ピロリジン縮合インドロベンザジアゼピンＨＣＶＮＳ５Ｂ阻害剤
本発明は、式I
の化合物およびその塩、ならびに該化合物を用いた組成物及び方法を提供する。該化合物はC型肝炎ウイルス(HCV)に対する活性を有し、HCVに感染した者の治療に有用でありうる。
の化合物およびその塩、ならびに該化合物を用いた組成物及び方法を提供する。該化合物はC型肝炎ウイルス(HCV)に対する活性を有し、HCVに感染した者の治療に有用でありうる。
【発明の詳細な説明】
【関連出願】
【０００１】
（関連出願の相互参照）
本出願は、2008年3月27日に出願された米国仮特許出願第61/039973号の利益を主張する。
【技術分野】
【０００２】
（発明の背景）
本発明は概して、C型肝炎ウイルス(HCV)に対する活性を有し、HCVに感染した者の治療に有用である、式Iの新規化合物およびその塩に関する。本発明はまた、これら化合物を用いた組成物および方法にも関する。
【背景技術】
【０００３】
C型肝炎ウイルス(HCV)は主要なヒト病原体であり、世界中で推定1億7千万人が感染しており-これはヒト免疫不全ウイルス１型による感染数のおよそ５倍である。これらHCV感染者のかなりの割合が、肝硬変および肝細胞癌を含む重篤な進行性肝疾患を発症する(非特許文献１)。
【０００４】
HCVはプラス鎖RNAウイルスである。5'非翻訳領域における推定アミノ酸配列および広範な類似性の比較に基づいて、HCVはフラビウイルス科の独立した属として分類されている。フラビウイルス科の全てのメンバーは、単一の連続したオープンリーディングフレームの翻訳を介して全ての公知のウイルス-特異的タンパク質をコードするプラス鎖RNAゲノムを含有するエンベロープに包まれたビリオンを有する。
【０００５】
HCVゲノム全体にわたって、ヌクレオチドおよびコードされたアミノ酸配列内に、かなりの多様性が見いだされる。少なくとも６つの主要な遺伝子型がキャラクタライズされており、50を超えるサブタイプが記載されている。HCVの主要な遺伝子型は世界的な分布において異なっており、病原性および治療法における遺伝子型の影響の可能性についての多くの研究にもかかわらず、HCVの遺伝的多様性の臨床的意義は依然として捉えにくい。
【０００６】
一本鎖HCV RNAゲノムは約9500ヌクレオチド長であり、約3000のアミノ酸である単一の大きなポリタンパク質をコードする単一のオープンリーディングフレーム(ORF)を有する。感染細胞において、このポリタンパク質は、細胞プロテアーゼおよびウイルスプロテアーゼにより複数の部位で切断され、構造タンパク質および非構造(NS)タンパク質を生じる。HCVの場合、成熟非構造タンパク質(NS2、NS3、NS4A、NS4B、NS5A、およびNS5B)の生成は、２つのウイルスプロテアーゼによりもたらされる。１つめのものはメタロプロテアーゼであり、NS2-NS3接合部を切断すると考えられており; ２つめは、NS3のN-末端領域内に含まれるセリンプロテアーゼ(NS3プロテアーゼとも言う)であり、NS3の下流、すなわちNS3-NS4A切断部位においてシスで、残りのNS4A-NS4B、NS4B-NS5A、NS5A-NS5B部位についてトランスでの両方における以降の切断の全てを仲介する。該NS4Aタンパク質は複数の機能を果たすと思われ、NS3プロテアーゼの補助因子として作用し、NS3および他のウイルスのレプリカーゼ成分の膜局在をおそらく補助している。NS3タンパク質とNS4Aとの複合体形成は、イベントの進行、全ての部位におけるタンパク質分解効率の増強に必要であると思われる。該NS3タンパク質はまた、ヌクレオシドトリホスファターゼおよびRNAヘリカーゼ活性を示す。NS5B(HCVポリメラーゼとも言う)は、HCVの複製に関与するRNA-依存性RNAポリメラーゼである。HCV NS5Bタンパク質は非特許文献１および２に記載されている。
【０００７】
現在、最も有効なHCVの治療法は、α-インターフェロンとリバビリンの組み合わせを用いており、40％の患者において持続的効果をもたらしている(非特許文献４)。最近の臨床結果は、ペグα-インターフェロンが単独療法としては未修飾のα-インターフェロンよりも優れていることを示す (非特許文献５)。しかしながら、ペグα-インターフェロンとリバビリンの組み合わせを含む実験的な治療レジメンでも、かなりの割合の患者において、ウイルス量の持続的な減少が認められない。従って、HCV感染症の治療に対する有効な治療薬の開発が明確にかつ切実に必要とされている。
【０００８】
本発明は技術的利点をもたらし、例えば、該化合物は新規であり、C型肝炎に対して有効である。また、該化合物は、例えば、それらの作用メカニズム、結合、阻害効果、標的選択性、溶解性、安全性プロファイルまたは生物学的利用能のうちの１つ以上に関して、医薬用途における利点をもたらす。
【０００９】
HCV NS5B阻害剤は特許文献１に記載されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１０】
【特許文献１】米国特許第7,399,758号
【非特許文献】
【００１１】
【非特許文献１】Lauer, G. M.; Walker, B. D. N. Engl. J. Med. 2001, 345, 41-52
【非特許文献２】“Structural Analysis of the Hepatitis C Virus RNA Polymerase in Complex with Ribonucleotides” (Bressanelli; S. et al., Journal of Virology 2002, 3482-3492）
【非特許文献３】Defrancesco and Rice, Clinics in Liver Disease 2003, 7, 211-242.
【非特許文献４】Poynard, T. et al. Lancet 1998, 352, 1426-1432
【非特許文献５】Zeuzem, S. et al. N. Engl. J. Med. 2000, 343, 1666-1672
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１２】
（発明の詳細）
本発明は、医薬的に許容される式Iの化合物およびその塩、ならびにこれらの化合物を用いた組成物および治療方法を包含する。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
本発明の一態様は、式I
【化１】
［式中、
R1はCO2R7またはCONR8R9であり;
R2は水素またはアルキルであり;
R3は水素またはアルキルであるか;あるいは、
NR2R3は一緒になってアゼチジニル、ピロリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、N-(アルキル)ピペラジニル、モルホリニル、チオモルホリニル、ホモピペリジニル、もしくはホモモルホリニルであって、0〜3個のアルキル置換基で置換されているか;または、
NR2R3は一緒になって、
【化２】
であり;
R4は水素、アルキル、アルキルCO、(R13)アルキル、((R13)アルキル)CO、(R13)CO、(R13)COCO、(Ar1)アルキル、(Ar1)CO、または(Ar1)COCOであり;
R5は水素、ハロ、アルキル、アルケニル、ヒドロキシ、ベンジルオキシ、またはアルコキシであり;
R6はシクロアルキルであり;
R7は水素またはアルキルであり;
R8は水素、アルキル、アルキルSO2、シクロアルキルSO2、ハロアルキルSO2、(R10)(R11)NSO2、または(R12)SO2であり;
R9は水素またはアルキルであり;
R10は水素またはアルキルであり;
R11は水素またはアルキルであり;
R12はアゼチジニル、ピロリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、N-(アルキル)ピペラジニル、モルホリニル、チオモルホリニル、ホモピペリジニル、またはホモモルホリニルであり;
R13はアミノ、アルキルアミノ、またはジアルキルアミノであるか、
あるいは、R13はアゼチジニル、ピロリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、N-(アルキル)ピペラジニル、モルホリニル、チオモルホリニル、ホモピペリジニル、またはホモモルホリニルであって、0〜3個のアルキル置換基で置換されており;
R14は水素、アルキル、シクロアルキル、(シクロアルキル)アルキル、アルキルカルボニル、シクロアルキルカルボニル、ハロアルキルカルボニル、アルコキシカルボニル、アルキルSO2、シクロアルキルSO2、ハロアルキルSO2、アミノカルボニル、(アルキルアミノ)カルボニル、(ジアルキルアミノ)カルボニル、ベンジル、ベンジルオキシカルボニル、またはピリジニルであり;および、
Ar1はフェニル、ピロリル、ピラゾリル、イミダゾリル、またはトリアゾリルであって、0〜2個のアルキル置換基で置換されている］
の化合物もしくは医薬的に許容されるその塩である。
【００１４】
本発明の別の態様は、R1がCONR8R9であり;R2がアルキルであり;R3がアルキルであるか;あるいはNR2R3が一緒になって2個のアルキル置換基で置換されたモルホリニルであり;R4が水素、アルキル、アルキルCO、(R13)アルキル、((R13)アルキル)CO、(R13)CO、(R13)COCO、(Ar1)アルキル、または(Ar1)COであり;R5がアルコキシであり;R6がシクロアルキルであり;R8が(R10)(R11)NSO2であり;R9が水素であり;R10がアルキルであり;R11がアルキルであり;R13がジアルキルアミノであるか、またはR13がピロリジニルであって0〜3個のアルキル置換基で置換されており;および、Ar1がフェニルまたはイミダゾリルであって0〜2個のアルキル置換基で置換されている、式Iの化合物もしくは医薬的に許容されるその塩である。
【００１５】
本発明の別の態様は、R1がCONHSO2NMe2であり;R2がメチルであり;R3がメチルであるか;あるいはNR2R3が一緒になって2個のメチル置換基で置換されたモルホリニルであり;R4が水素、メチル、イソプロピル、ベンジル、アセチル、CONMe2、N,N-ジメチルアミノプロピル、COCH2NMe2、COCONMe2、(メチルイミダゾリル)メチル、(メチルイミダゾリル)CO、または(メチルピロリジニル)COであり;R5がメトキシであり;R6がシクロヘキシルである、式Iの化合物もしくは医薬的に許容されるその塩である。
【００１６】
本発明の別の態様は、R1がCONR8R9であり;R8がアルキルSO2、シクロアルキルSO2、ハロアルキルSO2、(R10)(R11)NSO2、または(R12)SO2であり;およびR9が水素である、式Iの化合物である。
【００１７】
本発明の別の態様は、R5が水素である式Iの化合物である。
【００１８】
本発明の別の態様は、R5がメトキシである式Iの化合物である。
【００１９】
本発明の別の態様は、R6がシクロヘキシルである式Iの化合物である。
【００２０】
本発明の別の態様は、R8が(R10)(R11)NSO2または(R12)SO2である式Iの化合物である。
【００２１】
本発明の別の態様は、以下の立体化学
【化３】
を有する式Iの化合物である。
【００２２】
本発明の別の態様は、以下の立体化学
【化４】
を有する式Iの化合物である。
【００２３】
式Iの化合物に関して、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13、R14、およびAr1を含む可変置換基のいずれの場合の範囲も、可変置換基のいずれの他の場合の範囲と独立して用いることができる。そのようなものとして、本発明は異なる態様の組み合わせを含む。
【発明を実施するための形態】
【００２４】
他に特別の定めのない限り、これらの用語は以下の意味を有する。「アルキル」は、1〜6個の炭素から成る直鎖もしくは分枝鎖アルキル基を意味する。「アルケニル」は、少なくとも１個の二重結合を有する、2〜6個の炭素から成る直鎖または分枝鎖アルキル基を意味する。「アルキニル」は、少なくとも１個の三重結合を有する、2〜6個の炭素から成る直鎖または分枝鎖アルキル基を意味する。「シクロアルキル」は、3〜7個の炭素から成る単環系を意味する。「ハロアルキル」および「ハロアルコキシ」は、モノハロからペルハロまでの全てのハロゲン化異性体を含む。炭化水素部分(例えば、アルコキシ)を有する用語は、炭化水素部分についての直鎖および分枝鎖異性体を含む。括弧（Parenthetic）および複数の括弧（multiparenthetic）でくくられた用語は、当業者に対して結合関係を明確にすることを目的としている。例えば、((R)アルキル)のような用語は、置換基Rでさらに置換されたアルキル置換基を意味する。
【００２５】
本発明には、該化合物の医薬的に許容される塩形態の全てが含まれる。医薬的に許容される塩は、その対イオンが化合物の生理学的活性または毒性、および薬理学的な同等物としての機能にほとんど寄与しないものである。これらの塩は、市販の試薬を用いた一般的な有機化学技術に従って製造することができる。いくつかのアニオン塩形態としては、酢酸塩、アシストレート、ベシル酸塩、臭化物塩、塩化物塩、クエン酸塩、フマル酸塩、グルコウロン酸塩（glucouronate）、臭化水素塩、塩化水素塩、ヨウ化水素塩、ヨウ化物塩、乳酸塩、マレイン酸塩、メシル酸塩、硝酸塩、パモ酸塩、リン酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、トシレート、およびキシノホエート（xinofoate）が挙げられる。いくつかのカチオン塩形態としては、アンモニウム塩、アルミニウム塩、ベンザチン塩、ビスマス塩、カルシウム塩、コリン塩、ジエチルアミン塩、ジエタノールアミン塩、リチウム塩、マグネシウム塩、メグルミン塩、4-フェニルシクロヘキシルアミン塩、ピペラジン塩、カリウム塩、ナトリウム塩、トロメタミン塩、および亜鉛塩が挙げられる。
【００２６】
いくつかの本発明の化合物は、不斉炭素原子を有している(例えば、以下の化合物を参照)。本発明には、エナンチオマーおよびジアステレオマー並びに立体異性体の混合（例えばラセミ体）を含む、全ての立体異性体が含まれる。いくつかの立体異性体は、当分野で公知の方法を用いて製造することができる。 該化合物の立体異性体の混合物および関連する中間体は、当分野で公知の方法に従って、個々の異性体に分離することができる。
【化５】
【００２７】
（合成方法）
該化合物は、以下に記載のものおよび当分野の技術内における改変を含む、当分野で公知の方法によって製造されうる。いくつかの試薬および中間体が当分野においては公知である。他の試薬および中間体を、容易に入手可能な物質を用いて当分野で公知の方法により製造することができる。該化合物の合成を説明するために用いる変数(例えば、番号が付けられた「R」置換基)は、製造方法を例示することのみを意図し、特許請求の範囲または本明細書の他の項で用いられる変数と混同されない。以下の方法は例示目的であり、本発明の範囲を制限するものではない。
【００２８】
スキーム内で用いる略語は、通常、当分野で用いられる慣習に従う。本明細書および実施例で用いる化学的な略語は以下のとおり定義される:「NaHMDS」はナトリウムビス(トリメチルシリル)アミドであり;「DMF」はN,N-ジメチルホルムアミドであり;「MeOH」はメタノールであり;「NBS」はN-ブロモスクシンイミドであり;「Ar」はアリールであり;「TFA」はトリフルオロ酢酸であり;「LAH」は水素化リチウムアルミニウムであり;「BOC」、「DMSO」はジメチルスルホキシドであり;「h」は時間であり;「rt」は室温または保持時間であり(文脈によって決定される);「min」は分であり;「EtOAc」は酢酸エチルであり;「THF」はテトラヒドロフランであり;「EDTA」はエチレンジアミン四酢酸であり;「Et2O」はジエチルエーテルであり;「DMAP」は4-ジメチルアミノピリジンであり;「DCE」は1,2-ジクロロエタンであり;「ACN」はアセトニトリルであり;「DME」は1,2-ジメトキシエタンであり;「HOBt」は1-ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物であり;「DIEA」はジイソプロピルエチルアミン、「Nf」はCF3(CF2)3SO2-であり;「TMOF」はオルトぎ酸トリメチルである。
【００２９】
2-ブロモ-3-シクロヘキシル-1H-インドール-6-カルボン酸アルキルを対応するカルボン酸に加水分解し、標準的なカップリング試薬（例えばカルボニルジイミダゾール(CDI)もしくは1-(3-ジメチルアミノプロピル)-3-エチルカルボジイミド塩酸塩(EDC)）を用いてスルホンアミドまたはスルファミドにカップリングさせることができる(スキーム1参照)。得られたアシルスルホンアミド/アシルスルファミド（acylsufamide）ブロモインドールを、置換もしくは無置換の2-ボロン酸もしくは2-ボロン酸エステルベンズアルデヒドを用いて公知のパラジウム触媒カップリング反応で処理することができる。得られた環状ヘミアミナールは、時々、関連するアリールアルデヒドと平衡状態で存在することが観察され、塩基性反応条件下において、高温での2-(ジアルコキシホスホリル)アクリル酸アルキルを用いた公知の環化により、置換7H-インドロ[2,1-a][2]ベンゾアゼピンを得ることができる。
スキーム1
【化６】
【００３０】
次いで、7H-インドロ[2,1-a][2]ベンゾアゼピンのα,δ-不飽和エステルを、保護されたN-(アルコキシオキシメチル)-N-(トリメチルシリルメチル)アミンと反応させて、保護されたピロリジンを形式的[3+2]-環付加生成物として得ることができる(スキーム2参照)。該ネオペンチルカルボン酸エステルを加水分解して、得られたカルボン酸を、標準的なアミド形成試薬、例えば、HATU、CDI、DCCおよびTBTUを用いて、様々な第一級もしくは第二級アミンにカップリングさせることができる。該ピロリジン保護基がベンジルである場合、水素付加によって、本発明に記載の分子の製造において有用な中間体を得ることができる。
スキーム2
【化７】
【００３１】
縮合ピロリジンの第二級アミンを、いくつかの公知の技法を用いて官能化することができる(スキーム3参照)。ケトンもしくはアルデヒドを酸性条件下において第二級アミンと反応させて、イミニウム中間体を製造することができ、それをそのまま水素化物還元剤（例えばNaBH4もしくはNaCNBH3）により還元して、アルキル化アミンを得ることができる。縮合ピロリジンの第二級アミンとの反応において、カップリング試薬（例えばHATU、CDI、DCCおよびTBTU）およびカルボン酸を用いて、アミドを得ることができる。塩基性反応条件下においてカルバミルクロリドを用いて、第二級アミンからウレアを得ることができる。
スキーム3
【化８】
【００３２】
反応順序の順番は変更することができる。例えば、ピロリジンを脱保護および官能化した後で、ネオペンチルエステルを加水分解（hydrolysized）および官能化することができる。
【００３３】
（生物学的方法）
該化合物は、以下のHCV RdRpアッセイにおいて決定されるように、HCV NS5Bに対する活性を示した。
【００３４】
HCV NS5B RdRpクローニング、発現、および精製
HCVのNS5Bタンパク質、遺伝子型1bをコードするcDNAをpET21a発現ベクターにクローニングした。該タンパク質を18個のアミノ酸のC-末端トランケーションで発現させ、溶解性を高めた。大腸菌コンピテント細胞株BL21(DE3)を、該タンパク質の発現に用いた。培養物が600 nmで吸光度2.0になるまで、37℃で〜4時間培養した。該培養物を20℃に冷却し、1 mM IPTGで誘導した。新たに調製したアンピシリンを最終濃度50 μg/mlに添加し、該細胞を終夜20℃で増殖させた。
【００３５】
細胞ペレット(3L)を溶解して精製し、15〜24 mgの精製NS5Bを得た。該溶解バッファーは、20 mM Tris-HCl、pH 7.4、500 mM NaCl、0.5％ トリトンX-100、1 mM DTT、1mM EDTA、20％ グリセロール、0.5 mg/ml リゾチーム、10 mM MgCl2、15 μg/ml デオキシリボヌクレアーゼI、およびComplete TM protease inhibitor tablets (Roche)から成る。該溶解バッファーの添加後、凍結させた細胞ペレットを、組織ホモジナイザーを用いて再懸濁した。サンプルの粘稠性を減少させるために、溶解物のアリコートを、ブランソン超音波処理器に接続したマイクロチップを用いて氷上で超音波処理した。超音波処理した溶解物を4℃で1時間、100,000 x gで遠心し、0.2 μm フィルターユニット(Corning)を通して濾過した。
【００３６】
該タンパク質を、３つの連続したクロマトグラフィー工程: Heparin sepharose CL-6B、polyU sepharose 4B、およびHitrap SP sepharose(Pharmacia)を用いて精製した。該クロマトグラフィーバッファーは溶解バッファーと同じであるが、リゾチーム、デオキシリボヌクレアーゼI、MgCl2またはプロテアーゼインヒビターを含まず、バッファーのNaCl濃度はカラムへのタンパク質の充填要件に従って調節した。カラムの種類に応じて5〜50のカラム容積の様々な長さの各カラムを、NaCl勾配で溶出した。最終クロマトグラフィー工程の後、得られた酵素の純度はSDS-PAGE分析に基づき＞90％である。該酵素をアリコートにして-80℃で保存した。
【００３７】
標準的HCV NS5B RdRp酵素アッセイ
HCV RdRp 遺伝子型1bアッセイを、96ウェルプレート(Costar 3912)において、最終量60 mlで行った。該アッセイバッファーは、20 mM Hepes、pH 7.5、2.5 mM KCl、2.5 mM MgCl2、1 mM DTT、1.6 U RNAseインヒビター(Promega N2515)、0.1 mg/ml BSA(Promega R3961)、および2％グリセロールから成る。全ての化合物をDMSO中に連続的に希釈(3倍)し、アッセイにおけるDMSOの最終濃度が2％であるように、水にさらに希釈した。HCV RdRp 遺伝子型1b酵素は最終濃度28 nMで用いた。ポリA鋳型は6 nMで用い、ビオチン標識オリゴ-dT12プライマーは180 nM最終濃度で用いた。鋳型は商業的に入手した(Amersham 27-4110)。ビオチン標識プライマーはSigma Genosysにより調製された。3H-UTPは0.6 mCi(0.29 mM 総UTP)で用いた。反応は、酵素の添加により開始し、30℃で60分間インキュベートし、SPAビーズ(4 mg/ml, Amersham RPNQ 0007)を含有する50 mM EDTAを25 ml添加することにより停止させた。室温で＞1時間インキュベートした後、プレートをPackard Top Count NXTで測定した。
【００３８】
修飾HCV NS5B RdRp酵素アッセイ
修飾酵素アッセイを、以下の点を除いて、原則的に標準的な酵素アッセイの記載の通り実施した。ビオチン標識オリゴdT12プライマーを、アッセイバッファー中でプライマーとビーズを混合し、室温で1時間インキュベートすることにより、ストレプトアビジンでコーティングしたSPAビーズ上に予め結合させた。未結合のプライマーを遠心して除去した。該プライマー-結合ビーズを20 mM Hepesバッファー、pH 7.5に再懸濁し、最終濃度20 nMのプライマーおよび0.67 μg/mlのビーズでアッセイに用いた。アッセイにおける添加順序: 酵素(14 nM)を希釈した化合物に添加し、続いて、鋳型の混合物(0.2 nM)、3H-UTP(0.6 μCi, 0.29 μM)、およびプライマー結合ビーズを添加して反応を開始し;濃縮して最終物を得た。反応は、30℃で4時間行った。
【００３９】
化合物のIC50値を、７つの異なる[I]を用いて決定した。IC50値を、式 y = A+((B-A)/(1+((C/x)^D)))を用いて、阻害から算出した。
【００４０】
FRETアッセイの準備
HCV FRETスクリーニングアッセイを、96-ウェル細胞培養プレートを用いて実施した。該FRETペプチド(Anaspec, Inc.) (Taliani et al., Anal. Biochem. 1996, 240, 60-67)は、ペプチドの一方の端付近に蛍光ドナー、EDANSを有し、もう一方の端付近にアクセプター、DABCYLを有する。. ペプチドの蛍光発光はドナーおよびアクセプター間の分子間共鳴エネルギー移動(RET)によりクエンチされるが、NS3プロテアーゼがペプチドを開裂すると、該生成物がRETクエンチから解除され、ドナーの蛍光発光が明らかになる。該アッセイ試薬は以下のとおり調製した:5X細胞ルシフェラーゼ細胞培養溶解試薬（cell Luciferase cell culture lysis reagent）（Promega製）(#E153A)をdH2Oで1Xに希釈し、NaClを150 mM 最終に添加し、該FRETペプチドを2 mM 原液から20 μM 最終に希釈した。
【００４１】
