塩の形のｍＴＯＲ阻害剤
塩の形の式（Ｉ）のｍＴＯＲ阻害剤、ならびにこの調製、配合および疾患治療での使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、ＵＳ Ａｐｐｌ．Ｎｏ．６１／０７００６２（２００８年３月１９日）の優先権を主張し、この内容は全て参照として本明細書中に援用される。
【０００２】
本発明は、哺乳類のラパマイシン標的タンパク質（ｍＴＯＲ）リン酸化酵素（ＦＲＡＰ、ＲＡＦＴ、ＲＡＰＴ、ＳＥＰとしても既知）の阻害剤である二環式化合物に関する。詳細には、本発明は、癌の治療に有用なｍＴＯＲ阻害剤となる縮合二環式化合物に関する。
【背景技術】
【０００３】
高いレベルでのｍＴＯＲ活性調節不全は、多様なヒト癌、ならびに結節性硬化症、ＰＴＥＮ関連過誤腫症候群、およびポイツ・ジェガース症候群をはじめとする幾つかの過誤腫症候群に関連していることが示されてきた。ラパマイシン類似体は癌に対するｍＴＯＲリン酸化酵素阻害剤として臨床開発されているものの、ＣＣＩ−７７９を用いた臨床成績は、乳癌および腎臓癌患者でやっと中程度である。これはおそらくラパマイシンがｒａｐｔｏｒ−ｍＴＯＲ複合体（ｍＴＯＲＣ１）を通じてｍＴＯＲ機能を部分的に阻害するからである。乳癌患者の２／３および腎臓癌患者の１／２でラパマイシン治療が効かないこともわかっている。細胞生存の調整とラパマイシン非依存的様式でアクチン細胞骨格系の調整に主要な役割を果たすＰＫＣαの調節とに重要であるＡＫＴ（Ｓ４７３）のリン酸化に関与するｒｉｃｔｏｒ−ｍＴＯＲ複合体（ｍＴＯＲＣ２）が最近発見されたことからも、ｍＴＯＲのこうした活性の阻害がより広範囲な抗腫瘍活性およびより高い効力に重要である。従って、ｍＴＯＲＣ１およびｍＴＯＲＣ２を阻害できる、ｍＴＯＲリン酸化酵素の直接の阻害剤となる新規化合物の開発が望まれる。
【０００４】
細胞生存の調整とアクチン細胞骨格系の調整に主要な役割を果たすＰＫＣαの調節とに重要であるＡＫＴの（Ｓ４７３での）リン酸化においてｍＴＯＲがラパマイシン非依存的に機能する（ｍＴＯＲ２により）という最近の発見から、ｍＴＯＲ機能のラパマイシンによる阻害は部分的であると思われる。従って、ｍＴＯＲＣ１とｍＴＯＲＣ２の両方の機能を完全に阻害できる直接のｍＴＯＲリン酸化酵素阻害剤の発見がより広範囲な抗腫瘍活性およびより高い効力のために必要である。本発明者らは、今回、多様な癌（乳房、肺、腎臓、前立腺、血液、肝臓、卵巣、甲状腺、消化管、およびリンパ腫など）およびその他の適応症（リウマチ様関節炎、過誤腫症候群、移植片拒絶、ＩＢＤ、多発性硬化症、および免疫抑制など）の治療に用いることができる、直接のｍＴＯＲリン酸化酵素阻害剤の発見について記載する。
【０００５】
ＮＳＣＬＣの治療用ＥＧＦＲリン酸化酵素阻害剤であるＴａｒｃｅｖａの最近の成功、およびＣＭＬ治療用Ｇｌｅｅｖｅｃでの以前の成功は、癌の有効治療のための選択的リン酸化酵素阻害剤の開発が可能であることを示唆している。リン酸化酵素阻害剤をはじめとする抗癌剤が数種類存在するものの、抗癌剤のさらなる改善が引き続き必要とされており、選択性、効力が向上した、または毒性もしくは副作用が減少した新規化合物の開発が望まれる。つまり、癌患者の治療を目的として、ｍＴＯＲ阻害を示す化合物を開発することが望ましい。さらに、そうした化合物が他のリン酸化酵素（例えば、ＰＩ３Ｋ、Ｓｒｃ、ＫＤＲなど）でも活性で、乳癌、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、腎細胞癌、マントル細胞リンパ腫、子宮内膜癌、または他の過誤腫症候群にも効果を示してもよい。
【０００６】
新規塩形態に関しては、これらが医薬製造、配合、貯蔵、および使用に関して好ましい特性を与えることが望ましい。例えば、塩は、その他既知の基準のなかでも、好ましい溶解性、吸湿性、安定性、一様性、再現性、純度を示すことが望ましい。
【０００７】
ＵＳ２００７／０１１２００５は、とりわけ、ｍＴＯＲ阻害化合物を開示している。本発明は、ｍＴＯＲ阻害剤化合物の特定の塩および形態、これらの調製、配合、および使用に関する。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】米国特許出願公開第２００７／０１１２００５号明細書
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００９】
幾つかの態様において、本発明は、式（Ｉ）：
【００１０】
【化１】
で表される化合物の塩および多形を提供し、以下にこの詳細を記載する。塩は、ＵＳ２００７／０１１２００５に記載される化合物から調製することができる。ＵＳ２００７／０１１２００５は、化合物の調製、生物活性、および使用についても記載している。ＵＳ２００７／０１１２００５はこの全体が本明細書中に参照として援用される。本発明は、塩、多形、これらの調製、配合、および疾患治療への使用を含む。
【図面の簡単な説明】
【００１１】
【図１】実施例１のトロメタミン塩の形のＸＲＰＤパターン。
【図２】実施例２のカルシウム塩の形のＸＲＰＤパターン。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
幾つかの態様において、本発明は、式（Ｉ）で表される化合物の医薬的に許容される塩を提供する：
【００１３】
【化２】
式中：
Ｘ１およびＸ２は、それぞれ独立してＮまたはＣ−（Ｅ１）ａａであり；
Ｘ５はＮ、Ｃ−（Ｅ１）ａａ、またはＮ−（Ｅ１）ａａであり；
Ｘ３、Ｘ４、Ｘ６、およびＸ７は、それぞれ独立してＮまたはＣであり；
ただし、Ｘ３、Ｘ４、Ｘ５、Ｘ６、およびＸ７の少なくとも１つは、独立してＮまたはＮ−（Ｅ１）ａａであり；
Ｒ３は、Ｃ０−１０アルキル、シクロＣ３−１０アルキル、アミノメチルシクロＣ３−１０アルキル、ビシクロＣ５−１０アルキル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、ヘテロアラルキル、ヘテロシクリル、またはヘテロビシクロＣ５−１０アルキルであり、このいずれもが、１つまたは複数の独立したＧ１１置換基で場合により置換され；
Ｑ１は、−Ａ（Ｒ１）ｍＢ（Ｗ）ｎまたは−Ｂ（Ｇ１１）ｎＡ（Ｙ）ｍであり；
ＡおよびＢは、それぞれ、五員および六員の芳香族もしくはヘテロ芳香族環であるか、一緒に縮合して５−ベンゾ［ｂ］フリルおよび３−インドリルを除く九員のヘテロ芳香族系を形成するが、Ｘ１およびＸ５がＣＨであり、Ｘ３、Ｘ６、およびＸ７がＣであり、Ｘ２およびＸ４がＮである場合は、２−インドリル、２−ベンゾオキサゾール、２−ベンゾチアゾール、２−ベンゾイミダゾリル、４−アミノピロロピリミジン−５−イル、４−アミノピロロピリミジン−６−イル、および７−デアザ−７−アデノシニル誘導体を除き；
またはＱ１は−Ａ（Ｒ１）ｍＡ（Ｙ）ｍであり、式中それぞれのＡは同一であるか異なっていて、五員の芳香族もしくはヘテロ芳香族環であるか、この２つは一緒に縮合して八員のヘテロ芳香族系を形成し；
Ｒ１は、独立して、水素、−Ｎ（Ｃ０−８アルキル）（Ｃ０−８アルキル）、ヒドロキシル、ハロゲン、オキソ、アリール（１つ以上のＲ３１基で場合により置換される。）、ヘタリール（１つ以上のＲ３１基で場合により置換される。）、Ｃ１−６アルキル、−Ｃ０−８アルキルＣ３−８シクロアルキル、−Ｃ０−８アルキル−ＮＲ３１１Ｓ（Ｏ）０−２Ｒ３２１、−Ｃ０−８アルキル−ＮＲ３１１Ｓ（Ｏ）０−２ＮＲ３２１Ｒ３３１、−Ｃ０−８アルキル−Ｓ（Ｏ）０−２ＮＲ３１１Ｒ３２１、−Ｃ０−８アルキル−ＮＲ３１１ＣＯＲ３２１、−Ｃ０−８アルキル−ＮＲ３１１ＣＯ２Ｒ３２１、−Ｃ０−８アルキル−ＮＲ３１１ＣＯＮＲ３２１Ｒ３３１、−Ｃ０−８アルキル−ＣＯＮＲ３１１Ｒ３２１、−Ｃ０−８アルキル−ＣＯＮ（Ｒ３１１）Ｓ（Ｏ）０−２Ｒ３２１、−Ｃ０−８アルキル−ＣＯ２Ｒ３１１、−Ｃ０−８アルキル−Ｓ（Ｏ）０−２Ｒ３１１、−Ｃ０−８アルキル−Ｏ−Ｃ１−８アルキル、−Ｃ０−８アルキル−Ｏ−Ｃ０−８アルキルＣ３−８シクロアルキル、−Ｃ０−８アルキル−Ｏ−Ｃ０−８アルキルヘテロシクリル、−Ｃ０−８アルキル−Ｏ−Ｃ０−８アルキルアリール、−Ｃ０−８アルキルアリール、−Ｃ０−８アルキルヘタリール、−Ｃ０−８アルキルヘテロシクリル、−Ｃ０−８アルキル−Ｏ−Ｃ０−８アルキルヘタリール、−Ｃ０−８アルキル−Ｓ−Ｃ０−８アルキル、−Ｃ０−８アルキル−Ｓ−Ｃ０−８アルキルＣ３−８シクロアルキル、−Ｃ０−８アルキル−Ｓ−Ｃ０−８アルキルヘテロシクリル、−Ｃ０−８アルキル−Ｓ−Ｃ０−８アルキルアリール、−Ｃ０−８アルキル−Ｓ−Ｃ０−８アルキルヘタリール、−Ｃ０−８アルキル−Ｎ（Ｒ３１１）−Ｃ０−８アルキル、−Ｃ０−８アルキル−Ｎ（Ｒ３１１）−Ｃ０−８アルキルＣ３−８シクロアルキル、−Ｃ０−８アルキル−Ｎ（Ｒ３１１）−Ｃ０−８アルキルヘテロシクリル、−Ｃ０−８アルキル−Ｎ（Ｒ３１１）−Ｃ０−８アルキルアリール、−Ｃ０−８アルキル−Ｎ（Ｒ３１１）−Ｃ０−８アルキルヘタリール、−Ｃ０−８アルキル−ＮＲ３１１Ｒ３２１、−Ｃ２−８アルケニル、−Ｃ２−８アルキニル、ＮＯ２、ＣＮ、ＣＦ３、ＯＣＦ３、ＯＣＨＦ２であるが；ただしＱ１は、Ｎ−メチル−２−インドリル、Ｎ−（フェニルスルホニル）−２−インドリル、またはＮ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルではなく；
Ｗは、独立して、水素、−Ｎ（Ｃ０−８アルキル）（Ｃ０−８アルキル）、ヒドロキシル、ハロゲン、オキソ、アリール（１つ以上のＲ３１基で場合により置換される。）、ヘタリール（１つ以上のＲ３１基で場合により置換される。）、Ｃ１−６アルキル、−Ｃ０−８アルキルＣ３−８シクロアルキル、−Ｃ０−８アルキル−ＮＲ３１２Ｓ（Ｏ）０−２Ｒ３２２、−Ｃ０−８アルキル−ＮＲ３１１Ｓ（Ｏ）０−２ＮＲ３２１Ｒ３３１、−Ｃ０−８アルキル−ＮＲ３１１ＣＯ２Ｒ３２１、−Ｃ０−８アルキル−ＣＯＮ（Ｒ３１１）Ｓ（Ｏ）０−２Ｒ３２１、−Ｃ０−８アルキル−Ｓ（Ｏ）０−２ＮＲ３１２Ｒ３２２、−Ｃ０−８アルキル−ＮＲ３１２ＣＯＲ３２２、−Ｃ０−８アルキル−ＮＲ３１２ＣＯＮＲ３２２Ｒ３３２、−Ｃ０−８アルキル−ＣＯＮＲ３１２Ｒ３２２、−Ｃ０−８アルキル−ＣＯ２Ｒ３１２、−Ｃ０−８アルキルＳ（Ｏ）０−２Ｒ３１２、−Ｃ０−８アルキル−Ｏ−Ｃ１−８アルキル、−Ｃ０−８アルキル−Ｏ−Ｃ０−８アルキルシクリル、−Ｃ０−８アルキル−Ｏ−Ｃ０−８アルキルヘテロシクロアルキル、−Ｃ０−８アルキル−Ｏ−Ｃ０−８アルキルアリール、−Ｃ０−８アルキルアリール、−Ｃ０−８アルキルヘタリール、−Ｃ０−８アルキルヘテロシクリル、−Ｏアリール、−Ｃ０−８アルキル−Ｏ−Ｃ０−８アルキルヘタリール、−Ｃ０−８アルキル−Ｓ−Ｃ０−８アルキル、−Ｃ０−８アルキル−Ｓ−Ｃ０−８アルキルＣ３−８シクロアルキル、−Ｃ０−８アルキル−Ｓ−Ｃ０−８アルキルヘテロシクロアルキル、−Ｃ０−８アルキル−Ｓ−Ｃ０−８アルキルアリール、−Ｃ０−８アルキル−Ｓ−Ｃ０−８アルキルヘタリール、−Ｃ０−８アルキル−Ｎ（Ｒ３１２）−Ｃ０−８アルキル、−Ｃ０−８アルキル−Ｎ（Ｒ３１２）−Ｃ０−８アルキルＣ３−８シクロアルキル、−Ｃ０−８アルキル−Ｎ（Ｒ３１２）−Ｃ０−８アルキルヘテロシクロアルキル、−Ｃ０−８アルキル−Ｎ（Ｒ３１２）−Ｃ０−８アルキルアリール、−Ｃ０−８アルキル−Ｎ（Ｒ３１２）−Ｃ０−８アルキルヘタリール、Ｃ０−８アルキル−ＮＲ３１２Ｒ３２２、−Ｃ２−８アルケニル、−Ｃ２−８アルキニル、ＮＯ２、ＣＮ、ＣＦ３、ＯＣＦ３、ＯＣＨＦ２であるが、ただしＱ１は４−ベンジルオキシ−２−インドリルではなく；
Ｙは、独立して、水素、−Ｎ（Ｃ０−８アルキル）（Ｃ０−８アルキル）、ヒドロキシル、ハロゲン、オキソ、アリール（１つ以上のＲ３１基で場合により置換される。）、ヘタリール（１つ以上のＲ３１基で場合により置換される。）、Ｃ０−６アルキル、−Ｃ０−８アルキルＣ３−８シクロアルキル、−Ｃ０−８アルキル−ＮＲ３１１Ｓ（Ｏ）０−２Ｒ３２１、−Ｃ０−８アルキル−ＮＲ３１１Ｓ（Ｏ）０−２ＮＲ３２１Ｒ３３１、−Ｃ０−８アルキル−ＮＲ３１１ＣＯ２Ｒ３２１、−Ｃ０−８アルキル−ＣＯＮ（Ｒ３１１）Ｓ（Ｏ）０−２Ｒ３２１、−Ｃ０−８アルキル−Ｓ（Ｏ）０−２ＮＲ３１１Ｒ３２１、−Ｃ０−８アルキル−ＮＲ３１１ＣＯＲ３２１、−Ｃ０−８アルキル−ＮＲ３１１ＣＯＮＲ３２１Ｒ３３１、−Ｃ０−８アルキル−ＣＯＮＲ３１１Ｒ３２１、−Ｃ０−８アルキル−ＣＯ２Ｒ３１１、−Ｃ０−８アルキルＳ（Ｏ）０−２Ｒ３１１、−Ｃ０−８アルキル−Ｏ−Ｃ１−８アルキル、−Ｃ０−８アルキル−Ｏ−Ｃ０−８アルキルＣ３−８シクロアルキル、−Ｃ０−８アルキル−Ｏ−Ｃ０−８アルキルヘテロシクロアルキル、−Ｃ０−８アルキル−Ｏ−Ｃ０−８アルキルアリール、−Ｃ０−８アルキルアリール、−Ｃ０−８アルキルヘタリール、−Ｃ０−８アルキルヘテロシクリル、−Ｃ０−８アルキル−Ｏ−Ｃ０−８アルキルヘタリール、−Ｃ０−８アルキル−Ｓ−Ｃ０−８アルキル、−Ｃ０−８アルキル−Ｓ−Ｃ０−８アルキルＣ３−８シクロアルキル、−Ｃ０−８アルキル−Ｓ−Ｃ０−８アルキルヘテロシクロアルキル、−Ｃ０−８アルキル−Ｓ−Ｃ０−８アルキルアリール、−Ｃ０−８アルキル−Ｓ−Ｃ０−８アルキルヘタリール、−Ｃ０−８アルキル−Ｎ（Ｒ３１１）−Ｃ０−８アルキル、−Ｃ０−８アルキル−Ｎ（Ｒ３１１）−Ｃ０−８アルキルＣ３−８シクロアルキル、−Ｃ０−８アルキル−Ｎ（Ｒ３１１）−Ｃ０−８アルキルヘテロシクロアルキル、−Ｃ０−８アルキル−Ｎ（Ｒ３１１）−Ｃ０−８アルキルアリール、−Ｃ０−８アルキル−Ｎ（Ｒ３１１）−Ｃ０−８アルキルヘタリール、−Ｃ０−８アルキル−ＮＲ３１１Ｒ３２１、−Ｃ２−８アルケニル、−Ｃ２−８アルキニル、ＮＯ２、ＣＮ、ＣＦ３、ＯＣＦ３、ＯＣＨＦ２であるが、ただしＱ１は２−カルボキシ−５−ベンゾ［ｂ］チオフェニルではなく；
Ｇ１１は、ハロ、オキソ、−ＣＦ３、−ＯＣＦ３、−ＯＲ３１２、−ＮＲ３１２Ｒ３２２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ３１２、−Ｃ（Ｏ）Ｃ３−８シクロアルキル、−ＣＯ２Ｃ３−８シクロアルキル、−ＣＯ２Ｒ３１２、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ３１２Ｒ３２２、−ＮＯ２、−ＣＮ、−Ｓ（Ｏ）０−２Ｒ３１２、−ＳＯ２ＮＲ３１２Ｒ３２２、ＮＲ３１２（Ｃ＝Ｏ）Ｒ３２２、ＮＲ３１２Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ３２２、ＮＲ３１２Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ３２２Ｒ３３２、ＮＲ３１２Ｓ（Ｏ）０−２Ｒ３２２、−Ｃ（＝Ｓ）ＯＲ３１２、−Ｃ（＝Ｏ）ＳＲ３１２、−ＮＲ３１２Ｃ（＝ＮＲ３２２）ＮＲ３３２Ｒ３４１、−ＮＲ３１２Ｃ（＝ＮＲ３２２）ＯＲ３３２、−ＮＲ３１２Ｃ（＝ＮＲ３２２）ＳＲ３３２、−ＯＣ（＝Ｏ）ＯＲ３１２、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＲ３１２Ｒ３２２、−ＯＣ（＝Ｏ）ＳＲ３１２、−ＳＣ（＝Ｏ）ＯＲ３１２、−ＳＣ（＝Ｏ）ＮＲ３１２Ｒ３２２、−Ｐ（Ｏ）ＯＲ３１２ＯＲ３２２、Ｃ１−１０アルキリデン、Ｃ０−１０アルキル、Ｃ２−１０アルケニル、Ｃ２−１０アルキニル、−Ｃ１−１０アルコキシＣ１−１０アルキル、−Ｃ１−１０アルコキシＣ２−１０アルケニル、−Ｃ１−１０アルコキシＣ２−１０アルキニル、−Ｃ１−１０アルキルチオＣ１−１０アルキル、−Ｃ１−１０アルキルチオＣ２−１０アルケニル、−Ｃ１−１０アルキルチオＣ２−１０アルキニル、シクロＣ３−８アルキル、シクロＣ３−８アルケニル、−シクロＣ３−８アルキルＣ１−１０アルキル、−シクロＣ３−８アルケニルＣ１−１０アルキル、−シクロＣ３−８アルキルＣ２−１０アルケニル、−シクロＣ３−８アルケニルＣ２−１０アルケニル、−シクロＣ３−８アルキルＣ２−１０アルキニル、−シクロＣ３−８アルケニルＣ２−１０アルキニル、−ヘテロシクリル−Ｃ０−１０アルキル、−ヘテロシクリル−Ｃ２−１０アルケニル、または−ヘテロシクリル−Ｃ２−１０アルキニルであり、このいずれもが、１つ以上の独立したハロ、オキソ、−ＣＦ３、−ＯＣＦ３、−ＯＲ３１３、−ＮＲ３１３Ｒ３２３、−Ｃ（Ｏ）Ｒ３１３、−ＣＯ２Ｒ３１３、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ３１３Ｒ３２３、−ＮＯ２、−ＣＮ、−Ｓ（Ｏ）０−２Ｒ３１３、−ＳＯ２ＮＲ３１３Ｒ３２３、−ＮＲ３１３Ｃ（＝Ｏ）Ｒ３２３、−ＮＲ３１３Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ３２３、−ＮＲ３１３Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ３２３Ｒ３３３、−ＮＲ３１３Ｓ（Ｏ）０−２Ｒ３２３、−Ｃ（＝Ｓ）ＯＲ３１３、−Ｃ（＝Ｏ）ＳＲ３１３、−ＮＲ３１３Ｃ（＝ＮＲ３２３）ＮＲ３３３Ｒ３４２、−ＮＲ３１３Ｃ（＝ＮＲ３２３）ＯＲ３３３、−ＮＲ３１３Ｃ（＝ＮＲ３２３）ＳＲ３３３、−ＯＣ（＝Ｏ）ＯＲ３３３、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＲ３１３Ｒ３２３、−ＯＣ（＝Ｏ）ＳＲ３１３、−ＳＣ（＝Ｏ）ＯＲ３１３、−Ｐ（Ｏ）ＯＲ３１３ＯＲ３２３、または−ＳＣ（＝Ｏ）ＮＲ３１３Ｒ３２３置換基で場合により置換され；
