保湿剤
【課題】スクワレンを必ずしも配合しなくても保湿効果を有する保湿剤を提供すること。
【解決手段】（ａ）藻類ボトリオコッカスブラウニーから抽出される炭化水素成分、及び／又は（ｂ）前記（ａ）成分における２重結合部分に水素添加した成分を含む保湿剤。（ｃ）化学式１で表される炭化水素成分、及び／又は（ｄ）前記（ｃ）成分における２重結合部分に水素添加した成分を含む保湿剤。保湿剤には、オリーブオイルを含むことが好ましい。
【解決手段】（ａ）藻類ボトリオコッカスブラウニーから抽出される炭化水素成分、及び／又は（ｂ）前記（ａ）成分における２重結合部分に水素添加した成分を含む保湿剤。（ｃ）化学式１で表される炭化水素成分、及び／又は（ｄ）前記（ｃ）成分における２重結合部分に水素添加した成分を含む保湿剤。保湿剤には、オリーブオイルを含むことが好ましい。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、皮膚を保湿するために用いられる保湿剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
皮膚は、図２に示す構造を有する。皮膚の保湿においては、角質細胞１の外側にある皮脂膜３、細胞間脂質５、それにＮＭＦ（Natural Moisturizing Factor、天然保湿成分）７が重要な役割を担っている。角質細胞１の中で、まずはＮＭＦ７が水分９と結合し、蒸発しにくい結合水を作る。そして、細胞間脂質５がラメラ構造という層状の構造をとって水分を逃がさないように挟み込む形をつくる。さらに、皮膚表面で皮脂膜３がフタとなり、細胞間脂質５が引き込んだ水分の蒸発を防いでいる。これら、皮脂膜３、細胞間脂質５、ＮＭＦ７がバランスよく各々の機能を発揮することで肌が保湿される。
【０００３】
皮脂膜３の成分は以下のとおりである。
スクワレン：１０％
ロウ：２２％
脂肪酸：２５％
トリグリセリド：２５％
モノグリセリド、ジグリセルド：１０％
コレステロールエステル：２．５％
コレステロール：１．５％
その他：４％
皮脂膜３を作るのに欠かせないのがスクワレンである。しかしながらスクワレンの分泌量は、女性の場合２５才前後をピークに減少する。スクワレンの量が少なくなると、皮脂膜３のバランスが崩れ、保湿の機能が低下し、また、紫外線やほこり等の刺激に負けやすい肌になる。そこで従来、保湿効果を狙う化粧品等には、深海サメ肝臓やオリーブオイル等から抽出したスクワレンを、酸化され難い安定構造のスクワランに変えて添加してきた。
【０００４】
例えば、特開２００７−１９１４５５号公報（特許文献１）には、オリーブ果実から取れるバージンオリーブオイル中に極微量含まれているスクワレンを抽出・精製し、スクワランにして、そのスクワランをバージンオリーブオイルに３０〜５０％添加すれば、保湿や肌荒れに効果を発揮することが記載されている。また、特開２００９−２３４９２０号公報（特許文献２）には、数種の脂肪酸やミツロウ、ホホバ油に加えてスクワランを４％添加することで皮膚の保水性が飛躍的に向上することが記載されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特開２００７−１９１４５５号公報
【特許文献２】特開２００９−２３４９２０号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
スクワランは上述した多くの優れた効能のために、これまで、多くの保湿剤や化粧品等に添加されてきた。しかしながら、スクワランの元となるスクワレンの供給源は、深海に住むアイザメと呼ばれるサメの肝臓であり、アイザメは近年乱獲によって個体数が大きく減少している。このようなことから、現在スクワレンの価格は高騰し、さらに将来的にはアイザメの捕獲自体が規制されるのではないかとされている。一方、アイザメ以外にもオリーブ油や米ぬか等にもスクワレンは含まれているが、非常に微量であり、やはり価格的に高コストであるといった問題がある。
【０００７】