プレートの調製のため、ウミシイタケルシフェラーゼレポーター遺伝子（Renilla luciferase reporter gene）の有無にかかわらず、HCVレプリコン細胞をトリプシン処理し、96-ウェルプレートの各ウェルに入れ、列3から12に滴定した試験化合物を添加し;列1および2はコントロール化合物(HCVプロテアーゼインヒビター)を含み、一番下の列は化合物を有しない細胞である。次いで、該プレートを、37℃のCO2インキュベーターに設置した。
【００４２】
アッセイ
上記(FRETアッセイの準備)の試験化合物の添加後、様々な時点で、該プレートを取り出し、細胞毒性の測定としてアラマーブルー溶液（Alamar blue solution）(Trek Diagnostics, #00-100)をウェルごとに添加した。Cytoflour 4000装置(PE Biosystems)における測定後、プレートをPBSですすぎ、次いで、30 μlの上記(FRETアッセイの準備)のFRETペプチドアッセイ試薬をウェルごとに添加することにより、FRETアッセイに用いた。その後、該プレートを、340励起/490発光、20サイクルの自動モードにセットされたCytoflour 4000装置に設置し、キネティックモード（kinetic mode）で測定した。通常、測定後のエンドポイント分析によるシグナル対ノイズは、少なくとも3倍であった。別法として、アラマーブルー測定後に、プレートをPBSですすぎ、フェノールレッドを含まない50 μlのDMEM(高グルコース)を添加した後、プレートをPromega Dual-Glo Luciferase Assay Systemを用いたルシフェラーゼアッセイに用いた。
【００４３】
化合物分析は、相対的HCVレプリコン阻害および相対的細胞毒性値の定量化により決定した。細胞毒性値（cytoxicity value）の算出のため、コントロールウェルからの平均アラマーブルー蛍光シグナルを100％無毒とした。次いで、化合物試験ウェルのそれぞれにおける個々のシグナルを平均コントロールシグナルで割り、100％をかけて細胞毒性率を決定した。HCVレプリコン阻害値の算出のため、平均バックグラウンド値を、アッセイの最終時点で最高量のHCVプロテアーゼインヒビターを含有する２つのウェルから得た。これらの数値は、未処理Huh-7細胞から得られたものと類似していた。
【００４４】
次いで、コントロールウェルから得た平均シグナルから該バックグラウンド値を引き、この値を100％活性として用いた。その後、各化合物試験ウェルにおける個々のシグナルを、バックグラウンド値を引いた後の平均コントロール値で割り、100％をかけて活性率を決定した。プロテアーゼインヒビター滴定のEC50値は、FRETまたはルシフェラーゼ活性の50％低下を引き起こす濃度として算出した。化合物プレートにおいて得られた２つの値、細胞毒性（cytoxicity）率および活性率を用いてさらなる分析に関心が持たれる化合物を決定した。
【００４５】
化合物の代表的なデータを表１に報告する。
表1
【表１】
【表２】
【表３】
A＞0.5 μM; B 0.02 μM - 0.5 μM; C＜0.02 μM（しかし、正確な値は決定しなかった）;IC50値は、プレインキュベーション方法を用いて決定した。EC50値は、FRETアッセイを用いて決定した。
【００４６】
（医薬組成物および治療方法）
該化合物は、HCV NS5Bに対する活性を示し、HCVおよびHCV感染症の治療に有用であり得る。従って、本発明の別の態様は、式Iの化合物もしくは医薬的に許容されるその塩、および医薬的に許容される担体を含む組成物である。
【００４７】
本発明の別の態様は、C型肝炎の治療のための医薬の製造における式Iの化合物の使用である。
【００４８】
本発明の別の態様は、抗HCV活性を有する化合物をさらに含有する組成物である。
【００４９】
本発明の別の態様は、抗HCV活性を有する化合物がインターフェロンである組成物である。本発明の別の態様は、該インターフェロンがインターフェロンα2B、ペグインターフェロンα、コンセンサスインターフェロン、インターフェロンα2A、もしくはリンパ芽球様インターフェロンタウから選択される。
【００５０】
本発明の別の態様は、抗HCV活性を有する化合物がシクロスポリンである組成物である。本発明の別の態様は、該シクロスポリンがシクロスポリンAである。
【００５１】
本発明の別の態様は、抗HCV活性を有する化合物が、インターロイキン2、インターロイキン6、インターロイキン12、1型ヘルパーＴ細胞応答の発生を増強する化合物、干渉RNA、アンチセンスRNA、イミキモド（Imiqimod）、リバビリン、イノシン5'-一リン酸脱水素酵素インヒビター、アマンタジン、およびリマンタジンからなる群から選択される組成物である。
【００５２】
本発明の別の態様は、抗HCV活性を有する化合物が、HCV感染症の治療のために、HCVメタロプロテアーゼ、HCVセリンプロテアーゼ、HCVポリメラーゼ、HCVヘリカーゼ、HCV NS4Bタンパク質、HCVエントリー、HCVアセンブリ、HCVイグレス、HCV NS5Aタンパク質、IMPDH、およびヌクレオシドアナログから選択される標的の機能を阻害するのに有効である、組成物である。
【００５３】
本発明の別の態様は、式Iの化合物もしくは医薬的に許容されるその塩、医薬的に許容される担体、インターフェロンおよびリバビリンを含む組成物である。
【００５４】
本発明の別の態様は、HCVレプリコンに式Iの化合物または医薬的に許容されるその塩を接触させることを含む、HCVレプリコンの機能を阻害する方法である。
【００５５】
本発明の別の態様は、HCV NS5Bタンパク質に式Iの化合物または医薬的に許容されるその塩を接触させることを含む、HCV NS5Bタンパク質の機能を阻害する方法である。
【００５６】
本発明の別の態様は、患者に治療上有効な量の式Iの化合物または医薬的に許容されるその塩を投与することを含む、患者におけるHCV感染症の治療方法である。別の実施態様において、該化合物はHCVレプリコンの機能を阻害するのに有効である。別の実施態様において、該化合物はHCV NS5Bタンパク質の機能を阻害するのに有効である。
【００５７】
本発明の別の態様は、患者に治療上有効な量の式Iの化合物または医薬的に許容されるその塩を、抗HCV活性を有する別の化合物とともに(前、後、もしくは同時に)投与することを含む、患者におけるHCV感染症の治療方法である。
【００５８】
本発明の別の態様は、抗HCV活性を有する他の化合物がインターフェロンである、該方法である。
【００５９】
本発明の別の態様は、該インターフェロンがインターフェロンα2B、ペグインターフェロンα、コンセンサスインターフェロン、インターフェロンα2A、およびリンパ芽球様インターフェロンタウから選択される、該方法である。
【００６０】
本発明の別の態様は、抗HCV活性を有する他の化合物がシクロスポリンである、該方法である。
【００６１】
本発明の別の態様は、該シクロスポリンがシクロスポリンAである、該方法である。
【００６２】
本発明の別の態様は、抗HCV活性を有する他の化合物が、インターロイキン2、インターロイキン6、インターロイキン12、1型ヘルパーＴ細胞応答の発生を増強する化合物、干渉RNA、アンチセンスRNA、イミキモド、リバビリン、イノシン5'-一リン酸脱水素酵素インヒビター、アマンタジン、またはリマンタジンから選択される、該方法である。
【００６３】
本発明の別の態様は、HCV感染症の治療のために、抗HCV活性を有する他の化合物が、HCVメタロプロテアーゼ、HCVセリンプロテアーゼ、HCVポリメラーゼ、HCVヘリカーゼ、HCV NS4Bタンパク質、HCVエントリー、HCVアセンブリ、HCVイグレス、HCV NS5Aタンパク質、IMPDH、およびヌクレオシドアナログからなる群から選択される標的の機能を阻害するのに有効である、該方法である。
【００６４】
本発明の別の態様は、抗HCV活性を有する他の化合物がHCV NS5Bタンパク質以外のHCVの生活環における標的の機能を阻害するのに有効である、該方法である。
【００６５】
「治療上有効な」とは、肝炎およびHCV感染症の分野の医師には明らかであるように、有意義な患者利益をもたらすのに必要な薬剤の量を意味する。
【００６６】
「患者」とは、肝炎およびHCV感染症の分野の医師には明らかであるように、HCVウイルスに感染しており、療法に適した患者を意味する。
【００６７】
「治療」、「療法」、「レジメン」、「HCV感染症」および関連する用語が、肝炎およびHCV感染症の分野の医師には明らかであるように、用いられる。
【００６８】
本発明の化合物は、通常、治療上有効な量の化合物またはその医薬的に許容される塩および医薬的に許容される担体を含む医薬組成物として提供され、通常の賦形剤を有してもよい。治療上有効な量は、有意義な患者利益をもたらすのに必要とされるものである。医薬的に許容される担体は、許容される安全性プロファイルを有する従来既知の担体である。組成物は、カプセル剤、錠剤、トローチ剤（losenge）、および散剤ならびに液体懸濁剤、シロップ剤、エリキシル剤（elixer）、および液剤を含む、全ての一般的な固形および液状形態を包含する。組成物は一般的な製剤技術を用いて製造され、通常の賦形剤(例えば結合剤および湿潤剤)およびベヒクル(例えば水およびアルコール)が組成物に一般的に用いられる。
【００６９】
固体組成物は通常、用量当たり約1〜1000 mgの活性成分を提供するように、用量単位および組成物中に製剤化することが好ましい。投与量のいくつかの例は、1 mg、10 mg、100 mg、250 mg、500 mg、および1000 mgである。通常、他の薬剤は、臨床的に用いられる種類の薬剤と同様の単位範囲で存在するであろう。典型的には、これは0.25〜1000 mg/単位である。
【００７０】
液体組成物は通常、用量単位内である。通常、液体組成物は1〜100 mg/mLの単位用量内であろう。投与量のいくつかの例は、1 mg/mL、10 mg/mL、25 mg/mL、50 mg/mL、および100 mg/mLである。通常、他の薬剤は、臨床的に用いられる種類の薬剤と同様の単位範囲で存在するであろう。典型的には、これは1〜100 mg/mLである。
【００７１】
本発明は全ての一般的な投与様式を包含し;経口および非経口方法が好ましい。通常、投与レジメンは臨床的に用いられる他の薬剤と同様であろう。典型的には、１日用量は、体重1kg当たり1〜100 mg/日であろう。通常、より多くの化合物が経口で必要とされ、非経口ではあまり必要とされない。しかしながら、具体的な投与レジメンは正確な医学的判断を用いて医師により決定されるであろう。
【００７２】
本発明はまた、該化合物を併用療法で投与する方法も包含する。すなわち、該化合物を、肝炎およびHCV感染症の治療において有用な他の薬剤と同時だが別個に用いることができる。これらの併用方法において、該化合物は通常、体重1kg当たり1〜100 mg/日の１日用量で、他の薬剤と同時に投与され得る。他の薬剤は通常、治療に用いられる量で投与され得る。しかしながら、具体的な投与レジメンは正確な医学的判断を用いて医師により決定されるであろう。
【００７３】
表２に、組成物および方法に適切な化合物のいくつかの例を記載する。
表２
【表４】
【表５】
【表６】
【実施例】
【００７４】
（具体的実施態様の説明）
他に特別な定めのない限り、以下の中間体および実施例についての分析LCMSデータは、以下のカラムおよび条件を用いて得た。停止時間: グラジエント時間 + 1 分; グラジエント時間: 2 分 (他に記載のない限り). 開始濃度: 0％ B 他に記載のない限り; 終了濃度: 100％ B; 溶出A: 0.1％ TFA含有10 ％ MeOH / 90 ％ H2O; 溶出B: 0.1％ TFA含有90 ％ MeOH / 10 ％ H2O; カラム: Phenomenex 10μ 4.6 x 50 mm C18.
プレパラティブHPLCデータ. グラジエント: 20分にわたる直線. 他に記載のない限り; 開始濃度: 15％ B 他に記載のない限り; 終了濃度: 100％ B; 溶出A: 0.1％ TFA含有10 ％ MeOH / 90 ％ H2O; 溶出B: 0.1％ TFA含有90 ％ MeOH / 10 ％ H2O; カラム: Phenomenex C18 10μ 30 x 100 mm.
【００７５】
中間体1
【化９】
rac-(3aR,14bR)-2-ベンジル-10-シクロヘキシル-7-((ジメチルスルファモイル)カルバモイル)-13-メトキシ-1,2,3,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-3a(4H)-カルボン酸メチル
N-(メトキシメチル)-N-(トリメチルシリルメチル)ベンジルアミン(0.70 mL, 2.7 mmol)を、5mM TFA／THF溶液(10 mL, 0.050 mmol)に溶解させた13-シクロヘキシル-10-((ジメチルスルファモイル)カルバモイル)-3-メトキシ-7H-インドロ[2,1-a][2]ベンゾアゼピン-6-カルボキシレート(500 mg, 0.91 mmol)の溶液に、窒素下において、滴下した。該反応混合液を16時間撹拌し、さらなるN-(メトキシメチル)-N-(トリメチルシリルメチル)ベンジルアミン(0.40 mL, 1.6 mmol)を加えた。該反応混合液を16時間撹拌し、NH4Cl水溶液(20 mL)でクエンチし、EtOAc(20 mL)で抽出した。有機層を、NaHCO3(20 mL)および食塩水(15 mL)で洗浄し、乾燥させ(MgSO4)、濾過し、濃縮して、rac-(3aR,14bR)-2-ベンジル-10-シクロヘキシル-7-((ジメチルスルファモイル)カルバモイル)-13-メトキシ-1,2,3,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-3a(4H)-カルボン酸メチル(990 mg, 定量的)を黄色の固形物として得た。 1HNMR (300 MHz, CD3OD) δ 1.22 - 1.64 (m, 4H), 1.76 - 2.36 (m, 7H), 2.87 - 3.05 (m, 2H), 3.07 (s, 6H), 3.47 - 3.56 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.92 (s, 3H), 3.99 - 4.16 (m, 4H), 4.32 (d, J = 12.8 Hz, 1H), 4.55 (d, J = 15.0 Hz, 1H), 6.89 - 7.29 (m, 5H), 7.10 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 7.17 (dd, J = 8.4, 2.6 Hz, 1H), 7.44 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.68 (dd, J = 8.4, 1.1 Hz, 1H), 7.88 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 8.00 (d, J = 1.1 Hz, 1H). LCMS: m/e 685 (M+H)+, 保持時間 1.87 分, 2 分グラジエント.
【００７６】
中間体2
【化１０】
rac-(3aR,14bR)-2-ベンジル-10-シクロヘキシル-7-((ジメチルスルファモイル)カルバモイル)-13-メトキシ-1,2,3,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-3a(4H)-カルボン酸
1.0N NaOH水溶液(3 mL, 3.0 mmol)を、THF(10 mL)およびMeOH(10 mL)中のrac-(3aR,14bR)-2-ベンジル-10-シクロヘキシル-7-((ジメチルスルファモイル)カルバモイル)-13-メトキシ-1,2,3,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-3a(4H)-カルボン酸メチル(620 mg, 0.90 mmol)溶液に加えた。該反応液を3日間撹拌し、その後濃縮して有機溶媒を除去した。該残渣をH2O(70 mL)で希釈し、Et2O(2 x 20 mL)で洗浄し、1.0N HCl水溶液(3 mL, 3.0 mmol)で中和して終夜撹拌した。得られた白色の沈殿物を濾過により集め、H2Oで洗浄し、乾燥させて、rac-(3aR,14bR)-2-ベンジル-10-シクロヘキシル-7-((ジメチルスルファモイル)カルバモイル)-13-メトキシ-1,2,3,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-3a(4H)-カルボン酸(596 mg, 0.89 mmol, 99％ 収率)を白色の固形物として得た 1HNMR (300 MHz, CD3OD) δ 1.23 - 1.65 (m, 4H), 1.77 - 2.39 (m, 7H), 2.87 - 3.04 (m, 2H), 3.07 (s, 6H), 3.46 - 3.55 (m, 1H), 3.93 (s, 3H), 3.88 - 4.18 (m, 4H), 4.32 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 4.57 (d, J = 15.0 Hz, 1H), 6.88 - 7.30 (m, 6H), 7.18 (dd, J = 8.4, 2.6 Hz, 1H), 7.46 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.69 (dd, J = 8.8, 1.1 Hz, 1H), 7.89 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 8.02 (ブロードのs, 1H). LCMS: m/e 671 (M+H)+, 保持時間 3.45 分, 4 分グラジエント.
【００７７】
実施例 1
【化１１】
rac-(3aR,14bR)-2-ベンジル-10-シクロヘキシル-3a-(((2S,6R)-2,6-ジメチル-4-モルホリニル)カルボニル)-N-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-1,2,3,3a,4,14b-ヘキサヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-7-カルボキサミド
HATU(360 mg, 0.96 mmol)を、DMF(7 mL)およびTEA(0.4 mL, 3.0 mmol)中のrac-(3aR,14bR)-2-ベンジル-10-シクロヘキシル-7-((ジメチルスルファモイル)カルバモイル)-13-メトキシ-1,2,3,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-3a(4H)-カルボン酸(490 mg, 0.74 mmol)および(2R,6S)-2,6-ジメチルモルホリン(110 mg, 0.96 mmol)のスラリーに加えた。該反応混合液を室温で16時間撹拌し、H2O(10 mL)で希釈し、HCl水溶液(1.0N, 3 mL)でゆっくりとクエンチした。得られたオフホワイト色の沈殿物を濾過により集め、H2Oで洗浄し、乾燥させて粗生成物(705 mg)をオフホワイト色の固形物として得た。40 mgの粗生成物をプレパラティブHPLC(0.1％TFA含有H2O/MeOHバッファー)により精製して、rac-(3aR,14bR)-2-ベンジル-10-シクロヘキシル-3a-(((2S,6R)-2,6-ジメチル-4-モルホリニル)カルボニル)-N-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-1,2,3,3a,4,14b-ヘキサヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-7-カルボキサミド(26.7 mg, 0.034 mmol, 83％)をオフホワイト色の固形物として得た。 1HNMR (300 MHz, CD3OD) δ 1.19 (d, J = 6.2 Hz, 3H), 1.21 (d, J = 5.9 Hz, 3H), 1.25 - 1.59 (m, 4H), 1.77 - 2.33 (m, 8H), 2.82 - 2.97 (m, 3H), 3.06 (s, 6H), 3.45 - 3.78 (m, 4H), 3.94 (s, 3H), 3.91 - 4.12 (m, 4H), 4.27 - 4.39 (m, 1H), 4.42 - 4.54 (m, 2H), 6.91 - 7.30 (m, 5H), 7.18 (dd, J = 8.4, 2.6 Hz, 1H), 7.24 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 7.46 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.69 (dd, J = 8.4, 1.1 Hz, 1H), 7.86 - 7.93 (m, 2H). LCMS: m/e 768 (M+H)+, 保持時間 3.50 分, 4 分グラジエント.
【００７８】
実施例 2
【化１２】
rac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-3a-(((2S,6R)-2,6-ジメチル-4-モルホリニル)カルボニル)-N-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-1,2,3,3a,4,14b-ヘキサヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-7-カルボキサミド
10％ Pd/C(60 mg, 0.056 mmol)を、MeOH/EtOAc/95％EtOH(10:10:1, 21 mL)中のrac-(3aR,14bR)-2-ベンジル-10-シクロヘキシル-3a-(((2S,6R)-2,6-ジメチル-4-モルホリニル)カルボニル)-N-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-1,2,3,3a,4,14b-ヘキサヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-7-カルボキサミド(100 mg, 0.130 mmol)の濁った溶液に加えた。該反応混合液をN2(3x)、次いでH2(3x)で減圧フラッシュし、50 psiのH2下において16時間、パールシェイカー（Parr shaker）で振盪させた。該反応混合液をセライトを通して濾過し、淡黄色の固形物まで濃縮した。該粗固形物をMeOH(4 mL + 2 mL)でトリチュレートし、rac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-3a-(((2S,6R)-2,6-ジメチル-4-モルホリニル)カルボニル)-N-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-1,2,3,3a,4,14b-ヘキサヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-7-カルボキサミド(40 mg, 0.059 mmol)を白色の固形物として得た。該母液を濃縮し、MeOHおよびDMFに溶解させ、プレパラティブHPLC(0.1％TFA含有H2O/MeOHバッファー)により精製して、さらなる生成物(27.7 mg, 0.041 mmol)を淡黄色の固形物として得た。総単離生成物(67.7 mg, 0.10 mmol, 77％)。 1HNMR (300 MHz, CD3OD) δ 1.23 (d, J = 6.2 Hz, 3H), 1.27 (d, J = 6.2 Hz, 3H), 1.29 - 1.70 (m, 4H), 1.77 - 2.25 (m, 6H), 2.30 - 2.43 (m, 1H), 2.64 - 3.05 (m, 3H), 3.03 (s, 6H), 3.11 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 3.45 (dd, J = 8.1, 11.0 Hz, 1H), 3.59 - 3.80 (m, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.98 (d, J = 10.3 Hz, 1H), 4.11 (d, J = 15.4 Hz, 1H), 4.10 - 4.24 (m, 1H), 4.25 - 4.36 (m, 2H), 4.59 (d, J = 15.4 Hz, 1H), 7.19 (dd, J = 8.8, 2.6 Hz, 1H), 7.27 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 7.51 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.67 (dd, J = 8.4, 1.5 Hz, 1H), 7.97 - 8.07 (m, 2H). LCMS: m/e 678 (M+H)+, 保持時間 3.38 分, 4 分グラジエント.