またはＧ１１は、アリール−Ｃ０−１０アルキル、アリール−Ｃ２−１０アルケニル、アリール−Ｃ２−１０アルキニル、ヘタリール−Ｃ０−１０アルキル、ヘタリール−Ｃ２−１０アルケニル、またはヘタリール−Ｃ２−１０アルキニルであり、これらの結合点は、記載されるとおり左または右のいずれかからであり、このいずれもが、１つ以上の独立したハロ、−ＣＦ３、−ＯＣＦ３、−ＯＲ３１３、−ＮＲ３１３Ｒ３２３、−Ｃ（Ｏ）Ｒ３１３、−ＣＯ２Ｒ３１３、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ３１３Ｒ３２３、−ＮＯ２、−ＣＮ、−Ｓ（Ｏ）０−２Ｒ３１３、−ＳＯ２ＮＲ３１３Ｒ３２３、−ＮＲ３１３Ｃ（＝Ｏ）Ｒ３２３、−ＮＲ３１３Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ３２３、−ＮＲ３１３Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ３２３Ｒ３３３、−ＮＲ３１３Ｓ（Ｏ）０−２Ｒ３２３、−Ｃ（＝Ｓ）ＯＲ３１３、−Ｃ（Ｏ）ＳＲ３１３、−ＮＲ３２３Ｃ（＝ＮＲ３１３）ＮＲ３３３Ｒ３４２、−ＮＲ３１３Ｃ（＝ＮＲ３２３）ＯＲ３３３、−ＮＲ３１３Ｃ（＝ＮＲ３２３）ＳＲ３３３、−ＯＣ（＝Ｏ）ＯＲ３１３、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＲ３１３Ｒ３２３、−ＯＣ（＝Ｏ）ＳＲ３１３、−ＳＣ（＝Ｏ）ＯＲ３１３、−Ｐ（Ｏ）ＯＲ３１３ＯＲ３２３、または−ＳＣ（＝Ｏ）ＮＲ３１３Ｒ３２３置換基で場合により置換されるが、ただしＲ３が４−ピペリジニルの場合Ｇ１１はＮ−ＣＨ２ＣＯ２Ｈではなく；
各例において、Ｒ３１、Ｒ３２、Ｒ３３、Ｒ３１１、Ｒ３２１、Ｒ３３１、Ｒ３１２、Ｒ３２２、Ｒ３３２、Ｒ３４１、Ｒ３１３、Ｒ３２３、Ｒ３３３、およびＲ３４２は、独立して：アリール、ヘテロシクリル、もしくはヘタリール置換基で場合により置換されるＣ０−８アルキル、または１から６個の独立したハロ、−ＣＯＮ（Ｃ０−８アルキル）（Ｃ０−８アルキル）、−ＣＯ（Ｃ０−８アルキル）、−ＯＣ０−８アルキル、−Ｏアリール、−Ｏヘタリール、−Ｏヘテロシクリル、−Ｓ（Ｏ）０−２アリール、−Ｓ（Ｏ）０−２ヘタリール、−Ｓ（Ｏ）０−２ヘテロシクリル、−Ｓ（Ｏ）０−２Ｃ０−８アルキル、−Ｎ（Ｃ０−８アルキル）（Ｃ０−８アルキル）、−Ｎ（Ｃ０−８アルキル）ＣＯＮ（Ｃ０−８アルキル）（Ｃ０−８アルキル）、−Ｎ（Ｃ０−８アルキル）ＣＯ（Ｃ１−８アルキル）、−Ｎ（Ｃ０−８アルキル）ＣＯ（Ｃ３−８シクロアルキル）、−Ｎ（Ｃ０−８アルキル）ＣＯ２（Ｃ１−８アルキル）、Ｓ（Ｏ）１−２Ｎ（Ｃ０−８アルキル）（Ｃ０−８アルキル）、−ＮＲ１１Ｓ（Ｏ）１−２（Ｃ０−８アルキル）、−ＣＯＮ（Ｃ３−８シクロアルキル）（Ｃ３−８シクロアルキル）、−ＣＯＮ（Ｃ０−８アルキル）（Ｃ３−８シクロアルキル）、−Ｎ（Ｃ３−８シクロアルキル）ＣＯＮ（Ｃ０−８アルキル）（Ｃ０−８アルキル）、−Ｎ（Ｃ３−８シクロアルキル）ＣＯＮ（Ｃ３−８シクロアルキル）（Ｃ０−８アルキル）、−Ｎ（Ｃ０−８アルキル）ＣＯＮ（Ｃ３−８シクロアルキル）（Ｃ０−８アルキル）、−Ｎ（Ｃ０−８アルキル）ＣＯ２（Ｃ３−８シクロアルキル）、−Ｎ（Ｃ３−８シクロアルキル）ＣＯ２（Ｃ３−８シクロアルキル）、Ｓ（Ｏ）１−２Ｎ（Ｃ０−８アルキル）（Ｃ３−８シクロアルキル）、−ＮＲ１１Ｓ（Ｏ）１−２（Ｃ３−８シクロアルキル）、Ｃ２−８アルケニル、Ｃ２−８アルキニル、ＣＮ、ＣＦ３、ＯＨ、または場合により置換したアリール置換基で場合により置換されるＣ０−８アルキルであるが；ただし、上記アリール、ヘテロシクリル、ヘタリール、アルキル、またはシクロアルキル基のそれぞれは、独立して−Ｎ（Ｃ０−８アルキル）（Ｃ０−８アルキル）、ヒドロキシル、ハロゲン、オキソ、アリール、ヘタリール、Ｃ０−６アルキル、−Ｃ０−８アルキルシクリル、−Ｃ０−８アルキル−Ｎ（Ｃ０−８アルキル）−Ｓ（Ｏ）０−２−（Ｃ０−８アルキル）、−Ｃ０−８アルキル−Ｓ（Ｏ）０−２−Ｎ（Ｃ０−８アルキル）（Ｃ０−８アルキル）、−Ｃ０−８アルキル−Ｎ（Ｃ０−８アルキル）ＣＯ（Ｃ０−８アルキル）、−Ｃ０−８アルキル−Ｎ（Ｃ０−８アルキル）ＣＯ−Ｎ（Ｃ０−８アルキル）（Ｃ０−８アルキル）、−Ｃ０−８アルキル−ＣＯ−Ｎ（Ｃ０−８アルキル）（Ｃ０−８アルキル）、−Ｃ１−８アルキル−ＣＯ２−（Ｃ０−８アルキル）、−Ｃ０−８アルキルＳ（Ｏ）０−２−（Ｃ０−８アルキル）、−Ｃ０−８アルキル−Ｏ−Ｃ１−８アルキル、−Ｃ０−８アルキル−Ｏ−Ｃ０−８アルキルシクリル、−Ｃ０−８アルキル−Ｏ−Ｃ０−８アルキルヘテロシクリル、−Ｃ０−８アルキル−Ｏ−Ｃ０−８アルキルアリール、−Ｃ０−８アルキル−Ｏ−Ｃ０−８アルキルヘタリール、−Ｃ０−８アルキル−Ｓ−Ｃ０−８アルキル、−Ｃ０−８アルキル−Ｓ−Ｃ０−８アルキルシクリル、−Ｃ０−８アルキル−Ｓ−Ｃ０−８アルキルヘテロシクリル、−Ｃ０−８アルキル−Ｓ−Ｃ０−８アルキルアリール、−Ｃ０−８アルキル−Ｓ−Ｃ０−８アルキルヘタリール、−Ｃ０−８アルキル−Ｎ（Ｃ０−８アルキル）−Ｃ０−８アルキル、−Ｃ０−８アルキル−Ｎ（Ｃ０−８アルキル）−Ｃ０−８アルキルシクリル、−Ｃ０−８アルキル−Ｎ（Ｃ０−８アルキル）−Ｃ０−８アルキルヘテロシクリル、−Ｃ０−８アルキル−Ｎ（Ｃ０−８アルキル）−Ｃ０−８アルキルアリール、−Ｃ０−８アルキル−Ｎ（Ｃ０−８アルキル）−Ｃ０−８アルキルヘタリール、−Ｃ２−８アルケニル、−Ｃ２−８アルキニル、ＮＯ２、ＣＮ、ＣＦ３、ＯＣＦ３、ＯＣＨＦ２、−Ｃ０−８アルキル−Ｃ３−８シクロアルキル、−Ｃ０−８アルキル−Ｏ−Ｃ０−８アルキル、−Ｃ０−８アルキル−Ｎ（Ｃ０−８アルキル）（Ｃ０−８アルキル）、−Ｃ０−８アルキル−Ｓ（Ｏ）０−２−Ｃ０−８アルキル、または１から４個の独立したＣ０−８アルキル、シクリル、もしくは置換シクリル置換基で場合により置換されたヘテロシクリルで、場合により置換されてもよく；
各例において、Ｅ１は、独立してハロ、−ＣＦ３、−ＯＣＦ３、−ＯＲ２、−ＮＲ３１Ｒ３２、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ３１、−ＣＯ２Ｒ３１、−ＣＯＮＲ３１Ｒ３２、−ＮＯ２、−ＣＮ、−Ｓ（Ｏ）０−２Ｒ３１、−Ｓ（Ｏ）０−２ＮＲ３１Ｒ３２、−ＮＲ３１Ｃ（＝Ｏ）Ｒ３２、−ＮＲ３１Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ３２、−ＮＲ３１Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ３２Ｒ３３、−ＮＲ３１Ｓ（Ｏ）０−２Ｒ３２、−Ｃ（＝Ｓ）ＯＲ３１、−Ｃ（＝Ｏ）ＳＲ３１、−ＮＲ３１Ｃ（＝ＮＲ３２）ＮＲ３３Ｒ３１、−ＮＲ３１Ｃ（＝ＮＲ３２）ＯＲ３３、−ＮＲ３１Ｃ（＝ＮＲ３１）ＳＲ３１、−ＯＣ（＝Ｏ）ＯＲ３１、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＲ３１Ｒ３２、−ＯＣ（＝Ｏ）ＳＲ３１、−ＳＣ（＝Ｏ）ＯＲ３１、−ＳＣ（＝Ｏ）ＮＲ３１Ｒ３２、Ｃ０−１０アルキル、Ｃ２−１０アルケニル、Ｃ２−１０アルキニル、−Ｃ１−１０アルコキシＣ１−１０アルキル、−Ｃ１−１０アルコキシＣ２−１０アルケニル、−Ｃ１−１０アルコキシＣ２−１０アルキニル、−Ｃ１−１０アルキルチオＣ１−１０アルキル、−Ｃ１−１０アルキルチオＣ２−１０アルケニル、−Ｃ１−１０アルキルチオＣ２−１０アルキニル、シクロＣ３−８アルキル、シクロＣ３−８アルケニル、−シクロＣ３−８アルキルＣ１−１０アルキル、−シクロＣ３−８アルケニルＣ１−１０アルキル、−シクロＣ３−８アルキルＣ２−１０アルケニル、−シクロＣ３−８アルケニルＣ２−１０アルケニル、−シクロＣ３−８アルキルＣ２−１０アルキニル、−シクロＣ３−８アルケニルＣ２−１０アルキニル、−ヘテロシクリル−Ｃ０−１０アルキル、−ヘテロシクリル−Ｃ２−１０アルケニル、または−ヘテロシクリル−Ｃ２−１０アルキニルであり、このいずれもが１つ以上の独立したハロ、オキソ、−ＣＦ３、−ＯＣＦ３、−ＯＲ３１、−ＮＲ３１Ｒ３２、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ３１、−ＣＯ２Ｒ３１、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ３１Ｒ３２、−ＮＯ２、−ＣＮ、−Ｓ（Ｏ）０−２Ｒ３１、−ＳＯ２ＮＲ３１、−ＮＲ３１Ｃ（＝Ｏ）Ｒ３２、−ＮＲ３１Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ３１、−ＮＲ３１Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ３２Ｒ３３、−ＮＲ３１Ｓ（Ｏ）０−２Ｒ３１、−Ｃ（＝Ｓ）ＯＲ３１、−Ｃ（＝Ｏ）ＳＲ３１、−ＮＲ３１Ｃ（＝ＮＲ３２）ＮＲ３３Ｒ３１、−ＮＲ３１Ｃ（＝ＮＲ３２）ＯＲ３３、−ＮＲ３１Ｃ（＝ＮＲ３２）ＳＲ３３、−ＯＣ（＝Ｏ）ＯＲ３１、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＲ３１Ｒ３２、−ＯＣ（＝Ｏ）ＳＲ３１、−ＳＣ（Ｏ）ＯＲ３１、または−ＳＣ（＝Ｏ）ＮＲ３１Ｒ３２置換基で場合により置換され；
または各例において、Ｅ１は、独立してアリール−Ｃ０−１０アルキル、アリール−Ｃ２−１０アルケニル、アリール−Ｃ２−１０アルキニル、ヘタリール−Ｃ０−１０アルキル、ヘタリール−Ｃ２−１０アルケニル、またはヘタリール−Ｃ２−１０アルキニルであり、これらの結合点は、記載されるとおり左または右のいずれかからであり、このいずれもが、１つ以上の独立したハロ、−ＣＦ３、−ＯＣＦ３、−ＯＲ３１、−ＮＲ３１Ｒ３２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ３１、−ＣＯ２Ｒ３１、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ３１Ｒ３２、−ＮＯ２、−ＣＮ、−Ｓ（Ｏ）０−２Ｒ３１、−Ｓ（Ｏ）０−２ＮＲ３１Ｒ３２、−ＮＲ３１Ｃ（＝Ｏ）Ｒ３２、−ＮＲ３１Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ３２、−ＮＲ３１Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ３２Ｒ３３、−ＮＲ３１Ｓ（Ｏ）０−２Ｒ３２、−Ｃ（＝Ｓ）ＯＲ３１、−Ｃ（＝Ｏ）ＳＲ３１、−ＮＲ３１Ｃ（＝ＮＲ３２）ＮＲ３３Ｒ３１、−ＮＲ３１Ｃ（＝ＮＲ３２）ＯＲ３３、−ＮＲ３１Ｃ（＝ＮＲ３２）ＳＲ３３、−ＯＣ（＝Ｏ）ＯＲ３１、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＲ３１Ｒ３２、−ＯＣ（＝Ｏ）ＳＲ３１、−ＳＣ（＝Ｏ）ＯＲ３１、または−ＳＣ（＝Ｏ）ＮＲ３１Ｒ３２置換基で場合により置換され；
−ＮＲ３１Ｒ３２、−ＮＲ３１１Ｒ３２１、−ＮＲ３１２Ｒ３２２、−ＮＲ３３２Ｒ３４１、−ＮＲ３１３Ｒ３２３、および−ＮＲ３２３Ｒ３３３の場合、Ｒ３１とＲ３２、Ｒ３１１とＲ３２１、Ｒ３１２とＲ３２２、Ｒ３３１とＲ３４１、Ｒ３１３とＲ３２３、およびＲ３２３とＲ３３３は、それぞれ場合により、これらが結合した窒素原子と一緒になって三から十員の飽和もしくは不飽和環を形成し；前記環は、各例において、独立して、１つ以上の独立した−Ｎ（Ｃ０−８アルキル）（Ｃ０−８アルキル）、ヒドロキシル、ハロゲン、オキソ、アリール、ヘタリール、Ｃ０−６アルキル、−Ｃ０−８アルキルＣ３−８シクロアルキル、−Ｃ０−８アルキル−Ｎ（Ｃ０−８アルキル）Ｓ（Ｏ）０−２Ｃ０−８アルキル、−Ｃ０−８アルキル−Ｎ（Ｃ０−８アルキル）Ｓ（Ｏ）０−２Ｎ（Ｃ０−８アルキル）（Ｃ０−８アルキル）、−Ｃ０−８アルキル−Ｎ（Ｃ０−８アルキル）ＣＯ２（Ｃ０−８アルキル）、−Ｃ０−８アルキル−ＣＯＮ（（Ｃ０−８アルキル））Ｓ（Ｏ）０−２（Ｃ０−８アルキル）、−Ｃ０−８アルキル−Ｓ（Ｏ）０−２Ｎ（Ｃ０−８アルキル）（Ｃ０−８アルキル）、−Ｃ０−８アルキル−Ｎ（Ｃ０−８アルキル）ＣＯ（Ｃ０−８アルキル）、−Ｃ０−８アルキル−Ｎ（Ｃ０−８アルキル）ＣＯＮ（Ｃ０−８アルキル）（Ｃ０−８アルキル）、−Ｃ０−８アルキル−ＣＯＮ（Ｃ０−８アルキル）（Ｃ０−８アルキル）、−Ｃ０−８アルキル−ＣＯ２（Ｃ０−８アルキル）、−Ｃ０−８アルキルＳ（Ｏ）０−２（Ｃ０−８アルキル）、−Ｃ０−８アルキル−Ｏ−Ｃ０−８アルキル、−Ｃ０−８アルキル−Ｏ−Ｃ０−８アルキルシクリル、−Ｃ０−８アルキル−Ｏ−Ｃ０−８アルキルヘテロシクロアルキル、−Ｃ０−８アルキル−Ｏ−Ｃ０−８アルキルアリール、−Ｏアリール、−Ｃ０−８アルキル−Ｏ−Ｃ０−８アルキルヘタリール、−Ｃ０−８アルキル−Ｓ−Ｃ０−８アルキル、−Ｃ０−８アルキル−Ｓ−Ｃ０−８アルキルＣ３−８シクロアルキル、−Ｃ０−８アルキル−Ｓ−Ｃ０−８アルキルヘテロシクロアルキル、−Ｃ０−８アルキル−Ｓ−Ｃ０−８アルキルアリール、−Ｃ０−８アルキル−Ｓ−Ｃ０−８アルキルヘタリール、−Ｃ０−８アルキル−Ｎ（Ｃ０−８アルキル）−Ｃ０−８アルキル、−Ｃ０−８アルキル−Ｎ（Ｃ０−８アルキル）−Ｃ０−８アルキルＣ３−８シクロアルキル、−Ｃ０−８アルキル−Ｎ（Ｃ０−８アルキル）−Ｃ０−８アルキルヘテロシクロアルキル、−Ｃ０−８アルキル−Ｎ（Ｃ０−８アルキル）−Ｃ０−８アルキルアリール、−Ｃ０−８アルキル−Ｎ（Ｃ０−８アルキル）−Ｃ０−８アルキルヘタリール、−Ｃ０−８アルキル−Ｎ（Ｃ０−８アルキル）（Ｃ０−８アルキル）、Ｃ２−８アルケニル、Ｃ２−８アルキニル、ＮＯ２、ＣＮ、ＣＦ３、ＯＣＦ３、またはＯＣＨＦ２置換基で場合により置換され；前記環は、各例において、独立して、場合により１つ以上の窒素以外のヘテロ原子を含み；および
ｍは、０、１、２、または３であり；ｎは、０、１、２、３、または４であり；およびａａは０または１である。
【００１４】
実施形態の幾つかにおいて、化合物は、ｔｒａｎｓ−４−［８−アミノ−１−（７−クロロ−４−ヒドロキシ−１Ｈ−インドール−２−イル）イミダゾ［１，５−α］ピラジン−３−イル］シクロヘキサンカルボン酸、ｃｉｓ−３−［８−アミノ−１−（７−クロロ−１Ｈ−インドール−２−イル）イミダゾ［１，５−α］ピラジン−３−イル］シクロブタンカルボン酸、ｔｒａｎｓ−４−｛８−アミノ−１−［７−（３−イソプロピル）フェニル−１Ｈ−インドール−２−イル］イミダゾ［１，５−α］ピラジン−３−イル｝シクロヘキサンカルボン酸、またはｔｒａｎｓ−４−｛８−アミノ−１−［７−（２，５−ジクロロ）フェニル−１Ｈ−インドール−２−イル］イミダゾ［１，５−α］ピラジン−３−イル｝シクロヘキサンカルボン酸ではない。
【００１５】
実施形態の幾つかにおいて、以下から選択される化合物の、トロメタミン、ナトリウム、カルシウムおよびＬ−アルギニンからなる群より選択される医薬的に許容される塩が提供される：
【００１６】
【化３】
【００１７】
化合物は、当分野の一般技術に従って、ＵＳ２００７／０１１２００５に記載されるように調製することができる。
【００１８】
実施形態の幾つかにおいて、塩は、トロメタミン、ナトリウム、カルシウム、およびＬ−アルギニンから選択される。実施形態の幾つかにおいて、塩は、マグネシウム、カリウム、Ｎ，Ｎ−ジエチルエタノールアミン、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン、およびピペラジンから選択される。
【００１９】
実施形態の幾つかにおいて、ｔｒａｎｓ−４−［４−アミノ−５−（７−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−イル）イミダゾ［５，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル］シクロヘキサンカルボン酸の医薬的に許容される塩が提供され、この塩は、ナトリウム、カルシウム、Ｌ−アルギニン、マグネシウム、カリウム、Ｎ，Ｎ−ジエチルエタノールアミン、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン、およびトロメタミンから選択される。
【００２０】
実施形態の幾つかにおいて、塩の形は、ナトリウム、カルシウム、またはＬ−アルギニンから選択される。実施形態の幾つかにおいて、塩の形は、マグネシウム、カリウム、Ｎ，Ｎ−ジエチルエタノールアミン、またはＮ−メチル−Ｄ−グルカミンから選択される。実施形態の幾つかにおいて、塩の形は、トロメタミンである。
【００２１】
