本発明は、Ｔｏｌｌ様レセプター４／ＭＤ−２レセプター複合体を認識するモノクローナル抗体、ならびにＴＬＲ４／ＭＤ２複合体およびＭＤ−２と複合体形成されない場合のＴＬＲ４を認識するモノクローナル抗体を提供する。本発明は、療薬としてヒト化モノクローナル抗体を使用する方法をさらに提供する。本発明はまた、可溶性キメラタンパク質、可溶性キメラタンパク質を発現させる方法および可溶性キメラタンパク質を精製する方法、ならびに治療薬として可溶性キメラタンパク質を使用する方法、可溶性キメラタンパク質を抗体のスクリーニングアッセイにおいて使用する方法、および可溶性キメラタンパク質を抗体の産生において使用する方法を提供する。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
Ｔｏｌｌ様レセプター４（ＴＬＲ４）／ＭＤ−２複合体を免疫特異的に結合する抗体であって、該抗体は、配列番号５４の残基２８９と残基３７５との間のヒトＴＬＲ４上の１個以上のアミノ酸残基を含むエピトープに結合する、抗体。
【請求項２】
前記抗体は、配列番号５４の少なくとも残基３２８と残基３２９とを含むエピトープに特異的に結合する、請求項１に記載の抗体。
【請求項３】
前記抗体は、配列番号５４の少なくとも残基３４９〜残基３５１を含むエピトープに特異的に結合する、請求項１に記載の抗体。
【請求項４】
前記抗体は、配列番号５４の少なくとも残基３６９〜残基３７１を含むエピトープに特異的に結合する、請求項１に記載の抗体。
【請求項５】
前記抗体は、配列番号５４の少なくとも残基３２８、残基３２９、残基３４９〜残基３５１および残基３６９〜残基３７１を含むエピトープに特異的に結合する、請求項１に記載の抗体。
【請求項６】
前記抗体は、配列番号５４の少なくとも残基２９３〜残基２９５を含むエピトープに特異的に結合する、請求項１に記載の抗体。
【請求項７】
前記抗体は、配列番号５４の少なくとも残基２９６と残基２９７とを含むエピトープに特異的に結合する、請求項１に記載の抗体。
【請求項８】
前記抗体は、配列番号５４の少なくとも残基３１９〜残基３２１を含むエピトープに特異的に結合する、請求項１に記載の抗体。
【請求項９】
前記抗体は、配列番号５４の少なくとも残基２９３〜残基２９５、残基２９６、残基２９７および残基３１９〜残基３２１を含むエピトープに特異的に結合する、請求項１に記載の抗体。
【請求項１０】
Ｔｏｌｌ様レセプター４（ＴＬＲ４）／ＭＤ−２複合体を免疫特異的に結合する抗体であって、該抗体は、配列番号４４の残基１９と残基５７との間のヒトＭＤ−２上のエピトープに結合する、抗体。
【請求項１１】
前記抗体は、配列番号４４の少なくとも残基５３を含むエピトープに特異的に結合する、請求項１０に記載の抗体。
【請求項１２】
Ｔｏｌｌ様レセプター４（ＴＬＲ４）／ＭＤ−２複合体に免疫特異的に結合するヒト化抗体であって、該抗体は、ＧＧＹＳＷＨ（配列番号２３）；ＹＩＨＹＳＧＹＴＤＦＮＰＳＬＫＴ（配列番号２４）；ＫＤＰＳＤＧＦＰＹ（配列番号２５）；ＤＳＹＩＨ（配列番号３）；ＷＴＤＰＥＮＶＮＳＩＹＤＰＲＦＱＧ（配列番号４）、ＧＹＮＧＶＹＹＡＭＤＹ（配列番号５）；ＴＹＮＩＧＶＧ（配列番号３３）；ＨＩＷＷＮＤＮＩＹＹＮＴＶＬＫＳ（配列番号３４）；およびＭＡＥＧＲＹＤＡＭＤＹ（配列番号３５）からなる群より選択されるアミノ酸配列を含む３個の相補性決定領域（ＣＤＲ）を有する重鎖を含む、ヒト化抗体。
【請求項１３】
前記抗体は、ＲＡＳＱＳＩＳＤＨＬＨ（配列番号２８）；ＹＡＳＨＡＩＳ（配列番号２９）；ＱＮＧＨＳＦＰＬＴ（配列番号３０）；ＳＡＳＳＳＶＩＹＭＨ（配列番号８）；ＲＴＹＮＬＡＳ（配列番号９）；ＨＱＷＳＳＦＰＹＴ（配列番号１０）；ＲＡＳＱＤＩＴＮＹＬＮ（配列番号３８）；ＹＴＳＫＬＨＳ（配列番号３９）；およびＱＱＧＮＴＦＰＷＴ（配列番号４０）のアミノ酸配列からなる群より選択されるアミノ酸配列を含む３個のＣＤＲを有する軽鎖をさらに含む、請求項１２に記載の抗体。
【請求項１４】
Ｔｏｌｌ様レセプター４（ＴＬＲ４）／ＭＤ−２複合体に免疫特異的に結合するヒト化抗体であって、該抗体は、ＲＡＳＱＳＩＳＤＨＬＨ（配列番号２８）；ＹＡＳＨＡＩＳ（配列番号２９）；ＱＮＧＨＳＦＰＬＴ（配列番号３０）；ＳＡＳＳＳＶＩＹＭＨ（配列番号８）；ＲＴＹＮＬＡＳ（配列番号９）；ＨＱＷＳＳＦＰＹＴ（配列番号１０）；ＲＡＳＱＤＩＴＮＹＬＮ（配列番号３８）；ＹＴＳＫＬＨＳ（配列番号３９）；およびＱＱＧＮＴＦＰＷＴ（配列番号４０）のアミノ酸配列からなる群より選択されるアミノ酸配列を含む３個のＣＤＲを有する軽鎖を含む、ヒト化抗体。
【請求項１５】
前記抗体は、ＧＧＹＳＷＨ（配列番号２３）；ＹＩＨＹＳＧＹＴＤＦＮＰＳＬＫＴ（配列番号２４）；ＫＤＰＳＤＧＦＰＹ（配列番号２５）；ＤＳＹＩＨ（配列番号３）；ＷＴＤＰＥＮＶＮＳＩＹＤＰＲＦＱＧ（配列番号４）、ＧＹＮＧＶＹＹＡＭＤＹ（配列番号５）；ＴＹＮＩＧＶＧ（配列番号３３）；ＨＩＷＷＮＤＮＩＹＹＮＴＶＬＫＳ（配列番号３４）；およびＭＡＥＧＲＹＤＡＭＤＹ（配列番号３５）からなる群より選択されるアミノ酸配列を含む３個の相補性決定領域（ＣＤＲ）を有する重鎖をさらに含む、請求項１４に記載の抗体。
【請求項１６】
Ｔｏｌｌ様レセプター４（ＴＬＲ４）／ＭＤ−２複合体に免疫特異的に結合するヒト化抗体であって、該抗体は、配列番号４５、配列番号４６、配列番号４９、配列番号５１および配列番号５２からなる群より選択される重鎖可変アミノ酸配列を含む、ヒト化抗体。
【請求項１７】
前記抗体は、配列番号４７、配列番号４８、配列番号５０および配列番号５３からなる群より選択される軽鎖可変アミノ酸配列をさらに含む、請求項１６に記載の抗体。
【請求項１８】
Ｔｏｌｌ様レセプター４（ＴＬＲ４）／ＭＤ−２複合体に免疫特異的に結合するヒト化抗体であって、該抗体は、配列番号４７、配列番号４８、配列番号５０および配列番号５３からなる群より選択される軽鎖可変アミノ酸配列を含む、ヒト化抗体。
【請求項１９】
前記抗体は、配列番号４５、配列番号４６、配列番号４９、配列番号５１および配列番号５２からなる群より選択される重鎖可変アミノ酸配列をさらに含む、請求項１８に記載の抗体。
【請求項２０】
異常なＴＬＲ４シグナリングに関連する病理の症状を緩和する方法であって、該方法は、請求項１、１２、１４、１６および１８のいずれか１項に記載の抗体を、その必要がある被験体に、該被験体において該病理の症状を緩和するのに十分な量で投与する工程を包含する、方法。
【請求項２１】
前記被験体は、ヒトである、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
異常なＴＬＲ４シグナリングに関連する前記病理の症状を緩和するのに十分な前記抗体の量は、ＬＰＳ誘導性の炎症促進性サイトカイン産生を減少させるのに十分な量である、請求項２０に記載の方法。
【請求項２３】
前記病理は、敗血症、人工呼吸による肺の傷害、急性炎症、慢性炎症、自己免疫疾患、および内因性の可溶性ストレス因子によって誘導される障害からなる群より選択される、請求項２０に記載の方法。
【請求項２４】
前記慢性炎症は、アレルギー状態または喘息に関連する、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
前記病理は、炎症性腸障害またはアテローム硬化症である、請求項２３に記載の方法。
【請求項２６】
前記内因性の可溶性ストレス因子によって誘導される障害は、変形性関節症または関節リウマチである、請求項２３に記載の方法。
【請求項２７】
前記内因性の可溶性ストレス因子は、Ｈｓｐ６０、フィブロネクチン、硫酸ヘパリン、ヒアルロナン、ｇｐ９６、β−ディフェンシン−２またはサーファクタント蛋白Ａである、請求項２３に記載の方法。
【請求項２８】
請求項１、１２、１４、１６および１８のいずれか１項に記載の抗体ならびにキャリアを含有する、薬学的組成物。
【請求項２９】
請求項１、１２、１４、１６および１８のいずれか１項に記載の抗体を備える、キット。

