抗コリン作用剤
従来から用いられている抗コリン作用剤にしばしば見られる副作用を軽減した新規な抗コリン作用剤を見出し、神経因性膀胱、膀胱痙縮、神経性膀胱炎及び遺尿症などによる頻尿又は各種の尿失禁をはじめとする膀胱異常、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、可逆性閉塞性肺疾患（ＲＯＰＤ）又は胆石症や腸疾患による疝痛に対する長期投与可能で安全な治療剤を提供する。
本発明としては、例えば、有効成分として、（４−エチルアミノ−１，１−ジメチル−２−ブチン−１−イル）−（Ｒ）−２−シクロヘキシル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセテート又はその医薬上許容される塩を含有する抗コリン作用剤である。
本発明としては、例えば、有効成分として、（４−エチルアミノ−１，１−ジメチル−２−ブチン−１−イル）−（Ｒ）−２−シクロヘキシル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセテート又はその医薬上許容される塩を含有する抗コリン作用剤である。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、次の化学式〔１Ｒ〕で表される化合物（４−エチルアミノ−１，１−ジメチル−２−ブチン−１−イル）−（Ｒ）−２−シクロヘキシル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセテート（以下、「化合物〔１Ｒ〕」という）又はその医薬上許容される塩を有効成分とする抗コリン作用剤に関するものである。
【化１】
【背景技術】
【０００２】
従来から、抗コリン作用剤は、頻尿・尿失禁治療における第一選択薬として使用されている（Ｅｘｐｅｒｔ Ｏｐｉｎｉｏｎ ｏｎ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ Ｐａｔｅｎｔｓ， １１（１）， ｐ．１７−３１ （２００１））。しかしながら、口渇、散瞳、嗜眠状態、悪心、便秘、動悸、頻脈等の副作用（Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ， ６４， ｐ．３９５−４０１ （１９９９））を伴い、しばしば問題となっている。これら副作用の軽減を図ることは、長期投与を必要とする治療において、抗コリン作用剤の利用価値を高めるものである。
抗コリン作用剤は、上記のほか慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）（Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ａｓｔｈｍａ， ３４（５）， ｐ．３５７−３６８ （１９９７））、可逆性閉塞性肺疾患（ＲＯＰＤ）、胆石症や腸疾患による疝痛の治療剤（Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ， ３， ｐ．４７５−４７９ （１９９８）； Ｂａｉｌｌｉｅｒｅ’ｓ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ， １３（３）， ｐ．４６１−４７１ （１９９９））として有用であることが知られている。
【０００３】
次の化学式〔２〕で表される（４−ジエチルアミノ−１，１−ジメチル−２−ブチン−１−イル）−２−シクロヘキシル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセテート（ラセミ体）（以下、「化合物〔２〕」という）は、抗コリン作用を有し、頻尿やその他各種の尿失禁をはじめとする膀胱異常の治療剤として有用であることが知られている。また、血漿中半減期が長く持続性に優れ、毒性も非常に低いことが知られている（例えば、特許文献１及び非特許文献１参照）。
【化２】
【０００４】
次の化学式〔１〕で表される（４−エチルアミノ−１，１−ジメチル−２−ブチン−１−イル）−２−シクロヘキシル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセテート（ラセミ体）（以下、「化合物〔１〕」という）は、化合物〔２〕の主要な活性代謝物であることが知られている（例えば、非特許文献１参照）。
【化３】
【０００５】
また、化合物〔２〕と比較して、活性代謝物である化合物〔１〕は、より抗コリン作用が強いことが知られている（例えば、非特許文献１参照）。
頻尿・尿失禁治療剤として開発されている化合物〔２〕の安全性評価の一環として、化合物〔２〕、化合物〔２〕の光学活性体である次の化学式〔２Ｒ〕で表される（４−ジエチルアミノ−１，１−ジメチル−２−ブチン−１−イル）−（Ｒ）−２−シクロヘキシル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセテート（以下、「化合物〔２Ｒ〕」という）及び化学式〔２Ｓ〕で表される（４−ジエチルアミノ−１，１−ジメチル−２−ブチン−１−イル）−（Ｓ）−２−シクロヘキシル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセテート（以下、「化合物〔２Ｓ〕」という）、並びに化合物〔１〕、化合物〔１〕の光学活性体である化合物〔１Ｒ〕及び次の化学式〔１Ｓ〕で表される（４−エチルアミノ−１，１−ジメチル−２−ブチン−１−イル）−（Ｓ）−２−シクロヘキシル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセテート（以下、「化合物〔１Ｓ〕」という）について、それぞれの単回投与毒性試験が腹空内投与により行われ、評価されている（例えば、非特許文献２参照）。
【化４】
しかしながら、これまで化合物〔１〕の光学活性体である化合物〔１Ｒ〕の抗コリン作用及び副作用の一つと考えられる唾液分泌抑制作用については知られていない。
【特許文献１】特公平６−６９９９６号公報
【非特許文献１】Ｇｅｎｅｒａｌ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ， ２９（５）， ｐ．７７１−７７８ （１９９７）
【非特許文献２】Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｔｏｘｉｃｏｌｏｇｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ， ２２， Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ Ｉ， ｐ．１５−２５ （１９９７）
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明の目的は、主として従来から用いられている抗コリン作用剤にしばしば見られる副作用を軽減した新規な抗コリン作用剤を見出し、神経因性膀胱、膀胱痙縮、神経性膀胱炎及び遺尿症などによる頻尿又は各種の尿失禁をはじめとする膀胱異常、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、可逆性閉塞性肺疾患（ＲＯＰＤ）又は胆石症や腸疾患による疝痛に対する長期投与可能で安全な治療剤を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者らは、鋭意研究を重ねた結果、上記目的を達成しうる化合物を見出し、本発明を完成するに至った。
本発明としては、例えば、有効成分として、化合物〔１Ｒ〕又はその医薬上許容される塩を含有する抗コリン作用剤（以下、「本発明抗コリン作用剤」という）を挙げることができる。
本発明の特徴として、本発明抗コリン作用剤が、膀胱収縮抑制作用を有するだけではなく、膀胱収縮抑制作用と比較して抗コリン作用に関連する副作用の一つである唾液分泌抑制作用が弱いという点を挙げることができる。
【０００８】
本明細書において使用する用語の定義は、以下の通りである。
「抗コリン作用剤」とは、例えば、神経因性膀胱、膀胱痙縮、神経性膀胱炎及び遺尿症などによる頻尿又は各種の尿失禁をはじめとする膀胱異常、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、可逆性閉塞性肺疾患（ＲＯＰＤ）又は胆石症や腸疾患による疝痛の治療に有用な薬剤をいう。
「慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）」とは、１）慢性の不可逆性の気道閉塞がある、２）慢性気管支炎、肺気腫、気管支喘息のうち２〜３疾患が混在して区別が困難である、３）典型的な上記３疾患は除外するという３条件に該当するものと定義され、気道の障害や機能不全によって主として閉塞性の換気障害をきたし、そのために運動時の呼吸困難を主症状とする疾患群をいう。
「可逆性閉塞性肺疾患（ＲＯＰＤ）」としては、例えば、喘息等を挙げることができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００９】
以下、本発明抗コリン作用剤について詳述する。
本発明抗コリン剤の有効成分である化合物〔１Ｒ〕を製造する方法としては、例えば、以下のプロセスを挙げることができる。
化合物〔１Ｒ〕を製造するための原料となるラセミ化合物〔１〕は、例えば、特公平６−６９９９６号に記載の方法又はそれらに準じた方法にしたがって製造することができる。
続いて化合物〔１〕から、光学異性体分離カラムを装着した高速液体クロマトグラフィー（以下、「ＨＰＬＣ 」という）装置により、化合物〔１Ｒ〕を容易に取得することができる。
【００１０】
また、他の化合物〔１Ｒ〕を製造する方法としては、例えば、（Ａ）〜（Ｃ）の工程を含有する、ラセミ体である化合物〔２〕を出発原料とする方法を挙げることができる。
（Ａ）ラセミ体である化合物〔２〕をＨＰＬＣ装置により光学分割する工程
化合物〔２〕は、例えば、特公平６−６９９９６号に記載の方法又はそれらに準じた方法にしたがって製造することができる。化合物〔２〕から、光学異性体分離カラムを装着したＨＰＬＣ装置により、化合物〔２Ｒ〕を容易に取得することができる。
（Ｂ）臭化プロパルギル化反応の工程
光学分割した化合物〔２Ｒ〕を反応溶媒に溶解し、ブロモシアニドと反応させることによって、対応する次の化学式〔３〕で表されるプロパルギルブロミド誘導体（以下、「化合物〔３〕」という）を製造することができる。本反応の反応溶媒としては、この種の反応に通常使用されるものを用いることができる。例えば、エーテル、テトラヒドロフラン、１，４−ジオキサン等のエーテル系溶媒等を挙げることができる。反応温度としては、−３０℃〜１００℃で反応を行うことができる。
反応時間は、使用する溶媒、反応温度等によって異なるが、通常３０分〜４８時間が適当である。ブロモシアニドの使用量は、化合物〔２Ｒ〕に対して１〜５倍モル量が好ましい。
【化５】
（Ｃ）エチルアミノ化反応の工程
化合物〔１Ｒ〕は、エチルアミン水溶液中に、前記工程で合成した化合物〔３〕を加えることにより製造することができる。反応溶媒としては、例えば、メタノール、エタノールなどのアルコール類、水、又はこれらの混合溶媒を挙げることができる。反応温度としては、−３０℃〜１００℃で反応することができる。反応時間は、使用する溶媒、反応温度等によって異なるが、通常３０分〜４８時間が適当である。エチルアミンの使用量は、化合物〔３〕に対して１〜１００倍モル量が好ましい。
【化６】
【００１１】
このようにして製造される化合物〔１Ｒ〕は、それ自体公知の手段、例えば、濃縮、液性変換、転溶、溶媒抽出、結晶化、再結晶、分留、クロマトグラフィー等により分離精製することができる。
化合物〔１Ｒ〕は、塩基性を示す化合物であるので、遊離の塩基のまま医薬として用いることができるが、公知の方法により医薬上許容される塩の形にして医薬として用いることができる。
化合物〔１Ｒ〕の「塩」としては、医薬上許容される塩、例えば、塩酸、硫酸、硝酸、リン酸、フッ化水素酸、臭化水素酸等の無機酸の塩、及び酢酸、酒石酸、乳酸、クエン酸、フマル酸、マレイン酸、コハク酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、トルエンスルホン酸、ナフタレンスルホン酸、カンファースルホン酸等の有機酸の塩を挙げることができる。好ましい塩としては、塩酸塩を挙げることができる。
例えば、化合物〔１Ｒ〕の塩酸塩は、化合物〔１Ｒ〕を塩化水素のアルコール溶液又はジエチルエーテル溶液で処理し、析出結晶をろ取するか、結晶が析出しない場合は、溶液を濃縮して結晶を析出させた後、ろ取することにより得ることができる。
【００１２】
本発明抗コリン作用剤は、後記する試験例に示すように優れた抗コリン作用を有しており、例えば、神経因性膀胱、膀胱痙縮、神経性膀胱炎及び遺尿症などによる頻尿又は各種の尿失禁をはじめとする膀胱異常、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、可逆性閉塞性肺疾患（ＲＯＰＤ）又は胆石症や腸疾患による疝痛の治療剤として有用である。
また、本発明抗コリン作用剤は、後記するカルバコール誘発膀胱収縮と唾液分泌に対する作用をみる試験例に示すように、膀胱収縮抑制作用に比べて副作用である唾液分泌抑制作用が弱いという既存の医薬品にはない優れた特徴を有し、長期投与を必要とする上記疾患の治療剤として有用である。
【００１３】
本発明抗コリン剤を医薬として投与する場合、化合物〔１Ｒ〕又はその医薬上許容される塩をそのまま又は医薬的に許容される無毒性かつ不活性の担体中に、例えば、 ０．１％〜９９．５％、好ましくは ０．５％〜９０％含有する医薬組成物として、人を含む哺乳動物に投与される。
医薬上許容される担体としては、固形、半固形、又は液状の希釈剤、充填剤、及びその他の処方用の助剤一種以上が用いられる。医薬組成物は、投与単位形態で投与することが望ましい。医薬組成物は、経口的又は非経口的（例えば、注射、経直腸等）に投与することができる。これらの投与方法に適した剤型で投与されるのはもちろんである。例えば、経口投与が好ましい。
本発明抗コリン剤の用量は、年齢、体重、疾病の性質、程度等の患者の状態、投与経路を考慮した上で調整することが望ましいが、通常は、成人に対して化合物〔１Ｒ〕又はその医薬上許容される塩の有効成分量として、経口投与の場合、１日あたり、０．１ｍｇ〜１００ｍｇ／成人の範囲、好ましくは、０．１ｍｇ〜５０ｍｇ／成人の範囲である。場合によっては、これ以下でも足りるし、また逆にこれ以上の用量を必要とすることもある。通常、１日１回又は数回に分けて投与することができる。
静脈内投与の場合、１日あたり、０．００１〜１０ｍｇ／成人の範囲、好ましくは、０．００１〜３ｍｇ／成人の範囲である。場合によっては、これ以下でも足りるし、また逆にこれ以上の用量を必要とすることもある。通常、１日１回又は数回に分けて投与することができる。
経口投与は固形又は液状の用量単位、例えば、末剤、散剤、錠剤、糖衣剤、カプセル剤、顆粒剤、懸濁剤、液剤、シロップ剤、ドロップ剤、舌下錠その他の剤型によって行うことができる。
末剤は、化合物〔１Ｒ〕又はその医薬上許容される塩を適当な細かさにすることにより製造される。散剤は、化合物〔１Ｒ〕又はその医薬上許容される塩を適当な細かさと成し、次いで同様に細かくした医薬用担体、例えば、澱粉、マンニトールのような可食性炭水化物その他と混合することにより製造される。必要に応じ、風味剤、保存剤、分散剤、着色剤、香料その他のものを混ぜてもよい。
カプセル剤は、まず上述のようにして粉末状となった末剤や散剤あるいは錠剤の項で述べるように顆粒化したものを、例えば、ゼラチンカプセルのようなカプセル外皮の中へ充填することにより製造される。滑沢剤や流動化剤、例えば、コロイド状のシリカ、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、固形のポリエチレングリコールのようなものを粉末状態のものに混合し、然るのちに充填操作を行うこともできる。崩壊剤や可溶化剤、例えば、カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースカルシウム、低置換度ヒドロキシプロピルセルロース、クロスカルメロースナトリウム、カルボキシメチルスターチナトリウム、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウムを添加すれば、カプセル剤が摂取されたときの医薬の有効性を改善することができる。
また、化合物〔１Ｒ〕又はその医薬上許容される塩の微粉末を植物油、ポリエチレングリコール、グリセリン、界面活性剤中に懸濁分散し、これをゼラチンシートで包んで軟カプセル剤とすることができる。
錠剤は、賦形剤を加えて粉末混合物を作り、顆粒化もしくはスラグ化し、次いで崩壊剤又は滑沢剤を加えたのち打錠することにより製造される。