実施形態の幾つかにおいて、塩の形は、水和または溶媒和塩の形である。実施形態の幾つかにおいて、塩の形は、実質的に非晶質である。実施形態の幾つかにおいて、塩の形は、実質的に結晶性である。
【００２２】
実施形態の幾つかにおいて、塩の形は、少なくとも約９５重量％が結晶性である。実施形態の幾つかにおいて、塩の形は、実質的に単一の結晶形である。
【００２３】
実施形態の幾つかにおいて、塩の形は、４０℃および７５％ＲＨで３０日間に約１重量％以下が分解する。
【００２４】
実施形態の幾つかにおいて、塩の形は、図１のものと実質的に相似したＸ線粉末回折パターンを示すトロメタミン塩である。実施形態の幾つかにおいて、塩の形は、ＤＳＣ分析により約２０２から２１１℃で吸熱を示すトロメタミン塩の形である。実施形態の幾つかにおいて、塩の形は、水に対して約６ｍｇ／ｍＬの溶解性を有するトロメタミン塩の形である。実施形態の幾つかにおいて、塩の形は、実施例１のものと実質的に同様な１３Ｃ ＮＭＲスペクトルを有するトロメタミン塩の形である。実施形態の幾つかにおいて、塩の形は、９０から９５％ＲＨで２から４％の吸湿性を有するトロメタミン塩の形である。
【００２５】
実施形態の幾つかにおいて、塩の形は、ＭｅＯＨを還流させながらこの中で約１時間（トロメタミン）１，３−プロパンジオール、２−アミノ−２−（ヒドロキシメチル）（約１から２当量）を反応させ、冷却し、ろ過し、洗い、乾燥させることにより調製される。実施形態の幾つかにおいて、出発物質の遊離化合物は、最初は無機塩を含まない。遊離化合物をＥｔＯＨまたはＥｔＯＨ／水から結晶化させると、残留Ｐｄが存在する場合にこれを除去するのに特に有用であり得る。実施形態の幾つかにおいて、トロメタミン塩は、約３当量のトロメタミンをＥｔＯＨまたはＥｔＯＨ：水１：１中で反応させることにより形成される。実施形態の幾つかにおいて、トロメタミン塩は、ＭｅＯＨ：ＴＨＦ中でゆっくり冷却することにより調製される。
【００２６】
実施形態の幾つかにおいて、塩の形は、図２のものと実質的に相似したＸ線粉末回折パターンを示すカルシウム塩である。
【００２７】
生物活性：ｍＴＯＲ活性の阻害
組換え４Ｅ−ＢＰ１を基質として用いて、ｉｎ ｖｉｔｒｏ免疫沈降（ＩＰ）リン酸化酵素アッセイで化合物のｍＴＯＲリン酸化酵素活性を阻害する能力を求めた。アッセイにより、ｍＴＯＲの既知の生理基質である４Ｅ−ＢＰ１のリン酸化を阻害する化合物の能力が求められる。ＨｅＬａ細胞由来の免疫捕捉ｍＴＯＲ複合体を、リン酸化酵素アッセイ緩衝液中、様々な濃度の化合物およびＨｉｓ−タグ４Ｅ−ＢＰ１とともに温置してから、ＡＴＰを添加して室温で反応を開始する。３０分後に反応を止め、４℃で一晩かけて、ホスホリル化Ｈｉｓ−タグ４Ｅ−ＢＰ１をニッケルキレートプレートに捕捉する。次いで、ホスホ−４Ｅ−ＢＰｌ（Ｔ３７／４６）一次抗体および対応する抗ウサギＩｇＧ ＨＲＰ複合二次抗体を用いて、４Ｅ−ＢＰ１のホスホスレオニン含量を測定する。二次抗体は、一次抗体のホスホリル化４Ｅ−ＢＰ１への結合が、一次抗体に結合した二次抗体の量として定量的に求めることができるように、共有結合したレポーター酵素（例えば西洋ワサビペルオキシダーゼ、ＨＲＰ）を有している。二次抗体の量は、適切なＨＲＰ基質との温置により求めることができる。
【００２８】
用いた貯蔵試薬は以下のとおりである：細胞溶解緩衝液：４０ｍＭのＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．５、１２０ｍＭのＮａＣｌ、１ｍＭのＥＤＴＡ、１０ｍＭのピロリン酸ナトリウム、１０ｍＭのβ−グリセロリン酸（グリセロホスフェート）、５０ｍＭのフッ化ナトリウム、１．５ｍＭのバナジン酸ナトリウム、および０．３％のＣＨＡＰＳを含有。Ｃｏｍｐｌｅｔｅ ｍｉｎｉ ＥＤＴＡ−ｆｒｅｅ プロテアーゼ阻害剤（Ｒｏｃｈｅ、カタログ番号＃１１ ８３６ １７０ ００１）。ＨｅＬａ細胞ペレット（Ｐａｒａｇｏｎ Ｂｉｏｓｅｒｖｉｃｅｓ）。タンパク質Ｇでコーティングした免疫沈降用プレート（Ｐｉｅｒｃｅ、カタログ番号＃１５１３１）。ｍＴＯＲ（ａｋａ ＦＲＡＰ）Ｎ−１９抗体（Ｓａｎｔａ Ｃｒｕｚ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、カタログ番号＃ｓｃ−１５４９）。ＩＰ洗浄緩衝液：５０ｍＭのＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．５，１５０ｍＭのＮａＣｌを含有。リン酸化酵素緩衝液：２０ｍＭのＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．５，１０ｍＭのＭｇＣｌ２、４ｍＭのＭｎＣｌ２、１０ｍＭのｂ−メルカプトエタノール、および２００ｕＭのバナジン酸ナトリウムを含有。アッセイ用に新たに作成する。組換え４Ｅ−ＢＰ１（ａｋａ ＰＨＡＳ Ｉ）（Ｃａｌｂｉｏｃｈｅｍ、カタログ番号＃５１６６７５）。４Ｅ−ＢＰ１貯蔵液（１ｍｇ／ｍＬ）をリン酸化酵素アッセイ緩衝液で１２０倍に希釈して３０ｕＬ中０．２５μｇ／ウェル濃度にする。ＡＴＰ溶液はリン酸化酵素緩衝液の３３０ｕＭ ＡＴＰ貯蔵液で調製。Ｎｉ−キレートプレート（Ｐｉｅｒｃｅ、カタログ番号＃１５２４２）。抗体希釈緩衝液：ＴＢＳＴ、５％の脱脂乳を含有。ホスホ−４Ｅ−ＢＰ１（Ｔ３７／４６）抗体：ホスホ−４Ｅ−ＢＰ１（Ｔ３７／４６）抗体（Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、カタログ番号＃９４５９）を抗体希釈緩衝液で１：１０００に希釈したもの。ロバ抗ウサギＩｇＧ−ＨＲＰ結合体；抗ウサギＩｇＧ−ＨＲＰ結合体（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ、カタログ番号ＮＡ９３４）を抗体希釈緩衝液で１：１０，０００に希釈したもの。ＨＲＰ基質：化学発光試薬（Ｐｉｅｒｃｅ、カタログ番号＃３７０７４）
アッセイプロトコル：細胞ペレット２５ｇを細胞溶解緩衝液６０ｍＬに加えて均一にし、それから１２，０００ｒｐｍで３０分間遠心分離してＨｅＬａ細胞可溶化物を大量に調製した。透明な上清を新しい管に移し、等分して、急速凍結させ、使用するまで−８０℃で貯蔵した。タンパク質Ｇでコーティングした９６−ウェルプレートを溶解緩衝液で１回洗浄し、希釈ｍＴＯＲ抗体５０μＬを各ウェルに添加し、室温で３０から６０分間温置する。次いで、ＨｅＬａ細胞可溶化物５０μｇを各ウェルに溶解緩衝液５０μＬで添加し、冷蔵室中４℃でシェーカー上に２から３時間温置した。可溶化物を除去して、プレートを完全溶解緩衝液１００μＬで洗浄した（３回）。プレートをさらに高塩濃度緩衝液１００μＬで２回洗浄した。希釈した４Ｅ−ＢＰ１（基質）を各ウェルに３０μＬ添加する。化合物を様々な濃度で５μＬずつ各ウェルに添加した。薬の濃度は３０μＭから０．１μＭまで様々であった。最終ＤＭＳＯ濃度は１％であった。陽性対照ウェルにはＤＭＳＯのみを添加した。陰性対照ウェルについては、ＡＴＰ溶液を添加せず、代わりにリン酸化酵素緩衝液１５μＬを添加し、ＡＴＰを１５μＬ添加して反応を開始させ、陰性対照ウェル以外の残りのウェルには最終濃度１００μＭまでＡＴＰを添加した。反応は、室温で３０分間行なった。次いで、反応液４５μＬをＮｉ−キレートプレートに移し、４℃で一晩温置した。プレートを抗体希釈緩衝液で１回洗浄して、希釈ホスホ−４Ｅ−ＢＰ１抗体５０μＬを各ウェルに添加し、室温で１時間温置した。次いで、プレートをＴＢＳＴで洗浄して（４回）、希釈抗−ウサギ二次抗体５０μＬを各プレートに添加し、室温で１時間温置した。プレートをＴＢＳＴ１００μＬで洗浄した（４回）。各ウェルに、Ｐｉｅｒｃｅ Ｆｅｍｔｏ化学発光試薬５０μＬを添加して、ｖｉｃｔｏｒ装置で化学発光を測定した。
【００２９】
化合物の存在下で得られるアッセイシグナルと陽性対照および陰性対照のものとの比較により、ホスホ−４Ｅ−ＢＰ１リン酸化の阻害程度を化合物濃度範囲にわたって求めることができる。これらの阻害値を、Ｓ字形用量反応阻害曲線に当てはめて、ＩＣ５０値（即ち４Ｅ−ＢＰ１のリン酸化を５０％阻害する化合物濃度）を求める。
【００３０】
４Ｅ−ＢＰ１（Ｔ３７／４６）のリン酸化阻害を測定する、ｍＴＯＲ細胞に基づく機構アッセイ
ＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞を、完全培養培地９０ｕＬ中２×１０４細胞／ウェルで９６ウェルプレートに播種し、ＣＯ２インキュベーター中で一晩３７℃で培養する。ＣＯ２インキュベーター中３７℃で３時間、細胞を、様々な化合物で用量反応様式で処理してから、細胞可溶化物を作成して、４Ｅ−ＢＰ１のＴ３７／４６でのリン酸化阻害を測定した。細胞可溶化物を、４Ｅ−ＢＰ１抗体でコーティングした９６ウェルプレートに移し、４℃で一晩、ホスホ−４Ｅ−ＢＰ１（Ｔ３７／４６）を捕捉しながら温置する。ウェルを抗−ウサギホスホ−４Ｅ−ＢＰ１（Ｔ３７／４６）抗体および対応するヤギ抗−ウサギＩｇＧ−ＨＲＰ結合体とともに温置して、各ウェルのホスホ−４Ｅ−ＢＰ１の量をさらに測定する。各ウェルに存在するＨＲＰ量を化学発光法により測定する。この量は、各ウェルのホスホ−４Ｅ−ＢＰ１量に相当する。６点用量反応曲線を用いて、ＩＣ５０値を求めた。
【００３１】
本発明の化合物は以下のうち少なくとも１つを示した：Ｉ）ｍＴＯＲ活性の阻害についての生化学アッセイで求められたとおり、０．００１μＭから１１．００μＭの間のＩＣ５０値で、有利には１．００μＭ未満のＩＣ５０値で、より有利には０．１μＭ未満のＩＣ５０値で、さらにより有利には０．０１μＭ未満のＩＣ５０値で、免疫補足されたヒトｍＴＯＲによる４Ｅ−ＢＰ１リン酸化を阻害した；ＩＩ）ｍＴＯＲ細胞に基づく機構アッセイで、４０μＭ未満のＩＣ５０値で４Ｅ−ＢＰ１（Ｔ３７／４６）のリン酸化を阻害した。例えば、ｔｒａｎｓ−４−［４−アミノ−５−（７−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−イル）−イミダゾ［５，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル］シクロヘキサンカルボン酸は、ｍＴＯＲ細胞に基づく機構アッセイで、約１μＭのＩＣ５０値で４Ｅ−ＢＰ１（Ｔ３７／４６）のリン酸化を阻害した。
【００３２】
薬学的組成物
本発明は、医薬的に許容されるキャリアまたは賦形剤１種以上とともに、またはこれを含まずに、望ましい投与様式に合わせて配合した本発明の化合物塩を含む組成物を含む。
【００３３】
本発明の薬学的組成物は、活性成分として少なくとも１種の化合物、場合により医薬的に許容されるキャリア、および場合によりその他のアジュバントを含む。本発明の薬学的組成物は、経口、直腸、外用、および非経口（皮下、筋肉内、および静脈内を含む）投与に適した組成物を含むが、どのような場合にしろ最適な経路は、活性成分が投与されるこの個体（ｈｏｓｔ）ならびに投与される症状の性質および重篤度に依存する。薬学的組成物は、簡便なように、単位剤形で存在することができ、薬学の当分野で周知である方法のいずれかにより調製することができる。使用可能な薬学的キャリアは、例えば、固体、液体、または気体であり得る。固体キャリアの例として、ラクトース、白土、スクロース、タルク、ゼラチン、寒天、ペクチン、アラビアガム、ステアリン酸マグネシウム、およびステアリン酸が挙げられる。液体キャリアの例として、糖シロップ、ピーナッツ油、オリーブ油、および水が挙げられる。気体キャリアの例として、二酸化炭素および窒素が挙げられる。経口剤形の組成物の調製では、任意の便利な薬学的媒体を用いることができる。例えば、水、グリコール、油、アルコール、香味剤、保存料、着色剤などを用いて、懸濁液、エリキシル剤、および溶液などの経口液状製剤を形成することができる。また、デンプン、糖類、微結晶性セルロース、希釈剤、顆粒化剤、潤滑剤、結合剤、崩壊剤などのキャリアを用いて、粉剤、カプセル剤、および錠剤などの経口固形製剤を形成することができる。投与が簡単であることから、錠剤およびカプセル剤は好適な経口投薬単位であるが、これにより固形の薬学的キャリアが用いられる。標準的な水性または非水性技法で、場合により、錠剤をコーティングしてもよい。
【００３４】
本発明の組成物を含有する錠剤は、場合により１種以上の付属成分またはアジュバントとともに、圧縮または成型により調製することができる。圧縮錠剤は、適した装置で、自在に変化する形（粉末または顆粒など）の活性成分を、場合により結合剤、潤滑剤、不活性希釈剤、界面活性剤、または分散剤と混合して、圧縮することにより調製できる。成型錠剤は、適した装置で、不活性液状希釈剤で濡らした粉末化合物の混合物を成型することにより製造できる。各錠剤は、好ましくは活性成分を約０．０５ｍｇから約５ｇ含有し、各カシェ剤またはカプセル剤は、好ましくは活性成分を約０．０５ｍｇから約５ｇ含有する。例えば、ヒトへの経口投与用配合物は、適切で便利な量のキャリア材料と配合された活性剤を約０．５ｍｇから約５ｇ含有することができ、活性剤は、組成物全体の約５から約９５％まで様々な量が可能である。単位剤形は、一般に、活性成分を約１ｍｇから約２ｇ含有することができ、代表的には、２５ｍｇ、５０ｍｇ、１００ｍｇ、２００ｍｇ、３００ｍｇ、４００ｍｇ、５００ｍｇ、６００ｍｇ、８００ｍｇ、または１０００ｍｇ含有する。
【００３５】
非経口投与に適した本発明の薬学的組成物は、活性化合物を水に加えた液剤または懸濁液として調製することができる。適した界面活性剤として、例えば、ヒドロキシプロピルセルロースを挙げることができる。分散剤も、グリセロール、液体ポリエチレングリコール、およびこれらの油混合物で調製することができる。さらに、保存料を加えて微生物の有害な増殖を防ぐことができる。注射に適した本発明の薬学的組成物として、滅菌水溶液および分散剤が挙げられる。そのうえさらに、薬学的組成物は、このような滅菌注射液または分散剤の即時調製用滅菌粉末の形にすることもできる。全ての場合において、最終的な注射形態は、滅菌状態でなくてはならず、簡単にシリンジに入れられる（ｓｙｒｉｎｇａｂｉｌｉｔｙ）ぐらいの流動性がなくてはならない。薬学的組成物は、製造および貯蔵条件下で安定でなくてはならない。従って、薬学的組成物は、好ましくは、微生物（細菌および真菌など）の混入作用から保護されるべきである。キャリアは、溶媒または、例えば、水、ＥｔＯＨ、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコールおよび液体ポリエチレングリコール）、植物油、およびこれらの適した混合物を含有する分散媒体が可能である。
【００３６】
上記の薬学的配合物は、上記のキャリア成分の他に、適切なように、希釈剤、緩衝液、香味剤、結合剤、界面活性剤、増粘剤、潤滑剤、保存料（酸化防止剤を含む。）などのさらなるキャリア成分を１種以上含むことができる。そのうえさらに、その他のアジュバントを加えることにより投与対象者の血液と等張な配合物にすることができる。本発明の塩を含有する組成物は、粉末または液体濃縮物の形態で調製することもできる。
【００３７】
本発明は、本発明の化合物塩および少なくとも１種のさらなる活性剤（さらなる抗新生物薬、抗腫瘍薬、抗血管新生薬、または化学療法薬など）を含有する組成物を含む。
【００３８】
治療法
本発明は、癌をはじめとする過剰増殖性疾患の治療法を含み、この方法は、このような治療を必要としている患者に本発明の化合物塩を有効量で投与することを含む。過剰増殖性疾患として、卵巣癌、リンパ腫、乳癌、肺癌、非小細胞肺癌、腎臓癌、腎細胞癌、前立腺癌、血液の癌、肝臓癌、卵巣癌、甲状腺癌、子宮内膜癌、消化管の癌、腎細胞癌、マントル細胞リンパ腫、または子宮内膜癌が可能である。
【００３９】
このように、治療を必要としている患者に本発明の化合物塩を有効量で投与することを含む腫瘍の治療法が提供される。この実施形態の幾つかにおいて、癌はリンパ腫または卵巣癌である。
【００４０】
一般に、上記症状の治療には、１日あたり体重の約０．０１ｍｇ／ｋｇから約１５０ｍｇ／ｋｇの投与レベル、または１日あたり患者あたり約０．５ｍｇから約７ｇが有用となる。例えば、乳房、肺、腎臓、前立腺、血液、肝臓、卵巣、甲状腺、消化管の癌およびリンパ腫は、化合物を１日あたり体重１キログラムあたり約０．０１から５０ｍｇ、または１日あたり患者あたり約０．５ｍｇから約３．５ｇ投与することにより有効に治療され得る。実施形態の幾つかにおいて、１日あたり患者あたり約０．０５ｍｇから約２ｍｇ、または約０．１から約１ｍｇ／ｋｇを投与することができる。任意の特定の患者についての実際の用量は、様々な要因（年齢、体重、全体的な健康状態、性別、食事、投与時間、投与経路、排出速度、薬の組合せ、および治療を受けている特定疾患の重篤度など）に依存する。
【００４１】
（実施例）