本発明は以上の点に鑑みなされたものであり、スクワランを必ずしも配合しなくても保湿効果を有する保湿剤を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明の第１の保湿剤は、（ａ）藻類ボトリオコッカスブラウニーから抽出される炭化水素成分、及び／又は（ｂ）前記（ａ）成分における２重結合部分に水素添加した成分を含むことを特徴とする。
【０００９】
本発明の第１の保湿剤は、保湿性能が高く、また、安全性が高い。本発明の第１の保湿剤において、前記（ａ）成分と前記（ｂ）成分との合計濃度は、１５〜３０重量％であることが好ましい。この範囲内であることにより、保湿性能が一層高くなる。なお、（ａ）成分のみを含み、（ｂ）成分を含まない場合の合計濃度とは、（ａ）成分の濃度である。また、（ｂ）成分のみを含み、（ａ）成分を含まない場合の合計濃度とは、（ｂ）成分の濃度である。また、上記の濃度とは、保湿剤の全量を１００重量％としたときの濃度である。
前記（ｂ）成分は、（ａ）成分における２重結合部分の全てに水素添加したものであってもよいし、一部のみに水素添加したものであってもよい。
【００１０】
本発明の第２の保湿剤は、（ｃ）化学式１で表される炭化水素成分、及び／又は（ｄ）前記（ｃ）成分における２重結合部分に水素添加した成分を含むことを特徴とする。
【００１１】
【化１】
【００１２】
本発明の第２の保湿剤は、保湿性能が高く、また、安全性が高い。本発明の第２の保湿剤において、前記（ｃ）成分と前記（ｄ）成分との合計濃度は、１５〜３０重量％であることが好ましい。この範囲内であることにより、保湿性能が一層高くなる。なお、（ｃ）成分のみを含み、（ｄ）成分を含まない場合の合計濃度とは、（ｃ）成分の濃度である。また、（ｄ）成分のみを含み、（ｃ）成分を含まない場合の合計濃度とは、（ｄ）成分の濃度である。また、上記の濃度とは、保湿剤の全量を１００重量％としたときの濃度である。
前記（ｄ）成分は、（ｃ）成分における２重結合部分の全てに水素添加したものであってもよいし、一部のみに水素添加したものであってもよい。
【００１３】
本発明の第１の保湿剤、及び第２の保湿剤は、オリーブオイルを含むことが好ましい。オリーブオイルは、例えば、保湿剤の基材とすることができる。オリーブオイルを含むことにより、保湿性能が一層高くなる。本発明の第１の保湿剤、及び第２の保湿剤は、様々な用途に用いることができ、例えば、化粧用保湿剤とすることができる。本発明の第１の保湿剤、及び第２の保湿剤は、皮膚に塗布する方法で用いることができる。
【図面の簡単な説明】
【００１４】
【図１】ボトリオイル（Ｃ34Ｈ58）の分子構造を表す説明図である。
【図２】皮膚の構造を表す模式図である。
【発明を実施するための形態】
【００１５】
本発明の実施形態を説明する。
１．保湿剤の製造
（１）炭化水素の抽出
緑藻類である「botoryococcus braunii」（以下ではボトリオコッカスと表記）を、所定の濃度まで培養した後、水中からネット等で回収し、凝縮する。ここで、凝縮とは、水分と藻体とを可能な範囲で分離することを意味する。また、ボトリオコッカスは、独立行政法人産業技術総合研究所 特許生物寄託センターに、受託番号「tsukuba-1 FERM T-22046」において寄託されている。なお、ここで用いたボトリオコッカスは、ＲａｃｅＢと称されるものである。
【００１６】
凝縮したボトリオコッカスを、上方か開口した、浅い容器（バット等）に展開し、乾燥させる。乾燥の方法は、温風乾燥であっても、天日乾燥であってもよい。乾燥したボトリオコッカスを、はさみを用いて細断し、ヘキサンに浸漬する。このとき、ボトリオコッカスのオイル分がヘキサンに溶出する。そのヘキサンをエバポレータで分留し、オイル分（炭化水素とトリグリセリド等の脂質）を抽出する。抽出したオイル分を、シリカゲルカラムに通す。このとき、炭化水素のみがシリカゲルカラムを通過する。そして、シリカゲルカラムを通過した炭化水素を得る。
【００１７】