粉末混合物の製造には、適当に粉末化された物質を上述の希釈剤やベースと混合し、必要に応じ結合剤（例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、ポリビニルアルコール）、溶解遅延化剤（例えば、パラフィン）、再吸収剤（例えば、四級塩）や吸着剤（例えば、ベントナイト、カオリン、リン酸ジカルシウム）を併用することができる。粉末混合物は、まず結合剤、例えば、シロップ、澱粉糊、アラビアゴム、セルロース溶液又は高分子物質溶液で湿らせ、攪拌混合し、これを乾燥、粉砕して顆粒とすることができる。このように粉末を顆粒化するかわりに、まず打錠機にかけたのち、得られる不完全な形態のスラグを破砕して顆粒にすることも可能である。このようにして作られる顆粒は、滑沢剤としてステアリン酸、ステアリン酸塩、タルク、ミネラルオイルその他を添加することにより、互いに付着することを防ぐことができる。このように滑沢化された混合物を次いで打錠する。こうして製造した素錠にフィルムコーティングや糖衣を施すことができる。
また、化合物〔１Ｒ〕又はその医薬上許容される塩は、上述のように顆粒化やスラグ化の工程を経ることなく、流動性の不活性担体と混合したのちに直接打錠をしてもよい。シェラックの密閉被膜からなる透明又は半透明の保護被覆、糖や高分子材料の被覆、及び、ワックスよりなる磨上被覆の如きも用いうる。他の経口投与剤型、例えば、溶液、シロップ、エリキシルもまたその一定量が薬物の一定量を含有するように用量単位形態にすることができる。シロップは、化合物〔１Ｒ〕又はその医薬上許容される塩を適当な香味水溶液に溶解して製造され、またエリキシルは非毒性のアルコール性担体を用いることにより製造される。懸濁剤は、化合物〔１Ｒ〕又はその医薬上許容される塩を非毒性担体中に分散させることにより処方される。可溶化剤や乳化剤（例えば、エトキシ化されたイソステアリルアルコール類、ポリオキシエチレンソルビトールエステル類）、保存剤、風味賦与剤（例えば、ペパーミント油、サッカリン）その他もまた必要に応じ添加することができる。
必要であれば、経口投与のための用量単位処方は、マイクロカプセル化してもよい。該処方はまた被覆をしたり、高分子・ワックス等中に埋め込んだりすることにより作用時間の延長や持続放出をもたらすこともできる。
非経口投与として注射剤、坐剤等を用いることができる。皮下・筋肉又は静脈内注射用とした液状用量単位形態、例えば、溶液や懸濁剤の形態を用いることによって行うことができる。これらのものは、化合物〔１Ｒ〕又はその医薬上許容される塩の一定量を、注射の目的に適合する非毒性の液状担体、例えば、水性や油性の媒体に懸濁し又は溶解し、次いで該懸濁液又は溶液を滅菌することにより製造される。注射液を等張にするために非毒性の塩や塩溶液を添加してもよい。更に安定剤、保存剤、乳化剤等を併用することもできる。
直腸投与は、化合物〔１Ｒ〕又はその医薬上許容される塩を低融点の、水に可溶又は不溶の固体、例えば、ポリエチレングリコール、カカオ脂、半合成の油脂（例えば、ウイテプゾール／登録商標）、高級エステル類（例えば、パルミチン酸ミリスチルエステル）及びそれらの混合物に溶解又は懸濁させて製造した坐剤等を用いることによって行うことができる。
【実施例】
【００１４】
以下に参考例、実施例、試験例及び製剤例を掲げて本発明を更に詳しく説明するが、本発明はこれらのみに限定されるものではない。化合物の比旋光度は２０℃で測定した。なお、化合物〔１〕及び〔２〕は、例えば、特公平６−６９９９６号に記載の方法又はそれらに準じた方法にしたがって製造した。
【００１５】
実施例１
化合物〔１Ｒ〕一塩酸塩
工程１
ＨＰＬＣの手法による光学分割
化合物〔２〕２．４ｇを５０ｍｌの溶媒（ｎ−ヘキサン：２−プロパノール＝１００：１）に溶解し、下記光学分割条件で分離精製した。
［光学分割条件］
ＨＰＬＣ 装置： 送液ユニット：ＬＣ−８Ａ（島津製作所社製）
検出器：ＳＰＤ−６ＡＶ（島津製作所社製）
光学異性体分離カラム：ＣＨＩＲＡＬＣＥＬ（登録商標） ＯＦ
＜１ｃｍφｘ２５ｃｍ＞２本（ダイセル化学社製）
＜１ｃｍφｘ５ｃｍ＞１本（ダイセル化学社製）
カラム温度 ：室温
移動相：ｎ−ヘキサン／２−プロパノール＝１００／１
流量：９ｍｌ／分
紫外線可視分光器検出波長：２５４ｎｍ
注入量：２ｍｌ
はじめに溶出された化合物（化合物Ａ）とあとから溶出された化合物（化合物Ｂ）を別々に４０℃で減圧下濃縮後、常法により塩酸塩とし、さらにエタノールから再結晶を行い単離した。かかる塩酸塩の収量、元素分析値、比旋光度［α］Ｄ値、光学純度は以下の通りであった。
化合物Ａ：収量：１．２０ｇ
元素分析値（Ｃ２４Ｈ３５ＮＯ３・ＨＣｌ・０．２Ｈ２Ｏとして）
計算値（％）Ｃ：６８．３１ Ｈ：８．６０ Ｎ：３．３２
実測値（％）Ｃ：６８．３６ Ｈ：８．８８ Ｎ：３．３０
比旋光度：［α］Ｄ２０＝＋４１．３３°（ｃ＝１．０２１， メタノール）
光学純度： ９９．５％ｅ．ｅ．
化合物Ｂ：収量：１．１９ｇ
元素分析値（Ｃ２４Ｈ３５ＮＯ３・ＨＣｌ・０．２Ｈ２Ｏとして）
計算値（％）Ｃ：６７．７３ Ｈ：８．６２ Ｎ：３．２９
実測値（％）Ｃ：６７．７９ Ｈ：８．７３ Ｎ：３．１４
比旋光度：［α］Ｄ２０＝−４２．９１°（ｃ＝１．００２， メタノール）
光学純度： ９９．４％ｅ．ｅ．
【化７】
工程２
構造決定
化合物Ａ及びＢの絶対配置は、絶対配置が既知である化合物（α−シクロヘキシル−α−グリコール酸）に誘導し、文献記載の比旋光度と誘導して得られた化合物の比旋光度とを比較することによって決定した（後述する［化８］参照）。
化合物Ｂ０．３ｇをメタノール５ｍｌに溶解し、１０％水酸化ナトリウム水溶液２ｍｌを加え、更にメタノール２ｍｌを加え、混合物を均一化した。その後、９時間加熱還流した。反応混合物を減圧条件下濃縮し、残渣を水に溶解し、エーテルで洗浄した。水相を１０％塩酸で酸性とし、エーテルで抽出作業を行った。有機相を水洗後、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧条件下溶媒を留去し、生じた結晶をろ取し無色針状結晶０．１３ｇを得た。比旋光度を測定すると、［α］Ｄ＝−２５．３０°であった。
同様に、化合物Ａにおいても上記の方法に従ってα−シクロヘキシル−α−グリコール酸へ誘導した結果、比旋光度は［α］Ｄ＝２４．０７°であった。
先行文献（Ｂｕｌｌｅｔｉｎ ｄｅ ｌａ Ｓｏｃｉｅｔｅ Ｃｈｉｍｉｑｕｅ ｄｅ Ｆｒａｎｃｅ， Ｎ゜ １−２， ＩＩ−７７−８２ （１９８４））に、（Ｓ）−α−シクロヘキシル−α−グリコール酸の比旋光度が、［α］Ｄ＝＋２５．２°であると記載されている。化合物Ａから誘導したα−シクロヘキシル−α−グリコール酸の比旋光度［α］Ｄ＝＋２４．０７°と一致した。
したがって、化合物Ａは、化合物〔２Ｓ〕であり、化合物Ｂは、化合物〔２Ｒ〕であると決定した。
【化８】
工程３
ブロモ化反応
化合物〔２Ｒ〕一塩酸塩１０ｇをクロロホルム４０ｍｌに溶解し、水４０ｍｌを加えて撹拌した。炭酸水素カリウム４．０ｇを水２０ｍｌに溶解した溶液を加え、ｐＨ８〜９に反応混合液を調整し分液した。有機層を水洗し、さらに、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧下溶媒を留去した。化合物〔２Ｒ〕を９．３ｇ得た。
得られた化合物〔２Ｒ〕を無水のエーテル５０ｍｌに溶解し、氷冷下撹拌した。内温が２℃になったことを確認し、滴下ロートを使用してブロモシアニド４．０ｇの無水エーテル５０ｍｌ溶液を３０分間かけて滴下した。その後一晩室温で撹拌した。
再度氷冷下において撹拌し、内温が２℃になったところで、５％塩酸４０ｍｌを加え３０分間撹拌した。分液作業を行い、有機層は、水洗し、さらに飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧下溶媒を留去した。得られた油状物は、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ワコーゲル（登録商標）Ｃ−２００、酢酸エチル：ｎ−ヘキサン＝１：５０〜１：９）により精製し、無色油状物を６．９１ｇ得た。
工程４
エチルアミノ化反応
７０％エチルアミン水溶液１００ｍｌを氷冷下で撹拌し、工程３において得られた無色油状物６．９ｇのメタノール３０ｍｌ溶液を滴下した。滴下終了後、同温にて６時間撹拌し、減圧下で溶媒を留去した。残渣をエーテルで抽出作業を行い、有機層を水洗し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧下溶媒を留去し、油状物６．２５ｇを得た。