化合物ｔｒａｎｓ−４−［４−アミノ−５−（７−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−イル）−イミダゾ［５，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル］−シクロヘキサンカルボン酸は既知であり、ＵＳ２００７／０１１２００５（この中の実施例２５８）に従って調製することができる。ｔｒａｎｓ−４−［４−アミノ−５−（７−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−イル）イミダゾ［５，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル］シクロヘキサンカルボン酸の塩（カルシウム塩、マグネシウム塩、カリウム塩、ナトリウム塩、Ｌ−アルギニン塩、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン塩、ピペラジン塩、およびトロメタミン塩を含む。）を調製した。
【実施例１】
【００４２】
ｔｒａｎｓ−４−［４−アミノ−５−（７−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−イル）イミダゾ［５，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル］シクロヘキサンカルボン酸トロメタミン塩。
【００４３】
【化４】
【００４４】
化合物ｔｒａｎｓ−４−［４−アミノ−５−（７−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−イル）−イミダゾ［５，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル］−シクロヘキサンカルボン酸は、当分野で既知のとおりに、例えば、ＵＳ２００７／０１１２００５（この中の実施例２５８）に従って調製することができる。この生成物（５．０１ｇ、１２．３ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ（７５．０ｍＬ）に懸濁させて加熱還流させた。１，３−プロパンジオール、２−アミノ−２−（ヒドロキシメチル）（１．７９ｇ、１４．８ｍｍｏｌ）を加えて、反応物を１時間加熱還流させた。懸濁液を室温まで冷却してからろ過した。固体をＭｅＯＨで洗い、それから減圧下５０℃で一晩乾燥させて、表題化合物を黄褐色固体として得た（４．５７ｇ、収率７０．２％）。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：δ１．６７（ｄｄｄｄ，Ｊ＝１２．８，１２．８，１２．８，２．８Ｈｚ，２Ｈ），１．８７（ｄｄｄｄ，Ｊ＝１３．２，１３．２，１３．２，３．２Ｈｚ，２Ｈ），２．１４−２．１７（ｍ，４Ｈ），２．３４（ｔｔ，Ｊ＝１２．４，２．８Ｈｚ，１Ｈ），３．４０（ｔｔ，Ｊ＝１２．４，３．２Ｈｚ，１Ｈ），３．６５（ｓ，６Ｈ），４．０１（ｓ，３Ｈ），６．７５（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），６．７５（ｓ，１Ｈ），７．０４（ｄｄ，Ｊ＝７．６，７．６Ｈｚ，１Ｈ），７．２３（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），７．８８（ｓ，１Ｈ）。１３Ｃ ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）：δ２９．１，２９．６，３４．３，４３．９，５５．３，５９．０，６１．３，１０２．３，１０２．５，１１０．９，１１３．１，１２０．１，１２６．８，１２７．２，１３０．０，１３２．１，１４６．３，１４６．７，１７８．６。ＬＣＭＳ（ＥＳＩ＋）：ｍ／ｚ４０７（ＭＨ＋）。元素分析：Ｃ２５Ｈ３３Ｎ７Ｏ６として計算：Ｃ，５６．９２％；Ｈ，６．３０％；Ｎ，１８．５８％；Ｏ，１８．２０％。実測：Ｃ，５６．２３％；Ｈ，６．３１％；Ｎ，１８．３３％；Ｏ，１８．６３％。
【００４５】
トロメタミン塩の特性決定データをまとめると以下のとおり：
（ａ）Ｘ線粉末回折分析（ＸＲＰＤ）［Ｉｎｅｌ ＸＲＧ−３０００ｗ／ＣＰＳ検出器ｗ／２θ範囲１２０°］は、この塩が結晶形であることを示した（図１参照）；
（ｂ）示差走査熱量測定（ＤＳＣ）［ＴＡ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ ２９２０またはＱ１０００］分析は２０２から２１１℃の溶融吸熱範囲とこれに続く分解を示した；
（ｃ）熱重量（ＴＧ）分析［ＴＡ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ ２０５０または２９５０］は、１５０℃での塩の０．３から１％重量減少を示した；
（ｄ）熱重量分析フーリエ変換分光（ＴＧＩＲ）分析は、水分に相当するわずかな重量減少（＜１％）を示した；
（ｅ）蒸気収着分析（ＤＶＳ）［ＶＴＩ ＳＧＡ−１００分析器］は、塩が、９０から９５％ＲＨで２から４％という低吸湿性を示すことを示した；
（ｆ）光学顕微鏡（ＯＭ）［Ｌｅｉｃａ ＤＭ ＬＰ］分析は、塩の大部分が微小ロッド状で存在し交差偏光顕微鏡により複屈折が見られることを示した；および
（ｇ）塩の溶解性は水に対して約６ｍｇ／ｍＬであった。
（ｈ）安定性データ：４０℃および７５％ＲＨで３０日後、明らかな分解は観測されなかった。
【００４６】
トロメタミン塩の多形性スクリーニングは、１０種の異なる溶媒のスラリーとして周辺温度で７日間置いた後の、トロメタミン塩のサンプルのＸＲＰＤパターンは、出発物質（表Ｉ）のものと一致し、実質的に図１と同様であったことを示した。そのうえさらに、トロメタミン塩の形はトロメタミン塩出発物質をＩＰＡ中で２４時間還流させた後も一定したままであった。
【００４７】
【表１】
【実施例２】
【００４８】
ｔｒａｎｓ−４−［４−アミノ−５−（７−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−イル）イミダゾ［５，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル］シクロヘキサンカルボン酸カルシウム塩。
【００４９】
ｔｒａｎｓ−４−［４−アミノ−５−（７−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−イル）−イミダゾ［５，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル］−シクロヘキサンカルボン酸ナトリウム（２０１ｍｇ、０．４６９ｍｍｏｌ）を水（２．００ｍＬ）に溶解して加熱還流させた。二塩化カルシウム（５１．８ｍｇ、０．４６７ｍｍｏｌ）を加えると直ちに固体が析出した。反応物を室温に冷却してろ過した。固体を水で洗い、６０℃で減圧乾燥して、表題化合物を黄褐色固体として得た（１８０ｍｇ、収率９０％）。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）：δ１．６７（ｄｄｄｄ，Ｊ＝１２．８，１２．８，１２．８，２．８Ｈｚ，２Ｈ），１．８７（ｄｄｄｄ，Ｊ＝１３．２，１３．２，１３．２，３．２Ｈｚ，２Ｈ），２．１４−２．１７（ｍ，４Ｈ），２．３４（ｔｔ，Ｊ＝１２．４，２．８Ｈｚ，１Ｈ），３．４０（ｔｔ，Ｊ＝１２．４，３．２Ｈｚ，１Ｈ），３．６５（ｓ，６Ｈ），４．０１（ｓ，３Ｈ），６．７５（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），６．７５（ｓ，１Ｈ），７．０４（ｄｄ，Ｊ＝７．６，７．６Ｈｚ，１Ｈ），７．２３（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），７．８８（ｓ，１Ｈ）。
【００５０】
カルシウム塩の特性決定データをまとめると以下のとおり：（ａ）Ｘ線粉末回折分析（ＸＲＰＤ）は、この塩が結晶性であることを示した（図２参照）；（ｂ）示差走査熱量測定（ＤＳＣ）分析は、１４５．５℃および１７８．２℃での広い吸熱を示した；（ｃ）蒸気収着分析（ＤＶＳ）は、塩が、０から９５％ＲＨで３５％重量増加の吸湿性を示すことを示した；および（ｄ）溶解性は水に対して１ｍｇ／ｍＬ未満であった。
【実施例３】
【００５１】
ｔｒａｎｓ−４−［４−アミノ−５−（７−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−イル）イミダゾ［５，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル］シクロヘキサンカルボン酸ナトリウム塩。
【００５２】
ｔｒａｎｓ−４−［４−アミノ−５−（７−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−イル）−イミダゾ［５，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル］−シクロヘキサンカルボン酸（１０ｇ、２４．６ｍｍｏｌ）を脱イオン水（１００ｍＬ）に懸濁させた。窒素下撹拌しながら、ＮａＯＨ水溶液（５０％ＮａＯＨ（１．９７ｇ、２４．６ｍｍｏｌ）と脱イオン水（２０ｍＬ）で調製）を１０分かけて加えた。ｐＨ約８で透明な褐色溶液が形成された。チャコール（０．５ｇ、５重量％）を加えた。混合物を５分間撹拌し、穏やかに吸引しながらガラスのマイクロファイバー（ＧＦ）と濾紙（二重）のフィルターでろ過した。フラスコとロートを脱イオン水少量ですすいだ。褐色のろ液を３０から３５℃で減圧濃縮した。得られる粘性固体を３０分間４０から４５℃（水浴）で減圧下に置き、実質的に乾燥した残渣を得て、これを乾燥皿に移した。固体を真空オーブン中５０℃で５時間超乾燥させ、表題化合物を黄褐色固体として得た（１０．１ｇ、収率９６％）。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）：δ１．４３（ｄｄｄｄ，Ｊ＝１２．６，１２．８，１２．８，２．４Ｈｚ，２Ｈ），１．６８（ｄｄｄｄ，Ｊ＝１２．４，１２．４，１２．４，２．８Ｈｚ，２Ｈ），１．９９−２．０２（ｍ，５Ｈ），３．１２（ｔｔ，Ｊ＝１２．０，２．８Ｈｚ，１Ｈ），３．９２（ｓ，３Ｈ），６．６１（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），６．６７（ｓ，１Ｈ），６．８８（ｄｄ，Ｊ＝７．６，７．６Ｈｚ，１Ｈ），７．１２（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．７２（ｓ，１Ｈ）。元素分析：Ｃ２１Ｈ２１Ｎ６Ｏ３Ｎａ・Ｈ２Ｏとして計算：Ｃ，５６．５０％；Ｈ，５．１９％；Ｎ，１８．８２％；Ｎａ，５．１５％。実測：Ｃ，５６．４４％；Ｈ，４．７６％；Ｎ，１８．５１％；Ｎａ，４．５５％。
【００５３】
ナトリウム塩の特性決定データをまとめると以下のとおり：（ａ）Ｘ線粉末回折分析（ＸＲＰＤ）は、この塩の大部分が非晶質であることを示した；（ｂ）示差走査熱量測定（ＤＳＣ）分析は、９８．３℃で広い吸熱、ならびに２２４．１℃および２５６．８℃で発熱を示した；（ｃ）熱重量（ＴＧ）分析は、２５０℃で塩の３．８％重量損失を示した；（ｄ）蒸気収着分析（ＤＶＳ）は、塩が、０から９５％ＲＨで３７％重量増加の吸湿性を示すことを示した；および（ｅ）溶解性は水に対して３０ｍｇ／ｍＬ超であった。
【実施例４】
【００５４】
ｔｒａｎｓ−４−［４−アミノ−５−（７−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−イル）イミダゾ［５，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル］シクロヘキサンカルボン酸Ｌ−アルギニン塩。
【００５５】
ｔｒａｎｓ−４−［４−アミノ−５−（７−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−イル）−イミダゾ［５，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル］シクロヘキサンカルボン酸（１１．１ｇ、２７．４ｍｍｏｌ）およびＬ−アルギニン（５．７２ｇ、３２．９ｍｍｏｌ）をＨ２Ｏ（７８．０ｍＬ）およびＥｔＯＨ（７８．０ｍＬ）に希釈した。懸濁液を加熱還流して透明な溶液とし、それからゆっくりと室温に冷却した。１６時間後、懸濁液を氷浴で３０分間冷却してろ過した。オフホワイト固体を８０℃で２日間減圧乾燥し、表題化合物を得た（１２．９ｇ、収率８１％）。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：δ１．５９−１．７８（ｍ，３Ｈ），１．７９−１．９０（ｍ，３Ｈ），２．１３（ｂｒｄ，Ｊ＝１０．８Ｈｚ，４Ｈ），２．３５（ｔｔ，Ｊ＝１２．４，３．６Ｈｚ，１Ｈ），３．２０−３．４２（ｍ，１Ｈ），３．３７（ｔｔ，Ｊ＝１２．０，２．８Ｈｚ，１Ｈ），３．６６（ｂｒｓ，４Ｈ），３．９８（ｓ，３Ｈ），６．７２（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），６．７２（ｓ，１Ｈ），７．０１（ｄｄ，Ｊ＝８．０，８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．２２（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），７．８４（ｓ，１Ｈ）。Ｘ線粉末回折分析（ＸＲＰＤ）は、この塩が非晶質であることを示した。
【技術分野】
【０００１】
本出願は、ＵＳ Ａｐｐｌ．Ｎｏ．６１／０７００６２（２００８年３月１９日）の優先権を主張し、この内容は全て参照として本明細書中に援用される。
【０００２】
本発明は、哺乳類のラパマイシン標的タンパク質（ｍＴＯＲ）リン酸化酵素（ＦＲＡＰ、ＲＡＦＴ、ＲＡＰＴ、ＳＥＰとしても既知）の阻害剤である二環式化合物に関する。詳細には、本発明は、癌の治療に有用なｍＴＯＲ阻害剤となる縮合二環式化合物に関する。
【背景技術】
【０００３】
高いレベルでのｍＴＯＲ活性調節不全は、多様なヒト癌、ならびに結節性硬化症、ＰＴＥＮ関連過誤腫症候群、およびポイツ・ジェガース症候群をはじめとする幾つかの過誤腫症候群に関連していることが示されてきた。ラパマイシン類似体は癌に対するｍＴＯＲリン酸化酵素阻害剤として臨床開発されているものの、ＣＣＩ−７７９を用いた臨床成績は、乳癌および腎臓癌患者でやっと中程度である。これはおそらくラパマイシンがｒａｐｔｏｒ−ｍＴＯＲ複合体（ｍＴＯＲＣ１）を通じてｍＴＯＲ機能を部分的に阻害するからである。乳癌患者の２／３および腎臓癌患者の１／２でラパマイシン治療が効かないこともわかっている。細胞生存の調整とラパマイシン非依存的様式でアクチン細胞骨格系の調整に主要な役割を果たすＰＫＣαの調節とに重要であるＡＫＴ（Ｓ４７３）のリン酸化に関与するｒｉｃｔｏｒ−ｍＴＯＲ複合体（ｍＴＯＲＣ２）が最近発見されたことからも、ｍＴＯＲのこうした活性の阻害がより広範囲な抗腫瘍活性およびより高い効力に重要である。従って、ｍＴＯＲＣ１およびｍＴＯＲＣ２を阻害できる、ｍＴＯＲリン酸化酵素の直接の阻害剤となる新規化合物の開発が望まれる。
【０００４】
細胞生存の調整とアクチン細胞骨格系の調整に主要な役割を果たすＰＫＣαの調節とに重要であるＡＫＴの（Ｓ４７３での）リン酸化においてｍＴＯＲがラパマイシン非依存的に機能する（ｍＴＯＲ２により）という最近の発見から、ｍＴＯＲ機能のラパマイシンによる阻害は部分的であると思われる。従って、ｍＴＯＲＣ１とｍＴＯＲＣ２の両方の機能を完全に阻害できる直接のｍＴＯＲリン酸化酵素阻害剤の発見がより広範囲な抗腫瘍活性およびより高い効力のために必要である。本発明者らは、今回、多様な癌（乳房、肺、腎臓、前立腺、血液、肝臓、卵巣、甲状腺、消化管、およびリンパ腫など）およびその他の適応症（リウマチ様関節炎、過誤腫症候群、移植片拒絶、ＩＢＤ、多発性硬化症、および免疫抑制など）の治療に用いることができる、直接のｍＴＯＲリン酸化酵素阻害剤の発見について記載する。
【０００５】
ＮＳＣＬＣの治療用ＥＧＦＲリン酸化酵素阻害剤であるＴａｒｃｅｖａの最近の成功、およびＣＭＬ治療用Ｇｌｅｅｖｅｃでの以前の成功は、癌の有効治療のための選択的リン酸化酵素阻害剤の開発が可能であることを示唆している。リン酸化酵素阻害剤をはじめとする抗癌剤が数種類存在するものの、抗癌剤のさらなる改善が引き続き必要とされており、選択性、効力が向上した、または毒性もしくは副作用が減少した新規化合物の開発が望まれる。つまり、癌患者の治療を目的として、ｍＴＯＲ阻害を示す化合物を開発することが望ましい。さらに、そうした化合物が他のリン酸化酵素（例えば、ＰＩ３Ｋ、Ｓｒｃ、ＫＤＲなど）でも活性で、乳癌、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、腎細胞癌、マントル細胞リンパ腫、子宮内膜癌、または他の過誤腫症候群にも効果を示してもよい。
【０００６】
新規塩形態に関しては、これらが医薬製造、配合、貯蔵、および使用に関して好ましい特性を与えることが望ましい。例えば、塩は、その他既知の基準のなかでも、好ましい溶解性、吸湿性、安定性、一様性、再現性、純度を示すことが望ましい。
