された。化合物１も化合物２も非−形質移入細胞におけるＣｌ電流を増加させなかった。
【０１１９】
これらの研究により、化合物１と化合物２がＣｌＣ−２チャンネルオープナーであることが示された。
【０１２０】
【表１】
【０１２１】
Ｎ．Ｓ．：有意差無し
化合物１：１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−１６，１６−ジフルオロ−ＰＧＥ１（（−）−７−［（２Ｒ，４ａＲ，５Ｒ，７ａＲ）−２−（１，１−ジフルオロペンチル）−２−ヒドロキシ−６−オキソぺルヒドロシクロペンタ［ｂ］ピラン−５−イル］ヘプタン酸）
化合物２：１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−１６，１６−ジフルオロ−１８（Ｓ）−メチル−ＰＧＥ１（（−）−７−｛（４ａＲ，５Ｒ，７ａＲ）−２−［（３Ｓ）−１，１−ジフルオロ−３−エチルペンチル］−２−ヒドロキシ−６−オキソぺルヒドロシクロペンタ［ｂ］ピラン−５−イル｝ヘプタン酸）
【０１２２】
（試験例２）
（方法）
健康な個体由来のヒト気道細胞系であり、ＣｌＣ−２および嚢胞性線維症膜貫通レギュレーター（Cystic Fibrosis Transmembrane Regulator）である、Ｃｌチャンネル（ＣＦＴＲ）を含む１６ＨＢＥ１４ｏ−細胞；および嚢胞性線維症患者由来のヒト気道細胞系であり、機能的形態のＣｌＣ−２および欠陥形態のＣＦＴＲ（△Ｆ５０８ＣＦＴＲ）を含むＣＦＢＥ４１ｏ−細胞を用いた。両方の細胞を１０％ＦＢＳ（Hyclone）、２０ｍＭ Ｌ−グルタミンおよびペニシリン／ストレプトマイシンを追加したＭＥＭで、フィブロネクチン／コラーゲン／ＢＳＡでコーティングしたフラスコ中で培養した。所望の場合、細胞を０．３ｃｍ２コラーゲン−コーティングした透過性のフィルター（Biocoat）に播種した。２４時間後、頂端側の培地を除去し、細胞を空気−水の界面で培養した。空気−水の界面で培養している間、細胞の基底外側に培地が与えられ、培地を一日おきに交換した。細胞を集密するまで増殖させた。
【０１２３】
短絡回路電流測定を用いて空気−水の界面で増殖させた細胞の分極した集密培養物におけるＣｌ輸送を評価した。０．３ｃｍ２の透過性の支持フィルターにおいて増殖させた集密細胞単層における短絡回路電流測定のためにプレキシグラス（plexiglass）チャンバー（World Precision instruments、Sarasota、FL）を用いた。電気計測は７４０２Ｃ電圧固定装置（Bioengineering Department、Iowa University）を用いて行った。温度を熱水をチャンバーのウォーター・ジャケットに循環させることにより３７℃に保持した。増幅器の出力をアナログ・チャート・レコーダーにプロットした。被験化合物の添加後の短絡回路電流における変化（△Ｉｓｃ）をフィルター面積（０．３ｃｍ２）に対して標準化し△Iｓｃ／ｃｍ２として報告した。
【０１２４】
１６ＨＢＥ１４ｏ−およびＣＦＢＥ４１ｏ−細胞における短絡回路電流測定はLofling et al. (Am J Physiol、277(4 Pt 1):L700-8、1999、この参考文献は引用により本出願に含まれる）に記載のように行った。側底膜溶液は、１１６ｍＭ ＮａＣｌ、２４ｍＭ ＨＣＯ３、３ｍＭ ＫＣｌ、２ｍＭ ＭｇＣｌ２、０．５ｍＭ ＣａＣｌ２、３．６ｍＭ ＨＥＰＥＳナトリウム、４．４ｍＭ ＨＥＰＥＳ水素（ｐＨ７．４）および１０ｍＭグルコースを含むものとした；頂端膜浴溶液は側底膜溶液と以下の点を除いては同じとした；Ｃｌ−濃度をＮａＣｌをグルコン酸ナトリウムに置換することにより低下させ、グルコン酸によるＣａ２＋のキレート化を補うためにＣａＣｌ２を０．５ｍＭから２ｍＭに上昇させた。両溶液にＣＯ２／Ｏ２（５％／９５％）を通気し、これによって溶液の混合が促された。すべての場合において、側底膜は２００μｇ／ｍｌナイスタチンによって透過性にした。
【０１２５】
化合物１および化合物２を最終濃度１μＭにて用いた。ＤＭＳＯの最終濃度は１％とした。
【０１２６】
（結果）