油状物は、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ワコーゲル（登録商標）Ｃ−２００、酢酸エチル：ｎ−ヘキサン＝１：２０〜３：２〜酢酸エチル）により精製し、無色油状物５．７５ｇを得た。無色油状物を無水のエーテル６０ｍｌに溶解し、氷冷下において１Ｍ ＨＣｌエーテル溶液１７ｍｌを使用し塩酸塩とし、租結晶をろ取しエーテルで洗浄後通風乾燥した。得られた租結晶をエタノール５０ｍｌに溶解し、酢酸エチル、エーテルを用いて再結晶後、エーテルで洗浄し減圧乾燥した。化合物〔１Ｒ〕一塩酸塩を無色結晶として５．７７ｇ得た。
元素分析値（Ｃ２２Ｈ３１ＮＯ３・ＨＣｌとして）
計算値（％）Ｃ：６７．０７ Ｈ：８．１９ Ｎ：３．５６
実測値（％）Ｃ：６７．０４ Ｈ：８．３２ Ｎ：３．５８
ＭＳ（ＥＩ）：ｍ／ｚ ＝ ３５７［Ｍ＋］
比旋光度：［α］Ｄ２０＝−３８．０９°（ｃ＝１．０９２， メタノール）
【００１６】
比較例１ 化合物〔１Ｓ〕一塩酸塩
実施例１の工程３及び４と同様の手法により、化合物〔２Ｒ〕一塩酸塩の代わりに、化合物〔２Ｓ〕一塩酸塩１０ｇを使用し、化合物〔１Ｓ〕一塩酸塩を無色結晶として５．７５ｇ得た。
元素分析値（Ｃ２２Ｈ３１ＮＯ３・ＨＣｌとして）
計算値（％）Ｃ：６７．０７ Ｈ：８．１９ Ｎ：３．５６
実測値（％）Ｃ：６７．０７ Ｈ：８．３５ Ｎ：３．５６
ＭＳ（ＥＩ）：ｍ／ｚ ＝ ３５７［Ｍ＋］
比旋光度：［α］Ｄ２０＝３７．８２°（ｃ＝１．０８４， メタノール）
【００１７】
以下に、被験薬物として、化合物〔１〕、化合物〔１Ｒ〕（実施例１の化合物）、化合物〔１Ｓ〕（比較例１の化合物）の一塩酸塩を使用して行った薬理試験の結果を示す。但し、試験例３のみ比較対照薬物として代表的な抗コリン作用薬である塩酸オキシブチニンの試験データも示している。
【００１８】
試験例１ ラット摘出排尿筋のカルバコールによる収縮反応に対する抑制作用
体重２５０−４５０ｇの雄性Ｓｌｃ／ＳＤラットを用いた。エーテル麻酔下、放血致死させた後、膀胱を摘出し、膀胱体部より幅約２ｍｍ， 長さ約５ｍｍの切片を縦走方向に切り出し、これを排尿筋標本とした。標本を１０ｍｌのＫｒｅｂｓ液を満たし、混合ガスを通気したマグヌス槽内に１ｇの負荷をかけて懸垂した後、６０分間平衡化した。標本の張力変化は等尺性トランスデューサー（Ｔ７−３０−２４０， Ｔｏｙｏ Ｂａｌｄｗｉｎ， Ｔｏｋｙｏ）を用い、歪圧力アンプ（ＡＰ−６２０Ｇ， 日本光電工業社製， 東京）を介してレクチコーダー（ＲＪＧ−４０２４， 日本光電工業社製）上に記録した。
標本を２−３回洗浄し、６０分間平衡化した後、カルバコールを累積的に適用して用量反応曲線を得た。その後、標本の洗浄を静止時の張力に戻るまで２−３回繰り返した。この様なカルバコールの累積適用を２−３回繰り返して、一定の用量反応を得た後、被験薬物を処置し、再びカルバコールを累積的に適用した。なお、α−アドレナリン受容体およびβ−アドレナリン受容体を介した作用を除くために、ｐｈｅｎｔｏｌａｍｉｎｅ（３×１０−６Ｍ）およびＰｒｏｐｒａｎｏｌｏｌ（１０−６Ｍ）を栄養液中に加えておいた。被験薬物の前処置時間は３０分とした。各カルバコール収縮反応における用量反応曲線より競合的拮抗作用（抗コリン作用）の効力を示すｐＡ２値をＡｒｕｎｌａｋｓｈａｎａ ａｎｄ Ｓｃｈｉｌｄの方法により算出した。
結果を表１に示す。
【表１】
上記結果から明らかな通り、摘出ラット排尿筋のカルバコール収縮に対して、化合物〔１Ｒ〕は、化合物〔１〕よりも１．８２倍強い競合的拮抗作用を示した。一方、他の光学異性体である化合物〔１Ｓ〕は、競合的拮抗作用を示さなかった。
【００１９】
試験例２ ラット律動性膀胱収縮の振幅に対する抑制作用
９−１２週齢の雌性Ｓｌｃ／ＳＤラットを用いた。ウレタンにて麻酔した後、背位に固定した。下腹部を正中切開した後、尿管にカニューレ（Ｉｎｔｒａｍｅｄｉｃ ＰＥ１０， Ｃｌａｙ Ａｄａｍｓ， ＮＪ）を挿入し、腎臓からの尿を体外へ排泄させ、膀胱側の尿管は結紮した。外尿道口よりカニューレ（Ｉｎｔｒａｍｅｄｉｃ ＰＥ−６０）を膀胱内に挿入し、尿道先端部を軽く結紮した。カニューレの他端にＴ字管を連結し、一方は膀胱内圧測定用トランスデューサー（ＴＰ−２００Ｔ， 日本光電工業社製）に接続し、他方より注入ポンプ（ＳＴＣ−５２１， テルモ社製， 東京）を用いて０．５−０．８ｍｌの生理食塩液を膀胱内に注入し、律動性膀胱収縮を記録した。律動性膀胱収縮の振幅と頻度が安定したところで、被験薬物を大腿静脈に挿入したカニューレを介して投与した。各被験薬物は投与容量が１ｍｌ／ｋｇとなるように生理食塩液に溶解し、約１５分間隔で低用量（０．１， ０．３， １， ３， １０ｍｇ／ｋｇ）より累積的に投与した。
投与前値に対する被験薬物の抑制率を各用量について求め、振幅抑制作用のＩＤ３０値（３０％抑制用量）を最小自乗法により求めた。
結果を表２に示す。
【表２】
上記結果から、化合物〔１Ｒ〕は、ラセミ体である化合物〔１〕よりも強いラット律動性膀胱収縮の振幅に対する抑制作用を有することが明らかである。また、化合物〔１Ｓ〕は、ラット律動性膀胱収縮の振幅に対する抑制作用が弱く、試験例１の結果を反映したものとなった。
【００２０】
試験例３ カルバコール誘発膀胱収縮と唾液分泌に対する作用
９−１２週齢の雄性Ｓｌｃ／ＳＤラットを用いた。ウレタンにて麻酔した後、背位に固定した。下腹部を正中切開し、尿道を結紮した。尿管にカニューレ（Ｉｎｔｒａｍｅｄｉｃ ＰＥ１０）を挿入し、腎臓からの尿を体外へ排泄させ、膀胱側の尿管は結紮した。膀胱頂部に挿入したカニューレ（Ｉｎｔｒａｍｅｄｉｃ ＰＥ６０）の他端にＴ字管を連結し、一方は膀胱内圧測定用トランスデューサー（ＴＰ−２００Ｔ）に接続した。他方より膀胱収縮閾値量以下（０．２−０．３ｍｌ）の生理食塩液を膀胱内に注入した。唾液分泌量測定の為に口腔内に綿球を挿入した。まず、カルバコール（１０μｇ）静脈内投与により膀胱収縮圧と唾液分泌量を測定した。次いで、被験薬物の十二指腸内投与３０分後に再度カルバコール（１０μｇ）を静脈内投与し、同様の操作を繰り返し、被験薬物投与前後の差からそれぞれの抑制率を求めた。なお、膀胱収縮圧は投与直後に最大に達するため、１分以内の最大値とした。また、唾液分泌量は口腔内に５分間挿入した後の綿球湿重量から綿球重量を減じたものとした。
結果を表３に示す。
【表３】
上記結果から明らかな通り、代表的な抗コリン作用薬である塩酸オキシブチニンは、膀胱収縮より唾液分泌を強く抑制した。一方、化合物〔１〕及び化合物〔１Ｒ〕は、塩酸オキシブチオニンとは異なり、唾液分泌より膀胱収縮を強く抑制し、その作用は有意であった。
【００２１】
製剤例１
錠剤（内服錠）
処方１錠８０ｍｇ 中
化合物〔１Ｒ〕一塩酸塩 １０．０ｍｇ
トウモロコシ澱粉 ４６．６ｍｇ
結晶セルロース ２４．０ｍｇ
メチルセルロース ４．０ｍｇ
ステアリン酸マグネシウム ０．４ｍｇ
この割合の混合末を通常の方法により打錠成形し内服錠とする。
【産業上の利用可能性】
【００２２】
本発明抗コリン剤は、膀胱収縮抑制作用と比較して副作用である唾液分泌抑制作用が弱いという優れた特徴を有する。即ち、長期投与を必要とする神経因性膀胱、膀胱痙縮、神経性膀胱炎及び遺尿症などによる頻尿又は各種の尿失禁をはじめとする膀胱異常、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、喘息等の可逆性閉塞性肺疾患（ＲＯＰＤ）又は胆石症や腸疾患による疝痛の治療剤として有用である。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、次の化学式〔１Ｒ〕で表される化合物（４−エチルアミノ−１，１−ジメチル−２−ブチン−１−イル）−（Ｒ）−２−シクロヘキシル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセテート（以下、「化合物〔１Ｒ〕」という）又はその医薬上許容される塩を有効成分とする抗コリン作用剤に関するものである。
【化１】
【背景技術】
【０００２】
従来から、抗コリン作用剤は、頻尿・尿失禁治療における第一選択薬として使用されている（Ｅｘｐｅｒｔ Ｏｐｉｎｉｏｎ ｏｎ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ Ｐａｔｅｎｔｓ， １１（１）， ｐ．１７−３１ （２００１））。しかしながら、口渇、散瞳、嗜眠状態、悪心、便秘、動悸、頻脈等の副作用（Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ， ６４， ｐ．３９５−４０１ （１９９９））を伴い、しばしば問題となっている。これら副作用の軽減を図ることは、長期投与を必要とする治療において、抗コリン作用剤の利用価値を高めるものである。