【０００７】
ＵＳ２００７／０１１２００５は、とりわけ、ｍＴＯＲ阻害化合物を開示している。本発明は、ｍＴＯＲ阻害剤化合物の特定の塩および形態、これらの調製、配合、および使用に関する。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】米国特許出願公開第２００７／０１１２００５号明細書
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００９】
幾つかの態様において、本発明は、式（Ｉ）：
【００１０】
【化１】
で表される化合物の塩および多形を提供し、以下にこの詳細を記載する。塩は、ＵＳ２００７／０１１２００５に記載される化合物から調製することができる。ＵＳ２００７／０１１２００５は、化合物の調製、生物活性、および使用についても記載している。ＵＳ２００７／０１１２００５はこの全体が本明細書中に参照として援用される。本発明は、塩、多形、これらの調製、配合、および疾患治療への使用を含む。
【図面の簡単な説明】
【００１１】
【図１】実施例１のトロメタミン塩の形のＸＲＰＤパターン。
【図２】実施例２のカルシウム塩の形のＸＲＰＤパターン。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
幾つかの態様において、本発明は、式（Ｉ）で表される化合物の医薬的に許容される塩を提供する：
【００１３】
【化２】
式中：
Ｘ１およびＸ２は、それぞれ独立してＮまたはＣ−（Ｅ１）ａａであり；
Ｘ５はＮ、Ｃ−（Ｅ１）ａａ、またはＮ−（Ｅ１）ａａであり；
Ｘ３、Ｘ４、Ｘ６、およびＸ７は、それぞれ独立してＮまたはＣであり；
ただし、Ｘ３、Ｘ４、Ｘ５、Ｘ６、およびＸ７の少なくとも１つは、独立してＮまたはＮ−（Ｅ１）ａａであり；
Ｒ３は、Ｃ０−１０アルキル、シクロＣ３−１０アルキル、アミノメチルシクロＣ３−１０アルキル、ビシクロＣ５−１０アルキル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、ヘテロアラルキル、ヘテロシクリル、またはヘテロビシクロＣ５−１０アルキルであり、このいずれもが、１つまたは複数の独立したＧ１１置換基で場合により置換され；
Ｑ１は、−Ａ（Ｒ１）ｍＢ（Ｗ）ｎまたは−Ｂ（Ｇ１１）ｎＡ（Ｙ）ｍであり；
ＡおよびＢは、それぞれ、五員および六員の芳香族もしくはヘテロ芳香族環であるか、一緒に縮合して５−ベンゾ［ｂ］フリルおよび３−インドリルを除く九員のヘテロ芳香族系を形成するが、Ｘ１およびＸ５がＣＨであり、Ｘ３、Ｘ６、およびＸ７がＣであり、Ｘ２およびＸ４がＮである場合は、２−インドリル、２−ベンゾオキサゾール、２−ベンゾチアゾール、２−ベンゾイミダゾリル、４−アミノピロロピリミジン−５−イル、４−アミノピロロピリミジン−６−イル、および７−デアザ−７−アデノシニル誘導体を除き；
またはＱ１は−Ａ（Ｒ１）ｍＡ（Ｙ）ｍであり、式中それぞれのＡは同一であるか異なっていて、五員の芳香族もしくはヘテロ芳香族環であるか、この２つは一緒に縮合して八員のヘテロ芳香族系を形成し；
Ｒ１は、独立して、水素、−Ｎ（Ｃ０−８アルキル）（Ｃ０−８アルキル）、ヒドロキシル、ハロゲン、オキソ、アリール（１つ以上のＲ３１基で場合により置換される。）、ヘタリール（１つ以上のＲ３１基で場合により置換される。）、Ｃ１−６アルキル、−Ｃ０−８アルキルＣ３−８シクロアルキル、−Ｃ０−８アルキル−ＮＲ３１１Ｓ（Ｏ）０−２Ｒ３２１、−Ｃ０−８アルキル−ＮＲ３１１Ｓ（Ｏ）０−２ＮＲ３２１Ｒ３３１、−Ｃ０−８アルキル−Ｓ（Ｏ）０−２ＮＲ３１１Ｒ３２１、−Ｃ０−８アルキル−ＮＲ３１１ＣＯＲ３２１、−Ｃ０−８アルキル−ＮＲ３１１ＣＯ２Ｒ３２１、−Ｃ０−８アルキル−ＮＲ３１１ＣＯＮＲ３２１Ｒ３３１、−Ｃ０−８アルキル−ＣＯＮＲ３１１Ｒ３２１、−Ｃ０−８アルキル−ＣＯＮ（Ｒ３１１）Ｓ（Ｏ）０−２Ｒ３２１、−Ｃ０−８アルキル−ＣＯ２Ｒ３１１、−Ｃ０−８アルキル−Ｓ（Ｏ）０−２Ｒ３１１、−Ｃ０−８アルキル−Ｏ−Ｃ１−８アルキル、−Ｃ０−８アルキル−Ｏ−Ｃ０−８アルキルＣ３−８シクロアルキル、−Ｃ０−８アルキル−Ｏ−Ｃ０−８アルキルヘテロシクリル、−Ｃ０−８アルキル−Ｏ−Ｃ０−８アルキルアリール、−Ｃ０−８アルキルアリール、−Ｃ０−８アルキルヘタリール、−Ｃ０−８アルキルヘテロシクリル、−Ｃ０−８アルキル−Ｏ−Ｃ０−８アルキルヘタリール、−Ｃ０−８アルキル−Ｓ−Ｃ０−８アルキル、−Ｃ０−８アルキル−Ｓ−Ｃ０−８アルキルＣ３−８シクロアルキル、−Ｃ０−８アルキル−Ｓ−Ｃ０−８アルキルヘテロシクリル、−Ｃ０−８アルキル−Ｓ−Ｃ０−８アルキルアリール、−Ｃ０−８アルキル−Ｓ−Ｃ０−８アルキルヘタリール、−Ｃ０−８アルキル−Ｎ（Ｒ３１１）−Ｃ０−８アルキル、−Ｃ０−８アルキル−Ｎ（Ｒ３１１）−Ｃ０−８アルキルＣ３−８シクロアルキル、−Ｃ０−８アルキル−Ｎ（Ｒ３１１）−Ｃ０−８アルキルヘテロシクリル、−Ｃ０−８アルキル−Ｎ（Ｒ３１１）−Ｃ０−８アルキルアリール、−Ｃ０−８アルキル−Ｎ（Ｒ３１１）−Ｃ０−８アルキルヘタリール、−Ｃ０−８アルキル−ＮＲ３１１Ｒ３２１、−Ｃ２−８アルケニル、−Ｃ２−８アルキニル、ＮＯ２、ＣＮ、ＣＦ３、ＯＣＦ３、ＯＣＨＦ２であるが；ただしＱ１は、Ｎ−メチル−２−インドリル、Ｎ−（フェニルスルホニル）−２−インドリル、またはＮ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルではなく；
Ｗは、独立して、水素、−Ｎ（Ｃ０−８アルキル）（Ｃ０−８アルキル）、ヒドロキシル、ハロゲン、オキソ、アリール（１つ以上のＲ３１基で場合により置換される。）、ヘタリール（１つ以上のＲ３１基で場合により置換される。）、Ｃ１−６アルキル、−Ｃ０−８アルキルＣ３−８シクロアルキル、−Ｃ０−８アルキル−ＮＲ３１２Ｓ（Ｏ）０−２Ｒ３２２、−Ｃ０−８アルキル−ＮＲ３１１Ｓ（Ｏ）０−２ＮＲ３２１Ｒ３３１、−Ｃ０−８アルキル−ＮＲ３１１ＣＯ２Ｒ３２１、−Ｃ０−８アルキル−ＣＯＮ（Ｒ３１１）Ｓ（Ｏ）０−２Ｒ３２１、−Ｃ０−８アルキル−Ｓ（Ｏ）０−２ＮＲ３１２Ｒ３２２、−Ｃ０−８アルキル−ＮＲ３１２ＣＯＲ３２２、−Ｃ０−８アルキル−ＮＲ３１２ＣＯＮＲ３２２Ｒ３３２、−Ｃ０−８アルキル−ＣＯＮＲ３１２Ｒ３２２、−Ｃ０−８アルキル−ＣＯ２Ｒ３１２、−Ｃ０−８アルキルＳ（Ｏ）０−２Ｒ３１２、−Ｃ０−８アルキル−Ｏ−Ｃ１−８アルキル、−Ｃ０−８アルキル−Ｏ−Ｃ０−８アルキルシクリル、−Ｃ０−８アルキル−Ｏ−Ｃ０−８アルキルヘテロシクロアルキル、−Ｃ０−８アルキル−Ｏ−Ｃ０−８アルキルアリール、−Ｃ０−８アルキルアリール、−Ｃ０−８アルキルヘタリール、−Ｃ０−８アルキルヘテロシクリル、−Ｏアリール、−Ｃ０−８アルキル−Ｏ−Ｃ０−８アルキルヘタリール、−Ｃ０−８アルキル−Ｓ−Ｃ０−８アルキル、−Ｃ０−８アルキル−Ｓ−Ｃ０−８アルキルＣ３−８シクロアルキル、−Ｃ０−８アルキル−Ｓ−Ｃ０−８アルキルヘテロシクロアルキル、−Ｃ０−８アルキル−Ｓ−Ｃ０−８アルキルアリール、−Ｃ０−８アルキル−Ｓ−Ｃ０−８アルキルヘタリール、−Ｃ０−８アルキル−Ｎ（Ｒ３１２）−Ｃ０−８アルキル、−Ｃ０−８アルキル−Ｎ（Ｒ３１２）−Ｃ０−８アルキルＣ３−８シクロアルキル、−Ｃ０−８アルキル−Ｎ（Ｒ３１２）−Ｃ０−８アルキルヘテロシクロアルキル、−Ｃ０−８アルキル−Ｎ（Ｒ３１２）−Ｃ０−８アルキルアリール、−Ｃ０−８アルキル−Ｎ（Ｒ３１２）−Ｃ０−８アルキルヘタリール、Ｃ０−８アルキル−ＮＲ３１２Ｒ３２２、−Ｃ２−８アルケニル、−Ｃ２−８アルキニル、ＮＯ２、ＣＮ、ＣＦ３、ＯＣＦ３、ＯＣＨＦ２であるが、ただしＱ１は４−ベンジルオキシ−２−インドリルではなく；
Ｙは、独立して、水素、−Ｎ（Ｃ０−８アルキル）（Ｃ０−８アルキル）、ヒドロキシル、ハロゲン、オキソ、アリール（１つ以上のＲ３１基で場合により置換される。）、ヘタリール（１つ以上のＲ３１基で場合により置換される。）、Ｃ０−６アルキル、−Ｃ０−８アルキルＣ３−８シクロアルキル、−Ｃ０−８アルキル−ＮＲ３１１Ｓ（Ｏ）０−２Ｒ３２１、−Ｃ０−８アルキル−ＮＲ３１１Ｓ（Ｏ）０−２ＮＲ３２１Ｒ３３１、−Ｃ０−８アルキル−ＮＲ３１１ＣＯ２Ｒ３２１、−Ｃ０−８アルキル−ＣＯＮ（Ｒ３１１）Ｓ（Ｏ）０−２Ｒ３２１、−Ｃ０−８アルキル−Ｓ（Ｏ）０−２ＮＲ３１１Ｒ３２１、−Ｃ０−８アルキル−ＮＲ３１１ＣＯＲ３２１、−Ｃ０−８アルキル−ＮＲ３１１ＣＯＮＲ３２１Ｒ３３１、−Ｃ０−８アルキル−ＣＯＮＲ３１１Ｒ３２１、−Ｃ０−８アルキル−ＣＯ２Ｒ３１１、−Ｃ０−８アルキルＳ（Ｏ）０−２Ｒ３１１、−Ｃ０−８アルキル−Ｏ−Ｃ１−８アルキル、−Ｃ０−８アルキル−Ｏ−Ｃ０−８アルキルＣ３−８シクロアルキル、−Ｃ０−８アルキル−Ｏ−Ｃ０−８アルキルヘテロシクロアルキル、−Ｃ０−８アルキル−Ｏ−Ｃ０−８アルキルアリール、−Ｃ０−８アルキルアリール、−Ｃ０−８アルキルヘタリール、−Ｃ０−８アルキルヘテロシクリル、−Ｃ０−８アルキル−Ｏ−Ｃ０−８アルキルヘタリール、−Ｃ０−８アルキル−Ｓ−Ｃ０−８アルキル、−Ｃ０−８アルキル−Ｓ−Ｃ０−８アルキルＣ３−８シクロアルキル、−Ｃ０−８アルキル−Ｓ−Ｃ０−８アルキルヘテロシクロアルキル、−Ｃ０−８アルキル−Ｓ−Ｃ０−８アルキルアリール、−Ｃ０−８アルキル−Ｓ−Ｃ０−８アルキルヘタリール、−Ｃ０−８アルキル−Ｎ（Ｒ３１１）−Ｃ０−８アルキル、−Ｃ０−８アルキル−Ｎ（Ｒ３１１）−Ｃ０−８アルキルＣ３−８シクロアルキル、−Ｃ０−８アルキル−Ｎ（Ｒ３１１）−Ｃ０−８アルキルヘテロシクロアルキル、−Ｃ０−８アルキル−Ｎ（Ｒ３１１）−Ｃ０−８アルキルアリール、−Ｃ０−８アルキル−Ｎ（Ｒ３１１）−Ｃ０−８アルキルヘタリール、−Ｃ０−８アルキル−ＮＲ３１１Ｒ３２１、−Ｃ２−８アルケニル、−Ｃ２−８アルキニル、ＮＯ２、ＣＮ、ＣＦ３、ＯＣＦ３、ＯＣＨＦ２であるが、ただしＱ１は２−カルボキシ−５−ベンゾ［ｂ］チオフェニルではなく；
Ｇ１１は、ハロ、オキソ、−ＣＦ３、−ＯＣＦ３、−ＯＲ３１２、−ＮＲ３１２Ｒ３２２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ３１２、−Ｃ（Ｏ）Ｃ３−８シクロアルキル、−ＣＯ２Ｃ３−８シクロアルキル、−ＣＯ２Ｒ３１２、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ３１２Ｒ３２２、−ＮＯ２、−ＣＮ、−Ｓ（Ｏ）０−２Ｒ３１２、−ＳＯ２ＮＲ３１２Ｒ３２２、ＮＲ３１２（Ｃ＝Ｏ）Ｒ３２２、ＮＲ３１２Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ３２２、ＮＲ３１２Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ３２２Ｒ３３２、ＮＲ３１２Ｓ（Ｏ）０−２Ｒ３２２、−Ｃ（＝Ｓ）ＯＲ３１２、−Ｃ（＝Ｏ）ＳＲ３１２、−ＮＲ３１２Ｃ（＝ＮＲ３２２）ＮＲ３３２Ｒ３４１、−ＮＲ３１２Ｃ（＝ＮＲ３２２）ＯＲ３３２、−ＮＲ３１２Ｃ（＝ＮＲ３２２）ＳＲ３３２、−ＯＣ（＝Ｏ）ＯＲ３１２、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＲ３１２Ｒ３２２、−ＯＣ（＝Ｏ）ＳＲ３１２、−ＳＣ（＝Ｏ）ＯＲ３１２、−ＳＣ（＝Ｏ）ＮＲ３１２Ｒ３２２、−Ｐ（Ｏ）ＯＲ３１２ＯＲ３２２、Ｃ１−１０アルキリデン、Ｃ０−１０アルキル、Ｃ２−１０アルケニル、Ｃ２−１０アルキニル、−Ｃ１−１０アルコキシＣ１−１０アルキル、−Ｃ１−１０アルコキシＣ２−１０アルケニル、−Ｃ１−１０アルコキシＣ２−１０アルキニル、−Ｃ１−１０アルキルチオＣ１−１０アルキル、−Ｃ１−１０アルキルチオＣ２−１０アルケニル、−Ｃ１−１０アルキルチオＣ２−１０アルキニル、シクロＣ３−８アルキル、シクロＣ３−８アルケニル、−シクロＣ３−８アルキルＣ１−１０アルキル、−シクロＣ３−８アルケニルＣ１−１０アルキル、−シクロＣ３−８アルキルＣ２−１０アルケニル、−シクロＣ３−８アルケニルＣ２−１０アルケニル、−シクロＣ３−８アルキルＣ２−１０アルキニル、−シクロＣ３−８アルケニルＣ２−１０アルキニル、−ヘテロシクリル−Ｃ０−１０アルキル、−ヘテロシクリル−Ｃ２−１０アルケニル、または−ヘテロシクリル−Ｃ２−１０アルキニルであり、このいずれもが、１つ以上の独立したハロ、オキソ、−ＣＦ３、−ＯＣＦ３、−ＯＲ３１３、−ＮＲ３１３Ｒ３２３、−Ｃ（Ｏ）Ｒ３１３、−ＣＯ２Ｒ３１３、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ３１３Ｒ３２３、−ＮＯ２、−ＣＮ、−Ｓ（Ｏ）０−２Ｒ３１３、−ＳＯ２ＮＲ３１３Ｒ３２３、−ＮＲ３１３Ｃ（＝Ｏ）Ｒ３２３、−ＮＲ３１３Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ３２３、−ＮＲ３１３Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ３２３Ｒ３３３、−ＮＲ３１３Ｓ（Ｏ）０−２Ｒ３２３、−Ｃ（＝Ｓ）ＯＲ３１３、−Ｃ（＝Ｏ）ＳＲ３１３、−ＮＲ３１３Ｃ（＝ＮＲ３２３）ＮＲ３３３Ｒ３４２、−ＮＲ３１３Ｃ（＝ＮＲ３２３）ＯＲ３３３、−ＮＲ３１３Ｃ（＝ＮＲ３２３）ＳＲ３３３、−ＯＣ（＝Ｏ）ＯＲ３３３、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＲ３１３Ｒ３２３、−ＯＣ（＝Ｏ）ＳＲ３１３、−ＳＣ（＝Ｏ）ＯＲ３１３、−Ｐ（Ｏ）ＯＲ３１３ＯＲ３２３、または−ＳＣ（＝Ｏ）ＮＲ３１３Ｒ３２３置換基で場合により置換され；
またはＧ１１は、アリール−Ｃ０−１０アルキル、アリール−Ｃ２−１０アルケニル、アリール−Ｃ２−１０アルキニル、ヘタリール−Ｃ０−１０アルキル、ヘタリール−Ｃ２−１０アルケニル、またはヘタリール−Ｃ２−１０アルキニルであり、これらの結合点は、記載されるとおり左または右のいずれかからであり、このいずれもが、１つ以上の独立したハロ、−ＣＦ３、−ＯＣＦ３、−ＯＲ３１３、−ＮＲ３１３Ｒ３２３、−Ｃ（Ｏ）Ｒ３１３、−ＣＯ２Ｒ３１３、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ３１３Ｒ３２３、−ＮＯ２、−ＣＮ、−Ｓ（Ｏ）０−２Ｒ３１３、−ＳＯ２ＮＲ３１３Ｒ３２３、−ＮＲ３１３Ｃ（＝Ｏ）Ｒ３２３、−ＮＲ３１３Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ３２３、−ＮＲ３１３Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ３２３Ｒ３３３、−ＮＲ３１３Ｓ（Ｏ）０−２Ｒ３２３、−Ｃ（＝Ｓ）ＯＲ３１３、−Ｃ（Ｏ）ＳＲ３１３、−ＮＲ３２３Ｃ（＝ＮＲ３１３）ＮＲ３３３Ｒ３４２、−ＮＲ３１３Ｃ（＝ＮＲ３２３）ＯＲ３３３、−ＮＲ３１３Ｃ（＝ＮＲ３２３）ＳＲ３３３、−ＯＣ（＝Ｏ）ＯＲ３１３、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＲ３１３Ｒ３２３、−ＯＣ（＝Ｏ）ＳＲ３１３、−ＳＣ（＝Ｏ）ＯＲ３１３、−Ｐ（Ｏ）ＯＲ３１３ＯＲ３２３、または−ＳＣ（＝Ｏ）ＮＲ３１３Ｒ３２３置換基で場合により置換されるが、ただしＲ３が４−ピペリジニルの場合Ｇ１１はＮ−ＣＨ２ＣＯ２Ｈではなく；