得られた炭化水素の組成を、ＧＣ−ＦＩＤ、ＧＣ−ＭＳにより分析した。ここで、ＧＣはガスクロマトグラフを意味し、ＦＩＤは水素炎イオン化検出器を意味し、ＭＳは質量分析計を意味する。また、得られた炭化水素の分子構造を、1Ｈ−ＮＭＲ、13Ｃ−ＮＭＲにより解析した。ここで、ＮＭＲは核磁気共鳴装置である。
【００１８】
組成分析及び分子構造解析の結果、得られた炭化水素は、図１に示す分子構造を有するＣ34Ｈ58であることが確認できた。以下では、この炭化水素をボトリオイル（Ｃ34Ｈ58）とする。
（２）水素を添加した炭化水素の製造
前記（１）で得られたボトリオイル（Ｃ34Ｈ58）に対し、次のようにして水素を添加した。
【００１９】
まず、３００ｍｌオートクレーブ反応容器に、Ａｒ気流下、以下の材料を投入した。
ボトリオイル（Ｃ34Ｈ58）：２８．６７ｇ
１０％Ｐｄ−Ｃ（５０％含水品）：２．８７ｇ
酢酸エチル：９６ｍｌ
次に、オートクレーブ反応容器に水素を３．１ＭＰａ充填し、攪拌を開始した。水素の消費とともに水素を追加充填しながら、０．９〜３．３ＭＰａの水素圧の下で攪拌を続けた。このとき、反応初期において少し発熱が生じた。
【００２０】
一晩攪拌した後、水素の吸収がそれ以上見られなくなったので、反応を停止した。オートクレーブ反応容器内をＡｒガスで置換した後、反応液をセライトでろ過し、また、触媒（１０％Ｐｄ−Ｃ）をろ過して酢酸エチルで十分に洗浄した。ろ液を減圧濃縮し、残渣を２８ｇ得た。この残渣のＮＭＲ分析を行ったところ、不飽和炭化水素のピークが消失していた。また、残渣のＧＣ／ＭＳ分析を行ったところ、主生成物の分子量は４４８であった。この残渣が、ボトリオイル（Ｃ34Ｈ58）に水素を添加したもの（以下、水素添加ボトリオオイルとする）である。
（３）保湿剤の製造
ボトリオイル（Ｃ34Ｈ58）とオリーブオイルとを表１に示す配合比で混合して、保湿剤１、保湿剤２を製造した。また、水素添加ボトリオオイルとオリーブオイルとを表１に示す配合比で混合して、保湿剤３、保湿剤４を製造した。
【００２１】
また、比較例として、スクワラン（和光純薬工業（株）製）とオリーブオイルとを表１に示す配合比で混合して、保湿剤Ｒ１、保湿剤Ｒ２を製造した。
【００２２】
【表１】
【００２３】
２．保湿剤の評価
（１）保湿性能の評価
保湿剤１〜保湿剤４、保湿剤Ｒ１、保湿剤Ｒ２をパネラ（ヒト）の皮膚に塗布し、塗布から１５分後、３０分後、４５分後、６０分後、９０分後、１２０分後にそれぞれ、角質水分量の変化率Ａを測定した。角質水分量の変化率Ａは、以下の式１で定義される量であり、このＡの値が大きいほど、保湿性能が高いことを示す。
【００２４】
（式１） Ａ＝（Ｂ／Ｂｉ）×１００
ここで、Ｂは各測定時（塗布から１５分後、３０分後、４５分後、６０分後、９０分後、１２０分後）における皮膚電気伝導度であり、Ｂｉは保湿剤の塗布直後における皮膚電気伝導度である。Ｂ、Ｂｉの単位はそれぞれμＳであり、Ａの単位は％である。Ａの測定部位はパネラの前腕内側中央部とし、パネラは肌健常者とした。Ｂ、Ｂｉの測定には、表皮角質水分測定器ＳＫＩＣＯＮ−２００ＥＸｗｐを用いた。各条件（保湿剤の種類、塗布からの時間）において、それぞれ、７人のパネラに対し角質水分量の変化率Ａの測定を行い、Ａの平均値及び標準偏差を算出した。
【００２５】
表２、表３に、各保湿剤を用いた場合の角質水分量の変化率Ａの平均値（上段）と、標準偏差（下段）を示す。また、比較対照として、保湿剤の代わりに蒸留水を用いた場合の角質水分量の変化率Ａも示す。なお、表２に示すデータは、同じときに取得されたものであり、また、表３に示すデータは、同じときに取得されたものである。
【００２６】
【表２】
【００２７】
【表３】
【００２８】
表２から明らかなように、保湿剤１、保湿剤２における角質水分量の変化率Ａは、保湿剤Ｒ１、保湿剤Ｒ２における角質水分量の変化率Ａと同等以上であった。また、保湿剤１、保湿剤２における角質水分量の変化率Ａは、蒸留水を塗布した場合の角質水分量の変化率Ａよりも顕著に高かった。