抗コリン作用剤は、上記のほか慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）（Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ａｓｔｈｍａ， ３４（５）， ｐ．３５７−３６８ （１９９７））、可逆性閉塞性肺疾患（ＲＯＰＤ）、胆石症や腸疾患による疝痛の治療剤（Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ， ３， ｐ．４７５−４７９ （１９９８）； Ｂａｉｌｌｉｅｒｅ’ｓ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ， １３（３）， ｐ．４６１−４７１ （１９９９））として有用であることが知られている。
【０００３】
次の化学式〔２〕で表される（４−ジエチルアミノ−１，１−ジメチル−２−ブチン−１−イル）−２−シクロヘキシル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセテート（ラセミ体）（以下、「化合物〔２〕」という）は、抗コリン作用を有し、頻尿やその他各種の尿失禁をはじめとする膀胱異常の治療剤として有用であることが知られている。また、血漿中半減期が長く持続性に優れ、毒性も非常に低いことが知られている（例えば、特許文献１及び非特許文献１参照）。
【化２】
【０００４】
次の化学式〔１〕で表される（４−エチルアミノ−１，１−ジメチル−２−ブチン−１−イル）−２−シクロヘキシル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセテート（ラセミ体）（以下、「化合物〔１〕」という）は、化合物〔２〕の主要な活性代謝物であることが知られている（例えば、非特許文献１参照）。
【化３】
【０００５】
また、化合物〔２〕と比較して、活性代謝物である化合物〔１〕は、より抗コリン作用が強いことが知られている（例えば、非特許文献１参照）。
頻尿・尿失禁治療剤として開発されている化合物〔２〕の安全性評価の一環として、化合物〔２〕、化合物〔２〕の光学活性体である次の化学式〔２Ｒ〕で表される（４−ジエチルアミノ−１，１−ジメチル−２−ブチン−１−イル）−（Ｒ）−２−シクロヘキシル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセテート（以下、「化合物〔２Ｒ〕」という）及び化学式〔２Ｓ〕で表される（４−ジエチルアミノ−１，１−ジメチル−２−ブチン−１−イル）−（Ｓ）−２−シクロヘキシル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセテート（以下、「化合物〔２Ｓ〕」という）、並びに化合物〔１〕、化合物〔１〕の光学活性体である化合物〔１Ｒ〕及び次の化学式〔１Ｓ〕で表される（４−エチルアミノ−１，１−ジメチル−２−ブチン−１−イル）−（Ｓ）−２−シクロヘキシル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセテート（以下、「化合物〔１Ｓ〕」という）について、それぞれの単回投与毒性試験が腹空内投与により行われ、評価されている（例えば、非特許文献２参照）。
【化４】
しかしながら、これまで化合物〔１〕の光学活性体である化合物〔１Ｒ〕の抗コリン作用及び副作用の一つと考えられる唾液分泌抑制作用については知られていない。
【特許文献１】特公平６−６９９９６号公報
【非特許文献１】Ｇｅｎｅｒａｌ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ， ２９（５）， ｐ．７７１−７７８ （１９９７）
【非特許文献２】Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｔｏｘｉｃｏｌｏｇｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ， ２２， Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ Ｉ， ｐ．１５−２５ （１９９７）
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明の目的は、主として従来から用いられている抗コリン作用剤にしばしば見られる副作用を軽減した新規な抗コリン作用剤を見出し、神経因性膀胱、膀胱痙縮、神経性膀胱炎及び遺尿症などによる頻尿又は各種の尿失禁をはじめとする膀胱異常、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、可逆性閉塞性肺疾患（ＲＯＰＤ）又は胆石症や腸疾患による疝痛に対する長期投与可能で安全な治療剤を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者らは、鋭意研究を重ねた結果、上記目的を達成しうる化合物を見出し、本発明を完成するに至った。
本発明としては、例えば、有効成分として、化合物〔１Ｒ〕又はその医薬上許容される塩を含有する抗コリン作用剤（以下、「本発明抗コリン作用剤」という）を挙げることができる。
本発明の特徴として、本発明抗コリン作用剤が、膀胱収縮抑制作用を有するだけではなく、膀胱収縮抑制作用と比較して抗コリン作用に関連する副作用の一つである唾液分泌抑制作用が弱いという点を挙げることができる。
【０００８】
本明細書において使用する用語の定義は、以下の通りである。
「抗コリン作用剤」とは、例えば、神経因性膀胱、膀胱痙縮、神経性膀胱炎及び遺尿症などによる頻尿又は各種の尿失禁をはじめとする膀胱異常、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、可逆性閉塞性肺疾患（ＲＯＰＤ）又は胆石症や腸疾患による疝痛の治療に有用な薬剤をいう。
「慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）」とは、１）慢性の不可逆性の気道閉塞がある、２）慢性気管支炎、肺気腫、気管支喘息のうち２〜３疾患が混在して区別が困難である、３）典型的な上記３疾患は除外するという３条件に該当するものと定義され、気道の障害や機能不全によって主として閉塞性の換気障害をきたし、そのために運動時の呼吸困難を主症状とする疾患群をいう。
「可逆性閉塞性肺疾患（ＲＯＰＤ）」としては、例えば、喘息等を挙げることができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００９】
以下、本発明抗コリン作用剤について詳述する。
本発明抗コリン剤の有効成分である化合物〔１Ｒ〕を製造する方法としては、例えば、以下のプロセスを挙げることができる。
化合物〔１Ｒ〕を製造するための原料となるラセミ化合物〔１〕は、例えば、特公平６−６９９９６号に記載の方法又はそれらに準じた方法にしたがって製造することができる。
続いて化合物〔１〕から、光学異性体分離カラムを装着した高速液体クロマトグラフィー（以下、「ＨＰＬＣ 」という）装置により、化合物〔１Ｒ〕を容易に取得することができる。
【００１０】
また、他の化合物〔１Ｒ〕を製造する方法としては、例えば、（Ａ）〜（Ｃ）の工程を含有する、ラセミ体である化合物〔２〕を出発原料とする方法を挙げることができる。
（Ａ）ラセミ体である化合物〔２〕をＨＰＬＣ装置により光学分割する工程
化合物〔２〕は、例えば、特公平６−６９９９６号に記載の方法又はそれらに準じた方法にしたがって製造することができる。化合物〔２〕から、光学異性体分離カラムを装着したＨＰＬＣ装置により、化合物〔２Ｒ〕を容易に取得することができる。
（Ｂ）臭化プロパルギル化反応の工程
光学分割した化合物〔２Ｒ〕を反応溶媒に溶解し、ブロモシアニドと反応させることによって、対応する次の化学式〔３〕で表されるプロパルギルブロミド誘導体（以下、「化合物〔３〕」という）を製造することができる。本反応の反応溶媒としては、この種の反応に通常使用されるものを用いることができる。例えば、エーテル、テトラヒドロフラン、１，４−ジオキサン等のエーテル系溶媒等を挙げることができる。反応温度としては、−３０℃〜１００℃で反応を行うことができる。
反応時間は、使用する溶媒、反応温度等によって異なるが、通常３０分〜４８時間が適当である。ブロモシアニドの使用量は、化合物〔２Ｒ〕に対して１〜５倍モル量が好ましい。
【化５】