表２に示すように、１μＭの化合物１は１６ＨＢＥ１４ｏ−細胞における短絡回路電流を増加させた。化合物１による活性化の程度は、９．５６±０．０９５μＡ／ｃｍ２であった。化合物２も１６ＨＥＢ１４ｏ−細胞において短絡回路電流を１１．６±１．３μＡ／ｃｍ２増加させた。１％ＤＭＳＯによる負の効果は大きく、およそ−１０．５±２．０μＡ／ｃｍ２であった。ＤＭＳＯにより短絡回路電流が大幅に減少したにもかかわらず、化合物１と化合物２の正味の効果はこれら細胞で正であった。
【０１２７】
表２に示すように、１μＭの化合物１はＣＦＢＥ４１ｏ−細胞における短絡回路電流を５．０±０．０４μＡ／ｃｍ２増加させた。１％ＤＭＳＯは短絡回路電流を−５．７±１．８μＡ／ｃｍ２減少させた。ＤＭＳＯによる大きな負の効果にかかわらず、化合物１はＣＦＢＥ細胞におけるＣｌ電流において正味の正の増加をもたらした。
【０１２８】
これらの結果は化合物１と化合物２はともに１６ＨＢＥ１４ｏ−細胞におけるＣｌチャンネルのオープナーであり、化合物１はＣＦＢＥ４１ｏ−細胞におけるｈＣｌＣ−２のオープナーであることを示す。
【０１２９】
【表２】
【０１３０】
（試験例３）
（方法）
ＡＳ−ＨＢＥは、ＣＦＴＲの最初の１３１ヌクレオチドをアンチセンス方向に発現するヒト気管支上皮（ＨＢＥ）細胞系（アンチセンスＣＦＴＲ１６ＨＢＥ１４ｏ−細胞、ＨＢＥ−ＡＳ；ＡＳ−ＨＢＥとも称される）である。その結果、ＡＳ−ＨＢＥ細胞はＣＦＴＲ転写産物を欠き、機能性のＣＦＴＲを欠く。しかしながら、ＡＳ−ＨＢＥ細胞はその起源である親細胞系、１６ＨＢＥ１４ｏ−細胞と同様に機能性のＣｌＣ−２を発現する。ＡＳ−ＨＢＥ細胞を３７℃で５％／９５％ＣＯ２／Ｏ２にてアール塩（Earl's salt)、Ｌ−グルタミン（GIBCO/Invitrogen）、１０％熱不活性化胎仔ウシ血清、１００ユニット／ｍｌペニシリン、１００μｇ／ｍｌストレプトマイシン硫酸塩および４００μｇ／ｍｌ Ｇ−４１８（GIBCO/Invitrogen）を追加した最小必須培地（MEM; GIBCO/Invitrogen、Carlsbad、CA）に維持した。細胞を空気−液体界面でヒト血漿フィブロネクチン（GIBCO/Invitrogen）およびビトロゲン(vitrogen)(Cohesion Technologies、Palo Alto、CA)でコーティングしたバイオコート・インサート（Biocoat inserts）(Fisher Scientific、Chicago、IL)上で増殖させた。
【０１３１】
試験例２に記載したのと同様にして、ＡＳ−ＨＢＥ細胞における短絡回路電流測定を行った。短絡回路電流における変化（△Ｉｓｃ）をフィルター面積（０．３ｃｍ２）に対して標準化し、△Ｉｓｃ／ｃｍ２として報告した。
【０１３２】
被験化合物は最終濃度２５０ｎＭで用いた。
【０１３３】
（結果）
表３はＡＳ−ＨＢＥ細胞における短絡回路電流に対する被験化合物の効果を示す。結果は本発明の化合物が有効なＣｌＣ−２チャンネルオープナーであることを示す。
【０１３４】
【表３】
【０１３５】
化合物１および２：試験例１を参照されたい。
化合物３：１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−１６，１６−ジフルオロ−ＰＧＥ１Ｎ−エチルアミド（Ｎ１−エチル−７−［（２，４ａＲ，５Ｒ，７ａＲ）−２−（１，１−ジフルオロペンチル）−２−ヒドロキシ−６−オキソぺルヒドロシクロペンタ［ｂ］ピラン−５−イル］ヘプタンアミド）
化合物４：１５−ケト−１６，１６−ジフルオロ−ＰＧＥ１
化合物５：２−デカルボキシ−２−（２−カルボキシエチル）−１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−１６、１６−ジフルオロ−２０−エチル−ＰＧＥ１イソプロピルエステル（イソプロピル（−）−９−［（４ａＲ，５Ｒ，７ａＲ）−２−（１，１−ジフルオロヘプチル）−２−ヒドロキシ−６−オキソぺルヒドロシクロペンタ［ｂ］ピラン−５−イル］ノナノエート）
化合物６：ＰＧＦ２α
化合物７：ＰＧＩ２−Ｎａ
【０１３６】
（試験例４）
（方法）
試験例１に記載の方法に従って、全細胞パッチクランプ測定を行った。
【０１３７】
被験化合物によって誘導される電流の増加は被験化合物の添加後の対照からのｐＡ／ｐＦの変化（△ｐＡ／ｐＦ）として報告した。
【０１３８】
被験化合物は最終濃度１００ｎＭにて用いた。
【０１３９】
（結果）
表４は被験化合物のＣｌＣ−２を形質移入されたＨＥＫ細胞におけるＣｌＣ−２活性化に対する効果を示す。結果は本発明の化合物が有効なＣｌＣ−２チャンネルオープナーであることを示す。