【００７９】
実施例 3
【化１３】
rac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-3a-(((2S,6R)-2,6-ジメチル-4-モルホリニル)カルボニル)-N-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-2-メチル-1,2,3,3a,4,14b-ヘキサヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-7-カルボキサミド
撹拌中のrac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-3a-(((2S,6R)-2,6-ジメチル-4-モルホリニル)カルボニル)-N-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-1,2,3,3a,4,14b-ヘキサヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-7-カルボキサミド(30 mg, 0.044 mmol)／MeOH(2 mL)懸濁液に、37％ホルムアルデヒド水溶液(0.03 mL, 0.40 mmol)、次いでNaCNBH3(20 mg, 0.32 mmol)を加えた。該反応液を室温で終夜撹拌し、DMF/MeOHで希釈し、濾過し、プレパラティブHPLC(0.1％TFA含有H2O/MeOHバッファー)により精製して、rac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-3a-(((2S,6R)-2,6-ジメチル-4-モルホリニル)カルボニル)-N-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-2-メチル-1,2,3,3a,4,14b-ヘキサヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-7-カルボキサミド(19.6 mg, 0.028 mmol, 64％ 収率)をオフホワイト色の固形物として得た。 1HNMR (500 MHz, CD3OD) δ 1.21 (d, J = 6.1 Hz, 3H), 1.24 (d, J = 5.5 Hz, 3H), 1.28 - 1.38 (m, 1H), 1.42 - 1.57 (m, 2H), 1.63 - 1.70 (m, 1H), 1.79 - 1.90 (m, 2H), 1.95 - 2.27 (m, 5H), 2.45 (ブロードのs, 3H), 2.60 - 2.93 (m, 3H), 2.95 - 3.08 (m, 2H), 3.04 (s, 6H), 3.61 - 3.81 (m, 3H), 3.95 (s, 3H), 4.11 - 4.45 (m, 3H), 4.53 - 4.66 (m, 2H), 7.22 (ブロードのd, J = 8.5 Hz, 1H), 7.26 (ブロードのs, 1H), 7.52 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.70 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 8.01 - 8.05 (m, 2H). LCMS: m/e 692 (M+H)+, 保持時間 3.40 分, 2 分グラジエント.
【００８０】
実施例 4
【化１４】
rac-(3aR,14bR)-2-アセチル-10-シクロヘキシル-3a-(((2S,6R)-2,6-ジメチル-4-モルホリニル)カルボニル)-N-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-1,2,3,3a,4,14b-ヘキサヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-7-カルボキサミド
HATU(25 mg, 0.066 mmol)を、DMF(1 mL)およびTEA(0.06 mL, 0.43 mmol)中のrac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-3a-(((2S,6R)-2,6-ジメチル-4-モルホリニル)カルボニル)-N-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-1,2,3,3a,4,14b-ヘキサヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-7-カルボキサミド(30 mg, 0.044 mmol)およびCH3CO2H(0.02 mL, 0.35 mmol)の溶液に加えた。該反応混合液を室温で3時間撹拌し、MeOHで希釈し、プレパラティブHPLC(0.1％TFA含有H2O/MeOHバッファー)により精製して、生成物rac-(3aR,14bR)-2-アセチル-10-シクロヘキシル-3a-(((2S,6R)-2,6-ジメチル-4-モルホリニル)カルボニル)-N-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-1,2,3,3a,4,14b-ヘキサヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-7-カルボキサミド(16.5 mg, 0.023 mmol, 52％ 収率)をオフホワイト色の固形物として得た。回転異性体の複合混合物が観察され、主要な回転異性体が得られた。 1HNMR (500 MHz, CD3OD) δ 1.11 - 2.22 (m, 16H), 2.72 - 3.08 (m, 5H), 3.04 (s, 6H), 3.60 - 3.80 (m, 3H), 3.92 (s, 3H), 3.86 - 4.29 (m, 7H), 4.43 - 4.51 (m, 1H), 4.61 (d, J = 15.0 Hz, 1H), 7.08 (dd, J = 8.2, 2.5 Hz, 1H), 7.24 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.40 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.61 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.91 - 7.96 (m, 2H). LCMS: m/e 720 (M+H)+, 保持時間 3.93 分, 2 分グラジエント.
【００８１】
実施例 5
【化１５】
rac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-3a-(((2S,6R)-2,6-ジメチル-4-モルホリニル)カルボニル)-N-(ジメチルスルファモイル)-2-イソプロピル-13-メトキシ-1,2,3,3a,4,14b-ヘキサヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-7-カルボキサミド
rac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-3a-(((2S,6R)-2,6-ジメチル-4-モルホリニル)カルボニル)-N-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-1,2,3,3a,4,14b-ヘキサヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-7-カルボキサミド(30 mg, 0.044 mmol)／MeOH(2 mL)懸濁液に、アセトン(0.050 mL, 0.680 mmol)、次いでNaCHBH3(25 mg, 0.40 mmol)を加えた。該反応混合液を室温で3時間撹拌し、DMF/MeOHで希釈し、プレパラティブHPLC(0.1％TFA含有H2O/MeOHバッファー)により精製して、純粋でない淡黄色の固形物を得た。該純粋でない物質をプレパラティブHPLC(10mM NH4OAc含有H2O/CH3CNバッファー)により再精製して、rac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-3a-(((2S,6R)-2,6-ジメチル-4-モルホリニル)カルボニル)-N-(ジメチルスルファモイル)-2-イソプロピル-13-メトキシ-1,2,3,3a,4,14b-ヘキサヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-7-カルボキサミド (18.5 mg, 0.026 mmol, 58％ 収率)を白色の固形物として得た。 1HNMR (300 MHz, CDCl3) δ 0.50 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 0.57 (d, J = 5.1 Hz, 3H), 1.16 - 2.14 (m, 16H), 2.37 - 2.76 (m, 3H), 2.83 - 3.03 (m, 3H), 3.04 (s, 6H), 3.33 (d, J = 10.6 Hz, 1H), 3.53 - 3.70 (m, 4H), 3.85 (s, 3H), 4.16 (d, J = 15.0 Hz, 1H), 4.28 (d, J = 15.0 Hz, 1H), 4.38 - 4.68 (m, 1H), 5.06 - 5.47 (m, 1H), 6.83 (ブロードのs, 1H), 6.93 (dd, J = 8.4, 2.2 Hz, 1H), 7.32 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.39 (dd, J = 8.4, 1.1 Hz, 1H), 7.84 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.97 (s, 1H). LCMS: m/e 720 (M+H)+, 保持時間 3.43 分, 2 分グラジエント.
【００８２】
実施例 6
【化１６】
rac-(3aR,14bR)-2-ベンジル-10-シクロヘキシル-N7-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-N3a,N3a-ジメチル-1,2,3,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-3a,7(4H)-ジカルボキサミド
HATU(680 mg, 1.789 mmol)を、DMF(10 mL)およびTEA(0.5 mL, 3.6 mmol)中のrac-(3aR,14bR)-2-ベンジル-10-シクロヘキシル-7-((ジメチルスルファモイル)カルバモイル)-13-メトキシ-1,2,3,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-3a(4H)-カルボン酸(600 mg, 0.89 mmol)およびジメチルアミン(0.90 mL, 1.8 mmol)のスラリーに加えた。該反応液を終夜撹拌し、さらなるジメチルアミン(0.5 mL)およびHATU(300 mg)を加えた。該反応液を終夜撹拌し、濾過し、H2O(20 mL)で希釈し、1.0N HCl水溶液(9 mL)(pH 〜3)でクエンチした。有機溶媒を減圧下で除去し、該残渣をEtOAc(60 mL)およびH2O(40 mL)間に分配した。有機層を1.0N HCl水溶液(15 mL)および食塩水(15 mL)で洗浄し、濃縮して、黄色の固形物を得た。該固形物をMeOH(30 mL)に溶解させ、H2O(30 mL)を滴下した。得られた沈殿物を濾過により集め、1:1 H2O/MeOHで洗浄し、乾燥させて粗生成物(670 mg)をオフホワイト色の固形物として得た。15 mgの粗生成物をプレパラティブHPLC(0.1％TFA含有H2O/MeOHバッファー)により精製し、rac-(3aR,14bR)-2-ベンジル-10-シクロヘキシル-N7-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-N3a,N3a-ジメチル-1,2,3,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-3a,7(4H)-ジカルボキサミド(11.7 mg, 0.017 mmol, 83％)を白色の固形物として得た。 1HNMR (300 MHz, CD3OD) δ 1.24 - 1.63 (m, 4H), 1.77 - 2.25 (m, 7H), 2.87 - 3.04 (m, 2H), 3.07 (s, 6H), 3.10 - 3.23 (m, 6H), 3.36 - 3.45 (m, 1H), 3.93 (s, 3H), 3.85 - 4.09 (m, 3H), 4.39 - 4.50 (m, 1H), 4.43 (d, J = 12.1 Hz, 1H), 4.63 (d, J = 15.0 Hz, 1H), 6.91 - 7.02 (m, 2H), 7.05 - 7.15 (m, 2H), 7.14 (dd, J = 8.4, 2.6 Hz, 1H), 7.20 - 7.29 (m, 1H), 7.27 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 7.42 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.70 (dd, J = 8.8, 1.5 Hz, 1H), 7.91 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.94 (ブロードのs, 1H). LCMS: m/e 698 (M+H)+, 保持時間 1.90 分, 2 分グラジエント.
【００８３】
実施例 7
【化１７】
rac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-N7-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-N3a,N3a-ジメチル-1,2,3,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-3a,7(4H)-ジカルボキサミド
10％ Pd/C (340 mg, 0.32 mmol)を、MeOH/95％EtOH(10:1, 55 mL)中のクルードなrac-(3aR,14bR)-2-ベンジル-10-シクロヘキシル-N7-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-N3a,N3a-ジメチル-1,2,3,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-3a,7(4H)-ジカルボキサミド(535 mg, 0.77 mmol)の溶液に加えた。該反応混合液を、N2(3x)およびH2(3x)で減圧フラッシュし、50 psiのH2下において16時間、パールシェイカーで振盪させた。該反応混合液を、セライトを通して濾過し、淡黄色の固形物まで濃縮した。該粗固形物をMeOHでトリチュレートし、rac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-N7-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-N3a,N3a-ジメチル-1,2,3,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-3a,7(4H)-ジカルボキサミド(336 mg, 0.553 mmol, 72％ 収率)を白色の固形物として得た。 1HNMR (300 MHz, CD3OD) δ 1.24 - 2.33 (m, 11H), 2.86 - 3.05 (m, 2H), 3.04 (s, 6H), 3.12 - 3.25 (m, 6H), 3.95 (s, 3H), 3.93 - 4.07 (m, 2H), 4.42 (d, J = 12.8 Hz, 1H), 4.59 (dd, J = 13.9, 7.7 Hz, 1H), 4.74 - 4.81 (m, 2H), 7.17 (dd, J = 8.8, 2.6 Hz, 1H), 7.30 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 7.48 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.69 (dd, J = 8.4, 1.5 Hz, 1H), 8.00 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 8.14 (d, J = 1.5 Hz, 1H). LCMS: m/e 608 (M+H)+, 保持時間 1.82 分, 2 分グラジエント.
【００８４】
実施例 8
【化１８】
rac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-N7-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-N2,N2,N3a,N3a-テトラメチル-1,14b-ジヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-2,3a,7(3H,4H)-トリカルボキサミド
ジメチルカルバミルクロリド(0.020 mL, 0.22mmol)およびiPr2EtN(0.040 mL, 0.23 mmol)を、rac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-N7-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-N3a,N3a-ジメチル-1,2,3,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-3a,7(4H)-ジカルボキサミド(30 mg, 0.049 mmol)／THF(1 mL)溶液に加えた。該反応混合液を、室温で16時間撹拌し、MeOH/DMFで希釈し、プレパラティブHPLC(10mM NH4OAc含有H2O/CH3CNバッファー)により精製して、rac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-N7-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-N2,N2,N3a,N3a-テトラメチル-1,14b-ジヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-2,3a,7(3H,4H)-トリカルボキサミド(10.5 mg, 0.015 mmol, 31％ 収率)を白色の固形物として得た。 1HNMR (300 MHz, CDCl3) δ 1.11 - 1.55 (m, 4H), 1.68 - 2.14 (m, 7H), 2.37 (s, 6H), 2.55 - 2.65 (m, 1H), 3.04 (s, 6H), 2.85 - 3.11 (m, 5H), 3.38 (t, J = 9.9 Hz, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.80 - 4.02 (m, 3H), 4.18 (d, J = 12.1 Hz, 1H), 4.28 (dd, J = 10.6, 10.2 Hz, 1H), 4.55 (d, J = 15.0 Hz, 1H), 6.95 (dd, J = 8.4, 2.2 Hz, 1H), 7.20 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 7.31 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.43 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.83 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 8.00 (s, 1H). LCMS: m/e 679 (M+H)+, 保持時間 3.86 分, 4 分グラジエント.
【００８５】
実施例 9
【化１９】
rac-(3aR,14bR)-2-アセチル-10-シクロヘキシル-N7-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-N3a,N3a-ジメチル-1,2,3,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-3a,7(4H)-ジカルボキサミド
HATU(38 mg, 0.10 mmol)を、DMF(1 mL)およびTEA(0.060 mL, 0.43 mmol)中のrac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-N7-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-N3a,N3a-ジメチル-1,2,3,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-3a,7(4H)-ジカルボキサミド(30 mg, 0.049 mmol)およびCH3CO2H(0.020 mL, 0.35 mmol)の溶液に加えた。該反応混合液を室温で3時間撹拌し、0.2 M HCl水溶液(1 mL)を滴下して中和し、乾固するまで濃縮した。該残渣をEtOAc(5 mL)およびH2O(5 mL)間に分配し、水層をEtOAc(5 mL)で抽出した。有機層を合わせて食塩水で洗浄し、濃縮し、プレパラティブHPLC(10mM NH4OAc含有H2O/CH3CNバッファー)により精製して、rac-(3aR,14bR)-2-アセチル-10-シクロヘキシル-N7-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-N3a,N3a-ジメチル-1,2,3,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-3a,7(4H)-ジカルボキサミド(15 mg, 0.023 mmol, 47 ％ 収率)を白色の固形物として得た。回転異性体の複合混合物が観察され、２つの主要な回転異性体(〜2:1 比)について、部分的1HNMR(芳香族領域)を得た。 1HNMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.05 - 7.11 (m, 1H), 7.23 (d, J = 2.6 Hz, 0.3H), 7.27 (d, J = 2.6 Hz, 0.7H), 7.40 (d, J = 8.8 Hz, 0.3H), 7.41 (d, J = 8.8 Hz, 0.7H), 7.63 (dd, J = 8.4, 1.5 Hz, 0.3H), 7.65 (dd, J = 8.4, 1.5 Hz, 0.7H), 7.91 (d, J = 8.4 Hz, 0.3H), 7.93 (d, J = 8.4 Hz, 0.7H), 8.10 (ブロードのs, 0.7H), 8.13 (ブロードのs, 0.3H). LCMS: m/e 650 (M+H)+, 保持時間 3.76 分, 4 分グラジエント.
【００８６】
実施例 10
【化２０】
rac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-N7-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-N3a,N3a,2-トリメチル-1,2,3,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-3a,7(4H)-ジカルボキサミド
撹拌中のrac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-N7-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-N3a,N3a-ジメチル-1,2,3,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-3a,7(4H)-ジカルボキサミド(30 mg, 0.049 mmol)／MeOH(1.5 mL)懸濁液に、37％ホルムアルデヒド水溶液(0.03 mL, 0.4 mmol)、次いでNaCNBH3(20 mg, 0.32 mmol)を加えた。該反応混合液を室温で3時間撹拌し、DMF/MeOHで希釈し、プレパラティブHPLC(0.1％TFA含有H2O/MeOHバッファー)により精製して、rac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-N7-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-N3a,N3a,2-トリメチル-1,2,3,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-3a,7(4H)-ジカルボキサミド(19.4 mg, 0.031 mmol, 63％ 収率)を白色の固形物として得た。 1HNMR (300 MHz, CDCl3) δ 1.22 - 2.24 (m, 11H), 2.44 (ブロードのs, 3H), 2.94 - 3.02 (m, 2H), 3.04 (s, 6H), 3.16 (ブロードのs, 6H), 3.52 - 3.67 (m, 1H), 3.94 (s, 3H), 4.09 (d, J = 15.4 Hz, 1H), 4.40 - 4.63 (m, 2H), 4.74 (d, J = 15.4 Hz, 1H), 7.18 (dd, J = 8.4, 2.6 Hz, 1H), 7.29 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 7.48 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.71 (dd, J = 8.4, 1.5 Hz, 1H), 8.03 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 8.12 (ブロードのs, 1H). LCMS: m/e 622 (M+H)+, 保持時間 3.23 分, 4 分グラジエント.
【００８７】
実施例 11
【化２１】
rac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-3a-(((2S,6R)-2,6-ジメチル-4-モルホリニル)カルボニル)-N7-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-N2,N2-ジメチル-1,3a,4,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-2,7(3H)-ジカルボキサミド
rac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-3a-(((2S,6R)-2,6-ジメチル-4-モルホリニル)カルボニル)-N-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-1,2,3,3a,4,14b-ヘキサヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-7-カルボキサミド (30 mg, 0.044 mmol)／THF(1.5 mL)懸濁液に、ジメチルカルバミルクロリド(0.010 mL, 0.11 mmol)、次いでiPr2EtN(0.031 mL, 0.18 mmol)を加えた。該反応混合液を室温で16時間撹拌し、MeOH/DMFで希釈し、プレパラティブHPLC(0.1％TFA含有H2O/MeOHバッファー)により精製し、rac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-3a-(((2S,6R)-2,6-ジメチル-4-モルホリニル)カルボニル)-N7-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-N2,N2-ジメチル-1,3a,4,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-2,7(3H)-ジカルボキサミド(17.1 mg, 0.023 mmol, 52％ 収率)を白色の固形物として得た。回転異性体の3:1混合物。 1HNMR (300 MHz, CD3OD) δ 1.24 (d, J = 6.2 Hz, 3H), 1.28 (d, J = 6.2 Hz, 3H), 1.30 - 2.27 (m, 10H), 2.49 (s, 4.5H), 2.65 - 2.84 (m, 2H), 2.86 - 2.90 (m, 1H), 2.94 (s, 1.5H), 2.99 - 3.02 (m, 1H), 3.03 (s, 6H), 3.49 - 3.58 (m, 1H), 3.60 - 3.85 (m, 3.75H), 3.88 (s, 0.75H), 3.91 (s, 2.25H), 3.95 - 4.27 (m, 4.25H), 4.56 (d, J = 15.0 Hz, 0.75H), 4.73 - 4.80 (m, 0.25H), 6.84 (ブロードのs, 0.25H), 7.03 - 7.08 (m, 0.25H), 7.07 (dd, J = 8.4, 2.6 Hz, 0.75H), 7.17 (d, J = 2.6 Hz, 0.75H), 7.34 (d, J = 8.4 Hz, 0.25H), 7.41 (d, J = 8.4 Hz, 0.75H), 7.55 (ブロードのd, J = 8.4 Hz, 0.25H), 7.61 (dd, J = 8.4, 1.5 Hz, 0.75H), 7.87 (d, J = 8.4 Hz, 0.25H), 7.92 (d, J = 8.4 Hz, 0.75H), 7.99 (ブロードのs, 0.25H), 8.02 (d, J = 1.5 Hz, 0.75H). LCMS: m/e 749 (M+H)+, 保持時間 4.01 分, 4 分グラジエント.
【００８８】
実施例 12
【化２２】
rac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-2-(2-(ジメチルアミノ)-1-メチルエチル)-3a-(((2S,6R)-2,6-ジメチル-4-モルホリニル)カルボニル)-N-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-1,2,3,3a,4,14b-ヘキサヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-7-カルボキサミド
rac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-3a-(((2S,6R)-2,6-ジメチル-4-モルホリニル)カルボニル)-N-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-1,2,3,3a,4,14b-ヘキサヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-7-カルボキサミド(30 mg, 0.044 mmol)／MeOH(2 mL)懸濁液に、(ジメチルアミノ)アセトン(0.020 mL, 0.18 mmol)、次いでNaCNBH3(11 mg, 0.18 mmol)を加えた。該反応混合液を室温で16時間撹拌し、DMFで希釈し、プレパラティブHPLC(0.1％TFA含有H2O/MeOHバッファー)により精製して黄色の固形物を得て、それをプレパラティブHPLC(10mM NH4OAc含有H2O/CH3CNバッファー)により再精製して、rac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-2-(2-(ジメチルアミノ)-1-メチルエチル)-3a-(((2S,6R)-2,6-ジメチル-4-モルホリニル)カルボニル)-N-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-1,2,3,3a,4,14b-ヘキサヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-7-カルボキサミド(13.8 mg, 0.018 mmol, 41％ 収率)を白色の固形物として得た。 1HNMR (300 MHz, CD3OD) δ 0.07 (d, J = 6.2 Hz, 3H), 1.24 (d, J = 6.2 Hz, 3H), 1.32 (d, J = 5.5 Hz, 3H), 1.38 - 2.24 (m, 10H), 2.71 (br, 6H), 2.97 (br, 6H), 2.60 - 3.07 (m, 8H), 3.56 (d, J = 10.3 Hz, 1H), 3.59 -3.79 (m, 2H), 3.92 (s, 3H), 3.89 - 3.98 (m, 1H), 4.15 (dd, J = 11.3, 7.7 Hz, 1H), 4.25 - 4.38 (m, 2H), 4.45 (d, J = 14.6 Hz, 1H), 4.73 - 4.80 (m, 1H), 7.08 (dd, J = 8.4, 2.6 Hz, 1H), 7.18 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 7.41 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.70 (ブロードのd, J = 8.4 Hz, 1H), 7.89 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 8.07 (ブロードのs, 1H). LCMS: m/e 763 (M+H)+, 保持時間 3.58 分, 4 分グラジエント.