各例において、Ｒ３１、Ｒ３２、Ｒ３３、Ｒ３１１、Ｒ３２１、Ｒ３３１、Ｒ３１２、Ｒ３２２、Ｒ３３２、Ｒ３４１、Ｒ３１３、Ｒ３２３、Ｒ３３３、およびＲ３４２は、独立して：アリール、ヘテロシクリル、もしくはヘタリール置換基で場合により置換されるＣ０−８アルキル、または１から６個の独立したハロ、−ＣＯＮ（Ｃ０−８アルキル）（Ｃ０−８アルキル）、−ＣＯ（Ｃ０−８アルキル）、−ＯＣ０−８アルキル、−Ｏアリール、−Ｏヘタリール、−Ｏヘテロシクリル、−Ｓ（Ｏ）０−２アリール、−Ｓ（Ｏ）０−２ヘタリール、−Ｓ（Ｏ）０−２ヘテロシクリル、−Ｓ（Ｏ）０−２Ｃ０−８アルキル、−Ｎ（Ｃ０−８アルキル）（Ｃ０−８アルキル）、−Ｎ（Ｃ０−８アルキル）ＣＯＮ（Ｃ０−８アルキル）（Ｃ０−８アルキル）、−Ｎ（Ｃ０−８アルキル）ＣＯ（Ｃ１−８アルキル）、−Ｎ（Ｃ０−８アルキル）ＣＯ（Ｃ３−８シクロアルキル）、−Ｎ（Ｃ０−８アルキル）ＣＯ２（Ｃ１−８アルキル）、Ｓ（Ｏ）１−２Ｎ（Ｃ０−８アルキル）（Ｃ０−８アルキル）、−ＮＲ１１Ｓ（Ｏ）１−２（Ｃ０−８アルキル）、−ＣＯＮ（Ｃ３−８シクロアルキル）（Ｃ３−８シクロアルキル）、−ＣＯＮ（Ｃ０−８アルキル）（Ｃ３−８シクロアルキル）、−Ｎ（Ｃ３−８シクロアルキル）ＣＯＮ（Ｃ０−８アルキル）（Ｃ０−８アルキル）、−Ｎ（Ｃ３−８シクロアルキル）ＣＯＮ（Ｃ３−８シクロアルキル）（Ｃ０−８アルキル）、−Ｎ（Ｃ０−８アルキル）ＣＯＮ（Ｃ３−８シクロアルキル）（Ｃ０−８アルキル）、−Ｎ（Ｃ０−８アルキル）ＣＯ２（Ｃ３−８シクロアルキル）、−Ｎ（Ｃ３−８シクロアルキル）ＣＯ２（Ｃ３−８シクロアルキル）、Ｓ（Ｏ）１−２Ｎ（Ｃ０−８アルキル）（Ｃ３−８シクロアルキル）、−ＮＲ１１Ｓ（Ｏ）１−２（Ｃ３−８シクロアルキル）、Ｃ２−８アルケニル、Ｃ２−８アルキニル、ＣＮ、ＣＦ３、ＯＨ、または場合により置換したアリール置換基で場合により置換されるＣ０−８アルキルであるが；ただし、上記アリール、ヘテロシクリル、ヘタリール、アルキル、またはシクロアルキル基のそれぞれは、独立して−Ｎ（Ｃ０−８アルキル）（Ｃ０−８アルキル）、ヒドロキシル、ハロゲン、オキソ、アリール、ヘタリール、Ｃ０−６アルキル、−Ｃ０−８アルキルシクリル、−Ｃ０−８アルキル−Ｎ（Ｃ０−８アルキル）−Ｓ（Ｏ）０−２−（Ｃ０−８アルキル）、−Ｃ０−８アルキル−Ｓ（Ｏ）０−２−Ｎ（Ｃ０−８アルキル）（Ｃ０−８アルキル）、−Ｃ０−８アルキル−Ｎ（Ｃ０−８アルキル）ＣＯ（Ｃ０−８アルキル）、−Ｃ０−８アルキル−Ｎ（Ｃ０−８アルキル）ＣＯ−Ｎ（Ｃ０−８アルキル）（Ｃ０−８アルキル）、−Ｃ０−８アルキル−ＣＯ−Ｎ（Ｃ０−８アルキル）（Ｃ０−８アルキル）、−Ｃ１−８アルキル−ＣＯ２−（Ｃ０−８アルキル）、−Ｃ０−８アルキルＳ（Ｏ）０−２−（Ｃ０−８アルキル）、−Ｃ０−８アルキル−Ｏ−Ｃ１−８アルキル、−Ｃ０−８アルキル−Ｏ−Ｃ０−８アルキルシクリル、−Ｃ０−８アルキル−Ｏ−Ｃ０−８アルキルヘテロシクリル、−Ｃ０−８アルキル−Ｏ−Ｃ０−８アルキルアリール、−Ｃ０−８アルキル−Ｏ−Ｃ０−８アルキルヘタリール、−Ｃ０−８アルキル−Ｓ−Ｃ０−８アルキル、−Ｃ０−８アルキル−Ｓ−Ｃ０−８アルキルシクリル、−Ｃ０−８アルキル−Ｓ−Ｃ０−８アルキルヘテロシクリル、−Ｃ０−８アルキル−Ｓ−Ｃ０−８アルキルアリール、−Ｃ０−８アルキル−Ｓ−Ｃ０−８アルキルヘタリール、−Ｃ０−８アルキル−Ｎ（Ｃ０−８アルキル）−Ｃ０−８アルキル、−Ｃ０−８アルキル−Ｎ（Ｃ０−８アルキル）−Ｃ０−８アルキルシクリル、−Ｃ０−８アルキル−Ｎ（Ｃ０−８アルキル）−Ｃ０−８アルキルヘテロシクリル、−Ｃ０−８アルキル−Ｎ（Ｃ０−８アルキル）−Ｃ０−８アルキルアリール、−Ｃ０−８アルキル−Ｎ（Ｃ０−８アルキル）−Ｃ０−８アルキルヘタリール、−Ｃ２−８アルケニル、−Ｃ２−８アルキニル、ＮＯ２、ＣＮ、ＣＦ３、ＯＣＦ３、ＯＣＨＦ２、−Ｃ０−８アルキル−Ｃ３−８シクロアルキル、−Ｃ０−８アルキル−Ｏ−Ｃ０−８アルキル、−Ｃ０−８アルキル−Ｎ（Ｃ０−８アルキル）（Ｃ０−８アルキル）、−Ｃ０−８アルキル−Ｓ（Ｏ）０−２−Ｃ０−８アルキル、または１から４個の独立したＣ０−８アルキル、シクリル、もしくは置換シクリル置換基で場合により置換されたヘテロシクリルで、場合により置換されてもよく；
各例において、Ｅ１は、独立してハロ、−ＣＦ３、−ＯＣＦ３、−ＯＲ２、−ＮＲ３１Ｒ３２、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ３１、−ＣＯ２Ｒ３１、−ＣＯＮＲ３１Ｒ３２、−ＮＯ２、−ＣＮ、−Ｓ（Ｏ）０−２Ｒ３１、−Ｓ（Ｏ）０−２ＮＲ３１Ｒ３２、−ＮＲ３１Ｃ（＝Ｏ）Ｒ３２、−ＮＲ３１Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ３２、−ＮＲ３１Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ３２Ｒ３３、−ＮＲ３１Ｓ（Ｏ）０−２Ｒ３２、−Ｃ（＝Ｓ）ＯＲ３１、−Ｃ（＝Ｏ）ＳＲ３１、−ＮＲ３１Ｃ（＝ＮＲ３２）ＮＲ３３Ｒ３１、−ＮＲ３１Ｃ（＝ＮＲ３２）ＯＲ３３、−ＮＲ３１Ｃ（＝ＮＲ３１）ＳＲ３１、−ＯＣ（＝Ｏ）ＯＲ３１、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＲ３１Ｒ３２、−ＯＣ（＝Ｏ）ＳＲ３１、−ＳＣ（＝Ｏ）ＯＲ３１、−ＳＣ（＝Ｏ）ＮＲ３１Ｒ３２、Ｃ０−１０アルキル、Ｃ２−１０アルケニル、Ｃ２−１０アルキニル、−Ｃ１−１０アルコキシＣ１−１０アルキル、−Ｃ１−１０アルコキシＣ２−１０アルケニル、−Ｃ１−１０アルコキシＣ２−１０アルキニル、−Ｃ１−１０アルキルチオＣ１−１０アルキル、−Ｃ１−１０アルキルチオＣ２−１０アルケニル、−Ｃ１−１０アルキルチオＣ２−１０アルキニル、シクロＣ３−８アルキル、シクロＣ３−８アルケニル、−シクロＣ３−８アルキルＣ１−１０アルキル、−シクロＣ３−８アルケニルＣ１−１０アルキル、−シクロＣ３−８アルキルＣ２−１０アルケニル、−シクロＣ３−８アルケニルＣ２−１０アルケニル、−シクロＣ３−８アルキルＣ２−１０アルキニル、−シクロＣ３−８アルケニルＣ２−１０アルキニル、−ヘテロシクリル−Ｃ０−１０アルキル、−ヘテロシクリル−Ｃ２−１０アルケニル、または−ヘテロシクリル−Ｃ２−１０アルキニルであり、このいずれもが１つ以上の独立したハロ、オキソ、−ＣＦ３、−ＯＣＦ３、−ＯＲ３１、−ＮＲ３１Ｒ３２、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ３１、−ＣＯ２Ｒ３１、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ３１Ｒ３２、−ＮＯ２、−ＣＮ、−Ｓ（Ｏ）０−２Ｒ３１、−ＳＯ２ＮＲ３１、−ＮＲ３１Ｃ（＝Ｏ）Ｒ３２、−ＮＲ３１Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ３１、−ＮＲ３１Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ３２Ｒ３３、−ＮＲ３１Ｓ（Ｏ）０−２Ｒ３１、−Ｃ（＝Ｓ）ＯＲ３１、−Ｃ（＝Ｏ）ＳＲ３１、−ＮＲ３１Ｃ（＝ＮＲ３２）ＮＲ３３Ｒ３１、−ＮＲ３１Ｃ（＝ＮＲ３２）ＯＲ３３、−ＮＲ３１Ｃ（＝ＮＲ３２）ＳＲ３３、−ＯＣ（＝Ｏ）ＯＲ３１、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＲ３１Ｒ３２、−ＯＣ（＝Ｏ）ＳＲ３１、−ＳＣ（Ｏ）ＯＲ３１、または−ＳＣ（＝Ｏ）ＮＲ３１Ｒ３２置換基で場合により置換され；
または各例において、Ｅ１は、独立してアリール−Ｃ０−１０アルキル、アリール−Ｃ２−１０アルケニル、アリール−Ｃ２−１０アルキニル、ヘタリール−Ｃ０−１０アルキル、ヘタリール−Ｃ２−１０アルケニル、またはヘタリール−Ｃ２−１０アルキニルであり、これらの結合点は、記載されるとおり左または右のいずれかからであり、このいずれもが、１つ以上の独立したハロ、−ＣＦ３、−ＯＣＦ３、−ＯＲ３１、−ＮＲ３１Ｒ３２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ３１、−ＣＯ２Ｒ３１、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ３１Ｒ３２、−ＮＯ２、−ＣＮ、−Ｓ（Ｏ）０−２Ｒ３１、−Ｓ（Ｏ）０−２ＮＲ３１Ｒ３２、−ＮＲ３１Ｃ（＝Ｏ）Ｒ３２、−ＮＲ３１Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ３２、−ＮＲ３１Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ３２Ｒ３３、−ＮＲ３１Ｓ（Ｏ）０−２Ｒ３２、−Ｃ（＝Ｓ）ＯＲ３１、−Ｃ（＝Ｏ）ＳＲ３１、−ＮＲ３１Ｃ（＝ＮＲ３２）ＮＲ３３Ｒ３１、−ＮＲ３１Ｃ（＝ＮＲ３２）ＯＲ３３、−ＮＲ３１Ｃ（＝ＮＲ３２）ＳＲ３３、−ＯＣ（＝Ｏ）ＯＲ３１、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＲ３１Ｒ３２、−ＯＣ（＝Ｏ）ＳＲ３１、−ＳＣ（＝Ｏ）ＯＲ３１、または−ＳＣ（＝Ｏ）ＮＲ３１Ｒ３２置換基で場合により置換され；
−ＮＲ３１Ｒ３２、−ＮＲ３１１Ｒ３２１、−ＮＲ３１２Ｒ３２２、−ＮＲ３３２Ｒ３４１、−ＮＲ３１３Ｒ３２３、および−ＮＲ３２３Ｒ３３３の場合、Ｒ３１とＲ３２、Ｒ３１１とＲ３２１、Ｒ３１２とＲ３２２、Ｒ３３１とＲ３４１、Ｒ３１３とＲ３２３、およびＲ３２３とＲ３３３は、それぞれ場合により、これらが結合した窒素原子と一緒になって三から十員の飽和もしくは不飽和環を形成し；前記環は、各例において、独立して、１つ以上の独立した−Ｎ（Ｃ０−８アルキル）（Ｃ０−８アルキル）、ヒドロキシル、ハロゲン、オキソ、アリール、ヘタリール、Ｃ０−６アルキル、−Ｃ０−８アルキルＣ３−８シクロアルキル、−Ｃ０−８アルキル−Ｎ（Ｃ０−８アルキル）Ｓ（Ｏ）０−２Ｃ０−８アルキル、−Ｃ０−８アルキル−Ｎ（Ｃ０−８アルキル）Ｓ（Ｏ）０−２Ｎ（Ｃ０−８アルキル）（Ｃ０−８アルキル）、−Ｃ０−８アルキル−Ｎ（Ｃ０−８アルキル）ＣＯ２（Ｃ０−８アルキル）、−Ｃ０−８アルキル−ＣＯＮ（（Ｃ０−８アルキル））Ｓ（Ｏ）０−２（Ｃ０−８アルキル）、−Ｃ０−８アルキル−Ｓ（Ｏ）０−２Ｎ（Ｃ０−８アルキル）（Ｃ０−８アルキル）、−Ｃ０−８アルキル−Ｎ（Ｃ０−８アルキル）ＣＯ（Ｃ０−８アルキル）、−Ｃ０−８アルキル−Ｎ（Ｃ０−８アルキル）ＣＯＮ（Ｃ０−８アルキル）（Ｃ０−８アルキル）、−Ｃ０−８アルキル−ＣＯＮ（Ｃ０−８アルキル）（Ｃ０−８アルキル）、−Ｃ０−８アルキル−ＣＯ２（Ｃ０−８アルキル）、−Ｃ０−８アルキルＳ（Ｏ）０−２（Ｃ０−８アルキル）、−Ｃ０−８アルキル−Ｏ−Ｃ０−８アルキル、−Ｃ０−８アルキル−Ｏ−Ｃ０−８アルキルシクリル、−Ｃ０−８アルキル−Ｏ−Ｃ０−８アルキルヘテロシクロアルキル、−Ｃ０−８アルキル−Ｏ−Ｃ０−８アルキルアリール、−Ｏアリール、−Ｃ０−８アルキル−Ｏ−Ｃ０−８アルキルヘタリール、−Ｃ０−８アルキル−Ｓ−Ｃ０−８アルキル、−Ｃ０−８アルキル−Ｓ−Ｃ０−８アルキルＣ３−８シクロアルキル、−Ｃ０−８アルキル−Ｓ−Ｃ０−８アルキルヘテロシクロアルキル、−Ｃ０−８アルキル−Ｓ−Ｃ０−８アルキルアリール、−Ｃ０−８アルキル−Ｓ−Ｃ０−８アルキルヘタリール、−Ｃ０−８アルキル−Ｎ（Ｃ０−８アルキル）−Ｃ０−８アルキル、−Ｃ０−８アルキル−Ｎ（Ｃ０−８アルキル）−Ｃ０−８アルキルＣ３−８シクロアルキル、−Ｃ０−８アルキル−Ｎ（Ｃ０−８アルキル）−Ｃ０−８アルキルヘテロシクロアルキル、−Ｃ０−８アルキル−Ｎ（Ｃ０−８アルキル）−Ｃ０−８アルキルアリール、−Ｃ０−８アルキル−Ｎ（Ｃ０−８アルキル）−Ｃ０−８アルキルヘタリール、−Ｃ０−８アルキル−Ｎ（Ｃ０−８アルキル）（Ｃ０−８アルキル）、Ｃ２−８アルケニル、Ｃ２−８アルキニル、ＮＯ２、ＣＮ、ＣＦ３、ＯＣＦ３、またはＯＣＨＦ２置換基で場合により置換され；前記環は、各例において、独立して、場合により１つ以上の窒素以外のヘテロ原子を含み；および
ｍは、０、１、２、または３であり；ｎは、０、１、２、３、または４であり；およびａａは０または１である。
【００１４】
実施形態の幾つかにおいて、化合物は、ｔｒａｎｓ−４−［８−アミノ−１−（７−クロロ−４−ヒドロキシ−１Ｈ−インドール−２−イル）イミダゾ［１，５−α］ピラジン−３−イル］シクロヘキサンカルボン酸、ｃｉｓ−３−［８−アミノ−１−（７−クロロ−１Ｈ−インドール−２−イル）イミダゾ［１，５−α］ピラジン−３−イル］シクロブタンカルボン酸、ｔｒａｎｓ−４−｛８−アミノ−１−［７−（３−イソプロピル）フェニル−１Ｈ−インドール−２−イル］イミダゾ［１，５−α］ピラジン−３−イル｝シクロヘキサンカルボン酸、またはｔｒａｎｓ−４−｛８−アミノ−１−［７−（２，５−ジクロロ）フェニル−１Ｈ−インドール−２−イル］イミダゾ［１，５−α］ピラジン−３−イル｝シクロヘキサンカルボン酸ではない。
【００１５】
実施形態の幾つかにおいて、以下から選択される化合物の、トロメタミン、ナトリウム、カルシウムおよびＬ−アルギニンからなる群より選択される医薬的に許容される塩が提供される：
【００１６】
【化３】
【００１７】
化合物は、当分野の一般技術に従って、ＵＳ２００７／０１１２００５に記載されるように調製することができる。
【００１８】
実施形態の幾つかにおいて、塩は、トロメタミン、ナトリウム、カルシウム、およびＬ−アルギニンから選択される。実施形態の幾つかにおいて、塩は、マグネシウム、カリウム、Ｎ，Ｎ−ジエチルエタノールアミン、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン、およびピペラジンから選択される。
【００１９】
実施形態の幾つかにおいて、ｔｒａｎｓ−４−［４−アミノ−５−（７−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−イル）イミダゾ［５，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル］シクロヘキサンカルボン酸の医薬的に許容される塩が提供され、この塩は、ナトリウム、カルシウム、Ｌ−アルギニン、マグネシウム、カリウム、Ｎ，Ｎ−ジエチルエタノールアミン、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン、およびトロメタミンから選択される。
【００２０】
実施形態の幾つかにおいて、塩の形は、ナトリウム、カルシウム、またはＬ−アルギニンから選択される。実施形態の幾つかにおいて、塩の形は、マグネシウム、カリウム、Ｎ，Ｎ−ジエチルエタノールアミン、またはＮ−メチル−Ｄ−グルカミンから選択される。実施形態の幾つかにおいて、塩の形は、トロメタミンである。
【００２１】
実施形態の幾つかにおいて、塩の形は、水和または溶媒和塩の形である。実施形態の幾つかにおいて、塩の形は、実質的に非晶質である。実施形態の幾つかにおいて、塩の形は、実質的に結晶性である。
【００２２】
実施形態の幾つかにおいて、塩の形は、少なくとも約９５重量％が結晶性である。実施形態の幾つかにおいて、塩の形は、実質的に単一の結晶形である。
【００２３】
実施形態の幾つかにおいて、塩の形は、４０℃および７５％ＲＨで３０日間に約１重量％以下が分解する。
【００２４】
実施形態の幾つかにおいて、塩の形は、図１のものと実質的に相似したＸ線粉末回折パターンを示すトロメタミン塩である。実施形態の幾つかにおいて、塩の形は、ＤＳＣ分析により約２０２から２１１℃で吸熱を示すトロメタミン塩の形である。実施形態の幾つかにおいて、塩の形は、水に対して約６ｍｇ／ｍＬの溶解性を有するトロメタミン塩の形である。実施形態の幾つかにおいて、塩の形は、実施例１のものと実質的に同様な１３Ｃ ＮＭＲスペクトルを有するトロメタミン塩の形である。実施形態の幾つかにおいて、塩の形は、９０から９５％ＲＨで２から４％の吸湿性を有するトロメタミン塩の形である。
【００２５】
実施形態の幾つかにおいて、塩の形は、ＭｅＯＨを還流させながらこの中で約１時間（トロメタミン）１，３−プロパンジオール、２−アミノ−２−（ヒドロキシメチル）（約１から２当量）を反応させ、冷却し、ろ過し、洗い、乾燥させることにより調製される。実施形態の幾つかにおいて、出発物質の遊離化合物は、最初は無機塩を含まない。遊離化合物をＥｔＯＨまたはＥｔＯＨ／水から結晶化させると、残留Ｐｄが存在する場合にこれを除去するのに特に有用であり得る。実施形態の幾つかにおいて、トロメタミン塩は、約３当量のトロメタミンをＥｔＯＨまたはＥｔＯＨ：水１：１中で反応させることにより形成される。実施形態の幾つかにおいて、トロメタミン塩は、ＭｅＯＨ：ＴＨＦ中でゆっくり冷却することにより調製される。
【００２６】
実施形態の幾つかにおいて、塩の形は、図２のものと実質的に相似したＸ線粉末回折パターンを示すカルシウム塩である。
【００２７】
生物活性：ｍＴＯＲ活性の阻害
組換え４Ｅ−ＢＰ１を基質として用いて、ｉｎ ｖｉｔｒｏ免疫沈降（ＩＰ）リン酸化酵素アッセイで化合物のｍＴＯＲリン酸化酵素活性を阻害する能力を求めた。アッセイにより、ｍＴＯＲの既知の生理基質である４Ｅ−ＢＰ１のリン酸化を阻害する化合物の能力が求められる。ＨｅＬａ細胞由来の免疫捕捉ｍＴＯＲ複合体を、リン酸化酵素アッセイ緩衝液中、様々な濃度の化合物およびＨｉｓ−タグ４Ｅ−ＢＰ１とともに温置してから、ＡＴＰを添加して室温で反応を開始する。３０分後に反応を止め、４℃で一晩かけて、ホスホリル化Ｈｉｓ−タグ４Ｅ−ＢＰ１をニッケルキレートプレートに捕捉する。次いで、ホスホ−４Ｅ−ＢＰｌ（Ｔ３７／４６）一次抗体および対応する抗ウサギＩｇＧ ＨＲＰ複合二次抗体を用いて、４Ｅ−ＢＰ１のホスホスレオニン含量を測定する。二次抗体は、一次抗体のホスホリル化４Ｅ−ＢＰ１への結合が、一次抗体に結合した二次抗体の量として定量的に求めることができるように、共有結合したレポーター酵素（例えば西洋ワサビペルオキシダーゼ、ＨＲＰ）を有している。二次抗体の量は、適切なＨＲＰ基質との温置により求めることができる。
【００２８】
