ブタＤＣ−ＳＩＧＮ、ＩＣＡＭ−３およびＬＳＥＣｔｉｎならびにそれらの使用
本発明は、ｐＤＣ−ＳＩＧＮ遺伝子およびｐＬＳＥＣｔｉｎの両方の全長ｃＤＮＡおよび遺伝子の新規のヌクレオチド配列を含む新たなブタＤＣ−ＳＩＧＮおよびＬＳＥＣｔｉｎタンパク質をコードする独特なおよび全体的なゲノム配列のクローニング、同定および特徴付けに関する。また、ブタ単球由来樹状細胞から新たに発見したブタＩＣＡＭ−３アイソフォームをコードする核酸分子およびそれらの使用を提供する。具体的には、本発明は、ブタＤＣ−ＳＩＧＮ、ブタＩＣＡＭ−３、ブタＬＳＥＣｔｉｎをコードするヌクレオチド配列、ヌクレオチド配列の相補体もしくはヌクレオチド配列の機能的な定義された部分のうち１つ以上を含む単離された核酸分子またはブタもしくはヒト起源であり得るタンパク質に連結したタンパク質融合産物に関する。新たなブタ遺伝子を単離およびクローニングするため、ならびにウイルス、特に、エンベロープウイルスを繁殖させるための改良された方法において、新たなヌクレオチド配列を使用するための方法についても、本明細書においてさらに説明する。本発明は、ブタタンパク質、新たな抗体などを安定に発現することができる新たなトランスフェクト細胞または細胞系統をさらに含む。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
ｐＤＣ−ＳＩＧＮ、ｐＩＣＡＭ−３およびｐＬＳＥＣｔｉｎからなる群から選択される１つ以上のタンパク質をコードするヌクレオチド配列、前記ヌクレオチド配列の少なくとも１つの相補体、ならびに前記ヌクレオチド配列の少なくとも１つの機能的な定義された部分を含む単離された核酸分子。
【請求項２】
前記ヌクレオチド配列は融合タンパク質をコードする、請求項１に記載の核酸分子。
【請求項３】
前記融合タンパク質は少なくとも２つのタンパク質を含み、ｐＬＳＥＣｔｉｎが、ｐＤＣ−ＳＩＧＮか、または２つのタンパク質のうちの少なくとも１つの機能的な定義された部分に連結されている、請求項２に記載の核酸分子。
【請求項４】
前記融合タンパク質は、ｈＤＣ−ＳＩＧＮ、ｈＬ−ＳＩＧＮ、ｈＬＳＥＣｔｉｎおよびそれらの組み合わせからなる群から選択される少なくとも１つのタンパク質、またはその機能的な定義された部分をさらに含む、請求項２に記載の核酸分子。
【請求項５】
前記融合タンパク質は、ｈＤＣ−ＳＩＧＮ、ｈＬ−ＳＩＧＮ、ｈＬＳＥＣｔｉｎおよびそれらの組み合わせからなる群から選択される少なくとも１つのタンパク質、またはその機能的な定義された部分をさらに含む、請求項３に記載の核酸分子。
【請求項６】
前記融合タンパク質は、ｐＤＣ−ＳＩＧＮまたはｐＬＳＥＣｔｉｎの炭水化物認識ドメインと、ｈＤＣ−ＳＩＧＮ、ｈＬ−ＳＩＧＮ、ｈＬＳＥＣｔｉｎの細胞質尾部、膜貫通ドメインもしくは反復ネック領域またはそれらの組み合わせとを含有する、請求項４に記載の核酸分子。
【請求項７】
ｐＤＣ−ＳＩＧＮをコードする前記ヌクレオチド配列は、配列番号１またはその相補鎖を含む、請求項１に記載の核酸分子。
【請求項８】
ｐＩＣＡＭ−３をコードする前記ヌクレオチド配列は、配列番号４、配列番号３９またはその相補鎖を含む、請求項１に記載の核酸分子。
【請求項９】
ｐＬＳＥＣｔｉｎをコードする前記ヌクレオチド配列は、配列番号３６またはその相補鎖を含む、請求項１に記載の核酸分子。
【請求項１０】
請求項１、２、３、４、５、６、７、８または９のいずれか一項に記載の核酸分子を含有する生物学的に機能的なプラスミドまたはウイルスベクター。
【請求項１１】
前記ベクターはｐＴｒｉＥｘ−１．１Ｎｅｏである、請求項１０に記載の生物学的に機能的なプラスミドまたはウイルスベクター。
【請求項１２】
ｐＤＣ−ＳＩＧＮ、ｐＩＣＡＭ−３およびｐＬＳＥＣｔｉｎからなる群から選択される少なくとも１つ以上のタンパク質、ヌクレオチド配列の少なくとも１つの相補体ならびにそれらの機能的な定義された部分を発現する単離されたトランスフェクト細胞または細胞系統。
【請求項１３】
前記細胞または細胞系統は融合タンパク質を発現する、請求項１２に記載の細胞または細胞系統。
【請求項１４】
前記融合タンパク質は少なくとも２つのタンパク質を含み、ｐＬＳＥＣｔｉｎが、ｐＤＣ−ＳＩＧＮか、または２つのタンパク質のうちの少なくとも１つの機能的な定義された部分に連結されている、請求項１３に記載の細胞または細胞系統。
【請求項１５】
前記融合タンパク質は、ｈＤＣ−ＳＩＧＮ、ｈＬ−ＳＩＧＮ、ｈＬＳＥＣｔｉｎおよびそれらの組み合わせからなる群から選択される少なくとも１つのタンパク質、またはその機能的な定義された部分をさらに含む、請求項１３に記載の細胞または細胞系統。
【請求項１６】
前記融合タンパク質は、ｈＤＣ−ＳＩＧＮ、ｈＬ−ＳＩＧＮ、ｈＬＳＥＣｔｉｎおよびそれらの組み合わせからなる群から選択される少なくとも１つのタンパク質、またはその機能的な定義された部分をさらに含む、請求項１４に記載の細胞または細胞系統。
【請求項１７】
前記融合タンパク質は、ｐＤＣ−ＳＩＧＮまたはｐＬＳＥＣｔｉｎの炭水化物認識ドメインと、ｈＤＣ−ＳＩＧＮ、ｈＬ−ＳＩＧＮ、ｈＬＳＥＣｔｉｎの細胞質尾部、膜貫通ドメインもしくは反復ネック領域またはそれらの組み合わせとを含有する、請求項１５に記載の細胞または細胞系統。
【請求項１８】
前記細胞または細胞系統は、樹状細胞、マクロファージ細胞、単球系細胞、リンパ系細胞および絨毛細胞からなる群から選択される、請求項１２、１３、１４または１５のいずれか一項に記載の細胞または細胞系統。
【請求項１９】
前記細胞または細胞系統は、ＢＨＫ−２１、ＭＡＲＣ−１４５、ＰＫ−１５、ＣＯＳ−７、ＶＥＲＯ、ＣＶ−１、ＬＬＣ−ＭＫ２、ＭＤＣＫ、ＭＤＢＫ、Ｒａｊｉ Ｂ、ＣＨＯ−Ｋ１、３Ｄ４／３１、ＳＪＰＬ、ＩＰＥＣ−Ｊ２、ＴＨＰ−１、ＲＡＷ２６４．７、ＭＡ−１０４、２９３ＴおよびＳＴ細胞からなる群から選択される、請求項１２、１３、１４または１５のいずれか一項に記載の細胞または細胞系統。
【請求項２０】
タンパク質産物の産生のための方法であって、適切な栄養条件下で、請求項１、２、３、４、５、６、７、８または９のいずれか一項に記載の核酸分子でトランスフェクトされた原核または真核細胞を、前記タンパク質産物の発現を可能にする様式で増殖させる工程と、前記核酸分子の発現の所望されるタンパク質産物を単離する工程とを含む方法。
【請求項２１】
配列番号２、配列番号５または配列番号３７を含む単離されたタンパク質。
【請求項２２】
配列番号２、配列番号５または配列番号３７のアミノ酸配列に特異的に結合する単離されたモノクローナルまたはポリクローナル抗体。