【０１４０】
【表４】
【０１４１】
化合物１および２：試験例１を参照されたい。
化合物８：１３，１４−ジヒドロ−１６，１６−ジフルオロ−ＰＧＥ１
化合物９：１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−１６，１６−ジフルオロ−ＰＧＦ１αＮ−エチルアミド（Ｎ１−エチル−７−［（２，４ａＲ，５Ｒ，６Ｓ，７ａＲ）−２−（１，１−ジフルオロペンチル）−２，６−ジヒドロキシぺルヒドロシクロペンタ［ｂ］ピラン−５−イル］ヘプタンアミド）
【０１４２】
（試験例５）
（方法）
密着結合している集密単層由来のヒト腸細胞系である、Ｔ８４細胞を用いた。該細胞系は短絡回路電流（Ｉｓｃ）を用いたＣｌ−輸送の研究に広く用いられている。これら細胞はＣＦＴＲとＣｌＣ−２との両方を含む。
【０１４３】
Ｔ８４ヒト腸上皮細胞をｐＨ７．４で１６２−ｃｍ２のフラスコ（Corning Costar、MA）でダルベッコ改変イーグル培地と６％胎仔ウシ血清（ＦＢＳ）、１５ｍＭ ＨＥＰＥＳ、１４．３ｍＭ ＮａＨＣＯ３、および抗生物質／抗真菌剤を追加したＨａｍ’ｓＦ−１２栄養分混合物の１：１混合物中で集密まで増殖させた。フラスコを毎週継代し、３日ごとに栄養を与えた。実験用の細胞単層をコラーゲン−コーティングした透過性の支持体(Biocoat）上で集密するまで増殖させた。単層に３日ごとに栄養を与え、安定な経上皮耐性が達成された後、およそ播種の７-１４日後に用いた。
【０１４４】
試験例２の記載と同様にして、Ｔ８４細胞における短絡回路電流測定を行った。短絡回路電流における変化（△Ｉｓｃ）をフィルター面積（０．３ｃｍ２）に対して標準化し、△Ｉｓｃ／ｃｍ２として報告した。
【０１４５】
化合物１を最終濃度５０ｎＭにて用いた。
【０１４６】
（結果）
表５はＴ８４細胞における短絡回路電流に対する化合物１の効果を示す。結果は、化合物１がヒト腸細胞系、Ｔ８４においてＣｌ−輸送を活性化したことを示す。
【０１４７】
【表５】
【０１４８】
化合物１：試験例１を参照されたい。
【０１４９】
（試験例６）
（方法）
少なくとも１６時間絶食させたＷｉｓｔａｒ系雄性ラット（６週齢、体重１８０〜２１０ｇ）に、化合物１（１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−１６，１６−ジフルオロ−プロスタグランジンＥ１）の１、１０あるいは１００μｇ／ｋｇを５ｍＬ／ｋｇの容量で経口投与した。対照群には、媒体（０．５％エタノール・０．０１％ポリソルベート８０含有蒸留水）を同容量経口投与した。投与３０分後に動物をエーテル麻酔下で開腹した。十二指腸起始部と回腸末端部をそれぞれ糸で結紮後、腸管を摘出した。各動物の腸内液をそれぞれ集めた後、１０，０００×ｇ、５分間遠心した。上清を分取後、腸液上清中のクロライドイオン濃度をクロライドカウンター（ＣＬ−７、平沼産業）を用い測定した。対照群と化合物１各用量投与群間の比較にＤｕｎｎｅｔｔ検定法を用いた。ｐ値０．０５未満を統計的有意差ありと判定した。
【０１５０】
（結果）
各群の腸液内クロライドイオン濃度を表６に示す。化合物１の１、１０及び１００μｇ／ｋｇの投与により、腸管内クロライドイオン濃度は、用量依存的に増加した。化合物１の１μｇ／ｋｇ投与群から対照群と比較し有意な腸液内クロライドイオン濃度の増加が認められた。
【０１５１】
以上の結果は、腸管において化合物１がクロライドチャンネルをオープンすることにより、クロライドイオンの輸送を積極的に促進することを示している。
【０１５２】
【表６】
【０１５３】
Ｄｕｎｎｅｔｔ検定：対照群と比較し、＊＊ Ｐ＜０．０１
【０１５４】
（試験例７）
（方法）
雄性ウイスターラット（６週齢、体重：１８０〜２１０ｇ）に、化合物２（１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−１６，１６−ジフルオロ−１８（Ｓ）−メチル−プロスタグランジンＥ１）の１００μｇ／ｋｇを１日３回７日間経口投与した。対照群（ｎ＝７）には、同容量の媒体（０．０１％ポリソルベート８０、０．５％エタノール含有蒸留水）を投与した。投与最終日の翌朝（最終投与の約１７時間後）、エーテル麻酔下でラットの総胆管内にポリエチレンカテーテル（PE10、Becton Dickinson and Company）を挿入した。ラットをボールマンケージに収容後１時間放置し麻酔から覚醒させた。カテーテル挿入１〜２時間後の１時間に排出された胆汁を採取後、胆汁中クロライドイオン濃度をクロライドカウンター（ＣＬ−７、平沼産業（株））を用い測定した。対照群と化合物２投与群間の比較にＳｔｕｄｅｎｔのｔ検定法を用いた。ｐ値０．０５未満を統計的有意差ありと判定した。