（Ｃ）エチルアミノ化反応の工程
化合物〔１Ｒ〕は、エチルアミン水溶液中に、前記工程で合成した化合物〔３〕を加えることにより製造することができる。反応溶媒としては、例えば、メタノール、エタノールなどのアルコール類、水、又はこれらの混合溶媒を挙げることができる。反応温度としては、−３０℃〜１００℃で反応することができる。反応時間は、使用する溶媒、反応温度等によって異なるが、通常３０分〜４８時間が適当である。エチルアミンの使用量は、化合物〔３〕に対して１〜１００倍モル量が好ましい。
【化６】
【００１１】
このようにして製造される化合物〔１Ｒ〕は、それ自体公知の手段、例えば、濃縮、液性変換、転溶、溶媒抽出、結晶化、再結晶、分留、クロマトグラフィー等により分離精製することができる。
化合物〔１Ｒ〕は、塩基性を示す化合物であるので、遊離の塩基のまま医薬として用いることができるが、公知の方法により医薬上許容される塩の形にして医薬として用いることができる。
化合物〔１Ｒ〕の「塩」としては、医薬上許容される塩、例えば、塩酸、硫酸、硝酸、リン酸、フッ化水素酸、臭化水素酸等の無機酸の塩、及び酢酸、酒石酸、乳酸、クエン酸、フマル酸、マレイン酸、コハク酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、トルエンスルホン酸、ナフタレンスルホン酸、カンファースルホン酸等の有機酸の塩を挙げることができる。好ましい塩としては、塩酸塩を挙げることができる。
例えば、化合物〔１Ｒ〕の塩酸塩は、化合物〔１Ｒ〕を塩化水素のアルコール溶液又はジエチルエーテル溶液で処理し、析出結晶をろ取するか、結晶が析出しない場合は、溶液を濃縮して結晶を析出させた後、ろ取することにより得ることができる。
【００１２】
本発明抗コリン作用剤は、後記する試験例に示すように優れた抗コリン作用を有しており、例えば、神経因性膀胱、膀胱痙縮、神経性膀胱炎及び遺尿症などによる頻尿又は各種の尿失禁をはじめとする膀胱異常、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、可逆性閉塞性肺疾患（ＲＯＰＤ）又は胆石症や腸疾患による疝痛の治療剤として有用である。
また、本発明抗コリン作用剤は、後記するカルバコール誘発膀胱収縮と唾液分泌に対する作用をみる試験例に示すように、膀胱収縮抑制作用に比べて副作用である唾液分泌抑制作用が弱いという既存の医薬品にはない優れた特徴を有し、長期投与を必要とする上記疾患の治療剤として有用である。
【００１３】
本発明抗コリン剤を医薬として投与する場合、化合物〔１Ｒ〕又はその医薬上許容される塩をそのまま又は医薬的に許容される無毒性かつ不活性の担体中に、例えば、 ０．１％〜９９．５％、好ましくは ０．５％〜９０％含有する医薬組成物として、人を含む哺乳動物に投与される。
医薬上許容される担体としては、固形、半固形、又は液状の希釈剤、充填剤、及びその他の処方用の助剤一種以上が用いられる。医薬組成物は、投与単位形態で投与することが望ましい。医薬組成物は、経口的又は非経口的（例えば、注射、経直腸等）に投与することができる。これらの投与方法に適した剤型で投与されるのはもちろんである。例えば、経口投与が好ましい。
本発明抗コリン剤の用量は、年齢、体重、疾病の性質、程度等の患者の状態、投与経路を考慮した上で調整することが望ましいが、通常は、成人に対して化合物〔１Ｒ〕又はその医薬上許容される塩の有効成分量として、経口投与の場合、１日あたり、０．１ｍｇ〜１００ｍｇ／成人の範囲、好ましくは、０．１ｍｇ〜５０ｍｇ／成人の範囲である。場合によっては、これ以下でも足りるし、また逆にこれ以上の用量を必要とすることもある。通常、１日１回又は数回に分けて投与することができる。
静脈内投与の場合、１日あたり、０．００１〜１０ｍｇ／成人の範囲、好ましくは、０．００１〜３ｍｇ／成人の範囲である。場合によっては、これ以下でも足りるし、また逆にこれ以上の用量を必要とすることもある。通常、１日１回又は数回に分けて投与することができる。
経口投与は固形又は液状の用量単位、例えば、末剤、散剤、錠剤、糖衣剤、カプセル剤、顆粒剤、懸濁剤、液剤、シロップ剤、ドロップ剤、舌下錠その他の剤型によって行うことができる。
末剤は、化合物〔１Ｒ〕又はその医薬上許容される塩を適当な細かさにすることにより製造される。散剤は、化合物〔１Ｒ〕又はその医薬上許容される塩を適当な細かさと成し、次いで同様に細かくした医薬用担体、例えば、澱粉、マンニトールのような可食性炭水化物その他と混合することにより製造される。必要に応じ、風味剤、保存剤、分散剤、着色剤、香料その他のものを混ぜてもよい。
カプセル剤は、まず上述のようにして粉末状となった末剤や散剤あるいは錠剤の項で述べるように顆粒化したものを、例えば、ゼラチンカプセルのようなカプセル外皮の中へ充填することにより製造される。滑沢剤や流動化剤、例えば、コロイド状のシリカ、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、固形のポリエチレングリコールのようなものを粉末状態のものに混合し、然るのちに充填操作を行うこともできる。崩壊剤や可溶化剤、例えば、カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースカルシウム、低置換度ヒドロキシプロピルセルロース、クロスカルメロースナトリウム、カルボキシメチルスターチナトリウム、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウムを添加すれば、カプセル剤が摂取されたときの医薬の有効性を改善することができる。
また、化合物〔１Ｒ〕又はその医薬上許容される塩の微粉末を植物油、ポリエチレングリコール、グリセリン、界面活性剤中に懸濁分散し、これをゼラチンシートで包んで軟カプセル剤とすることができる。
錠剤は、賦形剤を加えて粉末混合物を作り、顆粒化もしくはスラグ化し、次いで崩壊剤又は滑沢剤を加えたのち打錠することにより製造される。
粉末混合物の製造には、適当に粉末化された物質を上述の希釈剤やベースと混合し、必要に応じ結合剤（例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、ポリビニルアルコール）、溶解遅延化剤（例えば、パラフィン）、再吸収剤（例えば、四級塩）や吸着剤（例えば、ベントナイト、カオリン、リン酸ジカルシウム）を併用することができる。粉末混合物は、まず結合剤、例えば、シロップ、澱粉糊、アラビアゴム、セルロース溶液又は高分子物質溶液で湿らせ、攪拌混合し、これを乾燥、粉砕して顆粒とすることができる。このように粉末を顆粒化するかわりに、まず打錠機にかけたのち、得られる不完全な形態のスラグを破砕して顆粒にすることも可能である。このようにして作られる顆粒は、滑沢剤としてステアリン酸、ステアリン酸塩、タルク、ミネラルオイルその他を添加することにより、互いに付着することを防ぐことができる。このように滑沢化された混合物を次いで打錠する。こうして製造した素錠にフィルムコーティングや糖衣を施すことができる。
また、化合物〔１Ｒ〕又はその医薬上許容される塩は、上述のように顆粒化やスラグ化の工程を経ることなく、流動性の不活性担体と混合したのちに直接打錠をしてもよい。シェラックの密閉被膜からなる透明又は半透明の保護被覆、糖や高分子材料の被覆、及び、ワックスよりなる磨上被覆の如きも用いうる。他の経口投与剤型、例えば、溶液、シロップ、エリキシルもまたその一定量が薬物の一定量を含有するように用量単位形態にすることができる。シロップは、化合物〔１Ｒ〕又はその医薬上許容される塩を適当な香味水溶液に溶解して製造され、またエリキシルは非毒性のアルコール性担体を用いることにより製造される。懸濁剤は、化合物〔１Ｒ〕又はその医薬上許容される塩を非毒性担体中に分散させることにより処方される。可溶化剤や乳化剤（例えば、エトキシ化されたイソステアリルアルコール類、ポリオキシエチレンソルビトールエステル類）、保存剤、風味賦与剤（例えば、ペパーミント油、サッカリン）その他もまた必要に応じ添加することができる。
必要であれば、経口投与のための用量単位処方は、マイクロカプセル化してもよい。該処方はまた被覆をしたり、高分子・ワックス等中に埋め込んだりすることにより作用時間の延長や持続放出をもたらすこともできる。