【請求項２３】
前記抗体はポリクローナルであり、そして前記ポリクローナル抗体は、配列番号１３、配列番号１４または配列番号１３および配列番号１４の組み合わせを含むペプチド領域に特異的に結合する、請求項２２に記載の抗体。
【請求項２４】
請求項２２または２３に記載の抗体を産生するハイブリドーマ細胞系統。
【請求項２５】
配列番号２、配列番号５または配列番号３７のアミノ酸配列に特異的に結合する天然のまたは人工的に合成されたオリゴ糖リガンド。
【請求項２６】
（ａ）ｐＤＣ−ＳＩＧＮ、ｐＩＣＡＭ−３およびｐＬＳＥＣｔｉｎからなる群から選択される１つ以上のタンパク質をコードするヌクレオチド配列、前記ヌクレオチド配列の少なくとも１つの相補体、ならびに前記ヌクレオチド配列の少なくとも１つの機能的な定義された部分を含有するトランスフェクト細胞または細胞系統を提供する工程と；
（ｂ）前記トランスフェクト細胞または細胞系統を増殖培地において増殖させて、培養物を形成する工程と；
（ｃ）前記培養物にウイルスを播種する工程と；
（ｄ）前記播種された培養物を、培養物中でウイルスを繁殖させるのに有効な条件下でインキュベートする工程と
を含む、ウイルスを繁殖させるための方法。
【請求項２７】
細胞変性効果が観察されるか、または高い力価が達成されるまで、前記播種された培養物をインキュベートする工程をさらに含む、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
前記細胞を溶解して、細胞内のビリオンを放出させ、そしてウイルス抗原を採取する工程をさらに含む、請求項２６に記載の方法。
【請求項２９】
工程（ａ）は、融合タンパク質をコードするヌクレオチド配列を含有するトランスフェクト細胞または細胞系統を提供する、請求項２６、２７または２８に記載の方法。
【請求項３０】
工程（ａ）における融合タンパク質は少なくとも２つのタンパク質を含み、ｐＬＳＥＣｔｉｎが、ｐＤＣ−ＳＩＧＮか、または２つのタンパク質のうちの少なくとも１つの機能的な定義された部分に連結されている、請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
工程（ａ）における融合タンパク質は、ｈＤＣ−ＳＩＧＮ、ｈＬ−ＳＩＧＮ、ｈＬＳＥＣｔｉｎおよびそれらの組み合わせからなる群から選択される少なくとも１つのタンパク質、またはその機能的な定義された部分をさらに含む、請求項２９に記載の方法。
【請求項３２】
工程（ａ）における融合タンパク質は、ｈＤＣ−ＳＩＧＮ、ｈＬ−ＳＩＧＮ、ｈＬＳＥＣｔｉｎおよびそれらの組み合わせからなる群から選択される少なくとも１つのタンパク質、またはその機能的な定義された部分をさらに含む、請求項３０に記載の方法。
【請求項３３】
工程（ａ）における融合タンパク質は、ｐＤＣ−ＳＩＧＮまたはｐＬＳＥＣｔｉｎの炭水化物認識ドメインと、ｈＤＣ−ＳＩＧＮ、ｈＬ−ＳＩＧＮ、ｈＬＳＥＣｔｉｎの細胞質尾部、膜貫通ドメインもしくは反復ネック領域またはそれらの組み合わせとを含有する、請求項３１に記載の方法。
【請求項３４】
工程（ａ）は、配列番号１またはその相補鎖を含むヌクレオチド配列を含有するトランスフェクト細胞または細胞系統を提供する、請求項２６、２７または２８に記載の方法。
【請求項３５】
工程（ａ）は、配列番号４、配列番号３９またはその相補鎖を含むヌクレオチド配列を含有するトランスフェクト細胞または細胞系統を提供する、請求項２６、２７または２８に記載の方法。
【請求項３６】
工程（ａ）は、配列番号３６またはその相補鎖を含むヌクレオチド配列を含有するトランスフェクト細胞または細胞系統を提供する、請求項２６、２７または２８に記載の方法。
【請求項３７】
工程（ａ）は、樹状細胞、マクロファージ細胞、単球系細胞、リンパ系細胞および絨毛細胞からなる群から選択されるトランスフェクト細胞または細胞系統を提供する、請求項２６、２７または２８に記載の方法。
【請求項３８】
工程（ａ）は、ＢＨＫ−２１、ＭＡＲＣ−１４５、ＰＫ−１５、ＣＯＳ−７、ＶＥＲＯ、ＣＶ−１、ＬＬＣ−ＭＫ２、ＭＤＣＫ、ＭＤＢＫ、Ｒａｊｉ Ｂ、ＣＨＯ−Ｋ１、３Ｄ４／３１、ＳＪＰＬ、ＩＰＥＣ−Ｊ２、ＴＨＰ−１、ＲＡＷ２６４．７、ＭＡ−１０４、２９３ＴおよびＳＴ細胞からなる群から選択されるトランスフェクト細胞または細胞系統を提供する、請求項２６、２７または２８に記載の方法。
【請求項３９】
工程（ａ）は、樹状細胞、マクロファージ細胞、単球系細胞、リンパ系細胞および絨毛細胞からなる群から選択されるトランスフェクト細胞または細胞系統を提供する、請求項２９に記載の方法。
【請求項４０】
工程（ａ）は、ＢＨＫ−２１、ＭＡＲＣ−１４５、ＰＫ−１５、ＣＯＳ−７、ＶＥＲＯ、ＣＶ−１、ＬＬＣ−ＭＫ２、ＭＤＣＫ、ＭＤＢＫ、Ｒａｊｉ Ｂ、ＣＨＯ−Ｋ１、３Ｄ４／３１、ＳＪＰＬ、ＩＰＥＣ−Ｊ２、ＴＨＰ−１、ＲＡＷ２６４．７、ＭＡ−１０４、２９３ＴおよびＳＴ細胞からなる群から選択されるトランスフェクト細胞または細胞系統を提供する、請求項２９に記載の方法。
【請求項４１】
工程（ａ）は、樹状細胞、マクロファージ細胞、単球系細胞、リンパ系細胞および絨毛細胞からなる群から選択されるトランスフェクト細胞または細胞系統を提供する、請求項３０に記載の方法。
【請求項４２】
工程（ａ）は、ＢＨＫ−２１、ＭＡＲＣ−１４５、ＰＫ−１５、ＣＯＳ−７、ＶＥＲＯ、ＣＶ−１、ＬＬＣ−ＭＫ２、ＭＤＣＫ、ＭＤＢＫ、Ｒａｊｉ Ｂ、ＣＨＯ−Ｋ１、３Ｄ４／３１、ＳＪＰＬ、ＩＰＥＣ−Ｊ２、ＴＨＰ−１、ＲＡＷ２６４．７、ＭＡ−１０４、２９３ＴおよびＳＴ細胞からなる群から選択されるトランスフェクト細胞または細胞系統を提供する、請求項３０に記載の方法。
【請求項４３】
工程（ａ）は、樹状細胞、マクロファージ細胞、単球系細胞、リンパ系細胞および絨毛細胞からなる群から選択されるトランスフェクト細胞または細胞系統を提供する、請求項３１に記載の方法。
【請求項４４】
工程（ａ）は、ＢＨＫ−２１、ＭＡＲＣ−１４５、ＰＫ−１５、ＣＯＳ−７、ＶＥＲＯ、ＣＶ−１、ＬＬＣ−ＭＫ２、ＭＤＣＫ、ＭＤＢＫ、Ｒａｊｉ Ｂ、ＣＨＯ−Ｋ１、３Ｄ４／３１、ＳＪＰＬ、ＩＰＥＣ−Ｊ２、ＴＨＰ−１、ＲＡＷ２６４．７、ＭＡ−１０４、２９３ＴおよびＳＴ細胞からなる群から選択されるトランスフェクト細胞または細胞系統を提供する、請求項３１に記載の方法。
【請求項４５】
工程（ａ）は、樹状細胞、マクロファージ細胞、単球系細胞、リンパ系細胞および絨毛細胞からなる群から選択されるトランスフェクト細胞または細胞系統を提供する、請求項３２に記載の方法。
【請求項４６】