【００２９】
また、表３から明らかなように、保湿剤３、保湿剤４における角質水分量の変化率Ａは、保湿剤Ｒ１、保湿剤Ｒ２における角質水分量の変化率Ａと同等以上であった。また、保湿剤３、保湿剤４における角質水分量の変化率Ａは、蒸留水を塗布した場合の角質水分量の変化率Ａよりも顕著に高かった
すなわち、保湿剤１〜保湿剤４は、保湿性能において優れていることが確認できた。
（２）安全性の評価（その１）
保湿剤１、保湿剤２の安全性を確認するために、ボトリオイル（Ｃ34Ｈ58）による皮膚パッチテストを行った。具体的には、ボトリオイル（Ｃ34Ｈ58）をモルモットに投与し、投与後４８時間までに紅斑・痂皮形成や浮腫形成が見られるかを観察した。投与量は０．０３ｍＬ／匹とし、ｎ数は３とした。また、比較対照として、ボトリオイル（Ｃ34Ｈ58）の代わりに、スクワレン（和光純薬工業（株）製）、又はスクワラン（和光純薬工業（株）製）を用いて同様のパッチテストを行った。パッチテストの結果を表４に示す。
【００３０】
【表４】
【００３１】
表４に示されるように、ボトリオイル（Ｃ34Ｈ58）では、紅斑・痂皮形成や浮腫形成は生じなかった。一方、スクワレンでは、紅斑・痂皮形成が生じた。
（３）安全性の評価（その２）
保湿剤３、保湿剤４の安全性を確認するために、水素添加ボトリオオイルを塗布した絆創膏を試験動物の皮膚に貼り付け、パッチテストを実施した。その結果から、一次刺激性インデックス（Ｐ．Ｉ．Ｉ値）を算出した。また、比較対照として、試薬を塗布していない絆創膏を試験動物に貼り付けた場合の一次刺激性インデックスも算出した。パッチテストは、各条件とも、３匹の試験動物（Ｍ１〜Ｍ３）について行った。パッチテストの結果を表５に示す。
【００３２】
【表５】
【００３３】
表５に示すように、水素添加ボトリオオイルについての一次刺激性インデックスは全て０．００であり、安全性が高い（紅斑・痂皮形成や浮腫形成が全く生じない）ことが確認できた。
３．保湿剤が奏する効果
保湿剤１〜保湿剤４は、上述した保湿性能の評価結果から明らかなように、スクワランを配合していなくても、保湿性能が非常に高い。また、保湿剤１〜保湿剤４は、上述した安全性の評価結果から明らかなように、安全性が高い。
【００３４】
尚、本発明は前記実施形態になんら限定されるものではなく、本発明を逸脱しない範囲において種々の態様で実施しうることはいうまでもない。
例えば、保湿剤１、保湿剤２におけるボトリオイル（Ｃ34Ｈ58）の濃度は、１５〜３０重量％の範囲で任意に設定できる。また、保湿剤３、保湿剤４における水素添加ボトリオオイルの濃度は、１５〜３０重量％の範囲で任意に設定できる。
【００３５】
また、保湿剤１〜保湿剤４において、オリーブオイルの代わりに、他のオイル、溶剤を用いてもよい。また、保湿剤１〜保湿剤４には、本発明の効果を奏する範囲において、他の成分（例えば、化粧品等に添加される公知の成分）を添加してもよい。
【符号の説明】
【００３６】
１・・・角質細胞、３・・・皮脂膜、５・・・細胞間脂質、７・・・ＮＭＦ、
９・・・水分
【技術分野】
【０００１】
本発明は、皮膚を保湿するために用いられる保湿剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
皮膚は、図２に示す構造を有する。皮膚の保湿においては、角質細胞１の外側にある皮脂膜３、細胞間脂質５、それにＮＭＦ（Natural Moisturizing Factor、天然保湿成分）７が重要な役割を担っている。角質細胞１の中で、まずはＮＭＦ７が水分９と結合し、蒸発しにくい結合水を作る。そして、細胞間脂質５がラメラ構造という層状の構造をとって水分を逃がさないように挟み込む形をつくる。さらに、皮膚表面で皮脂膜３がフタとなり、細胞間脂質５が引き込んだ水分の蒸発を防いでいる。これら、皮脂膜３、細胞間脂質５、ＮＭＦ７がバランスよく各々の機能を発揮することで肌が保湿される。
【０００３】
皮脂膜３の成分は以下のとおりである。
スクワレン：１０％