【０１５５】
（結果）
各投与群の胆汁内クロライドイオン濃度を表７に示す。化合物２投与群の胆汁中クロライドイオン濃度は、対照群と比較し有意に増加した。
【０１５６】
以上の結果は、肝臓において化合物２がクロライドチャンネルをオープンすることにより、クロライドイオンの輸送を積極的に促進することを示している。
【０１５７】
【表７】
【０１５８】
Ｓｔｕｄｅｎｔのｔ検定：対照群と比較し、＊ ｐ＜０．０５
【０１５９】
（試験例８）
（方法）
雄性白色家兎に、生理食塩液、点眼液媒体、化合物１の０．０００１％点眼液あるいは０．００１％点眼液を、３０μＬ／眼の容量で点眼した。点眼前(０時間）および点眼２、４、６、および８時間後に、キャピラリーピペットを用い、下眼瞼の結膜嚢内から涙液５μＬを採取した。採取した涙液を蒸留水で５倍に希釈した後、クロライドカウンター（ＣＬ−７、平沼産業（株））を用い、クロライドイオン濃度を測定した。対照群と化合物１各用量投与群間の比較にＳｔｕｄｅｎｔのｔ検定法およびＷｉｌｃｏｘｏｎ検定法を用いた。ｐ値０．０５未満を統計的有意差ありと判定した。
【０１６０】
（結果）
各投与群の涙液中のクロライドイオン濃度を表８に示す。涙液中のクロライドイオン濃度は、対照群と比べ、化合物１の投与により濃度依存的に増加した。対照群と比較し、０．０００１％化合物１点眼液群では点眼後４および８時間後に、０．００１％化合物１点眼液群では点眼後２、４および８時間後に、それぞれ有意な涙液中クロライドイオン濃度の増加が認められた。
【０１６１】
以上の結果は、点眼により眼において化合物１がクロライドチャンネルをオープンすることにより、クロライドイオンの輸送を積極的に促進することを示している。
【０１６２】
【表８】
【０１６３】
Ｓｔｕｄｅｎｔのｔ検定：対照群と比較し、＃ｐ＜０．０５、＃＃ｐ＜０．０１
Ｗｉｌｃｏｘｏｎ検定：対照群と比較し、［＃］ｐ＜０．０５、［＃＃］ｐ＜０．０１
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式(IV)で表される新規化合物：
【化１】
[式中、Ｌ、ＭおよびＮは、水素、ヒドロキシ、ハロゲン、低級アルキル、ヒドロキシ（低級）アルキルまたはオキソ（ここでＬおよびＭの少なくとも１つは水素以外の基であり、五員環は１または複数の二重結合を有していてもよい）；
Ｒ’およびＲ''は、水素、低級アルキル、アリール、アルキル−またはアリール−スルホニル、低級アルケニルまたは低級アルキニル；
Ｂは、−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨ−または−Ｃ≡Ｃ−；
Ｒ１は、非置換またはハロゲン、アルキル、ヒドロキシ、オキソ、アリールまたは複素環基で置換された飽和または不飽和二価低〜中級脂肪族炭化水素残基であり、脂肪族炭化水素における少なくとも１の炭素原子は任意に酸素、窒素または硫黄によって置換されていてもよい；そして、
Ｒａは、非置換またはハロゲン、オキソ、ヒドロキシ、低級アルコキシ、低級アルカノイルオキシ、シクロ（低級）アルキル、シクロ（低級）アルキルオキシ、アリール、アリールオキシ、複素環基または複素環オキシ基で置換された飽和または不飽和の低〜中級脂肪族炭化水素残基；シクロ（低級）アルキル；シクロ（低級）アルキルオキシ；アリール；アリールオキシ；複素環基；複素環オキシ基]。
【請求項２】
化合物が１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−１６，１６−ジフルオロ−ＰＧＥ１Ｎ−エチルアミドである、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
化合物が１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−１６，１６−ジフルオロ−ＰＧＦ１αＮ−エチルアミドである、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