工程（ａ）は、ＢＨＫ−２１、ＭＡＲＣ−１４５、ＰＫ−１５、ＣＯＳ−７、ＶＥＲＯ、ＣＶ−１、ＬＬＣ−ＭＫ２、ＭＤＣＫ、ＭＤＢＫ、Ｒａｊｉ Ｂ、ＣＨＯ−Ｋ１、３Ｄ４／３１、ＳＪＰＬ、ＩＰＥＣ−Ｊ２、ＴＨＰ−１、ＲＡＷ２６４．７、ＭＡ−１０４、２９３ＴおよびＳＴ細胞からなる群から選択されるトランスフェクト細胞または細胞系統を提供する、請求項３２に記載の方法。
【請求項４７】
工程（ａ）は、樹状細胞、マクロファージ細胞、単球系細胞、リンパ系細胞および絨毛細胞からなる群から選択されるトランスフェクト細胞または細胞系統を提供する、請求項３３に記載の方法。
【請求項４８】
工程（ａ）は、ＢＨＫ−２１、ＭＡＲＣ−１４５、ＰＫ−１５、ＣＯＳ−７、ＶＥＲＯ、ＣＶ−１、ＬＬＣ−ＭＫ２、ＭＤＣＫ、ＭＤＢＫ、Ｒａｊｉ Ｂ、ＣＨＯ−Ｋ１、３Ｄ４／３１、ＳＪＰＬ、ＩＰＥＣ−Ｊ２、ＴＨＰ−１、ＲＡＷ２６４．７、ＭＡ−１０４、２９３ＴおよびＳＴ細胞からなる群から選択されるトランスフェクト細胞または細胞系統を提供する、請求項３３に記載の方法。
【請求項４９】
工程（ａ）は、樹状細胞、マクロファージ細胞、単球系細胞、リンパ系細胞および絨毛細胞からなる群から選択されるトランスフェクト細胞または細胞系統を提供する、請求項３４に記載の方法。
【請求項５０】
工程（ａ）は、ＢＨＫ−２１、ＭＡＲＣ−１４５、ＰＫ−１５、ＣＯＳ−７、ＶＥＲＯ、ＣＶ−１、ＬＬＣ−ＭＫ２、ＭＤＣＫ、ＭＤＢＫ、Ｒａｊｉ Ｂ、ＣＨＯ−Ｋ１、３Ｄ４／３１、ＳＪＰＬ、ＩＰＥＣ−Ｊ２、ＴＨＰ−１、ＲＡＷ２６４．７、ＭＡ−１０４、２９３ＴおよびＳＴ細胞からなる群から選択されるトランスフェクト細胞または細胞系統を提供する、請求項３４に記載の方法。
【請求項５１】
工程（ａ）は、樹状細胞、マクロファージ細胞、単球系細胞、リンパ系細胞および絨毛細胞からなる群から選択されるトランスフェクト細胞または細胞系統を提供する、請求項３５に記載の方法。
【請求項５２】
工程（ａ）は、ＢＨＫ−２１、ＭＡＲＣ−１４５、ＰＫ−１５、ＣＯＳ−７、ＶＥＲＯ、ＣＶ−１、ＬＬＣ−ＭＫ２、ＭＤＣＫ、ＭＤＢＫ、Ｒａｊｉ Ｂ、ＣＨＯ−Ｋ１、３Ｄ４／３１、ＳＪＰＬ、ＩＰＥＣ−Ｊ２、ＴＨＰ−１、ＲＡＷ２６４．７、ＭＡ−１０４、２９３ＴおよびＳＴ細胞からなる群から選択されるトランスフェクト細胞または細胞系統を提供する、請求項３５に記載の方法。
【請求項５３】
工程（ａ）は、樹状細胞、マクロファージ細胞、単球系細胞、リンパ系細胞および絨毛細胞からなる群から選択されるトランスフェクト細胞または細胞系統を提供する、請求項３６に記載の方法。
【請求項５４】
工程（ａ）は、ＢＨＫ−２１、ＭＡＲＣ−１４５、ＰＫ−１５、ＣＯＳ−７、ＶＥＲＯ、ＣＶ−１、ＬＬＣ−ＭＫ２、ＭＤＣＫ、ＭＤＢＫ、Ｒａｊｉ Ｂ、ＣＨＯ−Ｋ１、３Ｄ４／３１、ＳＪＰＬ、ＩＰＥＣ−Ｊ２、ＴＨＰ−１、ＲＡＷ２６４．７、ＭＡ−１０４、２９３ＴおよびＳＴ細胞からなる群から選択されるトランスフェクト細胞または細胞系統を提供する、請求項３６に記載の方法。
【請求項５５】
前記ウイルスはエンベロープまたは非エンベロープウイルスである、請求項２６、２７または２８に記載の方法。
【請求項５６】
前記ウイルスは、ブタ繁殖呼吸障害症候群ウイルス、ブタ呼吸器型コロナウイルス、ブタ流行性下痢ウイルス、ブタ内在性レトロウイルス、ブタ血球凝集性脳脊髄炎ウイルス、感染性胃腸炎ウイルス、日本脳炎ウイルス、ヒト免疫不全ウイルス、デングウイルス、ウエストナイルウイルス、エボラウイルス、マールブルグウイルス、重症急性呼吸器症候群コロナウイルス、ネココロナウイルス、ヒトサイトメガロウイルス、ブタサイトメガロウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、サル免疫不全ウイルス、ネコ免疫不全ウイルス、シンドビスウイルス、単純ヘルペスウイルス、Ａ型インフルエンザウイルス、Ｂ型インフルエンザウイルス、Ｃ型インフルエンザウイルス、ブタインフルエンザウイルス、ニパウイルス、ヘンドラウイルス、アフリカブタコレラウイルス、ブタコレラウイルス、ウシウイルス性下痢ウイルス、仮性狂犬病ウイルス、ブタポックスウイルス、水疱性口内炎ウイルス、狂犬病ウイルス、東部ウマ脳炎ウイルスおよびウマ動脈炎ウイルスからなる群から選択されるエンベロープウイルスである、請求項５５に記載の方法。
【請求項５７】
前記ウイルスはエンベロープまたは非エンベロープウイルスである、請求項２９に記載の方法。
【請求項５８】
前記ウイルスは、ブタ繁殖呼吸障害症候群ウイルス、ブタ呼吸器型コロナウイルス、ブタ流行性下痢ウイルス、ブタ内在性レトロウイルス、ブタ血球凝集性脳脊髄炎ウイルス、感染性胃腸炎ウイルス、日本脳炎ウイルス、ヒト免疫不全ウイルス、デングウイルス、ウエストナイルウイルス、エボラウイルス、マールブルグウイルス、重症急性呼吸器症候群コロナウイルス、ネココロナウイルス、ヒトサイトメガロウイルス、ブタサイトメガロウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、サル免疫不全ウイルス、ネコ免疫不全ウイルス、シンドビスウイルス、単純ヘルペスウイルス、Ａ型インフルエンザウイルス、Ｂ型インフルエンザウイルス、Ｃ型インフルエンザウイルス、ブタインフルエンザウイルス、ニパウイルス、ヘンドラウイルス、アフリカブタコレラウイルス、ブタコレラウイルス、ウシウイルス性下痢ウイルス、仮性狂犬病ウイルス、ブタポックスウイルス、水疱性口内炎ウイルス、狂犬病ウイルス、東部ウマ脳炎ウイルスおよびウマ動脈炎ウイルスからなる群から選択されるエンベロープウイルスである、請求項５７に記載の方法。
【請求項５９】
前記ウイルスは、ブタ繁殖呼吸障害症候群ウイルス、ブタ呼吸器型コロナウイルス、ブタ流行性下痢ウイルス、ブタ内在性レトロウイルス、ブタ血球凝集性脳脊髄炎ウイルス、感染性胃腸炎ウイルス、日本脳炎ウイルス、ヒト免疫不全ウイルス、デングウイルス、ウエストナイルウイルス、エボラウイルス、マールブルグウイルス、重症急性呼吸器症候群コロナウイルス、ネココロナウイルス、ヒトサイトメガロウイルス、ブタサイトメガロウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、サル免疫不全ウイルス、ネコ免疫不全ウイルス、シンドビスウイルス、単純ヘルペスウイルス、Ａ型インフルエンザウイルス、Ｂ型インフルエンザウイルス、Ｃ型インフルエンザウイルス、ブタインフルエンザウイルス、ニパウイルス、ヘンドラウイルス、アフリカブタコレラウイルス、ブタコレラウイルス、ウシウイルス性下痢ウイルス、仮性狂犬病ウイルス、ブタポックスウイルス、水疱性口内炎ウイルス、狂犬病ウイルス、東部ウマ脳炎ウイルスおよびウマ動脈炎ウイルスからなる群から選択されるエンベロープウイルスである、請求項３７に記載の方法。