【００８９】
実施例 13
【化２３】
rac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-2-(N,N-ジメチルグリシル)-3a-(((2S,6R)-2,6-ジメチル-4-モルホリニル)カルボニル)-N-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-1,2,3,3a,4,14b-ヘキサヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-7-カルボキサミド
DMF(1.5 mL)およびTEA(0.031 mL, 0.22 mmol)中のrac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-3a-(((2S,6R)-2,6-ジメチル-4-モルホリニル)カルボニル)-N-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-1,2,3,3a,4,14b-ヘキサヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-7-カルボキサミド(30 mg, 0.044 mmol)の懸濁液に、N,N-ジメチルグリシン(9.1 mg, 0.089 mmol)、次いでHATU(25.2 mg, 0.066 mmol)を加えた。該反応混合液を室温で16時間撹拌し、MeOHで希釈し、プレパラティブHPLC(0.1％TFA含有H2O/MeOHバッファー)により精製して固形物を得て、それをプレパラティブHPLC(10mM NH4OAc含有H2O/CH3CNバッファー)により再精製して、rac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-2-(N,N-ジメチルグリシル)-3a-(((2S,6R)-2,6-ジメチル-4-モルホリニル)カルボニル)-N-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-1,2,3,3a,4,14b-ヘキサヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-7-カルボキサミド(16.0 mg, 0.021 mmol, 47％ 収率)を白色の固形物として得た。回転異性体の1:1混合物。 1HNMR (300 MHz, CD3OD) δ 1.21 - 1.38 (m, 6H), 1.38 - 2.19 (m, 12H), 2.38 (s, 3H), 2.54 - 3.08 (m, 12H), 3.46 - 3.81 (m, 4H), 3.93 (s, 3H), 3.88 - 4.52 (m, 6H), 4.64 (d, J = 15.0 Hz, 0.5H), 4.66 (d, J = 14.6 Hz, 0.5H), 7.05 - 7.12 (m, 1H), 7.23 (d, J = 2.6 Hz, 0.5H), 7.25 (d, J = 2.6 Hz, 0.5H), 7.41 (d, J = 8.4 Hz, 0.5H), 7.43 (d, J = 8.4 Hz, 0.5H), 7.66 (dd, J = 8.4, 1.5 Hz, 0.5H), 7.72 (dd, J = 8.4, 1.5 Hz, 0.5H), 7.82 (d, J = 8.4 Hz, 0.5H), 7.88 (d, J = 8.8 Hz, 0.5H), 8.04 (ブロードのs, 0.5H), 8.15 (ブロードのs, 0.5H). LCMS: m/e 763 (M+H)+, 保持時間 3.45 分, 4 分グラジエント.
【００９０】
実施例 14
【化２４】
rac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-2-(N,N-ジメチルグリシル)-N7-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-N3a,N3a-ジメチル-1,2,3,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-3a,7(4H)-ジカルボキサミド
HATU(37.5 mg, 0.099 mmol)を、DMF(1 mL)およびTEA(0.03 mL, 0.215 mmol)中のrac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-N7-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-N3a,N3a-ジメチル-1,2,3,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-3a,7(4H)-ジカルボキサミド(30 mg, 0.049 mmol)および2-(ジメチルアミノ)酢酸(10 mg, 0.10 mmol)の溶液に加えた。該反応混合液を室温で3時間撹拌し、MeOHで希釈し、プレパラティブHPLC(0.1％TFA含有H2O/MeOHバッファー)により精製して、rac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-2-(N,N-ジメチルグリシル)-N7-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-N3a,N3a-ジメチル-1,2,3,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-3a,7(4H)-ジカルボキサミド(15.5 mg, 0.022 mmol, 45％ 収率)を白色の固形物として得た。回転異性体の1:1混合物。 1HNMR (300 MHz, CD3OD) δ 1.22 - 2.23 (m, 10H), 2.34 - 3.09 (m, 9H), 3.04 (s, 3H), 3.05 (s, 3H), 3.12 - 3.28 (m, 4H), 3.42 - 3.71 (m, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.83 - 4.13 (m, 4H), 4.31 - 4.58 (m, 2H), 4.82 - 4.96 (m, 1H), 7.08 - 7.14 (m, 1H), 7.27 (d, J = 2.6 Hz, 0.5H), 7.29 (d, J = 2.6 Hz, 0.5H), 7.43 (d, J = 8.4 Hz, 0.5H), 7.45 (d, J = 8.4 Hz, 0.5H), 7.60 (dd, J = 8.4, 1.5 Hz, 0.5H), 7.66 (dd, J = 8.4, 1.5 Hz, 0.5H), 7.95 (d, J = 8.4 Hz, 0.5H), 7.96 (d, J = 8.8 Hz, 0.5H), 8.17 (ブロードのs, 1H). LCMS: m/e 693 (M+H)+, 保持時間 3.24 分, 4 分グラジエント.
【００９１】
実施例 15
【化２５】
rac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-2-((ジメチルアミノ)(オキソ)アセチル)-N7-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-N3a,N3a-ジメチル-1,2,3,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-3a,7(4H)-ジカルボキサミド
HATU(37.5 mg, 0.099 mmol)を、DMF(1 mL)およびTEA(0.03 mL, 0.2 mmol)中のrac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-N7-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-N3a,N3a-ジメチル-1,2,3,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-3a,7(4H)-ジカルボキサミド(30 mg, 0.049 mmol)および2-(ジメチルアミノ)-2-オキソ酢酸(12 mg, 0.10 mmol)の溶液に加えた。該反応混合液を室温で3時間撹拌し、MeOHで希釈し、プレパラティブHPLC(0.1％ TFA含有H2O/MeOHバッファー)により精製して、rac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-2-((ジメチルアミノ)(オキソ)アセチル)-N7-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-N3a,N3a-ジメチル-1,2,3,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-3a,7(4H)-ジカルボキサミド(15.3 mg, 0.022 mmol, 44％ 収率)を白色の固形物として得た。回転異性体の複合混合物が観察され、3つの主要な回転異性体(〜5:3:2 比)について、部分的1HNMR(芳香族領域)を得た。 1HNMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.05 - 7.17 (m, 1H), 7.19 (d, J = 2.6 Hz, 0.2H), 7.25 (d, J = 2.6 Hz, 0.3H), 7.27 (d, J = 2.6 Hz, 0.5H), 7.38 - 7.45 (m, 0.2H), 7.41 (d, J = 8.4 Hz, 0.5H), 7.43 (d, J = 8.4 Hz, 0.3H), 7.57 (dd, J = 8.4, 1.5 Hz, 0.2H), 7.62 (dd, J = 8.4, 1.5 Hz, 0.3H), 7.65 (dd, J = 8.8, 1.5 Hz, 0.5H), 7.72 (ブロードのs, 0.2H), 7.87 (d, J = 8.4 Hz, 0.2H), 7.93 (d, J = 8.4 Hz, 0.3H), 7.95 (d, J = 8.8 Hz, 0.5H), 8.12 (d, J = 1.5 Hz, 0.3H), 8.19 (d, J = 1.5 Hz, 0.5H). LCMS: m/e 707 (M+H)+, 保持時間 3.69 分, 4 分グラジエント.
【００９２】
実施例 16
【化２６】
rac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-N7-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-N3a,N3a-ジメチル-2-((1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)カルボニル)-1,2,3,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-3a,7(4H)-ジカルボキサミド
DMF(1 mL)およびTEA(0.03 mL, 0.2 mmol)中のrac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-N7-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-N3a,N3a-ジメチル-1,2,3,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-3a,7(4H)-ジカルボキサミド(30 mg, 0.049 mmol)および1-メチル-1H-イミダゾール-2-カルボン酸(12.5 mg, 0.099 mmol)の溶液に、HATU(37.5 mg, 0.099 mmol)を加えた。該反応混合液を室温で16時間撹拌し、MeOHで希釈し、プレパラティブHPLC(0.1％TFA含有H2O/MeOHバッファー)により精製して、rac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-N7-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-N3a,N3a-ジメチル-2-((1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)カルボニル)-1,2,3,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-3a,7(4H)-ジカルボキサミド(20.3 mg, 0.028 mmol, 57％ 収率)を明黄色の固形物として得た。回転異性体の複合混合物が観察され、２つの主要な回転異性体(〜3:2 比)について、部分的1HNMR(芳香族領域)を得た。 1HNMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 6.78 (s, 0.6H), 6.91 (s, 0.4H), 7.00 (s, 0.4H), 7.05 (s, 0.4H), 7.08 - 7.22 (m, 2.2H), 7.32 (d, J = 8.2 Hz, 0.6H), 7.37 (d, J = 8.2 Hz, 0.4H), 7.54 (dd, J = 8.6, 1.2 Hz, 0.4H), 7.61 (dd, J = 8.6, 1.2 Hz, 0.6H), 7.81 (d, J = 8.6 Hz, 0.6H), 7.84 (d, J = 8.6 Hz, 0.4H), 8.09 (ブロードのs, 0.4H), 8.31 (ブロードのs, 0.6H), 11.31 (s, 0.4H), 11.69 (s, 0.6H). LCMS: m/e 716 (M+H)+, 保持時間 3.67 分, 4 分グラジエント.
【００９３】
実施例 17aおよび17b
【化２７】
rac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-2-(2-(ジメチルアミノ)-1R-メチルエチル)-N7-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-N3a,N3a-ジメチル-1,2,3,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-3a,7(4H)-ジカルボキサミドおよびrac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-2-(2-(ジメチルアミノ)-1S-メチルエチル)-N7-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-N3a,N3a-ジメチル-1,2,3,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-3a,7(4H)-ジカルボキサミド
rac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-N7-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-N3a,N3a-ジメチル-1,2,3,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-3a,7(4H)-ジカルボキサミド(30 mg, 0.049 mmol)／MeOH(2 mL)懸濁液に、(ジメチルアミノ)アセトン(0.020 mL, 0.18 mmol)、次いでNaCNBH3(12.4 mg, 0.20 mmol)を加えた。該反応混合液を室温で4時間撹拌し、DMF(1 mL)で希釈し、さらなる(ジメチルアミノ)アセトン(0.4 mL)で処理した。該反応混合液を室温で16時間撹拌し、MeOHで希釈し、プレパラティブHPLC(0.1％TFA含有H2O/MeOHバッファー)により精製して、生成物をジアステレオマー混合物として得た。該物質をプレパラティブHPLC(10mM NH4OAc含有H2O/CH3CNバッファー)により再精製し、２セットの異性体生成物を得た: ラセミ体対A: 逆相HPLCにおいてより短い保持時間である生成物、rac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-2-(2-(ジメチルアミノ)-1R-メチルエチル)-N7-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-N3a,N3a-ジメチル-1,2,3,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-3a,7(4H)-ジカルボキサミド(6.2 mg, 9.0 μmol, 18％ 収率)、オフホワイト色の固形物として。 LCMS: m/e 693 (M+H)+, 保持時間 2.30 分, 4 分グラジエント. カラム: phenomenex 10u C18 4.6 x 30 mm; ラセミ体対B: 逆相HPLCにおいてより長い保持時間である生成物、rac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-2-(2-(ジメチルアミノ)-1S-メチルエチル)-N7-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-N3a,N3a-ジメチル-1,2,3,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-3a,7(4H)-ジカルボキサミド(2.4 mg, 3.5 μmol, 7％ 収率)、オフホワイト色の固形物として。 1HNMR (300 MHz, CD3OD) δ 0.26 (d, J = 6.2 Hz, 3H), 1.18 - 2.25 (m, 12H), 2.34 (d, J = 9.9 Hz, 1H), 2.61 (s, 6H), 2.54 - 2.88 (m, 3H), 2.91 (s, 6H), 2.94 - 3.38 (m, 7H), 3.91 (s, 3H), 3.98 - 4.08 (m, 2H), 4.56 (d, J = 15.0 Hz, 1H), 4.78 - 4.94 (m, 1H), 7.06 (dd, J = 8.4, 2.6 Hz, 1H), 7.17 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.40 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.77 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.82 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 8.17 (s, 1H). LCMS: m/e 693 (M+H)+, 保持時間 2.43 分, 4 分グラジエント. カラム: phenomenex 10u C18 4.6 x 30 mm.
【００９４】
実施例 18
【化２８】
rac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-N7-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-N3a,N3a-ジメチル-2-((1-メチル-1H-イミダゾール-5-イル)メチル)-1,2,3,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-3a,7(4H)-ジカルボキサミド
rac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-N7-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-N3a,N3a-ジメチル-1,2,3,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-3a,7(4H)-ジカルボキサミド(30 mg, 0.049 mmol)／MeOH(2 mL)のスラリーに、1-メチル-1H-イミダゾール-5-カルバルデヒド(16.3 mg, 0.15 mmol)、次いでNaCNBH3(9.3 mg, 0.15 mmol)を加えた。該反応混合液を室温で4時間撹拌し、THF(1 mL)で希釈し、さらなる1-メチル-1H-イミダゾール-5-カルバルデヒド(25 mg)で処理した。該反応混合液を室温で16時間撹拌し、DMF(1 mL)で希釈し、さらなるNaCNBH3(10 mg)で処理した。該反応混合液を室温で1日間撹拌し、MeOHで希釈し、プレパラティブHPLC(0.1％TFA含有H2O/MeOHバッファー)により精製して、rac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-N7-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-N3a,N3a-ジメチル-2-((1-メチル-1H-イミダゾール-5-イル)メチル)-1,2,3,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-3a,7(4H)-ジカルボキサミド(20.2 mg, 0.029 mmol, 58％ 収率)を白色の固形物として得た。 1HNMR (300 MHz, CD3OD) δ 1.25 - 1.65 (m, 4H), 1.77 - 2.23 (m, 7H), 2.66 (d, J = 10.6 Hz, 1H), 2.94 - 3.07 (m, 2H), 3.05 (s, 6H), 3.10 - 3.35 (m, 6H), 3.51 (d, J = 15.0 Hz, 1H), 3.58 (d, J = 15.0 Hz, 1H), 3.64 (s, 3H), 3.79 (d, J = 10.6 Hz, 1H), 3.91 (s, 3H), 4.04 (d, J = 15.0 Hz, 1H), 4.15 (dd, J = 10.6, 7.7 Hz, 1H), 4.52 (d, J = 15.0 Hz, 1H), 7.06 - 7.15 (m, 3H), 7.41 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.65 (dd, J = 8.4, 1.5 Hz, 1H), 7.95 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 8.03 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 8.55 (ブロードのs, 1H). LCMS: m/e 702 (M+H)+, 保持時間 3.16 分, 4 分グラジエント.
【００９５】
実施例 19
【化２９】
rac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-N7-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-N3a,N3a-ジメチル-2-(1-メチル-L-プロリル)-1,2,3,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-3a,7(4H)-ジカルボキサミド
DMF(1 mL)およびTEA(0.03 mL, 0.2 mmol)中のrac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-N7-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-N3a,N3a-ジメチル-1,2,3,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-3a,7(4H)-ジカルボキサミド(30 mg, 0.049 mmol)および(S)-1-メチルピロリジン-2-カルボン酸塩酸塩(12.3 mg, 0.074 mmol)の溶液に、HATU(37.5 mg, 0.099 mmol)を加えた。該反応混合液を室温で3時間撹拌し、MeOHで希釈し、プレパラティブHPLC(0.1％TFA含有H2O/MeOHバッファー)により精製して、rac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-N7-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-N3a,N3a-ジメチル-2-(1-メチル-L-プロリル)-1,2,3,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-3a,7(4H)-ジカルボキサミド(24.3 mg, 0.034 mmol, 69％ 収率)を白色の固形物として得た。ジアステレオマーの複合混合物。 1HNMR(300 MHz, CD3OD) δ 1.21 - 2.26 (m, 14H), 2.51 - 3.07 (m, 11H), 3.10 - 3.30 (m, 6H), 3.43 - 3.86 (m, 3H), 3.94 (s, 3H), 3.91 - 4.65 (m, 5H), 4.72 - 4.96 (m, 1H), 7.07 - 7.15 (m, 1H), 7.26 - 7.33 (m, 1H), 7.40 -7.50 (m, 1H), 7.53 - 7.72 (m, 1H), 7.87 - 7.99 (m, 1H), 8.16 - 8.21 (m, 1H). LCMS: m/e 719 (M+H)+, 保持時間 3.21 分, 4 分グラジエント.
【００９６】
本発明は前述の例示的な実施例に限定されず、そしてその本質的特性から逸脱することなく他の特定の形態において具体化することができることが当業者には明白であろう。従って該実施例は、あらゆる点で、制限するものではなく例示的なものとしてみなされ、そして、前述の実施例に対してよりはむしろ特許請求の範囲を参照すべきであり、従って、特許請求の範囲と同等の意味および範囲内となる全ての変更を包含すると意図することが望ましい。
【関連出願】
【０００１】
（関連出願の相互参照）
本出願は、2008年3月27日に出願された米国仮特許出願第61/039973号の利益を主張する。
【技術分野】
【０００２】
（発明の背景）
本発明は概して、C型肝炎ウイルス(HCV)に対する活性を有し、HCVに感染した者の治療に有用である、式Iの新規化合物およびその塩に関する。本発明はまた、これら化合物を用いた組成物および方法にも関する。
【背景技術】
【０００３】
C型肝炎ウイルス(HCV)は主要なヒト病原体であり、世界中で推定1億7千万人が感染しており-これはヒト免疫不全ウイルス１型による感染数のおよそ５倍である。これらHCV感染者のかなりの割合が、肝硬変および肝細胞癌を含む重篤な進行性肝疾患を発症する(非特許文献１)。
【０００４】
HCVはプラス鎖RNAウイルスである。5'非翻訳領域における推定アミノ酸配列および広範な類似性の比較に基づいて、HCVはフラビウイルス科の独立した属として分類されている。フラビウイルス科の全てのメンバーは、単一の連続したオープンリーディングフレームの翻訳を介して全ての公知のウイルス-特異的タンパク質をコードするプラス鎖RNAゲノムを含有するエンベロープに包まれたビリオンを有する。
【０００５】
HCVゲノム全体にわたって、ヌクレオチドおよびコードされたアミノ酸配列内に、かなりの多様性が見いだされる。少なくとも６つの主要な遺伝子型がキャラクタライズされており、50を超えるサブタイプが記載されている。HCVの主要な遺伝子型は世界的な分布において異なっており、病原性および治療法における遺伝子型の影響の可能性についての多くの研究にもかかわらず、HCVの遺伝的多様性の臨床的意義は依然として捉えにくい。
【０００６】
一本鎖HCV RNAゲノムは約9500ヌクレオチド長であり、約3000のアミノ酸である単一の大きなポリタンパク質をコードする単一のオープンリーディングフレーム(ORF)を有する。感染細胞において、このポリタンパク質は、細胞プロテアーゼおよびウイルスプロテアーゼにより複数の部位で切断され、構造タンパク質および非構造(NS)タンパク質を生じる。HCVの場合、成熟非構造タンパク質(NS2、NS3、NS4A、NS4B、NS5A、およびNS5B)の生成は、２つのウイルスプロテアーゼによりもたらされる。１つめのものはメタロプロテアーゼであり、NS2-NS3接合部を切断すると考えられており; ２つめは、NS3のN-末端領域内に含まれるセリンプロテアーゼ(NS3プロテアーゼとも言う)であり、NS3の下流、すなわちNS3-NS4A切断部位においてシスで、残りのNS4A-NS4B、NS4B-NS5A、NS5A-NS5B部位についてトランスでの両方における以降の切断の全てを仲介する。該NS4Aタンパク質は複数の機能を果たすと思われ、NS3プロテアーゼの補助因子として作用し、NS3および他のウイルスのレプリカーゼ成分の膜局在をおそらく補助している。NS3タンパク質とNS4Aとの複合体形成は、イベントの進行、全ての部位におけるタンパク質分解効率の増強に必要であると思われる。該NS3タンパク質はまた、ヌクレオシドトリホスファターゼおよびRNAヘリカーゼ活性を示す。NS5B(HCVポリメラーゼとも言う)は、HCVの複製に関与するRNA-依存性RNAポリメラーゼである。HCV NS5Bタンパク質は非特許文献１および２に記載されている。
【０００７】
現在、最も有効なHCVの治療法は、α-インターフェロンとリバビリンの組み合わせを用いており、40％の患者において持続的効果をもたらしている(非特許文献４)。最近の臨床結果は、ペグα-インターフェロンが単独療法としては未修飾のα-インターフェロンよりも優れていることを示す (非特許文献５)。しかしながら、ペグα-インターフェロンとリバビリンの組み合わせを含む実験的な治療レジメンでも、かなりの割合の患者において、ウイルス量の持続的な減少が認められない。従って、HCV感染症の治療に対する有効な治療薬の開発が明確にかつ切実に必要とされている。
【０００８】
本発明は技術的利点をもたらし、例えば、該化合物は新規であり、C型肝炎に対して有効である。また、該化合物は、例えば、それらの作用メカニズム、結合、阻害効果、標的選択性、溶解性、安全性プロファイルまたは生物学的利用能のうちの１つ以上に関して、医薬用途における利点をもたらす。
【０００９】
HCV NS5B阻害剤は特許文献１に記載されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１０】
【特許文献１】米国特許第7,399,758号
【非特許文献】
【００１１】
【非特許文献１】Lauer, G. M.; Walker, B. D. N. Engl. J. Med. 2001, 345, 41-52
【非特許文献２】“Structural Analysis of the Hepatitis C Virus RNA Polymerase in Complex with Ribonucleotides” (Bressanelli; S. et al., Journal of Virology 2002, 3482-3492）
【非特許文献３】Defrancesco and Rice, Clinics in Liver Disease 2003, 7, 211-242.