非経口投与として注射剤、坐剤等を用いることができる。皮下・筋肉又は静脈内注射用とした液状用量単位形態、例えば、溶液や懸濁剤の形態を用いることによって行うことができる。これらのものは、化合物〔１Ｒ〕又はその医薬上許容される塩の一定量を、注射の目的に適合する非毒性の液状担体、例えば、水性や油性の媒体に懸濁し又は溶解し、次いで該懸濁液又は溶液を滅菌することにより製造される。注射液を等張にするために非毒性の塩や塩溶液を添加してもよい。更に安定剤、保存剤、乳化剤等を併用することもできる。
直腸投与は、化合物〔１Ｒ〕又はその医薬上許容される塩を低融点の、水に可溶又は不溶の固体、例えば、ポリエチレングリコール、カカオ脂、半合成の油脂（例えば、ウイテプゾール／登録商標）、高級エステル類（例えば、パルミチン酸ミリスチルエステル）及びそれらの混合物に溶解又は懸濁させて製造した坐剤等を用いることによって行うことができる。
【実施例】
【００１４】
以下に参考例、実施例、試験例及び製剤例を掲げて本発明を更に詳しく説明するが、本発明はこれらのみに限定されるものではない。化合物の比旋光度は２０℃で測定した。なお、化合物〔１〕及び〔２〕は、例えば、特公平６−６９９９６号に記載の方法又はそれらに準じた方法にしたがって製造した。
【００１５】
実施例１
化合物〔１Ｒ〕一塩酸塩
工程１
ＨＰＬＣの手法による光学分割
化合物〔２〕２．４ｇを５０ｍｌの溶媒（ｎ−ヘキサン：２−プロパノール＝１００：１）に溶解し、下記光学分割条件で分離精製した。
［光学分割条件］
ＨＰＬＣ 装置： 送液ユニット：ＬＣ−８Ａ（島津製作所社製）
検出器：ＳＰＤ−６ＡＶ（島津製作所社製）
光学異性体分離カラム：ＣＨＩＲＡＬＣＥＬ（登録商標） ＯＦ
＜１ｃｍφｘ２５ｃｍ＞２本（ダイセル化学社製）
＜１ｃｍφｘ５ｃｍ＞１本（ダイセル化学社製）
カラム温度 ：室温
移動相：ｎ−ヘキサン／２−プロパノール＝１００／１
流量：９ｍｌ／分
紫外線可視分光器検出波長：２５４ｎｍ
注入量：２ｍｌ
はじめに溶出された化合物（化合物Ａ）とあとから溶出された化合物（化合物Ｂ）を別々に４０℃で減圧下濃縮後、常法により塩酸塩とし、さらにエタノールから再結晶を行い単離した。かかる塩酸塩の収量、元素分析値、比旋光度［α］Ｄ値、光学純度は以下の通りであった。
化合物Ａ：収量：１．２０ｇ
元素分析値（Ｃ２４Ｈ３５ＮＯ３・ＨＣｌ・０．２Ｈ２Ｏとして）
計算値（％）Ｃ：６８．３１ Ｈ：８．６０ Ｎ：３．３２
実測値（％）Ｃ：６８．３６ Ｈ：８．８８ Ｎ：３．３０
比旋光度：［α］Ｄ２０＝＋４１．３３°（ｃ＝１．０２１， メタノール）
光学純度： ９９．５％ｅ．ｅ．
化合物Ｂ：収量：１．１９ｇ
元素分析値（Ｃ２４Ｈ３５ＮＯ３・ＨＣｌ・０．２Ｈ２Ｏとして）
計算値（％）Ｃ：６７．７３ Ｈ：８．６２ Ｎ：３．２９
実測値（％）Ｃ：６７．７９ Ｈ：８．７３ Ｎ：３．１４
比旋光度：［α］Ｄ２０＝−４２．９１°（ｃ＝１．００２， メタノール）
光学純度： ９９．４％ｅ．ｅ．
【化７】
工程２
構造決定
化合物Ａ及びＢの絶対配置は、絶対配置が既知である化合物（α−シクロヘキシル−α−グリコール酸）に誘導し、文献記載の比旋光度と誘導して得られた化合物の比旋光度とを比較することによって決定した（後述する［化８］参照）。
化合物Ｂ０．３ｇをメタノール５ｍｌに溶解し、１０％水酸化ナトリウム水溶液２ｍｌを加え、更にメタノール２ｍｌを加え、混合物を均一化した。その後、９時間加熱還流した。反応混合物を減圧条件下濃縮し、残渣を水に溶解し、エーテルで洗浄した。水相を１０％塩酸で酸性とし、エーテルで抽出作業を行った。有機相を水洗後、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧条件下溶媒を留去し、生じた結晶をろ取し無色針状結晶０．１３ｇを得た。比旋光度を測定すると、［α］Ｄ＝−２５．３０°であった。
同様に、化合物Ａにおいても上記の方法に従ってα−シクロヘキシル−α−グリコール酸へ誘導した結果、比旋光度は［α］Ｄ＝２４．０７°であった。
先行文献（Ｂｕｌｌｅｔｉｎ ｄｅ ｌａ Ｓｏｃｉｅｔｅ Ｃｈｉｍｉｑｕｅ ｄｅ Ｆｒａｎｃｅ， Ｎ゜ １−２， ＩＩ−７７−８２ （１９８４））に、（Ｓ）−α−シクロヘキシル−α−グリコール酸の比旋光度が、［α］Ｄ＝＋２５．２°であると記載されている。化合物Ａから誘導したα−シクロヘキシル−α−グリコール酸の比旋光度［α］Ｄ＝＋２４．０７°と一致した。
したがって、化合物Ａは、化合物〔２Ｓ〕であり、化合物Ｂは、化合物〔２Ｒ〕であると決定した。
【化８】
工程３
ブロモ化反応
化合物〔２Ｒ〕一塩酸塩１０ｇをクロロホルム４０ｍｌに溶解し、水４０ｍｌを加えて撹拌した。炭酸水素カリウム４．０ｇを水２０ｍｌに溶解した溶液を加え、ｐＨ８〜９に反応混合液を調整し分液した。有機層を水洗し、さらに、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧下溶媒を留去した。化合物〔２Ｒ〕を９．３ｇ得た。
得られた化合物〔２Ｒ〕を無水のエーテル５０ｍｌに溶解し、氷冷下撹拌した。内温が２℃になったことを確認し、滴下ロートを使用してブロモシアニド４．０ｇの無水エーテル５０ｍｌ溶液を３０分間かけて滴下した。その後一晩室温で撹拌した。
再度氷冷下において撹拌し、内温が２℃になったところで、５％塩酸４０ｍｌを加え３０分間撹拌した。分液作業を行い、有機層は、水洗し、さらに飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧下溶媒を留去した。得られた油状物は、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ワコーゲル（登録商標）Ｃ−２００、酢酸エチル：ｎ−ヘキサン＝１：５０〜１：９）により精製し、無色油状物を６．９１ｇ得た。
工程４
エチルアミノ化反応
７０％エチルアミン水溶液１００ｍｌを氷冷下で撹拌し、工程３において得られた無色油状物６．９ｇのメタノール３０ｍｌ溶液を滴下した。滴下終了後、同温にて６時間撹拌し、減圧下で溶媒を留去した。残渣をエーテルで抽出作業を行い、有機層を水洗し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧下溶媒を留去し、油状物６．２５ｇを得た。
油状物は、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ワコーゲル（登録商標）Ｃ−２００、酢酸エチル：ｎ−ヘキサン＝１：２０〜３：２〜酢酸エチル）により精製し、無色油状物５．７５ｇを得た。無色油状物を無水のエーテル６０ｍｌに溶解し、氷冷下において１Ｍ ＨＣｌエーテル溶液１７ｍｌを使用し塩酸塩とし、租結晶をろ取しエーテルで洗浄後通風乾燥した。得られた租結晶をエタノール５０ｍｌに溶解し、酢酸エチル、エーテルを用いて再結晶後、エーテルで洗浄し減圧乾燥した。化合物〔１Ｒ〕一塩酸塩を無色結晶として５．７７ｇ得た。
元素分析値（Ｃ２２Ｈ３１ＮＯ３・ＨＣｌとして）
計算値（％）Ｃ：６７．０７ Ｈ：８．１９ Ｎ：３．５６
実測値（％）Ｃ：６７．０４ Ｈ：８．３２ Ｎ：３．５８
ＭＳ（ＥＩ）：ｍ／ｚ ＝ ３５７［Ｍ＋］
比旋光度：［α］Ｄ２０＝−３８．０９°（ｃ＝１．０９２， メタノール）
【００１６】
比較例１ 化合物〔１Ｓ〕一塩酸塩
実施例１の工程３及び４と同様の手法により、化合物〔２Ｒ〕一塩酸塩の代わりに、化合物〔２Ｓ〕一塩酸塩１０ｇを使用し、化合物〔１Ｓ〕一塩酸塩を無色結晶として５．７５ｇ得た。
元素分析値（Ｃ２２Ｈ３１ＮＯ３・ＨＣｌとして）
計算値（％）Ｃ：６７．０７ Ｈ：８．１９ Ｎ：３．５６
実測値（％）Ｃ：６７．０７ Ｈ：８．３５ Ｎ：３．５６
ＭＳ（ＥＩ）：ｍ／ｚ ＝ ３５７［Ｍ＋］
比旋光度：［α］Ｄ２０＝３７．８２°（ｃ＝１．０８４， メタノール）
【００１７】
以下に、被験薬物として、化合物〔１〕、化合物〔１Ｒ〕（実施例１の化合物）、化合物〔１Ｓ〕（比較例１の化合物）の一塩酸塩を使用して行った薬理試験の結果を示す。但し、試験例３のみ比較対照薬物として代表的な抗コリン作用薬である塩酸オキシブチニンの試験データも示している。
【００１８】
試験例１ ラット摘出排尿筋のカルバコールによる収縮反応に対する抑制作用
体重２５０−４５０ｇの雄性Ｓｌｃ／ＳＤラットを用いた。エーテル麻酔下、放血致死させた後、膀胱を摘出し、膀胱体部より幅約２ｍｍ， 長さ約５ｍｍの切片を縦走方向に切り出し、これを排尿筋標本とした。標本を１０ｍｌのＫｒｅｂｓ液を満たし、混合ガスを通気したマグヌス槽内に１ｇの負荷をかけて懸垂した後、６０分間平衡化した。標本の張力変化は等尺性トランスデューサー（Ｔ７−３０−２４０， Ｔｏｙｏ Ｂａｌｄｗｉｎ， Ｔｏｋｙｏ）を用い、歪圧力アンプ（ＡＰ−６２０Ｇ， 日本光電工業社製， 東京）を介してレクチコーダー（ＲＪＧ−４０２４， 日本光電工業社製）上に記録した。