【請求項６０】
前記ウイルスは、ブタ繁殖呼吸障害症候群ウイルス、ブタ呼吸器型コロナウイルス、ブタ流行性下痢ウイルス、ブタ内在性レトロウイルス、ブタ血球凝集性脳脊髄炎ウイルス、感染性胃腸炎ウイルス、日本脳炎ウイルス、ヒト免疫不全ウイルス、デングウイルス、ウエストナイルウイルス、エボラウイルス、マールブルグウイルス、重症急性呼吸器症候群コロナウイルス、ネココロナウイルス、ヒトサイトメガロウイルス、ブタサイトメガロウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、サル免疫不全ウイルス、ネコ免疫不全ウイルス、シンドビスウイルス、単純ヘルペスウイルス、Ａ型インフルエンザウイルス、Ｂ型インフルエンザウイルス、Ｃ型インフルエンザウイルス、ブタインフルエンザウイルス、ニパウイルス、ヘンドラウイルス、アフリカブタコレラウイルス、ブタコレラウイルス、ウシウイルス性下痢ウイルス、仮性狂犬病ウイルス、ブタポックスウイルス、水疱性口内炎ウイルス、狂犬病ウイルス、東部ウマ脳炎ウイルスおよびウマ動脈炎ウイルスからなる群から選択されるエンベロープウイルスである、請求項３８に記載の方法。
【請求項６１】
前記ウイルスは、ブタ繁殖呼吸障害症候群ウイルス、ブタ呼吸器型コロナウイルス、ブタ流行性下痢ウイルス、ブタ内在性レトロウイルス、ブタ血球凝集性脳脊髄炎ウイルス、感染性胃腸炎ウイルス、日本脳炎ウイルス、ヒト免疫不全ウイルス、デングウイルス、ウエストナイルウイルス、エボラウイルス、マールブルグウイルス、重症急性呼吸器症候群コロナウイルス、ネココロナウイルス、ヒトサイトメガロウイルス、ブタサイトメガロウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、サル免疫不全ウイルス、ネコ免疫不全ウイルス、シンドビスウイルス、単純ヘルペスウイルス、Ａ型インフルエンザウイルス、Ｂ型インフルエンザウイルス、Ｃ型インフルエンザウイルス、ブタインフルエンザウイルス、ニパウイルス、ヘンドラウイルス、アフリカブタコレラウイルス、ブタコレラウイルス、ウシウイルス性下痢ウイルス、仮性狂犬病ウイルス、ブタポックスウイルス、水疱性口内炎ウイルス、狂犬病ウイルス、東部ウマ脳炎ウイルスおよびウマ動脈炎ウイルスからなる群から選択されるエンベロープウイルスである、請求項３９に記載の方法。
【請求項６２】
前記ウイルスは、ブタ繁殖呼吸障害症候群ウイルス、ブタ呼吸器型コロナウイルス、ブタ流行性下痢ウイルス、ブタ内在性レトロウイルス、ブタ血球凝集性脳脊髄炎ウイルス、感染性胃腸炎ウイルス、日本脳炎ウイルス、ヒト免疫不全ウイルス、デングウイルス、ウエストナイルウイルス、エボラウイルス、マールブルグウイルス、重症急性呼吸器症候群コロナウイルス、ネココロナウイルス、ヒトサイトメガロウイルス、ブタサイトメガロウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、サル免疫不全ウイルス、ネコ免疫不全ウイルス、シンドビスウイルス、単純ヘルペスウイルス、Ａ型インフルエンザウイルス、Ｂ型インフルエンザウイルス、Ｃ型インフルエンザウイルス、ブタインフルエンザウイルス、ニパウイルス、ヘンドラウイルス、アフリカブタコレラウイルス、ブタコレラウイルス、ウシウイルス性下痢ウイルス、仮性狂犬病ウイルス、ブタポックスウイルス、水疱性口内炎ウイルス、狂犬病ウイルス、東部ウマ脳炎ウイルスおよびウマ動脈炎ウイルスからなる群から選択されるエンベロープウイルスである、請求項４０に記載の方法。
【請求項６３】
前記ウイルスは非エンベロープウイルスである、請求項５５に記載の方法。
【請求項６４】
前記非エンベロープウイルスは、Ｅ型肝炎ウイルスまたはブタサーコウイルス２型である、請求項６３に記載の方法。
【請求項６５】
前記ウイルスは非エンベロープウイルスである、請求項５７に記載の方法。
【請求項６６】
前記非エンベロープウイルスは、Ｅ型肝炎ウイルスまたはブタサーコウイルス２型である、請求項６５に記載の方法。
【請求項６７】
非霊長類大型動物種から未知のＤＣ−ＳＩＧＮ ｃＤＮＡ相同体をクローニングする方法であって、以下の工程：
（ａ）動物の静脈血から、適切な宿主細胞において、前記樹状細胞の増殖を可能にする適切な栄養条件下で、単球由来樹状細胞を単離し、そしてインビトロで培養する工程と；
（ｂ）ＲＮＡを抽出する工程と；
（ｃ）ｃＤＮＡの第１鎖を合成し、そしてＲＴ−ＰＣＲによって、ｈＤＣ−ＳＩＧＮに相同な配列を有する短いフラグメントを増幅するために、ヒトおよびマウスＤＣ−ＳＩＧＮをコードする核酸分子の複数の配列アラインメントに基づいて、ヒトおよびマウスＤＣ−ＳＩＧＮヌクレオチド配列の保存配列に相補的であるように設計された縮重プライマーを使用して、逆転写酵素（ＲＴ）およびＰＣＲを実施する工程と；
（ｄ）それぞれ、５’−ＲＡＣＥまたは３’−ＲＡＣＥについて設計した、配列番号９を含む遺伝子特異的プライマーＰＤＲ−１および配列番号１０を含む遺伝子特異的プライマーＰＤＦ−１を使用して、縮重ＰＣＲ産物由来の配列情報に基づき、短いフラグメントに対して逆転写酵素およびＲＡＣＥ−ＰＣＲを実施する工程と；
（ｅ）ｃＤＮＡ末端迅速増幅（ＲＡＣＥ）−ＰＣＲ反応産物によって、動物における未知のＤＣ−ＳＩＧＮ相同体の完全なｃＤＮＡの２つの重複フラグメントをクローニングする工程と；
（ｆ）動物のＤＣ−ＳＩＧＮ相同体を単離、精製または配列決定する工程と
を含む、方法。
【請求項６８】
前記宿主細胞は、ＣＤ１４陽性末梢血単球細胞、脾臓由来リンパ球または骨髄由来リンパ球の培養物である、請求項６７に記載の方法。
【請求項１】
ｐＤＣ−ＳＩＧＮ、ｐＩＣＡＭ−３およびｐＬＳＥＣｔｉｎからなる群から選択される１つ以上のタンパク質をコードするヌクレオチド配列、前記ヌクレオチド配列の少なくとも１つの相補体、ならびに前記ヌクレオチド配列の少なくとも１つの機能的な定義された部分を含む単離された核酸分子。
【請求項２】
前記ヌクレオチド配列は融合タンパク質をコードする、請求項１に記載の核酸分子。
【請求項３】
前記融合タンパク質は少なくとも２つのタンパク質を含み、ｐＬＳＥＣｔｉｎが、ｐＤＣ−ＳＩＧＮか、または２つのタンパク質のうちの少なくとも１つの機能的な定義された部分に連結されている、請求項２に記載の核酸分子。
【請求項４】