【非特許文献４】Poynard, T. et al. Lancet 1998, 352, 1426-1432
【非特許文献５】Zeuzem, S. et al. N. Engl. J. Med. 2000, 343, 1666-1672
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１２】
（発明の詳細）
本発明は、医薬的に許容される式Iの化合物およびその塩、ならびにこれらの化合物を用いた組成物および治療方法を包含する。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
本発明の一態様は、式I
【化１】
［式中、
R1はCO2R7またはCONR8R9であり;
R2は水素またはアルキルであり;
R3は水素またはアルキルであるか;あるいは、
NR2R3は一緒になってアゼチジニル、ピロリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、N-(アルキル)ピペラジニル、モルホリニル、チオモルホリニル、ホモピペリジニル、もしくはホモモルホリニルであって、0〜3個のアルキル置換基で置換されているか;または、
NR2R3は一緒になって、
【化２】
であり;
R4は水素、アルキル、アルキルCO、(R13)アルキル、((R13)アルキル)CO、(R13)CO、(R13)COCO、(Ar1)アルキル、(Ar1)CO、または(Ar1)COCOであり;
R5は水素、ハロ、アルキル、アルケニル、ヒドロキシ、ベンジルオキシ、またはアルコキシであり;
R6はシクロアルキルであり;
R7は水素またはアルキルであり;
R8は水素、アルキル、アルキルSO2、シクロアルキルSO2、ハロアルキルSO2、(R10)(R11)NSO2、または(R12)SO2であり;
R9は水素またはアルキルであり;
R10は水素またはアルキルであり;
R11は水素またはアルキルであり;
R12はアゼチジニル、ピロリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、N-(アルキル)ピペラジニル、モルホリニル、チオモルホリニル、ホモピペリジニル、またはホモモルホリニルであり;
R13はアミノ、アルキルアミノ、またはジアルキルアミノであるか、
あるいは、R13はアゼチジニル、ピロリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、N-(アルキル)ピペラジニル、モルホリニル、チオモルホリニル、ホモピペリジニル、またはホモモルホリニルであって、0〜3個のアルキル置換基で置換されており;
R14は水素、アルキル、シクロアルキル、(シクロアルキル)アルキル、アルキルカルボニル、シクロアルキルカルボニル、ハロアルキルカルボニル、アルコキシカルボニル、アルキルSO2、シクロアルキルSO2、ハロアルキルSO2、アミノカルボニル、(アルキルアミノ)カルボニル、(ジアルキルアミノ)カルボニル、ベンジル、ベンジルオキシカルボニル、またはピリジニルであり;および、
Ar1はフェニル、ピロリル、ピラゾリル、イミダゾリル、またはトリアゾリルであって、0〜2個のアルキル置換基で置換されている］
の化合物もしくは医薬的に許容されるその塩である。
【００１４】
本発明の別の態様は、R1がCONR8R9であり;R2がアルキルであり;R3がアルキルであるか;あるいはNR2R3が一緒になって2個のアルキル置換基で置換されたモルホリニルであり;R4が水素、アルキル、アルキルCO、(R13)アルキル、((R13)アルキル)CO、(R13)CO、(R13)COCO、(Ar1)アルキル、または(Ar1)COであり;R5がアルコキシであり;R6がシクロアルキルであり;R8が(R10)(R11)NSO2であり;R9が水素であり;R10がアルキルであり;R11がアルキルであり;R13がジアルキルアミノであるか、またはR13がピロリジニルであって0〜3個のアルキル置換基で置換されており;および、Ar1がフェニルまたはイミダゾリルであって0〜2個のアルキル置換基で置換されている、式Iの化合物もしくは医薬的に許容されるその塩である。
【００１５】
本発明の別の態様は、R1がCONHSO2NMe2であり;R2がメチルであり;R3がメチルであるか;あるいはNR2R3が一緒になって2個のメチル置換基で置換されたモルホリニルであり;R4が水素、メチル、イソプロピル、ベンジル、アセチル、CONMe2、N,N-ジメチルアミノプロピル、COCH2NMe2、COCONMe2、(メチルイミダゾリル)メチル、(メチルイミダゾリル)CO、または(メチルピロリジニル)COであり;R5がメトキシであり;R6がシクロヘキシルである、式Iの化合物もしくは医薬的に許容されるその塩である。
【００１６】
本発明の別の態様は、R1がCONR8R9であり;R8がアルキルSO2、シクロアルキルSO2、ハロアルキルSO2、(R10)(R11)NSO2、または(R12)SO2であり;およびR9が水素である、式Iの化合物である。
【００１７】
本発明の別の態様は、R5が水素である式Iの化合物である。
【００１８】
本発明の別の態様は、R5がメトキシである式Iの化合物である。
【００１９】
本発明の別の態様は、R6がシクロヘキシルである式Iの化合物である。
【００２０】
本発明の別の態様は、R8が(R10)(R11)NSO2または(R12)SO2である式Iの化合物である。
【００２１】
本発明の別の態様は、以下の立体化学
【化３】
を有する式Iの化合物である。
【００２２】
本発明の別の態様は、以下の立体化学
【化４】
を有する式Iの化合物である。
【００２３】
式Iの化合物に関して、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13、R14、およびAr1を含む可変置換基のいずれの場合の範囲も、可変置換基のいずれの他の場合の範囲と独立して用いることができる。そのようなものとして、本発明は異なる態様の組み合わせを含む。
【発明を実施するための形態】
【００２４】
他に特別の定めのない限り、これらの用語は以下の意味を有する。「アルキル」は、1〜6個の炭素から成る直鎖もしくは分枝鎖アルキル基を意味する。「アルケニル」は、少なくとも１個の二重結合を有する、2〜6個の炭素から成る直鎖または分枝鎖アルキル基を意味する。「アルキニル」は、少なくとも１個の三重結合を有する、2〜6個の炭素から成る直鎖または分枝鎖アルキル基を意味する。「シクロアルキル」は、3〜7個の炭素から成る単環系を意味する。「ハロアルキル」および「ハロアルコキシ」は、モノハロからペルハロまでの全てのハロゲン化異性体を含む。炭化水素部分(例えば、アルコキシ)を有する用語は、炭化水素部分についての直鎖および分枝鎖異性体を含む。括弧（Parenthetic）および複数の括弧（multiparenthetic）でくくられた用語は、当業者に対して結合関係を明確にすることを目的としている。例えば、((R)アルキル)のような用語は、置換基Rでさらに置換されたアルキル置換基を意味する。
【００２５】
本発明には、該化合物の医薬的に許容される塩形態の全てが含まれる。医薬的に許容される塩は、その対イオンが化合物の生理学的活性または毒性、および薬理学的な同等物としての機能にほとんど寄与しないものである。これらの塩は、市販の試薬を用いた一般的な有機化学技術に従って製造することができる。いくつかのアニオン塩形態としては、酢酸塩、アシストレート、ベシル酸塩、臭化物塩、塩化物塩、クエン酸塩、フマル酸塩、グルコウロン酸塩（glucouronate）、臭化水素塩、塩化水素塩、ヨウ化水素塩、ヨウ化物塩、乳酸塩、マレイン酸塩、メシル酸塩、硝酸塩、パモ酸塩、リン酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、トシレート、およびキシノホエート（xinofoate）が挙げられる。いくつかのカチオン塩形態としては、アンモニウム塩、アルミニウム塩、ベンザチン塩、ビスマス塩、カルシウム塩、コリン塩、ジエチルアミン塩、ジエタノールアミン塩、リチウム塩、マグネシウム塩、メグルミン塩、4-フェニルシクロヘキシルアミン塩、ピペラジン塩、カリウム塩、ナトリウム塩、トロメタミン塩、および亜鉛塩が挙げられる。
【００２６】
いくつかの本発明の化合物は、不斉炭素原子を有している(例えば、以下の化合物を参照)。本発明には、エナンチオマーおよびジアステレオマー並びに立体異性体の混合（例えばラセミ体）を含む、全ての立体異性体が含まれる。いくつかの立体異性体は、当分野で公知の方法を用いて製造することができる。 該化合物の立体異性体の混合物および関連する中間体は、当分野で公知の方法に従って、個々の異性体に分離することができる。
【化５】
【００２７】
（合成方法）
該化合物は、以下に記載のものおよび当分野の技術内における改変を含む、当分野で公知の方法によって製造されうる。いくつかの試薬および中間体が当分野においては公知である。他の試薬および中間体を、容易に入手可能な物質を用いて当分野で公知の方法により製造することができる。該化合物の合成を説明するために用いる変数(例えば、番号が付けられた「R」置換基)は、製造方法を例示することのみを意図し、特許請求の範囲または本明細書の他の項で用いられる変数と混同されない。以下の方法は例示目的であり、本発明の範囲を制限するものではない。
【００２８】
スキーム内で用いる略語は、通常、当分野で用いられる慣習に従う。本明細書および実施例で用いる化学的な略語は以下のとおり定義される:「NaHMDS」はナトリウムビス(トリメチルシリル)アミドであり;「DMF」はN,N-ジメチルホルムアミドであり;「MeOH」はメタノールであり;「NBS」はN-ブロモスクシンイミドであり;「Ar」はアリールであり;「TFA」はトリフルオロ酢酸であり;「LAH」は水素化リチウムアルミニウムであり;「BOC」、「DMSO」はジメチルスルホキシドであり;「h」は時間であり;「rt」は室温または保持時間であり(文脈によって決定される);「min」は分であり;「EtOAc」は酢酸エチルであり;「THF」はテトラヒドロフランであり;「EDTA」はエチレンジアミン四酢酸であり;「Et2O」はジエチルエーテルであり;「DMAP」は4-ジメチルアミノピリジンであり;「DCE」は1,2-ジクロロエタンであり;「ACN」はアセトニトリルであり;「DME」は1,2-ジメトキシエタンであり;「HOBt」は1-ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物であり;「DIEA」はジイソプロピルエチルアミン、「Nf」はCF3(CF2)3SO2-であり;「TMOF」はオルトぎ酸トリメチルである。
【００２９】
2-ブロモ-3-シクロヘキシル-1H-インドール-6-カルボン酸アルキルを対応するカルボン酸に加水分解し、標準的なカップリング試薬（例えばカルボニルジイミダゾール(CDI)もしくは1-(3-ジメチルアミノプロピル)-3-エチルカルボジイミド塩酸塩(EDC)）を用いてスルホンアミドまたはスルファミドにカップリングさせることができる(スキーム1参照)。得られたアシルスルホンアミド/アシルスルファミド（acylsufamide）ブロモインドールを、置換もしくは無置換の2-ボロン酸もしくは2-ボロン酸エステルベンズアルデヒドを用いて公知のパラジウム触媒カップリング反応で処理することができる。得られた環状ヘミアミナールは、時々、関連するアリールアルデヒドと平衡状態で存在することが観察され、塩基性反応条件下において、高温での2-(ジアルコキシホスホリル)アクリル酸アルキルを用いた公知の環化により、置換7H-インドロ[2,1-a][2]ベンゾアゼピンを得ることができる。
スキーム1
【化６】
【００３０】
次いで、7H-インドロ[2,1-a][2]ベンゾアゼピンのα,δ-不飽和エステルを、保護されたN-(アルコキシオキシメチル)-N-(トリメチルシリルメチル)アミンと反応させて、保護されたピロリジンを形式的[3+2]-環付加生成物として得ることができる(スキーム2参照)。該ネオペンチルカルボン酸エステルを加水分解して、得られたカルボン酸を、標準的なアミド形成試薬、例えば、HATU、CDI、DCCおよびTBTUを用いて、様々な第一級もしくは第二級アミンにカップリングさせることができる。該ピロリジン保護基がベンジルである場合、水素付加によって、本発明に記載の分子の製造において有用な中間体を得ることができる。
スキーム2
【化７】
【００３１】
縮合ピロリジンの第二級アミンを、いくつかの公知の技法を用いて官能化することができる(スキーム3参照)。ケトンもしくはアルデヒドを酸性条件下において第二級アミンと反応させて、イミニウム中間体を製造することができ、それをそのまま水素化物還元剤（例えばNaBH4もしくはNaCNBH3）により還元して、アルキル化アミンを得ることができる。縮合ピロリジンの第二級アミンとの反応において、カップリング試薬（例えばHATU、CDI、DCCおよびTBTU）およびカルボン酸を用いて、アミドを得ることができる。塩基性反応条件下においてカルバミルクロリドを用いて、第二級アミンからウレアを得ることができる。
スキーム3
【化８】
【００３２】
反応順序の順番は変更することができる。例えば、ピロリジンを脱保護および官能化した後で、ネオペンチルエステルを加水分解（hydrolysized）および官能化することができる。
【００３３】
（生物学的方法）
該化合物は、以下のHCV RdRpアッセイにおいて決定されるように、HCV NS5Bに対する活性を示した。
【００３４】
HCV NS5B RdRpクローニング、発現、および精製
HCVのNS5Bタンパク質、遺伝子型1bをコードするcDNAをpET21a発現ベクターにクローニングした。該タンパク質を18個のアミノ酸のC-末端トランケーションで発現させ、溶解性を高めた。大腸菌コンピテント細胞株BL21(DE3)を、該タンパク質の発現に用いた。培養物が600 nmで吸光度2.0になるまで、37℃で〜4時間培養した。該培養物を20℃に冷却し、1 mM IPTGで誘導した。新たに調製したアンピシリンを最終濃度50 μg/mlに添加し、該細胞を終夜20℃で増殖させた。
【００３５】
細胞ペレット(3L)を溶解して精製し、15〜24 mgの精製NS5Bを得た。該溶解バッファーは、20 mM Tris-HCl、pH 7.4、500 mM NaCl、0.5％ トリトンX-100、1 mM DTT、1mM EDTA、20％ グリセロール、0.5 mg/ml リゾチーム、10 mM MgCl2、15 μg/ml デオキシリボヌクレアーゼI、およびComplete TM protease inhibitor tablets (Roche)から成る。該溶解バッファーの添加後、凍結させた細胞ペレットを、組織ホモジナイザーを用いて再懸濁した。サンプルの粘稠性を減少させるために、溶解物のアリコートを、ブランソン超音波処理器に接続したマイクロチップを用いて氷上で超音波処理した。超音波処理した溶解物を4℃で1時間、100,000 x gで遠心し、0.2 μm フィルターユニット(Corning)を通して濾過した。
【００３６】
該タンパク質を、３つの連続したクロマトグラフィー工程: Heparin sepharose CL-6B、polyU sepharose 4B、およびHitrap SP sepharose(Pharmacia)を用いて精製した。該クロマトグラフィーバッファーは溶解バッファーと同じであるが、リゾチーム、デオキシリボヌクレアーゼI、MgCl2またはプロテアーゼインヒビターを含まず、バッファーのNaCl濃度はカラムへのタンパク質の充填要件に従って調節した。カラムの種類に応じて5〜50のカラム容積の様々な長さの各カラムを、NaCl勾配で溶出した。最終クロマトグラフィー工程の後、得られた酵素の純度はSDS-PAGE分析に基づき＞90％である。該酵素をアリコートにして-80℃で保存した。
【００３７】
標準的HCV NS5B RdRp酵素アッセイ
HCV RdRp 遺伝子型1bアッセイを、96ウェルプレート(Costar 3912)において、最終量60 mlで行った。該アッセイバッファーは、20 mM Hepes、pH 7.5、2.5 mM KCl、2.5 mM MgCl2、1 mM DTT、1.6 U RNAseインヒビター(Promega N2515)、0.1 mg/ml BSA(Promega R3961)、および2％グリセロールから成る。全ての化合物をDMSO中に連続的に希釈(3倍)し、アッセイにおけるDMSOの最終濃度が2％であるように、水にさらに希釈した。HCV RdRp 遺伝子型1b酵素は最終濃度28 nMで用いた。ポリA鋳型は6 nMで用い、ビオチン標識オリゴ-dT12プライマーは180 nM最終濃度で用いた。鋳型は商業的に入手した(Amersham 27-4110)。ビオチン標識プライマーはSigma Genosysにより調製された。3H-UTPは0.6 mCi(0.29 mM 総UTP)で用いた。反応は、酵素の添加により開始し、30℃で60分間インキュベートし、SPAビーズ(4 mg/ml, Amersham RPNQ 0007)を含有する50 mM EDTAを25 ml添加することにより停止させた。室温で＞1時間インキュベートした後、プレートをPackard Top Count NXTで測定した。
【００３８】
修飾HCV NS5B RdRp酵素アッセイ
修飾酵素アッセイを、以下の点を除いて、原則的に標準的な酵素アッセイの記載の通り実施した。ビオチン標識オリゴdT12プライマーを、アッセイバッファー中でプライマーとビーズを混合し、室温で1時間インキュベートすることにより、ストレプトアビジンでコーティングしたSPAビーズ上に予め結合させた。未結合のプライマーを遠心して除去した。該プライマー-結合ビーズを20 mM Hepesバッファー、pH 7.5に再懸濁し、最終濃度20 nMのプライマーおよび0.67 μg/mlのビーズでアッセイに用いた。アッセイにおける添加順序: 酵素(14 nM)を希釈した化合物に添加し、続いて、鋳型の混合物(0.2 nM)、3H-UTP(0.6 μCi, 0.29 μM)、およびプライマー結合ビーズを添加して反応を開始し;濃縮して最終物を得た。反応は、30℃で4時間行った。
【００３９】
化合物のIC50値を、７つの異なる[I]を用いて決定した。IC50値を、式 y = A+((B-A)/(1+((C/x)^D)))を用いて、阻害から算出した。
【００４０】
FRETアッセイの準備
HCV FRETスクリーニングアッセイを、96-ウェル細胞培養プレートを用いて実施した。該FRETペプチド(Anaspec, Inc.) (Taliani et al., Anal. Biochem. 1996, 240, 60-67)は、ペプチドの一方の端付近に蛍光ドナー、EDANSを有し、もう一方の端付近にアクセプター、DABCYLを有する。. ペプチドの蛍光発光はドナーおよびアクセプター間の分子間共鳴エネルギー移動(RET)によりクエンチされるが、NS3プロテアーゼがペプチドを開裂すると、該生成物がRETクエンチから解除され、ドナーの蛍光発光が明らかになる。該アッセイ試薬は以下のとおり調製した:5X細胞ルシフェラーゼ細胞培養溶解試薬（cell Luciferase cell culture lysis reagent）（Promega製）(#E153A)をdH2Oで1Xに希釈し、NaClを150 mM 最終に添加し、該FRETペプチドを2 mM 原液から20 μM 最終に希釈した。
【００４１】
プレートの調製のため、ウミシイタケルシフェラーゼレポーター遺伝子（Renilla luciferase reporter gene）の有無にかかわらず、HCVレプリコン細胞をトリプシン処理し、96-ウェルプレートの各ウェルに入れ、列3から12に滴定した試験化合物を添加し;列1および2はコントロール化合物(HCVプロテアーゼインヒビター)を含み、一番下の列は化合物を有しない細胞である。次いで、該プレートを、37℃のCO2インキュベーターに設置した。
【００４２】
アッセイ
上記(FRETアッセイの準備)の試験化合物の添加後、様々な時点で、該プレートを取り出し、細胞毒性の測定としてアラマーブルー溶液（Alamar blue solution）(Trek Diagnostics, #00-100)をウェルごとに添加した。Cytoflour 4000装置(PE Biosystems)における測定後、プレートをPBSですすぎ、次いで、30 μlの上記(FRETアッセイの準備)のFRETペプチドアッセイ試薬をウェルごとに添加することにより、FRETアッセイに用いた。その後、該プレートを、340励起/490発光、20サイクルの自動モードにセットされたCytoflour 4000装置に設置し、キネティックモード（kinetic mode）で測定した。通常、測定後のエンドポイント分析によるシグナル対ノイズは、少なくとも3倍であった。別法として、アラマーブルー測定後に、プレートをPBSですすぎ、フェノールレッドを含まない50 μlのDMEM(高グルコース)を添加した後、プレートをPromega Dual-Glo Luciferase Assay Systemを用いたルシフェラーゼアッセイに用いた。
【００４３】
化合物分析は、相対的HCVレプリコン阻害および相対的細胞毒性値の定量化により決定した。細胞毒性値（cytoxicity value）の算出のため、コントロールウェルからの平均アラマーブルー蛍光シグナルを100％無毒とした。次いで、化合物試験ウェルのそれぞれにおける個々のシグナルを平均コントロールシグナルで割り、100％をかけて細胞毒性率を決定した。HCVレプリコン阻害値の算出のため、平均バックグラウンド値を、アッセイの最終時点で最高量のHCVプロテアーゼインヒビターを含有する２つのウェルから得た。これらの数値は、未処理Huh-7細胞から得られたものと類似していた。
【００４４】
次いで、コントロールウェルから得た平均シグナルから該バックグラウンド値を引き、この値を100％活性として用いた。その後、各化合物試験ウェルにおける個々のシグナルを、バックグラウンド値を引いた後の平均コントロール値で割り、100％をかけて活性率を決定した。プロテアーゼインヒビター滴定のEC50値は、FRETまたはルシフェラーゼ活性の50％低下を引き起こす濃度として算出した。化合物プレートにおいて得られた２つの値、細胞毒性（cytoxicity）率および活性率を用いてさらなる分析に関心が持たれる化合物を決定した。
【００４５】
化合物の代表的なデータを表１に報告する。
表1
【表１】
【表２】
【表３】
A＞0.5 μM; B 0.02 μM - 0.5 μM; C＜0.02 μM（しかし、正確な値は決定しなかった）;IC50値は、プレインキュベーション方法を用いて決定した。EC50値は、FRETアッセイを用いて決定した。
【００４６】
（医薬組成物および治療方法）
該化合物は、HCV NS5Bに対する活性を示し、HCVおよびHCV感染症の治療に有用であり得る。従って、本発明の別の態様は、式Iの化合物もしくは医薬的に許容されるその塩、および医薬的に許容される担体を含む組成物である。
【００４７】
本発明の別の態様は、C型肝炎の治療のための医薬の製造における式Iの化合物の使用である。
【００４８】
本発明の別の態様は、抗HCV活性を有する化合物をさらに含有する組成物である。
【００４９】
本発明の別の態様は、抗HCV活性を有する化合物がインターフェロンである組成物である。本発明の別の態様は、該インターフェロンがインターフェロンα2B、ペグインターフェロンα、コンセンサスインターフェロン、インターフェロンα2A、もしくはリンパ芽球様インターフェロンタウから選択される。
【００５０】
本発明の別の態様は、抗HCV活性を有する化合物がシクロスポリンである組成物である。本発明の別の態様は、該シクロスポリンがシクロスポリンAである。
【００５１】
本発明の別の態様は、抗HCV活性を有する化合物が、インターロイキン2、インターロイキン6、インターロイキン12、1型ヘルパーＴ細胞応答の発生を増強する化合物、干渉RNA、アンチセンスRNA、イミキモド（Imiqimod）、リバビリン、イノシン5'-一リン酸脱水素酵素インヒビター、アマンタジン、およびリマンタジンからなる群から選択される組成物である。
【００５２】
本発明の別の態様は、抗HCV活性を有する化合物が、HCV感染症の治療のために、HCVメタロプロテアーゼ、HCVセリンプロテアーゼ、HCVポリメラーゼ、HCVヘリカーゼ、HCV NS4Bタンパク質、HCVエントリー、HCVアセンブリ、HCVイグレス、HCV NS5Aタンパク質、IMPDH、およびヌクレオシドアナログから選択される標的の機能を阻害するのに有効である、組成物である。
【００５３】
本発明の別の態様は、式Iの化合物もしくは医薬的に許容されるその塩、医薬的に許容される担体、インターフェロンおよびリバビリンを含む組成物である。
【００５４】
本発明の別の態様は、HCVレプリコンに式Iの化合物または医薬的に許容されるその塩を接触させることを含む、HCVレプリコンの機能を阻害する方法である。
【００５５】
本発明の別の態様は、HCV NS5Bタンパク質に式Iの化合物または医薬的に許容されるその塩を接触させることを含む、HCV NS5Bタンパク質の機能を阻害する方法である。
【００５６】
本発明の別の態様は、患者に治療上有効な量の式Iの化合物または医薬的に許容されるその塩を投与することを含む、患者におけるHCV感染症の治療方法である。別の実施態様において、該化合物はHCVレプリコンの機能を阻害するのに有効である。別の実施態様において、該化合物はHCV NS5Bタンパク質の機能を阻害するのに有効である。
【００５７】
本発明の別の態様は、患者に治療上有効な量の式Iの化合物または医薬的に許容されるその塩を、抗HCV活性を有する別の化合物とともに(前、後、もしくは同時に)投与することを含む、患者におけるHCV感染症の治療方法である。
【００５８】
本発明の別の態様は、抗HCV活性を有する他の化合物がインターフェロンである、該方法である。
【００５９】
本発明の別の態様は、該インターフェロンがインターフェロンα2B、ペグインターフェロンα、コンセンサスインターフェロン、インターフェロンα2A、およびリンパ芽球様インターフェロンタウから選択される、該方法である。
【００６０】
本発明の別の態様は、抗HCV活性を有する他の化合物がシクロスポリンである、該方法である。
【００６１】
本発明の別の態様は、該シクロスポリンがシクロスポリンAである、該方法である。
【００６２】
本発明の別の態様は、抗HCV活性を有する他の化合物が、インターロイキン2、インターロイキン6、インターロイキン12、1型ヘルパーＴ細胞応答の発生を増強する化合物、干渉RNA、アンチセンスRNA、イミキモド、リバビリン、イノシン5'-一リン酸脱水素酵素インヒビター、アマンタジン、またはリマンタジンから選択される、該方法である。
【００６３】
本発明の別の態様は、HCV感染症の治療のために、抗HCV活性を有する他の化合物が、HCVメタロプロテアーゼ、HCVセリンプロテアーゼ、HCVポリメラーゼ、HCVヘリカーゼ、HCV NS4Bタンパク質、HCVエントリー、HCVアセンブリ、HCVイグレス、HCV NS5Aタンパク質、IMPDH、およびヌクレオシドアナログからなる群から選択される標的の機能を阻害するのに有効である、該方法である。
【００６４】
本発明の別の態様は、抗HCV活性を有する他の化合物がHCV NS5Bタンパク質以外のHCVの生活環における標的の機能を阻害するのに有効である、該方法である。
【００６５】
「治療上有効な」とは、肝炎およびHCV感染症の分野の医師には明らかであるように、有意義な患者利益をもたらすのに必要な薬剤の量を意味する。
【００６６】
「患者」とは、肝炎およびHCV感染症の分野の医師には明らかであるように、HCVウイルスに感染しており、療法に適した患者を意味する。
【００６７】
「治療」、「療法」、「レジメン」、「HCV感染症」および関連する用語が、肝炎およびHCV感染症の分野の医師には明らかであるように、用いられる。
【００６８】
本発明の化合物は、通常、治療上有効な量の化合物またはその医薬的に許容される塩および医薬的に許容される担体を含む医薬組成物として提供され、通常の賦形剤を有してもよい。治療上有効な量は、有意義な患者利益をもたらすのに必要とされるものである。医薬的に許容される担体は、許容される安全性プロファイルを有する従来既知の担体である。組成物は、カプセル剤、錠剤、トローチ剤（losenge）、および散剤ならびに液体懸濁剤、シロップ剤、エリキシル剤（elixer）、および液剤を含む、全ての一般的な固形および液状形態を包含する。組成物は一般的な製剤技術を用いて製造され、通常の賦形剤(例えば結合剤および湿潤剤)およびベヒクル(例えば水およびアルコール)が組成物に一般的に用いられる。
【００６９】
固体組成物は通常、用量当たり約1〜1000 mgの活性成分を提供するように、用量単位および組成物中に製剤化することが好ましい。投与量のいくつかの例は、1 mg、10 mg、100 mg、250 mg、500 mg、および1000 mgである。通常、他の薬剤は、臨床的に用いられる種類の薬剤と同様の単位範囲で存在するであろう。典型的には、これは0.25〜1000 mg/単位である。
【００７０】
液体組成物は通常、用量単位内である。通常、液体組成物は1〜100 mg/mLの単位用量内であろう。投与量のいくつかの例は、1 mg/mL、10 mg/mL、25 mg/mL、50 mg/mL、および100 mg/mLである。通常、他の薬剤は、臨床的に用いられる種類の薬剤と同様の単位範囲で存在するであろう。典型的には、これは1〜100 mg/mLである。
【００７１】
本発明は全ての一般的な投与様式を包含し;経口および非経口方法が好ましい。通常、投与レジメンは臨床的に用いられる他の薬剤と同様であろう。典型的には、１日用量は、体重1kg当たり1〜100 mg/日であろう。通常、より多くの化合物が経口で必要とされ、非経口ではあまり必要とされない。しかしながら、具体的な投与レジメンは正確な医学的判断を用いて医師により決定されるであろう。
【００７２】
本発明はまた、該化合物を併用療法で投与する方法も包含する。すなわち、該化合物を、肝炎およびHCV感染症の治療において有用な他の薬剤と同時だが別個に用いることができる。これらの併用方法において、該化合物は通常、体重1kg当たり1〜100 mg/日の１日用量で、他の薬剤と同時に投与され得る。他の薬剤は通常、治療に用いられる量で投与され得る。しかしながら、具体的な投与レジメンは正確な医学的判断を用いて医師により決定されるであろう。
【００７３】
表２に、組成物および方法に適切な化合物のいくつかの例を記載する。
表２
【表４】
【表５】
【表６】
【実施例】
【００７４】
（具体的実施態様の説明）
他に特別な定めのない限り、以下の中間体および実施例についての分析LCMSデータは、以下のカラムおよび条件を用いて得た。停止時間: グラジエント時間 + 1 分; グラジエント時間: 2 分 (他に記載のない限り). 開始濃度: 0％ B 他に記載のない限り; 終了濃度: 100％ B; 溶出A: 0.1％ TFA含有10 ％ MeOH / 90 ％ H2O; 溶出B: 0.1％ TFA含有90 ％ MeOH / 10 ％ H2O; カラム: Phenomenex 10μ 4.6 x 50 mm C18.