ロウ：２２％
脂肪酸：２５％
トリグリセリド：２５％
モノグリセリド、ジグリセルド：１０％
コレステロールエステル：２．５％
コレステロール：１．５％
その他：４％
皮脂膜３を作るのに欠かせないのがスクワレンである。しかしながらスクワレンの分泌量は、女性の場合２５才前後をピークに減少する。スクワレンの量が少なくなると、皮脂膜３のバランスが崩れ、保湿の機能が低下し、また、紫外線やほこり等の刺激に負けやすい肌になる。そこで従来、保湿効果を狙う化粧品等には、深海サメ肝臓やオリーブオイル等から抽出したスクワレンを、酸化され難い安定構造のスクワランに変えて添加してきた。
【０００４】
例えば、特開２００７−１９１４５５号公報（特許文献１）には、オリーブ果実から取れるバージンオリーブオイル中に極微量含まれているスクワレンを抽出・精製し、スクワランにして、そのスクワランをバージンオリーブオイルに３０〜５０％添加すれば、保湿や肌荒れに効果を発揮することが記載されている。また、特開２００９−２３４９２０号公報（特許文献２）には、数種の脂肪酸やミツロウ、ホホバ油に加えてスクワランを４％添加することで皮膚の保水性が飛躍的に向上することが記載されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特開２００７−１９１４５５号公報
【特許文献２】特開２００９−２３４９２０号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
スクワランは上述した多くの優れた効能のために、これまで、多くの保湿剤や化粧品等に添加されてきた。しかしながら、スクワランの元となるスクワレンの供給源は、深海に住むアイザメと呼ばれるサメの肝臓であり、アイザメは近年乱獲によって個体数が大きく減少している。このようなことから、現在スクワレンの価格は高騰し、さらに将来的にはアイザメの捕獲自体が規制されるのではないかとされている。一方、アイザメ以外にもオリーブ油や米ぬか等にもスクワレンは含まれているが、非常に微量であり、やはり価格的に高コストであるといった問題がある。
【０００７】
本発明は以上の点に鑑みなされたものであり、スクワランを必ずしも配合しなくても保湿効果を有する保湿剤を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明の第１の保湿剤は、（ａ）藻類ボトリオコッカスブラウニーから抽出される炭化水素成分、及び／又は（ｂ）前記（ａ）成分における２重結合部分に水素添加した成分を含むことを特徴とする。
【０００９】
本発明の第１の保湿剤は、保湿性能が高く、また、安全性が高い。本発明の第１の保湿剤において、前記（ａ）成分と前記（ｂ）成分との合計濃度は、１５〜３０重量％であることが好ましい。この範囲内であることにより、保湿性能が一層高くなる。なお、（ａ）成分のみを含み、（ｂ）成分を含まない場合の合計濃度とは、（ａ）成分の濃度である。また、（ｂ）成分のみを含み、（ａ）成分を含まない場合の合計濃度とは、（ｂ）成分の濃度である。また、上記の濃度とは、保湿剤の全量を１００重量％としたときの濃度である。
前記（ｂ）成分は、（ａ）成分における２重結合部分の全てに水素添加したものであってもよいし、一部のみに水素添加したものであってもよい。
【００１０】
本発明の第２の保湿剤は、（ｃ）化学式１で表される炭化水素成分、及び／又は（ｄ）前記（ｃ）成分における２重結合部分に水素添加した成分を含むことを特徴とする。
【００１１】
【化１】
【００１２】
本発明の第２の保湿剤は、保湿性能が高く、また、安全性が高い。本発明の第２の保湿剤において、前記（ｃ）成分と前記（ｄ）成分との合計濃度は、１５〜３０重量％であることが好ましい。この範囲内であることにより、保湿性能が一層高くなる。なお、（ｃ）成分のみを含み、（ｄ）成分を含まない場合の合計濃度とは、（ｃ）成分の濃度である。また、（ｄ）成分のみを含み、（ｃ）成分を含まない場合の合計濃度とは、（ｄ）成分の濃度である。また、上記の濃度とは、保湿剤の全量を１００重量％としたときの濃度である。