前記融合タンパク質は、ｈＤＣ−ＳＩＧＮ、ｈＬ−ＳＩＧＮ、ｈＬＳＥＣｔｉｎおよびそれらの組み合わせからなる群から選択される少なくとも１つのタンパク質、またはその機能的な定義された部分をさらに含む、請求項２に記載の核酸分子。
【請求項５】
前記融合タンパク質は、ｈＤＣ−ＳＩＧＮ、ｈＬ−ＳＩＧＮ、ｈＬＳＥＣｔｉｎおよびそれらの組み合わせからなる群から選択される少なくとも１つのタンパク質、またはその機能的な定義された部分をさらに含む、請求項３に記載の核酸分子。
【請求項６】
前記融合タンパク質は、ｐＤＣ−ＳＩＧＮまたはｐＬＳＥＣｔｉｎの炭水化物認識ドメインと、ｈＤＣ−ＳＩＧＮ、ｈＬ−ＳＩＧＮ、ｈＬＳＥＣｔｉｎの細胞質尾部、膜貫通ドメインもしくは反復ネック領域またはそれらの組み合わせとを含有する、請求項４に記載の核酸分子。
【請求項７】
ｐＤＣ−ＳＩＧＮをコードする前記ヌクレオチド配列は、配列番号１またはその相補鎖を含む、請求項１に記載の核酸分子。
【請求項８】
ｐＩＣＡＭ−３をコードする前記ヌクレオチド配列は、配列番号４、配列番号３９またはその相補鎖を含む、請求項１に記載の核酸分子。
【請求項９】
ｐＬＳＥＣｔｉｎをコードする前記ヌクレオチド配列は、配列番号３６またはその相補鎖を含む、請求項１に記載の核酸分子。
【請求項１０】
請求項１、２、３、４、５、６、７、８または９のいずれか一項に記載の核酸分子を含有する生物学的に機能的なプラスミドまたはウイルスベクター。
【請求項１１】
前記ベクターはｐＴｒｉＥｘ−１．１Ｎｅｏである、請求項１０に記載の生物学的に機能的なプラスミドまたはウイルスベクター。
【請求項１２】
ｐＤＣ−ＳＩＧＮ、ｐＩＣＡＭ−３およびｐＬＳＥＣｔｉｎからなる群から選択される少なくとも１つ以上のタンパク質、ヌクレオチド配列の少なくとも１つの相補体ならびにそれらの機能的な定義された部分を発現する単離されたトランスフェクト細胞または細胞系統。
【請求項１３】
前記細胞または細胞系統は融合タンパク質を発現する、請求項１２に記載の細胞または細胞系統。
【請求項１４】
前記融合タンパク質は少なくとも２つのタンパク質を含み、ｐＬＳＥＣｔｉｎが、ｐＤＣ−ＳＩＧＮか、または２つのタンパク質のうちの少なくとも１つの機能的な定義された部分に連結されている、請求項１３に記載の細胞または細胞系統。
【請求項１５】
前記融合タンパク質は、ｈＤＣ−ＳＩＧＮ、ｈＬ−ＳＩＧＮ、ｈＬＳＥＣｔｉｎおよびそれらの組み合わせからなる群から選択される少なくとも１つのタンパク質、またはその機能的な定義された部分をさらに含む、請求項１３に記載の細胞または細胞系統。
【請求項１６】
前記融合タンパク質は、ｈＤＣ−ＳＩＧＮ、ｈＬ−ＳＩＧＮ、ｈＬＳＥＣｔｉｎおよびそれらの組み合わせからなる群から選択される少なくとも１つのタンパク質、またはその機能的な定義された部分をさらに含む、請求項１４に記載の細胞または細胞系統。
【請求項１７】
前記融合タンパク質は、ｐＤＣ−ＳＩＧＮまたはｐＬＳＥＣｔｉｎの炭水化物認識ドメインと、ｈＤＣ−ＳＩＧＮ、ｈＬ−ＳＩＧＮ、ｈＬＳＥＣｔｉｎの細胞質尾部、膜貫通ドメインもしくは反復ネック領域またはそれらの組み合わせとを含有する、請求項１５に記載の細胞または細胞系統。
【請求項１８】
前記細胞または細胞系統は、樹状細胞、マクロファージ細胞、単球系細胞、リンパ系細胞および絨毛細胞からなる群から選択される、請求項１２、１３、１４または１５のいずれか一項に記載の細胞または細胞系統。
【請求項１９】
前記細胞または細胞系統は、ＢＨＫ−２１、ＭＡＲＣ−１４５、ＰＫ−１５、ＣＯＳ−７、ＶＥＲＯ、ＣＶ−１、ＬＬＣ−ＭＫ２、ＭＤＣＫ、ＭＤＢＫ、Ｒａｊｉ Ｂ、ＣＨＯ−Ｋ１、３Ｄ４／３１、ＳＪＰＬ、ＩＰＥＣ−Ｊ２、ＴＨＰ−１、ＲＡＷ２６４．７、ＭＡ−１０４、２９３ＴおよびＳＴ細胞からなる群から選択される、請求項１２、１３、１４または１５のいずれか一項に記載の細胞または細胞系統。
【請求項２０】
タンパク質産物の産生のための方法であって、適切な栄養条件下で、請求項１、２、３、４、５、６、７、８または９のいずれか一項に記載の核酸分子でトランスフェクトされた原核または真核細胞を、前記タンパク質産物の発現を可能にする様式で増殖させる工程と、前記核酸分子の発現の所望されるタンパク質産物を単離する工程とを含む方法。
【請求項２１】
配列番号２、配列番号５または配列番号３７を含む単離されたタンパク質。
【請求項２２】
配列番号２、配列番号５または配列番号３７のアミノ酸配列に特異的に結合する単離されたモノクローナルまたはポリクローナル抗体。
【請求項２３】
前記抗体はポリクローナルであり、そして前記ポリクローナル抗体は、配列番号１３、配列番号１４または配列番号１３および配列番号１４の組み合わせを含むペプチド領域に特異的に結合する、請求項２２に記載の抗体。
【請求項２４】
請求項２２または２３に記載の抗体を産生するハイブリドーマ細胞系統。
【請求項２５】
配列番号２、配列番号５または配列番号３７のアミノ酸配列に特異的に結合する天然のまたは人工的に合成されたオリゴ糖リガンド。
【請求項２６】
（ａ）ｐＤＣ−ＳＩＧＮ、ｐＩＣＡＭ−３およびｐＬＳＥＣｔｉｎからなる群から選択される１つ以上のタンパク質をコードするヌクレオチド配列、前記ヌクレオチド配列の少なくとも１つの相補体、ならびに前記ヌクレオチド配列の少なくとも１つの機能的な定義された部分を含有するトランスフェクト細胞または細胞系統を提供する工程と；
（ｂ）前記トランスフェクト細胞または細胞系統を増殖培地において増殖させて、培養物を形成する工程と；
（ｃ）前記培養物にウイルスを播種する工程と；
（ｄ）前記播種された培養物を、培養物中でウイルスを繁殖させるのに有効な条件下でインキュベートする工程と
を含む、ウイルスを繁殖させるための方法。
【請求項２７】
細胞変性効果が観察されるか、または高い力価が達成されるまで、前記播種された培養物をインキュベートする工程をさらに含む、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
前記細胞を溶解して、細胞内のビリオンを放出させ、そしてウイルス抗原を採取する工程をさらに含む、請求項２６に記載の方法。
【請求項２９】
工程（ａ）は、融合タンパク質をコードするヌクレオチド配列を含有するトランスフェクト細胞または細胞系統を提供する、請求項２６、２７または２８に記載の方法。
【請求項３０】
工程（ａ）における融合タンパク質は少なくとも２つのタンパク質を含み、ｐＬＳＥＣｔｉｎが、ｐＤＣ−ＳＩＧＮか、または２つのタンパク質のうちの少なくとも１つの機能的な定義された部分に連結されている、請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