プレパラティブHPLCデータ. グラジエント: 20分にわたる直線. 他に記載のない限り; 開始濃度: 15％ B 他に記載のない限り; 終了濃度: 100％ B; 溶出A: 0.1％ TFA含有10 ％ MeOH / 90 ％ H2O; 溶出B: 0.1％ TFA含有90 ％ MeOH / 10 ％ H2O; カラム: Phenomenex C18 10μ 30 x 100 mm.
【００７５】
中間体1
【化９】
rac-(3aR,14bR)-2-ベンジル-10-シクロヘキシル-7-((ジメチルスルファモイル)カルバモイル)-13-メトキシ-1,2,3,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-3a(4H)-カルボン酸メチル
N-(メトキシメチル)-N-(トリメチルシリルメチル)ベンジルアミン(0.70 mL, 2.7 mmol)を、5mM TFA／THF溶液(10 mL, 0.050 mmol)に溶解させた13-シクロヘキシル-10-((ジメチルスルファモイル)カルバモイル)-3-メトキシ-7H-インドロ[2,1-a][2]ベンゾアゼピン-6-カルボキシレート(500 mg, 0.91 mmol)の溶液に、窒素下において、滴下した。該反応混合液を16時間撹拌し、さらなるN-(メトキシメチル)-N-(トリメチルシリルメチル)ベンジルアミン(0.40 mL, 1.6 mmol)を加えた。該反応混合液を16時間撹拌し、NH4Cl水溶液(20 mL)でクエンチし、EtOAc(20 mL)で抽出した。有機層を、NaHCO3(20 mL)および食塩水(15 mL)で洗浄し、乾燥させ(MgSO4)、濾過し、濃縮して、rac-(3aR,14bR)-2-ベンジル-10-シクロヘキシル-7-((ジメチルスルファモイル)カルバモイル)-13-メトキシ-1,2,3,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-3a(4H)-カルボン酸メチル(990 mg, 定量的)を黄色の固形物として得た。 1HNMR (300 MHz, CD3OD) δ 1.22 - 1.64 (m, 4H), 1.76 - 2.36 (m, 7H), 2.87 - 3.05 (m, 2H), 3.07 (s, 6H), 3.47 - 3.56 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.92 (s, 3H), 3.99 - 4.16 (m, 4H), 4.32 (d, J = 12.8 Hz, 1H), 4.55 (d, J = 15.0 Hz, 1H), 6.89 - 7.29 (m, 5H), 7.10 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 7.17 (dd, J = 8.4, 2.6 Hz, 1H), 7.44 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.68 (dd, J = 8.4, 1.1 Hz, 1H), 7.88 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 8.00 (d, J = 1.1 Hz, 1H). LCMS: m/e 685 (M+H)+, 保持時間 1.87 分, 2 分グラジエント.
【００７６】
中間体2
【化１０】
rac-(3aR,14bR)-2-ベンジル-10-シクロヘキシル-7-((ジメチルスルファモイル)カルバモイル)-13-メトキシ-1,2,3,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-3a(4H)-カルボン酸
1.0N NaOH水溶液(3 mL, 3.0 mmol)を、THF(10 mL)およびMeOH(10 mL)中のrac-(3aR,14bR)-2-ベンジル-10-シクロヘキシル-7-((ジメチルスルファモイル)カルバモイル)-13-メトキシ-1,2,3,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-3a(4H)-カルボン酸メチル(620 mg, 0.90 mmol)溶液に加えた。該反応液を3日間撹拌し、その後濃縮して有機溶媒を除去した。該残渣をH2O(70 mL)で希釈し、Et2O(2 x 20 mL)で洗浄し、1.0N HCl水溶液(3 mL, 3.0 mmol)で中和して終夜撹拌した。得られた白色の沈殿物を濾過により集め、H2Oで洗浄し、乾燥させて、rac-(3aR,14bR)-2-ベンジル-10-シクロヘキシル-7-((ジメチルスルファモイル)カルバモイル)-13-メトキシ-1,2,3,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-3a(4H)-カルボン酸(596 mg, 0.89 mmol, 99％ 収率)を白色の固形物として得た 1HNMR (300 MHz, CD3OD) δ 1.23 - 1.65 (m, 4H), 1.77 - 2.39 (m, 7H), 2.87 - 3.04 (m, 2H), 3.07 (s, 6H), 3.46 - 3.55 (m, 1H), 3.93 (s, 3H), 3.88 - 4.18 (m, 4H), 4.32 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 4.57 (d, J = 15.0 Hz, 1H), 6.88 - 7.30 (m, 6H), 7.18 (dd, J = 8.4, 2.6 Hz, 1H), 7.46 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.69 (dd, J = 8.8, 1.1 Hz, 1H), 7.89 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 8.02 (ブロードのs, 1H). LCMS: m/e 671 (M+H)+, 保持時間 3.45 分, 4 分グラジエント.
【００７７】
実施例 1
【化１１】
rac-(3aR,14bR)-2-ベンジル-10-シクロヘキシル-3a-(((2S,6R)-2,6-ジメチル-4-モルホリニル)カルボニル)-N-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-1,2,3,3a,4,14b-ヘキサヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-7-カルボキサミド
HATU(360 mg, 0.96 mmol)を、DMF(7 mL)およびTEA(0.4 mL, 3.0 mmol)中のrac-(3aR,14bR)-2-ベンジル-10-シクロヘキシル-7-((ジメチルスルファモイル)カルバモイル)-13-メトキシ-1,2,3,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-3a(4H)-カルボン酸(490 mg, 0.74 mmol)および(2R,6S)-2,6-ジメチルモルホリン(110 mg, 0.96 mmol)のスラリーに加えた。該反応混合液を室温で16時間撹拌し、H2O(10 mL)で希釈し、HCl水溶液(1.0N, 3 mL)でゆっくりとクエンチした。得られたオフホワイト色の沈殿物を濾過により集め、H2Oで洗浄し、乾燥させて粗生成物(705 mg)をオフホワイト色の固形物として得た。40 mgの粗生成物をプレパラティブHPLC(0.1％TFA含有H2O/MeOHバッファー)により精製して、rac-(3aR,14bR)-2-ベンジル-10-シクロヘキシル-3a-(((2S,6R)-2,6-ジメチル-4-モルホリニル)カルボニル)-N-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-1,2,3,3a,4,14b-ヘキサヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-7-カルボキサミド(26.7 mg, 0.034 mmol, 83％)をオフホワイト色の固形物として得た。 1HNMR (300 MHz, CD3OD) δ 1.19 (d, J = 6.2 Hz, 3H), 1.21 (d, J = 5.9 Hz, 3H), 1.25 - 1.59 (m, 4H), 1.77 - 2.33 (m, 8H), 2.82 - 2.97 (m, 3H), 3.06 (s, 6H), 3.45 - 3.78 (m, 4H), 3.94 (s, 3H), 3.91 - 4.12 (m, 4H), 4.27 - 4.39 (m, 1H), 4.42 - 4.54 (m, 2H), 6.91 - 7.30 (m, 5H), 7.18 (dd, J = 8.4, 2.6 Hz, 1H), 7.24 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 7.46 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.69 (dd, J = 8.4, 1.1 Hz, 1H), 7.86 - 7.93 (m, 2H). LCMS: m/e 768 (M+H)+, 保持時間 3.50 分, 4 分グラジエント.
【００７８】
実施例 2
【化１２】
rac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-3a-(((2S,6R)-2,6-ジメチル-4-モルホリニル)カルボニル)-N-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-1,2,3,3a,4,14b-ヘキサヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-7-カルボキサミド
10％ Pd/C(60 mg, 0.056 mmol)を、MeOH/EtOAc/95％EtOH(10:10:1, 21 mL)中のrac-(3aR,14bR)-2-ベンジル-10-シクロヘキシル-3a-(((2S,6R)-2,6-ジメチル-4-モルホリニル)カルボニル)-N-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-1,2,3,3a,4,14b-ヘキサヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-7-カルボキサミド(100 mg, 0.130 mmol)の濁った溶液に加えた。該反応混合液をN2(3x)、次いでH2(3x)で減圧フラッシュし、50 psiのH2下において16時間、パールシェイカー（Parr shaker）で振盪させた。該反応混合液をセライトを通して濾過し、淡黄色の固形物まで濃縮した。該粗固形物をMeOH(4 mL + 2 mL)でトリチュレートし、rac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-3a-(((2S,6R)-2,6-ジメチル-4-モルホリニル)カルボニル)-N-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-1,2,3,3a,4,14b-ヘキサヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-7-カルボキサミド(40 mg, 0.059 mmol)を白色の固形物として得た。該母液を濃縮し、MeOHおよびDMFに溶解させ、プレパラティブHPLC(0.1％TFA含有H2O/MeOHバッファー)により精製して、さらなる生成物(27.7 mg, 0.041 mmol)を淡黄色の固形物として得た。総単離生成物(67.7 mg, 0.10 mmol, 77％)。 1HNMR (300 MHz, CD3OD) δ 1.23 (d, J = 6.2 Hz, 3H), 1.27 (d, J = 6.2 Hz, 3H), 1.29 - 1.70 (m, 4H), 1.77 - 2.25 (m, 6H), 2.30 - 2.43 (m, 1H), 2.64 - 3.05 (m, 3H), 3.03 (s, 6H), 3.11 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 3.45 (dd, J = 8.1, 11.0 Hz, 1H), 3.59 - 3.80 (m, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.98 (d, J = 10.3 Hz, 1H), 4.11 (d, J = 15.4 Hz, 1H), 4.10 - 4.24 (m, 1H), 4.25 - 4.36 (m, 2H), 4.59 (d, J = 15.4 Hz, 1H), 7.19 (dd, J = 8.8, 2.6 Hz, 1H), 7.27 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 7.51 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.67 (dd, J = 8.4, 1.5 Hz, 1H), 7.97 - 8.07 (m, 2H). LCMS: m/e 678 (M+H)+, 保持時間 3.38 分, 4 分グラジエント.
【００７９】
実施例 3
【化１３】
rac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-3a-(((2S,6R)-2,6-ジメチル-4-モルホリニル)カルボニル)-N-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-2-メチル-1,2,3,3a,4,14b-ヘキサヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-7-カルボキサミド
撹拌中のrac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-3a-(((2S,6R)-2,6-ジメチル-4-モルホリニル)カルボニル)-N-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-1,2,3,3a,4,14b-ヘキサヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-7-カルボキサミド(30 mg, 0.044 mmol)／MeOH(2 mL)懸濁液に、37％ホルムアルデヒド水溶液(0.03 mL, 0.40 mmol)、次いでNaCNBH3(20 mg, 0.32 mmol)を加えた。該反応液を室温で終夜撹拌し、DMF/MeOHで希釈し、濾過し、プレパラティブHPLC(0.1％TFA含有H2O/MeOHバッファー)により精製して、rac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-3a-(((2S,6R)-2,6-ジメチル-4-モルホリニル)カルボニル)-N-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-2-メチル-1,2,3,3a,4,14b-ヘキサヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-7-カルボキサミド(19.6 mg, 0.028 mmol, 64％ 収率)をオフホワイト色の固形物として得た。 1HNMR (500 MHz, CD3OD) δ 1.21 (d, J = 6.1 Hz, 3H), 1.24 (d, J = 5.5 Hz, 3H), 1.28 - 1.38 (m, 1H), 1.42 - 1.57 (m, 2H), 1.63 - 1.70 (m, 1H), 1.79 - 1.90 (m, 2H), 1.95 - 2.27 (m, 5H), 2.45 (ブロードのs, 3H), 2.60 - 2.93 (m, 3H), 2.95 - 3.08 (m, 2H), 3.04 (s, 6H), 3.61 - 3.81 (m, 3H), 3.95 (s, 3H), 4.11 - 4.45 (m, 3H), 4.53 - 4.66 (m, 2H), 7.22 (ブロードのd, J = 8.5 Hz, 1H), 7.26 (ブロードのs, 1H), 7.52 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.70 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 8.01 - 8.05 (m, 2H). LCMS: m/e 692 (M+H)+, 保持時間 3.40 分, 2 分グラジエント.
【００８０】
実施例 4
【化１４】
rac-(3aR,14bR)-2-アセチル-10-シクロヘキシル-3a-(((2S,6R)-2,6-ジメチル-4-モルホリニル)カルボニル)-N-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-1,2,3,3a,4,14b-ヘキサヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-7-カルボキサミド
HATU(25 mg, 0.066 mmol)を、DMF(1 mL)およびTEA(0.06 mL, 0.43 mmol)中のrac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-3a-(((2S,6R)-2,6-ジメチル-4-モルホリニル)カルボニル)-N-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-1,2,3,3a,4,14b-ヘキサヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-7-カルボキサミド(30 mg, 0.044 mmol)およびCH3CO2H(0.02 mL, 0.35 mmol)の溶液に加えた。該反応混合液を室温で3時間撹拌し、MeOHで希釈し、プレパラティブHPLC(0.1％TFA含有H2O/MeOHバッファー)により精製して、生成物rac-(3aR,14bR)-2-アセチル-10-シクロヘキシル-3a-(((2S,6R)-2,6-ジメチル-4-モルホリニル)カルボニル)-N-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-1,2,3,3a,4,14b-ヘキサヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-7-カルボキサミド(16.5 mg, 0.023 mmol, 52％ 収率)をオフホワイト色の固形物として得た。回転異性体の複合混合物が観察され、主要な回転異性体が得られた。 1HNMR (500 MHz, CD3OD) δ 1.11 - 2.22 (m, 16H), 2.72 - 3.08 (m, 5H), 3.04 (s, 6H), 3.60 - 3.80 (m, 3H), 3.92 (s, 3H), 3.86 - 4.29 (m, 7H), 4.43 - 4.51 (m, 1H), 4.61 (d, J = 15.0 Hz, 1H), 7.08 (dd, J = 8.2, 2.5 Hz, 1H), 7.24 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.40 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.61 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.91 - 7.96 (m, 2H). LCMS: m/e 720 (M+H)+, 保持時間 3.93 分, 2 分グラジエント.
【００８１】
実施例 5
【化１５】
rac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-3a-(((2S,6R)-2,6-ジメチル-4-モルホリニル)カルボニル)-N-(ジメチルスルファモイル)-2-イソプロピル-13-メトキシ-1,2,3,3a,4,14b-ヘキサヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-7-カルボキサミド
rac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-3a-(((2S,6R)-2,6-ジメチル-4-モルホリニル)カルボニル)-N-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-1,2,3,3a,4,14b-ヘキサヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-7-カルボキサミド(30 mg, 0.044 mmol)／MeOH(2 mL)懸濁液に、アセトン(0.050 mL, 0.680 mmol)、次いでNaCHBH3(25 mg, 0.40 mmol)を加えた。該反応混合液を室温で3時間撹拌し、DMF/MeOHで希釈し、プレパラティブHPLC(0.1％TFA含有H2O/MeOHバッファー)により精製して、純粋でない淡黄色の固形物を得た。該純粋でない物質をプレパラティブHPLC(10mM NH4OAc含有H2O/CH3CNバッファー)により再精製して、rac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-3a-(((2S,6R)-2,6-ジメチル-4-モルホリニル)カルボニル)-N-(ジメチルスルファモイル)-2-イソプロピル-13-メトキシ-1,2,3,3a,4,14b-ヘキサヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-7-カルボキサミド (18.5 mg, 0.026 mmol, 58％ 収率)を白色の固形物として得た。 1HNMR (300 MHz, CDCl3) δ 0.50 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 0.57 (d, J = 5.1 Hz, 3H), 1.16 - 2.14 (m, 16H), 2.37 - 2.76 (m, 3H), 2.83 - 3.03 (m, 3H), 3.04 (s, 6H), 3.33 (d, J = 10.6 Hz, 1H), 3.53 - 3.70 (m, 4H), 3.85 (s, 3H), 4.16 (d, J = 15.0 Hz, 1H), 4.28 (d, J = 15.0 Hz, 1H), 4.38 - 4.68 (m, 1H), 5.06 - 5.47 (m, 1H), 6.83 (ブロードのs, 1H), 6.93 (dd, J = 8.4, 2.2 Hz, 1H), 7.32 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.39 (dd, J = 8.4, 1.1 Hz, 1H), 7.84 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.97 (s, 1H). LCMS: m/e 720 (M+H)+, 保持時間 3.43 分, 2 分グラジエント.