化合物が１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−１７−フェニル−１８，１９，２０−トリノールＰＧＦ２αＮ−エチルアミドである、請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
化合物が１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−２０−エチル−ＰＧＦ２αＮ−エチルアミドである、請求項１に記載の化合物。
【請求項１】
式(IV)で表される新規化合物：
【化１】
[式中、Ｌ、ＭおよびＮは、水素、ヒドロキシ、ハロゲン、低級アルキル、ヒドロキシ（低級）アルキルまたはオキソ（ここでＬおよびＭの少なくとも１つは水素以外の基であり、五員環は１または複数の二重結合を有していてもよい）；
Ｒ’およびＲ''は、水素、低級アルキル、アリール、アルキル−またはアリール−スルホニル、低級アルケニルまたは低級アルキニル；
Ｂは、−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨ−または−Ｃ≡Ｃ−；
Ｒ１は、非置換またはハロゲン、アルキル、ヒドロキシ、オキソ、アリールまたは複素環基で置換された飽和または不飽和二価低〜中級脂肪族炭化水素残基であり、脂肪族炭化水素における少なくとも１の炭素原子は任意に酸素、窒素または硫黄によって置換されていてもよい；そして、
Ｒａは、非置換またはハロゲン、オキソ、ヒドロキシ、低級アルコキシ、低級アルカノイルオキシ、シクロ（低級）アルキル、シクロ（低級）アルキルオキシ、アリール、アリールオキシ、複素環基または複素環オキシ基で置換された飽和または不飽和の低〜中級脂肪族炭化水素残基；シクロ（低級）アルキル；シクロ（低級）アルキルオキシ；アリール；アリールオキシ；複素環基；複素環オキシ基]。
【請求項２】
化合物が１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−１６，１６−ジフルオロ−ＰＧＥ１Ｎ−エチルアミドである、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
化合物が１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−１６，１６−ジフルオロ−ＰＧＦ１αＮ−エチルアミドである、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
化合物が１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−１７−フェニル−１８，１９，２０−トリノールＰＧＦ２αＮ−エチルアミドである、請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
化合物が１３，１４−ジヒドロ−１５−ケト−２０−エチル−ＰＧＦ２αＮ−エチルアミドである、請求項１に記載の化合物。
【公開番号】特開２０１１−１０２３１３（Ｐ２０１１−１０２３１３Ａ）
【公開日】平成２３年５月２６日（２０１１．５．２６）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１１−１７６３（Ｐ２０１１−１７６３）
【出願日】平成２３年１月７日（２０１１．１．７）
【分割の表示】特願２００３−５３３９４４（Ｐ２００３−５３３９４４）の分割
【原出願日】平成１４年８月２９日（２００２．８．２９）
【出願人】（５０１１３１２７６）スキャンポ・アーゲー (37)
【氏名又は名称原語表記】Ｓｕｃａｍｐｏ ＡＧ
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２３年５月２６日（２０１１．５．２６）
【国際特許分類】
【出願日】平成２３年１月７日（２０１１．１．７）
【分割の表示】特願２００３−５３３９４４（Ｐ２００３−５３３９４４）の分割
【原出願日】平成１４年８月２９日（２００２．８．２９）
【出願人】（５０１１３１２７６）スキャンポ・アーゲー (37)
【氏名又は名称原語表記】Ｓｕｃａｍｐｏ ＡＧ
【Ｆターム（参考）】
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