前記（ｄ）成分は、（ｃ）成分における２重結合部分の全てに水素添加したものであってもよいし、一部のみに水素添加したものであってもよい。
【００１３】
本発明の第１の保湿剤、及び第２の保湿剤は、オリーブオイルを含むことが好ましい。オリーブオイルは、例えば、保湿剤の基材とすることができる。オリーブオイルを含むことにより、保湿性能が一層高くなる。本発明の第１の保湿剤、及び第２の保湿剤は、様々な用途に用いることができ、例えば、化粧用保湿剤とすることができる。本発明の第１の保湿剤、及び第２の保湿剤は、皮膚に塗布する方法で用いることができる。
【図面の簡単な説明】
【００１４】
【図１】ボトリオイル（Ｃ34Ｈ58）の分子構造を表す説明図である。
【図２】皮膚の構造を表す模式図である。
【発明を実施するための形態】
【００１５】
本発明の実施形態を説明する。
１．保湿剤の製造
（１）炭化水素の抽出
緑藻類である「botoryococcus braunii」（以下ではボトリオコッカスと表記）を、所定の濃度まで培養した後、水中からネット等で回収し、凝縮する。ここで、凝縮とは、水分と藻体とを可能な範囲で分離することを意味する。また、ボトリオコッカスは、独立行政法人産業技術総合研究所 特許生物寄託センターに、受託番号「tsukuba-1 FERM T-22046」において寄託されている。なお、ここで用いたボトリオコッカスは、ＲａｃｅＢと称されるものである。
【００１６】
凝縮したボトリオコッカスを、上方か開口した、浅い容器（バット等）に展開し、乾燥させる。乾燥の方法は、温風乾燥であっても、天日乾燥であってもよい。乾燥したボトリオコッカスを、はさみを用いて細断し、ヘキサンに浸漬する。このとき、ボトリオコッカスのオイル分がヘキサンに溶出する。そのヘキサンをエバポレータで分留し、オイル分（炭化水素とトリグリセリド等の脂質）を抽出する。抽出したオイル分を、シリカゲルカラムに通す。このとき、炭化水素のみがシリカゲルカラムを通過する。そして、シリカゲルカラムを通過した炭化水素を得る。
【００１７】
得られた炭化水素の組成を、ＧＣ−ＦＩＤ、ＧＣ−ＭＳにより分析した。ここで、ＧＣはガスクロマトグラフを意味し、ＦＩＤは水素炎イオン化検出器を意味し、ＭＳは質量分析計を意味する。また、得られた炭化水素の分子構造を、1Ｈ−ＮＭＲ、13Ｃ−ＮＭＲにより解析した。ここで、ＮＭＲは核磁気共鳴装置である。
【００１８】
組成分析及び分子構造解析の結果、得られた炭化水素は、図１に示す分子構造を有するＣ34Ｈ58であることが確認できた。以下では、この炭化水素をボトリオイル（Ｃ34Ｈ58）とする。
（２）水素を添加した炭化水素の製造
前記（１）で得られたボトリオイル（Ｃ34Ｈ58）に対し、次のようにして水素を添加した。
【００１９】
まず、３００ｍｌオートクレーブ反応容器に、Ａｒ気流下、以下の材料を投入した。
ボトリオイル（Ｃ34Ｈ58）：２８．６７ｇ
１０％Ｐｄ−Ｃ（５０％含水品）：２．８７ｇ
酢酸エチル：９６ｍｌ
次に、オートクレーブ反応容器に水素を３．１ＭＰａ充填し、攪拌を開始した。水素の消費とともに水素を追加充填しながら、０．９〜３．３ＭＰａの水素圧の下で攪拌を続けた。このとき、反応初期において少し発熱が生じた。
【００２０】
一晩攪拌した後、水素の吸収がそれ以上見られなくなったので、反応を停止した。オートクレーブ反応容器内をＡｒガスで置換した後、反応液をセライトでろ過し、また、触媒（１０％Ｐｄ−Ｃ）をろ過して酢酸エチルで十分に洗浄した。ろ液を減圧濃縮し、残渣を２８ｇ得た。この残渣のＮＭＲ分析を行ったところ、不飽和炭化水素のピークが消失していた。また、残渣のＧＣ／ＭＳ分析を行ったところ、主生成物の分子量は４４８であった。この残渣が、ボトリオイル（Ｃ34Ｈ58）に水素を添加したもの（以下、水素添加ボトリオオイルとする）である。
（３）保湿剤の製造