【００８２】
実施例 6
【化１６】
rac-(3aR,14bR)-2-ベンジル-10-シクロヘキシル-N7-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-N3a,N3a-ジメチル-1,2,3,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-3a,7(4H)-ジカルボキサミド
HATU(680 mg, 1.789 mmol)を、DMF(10 mL)およびTEA(0.5 mL, 3.6 mmol)中のrac-(3aR,14bR)-2-ベンジル-10-シクロヘキシル-7-((ジメチルスルファモイル)カルバモイル)-13-メトキシ-1,2,3,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-3a(4H)-カルボン酸(600 mg, 0.89 mmol)およびジメチルアミン(0.90 mL, 1.8 mmol)のスラリーに加えた。該反応液を終夜撹拌し、さらなるジメチルアミン(0.5 mL)およびHATU(300 mg)を加えた。該反応液を終夜撹拌し、濾過し、H2O(20 mL)で希釈し、1.0N HCl水溶液(9 mL)(pH 〜3)でクエンチした。有機溶媒を減圧下で除去し、該残渣をEtOAc(60 mL)およびH2O(40 mL)間に分配した。有機層を1.0N HCl水溶液(15 mL)および食塩水(15 mL)で洗浄し、濃縮して、黄色の固形物を得た。該固形物をMeOH(30 mL)に溶解させ、H2O(30 mL)を滴下した。得られた沈殿物を濾過により集め、1:1 H2O/MeOHで洗浄し、乾燥させて粗生成物(670 mg)をオフホワイト色の固形物として得た。15 mgの粗生成物をプレパラティブHPLC(0.1％TFA含有H2O/MeOHバッファー)により精製し、rac-(3aR,14bR)-2-ベンジル-10-シクロヘキシル-N7-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-N3a,N3a-ジメチル-1,2,3,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-3a,7(4H)-ジカルボキサミド(11.7 mg, 0.017 mmol, 83％)を白色の固形物として得た。 1HNMR (300 MHz, CD3OD) δ 1.24 - 1.63 (m, 4H), 1.77 - 2.25 (m, 7H), 2.87 - 3.04 (m, 2H), 3.07 (s, 6H), 3.10 - 3.23 (m, 6H), 3.36 - 3.45 (m, 1H), 3.93 (s, 3H), 3.85 - 4.09 (m, 3H), 4.39 - 4.50 (m, 1H), 4.43 (d, J = 12.1 Hz, 1H), 4.63 (d, J = 15.0 Hz, 1H), 6.91 - 7.02 (m, 2H), 7.05 - 7.15 (m, 2H), 7.14 (dd, J = 8.4, 2.6 Hz, 1H), 7.20 - 7.29 (m, 1H), 7.27 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 7.42 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.70 (dd, J = 8.8, 1.5 Hz, 1H), 7.91 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.94 (ブロードのs, 1H). LCMS: m/e 698 (M+H)+, 保持時間 1.90 分, 2 分グラジエント.
【００８３】
実施例 7
【化１７】
rac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-N7-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-N3a,N3a-ジメチル-1,2,3,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-3a,7(4H)-ジカルボキサミド
10％ Pd/C (340 mg, 0.32 mmol)を、MeOH/95％EtOH(10:1, 55 mL)中のクルードなrac-(3aR,14bR)-2-ベンジル-10-シクロヘキシル-N7-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-N3a,N3a-ジメチル-1,2,3,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-3a,7(4H)-ジカルボキサミド(535 mg, 0.77 mmol)の溶液に加えた。該反応混合液を、N2(3x)およびH2(3x)で減圧フラッシュし、50 psiのH2下において16時間、パールシェイカーで振盪させた。該反応混合液を、セライトを通して濾過し、淡黄色の固形物まで濃縮した。該粗固形物をMeOHでトリチュレートし、rac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-N7-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-N3a,N3a-ジメチル-1,2,3,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-3a,7(4H)-ジカルボキサミド(336 mg, 0.553 mmol, 72％ 収率)を白色の固形物として得た。 1HNMR (300 MHz, CD3OD) δ 1.24 - 2.33 (m, 11H), 2.86 - 3.05 (m, 2H), 3.04 (s, 6H), 3.12 - 3.25 (m, 6H), 3.95 (s, 3H), 3.93 - 4.07 (m, 2H), 4.42 (d, J = 12.8 Hz, 1H), 4.59 (dd, J = 13.9, 7.7 Hz, 1H), 4.74 - 4.81 (m, 2H), 7.17 (dd, J = 8.8, 2.6 Hz, 1H), 7.30 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 7.48 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.69 (dd, J = 8.4, 1.5 Hz, 1H), 8.00 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 8.14 (d, J = 1.5 Hz, 1H). LCMS: m/e 608 (M+H)+, 保持時間 1.82 分, 2 分グラジエント.
【００８４】
実施例 8
【化１８】
rac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-N7-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-N2,N2,N3a,N3a-テトラメチル-1,14b-ジヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-2,3a,7(3H,4H)-トリカルボキサミド
ジメチルカルバミルクロリド(0.020 mL, 0.22mmol)およびiPr2EtN(0.040 mL, 0.23 mmol)を、rac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-N7-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-N3a,N3a-ジメチル-1,2,3,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-3a,7(4H)-ジカルボキサミド(30 mg, 0.049 mmol)／THF(1 mL)溶液に加えた。該反応混合液を、室温で16時間撹拌し、MeOH/DMFで希釈し、プレパラティブHPLC(10mM NH4OAc含有H2O/CH3CNバッファー)により精製して、rac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-N7-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-N2,N2,N3a,N3a-テトラメチル-1,14b-ジヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-2,3a,7(3H,4H)-トリカルボキサミド(10.5 mg, 0.015 mmol, 31％ 収率)を白色の固形物として得た。 1HNMR (300 MHz, CDCl3) δ 1.11 - 1.55 (m, 4H), 1.68 - 2.14 (m, 7H), 2.37 (s, 6H), 2.55 - 2.65 (m, 1H), 3.04 (s, 6H), 2.85 - 3.11 (m, 5H), 3.38 (t, J = 9.9 Hz, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.80 - 4.02 (m, 3H), 4.18 (d, J = 12.1 Hz, 1H), 4.28 (dd, J = 10.6, 10.2 Hz, 1H), 4.55 (d, J = 15.0 Hz, 1H), 6.95 (dd, J = 8.4, 2.2 Hz, 1H), 7.20 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 7.31 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.43 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.83 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 8.00 (s, 1H). LCMS: m/e 679 (M+H)+, 保持時間 3.86 分, 4 分グラジエント.
【００８５】
実施例 9
【化１９】
rac-(3aR,14bR)-2-アセチル-10-シクロヘキシル-N7-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-N3a,N3a-ジメチル-1,2,3,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-3a,7(4H)-ジカルボキサミド
HATU(38 mg, 0.10 mmol)を、DMF(1 mL)およびTEA(0.060 mL, 0.43 mmol)中のrac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-N7-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-N3a,N3a-ジメチル-1,2,3,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-3a,7(4H)-ジカルボキサミド(30 mg, 0.049 mmol)およびCH3CO2H(0.020 mL, 0.35 mmol)の溶液に加えた。該反応混合液を室温で3時間撹拌し、0.2 M HCl水溶液(1 mL)を滴下して中和し、乾固するまで濃縮した。該残渣をEtOAc(5 mL)およびH2O(5 mL)間に分配し、水層をEtOAc(5 mL)で抽出した。有機層を合わせて食塩水で洗浄し、濃縮し、プレパラティブHPLC(10mM NH4OAc含有H2O/CH3CNバッファー)により精製して、rac-(3aR,14bR)-2-アセチル-10-シクロヘキシル-N7-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-N3a,N3a-ジメチル-1,2,3,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-3a,7(4H)-ジカルボキサミド(15 mg, 0.023 mmol, 47 ％ 収率)を白色の固形物として得た。回転異性体の複合混合物が観察され、２つの主要な回転異性体(〜2:1 比)について、部分的1HNMR(芳香族領域)を得た。 1HNMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.05 - 7.11 (m, 1H), 7.23 (d, J = 2.6 Hz, 0.3H), 7.27 (d, J = 2.6 Hz, 0.7H), 7.40 (d, J = 8.8 Hz, 0.3H), 7.41 (d, J = 8.8 Hz, 0.7H), 7.63 (dd, J = 8.4, 1.5 Hz, 0.3H), 7.65 (dd, J = 8.4, 1.5 Hz, 0.7H), 7.91 (d, J = 8.4 Hz, 0.3H), 7.93 (d, J = 8.4 Hz, 0.7H), 8.10 (ブロードのs, 0.7H), 8.13 (ブロードのs, 0.3H). LCMS: m/e 650 (M+H)+, 保持時間 3.76 分, 4 分グラジエント.
【００８６】
実施例 10
【化２０】
rac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-N7-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-N3a,N3a,2-トリメチル-1,2,3,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-3a,7(4H)-ジカルボキサミド
撹拌中のrac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-N7-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-N3a,N3a-ジメチル-1,2,3,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-3a,7(4H)-ジカルボキサミド(30 mg, 0.049 mmol)／MeOH(1.5 mL)懸濁液に、37％ホルムアルデヒド水溶液(0.03 mL, 0.4 mmol)、次いでNaCNBH3(20 mg, 0.32 mmol)を加えた。該反応混合液を室温で3時間撹拌し、DMF/MeOHで希釈し、プレパラティブHPLC(0.1％TFA含有H2O/MeOHバッファー)により精製して、rac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-N7-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-N3a,N3a,2-トリメチル-1,2,3,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-3a,7(4H)-ジカルボキサミド(19.4 mg, 0.031 mmol, 63％ 収率)を白色の固形物として得た。 1HNMR (300 MHz, CDCl3) δ 1.22 - 2.24 (m, 11H), 2.44 (ブロードのs, 3H), 2.94 - 3.02 (m, 2H), 3.04 (s, 6H), 3.16 (ブロードのs, 6H), 3.52 - 3.67 (m, 1H), 3.94 (s, 3H), 4.09 (d, J = 15.4 Hz, 1H), 4.40 - 4.63 (m, 2H), 4.74 (d, J = 15.4 Hz, 1H), 7.18 (dd, J = 8.4, 2.6 Hz, 1H), 7.29 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 7.48 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.71 (dd, J = 8.4, 1.5 Hz, 1H), 8.03 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 8.12 (ブロードのs, 1H). LCMS: m/e 622 (M+H)+, 保持時間 3.23 分, 4 分グラジエント.
【００８７】
実施例 11
【化２１】
rac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-3a-(((2S,6R)-2,6-ジメチル-4-モルホリニル)カルボニル)-N7-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-N2,N2-ジメチル-1,3a,4,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-2,7(3H)-ジカルボキサミド
rac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-3a-(((2S,6R)-2,6-ジメチル-4-モルホリニル)カルボニル)-N-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-1,2,3,3a,4,14b-ヘキサヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-7-カルボキサミド (30 mg, 0.044 mmol)／THF(1.5 mL)懸濁液に、ジメチルカルバミルクロリド(0.010 mL, 0.11 mmol)、次いでiPr2EtN(0.031 mL, 0.18 mmol)を加えた。該反応混合液を室温で16時間撹拌し、MeOH/DMFで希釈し、プレパラティブHPLC(0.1％TFA含有H2O/MeOHバッファー)により精製し、rac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-3a-(((2S,6R)-2,6-ジメチル-4-モルホリニル)カルボニル)-N7-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-N2,N2-ジメチル-1,3a,4,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-2,7(3H)-ジカルボキサミド(17.1 mg, 0.023 mmol, 52％ 収率)を白色の固形物として得た。回転異性体の3:1混合物。 1HNMR (300 MHz, CD3OD) δ 1.24 (d, J = 6.2 Hz, 3H), 1.28 (d, J = 6.2 Hz, 3H), 1.30 - 2.27 (m, 10H), 2.49 (s, 4.5H), 2.65 - 2.84 (m, 2H), 2.86 - 2.90 (m, 1H), 2.94 (s, 1.5H), 2.99 - 3.02 (m, 1H), 3.03 (s, 6H), 3.49 - 3.58 (m, 1H), 3.60 - 3.85 (m, 3.75H), 3.88 (s, 0.75H), 3.91 (s, 2.25H), 3.95 - 4.27 (m, 4.25H), 4.56 (d, J = 15.0 Hz, 0.75H), 4.73 - 4.80 (m, 0.25H), 6.84 (ブロードのs, 0.25H), 7.03 - 7.08 (m, 0.25H), 7.07 (dd, J = 8.4, 2.6 Hz, 0.75H), 7.17 (d, J = 2.6 Hz, 0.75H), 7.34 (d, J = 8.4 Hz, 0.25H), 7.41 (d, J = 8.4 Hz, 0.75H), 7.55 (ブロードのd, J = 8.4 Hz, 0.25H), 7.61 (dd, J = 8.4, 1.5 Hz, 0.75H), 7.87 (d, J = 8.4 Hz, 0.25H), 7.92 (d, J = 8.4 Hz, 0.75H), 7.99 (ブロードのs, 0.25H), 8.02 (d, J = 1.5 Hz, 0.75H). LCMS: m/e 749 (M+H)+, 保持時間 4.01 分, 4 分グラジエント.
【００８８】
実施例 12
【化２２】
rac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-2-(2-(ジメチルアミノ)-1-メチルエチル)-3a-(((2S,6R)-2,6-ジメチル-4-モルホリニル)カルボニル)-N-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-1,2,3,3a,4,14b-ヘキサヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-7-カルボキサミド
rac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-3a-(((2S,6R)-2,6-ジメチル-4-モルホリニル)カルボニル)-N-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-1,2,3,3a,4,14b-ヘキサヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-7-カルボキサミド(30 mg, 0.044 mmol)／MeOH(2 mL)懸濁液に、(ジメチルアミノ)アセトン(0.020 mL, 0.18 mmol)、次いでNaCNBH3(11 mg, 0.18 mmol)を加えた。該反応混合液を室温で16時間撹拌し、DMFで希釈し、プレパラティブHPLC(0.1％TFA含有H2O/MeOHバッファー)により精製して黄色の固形物を得て、それをプレパラティブHPLC(10mM NH4OAc含有H2O/CH3CNバッファー)により再精製して、rac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-2-(2-(ジメチルアミノ)-1-メチルエチル)-3a-(((2S,6R)-2,6-ジメチル-4-モルホリニル)カルボニル)-N-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-1,2,3,3a,4,14b-ヘキサヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-7-カルボキサミド(13.8 mg, 0.018 mmol, 41％ 収率)を白色の固形物として得た。 1HNMR (300 MHz, CD3OD) δ 0.07 (d, J = 6.2 Hz, 3H), 1.24 (d, J = 6.2 Hz, 3H), 1.32 (d, J = 5.5 Hz, 3H), 1.38 - 2.24 (m, 10H), 2.71 (br, 6H), 2.97 (br, 6H), 2.60 - 3.07 (m, 8H), 3.56 (d, J = 10.3 Hz, 1H), 3.59 -3.79 (m, 2H), 3.92 (s, 3H), 3.89 - 3.98 (m, 1H), 4.15 (dd, J = 11.3, 7.7 Hz, 1H), 4.25 - 4.38 (m, 2H), 4.45 (d, J = 14.6 Hz, 1H), 4.73 - 4.80 (m, 1H), 7.08 (dd, J = 8.4, 2.6 Hz, 1H), 7.18 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 7.41 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.70 (ブロードのd, J = 8.4 Hz, 1H), 7.89 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 8.07 (ブロードのs, 1H). LCMS: m/e 763 (M+H)+, 保持時間 3.58 分, 4 分グラジエント.
【００８９】
実施例 13
【化２３】
rac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-2-(N,N-ジメチルグリシル)-3a-(((2S,6R)-2,6-ジメチル-4-モルホリニル)カルボニル)-N-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-1,2,3,3a,4,14b-ヘキサヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-7-カルボキサミド
DMF(1.5 mL)およびTEA(0.031 mL, 0.22 mmol)中のrac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-3a-(((2S,6R)-2,6-ジメチル-4-モルホリニル)カルボニル)-N-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-1,2,3,3a,4,14b-ヘキサヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-7-カルボキサミド(30 mg, 0.044 mmol)の懸濁液に、N,N-ジメチルグリシン(9.1 mg, 0.089 mmol)、次いでHATU(25.2 mg, 0.066 mmol)を加えた。該反応混合液を室温で16時間撹拌し、MeOHで希釈し、プレパラティブHPLC(0.1％TFA含有H2O/MeOHバッファー)により精製して固形物を得て、それをプレパラティブHPLC(10mM NH4OAc含有H2O/CH3CNバッファー)により再精製して、rac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-2-(N,N-ジメチルグリシル)-3a-(((2S,6R)-2,6-ジメチル-4-モルホリニル)カルボニル)-N-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-1,2,3,3a,4,14b-ヘキサヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-7-カルボキサミド(16.0 mg, 0.021 mmol, 47％ 収率)を白色の固形物として得た。回転異性体の1:1混合物。 1HNMR (300 MHz, CD3OD) δ 1.21 - 1.38 (m, 6H), 1.38 - 2.19 (m, 12H), 2.38 (s, 3H), 2.54 - 3.08 (m, 12H), 3.46 - 3.81 (m, 4H), 3.93 (s, 3H), 3.88 - 4.52 (m, 6H), 4.64 (d, J = 15.0 Hz, 0.5H), 4.66 (d, J = 14.6 Hz, 0.5H), 7.05 - 7.12 (m, 1H), 7.23 (d, J = 2.6 Hz, 0.5H), 7.25 (d, J = 2.6 Hz, 0.5H), 7.41 (d, J = 8.4 Hz, 0.5H), 7.43 (d, J = 8.4 Hz, 0.5H), 7.66 (dd, J = 8.4, 1.5 Hz, 0.5H), 7.72 (dd, J = 8.4, 1.5 Hz, 0.5H), 7.82 (d, J = 8.4 Hz, 0.5H), 7.88 (d, J = 8.8 Hz, 0.5H), 8.04 (ブロードのs, 0.5H), 8.15 (ブロードのs, 0.5H). LCMS: m/e 763 (M+H)+, 保持時間 3.45 分, 4 分グラジエント.
【００９０】
実施例 14
【化２４】
rac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-2-(N,N-ジメチルグリシル)-N7-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-N3a,N3a-ジメチル-1,2,3,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-3a,7(4H)-ジカルボキサミド
HATU(37.5 mg, 0.099 mmol)を、DMF(1 mL)およびTEA(0.03 mL, 0.215 mmol)中のrac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-N7-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-N3a,N3a-ジメチル-1,2,3,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-3a,7(4H)-ジカルボキサミド(30 mg, 0.049 mmol)および2-(ジメチルアミノ)酢酸(10 mg, 0.10 mmol)の溶液に加えた。該反応混合液を室温で3時間撹拌し、MeOHで希釈し、プレパラティブHPLC(0.1％TFA含有H2O/MeOHバッファー)により精製して、rac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-2-(N,N-ジメチルグリシル)-N7-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-N3a,N3a-ジメチル-1,2,3,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-3a,7(4H)-ジカルボキサミド(15.5 mg, 0.022 mmol, 45％ 収率)を白色の固形物として得た。回転異性体の1:1混合物。 1HNMR (300 MHz, CD3OD) δ 1.22 - 2.23 (m, 10H), 2.34 - 3.09 (m, 9H), 3.04 (s, 3H), 3.05 (s, 3H), 3.12 - 3.28 (m, 4H), 3.42 - 3.71 (m, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.83 - 4.13 (m, 4H), 4.31 - 4.58 (m, 2H), 4.82 - 4.96 (m, 1H), 7.08 - 7.14 (m, 1H), 7.27 (d, J = 2.6 Hz, 0.5H), 7.29 (d, J = 2.6 Hz, 0.5H), 7.43 (d, J = 8.4 Hz, 0.5H), 7.45 (d, J = 8.4 Hz, 0.5H), 7.60 (dd, J = 8.4, 1.5 Hz, 0.5H), 7.66 (dd, J = 8.4, 1.5 Hz, 0.5H), 7.95 (d, J = 8.4 Hz, 0.5H), 7.96 (d, J = 8.8 Hz, 0.5H), 8.17 (ブロードのs, 1H). LCMS: m/e 693 (M+H)+, 保持時間 3.24 分, 4 分グラジエント.
【００９１】
実施例 15
【化２５】
rac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-2-((ジメチルアミノ)(オキソ)アセチル)-N7-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-N3a,N3a-ジメチル-1,2,3,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-3a,7(4H)-ジカルボキサミド
HATU(37.5 mg, 0.099 mmol)を、DMF(1 mL)およびTEA(0.03 mL, 0.2 mmol)中のrac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-N7-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-N3a,N3a-ジメチル-1,2,3,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-3a,7(4H)-ジカルボキサミド(30 mg, 0.049 mmol)および2-(ジメチルアミノ)-2-オキソ酢酸(12 mg, 0.10 mmol)の溶液に加えた。該反応混合液を室温で3時間撹拌し、MeOHで希釈し、プレパラティブHPLC(0.1％ TFA含有H2O/MeOHバッファー)により精製して、rac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-2-((ジメチルアミノ)(オキソ)アセチル)-N7-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-N3a,N3a-ジメチル-1,2,3,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-3a,7(4H)-ジカルボキサミド(15.3 mg, 0.022 mmol, 44％ 収率)を白色の固形物として得た。回転異性体の複合混合物が観察され、3つの主要な回転異性体(〜5:3:2 比)について、部分的1HNMR(芳香族領域)を得た。 1HNMR (300 MHz, CD3OD) δ 7.05 - 7.17 (m, 1H), 7.19 (d, J = 2.6 Hz, 0.2H), 7.25 (d, J = 2.6 Hz, 0.3H), 7.27 (d, J = 2.6 Hz, 0.5H), 7.38 - 7.45 (m, 0.2H), 7.41 (d, J = 8.4 Hz, 0.5H), 7.43 (d, J = 8.4 Hz, 0.3H), 7.57 (dd, J = 8.4, 1.5 Hz, 0.2H), 7.62 (dd, J = 8.4, 1.5 Hz, 0.3H), 7.65 (dd, J = 8.8, 1.5 Hz, 0.5H), 7.72 (ブロードのs, 0.2H), 7.87 (d, J = 8.4 Hz, 0.2H), 7.93 (d, J = 8.4 Hz, 0.3H), 7.95 (d, J = 8.8 Hz, 0.5H), 8.12 (d, J = 1.5 Hz, 0.3H), 8.19 (d, J = 1.5 Hz, 0.5H). LCMS: m/e 707 (M+H)+, 保持時間 3.69 分, 4 分グラジエント.