工程（ａ）における融合タンパク質は、ｈＤＣ−ＳＩＧＮ、ｈＬ−ＳＩＧＮ、ｈＬＳＥＣｔｉｎおよびそれらの組み合わせからなる群から選択される少なくとも１つのタンパク質、またはその機能的な定義された部分をさらに含む、請求項２９に記載の方法。
【請求項３２】
工程（ａ）における融合タンパク質は、ｈＤＣ−ＳＩＧＮ、ｈＬ−ＳＩＧＮ、ｈＬＳＥＣｔｉｎおよびそれらの組み合わせからなる群から選択される少なくとも１つのタンパク質、またはその機能的な定義された部分をさらに含む、請求項３０に記載の方法。
【請求項３３】
工程（ａ）における融合タンパク質は、ｐＤＣ−ＳＩＧＮまたはｐＬＳＥＣｔｉｎの炭水化物認識ドメインと、ｈＤＣ−ＳＩＧＮ、ｈＬ−ＳＩＧＮ、ｈＬＳＥＣｔｉｎの細胞質尾部、膜貫通ドメインもしくは反復ネック領域またはそれらの組み合わせとを含有する、請求項３１に記載の方法。
【請求項３４】
工程（ａ）は、配列番号１またはその相補鎖を含むヌクレオチド配列を含有するトランスフェクト細胞または細胞系統を提供する、請求項２６、２７または２８に記載の方法。
【請求項３５】
工程（ａ）は、配列番号４、配列番号３９またはその相補鎖を含むヌクレオチド配列を含有するトランスフェクト細胞または細胞系統を提供する、請求項２６、２７または２８に記載の方法。
【請求項３６】
工程（ａ）は、配列番号３６またはその相補鎖を含むヌクレオチド配列を含有するトランスフェクト細胞または細胞系統を提供する、請求項２６、２７または２８に記載の方法。
【請求項３７】
工程（ａ）は、樹状細胞、マクロファージ細胞、単球系細胞、リンパ系細胞および絨毛細胞からなる群から選択されるトランスフェクト細胞または細胞系統を提供する、請求項２６、２７または２８に記載の方法。
【請求項３８】
工程（ａ）は、ＢＨＫ−２１、ＭＡＲＣ−１４５、ＰＫ−１５、ＣＯＳ−７、ＶＥＲＯ、ＣＶ−１、ＬＬＣ−ＭＫ２、ＭＤＣＫ、ＭＤＢＫ、Ｒａｊｉ Ｂ、ＣＨＯ−Ｋ１、３Ｄ４／３１、ＳＪＰＬ、ＩＰＥＣ−Ｊ２、ＴＨＰ−１、ＲＡＷ２６４．７、ＭＡ−１０４、２９３ＴおよびＳＴ細胞からなる群から選択されるトランスフェクト細胞または細胞系統を提供する、請求項２６、２７または２８に記載の方法。
【請求項３９】
工程（ａ）は、樹状細胞、マクロファージ細胞、単球系細胞、リンパ系細胞および絨毛細胞からなる群から選択されるトランスフェクト細胞または細胞系統を提供する、請求項２９に記載の方法。
【請求項４０】
工程（ａ）は、ＢＨＫ−２１、ＭＡＲＣ−１４５、ＰＫ−１５、ＣＯＳ−７、ＶＥＲＯ、ＣＶ−１、ＬＬＣ−ＭＫ２、ＭＤＣＫ、ＭＤＢＫ、Ｒａｊｉ Ｂ、ＣＨＯ−Ｋ１、３Ｄ４／３１、ＳＪＰＬ、ＩＰＥＣ−Ｊ２、ＴＨＰ−１、ＲＡＷ２６４．７、ＭＡ−１０４、２９３ＴおよびＳＴ細胞からなる群から選択されるトランスフェクト細胞または細胞系統を提供する、請求項２９に記載の方法。
【請求項４１】
工程（ａ）は、樹状細胞、マクロファージ細胞、単球系細胞、リンパ系細胞および絨毛細胞からなる群から選択されるトランスフェクト細胞または細胞系統を提供する、請求項３０に記載の方法。
【請求項４２】
工程（ａ）は、ＢＨＫ−２１、ＭＡＲＣ−１４５、ＰＫ−１５、ＣＯＳ−７、ＶＥＲＯ、ＣＶ−１、ＬＬＣ−ＭＫ２、ＭＤＣＫ、ＭＤＢＫ、Ｒａｊｉ Ｂ、ＣＨＯ−Ｋ１、３Ｄ４／３１、ＳＪＰＬ、ＩＰＥＣ−Ｊ２、ＴＨＰ−１、ＲＡＷ２６４．７、ＭＡ−１０４、２９３ＴおよびＳＴ細胞からなる群から選択されるトランスフェクト細胞または細胞系統を提供する、請求項３０に記載の方法。
【請求項４３】
工程（ａ）は、樹状細胞、マクロファージ細胞、単球系細胞、リンパ系細胞および絨毛細胞からなる群から選択されるトランスフェクト細胞または細胞系統を提供する、請求項３１に記載の方法。
【請求項４４】
工程（ａ）は、ＢＨＫ−２１、ＭＡＲＣ−１４５、ＰＫ−１５、ＣＯＳ−７、ＶＥＲＯ、ＣＶ−１、ＬＬＣ−ＭＫ２、ＭＤＣＫ、ＭＤＢＫ、Ｒａｊｉ Ｂ、ＣＨＯ−Ｋ１、３Ｄ４／３１、ＳＪＰＬ、ＩＰＥＣ−Ｊ２、ＴＨＰ−１、ＲＡＷ２６４．７、ＭＡ−１０４、２９３ＴおよびＳＴ細胞からなる群から選択されるトランスフェクト細胞または細胞系統を提供する、請求項３１に記載の方法。
【請求項４５】
工程（ａ）は、樹状細胞、マクロファージ細胞、単球系細胞、リンパ系細胞および絨毛細胞からなる群から選択されるトランスフェクト細胞または細胞系統を提供する、請求項３２に記載の方法。
【請求項４６】
工程（ａ）は、ＢＨＫ−２１、ＭＡＲＣ−１４５、ＰＫ−１５、ＣＯＳ−７、ＶＥＲＯ、ＣＶ−１、ＬＬＣ−ＭＫ２、ＭＤＣＫ、ＭＤＢＫ、Ｒａｊｉ Ｂ、ＣＨＯ−Ｋ１、３Ｄ４／３１、ＳＪＰＬ、ＩＰＥＣ−Ｊ２、ＴＨＰ−１、ＲＡＷ２６４．７、ＭＡ−１０４、２９３ＴおよびＳＴ細胞からなる群から選択されるトランスフェクト細胞または細胞系統を提供する、請求項３２に記載の方法。
【請求項４７】
工程（ａ）は、樹状細胞、マクロファージ細胞、単球系細胞、リンパ系細胞および絨毛細胞からなる群から選択されるトランスフェクト細胞または細胞系統を提供する、請求項３３に記載の方法。
【請求項４８】
工程（ａ）は、ＢＨＫ−２１、ＭＡＲＣ−１４５、ＰＫ−１５、ＣＯＳ−７、ＶＥＲＯ、ＣＶ−１、ＬＬＣ−ＭＫ２、ＭＤＣＫ、ＭＤＢＫ、Ｒａｊｉ Ｂ、ＣＨＯ−Ｋ１、３Ｄ４／３１、ＳＪＰＬ、ＩＰＥＣ−Ｊ２、ＴＨＰ−１、ＲＡＷ２６４．７、ＭＡ−１０４、２９３ＴおよびＳＴ細胞からなる群から選択されるトランスフェクト細胞または細胞系統を提供する、請求項３３に記載の方法。
【請求項４９】
工程（ａ）は、樹状細胞、マクロファージ細胞、単球系細胞、リンパ系細胞および絨毛細胞からなる群から選択されるトランスフェクト細胞または細胞系統を提供する、請求項３４に記載の方法。
【請求項５０】
工程（ａ）は、ＢＨＫ−２１、ＭＡＲＣ−１４５、ＰＫ−１５、ＣＯＳ−７、ＶＥＲＯ、ＣＶ−１、ＬＬＣ−ＭＫ２、ＭＤＣＫ、ＭＤＢＫ、Ｒａｊｉ Ｂ、ＣＨＯ−Ｋ１、３Ｄ４／３１、ＳＪＰＬ、ＩＰＥＣ−Ｊ２、ＴＨＰ−１、ＲＡＷ２６４．７、ＭＡ−１０４、２９３ＴおよびＳＴ細胞からなる群から選択されるトランスフェクト細胞または細胞系統を提供する、請求項３４に記載の方法。
【請求項５１】
工程（ａ）は、樹状細胞、マクロファージ細胞、単球系細胞、リンパ系細胞および絨毛細胞からなる群から選択されるトランスフェクト細胞または細胞系統を提供する、請求項３５に記載の方法。
【請求項５２】