用いた貯蔵試薬は以下のとおりである：細胞溶解緩衝液：４０ｍＭのＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．５、１２０ｍＭのＮａＣｌ、１ｍＭのＥＤＴＡ、１０ｍＭのピロリン酸ナトリウム、１０ｍＭのβ−グリセロリン酸（グリセロホスフェート）、５０ｍＭのフッ化ナトリウム、１．５ｍＭのバナジン酸ナトリウム、および０．３％のＣＨＡＰＳを含有。Ｃｏｍｐｌｅｔｅ ｍｉｎｉ ＥＤＴＡ−ｆｒｅｅ プロテアーゼ阻害剤（Ｒｏｃｈｅ、カタログ番号＃１１ ８３６ １７０ ００１）。ＨｅＬａ細胞ペレット（Ｐａｒａｇｏｎ Ｂｉｏｓｅｒｖｉｃｅｓ）。タンパク質Ｇでコーティングした免疫沈降用プレート（Ｐｉｅｒｃｅ、カタログ番号＃１５１３１）。ｍＴＯＲ（ａｋａ ＦＲＡＰ）Ｎ−１９抗体（Ｓａｎｔａ Ｃｒｕｚ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、カタログ番号＃ｓｃ−１５４９）。ＩＰ洗浄緩衝液：５０ｍＭのＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．５，１５０ｍＭのＮａＣｌを含有。リン酸化酵素緩衝液：２０ｍＭのＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．５，１０ｍＭのＭｇＣｌ２、４ｍＭのＭｎＣｌ２、１０ｍＭのｂ−メルカプトエタノール、および２００ｕＭのバナジン酸ナトリウムを含有。アッセイ用に新たに作成する。組換え４Ｅ−ＢＰ１（ａｋａ ＰＨＡＳ Ｉ）（Ｃａｌｂｉｏｃｈｅｍ、カタログ番号＃５１６６７５）。４Ｅ−ＢＰ１貯蔵液（１ｍｇ／ｍＬ）をリン酸化酵素アッセイ緩衝液で１２０倍に希釈して３０ｕＬ中０．２５μｇ／ウェル濃度にする。ＡＴＰ溶液はリン酸化酵素緩衝液の３３０ｕＭ ＡＴＰ貯蔵液で調製。Ｎｉ−キレートプレート（Ｐｉｅｒｃｅ、カタログ番号＃１５２４２）。抗体希釈緩衝液：ＴＢＳＴ、５％の脱脂乳を含有。ホスホ−４Ｅ−ＢＰ１（Ｔ３７／４６）抗体：ホスホ−４Ｅ−ＢＰ１（Ｔ３７／４６）抗体（Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、カタログ番号＃９４５９）を抗体希釈緩衝液で１：１０００に希釈したもの。ロバ抗ウサギＩｇＧ−ＨＲＰ結合体；抗ウサギＩｇＧ−ＨＲＰ結合体（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ、カタログ番号ＮＡ９３４）を抗体希釈緩衝液で１：１０，０００に希釈したもの。ＨＲＰ基質：化学発光試薬（Ｐｉｅｒｃｅ、カタログ番号＃３７０７４）
アッセイプロトコル：細胞ペレット２５ｇを細胞溶解緩衝液６０ｍＬに加えて均一にし、それから１２，０００ｒｐｍで３０分間遠心分離してＨｅＬａ細胞可溶化物を大量に調製した。透明な上清を新しい管に移し、等分して、急速凍結させ、使用するまで−８０℃で貯蔵した。タンパク質Ｇでコーティングした９６−ウェルプレートを溶解緩衝液で１回洗浄し、希釈ｍＴＯＲ抗体５０μＬを各ウェルに添加し、室温で３０から６０分間温置する。次いで、ＨｅＬａ細胞可溶化物５０μｇを各ウェルに溶解緩衝液５０μＬで添加し、冷蔵室中４℃でシェーカー上に２から３時間温置した。可溶化物を除去して、プレートを完全溶解緩衝液１００μＬで洗浄した（３回）。プレートをさらに高塩濃度緩衝液１００μＬで２回洗浄した。希釈した４Ｅ−ＢＰ１（基質）を各ウェルに３０μＬ添加する。化合物を様々な濃度で５μＬずつ各ウェルに添加した。薬の濃度は３０μＭから０．１μＭまで様々であった。最終ＤＭＳＯ濃度は１％であった。陽性対照ウェルにはＤＭＳＯのみを添加した。陰性対照ウェルについては、ＡＴＰ溶液を添加せず、代わりにリン酸化酵素緩衝液１５μＬを添加し、ＡＴＰを１５μＬ添加して反応を開始させ、陰性対照ウェル以外の残りのウェルには最終濃度１００μＭまでＡＴＰを添加した。反応は、室温で３０分間行なった。次いで、反応液４５μＬをＮｉ−キレートプレートに移し、４℃で一晩温置した。プレートを抗体希釈緩衝液で１回洗浄して、希釈ホスホ−４Ｅ−ＢＰ１抗体５０μＬを各ウェルに添加し、室温で１時間温置した。次いで、プレートをＴＢＳＴで洗浄して（４回）、希釈抗−ウサギ二次抗体５０μＬを各プレートに添加し、室温で１時間温置した。プレートをＴＢＳＴ１００μＬで洗浄した（４回）。各ウェルに、Ｐｉｅｒｃｅ Ｆｅｍｔｏ化学発光試薬５０μＬを添加して、ｖｉｃｔｏｒ装置で化学発光を測定した。
【００２９】
化合物の存在下で得られるアッセイシグナルと陽性対照および陰性対照のものとの比較により、ホスホ−４Ｅ−ＢＰ１リン酸化の阻害程度を化合物濃度範囲にわたって求めることができる。これらの阻害値を、Ｓ字形用量反応阻害曲線に当てはめて、ＩＣ５０値（即ち４Ｅ−ＢＰ１のリン酸化を５０％阻害する化合物濃度）を求める。
【００３０】
４Ｅ−ＢＰ１（Ｔ３７／４６）のリン酸化阻害を測定する、ｍＴＯＲ細胞に基づく機構アッセイ
ＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞を、完全培養培地９０ｕＬ中２×１０４細胞／ウェルで９６ウェルプレートに播種し、ＣＯ２インキュベーター中で一晩３７℃で培養する。ＣＯ２インキュベーター中３７℃で３時間、細胞を、様々な化合物で用量反応様式で処理してから、細胞可溶化物を作成して、４Ｅ−ＢＰ１のＴ３７／４６でのリン酸化阻害を測定した。細胞可溶化物を、４Ｅ−ＢＰ１抗体でコーティングした９６ウェルプレートに移し、４℃で一晩、ホスホ−４Ｅ−ＢＰ１（Ｔ３７／４６）を捕捉しながら温置する。ウェルを抗−ウサギホスホ−４Ｅ−ＢＰ１（Ｔ３７／４６）抗体および対応するヤギ抗−ウサギＩｇＧ−ＨＲＰ結合体とともに温置して、各ウェルのホスホ−４Ｅ−ＢＰ１の量をさらに測定する。各ウェルに存在するＨＲＰ量を化学発光法により測定する。この量は、各ウェルのホスホ−４Ｅ−ＢＰ１量に相当する。６点用量反応曲線を用いて、ＩＣ５０値を求めた。
【００３１】
本発明の化合物は以下のうち少なくとも１つを示した：Ｉ）ｍＴＯＲ活性の阻害についての生化学アッセイで求められたとおり、０．００１μＭから１１．００μＭの間のＩＣ５０値で、有利には１．００μＭ未満のＩＣ５０値で、より有利には０．１μＭ未満のＩＣ５０値で、さらにより有利には０．０１μＭ未満のＩＣ５０値で、免疫補足されたヒトｍＴＯＲによる４Ｅ−ＢＰ１リン酸化を阻害した；ＩＩ）ｍＴＯＲ細胞に基づく機構アッセイで、４０μＭ未満のＩＣ５０値で４Ｅ−ＢＰ１（Ｔ３７／４６）のリン酸化を阻害した。例えば、ｔｒａｎｓ−４−［４−アミノ−５−（７−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−イル）−イミダゾ［５，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル］シクロヘキサンカルボン酸は、ｍＴＯＲ細胞に基づく機構アッセイで、約１μＭのＩＣ５０値で４Ｅ−ＢＰ１（Ｔ３７／４６）のリン酸化を阻害した。
【００３２】
薬学的組成物
本発明は、医薬的に許容されるキャリアまたは賦形剤１種以上とともに、またはこれを含まずに、望ましい投与様式に合わせて配合した本発明の化合物塩を含む組成物を含む。
【００３３】
本発明の薬学的組成物は、活性成分として少なくとも１種の化合物、場合により医薬的に許容されるキャリア、および場合によりその他のアジュバントを含む。本発明の薬学的組成物は、経口、直腸、外用、および非経口（皮下、筋肉内、および静脈内を含む）投与に適した組成物を含むが、どのような場合にしろ最適な経路は、活性成分が投与されるこの個体（ｈｏｓｔ）ならびに投与される症状の性質および重篤度に依存する。薬学的組成物は、簡便なように、単位剤形で存在することができ、薬学の当分野で周知である方法のいずれかにより調製することができる。使用可能な薬学的キャリアは、例えば、固体、液体、または気体であり得る。固体キャリアの例として、ラクトース、白土、スクロース、タルク、ゼラチン、寒天、ペクチン、アラビアガム、ステアリン酸マグネシウム、およびステアリン酸が挙げられる。液体キャリアの例として、糖シロップ、ピーナッツ油、オリーブ油、および水が挙げられる。気体キャリアの例として、二酸化炭素および窒素が挙げられる。経口剤形の組成物の調製では、任意の便利な薬学的媒体を用いることができる。例えば、水、グリコール、油、アルコール、香味剤、保存料、着色剤などを用いて、懸濁液、エリキシル剤、および溶液などの経口液状製剤を形成することができる。また、デンプン、糖類、微結晶性セルロース、希釈剤、顆粒化剤、潤滑剤、結合剤、崩壊剤などのキャリアを用いて、粉剤、カプセル剤、および錠剤などの経口固形製剤を形成することができる。投与が簡単であることから、錠剤およびカプセル剤は好適な経口投薬単位であるが、これにより固形の薬学的キャリアが用いられる。標準的な水性または非水性技法で、場合により、錠剤をコーティングしてもよい。
【００３４】
本発明の組成物を含有する錠剤は、場合により１種以上の付属成分またはアジュバントとともに、圧縮または成型により調製することができる。圧縮錠剤は、適した装置で、自在に変化する形（粉末または顆粒など）の活性成分を、場合により結合剤、潤滑剤、不活性希釈剤、界面活性剤、または分散剤と混合して、圧縮することにより調製できる。成型錠剤は、適した装置で、不活性液状希釈剤で濡らした粉末化合物の混合物を成型することにより製造できる。各錠剤は、好ましくは活性成分を約０．０５ｍｇから約５ｇ含有し、各カシェ剤またはカプセル剤は、好ましくは活性成分を約０．０５ｍｇから約５ｇ含有する。例えば、ヒトへの経口投与用配合物は、適切で便利な量のキャリア材料と配合された活性剤を約０．５ｍｇから約５ｇ含有することができ、活性剤は、組成物全体の約５から約９５％まで様々な量が可能である。単位剤形は、一般に、活性成分を約１ｍｇから約２ｇ含有することができ、代表的には、２５ｍｇ、５０ｍｇ、１００ｍｇ、２００ｍｇ、３００ｍｇ、４００ｍｇ、５００ｍｇ、６００ｍｇ、８００ｍｇ、または１０００ｍｇ含有する。
【００３５】
非経口投与に適した本発明の薬学的組成物は、活性化合物を水に加えた液剤または懸濁液として調製することができる。適した界面活性剤として、例えば、ヒドロキシプロピルセルロースを挙げることができる。分散剤も、グリセロール、液体ポリエチレングリコール、およびこれらの油混合物で調製することができる。さらに、保存料を加えて微生物の有害な増殖を防ぐことができる。注射に適した本発明の薬学的組成物として、滅菌水溶液および分散剤が挙げられる。そのうえさらに、薬学的組成物は、このような滅菌注射液または分散剤の即時調製用滅菌粉末の形にすることもできる。全ての場合において、最終的な注射形態は、滅菌状態でなくてはならず、簡単にシリンジに入れられる（ｓｙｒｉｎｇａｂｉｌｉｔｙ）ぐらいの流動性がなくてはならない。薬学的組成物は、製造および貯蔵条件下で安定でなくてはならない。従って、薬学的組成物は、好ましくは、微生物（細菌および真菌など）の混入作用から保護されるべきである。キャリアは、溶媒または、例えば、水、ＥｔＯＨ、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコールおよび液体ポリエチレングリコール）、植物油、およびこれらの適した混合物を含有する分散媒体が可能である。
【００３６】
上記の薬学的配合物は、上記のキャリア成分の他に、適切なように、希釈剤、緩衝液、香味剤、結合剤、界面活性剤、増粘剤、潤滑剤、保存料（酸化防止剤を含む。）などのさらなるキャリア成分を１種以上含むことができる。そのうえさらに、その他のアジュバントを加えることにより投与対象者の血液と等張な配合物にすることができる。本発明の塩を含有する組成物は、粉末または液体濃縮物の形態で調製することもできる。
【００３７】
本発明は、本発明の化合物塩および少なくとも１種のさらなる活性剤（さらなる抗新生物薬、抗腫瘍薬、抗血管新生薬、または化学療法薬など）を含有する組成物を含む。
【００３８】
治療法
本発明は、癌をはじめとする過剰増殖性疾患の治療法を含み、この方法は、このような治療を必要としている患者に本発明の化合物塩を有効量で投与することを含む。過剰増殖性疾患として、卵巣癌、リンパ腫、乳癌、肺癌、非小細胞肺癌、腎臓癌、腎細胞癌、前立腺癌、血液の癌、肝臓癌、卵巣癌、甲状腺癌、子宮内膜癌、消化管の癌、腎細胞癌、マントル細胞リンパ腫、または子宮内膜癌が可能である。
【００３９】
このように、治療を必要としている患者に本発明の化合物塩を有効量で投与することを含む腫瘍の治療法が提供される。この実施形態の幾つかにおいて、癌はリンパ腫または卵巣癌である。
【００４０】
一般に、上記症状の治療には、１日あたり体重の約０．０１ｍｇ／ｋｇから約１５０ｍｇ／ｋｇの投与レベル、または１日あたり患者あたり約０．５ｍｇから約７ｇが有用となる。例えば、乳房、肺、腎臓、前立腺、血液、肝臓、卵巣、甲状腺、消化管の癌およびリンパ腫は、化合物を１日あたり体重１キログラムあたり約０．０１から５０ｍｇ、または１日あたり患者あたり約０．５ｍｇから約３．５ｇ投与することにより有効に治療され得る。実施形態の幾つかにおいて、１日あたり患者あたり約０．０５ｍｇから約２ｍｇ、または約０．１から約１ｍｇ／ｋｇを投与することができる。任意の特定の患者についての実際の用量は、様々な要因（年齢、体重、全体的な健康状態、性別、食事、投与時間、投与経路、排出速度、薬の組合せ、および治療を受けている特定疾患の重篤度など）に依存する。
【００４１】
（実施例）
化合物ｔｒａｎｓ−４−［４−アミノ−５−（７−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−イル）−イミダゾ［５，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル］−シクロヘキサンカルボン酸は既知であり、ＵＳ２００７／０１１２００５（この中の実施例２５８）に従って調製することができる。ｔｒａｎｓ−４−［４−アミノ−５−（７−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−イル）イミダゾ［５，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル］シクロヘキサンカルボン酸の塩（カルシウム塩、マグネシウム塩、カリウム塩、ナトリウム塩、Ｌ−アルギニン塩、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン塩、ピペラジン塩、およびトロメタミン塩を含む。）を調製した。
【実施例１】
【００４２】
ｔｒａｎｓ−４−［４−アミノ−５−（７−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−イル）イミダゾ［５，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル］シクロヘキサンカルボン酸トロメタミン塩。
【００４３】
【化４】
【００４４】
化合物ｔｒａｎｓ−４−［４−アミノ−５−（７−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−イル）−イミダゾ［５，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル］−シクロヘキサンカルボン酸は、当分野で既知のとおりに、例えば、ＵＳ２００７／０１１２００５（この中の実施例２５８）に従って調製することができる。この生成物（５．０１ｇ、１２．３ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ（７５．０ｍＬ）に懸濁させて加熱還流させた。１，３−プロパンジオール、２−アミノ−２−（ヒドロキシメチル）（１．７９ｇ、１４．８ｍｍｏｌ）を加えて、反応物を１時間加熱還流させた。懸濁液を室温まで冷却してからろ過した。固体をＭｅＯＨで洗い、それから減圧下５０℃で一晩乾燥させて、表題化合物を黄褐色固体として得た（４．５７ｇ、収率７０．２％）。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：δ１．６７（ｄｄｄｄ，Ｊ＝１２．８，１２．８，１２．８，２．８Ｈｚ，２Ｈ），１．８７（ｄｄｄｄ，Ｊ＝１３．２，１３．２，１３．２，３．２Ｈｚ，２Ｈ），２．１４−２．１７（ｍ，４Ｈ），２．３４（ｔｔ，Ｊ＝１２．４，２．８Ｈｚ，１Ｈ），３．４０（ｔｔ，Ｊ＝１２．４，３．２Ｈｚ，１Ｈ），３．６５（ｓ，６Ｈ），４．０１（ｓ，３Ｈ），６．７５（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），６．７５（ｓ，１Ｈ），７．０４（ｄｄ，Ｊ＝７．６，７．６Ｈｚ，１Ｈ），７．２３（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），７．８８（ｓ，１Ｈ）。１３Ｃ ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）：δ２９．１，２９．６，３４．３，４３．９，５５．３，５９．０，６１．３，１０２．３，１０２．５，１１０．９，１１３．１，１２０．１，１２６．８，１２７．２，１３０．０，１３２．１，１４６．３，１４６．７，１７８．６。ＬＣＭＳ（ＥＳＩ＋）：ｍ／ｚ４０７（ＭＨ＋）。元素分析：Ｃ２５Ｈ３３Ｎ７Ｏ６として計算：Ｃ，５６．９２％；Ｈ，６．３０％；Ｎ，１８．５８％；Ｏ，１８．２０％。実測：Ｃ，５６．２３％；Ｈ，６．３１％；Ｎ，１８．３３％；Ｏ，１８．６３％。
【００４５】
トロメタミン塩の特性決定データをまとめると以下のとおり：