ボトリオイル（Ｃ34Ｈ58）とオリーブオイルとを表１に示す配合比で混合して、保湿剤１、保湿剤２を製造した。また、水素添加ボトリオオイルとオリーブオイルとを表１に示す配合比で混合して、保湿剤３、保湿剤４を製造した。
【００２１】
また、比較例として、スクワラン（和光純薬工業（株）製）とオリーブオイルとを表１に示す配合比で混合して、保湿剤Ｒ１、保湿剤Ｒ２を製造した。
【００２２】
【表１】
【００２３】
２．保湿剤の評価
（１）保湿性能の評価
保湿剤１〜保湿剤４、保湿剤Ｒ１、保湿剤Ｒ２をパネラ（ヒト）の皮膚に塗布し、塗布から１５分後、３０分後、４５分後、６０分後、９０分後、１２０分後にそれぞれ、角質水分量の変化率Ａを測定した。角質水分量の変化率Ａは、以下の式１で定義される量であり、このＡの値が大きいほど、保湿性能が高いことを示す。
【００２４】
（式１） Ａ＝（Ｂ／Ｂｉ）×１００
ここで、Ｂは各測定時（塗布から１５分後、３０分後、４５分後、６０分後、９０分後、１２０分後）における皮膚電気伝導度であり、Ｂｉは保湿剤の塗布直後における皮膚電気伝導度である。Ｂ、Ｂｉの単位はそれぞれμＳであり、Ａの単位は％である。Ａの測定部位はパネラの前腕内側中央部とし、パネラは肌健常者とした。Ｂ、Ｂｉの測定には、表皮角質水分測定器ＳＫＩＣＯＮ−２００ＥＸｗｐを用いた。各条件（保湿剤の種類、塗布からの時間）において、それぞれ、７人のパネラに対し角質水分量の変化率Ａの測定を行い、Ａの平均値及び標準偏差を算出した。
【００２５】
表２、表３に、各保湿剤を用いた場合の角質水分量の変化率Ａの平均値（上段）と、標準偏差（下段）を示す。また、比較対照として、保湿剤の代わりに蒸留水を用いた場合の角質水分量の変化率Ａも示す。なお、表２に示すデータは、同じときに取得されたものであり、また、表３に示すデータは、同じときに取得されたものである。
【００２６】
【表２】
【００２７】
【表３】
【００２８】
表２から明らかなように、保湿剤１、保湿剤２における角質水分量の変化率Ａは、保湿剤Ｒ１、保湿剤Ｒ２における角質水分量の変化率Ａと同等以上であった。また、保湿剤１、保湿剤２における角質水分量の変化率Ａは、蒸留水を塗布した場合の角質水分量の変化率Ａよりも顕著に高かった。
【００２９】
また、表３から明らかなように、保湿剤３、保湿剤４における角質水分量の変化率Ａは、保湿剤Ｒ１、保湿剤Ｒ２における角質水分量の変化率Ａと同等以上であった。また、保湿剤３、保湿剤４における角質水分量の変化率Ａは、蒸留水を塗布した場合の角質水分量の変化率Ａよりも顕著に高かった
すなわち、保湿剤１〜保湿剤４は、保湿性能において優れていることが確認できた。
（２）安全性の評価（その１）
保湿剤１、保湿剤２の安全性を確認するために、ボトリオイル（Ｃ34Ｈ58）による皮膚パッチテストを行った。具体的には、ボトリオイル（Ｃ34Ｈ58）をモルモットに投与し、投与後４８時間までに紅斑・痂皮形成や浮腫形成が見られるかを観察した。投与量は０．０３ｍＬ／匹とし、ｎ数は３とした。また、比較対照として、ボトリオイル（Ｃ34Ｈ58）の代わりに、スクワレン（和光純薬工業（株）製）、又はスクワラン（和光純薬工業（株）製）を用いて同様のパッチテストを行った。パッチテストの結果を表４に示す。
【００３０】
【表４】
【００３１】
表４に示されるように、ボトリオイル（Ｃ34Ｈ58）では、紅斑・痂皮形成や浮腫形成は生じなかった。一方、スクワレンでは、紅斑・痂皮形成が生じた。
（３）安全性の評価（その２）
保湿剤３、保湿剤４の安全性を確認するために、水素添加ボトリオオイルを塗布した絆創膏を試験動物の皮膚に貼り付け、パッチテストを実施した。その結果から、一次刺激性インデックス（Ｐ．Ｉ．Ｉ値）を算出した。また、比較対照として、試薬を塗布していない絆創膏を試験動物に貼り付けた場合の一次刺激性インデックスも算出した。パッチテストは、各条件とも、３匹の試験動物（Ｍ１〜Ｍ３）について行った。パッチテストの結果を表５に示す。
【００３２】
【表５】
【００３３】
表５に示すように、水素添加ボトリオオイルについての一次刺激性インデックスは全て０．００であり、安全性が高い（紅斑・痂皮形成や浮腫形成が全く生じない）ことが確認できた。