標本を２−３回洗浄し、６０分間平衡化した後、カルバコールを累積的に適用して用量反応曲線を得た。その後、標本の洗浄を静止時の張力に戻るまで２−３回繰り返した。この様なカルバコールの累積適用を２−３回繰り返して、一定の用量反応を得た後、被験薬物を処置し、再びカルバコールを累積的に適用した。なお、α−アドレナリン受容体およびβ−アドレナリン受容体を介した作用を除くために、ｐｈｅｎｔｏｌａｍｉｎｅ（３×１０−６Ｍ）およびＰｒｏｐｒａｎｏｌｏｌ（１０−６Ｍ）を栄養液中に加えておいた。被験薬物の前処置時間は３０分とした。各カルバコール収縮反応における用量反応曲線より競合的拮抗作用（抗コリン作用）の効力を示すｐＡ２値をＡｒｕｎｌａｋｓｈａｎａ ａｎｄ Ｓｃｈｉｌｄの方法により算出した。
結果を表１に示す。
【表１】
上記結果から明らかな通り、摘出ラット排尿筋のカルバコール収縮に対して、化合物〔１Ｒ〕は、化合物〔１〕よりも１．８２倍強い競合的拮抗作用を示した。一方、他の光学異性体である化合物〔１Ｓ〕は、競合的拮抗作用を示さなかった。
【００１９】
試験例２ ラット律動性膀胱収縮の振幅に対する抑制作用
９−１２週齢の雌性Ｓｌｃ／ＳＤラットを用いた。ウレタンにて麻酔した後、背位に固定した。下腹部を正中切開した後、尿管にカニューレ（Ｉｎｔｒａｍｅｄｉｃ ＰＥ１０， Ｃｌａｙ Ａｄａｍｓ， ＮＪ）を挿入し、腎臓からの尿を体外へ排泄させ、膀胱側の尿管は結紮した。外尿道口よりカニューレ（Ｉｎｔｒａｍｅｄｉｃ ＰＥ−６０）を膀胱内に挿入し、尿道先端部を軽く結紮した。カニューレの他端にＴ字管を連結し、一方は膀胱内圧測定用トランスデューサー（ＴＰ−２００Ｔ， 日本光電工業社製）に接続し、他方より注入ポンプ（ＳＴＣ−５２１， テルモ社製， 東京）を用いて０．５−０．８ｍｌの生理食塩液を膀胱内に注入し、律動性膀胱収縮を記録した。律動性膀胱収縮の振幅と頻度が安定したところで、被験薬物を大腿静脈に挿入したカニューレを介して投与した。各被験薬物は投与容量が１ｍｌ／ｋｇとなるように生理食塩液に溶解し、約１５分間隔で低用量（０．１， ０．３， １， ３， １０ｍｇ／ｋｇ）より累積的に投与した。
投与前値に対する被験薬物の抑制率を各用量について求め、振幅抑制作用のＩＤ３０値（３０％抑制用量）を最小自乗法により求めた。
結果を表２に示す。
【表２】
上記結果から、化合物〔１Ｒ〕は、ラセミ体である化合物〔１〕よりも強いラット律動性膀胱収縮の振幅に対する抑制作用を有することが明らかである。また、化合物〔１Ｓ〕は、ラット律動性膀胱収縮の振幅に対する抑制作用が弱く、試験例１の結果を反映したものとなった。
【００２０】
試験例３ カルバコール誘発膀胱収縮と唾液分泌に対する作用
９−１２週齢の雄性Ｓｌｃ／ＳＤラットを用いた。ウレタンにて麻酔した後、背位に固定した。下腹部を正中切開し、尿道を結紮した。尿管にカニューレ（Ｉｎｔｒａｍｅｄｉｃ ＰＥ１０）を挿入し、腎臓からの尿を体外へ排泄させ、膀胱側の尿管は結紮した。膀胱頂部に挿入したカニューレ（Ｉｎｔｒａｍｅｄｉｃ ＰＥ６０）の他端にＴ字管を連結し、一方は膀胱内圧測定用トランスデューサー（ＴＰ−２００Ｔ）に接続した。他方より膀胱収縮閾値量以下（０．２−０．３ｍｌ）の生理食塩液を膀胱内に注入した。唾液分泌量測定の為に口腔内に綿球を挿入した。まず、カルバコール（１０μｇ）静脈内投与により膀胱収縮圧と唾液分泌量を測定した。次いで、被験薬物の十二指腸内投与３０分後に再度カルバコール（１０μｇ）を静脈内投与し、同様の操作を繰り返し、被験薬物投与前後の差からそれぞれの抑制率を求めた。なお、膀胱収縮圧は投与直後に最大に達するため、１分以内の最大値とした。また、唾液分泌量は口腔内に５分間挿入した後の綿球湿重量から綿球重量を減じたものとした。
結果を表３に示す。
【表３】
上記結果から明らかな通り、代表的な抗コリン作用薬である塩酸オキシブチニンは、膀胱収縮より唾液分泌を強く抑制した。一方、化合物〔１〕及び化合物〔１Ｒ〕は、塩酸オキシブチオニンとは異なり、唾液分泌より膀胱収縮を強く抑制し、その作用は有意であった。
【００２１】
製剤例１
錠剤（内服錠）
処方１錠８０ｍｇ 中
化合物〔１Ｒ〕一塩酸塩 １０．０ｍｇ
トウモロコシ澱粉 ４６．６ｍｇ
結晶セルロース ２４．０ｍｇ
メチルセルロース ４．０ｍｇ
ステアリン酸マグネシウム ０．４ｍｇ
この割合の混合末を通常の方法により打錠成形し内服錠とする。
【産業上の利用可能性】
【００２２】
本発明抗コリン剤は、膀胱収縮抑制作用と比較して副作用である唾液分泌抑制作用が弱いという優れた特徴を有する。即ち、長期投与を必要とする神経因性膀胱、膀胱痙縮、神経性膀胱炎及び遺尿症などによる頻尿又は各種の尿失禁をはじめとする膀胱異常、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、喘息等の可逆性閉塞性肺疾患（ＲＯＰＤ）又は胆石症や腸疾患による疝痛の治療剤として有用である。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
有効成分として、（４−エチルアミノ−１，１−ジメチル−２−ブチン−１−イル）−（Ｒ）−２−シクロヘキシル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセテート又はその医薬上許容される塩を含有する抗コリン作用剤。
【請求項２】
有効成分として、（４−エチルアミノ−１，１−ジメチル−２−ブチン−１−イル）−（Ｒ）−２−シクロヘキシル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセテート又はその医薬上許容される塩を含有する頻尿又は尿失禁治療剤。
【請求項３】
有効成分として、（４−エチルアミノ−１，１−ジメチル−２−ブチン−１−イル）−（Ｒ）−２−シクロヘキシル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセテート又はその医薬上許容される塩を含有する慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、可逆性閉塞性肺疾患（ＲＯＰＤ）又は胆石症若しくは腸疾患による疝痛の治療剤。
【請求項１】
有効成分として、（４−エチルアミノ−１，１−ジメチル−２−ブチン−１−イル）−（Ｒ）−２−シクロヘキシル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセテート又はその医薬上許容される塩を含有する抗コリン作用剤。
【請求項２】
有効成分として、（４−エチルアミノ−１，１−ジメチル−２−ブチン−１−イル）−（Ｒ）−２−シクロヘキシル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセテート又はその医薬上許容される塩を含有する頻尿又は尿失禁治療剤。
【請求項３】
有効成分として、（４−エチルアミノ−１，１−ジメチル−２−ブチン−１−イル）−（Ｒ）−２−シクロヘキシル−２−ヒドロキシ−２−フェニルアセテート又はその医薬上許容される塩を含有する慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、可逆性閉塞性肺疾患（ＲＯＰＤ）又は胆石症若しくは腸疾患による疝痛の治療剤。
【国際公開番号】ＷＯ２００５／０５５９９９
【国際公開日】平成１７年６月２３日（２００５．６．２３）
【発行日】平成１９年７月５日（２００７．７．５）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００５−５１６１１０（Ｐ２００５−５１６１１０）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＪＰ２００４／０１８１７４
【国際出願日】平成１６年１２月７日（２００４．１２．７）
【出願人】（０００００４１５６）日本新薬株式会社 (46)
【Ｆターム（参考）】
【国際公開日】平成１７年６月２３日（２００５．６．２３）
【発行日】平成１９年７月５日（２００７．７．５）
【国際特許分類】
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＪＰ２００４／０１８１７４
【国際出願日】平成１６年１２月７日（２００４．１２．７）
【出願人】（０００００４１５６）日本新薬株式会社 (46)
【Ｆターム（参考）】
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