（ａ）Ｘ線粉末回折分析（ＸＲＰＤ）［Ｉｎｅｌ ＸＲＧ−３０００ｗ／ＣＰＳ検出器ｗ／２θ範囲１２０°］は、この塩が結晶形であることを示した（図１参照）；
（ｂ）示差走査熱量測定（ＤＳＣ）［ＴＡ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ ２９２０またはＱ１０００］分析は２０２から２１１℃の溶融吸熱範囲とこれに続く分解を示した；
（ｃ）熱重量（ＴＧ）分析［ＴＡ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ ２０５０または２９５０］は、１５０℃での塩の０．３から１％重量減少を示した；
（ｄ）熱重量分析フーリエ変換分光（ＴＧＩＲ）分析は、水分に相当するわずかな重量減少（＜１％）を示した；
（ｅ）蒸気収着分析（ＤＶＳ）［ＶＴＩ ＳＧＡ−１００分析器］は、塩が、９０から９５％ＲＨで２から４％という低吸湿性を示すことを示した；
（ｆ）光学顕微鏡（ＯＭ）［Ｌｅｉｃａ ＤＭ ＬＰ］分析は、塩の大部分が微小ロッド状で存在し交差偏光顕微鏡により複屈折が見られることを示した；および
（ｇ）塩の溶解性は水に対して約６ｍｇ／ｍＬであった。
（ｈ）安定性データ：４０℃および７５％ＲＨで３０日後、明らかな分解は観測されなかった。
【００４６】
トロメタミン塩の多形性スクリーニングは、１０種の異なる溶媒のスラリーとして周辺温度で７日間置いた後の、トロメタミン塩のサンプルのＸＲＰＤパターンは、出発物質（表Ｉ）のものと一致し、実質的に図１と同様であったことを示した。そのうえさらに、トロメタミン塩の形はトロメタミン塩出発物質をＩＰＡ中で２４時間還流させた後も一定したままであった。
【００４７】
【表１】
【実施例２】
【００４８】
ｔｒａｎｓ−４−［４−アミノ−５−（７−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−イル）イミダゾ［５，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル］シクロヘキサンカルボン酸カルシウム塩。
【００４９】
ｔｒａｎｓ−４−［４−アミノ−５−（７−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−イル）−イミダゾ［５，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル］−シクロヘキサンカルボン酸ナトリウム（２０１ｍｇ、０．４６９ｍｍｏｌ）を水（２．００ｍＬ）に溶解して加熱還流させた。二塩化カルシウム（５１．８ｍｇ、０．４６７ｍｍｏｌ）を加えると直ちに固体が析出した。反応物を室温に冷却してろ過した。固体を水で洗い、６０℃で減圧乾燥して、表題化合物を黄褐色固体として得た（１８０ｍｇ、収率９０％）。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）：δ１．６７（ｄｄｄｄ，Ｊ＝１２．８，１２．８，１２．８，２．８Ｈｚ，２Ｈ），１．８７（ｄｄｄｄ，Ｊ＝１３．２，１３．２，１３．２，３．２Ｈｚ，２Ｈ），２．１４−２．１７（ｍ，４Ｈ），２．３４（ｔｔ，Ｊ＝１２．４，２．８Ｈｚ，１Ｈ），３．４０（ｔｔ，Ｊ＝１２．４，３．２Ｈｚ，１Ｈ），３．６５（ｓ，６Ｈ），４．０１（ｓ，３Ｈ），６．７５（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），６．７５（ｓ，１Ｈ），７．０４（ｄｄ，Ｊ＝７．６，７．６Ｈｚ，１Ｈ），７．２３（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），７．８８（ｓ，１Ｈ）。
【００５０】
カルシウム塩の特性決定データをまとめると以下のとおり：（ａ）Ｘ線粉末回折分析（ＸＲＰＤ）は、この塩が結晶性であることを示した（図２参照）；（ｂ）示差走査熱量測定（ＤＳＣ）分析は、１４５．５℃および１７８．２℃での広い吸熱を示した；（ｃ）蒸気収着分析（ＤＶＳ）は、塩が、０から９５％ＲＨで３５％重量増加の吸湿性を示すことを示した；および（ｄ）溶解性は水に対して１ｍｇ／ｍＬ未満であった。
【実施例３】
【００５１】
ｔｒａｎｓ−４−［４−アミノ−５−（７−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−イル）イミダゾ［５，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル］シクロヘキサンカルボン酸ナトリウム塩。
【００５２】
ｔｒａｎｓ−４−［４−アミノ−５−（７−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−イル）−イミダゾ［５，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル］−シクロヘキサンカルボン酸（１０ｇ、２４．６ｍｍｏｌ）を脱イオン水（１００ｍＬ）に懸濁させた。窒素下撹拌しながら、ＮａＯＨ水溶液（５０％ＮａＯＨ（１．９７ｇ、２４．６ｍｍｏｌ）と脱イオン水（２０ｍＬ）で調製）を１０分かけて加えた。ｐＨ約８で透明な褐色溶液が形成された。チャコール（０．５ｇ、５重量％）を加えた。混合物を５分間撹拌し、穏やかに吸引しながらガラスのマイクロファイバー（ＧＦ）と濾紙（二重）のフィルターでろ過した。フラスコとロートを脱イオン水少量ですすいだ。褐色のろ液を３０から３５℃で減圧濃縮した。得られる粘性固体を３０分間４０から４５℃（水浴）で減圧下に置き、実質的に乾燥した残渣を得て、これを乾燥皿に移した。固体を真空オーブン中５０℃で５時間超乾燥させ、表題化合物を黄褐色固体として得た（１０．１ｇ、収率９６％）。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）：δ１．４３（ｄｄｄｄ，Ｊ＝１２．６，１２．８，１２．８，２．４Ｈｚ，２Ｈ），１．６８（ｄｄｄｄ，Ｊ＝１２．４，１２．４，１２．４，２．８Ｈｚ，２Ｈ），１．９９−２．０２（ｍ，５Ｈ），３．１２（ｔｔ，Ｊ＝１２．０，２．８Ｈｚ，１Ｈ），３．９２（ｓ，３Ｈ），６．６１（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），６．６７（ｓ，１Ｈ），６．８８（ｄｄ，Ｊ＝７．６，７．６Ｈｚ，１Ｈ），７．１２（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．７２（ｓ，１Ｈ）。元素分析：Ｃ２１Ｈ２１Ｎ６Ｏ３Ｎａ・Ｈ２Ｏとして計算：Ｃ，５６．５０％；Ｈ，５．１９％；Ｎ，１８．８２％；Ｎａ，５．１５％。実測：Ｃ，５６．４４％；Ｈ，４．７６％；Ｎ，１８．５１％；Ｎａ，４．５５％。
【００５３】
ナトリウム塩の特性決定データをまとめると以下のとおり：（ａ）Ｘ線粉末回折分析（ＸＲＰＤ）は、この塩の大部分が非晶質であることを示した；（ｂ）示差走査熱量測定（ＤＳＣ）分析は、９８．３℃で広い吸熱、ならびに２２４．１℃および２５６．８℃で発熱を示した；（ｃ）熱重量（ＴＧ）分析は、２５０℃で塩の３．８％重量損失を示した；（ｄ）蒸気収着分析（ＤＶＳ）は、塩が、０から９５％ＲＨで３７％重量増加の吸湿性を示すことを示した；および（ｅ）溶解性は水に対して３０ｍｇ／ｍＬ超であった。
【実施例４】
【００５４】
ｔｒａｎｓ−４−［４−アミノ−５−（７−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−イル）イミダゾ［５，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル］シクロヘキサンカルボン酸Ｌ−アルギニン塩。
【００５５】
ｔｒａｎｓ−４−［４−アミノ−５−（７−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−イル）−イミダゾ［５，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル］シクロヘキサンカルボン酸（１１．１ｇ、２７．４ｍｍｏｌ）およびＬ−アルギニン（５．７２ｇ、３２．９ｍｍｏｌ）をＨ２Ｏ（７８．０ｍＬ）およびＥｔＯＨ（７８．０ｍＬ）に希釈した。懸濁液を加熱還流して透明な溶液とし、それからゆっくりと室温に冷却した。１６時間後、懸濁液を氷浴で３０分間冷却してろ過した。オフホワイト固体を８０℃で２日間減圧乾燥し、表題化合物を得た（１２．９ｇ、収率８１％）。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：δ１．５９−１．７８（ｍ，３Ｈ），１．７９−１．９０（ｍ，３Ｈ），２．１３（ｂｒｄ，Ｊ＝１０．８Ｈｚ，４Ｈ），２．３５（ｔｔ，Ｊ＝１２．４，３．６Ｈｚ，１Ｈ），３．２０−３．４２（ｍ，１Ｈ），３．３７（ｔｔ，Ｊ＝１２．０，２．８Ｈｚ，１Ｈ），３．６６（ｂｒｓ，４Ｈ），３．９８（ｓ，３Ｈ），６．７２（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），６．７２（ｓ，１Ｈ），７．０１（ｄｄ，Ｊ＝８．０，８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．２２（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），７．８４（ｓ，１Ｈ）。Ｘ線粉末回折分析（ＸＲＰＤ）は、この塩が非晶質であることを示した。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ナトリウム、カルシウム、Ｌ−アルギニン、マグネシウム、カリウム、Ｎ，Ｎ−ジエチルエタノールアミン、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン、またはトロメタミンから選択される、ｔｒａｎｓ−４−［４−アミノ−５−（７−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−イル）イミダゾ［５，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル］シクロヘキサンカルボン酸の医薬的に許容される塩。
【請求項２】
塩の形は、ナトリウム、カルシウム、またはＬ−アルギニンから選択される、請求項１に記載の塩。
【請求項３】
塩の形は、マグネシウム、カリウム、Ｎ，Ｎ−ジエチルエタノールアミン、またはＮ−メチル−Ｄ−グルカミンから選択される、請求項１に記載の塩。
【請求項４】
塩の形は、トロメタミンである、請求項１に記載の塩。
【請求項５】
トロメタミン塩の水和物または溶媒和物の形である、請求項１に記載の塩。
【請求項６】
実質的に非晶質形である、請求項１から５のいずれか一項に記載の塩。
【請求項７】
実質的に結晶形である、請求項１から５のいずれか一項に記載の塩。
【請求項８】
少なくとも約９５重量％の量が結晶で存在する、請求項１から５のいずれか一項に記載の塩。
【請求項９】
実質的に単一の結晶形の量で存在する、請求項１から５のいずれか一項に記載の塩。
【請求項１０】
４０℃および７５％ＲＨで３０日間で約１重量％以下が分解する、請求項１から９のいずれか一項に記載の塩。
【請求項１１】
図１のものと実質的に相似したＸ線粉末回折パターンを示すトロメタミン塩である、請求項１に記載の塩。
【請求項１２】
実質的に実施例１のものである１３Ｃ ＮＭＲスペクトルを示す、請求項４または７から１１のいずれか一項に記載の塩。
【請求項１３】
９０から９５％ＲＨで約２から４％の吸湿性を有する、請求項４または７から１２のいずれか一項に記載の塩。
【請求項１４】
ＤＳＣ分析により約２０２から２１１℃で鋭い吸熱を示す、請求項４または７から１３のいずれか一項に記載の塩。
【請求項１５】
水に対して少なくとも約６ｍｇ／ｍＬの溶解性を有する、請求項４または７から１４のいずれか一項に記載の塩。
【請求項１６】
図２のものと実質的に相似したＸ線粉末回折パターンを示すカルシウム塩である、請求項１に記載の塩。
【請求項１７】
少なくとも１種の医薬的に許容される賦形剤とともに、またはこれを含まずに配合された請求項１から１６のいずれか一項に記載の塩を含む薬学的組成物。
【請求項１８】
治療を必要としている患者に請求項１から１６のいずれか一項に記載の塩を有効量で投与することを含む、腫瘍の治療法。
【請求項１９】
治療を必要としている患者に請求項１から１６のいずれか一項に記載の塩を有効量で投与することを含む、リンパ腫または卵巣癌の治療法。
【請求項１】
ナトリウム、カルシウム、Ｌ−アルギニン、マグネシウム、カリウム、Ｎ，Ｎ−ジエチルエタノールアミン、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン、またはトロメタミンから選択される、ｔｒａｎｓ−４−［４−アミノ−５−（７−メトキシ−１Ｈ−インドール−２−イル）イミダゾ［５，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−７−イル］シクロヘキサンカルボン酸の医薬的に許容される塩。
【請求項２】
塩の形は、ナトリウム、カルシウム、またはＬ−アルギニンから選択される、請求項１に記載の塩。
【請求項３】
塩の形は、マグネシウム、カリウム、Ｎ，Ｎ−ジエチルエタノールアミン、またはＮ−メチル−Ｄ−グルカミンから選択される、請求項１に記載の塩。
【請求項４】
塩の形は、トロメタミンである、請求項１に記載の塩。
【請求項５】
トロメタミン塩の水和物または溶媒和物の形である、請求項１に記載の塩。
【請求項６】
実質的に非晶質形である、請求項１から５のいずれか一項に記載の塩。
【請求項７】
実質的に結晶形である、請求項１から５のいずれか一項に記載の塩。
【請求項８】
少なくとも約９５重量％の量が結晶で存在する、請求項１から５のいずれか一項に記載の塩。
【請求項９】
実質的に単一の結晶形の量で存在する、請求項１から５のいずれか一項に記載の塩。
【請求項１０】
４０℃および７５％ＲＨで３０日間で約１重量％以下が分解する、請求項１から９のいずれか一項に記載の塩。
【請求項１１】
図１のものと実質的に相似したＸ線粉末回折パターンを示すトロメタミン塩である、請求項１に記載の塩。
【請求項１２】
実質的に実施例１のものである１３Ｃ ＮＭＲスペクトルを示す、請求項４または７から１１のいずれか一項に記載の塩。
【請求項１３】
９０から９５％ＲＨで約２から４％の吸湿性を有する、請求項４または７から１２のいずれか一項に記載の塩。
【請求項１４】
ＤＳＣ分析により約２０２から２１１℃で鋭い吸熱を示す、請求項４または７から１３のいずれか一項に記載の塩。
【請求項１５】
水に対して少なくとも約６ｍｇ／ｍＬの溶解性を有する、請求項４または７から１４のいずれか一項に記載の塩。
【請求項１６】
図２のものと実質的に相似したＸ線粉末回折パターンを示すカルシウム塩である、請求項１に記載の塩。
【請求項１７】
少なくとも１種の医薬的に許容される賦形剤とともに、またはこれを含まずに配合された請求項１から１６のいずれか一項に記載の塩を含む薬学的組成物。
【請求項１８】
治療を必要としている患者に請求項１から１６のいずれか一項に記載の塩を有効量で投与することを含む、腫瘍の治療法。
【請求項１９】
治療を必要としている患者に請求項１から１６のいずれか一項に記載の塩を有効量で投与することを含む、リンパ腫または卵巣癌の治療法。
【図１】
【図２】
【図２】
【公表番号】特表２０１１−５１５４１０（Ｐ２０１１−５１５４１０Ａ）
【公表日】平成２３年５月１９日（２０１１．５．１９）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１１−５００９２０（Ｐ２０１１−５００９２０）
【出願日】平成２１年３月１８日（２００９．３．１８）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００９／０３７５０５
【国際公開番号】ＷＯ２００９／１１７４８２
【国際公開日】平成２１年９月２４日（２００９．９．２４）
【出願人】（５１０１４３２６２）オーエスアイ・フアーマスーテイカルズ・インコーポレーテツド (8)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２３年５月１９日（２０１１．５．１９）
【国際特許分類】
【出願日】平成２１年３月１８日（２００９．３．１８）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００９／０３７５０５
【国際公開番号】ＷＯ２００９／１１７４８２
【国際公開日】平成２１年９月２４日（２００９．９．２４）
【出願人】（５１０１４３２６２）オーエスアイ・フアーマスーテイカルズ・インコーポレーテツド (8)
【Ｆターム（参考）】
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