【図１】

【図２】

【図３】

【図４−１】

【図４−２】

【図４−３】

【図５Ａ】

【図５Ｂ】

【図６−１】

【図６−２】

【図７】

【図８】

【図９】

【図１０】

【図１１】

【図１２−１】

【図１２−２】

【図１２−３】

【図１３−１】

【図１３−２】

【図１４】

【図１５】

【図１６】

【図１７−１】

【図１７−２】

【図１８−１】

【図１８−２】

【図１９】

【図２０】

【図２１】

【図２２】

【図２３】

【図２４−１】

【図２４−２】

【図２５−１】

【図２５−２】

【図２６】

【図２７】

【図２８Ａ】

【図２８Ｂ】

【図２８Ｃ】

【図２９】

【図３０】

【図３１】

【図３２】

【図３３】

【図３４Ａ】

【図３４Ｂ】

【図３４Ｃ】

【図３５】

【図３６】

【図３７Ａ】

【図３７Ｂ】

【図３８】

【図３９】

【図４０】

【図４１】

【図４２】

【図４３】

【図４４】

【公表番号】特表２００８−５２７０４９（Ｐ２００８−５２７０４９Ａ）
【公表日】平成２０年７月２４日（２００８．７．２４）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００８−５０７１７６（Ｐ２００８−５０７１７６）
【出願日】平成１７年６月１４日（２００５．６．１４）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＩＢ２００５／００４２０６
【国際公開番号】ＷＯ２００７／１１０６７８
【国際公開日】平成１９年１０月４日（２００７．１０．４）
【出願人】（５０６１９８５６２）
【Ｆターム（参考）】