工程（ａ）は、ＢＨＫ−２１、ＭＡＲＣ−１４５、ＰＫ−１５、ＣＯＳ−７、ＶＥＲＯ、ＣＶ−１、ＬＬＣ−ＭＫ２、ＭＤＣＫ、ＭＤＢＫ、Ｒａｊｉ Ｂ、ＣＨＯ−Ｋ１、３Ｄ４／３１、ＳＪＰＬ、ＩＰＥＣ−Ｊ２、ＴＨＰ−１、ＲＡＷ２６４．７、ＭＡ−１０４、２９３ＴおよびＳＴ細胞からなる群から選択されるトランスフェクト細胞または細胞系統を提供する、請求項３５に記載の方法。
【請求項５３】
工程（ａ）は、樹状細胞、マクロファージ細胞、単球系細胞、リンパ系細胞および絨毛細胞からなる群から選択されるトランスフェクト細胞または細胞系統を提供する、請求項３６に記載の方法。
【請求項５４】
工程（ａ）は、ＢＨＫ−２１、ＭＡＲＣ−１４５、ＰＫ−１５、ＣＯＳ−７、ＶＥＲＯ、ＣＶ−１、ＬＬＣ−ＭＫ２、ＭＤＣＫ、ＭＤＢＫ、Ｒａｊｉ Ｂ、ＣＨＯ−Ｋ１、３Ｄ４／３１、ＳＪＰＬ、ＩＰＥＣ−Ｊ２、ＴＨＰ−１、ＲＡＷ２６４．７、ＭＡ−１０４、２９３ＴおよびＳＴ細胞からなる群から選択されるトランスフェクト細胞または細胞系統を提供する、請求項３６に記載の方法。
【請求項５５】
前記ウイルスはエンベロープまたは非エンベロープウイルスである、請求項２６、２７または２８に記載の方法。
【請求項５６】
前記ウイルスは、ブタ繁殖呼吸障害症候群ウイルス、ブタ呼吸器型コロナウイルス、ブタ流行性下痢ウイルス、ブタ内在性レトロウイルス、ブタ血球凝集性脳脊髄炎ウイルス、感染性胃腸炎ウイルス、日本脳炎ウイルス、ヒト免疫不全ウイルス、デングウイルス、ウエストナイルウイルス、エボラウイルス、マールブルグウイルス、重症急性呼吸器症候群コロナウイルス、ネココロナウイルス、ヒトサイトメガロウイルス、ブタサイトメガロウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、サル免疫不全ウイルス、ネコ免疫不全ウイルス、シンドビスウイルス、単純ヘルペスウイルス、Ａ型インフルエンザウイルス、Ｂ型インフルエンザウイルス、Ｃ型インフルエンザウイルス、ブタインフルエンザウイルス、ニパウイルス、ヘンドラウイルス、アフリカブタコレラウイルス、ブタコレラウイルス、ウシウイルス性下痢ウイルス、仮性狂犬病ウイルス、ブタポックスウイルス、水疱性口内炎ウイルス、狂犬病ウイルス、東部ウマ脳炎ウイルスおよびウマ動脈炎ウイルスからなる群から選択されるエンベロープウイルスである、請求項５５に記載の方法。
【請求項５７】
前記ウイルスはエンベロープまたは非エンベロープウイルスである、請求項２９に記載の方法。
【請求項５８】
前記ウイルスは、ブタ繁殖呼吸障害症候群ウイルス、ブタ呼吸器型コロナウイルス、ブタ流行性下痢ウイルス、ブタ内在性レトロウイルス、ブタ血球凝集性脳脊髄炎ウイルス、感染性胃腸炎ウイルス、日本脳炎ウイルス、ヒト免疫不全ウイルス、デングウイルス、ウエストナイルウイルス、エボラウイルス、マールブルグウイルス、重症急性呼吸器症候群コロナウイルス、ネココロナウイルス、ヒトサイトメガロウイルス、ブタサイトメガロウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、サル免疫不全ウイルス、ネコ免疫不全ウイルス、シンドビスウイルス、単純ヘルペスウイルス、Ａ型インフルエンザウイルス、Ｂ型インフルエンザウイルス、Ｃ型インフルエンザウイルス、ブタインフルエンザウイルス、ニパウイルス、ヘンドラウイルス、アフリカブタコレラウイルス、ブタコレラウイルス、ウシウイルス性下痢ウイルス、仮性狂犬病ウイルス、ブタポックスウイルス、水疱性口内炎ウイルス、狂犬病ウイルス、東部ウマ脳炎ウイルスおよびウマ動脈炎ウイルスからなる群から選択されるエンベロープウイルスである、請求項５７に記載の方法。
【請求項５９】
前記ウイルスは、ブタ繁殖呼吸障害症候群ウイルス、ブタ呼吸器型コロナウイルス、ブタ流行性下痢ウイルス、ブタ内在性レトロウイルス、ブタ血球凝集性脳脊髄炎ウイルス、感染性胃腸炎ウイルス、日本脳炎ウイルス、ヒト免疫不全ウイルス、デングウイルス、ウエストナイルウイルス、エボラウイルス、マールブルグウイルス、重症急性呼吸器症候群コロナウイルス、ネココロナウイルス、ヒトサイトメガロウイルス、ブタサイトメガロウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、サル免疫不全ウイルス、ネコ免疫不全ウイルス、シンドビスウイルス、単純ヘルペスウイルス、Ａ型インフルエンザウイルス、Ｂ型インフルエンザウイルス、Ｃ型インフルエンザウイルス、ブタインフルエンザウイルス、ニパウイルス、ヘンドラウイルス、アフリカブタコレラウイルス、ブタコレラウイルス、ウシウイルス性下痢ウイルス、仮性狂犬病ウイルス、ブタポックスウイルス、水疱性口内炎ウイルス、狂犬病ウイルス、東部ウマ脳炎ウイルスおよびウマ動脈炎ウイルスからなる群から選択されるエンベロープウイルスである、請求項３７に記載の方法。
【請求項６０】
前記ウイルスは、ブタ繁殖呼吸障害症候群ウイルス、ブタ呼吸器型コロナウイルス、ブタ流行性下痢ウイルス、ブタ内在性レトロウイルス、ブタ血球凝集性脳脊髄炎ウイルス、感染性胃腸炎ウイルス、日本脳炎ウイルス、ヒト免疫不全ウイルス、デングウイルス、ウエストナイルウイルス、エボラウイルス、マールブルグウイルス、重症急性呼吸器症候群コロナウイルス、ネココロナウイルス、ヒトサイトメガロウイルス、ブタサイトメガロウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、サル免疫不全ウイルス、ネコ免疫不全ウイルス、シンドビスウイルス、単純ヘルペスウイルス、Ａ型インフルエンザウイルス、Ｂ型インフルエンザウイルス、Ｃ型インフルエンザウイルス、ブタインフルエンザウイルス、ニパウイルス、ヘンドラウイルス、アフリカブタコレラウイルス、ブタコレラウイルス、ウシウイルス性下痢ウイルス、仮性狂犬病ウイルス、ブタポックスウイルス、水疱性口内炎ウイルス、狂犬病ウイルス、東部ウマ脳炎ウイルスおよびウマ動脈炎ウイルスからなる群から選択されるエンベロープウイルスである、請求項３８に記載の方法。
【請求項６１】
前記ウイルスは、ブタ繁殖呼吸障害症候群ウイルス、ブタ呼吸器型コロナウイルス、ブタ流行性下痢ウイルス、ブタ内在性レトロウイルス、ブタ血球凝集性脳脊髄炎ウイルス、感染性胃腸炎ウイルス、日本脳炎ウイルス、ヒト免疫不全ウイルス、デングウイルス、ウエストナイルウイルス、エボラウイルス、マールブルグウイルス、重症急性呼吸器症候群コロナウイルス、ネココロナウイルス、ヒトサイトメガロウイルス、ブタサイトメガロウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、サル免疫不全ウイルス、ネコ免疫不全ウイルス、シンドビスウイルス、単純ヘルペスウイルス、Ａ型インフルエンザウイルス、Ｂ型インフルエンザウイルス、Ｃ型インフルエンザウイルス、ブタインフルエンザウイルス、ニパウイルス、ヘンドラウイルス、アフリカブタコレラウイルス、ブタコレラウイルス、ウシウイルス性下痢ウイルス、仮性狂犬病ウイルス、ブタポックスウイルス、水疱性口内炎ウイルス、狂犬病ウイルス、東部ウマ脳炎ウイルスおよびウマ動脈炎ウイルスからなる群から選択されるエンベロープウイルスである、請求項３９に記載の方法。