３．保湿剤が奏する効果
保湿剤１〜保湿剤４は、上述した保湿性能の評価結果から明らかなように、スクワランを配合していなくても、保湿性能が非常に高い。また、保湿剤１〜保湿剤４は、上述した安全性の評価結果から明らかなように、安全性が高い。
【００３４】
尚、本発明は前記実施形態になんら限定されるものではなく、本発明を逸脱しない範囲において種々の態様で実施しうることはいうまでもない。
例えば、保湿剤１、保湿剤２におけるボトリオイル（Ｃ34Ｈ58）の濃度は、１５〜３０重量％の範囲で任意に設定できる。また、保湿剤３、保湿剤４における水素添加ボトリオオイルの濃度は、１５〜３０重量％の範囲で任意に設定できる。
【００３５】
また、保湿剤１〜保湿剤４において、オリーブオイルの代わりに、他のオイル、溶剤を用いてもよい。また、保湿剤１〜保湿剤４には、本発明の効果を奏する範囲において、他の成分（例えば、化粧品等に添加される公知の成分）を添加してもよい。
【符号の説明】
【００３６】
１・・・角質細胞、３・・・皮脂膜、５・・・細胞間脂質、７・・・ＮＭＦ、
９・・・水分
【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ａ）藻類ボトリオコッカスブラウニーから抽出される炭化水素成分、及び／又は（ｂ）前記（ａ）成分における２重結合部分に水素添加した成分を含む保湿剤。
【請求項２】
前記（ａ）成分と前記（ｂ）成分との合計濃度が１５〜３０重量％であることを特徴とする請求項１に記載の保湿剤。
【請求項３】
（ｃ）化学式１で表される炭化水素成分、及び／又は（ｄ）前記（ｃ）成分における２重結合部分に水素添加した成分を含む保湿剤。
【化２】
【請求項４】
前記（ｃ）成分と前記（ｄ）成分との合計濃度が１５〜３０重量％であることを特徴とする請求項３に記載の保湿剤。
【請求項５】
オリーブオイルを含むことを特徴とする請求項１〜４のいずれか１項に記載の保湿剤。
【請求項１】
（ａ）藻類ボトリオコッカスブラウニーから抽出される炭化水素成分、及び／又は（ｂ）前記（ａ）成分における２重結合部分に水素添加した成分を含む保湿剤。
【請求項２】
前記（ａ）成分と前記（ｂ）成分との合計濃度が１５〜３０重量％であることを特徴とする請求項１に記載の保湿剤。
【請求項３】
（ｃ）化学式１で表される炭化水素成分、及び／又は（ｄ）前記（ｃ）成分における２重結合部分に水素添加した成分を含む保湿剤。
【化２】
【請求項４】
前記（ｃ）成分と前記（ｄ）成分との合計濃度が１５〜３０重量％であることを特徴とする請求項３に記載の保湿剤。
【請求項５】
オリーブオイルを含むことを特徴とする請求項１〜４のいずれか１項に記載の保湿剤。
【図１】
【図２】
【図２】
【公開番号】特開２０１３−３５７９１（Ｐ２０１３−３５７９１Ａ）
【公開日】平成２５年２月２１日（２０１３．２．２１）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１１−１７４２４２（Ｐ２０１１−１７４２４２）
【出願日】平成２３年８月９日（２０１１．８．９）
【出願人】（０００００４２６０）株式会社デンソー (27,639)
【出願人】（５０４１７１１３４）国立大学法人 筑波大学 (510)
【出願人】（５１０１５４０３９）株式会社新産業創造研究所 (3)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２５年２月２１日（２０１３．２．２１）
【国際特許分類】
【出願日】平成２３年８月９日（２０１１．８．９）
【出願人】（０００００４２６０）株式会社デンソー (27,639)
【出願人】（５０４１７１１３４）国立大学法人 筑波大学 (510)
【出願人】（５１０１５４０３９）株式会社新産業創造研究所 (3)
【Ｆターム（参考）】
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