【００９２】
実施例 16
【化２６】
rac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-N7-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-N3a,N3a-ジメチル-2-((1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)カルボニル)-1,2,3,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-3a,7(4H)-ジカルボキサミド
DMF(1 mL)およびTEA(0.03 mL, 0.2 mmol)中のrac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-N7-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-N3a,N3a-ジメチル-1,2,3,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-3a,7(4H)-ジカルボキサミド(30 mg, 0.049 mmol)および1-メチル-1H-イミダゾール-2-カルボン酸(12.5 mg, 0.099 mmol)の溶液に、HATU(37.5 mg, 0.099 mmol)を加えた。該反応混合液を室温で16時間撹拌し、MeOHで希釈し、プレパラティブHPLC(0.1％TFA含有H2O/MeOHバッファー)により精製して、rac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-N7-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-N3a,N3a-ジメチル-2-((1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)カルボニル)-1,2,3,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-3a,7(4H)-ジカルボキサミド(20.3 mg, 0.028 mmol, 57％ 収率)を明黄色の固形物として得た。回転異性体の複合混合物が観察され、２つの主要な回転異性体(〜3:2 比)について、部分的1HNMR(芳香族領域)を得た。 1HNMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 6.78 (s, 0.6H), 6.91 (s, 0.4H), 7.00 (s, 0.4H), 7.05 (s, 0.4H), 7.08 - 7.22 (m, 2.2H), 7.32 (d, J = 8.2 Hz, 0.6H), 7.37 (d, J = 8.2 Hz, 0.4H), 7.54 (dd, J = 8.6, 1.2 Hz, 0.4H), 7.61 (dd, J = 8.6, 1.2 Hz, 0.6H), 7.81 (d, J = 8.6 Hz, 0.6H), 7.84 (d, J = 8.6 Hz, 0.4H), 8.09 (ブロードのs, 0.4H), 8.31 (ブロードのs, 0.6H), 11.31 (s, 0.4H), 11.69 (s, 0.6H). LCMS: m/e 716 (M+H)+, 保持時間 3.67 分, 4 分グラジエント.
【００９３】
実施例 17aおよび17b
【化２７】
rac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-2-(2-(ジメチルアミノ)-1R-メチルエチル)-N7-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-N3a,N3a-ジメチル-1,2,3,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-3a,7(4H)-ジカルボキサミドおよびrac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-2-(2-(ジメチルアミノ)-1S-メチルエチル)-N7-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-N3a,N3a-ジメチル-1,2,3,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-3a,7(4H)-ジカルボキサミド
rac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-N7-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-N3a,N3a-ジメチル-1,2,3,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-3a,7(4H)-ジカルボキサミド(30 mg, 0.049 mmol)／MeOH(2 mL)懸濁液に、(ジメチルアミノ)アセトン(0.020 mL, 0.18 mmol)、次いでNaCNBH3(12.4 mg, 0.20 mmol)を加えた。該反応混合液を室温で4時間撹拌し、DMF(1 mL)で希釈し、さらなる(ジメチルアミノ)アセトン(0.4 mL)で処理した。該反応混合液を室温で16時間撹拌し、MeOHで希釈し、プレパラティブHPLC(0.1％TFA含有H2O/MeOHバッファー)により精製して、生成物をジアステレオマー混合物として得た。該物質をプレパラティブHPLC(10mM NH4OAc含有H2O/CH3CNバッファー)により再精製し、２セットの異性体生成物を得た: ラセミ体対A: 逆相HPLCにおいてより短い保持時間である生成物、rac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-2-(2-(ジメチルアミノ)-1R-メチルエチル)-N7-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-N3a,N3a-ジメチル-1,2,3,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-3a,7(4H)-ジカルボキサミド(6.2 mg, 9.0 μmol, 18％ 収率)、オフホワイト色の固形物として。 LCMS: m/e 693 (M+H)+, 保持時間 2.30 分, 4 分グラジエント. カラム: phenomenex 10u C18 4.6 x 30 mm; ラセミ体対B: 逆相HPLCにおいてより長い保持時間である生成物、rac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-2-(2-(ジメチルアミノ)-1S-メチルエチル)-N7-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-N3a,N3a-ジメチル-1,2,3,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-3a,7(4H)-ジカルボキサミド(2.4 mg, 3.5 μmol, 7％ 収率)、オフホワイト色の固形物として。 1HNMR (300 MHz, CD3OD) δ 0.26 (d, J = 6.2 Hz, 3H), 1.18 - 2.25 (m, 12H), 2.34 (d, J = 9.9 Hz, 1H), 2.61 (s, 6H), 2.54 - 2.88 (m, 3H), 2.91 (s, 6H), 2.94 - 3.38 (m, 7H), 3.91 (s, 3H), 3.98 - 4.08 (m, 2H), 4.56 (d, J = 15.0 Hz, 1H), 4.78 - 4.94 (m, 1H), 7.06 (dd, J = 8.4, 2.6 Hz, 1H), 7.17 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.40 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.77 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.82 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 8.17 (s, 1H). LCMS: m/e 693 (M+H)+, 保持時間 2.43 分, 4 分グラジエント. カラム: phenomenex 10u C18 4.6 x 30 mm.
【００９４】
実施例 18
【化２８】
rac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-N7-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-N3a,N3a-ジメチル-2-((1-メチル-1H-イミダゾール-5-イル)メチル)-1,2,3,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-3a,7(4H)-ジカルボキサミド
rac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-N7-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-N3a,N3a-ジメチル-1,2,3,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-3a,7(4H)-ジカルボキサミド(30 mg, 0.049 mmol)／MeOH(2 mL)のスラリーに、1-メチル-1H-イミダゾール-5-カルバルデヒド(16.3 mg, 0.15 mmol)、次いでNaCNBH3(9.3 mg, 0.15 mmol)を加えた。該反応混合液を室温で4時間撹拌し、THF(1 mL)で希釈し、さらなる1-メチル-1H-イミダゾール-5-カルバルデヒド(25 mg)で処理した。該反応混合液を室温で16時間撹拌し、DMF(1 mL)で希釈し、さらなるNaCNBH3(10 mg)で処理した。該反応混合液を室温で1日間撹拌し、MeOHで希釈し、プレパラティブHPLC(0.1％TFA含有H2O/MeOHバッファー)により精製して、rac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-N7-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-N3a,N3a-ジメチル-2-((1-メチル-1H-イミダゾール-5-イル)メチル)-1,2,3,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-3a,7(4H)-ジカルボキサミド(20.2 mg, 0.029 mmol, 58％ 収率)を白色の固形物として得た。 1HNMR (300 MHz, CD3OD) δ 1.25 - 1.65 (m, 4H), 1.77 - 2.23 (m, 7H), 2.66 (d, J = 10.6 Hz, 1H), 2.94 - 3.07 (m, 2H), 3.05 (s, 6H), 3.10 - 3.35 (m, 6H), 3.51 (d, J = 15.0 Hz, 1H), 3.58 (d, J = 15.0 Hz, 1H), 3.64 (s, 3H), 3.79 (d, J = 10.6 Hz, 1H), 3.91 (s, 3H), 4.04 (d, J = 15.0 Hz, 1H), 4.15 (dd, J = 10.6, 7.7 Hz, 1H), 4.52 (d, J = 15.0 Hz, 1H), 7.06 - 7.15 (m, 3H), 7.41 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.65 (dd, J = 8.4, 1.5 Hz, 1H), 7.95 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 8.03 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 8.55 (ブロードのs, 1H). LCMS: m/e 702 (M+H)+, 保持時間 3.16 分, 4 分グラジエント.
【００９５】
実施例 19
【化２９】
rac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-N7-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-N3a,N3a-ジメチル-2-(1-メチル-L-プロリル)-1,2,3,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-3a,7(4H)-ジカルボキサミド
DMF(1 mL)およびTEA(0.03 mL, 0.2 mmol)中のrac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-N7-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-N3a,N3a-ジメチル-1,2,3,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-3a,7(4H)-ジカルボキサミド(30 mg, 0.049 mmol)および(S)-1-メチルピロリジン-2-カルボン酸塩酸塩(12.3 mg, 0.074 mmol)の溶液に、HATU(37.5 mg, 0.099 mmol)を加えた。該反応混合液を室温で3時間撹拌し、MeOHで希釈し、プレパラティブHPLC(0.1％TFA含有H2O/MeOHバッファー)により精製して、rac-(3aR,14bR)-10-シクロヘキシル-N7-(ジメチルスルファモイル)-13-メトキシ-N3a,N3a-ジメチル-2-(1-メチル-L-プロリル)-1,2,3,14b-テトラヒドロインドロ[2,1-a]ピロロ[3,4-d][2]ベンゾアゼピン-3a,7(4H)-ジカルボキサミド(24.3 mg, 0.034 mmol, 69％ 収率)を白色の固形物として得た。ジアステレオマーの複合混合物。 1HNMR(300 MHz, CD3OD) δ 1.21 - 2.26 (m, 14H), 2.51 - 3.07 (m, 11H), 3.10 - 3.30 (m, 6H), 3.43 - 3.86 (m, 3H), 3.94 (s, 3H), 3.91 - 4.65 (m, 5H), 4.72 - 4.96 (m, 1H), 7.07 - 7.15 (m, 1H), 7.26 - 7.33 (m, 1H), 7.40 -7.50 (m, 1H), 7.53 - 7.72 (m, 1H), 7.87 - 7.99 (m, 1H), 8.16 - 8.21 (m, 1H). LCMS: m/e 719 (M+H)+, 保持時間 3.21 分, 4 分グラジエント.
【００９６】
本発明は前述の例示的な実施例に限定されず、そしてその本質的特性から逸脱することなく他の特定の形態において具体化することができることが当業者には明白であろう。従って該実施例は、あらゆる点で、制限するものではなく例示的なものとしてみなされ、そして、前述の実施例に対してよりはむしろ特許請求の範囲を参照すべきであり、従って、特許請求の範囲と同等の意味および範囲内となる全ての変更を包含すると意図することが望ましい。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式I
【化１】
［式中、
R1はCO2R7またはCONR8R9であり;
R2は水素またはアルキルであり;
R3は水素またはアルキルであるか;あるいは、
NR2R3は一緒になって、アゼチジニル、ピロリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、N-(アルキル)ピペラジニル、モルホリニル、チオモルホリニル、ホモピペリジニル、もしくはホモモルホリニルであって、0〜3個のアルキル置換基で置換されているか;または、
NR2R3は一緒になって、
【化２】
であり;
R4は水素、アルキル、アルキルCO、(R13)アルキル、((R13)アルキル)CO、(R13)CO、(R13)COCO、(Ar1)アルキル、(Ar1)CO、または(Ar1)COCOであり;
R5は水素、ハロ、アルキル、アルケニル、ヒドロキシ、ベンジルオキシ、またはアルコキシであり;
R6はシクロアルキルであり;
R7は水素またはアルキルであり;
R8は水素、アルキル、アルキルSO2、シクロアルキルSO2、ハロアルキルSO2、(R10)(R11)NSO2、または(R12)SO2であり;
R9は水素またはアルキルであり;
R10は水素またはアルキルであり;
R11は水素またはアルキルであり;
R12はアゼチジニル、ピロリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、N-(アルキル)ピペラジニル、モルホリニル、チオモルホリニル、ホモピペリジニル、またはホモモルホリニルであり;
R13はアミノ、アルキルアミノ、またはジアルキルアミノであるか、
あるいは、R13はアゼチジニル、ピロリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、N-(アルキル)ピペラジニル、モルホリニル、チオモルホリニル、ホモピペリジニル、またはホモモルホリニルであって、0〜3個のアルキル置換基で置換されており;
R14は水素、アルキル、シクロアルキル、(シクロアルキル)アルキル、アルキルカルボニル、シクロアルキルカルボニル、ハロアルキルカルボニル、アルコキシカルボニル、アルキルSO2、シクロアルキルSO2、ハロアルキルSO2、アミノカルボニル、(アルキルアミノ)カルボニル、(ジアルキルアミノ)カルボニル、ベンジル、ベンジルオキシカルボニル、またはピリジニルであり;および、
Ar1はフェニル、ピロリル、ピラゾリル、イミダゾリル、またはトリアゾリルであって、0〜2個のアルキル置換基で置換されている］
の化合物もしくは医薬的に許容されるその塩。
【請求項２】
R1がCONR8R9であり;R2がアルキルであり;R3がアルキルであるか;あるいは、NR2R3が一緒になって、2個のアルキル置換基で置換されたモルホリニルであり;R4が水素、アルキル、アルキルCO、(R13)アルキル、((R13)アルキル)CO、(R13)CO、(R13)COCO、(Ar1)アルキル、または(Ar1)COであり;R5がアルコキシであり;R6がシクロアルキルであり;R8が(R10)(R11)NSO2であり;R9が水素であり;R10がアルキルであり;R11がアルキルであり;R13がジアルキルアミノであるか、またはR13がピロリジニルであって0〜3個のアルキル置換基で置換されており;および、Ar1がフェニルまたはイミダゾリルであって、0〜2個のアルキル置換基で置換されている、請求項１に記載の化合物もしくは医薬的に許容されるその塩。
【請求項３】
R1がCONHSO2NMe2であり;R2がメチルであり;R3がメチルであるか;あるいはNR2R3が一緒になって2個のメチル置換基で置換されたモルホリニルであり;R4が水素、メチル、イソプロピル、ベンジル、アセチル、CONMe2、N,N-ジメチルアミノプロピル、COCH2NMe2、COCONMe2、(メチルイミダゾリル)メチル、(メチルイミダゾリル)CO、または(メチルピロリジニル)COであり;R5がメトキシであり;R6がシクロヘキシルである、請求項２に記載の化合物もしくは医薬的に許容されるその塩。
【請求項４】
R1がCONR8R9であり;R8がアルキルSO2、シクロアルキルSO2、ハロアルキルSO2、(R10)(R11)NSO2、または(R12)SO2であり;およびR9が水素である、請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
R5が水素である、請求項１に記載の化合物。
【請求項６】
R5がメトキシである、請求項１に記載の化合物。
【請求項７】
R6がシクロヘキシルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項８】
R8が(R10)(R11)NSO2または(R12)SO2である、請求項１に記載の化合物。
【請求項９】
以下の立体化学
【化３】
を有する請求項１に記載の化合物。
【請求項１０】
式
【化４】
からなる群から選択される、請求項１に記載の化合物もしくは医薬的に許容されるその塩。
【請求項１１】
請求項１に記載の化合物もしくは医薬的に許容されるその塩、および医薬的に許容される担体を含有する組成物。
【請求項１２】
HCVに対する治療上の有用性を有する少なくとも１つのさらなる化合物をさらに含有する請求項１に記載の組成物であって、該化合物がインターフェロン、シクロスポリン、インターロイキン、HCVメタロプロテアーゼ阻害剤、HCVセリンプロテアーゼ阻害剤、HCVポリメラーゼ阻害剤、HCVヘリカーゼ阻害剤、HCV NS4Bタンパク質阻害剤、HCVエントリー阻害剤、HCVアセンブリ阻害剤、HCVイグレス阻害剤、HCV NS5Aタンパク質阻害剤、HCV NS5Bタンパク質阻害剤、およびHCVレプリコン阻害剤からなる群から選択される、該組成物。
【請求項１３】
治療上有効な量の請求項１に記載の化合物を患者に投与することを含む、C型肝炎感染症の治療方法。
【請求項１４】
HCVに対する治療上の有用性を有する少なくとも１つのさらなる化合物を投与することをさらに含む請求項１３に記載の方法であって、該化合物がインターフェロン、シクロスポリン、インターロイキン、HCVメタロプロテアーゼ阻害剤、HCVセリンプロテアーゼ阻害剤、HCVポリメラーゼ阻害剤、HCVヘリカーゼ阻害剤、HCV NS4Bタンパク質阻害剤、HCVエントリー阻害剤、HCVアセンブリ阻害剤、HCVイグレス阻害剤、HCV NS5Aタンパク質阻害剤、HCV NS5Bタンパク質阻害剤、およびHCVレプリコン阻害剤からなる群から選択される、該方法。
【請求項１】
式I
【化１】
［式中、
R1はCO2R7またはCONR8R9であり;
R2は水素またはアルキルであり;
R3は水素またはアルキルであるか;あるいは、
NR2R3は一緒になって、アゼチジニル、ピロリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、N-(アルキル)ピペラジニル、モルホリニル、チオモルホリニル、ホモピペリジニル、もしくはホモモルホリニルであって、0〜3個のアルキル置換基で置換されているか;または、
NR2R3は一緒になって、
【化２】
であり;
R4は水素、アルキル、アルキルCO、(R13)アルキル、((R13)アルキル)CO、(R13)CO、(R13)COCO、(Ar1)アルキル、(Ar1)CO、または(Ar1)COCOであり;
R5は水素、ハロ、アルキル、アルケニル、ヒドロキシ、ベンジルオキシ、またはアルコキシであり;
R6はシクロアルキルであり;
R7は水素またはアルキルであり;
R8は水素、アルキル、アルキルSO2、シクロアルキルSO2、ハロアルキルSO2、(R10)(R11)NSO2、または(R12)SO2であり;
R9は水素またはアルキルであり;
R10は水素またはアルキルであり;
R11は水素またはアルキルであり;
R12はアゼチジニル、ピロリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、N-(アルキル)ピペラジニル、モルホリニル、チオモルホリニル、ホモピペリジニル、またはホモモルホリニルであり;
R13はアミノ、アルキルアミノ、またはジアルキルアミノであるか、
あるいは、R13はアゼチジニル、ピロリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、N-(アルキル)ピペラジニル、モルホリニル、チオモルホリニル、ホモピペリジニル、またはホモモルホリニルであって、0〜3個のアルキル置換基で置換されており;
R14は水素、アルキル、シクロアルキル、(シクロアルキル)アルキル、アルキルカルボニル、シクロアルキルカルボニル、ハロアルキルカルボニル、アルコキシカルボニル、アルキルSO2、シクロアルキルSO2、ハロアルキルSO2、アミノカルボニル、(アルキルアミノ)カルボニル、(ジアルキルアミノ)カルボニル、ベンジル、ベンジルオキシカルボニル、またはピリジニルであり;および、
Ar1はフェニル、ピロリル、ピラゾリル、イミダゾリル、またはトリアゾリルであって、0〜2個のアルキル置換基で置換されている］
の化合物もしくは医薬的に許容されるその塩。
【請求項２】
R1がCONR8R9であり;R2がアルキルであり;R3がアルキルであるか;あるいは、NR2R3が一緒になって、2個のアルキル置換基で置換されたモルホリニルであり;R4が水素、アルキル、アルキルCO、(R13)アルキル、((R13)アルキル)CO、(R13)CO、(R13)COCO、(Ar1)アルキル、または(Ar1)COであり;R5がアルコキシであり;R6がシクロアルキルであり;R8が(R10)(R11)NSO2であり;R9が水素であり;R10がアルキルであり;R11がアルキルであり;R13がジアルキルアミノであるか、またはR13がピロリジニルであって0〜3個のアルキル置換基で置換されており;および、Ar1がフェニルまたはイミダゾリルであって、0〜2個のアルキル置換基で置換されている、請求項１に記載の化合物もしくは医薬的に許容されるその塩。
【請求項３】
R1がCONHSO2NMe2であり;R2がメチルであり;R3がメチルであるか;あるいはNR2R3が一緒になって2個のメチル置換基で置換されたモルホリニルであり;R4が水素、メチル、イソプロピル、ベンジル、アセチル、CONMe2、N,N-ジメチルアミノプロピル、COCH2NMe2、COCONMe2、(メチルイミダゾリル)メチル、(メチルイミダゾリル)CO、または(メチルピロリジニル)COであり;R5がメトキシであり;R6がシクロヘキシルである、請求項２に記載の化合物もしくは医薬的に許容されるその塩。
【請求項４】
R1がCONR8R9であり;R8がアルキルSO2、シクロアルキルSO2、ハロアルキルSO2、(R10)(R11)NSO2、または(R12)SO2であり;およびR9が水素である、請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
R5が水素である、請求項１に記載の化合物。
【請求項６】
R5がメトキシである、請求項１に記載の化合物。
【請求項７】
R6がシクロヘキシルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項８】
R8が(R10)(R11)NSO2または(R12)SO2である、請求項１に記載の化合物。
【請求項９】
以下の立体化学
【化３】
を有する請求項１に記載の化合物。
【請求項１０】
式
【化４】
からなる群から選択される、請求項１に記載の化合物もしくは医薬的に許容されるその塩。
【請求項１１】
請求項１に記載の化合物もしくは医薬的に許容されるその塩、および医薬的に許容される担体を含有する組成物。
【請求項１２】
HCVに対する治療上の有用性を有する少なくとも１つのさらなる化合物をさらに含有する請求項１に記載の組成物であって、該化合物がインターフェロン、シクロスポリン、インターロイキン、HCVメタロプロテアーゼ阻害剤、HCVセリンプロテアーゼ阻害剤、HCVポリメラーゼ阻害剤、HCVヘリカーゼ阻害剤、HCV NS4Bタンパク質阻害剤、HCVエントリー阻害剤、HCVアセンブリ阻害剤、HCVイグレス阻害剤、HCV NS5Aタンパク質阻害剤、HCV NS5Bタンパク質阻害剤、およびHCVレプリコン阻害剤からなる群から選択される、該組成物。
【請求項１３】
治療上有効な量の請求項１に記載の化合物を患者に投与することを含む、C型肝炎感染症の治療方法。
【請求項１４】
HCVに対する治療上の有用性を有する少なくとも１つのさらなる化合物を投与することをさらに含む請求項１３に記載の方法であって、該化合物がインターフェロン、シクロスポリン、インターロイキン、HCVメタロプロテアーゼ阻害剤、HCVセリンプロテアーゼ阻害剤、HCVポリメラーゼ阻害剤、HCVヘリカーゼ阻害剤、HCV NS4Bタンパク質阻害剤、HCVエントリー阻害剤、HCVアセンブリ阻害剤、HCVイグレス阻害剤、HCV NS5Aタンパク質阻害剤、HCV NS5Bタンパク質阻害剤、およびHCVレプリコン阻害剤からなる群から選択される、該方法。
【公表番号】特表２０１１−５１５４８４（Ｐ２０１１−５１５４８４Ａ）
【公表日】平成２３年５月１９日（２０１１．５．１９）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１１−５０１９９９（Ｐ２０１１−５０１９９９）
【出願日】平成２１年３月２５日（２００９．３．２５）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００９／０３８１６７
【国際公開番号】ＷＯ２００９／１２０７３３
【国際公開日】平成２１年１０月１日（２００９．１０．１）
【出願人】（３９１０１５７０８）ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニー (494)
【氏名又は名称原語表記】ＢＲＩＳＴＯＬ−ＭＹＥＲＳ ＳＱＵＩＢＢ ＣＯＭＰＡＮＹ
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２３年５月１９日（２０１１．５．１９）
【国際特許分類】
【出願日】平成２１年３月２５日（２００９．３．２５）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００９／０３８１６７
【国際公開番号】ＷＯ２００９／１２０７３３
【国際公開日】平成２１年１０月１日（２００９．１０．１）
【出願人】（３９１０１５７０８）ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニー (494)
【氏名又は名称原語表記】ＢＲＩＳＴＯＬ−ＭＹＥＲＳ ＳＱＵＩＢＢ ＣＯＭＰＡＮＹ
【Ｆターム（参考）】
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