【請求項６２】
前記ウイルスは、ブタ繁殖呼吸障害症候群ウイルス、ブタ呼吸器型コロナウイルス、ブタ流行性下痢ウイルス、ブタ内在性レトロウイルス、ブタ血球凝集性脳脊髄炎ウイルス、感染性胃腸炎ウイルス、日本脳炎ウイルス、ヒト免疫不全ウイルス、デングウイルス、ウエストナイルウイルス、エボラウイルス、マールブルグウイルス、重症急性呼吸器症候群コロナウイルス、ネココロナウイルス、ヒトサイトメガロウイルス、ブタサイトメガロウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、サル免疫不全ウイルス、ネコ免疫不全ウイルス、シンドビスウイルス、単純ヘルペスウイルス、Ａ型インフルエンザウイルス、Ｂ型インフルエンザウイルス、Ｃ型インフルエンザウイルス、ブタインフルエンザウイルス、ニパウイルス、ヘンドラウイルス、アフリカブタコレラウイルス、ブタコレラウイルス、ウシウイルス性下痢ウイルス、仮性狂犬病ウイルス、ブタポックスウイルス、水疱性口内炎ウイルス、狂犬病ウイルス、東部ウマ脳炎ウイルスおよびウマ動脈炎ウイルスからなる群から選択されるエンベロープウイルスである、請求項４０に記載の方法。
【請求項６３】
前記ウイルスは非エンベロープウイルスである、請求項５５に記載の方法。
【請求項６４】
前記非エンベロープウイルスは、Ｅ型肝炎ウイルスまたはブタサーコウイルス２型である、請求項６３に記載の方法。
【請求項６５】
前記ウイルスは非エンベロープウイルスである、請求項５７に記載の方法。
【請求項６６】
前記非エンベロープウイルスは、Ｅ型肝炎ウイルスまたはブタサーコウイルス２型である、請求項６５に記載の方法。
【請求項６７】
非霊長類大型動物種から未知のＤＣ−ＳＩＧＮ ｃＤＮＡ相同体をクローニングする方法であって、以下の工程：
（ａ）動物の静脈血から、適切な宿主細胞において、前記樹状細胞の増殖を可能にする適切な栄養条件下で、単球由来樹状細胞を単離し、そしてインビトロで培養する工程と；
（ｂ）ＲＮＡを抽出する工程と；
（ｃ）ｃＤＮＡの第１鎖を合成し、そしてＲＴ−ＰＣＲによって、ｈＤＣ−ＳＩＧＮに相同な配列を有する短いフラグメントを増幅するために、ヒトおよびマウスＤＣ−ＳＩＧＮをコードする核酸分子の複数の配列アラインメントに基づいて、ヒトおよびマウスＤＣ−ＳＩＧＮヌクレオチド配列の保存配列に相補的であるように設計された縮重プライマーを使用して、逆転写酵素（ＲＴ）およびＰＣＲを実施する工程と；
（ｄ）それぞれ、５’−ＲＡＣＥまたは３’−ＲＡＣＥについて設計した、配列番号９を含む遺伝子特異的プライマーＰＤＲ−１および配列番号１０を含む遺伝子特異的プライマーＰＤＦ−１を使用して、縮重ＰＣＲ産物由来の配列情報に基づき、短いフラグメントに対して逆転写酵素およびＲＡＣＥ−ＰＣＲを実施する工程と；
（ｅ）ｃＤＮＡ末端迅速増幅（ＲＡＣＥ）−ＰＣＲ反応産物によって、動物における未知のＤＣ−ＳＩＧＮ相同体の完全なｃＤＮＡの２つの重複フラグメントをクローニングする工程と；
（ｆ）動物のＤＣ−ＳＩＧＮ相同体を単離、精製または配列決定する工程と
を含む、方法。
【請求項６８】
前記宿主細胞は、ＣＤ１４陽性末梢血単球細胞、脾臓由来リンパ球または骨髄由来リンパ球の培養物である、請求項６７に記載の方法。
【図２ａ】
【図２ｂ】
【図３（ａ）】
【図３（ｂ）】
【図３（ｃ）】
【図３（ｄ）】
【図４ａ】
【図４ｂ】
【図５ａ】
【図５ｂ】
【図５ｃ】
【図５ｄ】
【図６ａ】
【図６ｂ】
【図６ｃ】
【図６ｄ】
【図７（ａ）】
【図７（ｂ）】
【図７（ｃ）】
【図７（ｄ）】
【図８ａ】
【図８ｂ】
【図８ｃ】
【図８ｄ】
【図８ｅ】
【図９ａ】
【図９ｂ】
【図９ｃ】
【図９ｄ】
【図１０ａ】
【図１０ｂ】
【図１１ａ】
【図１１ｂ】
【図１２ａ】
【図１２ｂ】
【図１３】
【図１４ａ】
【図１４ｂ】
【図１４ｃ】
【図１５ａ】
【図１５ｂ】
【図１５ｃ】
【図１６】
【図１７】
【図２ｂ】
【図３（ａ）】
【図３（ｂ）】
【図３（ｃ）】
【図３（ｄ）】
【図４ａ】
【図４ｂ】
【図５ａ】
【図５ｂ】
【図５ｃ】
【図５ｄ】
【図６ａ】
【図６ｂ】
【図６ｃ】
【図６ｄ】
【図７（ａ）】
【図７（ｂ）】
【図７（ｃ）】
【図７（ｄ）】
【図８ａ】
【図８ｂ】
【図８ｃ】
【図８ｄ】
【図８ｅ】
【図９ａ】
【図９ｂ】
【図９ｃ】
【図９ｄ】
【図１０ａ】
【図１０ｂ】
【図１１ａ】
【図１１ｂ】
【図１２ａ】
【図１２ｂ】
【図１３】
【図１４ａ】
【図１４ｂ】
【図１４ｃ】
【図１５ａ】
【図１５ｂ】
【図１５ｃ】
【図１６】
【図１７】
【公表番号】特表２０１１−５０１９５８（Ｐ２０１１−５０１９５８Ａ）
【公表日】平成２３年１月２０日（２０１１．１．２０）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１０−５３２０４２（Ｐ２０１０−５３２０４２）
【出願日】平成２０年１０月２９日（２００８．１０．２９）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００８／０１２２５１
【国際公開番号】ＷＯ２００９／０５８２８５
【国際公開日】平成２１年５月７日（２００９．５．７）
【出願人】（５０１３２６５８４）バージニア テック インテレクチュアル プロパティーズ インコーポレーテッド (6)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２３年１月２０日（２０１１．１．２０）
【国際特許分類】
【出願日】平成２０年１０月２９日（２００８．１０．２９）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００８／０１２２５１
【国際公開番号】ＷＯ２００９／０５８２８５
【国際公開日】平成２１年５月７日（２００９．５．７）
【出願人】（５０１３２６５８４）バージニア テック インテレクチュアル プロパティーズ インコーポレーテッド (6)
【Ｆターム（参考）】
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